TWI404801B - 胜肽粒線體移植系統方法及其用途 - Google Patents

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胜肽粒線體移植系統方法及其用途
本發明係以一種貫穿膜之胜肽(cell penetrating peptide，Pep-1)，標定並運送分離來自健康細胞之粒線體(mitochondria)，用以取代受損細胞粒線體功能之方法。
粒線體移植之需求與必要性高，因粒線體缺陷廣泛涉及相關疾病、原因不明且目前仍無效治療方式-先天遺傳-細胞質中胞器(粒線體)中的DNA發生突變，大部份此疾病為遺傳性，但也有部份是因基因突變所造成。通常是由媽媽遺傳給下一代，因在卵子內存有數以萬計個粒線體，精卵結合時精子的粒線體則是被留在卵子外，受精卵的粒線體DNA全部來自母親。粒線體缺陷發生率與罕見疾病-粒線體DNA的分布屬隨機的，因一個細胞就含有上千個粒線體，每個粒線體又有2~10個粒線體DNA，是那一個粒線體DNA發生問題說不一定。在台灣目前已知可能與粒線體缺陷相關的疾病已有五十多種，粒線體疾病已被納入罕見疾病之列；而國內300~400個家族有粒線體基因缺陷現象，缺陷率達1/10,000。
粒線體缺陷廣泛涉及疾病發生與惡化，粒線體疾病的臨床表現千變萬化；就發生年齡來說，可自新生嬰兒至成年人，有些症狀表徵是持續而明顯的(如發展遲緩、抽搐等)，有些則以非特異性症狀存在(如偏頭痛、身材矮小等)，而在身體狀況較差時，才出現較明顯的症狀。各器官視不同症候群之表現而有不等程度的病變，例如腦部則有頭痛、抽搐、意識障礙、皮質性視盲、半身癱瘓、智力不足、精神運動發育遲緩、腦幹功能異常等現象；肌肉則有各種不同程度的肌肉病變；心臟則有心肌肥大、心房室傳導異常；眼睛則有眼臉下垂、外眼球肌麻痺、視神經萎縮、視網膜病變；腎臟則有腎小管功能異常；肝臟則有肝功能異常；腸胃則有嘔吐、腹瀉、假性腸阻塞；胰臟則有糖尿病；骨髓則有功能異常；其他則包括有耳聾、身材矮小、週邊神經病變、皮下脂肪瘤等等。此外，許多老化的症狀或疾病也和粒線體缺陷有關，包括：動脈粥狀硬化、中風、巴金森氏症、阿茲海默症和癌症等。
此疾病目前仍無根治的方法，大多使用維生素或丙酮酸來治療，但隨著醫學界對粒線體疾病的認識，治療方式日漸增多，且可針對個別情況觀察和改善狀況。理論上，若是母系遺傳的粒線體基因缺陷，有朝一日也許可以使用顯微注射單一胚胎粒線體移植來預防疾病的發生，但如因外在條件導致的粒線體變異，如氧化壓力，粒線體品質不佳，本發明將有助於提供粒線體移植治療大量細胞之效率。
真核細胞中，粒線體為提供能量主要來源，細胞的生長、分化甚至死亡都接受粒線體調控，文獻中發現幹細胞與粒線體功能障礙的細胞經細胞融合(cell fusion)後，經由細胞間將彼此粒線體相互傳送後，可有效治療細胞損傷使細胞恢復正常能量代謝，因此主動或被動「細胞粒線體移植」已視為有效的細胞治療方式。但此技術仍受移植效率與細胞特性不同，而導致應用上受限制；如利用顯微注射(microinjection)，一次僅能治療一個細胞，導致治療效率太差，或治療的細胞本身並無法與其他細胞產生融合現象，故目前並無有效方式主動將粒線體運送進入細胞內。
粒線體移植之觀念已於1998年國外文獻中被提出；近年研究發現亦證實，經由轉殖技術將粒線體轉殖於胚胎中，可提高胚胎之發育，為了評估粒線體轉移技術對胚胎發育之影響，從小鼠肝細胞中分離出粒線體，並經由顯微注射轉殖入較年輕和較老小鼠在兩個細胞核(2PN)階段之受精卵中，將上述之受精卵在體外培養後評估其結果，結果發現經長時間在體外培養，從年輕小鼠胚胎發展到囊胚階段，實驗組(37.65%)顯著高於對照組(20.91%)；而孵化率卻不受影響(實驗組(1.76%)和對照組(1.82%))。即使來自於年紀較大的老鼠(約20週齡)之受精卵，經移植後之對照組的胚胎發育也明顯獲得改善，(實驗組(54.35%)相對於對照組(18.92%)，發展到桑葚胚階段(morula stage)，43.48%和8.11%發展到囊胚階段(blastocyst stage)。由於倫理問題，且淺在風險如粒線體的異質性等，是否會影響細胞活性，目前並未查詢到關於與人類粒線體移植之相關研究，此外，其移植模式是否合適於其他細胞類型或經由其他方式介入，亦尚待研究。
目前粒線體轉殖技術包括有顯微注射(microinjection)、細胞融合(cell infusion)、轉運核醣核酸(tRNA)轉殖系統及胜肽運送粒線體系統，其運送原理、治療對象、介入方式及優缺點如表一所示。其中胜肽運送粒線體系統可一次處理大量細胞。可彈性調控欲送入之粒線體數量。步驟簡單方便，技術門檻低。
貫穿膜胜肽(cell penetrating peptide，簡稱為Pep-1)，為貫穿膜胜肽家族(cell penetrating peptide)中之一種，其胺基酸序列如SEQ ID NO：1所示，分別由三段鏈結(domain)構成：疏水鏈(KETWWETWWTEW)、親水鏈(含大量離胺酸(Lysine(K),KKKRKV)與間格子(Spacer,SQP)。其胜肽同時具備有親疏水端，為一種兩性胜態(Amphipathic peptide)。此類胜肽常用來當作藥物與酵素載體，運送原理乃利用疏水不溶於水產生聚集特性微粒，包埋過程中產生自組裝反應而包入藥物或酵素，利用親水點所帶的正電荷與細胞膜上的負電結合，同時疏水端崁入細胞雙層磷脂膜，將蛋白送入細胞中。利用此方式的優點在於欲送入的蛋白不必事先化學處理交聯，及送入之機轉為主動介入，非經由被動細胞吞噬作用(endocytosis)進入，故送入之蛋白並不會直接經溶小體(Lysosome)代謝，增加細胞質中的保留。文獻指出Pep-1，本身並不會導致細胞毒性，此運送方式亦不會影響運送細胞之細胞膜表面接受子(receptors)與引子(ligands)結合。
此Pep-1胜肽雖已應用與藥物、粒子等運送，但對粒線體之運送技術為本發明之創新技術開發，同時此發明亦結合良好粒線體分離技術，因此發展出此「胜肽運送粒線體系統(Peptide-mediated mitochondrial delivery system,PMD)」其優點包含，步驟省時簡單，一次標定後可同時治療大量細胞；可彈性調控欲送入之粒線體數量(微克)；在適當粒線體移植下，不會產生細胞毒性；移植效率可達80%以上。在此系統下送入之粒線體會移動到原細胞粒線體部位，並不會進入溶小體中代謝分解，故至少可維持一周以上治療效果。
本發明係應用一種可貫穿膜之胜肽(cell penetrating peptide)，將上述之胜肽加以標定並運送分離來自健康細胞之粒線體(mitochondria)，用以取代受損細胞中粒線體功能之方法，可用於治療細胞粒線體退化與相關疾病之用途。
是以，本案發明人鑑於上述習用針對粒線體移植的方法所衍生的各項缺點，乃亟思加以改良創新，並經多年苦心孤詣潛心研究後，終於成功研發完成本件胜肽粒線體移植系統方法及其用途。
本發明係以一種貫穿膜之胜肽(cell penetrating peptide，Pep-1)，標定並運送分離來自健康細胞之粒線體(mitochondria)，用以取代受損細胞粒線體功能之方法。
本發明揭示一種用於將粒線體導入宿主細胞的方法，其包括：將功能正常之粒線體以具有如SEQ ID NO：1之胜肽標定後得胜肽粒線體；再將標定後之胜肽粒線體與宿主細胞接觸一段足以將該胜肽粒線體導入宿主細胞之時間。
一實施例係揭示以一種貫穿膜之胜肽(cell penetrating peptide)，其胺基酸序列為SEQ ID NO：1(KETWWETWWTEWSQPKKKRKV-cysteamine)，標定並運送分離來自健康細胞之粒線體(mitochondria)，用以取代受損細胞中粒線體的功能之方法。其中貫穿膜胜肽，分別由三段鏈結(domain)構成：疏水鏈(KETWWETWWTEW)、親水鏈(含大量離胺酸(Lysine(K),KKKRKV)與間格子(Spacer,SQP)。其胜肽同時具備有親疏水端，為一種兩性胜肽(Amphipathic peptide)。運送原理乃利用疏水不溶於水產生聚集特性微粒，包埋過程中產生自組裝反應而包入藥物或酵素，利用親水點所帶的正電荷與細胞膜上的負電結合，同時疏水端崁入細胞雙層磷脂膜，將蛋白送入細胞中。
在另一實施例中，分離自人類野生型融合細胞株(B143 cell line harboring normal mitochodria)得到功能正常之粒線體，取上述105μg(微克)粒線體(分離自2×107 細胞)，將粒線體定量並標示紅色螢光(Mitotracker Red)，並以Pep-1(如SEQ ID NO：1所示之胜肽)標定粒線體1小時得胜肽粒線體(Pep-1/粒線體)；再將標定後之胜肽粒線體(Pep-1/粒線體)運送二天至宿主細胞中(含5×104 細胞)，該宿主細胞包含人類腦肌病症候群衍生之粒線體融合細胞株(MERRF patient-derived B2 clone)及經ethidium bromide抑制粒線體之人類細胞株(B143ρ°cells)；將接受移植細胞培養一天後進行細胞粒線體功能性評估
此「胜肽運送粒線體系統(Peptide-mediated mitochondrial delivery system,PMD)」其優點包含，步驟省時簡單，一次標定後可同時治療大量細胞；可彈性調控欲送入之粒線體數量(微克)；在適當粒線體移植下，不會產生細胞毒性；移植效率可達80%以上。在此系統下送入之粒線體會移動到原細胞粒線體部位，並不會進入溶小體中代謝分解，故至少可維持一周以上治療效果。經本研究發現，以人類腦肌病症候群衍生之粒線體融合細胞株((MERRF)patient-derived(B2 colne))與Ethidium Bromide抑制粒線體之人類細胞株(B143 ρ° cells)為模式，揭露其可用於治療細胞粒線體退化與相關疾病之用途。
本發明係以下面的實施例予以示範闡明，但本發明不受下述實施例所限制。
實施例一　胜肽運送系統實例說明(Peptide-mediated delivery system) 1.技術流程：
本發明揭示以一種貫穿膜之胜肽(cell penetrating peptide)，其胺基酸序列為SEQ ID NO：1(KETWWETWWTEWSQPKKKRKV-cysteamine)，標定並運送分離來自健康細胞之粒線體(mitochondria)，用以取代受損細胞中粒線體的功能之方法。該胜肽運送粒線體系統方式如圖一所示，其中貫穿膜胜肽，分別由三段鏈結(domain)構成：疏水鏈(KETWWETWWTEW)、親水鏈(含大量離胺酸(Lysine(K),KKKRKV)與間格子(Spacer,SQP)。其胜肽同時具備有親疏水端，為一種兩性胜肽(Amphipathic peptide)。運送原理乃利用疏水不溶於水產生聚集特性微粒，包埋過程中產生自組裝反應而包入藥物或酵素，利用親水點所帶的正電荷與細胞膜上的負電結合，同時疏水端崁入細胞雙層磷脂膜，將蛋白送入細胞中。利用此方式的優點在於欲送入的蛋白不必事先化學處理交聯，及送入之機轉為主動介入，非經由被動細胞吞噬作用(endocytosis)進入，故送入之蛋白並不會直接經溶小體(Lysosome)代謝，增加細胞質中的保留。文獻指出Pep-1，本身並不會導致細胞毒性，此運送方式亦不會影響運送細胞之細胞膜表面接受子(receptors)與引子(ligands)結合。
2.利用胜肽運送類似粒線體大小之奈米粒子(量子點)實證結果：
本發明比較其他高分子轉殖試劑(PolyFect reagents(TQ)，其機轉係由增加細胞吞噬作用進入)與利用貫穿膜胜肽(cell penetrating peptide，Pep-1)傳送粒線體的方法，其結果證實利用Pep-1方式傳送粒線體可成功送入奈米粒子量子點(LQ)；由螢光強度可知，其效率優於高分子轉殖試劑(TQ)(如圖二)；同時並不會抑制人類脂肪間葉幹細胞(human adipose-derived adult stem cells，ADAS)細胞表面標誌蛋白(如圖三A)的表現與細胞生長(圖三B)；利用此方式亦不會抑制幹細胞進行硬骨(如圖四A及B)與軟骨分化(如圖五A、B、C、D)。相反的，利用高分子轉殖試劑運送粒子(TQ)則會抑制細胞分化，甚至導致細胞無法三維培養(micromass culture)，導致無法分化為成熟軟骨細胞。
實施例二　細胞療效評估 1.胜肽運送粒線體系統(Peptide-mediated mitochondrial delivery system，PMD)體外評估方法：
分離自人類野生型融合細胞株(B143 cell line harboring normal mitochodria)得到功能正常之粒線體，取上述105μg(微克)粒線體(分離自2×107 細胞)，將粒線體定量並標示紅色螢光(Mitotracker Red)，並以Pep-1(如SEQ ID NO：1所示之胜肽)標定粒線體1小時得胜肽粒線體(Pep-1/粒線體)；再將標定後之胜肽粒線體(Pep-1/粒線體)運送二天至宿主細胞中(含5×104 細胞)，該宿主細胞包含人類腦肌病症候群衍生之粒線體融合細胞株(MERRF patient-derived B2 clone)及經ethidium bromide抑制粒線體之人類細胞株(B143ρ°cells)；將接受移植細胞培養一天後進行細胞粒線體功能性評估(詳如圖六所示)。
2.療效確認評估：
(1).粒線體運送效率與定期追蹤：
胜肽Pep-1可有效運送粒線體進入細胞(紅色螢光圍標定送入之健康粒線體)(圖七A)。其運送效率在人類腦肌病症候群衍生之粒線體融合細胞株(MERRF patient-derived B2 clone)及經ethidium bromide抑制粒線體之人類細胞株(B143ρ°cells)中為分別為75.5%(MitoB2)和83.0%(Mitoρ°)(圖七B)。
(2).胜肽Pep-1標定之粒線體於細胞內之表現：
在此胜肽運送粒腺體系統(Peptide-mediated mitochondrial delivery system，PMD)下送入之粒線體會移動到原細胞粒線體部位(圖八A)，進一步利用粒線體表現明顯的MERRF纖維母細胞(fibroblast cells)觀察送入情況，粒線體亦能成功送入，並坐落於原細胞粒線體部位(圖八B)。
(3).胜肽Pep-1標定粒線體修復細胞粒線體損傷功能評估：
此胜肽運送粒腺體系統(Peptide-mediated mitochondrial delivery system，PMD)無細胞毒性，可治療因粒線體基因突變所引起細胞粒線體功能異常，包含：可恢復粒體膜電位(降低JC1monomers螢光表現)(圖九A)；延長細胞於低糖培養下細胞存活率(圖九B)，；恢復細胞生長能力(圖九C)；恢復細胞能量生成(圖九D)；並降低無氧代謝產生之乳酸生成(圖九E)。其效果至少維持一周以上。
本發明所發展之胜肽運送粒腺體系統(Peptide-mediated mitochondrial delivery system，PMD)，與其他習用之運送粒線體技術相互比較時，更具有下列之優點：
1.其對幹細胞並無毒性
2.且能有效將奈米粒子送入幹細胞，且不影響幹細胞分化。
3.送入之粒子並不會活化細胞代謝，粒子可經代謝排出。
以上，可得知結合「胜肽運送粒線體系統」為可行之技術，並已在此驗證結果中得到證實。此Pep-1胜肽雖已應用與藥物、粒子等運送，但對粒線體之運送技術為本技術之創新開發，同時亦需結合良好粒線體分離技術。此「胜肽運送粒線體系統(Peptide-mediated mitochondrial delivery system,PMD)」其優點包含，步驟省時簡單，一次標定後可同時治療大量細胞；可彈性調控欲送入之粒線體數量(微克)；在適當粒線體移植下，不會產生細胞毒性；移植效率可達80%以上。在此系統下送入之粒線體會移動到原細胞粒線體部位，並不會進入溶小體中代謝分解，故至少可維持一周以上治療效果。經本研究發現，以人類腦肌病症候群衍生之粒線體融合細胞株((MERRF)patient-derived(B2 colne))與Ethidium Bromide抑制粒線體之人類細胞株(B143 ρ° cells)為模式，揭露其可用於治療細胞粒線體退化與相關疾病之用途。
本發明中使用之胜肽本身無毒性，適當粒線體移植數目需依用途先進行評估，不同模式之細胞有效之粒線體移植數目可能不同，如本發明證實105μg(微克)粒線體，經計算與Pep-1比例後，可有效治療50000顆腦肌病症候群(MERRF)患者粒線體變異模式細胞(B2 cybrids cells)。過量粒線體移植，可能會導致細胞壓力產生，導致受治療細胞生長緩慢。
上列詳細說明係針對本發明之一可行實施例之具體說明，惟該實施例並非用以限制本發明之專利範圍，凡未脫離本發明技藝精神所為之等效實施或變更，均應包含於本案之專利範圍中。
綜上所述，本案所提供之胜肽運送粒腺體系統不但為一創新的運送粒線體技術，並具有上述多項功效，應已充分符合新穎性及進步性之法定發明專利要件，爰依法提出申請，懇請　貴局核准本件發明專利申請案，以勵發明，至感德便。
<110>　財團法人彰化基督教醫院
<120>　胜肽粒線體移植系統方法及其用途
<160> 1
<210> 1
<211> 22
<212> PRT
<213>　人工序列
<400> 1
圖一、胜肽運送粒線體系統(Peptide-mediated mitochondrial delivery system,PMD)設計示意圖。
圖二、比較人類脂肪間葉幹細胞(human adipose-derived adult stem cells，ADAS)經不同方式送入量子點之效率。(A)送入後量子點於細胞內的表現與(B)粒子所散射出之螢光強度。
C：控制組；LQ：以Pep-1運送；TQ：以高分子轉殖試劑(PolyFect reagents)運送。
圖三、比較人類脂肪間葉幹細胞(human adipose-derived adult stem cells，ADAS)經不同方式送入量子點其(A)細胞表面標誌蛋白表現(送入一天後觀測)與(B)細胞生長。
C：控制組；LQ：以Pep-1運送；TQ：以高分子轉殖試劑(PolyFect reagents)運送。(#比較C組有顯著差異；比較LQ組有顯著差異)。
圖四、比較人類脂肪間葉幹細胞(human adipose-derived adult stem cells，ADAS)經不同方式送入量子點其(A)硬骨基因表現、鹼性磷酸鋂活性與(B)鈣沉積表現。
C：控制組；LQ：以Pep-1運送；TQ：以高分子轉殖試劑(PolyFect reagents)運送。
圖五、比較人類脂肪間葉幹細胞(human adipose-derived adult stem cells，ADAS)經不同方式送入量子點其(A)軟骨基因表現、(B、C)胞外基質蛋白多醣表現與(D)第二型膠原蛋白表現。
C：控制組；LQ：以Pep-1運送；TQ：以高分子轉殖試劑(PolyFect reagents)運送。
圖六、胜肽運送粒線體系統(Peptide-mediated mitochondrial delivery system，PMD)體外評估流程圖。
圖七、(A)胜肽Pep-1可有效運送粒線體進入細胞(紅色螢光)。(B)有75.5%(MitoB2)和83.0%(Mitoρ°)的細胞有顯著胜肽Pep-1標定的粒線體表現。
圖八、(A)Pep-1標定之粒線體於細胞內之表現，送入之粒線體(紅色螢光)會移動到原細胞粒線體部位(綠色螢光)。(B)三維掃描MERRF纖維母細胞(fibroblast cells)送入粒線體後情況，證實粒線體亦能成功送入，並座落於原細胞粒線體部位。
圖九、粒線體功能性評估。(A)粒線體膜電位測量(mitochondrial membrane potential assay)。(B)細胞存活率測試(Cell viability after glucose-starvation)-*比較控制組有顯著差異；+比較變異組有顯著差異；#比較變異組中MERRF B2組有顯著差異。(C)細胞生長測量(Cell proliferation assay)-*比較控制組有顯著差異；+比較變異組有顯著差異；#比較變異組中MERRF B2組有顯著差異。(D)三磷酸腺苷生成(Adenosine triphosphate，ATP synthesis)-*比較控制組有顯著差異；+比較變異組有顯著差異；#比較變異組中MERRF B2組有顯著差異。(E)細胞乳酸代謝量(Cellular lactate assay)-*比較控制組有顯著差異；+比較變異組有顯著差異；#比較變異組中MERRF B2組有顯著差異。

Claims (15)

  1. 一種用於將胜肽與功能正常之粒線體在製備取代受損粒線體之組合物的方法，其包括：將功能正常之粒線體以SEQ ID NO：1之胜肽標定，所得之胜肽粒線體組合物再與粒線體功能障礙之宿主細胞，接觸一段足以將該胜肽粒線體導入細胞之時間。
  2. 如申請專利範圍第1項所述之方法，其中該功能正常之粒線體係分離自正常細胞。
  3. 如申請專利範圍第2項所述之方法，其中該功能正常之粒線體係分離自人類正常細胞。
  4. 如申請專利範圍第1項所述之方法，其中該胜肽為一兩性胜肽(Amphipathic peptide)，同時具備有親水端及疏水端。
  5. 如申請專利範圍第4項所述之方法，其中該胜肽由疏水性鏈、親水性鏈及間隔鏈所組成。
  6. 如申請專利範圍第1項所述之方法，其中以SEQ ID NO：1胜肽標定功能正常之粒線體作用持續一段少於3小時的時間。
  7. 如申請專利範圍第1項所述之方法，其中該宿主細胞係選自具有粒線體缺陷之宿主組織或宿主細胞。
  8. 如申請專利範圍第1項所述之方法，其中該標定後之胜肽粒線體與宿主細胞接觸作用持續一段少於3天的時間。
  9. 如申請專利範圍第1項所述之方法，其中該標定後之胜肽粒線體與宿主細胞作用比例為每微克胜肽粒線體可與至多500個宿主細胞作用。
  10. 一種用於將粒線體導入宿主細胞的組成物，其包含：一SEQ ID NO：1之胜肽、一功能正常之粒線體及一醫藥上可接受之賦形劑。
  11. 如申請專利範圍第10項所述之組合物，其中該功能正常之粒線體係分離自正常細胞。
  12. 如申請專利範圍第11項所述之組合物，其中該功能正常之粒線體係分離 自人類正常細胞。
  13. 如申請專利範圍第10項所述之組合物，其中該胜肽為一兩性胜肽(Amphipathic peptide)，同時具備有親水端及疏水端。
  14. 如申請專利範圍第13項所述之組合物，其中該胜肽由疏水性鏈、親水性鏈及間隔鏈所組成。
  15. 如申請專利範圍第10項所述之組合物，其中該賦形劑可為稀釋劑、填充劑、結合劑、崩解劑或潤滑劑。
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Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP1305333A2 (en) * 2000-07-31 2003-05-02 Active Motif PEPTIDE MEDIATED DELIVERY OF MOLECULES IN CELLS

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP1305333A2 (en) * 2000-07-31 2003-05-02 Active Motif PEPTIDE MEDIATED DELIVERY OF MOLECULES IN CELLS

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* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Deshayes S., et al.,2005. Cell-penetrating peptides: tools for intracellular delivery of therapeutics. Cell Mol Life Sci, Vol.62(16): p.1839-49 *
Trabulo S.et al.,2010. Cell-penetrating peptides-mechanisms of cellular uptake and generation of delivery systems. Pharmaceuticals, Vol.3(4): p. 961-993 *

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