TW504371B - A process of using pectin for culturing mycelium of Reichi (LingZhi), and the related healthy food - Google Patents

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五、發明說明（/ ) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 發明目的 本發明係關於利用靈芝菌絲體於果膠、果汁或果菜汁 中’尤其是含果膠之果菜汁中，培養所獲得之果菜汁靈芝 液產品，以及其相關之製法。 發明背景 果膠(pectin)為一種存在於所有植物組織之細胞壁中 之多醣體，分子量約為2〇,〇〇〇〜4〇〇,〇〇〇，屬於水溶性的食 物纖維，廣泛地存在於各種蔬果中，在柑橘類果皮中含量 尤其豐富，天然果膠係呈D_聚半乳糖醛酯 (polygalacuronate)之型式，尤以D-聚半乳糖酸曱酯居多， 其間可能穿插一些鼠李糖殘基（L-rhamnose residues ); 一些天然糖如· D-半乳糖（gaiact〇se)、L-阿拉伯糖 (arabinose)、D-木糖(xyiose)、及乙_巖藻糖(foc〇se)會在果 膠分子上形成側鏈。 已知各種蔬果如草莓、香蕉、鳳梨、木瓜、蘋果、柑 橘類水果（如檸檬、橘子、柚子、葡萄柚等）、火龍果、 奇異果、柿子、愛玉'哈密瓜、梨、甘蔗、青豆、乾豆、 紅蘿葡、高麗菜、花椰菜、南瓜、馬鈴薯、蕃薯等含有豐 富的果膠、各種維生素、礦物質、纖維素等營養成分。丑 許多已發表的醫學研究顯示，果膠能保護腸壁，使腸 内的有用菌活性化，調整腸機能；此外，果膠亦可吸收膽 汁酸、膽固醇，預防南血脂症和高血壓。 3 靈芝是一種木質腐生茵，喜高溫多濕及通風良好之環 ----·---：-----,ΦΜ (請先閱讀背面之注意事項本頁) 訂--------- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 x 297公 專利申請案第90122954號 ROC Patent Appln. N〇.90122945

Amended Pages of the Chinese Specification - Enel. II (民國91年5月匆曰修正並送呈） (Amended & Submitted on May 开 2002) .赞『參)r五、發明k萌·(i 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 ^，其分類為··擔子菌亞門，無褶菌目，多孔菌科，靈芝 ，。近年來由於人工栽培的研究成果顯示其代謝物中含有 諸夕具商療作用之活性成分，如多醣體（ )、類三萜、有機鍺化合物及腺苷等。如果將國内外靈芝 之研究文獻詳加整理分析，發現靈芝具有抗癌、降血壓、 降血糖、抑制膽固醇、免疫及保肝的生理作用及藥理效果 ，所以靈芝在日本早已大行其道，除醫藥學界對其積極研 究探討外，各大藥廠更競相製造，但是由於栽培成本過高 ，所提供之靈芝產品價位始終居高不下，讓此種優異產品 不夠普及化以廣泛嘉惠大眾之健康。 已知靈芝多醣消滅癌細胞的機制：當靈芝多醣與巨噬 細胞一起培養時，由產生之酵素分解高分子多醣類，產生 小刀子的各種葡萄糖誘導體，而且其會誘導巨嗟細胞分泌 免疫物貝·干擾素(INF)-y、介白素_丨、介白素_2等等， 使T細胞變成殺手T細胞，殺手τ細胞是具有攻擊能力咐 細胞’產生干擾f可刺激免疫細胞變為天然殺手（Natural Killer)細胞’其對0可以抵抗癌細胞，渺卜可以找尋不 屬於體内的生物以攻擊之。 1881年Κ_η根據具有表面漆光和g柄的白腐型真菌 W· Cut)為基礎而建立了靈芝屬（ 如)。$芝在藥理研究和人工栽鱗最常被使用的 學名為G /⑽·—，但常常在其中發現同名異物的情況，事 實上是將-群形__$芝群(G·喊㈣_piex)當作 同一種。在所謂的靈芝群（G /WCW_ c〇_ex)中，其實 91. 3. 2,000 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 訂· 4 504371 本?卜 A7 B7 五、發明說明（3) 包含有松杉靈芝(G· tsugae Murr·)，凡勒斯靈芝(G. valesiacum Boud·),奥勒岡靈芝（g· 〇reg〇nense muit·)，銳斯那靈芝（g. resinaceum Boud·)，菲力靈芝(g· pfeifferi Bres·)，奥斯特靈芝(〇 oerstedii (Fr·) Torr·)，阿瑪延靈芝(g· ahmadii Stay·)，等形態相近的 類緣近屬；已知靈芝屬有四十多種；本文所提及之靈芝係泛指 各種可食用之靈芝。 1998年11月台北榮民總醫院醫學研究部教授王聲遠即發表 一篇「靈芝免疫調節作用與抗腫瘤活性之關係」研究報告。他 指出，使用高純度化、高倍數的靈芝抽取液在人體内，可增強 人體的免疫細胞作用，進而可直接或間接影響抑制到腫瘤。王 教授表示，他將免疫細胞培養在培養液内，發現靈芝對免疫細 胞有增強的作用，而免疫細胞所產生的細胞因子(cyt〇kine)可以 抑制腫瘤的成長。研究顯示，巨噬細胞培養液中的介白素—i (IL-1)、腫瘤壞死因子（TNF)，及介白素一6經過靈芝萃取 液處理後，將比未經處理的對照組分別多出41倍、9·8倍及29 倍，這將可證明靈芝可以刺激Τ淋巴細胞、巨喔細胞產生細胞 因子，抑制腫瘤細胞的生長。 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 鑑於靈芝之前述優點以及各種蔬果之豐富營養成份，本 發明意外地發現利用果膠、果汁或果菜汁，尤其是含果膠之 果汁或果菜汁，培養靈芝之g絲體，所培養出來的菌絲體會 分泌各種分解㈣體的酵素，這些酵素在分解果膠及其他存 在之多體後，產生各種分子較小的<Κ3>4<1_6>醋類（例 如：雙醣類、半纖維素(hemicellulose)以及其他短鏈的多醣 體）的混合物’而發揮抗癌作用；如此竟可培養出與已知 〜5〜 A7 B7 五、發明說明（孕 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 二ίί之保健效果相同之健康食品，甚至可提高靈芝内 有^人體健康之成份含量。 主登盟么技術内交斑特％ 本發明係利用靈芝菌絲體，更明確地說，是利用靈芝 之多體分解酵素，於果膠、果汁或果菜汁中，尤其是含 果f之果汁或果菜汁巾，培養製造出生機食品，由於利用 果菜汁作為培養基以培養靈芝菌絲體時，靈芝苗（菌絲體 叢^得容易生長，遂可得到富含靈芝菌絲體及靈芝苗之生 ，食品，此種產品可提高細胞性免疫力，屬於產業上利用 價值極高之抗癌食品或健康食品。 ^本發明並非以子實體之成份產生為目的，而係利用其 菌絲體所分泌之酵素群將果菜汁中之多醣體成份，特別是 果膠，分解產生抗癌物質。 本發明製法可直接利用果膠或利用一或多種含果膠的 水果或蔬菜以果汁機處理成天然果(菜)汁，視需要，可另 添加一些有利於靈芝生長之輔助劑，在適當稀釋（例如添 加水）並經加熱消毒滅菌後，加入靈芝(例 /wezWww)之菌絲體發酵培養，利用菌絲體所分泌之酵素群 將前述果膠或果菜汁中之多醣體轉變為易消化、吸收且有 抗癌性之具有特殊生物學價值之產物，此等產物可直接調 配分裝製成口服用果菜汁靈芝液，或與習知之食品添加物 ，例如··甜味劑、香料、食用色素等，適當混合後方製成 口服用果菜汁靈芝液；前述產物亦可依習知食品加工方法 {請先閱讀背面之注咅？事項 ---------tr--------- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 χ 297公釐） :-^L^ j

五、發明說明（5 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 進一步調配成各種食品型式， 义 I武如·凝膠、果凍、果醬、洋羹 ^則述錄亦可經冷奸―，縣賴財，戍者再 製成錠舰膠囊奴俾便·或長祕存。這些產品 白土二合生物活性物質(如：半纖維素(hemicellul°se)、活性 α ^(Active Hexose Correlated Compound, AHCC)、靈芝蛋白質、肌醇p3 (⑻姻p3)及/或各種營養素 ’生素之健康食品’此種產品及其製法並未見 诸任何已知技藝。 —·本發明製法之培養條件可採用—般習知之培養操作方式進 仃’例如：先將-或多種含果膠的水果或蔬菜以果汁機處理成 =然果(菜)汁（可直接使用，亦可經過濾處理），置於適當容 器十視f要，可另添加—些有.靈芝生長之辅助劑，如： 葡萄糖或蔗糖等碳水化合物，在適當藩（例如添加五倍量的 水）後，適當加熱以消毒滅菌；冷卻後，添加靈芝菌絲體在 20〜30 C下培養3至14天，宜好氣性培養5至1〇天，培養可於攪 拌或振1下進行’所得產物可直接娜製成口顧果菜汁靈芝 液，或與習知之食品添加物，例如：甜味劑、香料、食用色素 等[適當混合後方製成口服用果菜汁靈芝液；選擇地，亦可將 培養基依習知食品加工方法進一步調配成各種食品型式，如 •凝膠、果束、果醬、洋羹等；選擇地，亦可將培養基全體 以習知凍乾技術乾燥，粉末化或進一步錠劑化或製成膠囊。 此等產品沒有靈芝特有之苦味以及顏色，也沒有毒性，宜於 低溫及/或低渔度下保存。本發明製法之殺菌可採習知方式 進行’例如：加熱、紫外線等。凡熟習此項技術者應可依 1--1 — — — — — —*-------— — — — — — (請先聞讀背面之注意事項再填寫本頁) 本紙張尺度適用中國國冢標準（CNS)A4規格⑽x 297公楚） 91. 3. 2,000 504371

五、發明說明（6 ) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 其經驗選擇最適當之培養溫度、溼度及時間。 各種可食用之靈芝皆可應用於本發明製法中，甚至亦可 利用各種可食類，如：衫、洋益、軸等等，依上述 模式生產出生物活性物質含量不同之生機食品。 各種蔬菜、水果，甚至是含果膠之果皮，如：柑橘類果 皮’皆可應用於本發明製法中，其中以富含果膠之蔬果為較 佳，若採經分離之果膠亦可；視需要，可添加一些可食用輔 助劑以促進靈芝之生長與繁殖及/或改善食用風味。 根據本發明製法製得之產品，經離子交換層析法分析， 證明確實含有下列成份之混合物： 1.靈芝蛋白質； 2·半纖維素(hemicellulose)之各種分解產物； 3. 活性六碳醣相關之化合物（Active Hex〇se c〇rrekted Compound, AHCC)； 4. 肌醇P3(inositol P3); 5. 各種營養素·維生素、植酸(phytic acj^)、礦物質； 6. 酵素：多醣類分解酵素、蛋白分解酵素。 這些成份在已知技藝中業經證明對人體免疫力之增強有莫大 的助益，因此本案能利用果膠、各種水果、蔬果以及其廢棄 物（如·果皮）製造出尚生物價值之高級生化、高技術性食 品，以提高農作物之經濟價值，甚至可適時地解決農產品生 產過剩之問，貫乃兼具進步性及產業利用性之新發明。 〜8〜 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 訂： 適 度 尺 張 紙 本 公 97 2 X 10 2 /V 格 規 4 A S) N (C 準 標 家 90* 2,〇〇〇 504371 Λ7 Β7 經 濟 部 智 慧 財 產 局 員 工 消 費 合 作 社 印 製 五、發明說明（7 實例部分 以下實例旨在進一步說明本發明之技術内容，而非 限制本發明之申請專利範圍。 實例1 將（50克）柚子皮加五倍水蒸煮2〇分鐘後以果汁機攪碎， 過慮，置入二角瓶中，添加1〇倍量的水，於下加熱 約20分鐘以滅菌消毒，冷卻後，添加5%靈芝菌絲體（ /w(:也m)，在室溫及通風良好之情況下振盪 培養七天（培養期間過長時，會產生苦味），使培養液中 產生多量菌絲體。 此培養液可錢食用；若需要贿，則宜於乾燥及低溫條 件下進行。 ' 可《實例1之步驟’以馬鈴薯、蕃薯、南瓜或其他蔬果 之混合物取代柚子皮，亦可麟錄活性㈣含量不 生機食品。 實例2 將（100克）Μ果以果汁機授碎，置入三角瓶中，添加五 倍量的水，於1HTC下加熱約2〇分鐘以滅菌消毒冷 ’添加5%靈芝菌絲體（⑽/__ )，在室、、 通風良好之情況下«培養七天（培養期間過長時^ 生苦味），使培養液中產生多量菌絲體。 曰 本紙張尺度_巾^鮮χ 297公髮 n ϋ 1_1 *1>· ϋ .1 ϋ n H · n ϋν n n ϋ ϋ n 一δ、I I n n n n n n I . (請先閱讀背面之注音？事寫本頁) · -9〜 504371 A7 B7 五、發明說明（没） 此培養液可直接食用；若需要保存，則宜於乾燥及低溫條 件下進行。 (請先閱讀背面之注意事項^^寫本頁) 可重覆實例2之步驟，以香蕉、草莓、鳳梨、木瓜或各種 蔬果之混合物取代蘋果，亦可獲得生物活性物質含量不同 之生機食品。 實例3 小白鼠體内（in vivo )試驗 试驗方法出處·中華癌醫會諸(j· Chinese Oncol. Soc.) 10(3)，14-23，1994 ;中華癌醫會諸(j. Chinese Oncol. Soc.) 11(3)，27-34, 1995 〇 以實例1製得之產品餵食經S-l 80肉瘤細胞接種之純種近親 父配的小白鼠（inbred mice)(每隻體重約30克），每隻 每天餵0.5毫升，30天後檢測S-180肉瘤細胞發展情形；在 與控制組比較下，發現對S-180網狀細胞肉瘤(sarcoma)生 長抑制作用呈陽性反應。 實例4 以實例1製得之產品餵食人類志願者（30位來自抗癌人協 會之經癌症腫瘤切除手術之“過來人”），每人每天服用30 宅升’平均2〜5年内，未見癌症復發。 實例5 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 适麓外(in vitro)試驗 在含實例1或2製得之產品之培養基中培養腫瘤細胞，結果 如下表所示。 10〜 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 x 297公釐） 504371 A7 _B7五、發明說明（7 ) 1 cc中細/ 包數目 對照組 試驗組 對Hep G2細胞生長抑制 125 100 U-937細胞生長抑制 200 150 腫瘤壞死因子（TNF-α)產生之促進 + +++ 巨噬細胞干擾素（INF-r )產生之促進 + ++ +:表陽性反應 實例6 對S-180肉瘤細胞發生之預防 試驗方法出處··中華癌醫會諸(J· Chinese Oncol. Soc.) 10(3)，14-23，1994 ;中華癌醫會諸(J. Chinese Oncol. Soc·) 11(3)，27-34, 1995。 以實例1製得之產品餵食純種近親交配的小白鼠（inbred mice)(每隻體重約30克），每隻每天银0·5毫升，歷經 一週後，經皮下注射S-180肉瘤細胞並繼續服用實例1製得 之產品；一個月内未發現S-180肉瘤細胞存在。 (請先閱讀背面之注意事 裝--- 寫本頁} t 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 〜11〜 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐）

Claims (1)

1. 504371 ,1 Α8 Ί/ ΓΡ·：； Β8 ( C8 六、申幂專利範圍 專利申請案第90122954號 ROC Patent Appln. No. 90122954 修正之申請專卹範g中文本-附件(一） Amended Claims in Chinese - Enel. I (民國91年5月30日送呈） (Submitted on May 30, 2002) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 1· 一種製造生機食品之方法，其係利用含有果膠之水果 作為培養基原料，以靈芝/批/心^之菌絲 體發酵培養，然後將培養物製成口服液、谬狀、果凍 狀、粉末、鍵劑、膠囊之產品型式。 2· 一種製造生機食品之方法，其係利用含有果膠之蔬菜 作為培養基原料’以靈芝lucidum之镜綠、 體發酵培養，然後將培養物製成口服液、膠狀、果凍 狀、粉末、錠劑、膠囊之產品型式。 一種製造生機食品之方法，其係利用含有果膠之果皮 作為培養基原料’以靈芝lucidum之嵐絲、 體發酵培養，然後將培養物製成口服液、膠狀、果凍 狀、粉末、錠劑、膠囊之產品型式。 一種製造生機食品之方法，其係利用含有果膠之水果 及蔬菜作為培養基原料’以靈芝•办m 之菌絲體發酵培養，然後將培養物製成口服液、膠 狀、果凍狀、粉末、鍵劑、膠囊之產品型式。 一種製造生機食品之方法，其係利用含有果膠之蔬菜 及果皮作為培養基原料’以靈芝/⑽/办所 之菌絲體發酵培養，然後將培養物製成口服液、膠 狀、果凍狀、粉末、錠劑、膠囊之產品型式。 一種製造生機食品之方法，其係利用含有果膠之水果 -12 - 本紙張尺度適財國國家標準(CNS)A4規格⑽χ 297公餐） 3. 4. 5. 6. 錦 J

   /、'申請專利範圍 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 及果皮作為培養基原料’以靈芝G 之菌絲體發酵培養，然後將培養物製成口服液、膠 狀、果凍狀、粉末、錠劑、膠囊之產品型式。 7· —種製造生機食品之方法，其係利用含有果膠之水 果、蔬菜及果皮作為培養基原料’以靈芝 之菌絲體發酵培養，然後將培養物製成口服 液、膠狀、果凍狀、粉末、錠劑、膠囊之產品型式。 8·根據申請專利範圍第1至7項中任一項之方法，其中 係將培養物直接調配製成口服用果菜汁靈芝液。 9.根據申請專利範圍第1至7項中任一項之方法，其中 係將培養物與習知之食品添加物適當混合後方製成口 服用果菜汁靈芝液。 1〇· —種液態生機食品，其係由果膠及靈芝根據申請專利 範圍第1項之方法製得，且包含靈芝蛋白質、半纖維 素(hemicellulose)之各種分解產物、活性六碳·相關之 化合物（Active Hexose Correlated Compound，AHCC)及 肌醇 P3(inositol P3)。 11· 一種固態生機食品，其係由果膠及靈芝根據申請專利 範圍第1項之方法製得，且包含靈芝蛋白質、半纖維 素(hemicellulose)之各種分解產物、活性六碳醣相關之 化合物（Active Hexose Correlated Compound，AHCC)及 肌醇 P3 (inositol P3)。 12·根據申請專利範圍第10或u項之生機食品，其係由 蔬果及靈芝製得。 -13 - 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS)A4規格（210x297公釐）