TWI279190B - Formulation of microorganisms for rodent control in bait gel - Google Patents

Description

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五、發明說明（1 ) 10 15 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 20 奄明係關於包含不同階段之致病性原蟲於飼：凝膠中 的組成物及其供齧齒動物控制之使用。 已知肉孢子蟲（原蟲門，孢子蟲綱，球蟲亞綱，真球 =目，球孢子虫亞目）對（鼠屬，印度碩鼠屬，田鼠屬，害 昧、屬與小乳屬專）备齒動物有致病力，且於充足劑量下 可導致此些動物之死亡（Rzepczyk 1974，國際寄生虫學期 刊毛 447-449; Brehn，Frank 1980, Z· Parasitenkd·坠， 15-30)。此些寄生虫中，對多種鼠種特別有致病力之一為 新加波肌囊虫屬（Zammanetal· 1975，z· parasitenkd·II， 169-185) 〇 此寄生虫之終宿主為獵食或雜食性動物 ;新加波肌囊 虫屬之終宿主為蛇類，如網紋蟒蛇。此寄生虫於終宿主腸 中形成孢子囊。此些具持續感染力階段之虫體與終宿主糞 便一同排出。若中間宿主經口感染此孢子囊，如鼠感染新 加波肌囊虫屬，其生殖孢子於鼠腸中孵化並穿過腸壁，此 些階段之虫體經過血液循環到達其它器官，而於之藉分裂 生殖進行複製。 有二個分裂生殖被檢測出：第一個約在感染後第6 天，而第二個約在感染後第14-16天。裂殖體（裂殖子）特 別大$發現於肺臟，於内皮細胞中繁殖。 若感染嚴重，則導致裂殖子大量於肺臟中繁殖，鼠隻 於感染後第16天寄生虫第二個分裂生殖顧發病，大多 數於數小時内死亡。 此致病寄生虫之孢子囊可施於齧齒動物， 繼而使之死 -3· ‘紙張尺度適用中國國家標f (CNS)A4規格石G χ挪公爱） ——I I-.-----•裝--------訂---------Φ (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 1279190 A7 —-------S--- 五、發明說明（2 ) 於感染。此原則可用於齧齒動物之控制（Wood 1985，熱帶 植物保護期刊167-69)。鼠類之以新加波肌囊虫屬孢子 囊控制已獲成功（Jakel et al· 1996，寄生虫學期刊 82,280-287) ° 5 鼠屬與挪威屬鼠種鼠隻感染超過20, 000個孢子囊（視 寄生虫株而定），例皆致死。直至感染後第14天動物仍無 症狀，伺於感染後約第16天迅速呈現衰弱而死亡。 遭次致死（量）感染之鼠隻實質上不呈現症狀，甚至直 至感染後第14天，並存活過此種感染而無生命力之減 10失。（此種）感染後只須數天，動物即能建立起對此致病寄 生虫之免疫力。此些動物自此即對以單一新加波肌囊虫屬 製劑之感染不敏感。 水懸浮製劑中之生殖孢子儲存效期達兩年，不明顯喪 失致病力，此懸浮製劑可以強飼法施於鼠隻，劑量適當則 15能致死。然孢子囊無法於乾燥狀態下存活。 欲控制鼠群，必須用其所食之餌。含新加波肌囊虫屬 孢子囊之餌保持濕潤即可維持致病力。一旦乾燥，孢子囊 =喪失致病力。此即習用㈣為基質之魅法有效施予 2〇 LLt虫之原因。於申請人之研究中，穀類為基質之魅 /呆持新加波肌鈔屬孢子囊之致病力。混 即喪失感染力。 儲存tr子囊之餌須於濕潤狀態膜封。濕潤配劑之缺點為 放舰，因榖物易於數天内發霉或發芽。變通方法之 ’、‘、水懸浮製劑施於餌之小孔巾。例如小孔中含致 -------------------^--------- (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) -4- 1279190 A7 B7 10 五、發明說明（ 之懸》于製劑之貧狀餌塊已成功運用。然因水份易喪失或由 膏狀基質吸收而致膨脹或發酵使餌失效，此餌亦須於配製 數天内使用。 以諸如新加波肌囊虫屬原虫控制齧齒動物唯一實用之 可能為於臨使用前由含抱子囊之水懸浮製劑與如毅類之僻 基質配製。其問題為可計量孢子囊之獲致，因其極易於水 懸浮製劑中沉殿集中於容器底部。其為此種方式配製之中 等劑量_孢子囊分布不均之原因。此館極易乾燥 ，甚至常 於混製之際。喊孢子囊於數小_死亡，飼失效。 肌囊纟屬射囊於特賴料長期轉錢力之發現 f思表，雖則前已研知於諸如賦形劑之膏與凝膠中，短 =天即失感染力。此述其於凝膠中存活數月之事實極屬 12料文獻有載.即如源自溫帶之巨型肌囊虫屬強健 了包子虫，亦對酸驗度與化學劑之變化極敏感(一 ::⑽ΓΠ生虫學1992,壯16)。因而即機^ 與防腐劑之添加皆未實質降低寄生虫之存活機會尤 因此本發明使孢子囊保存凝谬中， =成於此基質中係維持均句分布二則使 疋里孢子囊之獲致成為可能 慢，均勻分布《2& ；17基_收殊為緩 蒸發極慢，可保持濕潤，因而有 α木力，即如乾紐環境亦可使用。 如此可貯存孢子囊數月不致凝勝分離或致病劑感染力 本紙張尺度刺+ _ (eNS)A4 - -----------«t--------tx--------- (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 20 1279190 A7 B7 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 五、發明說明（ 之貫質降低。附例以Carbopol(見錢)佐註此種混配劑可 使用數月之久。 本發明申請之主樣要原理在不同階段單細胞寄生虫於 凝膠中之保存。此凝膠可單獨或附加於辦，用於控制誓齒 5 動物。 適用之致病體主為所有孢子虫綱之原虫。尤其適用者 為球虫亞綱之虫種。更尤其適用者為球孢子虫亞目之代表 虫種。值得提到而不限於之者為肌囊虫屬之虫種，諸如新 加波肌囊虫屬。 10 依據本發明之組成物可混入所有習用於製造齧齒動物 飼餌之配方。諸如穀物基質餌，膏，凝膠與臘封塊中，及 於穀物與配方助劑等混配擠製品。更可施用致病劑於水基 質飲料餌。本發明之餌之目的與習用控制有害齧齒動物之 餌相似。其可置於關閉與開放之空間，每個置餌站5—500 15克，依靶標鼠種及置餌站密度而定。亦可置於欲控制之齧 齒動物之通口。 凝膠中之致病劑量可依需要而定。可為一 10,000,000 孢子囊/毫升。500,000_2,000,000 孢子囊/毫 升更佳。 " 20 餌中之致病劑量應為1000-200,000孢子囊/克餌。 2000-100, 000孢子囊/克之濃度為佳，1〇,〇〇〇_3〇,〇〇〇之濃 度尤佳，20, 000孢子囊/克之濃度更佳。更高之濃度亦 可，但非必須。採用單一致病劑種或不同致病劑種孢子囊 之混配劑亦可。 、 -----------裝--------訂--------- (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 本紙張尺錢心闕 ^ (210 X 297 ^ )-—_____ 1279190 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 A7 B7 五、發明說明（） 本發明之目的，所欲控制之有或無害齧齒動物為齧齒 動物目之齧齒動物。鼠屬，小鼠屬，印度碩鼠屬，害鼠 屬，與田鼠屬尤屬於此。鼠屬與印度碩鼠屬之代表，如鼠 屬鼠，挪威鼠屬鼠，孟加拉印度碩鼠，印度印度碩鼠更尤 5 屬於此。 本發明所用之凝膠屬水基質，經適當之增稠劑處理。 適當增稠劑為纖維素衍生物類巨分子，如羥丙基纖維素， 羥乙基纖維素，曱基纖維素，羧曱基纖維素，羥丙基曱基 纖維素，羥乙基曱基纖維素，羥乙基丙基纖維素，或黃原 10 膠，藻酸鹽，聚乙烯醇，聚乙烯吡咯烷酮，聚丙烯酸及其 衍生物或如高度分散矽膠等無機膠（參見如Rudolf Voigt， Pharmazeutishe Technologie pp. 362-385， Ulstein Mosby)。尤其適用者為纖維素衍生物類與聚丙烯酸類。 此類凝膠含水量可大幅度變動，如於重量30-98%之 15 間，尤其於重量50-90%之間，更尤其於重量70-80%之 間。 凝膠酸鹼值亦可大幅度變動，例如於酸鹼值2-10 間’尤其於4-9之間’於6-8之間尤佳。 凝膠可用諸如對羥基苯曱酸酯，苯甲酸鹽，山梨酸， 20 檸檬酸鹽或對羥基苯曱酸酯等防腐劑，或諸如甘油或丙二 醇等保濕劑，諸如丁基羥曱苯或丁基羥茴香醚，生育酚， 抗壞血酸等抗氧化劑，香料或其他配方助劑等加以處理。 於據本發明之組成物中，致病原蟲孢子囊亦可結合諸 如化學劑-具齧齒動物群控制活性之化合物施用。香豆素 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS)A4規格（210 X 297公釐） ------1-----裝-------1 訂--------- (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 1279190 A7 B7 五、發明說明（6) 於此可為一貫例，但不限於此例。 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 據本發明之組成物係依適當比例混配成分製備。混配 可機械式進行，如於適用之攪拌容器或其他器具。 下例可為本發明之說明，但非以設限。 5 實例 方法 所用之S5寄生蟲株孢子囊（於H〇henheim大學寄生蟲 系可得）係源於1998.8.17泰國之遞殖（passage)所得。以 Neubauer 血球計計數。凝膠以 1% Carbopol 974 P (342 10 ΡΡπΟ水溶液製備（Carbopols:輕度交連之聚丙烯酸）。以2 當量濃度之氫氧化鈉滴定調節酸鹼值。所用之防腐劑為 0.02%之 Solbrol p 與 〇·ΐ4%之 Solbrol μ ( Solbrols··對 經基本曱酸[甲，乙或丁醇]酯）。樣品之一含2〇%甘油。 凝膠中加入孢子囊徹底混拌至分布均勻5〇, 〇〇〇孢子囊/毫 15升。再置入冰箱於約冷藏，而於實驗當天依計劃施 用。 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 所用實驗動物皆為野生挪威鼠。供予孢子囊餌前14 小時斷食，使之任意飲水。餌以壓碎麥粒為基質。每鼠給 予以1毫升凝膠處理之壓碎麥粒5克。鼠隻食用肌囊蟲孢 20子襄辦後任思給予標準飼料。各劑量以2鼠施询：，觀察至 21天。定參數為以凝膠配方與儲存期間為函數之死亡 率。預期致病劑生效（施餌第13—17天）期間顯示嚴重症 狀’於自然條件下不可能存活之鼠隻則予銷毁。 結果 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 1279190 A7 B7 五、發明說明（7 ) 表1 進食各種含50, 000孢子囊（*星號者為100, 000)之凝 膠處理之壓碎麥粒餌，以凝膠儲存期間為函數之（鼠隻）死 亡率。 凝膠 pH 對羥基苯甘油 甲酸酯 0 2 儲存一週後之死亡率（％) 4 6 8 10 12 14 19 24 6.17 + 一 100 100 100 50 0 7. 04 + + 100 50 0 0 0 7. 05 — — 100 100 100 0 50氺 8.19 + — 100 100 100 0 0 ---K---：----—^_w· ^--------^--------- (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 -9- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐）

Claims (1)

1. [27^190 六、申請專利範圍

   專利申請案第90111208號 ROC Patent Application No.90111208 修正之申請專利範圍中文本-附件（一） Amended Claims in Chinese - Encl.fT^ (民國94年9月日送呈） (Submitted on September 二。，2005) 10 15 20 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 1· 一種用於控制齧齒動物之組成物，其含致病原蟲孢子 囊於水性凝膠中，其中其含濃度1〇〇〇_1〇,〇〇〇,〇〇〇致 病原蟲孢子囊/毫升及含30-98%之水。 2.根據申請專利範圍第丨項之組成物，其特徵在於水溶 性政膠以水及選自包含纖維素衍生物，黃原膠，藻酸 鹽，聚乙烯醇，聚乙烯吡咯烷酮，聚丙烯酸與無機膠 類之增稠劑為基質。3· —種|耳，其包含根據申請專利範圍第1與2項之用於 控制齧齒動物之組成物。 4. -種根射請專職圍第丨與2項之組成物於製備控 制齧齒動物之㈣用途，其特徵在於級成物與習用辑 料混合。5. -種根射請專·圍第丨與2項之組成物於控制餐 uj動物之用述’其特徵在於組成物係置於齧齒動物之 環境中。 6. -種根射請專利範圍第3項之㈣控制齧齒動物 用途，其特徵在於組成物係置於齧齒動物之環境中 之 -10 - 本紙張尺度顧巾酬家鮮(CNS)A4 ΜΜ^〇χ29Ί ^ 90197Β-接 2