TWI388319B

TWI388319B - Ｄｈａ和ａｒａ於製造供預防或治療肥胖用的組成物上之用途

Info

Publication number: TWI388319B
Application number: TW096106856A
Authority: TW
Inventors: Kristin Morris; Joshua C Anthony; Steven Charles Rumsey; J Thomas Brenna
Original assignee: Mead Johnson Nutrition Co; Cornell Res Foundation Inc
Priority date: 2006-02-28
Filing date: 2007-02-27
Publication date: 2013-03-11
Also published as: BRPI0708378A2; CA2642969A1; RU2008134874A; WO2007100561A3; KR20080103972A; MX2008010888A; RU2456985C2; WO2007100561A2; CN101389322A; EP1988888A2; US20070203237A1; TW200744573A; IN2008DE06532A; NO20082636L

Description

DHA和ARA於製造供預防或治療肥胖用的組成物上之用途

本發明大致上係關於一種預防或治療肥胖之方法。

於美國，有超過25%成年人及超過14%的兒童及青少年肥胖。肥胖為一種考量多種因子如身體質量指數(BMI)及腰圍之醫學病況。舉例來說，如果男性的BMI值超過30且腰圍大於40英吋，即可視為肥胖。肥胖亦可藉由比較體內脂肪組織(一種特化的結締組織，其為脂肪之主要儲存部位)對精瘦肌肉的份量來決定。肥胖會明顯提高生病率，縮短壽命期望值，且已顯示出會導致高血壓、呼吸問題、中風、心臟病、糖尿病、高血脂、高膽固醇、膽囊疾病、痛風、某些類型的癌症及動脈硬化。

有證據顯示肥胖可從嬰兒期追踪到成年期。Zive,M.M.等人，Infant－feeding Practices and Adiposity in 4－y－old Anglo－and Mexican－Americans, Am.J.Clin.Nutr.55：1104－1108(1992)。事實上，研究發現三分之一的肥胖成人亦為肥胖兒童且50%肥胖青少年在嬰兒期也肥胖。Mulhins,A.G.,The Prognosis in Juvenile Obesity, Arch.Dis.Childhood 33：307－314(1958)；Poskitt,E.M.E.,The Fat Child. Clin.Paediatr.Endocrin.141－158(1981)。

雖然成人肥胖很容易透過BMI及腰圍來測定，不過同樣方式並不適用於嬰兒或兒童。研究人員及臨床人員同意身體組成評估(其為一種身體質量的測量值，其係以脂肪、骨骼及精瘦肌肉來表示)可提供一種較身高及腰圍更適合顯現出嬰兒或兒童生長及營養狀態的判斷工具。所以，預防在兒童時期、青春期或成年期發生肥胖的最好方式或許為改善嬰兒期的身體組成。

所以，提供一種能改變嬰兒及兒童身體組成以預防兒童時期、青春期及成年期發生肥胖之組成物會很有益處。此外，提供一種含有此等組成物之嬰兒配方食品或營養補充品以改善嬰兒及兒童之身體組成也很有益處。

發明總論

簡要地，本發明係關於一種預防或治療個體肥胖之新穎方法，該方法包含把治療有效量之DHA或ARA(單獨或彼此組合地)投予給該個體。該個體可為嬰兒或兒童。

本發明亦關於一種增加個體之精瘦肌肉質量及減少脂肪組織之新穎方法，該方法包含把治療有效量之DHA或ARA(單獨或彼此組合地)投予給該個體。此外，本發明還有關一種向上調節個體骨骼肌內之IL－15之表現的方法，該方法包含把治療有效量之DHA或ARA(單獨或彼此組合地)投予給該個體。本發明還關於一種向下調節個體皮下脂肪組織內之IL－15之表現的方法，該方法包含把治療有效量之DHA或ARA(單獨或彼此組合地)投予給該個體。

再者，本發明還有關一種向上調節個體骨骼肌內之脂聯素(adiponectin)之表現的方法，該方法包含把治療有效量之DHA或ARA(單獨或彼此組合地)投予給該個體。此外，本發明還關於一種向下調節個體肝臟瘦素受體之表現的方法，該方法包含把治療有效量之DHA或ARA(單獨或彼此組合地)投予給該個體。

本發明所能達到的多種優點中，包括預防肥胖發生或治療肥胖。本發明可增加體內精瘦肌肉之份量及減少脂肪組織的份量。如此一來，本發明亦可預防與肥胖相關之多種疾病及失調的發生。

較佳具體例之詳細說明

現在將詳細參考本發明之具體例，其一或多個實施例顯示如下。各實施例係用來解釋本發明，而非限制本發明。事實上對熟悉此技術者而言極明顯地，可在不逾越本發明之範疇或悖離本發明之精神的情況下對本發明進行不同的修改及變更。舉例來說，於一具體例某部份顯示或說明之特性可用於另一具體例而產生再一具體例。

所以，本發明意圖將此等修改及變更涵括於後附申請專利範圍及其均等物之範圍內。本發明之其他目標、特性及態樣係揭示在如下詳細說明中或基於如下詳細說明即顯明可知。熟悉此技術之人士應瞭解此等討論僅為示範性具體例之描述，且並非意圖用以限制本發明之較廣態樣。

在此使用時，術語“向上調節”意指對於基因的表現產生正向調節影響。

術語“向下調節”意指對於基因的表現產生負向調節影響。

在此使用時，術語“表現”意指把編碼在基因內之基因資訊透過轉錄作用轉變成信使RAN(mRNA)、傳遞RNA(tRNA)或核糖體RNA(rRNA)。

術語“治療有效量”係指足以改善或矯治該疾病、失調、該疾病或病況之症狀的份量。

術語“嬰兒”係指小於約1歲之出生後的人類。

術語“兒童”係指介於約1歲到12歲之間的人類。於某些具體例中，兒童係在約1到6歲間。於某些具體例中，兒童係在約7到12歲間。

在此使用時，術語“嬰兒配方食品”意指可作為母乳替代品且能滿足嬰兒營養需求之組成物。在美國，嬰兒配方食品之內容物係由聯邦法規21 C.F.R.第100、106及107款來規範。此等規定界定了多種主營養素、維生素類、礦物質類及其它成份含量以力求達到母乳所激發之營養效果及其它特性。

根據本發明，本案發明者已發現一種預防或治療個體肥胖之新穎方法，其包含把治療有效量之二十二碳六烯酸(DHA)及二十碳四烯酸(ARA)投予給個體。

事實上，本發明已顯示單獨或彼此組合地投予DHA及ARA能增加骨骼肌內介白素－15(IL－15)之表現及減少皮下脂肪組織內IL－15的表現，顯示投予DHA或ARA(單獨或彼此組合)能改變嬰兒或兒童之身體組成使具有較多精瘦肌肉及較少油脂性脂肪組織。

IL－15為一種細胞介素，其於骨骼肌組織中高度表現且對骨骼肌蛋白質具合成代謝效果。其會刺激骨骼肌纖維蛋白質合成且抑制蛋白質降解作用。Quinn,L.S.等人，Interleukin－15：A Novel Anabolic Cytokine for Skeletal Muscle, Endocrinol.136：(8)3669－3672(1995)。投予IL－15亦已顯示出能抑制白色脂肪組織沉積，可能對此等組織具直接作用。Alvarez,B.等人，Effects of Interleukin－15(1L－15) on Adipose Tissue Mass in Rodent Obesity Models：Evidence for Direct IL－15 Action on Adipose Tissue, Biochimica et Biophysica Acta 1570：33－37(2002)。

藉由刺激肌肉生長及抑制脂肪組織生長，本發明之方法可改變身體組成且可用來治療肥胖(出處同上)。事實上，已知IL－15受體改變可能是造成某些類型肥胖的理由(出處同上)。故而，單獨或組合使用DHA或ARA對於IL－15表現的影響可用來改變嬰兒及兒童身體組成且可預防未來長大以後的肥胖現象。

本發明亦顯示出能增加骨骼肌內脂聯素受體－2之表現。脂聯素為一種主要由脂肪組織製造及分泌之蛋白質激素，其能調節脂質及葡萄糖的代謝。還藉由完整長度之脂聯素而協調較高的活化蛋白質激酶(AMPK)活性及過氧化微粒體增殖物－激活型受體(PPAR)－α配位子活性以及脂肪酸氧化及葡萄糖汲取作用。骨骼肌內脂聯素表現增加會提高骨骼肌內脂肪酸之氧化。

該激素量與身體質量指數及肥胖呈負相關。因此，一般認為較高脂聯素的表現可預防或治療肥胖。Haluzik,M.等人，Adiponectin and Its Role in the Obesity－Induced Insulin, Physil.Res.53：123－129(2004)。由於本發明顯示DHA或ARA(單獨或彼此組合)可增加骨骼肌內脂聯素受體－2之表現，因此能增加脂聯素量，所以本發明方法可用來改變身體組成及預防或治療肥胖。

本發明還顯示補充DHA或ARA(單獨或彼此組合)會降低肝臟瘦素受體之表現。瘦素為一種由白色脂肪組織所製造之激素，其涉及能量代謝及體重調節。瘦素係以一種循環性因子來運作，它們會把飽足信號送給下視丘，藉此抑制食慾。研究還指出瘦素會增加能量支出，由氧氣消耗量增加、體溫較高，及脂肪組織減少的情況得知。故而，只要個體編碼瘦素之肥胖基因(ob)沒有任何基因缺陷，那麼增加循環性瘦素量則與較少脂肪組織有關。

研究資料顯示肝臟為可溶解之循環性瘦素受體(sOb－R)的主要來源，其能隔離游離的瘦素且限制瘦素作用。本發明方法已顯示DHA或ARA(單獨或彼此組合)可向下調節肝臟內瘦素受體之表現。藉由向下調節瘦素受體之表現，更多瘦素會保留在血液循環內，因而造成脂肪組織減少。

於本發明中，把DHA或ARA(單獨或彼此組合)投予給嬰兒及兒童已顯示出能改變身體組成，使得身體傾向於有較多精瘦肌肉及較少脂肪組織。DHA及ARA為長鏈多不飽和脂肪酸(LCPUFA)，其早已顯示出能有益於嬰兒的健康及成長。更明確地，DHA及ARA已顯示出能支持嬰兒腦、眼睛及神經的發育及維護。Birch,E.等人，A Randomized Controlled Trial of Long－Chain Polyunsaturated Fatty Acid Supplementation of Formula in Term Infants after Weaning at 6 Weeks of Age, Am.J.Clin.Nutr.75：570－580(2002)。Clandinin,M.等人，Formulas with Docosahexaenoic Acid(DHA)and Arachidonic Acid(ARA)Promote Better Growth and Development Scores in Very－Low－Birth－Weight Infants (VLBW), Pediatr.Res.51：187A－188A(2002)。餵食母乳之嬰兒的DHA及ARA一般係從母乳得到。然而，以嬰兒配方食品餵養的嬰兒則必需把DHA及ARA加到飲食內。

雖然已知DHA及ARA有益於嬰兒腦、眼睛及神經的發育，不過以往並不知道DHA及ARA具有預防或治療肥胖的功效。DHA及ARA對於預防及治療肥胖的正面效用係令人訝異且無法預知的。

於本發明某些具體例中，該個體為需要預防及/或治療肥胖的主體。該個體可能是由於基因性易染病體質、飲食、生活方式、疾病或失調等而有此風險。於特定具體例中，該個體為嬰兒或兒童。於此等具體例中，該嬰兒或兒童需要預防或治療肥胖。

於本發明中，DHA及ARA的投藥形式並不重要，只要能把治療有效量投予給個體即可。於某些具體例中，該DHA及ARA係透過錠劑、片劑、囊劑、膜衣錠、粒狀膠囊、膠囊、油滴或囊袋投予給個體。於另一具體例中，該DHA及ARA係添加到食品或飲料中食用。該食品或飲料可為兒童營養品如較大嬰兒配方食品、成長奶水或奶粉或者該產品可為嬰兒營養品如嬰兒配方食品。

於特定具體例中，該個體為嬰兒。於此具體例中，可把DHA或ARA(單獨或彼此組合地)添加到嬰兒配方食品中，然後餵食給嬰兒。

於一具體例中，用於本發明之嬰兒配方食品具有完整的營養且含有適當類型及份量的脂質、醣類、蛋白質類、維生素類及礦物質類。該脂質或脂肪量一般係在約3到約7g/100仟卡間不等。該蛋白質量一般係在約1到約5g/100仟卡間不等。該醣類量一般係在約8到約12 g/100仟卡間不等。蛋白質源可為任何此技術所用的蛋白質，如無脂牛奶、乳清蛋白質、酪蛋白、大豆蛋白質、水解蛋白質、胺基酸等。醣類源可為任何此技術所用的醣類，如乳糖、葡萄糖、玉米糖漿固體、麥芽糊精、蔗糖、澱粉、米漿固體等。脂質源可為任何此技術所用的脂質，如植物油如棕櫚油、菜籽油、玉米油、大豆油、棕櫚液油、椰子油、中等鏈長三甘油酯油、高油酸葵花油、高油酸紅花子油等。

方便地，可採用市售的嬰兒配方食品。如，可於Enfalac、Enfamil、Enfamil早產兒配方食品、Enfamil含鐵配方、Lactofree、Nutramigen、Pregestimil，及ProSobee(來自Mead Johnson & Company,艾凡士惟(Evansville)，印地安納州，美國)補充適當量的DHA或ARA(單獨或彼此組合)且用以實施本發明之方法。此外，EnfamilLIPIL(其含有有效量DHA及ARA)為市售產品且可用於本發明。

本發明方法需要投予DHA或ARA(單獨或彼此組合)。於此具體例中，該ARA：DHA的重量比為約1：3到約9：1。於本發明一具體例中，該比例為約1：2到約4：1。於再一具體例中，該比例為約2：3到約2：1。於一特定具體例中，該比例為約2：1。於本發明另一特定具體例中，該比例為約1：1.5。於其他具體例中，該比例為約1：1.3。於再一具體例中，該比例為約1：1.9。於一特定具體例中，該比例為約1.5：1。於更一具體例中，該比例為約1.47：1。

於本發明特定具體例中，該DHA量為脂肪酸類重量之約0.0%到1.0%之間。因此，於特定具體例中，單獨使用ARA即可治療或減少肥胖。

該DHA量可為約0.32重量%。於某些具體例中，該DHA量可為約0.33重量%。於另一具體例中，該DHA量可為約0.64重量%。於另一具體例中，該DHA量可為約0.67重量%。於再一具體例中，該DHA量可為約0.96重量%。於更一具體例中，該DHA量可為約1.00重量%。

於本發明具體例中，該ARA量為脂肪酸類重量之約0.0%到約0.67%之間。因此，於本發明特定具體例中，單獨使用DHA即可治療或減少肥胖。於另一具體例中，該ARA量可為約0.67重量%。於另一具體例中，該ARA量可為約0.5重量%。於再一具體例中，該ARA量可為約0.47重量%到0.48重量%之間。

於本發明具體例中，該DHA的有效量一般係從每天每公斤體重約3 mg到每天每公斤體重約150 mg之間。於本發明一具體例中，該份量係從每天每公斤體重約6 mg到每天每公斤體重約100 mg之間。於另一具體例中，該份量係從每天每公斤體重約15 mg到每天每公斤體重約60 mg之間。

於本發明具體例中ARA之有效量一般係從每天每公斤體重約5 mg到每天每公斤體重約150 mg之間。於本發明一具體例中，該份量為每天每公斤體重約10 mg到每天每公斤體重約120 mg間。於另一具體例中，該份量為每天每公斤體重約15 mg到每天每公斤體重約90 mg間。於再一具體例中，該份量為每天每公斤體重約20 mg到每天每公斤體重約60 mg間。

本發明嬰兒配方食品中DHA量一般為約2 mg/100仟卡(kcal)到約100 mg/100仟卡之間。於另一具體例中，該DHA量為約5 mg/100 kcal到約75 mg/100 kcal間。於再一具體例中，該DHA量係約15 mg/100 kcal到約60 mg/100 kcal間。

本發明嬰兒配方食品中ARA量一般為約4 mg/100仟卡(kcal)到約100 mg/100仟卡間不等。於另一具體例中，該ARA量為約10 mg/100 kcal到約67 mg/100 kcal間。於再一具體例中，該ARA量係約20 mg/100 kcal到約50 mg/100 kcal間。於一特定具體例中，該ARA量係約25 mg/100 kcal到約40 mg/100 kcal間。於一具體例中，該ARA量為約30 mg/100 kcal。

用於本發明之已補充含有DHA及ARA之油類的嬰兒配方食品可採用此技術習知的標準技藝製備。舉例來說，可用等量的DHA及ARA替代常用於嬰兒配方食品之油類(如高油酸葵花油)。

該ARA及DHA源可為此技術任何習知的來源如海產油、魚油、單細胞油、蛋黃脂質、腦脂質等。該DHA及ARA可為天然形式，惟其餘LCPUFA源必需不會對嬰兒產生任何實質的不良影響。另一選擇地，可採用精煉形式的DHA及ARA。

所用之LCPUFA可含或不含二十碳五烯酸(EPA)。於某些具體例中，本發明所用LCPUFA含有極少或根本不含EPA。舉例來說，於特定具體例中，在此所用之嬰兒配方食品含有少於約20 mg/100 kcal EPA；於某些具體例中，含有少於約10 mg/100 kcal EPA；於其他具體例中，含有少於約5 mg/100 kcal EPA；於另外的具體例中，則基本上不含EPA。

如美國專利第5,374,657號、第5,550,156號及第5,397,591號之教示般，DHA及ARA源可為單細胞油類，該等專利案之揭示全部併此以為參考。

於本發明一具體例中，從嬰兒出生開始到嬰兒一歲左右的飲食內皆補充有DHA或ARA(單獨或彼此組合)。於一特定具體例中，該嬰兒可為早產兒。於本發明另一具體例中，從嬰兒出生開始到嬰兒兩歲左右的飲食內皆補充有DHA或ARA(單獨或彼此組合)。於其他具體例中，個體終身飲食內皆補充有DHA或ARA(單獨或彼此組合)。故而，於特定具體例中，該個體可為兒童、青少年或成人。

於一具體例中，本發明之個體為介於1歲到6歲間之兒童。於其他具體例中，本發明之個體為介於7歲到12歲間之兒童。於特定具體例中，把DHA投予給1到12歲間之兒童可有效預防或治療肥胖。於其他具體例中，把DHA及ARA投予給1到12歲間之兒童可有效預防或治療肥胖。

於本發明之特定具體例中，DHA或ARA(單獨或彼此組合)可用於動物個體有效治療或預防肥胖。該動物個體可為具有此等預防或治療需求之個體。該動物個體一般為哺乳動物，其可為家畜、畜養動物、動物園之動物、運動用動物或寵物，如狗、馬、貓、牛等。

本發明亦關於DHA或ARA(單獨或彼此組合)於製備供預防或治療肥胖之藥劑之用途。於此具體例中，該DHA或ARA(單獨或彼此組合)可用來製備用於人類或動物新生兒治療或預防肥胖之藥物。於某些具體例中，該動物為需要治療或預防肥胖之動物。

如下實施例係在說明本發明不同的具體例。熟悉此技術之人士在考量於此揭示之本發明說明書內容或具體施行之後，即明顯可知包含於在此所述之申請專利範圍內之其他具體例。本案申請人認為本說明書及實施例應僅視為舉例用，且本發明之範疇及精神應由實施例後方之申請專利範圍來界定。除非另有說明，否則於此等實施例中之所有百分率都是以重量為基礎來提供。

實施例1

此實施例係說明補充DHA及ARA以改良身體組成之結果。

方法動物

所有的動物處理係在聖安東尼市(San Antonio，TX)之西南生物醫學研究所(Southwest Foundation for Biomedical Research，SFBR)進行。動物處理步驟已獲SFBR及康乃爾大學研究用動物照顧及應用委員會(IACUC)核准。動物的特性概述於表1。

14隻懷孕的狒狒在妊娠約182天同時分娩。在出生後24小時內把新生兒轉到育嬰室且隨機分配到三個飲食組中之其中一組。動物係養育在隔離的新生兒保育器內，等到2週大以後再移到進出管制之育嬰室內個別的不銹鋼籠中。房間溫度係維持在76℉到82℉間，12小時光/暗循環。他們係以一種實驗性配方食品餵養到12週大為止。

飲食

動物被指定到如下三種實驗性配方食品組中之其中一組，且其LCPUFA濃度示於下表2。

目標濃度係設定成如各表格所示，且飲食係過量調製以涵蓋分析性及製造性變異及/或儲存期間可能的損失。對照組(C)及L組(中等DHA含量配方食品)分別來自市售的人類嬰兒配方食品Enfamil及Enfamil LIPIL。配方食品L3組具有同樣濃度之ARA且其目標為三倍的DHA濃度。

配方食品係由Mead－Johnson & Company(艾凡士惟,IN)以立即可食之形式提供。各飲食係密封在罐中且以兩種不同顏色的標記標示以隱瞞研究者。每天於7：00、10：00、13：00及16：00提供1盎司配方食品給動物，一天共餵食4次，且最初2晚還多餵食一餐。從第3天開始，每天提供新生兒4盎司食物；當新生兒吃光全部食物時，每日供應量會再增加2盎司。在最初7－10天係用人工餵食新生兒直到嬰兒能獨立進食為止。

生長

新生兒生長情形係採用體重測量法評估，每週記錄體重2或3次。每週還會測量每隻動物的頭圍及頭頂到臀部的長度。器官重量係在第12週進行屍體剖驗取得。

採樣

將動物麻醉且於第84.57±1.09天放血安樂死。血液係用含EDTA之真空採血管收集，且以離心分離紅血球(RBC)及血漿。取出眼睛及一顆腦半球並立即切片。由有經驗的神經學家對中樞神經系統(CNS)結構切片、稱重、於液態氮驟冷凍，且儲存於－80℃直到全部被分析過為止。取出視網膜及1公克左腦室及右肝葉樣本且類似地處理。

自骨骼肌、皮下及內臟脂肪組織及肝臟收集組織，且加以分離，以進行DNA微矩陣表現分析。

分析

總脂質係使用Bligh & Dyer方法從組織均質液中萃取出來。脂肪酸甲酯類(FAME)係使用氫氧化鈉及14%三氟化硼(BF₃ )於甲醇製造，且以氣相層析(HP 5890；BPX－70管柱，SGE，奧斯丁，TX)，使用氫載氣，如前述般分析。脂肪酸(FA)本體係使用共價加成物化學性離子化串聯式質譜儀測定，及使用十七烷酸甲酯作為內標準，利用衍生自等重之FAME混合物的反應因子來定量。FA濃度係以佔14到24個碳之脂肪酸總量的重量%表示。

統計分析

數據係以平均值±SD表示。統計分析係以變異數分析(ANOVA)來測試第12週測量值有相同平均值之假設，並使用塔基(Tukey)校正來控制多種比較值。配方食品的食用量、體重、頭圍及頭頂到臀部長度隨著時間的變化情形係使用隨機係數迴歸模式測試以比較LCPUFA組(L組，L3組)相對於對照組(C組)之差異。分析係使用適於視窗9.1版之SAS(SAS Institute,Cary,NC)進行，顯著性為p<0.05。

結果生長情形

LCPUFA組及C組間配方食品的食用量隨著時間的變化並沒有顯著差異(p＝0.64)。類似地，體重(BW,p＝0.47)、頭圍(p＝0.68)、頭頂到臀部長度(CRL,p＝0.38)或BW/CRL比率(p>0.50)(資料未顯示)隨著時間的變化並沒有顯著差異。第12週時此等人體計量學之測量值並沒有顯著差異。第12週時腦、肝、胸腺、脾、心臟、肺右腎或胰臟的器官重量(以體重(BW)之百分率來表示)並沒有顯著差異及變化趨勢。

肝臟及心臟脂肪酸

增加配方食品之DHA量會顯著提高肝臟的DHA濃度；L組及L3組分別有C組之2.2倍及3.6倍的DHA。相對於DHA，食用的ARA會增加L組肝臟中之ARA量；從L組到L3組ARA量掉落14.3%。ARA延長產物腎上腺酸(AdrA)之濃度於C組明顯高於L組及L3組(0.99±0.13%)。二十二碳五烯酸(DPA)n－6也可以看到類似、但不顯著的變化趨勢；於C組含量最高，然後是L組及L3組。LCPUFA組動物之DPAn－3濃度較對照組減少一半。C組及L組之DPAn－6/DHA值分別為L3組之4.6倍及14倍且顯著地提高。LCPUFA的增加係由單不飽和脂肪酸(MUFA)總量及亞麻油酸(LA,18：2n－6)量的減少來抵銷，不過並不影響飽和脂肪酸(SFA)總量。

至於肝臟及心臟DHA，L組及L3組分別增加2.8倍及3.9倍，而其DPAn－3則顯著減少。DHA增加似乎會損及SFA，不過SFA從C組到L組到L3組的減少情形並未達到統計上的顯著性。亞麻油酸含量係C組較L組高，不過L組與L3組間並無差異。

RBC及血漿脂肪酸

補充作用能顯著提高L組及L3組之RBC DHA，且L組及L3組之值分別為對照組之3.8倍及4.6倍。於血漿可以觀察到類似的變化趨勢，補充LCPUFA之L組及L3組之DHA量分別增加4.6倍及7.5倍。雖然從C組到L組之RBC ARA量顯著增加，不過從L組到L3組之ARA量卻減少了。ARA血漿濃度則有一致但不顯著的變化趨勢，從C組(5.36±1.0)到L組(10.06±0.99)有溫和的增加現象，而L3組則有中等含量(7.79±0.84)。AdrA為微量成份，但是RBC及血漿中的AdrA量的確對飲食變化產生反應，L3組之數值較C組及L組顯著降低。對照組RBC之DPAn－6濃度顯著較高。C組RBC及血漿測量值內的DPAn－3量較L組及L3組更高。該對照組及L組動物之DPAn－6/DHA比明顯高於L3組且分別為L3組之4倍及10倍。

視網膜脂肪酸

食用的LCPUFA造成之視網膜DHA的變化並沒有達到顯著性，不過該L組及L3組之平均值類似於先前的報告且較C組更高。ARA濃度並沒有受到配方組成物的影響。對照組之DPAn－6濃度顯著地高於營養補充量最高的L3組。DPAn－3量會隨著食用的LCPUFA量增加，且L3組較C組顯著提高。該C組及L組之DPAn－6/DHA指數高於含有高含量DHA之配方食品L3組且為其3.6倍。

CNS脂肪酸

配方食品之DHA含量較高時，大腦皮質中央前回(主要的運動皮質區)內之DHA濃度顯著較高。於L組及L3組，DHA的補充量較對照組分別多出24%及43%且L組及L3組間的差異有統計上的顯著性。補充LCPUFA使得L組及L3組額皮質內之DHA量較對照組分別明顯提高30%及41%，不過L組及L3組間的差異只達邊際顯著性(p＝0.10)。

配方食品DHA會增加基底神經節內蒼白球及尾狀核(caudate)及中腦上丘及下丘之DHA量，不過在L組及L3組間並沒有可偵測之差異。殼核(putamen)及扁桃體並沒有明顯的變化趨勢也與此型式一致。在所有CNS區域中DPAn－6量係從C組到L組到L3組顯著且一致地減少。

除了兩個CNS區域以外，食用的操作對於ARA量沒有什麼影響。蒼白球及上丘內之ARA量於L配方組最高，但是當配方DHA量更多時卻顯著減少10%。

於腦部所有區域，n－3充裕指數皆得到類似的結果。於所有CNS區域中，C組之DPAn－6/DHA比率比起配方內DHA含量較高之L3組顯著地提高。於前葉、蒼白球、尾狀核及下丘處，L組及L3組顯著不同。相較於L3組，C組及L組同樣高出2倍及5倍。

身體組成

此研究結果顯示在出生後早期數週內，補充0.33%DHA/0.67%ARA及1.00%DHA/0.67%ARA(相較於未補充營養之對照組)可增加骨骼肌內IL－15之表現及減少皮下脂肪組織內IL－15之表現。DHA及ARA對IL－15表現之影響指出骨骼肌及脂肪組織代謝間會相互溝通。補充DHA及ARA可促進脂肪組織脂肪庫存物之代謝且有益地影響骨骼肌蛋白質合成及增長。此外，補充DHA及ARA可增加骨骼肌內脂聯素的表現及減少肝臟瘦素受體之表現。此等結果示於表3。

¹ 數據為經Log 2處理之值。因此，於log 2尺度上2倍的變化代表線性尺度上4倍的變化。舉例來說，對照組皮下脂肪組織內IL－15的表現在線性尺度上為L3組之近乎8倍(6.444 vs.3.556＝2.888)。

討論

本研究顯示把DHA從0(C組)增加到0.33%(L組)能增加所有研究組織內之DHA量，不過於本研究中視網膜、殼核及扁桃體的增加量並未達到統計上的顯著性。

食用的DHA量為0.3%(w/w)時，除了大腦皮質腦葉以外之所有其他CNS區域中，以配方餵養之新生兒的DHA量係與母乳餵養之新生兒的DHA量差不多，不過在腦葉處以較高DHA配方餵養之新生兒的DHA量雖然比對照組多，但是卻為餵食母乳組含量之87%到90%。一種合理的假說為提供更多DHA或許能把皮質DHA量再提高到和餵食母乳一樣。目前的數據顯示：L組之中央前回DHA較C組增加24%，L3組則較C組增加43%。從L組到L3組額外增加的19%具有統計上的顯著性，顯示L3配方組含有較多DHA能有效提高中央前回之DHA。雖然目前的研究並不包括餵食母乳的對照組，不過其增加幅度近似於餵食母乳相對於時期之比較研究中相關的增強效果。本案發明者還注意到中央前回DHA的增加幅度小於2倍，不過從L組到L3組間飲食內之DHA含量則增為3倍。此觀察顯示：當食用的DHA量接近餵食母乳曾報導之最高值時，靈長類動物的腦中會發生以大鼠實驗時組織脂肪酸濃度因應食用的脂肪酸的增加而提高不過卻反應出之較平緩的增加現象的情形。

基底神經節為一組CNS器官，其能統合及協調來自額皮質、與執行功能及動作協調相關之信號。上丘為控制掃視及具皮質輸入之腦幹結構，下丘則與聲音定位有關。總括地說，L組及L3組間此等CNS區域之DHA量並沒有顯著差異。只不過具有潛在生物重要性之DHA(11%)在L組及L3組之蒼白球處並沒有顯著差異；於其他組織中，其DHA的增加量僅小於4%或者稍微減少。部份基於此等觀察地，可以推論說此靈長類研究中必要審慎的統計能力並無法限制偵測差異的能力。此等結果係與“大腦皮質DHA對於適度的食用的DHA量最敏感”之結論一致。在考慮到人體CNS系統內DHA量增加的現象會長達兩年，且定量來說大腦皮質為人體最大的CNS區域之情況下，DHA需求之重要性不僅僅只有嬰兒期而已。

人類及狒狒母乳所含之n－3 LCPUFA EPA及DPA之濃度僅為DHA濃度之一點點而已。於成年人，此等LCPUFA會比α－次亞麻油酸(ALA)更有效率地轉化成DHA。美國之嬰兒配方食品含有可忽略量之EPA及n－3 DPA，因為n－3 LCPUFA之來源(來自海藻之對隱甲藻(Crypthecodinium cohnii )之油類)不含此等LCPUFAs。DHA含量較目前市售配方更高且更類似L3配方食品時，可以彌補此等微量n－3 LCPUFA的現象。事實上，本研究已發現：大多數組織對於中等量DHA係反應出n－3 DPA掉落的現象，但是在L3組DHA含量下卻會彈升。唯一的例外為視網膜，於該處當DHA量增加時n－3 DPA量亦會增加。CNS中僅含有微量EPA。

L組之ARA量於肝臟、RBC及血漿顯著升高且而後於L3組達到中間值；在心臟亦發現同樣但未達顯著之型式。目前的結果係與先前的數據一致，其顯示組織ARA濃度(特別是CNS之ARA濃度)對配方食品之ARA量之變化較DHA更不易受到影響。在大腦皮質、視網膜、殼核、尾狀核及扁桃體處並沒有發生改變。不過，L3組於上丘之ARA量較對照組減少，且於蒼白球之量較L組減少。

阿思旁德酸(Osbond acid)(DPAn－6)為ARA之延長及4－5去飽和產物，其在實驗性n－3脂肪酸缺乏之動物體內濃度會持續升高，而於其他方面正常之哺乳動物體內在補充DHA後則會減少。在增加DHA後所有組織內的DPAn－6量會減少，於某些組織(如大腦皮質)L3組之DPAn－3量僅為C組數據的一小部份而已。此減少現象及伴隨之DHA增加量使得L組到L3組之DPA/DHA比率減少。

此結果顯示於大多數組織中DHA比ARA對食用的人為操控更為敏感。其顯示在大腦皮質中DHA增加的濃度會高出目前市售嬰兒配方食品所含之量，不過並未提升基底神經節及邊緣系統中之DHA量。

此數據亦支持下列下假設：高於目前所用配方食品不過仍在母乳已知範圍內之配方DHA量能使得CNS組成更正常地接近餵食母乳之嬰兒。組織組成改變本身並不足以成為變更飲食組成之正當理由，還必需配合功能性結果改進之效能展現才行。

此等數據亦顯示DHA及ARA(1)係相反地調節骨骼肌及脂肪組織內IL－15之表現，其有利於增加肌肉質量及阻撓脂肪過多；(2)能減少肝臟瘦素受體之表現，藉此增進循環性瘦素之較高飽足感影響；及(3)增加骨骼肌脂聯素受體之表現，其能增加脂肪酸氧化及胰島素敏感性。

補充DHA及ARA亦能減少肝臟LCPUFA重新合成，其係經由向下調節固醇調節性－結合蛋白－2(SREBP2)及協作地抑制固醇－CoA去飽和酶(δ－9去飽和酶)、脂肪酸去飽和酶(δ－5去飽和酶)，及脂肪酸去飽和酶－2(δ－6去飽和酶)。固醇－CoA去飽和酶(SCD)之抑制作用能抑制ω－9脂肪酸於細胞膜之累積以維持良好的磷脂質細胞膜組成。此為正常胎兒及新生兒成長所必需。向下調節SCD係與DHA及ARA對脂肪酸重新合成之抑制作用一致。淨結果為減少三甘油酯類之棕櫚油酸組成及減少脂肪細胞。於目前的研究中，增加DHA量能導致較高的SCD mRNA量抑制作用，顯示較高DHA量能更有效地抑制脂質重新合成及促進較佳的三甘油酯及脂質蛋白組成。

此等作用之淨結果導致脂質重新合成及促進脂肪酸氧化，增進胰島素敏感度，及改進瘦素反應性，累積出一種不利於肥胖發生之代謝環境。

於此專利說明書所引用之所有參考資料，包括但不限於所有文章、公告、專利、專利申請案、演講、教科書、報告、手稿、小冊、書籍、網貼、雜誌、期刊等，全部併入本專利說明書中以為參考。在此對此等參考資料的討論僅係概述作者的論點且並非同意任一參考資料為先前技術。本案申請人保留挑戰引用資料之正確性及恰當性之權利。

雖然本發明之較佳具體例已使用特定術語、裝置及方法來說明，不過此等說明僅係用於展示性目的。所用之字句係描述性字句而非限制性字句。應瞭解地，熟悉此技術之人士可在不悖離本發明之精神或逾越本發明之範疇下進行多種變化及改變，本發明之範疇係以如下所述之申請專利範圍來界定。此外應瞭解地，該等不同具體例之態樣可全部或部份地彼此互換。舉例來說，雖然本發明係例示市售的無菌液體營養補充品之製法，不過還意圖包含其他應用。故而，後附申請專利範圍之精神及範疇不應受限於其內所含較佳版本之說明而已。

Claims

一種一份量之二十二碳六烯酸(DHA)及二十碳四烯酸(ARA)於製造供刺激嬰兒肌肉生長和抑制嬰兒脂肪組織生長用的營養組成物之用途，其中該營養組成物中ARA：DHA之重量比係約1：3到約9：1。
如申請專利範圍第1項之用途，其中該營養組成物中ARA：DHA之重量比係約2：1。
如申請專利範圍第1項之用途，其中該營養組成物中ARA：DHA之重量比係約1：1.5。
一種一份量之DHA及ARA於製造供向上調節嬰兒骨骼肌內IL-15之表現的營養組成物之用途，其中該營養組成物中ARA：DHA之重量比係約1：3到約9：1。
一種一份量之DHA及ARA於製造供向下調節嬰兒皮下脂肪組織內IL-15之表現的營養組成物之用途，其中該營養組成物中ARA：DHA之重量比係約1：3到約9：1。
一種一份量之DHA及ARA於製造供向上調節嬰兒骨骼肌內脂聯素(adiponectin)之表現的營養組成物之用途，其中該營養組成物中ARA：DHA之重量比係約1：3到約9：1。
一種一份量之DHA及ARA於製造供向下調節嬰兒肝臟瘦素受體之表現的營養組成物之用途，其中該營養組成物中ARA：DHA之重量比係約1：3到約9：1。