TW468047B - Methods for providing liquid and solid components of a sample for use in assay methods - Google Patents

Description

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五、發明說明（l) 鳘明範園 本發明 的範圍相 t明背景 以下是 個比本申 美國專 樣本，隨 個採樣裝 份可以和 對於乾式 美國專 素的裝置 此可以使 任何固態 樣本之中 :與用於不同試驗或分析方法的樣本收集與傳送 =技藝的討論，λ家公認它們之中沒有— 明專利範圍的技藝更先進。 :7〇9,838號是一個採樣裝f ’它可以採取 後再把所收集到的樣本傳送至試驗套件之中。這 f ^由一個小湯匙和一個把手所組成。湯匙的^ 把手分離，以便可以置放於試驗容器内。該裝置 顆粒狀樣本及溶於會揮發基質中的物質皆適用。 利第5, 46 0, 78 1號則是一個可從糞便中採樣血紅 。這個裝置包含一個可以抽取水分的纖維束，'因 不同黏性的糞便樣本中所採得的血紅素不會擴帶 物質到分析試驗中。本裝置必須多點置放於^便 ’以確保採樣量足夠。 美國專利第4, 225, 557號是一個由診斷試驗試紙條所組 成的裝置，它可以直接與糞便樣本接觸，隨後在試驗之 前，該裝置再塗覆或覆蓋於糞便檢體中。 | 另一個傳送糞便樣本方法的說明在美國專利第 | 4, 4 92, 1 24號中。本方法包含使用一個鈿長的把手和一個 圓柱體的核心裝置。核心裝置會推進到檢體中，以便填滿 檢體的核心樣本，隨後核心裝置會從檢體中取出，再從把 手上釋放至適當的容器中，以便於傳送或是進行試驗。樣 -"8 04? 五、發明說明（2) 裝置推進樣本釋出裝置或是從核心裝置 清洗樣本來完成。 狀：ϊ 3 η543,1 1 5號是—個由-根細長柄和-個溝 成的樣本操作褒置。㈣的樣本是在 任何的固態或半固態物質的樣本皆有用。于、收集 美國專利第5，〇 6 6，4 6 3號揭示一個由可以拿起糞便 =鉤所組成的糞便檢查裝置，它隨後 裝置的凹洞部份。 π心〜 W0 97/32529描述一個可從病人身上除去乾硬糞便的裝 有軟針的柄，可用於把壓縮的糞塊弄平。 包L”=，，847和5,215,7"號是-種定量=狀 區域：上 的試驗套件，@可以用小匙包覆在樣本 發明招i座 關本Ϊ供由固態及液態組份形成的樣本分裝方法相 質傳送至]=Ϊ 圍採樣法可以改善再現性及簡化檢體基 和固態組份，s此所收集的樣本可以代表二 會偵測到二：饭如ΐ有可具代表性的檢體，&應就可能 估的可"生r性的濃度於是就會有無效的偵測或是低 方法中ίi採檢法可用於傳送樣本到各種不同的試驗 化t分析方法可以是任何一個能夠定性或定量樣

第5頁 五、發明說明（3) 本中的一種或更多組份的方法。這些分析試驗方法包括 有，但並不只侷限於這些方法，簡單分光光度計分析法、 放射性同位素分析法、化學分析法、免疫分析法、核酸分 =法，及色層分析技術。這些試驗方法可以檢查不同分析 質的樣本，包括有潛血、難治梭菌毒素，或是從病人身上 所取得樣本的其他感染原，同時也可以分析樣本的化學組 成。 不s檢體的濃度或黏稠度如何，本發明都可以保持不 變、重複再現地將樣本傳送到試驗方法中，這就表示了本 發明超越目前採樣方法的優點。當樣本存留在採樣裝置 =，一直到傳送到反應或試驗管為止，本發明方法也可以 簡化或減少樣本物質暴露的機會。 首先，本發明的特色是，在採樣裝置支配樣本分裝及 ^用^分析方法之分裝樣本的條件之下，提供用於分析方 法之i含液態及固態成份皆有之樣本分裝的方 工置結構與樣本接·，和依樣本中液態及= 知=比例來配置分裝樣本中的液態及固態組份。 ，， 畜我們有興趣分析的物質可能是 的時候’r法直接可以拿到== …限於這些例子，化驗非生物來源的 泥狀：或懸洋物中一種或更多種的可能成份，丨生物 的1，糞便、痰、鼻腔洗出物、鼻腔抽出物、全、 血 '膿或其他的滲出物，或是組織均等質，，樣本分裝"是

胃6頁 五、發明說明（4) 該收集樣本的一部份，择士认 * 例如燒傷或傷口部的；部：可以是從原位取得， 或製備的管路中。孰去：一部份的樣本則取自人工 法。-般熟諸此鼓；；悉各種不同的取樣方 法可以是包含二疋分裝樣本所需要的樣本量。分析方 的方法一 “諸任何-種定性或定量分析質 定適當的分析方法。孩 可以因為所選擇的分析質來決 因為樣本是要與採樣裝置接 本中的液態和/或固能知於味飞u怠組伤，所以採樣樣 i 。彳目π媒+心伤，u形都會成為採樣裝置的附加 ;;二早的侧邊或旋轉採樣裝置的動#，可能必 熊組份而ώ Λ ί旎具有樣本中代表性成比例的液態和固 :固：《且广比二裝置。採樣裝置是要能依照樣本之液態 設計及配置的。那也就是％、中的所有液悲及固組份而來 止，只要它們存i t;%;”專送至分析方法中使用為 有液態及固態組份1謂；；分裝樣本中的所 意思就是說能夠代表這〜=:”和固態成比例的 只要採樣裂置取得了適：m中的相對含量。 給予分析方法使用;也就是\的樣八本上’分裝樣本就會提供 移出供分析方法使用。移/分λ太t曰從採樣裝置上 中使用到的採樣裝置採樣頌表^ °以疋直接與分析法 入分析方法隨後要使用的；4:接！ ’或是將採樣裝置浸 4夜中。溶液是内含在反應管路 五、發明說明（5) ‘ 之中的。這個溶液可以是八 取，或是用於分析法中的n二裝樣本中加強分析質的萃 單純是可從採樣裝置上有f式劑（試驗溶液），也可能只 裝置運送分裝樣本到溶液^ ^出^裝樣本的液體。從採樣 過程來加速，例如攪拌 可以藉由在反應管路中的物理 採樣裝置的較佳具體實f動和/或擠壓採樣農置。 來聚集細胞的；樣本是翼伟&例是刷狀物；刷狀物是設計用 素；分析法是光學免疫分批析法是用來偵測難治梭菌毒 或懸浮物；樣本是採自包括^樣本是非生物來源的泥狀物 物、全血、膿、細胞渗出物度、/腔洗出物、鼻腔抽出 分裝樣本包含將採樣裝置& 2組織均等質等分類；提供 樣裝置推入樣本中，在栉二式驗溶液中；接觸包括把採 出採樣裝置;物“策本值本中*轉㈣ 送到試驗表面。、 延到反應管路；分裝樣本直接傳 較佳的採樣裝置是一個 的是可以取得任何形能_ Ϊ物，雖然熟諳此藝者所讚賞 和固態組份：==工而且又能保持樣本中液態 與车如杜 里的樣本裝置。刷狀物的刷毛是直立地 的特性炎古i Γ般热諸此藝者是可^艮容易地根據所描述 :-個可以買得到的刷狀物或去建構一個有用的刷狀是 1 ，例如：所選擇刷狀物的形狀、刷狀物内的刷毛形 内的Γίϊ内刷毛的密卜所選擇刷狀物的長度、刷狀物 ^ , 度、刷毛的直徑、刷毛的物質組份、所選擇刷 狀物内刷毛的分布形態，及刷狀物把手的設計。 4 68 04? 五、發明說明（6) 刷狀物的較佳具體實施例是.設計用來聚集細胞。所謂 "刷狀物是設計用來聚集細胞"就是說刷狀物可以用來取 得細胞’例如取自子宮頸。這些刷狀物可以說是細胞學刷 狀物。舉例來說’有一種這種刷狀物就是C Y T 〇 B R U S HTM細胞 學刷狀物（M e d s c a η，A B，M a 1 m 〇，瑞典製）。關於細胞學刷 狀物已經有很多的設計了。這些設計中的一些在美國專利 第3, 881, 464號、美國專利第4, 759, 376號、美國專利第5, 133, 361 號、美國專利第 5, 7)3,369 號、及W0 91/16855 中 有說明。這些刷狀物設計成可從子宮頸和子宮頸内採樣以 用作癌症篩檢之用。這些刷狀物形狀是相當垂直的，而且 刷毛的長度及密度是一樣的。它們可以藉由修改刷毛的長 度和密度而決定形狀，也可能是刷毛以螺旋狀繞著刷狀物 柄。刷毛的長度可以改變。 較佳的採樣法是可以重覆再現地傳送糞便樣本，尤其是 |當這些樣本是同時含有液態和固態組份時的腹濕糞便樣 丨本。 I 眾所周知的’價測由難治梭菌所製造的毒素所用的分析 |法是，但並不僅^艮於，細胞毒性分析法、先疫分析法和光 !學免疫分析（〇 I )分析法。 光學免疫分析法是以光線與薄膜產生交互作用為基礎的 方法。與ί專膜父互作用的光線會經歷好幾種形態的調節， 通常疋相延遲’但疋也可.能是其他的效應。隨著薄膜裝置 i設計的不同，光線可能會通過分解光柵而產生可見光的改 I變，或是光線也可能會經過偏極作用的改變之後，再由橢

第9頁 4 6 8 0 4 7 五、發明說明（7) 一'' 圓對稱、對比橢圓對稱、固定角度橢圓對稱，或是其他的 橢圓對稱方法來測量。當產生可見光的改變時，可能可以 用簡單的反射光度計代替眼睛來做為顏色改變的偵測器。 薄膜的表面也可以用表面面型測定器、掃描隧道顯微鏡， 或是原子激發顯微鏡來評估。與薄膜產生交互作用所造成 的光線減弱可能是由於一個或更多波長的抑制或放大也 可能是單色光線或多色光線強度的改變，或由於光線偏極 化的改變（強度和/或偏極化的波長程度），或是其他的可 測量的現象所造成的·。這種減弱也可以是光線中這些改變 的混合所致。薄膜可能是無機的、有機的’或混合有機/ |無機薄膜。這種薄膜是建構在光學的支持之上的。光學所 |支持的是選擇與最後採用的分析法版本相容的偵測法。薄 i膜的選擇是與光學支持、彳貞測方法，和分析系統的其他元 I件（例如抗體受體層）都相容的。針對物質相容性的物質選 擇法與標準在美國專利第5, 550, 063號、美國專利第 5, 482, 830號、美國專利第5, 541，057號、美國專利第 | 5, 468, 60 6 號、美國專利第 5, 639, 67 1 號和R. M· Ostrof f 等 ί人在臨床化學1 998年第44卷203 1 -2 0 35頁中有提出。 | 非生物來源的較佳樣本是泥狀物或懸浮物。所謂"泥狀 i物"是指含有細小固態組份在内的液態。而m懸浮物”則是 j包括在液態中有分布著分開的細小固態物的兩種相系統， I例如液態藥物記方。所謂"非生物來源"是說來源不是從植 |物，也不是動物而來的意思。樣本也可以是任何一種生物 j來源的物質，最好是痰、鼻腔洗出物、鼻腔抽出物、全

I

第10頁 4 β 8 Ο 4 7 ________ ____________—-------------— — ' *—- -——— - - - _ _ -·· ··. ,.··...... 五、發明說明（8) 血、膿、細胞參出物’和組織均等質。 採樣裝置中所包含的分裝是可以傳送到反應管路’用以 預備在分析方法中使用的。反應管路是一種容器，它包括 有，但並不侷限於’聚丙稀官子、破璃製的管路、聚乙締 或石英。一旦樣本傳送到反應管路之後，樣本就必須快速 地分布到試驗溶液之中。這是可以藉由將含有分裝樣本在 内的採樣裝置部份浸入試驗溶液中來完成的。抑或是分敦 的樣本可以直接地傳送到"試驗表面"去，也就是可以執行 分析方法的任何表面，例如用於免疫分析法或核酸分析分 析裝置基底的膜’螢光分析法或顯微鏡評估所用的顯微鏡 玻月，或是微生物分析時所用的固態洋菜膠培養m。 組份。 本方法更進一步的較佳具體實施例是提供光學免疫法谓 測難治梭菌毒素所用的糞便樣本分裝，這包括了以採樣刷 狀物結構與糞便接觸’以及在採樣裝置支配樣本分裝及提 供用於難治梭菌毒性光學免疫分析法的條件之下，可以依 樣本_液態及固態比例來配置分裝糞便樣本中液態及固態 甚至分裝的較佳具體實施例是，在: 之耵先把分裝樣本傳送到反應管路中； 聚集細胞。 ，在執行光學免疫分析法 各中；刷狀物是設計用來 本發明的其他特色及優點可以從下述關於它的較佔艮雜

照會。 468047 五、發明說明（9) 體會施侧的說明 為了進一步地說明本發明的不同觀點和具體實施例以便 擴大視野，提供下列實例。 tALj刷狀物的挑選與構造 較佳的採樣裝置是一個刷狀物，例如從子宮頸聚集細胞 所用的細胞學刷狀物（Oosina，Englewood, NJ; Hardwood

Products, Co. , Guilford, ME; Medical Packaging

Corp·， Camarillo 明顯地有各種不同 專利範圍方法中。 態和固態組份的樣 慮之下’來加以決 地，一般熟諳此藝 狀物特性來設計一 是要直接放置在樣 隨後會插入試管或 合。樣本可能會隨 測的分析質，同時 後的試驗。使用刷 每一根刷毛都可以 體。物質可以安全 應管路中，絕不會 是採自人體，例如 前應該是無菌的。 ,CA)。然而對於實ϋ 的形態及設計的刷狀 一般熟諳此藝者是可 本及將先前討論過的 定哪一種市售的刷狀 者也可以根據樣本組 個適用的刷狀物。在 本之中，常會抽出定 其他反應管路之中， 著刷狀物而與溶液混 也製造了一致性的樣 狀物來採樣檢體的首 抓住刷毛之間的固體 地保有在刷狀物中， 暴露於操作採樣的人 傷口部位或鼻腔通道 &操作者而言，很 物都適用於本申請 以針對特定含有液 刷狀物性質列入考 物是適用的。相對 份及上述說明的刷 本發明中，刷狀物 量的樣本。刷狀物 再與液態試劑混 合，以便釋放出待 本基質以便進行隨 要好處是刷狀物的 、黏稠的物質和液 再傳送到適當的反 員。假如分裝樣本 ，刷狀物在使用之

4βΒ 047 五'發明說明（10) 市售有很多不同範圍的細胞學刷狀物。在選用市售設計 的或在設計一個新穎的刷狀物之時，都必須將用於收集分 裝樣本範圍是從含少量液態成份的固態樣本，還是到主要 是液態樣本的因素都加以考慮。選用刷狀物應該要考慮設 計的刷狀物 刷毛的密度 料成份，及 手設計也要 會接觸到樣 性，和穿透 須相容於樣 與反應基質 得，我們可 裝置的刷 而刷狀物部 度、刷毛在 刷毛可能從 連續性分布 長度更進一 或多個長度 毛間交錯。 刷毛的堅 直徑。大部 的原料也可 部份的形狀 、選用刷狀 刷毛在刷狀 加以考慮。 本。但是它 樣本需要多 本傳送到的 混合。假如 能需要一個 毛部份決定 份的長度、 刷狀物部份 刷狀物部份 °刷毛也可 步地決定刷 ’而且長度 硬度是取決 分市售的刷 以控制刷狀 、刷狀物内 物的長度、 物部份内的 把手應該要 也應該要夠 少壓力之下 反應管路， 樣本是直接 有彈性的把 了傳送到反 刷狀物部份 内的分布形 開始形成螺 能排成不連 狀物部份的 可能是一排 於製造刷毛 毛都是尼龍 物的厭水性 刷毛的形狀 刷毛的直徑 分布形態。 夠長到使操 堅固到不管 都不會弄斷 使得樣本可 傷口部位 〇 應管路的分 内刷毛長度 態決定刷狀 旋狀，這造 續的一排， 形狀。刷毛 排地交錯或 時所使用原 製的。製造 質。刷毛必 、刷狀物内 、刷毛的原 刷狀物的把 作者不可能 樣本的黏 。把手還必 以很容易地 或鼻腔取 裝樣本量。 、刷毛的密 物的形狀。 成了刷毛的 個別刷毛的 可能是一個 是一個個刷 料的成份和 刷毛所使用 須保持某種

第13頁 4 68 047 五、發明說明（11) 程度的堅硬度以便幫助穿透樣本及收集樣本。 制毛在製程中可以修剪成鈍頭末端或尖頭末端。尖頭 好處是當樣本固態黏滞性fe女Hi . . #、ra t _ 4 , , v 刀从凡頌冬喁或尖頭末端。尖頭求 端的好處是當樣本固態黏滯性較大時，方便穿過樣 置樣本。 ¥ 對於液態樣本較多時，刷毛的密度必須充足以便製造收 集位，。液體是藉由與刷毛產生靜電交互作用，再形成一 個封蓋而留置在刷毛之間，這是比空氣雨水之間的交互作 量。較多固態的樣本是由於黏稠性而很容易就 作別採樣應用的適當刷毛設計是要根據將刷狀物當 的樣木ί送設計的專業觀察來加以選擇的°已知樣本種類 圍都應該列入評估之中。這樣才』 足量的樣太σ 的樣本黏性之後，採樣設計仍能收集到 先天偵測上的而求置首先是取決於分析試驗的方法及 本量會比較=二一個非常靈敏的分析方法所需要的樣 分析法比較不ί: 法所需要的量少。—個非常靈敏的 物釋出所收隹择士的方法所需導入反應管路中以便從刷狀 要最佳化，以硿 j量要來的少，但是試驗試劑的量必須 試驗試劑可以勺保取少的添加試劑量能完成樣本的回收。 類、偵測試劑i Ϊ有1緩衝液、溶劑、清潔劑、酸類、鹼 純地幫助收隼描士。、試驗試劑可以溶解所收集的樣本，單 行後續的偵測。揭f懸洋狀態，或是修飾樣本組份以便進 及分析方法所έ回收的再現性必須通過樣本黏性範圍 所此谓測分析質的最小劑量的評估。 4 6 8 04 7 Γχ、發明說明（12) 一 我們所選擇的刷狀物必須相容於樣本及試驗試劑。這就 是說刷狀物必須不能釋出物質到樣本或是試驗試劑中，以 免干擾或抑制分析方法。刷狀物也不能溶於試驗試劑中， 除非我們能證明這種溶解不會影響試驗法中分析質的回 收刷狀物也必須不能在除去過程或與其他試驗試劑結合 枯殘留（分裝）樣本，而因此減少方法的敏感度。 根據上述的變數5兒明，熟諳此藝者應該可以選擇史計 一種刷狀物，以便提供不同黏性的廣大範圍樣本給不同分 析方法來使用。 狀：3 : 2物來收集樣本的方法是很單純的。•們控制刷 狀物的把手，而刷狀物的部份可以推入樣本中，以採 =置狀物部#。當我們所使用的刷狀物部：狗 長夺可此不須元全穿透樣本就可收集到足量的樣本。秋 未與樣本接冑的刷狀物物質卩能會變 二生1刷狀物穿透樣本，把手會旋轉以使刷狀 α促μ本的收集°刷狀物隨後離開 I古棘ΐ把刀裝的樣本傳送到反應管路。某些情形下，例 ’簡單的裝置就可以把樣本塗抹於像顯 微鏡玻片的反應表面上。反應管路中可能内含一種或 白ϋ驗試劑以促進附著於刷狀物的刷毛上的樣本釋出。刷 2物的採樣設計可以用於混合試驗試劑與樣本。依樣本^ 而’刷狀物可能需要有外在的搖動（例如攪拌、搖動、 形）以強調所有分裝樣本都進入反應混合物中。有一個方 便的方法是把採樣裳置和反應液體都放在叫固柔軟的聚丙

4 6 8 047 五、發明說明（13) ~ ~ J ::中’使用者可以壓擠管子側邊，於是刷狀物内的刷 毛冼=變形了。當刷狀物變形，分裝的樣本就釋放出來 —开/成均勻的昆合物之後’採樣裝置就可以丟棄 了。可丟棄式應該可以適合所有我們欲分析的任何形態樣 本的常規或環ί兄需求。試驗液體隨後可用預先選擇的分析 法來分析。 采樣方法 針對可能的收集樣本設計，不同的樣本黏性會出現各種 的採樣情況。以下實例是本申請專利範圍採樣法的使 I用=例，但並不僅限於只能應用於此。本採樣裝置可用於 i獲传前述所收集的分裝樣本，或適用於從燒傷或傷口部位 !或鼻通道來直接收集樣本以用作之後的培養或分析，亦可 I以用於從製造或製備的管路申採樣。本採樣裝置不應該沈 積j維’例如在體内從拭子進入收集部位時。 製造方法可以因黏性或固態成份改變而產生一個泥狀物 :的狀態5在製造方法的下一個步驟之前，或是在丟棄或丟 |棄過程之前’決定泥狀物内具有功能的一種或多種組份的 I組成可能是必需的。樣本可以是藥物製造過程中半合成的 泥狀物，它必須用像高壓液相色層分析法之類的分析法來 ；測試活性藥物組份的比例。 ； 土壤樣本會隨著樣本面積内的渥潤程度與污染物而改變 | ^點稠度。所以樣本如果是有一種或多種污染物的污染土 |壤樣本，可以用萃取和分析來觀測去污染的過程。礦區的 丨礦邊可以測試惡性金屬或毒性物質的殘留。礦區的泥狀物

第16頁 468 047 五、發明說明（14) 也可以在過程中測試回收 以應用在啤酒或酒類發酵過程中等。採樣方法可 集。酵母菌麵團可測試有 ^出現的酵母菌麵團的收 生存能力的物質可以 1 /亏染和/或生存能力。有 酵過程中，應該採樣製藥過程。在藥物發 生存能力。本採樣法也可以有機體來沣估污染和/或 菌或其他形態污举私 於採樣未加工過程肉類令生 品和飲料製造過程 录法也可以作為其他形態的食 之前或最後包裝罐頭二：別是嬰兒食品’在最後包裝 的採樣和傳送。 、、擇採樣。較佳的應用是糞便樣本 不同黏性樣本的採將姓 檢體的採樣對於彳p _ 7 ’。由糞便檢體來舉例說明。糞便 潛血提供直腸或^;=狀態是很重要的。舉例來說， 全的採取和便利的傳::5癌前狀況的指標。把糞便檢體安 體，尤其是和腹萬試驗方法是报固難的。翼便檢 性非常鬆散、近i液ί 311的範圍可以從成形的糞便到黏 送系統，它可以針重糞便。本發明提供一種單-的傳 就是說，糞便檢體的待：土不同黏性的.樣本來採樣，那也 可以傳送到分析方ί測分析質是液態和/或固態組份都 樣ί 的變異性而很難採樣的生物來源的 感染的種類包括有：：：吸道感染是很有用“。呼吸道 本方法對於採樣痰也心 呼吸道融合病毒、I冒病毒。 用。

第17頁 468 047 五、發明說明（15) 已知某些病人的腹瀉的起因的較佳分析質 製造的毒素。這個毒素的偵測可以用標準細 法、免疫分析法，或是大家最喜歡用的光學 (01 A@)。（請參閱美國專利第5, 486, 60 6號、 541，057號、和美國專利第5, 550, 063號）。 製造難治梭菌毒素所用的光學免疫分析法 組份。首先必需選擇光學受質。針對這個分 用已知反射係數的反射光學受質，例如石夕或 晶石夕的玻璃。因為這個試驗是單一用途的設 是可見訊號解釋的定量法。為了要產生這個 學受質必需塗上一層抗反射層（AR) °AR層所 需與光學受質的反射係數有關，而且依照下 理論厚度（用標準光學計算所決定的）來加以 t以是氮化矽、氮氧化矽、一氧化矽、雙氧化 鈦，和其他相同適合製造此層的原料。曾經 沈積氮化矽的蒸氣。 當光學裝置設計好了之後’光學表面會塗 的硅氧烷形成一層附屬層。這層附屬層製造 取試劑所喜歡的附著環境，以便在其上留薏 性。這個抓取試劑或受體原料可以從任何〜 待測分析質反應的生物成份中選取。曾經有 梭菌所產生毒素的多株抗體。這個抗體層的 附屬層的光學裝置浸入含有抗體的溶液中〜 間。當光學設計從覆蓋溶液中取出之後，立 是難治梭菌所 胞毒性分析 免疫分析法 美國專利第5， 需 要 用 到 下 列 析 法 可 以 選 塗 上 層 非 結 計 t 所 以 較 佳 可 見 訊 號 9 光 選 用 的 原 料 必 層 的 生 物 層 的 調 整 0 AR 層 可 錯 、 雙 氧 化 也 有 人 使 用 過 上 層 分 支 狀 了 ~ 個 生 物 抓 和 保 持 穩 定 種 能 專 的 與 人 選 用 過 難 治 用 法 是 把 塗 有 段 預 定 的 時 刻 用 蒸 餾 水 加

46804? 五、發明說明（16) 以清洗、弄乾，在塗上一層保護層以增進穩定性。這個完 成了的光學裝置隨後可以在個別的試驗表面内弄破以作成 一個塑膠的分析裝置。一般熟諳此藝者沿襲美國專利第5， 418’136號所揭示的就可以製造一個也可以產生可見的訊 號而用儀器讀出的其他光學免疫分析法裝置。 難治梭菌光學免疫分析法（CdTOX A 0ΙΑ)的操作法如 下：將採樣刷狀物插入糞便樣本中，再旋轉之使其刷毛充 滿糞便物質。在刷狀物的刷毛裝滿樣本之後，把刷狀物從 樣本中取出’相對於檢體容器壁離心旋轉以除去多餘物 質。刷狀物隨後會傳送到内含3 〇 0微升抗體與酵素接合物 的有彈性的聚丙烯反應管。我們用刷狀物來混合檢體和接 合物，壓擠管路之後丟棄刷狀物。〇 IA分析法是將一或兩 滴的檢體/接合物混合物傳送到〇 IA表面，在室溫下典養已 分鐘。假如檢體中含有難治梭菌毒素，在酵素接合^之間 會形成複合物，毒素和抗體會結合在0ΙΑ表面。〇lA表面用 鹽類緩衝液溶液清洗’用吸水紙弄乾。再添加一滴沈搬酵 素受質到0ΙΑ表面’在室溫下培養5分鐘。假如前述的複入 物出現，酵素就會與受質作用而形成沈澱產物。沈殿產^ 出現了會在0ΙΑ表面產生一個可見的薄膜。 實例4 :採耩刷狀物的使用 四種市售不同體積C參閱表1)的刷狀物之採樣懸浮物的 能力比較。使用的刷狀物是Med i ca 1 Packag i ng Corp. (MPC)(Camarill〇，CA)短型及標準型（std)和 Oos ina(Englewood, N. J.)短型和標準型。刷狀物是用來

第19頁 4 68 047 五、發明說明（17) ； - — 採樣以蛋白質、顆粒及其他原料所製成的懸浮物，、 供樣本黏性來模擬腹瀉的樣本。樣本黏稠^厚厚丄以便， 一種類型的十個刷狀物用來像上述難治梭菌分析中°每 來採裱懸浮物。用已經裝滿的刷狀物重量減去單獨二，2 的重量來計算所收集物質的重量（參閱表i)。變異係數的& 百分比代表的意思是以計算出來的採樣誤差除以標準差'。 如表1所顯示’刷狀物可以抓住的分裝樣本量隨著τ刷狀物 的設計而有不同；而令人驚訝的是，使用同一刷狀物收 樣本的方法所呈現的樣本收集變異非常小，那也就β '、 樣本收集量的結果非常具有再現性。 ^ π ’ 表1 MPC- 短型 Qosina- 短型 MPC-標準型 Qosina- 標準型 長度 12.0釐米 12.0釐米 19.0釐米 21.0釐米 底部直徑 6.5釐米 6.5釐米 6.5釐米 &〇釐米 尖端直徑 5·5釐米 5.0釐米 5.0釐米 5.0釐米 質量(公克） 0.26 0.28 0.38 0.50 ^ 0.34 0.31 0.38 0.54 0.29 0.32 0.38 0.64 0.31 0.32 0.39 0.57 0.29 0.34 0.41 0.56 0.31 0.29 0.40 0.62 0.31 0.30 0.36 0.52 0.29 0.25 0.38 0‘60 0.27 0.24 0.35 0.57 0.24 0.33 0.46 0.52 平均值 0.29 0.30 0.39 0.56 標準差 0.029 0.033 0.030 0.046 變異係數百分比 9.91% 11.16% 7.80% 8.11%

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Claims (1)

1. 4 68 047 _案號88122268_%年江月^日 修正_ 六、申請專利範圍. - 1. 一種提供用於分析方法中含有液態及固態成份樣本之 等份物的方法，其包括： 將樣本與取樣裝置接觸，其係配置用來傳送該樣本之等 份物至該取樣裝置，其中該等份物之液態及固態成份等比 例地代表該樣本之液態及固態成份，及 傳送所有或部份該等份物至該分析方法，其中傳送至該 分析方法之該等份物的液態與固態組份等比例地代表該樣 本之液態及固態成份。 2. 如申請專利範圍第1項的方法，其中該採樣裝置為刷 狀物。 3. 如申請專利範圍第2項的方法，其中該刷狀物是設計 用來聚集細胞的。 4. 如申請專利範圍第1項的方法，其中該樣本為糞便。 5. 如申請專利範圍第4項的方法，其中該分析法為用作 偵測難治梭菌毒素。 6. 如申請專利範圍第1項的方法，其中該分析法為光學 免疫分析法。 7. 如申請專利範圍第1項的方法，其中該樣本為非生物 來源的泥狀物或懸浮物。 8. 如申請專利範圍第1項的方法，其中該樣本係選自 痰、鼻腔洗出物、鼻腔抽出物、全血、膿、細胞滲出物及 組織均等質所組成之群組。 9. 如申請專利範圍第1項的方法，其中提供的該分裝樣 本包含將該採樣裝置浸入試驗溶液中。

   O:\61\61874.ptc 第1頁 2001.04.27. 022 d 6 8 047 案號88122268_和年年月^曰__ 六、申請專利範圍 ~ 10.如申請專利範圍第1項的方法，其中該接觸包含有將 該採樣裝置推入樣本中，於樣本中旋轉該採樣裝置，再把 採樣裝置從樣本中取出。 π.如申請專利範圍第1項的方法，其中該分裝樣本被傳 送到反應容器" 12.如申請專利範圍第1項的方法，其中該分裝樣本被直 接傳送到試驗表面。 1 3. —種提供用於光學免疫法以偵測難治梭菌毒素之等 份糞便樣本的方法，其包括： 在該採樣裝置支配上述樣本分裝的條件之下，將採樣刷 狀物結構與糞便接觸，和依該糞便樣本中液態及固態比例 來配置分裝液態及固態組份皆有的糞便樣本；以及 提供用於該難治梭菌毒素光學免疫分析法的分裝樣本。 14.如申請專利範圍第13項的方法，其中該分裝樣本是 在進行該光學免疫分析法之前傳送到反應容器中。 1 5.如申請專利範圍第1 3項的方法，其中該刷狀物是設 計用來聚集細胞的。

   O:\61\61874.ptc 第2頁 2001.04.27. 023 4 68 047 _案號88122268_%年江月^日 修正_ 六、申請專利範圍. - 1. 一種提供用於分析方法中含有液態及固態成份樣本之 等份物的方法，其包括： 將樣本與取樣裝置接觸，其係配置用來傳送該樣本之等 份物至該取樣裝置，其中該等份物之液態及固態成份等比 例地代表該樣本之液態及固態成份，及 傳送所有或部份該等份物至該分析方法，其中傳送至該 分析方法之該等份物的液態與固態組份等比例地代表該樣 本之液態及固態成份。 2. 如申請專利範圍第1項的方法，其中該採樣裝置為刷 狀物。 3. 如申請專利範圍第2項的方法，其中該刷狀物是設計 用來聚集細胞的。 4. 如申請專利範圍第1項的方法，其中該樣本為糞便。 5. 如申請專利範圍第4項的方法，其中該分析法為用作 偵測難治梭菌毒素。 6. 如申請專利範圍第1項的方法，其中該分析法為光學 免疫分析法。 7. 如申請專利範圍第1項的方法，其中該樣本為非生物 來源的泥狀物或懸浮物。 8. 如申請專利範圍第1項的方法，其中該樣本係選自 痰、鼻腔洗出物、鼻腔抽出物、全血、膿、細胞滲出物及 組織均等質所組成之群組。 9. 如申請專利範圍第1項的方法，其中提供的該分裝樣 本包含將該採樣裝置浸入試驗溶液中。

   O:\61\61874.ptc 第1頁 2001.04.27. 022 d 6 8 047 案號88122268_和年年月^曰__ 六、申請專利範圍 ~ 10.如申請專利範圍第1項的方法，其中該接觸包含有將 該採樣裝置推入樣本中，於樣本中旋轉該採樣裝置，再把 採樣裝置從樣本中取出。 π.如申請專利範圍第1項的方法，其中該分裝樣本被傳 送到反應容器" 12.如申請專利範圍第1項的方法，其中該分裝樣本被直 接傳送到試驗表面。 1 3. —種提供用於光學免疫法以偵測難治梭菌毒素之等 份糞便樣本的方法，其包括： 在該採樣裝置支配上述樣本分裝的條件之下，將採樣刷 狀物結構與糞便接觸，和依該糞便樣本中液態及固態比例 來配置分裝液態及固態組份皆有的糞便樣本；以及 提供用於該難治梭菌毒素光學免疫分析法的分裝樣本。 14.如申請專利範圍第13項的方法，其中該分裝樣本是 在進行該光學免疫分析法之前傳送到反應容器中。 1 5.如申請專利範圍第1 3項的方法，其中該刷狀物是設 計用來聚集細胞的。

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