TWI587866B - 一種用於預防及治療牙周病之藻類萃取物的組合物 - Google Patents
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Description
本發明提供一種藻類萃取物的組合物,該藻類萃取物含有藻藍蛋白,能有效抑制口腔病原菌包括牙齦卟啉單胞菌和伴放線桿菌的生長,並降低該病原菌所造成的發炎反應,使牙周病患者的齒槽骨流失現象減緩,而達到預防及治療牙周病的效果。
牙周病為一慢性疾病,而且在世界各地皆有很高的流行比例。根據牙周病醫學會的統計,台灣成年人罹患牙周病比例高達九成以上,這些患者除了牙齒外觀不美麗外,更容易引起其他口腔疾病及口臭等現象,嚴重影響人際關係與社交生活。造成牙周病的主要因子為細菌,其他的因素包括抽煙、遺傳、壓力、飲食、年齡、糖尿病、骨質疏鬆症、愛滋病感染、放射線的照射及抑制免疫能力藥物的服用等,皆可能增加罹患牙周病之風險,並加速牙周致病菌之破壞發生的速度。
在牙齦與牙齒交接的地方有一溝槽,稱之為牙齦溝,在這個地方會因為口腔衛生不良,而造成細菌滋生,逐漸形成生物膜(biofilm)。
這些細菌主要是牙齦卟啉單胞菌(Porphyromonas gingivalis)以及伴放線桿菌(Actinobacillus actinomycetemcomitans),它們藉由黏連因子附著於生物膜上,並可彼此吸附與聚集,形成牙菌斑(plaque)。
牙菌斑內的細菌會入侵牙齒周圍組織,並逐漸形成牙周囊
袋。入侵的細菌本身及其所分泌的毒素,亦會刺激宿主細胞製造發炎前驅因子,其中包括環氧化酶(COX)的產物及誘導性一氧化氮合成酶(inducible NO synthase,iNOS)的代謝物等,直接或間接地再造成牙齒周圍組織的破壞。
在臨床上,觀察患者牙周齒槽骨的高度是非常重要的,因為
齒槽骨的高度會直接影響到牙齒的存留。體內骨質的存在乃沈積與吸收兩者不斷交互作用的結果,當沈積多於吸收,骨質增加,若吸收多於沈積,則骨質減少,而牙周齒槽骨高度之決定亦然。骨質的沉積與吸收決定於成骨細胞(osteoblast)與蝕骨細胞(osteoclast),當細菌進入齒槽骨後,會破壞毛細血管,阻斷營養供給,降低成骨細胞活性。另一方面,細菌所誘導的發炎因子(例如TNF-α、IL-1)及免疫細胞(例如T細胞)會促使蝕骨細胞大量產生並活化,進而造成齒槽骨萎縮、骨質流失,最終導致牙床降低、牙根暴露、牙齒鬆動脫落。
綜觀而論,牙菌斑中的細菌是造成牙周病的主要元兇,因此
減少該病原菌的聚集及增生是預防及治療牙周病的首要目標。此外,目前牙周病除外科治療外,藥物治療仍沒有很好的效果,因此值得進一步研究與開發。
為解決上述問題,本發明提供一種用於治療牙周病之藻類萃取物的組合物,其中該組合物包含一有效濃度的一藻藍蛋白。
本發明之一實施例中,其中該組合物之藻藍蛋白的有效濃度為50μg/ml~600μg/ml。
本發明另提供一種用於預防牙周病之藻類萃取物的組合物,其中該組合物包含一有效濃度的一藻藍蛋白。
本發明之一實施例中,其中該組合物之藻藍蛋白的有效濃度為50μg/ml~600μg/ml。
本發明提供一種藻類萃取物的組合物,能有效抑制口腔病原菌的生長。
本發明之一實施例中,其中該口腔病原菌為牙齦卟啉單胞菌(Porphyromonas gingivalis)或伴放線桿菌(Actinobacillus actinomycetemcomitans)。
本發明提供一種藻類萃取物的組合物,能有效減緩牙周病患者齒槽骨流失的現象。
本發明提供一種藻類萃取物的組合物,能有效降低因口腔病原菌感染所導致的發炎現象。
本發明之一實施例中,其中該藻類萃取物的組合物可以製作成膏狀、針劑或貼片等型式使用。
本發明之一實施例中,其中該藻類萃取物的組合物能添加於潔牙產品,如牙膏、潔牙粉、漱口水或牙線等。
本發明之一實施例中,其中該藻類萃取物的組合物能塗抹於牙齒矯正工具,如牙套,或假牙上。
本發明之一實施例中,其中該藻類萃取物的組合物能添加於應用在牙套或假牙等相關之產品,如黏著劑或洗潔液等。
本發明之一實施例中,其中該藻類萃取物的組合物能添加於補牙物料,如銀粉、合成樹脂等。
本發明之一實施例中,其中該藻類萃取物的組合物能混合於口香糖、薄荷錠或口腔清新劑等產品。
本發明進一步提供一種藻類萃取物的組合物用於製備治療牙周病之用途,其中該組合物包含一有效濃度的一藻藍蛋白,且該治療牙周病的機制係透過抑制口腔病原菌的生長。
本發明之一實施例中,其中該組合物之藻藍蛋白的有效濃度為50μg/ml~600μg/ml。
本發明亦提供一種藻類萃取物的組合物用於製備預防牙周病之用途,其中該組合物包含一有效濃度的一藻藍蛋白,且該預防牙周病的機制係透過抑制口腔病原菌的生長。
本發明之一實施例中,其中該組合物之藻藍蛋白的有效濃度為50μg/ml~600μg/ml。
第1A圖顯示本發明不同劑量之含藻藍蛋白萃取物對牙齦卟啉單胞菌(Porphyromonas gingivalis)的抑制結果,第1B圖顯示本發明不同劑量之含藻藍蛋白萃取物對伴放線桿菌(Actinobacillus actinomycetemcomitans)的抑制結果。
第2A圖顯示大白鼠口腔牙齒結構圖,第2B圖顯示動物牙周病誘發實驗操作圖。
第3圖顯示動物實驗的設計流程圖。
第4A圖顯示以斷層掃描觀察動物齒槽骨流失的現象。第4B圖為第4A圖的統計結果。第4c圖顯示在不同條件處理下之動物組織切片圖。
實施例一:抗菌測試
1. 牙周病主要致病菌種培養
參考Jeong et al.,2000以及Zhou et al.,2006兩篇期刊,培養牙齦卟啉單胞菌(Porphyromonas gingivalis)及伴放線桿菌(Actinobacillus actinomycetemcomitans)兩種主要牙周致病菌株。
2. 抗菌試驗
依據抑制50%細菌生長的實驗設計指標,觀察本發明不同濃度(25、50、100、150、300及600μg/ml)之含藻藍蛋白萃取物,對牙齦卟啉單胞菌(Porphyromonas gingivalis)(第1A圖)及伴放線桿菌(Actinobacillus actinomycetemcomitans)(第1B圖)的抑制現象。其
中,第1A圖與第1B圖之橫坐標表示加入不同濃度(μg/ml)之含藻藍蛋白萃取物,而縱座標則表示於波長660nm下所測到的吸光值,並以百分比例顯示。由第1A圖的結果可知本發明之含藻藍蛋白萃取物其抑制50%牙齦卟啉單胞菌生長的有效劑量約為150μg/ml,而第1B圖顯示其抑制50%伴放線桿菌生長的有效劑量則大約為100μg/ml,但對E.coli,S.aureus、Streptococcus mutans以及T.rubrum無抑制效果,因此本發明之含藻藍蛋白萃取物具有抑制牙周致病菌的生長效果。
實施例二:齒槽骨流失現象的觀察
1. 實驗動物
本發明係採用Sprague Dawley(SD)品系之雄性大白鼠進行試驗,每隻大白鼠的體重約為280-310公克。大白鼠來源為國家動物中心,並飼養在國防醫學院動物中心,該飼養環境為溫度23-25℃,光照週期控制在日夜各12小時,其中光週期之時間為8:00-20:00,並充份供應飼料與飲水。此外,飼養房調控在適當的濕度,並供給獨立過濾之空氣。
2. 牙周病疾病動物模式建立
依據Cai et al.,2008所發表之期刊,以結紮線方式誘發牙周病模式(Ligature-induced periodontal disease model),以下簡稱為ligation。首先大白鼠以腹腔注射的方式給予麻醉藥後,將結紮線放置在下顎兩側第一大臼齒齒頸部及上顎第二大臼齒齒頸部,請參考第2A及2B圖,並將線結放置在頰側近心面。
3. 實驗設計
將大白鼠隨機分成五組,包括(1)正常組(control)、(2)誘發組(ligation)、(3)結紮線+本發明之含藻藍蛋白萃取物50mg/kg、(4)結紮線+本發明之含藻藍蛋白萃取物100mg/kg、(5)結紮線+本發明之含藻藍蛋白萃取物200mg/kg。請參考第3圖,於試驗開始,即給予生理食鹽水(normal saline)或不同濃度之本發明含藻藍蛋白萃取物,一直持續給予到試驗第10天,其中於試驗第3天以結紮線誘發牙周病產生,並於試驗第11天犧牲大白鼠,觀察其齒槽骨的高度改變情形。
4. 齒槽骨高度測量
去除大白鼠下顎的軟組織後,確認牙釉質交接(cemento-enamel junction,CEJ)的位置,並測定CEJ到齒槽骨(alveolar bone crest,ABC)的距離。第4A圖係以斷層掃描觀察大白鼠齒槽骨的高度變化,結果顯示在結紮線誘發牙周病的組別(Ligation)中,不管是從舌側或頰側觀測,都有著嚴重骨基質吸收的情況。而在給予本發明之含藻藍蛋白(C-PC)萃取物後,可觀察到當給予劑量為100mg/kg及200mg/kg皆可降低牙釉質交接(CEJ)到齒槽骨(ABC)的距離,但此兩種劑量彼此間並無差異性,如第4B圖。
另外,在牙齦組織病理切片中觀察大白鼠齒槽骨流失的現象,如第4C圖,圖中d為象牙質(dentin)之標示,g為牙齦(gingiva)之標示,pl為牙周韌帶(periodontal ligament)之標示,ab為齒槽骨(alveolar bone,白色框線範圍)之標示。由結果顯示誘發組(ligation),其牙周組織相對於正常組(Control)具有嚴重的齒槽骨流失現象產生,而給予本發明之含藻藍蛋白(C-PC)萃取物100mg/kg後,相對於
誘發組,齒槽骨破懷情況獲得改善,因此,本發明之含藻藍蛋白萃取物可有效改善齒槽骨流失的現象。
綜合以上結果,可證明本發明之含藻藍蛋白萃取物的組合物,能有效抑制牙周致病菌的生長,並降低該致病菌所造成的發炎反應,使牙周病患者的齒槽骨流失現象減緩,而達到預防及治療牙周病的效果
Claims (12)
- 一種含有藻類萃取物的組合物用於製備治療牙周病藥物之應用,其中該組合物包含一有效濃度的一藻藍蛋白;其中該組合物能抑制牙齦卟啉單胞菌(Porphyromonas gingivalis)或伴放線桿菌(Actinobacillus actinomycetemcomitans)的生長;其中該組合物能有效減緩牙周病患者齒槽骨流失的現象。
- 如申請專利範圍第1項之應用,其中該藻藍蛋白的有效濃度為50μg/ml以上。
- 一種含有藻類萃取物的組合物用於製備預防牙周病藥物之應用,其中該組合物包含一有效濃度的一藻藍蛋白;其中該組合物能抑制牙齦卟啉單胞菌(Porphyromonas gingivalis)或伴放線桿菌(Actinobacillus actinomycetemcomitans)的生長;其中該組合物能有效減緩牙周病患者齒槽骨流失的現象。
- 如申請專利範圍第3項之應用,其中該藻藍蛋白的有效濃度為50μg/ml以上。
- 如申請專利範圍第1或第3項之應用,其中該組合物可以製作成膏狀、針劑或貼片等型式使用。
- 如申請專利範圍第1或第3項之應用,其中該組合物能添加於潔牙 產品,如牙膏、粉末、漱口水或牙線。
- 如申請專利範圍第1或第3項之應用,其中該組合物能塗抹於牙齒矯正工具,如牙套,或假牙上。
- 如申請專利範圍第1或第3項之應用,其中該組合物能添加於應用在牙套或假牙等相關之產品,如黏著劑或洗潔液等。
- 如申請專利範圍第1或第3項之應用,其中該組合物能添加於補牙物料,如銀粉、合成樹脂等。
- 如申請專利範圍第1或第3項之應用,其中該組合物能混合於口香糖、薄荷錠或口腔清新劑等產品。
- 如申請專利範圍第1或第3項之應用,其中該組合物能進一步與藥學上可接受之賦形劑結合。
- 如申請專利範圍第1或第3項之應用,其中該組合物能進一步為一種食品添加劑。
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Journal of Environmental Biology,33, 115-121 (2012) Journal of Algal Biomass Utilization 2012, 3(3):7-11 * |
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