TWI406942B - 類茄紅素萃取物及其組合物 - Google Patents

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Description

類茄紅素萃取物及其組合物
本發明係一種可生成類茄紅素之微生物，尤指於藉由物理變化使該微生物生成類茄紅素者，以及其萃取物、萃取之類茄紅素與其組合物。
茄紅素(Lycopene)又稱作番茄紅素，分子式是C40 H56 ，係存在於人體之血漿及其他組織中，而且在人體血漿中所佔的各種胡蘿蔔素比例中，茄紅素亦佔有最大比例，其為β-胡蘿蔔素的2.5倍，α-胡蘿蔔素的7.5倍，這正證明了茄紅素在人體自我防衛系統中之重要性。
近年來已研究出茄紅素在人體內可以發揮抗氧化的作用，其抗氧化和抗老化之效果遠比β-胡蘿蔔素、維生素E高出甚多，並消除造成人體疾病和老化之自由基，特別是對於單線態氧(Single Oxygen)的消除能力更是首屈一指。更有流行病學的研究指出，茄紅素能大大增進人體對低密度脂蛋白(LDL Oxidation)的抵抗力，進而能預防動脈硬化，對於心肌梗塞及心臟病等等心血管疾病的預防大有助益。
由於茄紅素係為一種強力抗氧化物，現已成為抗癌和抗心血管疾病的聖品。但人體不會製造茄紅素，必須藉由外界補充，來對抗固種因為過多的自由基所引起的疾病。又因為人體內抗自由基的系統會隨著年齡的增加而衰退，所以適時適量補充茄紅素可以減少疾病的發生和增強體力。
茄紅素廣泛存在於番茄、葡萄柚、紅辣椒、西瓜、芭樂、木瓜、杏仁等紅橙色蔬果及其製品中，而茄紅素含量最多的是番茄，而且越是鮮紅的番茄，茄紅素含量越高，然茄紅素主要存在於番茄細胞壁內，以及蛋白質與纖維的組織中，故不易被人體所吸收，因此，即使直接食用新鮮番茄的過程，亦不易自其中攝取對人體有效的茄紅素劑量。
利用茄紅素公知的脂溶性特點，而製作各種茄紅素食品，以利人體方便吸收及提供預防疾病功效，亦為市面上普遍之產品，甚至有許多相關專利。
進一步而言，無論茄紅素或β-胡蘿蔔素都被發現有可以保護人體淋巴球對抗No2 這種自由基的傷害，而No2 自由基是空氣污染及抽煙中最主要的毒素成分，而茄紅素對抗No2 的效果至少是β-胡蘿蔔素的兩倍。因此，補充茄紅素對於目前嚴重的空氣汙染或是二手菸問題是有絕對的助益的。
有鑒於茄紅素對人體具有上述之效益，而目前由番茄中所取得之茄紅素之量及速度仍屬有限，是以，要如何有效的快速萃取出大量之茄紅素，使其能為人體100%的有效吸收，實為目前生物科技業者所亟待克服之課題。許多相關專利，如美國專利第5530189、5429939及5304478均皆揭示了可用於基因重組以合成茄紅素所需的基因序列，將其轉殖於細菌中，可使菌種產生高純度之茄紅素。然而，目前並未有任何專利相關於一種突變可產生類茄紅素之菌種。
本發明亦提供一種新穎之類茄紅素萃取物，其由光合菌所萃取而來，該光合菌係球型紅桿菌(Rhodobacter sphaeroides)，由野生或培養之原生光合菌經紫外線照射使其變性而來，已寄存於台灣新竹食品工業發產研究所，寄存標號為BCRC910406，其CrtC酵素DNA序列如SEQ ID NO.1所示，CrtC酵素胺基酸序列如SEQ ID NO.2所示。此類茄紅素萃取物係具有抗氧化、美白、抑制膠原蛋白分解或抗發炎之作用，該類茄紅素萃取物係利用有機溶劑萃取，該有機溶劑可為甲醇、乙醇、丙酮、正丁醇、正己烷、二氯甲烷或乙酸乙酯等。其中，抗氧化之作用係經由刺激抗氧化酵素活性的上升；美白之作用在其可降低細胞內黑色素之含量；抗發炎之作用係經由抑制iNOS、COX-II之蛋白質表現或NO之釋放。在一實施例中，其中之抗氧化酵素係麩胺基硫過氧化酶(glutathione peroxidase,GPX)。在另一實施例中，其中膠原蛋白係第一型之原膠原蛋白質。
本發明之類茄紅素萃取物，將以乙醇丙酮萃取之萃取物溶於二甲亞碸後，經高效液相層析法分析，其分析圖譜如圖五(D)所示，在滯留時間約21.7~24.19分鐘左右有一波峰，明顯與茄紅素相異，如圖五(C)所示，其滯留時間約50±2分鐘。
本發明中所使用之術語『類茄紅素』係指光合菌體本身合成茄紅素過程之中間代謝產物，經高效液相層析法(HPLC)分析，其滯留時間與茄紅素(lycopene)不同，稱之為類茄紅素(lycogen)。
本發明提供一種類茄紅素萃取物，其包含活性成分選自ζ-胡蘿蔔素(ζ-carotene)、鏈孢紅素(neurosporene)、球形烯醇(spheroidenone)及/或甲氧基鏈孢紅素(methoxyneurosporene)。在本發明之一具體實施例中，該活性成分係萃取自突變之光合菌。在另一具體實施例中，該突變之光合菌係寄存標號為BCRC910406的球形紅桿菌(Rhodobacter sphaeroides )。在尚有另一具體實施例中，該突變之光合菌之CrtC酵素(hydroxyneurosporene dehydrogenase)之DNA序列如SEQ ID NO:1所示；而野生型光合菌之CrtC酵素(hydroxyneurosporene dehydrogenase)之DNA序列如SEQ ID NO:3所示。在另一具體實施例中，該突變之光合菌之CrtC酵素(hydroxyneurosporene dehydrogenase)之胺基酸序列如SEQ ID NO:2所示；而野生型光合菌之CrtC酵素之胺基酸序列如SEQ ID NO:4所示。
在一具體實施例中，該ζ-胡蘿蔔素之含量多於該類茄紅萃取物之10重量百分比。在另一具體實施例中，該鏈孢紅素之含量多於該類茄紅萃取物之10重量百分比。在尚有另一具體實施例中，該球形烯醇之含量多於該類茄紅萃取物之30重量百分比。在另一具體實施例中，該甲氧基鏈孢紅素之含量多於該類茄紅萃取物之30重量百分比。在上述具體實施例中，該ζ-胡蘿蔔素、鏈孢紅素、球形烯醇及甲氧基鏈孢紅素之總和不超過該類茄紅萃取物之100重量百分比。
在一具體實施例中，該類茄紅萃取物中所含之球形烯醇及甲氧基鏈孢紅素的比例約為一比一。
在一較佳具體實施例中，該ζ-胡蘿蔔素之含量約為該類茄紅萃取物之10至20重量百分比。在另一較佳具體實施例中，該鏈孢紅素之含量約為該類茄紅萃取物之10至20重量百分比。在尚有另一較佳具體實施例中，該球形烯醇之含量約為該類茄紅萃取物之30至45重量百分比。在另一較佳具體實施例中，該甲氧基鏈孢紅素之含量約為該類茄紅萃取物之30至45重量百分比。在上述較佳具體實施例中，該ζ-胡蘿蔔素、鏈孢紅素、球形烯醇及甲氧基鏈孢紅素之總和不超過該類茄紅萃取物之100重量百分比。
在一更佳具體實施例中，該ζ-胡蘿蔔素之含量約為該類茄紅萃取物之10.58重量百分比。在另一更佳具體實施例中，該鏈孢紅素之含量約為該類茄紅萃取物之13.47重量百分比。在尚有另一更佳具體實施例中，該球形烯醇之含量約為該類茄紅萃取物之37.37重量百分比。在另一更佳具體實施例中，該甲氧基鏈孢紅素之含量約為該類茄紅萃取物之38.58重量百分比。
本發明亦提供一種組合物，包含本發明之類茄紅素萃取物，及食品或醫藥上可接受之載劑。在本發明之一具體實施例中，該組合物可用於抗發炎、抗氧化、美白、抑制膠原蛋白分解或促進膠原蛋白增生。在另一具體實施例中，該組合物可用作食物增補劑、動物飼料、人類食物產品或醫藥品或化妝品組合物。
下述的實施例僅作為本發明代表性的不同面向及特徵，而非用來限本發明。
為使　貴審查員能更進一步了解本發明之方法及所能達成之功效，茲配合圖式說明如下：首先，請參閱圖一之流程圖所示，本發明提供一種生成類茄紅素之微生物，其主要係將野生或培養之原生光合菌，利用紫外線分別予以照射5、10、20、30、40秒後，使其產生變性，而當光合菌經由紫外線之照射而變成含有豐富茄紅素之突變光合菌(命名為茄紅菌)時，將該突變之光合菌(茄紅菌)篩選取出，並予以培養繁殖，再以有機溶劑予以萃取出茄紅素及類茄紅素。
次請參閱圖二，原生光合菌生成茄紅素的代謝途徑中，由甲基辛烯二甲基辛烯焦磷酸(Geranylgeranyl diphosphate)起始，其經由CrtB酵素作用轉變成八氫番茄紅菌(Phytoene)，接著藉由CrtI酵素作用轉變成六氫番茄紅菌(Phytofluene)，該六氫番茄紅菌則接著經由CrtI酵素變化成ζ-胡蘿蔔素(ζ-carotene)，而ζ-胡蘿蔔素會再經由CrtI酵素作用變化成鏈孢紅素(Neurosporene)；接著，鏈孢紅素經由CrtI酵素作用轉變成茄紅素(Lycopene)。該茄紅素生成後被CrtC酵素轉化成紫菌紅素(Rhodopin)，該紫菌紅素經由CrtD酵素作用轉化成3,4-二脫氫紫菌紅素(3,4-didehydrorhodopin)，該3,4-二脫氫紫菌紅素會經CrtF酵素變化成脫水紫菌紅醇(Anhydro-rhodovibrin)，該脫水紫菌紅醇會經CrtC酵素變化成紫菌紅醇(Rhodovibrin)；接著該紫菌紅醇再經由CrtD酵素變化成單脫甲基螺菌黃素(Monodemethyl-spirilloxanthin)，該單脫甲基螺菌黃素最後由CrtF酵素變化成螺菌黃素(Spirilloxanthin)。
上述之代謝過程中，該鏈孢紅素(Neurosporene)尚有可能會由CrtC酵素變化成羥基鏈孢紅素(hydroxyneurosporene)，該羥基鏈孢紅素再經由CrtF酵素轉變成甲氧基鏈孢紅素(Methoxyneurosporene)，然後該甲氧基鏈孢紅素由CrtD酵素變化成球形烯(Spheroidene)；其中，該球形烯可能由CrtC酵素作用生成羥基球形烯羥(Hydroxyspheroidene)，或由CrtA酵素作用生成球形烯醇(Spheroidenone)。
其中，本發明之原生光合菌經由紫外線之照射後，其顏色會產生變化，當其變化成鮮紅色之突變光合菌(茄紅菌)時，將菌液篩選出至培養皿中進行培養繁殖，經由培養繁殖之茄紅菌的CrtC酵素的DNA序列如SEQ ID NO:1所示，CrtC酵素的胺基酸序列如SEQ ID NO:2所示。比較該突變之光合菌(茄紅菌)之CrtC酵素的DNA序列與野生(原生)之光合菌之CrtC酵素的DNA序列時，如圖三所示，茄紅菌於第76、88、147、214、274、282、310、496、694、707、708及715個序列會產生變異；藉此，可確定於CrtC酵素DNA序列的第76、88、147、214、274、282、310、496、694、707、708及715個核苷酸具有變異的突變菌株即為茄紅菌。此外，該茄紅菌之CrtC酵素胺基酸序列則如SEQ ID NO:2所示。該茄紅菌之CrtC酵素胺基酸序列與原生之光合菌比較時，如圖四所示，可於第45、46、47、190及239個胺基酸位置發現變異；藉此，可確定於CrtC酵素胺基酸序列第45、46、47、190及239個胺基酸位置具有變異的突變菌株即為茄紅菌。接著將該等茄紅菌篩選至培養皿中予以培養繁殖，再利用有機溶劑萃取培養所得之茄紅菌，而該有機溶劑於實施時，可利用脂溶性有機溶劑為之。
本發明藉由採用物理性之紫外線照射，將野生或培養之原生光合菌以不同時間照射處理，使該光合菌產生突變菌株，並篩選出顏色呈鮮紅色之茄紅菌，將該茄紅菌篩選至培養皿中予以培養繁殖，再以有機溶劑進行，藉此，無須由番茄中萃取，即可達到快速的產生大量茄紅素與類茄紅素之功效。
〈類茄紅素之提取與分離〉 1.甲醇和丙酮萃取物
菌體以甲醇於室溫下震盪後離心8000rpm，10分鐘，取上清液後過濾，重覆此抽取步驟三次，合併三次濾液，並減壓濃縮得到甲醇萃取物(Rs-M)。經甲醇萃取後之菌體殘餘物再以丙酮萃取，重複以上步驟，減壓濃縮後得到丙酮萃取物(Rs-M/A)。
2.乙醇和丙酮萃取物
同上步驟1，分別得乙醇萃取物(Rs-E)和丙酮萃取物(Rs-E/A)。
3.丙酮萃取物
同上步驟1，得丙酮萃取物(Rs-A)
4.萃取物之分離
萃取物，加入蒸餾水使之成懸浮液，再以正己烷萃取三次，萃取液合併減壓濃縮至乾，得到正己烷層(Fr,Rs-H)，同上法再將水層依序增加極性以二氯甲烷、乙酸乙酯、水飽和之正丁醇萃取之，分別得二氯甲烷層(Fr,Rs-C)，乙酸乙酯層(Fr,Rs-E)，正丁醇層(Fr,Rs-B)，餘者為水層(Fr,Rs-W)。
HPLC分析法
菌色素含量分析，取菌體萃取粉末以適量DMSO回溶，全程避光。HPLC條件如下：採用C18管柱，波長470 nm，移動相為甲醇/異丙醇(95/5,v/v)，流速1毫升/分鐘，茄紅素標準品滯留時間為50±2分鐘。
甲醇萃取物(Rs-M)顏色為綠色，乙醇萃取物(Rs-E)顏色為茶褐色，丙酮萃取物(Rs-A)顏色為深紅色。以茄紅素標準品為比較，經HPLC分析發現，Rs-A之茄紅素含量最多(RT=50分鐘)，Rs-E微量，而Rs-M則完全沒有茄紅素；推測使用甲醇和乙醇萃取之殘餘菌體仍含有茄紅素，故將甲醇與乙醇處理後的菌體殘餘物分別使用丙酮再進行萃取，結果分別得到甲醇殘餘物的丙酮萃取物(Rs-M/A)和乙醇殘餘物的丙酮萃取物(Rs-E/A)，二者顏色皆為紅色。Rs-E/A和Rs-M/A亦進行HPLC分析，如圖五(A)至(F)所示，箭頭所指處為茄紅素吸收峰。
菌體之乙醇丙酮萃取物溶於二甲亞碸(DMSO)後經HPLC分析，並與茄紅素標準品(L-9879,Sigma)比對其滯留時間(圖五(G))，發現菌體萃取物之HPLC分析圖譜顯示位於標準品相同滯留時間(50分鐘)的波峰極小，最大的波峰出現在滯留時間約21分鐘左右(約21.7~24.19分鐘，稱為未知波峰)(圖五(H))。表示菌體茄紅素在波長470nm下吸光的主要成分以21分鐘出現之物質為主，可能是菌體本身合成茄紅素過程之中間代謝產物，因此稱之為「類茄紅素」。以波峰面積來計算的話，其中的茄紅素面積僅為類茄紅素的3.3%左右。
〈抗發炎反應之測試〉 細胞培養
將小鼠RAW 264.7巨噬細胞培養在含有10%胎牛血清及抗生素之DMEM中(青黴素100U/毫升及鏈黴素100微克/毫升)。將細胞置於5%CO2 ，37℃培養箱中培養。
iNOS之表現量
根據吳等人之(2008)報告指出，在in vitro 試驗中，Rhodobacter sphaeroide 改良菌生成之抗炎性物質，能抑制LPS誘發ARW 264.7巨噬細胞產生NO的作用，故利用LPS誘發RAW 264.7巨噬細胞釋放NO，觀察iNOS與COX-II之蛋白質表現，結果如圖六所示，細胞在LPS刺激誘發的條件下，隨著菌體萃取物濃度的提高，iNOS與COX-II蛋白質表現顯著的降低(圖六)，其中圖六(B)iNOS與COX-II之蛋白質量化數據如表一所示，結果顯示甲醇萃取物(Rs-M)含有某種抗發炎性物質，且以乙醇萃取物(Rs-E)測試亦有類似效果。
NO釋放之抑制
以LPS刺激RAW 264.7巨噬細胞，接著以100微克/毫升之五種有機溶劑萃取物(Rs-M、Rs-M/A、Rs-E、Rs-E/A、Rs-A)處理細胞24小時，再測量NO釋放之情形。結果顯示Rs-M抑制NO釋放之作用最顯著，抑制效果分別為Rs-M＞Rs-A＞Rs-E，而Rs-M/A和Rs-E/A無明顯抗發炎活性。結果顯示沒有茄紅素存在之Rs-M，其抗發炎活性能力高於其他四種萃取物(具有類茄紅素之存在)，故研判Rs-M中所含之抗炎性物質，與茄紅素應無關，而可能是另一種類茄紅素之作用。
接著，再利用以下不同極性之有機溶劑萃取。利用正己烷(H)、二氯甲烷(C)、乙酸乙酯(E)、正丁醇(B)萃取後，其有機萃取物與水層(W)對NO釋放之作用，如圖七所示，結果顯示以正己烷(H)與二氯甲烷(C)萃取之作用最顯著。
接著，再以類茄紅素進行以下實驗；此類茄紅素係以乙醇丙酮從本發明之突變光合菌萃取而得，萃取步驟如上文所述。
〈抗氧化能力分析〉 動物分組與飼養：
採用三至四週齡的韋斯(Wistar)大鼠，實驗前先使其適應三至七天，接著依體重分為兩大組分別為基礎飼料組(Control組，C組)及基礎飼料加菌體類茄紅素組(Lyc組)。為避免類茄紅素在光照與長期空氣暴露下被氧化，該類茄紅素粉末以玉米澱粉混合後於每日固定時段單次餵食(劑量為20毫克Lyc/公斤體重)。飼養三週後，將基礎飼料組分成兩組(分別稱為C+Fe組及C-Fe組)；將其中一組基礎飼料組與Lyc組先進行Fe-NTA(ferric nitrilotriacetate)(每天10毫克Fe/公斤)腹腔注射，分別標記為C+Fe組和Lyc+Fe組。三小時之後，即以CO2 窒息，由下腔靜脈採血並分離血清。取下各組織並冷凍貯存以供日後分析。
硫巴比妥酸反應物質(Thiobarbituric acid-reactive substances,TBARS)偵 測
TBARS為偵測組織脂質過氧化情形時常用的指標。本實驗中以注射Fe-NTA方式誘導脂質過氧化，並在此情況下觀察類茄紅素抗氧化之作用，結果如表一所示。在肝臟及腎臟組織中，Fe劑注射組(C+Fe組及Lyc+Fe組)之TBARS值皆顯著高於C-Fe組；而在脾臟和前列腺中，C+Fe組的TBARS值最高、Lyc+Fe次之而C-Fe組最低；結果顯示類茄紅素可降低脾臟、前列腺兩組織的過氧化物，具有顯著的保護作用。
1.　每個數值為平均值±標準差(Mean±SD)(n=6)。
2.　具有不同上標的數值間以單因子變異數分析(one-way ANOVA)與鄧肯多重差距檢定(Duncan’s multiple range test)方法比較時達顯著不同(p<0.05)。
麩胺基硫(Glutathione,GSH)之測量
取1毫升組織均質液加入5%三氯乙酸(trichloroacetic acid,TCA)溶液，製得三氯乙酸上清液後將其與5,5'-二硫-2-硝基苯甲酸(5,5'-dithiobis-(2-nitrobenzoic acid),DTNB)反應，並測定412nm之吸光值(Sedlak and Lindsay 1968)，再與標準曲線對照換算。
以Fe-NTA處理之肝臟、腎臟與脾臟的GSH含量皆顯著低於未處理組，而投予類茄紅素則顯著增加肝臟中之GSH含量(如表二所示)；腎和脾臟中之GSH含量則未因類茄紅素的餵食而達顯著改變；前列腺中之GSH含量於三組間無顯著差異，顯示鐵劑注射雖然會提升該組織TBARS量，但可能不是透過GSH消耗之途徑所致。
1.　每個數值為平均值±標準差(SD.)(n=6)。
2.　具有不同上標的數值間以單因子變異數分析(one-way ANOVA)與鄧肯多重差距檢定(Duncan’s multiple range test)方法比較時達顯著不同(p<0.05)。
麩胺基硫過氧化酵素(GPX)活性之測量
取組織離心後之細胞上清液進行酵素活性測定。測定過程中所利用之反應為H2 O2 +2GSH→GSSG+2H2 O。由於GSSG可藉由麩胺硫還原酶(Glutathione reductase)之作用被NADPH還原，反應為GSSG+NADPH+H+ →2GSH+NADP+ 。因此可根據NADPH在340nm吸光值之降低程度計算GPX的活性。其1個活性單位的GPX每分鐘可減少1微莫耳NADPH(Pagli and Valentine 1967)。
肝臟之SOD與過氧化氫酶(catalase)兩酵素活性於經不同處理的三組間並無顯著差異(如表三所示)；然而，以Fe-NTA與類茄紅素處理後，GPX之活性顯著上升。Moreira等人(2005)以番茄粉末餵食大鼠可增加肝臟GPX之活性，並降低TBARS值。這些結果說明類茄紅素具有誘導肝臟GPX酵素活性之特性，且與保護肝臟避免過氧化有關，其與萃取自番茄之茄紅素有相似之作用。
1.　每個數值為平均值±標準差(SD.)(n=6)。
2.　具有不同上標的數值間以單因子變異數分析(one-way ANOVA)與鄧肯多重差距檢定(Duncan’s multiple range test)方法比較時達顯著不同(p<0.05)。
〈 黑色素含量分析〉
將黑色素細胞瘤細胞株以3微莫耳麴酸(kojic acid)或20微莫耳類茄紅素萃取物處理24小時後，測量黑色素含量(毫克/毫克蛋白質)，以了解其抑制黑色素之反應結果，從圖八之結果顯示類茄紅素萃取物降低黑色素含量的效果比市面上常用之麴酸(kojic acid)更佳，意即類茄紅素萃取物具有較佳的美白作用。
紅斑與黑色素之動物實驗
自國家實驗動物中心購得12隻6週齡大的公倉鼠(Syrian hamster)，將其分為實驗組及對照組，其中每組各6隻，實驗過程為期30天，皆餵食基礎飼料。
首先將倉鼠之背部剃毛，再以紫外光鍵結箱(UV crosslinker)照射，每日照射總量為2.5 J/平方公分，且連續照射30天。每日照射後，實驗組倉鼠之皮膚塗以含0.2%類茄紅素萃取物之凝膠(0.5克)，對照組則塗以不含類茄紅素萃取物之凝膠(0.5克)，等待2小時以讓藥物吸收，再以DSM II色差計(DSM II ColorMeter)測定皮膚之紅斑值與黑色素值。結果如圖九(B)與(C)所示，紫外線處理後紅斑明顯增加(圖九(B))，而第十天開始下降，此可能原因有二：一為當紫外線刺激後，因傷害皮膚及表皮組織而產生紅斑反應，而後開始產生表皮角質化以保護皮膚；或者，在紫外線刺激下，產生紅斑反應後接著誘發黑色素生成(如圖九(C))，因而減少紫外線對皮膚的傷害，當黑色素增加後，紅斑值則漸減(圖九(B))。此結果顯示，塗抹含0.2%類茄紅素萃取物凝膠之倉鼠，可以減緩紅斑性反應，亦可減少因UV照射後誘發之黑色素生成作用(如圖九(B)(C))。
〈原膠原蛋白含量分析〉
照射紫外線UVA 20 J/cm2 後，分別加入10、25與50毫莫耳之類茄紅素萃取物處理人類纖維母細胞(Hs68)24小時，再以西方點墨法分析第一型原膠原蛋白(type I procollagen)之含量。如圖九所示，結果顯示濃度10毫莫耳濃度之類茄紅素萃取物，即具有抑制經紫外線照射刺激分解原膠原蛋白的作用。
此外，在未經紫外線處理之情況下，以0.1、0.5與10微莫耳濃度之茄紅素(從番茄萃取而得)或1、5與10微莫耳濃度之類茄紅素萃取物處理Hs68細胞24小時，再以西方點墨法分析第一型原膠原蛋白(type I procollagen)之含量。結果如圖十所示，番茄萃取之茄紅素標準品無促進原膠原蛋白增生的作用(圖十(A))；反之，本發明之類茄紅素萃取物具有促進膠原蛋白增生之作用，且其作用隨濃度增加而提高(圖十(B))。
<NMR分析>
以下實驗中所使用的樣本係利用乙醇丙酮萃取本發明之光合菌所得的類茄紅素萃取物。
樣本製備
秤取約15 mg樣本並將其溶解於D-三氯甲烷中。將溶解完成之樣品裝入常規液態NMR tube，裝入的體積大約在500uL左右。裝入後使用parafilm(石臘膜)將管口密封，並置於冰箱中保存(~4℃)，以防止溶劑的揮發與樣品的變質。
NMR實驗
將配置好的樣品放入液態500 NMR(Varian公司產品，磁場強度為11.74 T)。將樣品進行20 rps的轉動(儀器內建功能)，藉以消除磁場不均勻性，提升光譜解析度。呼叫儀器內部脈衝序列資訊，分別進行一維1 H NMR、13 C NMR、DEPT NMR、COSY NMR、NOESY NMR實驗。實驗完成後，調整得到的光譜(基線調整、相位調整、施加窗函數)。上述這些調整主要目的在於利於後續的分析。本發明所屬述領域中具有通常知識者認可，這些調整不會對光譜產生嚴重性失真，因此被廣為應用。
光譜分析
將NMR實驗中得到的一維13 C譜、DEPT譜、二維COSY譜(圖十四)及二維NOESY譜進行分析比較。一維13 C譜展示所有13 C資訊。DEPT譜可以用來區分甲基、乙基及丙基碳。COSY和NOESY譜則可以用來鑑定分子結構。
將COSY譜與預測所得之光譜(圖十三，由NMR預測器(nmrdb.org)產生)進行比較以辨識樣本中所含的各種成分。為了進行NMR光譜預測，自KEGG網站下載各化合物(請參照圖十二)之分子表達譜(molecular profiles)，並以NMR預測器進行資料處理及預測。利用上述光譜得到的各項資訊，進行樣品定性以及定量的判斷。接著請參照圖14，標記為「a」之波峰代表可能的雜質；標記為「b」之波峰代表球形烯醇(spheriodenone)及甲氧基鏈孢紅素(methoxyneurosporene)；標記為「c」之波峰代表ζ-胡蘿蔔素(ζ-carotene)及鏈孢紅素(neurosporene)；且標記為「d」之波峰代表球形烯醇(spheriodenone)。根據標記為「c」之波峰的低強度，相較於在3-4 ppm之間的兩個波峰(標記為「b」)，可得知球形烯醇(spheriodenone)及甲氧基鏈孢紅素(methoxyneurosporene)係樣本中之主要成分，且其比例約為一比一。該球形烯醇含量多於樣本的30重量百分比，而甲氧基鏈孢紅素含量亦多於樣本的30重量百分比。
ζ-胡蘿蔔素純化物、鏈孢紅素純化物及類茄紅素萃取物的1 H NMR光譜如圖十五至十七所示。以前述資訊為基礎，藉由將圖十六(A)中所示之光譜與圖十五(A)及(B)中所示之光譜進行比較，以進一步辨識類茄紅素萃取物中的活性成分及其所占比例。圖十六(A)光譜中各波峰所代表的化合物被標示於圖十六(C)及(D)中。圖十六(C)虛線長方型區域內的波峰皆可與ζ-胡蘿蔔素純化物(圖十五(A))及鏈孢紅素純化物之1 H NMR光譜中的波峰相對應(圖十五(B))。由圖十五(A)及(B)可得知，ζ-胡蘿蔔素純化物及鏈孢紅素純化物在進行1 H NMR時，皆會產生一個在5.1 ppm處的波峰(箭頭標示)。
由一化合物在NMR光譜中波峰的強度及/或波峰下的面積可推知該化合物的含量。圖十五(A)及(B)中，箭頭所指波峰的強度比為1:1.273，代表ζ-胡蘿蔔素及鏈孢紅素之比例為1:1.273。圖十七中的波峰a代表ζ-胡蘿蔔素及鏈孢紅素；波峰b代表球形烯醇；而波峰c代表甲氧基鏈孢紅素。上述波峰a、b及c的面積比為1:1.553:1.604。根據上述所有實驗資料，可計算得知本發明類茄紅素萃取物中所含的ζ-胡蘿蔔素約為10.58重量百分比，鏈孢紅素約為13.47重量百分比，球形烯醇約為37.37重量百分比，而甲氧基鏈孢紅素約為38.58重量百分比。
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<120>　類茄紅素萃取物及其組合物
<130>　1438-ABD-TW
<150>　099124072
<151>　2010-07-22
<160>　4
<170>　PatentIn version 3.5
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<212>　DNA
<213>　Rhodobacter sphaeroides
<220>
<221>　gene
<222>　(1)..(955)
<400>　3
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<211>　278
<212>　PRT
<213>　Rhodobacter sphaeroides
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圖一係根據本發明之一具體實施例，產生茄紅菌之流程圖。
圖二係原生光合菌之代謝途徑。
圖三(A-B)係根據本發明之一具體實施例，本發明之茄紅菌與野生光合菌之CrtC酵素DNA序列比較圖。
圖四係根據本發明之一具體實施例，本發明之茄紅菌與野生光合菌之CrtC酵素胺基酸序列比較圖。
圖五係根據本發明之一具體實施例之高效液相層析法(HPLC)分析圖；(A)至(F)為以不同有機溶劑萃取本發明茄紅菌之萃取物；圖五(G)為茄紅素標準品；圖五(H)為本發明茄紅菌之乙醇丙酮類茄紅素萃取物。
圖六係根據本發明之一具體實施例，以脂多醣(LPS)刺激RAW 264.7巨噬細胞，再以本發明茄紅菌之甲醇萃取物處理細胞後，並以西方點墨法分析觀察(A)iNOS蛋白質與(B)COX-II蛋白質表現之結果。
圖七係根據本發明之一具體實施例，測試不同有機溶劑之本發明類茄紅素萃取物對NO釋放之影響；以脂多醣(LPS)刺激RAW 264.7巨噬細胞，再以不同有機溶劑萃取本發明茄紅菌之萃取物處理細胞，並測量NO之釋放量。
圖八係根據本發明之一具體實施例，以本發明之類茄紅素萃取物對黑色素 含量的影響分析；以本案之類茄紅素處理黑色素瘤細胞24小時，再測量其黑色素含量(毫克/毫克蛋白質)。
圖九係根據本發明之一具體實施例，測試含本發明之類茄紅素萃取物之膠體對紫外線照射倉鼠之紅斑值與黑色素值之抑制作用；將倉鼠以紫外光鍵結箱(UV crosslinker)照射，每日照射總量為2.5 J/平方公分，連續照射30天，每日照射後塗抹含或不含0.2%之本發明類茄紅素萃取物的膠體0.5克，再測量其紅斑值(圖九(A))與黑色素值(圖九(B))。
圖十係根據本發明之一具體實施例，以本發明之類茄紅素萃取物抑制紫外線誘發膠原蛋白分解的結果分析；將細胞以紫外線刺激或未刺激細胞，再以10、25與50微莫耳之本發明之類茄紅素萃取物處理細胞，並以西方點墨法分析其第一型原膠原蛋白質之含量。
圖十一係根據本發明之一具體實施例，在無紫外線刺激下，本發明之類茄紅素萃取物(圖十(A))與番茄之茄紅素萃取物(圖十(B))誘發原膠原蛋白增生的結果分析。
圖十二顯示(A)茄紅素；(B)ζ-胡蘿蔔素；(C)鏈孢紅素；(D)球形烯醇及(E)甲氧基鏈孢紅素之分子結構。
圖十三顯示(A)ζ-胡蘿蔔素；(B)鏈孢紅素；(C)球形烯醇及(D)甲氧基鏈孢紅素之預測NMR光譜。該些經標記之波峰代表該些可與類茄紅素萃取物之COSY NMR光譜所示之波峰相對應之波峰。
圖十四顯示類茄紅素萃取物之COSY NMR光譜；標記為「a」之波峰代表可能的雜質；標記為「b」之波峰代表球形烯醇及甲氧基鏈孢紅素；標記為「c」之波峰代表ζ-胡蘿蔔素及鏈孢紅素；且標記為「d」之波峰代表球形烯醇。
圖十五顯示根據本發明之一具體實施例之ζ-胡蘿蔔素純化物(A)及鏈孢紅素純化物(B)1 H NMR光譜；箭頭所指處表示ζ-胡蘿蔔素純化物及鏈孢紅素純化物皆會在5.1 ppm處產生一波峰。
圖十六顯示根據本發明之一具體實施例之類茄紅素萃取物1 H NMR光譜(A)及其部分放大圖(B及C)。
圖十七顯示根據本發明之一具體實施例之用於定量分析的類茄紅素萃取物1 H NMR光譜。

Claims (5)

  1. 一種類茄紅素萃取物，其係萃取自突變之光合菌，該突變之光合菌係寄存標號為BCRC910406的球形紅桿菌(Rhodobacter sphaeroides)，其中該類茄紅素萃取物包含活性成分選自ζ-胡蘿蔔素(ζ-carotene)、鏈孢紅素(neurosporene)、球形烯醇(spheroidenone)及甲氧基鏈孢紅素(methoxyneurosporene)，其中該ζ-胡蘿蔔素之含量多於該類茄紅素萃取物之10重量百分比；該鏈孢紅素之含量多於該類茄紅素萃取物之10重量百分比；該球形烯醇之含量多於該類茄紅素萃取物之30重量百分比；及甲氧基鏈孢紅素之含量多於該類茄紅素萃取物之30重量百分。
  2. 如申請專利範圍第1項之萃取物，其中該突變之光合菌之CrtC酵素之DNA序列如SEQ ID NO：1所示。
  3. 一種組合物，包含申請專利範圍第1項之類茄紅素萃取物，及食品或醫藥上可接受之載劑。
  4. 如申請專利範圍第3項之組合物，其可用於抗發炎、抗氧化、美白、抑制膠原蛋白分解或促進膠原蛋白增生。
  5. 如申請專利範圍第3項之組合物，其可用作食物增補劑、動物飼料、人 類食物產品或醫藥品或化妝品組合物。
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Families Citing this family (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
TWI457129B (zh) * 2012-03-16 2014-10-21 Asia Pacific Biotech Developing Inc Use of a Lycogen composition for the manufacture or prevention of hypertrophy or renal function of the prostate
TWI459950B (zh) * 2012-12-22 2014-11-11 Asia Pacific Biotech Developing Inc 一種治療或預防糖尿病或大腸直腸癌的醫藥組合物
CN103393572B (zh) * 2013-08-06 2014-09-17 珀莱雅化妆品股份有限公司 具有抗老化功效的深亚微米粒乳液的制备方法
TWI594749B (zh) * 2015-07-30 2017-08-11 亞比多生技發展有限公司 類茄紅素用於製備促進糖尿病傷口癒合及輔助抑制癌移轉的類茄紅素醫藥組合物之用途
CN109010093A (zh) * 2018-08-28 2018-12-18 上海能相旭生物科技有限公司 一种四氢茄红素的应用及其制备方法
CN108904435A (zh) * 2018-08-28 2018-11-30 上海能相旭生物科技有限公司 一种球形酮的应用及其制备方法
EP4041207A4 (en) * 2019-10-10 2023-11-08 Lycored Ltd. COMPOSITIONS AND METHODS FOR INHIBITING COLLAGEN LOSS
FR3102671B1 (fr) * 2019-11-02 2021-10-15 Deinove Sa Utilisation du neurosporène pour protéger la peau des effets délétères de la lumière bleue

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
TW201012931A (en) * 2008-09-23 2010-04-01 Asia Pacific Biotech Developing Inc Lycopenoid-producing microorganism

Family Cites Families (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6818424B2 (en) * 2000-09-01 2004-11-16 E. I. Du Pont De Nemours And Company Production of cyclic terpenoids
WO2003068202A1 (en) * 2002-02-15 2003-08-21 Dsm Ip Assets B.V. Compositions comprising lycopene for the treatment and prevention of angiogenesis associated pathologies
US20040219629A1 (en) * 2002-12-19 2004-11-04 Qiong Cheng Increasing carotenoid production in bacteria via chromosomal integration
US20060135610A1 (en) * 2004-12-22 2006-06-22 Bortz Jonathan D Cardiovascular compositions
CN100998573A (zh) * 2006-06-26 2007-07-18 宁波健永生物科技有限公司 多重茄红素调合制备的胶囊的功效及用途

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
TW201012931A (en) * 2008-09-23 2010-04-01 Asia Pacific Biotech Developing Inc Lycopenoid-producing microorganism

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