TWI222865B

TWI222865B - Pharmaceutical composition for treatment of thromboembolic disorder or atherosclerosis or to inhibit blood coagulation

Info

Publication number: TWI222865B
Application number: TW088116517A
Authority: TW
Inventors: Jin-An Jiao; Lawrence K Luepschen; Esperanza L Nieves; Hing C Wong; Dean P Taylor
Original assignee: Sunol Molecular Corp
Priority date: 1998-09-25
Filing date: 1999-09-27
Publication date: 2004-11-01
Also published as: US20050245488A1; JP2002525323A; US7199113B2; US6828312B2; AU6264699A; EP1115396A4; US20020065327A1; CA2345273A1; EP1115396A1; US20070155703A1; WO2000018398A1; AU769647B2

Description

1222865 A7 ---- B7___ 五、發明說明（i ) [發明背景] 1. 發明領诚i (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 本發明有關醫藥活性化合物及利用4包括一種或多種該化合物之醫藥組成物。較佳的化合物對於治療或預防非所欲之栓塞特別有用。本發明亦包含治療栓塞之方法。本發明具有包含篩選使用於治療或預防检塞之候選化合物之寬廣應用譜。 2. 背景：血凝塊經由減少血液的流失而協助止血。大體上，血凝塊藉由血管損傷而引發，且需要血小板聚集、凝固因子、及抑制血纖維蛋白溶酶作用。凝固因子藉由與血管損傷相關之級聯而形成血凝塊（概括參見L stryer, 以， 3rd Ed，W.H· Freeman Co·，New York ;及 a.G· Gilman et al·，

The Pharmacological Basis of Therapeutics, 8th Edition McGraw Hill Inc·，New York，pp.1311-1331) 〇經濟部智慧財產局員工消費合作社印製組織因子（TF)，具有263個胺基酸之一種整合膜蛋白’係負責引發凝固蛋白酶之級聯。血管的損傷使血液暴露至表現於内皮下細胞表面之組織因子，導致與血漿因子 W(FVII)或活化因子vn(FWa)形成鈣依賴及高親和力之複合物。結合至TF促使酶原FVD藉由若干蛋白酶（例如X a 因子、或凝血酶）迅速進行蛋白水解分裂成為活性絲胺酸蛋白酶FVH a 6 TF藉由效果強烈地增強FVH a對其蛋白受質因子IX及X之催化效率，亦擔任其主要的共因子。TF/ W a複合物經由有限的蛋白水解作用使因子K (FK )及本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 1 91539 1222865 經濟部智慧財產局員工消費合作社印制衣 A7 B7 五、發明說明（2 ) X (FX )活化，終於導致產生凝血酶及使血纖維蛋白沉積。於病態情況下，例如動脈粥瘤硬化，或下列侵入性外科過程如微血管移植片、血管造形術、配置植入裝置（如：移植膜、導管、或動脈與靜脈分流器）、或動脈内臈切除術，由TF引發之凝固可導致栓塞性病症，其可造成如：心臟發作、中風、不穩定的絞痛病、或其它冠狀動脈病症。栓塞亦會併發多種血栓性栓塞病症及凝固病，分別例如肺栓塞（如：含栓塞之心房纖維顫動、深靜脈栓塞等）及散布性血管内凝固。體液之操作亦能造成非所欲之血栓，特別是在輸血或體液取樣以及包括體外循環（如：心與肺的分流手術）及滲析過程中之體液操作。某些抗凝金劑已用於減輕或避免與栓塞相關之金凝塊。藉由適當抗凝血劑或其混合物之給藥，包含一或多種薰草素衍生物（如：殺鼠靈、及雙薰草素醇）或帶電聚合物 (如：肝素、水蛭素、或赫如勞（hirulog))，時常能夠減小或消除金凝塊。參見如 Gilman et al.，R.J. Beigering et al.5 Ann. HemathoL, 72 ： 177(1996) ； J.D. Willerson, Circulation^ 94 ' 866(1996) 〇某些含抗血小板活性之抗體亦已用於減輕多種栓塞。例如，ReoProTM為一種用於常規性給藥以減輕多種血栓性栓塞病症（例如發生自血管造形術、心肌梗塞、不穩定的絞痛病、及冠狀動脈狹窄者）之治療性抗體。此外， ReoProTM可利用作為預防藥，以降低心肌梗塞及絞痛病之風險（J.T. Willerson，⑽，94 : 866(1996) ; M.L. --------訂--------- C請先間讀背面之注意事項再填寫本頁) 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 2 91539 1222865

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Simmons et al·，C/rcw/^m⑽，89 : 596(1994))。然而，使用先前之抗凝血劑時常會伴隨副作用例如出血、再閉塞、「白色凝塊」徵候群、刺激、生育不全、血小板減少症、與肝機能障礙。抗凝血劑之長期給藥特別會增加發生致命疾病的風險。蛋白質基礎的藥劑可能較安全，但通常局限於治療糸性的情況，且時常限制於非經腸之給藥。由於蛋白質治^ 劑產生免疫反應的可能性增加相當高的製造成本及/或限' 制口部的生物利用性所以此類藥劑被認為較不適合於長期治療慢性疾病（例如動脈粥瘤硬化、心臟發作之主要原因）。因此’業界希望擁有新穎之抗凝血藥劑，特別是希望擁有能夠較長期給藥之新穎之抗凝血藥劑，以治療慢性情況，例如動脈粥瘤硬化。 [發明概述] 頃已發現對於治療或預防非所欲的栓塞非常有用之醫樂活性化合物及組成物。本發明之較佳化合物係組織因子 (TF)拮抗劑’其最好特異性地阻斷由人類組織因子/因子 YU a複合物所催化之人類因子X及jx之活化。亦發現利用本文所揭示的化合物及組成物治療或預防栓塞之方法。本發明更特別之方法包含給予治療有效量之至少一種本發明的化合物或組成物藥劑。此化合物或組成物一般給予需要治療之哺乳動物，例如易感染、患有、或復元自非所欲的栓塞之人類病人，或患有、復元自、或易感染其它 --------tr--------- (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 3 91539 1222865 員 4 A7 五、發明說明（4 ) 疾病或又組織因子（例如心與血管的疾病 '細胞增生病症' 手術後併發症、或免疫病症）強烈影響之病症。較佳化合物及組成物亦可用於治療或預防由多種栓塞（例如本文所揭不的特別病症）強烈影響之公認病症。本發明亦包含阻斷或抑制屬組織因子依賴性之因子X 及/或因子K之活化之方法。此類方法一般包含使組織因子與TF阻斷化合物接觸，藉此抑制因子X或因子IX與、卫織因子或TF/W a形成官能複合物，最好是τρ阻斷化 α物結合至組織因子，因而抑制該官能複合物之形成。抑制或預防形成該官能複合物可具有十分廣泛的應用，包括用於治療哺乳動物之上述疾病或病症，特別是患有或易感染該等疾病或病症之人類。本發明之較佳化合物通常於偵檢及較佳為測量由TF 入之血液凝塊之至少一種試驗中展現優良之阻斷活性。更特別之試驗為測量特異血凝固因子活性之標準活體外檢定’該檢定公認係於打或TF相關複合物（例如人類TF/ Vila複合物）存在下提供最適結果。於檢定中，視所選擇之特異檢定法而定’所提供之打可為重組體分子或自天然來源純化之分子。更特別的活體外檢定係偵檢及測量特異血凝固因子之活性，該血凝固因子於人類打或人類顶心複合物存在下具有增強之公認活性。較令人感興趣的則為測量因子 X至FXa及因子K至FKa之^依賴性活化之標準活體外檢定。此類檢定有時於^中稱為「初級篩選檢定」或 ^氏張尺度適用中關家標準（CNS)A4規格_(21〇 X挪公釐了 91539 --------------------訂--------- (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 1222865 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 A7 五、發明說明（5 ) 相關術語、或慣用語例如「發現方法」，以表示於篩選化合物中之較佳檢定用途。例如，本發明之特佳化合物於測量因子X至F X &之 TF依賴性活化之初級篩選檢定中展現優良阻斷活性。此外，較佳化合物於測量因子汉至FKai TF依賴性活化之初級篩選檢定中展現優良阻斷活性。需瞭解慣用語「優良阻斷活性」或相關慣用語係意指本發明化合物用於降低或抑制因子X至及/或因子仅至FK a之TF/W a依賴性活化之較佳利用。較佳化合物係合成或半合成的化合物，例如下述所揭示之彼等小分子化合物。下列提供關於初級篩選檢定之更特別揭示。本發明之較佳化合物展現約1〇〇//M或更少之IC5g(相對於適當對照組’需要抑制約5〇%因子X活化之濃度），杈佳為約10 // Μ或更少。此外，較佳化合物於檢定中展現相等於或大於約70%之TF或TF/VDa依賴性FX活化之抑制率。較佳具體實例中，初級篩選檢定包含下列所有步驟： 1) 在導向形成因子Xa之條件下，摻合TF/W a複合物與因子X至適當檢定溶液中； 2) 使溶液與偵檢標記因子χ &受質接觸；及 3) 偵檢溶液中之標記產物，作為因子X活化之表示。此初級篩選檢定之較佳利用可有效測量候選化合物降低或消除TF或TF/W a依賴性因子X活化之能力。此檢定一般具有彈性，且當需要時能夠精巧地操控試驗化合物 (請先閱讀背面之注音？事項再填寫本頁)

^1 1 1 1_1 ϋ .1 1 一-0、 ϋ ϋ ϋ ϋ .^1 I I 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 x 297公釐） 5 91539 1222865 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 6 A7 五、發明說明（6 ) 阻斷因子X活化之能力。例如，可於上述表示之任一項戍多項步驟中添加候選化合物，對於多數篩選應用以在步驟 1)添加化合物為較佳。方法_所使用之較佳TF/νπ a複合物包含TF，其已暴露於導向暴露優異TF阻斷位置之條件中。單離及使用τρ 之更詳細條件係提供於下。如上所提及，另一初級篩選檢定係用於測量藉由Tf 或TF/VD a之因子！X活化之標準活體外檢定。此實例中，較佳化合物於檢定中展現約200 // Μ或更少之IC5G(相對於適當對照組’檢定中需要抑制約5〇0/〇因子κ活化之濃度）’較佳為約1 〇以Μ或更少。較佳具體實例中，測量因子IX活化之標準檢定包含下列所有步驟： 1) 在導向形成因子FKa之條件下，摻合TF/VHa複合物與因子K至適當檢定溶液中； 2) 使溶液與Fx和偵檢標記受質接觸；及 3) 於溶液中偵檢標記產物，作為藉由tf/yh a之因子 IX a活化之表示。於較佳具體實例中，此篩選檢定可有效測量候選化合物降低或消除因子JX活化之包容力或能力。檢定一般對於 FK a之TF或tf/w a依賴性形成係敏感的，且能夠以多種方式使用，以測試所欲化合物阻斷因子κ活化之包容力或能力。例如，可於上述表示之一項或多項步驟中添加待進一步測試驗之化合物，對於多數篩選應用以在步驟^ 添加化合物為較佳。本發明之典型較佳化合物在此初級筛 &張尺度適用中ig 準（CNS)A4規格（21Q χ 297公爱） 91539 C請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁} --------訂---------· 1222865 A7 ------JB7__ 五、發明說明（7 ) 選檢定實例中展現優良阻斷活性。本發明之進一步較佳初級篩選為測量外在途徑凝塊之凝血酶原時間（PT)試驗或檢定。此試驗於此領域中已標準化’且常規地用於測量生物樣品（例如血漿）中的凝塊。本發明之更特佳化合物在PT檢定中展現優良抑制活性。典型較佳化合物在PT檢定中相對於適當對照組，可增加血漿凝塊時間至少約5%至約10%(秒）。PT檢定之較佳利用測量由TF介入之血漿凝塊時間且如下述進行： 1) 在導向血襞凝固之條件下，於適當檢定溶液中提供添加檸檬酸鹽之血槳； 2) 在引發血漿滅固之適當條件下，於溶液中換合適當組織因子製劑及鈣；及 3) 於溶液中測量凝塊時間，以測定凝血酶原凝塊時間 (PT) 〇 pt檢定之較佳利用可測量受試化合物延長凝血酶原凝塊時間之能力。PT檢定在此領域中係已熟知，且可經一種或組合的方式使用，以測試化合物增加或阻斷凝血酶原凝塊時間之包容力或能力。本發明之特佳化合物在上述之至少一種初級檢定（因子X、因子κ活化及/或ρτ試驗）中展現優良活性。於上述任一種或多種初級篩選檢定中，TF或TF/W a 依賴性活化之優良抑制性至少在許多情形下可歸究於該化合物對TF/Wa及/或FXa活性之影響。如上所討論，本發月之較佳化合物為TF拮抗劑，且一般在測量由tf介本紙張尺度翻中國國家標準（CNS)^格⑽χ 297公餐）----- 7 91539 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) ---------tr---------' 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 8 ^22865 五、發明說明（8 入之血凝固之較佳活體外檢定中，展現優良阻斷活性。因此通常希望將於上述一種或多種初級篩選檢定中具有優良阻斷活性之化合物，進一步於至少一種及較佳為超過一種之下述「二次篩選檢定」中進行測試。此類二次檢定有助於進一步鑑定及選擇具有所欲的TF拮抗劑活性之候選化合物，如：剔除具有所欲活性以外的活性之考慮化合物，例如強烈影響蛋白酶活性之化合物。有多種二次檢定可根據本發明進行，以進一步評估於初級檢定中所鑑定之化合物，如：進一步評估於初級檢定中所鑑定之活性，或測定某些非所欲活性之存在。例如，本發明之較佳化合物又在無助於測量TF拮抗作用之其它二次篩選檢定中，展現實際上減小或可忽略的活性。換言之，此類二次檢定並非TF依賴性。此類檢定之特別實例包含被設定用於測量凝血酶、胰蛋白酶、或活化因子（例如FXa、FKa、或FWa)者。同時，較佳化合物於經活化之部份促凝血酶原激酶時間（APTT)試驗或檢定中，亦展現可忽略的㈣。此類二次篩選檢定之更特殊實例見於討論及下述實施例中。於本文所揭示之包含以上所討論之初級篩選及二次試驗之任一種或所有檢定中，候選化合物可為單一的活性藥劑或可結合待測試之其它藥劑，包含其它化合物或本發明之組成物。於此具體實例中，篩選檢定對於偵檢及較佳為化合物、藥劑、或組成物間協合作用之定量特別有用。本文揭示對抗人類組織因子之多種抑制劑。此類化合私紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐）- 91539 (請先閱讀背面之注音？事項再填寫本頁) --------訂---------線秦

Ar- A7 五、發明說明（9 物了於本文所揭示之篩選拾丨v β 士 .,、檢疋以及本發明之治療或預防方次T使用。 ^ 本文揭不膦酸酯化合物，有時稱為「TF拮抗二咖炎P且斷化合物」、或類似慣用語。本發明之較佳化合物為小分子且不包含狀匕3肽鍵聯基團者。更特別之化合物係由膦酸酯基盘帽箠π ee)所組成。—般而言，帽蓋經，、價鍵結至膦酸酯基上， l ^ # 土上 1包含或由胺基或環狀結構（例如方基）所組成。於帽蓋包令 ^ 、卩目盈匕3方基之具體實例中，帽蓋較 ^由氮或氧原子鍵合至膦酸酯（較佳為雙膦酸酯）基上。車乂佳方基為苯基，其可經以下討論之一或多個其它基團所取代於帽蓋為胺基之具體實例中，需瞭解該化合物可以第一胺化合物為代表。更八體而δ，本發明之較佳化合物包含具有下述者： (CXY)m-(HetHCX，Y，)n-C(Z)p-(P〇3y

Ar為視情況經取代之碳環芳基、或視情況經取代之雜芳基；

Het為視情況經取代之n、〇、或8 ; 各X各Y、各X、各γ，、及各z係各自獨立為氮；鹵素；羥基；巯基；胺基；視情況經取代之烷基，較佳具有約12個故’更佳為1至約6個碳；視情況經取代之烯基，較佳具有約2至12個碳，更佳為約2至6個碳；視情況經取代之炔基，較佳具有約2至12個碳，更佳為本紙張尺度適財關家標準（CNS)A4規格咖χ 297公髮） 9 91539 --------訂---------線^^· (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁} 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 1222865

Z η、及p係與上述 A7 五、發明說明（10 ) 約2至6個碳，·視情況經取代之燒氧基，較佳具有^至約 12個碳’更佳為！至約6個碳，·視情況經取代之燒硫基，較佳具有約1至12個碳，更佳為約j至6個碳，·視情況經取代之烷亞磺醯基，較佳具有約丨至12個碳，更佳為約1至6個碳，·視情況經取代之烷磺醯基，較佳具有約i 至12個碳’更佳為約j至6個碳·或視情況經取代之烷胺基’較佳具有約1至12個碳，更佳為約i至6個碳； m為0(其中雜原子係直接取代於芳基上）至4之整數，且較佳為0、1、或2; η為0至4之整數，且較佳〇為丨或2; P為1(該化合物為雙膦酸酯）或2(該化合物具有單一末端P〇3基團）；及其醫藥可接受之鹽類。此外，較佳化合物包含上述式J中Ar為碳環芳基，特別是苯基者，例如下述式Π之化合物： (R^c ^ χ _(Het) — (CXY% — C(Z)p—(p〇3)3予 Π 其中 X、Y、Het、X，、γ，式I之定義相同；其中各R1係獨立為齒素（F、C卜Br、I);胺基；羥基；硝基；羧基；巯基；視情況經取代之烷基，較佳具有 1至約20個碳原子，更佳為i至約1〇個碳原子，又更佳為1至約6個碳原子；視情況經取代之烯基，較佳具有2 至約20個碳原子，更佳為2至約丨〇個碳原子，又更佳為本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（21〇 X 297公爱） 10 91539 --------訂---------線扇 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部智慧財產局 1222865 A7 -------------B7_____ 五、發明說明（11 ) 2至約6個碳原子；視情況經取代之炔基，較佳具有2至約20個碳原子，更佳為2至約1〇個碳原子，又更佳為2 至約6個碳原子，·視情況經取代之烷氧基，較佳具有丨至約20個碳原子，更佳為}至約1〇個碳原子，又更隹為工至約6個碳原子；視情況經取代之烷硫基，較佳具有丨至約20個碳原子，更佳為！至約丨〇個碳原子又更佳為工至約6個碳原子；視情況經取代之烷亞磺醯基，較佳具有 1至約20個碳原子，更佳為i至約1〇個碳原子，又更佳為1至約6個碳原子；視情況經取代之烷磺醯基，較佳具有1至約20個碳原子，更佳為1至約10個碳原子，又更佳為1至約6個碳原子，·視情況經取代之烷胺基，較佳具有1至約20個碳原子，更佳為1至約10個碳原子，又^ 佳為1至約6個碳原子；視情況經取代之烧釀基，較佳且有1至約20個碳原子，更隹為1至約10個碳原子，又^ 佳為1至約6個碳原子；視情況經取代之碳環芳基；或視情況經取代之芳烷基； q為〇(苯環位置全以氫取代）至5之整數，且較佳q 為〇、1、2或3;及及其醫藥可接受之鹽類。上述式I及Π之化合物中，附加之化合物包含，其中基團Het為視情況經取代之氮或氧者，例如具有下述❹ 及IV之化合物： (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) --------^--------- 消費合作社印製 (R^c —(CXY)m-(NW 卜(cx»Y)n 〜C(Z)p—(P〇3)3叩 11 91539 1222865

(請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

IV 其中式m及ιν之各ι^、χ、γ、χ，、ν， 7 λ 、Y 、Z、q、m、n、經濟部智慧財產局員工消費合作社印製及ρ係與上述式m之定義相同；aw為氫；視情況經取代之烷基，較佳具有1至約8個碳原子，更佳為i至約6個碳原子；視情況經取代之烯基’較佳具有2至約8 個碳原子’更佳為2至約6個碳原子；視情況經取代之炔基’較佳具有2至約8個碳原子，更佳為2至約6個碳原子；視情況經取代之烷氧基，較佳具有丨至約8個碳原子，更佳為1至約6個碳原子；視情況經取代之烷硫基較佳具有1至約8個碳原子，更佳為丨至約6個碳原子；視情況經取代之烷亞磺醯基，較佳具有〖至約8個碳原子更佳為1至約6個碳原子；視情況經取代之烷磺醮基；視情況經取代之烷胺基；視情況經取代之烷醯基，較佳具有i 至約8個碳原子，更佳為丨至約6個碳原子；視情況經取代之碳環芳基；或視情況經取代之芳烷基；式瓜之附加化合物包含氮基團為直接（未插入碳或其它原子）苯環取代基者，及式jy之特佳化合物包含氧為直接環取代基或存在單一亞甲基者，例如具有下述式jjja及 IV a之化合物：本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 x 297公釐） 12 91539 1222865 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 13 91539 A7 B7 五、發明說明（Π )

其中R、X、Y’、n、及q係與上述式I及u之定義相同；及彼等化合物之醫藥可接受鹽類。本發明之附加化合物結合組織因子（TF)，以至於？又無法有效結合至TF/因子Wa複合物上，因此FX無法有效轉換為其活化形式（F X a)。本發明之較佳化合物可藉由有效阻斷FX結合或接近TF分子而抑制TF功能。例如，參見下述實施例2之結果。本文所用之「本發明之化合物包含上述具有式ϊ、π、皿、皿a、IV、及iva之化合物。於較佳方面，本發明提供抑制哺乳動物血凝固及血凝塊形成之方法、抑制哺乳動物凝血酶產生之方法、及治療或預防哺乳動物血栓性栓塞病症之方法。本發明之方法一般包括給予哺乳動物（例如靈長類動物，特別是人類）治療有效量之本發明化合物。本發明之化合物對減輕受組織因子（TF)影響之多種疾病特別有用。術#「強烈影響」表示根據公認的檢定或試驗，由於TF之存在，疾病之嚴重性或持績時間增加。特別疾病包含栓塞，特別是預防或抑制再狹窄，或於侵入性醫學程序例如動脈或心臟的手術（如：血管造形術、動脈 ‘紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐）--"~ ----- (請先閱讀背面之注咅？事項再填寫本頁)

1222865 14 A7 五、發明說明（U ) 内膜切除術）後之其它栓塞，包含預防與矯形外科或其它手術相關之深靜脈栓塞。本發明之化合物亦能使用於減小或甚至有效消除發生自使用醫學植入裝置（如：導管、移植膜、動脈與靜脈的分流器、或其它醫學裝置）之血凝固。本發明之化合物亦有用於預防心肌梗塞之長期風險。本發明之化合物亦有用於治療栓塞情況，其係與急性前骨髓細胞性白血病、糖尿病、多發性骨髓瘤、與敗血病休克相關之散布性血管内凝固、與感染相關之暴發性紫癜病、成年呼吸痛苦徵候群、不穩定的絞痛病、及與主動脈瓣或血管補缺術相關之栓塞併發症等相關。本化合物之附加用途包含治療動脈粥瘤硬化、炎症、及作為抗血管原藥劑，尤指治療癌症，特別是固體癌:，例如存在肺、胸、肝、腦、或其它組織中之癌症之用途。本發明之化合物亦能於哺乳動物（特別是人類患者）之體外循環中作為抗凝血劑用。此類方法中，係於較。早或於體外循環（例如可發生於心與肺的分流手術、器官移植片、手術、或其它長時間手術）期間給予哺乳動物足夠抑制血流凝固之量之一種或多種本發明化合物。本發明之化合物亦能使用於活體内診斷方法，勺人、人之活體内診斷成像。匕各病本發明之化合物亦能使用於活體外 w 肢外檢疋，如：選擇性因子X活化。本發明之此類檢定有用於測定病人且有血凝固或血凝塊之存在或可能性。 /、本發明亦提供包括有效量之一種或 —____ 裡A夕種本發明之化合本紙張尺度適用中關家標準（CNS)A4規袼⑵G x 297公爱「 91539 .--------------------訂---------線^^- (請先閱讀背面之注音？事項再填寫本頁) 1222865 A7 B7 五、發明說明（IS ) 物及醫藥可接受之載體之醫藥組成物。本發明之其它方面討論如下。 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) [圖示簡單說明] 第1圖為下述實施例所使用篩選檢定之流程圖。第2(a)、2(b)、2(c)及2(d)圖揭示下列實施例之結果。第3圖表示藉由某些本發明tf拮抗劑，即化合物1、 2_、i、及i之IC50值及蛋白酶活性抑制率之圖表。標示「佛薩麥（Fosamax)」之化合物係以化學式NH2_雙膦酸酯表示。第4圖表示在凝血酶原時間（ρτ)檢定中，特殊TF拮抗劑（化合物1_及Z)之效果之圖表。第5圖表示在TF/W a依賴性活化檢定中，化合物1 對FX的Km值之影響之圖表。第6圖表示化合物t對TF/W a依賴性FX活化之抑制率曲線圖。檢定中FX濃度為30nM。第7圖表示化合物t對TF/VH a依賴性F X活化之抑制率曲線圖。檢定中FX濃度為5nM。經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 [發明之詳細說明] 如上所討論’本發明之特徵為化合物，例如醫藥活性化合物，及尤其是利用或包括一種或多種該化合物之醫藥組成物。較佳化合物為藉由本文揭示的標準活體外_選檢定所測定之有效TF拮抗劑。特佳化合物對於治療或預防非所欲之栓塞非常有用。本發明具有包含用於篩選具有顯著TF拮抗活性之候選化合物之寬廣應用譜。 15 91539 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 1222865 A7 -—__B7_______ 五、發明說明（W ) 如上所討論，本發明之較佳化合物及組成物在至少一種且較佳為所有初級篩選檢定（因子X或因子汉之TF或 TF/ΥΠ a依賴性活化、及PT檢定）中，為展現顯著阻斷活性之優良TF拮抗劑。特佳化合物於先前討論之經活化之部份促凝血酶原激酶時間（ΑΡΤΤ)檢定中不展現顯著之阻斷活性。更佳者為在下述討論之其它二次檢定中，例如用於測量胰蛋白酶、凝血酶、因子Xa、因子Ka、及因子Wa 活性之檢定中，表現不顯著之活性之本發明化合物。本文揭示之標準活體外檢定為此領域所熟知，且一般為可彈性調整。再者，該類檢定可方便操作以偵檢及定量所需之TF拮抗活性。在具有優良抗血小板活性、抗溶解血栓活性、或抗凝血活性之其它治療性或實驗藥劑存在下，該類檢定一般適合於測試本發明化合物或組成物。此外’該類檢定可與公認的抗TF抗體用於測試效果。在此具體實施例中，標準活體外檢定於偵檢及較佳為測量本發明化合物或組成物展現之顯著合作或協同效果特別有用。先前討論之初級篩選檢定的更特別實例係如下述。該檢定係用於測量TF/VII a依賴性因子X活化作用之基準。較佳化合物在檢定中展現少於約1〇〇 # Μ之IC5G，且較佳為少於約10 // Μ，以作為檢定中優良阻斷活性之例證。更佳具體實例中，初級篩選較佳包含下列步驟： 1)於適當檢定溶液中，摻合約〇·1ηΜ人類重組體TF/ W a複合物（經脂化）、約i80nM人類FX、及介於約〇5 微升至約10微升間的至少一種欲測試之化合物（視情況溶本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 >< 297公釐） 91539 (請先閱讀背面之注音？事項再填寫本頁) ------丨—訂---I------線赢 16 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 1222865 A7 _ B7 五、發明說明（Π ) 解於適當的賦形劑中，例如水或二甲亞碾（DMS〇))，且於 371將反應保溫數分鐘至多達約一小時或一小時以上； 2) 使溶液與適當钳合劑（例如伸乙二胺四乙酸（EDTa)) 接觸，以降低或終止因子X活化； 3) 使溶液與可债檢量之FXa特異性色原受質（如光譜酶（Spectrozyme)FXa 或 S-2756)接觸，且於 37°c 保溫，·及 4) 偵檢溶液中所產生之發色團，作為因子X活化之表示。本文論及之「用於測量TF/VE a依賴性因子X活化之標準檢定」或類似慣用語最好參照上述步驟1)至4)。於下述實施例2中可發現關於該檢定之更詳細揭示，其中用於測量TF/W a依賴性因子X活化之標準檢定，係經特別更改使適合於405 nm處FX產生之發色團之光譜偵檢。用於本方法之較佳TF/W a複合物包含暴露於適合展現優良TF阻斷位置條件之TF。該TF分子可經由一種或組合之方式獲得。在一種方法中，人類TF可自過度產生的永存細胞系或由人腦衍生的丙酮粉末而獲得。TF較佳於存在至少一種非離子清淨劑，例如TRITON⑧X-100(聚氧乙烯基（10)異辛基苯基醚），並在鹽類及pH之適度條件下（如：100mM NaCl及pH 8.0)予以單離。非離子清淨劑之較佳量係依意指用途而不同，但通常用量係介於約 0.05%至約〇.5%(w/v)之間。參見下述實施例之「一般解說」以得到關於單離人類TF之更詳細資訊。

此外，較佳TF係暴露於測量TF/VH a依賴性因子X ---------------------訂---------線^^ (請先閱讀背面之注咅？事項再填寫本頁} 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 17 91539 1222865 A7 B7 五、發明說明（l8 ) 活化用標準檢定之條件。參見下述實施例2以得到關於彼標準檢定之更詳細揭示。 (請先閱讀背面之注音？事項再填寫本頁) 此外，本發明之較佳化合物於測量TF/W a依賴性因子IX活化之其它初級篩選檢定中展現優良阻斷活性。較佳化合物在檢定中展現少於約200〆Μ之IC50,且較佳為少於約10 // Μ，以作為檢定中優良阻斷活性之例證。於更特別之具體實例中，標準檢定較佳包含下列步驟： 1) 於適當檢定溶液中，摻合約〇 7nM TF/Vn a複合物與300nM因子汉和1000nM因子χ、及介於約〇5微升至約10微升間的至少一種欲測試之化合物（視情況溶解於適當的賦形劑中，例如水或二甲亞楓（DMS〇))，且在適合形成FKa及FXa之條件下，於37^保溫該溶液約數分鐘至多達約一小時； 2) 使溶液與適當鉗合劑（例如edTA)接觸，以終止 FK活化； 3) 使溶液與FX a特異性色原受質（如光譜酶ρχ a)接觸，且於37°C保溫；及經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 4) 偵檢溶液中之發色團，作為因子κ活化之表示。本文論及之「用於測量TF/W a依賴性因子K活化之才示準檢疋」或類似慣用語可詳細參照上述步驟1)至4)。參見下述實施例2中經更改使適合於405nm處較佳發色團的光譜摘檢之標準檢定的更詳細說明。下述第3圖中之表表示本發明特定TF拮抗劑（即化合物1、化合物2_、化合物、化合物4_及化合物幻與佛薩本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 18 91539 1222865 A7 --------B7______ 五、發明說明（l9 ) 麥之詳細ICw值。由測量TF/W a依賴性因子X活化及TF/

Wa依賴性因子IX活化之標準檢定可測出該值。如第3圖 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 之表中所見’此等化合物在此等檢定中提供優良阻斷活性。如上所討論，本發明之較佳化合物在PT檢定中又展現優良之凝塊時間抑制率，相對於適當對照組，較佳增加凝塊時間約20%至至少1〇〇%，且更佳為約20%至至少 500%。凝塊時間通常以秒測量。較佳之ρτ檢定一般係藉由添加適量（如約1至3nM)經脂化的組織因子至包含習知添加檸檬酸鹽血漿之檢定溶液中進行之。PT檢定測量由 TF介入之金漿凝塊時間，且較佳遵照下述步驟而進行： 1) 在適當檢定溶液中提供約〇·1毫升添加檸檬酸鹽之血漿，將前者與介於約0.5微升至10微升間的至少一種欲測試之化合物（視情況溶解於賦形劑中，例如水或二甲亞楓（DMSO))結合，且在室溫下保溫約3至1〇分鐘； 2) 摻合約0.2毫升（約1至3ηΜ重組體人類組織因子）及約5至10mM鈣至溶液中以引發血漿凝固；及經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 3) 測量血漿凝塊時間以測定凝血酶原凝塊時間（ρΤ)。本文論及之「標準PT檢定」或類似慣用語或術語可詳細參照上述步驟1)至3)。亦可參見阶//以㈣价·紿沁gj;， 5th Ed.(Beutler, E. et al. Eds.)McGraw-Hill9 Inc. Health Professions Div·，New York，作為更多關於進行ρτ檢定之特別揭示。如上所提及，本發明提供多樣檢定，用於偵檢及較佳本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 19 91539

1222865 五、發明說明（2〇 ) 為測里本發明之較佳化合物拮抗優良TF活性之能力。亦 7上所討論，某些標準活體外篩選檢定於本文中有時稱為一次師選檢疋」，以表示一種或多種或所有前述提及的初級篩選檢定之較佳用途。該等特別的二次篩選檢定結合一種或多種初級篩選檢定之實施，可提供特徵為優良抗TF 活性的廣譜之有用化合物。本文揭示之二次篩選檢定包含適合偵檢及較佳為測量因子W a(FVD a)、因子IX a(FK a)、因子X a(FX a)、凝血酶、騰蛋白酶、或拉塞耳氏（Russell，s)蛇毒（RVV)之催化活性者。多數實例中，此等檢定之最佳實施不需要添加TF。本發明之較佳化合物為特異性TF拮抗劑，且在此等檢定中一般可展現實際上降低或可忽略的活性。二次篩選試驗結合先前討論的初級及較佳二次篩選檢定之實施，有助於選擇展現高度特異性的抗TF活性之較佳化合物。關於此等二次篩選檢定，本文論及之「降低」或「可忽略」活性係表示由適當對照組（例如水或DMSO)所展現之約2%至約10%的活性。如上所討論，本發明提供廣譜之醫藥活性化合物及組成物，其有用於治療或預防非所欲之栓塞。較佳化合物為組織因子（TF)拮抗劑，且最好可特異性地阻斷由人類組織因子/因子VHa複合物所催化之人類因子X與IX之活化。本發明之例證化合物包含上述定義之式I、n、m、ina、 IV、及IV a之抗凝血劑膦酸酯。

本發明之例證化合物為雙膦酸酯，亦即上述諸式中P (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) --------^--------- 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 20 91539 1222865 A7 五、發明說明（21 ) 為1且存在兩個P〇3基團之化合物。上述諸式之較佳R1 環取代基包含經基、鹵素、烧基（例如c16燒基）、胺美、及院胺基（例如單或二（cl-4)烧基）。較佳w基圏（視情二之胺基取代基）包含氫及視情況經取代之烷基，特別為C 視情況經取代之烧基。較佳x、Y、m及/基團1 含氳及及視情況經取代之燒基，特別為Ci 6視情況經取代之烷基。本發明之附加化合物包含下述化合物乙至色，及彼等化合物的醫藥可接受之鹽類。下列化合物上、1及t為特別佳。本發明所有揭示内容中均使用命名i^至[之彼等化合物’且係指如下所示結構之特定化合物。 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) — — — — — — — ^ 1111111!

經濟部智慧財產局員工消費合作社印製

Η I〇/|、〇

〇^γρί 〇〆!、〇本發明化合物（包含如上所定義之式I、JJ、皿、nia、 W、及/或IVa之化合物）之適當鹵素取代基團為F、c卜Br、及I。本文所用之烷基術語除非另行修正，否則係指環狀及非環狀基團，而環狀基團含有至少三個碳環原子。一般 W張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐) --- 21 91539 1222865 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 22 A7 B7 五、發明說明（22 ) 以脂環烧基為較佳。本發明之化合物中浠基及炔基具有一或多個不飽和鍵聯，一般為1至約3或4個不飽和鍵聯。本文所用之烯基及炔基術語亦指環狀及非環狀基團，而一般以直鏈或分支鏈之非環狀基團為更佳。本發明化合物之烷氧基具有一或多個氧鍵聯，一般為1至約5或6個氧鍵聯。本發明化合物之烷硫基具有一或多個硫醚鍵聯，一般為1至約5或6個硫醚鍵聯。本發明化合物之烧亞橫醯基具有一或多個亞績醯基（SO)鍵聯，一般為1至約5或6個亞績醯基鍵聯。本發明化合物之烧績醯基具有一或多個橫醜基（S〇2)鍵聯，一般為1至約5或6個磺醯基鍵聯。本發明化合物之較佳烷胺基包含具有一或多個一級、二級、及/或二級胺基，較佳為1至約3或4個胺基之基團。適合的烷醯基具有一或多個羰基，一般為丨至約4或5個羰基。烷氧基' 烷硫基、烷亞磺醯基、烷磺醯基、烷醯基、及其匕基團可適當地為線型或支鏈型。本文所使用之碳環方基為具有1至3個不相連的環或稠環及6至18員碳環之非雜芳基，且可包含如苯基、萘基、聯苯基、苊萘基、菲醯基等。較佳為苯基及萘基。適合的雜芳基具有1至3 個％’各環為3至8員環，及具有j至約3個雜原子（N、或s) °特別適合的雜芳基包含如薰草基、喹啉基、吼啶基、吡哄基、嘧啶基、呋喃基、吡咯基、噻吩基、噻唑基、嗜唾基、㈣基、«基、苯并咲喃基、及苯并噻唾基。 ___f上述所定義諸式之式I、11、11[、11[3、17、及/或規格⑽ χ 29 ) 91539 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 訂---------線肩山2865 五 '發明說明（23 ) Γ團^合物^具有作為苯環上之對位取代基存在之R】基二:::::："+〜，、氮、 “視情況經取代者。可存在於「 < K 、w、X、γ、γ，」硝其· m 』如氟虱、溴、及碘；氫基；羥基，· 等);_;燒基，包含且有广至：:基(例如乙醯基 ,t 匕3具有1至約12個碳原子，較佳為個碳原子之彼等基團，·稀基及块基， -或多個不飽合鍵聯，及2至約至約6個碳原子之基斯卞m隹為2 ，烷氧基，具有一或多個氧鍵聯， A勺二、且古個^原子’較佳為1至約6個碳原子；烷硫二二“有-或多個制鍵聯，及1至約U個碳原子，個碳原子之部份;院亞梅，包含具有亞㉟酿基鍵聯’及1至約12個碳原子，較佳為二原子之部份;燒績醯基’包含具有-或多個 ;酿基鍵聯’及1至約個碳原子，較佳P至約6個反原子之部份；胺燒基，例如具有一或多個N原子，及1 至約12個碳原子，較佳為ι至約6個碳原子之基團；具更多個碳之碳環芳基，特別是苯基；芳氧基，例如本土 /、有1至3個不相連的環或稠環及6至約丨8個碳環原子之芳燒基，較佳基團為苯甲基；具有U 3個不相連的環或稠環及6至約18個碳環原子之芳燒氧基，較土團為Q^y基’或雜芳基或雜脂環基，具有各環係 ^尺細中國 23 91539 1222865 A7

五、發明說明（24 ) (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 3至約8員及一或多個n、0或S原子之1至3個不相連的環或稠環，如：薰草基、喹啉基、吡啶基、吡哄基、嘴 °定基、呋喃基、吡咯基、噻吩基、噻唑基、噚唑基、嗦唾基、吲哚基、苯并呋喃基、苯并噻唑基、四氫呋喃基、四虱哌喃基、六氫D比唆基、嗎琳基、及Π比略咬基。本發明化合物之「經取代」之Ri、W、X、Y、及Z取代基，可由一或多個適合的基團（例如直接詳列如上者），取代於一或多個可利用的位置上，一般為1、2或3位置。本發明化合物可由此項技藝中一般悉知之步驟予以製備。例如，式I的膦酸類可由形成相對應的烷基二酯後轉化為二酸而製備，如：以溴三甲石夕烧處理二酯，接著使中間體進一步反應以提供本發明之化合物。參見例如，c R Degenhardt et al.? J. Org. Chem., 51 ： 3488-3490(1986) ； I. S. Alfer et al., Izv. Akad. Nauk SSSR, 1122-1126(1984)； I. S. Alfer et al.? Izv. Akad. Nauk SSSR, 2802-2806(1983);及美國專利5,728,650號案。亦參見下述實施例1。經濟部智慧財產局員工消費合作社印製本文論及之「TF阻斷化合物」、「TF拮抗劑」、或類似術語一般包含本文所揭示之在至少一種初級篩選檢定 (例如PT檢定）中，可展現優良阻斷活性之彼等化合物。更特別的TF阻斷化合物可特異性地結合TF。就理論而言，在沒有預期之情形下，化合物一般認為可經由足以分別降低或阻斷對FX或FK活化的方式，而阻斷FX或 FK結合至TF。本文論及之組成物的「治療有效量」係指對宿主（例本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 24 91539 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 1222865 A7 -----B7 五、發明說明（25 ) 如哺乳動物，尤其是靈長類動物，例如人類病人）產生所欲效果之量。較佳可使用熟習此領域人士悉知的多個終點 (end-points)追蹤該效果。例如，所欲之效果係如經由增強心臟功能及尤其是受驗者血管中之血流，測得之心與血管功能之增加或穩定。此等影響可被追蹤及通常依據治療效果，（如·改善心與血管的功能、減輕一種或多種表示危及心臟功能或相關血管分布功能之症狀）的觀點、或其它詳述生理檢定予以測量。本發明並未意謂包含於此等特殊方法中，意謂順應特殊施用（例如栓塞、癌、或動脈粥瘤硬化）之更多方法，對此領域中熟習的工作者而言係為明顯的。如上所討論，本發明之化合物可對哺乳動物，較佳為靈長類動物例如人類給藥，以預防或減少栓塞。本發明化合物有用的治療法包含治療或預防靜脈栓塞及肺栓塞、動脈栓塞如：心肌局部缺血、心肌梗塞、不穩定的絞痛病、與栓塞相關的中風、及末梢動脈栓塞。本發明之化合物亦可用於治療或預防動脈粥瘤硬化性疾病，如：冠狀動脈疾病、大編動脈疾病、及末梢動脈疾病。參見如Wiide r 〇 et al. Bioinorganic & Medicinal Chemistry Letters 167-172(1995)。本發明之化合物亦可用於包括人工器官心瓣、醫學植入裝置（如内在裝置，例如導管、移植膜等）等之抗凝血治療。本發明之化合物亦可用於治療涉及血凝固相關病症之其它病症或疾病，如：癌、炎性疾病（特別是關節炎）、與糖尿病。 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 25 91539

五、發明說明（26 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 91539 於特定之報土Φ 、, ° ’ 一種或多種化合物亦可當作唯一的 >口療藥劑給藥。哎去，士 & 者本發明之化合物可與其它治療藥劑共同給藥，如經引逡 D丨等使於血凝固機制中相互作用之醫藥，列如鏈球菌激_、組織血纖維蛋白溶酶活化因子（tpA)、 Z激酶、及可溶解凝塊之其它藥劑。本發明之化合物亦可 ’、例如~種或多種其它抗凝血劑（如··肝素、水經素、或 =)或抗血小板（如：ReoPro或阿斯匹靈）之其它藥劑給樂。於此等組合治療中，在給予一種或多種其它適當抗凝血劑、抗血小板、溶解血栓或其它藥劑之前或之後， "、本發月化合物給藥，以增加或延長所欲之抗凝固活性。本發明之化合物可經由鼻内、口服、或注射（如：肌内、腹膜内、皮下、或靜脈内注射）、或經皮、眼内、經腸的方式給藥。靜脈内或非經腸的給藥法包含如：皮下、腹膜内、或肌内給藥。一般較佳為口服給藥法。最適劑量可以習知方式決定。本發明之化合物適合以質子化及水溶性形式對受驗者給藥，如有機或無機酸之醫藥可接受鹽類，如：鹽酸鹽、硫酸鹽、半硫酸鹽、磷酸鹽、硝酸鹽、乙酸鹽、草酸鹽、檸檬酸鹽、順丁烯二酸鹽、甲磺醯鹽本發明之化合物可單獨或組合一種或多種如上述討論的其它治療藥劑，與習知賦形劑混合成為醫藥組成物使用，該賦形劑即適合施用於非經腸、經腸、或鼻内之醫藥可接夂有機或無機載體物質，不會與活性化合物產生有害反應且對其接受者為無害本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） --------^---------^A_w. (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 865 A7 B7 五、發明說明（27 ) 適合的醫藥可接受載體包含伸人 u各1一不局限於水、鹽類溶

液、醇、植物油、聚乙二酵、明膠、A 71妙、礼糖 '直鏈澱粉、硬 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 醋酸鎂、滑石、石夕酸、黏性石壤、香料油、脂肪酸單甘油酉旨與二甘油醋、石油謎脂肪酸醋、瘦甲基纖維素、聚乙稀 ^各㈣等。醫藥製劑可被滅菌，且若需要可與輔助劑混合，如：潤滑劑、防腐劑、安定劑、潤濕劑、乳化劑、影響滲透壓的鹽類、緩衝劑、著色劑、調味劑、及/或芳煙物質等，其不會與活性化合物產生有害反應。對於非經腸的施用特別適合者為溶液（較佳為油性或水溶液）’以及懸浮劑、乳劑、或包含栓劑之植入物。安瓿為方便的單位劑量。對於經腸的施用，特別適合者為具有滑石及/或醣載體黏合劑等之片劑、糖衣錠、或膠囊，其中載體較佳為乳糖及/或玉米澱粉及/或馬鈴薯澱粉。可利用其中使用甜味賦形劑之糖漿、酏劑等。持續性釋放組成物可調配成包含以差異分解性包衣（如：微膠囊化、多重包衣等）保護活性成分者。經濟部智慧財產局員工消費合作社印製合適的給藥調配物之討論一般參見及㈣以以⑽，5

Pharmaceutical Sciences .(Mack Publishing Co.? Easton PA,(1980)) 〇需瞭解所提供治療使用的活性化合物之實際較佳量係根據下列而改變··利用的特殊化合物、調配的特別組成物、施用的方式、給藥的特定位置等。熟習此項技藝人士對於所提供給藥報告之最適給藥可使用遵照前述指標的習知劑本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（21〇 X 297公釐） 27 91539 1222865 A7 ----------- 五、發明說明（28 ) 量測定試驗迅速確定。-般而言，一種或多種^化合物之適當有效劑量為每天每公斤接受者體重可介於約〇〇ι 至100毫克間’較佳為每天每公斤接受者體重可介於約〇·〇1至20至50毫克間。本文所提及的全部文件係完全合併作為全體的參考文獻。下述非限定之實施例可說明本發明。 [一般解說] 以下的實施例中，可從酶研究實驗室公司（Enzyme Research Laboratories Inc.)獲得純化的人類因子Wa、仅、與X、凝血酶、及拉塞耳氏蛇毒。胰蛋白酶係得自B〇ehriger Mannheim。色原受質 S-2222、s_2288、S-2238、及弘2765 係得自DiaPharma Group公司，及光譜酶！7又&係得自 American Diagnostica公司。截斷的重組體人類組織因子 (如由243個胺基酸所組成）係於ε· 中表現，及以免疫親和性層析術純化。較佳之截斷重組體人類組織因子缺乏細胞質區域。天然人類TF係從人類癌細胞系J82，以經濟部智慧財產局員工消費合作社印製含有〇·1Μ NaCM、ImM EDTA、0.3〇/〇Triton X-100 之 50mM Tris_HCl、pH 8·0萃取而得。其它來源之天然tf係從動物大腦丙酮粉末，以相同的緩衝劑萃取而得。其它全部試劑均得自Sigma。 m 1: .ι_(雙膦酸根）-2_胺基（3-羥苯基）乙烷製劑（上述化合物1) 可遵照 Degenhardt et al·，/· C72d，51 ·· 3488- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 x 297公爱 28 91539 1222865 A7 —_B7 五、發明說明（29 ) 請先閱讀背面之注意事項再填 % 本頁 3490(测）之方法製造該化合物。簡言之將三聚甲搭 (104.2克’ 3.47莫耳）及二乙胺（5〇 8克，〇的莫耳）結合於2升甲醇中，加熱混合物至澄清。將熱移除，添加 CH2(P〇3(CH2CH3)2)2(2〇〇克 ’ 〇 69 莫耳）。將混合物迴流 24 小時’接著添加另外2升甲醇，l35〇C及減壓下濃縮溶液。添加1升甲苯至漠縮物中，濃縮生成之溶液，重覆添加甲苯及濃縮。將生成之中間物接著溶於】升無水甲苯中，添加對甲苯續酸單水合物（〇5克），迴流混合物。移除生成之甲#，例如藉由丁·斯達克（Dean_stark)^或分子篩。14小時後，濃縮溶液，以氣仿稀釋，以水（2χΐ5〇毫升）洗滌，經MgS〇4乾燥後而濃縮。若需要，可純化生成之化。物（CH2 — C(P〇3(CH2CH3)2)2)，例如蒸餾。化合物CH2 =C(P〇3(CH2CH3)2)2可接著如所需予以反應以提供本發明化合物。特別是可與NH2(3-羥苯基）經由麥可反應（Michael reaction)而提供標題化合物，（^Η2=(Ι：(Ρ03((：ΙΙ2€Ή3)2)2。膦酸二酯藉由以溴三甲矽烷處理可轉換為二酸（參見如 Morita et al.9 Bull. Chem, Soc. Jpn., 54 ： 267(1981)) 〇實施例2: m選對於抑制組織因子/因子VHa(TF/YDa)之化合物之初級篩選，係根據TF/Wa依賴性FX活化作用檢定法（參見第 1圖之流程圖）。此檢定中，TF/Wa複合物活化Fx之能力係於兩個不連續階段測定。第一階段（FX活化）中，不活性FX藉由TF/Wa’於磷脂及釣存在下，轉換為活性酶形式（F X a)。第二階段（F X a活性檢定）中，在指示時間添| 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 29 91539 1222865 A7

五、發明說明（3〇 ) 加EDTA至F X活化混合物中以鉗合鈣，因此導致終止 FX — FXa轉換。TF/VE a活性係需要轉的，接著經由對 FX a具特異性之色原受質（例如s_2222、S-2756、或光譜酶F X a)測量F X a活性。於初級篩選中，將得自先前製備之化學庫之化合物在TF/VH a依賴性ρχ活化檢定中，以相當南濃度（〜0.83 3 mM)先進行試驗，以鏗定出可能的 TF途控拮抗劑（參見第1圖）。然而，於此酶偶合檢定中，化合物對於TF/Wa依賴性！^又活化之抑制作用，可明顯歸究於化合物對TF/VIIa及/或FXa活性之影響^因此，二次篩選試驗係為測定抑制如何發生及抑制機制而設計。於二次篩選實驗中，係測試由初級篩選鑑定出之化合物對於因子W a(FW a)、因子]X a(FK a)、因子x a(FXa)、凝血酶、拉塞耳氏蛇毒（RVV)、及胰蛋白酶之催化活性之影響。可進行另外的試驗（例如TF/VH a依賴性因子K活化檢定及凝血酶原時間（PT)檢定）確定所欲之活性，並進行二次試驗進一步選擇具有優良TF拮抗活性而未展現非所欲活性之化合物。 A·初級篩選·· TF/VDa依賴性FX活化初級檢定係使用TF/ΥΠ a依賴性FX活化檢定，在96 個凹槽板上進行二重複。將被篩選的所有化合物皆溶於二甲亞楓（DMSO)中，其它試劑在25mM HEPES-NaOH、5mM CaCl2、150mM NaCl、0.1%BSA、pH 7·5 中製備或稀釋。對使用TF之檢定而言，純化的人類重組體TF(1〇〇nM)在 50mM Tris-HC卜pH 7.5、0.1%牛血清白蛋白（BSA)中，以 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁} --------訂---------線在經濟部智慧財產局員工消費合作社印製本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 30 91539 1222865 A7 _____B7___ 五、發明說明（31 ) 填脂醯膽驗（〇·〇7毫克/毫升）及磷脂酿絲胺酸（0 03毫克/毫升），於37°C先進行脂化30分鐘。接著結合等體積之i〇0n]VI 經脂化的TF及ΙΟΟηΜ FVH a製備TF/W a複合物之儲備溶液。將複合物於37°C保溫30分鐘，接著將其均分成數份且存放於-70°C下以於未來使用。篩選檢定係將5微升之各化合物（約1〇π1μ，於DMSO 中）或DMSO置於96個凹槽板之各凹槽中，接著添加45 微升TF/VH a複合物（〇·ΐηΜ)。以吸量管尖或是藉由在Lab· Line滴定板振動器上振動凹槽板3〇秒混合各凹槽中的成分。於37C保溫凹槽板15分鐘後，添加1〇微升人類 FX(180nM)至各凹槽中且如上述混合。然後將該板於37〇c 保溫3至15分鐘，接著添加10微升EDTA(400mM，於 144mM HEPES、864m]V[ NaCl、0.576%BSA 中 pH 調節至 7·5)至各凹槽中以終止ρχ活化。添加微升受質 (5mM光譜酶FX a、或3·2ιηΜ S-2765)至各凹槽以測量 FXa活性。該板如上述混合，在37〇c保溫約15分鐘後，以20微升50%乙酸終結ρ X a活性。然後以ELISA讀數讀取405nm處之吸收率。0〇4。5請值轉移至微軟試算表 (Microsoft Excel)檔案上且以下式計算TF/vn a依賴性FX 潘化之抑制百分率： ; %抑制率=100—(ΙΟΟχΑ/Β) 鲁斧A灰B分別為存在及缺乏化合物下之值。將碰a依4性FX活化表現等於或大於7〇%抑制率之任一種也善物，扣派作為二次篩選試驗之候選物。 °本紙張尺度適用中國國家標準&NS)A4規格（21〇 X 297公釐）-------- 31 91539 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 訂---------線* 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 1222865 A7 _____________ 五、發明說明（32 ) 、 B ·二次篩選於初級篩選中鑑定出之彼等化合物以10、50或10Q 倍之稀釋濃度（參見第i圖之流程圖），在TF/Wa依賴性 FX活化檢定中重覆試驗。在稀釋濃度，未能表現顯著抑制率（顯示其抑制作用不具特異性或非常微弱）之化合物即不再進一步試驗。將在稀釋濃度中抑制TF/Wa依賴性 FX活化之化合物，進一步試驗其對抑制下列蛋白酶、胰蛋白酶、RVV、凝血酶、Fx a、FV[I a、及FK &的活性之能力。目標為鑑定出能特異性地防止FX(及FK)結合至 TF/VD a複合物上，或妨礙tf及Yna交互作用以致於阻斷 FX (及FIX)活化之化合物。然而，具有廣泛能力（不具特異性）而抑制多種蛋白酶活性之彼等化合物即不再進一步研究。選擇出符合特定準則（換言之，以低濃度（< 〇nmM) 抑制TF/VHa依賴性Fx活化，但對於蛋白酶活性無顯著影響）之化合物，包含化合物2_及2(其結構示於上），鑑定其為強TF拮抗劑並進一步加以研究。置~班例3 ·· 本發明之化合物對於FW a、FX a、凝血酶、及胰蛋白酶之影響欲測試化合物L及1是否抑制凝固蛋白酶及胰蛋白 —，可進行下述檢定。 A · F νίΐ a活性檢定 ί子VH a(FW a)活性或TF及VH a交互作用的影響之測定，4 丁女存在下，係使用ρχ及小肽（色原）受質，於缺乏Tt下，則使用fx作為受質。使用對具特異性之 Γ%先閱讀背面之注意事項再填寫本頁} -------^--------- 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 x 297公釐） 32 91539 1222865 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 33 A7 五、發明說明（33 ) 色原受質S-2288之檢定係直接測量化合物對FVH a催化活性之影響。此檢定中，先使55微升TF/ FVH a複合物（含有10nM TF及lOnM W a)與5微升DMSO(或經稀釋之 DMSO)或化合物，在96個凹槽板中，於37°C保溫15分鐘’接著與20微升8mM S-2288摻合。反應於37。(：保溫 1至2小時。以20微升50%乙酸終結反應後，測量4〇5nm 處之吸收率。由缺乏及存在化合物下之〇D心$請值，計算 TF/W a活性之抑制百分率。結果如表J(第2(a)圖）所示並顯示化合物1_及對於TF/VHa對S-2288之催化活性未具有顯著的影響，表示此類化合物未結合至a之活化位置上，也未妨凝TF及YUa交互作用。若此二化合物結合至Wa活化位置或防止！^及通3形成活化複合物，則可預期彼等將抑制TF/W a對S-2288之活性。 B.FX a活性檢定在任何化合物均不存在下，Fx藉由合物而轉化為FXa。因此，在50毫升管中添加54微升订/通a(5〇nM) 至27毫升緩衝液。接著添加6毫升ρχ(ΐ8〇ηΜ)，且於叨 °C保温15分鐘。添加6毫升EDTA次終止Fx活化。將$ 微升化合物或DMSO置於96個凹槽板之各凹槽中，進行二重複’然後添加上述產生之65微升FXa至各凹槽中且混合之。在37。(：保溫15分鐘後，添加1〇微升&受質光譜酶FXa，於保溫2G分鐘。添加2Q微升5〇%乙酸後，接著測量405nm處之吸收率。由缺乏及存在化合 I物下之OD4Q5nm值’計算Fx a活性之抑制百分率。表1(第本紙張尺度適用中關家標準（_Α4規格⑵〇 X 297公髮「 91539 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) --------訂---------線表 1222865 34 A7 五、發明說明（34 ) 2(a)圖）所不結果表示化合物乙及1未抑制FX a活性，暗不TF/W a依賴性F χ a活化之抑制並非由於此二化合物對 F X a活性之抑制。 C ·凝血酶活性檢定凝血酶活性檢定係將55微升緩衝液與5微升DMSO 或化合物混合’接著添加1〇微升凝血酶（2〇nM)。混合及於37C保溫10分鐘。然後添加1〇微升受質s-2238，令其於37 C保溫15至20分鐘。接著測量4〇5nm處之吸收率，且由缺乏及存在化合物下之〇〇4()5謂值，計算凝血酶活性之抑制百分率。如表丨（第2(a)圖）所示結果表示化合物上~及2_(結構示於上）未抑制凝血酶活性。 D·胰蛋白酶活性檢定胰蛋白酶活性檢定係將4微升胰蛋白酶（1〇〇nM)先與 61微升緩衝液、5微升DMS0或5微升化合物（於dms〇中）混合，接著於37。(：保溫15分鐘。然後添加1〇微升受質S-2222(4.8mM)開始反應。於37t保溫15分鐘後，以 20微升50%乙酸終止反應。接著測量4〇5nm處之吸收率，且由缺乏及存在化合物下之◦以^^值，計算胰蛋白酶活性之抑制百分率。表1(第2(3)圖）中之結果表示化合物丄及2(結構示於上）未抑制胰蛋白酶活性。亦參見顯示使用83以Μ化合物l或化合物2_對因子 Xa及因子viia活性之抑制百分率之第3圖。第3圖亦示出63以Μ化合物L或化合物L對凝血酶活性之抑制百分率。該圖中亦示出71 化合物乙或化合物對胰蛋2 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐)— 91539 --------訂---------線 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 1222865 A7 B7 五、發明說明（35 ) 酶活性之抑制百分率。 iiMM 4 ： TF拮抗劑對於受RVV、FIX a、及FVH a所催化之F X活化之影響除了 TF/W a複合物之外，RVV、FIX a、及FW a亦能夠在活體外活化F X。可進行下述檢定探討及2(結構示於上）對於RVV、FKa、及VHa所催化之FX活化之影響。由此類檢定之數據可協助瞭解此類化合物之結合位置及其抑制機制。 A. RVV依賴性FX活化添加45微升RVV(0. InM)至含有5微升經稀釋之 DMSO(或緩衝液）或化合物之96個凹槽板之各凹槽中，然後混合及於37°C保溫15分鐘。接著添加10微升fx (180nM)，且於37°C保溫15分鐘。於添加1〇微升 EDTA(400mM)及10微升光譜酶FXa(5mM)後，反應於 37°C保溫20分鐘。添加20微升5 0%乙酸後，接著測量 405nm處之吸收率。由缺乏及存在化合物下之〇D 值，計算RVV依賴性FX活化之抑制百分率。表2(第2(b)圖）所示之數據表示化合物t及2_ (結構示於上）未抑制rv V催化活性’及彼等未結合至FX之分裂位置。獨立之研究已證實所有FX活化酶（TF/VHa、FVEa、FKa、及RVV)在F X上皆分裂相同位置。 B. FIX a依賴性FX活化檢定在化合物不存在下’先將FIX藉由TF/VHa轉化為FIX a，此反應於50毫升管中進行。於37°C保溫TF/VH a(〇 67nM、 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) ---I — 丨丨 I 訂 — — — — — — — — — 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 35 91539 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 1222865 五、發明說明（36 ) 10¾升）15分鐘後，添加FIX (300nM、0· 123毫升）並於 37 C保溫30分鐘。然後添加！ 54毫升EDTA(400mM)以終止FK活化。接著將65微升上述F]X &樣品轉移至含有 5微升稀DMSO(或緩衝液）或化合物（於稀DMS〇或緩衝液中）之96個凹槽板之凹槽中。添加1〇微升fX (1000nM)、 1〇微升聚離胺酸（300nM)、及1〇微升光譜酶ρχ a(5mM) 至各凹槽’且於37°C保溫直到OD4G5nm值達至〇·8。添加 20微升50%乙酸後，接著測量4〇5nm處之吸收率。由缺乏及存在化合物下之值，計算FIX a活性之抑制百分率。同樣地，化合物1_及2_未抑制FIX a活性，彼等亦未結合至FX而使FX不被FIXa活化（表2、第2(b)圖）。 C.FWa依賴性FX活化單獨存在於磷脂及鈣中之FW a，雖然活化速率非常低，但亦能活化F X。此實驗設計為探討於省略tf下，化合物t及2_是否可抑制FW a依賴性F X活化。可抑制 FW a依賴性F X活化意指兩種化合物可結合至FYu &上，而未抑制則表示兩種化合物未結合至FVEa或FX上。此檢定以相當高FWa濃度完成。將6微升化合物，

於10%DMSO中）或1〇%DMSO與40微升含有構脂醯膽驗 (0.07毫克/毫升）及磷脂醯絲胺酸（0·03毫克/毫升）之25mM HEPES-NaOH、5mM CaCl2、1 50mM NaCl、0.1 %BSΑ(ρΗ 7 5) 混合。然後添加及混合4微升FWa(l ·5//M)及10微升 FX (180nM)。混合物於37°C保溫1小時。接著添加10微升EDTA(400mM)，藉由移除因子W活性所需之鈣，以終 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 36 91539 1222865 A7 ---B7 五、發明說明（37 ) 止FVD活性。然後添加1〇微升ρχ a受質S-2765(3.2mM) 以測量由FVHa所產生之fx a活性。於37°C保溫16分鐘後，添加20微升50%乙酸以終結反應。讀取4〇5nm處之吸收率，且由缺乏及存在化合物乙下之〇D4Q5nm值，計算 FVD a依賴性FX活化之抑制百分率。表2(第2(b)圖）所示數據表示化合物未抑制F VH a依賴性F X活化，顯示其未結合至FVHa或FX上。 D·抑制TF/W a依賴性FX活化為了測定化合物h及2^於低濃度下，對TF/W a依賴性FX活化之抑制，於DMSO中之化合物以l〇mM HEPES-NaOH(pH 7·5)稀釋，然後以先前敘述之初級篩選方法進行檢定。表3(第2(c)圖）為化合物及1對TF/Wa 依賴性F X活化之滴定結果。若干實驗中，將兩化合物溶於0·1Μ NaOH中，然後以水稀釋至16 5ιπμ NaOH。由表 3的數據，化合物]_及2(結構示於上）抑制tf/VH a依賴性 FX活化之IC^(抑制5 0%TF/Wa依賴性FX活化之抑制劑濃度）值，化合物為19.0//M及化合物2__為9.7 // Μ。 Ε·抑制TF/W a依賴性FIX活化 TF/W a不只能活化F X，而且亦能轉化FK為FIX a。欲探討1_及兩拮抗劑是否能夠阻斷由TF/W a所催化之 FIX活化，而進行FK活化實驗。於96個凹槽板之各凹槽中，添加5微升稀DMSO或化合物，之後添加45微升TF/ Wa(0.67nM)。混合及於37°C保溫15分鐘後，添加1〇微升FK(300nM)，且於37°C保溫1〇分鐘。添加10微升 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) --------訂--------I線應經濟部智慧財產局員工消費合作社印製本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 37 91539 1222865 A7 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 B7____五、發明說明（38 ) EDTA(400nM，於 144mM HEPES、864nM NaC卜 0.576%BSA 中，pH調節至7·5)，然後添加ι〇微升ρχ (ΙΟΟΟηΜ)、10 微升聚離胺酸、及10微升光譜酶FX a(6mM)。於37°C保溫3小時後，接著添加20微升50%乙酸，然後測量405nm 處之吸收率。由缺乏及存在化合物下之〇D4G5nm值，計算 TF/VD a依賴性FIX活化之抑制百分率。表4(第2(d)圖）之數據顯示化合物及2(結構示於上）抑制TF/W a依賴性 FIX活化，與TF/W a依賴性FX活化中所見相似。實施例5 : TF拮抗劑之抑制機制上述實施例3及4顯示本發明之化合物係tf特異拮抗劑。為了明白TF拮抗劑之抑制機制，可進行下述實驗。在使用兩種不同FX濃度之兩種檢定條件下，以〇至 84 // Μ之化合物滴定。於其一條件下，在添加之前，化合物L與TF/Wa於37°C預先保溫15分鐘後。於另_ 條件下’同時添加及混合TF/Wa、FX、與化合物1。其中一組實驗以5nM FX進行，另一組則以3〇nM FX進行。由第6及7圖所示結果可見，預保溫實驗之ICm值稍微低於同時添加實驗之IC5。值（FX為5nM時為8·3/ζΜ與 18·1Μιη 之比較；FX 為 30ηΜ 時，為 12 5/ίΜ 與 33 2^μ 之比較）。此外，1C5。值隨著FX濃度提高而增加。例如，於此二檢定條件下，當FX自5nM提高至30nM時，Ic 值分別自8.3//M與18·1/ζΜ增加至12.5//M與33 2 “埘〇。彼等數據暗示化合物h係相互競爭結合至TF。 TF/Wa依賴性FX活化之進一步動力學分析顯示，本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 38 91539 (請先閱讀背面之注咅？事項再填寫本頁) 11--! I 訂—------· 1222865

五、發明說明（39 ) 合物L·對FX受質之表觀Km值顯著地增加（參見第5圖）。此表示（1)化合物]_為TF/Wa複合物之競爭性抑制劑，（2) 化合物t與TF/Ylia之結合阻斷ρχ與TF/Wa複合物之結合。經由等溫熱量測定分析亦可直接觀察到化合物t與 TF(243種脂化形式或219種非脂化形式）之結合上。 1施例6 :本發明之化合物在凝血酶原時間（PT)檢定中之影響凝血酶原時間（PT)試驗可如下進行： PT 檢定係以 Electra 800(Medical Automation 公司）於 37°C進行。經由添加〇·2毫升脂化的重組體人類組織因子至0·105毫升人類血漿（Ci-Tr〇i對照標準I，得自vwR、目錄編號68100-336)中，以引發PT反應。添加1毫升純水至Ci-Trol之各小玻璃瓶中且混合至溶解。若使用一個以上小玻璃瓶時，則適於將彼等合併至一個容器内。添加 5微升DMSO或5微升化合物至含有〇·1毫升Ci-Trol之雙槽光析管之各槽中。使用0.1毫升管尖之吸量管有助於混合，確定槽中無氣泡。接著將化合物（或DMSO)與血漿 (Ci-Trol)混合，添加〇·2毫升脂化的重組體組織因子至 3nM)至血漿中，且在1〇分鐘内測量凝塊時間。第4圖之數據指示化合物JL及1顯著延長由TF引發之PT時間。茲已參照較佳具體實例詳細說明本發明。然而，需瞭解熟習此項技藝人士於詳慮本揭示内容後，可於本發明之精神及領域範圍内修飾及改良。 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) -------—訂-----1111線泰經濟部智慧財產局員工消費合作社印製本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 39 91539

Claims

H3 H3 公告答I 第88116517號專利申請 —___________ 申請專利範圍修正本g有泰卜“ 4 4 一一_·· 一一,、·— ···,,_<» _ (93年6月25曰） —種用以治療血栓性栓塞症或動脈粥瘤硬化或用以抑制血液凝結之醫藥組成物，該組成物包括下述式〗之化合物： Ar-(CXY)m.(Het) 〇 .¾ Y1)n"C(Z)p-(P〇3). I 之其中Ar為視情況經羥基、胺基或Ci2烷基取代笨基或萘基； Het 為 NH 或〇 ; 各X、各Y、各X1及γΐ、及各z係各自獨立為氫；及 m為〇;n為l;p為1;及其醫藥可接受之鹽類。 2·如申請專利範圍第丨項之醫藥組成物，其中，該化合物為下述式Π : ^1)q>sy^=\ \_/—(CXY)m—(Het)〇 —(CX’Y，)n—C(Z)p—(ρ〇3)3·ρ 經濟部中央標準局員工福利委員會印製其中Het為NH或Ο ; 氫；各X、各υ、各χ，、各γ，、及各ζ係各自獨立為及各R1係獨立為鹵素；胺基；羥基；或Cl_2燒基； 111為〇;11為1;P為l;q為〇或1;及其醫藥可本紙張尺度適用中國國家標準（CNs)从規格（2獻撕公楚） 1222865 接受之鹽類。其中，該化合物 3·如申請專利範圍第丨項之醫藥組成物為下述式ΙΠ : (R^c (CXY)m—(NW)—(CX，Y，)n—C(Z)p—(P03)3_p Π 其中各X、各γ、各X，、各Y，、及各Z係各自獨立為氫； 111為〇;11為1;1)為1; W為氫； R1係獨立為鹵素；胺基；羥基；或Ci 2烷基；及 q為〇或1;及其醫藥可接受之鹽類。 4.如申請專利範圍第丨項之醫藥組成物，其中，該化合物為下述式ΠΙ a :

經濟部中央標準局員工福利委員會印製其中R1係獨立為鹵素；胺基；羥基；或Ci 2烷基及 q為0或1 ;及其醫藥可接受之鹽類。 5·如申請專利範圍第1項之醫藥組成物，其中，該化合物為下述式IV : 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS) A4規格（210 X 297公楚） 7 H3 ㈣ \ /~(CXY)m—(〇)—(CX，Y，)n—C(Z)p—(P〇3)3-p IV 其中各X、各γ、各x，、各Y，、及各z係各自獨立為氫； m為0;n為1;p為 R係獨立為鹵素；胺基；羥基；或ci 2烷基；及 6.如q為〇或1;及其醫藥可接受之鹽類。申％專利範圍第第丨項之醫藥組成物，其中，該化合物為下述式IV a ·· \ /(CH2)0或厂(〇)—(ex’Y*)n—or—(P〇3)2 IVa 其中各X，及各γ，係獨立為氫； R1係獨立為鹵素；胺基；羥基；或ci 2烷基；及 1; q為0或1;及其醫藥可接受之鹽類。 7 經濟部中央標準局員工福利委員會印製 •如申請專利範圍第1項之醫藥組成物，其中Ar係經羥基取代者。 8·如申請專利範圍第2項之醫藥組成物，其中至少一個Ri 為餐基。 9.如申請專利範圍第3項之醫藥組成物，其中至少一個為經基^。 10·如申請專利範圍第1項之醫藥組成物，其中，該化合物為下列化合物中之一者： 9T33XWjEW7 本紙張尺度適用巾國國家標準（CNS) A4規格（210X297公楚） 1222865 H A 〇1、〇〇t〇 (X 小 H3 1、0 1、0 經濟部中央標準局員工福利委員會印製或其醫藥可接受之鹽類。 11 ·如申請專利範圍第1項之醫藥用於治療血栓性栓塞症。 U·如申請專利範圍第2項之醫藥組成物用於治療血栓性栓塞症。 U·如申請專利範圍第3項之醫藥組成物用於治療血栓性栓塞症。 14 ·如申請專利範圍第4項之醫藥組成物用於治療血栓性栓塞症。 15·如申請專利範圍第5項之醫藥組成物用於治療血栓性栓塞症。 1 6.如申請專利範圍第6項之醫藥組成物用於治療血栓性栓塞症。 17·如申請專利範圍第7項之醫藥組成物用於治療血栓性栓塞症。 1 8 ·如申請專利範圍第8項之醫藥組成物用於治療血栓性栓塞症。組成物，其中該組成物係 ’其中該組成物係 ’其中該組成物係 ’其中該組成物係其中該組成物係 ’其中該組成物係 ’其中該組成物係 ’其中該組成物係本紙張尺度義(CNS) Α4規格（210X297公釐） 1222865

19. 如申請專利範圍第9項之醫藥組成物，其中該組成物係用於治療血栓性栓塞症。 20. 如申請專利範圍第1〇項之醫藥組成物，其中該組成物係用於治療血徐性栓塞症。 21. 如申請專利範圍第丄至2〇項中任一項之醫藥組成物，其中該組成物係用於治療動脈粥瘤硬化。 22·如申請專利範圍第1至2〇項中任一項之醫藥組成物，其中該組成物係用於抑制血液凝結。 23·如申請專利範圍第i至2〇項中任一項之醫藥組成物，復包括醫藥可接受之載體。 24·如申凊專利範圍第2丄項之醫藥組成物，復包括醫藥可接受之載體。 2 5 ·如申清專利範圍第2 2項之醫藥組成物，復包括醫藥可接受之載體。

經濟部中央標準局員工福利委員會印製本紙張尺度適用中國國家標準（CNS) A4規格（210X297公釐） 5 巧1539(修正版)