TW202415398A - 甘草萃取物 - Google Patents
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- UHVMMEOXYDMDKI-JKYCWFKZSA-L zinc;1-(5-cyanopyridin-2-yl)-3-[(1s,2s)-2-(6-fluoro-2-hydroxy-3-propanoylphenyl)cyclopropyl]urea;diacetate Chemical compound [Zn+2].CC([O-])=O.CC([O-])=O.CCC(=O)C1=CC=C(F)C([C@H]2[C@H](C2)NC(=O)NC=2N=CC(=CC=2)C#N)=C1O UHVMMEOXYDMDKI-JKYCWFKZSA-L 0.000 description 1
Abstract
本發明提供一種甘草萃取物，其能夠用作多機能性原料。甘草萃取物包含： (A)選自由甘草酸、甘草酸衍生物、甘草次酸及甘草次酸衍生物所組成之群組中的一種以上； (B)(A)以外的甘草皂苷類；及， (C)甘草黃酮類；並且， (B)至少包含1.7質量%以上的甘草皂苷H2、0.2質量%以上的甘草皂苷G2、0.2質量%以上的馬其頓苷A， (C)至少包含0.1質量%以上的芹糖甘草苷、0.1質量%以上的芹糖異甘草苷、0.1質量%以上的異甘草苷。
Description
本發明關於一種甘草萃取物，其是萃取甘草的成分所獲得者。
甘草一直以來都被利用來作為食品添加物和醫藥品的原料之一。特別是，甘草所包含的甘草酸和甘草黃酮類的作用受到注目，有時會被用於特殊的用途。
例如，日本專利第6589102號(專利文獻1)中，記載有如下技術內容：甘草所包含的甘草酸受到注目，以目標為改善超排卵治療後所獲得的胚胎品質之哺乳動物用飼料添加劑與改善方法為目的，在直到回收胚胎的60～90天對黑毛和牛持續地餵給至少具有13％的甘草酸含量之甘草精華。
此外，例如日本特開平2-204417號公報(專利文獻2)中記載有如下技術內容：為了提供甘草疏水性黃酮製劑，將乙醇設為萃取溶液並使用吸附樹脂等來精製藉由甘草根粉碎物所獲得的萃取物，獲得甘草疏水性黃酮含量約50％的精製萃取物，並對其添加中鏈脂肪酸甘油三酯來製造乳化劑，然後使乳化劑乾燥來進行粉末化。
此外，日本特開2015-70823號公報(專利文獻3)中記載有一種果實或蔬菜的糖度提升劑及其製造方法、以及一種糖度提升方法，該等技術是利用甘草黃酮類作為有效成分，該甘草黃酮類包含於自甘草萃取液使甘草酸結晶後的結晶母液中。
日本特開2018-161144號公報(專利文獻4)中記載有一種健康肥胖維持劑，其含有甘草加工物作為有效成分，其中，甘草加工物記載為含有：甘草酸、22β-乙醯氧基甘草酸、甘草皂苷G2、甘草皂苷H2、甘草苷、甘草素、異甘草苷、異甘草素等。
日本特開2009-203182號公報(專利文獻5)中，提供一種食品組成物，其藉由使用含有甘草皂苷H2之甘草萃取物而具有優異的透明質酸酶抑制作用，並且記載為可解決粉刺、肌膚粗糙等的問題。
[先前技術文獻]
(專利文獻)
專利文獻1：日本專利第6589102號。
專利文獻2：日本特開平2-204417號公報。
專利文獻3：日本特開2015-70823號公報。
專利文獻4：日本特開2018-161144號公報。
專利文獻5：日本特開2009-203182號公報。
然而，以往的甘草萃取物，例如在同時發揮用以維持或提升哺乳動物或家畜的健康狀態所需的複數種機能的效果上仍不充分。
因此，本發明的目的在於提供一種甘草萃取物，其能夠用作多機能性原料。
[發明所欲解決的問題]
發明人致力於研究的結果，發現並非一直以來被利用來作為有效成分的甘草酸和甘草黃酮類各自以分別高純度使用、或以高濃度使用，而是藉由除了甘草酸與甘草黃酮類還有與甘草酸以外的甘草皂苷類的複合性作用，在各式各樣的用途中，能夠獲得無法由分別單獨使用的情況預期到的較高的效果，而能夠將甘草萃取物用作多機能性原料。基於以上的見解，本發明構成如下。
依據本發明的甘草萃取物包含：(A)選自由甘草酸、甘草酸衍生物、甘草次酸及甘草次酸衍生物所組成之群組中的一種以上；(B)上述(A)以外的甘草皂苷類；及，(C)甘草黃酮類；並且，(B)包含甘草皂苷H2、甘草皂苷G2和馬其頓苷 (Macedonoside)A。
藉由如此操作，能夠提供一種甘草萃取物，其能夠用作多機能性原料。
以下，一邊配合具體例一邊詳細地說明本發明的甘草萃取物。本發明不限於以下所示的實施形態，在不脫離本發明的技術思想的範圍內能進行各種變化。
本發明中所謂的甘草，意指屬於甘草屬的植物。甘草屬是豆科多年生草本植物，其自然生長於地中海區域、小亞細亞、俄羅斯南部、中亞、中國北部、北美洲等處。在本發明中能夠使用：Glycyrrhiza acanthocarpa、G.aspera、G.astragalina、G.bucharica、G.echinata(俄羅斯甘草)、G.eglandulosa、G.foetida、G.foetidissima、G.glabra(西班牙甘草)、G.gontscharovii、G.iconica 、 G.inflate、G.korshinskyi、G.lepidota(美國甘草)、G.pallidiflora、G.squamulosa、G.triphylla、G.uralensis(烏拉爾甘草)、G.yunnanensis、G.inflata(新疆甘草)。該等能夠使用1種或組合2種以上來使用。
本發明的甘草萃取物包含：(A)選自由甘草酸、甘草酸衍生物、甘草次酸及甘草次酸衍生物所組成之群組中的一種以上；(B)上述(A)以外的甘草皂苷類；及，(C)甘草黃酮類；並且，(B)包含甘草皂苷H2、甘草皂苷G2和馬其頓苷 (Macedonoside)A。
本發明中，甘草酸衍生物並無限定，例如是甘草酸二鉀。甘草次酸衍生物並無限定，例如是甘草次酸二鉀。本發明的甘草萃取物中，(A)較佳是甘草酸。甘草萃取物較佳是包含9質量%以上的(A)選自由甘草酸、甘草酸衍生物、甘草次酸及甘草次酸衍生物所組成之群組中的一種以上，更佳是包含10質量%以上，進一步較佳是包含14質量%以上，進一步更佳是包含15質量%以上。更具體而言，甘草萃取物較佳是包含9.7質量%以上的(A)選自由甘草酸、甘草酸衍生物、甘草次酸及甘草次酸衍生物所組成之群組中的一種以上，更佳是包含10.6質量%以上，進一步較佳是包含14.5質量%以上，特佳是包含15.3質量%以上。
甘草萃取物較佳是包含2質量%以上的上述(A)以外的甘草皂苷類，更佳是包含3質量%以上，進一步較佳是包含9質量%以上。更具體而言，甘草萃取物較佳是包含2.8質量%以上的上述(A)以外的甘草皂苷類，更佳是包含3.1質量%以上，進一步較佳是包含3.6質量%以上，特佳是包含9.7質量%以上。
(B)上述(A)以外的甘草皂苷類較佳是包含1.7質量%以上的甘草皂苷H2，更佳是包含2.1質量%以上，進一步較佳是包含2.9質量%以上，特佳是包含6.3質量%以上。
(B)上述(A)以外的甘草皂苷類較佳是包含0.2質量%以上的甘草皂苷G2，更佳是包含0.5質量%以上，特佳是包含0.8質量%以上。
(B)上述(A)以外的甘草皂苷類較佳是包含0.2質量%以上的馬其頓苷A，更佳是包含0.5質量%以上，進一步較佳是包含0.9質量%以上，特佳是包含2.6質量%以上。
(B)上述(A)以外的甘草皂苷類可包含甘草皂苷H2、甘草皂苷G2及馬其頓苷A以外的甘草皂苷類。
甘草萃取物較佳是包含4質量%以上的(C)甘草黃酮類，更佳是包含10質量%以上，進一步較佳是包含19質量%以上。更具體而言，甘草萃取物較佳是包含4.6質量%以上的上述(C)甘草黃酮類，更佳是包含4.7質量%以上，進一步較佳是包含10.8質量%以上，特佳是包含19.8質量%以上。
甘草萃取物較佳是包含芹糖甘草苷(liquiritin apioside)、甘草苷(liquiritin)、甘草素、芹糖異甘草苷(isoliquiritin apioside)、異甘草苷(isoliquiritin)、異甘草素作為(C)甘草黃酮類。作為(C)成分，也可包含其他甘草黃酮類。
(C)甘草黃酮類較佳是包含0.1質量%以上的芹糖甘草苷，更佳是包含0.9質量%以上，進一步較佳是包含2.4質量%以上，特佳是包含5.6質量%以上。
(C)甘草黃酮類較佳是包含0.1質量%以上的芹糖異甘草苷，更佳是包含0.4質量%以上，進一步較佳是包含1.8質量%以上。
(C)甘草黃酮類較佳是包含0.1質量%以上的異甘草苷，更佳是包含0.3質量%以上，進一步較佳是包含2.7質量%以上。
(C)甘草黃酮類較佳是包含0.9質量%以上的甘草苷，更佳是包含2.1質量%以上，進一步較佳是包含5.7質量%以上，特佳是包含7.9質量%以上。
(C)甘草黃酮類較佳是包含0.2質量%以上的甘草素，更佳是包含1.1質量%以上，進一步較佳是包含1.3質量%以上，特佳是包含2.0質量%以上。
(C)甘草黃酮類較佳是包含0.1質量%以上的異甘草素，更佳是包含0.5質量%以上，進一步較佳是包含1.2質量%以上，特佳是包含2.0質量%以上。
甘草萃取物的(A)、(B)、(C)與各成分的含量，能夠以任意組合上述數值。
例如，甘草萃取物較佳是：包含1.7質量%以上的甘草皂苷H2，包含0.2質量%以上的甘草皂苷G2、包含0.2質量%以上的馬其頓苷A，包含0.1質量%以上的芹糖甘草苷，包含0.1質量%以上的芹糖異甘草苷，包含0.1質量%以上的異甘草苷。甘草萃取物進一步較佳是包含9.7質量%以上的(A)選自由甘草酸、甘草酸衍生物、甘草次酸及甘草次酸衍生物所組成之群組中的一種以上。甘草萃取物進一步較佳是包含2.1質量%以上的甘草苷。甘草萃取物進一步較佳是包含1.1質量%以上的甘草素。甘草萃取物進一步較佳是包含0.5質量%以上的異甘草素。甘草萃取物較佳是包含2.8質量%以上的(B)上述(A)以外的甘草皂苷類。甘草萃取物較佳是包含4.7質量%以上的(C)甘草黃酮類。
此外，甘草萃取物較佳是：包含1.7質量%以上的甘草皂苷H2，包含0.2質量%以上的甘草皂苷G2、包含0.9質量%以上的馬其頓苷A，包含0.1質量%以上的芹糖甘草苷，包含0.1質量%以上的芹糖異甘草苷，包含0.1質量%以上的異甘草苷。甘草萃取物進一步較佳是包含15.3質量%以上的(A)選自由甘草酸、甘草酸衍生物、甘草次酸及甘草次酸衍生物所組成之群組中的一種以上。甘草萃取物進一步較佳是包含2.1質量%以上的甘草苷。甘草萃取物進一步較佳是包含1.1質量%以上的甘草素。甘草萃取物進一步較佳是包含1.2質量%以上的異甘草素。甘草萃取物較佳是包含2.8質量%以上的(B)上述(A)以外的甘草皂苷類。甘草萃取物較佳是包含4.7質量%以上的(C)甘草黃酮類。
此外，甘草萃取物較佳是：包含2.9質量%以上的甘草皂苷H2，包含0.5質量%以上的甘草皂苷G2、包含0.2質量%以上的馬其頓苷A，包含0.9質量%以上的芹糖甘草苷，包含0.1質量%以上的芹糖異甘草苷，包含0.1質量%以上的異甘草苷。甘草萃取物進一步較佳是包含9.7質量%以上的(A)選自由甘草酸、甘草酸衍生物、甘草次酸及甘草次酸衍生物所組成之群組中的一種以上。甘草萃取物進一步較佳是包含7.9質量%以上的甘草苷。甘草萃取物進一步較佳是包含1.3質量%以上的甘草素。甘草萃取物進一步較佳是包含0.5質量%以上的異甘草素。甘草萃取物較佳是包含3.6質量%以上的(B)上述(A)以外的甘草皂苷類。甘草萃取物較佳是包含10.8質量%以上的(C)甘草黃酮類。
此外，甘草萃取物較佳是：包含6.3質量%以上的甘草皂苷H2，包含0.8質量%以上的甘草皂苷G2、包含2.6質量%以上的馬其頓苷A，包含5.6質量%以上的芹糖甘草苷，包含1.8質量%以上的芹糖異甘草苷，包含2.7質量%以上的異甘草苷。甘草萃取物進一步較佳是包含14.5質量%以上的(A)選自由甘草酸、甘草酸衍生物、甘草次酸及甘草次酸衍生物所組成之群組中的一種以上。甘草萃取物進一步較佳是包含5.7質量%以上的甘草苷。甘草萃取物進一步較佳是包含2.0質量%以上的甘草素。甘草萃取物進一步較佳是包含2.0質量%以上的異甘草素。甘草萃取物較佳是包含9.7質量%以上的(B)上述(A)以外的甘草皂苷類。甘草萃取物較佳是包含19.8質量%以上的(C)甘草黃酮類。
本發明的甘草萃取物是萃取、分離、精製甘草的成分所獲得的甘草精華等的甘草萃取物。甘草萃取物的形態並無限定，可依據性質和用途選擇糖漿狀、黏稠性液體、液體、懸浮液、粉末、顆粒、錠劑、球狀、團狀等。甘草萃取物的形態較佳是粉末。
作為本發明的甘草萃取物的一例，說明甘草萃取物的製造方法的一例。本發明的甘草萃取物的製造步驟較佳是包含步驟A～C中的至少一步驟。
步驟A
步驟A是從甘草根獲得萃取液的步驟。將1種或2種以上的甘草的根進行乾燥然後粉碎，添加水及氨而從甘草根獲得萃取液。對萃取液添加硫酸來使其沉澱，然後分離為黏稠精華與上清液。將黏稠精華乾燥，然後將所獲得的一次萃取物設為甘草萃取物(濃縮甘草)。
步驟B
步驟B是分離精製步驟。將由步驟A所獲得的濃縮甘草溶解於乙醇水溶液中，然後過濾而去除不溶物質。對所獲得的萃取液添加氨，使甘草皂苷結晶(結晶化)為銨鹽，進行過濾將結晶與萃取母液分離。將萃取母液進行減壓濃縮來回收乙醇，然後添加碳酸鈉或碳酸鉀而將pH值調整為6～7。將所獲得的濃縮液利用噴霧乾燥進行乾燥、混合，而獲得甘草萃取物。
步驟C
步驟C是另外的分離精製步驟。其對由步驟B所獲得的萃取母液添加活性碳來去除雜質，然後將所獲得的液體利用噴霧乾燥進行乾燥，即能夠獲得甘草萃取物。
甘草萃取物，例如可以是僅利用步驟A所製成的甘草萃取物，也可以是連續實行步驟A和步驟B所製成的甘草萃取物，也可以是連續實行步驟A～C所製成的甘草萃取物，也可以是僅利用步驟A所製成的甘草萃取物與連續實行步驟A、步驟B所製成的甘草萃取物之混合物，也可以是僅利用步驟A所製成的甘草萃取物與連續實行步驟A～C所製成的甘草萃取物之混合物，也可以是僅利用步驟A所製成的甘草萃取物、連續實行步驟A和步驟B所製成的甘草萃取物及連續實行步驟A～C所製成的甘草萃取物之混合物，也可以是連續實行步驟A和步驟B所製成的甘草萃取物與連續實行步驟A～C所製成的甘草萃取物之混合物。此外，重複各自步驟的次數也為任意。此外，甘草萃取物也可以是混合所製成的甘草萃取物，其混合有使用某種原料甘草並利用上述任一步驟所製成的甘草萃取物與1種以上的使用另外的原料甘草並利用上述步驟所製成的甘草萃取物。
甘草萃取物可依據需要進行包裝。
甘草萃取物的萃取溶劑並無限定，能夠使用例如：水、醇(例如：甲醇、乙醇、正丙醇、正丁醇等)、丙酮、乙酸乙酯等。此外，當要獲得乾燥粉末時，能夠對於上述甘草萃取物使用例如減壓乾燥和噴霧乾燥等習知的手法。
在甘草萃取物的製造中，能夠以各成分成為期望的濃度的方式，重複及/或省略步驟A～C的各步驟。此外，也能夠以各成分成為期望的濃度的方式，混合由步驟A～C的各步驟所獲得的甘草萃取物而獲得新的甘草萃取物。
本發明的甘草萃取物能夠直接、或添加其他成分和添加物地作成食品、營養補充品或飼料添加劑等來使用。例如，組合甘草萃取物與甘草根粉末來作成甘草加工物使用，該甘草根粉末是粉碎乾燥的甘草根而成。
能夠將本發明的甘草萃取物直接、或添加其他成分和添加物地製造營養補充品或飼料添加劑。藉由將本發明的甘草萃取物添加至飼料中作為營養補充品或飼料添加劑，或者藉由將包含本發明的甘草萃取物之營養補充品或飼料添加劑添加至飼料中，能夠同時對飼料賦予用以維持並提升哺乳動物或家畜的健康所需的複數種機能。本發明的營養補充品或飼料添加劑中的甘草萃取物的含量可以是100質量%。
本發明中，所謂哺乳動物並無特別限定，例如是猴、狗、貓、山羊、綿羊、豬、牛、豚鼠、兔子、小鼠、大鼠或人類，較佳是牛。本發明中，在家畜中除了哺乳動物以外，還包含雞、鴿子、鴨等鳥類。
本發明中，所謂飼料，意指適於或者意圖使哺乳動物或家畜進行攝取的任何化合物、調製品、混合物或組成物。本發明中所謂的飼料添加劑，是被利用來添加至餌(飼料)來保持飼料的品質和作為補充營養的添加劑，該餌是以對家畜等供給營養為目的所使用者。
營養補充品或飼料添加劑的劑型並無限定，可依據性質和用途選擇糖漿狀、黏稠性液體、液體、懸浮液、粉末、顆粒、錠劑、球狀、團狀等。
營養補充品或飼料添加劑中的本發明的甘草萃取物的含量並無限定，較佳是1 g/天/頭以上，並且較佳是小於10 g/天/頭，更佳是5 g/天/頭以下。以往被用作飼料添加劑的甘草萃取物例如是以10～40 g/天/頭的量進行添加，但是本發明的甘草萃取物能夠以更少的添加量對飼料賦予複數種機能。
換句話說，當對哺乳動物或家畜給予1 g/天/頭以上的本發明的甘草萃取物時，就會給予0.017 g/天/頭以上的甘草皂苷H2、0.002 g/天/頭以上的甘草皂苷G2、0.002 g/天/頭以上的馬其頓苷A、且0.001 g/天/頭以上的芹糖甘草苷、0.001 g/天/頭以上的芹糖異甘草苷、0.001 g/天/頭以上的異甘草苷。
當對哺乳動物或家畜給予5 g/天/頭以上的本發明的甘草萃取物時，就會給予0.085 g/天/頭以上的甘草皂苷H2、0.01 g/天/頭以上的甘草皂苷G2、0.01 g/天/頭以上的馬其頓苷A、且0.005 g/天/頭以上的芹糖甘草苷、0.005 g/天/頭以上的芹糖異甘草苷、0.005 g/天/頭以上的異甘草苷。
當對哺乳動物或家畜給予10 g/天/頭以上的本發明的甘草萃取物時，就會給予0.17 g/天/頭以上的甘草皂苷H2、0.02 g/天/頭以上的甘草皂苷G2、0.02 g/天/頭以上的馬其頓苷A、且0.01 g/天/頭以上的芹糖甘草苷、0.01 g/天/頭以上的芹糖異甘草苷、0.01 g/天/頭以上的異甘草苷。
對於哺乳動物或家畜，較佳是給予0.017 g/天/頭以上的甘草皂苷H2，更佳是給予0.02 g/天/頭以上，進一步較佳是給予0.029 g/天/頭以上，特佳是給予0.063 g/天/頭以上。
對於哺乳動物或家畜，較佳是給予0.002 g/天/頭以上的甘草皂苷G2，更佳是給予0.005 g/天/頭以上，進一步較佳是給予0.008 g/天/頭以上。
對於哺乳動物或家畜，較佳是給予0.002 g/天/頭以上的馬其頓苷A，更佳是給予0.005 g/天/頭以上，進一步較佳是給予0.009 g/天/頭以上，特佳是給予0.026 g/天/頭以上。
對於哺乳動物或家畜，較佳是給予0.001 g/天/頭以上的芹糖甘草苷，更佳是給予0.009 g/天/頭以上，進一步較佳是給予0.024 g/天/頭以上，特佳是給予0.056 g/天/頭以上。
對於哺乳動物或家畜，較佳是給予0.001 g/天/頭以上的芹糖異甘草苷，更佳是給予0.004 g/天/頭以上，進一步較佳是給予0.018 g/天/頭以上。
對於哺乳動物或家畜，較佳是給予0.001 g/天/頭以上的異甘草苷，更佳是給予0.003 g/天/頭以上，進一步較佳是給予0.027 g/天/頭以上。
對於哺乳動物或家畜，較佳是給予0.009 g/天/頭以上的甘草苷，更佳是給予0.021 g/天/頭以上，進一步較佳是給予0.057 g/天/頭以上，特佳是給予0.079 g/天/頭以上。
對於哺乳動物或家畜，較佳是給予0.002 g/天/頭以上的甘草素，更佳是給予0.011 g/天/頭以上，進一步較佳是給予0.013 g/天/頭以上，特佳是給予0.020 g/天/頭以上。
對於哺乳動物或家畜，較佳是給予0.001 g/天/頭以上的異甘草素，更佳是給予0.005 g/天/頭以上，進一步較佳是給予0.012 g/天/頭以上，特佳是給予0.020 g/天/頭以上。
對於哺乳動物或家畜，較佳是給予0.09 g/天/頭以上的(A)選自由甘草酸、甘草酸衍生物、甘草次酸及甘草次酸衍生物所組成之群組中的一種以上，更佳是給予0.14 g/天/頭以上，進一步較佳是給予0.15 g/天/頭以上。
對於哺乳動物或家畜，較佳是給予0.02 g/天/頭以上的(B)上述(A)以外的甘草皂苷類，更佳是給予0.03 g/天/頭以上，進一步較佳是給予0.09 g/天/頭以上。
對於哺乳動物或家畜，較佳是給予0.04 g/天/頭以上的(C)甘草黃酮類，更佳是給予0.10 g/天/頭以上，進一步較佳是給予0.19 g/天/頭以上。
對哺乳動物或家畜給予的(A)、(B)、(C)與各成分的量，能夠任意地組合上述數值。
例如甘草萃取物較佳是給予0.017 g/天/頭以上的甘草皂苷H2、0.002 g/天/頭以上的甘草皂苷G2、0.002 g/天/頭以上的馬其頓苷A、0.001 g/天/頭以上的芹糖甘草苷、0.001 g/天/頭以上的芹糖異甘草苷、0.001 g/天/頭以上的異甘草苷。甘草萃取物進一步較佳是給予0.097 g/天/頭以上的(A)選自由甘草酸、甘草酸衍生物、甘草次酸及甘草次酸衍生物所組成之群組中的一種以上。甘草萃取物進一步較佳是給予0.021 g/天/頭以上的甘草苷。甘草萃取物進一步較佳是給予0.011 g/天/頭以上的甘草素。甘草萃取物進一步較佳是給予0.005 g/天/頭以上的異甘草素。甘草萃取物較佳是給予0.028 g/天/頭以上的(B)上述(A)以外的甘草皂苷類。甘草萃取物較佳是給予0.047 g/天/頭以上的(C)甘草黃酮類。
此外，甘草萃取物較佳是給予0.017 g/天/頭以上的甘草皂苷H2、0.002 g/天/頭以上的甘草皂苷G2、0.009 g/天/頭以上的馬其頓苷A、0.001 g/天/頭以上的芹糖甘草苷、0.001 g/天/頭以上的芹糖異甘草苷、0.001 g/天/頭以上的異甘草苷。甘草萃取物進一步較佳是給予0.153 g/天/頭以上的(A)選自由甘草酸、甘草酸衍生物、甘草次酸及甘草次酸衍生物所組成之群組中的一種以上。甘草萃取物進一步較佳是給予0.021 g/天/頭以上的甘草苷。甘草萃取物進一步較佳是給予0.011 g/天/頭以上的甘草素。甘草萃取物進一步較佳是給予0.012 g/天/頭以上的異甘草素。甘草萃取物較佳是給予0.028 g/天/頭以上的(B)上述(A)以外的甘草皂苷類。甘草萃取物較佳是給予0.047 g/天/頭以上的(C)甘草黃酮類。
此外，甘草萃取物較佳是給予0.029 g/天/頭以上的甘草皂苷H2、0.005 g/天/頭以上的甘草皂苷G2、0.002 g/天/頭以上的馬其頓苷A、0.009 g/天/頭以上的芹糖甘草苷、0.001 g/天/頭以上的芹糖異甘草苷、0.001 g/天/頭以上的異甘草苷。甘草萃取物進一步較佳是給予0.097 g/天/頭以上的(A)選自由甘草酸、甘草酸衍生物、甘草次酸及甘草次酸衍生物所組成之群組中的一種以上。甘草萃取物進一步較佳是給予0.079 g/天/頭以上的甘草苷。甘草萃取物進一步較佳是給予0.013 g/天/頭以上的甘草素。甘草萃取物進一步較佳是給予0.005 g/天/頭以上的異甘草素。甘草萃取物較佳是給予0.036 g/天/頭以上的(B)上述(A)以外的甘草皂苷類。甘草萃取物較佳是給予0.108 g/天/頭以上的(C)甘草黃酮類。
此外，甘草萃取物較佳是給予0.063 g/天/頭以上的甘草皂苷H2、0.008 g/天/頭以上的甘草皂苷G2、0.026 g/天/頭以上的馬其頓苷A、0.056 g/天/頭以上的芹糖甘草苷、0.018 g/天/頭以上的芹糖異甘草苷、0.027 g/天/頭以上的異甘草苷。甘草萃取物進一步較佳是給予0.145 g/天/頭以上的(A)選自由甘草酸、甘草酸衍生物、甘草次酸及甘草次酸衍生物所組成之群組中的一種以上。甘草萃取物進一步較佳是給予0.057 g/天/頭以上的甘草苷。甘草萃取物進一步較佳是給予0.020 g/天/頭以上的甘草素。甘草萃取物進一步較佳是給予0.020 g/天/頭以上的異甘草素。甘草萃取物較佳是給予0.097 g/天/頭以上的(B)上述(A)以外的甘草皂苷類。甘草萃取物較佳是給予0.198 g/天/頭以上的(C)甘草黃酮類。
營養補充品或飼料添加劑中可任意地包含水溶性膳食纖維。水溶性膳食纖維是若添加於水中會呈具黏性的膠狀。作為水溶性膳食纖維並無限定，能夠使用車前子種皮(車前草)、鹿角菜膠、黃原膠、凝乳膠、果膠、阿拉伯膠、海藻酸、甲殼素、殼聚醣、瓜爾膠、葡甘聚醣、結冷膠、塔拉膠、羅望子膠、黃蓍膠、普魯蘭多醣、難消化性糊精、聚葡萄糖等，較佳是使用葡甘聚醣。葡甘聚醣可利用水或含水乙醇等進行精製後使用，也可以使用蒟蒻粉來作為葡甘聚醣含有物。一般而言，蒟蒻粉的平均粒徑為約420μm(全部通過篩網#35目)，粒徑較大，但是在本發明的飼料添加劑中較佳是使用平均粒徑為約177μm(全部通過篩網#80目)以下的蒟蒻粉或粉狀的葡甘聚醣。藉由如此設定，粒子的表面積會變大，與水的親和性會變高，葡甘聚醣的膨潤速度會變快。藉由添加葡甘聚醣，能夠提高甘草加工物的整腸作用。
甘草萃取物與水溶性膳食纖維，在本發明的營養補充品或飼料添加劑中，較佳是甘草萃取物：水溶性膳食纖維以10：90～40：60的質量比包含。
本發明的營養補充品或飼料添加劑較佳是進一步包含澱粉分解物。包含澱粉分解物時，甘草萃取物：水溶性膳食纖維：澱粉分解物較佳是以10：30：60的質量比包含。
藉由對哺乳動物或家畜給予本發明的甘草萃取物或包含甘草萃取物之營養補充品或飼料添加劑，而能夠藉由哺乳動物或家畜的選自由餌食攝取量的增量、血液中的總膽固醇值的增加、血液中的維生素A值的增加、血液中的GOT值的降低、體重的增加、腹瀉的預防、腹瀉的治療天數的降低、感冒的預防及感冒的治療天數的降低所組成的群組中的至少一種作用，來以用以改善健康狀態的方式給予甘草萃取物或包含甘草萃取物之營養補充品或飼料添加劑。
本發明的甘草萃取物或包含甘草萃取物之營養補充品或飼料添加劑所給予的哺乳動物或家畜，較佳是肉品生產用途的家畜，而能夠用以增加屠體重、改善屠宰率及/或降低肉畜的肝臟廢棄率地給予甘草萃取物或包含甘草萃取物之營養補充品或飼料添加劑。
本發明的甘草萃取物或包含甘草萃取物之營養補充品或飼料添加劑所給予的哺乳動物或家畜，較佳是肉品生產用途的家畜，而能夠用以使飼料效率提升地給予甘草萃取物或包含甘草萃取物之營養補充品或飼料添加劑。
若統整本發明，如下所述。
(1) 在一態樣中，依據本發明的甘草萃取物包含：(A)選自由甘草酸、甘草酸衍生物、甘草次酸及甘草次酸衍生物所組成之群組中的一種以上；(B)上述(A)以外的甘草皂苷類；及，(C)甘草黃酮類；並且，(B)至少包含1.7質量%以上的甘草皂苷H2、0.2質量%以上的甘草皂苷G2、0.2質量%以上的馬其頓苷A，(C)至少包含0.1質量%以上的芹糖甘草苷、0.1質量%以上的芹糖異甘草苷、0.1質量%以上的異甘草苷。
(2) 較佳是：在依據本發明的甘草萃取物中，(B)至少包含1.7質量%以上的甘草皂苷H2、0.2質量%以上的甘草皂苷G2、0.9質量%以上的馬其頓苷A，(C)至少包含0.1質量%以上的芹糖甘草苷、0.1質量%以上的芹糖異甘草苷、0.1質量%以上的異甘草苷。
(3) 較佳是：在依據本發明的甘草萃取物中，(B)至少包含2.9質量%以上的甘草皂苷H2、0.5質量%以上的甘草皂苷G2、0.2質量%以上的馬其頓苷A，(C)至少包含0.9質量%以上的芹糖甘草苷、0.1質量%以上的芹糖異甘草苷、0.1質量%以上的異甘草苷。
(4) 較佳是：在依據本發明的甘草萃取物中，(B)至少包含2質量%以上的甘草皂苷H2、0.5質量%以上的甘草皂苷G2、0.5質量%以上的馬其頓苷A，(C)至少包含2.4質量%以上的芹糖甘草苷、0.4質量%以上的芹糖異甘草苷、0.3質量%以上的異甘草苷。
(5) 較佳是：在依據本發明的甘草萃取物中，(B)至少包含6.3質量%以上的甘草皂苷H2、0.8質量%以上的甘草皂苷G2、2.6質量%以上的馬其頓苷A，(C)至少包含5.6質量%以上的芹糖甘草苷、1.8質量%以上的芹糖異甘草苷、2.7質量%以上的異甘草苷。
(6) 較佳是：在依據本發明的甘草萃取物中，包含9質量%以上的(A)及/或2質量%以上的(B)及/或4質量%以上的(C)。
(7) 較佳是：在依據本發明的甘草萃取物中，包含15質量%以上的(A)及/或2質量%以上的(B)及/或4質量%以上的(C)。
(8) 較佳是：在依據本發明的甘草萃取物中，包含9質量%以上的(A)及/或3質量%以上的(B)及/或10質量%以上的(C)。
(9) 較佳是：在依據本發明的甘草萃取物中，包含14質量%以上的(A)及/或9質量%以上的(B)及/或19質量%以上的(C)。
(10) 較佳是：依據本發明的哺乳動物或家畜的飼料添加劑，其包含上述(1)～(9)中任一項所述之甘草萃取物。
(11) 較佳是：依據本發明的飼料添加劑中，包含水溶性膳食纖維。
(12) 較佳是：依據本發明的飼料添加劑以甘草萃取物：水溶性膳食纖維=10：90～40：60的質量比包含甘草萃取物與水溶性膳食纖維。
(13) 較佳是：依據本發明的飼料添加劑中，水溶性膳食纖維是葡甘聚醣。
(14) 較佳是：依據本發明的哺乳動物或家畜的飼養方法，藉由對哺乳動物或家畜給予上述(10)所述之飼料添加劑，而藉由哺乳動物或家畜的選自由餌食攝取量的增量、血液中的總膽固醇值的增加、血液中的維生素A值的增加、血液中的GOT值的降低、體重的增加、腹瀉的預防、腹瀉的治療天數的降低、感冒的預防及感冒的治療天數的降低所組成的群組中的至少一種作用，來改善健康狀態。
(15) 較佳是：在依據本發明的哺乳動物或家畜的飼養方法中，哺乳動物或家畜是肉品生產用途的家畜，藉由對哺乳動物或家畜給予上述(10)所述之飼料添加劑，來增加屠體重、改善屠宰率及/或降低肉畜的肝臟廢棄率。
(16) 較佳是：在依據本發明的使飼料效率增大的方法中，哺乳動物或家畜是肉品生產用途的家畜，藉由對哺乳動物或家畜給予上述(10)所述之飼料添加劑，來使飼料效率增加。
(17) 另一態樣中，依據本發明的改善哺乳動物或家畜的健康狀態的方法，是如下方法：藉由對哺乳動物或家畜給予甘草萃取物，該甘草萃取物含有(A)選自由甘草酸、甘草酸衍生物、甘草次酸及甘草次酸衍生物所組成之群組中的一種以上、(B)(A)以外的甘草皂苷類及(C)甘草黃酮類，並且，(B)至少包含甘草皂苷H2、甘草皂苷G2、馬其頓苷A，(C)至少包含芹糖甘草苷、芹糖異甘草苷、異甘草苷，而對哺乳動物或家畜給予0.017 g/天/頭以上的甘草皂苷H2、0.002 g/天/頭以上的甘草皂苷G2及0.002 g/天/頭以上的馬其頓苷A、且0.001 g/天/頭以上的芹糖甘草苷、0.001 g/天/頭以上的芹糖異甘草苷及0.001 g/天/頭以上的異甘草苷，藉此至少藉由哺乳動物或家畜的選自由餌食攝取量的增量、血液中的總膽固醇值的增加、血液中的維生素A值的增加、血液中的GOT值的降低、體重的增加、腹瀉的預防、腹瀉的治療天數的降低、感冒的預防及感冒的治療天數的降低所組成的群組中的至少一種作用，來改善哺乳動物或家畜的健康狀態。
(18) 較佳是：依據本發明的方法包含對哺乳動物或家畜給予0.017 g/天/頭以上的甘草皂苷H2、0.002 g/天/頭以上的甘草皂苷G2、0.009 g/天/頭以上的馬其頓苷A、且0.001 g/天/頭以上的芹糖甘草苷、0.001 g/天/頭以上的芹糖異甘草苷、0.001 g/天/頭以上的異甘草苷的步驟。
(19) 較佳是：依據本發明的方法包含對哺乳動物或家畜給予0.029 g/天/頭以上的甘草皂苷H2、0.005 g/天/頭以上的甘草皂苷G2、0.002 g/天/頭以上的馬其頓苷A、且0.009 g/天/頭以上的芹糖甘草苷、0.001 g/天/頭以上的芹糖異甘草苷、0.001 g/天/頭以上的異甘草苷的步驟。
(20) 較佳是：依據本發明的方法包含對哺乳動物或家畜給予0.02 g/天/頭以上的甘草皂苷H2、0.005 g/天/頭以上的甘草皂苷G2、0.005 g/天/頭以上的馬其頓苷A、且0.024 g/天/頭以上的芹糖甘草苷、0.004 g/天/頭以上的芹糖異甘草苷、0.003 g/天/頭以上的異甘草苷的步驟。
(21) 較佳是：依據本發明的方法包含對哺乳動物或家畜給予0.063 g/天/頭以上的甘草皂苷H2、0.008 g/天/頭以上的甘草皂苷G2、0.026 g/天/頭以上的馬其頓苷A、且0.056 g/天/頭以上的芹糖甘草苷、0.018 g/天/頭以上的芹糖異甘草苷、0.027 g/天/頭以上的異甘草苷的步驟。
(22) 較佳是：依據本發明的方法包含對哺乳動物或家畜給予0.09 g/天/頭以上的(A)及/或0.02 g/天/頭以上的(B)及/或0.04 g/天/頭以上的(C)的步驟。
(23) 較佳是：依據本發明的方法包含對哺乳動物或家畜給予0.15 g/天/頭以上的(A)及/或0.02 g/天/頭以上的(B)及/或0.04 g/天/頭以上的(C)的步驟。
(24) 較佳是：依據本發明的方法包含對哺乳動物或家畜給予0.09 g/天/頭以上的(A)及/或0.03 g/天/頭以上的(B)及/或0.10 g/天/頭以上的(C)的步驟。
(25) 較佳是：依據本發明的方法包含對哺乳動物或家畜給予0.14 g/天/頭以上的(A)及/或0.09 g/天/頭以上的(B)及/或0.19 g/天/頭以上的(C)的步驟。
(26) 較佳是：依據本發明的方法至少藉由哺乳動物或家畜的選自由餌食攝取量的增量、血液中的總膽固醇值的增加、血液中的維生素A值的增加、血液中的GOT值的降低、體重的增加、腹瀉的預防、腹瀉的治療天數的降低、感冒的預防及感冒的治療天數的降低，來改善哺乳動物或家畜的健康狀態。
(27) 較佳是：在依據本發明的方法中，哺乳動物或家畜是肉品生產用途的家畜。
(28) 較佳是：依據本發明的方法，進一步是用以增加屠體重、提升屠宰率及/或降低食用肝臟廢棄率的方法。
(29) 較佳是：依據本發明的方法，進一步是用以增加屠體重、提升屠宰率及降低食用肝臟廢棄率的方法。
(30) 較佳是：依據本發明的方法，進一步是用以使飼料效率增加的方法。
(31) 較佳是：在依據本發明的方法中，甘草萃取物包含：(A)選自由甘草酸、甘草酸衍生物、甘草次酸及甘草次酸衍生物所組成之群組中的一種以上；(B)(A)以外的甘草皂苷類；及，(C)甘草黃酮類；並且，(B)至少包含1.7質量%以上的甘草皂苷H2、0.2質量%以上的甘草皂苷G2、0.2質量%以上的馬其頓苷A，(C)至少包含0.1質量%以上的芹糖甘草苷、0.1質量%以上的芹糖異甘草苷、0.1質量%以上的異甘草苷。
(32) 較佳是：在依據本發明的方法中，甘草萃取物中，(B)至少包含1.7質量%以上的甘草皂苷H2、0.2質量%以上的甘草皂苷G2、0.9質量%以上的馬其頓苷A，(C)至少包含0.1質量%以上的芹糖甘草苷、0.1質量%以上的芹糖異甘草苷、0.1質量%以上的異甘草苷。
(32) 較佳是：在依據本發明的方法中，甘草萃取物中，(B)至少包含2.9質量%以上的甘草皂苷H2、0.5質量%以上的甘草皂苷G2、0.2質量%以上的馬其頓苷A，(C)至少包含0.9質量%以上的芹糖甘草苷、0.1質量%以上的芹糖異甘草苷、0.1質量%以上的異甘草苷。
(33) 較佳是：在依據本發明的方法中，甘草萃取物中，(B)至少包含2質量%以上的甘草皂苷H2、0.5質量%以上的甘草皂苷G2、0.5質量%以上的馬其頓苷A，(C)至少包含2.4質量%以上的芹糖甘草苷、0.4質量%以上的芹糖異甘草苷、0.3質量%以上的異甘草苷。
(34) 較佳是：在依據本發明的方法中，甘草萃取物中，(B)至少包含6.3質量%以上的甘草皂苷H2、0.8質量%以上的甘草皂苷G2、2.6質量%以上的馬其頓苷A，(C)至少包含5.6質量%以上的芹糖甘草苷、1.8質量%以上的芹糖異甘草苷、2.7質量%以上的異甘草苷。
(32) 較佳是：在依據本發明的方法中，甘草萃取物包含9質量%以上的(A)及/或2質量%以上的(B)及/或4質量%以上的(C)。
(33) 較佳是：在依據本發明的方法中，甘草萃取物包含15質量%以上的(A)及/或2質量%以上的(B)及/或4質量%以上的(C)。
(34) 較佳是：在依據本發明的方法中，甘草萃取物包含9質量%以上的(A)及/或3質量%以上的(B)及/或10質量%以上的(C)。
(35) 較佳是：在依據本發明的方法中，甘草萃取物包含14質量%以上的(A)及/或9質量%以上的(B)及/或19質量%以上的(C)。
(36)較佳是：在依據本發明的方法中，甘草萃取物包含於飼料添加劑。
(37) 較佳是：在依據本發明的方法中，飼料添加劑包含水溶性膳食纖維。
(38) 較佳是：在依據本發明的方法中，飼料添加劑以甘草萃取物：水溶性膳食纖維=10：90～40：60的質量比包含甘草萃取物與水溶性膳食纖維。
(39) 較佳是：在依據本發明的方法中，水溶性膳食纖維是葡甘聚醣。
[實施例]
更詳細地說明本發明中的甘草萃取物與哺乳動物或家畜的飼養方法，該飼養方法使用包含甘草萃取物之營養補充品或飼料添加劑。
＜甘草萃取物的製造＞
作為甘草，使用西班牙甘草(glabra)品種、烏拉爾甘草(uralensis)品種及新疆甘草(inflata)品種，利用以下的步驟製造甘草萃取物。實施例1、2、4、5、7、8及比較例1使用了西班牙甘草(glabra)品種。實施例9使用了新疆甘草(inflata)品種。實施例3使用了西班牙甘草(glabra)品種及烏拉爾甘草(uralensis)品種。實施例6、10使用了西班牙甘草(glabra)品種及新疆甘草(inflata)品種。實施例11、20使用了新疆甘草(inflata)品種。實施例12、13、14、15、16、17使用了西班牙甘草(glabra)品種。實施例18、19使用了西班牙甘草(glabra)品種及新疆甘草(inflata)品種。
步驟A
將1品種、2品種或3品種的甘草的根進行乾燥然後粉碎。對已粉碎的1公斤的甘草根適量地添加約8～10L的常溫水及氨水來進行萃取，而獲得萃取液。此時，以成為pH9左右的方式，調整進行添加的氨水的量。對所獲得的萃取液添加硫酸來使成分沉澱，然後分離為黏稠精華與上清(上清液)。此時，硫酸的量以將沉澱污泥的pH值調整為1.8左右的方式進行調整。將分離出的黏稠精華乾燥，然後將所獲得的一次萃取物設為甘草萃取物(濃縮甘草)。步驟A可依據需要重複至獲得期望的成分含量為止。
步驟B
對100g的由步驟A所獲得的濃縮甘草添加600～800mL的90%左右的乙醇進行萃取，然後過濾去除雜質，而獲得萃取液。將所獲得的萃取液加熱至50～60℃然後添加氨，使甘草皂苷結晶(結晶化)為銨鹽。冷卻至常溫後，離心分離並去除甘草皂苷的銨鹽，獲得萃取母液(甘草萃取液)。此時，所添加的氨水的量，以結晶化污泥的pH值成為5左右的方式進行調整。截至目前為止的步驟，可依據需要重複至獲得期望的成分含量為止。將萃取母液(甘草萃取液)進行減壓濃縮來回收乙醇，剩餘液體設為約100mL。對經減壓濃縮的萃取母液(甘草萃取液)添加碳酸鈉或碳酸鉀而將pH值調整為6～7。將所獲得的液體利用噴霧乾燥進行乾燥，而獲得甘草萃取物。
步驟C
對由步驟B所獲得的萃取母液(甘草萃取液)添加活性碳來去除雜質，並實行1～2次該步驟，而獲得萃取母液(甘草萃取液)。然後將所獲得的液體利用噴霧乾燥進行乾燥，而獲得甘草萃取物。
以各成分的含量成為期望的量的方式，依據需要地混合由步驟A～C的各步驟或組合步驟A～C之步驟所獲得的甘草萃取物。
實施例1～6的甘草萃取物是藉由步驟A和步驟B製成。實施例7、8的甘草萃取物是藉由將步驟A～C的各步驟所獲得的甘草萃取物混合而製成。實施例9、10的甘草萃取物是藉由步驟A製成。比較例1的甘草萃取物是藉由步驟A～C製成。實施例11～17的甘草萃取物是藉由步驟A和步驟B製成。實施例18、19的甘草萃取物是藉由步驟A、步驟B及步驟C製成。實施例20的甘草萃取物是藉由步驟A製成。
＜甘草萃取物中的成分的測定＞
利用以下條件並藉由HPLC分析來測定各實施例與比較例的甘草萃取物的(A)選自由甘草酸、甘草酸衍生物、甘草次酸及甘草次酸衍生物所組成之群組中的一種以上之中的甘草酸及(B)甘草皂苷H2、甘草皂苷G2、馬其頓苷A。
＜測定用樣品的調製＞
測定用樣品的調製，溶於水的甘草萃取物依據(1)來實行，不溶於水的甘草萃取物依據(2)來實行。
(1)溶於水的甘草萃取物
量取約200 mg的樣品，添加水而準確地作成100 mL的樣品溶液。使用另外使用甘草酸標準品調製成的標準溶液，藉由液相層析來實行分析。但是樣品的採取量以乾燥物換算%進行校正。
(2)不溶於水的甘草萃取物
量取0.1 g的樣品，以3滴的氨水(28%)及水準確地作成50 mL的樣品溶液。另外在甘草酸標準品中添加稀釋乙醇來調製標準溶液。使用標準溶液並藉由液相層析來實行分析。但是樣品的採取量藉由公式1以乾燥物換算%進行校正。
欲求出的物質的含量(%)=
(公式1)
AT：樣品溶液的面積
AS：標準溶液的面積
WS：標準溶液濃度
WT：換算為乾燥物的樣品溶液濃度
＜甘草酸的測定＞
甘草酸的測定的試驗條件(支持高壓HPLC(安捷倫科技股份有限公司製造LC1290))如下所示。
偵檢器：紫外線吸光光度計(測定波長：254 nm)
管柱：Tosoh TSK Gel ODS80TsQA
管柱溫度：在30℃左右的固定溫度
流速：以甘草酸的保持時間成為約7～8分鐘的方式調整。
移動相：2%乙酸：乙腈=60：40
注入量：20 μL
＜甘草皂苷類的測定＞
甘草皂苷類的測定的試驗條件(支持高壓HPLC(安捷倫科技股份有限公司製造LC1290))如下所示。
偵檢器：紫外線吸光光度計(測定波長：254 nm)
管柱：TSK Gel ODS80TsQA
管柱溫度：在30℃左右的固定溫度
流速：0.8 mL/分鐘
流動相：流動相A：0.1%甲酸(水)/流動相B：0.1%甲酸(乙腈)
注入量：20 μL
移動相的濃度梯度為使流量比自A：B=90：10(0～3分鐘)變化為10：90(3分鐘～60分鐘)。
＜甘草黃酮類的測定＞
各實施例與比較例的甘草黃酮類利用下述的試驗條件藉由HPLC分析進行測定。測定用樣品與上述的甘草酸與其他甘草皂苷類的測定同樣地進行調製。作為標準溶液使用甘草酸標準溶液(測定波長254 nm)、甘草苷標準溶液(測定波長280 nm)、異甘草素標準溶液(測定波長355 nm)、異甘草苷標準溶液(測定波長355nm)，藉由液相層析對樣品溶液及標準溶液進行梯度分析，來求出黃酮含量。但是樣品以乾燥物換算%進行校正。
測定條件(支持高壓HPLC(安捷倫科技股份有限公司製造LC1290))如下所示。
偵檢器：紫外線吸光光度計(測定波長：280 nm、355 nm)
管柱：TSK Gel ODS80TsQA
管柱溫度：在30℃左右的固定溫度
流速：0.8 mL/分鐘
流動相：流動相A：0.1%甲酸(水)/流動相B：0.1%甲酸(乙腈)
注入量：20 μL
移動相的濃度梯度為使流量比自A：B=90：10(0～3分鐘)變化為10：90(3分鐘～60分鐘)。
在表1與表2中表示所獲得的甘草萃取物的主要成分。再者，比中的「%」意指質量%。
[表1]
[表2]
為了確認藉由本發明的甘草萃取物所產生的效果，作為哺乳動物或家畜，以肉品生產用途的家畜之牛為對象來實行以下的試驗。
試驗1.自生後5日齡起至約240日齡～約270日齡為止
小牛在生後以高濃度的代用乳來進行哺乳飼養後，自生後約80日齡起逐漸離乳並切換為飼料給予進行的飼養。若因高濃度的代用乳對消化器官造成負擔，會引發飼料攝取量的降低和起伏。此外，在離乳時由於自哺乳飼養牛舍轉換為飼料飼養牛舍時的環境變化所造成的壓力和群養所造成的壓力、自代用乳切換為混合飼料和粗飼料所造成的壓力，也會引起飼料攝取量的降低和起伏。這樣的對消化器官的負擔、壓力、飼料攝取量的降低和起伏，會使得消化器官的發育、例如胃中的瘤胃(rumen)的發育遲緩。飼料攝取量的降低和起伏、消化器官的發育遲緩會使生長遲緩並使飼料效率降低。
因此，藉由對自生後5日齡至約240日齡～約270日齡為止的小牛給予本發明的甘草萃取物作為飼料添加劑，來調查本發明的甘草萃取物對於離乳時的飼料的剩食量的降低(餌食攝取量的增加)、營養狀態(血液檢查的總膽固醇值、維生素A值、GOT值)、體重產生的影響。
一般而言，建議是在約90日齡進行離乳，而自約80日齡起逐漸地減少代用乳及離乳飼料，然後開始增加稻草、燕麥及混合飼料。但是在本試驗中，為了明確地確認藉由甘草萃取物的效果，在約80日齡時已完全離乳。
對象為自生後5日齡～10日齡起至小牛拍賣市場出貨時的日齡(雄性241～261日齡、雌性246～291日齡)為止的黑毛和牛的雄性小牛30頭、雌性小牛30頭，合計為60頭。分為表示於表3的3組。
[表3]
| 雄性 | 雌性 | 合計 | |
| KS組 | 10頭 | 10頭 | 20頭 |
| K組 | 10頭 | 10頭 | 20頭 |
| 無給予組 | 10頭 | 10頭 | 20頭 |
KS組是自生後約5日齡起將實施例5的甘草萃取物作為飼料添加劑添加至飼料中，K組是將比較例1的甘草萃取物作為飼料添加劑添加至飼料中。無給予組並未對飼料添加甘草萃取物。甘草萃取物以外的飼料(代用乳、人造奶、混合飼料、牧草等粗飼料)是將表示於表4(每一頭雄性的給予飼料)與表5(每一頭雌性的給予飼料)的飼料分為1天3次，81日齡以後是以混合飼料、稻草、燕麥的順序，對各組同時地給予相同量。離乳飼料與燕麥是自生後約2星期後開始給予。
[表4]
| 代用乳 人造乳 | 離乳飼料 | 混合飼料 | 稻草 | 燕麥 | |
| 0～30天 | 給予 | 0.3 kg | - | - | 0.03 kg |
| 31～60天 | 給予 | 1.5 kg | - | - | 0.2 kg |
| 61～80天 | 給予 | 3.2 kg | - | - | 0.4 kg |
| 81～120天 | - | - | 4.5 kg | 0.4 kg | 1.8 kg |
| 121～150天 | - | - | 5.5 kg | 0.4 kg | 2.5 kg |
| 151～180天 | - | - | 4.5 kg | 0.4 kg | 4.0 kg |
| 181～210天 | - | - | 4.5 kg | 0.4 kg | 4.5 kg |
| 211～240天 | - | - | 4.5 kg | 0.4 kg | 5.0 kg |
[表5]
| 代用乳 人造乳 | 離乳飼料 | 混合飼料 | 稻草 | 燕麥 | |
| 0～30天 | 給予 | 0.3 kg | - | - | 0.03 kg |
| 31～60天 | 給予 | 1.5 kg | - | - | 0.2 kg |
| 61～80天 | 給予 | 3.0 kg | - | - | 0.4 kg |
| 81～120天 | - | - | 4.0 kg | 0.4 kg | 1.5 kg |
| 121～150天 | - | - | 4.5 kg | 0.4 kg | 3.5 kg |
| 151～180天 | - | - | 4.0 kg | 0.4 kg | 4.0 kg |
| 181～210天 | - | - | 4.0 kg | 0.4 kg | 4.5 kg |
| 211～240天 | - | - | 4.0 kg | 0.4 kg | 4.5 kg |
| (241～270天) | - | - | (4.0 kg) | (0.4 kg) | (4.5 kg) |
針對KS組，將實施例5的甘草萃取物作為飼料添加劑以如下量添加至飼料來進行給予：生後約第5天起為1 g/天/頭，生後約41天起為2 g/天/頭，生後約81天起至約240天～約270天為止為3 g/天/頭。針對K組，將比較例1的甘草萃取物作為飼料添加劑以如下量添加至飼料來進行給予：生後約第5天起為1 g/天/頭，生後約41天起為2 g/天/頭，生後約81天起至約240天～約270天為止為3 g/天/頭。
1.1 剩食量
如同上述，約81日齡之後將飼料以混合飼料、稻草、燕麥的順序進行給予，因此當發生剩餘飼料時，剩餘飼料會是燕麥。因而將燕麥的剩餘飼料重量作為剩食量進行測量。將約81日齡的離乳第一天視為第一天，在第1圖與第2圖中顯示剩食量的演變。
如第1圖所示，雄性在KS組中，自離乳第1天起即沒有剩食地呈現持續吃完飼料的狀態。K組中，在第8～9天的這兩天曾一度吃完飼料，但是再次發生剩食，直到呈現持續吃完飼料的狀態需要11天。無給予組直到呈現持續吃完飼料的狀態需要14天。
如第2圖所示，雌性在KS組中，自離乳第1天(約81日齡)及第3天吃完飼料，在第2天及第4天發生剩食，然後自第5天起呈現持續吃完飼料的狀態。K組中，發現了吃完飼料的差異，然後自第12天起呈現持續吃完飼料的狀態。無給予組直到呈現持續吃完飼料的狀態需要15天。
自生後約5日齡起開始給予實施例5的甘草萃取物的KS組中，自約81日齡的離乳時起即表現了藉由甘草萃取物的給予所產生的效果。與給予包含13%以上的甘草酸之萃取物的K組相比，仍確認到較高的效果，而確認到實施例5的甘草萃取物中所包含的甘草酸、甘草皂苷類、甘草黃酮類對於剩食量的降低(餌食攝取量的增加)的協同作用。
如同上述，認為飼料攝取量反映了小牛的壓力和消化器官的負擔、消化器官的發育程度。認為比起K組、無給予組，自離乳立刻就吃完飼料而飼料攝取量多的KS組，可降低牛的壓力，消化器官的負擔少並且消化器官的發育狀態佳。
1.2 血液檢查結果(總膽固醇值、VA值、GOT值)
為了把握牛的營養狀態和代謝狀態，實行血液檢查，測定總膽固醇值、維生素A值(VA值)、GOT值。總膽固醇值反映綜合性的營養攝取狀況。VA值與生長和發育相關，缺乏維生素A會導致發育遲緩和免疫力降低。GOT值是急性肝損傷和臟器損傷的判斷根據。特別是，GOT值較高時會懷疑是肝臟疾病。
全部的牛的血液檢查(總膽固醇值、VA值、GOT值)，在生後約40日齡與約160日齡實施2次。
將雄性及雌性各組的10頭的平均值與不包括10頭中的數值的最高值與最低值的2頭之8頭的平均值顯示於第3圖～第6圖(總膽固醇值)、第7圖～第10圖(VA值)、第11圖～第14圖(GOT值)。
如第3圖～第6圖所示，自離乳前的生後約5日齡起給予實施例5的甘草萃取物的KS組中，在雄性及雌性在生後約40日齡與生後約160日齡中的任一時間點，皆呈現比其他組更高的數值。高總膽固醇值認為顯示了營養攝取狀態佳、代謝受到促進的狀態。另一方面，懷疑無給予組呈營養不良。營養不良會使免疫力降低，或提高罹患疾病的危險性。可知本發明的甘草萃取物能夠使營養狀態與代謝變好。
如第7圖～第10圖所示，KS組中雄性及雌性的VA值皆較高。維生素A是發育不可或缺的成分，VA值會影響增加體重(家畜的體重增加量)。但是VA無法在體內合成，所以必須要藉由食物攝取至體內。若VA變得極少，會導致發育遲緩和免疫力降低，並且有時會有感冒和腹瀉等疾病發病的情況。KS組中VA值在生後約40日齡與生後約160日齡中的任一時間點，皆比其他組高，特別是在生後約160日齡時變得比其他組更高，而顯示了KS組有利於增加體重的現象。可知本發明的甘草萃取物能夠增加並維持增加體重所需的VA值。
如第11圖～第14圖所示，KS組中在生後約40日齡與生後約160日齡中的任一時間點，GOT值皆比其他組更低。KS組的GOT值進一步在生後約160日齡時低於生後約40日齡。另一方面，K組中在生後約40日齡與生後約160日齡的GOT值呈現持平。無給予組中，生後約40日齡的血液檢查時的GOT高於其他組，並且確認到生後約160日齡時進一步升高的GOT值。可知本發明的甘草萃取物具有提高肝功能的效果。
由以上的結果可知：比起大量地含有甘草酸之K組的甘草萃取物(比較例1)，含有甘草黃酮類與甘草酸以外的甘草皂苷類之KS組的甘草萃取物(實施例5)是藉由甘草酸、其他甘草皂苷類及甘草黃酮類的複合性效果，對於營養狀態與代謝(總膽固醇值)、發育狀態(維生素A值)、肝功能(GOT值)帶來良好的影響，而非甘草酸所產生的效果。
1.3 體重
牛在拍賣市場出貨時，一定會在拍賣市場測定個體分別的體重。在第15圖～第18圖中顯示出貨至拍賣市場時所測定的體重的雄性及雌性各組10頭的平均值與不包括10頭中的數值的最高值與最低值的2頭之8頭的平均值。再者，由於拍賣市場的開市日期有所限定，因此出貨時的日齡有些許差異。
如第15圖～第18圖所示，雄性及雌性在KS組的體重皆大於其他組。如同上述，認為藉由將本發明的甘草萃取物作為飼料添加劑進行給予，在KS組中的飼料攝取量多於其他組，營養狀態與代謝、發育狀態、肝功能較佳，因此不會使免疫力降低而能夠防止疾病的發生，例如也能夠防止疾病所造成的食慾不振、餌食攝取量的降低，而有助於增加體重。
所謂增加體重大，能夠達成拍賣市場的出貨日齡的縮短、即飼養期間的縮短，有助於降低人事費用和飼料費用等經費。此外，在KS組、K組、無給予組中，即使甘草萃取物以外皆使用相同種類、相同量的飼料，KS組的增加體重仍大於其他組，由此可知，藉由將本發明的甘草萃取物作為飼料添加劑進行給予，能夠使飼料效率增大。
在自生後約5日齡起至約240日齡～約270日齡之間，是哺乳期、離乳期、之後的成長過程，飼料的種類、給予內容、給予方法會逐漸變化。已知牛會由於些微的環境變化而強烈地感受到精神上和肉體上的壓力，造成身體狀態發生變化，但是藉由將本發明的甘草萃取物作為飼料添加劑進行給予，能夠降低環境變化和壓力對於飼料攝取量、營養狀態、代謝、發育、肝功能造成的不良影響，而能夠使體重增加。
試驗2. 導入肥育時起至出貨至肉品市場為止
由繁殖農家被出貨至拍賣市場的小牛，之後會被導入至肥育農家。在此之間，小牛會受到移動的壓力和環境變化的壓力，該移動的壓力是由於自繁殖農家往小牛拍賣市場會藉由卡車運輸進行移動，並且在市場競標成功後會利用卡車來移動至新的肥育農家的牧場所造成，該環境變化的壓力是由於生活場所與飼養者等改變所造成。也時常會發生自北海道的市場至鹿兒島縣、宮崎縣等的牧場這樣長距離的移動。進一步，從被導入至肥育牧場的那天起，也會有所給予的飼料的種類和量等改變所造成的壓力、在肥育牧場的熱刺激與冷刺激(暑熱期及寒冷期的壓力)和群養等的壓力。該等壓力會對牛的飼料攝取量、營養狀態、代謝、發育、肝功能造成不良影響。此外，對肥育牧場進行導入時，已經以增加體重為目的地餵食了高濃度的混合飼料和各式各樣的添加劑等，所以經常會有消化器官和內臟器官、特別是肝功能受到損傷的情況。
因此，自導入肥育時起至以販賣為目的地出貨至肉品市場為止，藉由對此期間的牛賦予本發明的甘草萃取物作為飼料添加劑，來調查本發明的甘草萃取物對於導入肥育時的剩食量、營養狀態(血液檢查的總膽固醇值、維生素A值、GOT值)、體重、肝臟廢棄率、屠體重、屠宰率產生的影響。
對象為約9個月齡～約10個月齡(生後266日齡至308日齡)的黑毛和牛公牛30頭及約9個月齡～約10個月齡(生後274日齡至304日齡)的黑毛和牛母牛30頭，合計60頭。基於在小牛拍賣市場買入時所測量的體重結果，以各組的個別體重及日齡幾乎平均的方式分為如表6所示的3組。
[表6]
| 雄性 | 雌性 | 合計 | |
| KS組 | 10頭 | 10頭 | 20頭 |
| K組 | 10頭 | 10頭 | 20頭 |
| 無給予組 | 10頭 | 10頭 | 20頭 |
KS組是將實施例5的甘草萃取物作為飼料添加劑添加至飼料中，K組是將比較例1的甘草萃取物作為飼料添加劑添加至飼料中。無給予組並未對飼料添加甘草萃取物。甘草萃取物以外的飼料是將表示於表7(每一頭雄性的給予飼料)與表8(每一頭雌性的給予飼料)的飼料分為1天3次，對各組同時地給予相同量。導入肥育牧場後，到吃完飼料為止是以混合飼料、稻草、啤酒粕、燕麥的順序進行給予。
[表7]
| 混合飼料 | 稻草 | 啤酒粕 （水分50％） | 燕麥 | |
| 0～1個月 | 2.5kg | 0.3kg | 2.0kg | 4.0kg |
| ～2個月 | 3.5kg | 0.3kg | 2.0kg | 4.0kg |
| ～3個月 | 5.0kg | 0.3kg | 2.0kg | 5.0kg |
| ～4個月 | 6.5kg | 0.3kg | 2.0kg | 5.0kg |
| ～5個月 | 8.0kg | 0.3kg | 3.0kg | 4.0kg |
| ～6個月 | 9.0kg | 2.0kg | 3.0kg | 3.0kg |
| ～7個月 | 9.0kg | 2.5kg | 3.0kg | － |
| ～12個月 | 10.0kg | 2.5kg | 4.0kg | － |
| ～13個月 | 11.0kg | 2.5kg | 2.0kg | － |
| ～19個月 | 11.0kg | 2.5kg | － | － |
[表8]
| 混合飼料 | 稻草 | 啤酒粕 （水分50％） | 燕麥 | |
| 0～1個月 | 1.8kg | 0.2kg | 2.0kg | 3.5kg |
| ～2個月 | 2.5kg | 0.2kg | 2.0kg | 3.5kg |
| ～3個月 | 3.5kg | 0.2kg | 2.0kg | 3.5kg |
| ～4個月 | 4.5kg | 0.2kg | 2.0kg | 3.0kg |
| ～5個月 | 5.5kg | 0.2kg | 2.0kg | 3.0kg |
| ～6個月 | 6.5kg | 2.0kg | 2.0kg | 2.5kg |
| ～14個月 | 7.0kg | 3.0kg | 3.0kg | － |
| ～19個月 | 9.0kg | 3.0kg | － | － |
針對KS組，在自肥育牧場導入日起至約19個月之間，對飼料添加3 g/天/頭的實施例5的甘草萃取物作為飼料添加劑來進行給予。針對K組，在自肥育牧場導入日起至約19個月之間，對飼料添加3 g/天/頭的比較例1的甘草萃取物作為飼料添加劑來進行給予。
2.1 剩食量
如同上述，將飼料以混合飼料、稻草、啤酒粕、燕麥的順序進行給予，因此當發生剩餘飼料時，剩餘飼料會是燕麥。因而將燕麥的剩餘飼料重量作為剩食量進行測量。在第19圖與第20圖中顯示剩食量的演變。
如第19圖所示，雄性在KS組中直到吃完飼料為止是開始給予後5天，K組直到吃完飼料為止需要9天，無給予組直到吃完飼料為止需要14天。
如第20圖所示，雌性在KS組中直到吃完飼料為止是開始給予後4天，K組直到吃完飼料為止需要10天，無給予組直到吃完飼料為止與雄性相同地需要14天。
本發明的甘草萃取物的給予即便在導入肥育後才開始，比起給予包含13%以上的甘草酸之甘草萃取物的K組，仍可確認到較高的效果，由此可確認實施例5的甘草萃取物中所包含的甘草酸、甘草皂苷類、甘草黃酮類的協同效果。
認為比起K組、無給予組，自導入肥育後即刻吃完飼料而飼料攝取量較多的KS組可降低牛的壓力，消化器官的負擔少，消化器官的功能和狀態佳。
2.2血液檢查結果(總膽固醇值、VA值、GOT值)
全部的牛的血液檢查(總膽固醇值、VA值、GOT值)，在導入至肥育牧場時、導入後6個月、導入後12個月實施3次，來測定總膽固醇值、GOT值、VA值。
將雄性及雌性各組的10頭的平均值與不包括10頭中的數值的最高值與最低值的2頭之8頭的平均值顯示於第21圖～第24圖(總膽固醇值)、第25圖～第28圖(VA值)、第29圖～第32圖(GOT值)。
如第21圖～第24圖所示，總膽固醇值方面，雄性及雌性皆在KS組呈現較高的數值。由該結果可知，如同上述地KS組在導入肥育後比其他組在更早的階段開始飼料攝取料變多，除此之外，所攝取的飼料的消化吸收及代謝也較好。
如第25圖～第28圖所示，VA值方面，雄性及雌性皆在KS組呈現較高的數值。比起導入肥育時，在6個月後與12個月後，每一組都呈現VA值降低，但是在KS組中6個月後與12個月後大致呈現持平甚至提升。另一方面，K組與無給予組中VA值從6個月後往12個月後進一步降低。
如第29圖～第32圖所示，雄性及雌性在KS組中，在導入肥育後、6個月後及12個月後的任一時間點，GOT值皆低於其他組。K組與無給予組中， GOT值在6個月後高於導入肥育後，並且GOT值在12個月後進一步變高。
由以上的結果可知：本發明的甘草萃取物的給予即便在導入肥育後才開始，藉由甘草酸、其他甘草皂苷類、甘草黃酮類的複合性的效果，仍會對營養與代謝(總膽固醇值)、發育狀態和免疫力(維生素A值)、肝功能(GOT值)帶來良好的影響。
2.3體重
測定在導入肥育牧場時與到達肉品市場時的體重與增加體重。將在小牛拍賣市場所測定的體重設為導入肥育牧場時的體重。將自肥育牧場出發到達肉品市場時所測出的體重設為到達時的體重。將導入時的體重與到達時的體重的差值設為增加體重量。
如第32圖～第38圖所示，雄性及雌性不論是到達時的體重還是增加體重皆在KS組最大。所謂增加體重大，認為是基於以下的良性循環所產生。亦即，如同上述，KS組在導入肥育後比其他組在更早的階段開始飼料攝取料變多，除此之外，消化吸收與代謝、發育和免疫力、肝功能也較好，藉此即便環境和飼料變化，仍不易受到壓力的不良影響，消化器官等內臟的狀態仍能夠良好地保持。其結果，能夠防止疾病，此外還能夠防止疾病所造成的食慾不振。認為如此，KS組呈穩定而飼料攝取量變多，直到出貨至肉品市場時能夠獲得比其他組更大的增加體重。
如同在試驗1中所述，在KS組、K組、無給予組中，即使甘草萃取物以外皆使用相同種類、相同量的飼料，KS組的增加體重仍大於其他組，所以可知，即便在肥育牧場導入日後才開始給予本發明的甘草萃取物作為飼料添加劑，仍能夠使飼料效率增大。
2.4食用肝臟的廢棄比例
確認在屠宰時的食用肝臟的廢棄比例。食用肝臟的廢棄會導致經濟性的損失。出貨至肉品市場時的鋸屑肝、肝出血等肝臟病變，會起因於在肥育期間中的對肝臟的負擔增加而發生。肝臟病變少，顯示了肝功能維持在健康的狀態的現象。
如第39圖〜第40圖所示，比起其他組，雄性及雌性在KS組中的食用肝臟的廢棄比例皆非常少。即使是給予包含13%以上的甘草酸之甘草萃取物的K組大致上也是與無給予組相同程度的食用肝臟廢棄率。可知本發明的甘草萃取物在將肝功能維持在健康的狀態的效果非常大。
2.5 屠體重及屠宰率
在肉品市場測定屠體重。此外，由到達肉品市場時的體重與屠體重算出屠宰率((屠體重/到達肉品市場時的體重)×100)。再者，所謂屠體，意指由活體去除頭、皮、內臟、血液等後的狀態，即可食用部分。
如第41圖～第42圖所示，可知KS組呈可食用部分的屠體重多於其他組。進一步，如第43圖～第46圖所示，KS組中屠宰率也高於其他組。即使增加體重良好，只要產率不佳則無法按體重的比例獲得屠體。認為藉由給予本發明的甘草萃取物，在導入肥育後能夠自較早的階段維持穩定且高的飼料攝取量與消化器官和肝臟的健康，這會達到提升增加體重與屠體重、屠宰率的結果。
如同上述，在KS組、K組、無給予組中，即使甘草萃取物以外皆使用相同種類、相同量的飼料，KS組不論在屠體重還是屠宰率皆大於其他組，由此可確認，即便在肥育牧場導入日後才開始給予本發明的甘草萃取物作為飼料添加劑，仍能夠使飼料效率增大。
試驗3. 自肥育導入日起僅10天的給予
如同「試驗2. 自導入肥育時起至出貨至肉品市場為止」中所述，導入至肥育牧場時的小牛尤其會受到移動和環境變化的壓力。此外，在導入至肥育牧場時，由於以增加體重為目的的餌食而消化器官等內臟器官和肝功能等已經受到傷害。因此，在自導入至肥育牧場日起僅10天給予甘草萃取物，來調查本發明的甘草萃取物對於飼料的剩食量、直到吃完飼料為止的天數、營養狀態(血液檢查的總膽固醇值、維生素A值、GOT值)產生的影響。
對象為約9個月齡～約10個月齡(生後275日齡至308日齡)的黑毛和牛公牛36頭及約9個月齡～約10個月齡(生後279日齡至309日齡)的黑毛和牛母牛36頭，其是以肥育為目的在小牛拍賣市場買進而導入肥育牧場者。如表9所示，自導入至肥育牧場時起雄性及雌性皆以4頭為1舍×3舍=各組12頭的方式分為3組。
[表9]
| 雄性 | 雌性 | 合計 | |
| KS組 | 12頭 | 12頭 | 24頭 |
| K組 | 12頭 | 12頭 | 24頭 |
| 無給予組 | 12頭 | 12頭 | 24頭 |
KS組是將實施例5的甘草萃取物作為飼料添加劑添加至飼料中，K組是將比較例1的甘草萃取物作為飼料添加劑添加至飼料中。無給予組並未對飼料添加甘草萃取物。甘草萃取物以外的飼料，針對雄性是以每一頭混合飼料3.0 kg、稻草0.4 kg、啤酒粕(水分50%)2.0 kg、燕麥6.0 kg的份量，針對雌性是以每一頭混合飼料3.0 kg、稻草0.4 kg、啤酒粕(水分50%)2.0 kg、燕麥5.0 kg的份量，分成1天3次並以混合飼料、稻草、啤酒粕、燕麥的順序，同時對於各組給予相同量。為了確認飼料攝取量及採食性的增加，飼料添加劑(甘草萃取物)的量增加至比通常量更多。
針對KS組，在自肥育牧場導入日起的10天之間，對飼料添加5 g/天/頭的實施例5的甘草萃取物作為飼料添加劑來進行給予。針對K組，在自肥育牧場導入日起的10天之間，對飼料添加5 g/天/頭的比較例1的甘草萃取物作為飼料添加劑來進行給予。本試驗在10天期間結束。
3.1 剩食量與直到吃完飼料為止的天數
如同上述，將飼料以混合飼料、稻草、燕麥的順序進行給予，因此當發生剩餘飼料時，剩餘飼料會是燕麥。因而將燕麥的剩餘飼料重量作為剩食量進行測量。在第47圖與第48圖中顯示剩食量的演變，在第49圖與第50圖中顯示直到吃完飼料為止的天數。
如第48圖～第52圖所示，雄性肥育牛在KS組中，12頭全部呈現吃完飼料的狀態需要3天，K組需要8天，無給予組需要10天。雄性在直到吃完飼料為止的平均天數，KS組為2.66天，K組為7.66天，無給予組為8.33天。雌性肥育牛在KS組中12頭全部呈現吃完飼料的狀態需要4天，K組需要9天，無給予組中，在10天後仍有無法吃完飼料的牛。直到吃完飼料為止的平均天數，KS組為3.66天，K組為8.66天(無給予組在10天之間無法吃完)。
從該結果可認為，本發明的甘草萃取物能夠改善導入肥育時的小牛的壓力，並且能夠改善內臟器官和肝功能。此外，藉由使導入肥育時的小牛的剩食量減少，能夠在導入肥育後自較早的時期達到增加體重的狀態。
試驗3是自肥育導入日起僅實行10天，所以在結束試驗時(自肥育導入日起第10天)仍處於肥育過程中，在該時間點還無法得知肉品的生產量，已給予的飼料與肉品生產量的重量比(飼料效率)。但是，與試驗1、2相同，在KS組、K組、無給予組中，即使甘草萃取物以外皆使用相同種類、相同量的飼料，KS組的剩食量仍少於其他組(餌食攝取量較多)，並且直到吃完飼料為止的天數較少，基於這樣的結果認為，既便是自導入肥育牧場後僅實行10天給予本發明的甘草萃取物作為飼料添加劑的情況，仍能夠使飼料效率增大。
試驗4. 自生後約91日齡起至約150日齡為止
如同上述，小牛建議在生後約90日齡離乳。自離乳後的生後約91日齡起至小牛拍賣市場出貨時為止的期間，會對消化器官造成負荷、負擔或造成壓力，而使飼料攝取量降低，消化器官的發育遲緩。消化器官的發育遲緩會進一步造成飼料攝取量降低的惡性循環。這種情況會導致增加體重與飼料效率的降低。
因此，藉由對自生後約91日齡起至約150日齡為止的牛給予本發明的甘草萃取物作為飼料添加劑，來調查本發明的甘草萃取物對於離乳後的離乳後的小牛的剩食量、營養狀態(血液檢查的總膽固醇值、維生素A值、GOT值)產生的影響。
對象為生後約91日齡～約150日齡為止的黑毛和牛雄性小牛30頭及雌性小牛30頭，合計60頭。分為如表10所示的3組。在此處，在離乳前的生後約70日齡實行第1次的血液檢查，以藉由血液檢查所測定出的總膽固醇值、維生素A值、GOT值的各平均值成為相同程度的方式分為3組。該等數值之中，將GOT值的平均較高的組設為KS組。
[表10]
| 雄性 | 雌性 | 合計 | |
| KS組 | 10頭 | 10頭 | 20頭 |
| K組 | 10頭 | 10頭 | 20頭 |
| 無給予組 | 10頭 | 10頭 | 20頭 |
KS組是將實施例5的甘草萃取物作為飼料添加劑添加至飼料中，K組是將比較例1的甘草萃取物作為飼料添加劑添加至飼料中。無給予組並未對飼料添加甘草萃取物。甘草萃取物以外的飼料(代用乳、離乳飼料、混合飼料、燕麥)將表示於表11(每一頭雄性的給予飼料)與表12(每一頭雌性的給予飼料)的飼料分為1天3次，約91日齡以後是以混合飼料、燕麥的順序，同時對於各組給予相同量。
[表11]
| 代用乳 | 離乳飼料 | 混合飼料 | 燕麥 | |
| 81～90天 | 給予 | 3.2kg | － | 0.4kg |
| 91～120天 | － | － | 4.5kg | 1.8kg |
| 121～150天 | － | － | 5.0kg | 2.0kg |
[表12]
| 代用乳 | 離乳飼料 | 混合飼料 | 燕麥 | |
| 81～90天 | 給予 | 2.8kg | － | 0.3kg |
| 91～120天 | － | － | 3.5kg | 1.5kg |
| 121～150天 | － | － | 4.5kg | 2.0kg |
針對KS組，在自生後約91日齡起至約150日齡為止之間，對飼料添加3 g/天/頭的實施例5的甘草萃取物作為飼料添加劑來進行給予。針對K組，在自生後約91日齡起至約150日齡為止之間，對飼料添加3 g/天/頭的比較例1的甘草萃取物作為飼料添加劑來進行給予。
4.1 剩食量
如同上述，生後約91日齡以後是以混合飼料、燕麥的順序進行給予，因此當發生剩餘飼料時，剩餘飼料會是燕麥。因而將燕麥的剩餘飼料重量作為剩食量進行測量。在第51圖與第52圖中顯示剩食量的演變。
如第51圖與第52圖所示，雄性在KS組中，在第5天吃完飼料，並且持續呈現吃完飼料的狀態。K組中，直到持續呈現吃完飼料的狀態需要11天。無給予組中，需要更多的天數而直到持續呈現吃完飼料的狀態需要14天。雌性在KS組中，在第4天吃完飼料而比雄性早1天，並且之後持續呈現吃完飼料的狀態。K組中，發現在第1天起至第9天為止的起伏，在第13天吃完飼料，並且之後持續呈現吃完飼料的狀態。比起K組，在KS組中直到吃完飼料為止所需的天數較少。
可知即便在離乳後才開始給予本發明的甘草萃取物，仍具有可使飼料攝取量提升的效果。
4.2 血液檢查結果(總膽固醇值、VA值、GOT值)
為了把握牛的營養狀態和代謝狀態，實行血液檢查來測定總膽固醇值、維生素A值(VA值)、GOT值。
全部的牛的血液檢查(總膽固醇值、VA值、GOT值)在生後約70日齡的時間點與約150日齡的時間點實施2次。
將雄性及雌性各組的10頭的平均值與不包括10頭中的數值的最高值與最低值的2頭之8頭的平均值顯示於第53圖～第56圖(總膽固醇值)、第57圖～第60圖(VA值)、第61圖～第64圖(GOT值)。
如第53圖～第56圖所示，在開始給予甘草萃取物前的約70日齡的血液檢查中，雄性及雌性的總膽固醇值在各組間皆大致沒有差異。另一方面，在約150日齡的血液檢查中，雄性及雌性皆在KS組中呈現最高的總膽固醇值。在K組中，在約70日齡與約150日齡時，總膽固醇值大致持平，無給予區的總膽固醇值，約150日齡低於約70日齡。
如第57圖～第60圖所示，VA值在開始給予甘草萃取物前的約70日齡的血液檢查中，雄性及雌性在各組間皆大致沒有差異，在KS組中的值反而低於其他組。另一方面，在約150日齡的血液檢查中，雄性及雌性皆在KS組中呈現最高的VA值。在K組中，在約70日齡與約150日齡時，VA值大致持平，無給予區的VA值，約150日齡低於約70日齡。
如第61圖～第64圖所示，GOT值在開始給予甘草萃取物前的約70日齡的血液檢查中，雄性及雌性在KS組中的值皆高於其他組。另一方面，在約150日齡的血液檢查中，雄性及雌性皆在KS組中呈現最低的GOT值。在K組中，在約70日齡與約150日齡時，GOT值大致持平，無給予區的GOT值，約150日齡高於約70日齡。
由以上的結果可知，即便在離乳後才開始給予本發明的甘草萃取物，含有甘草黃酮類與甘草酸以外的甘草皂苷類之KS組的甘草萃取物(實施例5)，是藉由甘草酸、其他甘草皂苷類及甘草黃酮類的複合性效果，對於營養狀態與代謝(總膽固醇值)、發育狀態(維生素A值)、肝功能(GOT值)帶來良好的影響，而非甘草酸所產生的效果。
試驗4是僅在自生後約91日齡起至約150日齡為止之間實行，所以在結束試驗時仍無法得知肉品的生產量、已給予的飼料與肉品生產量的重量比(飼料效率)。但是，與試驗1、2相同，在KS組、K組、無給予組中，即使甘草萃取物以外皆使用相同種類、相同量的飼料，KS組的剩食量仍少於其他組(餌食攝取量較多)，並且直到吃完飼料為止的天數較少，基於這樣的結果認為，既便在離乳後才給予本發明的甘草萃取物作為飼料添加劑，仍能夠使飼料效率增大。
試驗5. 自生後約5日齡起至約60日齡為止的約2個月
在牛的哺乳期若對消化器官等內臟器官和肝功能增加負擔，免疫力和代謝會降低而發生腹瀉和感冒。內臟器官和肝功能的負擔，有時會由於哺乳期的高濃度的代用乳和混合飼料的攝取而造成。此外，生後立即與母牛分離而由飼養員飼養所造成的壓力、依據成長而變更飼料的種類和量所造成的壓力、暑熱期及寒冷期的熱刺激及冷刺激和冷熱差等環境變化所造成的對肉體的壓力，有時也會對內臟器官和肝功能增加負擔，或降低免疫力和代謝。特別是，小牛的發育仍不充分，因此會由於對內臟器官和肝功能的負擔，容易造成食慾不振，而變得營養不良，有時會進而陷入對內臟器官和肝功能的負擔和壓力增加的惡性循環，因而容易造成腹瀉和感冒。
若發生腹瀉的症狀，大多數的情況會實行藥的投予、抗生素的投予、益生菌的連續投予等治療。腹瀉有時會引發失去體內水分的脫水症狀，若治療拖得很久會招致免疫力和抵抗力的降低，也經常會發生與感冒同時發病的情況。
在此處，多發於小牛的腹瀉，一般而言已知大致上可分為2類。一類是消化不良所造成的腹瀉，其是由於高濃度的乳及飼料的攝取、暑熱期及寒冷期和冷暖差等所生的氣象條件和初乳的攝取不足、飼料改變等，對於內臟器官及消化器官造成負荷而代謝能力及免疫力降低所造成。另一種是由於品質良好且乾燥的飼料中混有細菌、病毒、寄生蟲等，這樣的情況能夠藉由頻繁地替換飼料來防止，所以也能夠認為原因在於牛舍的衛生管理。
因此，藉由對生後約5日齡起至約60日齡為止的小牛給予本發明的甘草萃取物作為飼料添加劑，來調查本發明的甘草萃取物對於消化不良所造成的腹瀉的發生比例、由於消化不良所造成的腹瀉的治療天數、感冒的發生比例、感冒的治療天數產生的影響。
對象是自生後約5日齡起至約60日齡期間的黑毛和牛小牛150頭與荷蘭牛小牛30頭。分為表13所示的3組。
[表13]
| A農場 | B農場 | C農場 | 合計 | ||||
| 雄性 | 雌性 | 雄性 | 雌性 | 雄性 | 雌性 | ||
| KS組 | 15頭 | 15頭 | 10頭 | 10頭 | 5頭 | 5頭 | 60頭 |
| K組 | 15頭 | 15頭 | 10頭 | 10頭 | 5頭 | 5頭 | 60頭 |
| 無給予組 | 15頭 | 15頭 | 10頭 | 10頭 | 5頭 | 5頭 | 60頭 |
KS組是將實施例5的甘草萃取物作為飼料添加劑添加至飼料中，K組是將比較例1的甘草萃取物作為飼料添加劑添加至飼料中。無給予組並未對飼料添加甘草萃取物。甘草萃取物以外的飼料(代用乳、離乳飼料、燕麥)在雄性及雌性皆是分為1天3次，對各組同時地給予相同量。離乳飼料與燕麥是自生後約2星期後開始給予。
針對KS組，在自生後約5日齡起至生後約60日齡為止，對飼料添加2 g/天/頭的實施例5的甘草萃取物作為飼料添加劑來進行給予。針對K組，在自生後約5日齡起至生後約60日齡為止，對飼料添加2 g/天/頭的比較例1的甘草萃取物作為飼料添加劑來進行給予。
將合計180頭牛的由於消化不良所造成的腹瀉的發生件數(頭數)表示於表14與第65圖，腹瀉的治療天數表示於表15與第66圖。
[表14]
| KS組 | K組 | 無給予組 | |
| 第1～7天 | 1 | 3 | 3 |
| 第8～14天 | 7 | 15 | 19 |
| 第15～21天 | 1 | 4 | 3 |
| 第22～28天 | 5 | 8 | 11 |
| 第29～35天 | 3 | 6 | 7 |
| 第36～42天 | 2 | 3 | 4 |
| 第43～49天 | 1 | 3 | 4 |
| 第50～56天 | 2 | 1 | 2 |
| 第57～60天 | 1 | 1 | 2 |
| 未發生（件數） | 37 | 16 | 5 |
| 發生比例 | 38.3% | 73.3% | 91.7% |
[表15]
| KS組 | K組 | 無給予組 | ||||
| 治療天數 | 頭數 | 治療天數 × 頭數 | 頭數 | 治療天數 × 頭數 | 頭數 | 治療天數 × 頭數 |
| 1天 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 |
| 2天 | 5 | 10 | 2 | 4 | 0 | 0 |
| 3天 | 10 | 30 | 2 | 6 | 0 | 0 |
| 4天 | 5 | 20 | 3 | 12 | 1 | 4 |
| 5天 | 1 | 5 | 10 | 50 | 2 | 10 |
| 6天 | 1 | 6 | 8 | 48 | 4 | 24 |
| 7天 | 1 | 7 | 7 | 49 | 6 | 42 |
| 8天 | 0 | 0 | 5 | 40 | 8 | 64 |
| 9天 | 0 | 0 | 3 | 27 | 8 | 72 |
| 10天 | 0 | 0 | 2 | 20 | 8 | 80 |
| 11天 | 0 | 0 | 1 | 11 | 8 | 88 |
| 12天 | 0 | 0 | 1 | 12 | 3 | 36 |
| 13天 | 0 | 0 | 0 | 0 | 4 | 52 |
| 14天 | 0 | 0 | 0 | 0 | 2 | 28 |
| 15天 | 0 | 0 | 0 | 0 | 1 | 15 |
| 合計23頭 | 平均3.4天 | 合計44頭 | 平均6.3天 | 合計55頭 | 平均9.4天 |
如表14與第65圖所示，KS組中，直到約60日齡為止的腹瀉的發生件數為K組的52%左右、無給予組的42%左右。此外，KS組中在全部的星期數的腹瀉的發生件數少於其他組。過半數的牛沒有發生腹瀉的也僅有KS組。
如表15與第66圖所示，KS組中，治療天數少於其他組。可知藉由將本發明的甘草萃取物作為飼料添加劑進行給予，可抑制腹瀉的發生且即便罹患腹瀉仍不易重症化，並且能夠在較短的治療時間恢復。
以往甘草被用於草藥的「大黃甘草湯」，並且已知具有瀉藥作用(造成及引發腹瀉)。然而，本發明的甘草萃取物確認到不會造成(引發)腹瀉這樣的由以往的技術常識無法預測到的新穎效果。
本發明的甘草萃取物中不僅具有甘草酸，還包含有甘草酸以外的甘草皂苷類與甘草黃酮類。如同截至目前為止所述，藉由該等成分的協同效果，牛不易受到壓力的影響，會使飼料攝取量增加，使消化吸收、免疫力和代謝提升而增加體重，也被認為是不易造成腹瀉的原因之一。
將合計180頭牛的感冒的發生件數(頭數)表示於表16與第67圖，感冒的治療天數表示於表17與第68圖。
[表16]
| KS組 | K組 | 無給予組 | |
| 第1～7天 | 0 | 1 | 1 |
| 第8～14天 | 1 | 3 | 5 |
| 第15～21天 | 1 | 2 | 4 |
| 第22～28天 | 1 | 4 | 8 |
| 第29～35天 | 0 | 3 | 5 |
| 第36～42天 | 0 | 2 | 2 |
| 第43～49天 | 1 | 1 | 2 |
| 第50～56天 | 2 | 3 | 2 |
| 第57～60天 | 1 | 2 | 3 |
| 未發生（件數） | 53 | 39 | 28 |
| 發生比例 | 11.7% | 35.0% | 53.3% |
[表17]
| KS組 | K組 | 無給予組 | ||||
| 治療天數 | 頭數 | 治療天數 × 頭數 | 頭數 | 治療天數 × 頭數 | 頭數 | 治療天數 × 頭數 |
| 1天 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 |
| 2天 | 1 | 2 | 0 | 0 | 0 | 0 |
| 3天 | 3 | 9 | 1 | 3 | 0 | 0 |
| 4天 | 1 | 4 | 1 | 4 | 0 | 0 |
| 5天 | 1 | 5 | 3 | 15 | 1 | 5 |
| 6天 | 1 | 6 | 7 | 42 | 1 | 6 |
| 7天 | 0 | 0 | 4 | 28 | 0 | 0 |
| 8天 | 0 | 0 | 1 | 8 | 5 | 40 |
| 9天 | 0 | 0 | 1 | 9 | 8 | 72 |
| 10天 | 0 | 0 | 1 | 10 | 8 | 80 |
| 11天 | 0 | 0 | 1 | 11 | 5 | 55 |
| 12天 | 0 | 0 | 1 | 12 | 1 | 12 |
| 13天 | 0 | 0 | 0 | 0 | 1 | 13 |
| 14天 | 0 | 0 | 0 | 0 | 1 | 14 |
| 15天 | 0 | 0 | 0 | 0 | 1 | 15 |
| 合計7頭 | 平均3.7天 | 合計21頭 | 平均6.8天 | 合計32頭 | 平均9.8天 |
如表16與第67圖所示，KS組中，直到約60日齡為止的感冒的發生件數為K組的33%左右、無給予組的22%左右。此外，KS組中在全部的星期數的感冒的發生件數少於其他組。
如表17與第68圖所示，KS組中，治療天數少於其他組。可知藉由將本發明的甘草萃取物作為飼料添加劑進行給予，可抑制感冒的發生且即便罹患感冒仍不易重症化而能夠以較短治療時間恢復。
此外可知：在K組與無給予組中，腹瀉和感冒橫跨整個期間地發生，但是發生數的增減在腹瀉與感冒方面相似。免疫力和抵抗力弱的牛，感冒與腹瀉容易同時地發病。藉由將本發明的甘草萃取物作為飼料添加劑進行給予，能夠防止腹瀉與感冒中的任一種，即便在發病時也能夠防止重症化而能夠降低治療天數。
小牛的感冒原因如下：來自母牛的移行免疫的降低、由於氣候和環境的變化所造成的壓力、由於通風不良所造成的氨氣和灰塵吸附等牛舍的衛生管理不充分等。由於該等原因造成免疫力和抵抗力降低時，會受到病毒和細菌感染而罹患感冒。健康的小牛的體溫為38.5～39℃，但是若罹患感冒，會出現39.5～40℃以上的發熱、咳嗽、鼻水、呼吸變快等症狀。此外，有時會陷入嗜睡、無法站立、進食困難、虛弱、食慾不振並且重症化而死亡，或者在恢復後仍變得發育不良，因此必須進行早期治療與預防。
以往，作為預防的一種方法，會讓小牛喝初乳來增加免疫力和抵抗力。但是，初乳給予不足和不吃飼料的牛會營養不良。此外，截至目前為止所述，有時會由於以增加體重為目的的高濃度的乳和高濃度的飼料的攝取對消化器官等內臟器官和肝功能造成負擔，免疫力和抵抗力降低而罹患感冒。
如同試驗1～試驗5的結果所示，本發明的甘草萃取物具有如下效果：飼料攝取量的增加、營養的消化吸收與代謝的改善、發育狀態與免疫力的改善、肝功能的改善、體重增加等。藉由將本發明的甘草萃取物作為飼料添加劑進行給予，能夠防止成為感冒的原因的營養不良和免疫力的降低，防止感冒並且防止重症化，並且能夠降低治療天數。
本發明的甘草萃取物，能夠用作多機能性的飼料添加劑的原料來使用，該多機能性的飼料添加劑是以如下效果為目的：飼料攝取量的增加、營養的消化吸收與代謝的改善、發育狀態與免疫力的改善、肝功能的改善、體重增加、屠體重的增加、屠宰率的提升、腹瀉的預防、腹瀉的治療天數的降低、感冒的預防及/或感冒的治療天數的降低。
試驗6. 包含甘草萃取物與水溶性膳食纖維之飼料添加劑的給予
6.1 腹瀉的發生件數
以自生後約5日齡起至約60日齡的黑毛和牛的小牛雄性60頭與黑毛和牛的小牛雌性60頭，合計120頭為對象，調查生後約60日間的腹瀉的發生比例與直到完全痊癒為止的治療天數。
將對象的牛分為表18所示的給予組與無給予組。針對給予組的牛，對飼料給予包含實施例5的甘草萃取物之飼料添加劑A與飼料添加劑B來進行給予。無給予組的飼料中並未添加甘草萃取物。
[表18]
| 給予組 | 無給予組 | 合計 | |
| 雄性小牛 | 30頭 | 30頭 | 60頭 |
| 雌性小牛 | 30頭 | 30頭 | 60頭 |
飼料添加劑A是均勻地混合實施例5的甘草萃取物10質量%、作為水溶性膳食纖維的葡甘聚醣(平均粒徑150～200目)30質量%及澱粉分解物(松谷化學工業股份有限公司，paindex#1)60質量%所調製而成。
飼料添加劑B是均勻地混合實施例5的甘草萃取物40質量%與作為水溶性膳食纖維的葡甘聚醣(平均粒徑150～200目)60質量%所調製而成。
飼料添加劑A、B的成分如同表19所示。
[表19]
| (每100g) | ||
| 飼料添加劑A | 飼料添加劑B | |
| 蛋白質 | 3.8g | 1.1g |
| 脂質 | 21.1g | 7.9g |
| 碳水化合物 | 68.8g | 67.2g |
| 灰分 | 0.1g | 14.7g |
| 鈉 | 12mg | 844mg |
自生後約5日齡起至生後約30日齡為止的期間，使飼料添加劑A均勻地分散於代用乳中，以5 g/頭在早上及晚上給予2次，合計以10 g/頭/天的方式進行給予。自生後約31日齡起至生後約60日齡的期間，將對飼料添加劑B適量地添加水而作成團狀者，以2.5 g/頭在早上及晚上進行2次的經口給予，合計以5 g/頭/天的方式進行給予。
在表20中表示腹瀉的發生件數(頭數)與發生比例。
[表20]
| 生後 | 給予組 | 無給予組 |
| 第1～7天 | 1 | 3 |
| 第8～14天 | 0 | 10 |
| 第15～21天 | 2 | 2 |
| 第22～28天 | 2 | 8 |
| 第29～35天 | 3 | 5 |
| 第36～42天 | 3 | 3 |
| 第43～49天 | 1 | 3 |
| 第50～56天 | 0 | 2 |
| 第57～60天 | 1 | 2 |
| 發生件數 | 13 | 38 |
| 發生比例 | 21.6% | 63.3% |
如表20所示，給予組中腹瀉的發生被抑制至無給予組的1/3左右。
6.2 腹瀉的治療天數
以罹患腹瀉的小牛為對象，給予飼料添加劑A與飼料添加劑B來調查治療天數。對象不論生後日齡，為罹患腹瀉的雄性小牛36頭與雌性小牛28頭，合計64頭，如同表21所示地分為給予組與無給予組。
[表21]
| 給予組 | 無給予組 | 合計 | |
| 罹患腹瀉的雄性小牛 | 18頭 | 18頭 | 36頭 |
| 罹患腹瀉的 雌性小牛 | 14頭 | 14頭 | 28頭 |
自生後約5日齡起至生後約30日齡為止的期間，使飼料添加劑A均勻地分散於代用乳中，以5 g/頭在早上及晚上給予2次，合計以10 g/頭/天的方式進行給予。自生後約31日齡起至生後約60日齡的期間，將對飼料添加劑B適量地添加水而作成團狀者，以2.5 g/頭在早上及晚上進行2次的經口給予，合計以5 g/頭/天的方式進行給予。
在表22中表示腹瀉的治療天數與平均治療天數。
[表22]
| 治療天數 | 給予組 | 無給予組 |
| 1天 | 4 | 0 |
| 2天 | 17 | 0 |
| 3天 | 3 | 4 |
| 4天 | 2 | 1 |
| 5天 | 1 | 4 |
| 6天 | 0 | 6 |
| 7天 | 0 | 8 |
| 8天 | 0 | 4 |
| 9天 | 0 | 6 |
| 10天 | 0 | 2 |
| 11天 | 0 | 1 |
| 12天 | 0 | 1 |
| 13天 | 0 | 0 |
| 14天 | 0 | 0 |
| 15天 | 0 | 0 |
| 合計(頭數) | 27 | 37 |
| 完全痊癒平均 | 2.22天 | 6.94天 |
如表22所示，給予組中腹瀉的治療天數能夠縮短至無給予組的1/3以下。藉由對本發明的甘草萃取物添加葡甘聚醣之本發明的飼料添加劑，除了藉由甘草萃取物產生的效果與藉由葡甘聚醣產生的整腸作用，還可以有效地抑制腹瀉的發生，並且能夠降低治療天數。
試驗7. 自生後起約240日齡～約270日齡為止(KS組、KK組、K組、無給予組的比較)
對自生後起約240日齡～約270日齡為止的小牛給予本發明的甘草萃取物作為飼料添加劑，藉此來調查本發明的甘草萃取物對於離乳時的飼料的剩食量的降低(餌食攝取量的增加)、營養狀態(血液檢查的GOT值)、體重產生的影響。
本試驗中，與試驗1相同，為了明確地確認藉由甘草萃取物的效果，在約80日齡時已完全離乳。
對象是自生後0日齡起至小牛拍賣市場出貨日時為止的黑毛和牛去勢雄性小牛20頭與雌性小牛20頭，合計40頭。分為如表23所示的4組。
KS組是自生後約5日齡起將實施例5的甘草萃取物作為飼料添加劑添加至飼料中，KK組是將實施例11的甘草萃取物作為飼料添加劑添加至飼料中，K組是將比較例1的甘草萃取物作為飼料添加劑添加至飼料中。無給予組並未對飼料添加甘草萃取物。甘草萃取物以外的飼料(代用乳、人造奶、混合飼料、牧草等粗飼料)是將表示於表24的飼料分為1天3次，81日齡以後是以混合飼料、稻草、燕麥的順序，對各組同時地給予相同量。離乳飼料與燕麥是自生後約2星期後開始給予。
[表23]
| 甘草萃取物 | 雄性 | 雌性 | 合計 | |
| KS組 | 實施例5 | 5頭 | 5頭 | 10頭 |
| KK組 | 實施例11 | 5頭 | 5頭 | 10頭 |
| K組 | 比較例1 | 5頭 | 5頭 | 10頭 |
| 無給予組 | 無 | 5頭 | 5頭 | 10頭 |
[表24]
| 代用乳 人造乳 | 離乳飼料 | 混合飼料 | 稻草 | 燕麥 | |
| 0～30天 | 給予 | 0.3kg | － | － | 0.03kg |
| 31～60天 | 給予 | 1.5kg | － | － | 0.2kg |
| 61～80天 | 給予 | 3.2kg | － | － | 0.4kg |
| 81～120天 | － | － | 4.5kg | 0.4kg | 1.8kg |
| 121～150天 | － | － | 5.5kg | 0.4kg | 2.5kg |
| 151～180天 | － | － | 4.5kg | 0.4kg | 4.0kg |
| 181～210天 | － | － | 4.5kg | 0.4kg | 4.5kg |
| 211～240天 | － | － | 4.5kg | 0.4kg | 5.0kg |
[表25]
| 代用乳 人造乳 | 離乳飼料 | 混合飼料 | 稻草 | 燕麥 | |
| 0～30天 | 給予 | 0.3kg | － | － | 0.03kg |
| 31～60天 | 給予 | 1.5kg | － | － | 0.2kg |
| 61～80天 | 給予 | 3.0kg | － | － | 0.4kg |
| 81～120天 | － | － | 4.0kg | 0.4kg | 1.5kg |
| 121～150天 | － | － | 4.5kg | 0.4kg | 3.5kg |
| 151～180天 | － | － | 4.0kg | 0.4kg | 4.0kg |
| 181～210天 | － | － | 4.0kg | 0.4kg | 4.5kg |
| 211～240天 | － | － | 4.0kg | 0.4kg | 4.5kg |
| (241～270天) | － | － | (4.0kg) | (0.4kg) | (4.5kg) |
針對KS組，將實施例5的甘草萃取物作為飼料添加劑以如下量添加至飼料來進行給予：自生後約第5天起為1 g/天/頭，自生後約41天起為2 g/天/頭，自生後約81天起至約240天為止為3 g/天/頭。針對KK組，將實施例11的甘草萃取物作為飼料添加劑以如下量添加至飼料來進行給予：自生後約第5天起為1 g/天/頭，自生後約41天起為2 g/天/頭，自生後約81天起至約240天為止為3 g/天/頭。針對K組，將比較例1的甘草萃取物作為飼料添加劑以如下量添加至飼料來進行給予：自生後約第5天起為1 g/天/頭，自生後約41天起為2 g/天/頭，自生後約81天起至約240天為止為3 g/天/頭。
7.1 剩食量
如同上述，約81日齡之後將飼料以混合飼料、稻草、燕麥的順序進行給予，因此當發生剩餘飼料時，剩餘飼料會是燕麥。因而將燕麥的剩餘飼料重量作為剩食量進行測量。將約81日齡的離乳第一天視為第一天，在第69圖與第70圖中顯示剩食量的演變。
如第69圖所示，雄性在KS組中自離乳第2天起、在KK組中自離乳第4天起即沒有剩食地呈現持續吃完飼料的狀態。K組中，在第8天曾一度吃完飼料，但是再次發生剩食，直到呈現持續吃完飼料的狀態需要10天。無給予組自離乳開始到第10天仍未吃完飼料。
如第70圖所示，雌性在KS組中自離乳第5天起、在KK組中自離乳第6天起即沒有剩食地呈現持續吃完飼料的狀態。K組中，在第7天曾一度吃完飼料，但是再次發生剩食，直到呈現持續吃完飼料的狀態需要9天。無給予組自離乳開始到第10天仍未吃完飼料。
如此，在自生後約5日齡起給予實施例5的甘草萃取物的KS組與給予實施例11的甘草萃取物的KK組中，自約81日齡的離乳後起即表現出藉由給予甘草萃取物所產生的效果。比起給予包含13%以上的甘草酸之甘草萃取物的K組仍可確認到較高的效果，藉此確認了實施例5的甘草萃取物中所包含的甘草酸、甘草皂苷類、甘草黃酮類對於剩食量的降低(餌食攝取量的增加)的協同效果。
在KK組中給予的實施例11的甘草萃取物，甘草酸、甘草皂苷類、甘草黃酮類皆少於實施例5，但是在KK組中仍獲得不遜於KS組的效果，並且確認到比K組更高的效果。
如同上述，認為飼料攝取量會反映小牛的壓力和消化器官的負擔、消化器官的發育程度。認為比起K組、無給予組，在自離乳後立刻吃完飼料而飼料攝取量較多的KS組與KK組中可降低牛的壓力，消化器官的負擔少，並且消化器官的發育狀態佳。
7.2 血液檢查結果(GOT值)
全部的牛的血液檢查(GOT值)在生後約40日齡與約160日齡實施2次。
將各組的5頭的GOT值的平均值與不包括5頭中的數值的最高值與最低值的2頭之3頭的GOT值的平均值顯示於第71圖～第74圖(GOT值)。
如第71圖～第74圖所示，KS組與KK組中在生後約40日齡與生後約160日齡中的任一時間點，GOT值皆低於其他組。KS組與KK組中，GOT值進一步在生後約160日齡時低於生後約40日齡。另一方面，K組與無給予組中在生後約40日齡與生後約160日齡的GOT值呈現持平，或稍微變高。比起在KS組中給予的實施例5，在KK組中給予的實施例11的甘草萃取物，在(A)甘草酸、(B)甘草酸以外的甘草皂苷類、(C)甘草黃酮類的含量皆較低，但是仍獲得與KS組相同程度的效果。
由以上的結果可知，是藉由甘草酸、其他甘草皂苷類及甘草黃酮類的複合性效果而對於肝功能(GOT值)帶來良好的影響，而非甘草酸所產生的效果。
7.3 體重
在第75圖～第78圖中顯示拍賣市場出貨時所測定的體重的各組5頭的平均值與不包括5頭中的數值的最高值與最低值的2頭之3頭的平均值。雌性的無給予組中，在240天時仍重量不足，因此在270天時才出貨。再者，由於拍賣市場的開市日期有所限定，因此出貨時的日齡有些許差異。
如第75圖～第78圖所示，在KS組的體重皆大於其他組。在KK組中，增加體重仍大於無給予組。特別是，雌性的無給予組的出貨日被延長至約270日齡，但是體重仍不及在240日齡的時間點的KS組與KK組。
試驗8. 腹瀉與感冒的發生與治療天數(KS組、KK組、K組、無給予組的比較)
對自生後約5日齡起至約60日齡為止的小牛給予本發明的甘草萃取物作為飼料添加劑，藉此來調查本發明的甘草萃取物對於由於消化不良所造成的腹瀉的發生比例、由於消化不良所造成的腹瀉的治療天數、感冒的發生比例、感冒的治療天數產生的影響。
對象為自生後約5日齡起至約60日齡的期間的黑毛和牛小牛80頭。分為表26所表示的4組。
[表26]
| A農場 | B農場 | 合計 | |||
| 雄性 | 雌性 | 雄性 | 雌性 | ||
| KS組 | 5頭 | 5頭 | 5頭 | 5頭 | 20頭 |
| KK組 | 5頭 | 5頭 | 5頭 | 5頭 | 20頭 |
| K組 | 5頭 | 5頭 | 5頭 | 5頭 | 20頭 |
| 無給予組 | 5頭 | 5頭 | 5頭 | 5頭 | 20頭 |
KS組是將實施例5的甘草萃取物作為飼料添加劑添加至飼料中，KK組是將實施例11的甘草萃取物作為飼料添加劑添加至飼料中，K組是將比較例1的甘草萃取物作為飼料添加劑添加至飼料中。無給予組並未對飼料添加甘草萃取物。甘草萃取物以外的飼料(代用乳、離乳飼料、燕麥)，針對雄性及雌性皆是分為1天3次對各組同時地給予相同量。離乳飼料與燕麥是自生後約2星期後開始給予。
針對KS組，自生後約5日齡起至生後約60日齡為止，對飼料添加2 g/天/頭的實施例5的甘草萃取物作為飼料添加劑來進行給予。針對KK組，自生後約5日齡起至生後約60日齡為止，對飼料添加2 g/天/頭的實施例11的甘草萃取物作為飼料添加劑來進行給予。針對K組，自生後約5日齡起至生後約60日齡為止，對飼料添加2 g/天/頭的比較例1的甘草萃取物作為飼料添加劑來進行給予。
將合計80頭的牛由於消化不良所造成的腹瀉的發生件數(頭數)表示於表27與第79圖，將腹瀉的治療天數表示於表28與第80圖。
[表27]
| KS組 | KK組 | K組 | 無給予組 | |
| 第1～7天 | 1 | 2 | 0 | 2 |
| 第8～14天 | 1 | 1 | 3 | 2 |
| 第15～21天 | 1 | 1 | 3 | 1 |
| 第22～28天 | 1 | 2 | 2 | 4 |
| 第29～35天 | 0 | 1 | 1 | 4 |
| 第36～42天 | 1 | 1 | 1 | 0 |
| 第43～49天 | 1 | 0 | 1 | 2 |
| 第50～56天 | 0 | 1 | 2 | 1 |
| 第57～60天 | 1 | 1 | 1 | 1 |
| 未發生（件數） | 13 | 9 | 6 | 3 |
| 腹瀉的發生比例 | 35.0% | 50.0% | 70.0% | 85.0% |
[表28]
| KS組 | KK組 | K組 | 無給予組 | ||||||||
| 腹瀉 治療天數 | 頭數 | 治療天數 × 頭數 | 頭數 | 治療天數 × 頭數 | 頭數 | 治療天數 × 頭數 | 頭數 | 治療天數 × 頭數 | |||
| 1天 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | |||
| 2天 | 2 | 4 | 2 | 4 | 2 | 4 | 1 | 2 | |||
| 3天 | 2 | 6 | 3 | 9 | 0 | 0 | 1 | 3 | |||
| 4天 | 3 | 12 | 2 | 8 | 2 | 8 | 2 | 8 | |||
| 5天 | 0 | 0 | 2 | 10 | 3 | 15 | 3 | 15 | |||
| 6天 | 0 | 0 | 1 | 6 | 2 | 12 | 1 | 6 | |||
| 7天 | 0 | 0 | 0 | 0 | 1 | 7 | 3 | 21 | |||
| 8天 | 0 | 0 | 0 | 0 | 1 | 8 | 3 | 24 | |||
| 9天 | 0 | 0 | 0 | 0 | 2 | 18 | 1 | 9 | |||
| 10天 | 0 | 0 | 0 | 0 | 1 | 10 | 1 | 10 | |||
| 11天 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 1 | 11 | |||
| 12天 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | |||
| 13天 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | |||
| 14天 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | |||
| 15天 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | |||
| 合計7頭 | 平均 3.1天 | 合計10頭 | 平均 3.7天 | 合計14頭 | 平均 5.9天 | 合計17頭 | 平均 6.4天 | ||||
如表27～表28與第79圖～第80圖所示，KS組與KK組中，腹瀉的發生件數被抑制至牛的半數以下。
在KS組與KK組中，治療天數也少於其他組。可知藉由將本發明的甘草萃取物作為飼料添加劑進行給予，可抑制腹瀉的發生且即便罹患腹瀉仍不易重症化，並且能夠在較短的治療時間恢復。
繼而，將合計20頭牛的感冒的發生件數(頭數)表示於表29與第81圖，將感冒的治療天數表示於表30與第82圖。
[表29]
| KS組 | KK組 | K組 | 無給予組 | |
| 第1～7天 | 2 | 2 | 1 | 2 |
| 第8～14天 | 1 | 0 | 1 | 1 |
| 第15～21天 | 0 | 1 | 3 | 2 |
| 第22～28天 | 2 | 1 | 1 | 3 |
| 第29～35天 | 0 | 3 | 2 | 3 |
| 第36～42天 | 0 | 2 | 2 | 2 |
| 第43～49天 | 2 | 0 | 2 | 1 |
| 第50～56天 | 0 | 1 | 1 | 3 |
| 第57～60天 | 0 | 1 | 3 | 2 |
| 未發生(件數) | 13 | 9 | 4 | 1 |
| 感冒的發生比例 | 35.0% | 55.0% | 80.0% | 95.0% |
[表30]
| KS組 | KK組 | K組 | 無給予組 | ||||||||
| 感冒 治療天數 | 頭數 | 治療天數 × 頭數 | 頭數 | 治療天數 × 頭數 | 頭數 | 治療天數 × 頭數 | 頭數 | 治療天數 × 頭數 | |||
| 1天 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | |||
| 2天 | 1 | 2 | 2 | 4 | 0 | 0 | 0 | 0 | |||
| 3天 | 2 | 6 | 3 | 9 | 1 | 3 | 1 | 3 | |||
| 4天 | 2 | 8 | 2 | 8 | 2 | 8 | 1 | 4 | |||
| 5天 | 1 | 5 | 0 | 0 | 1 | 5 | 1 | 5 | |||
| 6天 | 1 | 6 | 2 | 12 | 2 | 12 | 1 | 6 | |||
| 7天 | 0 | 0 | 2 | 14 | 4 | 28 | 4 | 28 | |||
| 8天 | 0 | 0 | 0 | 0 | 3 | 24 | 2 | 16 | |||
| 9天 | 0 | 0 | 0 | 0 | 1 | 9 | 2 | 18 | |||
| 10天 | 0 | 0 | 0 | 0 | 1 | 10 | 2 | 20 | |||
| 11天 | 0 | 0 | 0 | 0 | 1 | 11 | 4 | 44 | |||
| 12天 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 1 | 12 | |||
| 13天 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | |||
| 14天 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | |||
| 15天 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | |||
| 合計7頭 | 平均 3.9天 | 合計11頭 | 平均 4.3天 | 合計16頭 | 平均 6.9天 | 合計19頭 | 平均 8.2天 | ||||
如表29～表30與第81圖～第82圖所示，KS組中感冒的發生件數被抑制至牛的半數以下。即便在KK組中，比起8成以上的牛罹患感冒的K組與無給予組，仍能夠大幅地降低感冒的發生件數。
在KS組與KK組中，治療天數也少於其他組。可知藉由將本發明的甘草萃取物作為飼料添加劑進行給予，可抑制感冒的發生且即便罹患感冒仍不易重症化，並且能夠在較短的治療時間恢復。
試驗9. 自生後起約240日齡～約270日齡為止(KS組、TK組、K組、無給予組的比較)
對自生後起約240日齡～約270日齡為止的小牛給予本發明的甘草萃取物作為飼料添加劑，藉此來調查本發明的甘草萃取物對於離乳時的飼料剩食量的降低(餌食攝取量的增加)、營養狀態(血液檢查的GOT值)、體重產生的影響。
本試驗中，與試驗1相同，為了明確地確認藉由甘草萃取物的效果，在約80日齡時已完全離乳。
對象是自生後0日齡起至小牛拍賣市場出貨時日齡為止的黑毛和牛去勢雄性小牛20頭與雌性小牛20頭，合計40頭。分為如表31所示的4組。
KS組是自生後約5日齡起將實施例5的甘草萃取物作為飼料添加劑添加至飼料中，TK組是將實施例12的甘草萃取物作為飼料添加劑添加至飼料中，K組是將比較例1的甘草萃取物作為飼料添加劑添加至飼料中。無給予組並未對飼料添加甘草萃取物。甘草萃取物以外的飼料(代用乳、人造奶、混合飼料、牧草等粗飼料)是將表示於表32的飼料分為1天3次，81日齡以後是以混合飼料、稻草、燕麥的順序，對各組同時地給予相同量。離乳飼料與燕麥是自生後約2星期後開始給予。
[表31]
| 甘草萃取物 | 雄性 | 雌性 | 合計 | |
| KS組 | 實施例5 | 5頭 | 5頭 | 10頭 |
| TK組 | 實施例12 | 5頭 | 5頭 | 10頭 |
| K組 | 比較例1 | 5頭 | 5頭 | 10頭 |
| 無給予組 | 無 | 5頭 | 5頭 | 10頭 |
[表32]
| 代用乳 人造乳 | 離乳飼料 | 混合飼料 | 稻草 | 燕麥 | |
| 0～30天 | 給予 | 0.3kg | － | － | 0.03kg |
| 31～60天 | 給予 | 1.5kg | － | － | 0.2kg |
| 61～80天 | 給予 | 3.2kg | － | － | 0.4kg |
| 81～120天 | － | － | 4.5kg | 0.4kg | 1.8kg |
| 121～150天 | － | － | 5.5kg | 0.4kg | 2.5kg |
| 151～180天 | － | － | 4.5kg | 0.4kg | 4.0kg |
| 181～210天 | － | － | 4.5kg | 0.4kg | 4.5kg |
| 211～240天 | － | － | 4.5kg | 0.4kg | 5.0kg |
[表33]
| 代用乳 人造乳 | 離乳飼料 | 混合飼料 | 稻草 | 燕麥 | |
| 0～30天 | 給与 | 0.3kg | － | － | 0.03kg |
| 31～60天 | 給与 | 1.5kg | － | － | 0.2kg |
| 61～80天 | 給与 | 3.0kg | － | － | 0.4kg |
| 81～120天 | － | － | 4.0kg | 0.4kg | 1.5kg |
| 121～150天 | － | － | 4.5kg | 0.4kg | 3.5kg |
| 151～180天 | － | － | 4.0kg | 0.4kg | 4.0kg |
| 181～210天 | － | － | 4.0kg | 0.4kg | 4.5kg |
| 211～240天 | － | － | 4.0kg | 0.4kg | 4.5kg |
| (241～270天) | － | － | (4.0kg) | (0.4kg) | (4.5kg) |
針對KS組，將實施例5的甘草萃取物作為飼料添加劑以如下量添加至飼料來進行給予：自生後約第5天起為1 g/天/頭，自生後約41天起為2 g/天/頭，自生後約81天起至約240天為止為3 g/天/頭。針對TK組，將實施例12的甘草萃取物作為飼料添加劑以如下量添加至飼料來進行給予：自生後約第5天起為1 g/天/頭，自生後約41天起為2 g/天/頭，自生後約81天起至約240天為止為3 g/天/頭。針對K組，將比較例1的甘草萃取物作為飼料添加劑以如下量添加至飼料來進行給予：自生後約第5天起為1 g/天/頭，自生後約41天起為2 g/天/頭，自生後約81天起至約240天為止為3 g/天/頭。
9.1 剩食量
如同上述，約81日齡之後將飼料以混合飼料、稻草、燕麥的順序進行給予，因此當發生剩餘飼料時，剩餘飼料會是燕麥。因而將燕麥的剩餘飼料重量作為剩食量進行測量。將約81日齡的離乳第一天視為第一天，在第83圖與第84圖中顯示剩食量的演變。
如第83圖所示，雄性在KS組中自離乳第3天起、在TK組中自離乳第5天起即沒有剩食地呈現持續吃完飼料的狀態。K組中，在第6天曾一度吃完飼料，但是再次發生剩食，直到呈現持續吃完飼料的狀態需要8天。無給予組在自離乳起第10天吃完飼料。
如第84圖所示，雌性在KS組中自離乳第5天起、在TK組中自離乳第7天起即沒有剩食地呈現持續吃完飼料的狀態。K組中，在自離乳起第9天吃完飼料。無給予組在自離乳起的第9天吃完飼料，但是第10天時仍未吃完飼料。
如此，在自生後約5日齡起給予實施例5的甘草萃取物的KS組與給予實施例12的甘草萃取物的TK組中，自約81日齡的離乳後起即表現出藉由給予甘草萃取物所產生的效果。比起給予包含13%以上的甘草酸之甘草萃取物的K組仍可確認到較高的效果，藉此確認了實施例5的甘草萃取物中所包含的甘草酸、甘草皂苷類、甘草黃酮類對於剩食量的降低(餌食攝取量的增加)的協同效果。
在TK組中給予的實施例12的甘草萃取物，甘草酸為15.3%而多於在KS組中給予的實施例5。另一方面，實施例12的甘草萃取物的甘草皂苷類與甘草黃酮類少於實施例5。第83圖～第84圖中，若比較KS組與TK組，即便甘草酸少但甘草酸以外的甘草皂苷類與甘草黃酮類較多的KS組在增加體重方面仍是有效的，亦即，顯示了是各成分的複合效果而非甘草酸含量的多寡。
如同上述，認為飼料攝取量會反映小牛的壓力和消化器官的負擔、消化器官的發育程度。認為比起K組、無給予組，在自離乳後立刻吃完飼料而飼料攝取量較多的KS組與TK組中可降低牛的壓力，消化器官的負擔少，並且消化器官的發育狀態佳。
9.2血液檢查結果(GOT值)
全部的牛的血液檢查(GOT值)在生後約40日齡與約160日齡實施2次。
將各組的5頭的GOT值的平均值與不包括5頭中的數值的最高值與最低值的2頭之3頭的GOT值的平均值顯示於第85圖～第88圖(GOT值)。
如第85圖～第88圖所示，KS組與TK組中在生後約40日齡與生後約160日齡中的任一時間點，GOT值皆低於其他組。KS組與TK組中，GOT值進一步在生後約160日齡時低於生後約40日齡。另一方面，K組與無給予組中在生後約40日齡與生後約160日齡的GOT值呈現持平，或稍微變高。
由以上的結果可知，是藉由甘草酸、其他甘草皂苷類及甘草黃酮類的複合性效果而對於肝功能(GOT值)帶來良好的影響，而非甘草酸所產生的效果。
9.3 體重
在第89圖～第92圖中顯示拍賣市場出貨時所測定的體重的各組5頭的平均值與不包括5頭中的數值的最高值與最低值的2頭之3頭的平均值。雌性的無給予組中，在240天時仍重量不足，因此在270天時才出貨。再者，由於拍賣市場的開市日期有所限定，因此出貨時的日齡有些許差異。
如第89圖～第92圖所示，在KS組的體重皆大於其他組。在TK組中，增加體重仍大於無給予組。特別是，雌性在無給予組中的出貨日被延長至約270日齡，但是體重仍不及在240日齡的時間點的KS組與TK組。
試驗10. 腹瀉與感冒的發生與治療天數(KS組、TK組、K組、無給予組的比較)
對自生後約5日齡起至約60日齡為止的小牛給予本發明的甘草萃取物作為飼料添加劑，藉此來調查本發明的甘草萃取物對於由於消化不良所造成的腹瀉的發生比例、由於消化不良所造成的腹瀉的治療天數、感冒的發生比例、感冒的治療天數產生的影響。
對象為自生後約5日齡起至約60日齡的期間的黑毛和牛小牛40頭。分為表34所表示的4組。
[表34]
| A農場 | B農場 | 合計 | |
| 雄性 | 雌性 | ||
| KS組 | 5頭 | 5頭 | 10頭 |
| TK組 | 5頭 | 5頭 | 10頭 |
| K組 | 5頭 | 5頭 | 10頭 |
| 無給予組 | 5頭 | 5頭 | 10頭 |
KS組是將實施例5的甘草萃取物作為飼料添加劑添加至飼料中，TK組是將實施例12的甘草萃取物作為飼料添加劑添加至飼料中，K組是將比較例1的甘草萃取物作為飼料添加劑添加至飼料中。無給予組並未對飼料添加甘草萃取物。甘草萃取物以外的飼料(代用乳、離乳飼料、燕麥)，針對雄性及雌性皆是分為1天3次對各組同時地給予相同量。離乳飼料與燕麥是自生後約2星期後開始給予。
針對KS組，自生後約5日齡起至生後約60日齡為止，對飼料添加2 g/天/頭的實施例5的甘草萃取物作為飼料添加劑來進行給予。針對TK組，自生後約5日齡起至生後約60日齡為止，對飼料添加2 g/天/頭的實施例12的甘草萃取物作為飼料添加劑來進行給予。針對K組，自生後約5日齡起至生後約60日齡為止，對飼料添加2 g/天/頭的比較例1的甘草萃取物作為飼料添加劑來進行給予。
將合計80頭的牛由於消化不良所造成的腹瀉的發生件數(頭數)表示於表35與第93圖，將腹瀉的治療天數表示於表36與第94圖。
[表35]
| KS組 | TK組 | K組 | 無給予組 | |
| 第1～7天 | 1 | 2 | 0 | 1 |
| 第8～14天 | 0 | 1 | 2 | 1 |
| 第15～21天 | 1 | 1 | 1 | 1 |
| 第22～28天 | 1 | 1 | 2 | 2 |
| 第29～35天 | 0 | 0 | 0 | 1 |
| 第36～42天 | 0 | 0 | 2 | 1 |
| 第43～49天 | 0 | 0 | 0 | 1 |
| 第50～56天 | 0 | 0 | 1 | 1 |
| 第57～60天 | 0 | 0 | 0 | 0 |
| 未發生（件數） | 7 | 5 | 2 | 1 |
| 腹瀉的發生比例 | 30.0% | 50.0% | 80.0% | 90.0% |
[表36]
| KS組 | TK組 | K組 | 無給予組 | ||||||||
| 腹瀉 治療天數 | 頭數 | 治療天數 × 頭數 | 頭數 | 治療天數 × 頭數 | 頭數 | 治療天數 × 頭數 | 頭數 | 治療天數 × 頭數 | |||
| 1天 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | |||
| 2天 | 1 | 2 | 0 | 0 | 1 | 2 | 0 | 0 | |||
| 3天 | 1 | 3 | 2 | 6 | 0 | 0 | 1 | 3 | |||
| 4天 | 1 | 4 | 2 | 8 | 0 | 0 | 0 | 0 | |||
| 5天 | 0 | 0 | 0 | 0 | 2 | 10 | 2 | 10 | |||
| 6天 | 0 | 0 | 1 | 6 | 1 | 6 | 2 | 12 | |||
| 7天 | 0 | 0 | 0 | 0 | 1 | 7 | 0 | 0 | |||
| 8天 | 0 | 0 | 0 | 0 | 2 | 16 | 1 | 8 | |||
| 9天 | 0 | 0 | 0 | 0 | 1 | 9 | 2 | 18 | |||
| 10天 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | |||
| 11天 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 1 | 11 | |||
| 12天 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | |||
| 13天 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | |||
| 14天 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | |||
| 15天 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | |||
| 合計3頭 | 平均 3.0天 | 合計5頭 | 平均 4.0天 | 合計8頭 | 平均 6.3天 | 合計9頭 | 平均 6.9天 | ||||
如表35～表36與第93圖～第94圖所示，KS組與TK組中，腹瀉的發生件數被抑制至牛的半數以下。
在KS組與TK組中，治療天數也少於其他組。可知藉由將本發明的甘草萃取物作為飼料添加劑進行給予，可抑制腹瀉的發生且即便罹患腹瀉仍不易重症化，並且能夠在較短的治療時間恢復。特別是，若僅觀察甘草酸的量，在KS組中少於TK組、K組，但是腹瀉的發生件數和治療天數皆最少。在該試驗中，顯示了(A)甘草酸、(B)甘草酸以外的甘草皂苷類及(C)甘草黃酮類的複合效果，而非甘草酸單獨的效果。
繼而，將合計40頭牛的感冒的發生件數(頭數)表示於表37與第95圖，將感冒的治療天數表示於表38與第96圖。
[表37]
| KS組 | TK組 | K組 | 無給予組 | |
| 第1～7天 | 1 | 1 | 0 | 2 |
| 第8～14天 | 0 | 1 | 2 | 0 |
| 第15～21天 | 1 | 0 | 1 | 2 |
| 第22～28天 | 0 | 1 | 1 | 1 |
| 第29～35天 | 0 | 1 | 1 | 0 |
| 第36～42天 | 1 | 0 | 0 | 2 |
| 第43～49天 | 0 | 1 | 1 | 0 |
| 第50～56天 | 0 | 0 | 1 | 1 |
| 第57～60天 | 0 | 0 | 0 | 1 |
| 未發生（件數） | 7 | 5 | 3 | 1 |
| 感冒的發生比例 | 30.0% | 50.0% | 70.0% | 90.0% |
[表38]
| KS組 | TK組 | K組 | 無給予組 | ||||||||
| 感冒 治療天數 | 頭數 | 治療天數 × 頭數 | 頭數 | 治療天數 × 頭數 | 頭數 | 治療天數 × 頭數 | 頭數 | 治療天數 × 頭數 | |||
| 1天 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | |||
| 2天 | 1 | 2 | 1 | 2 | 0 | 0 | 0 | 0 | |||
| 3天 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | |||
| 4天 | 2 | 8 | 2 | 8 | 1 | 4 | 2 | 8 | |||
| 5天 | 0 | 0 | 1 | 5 | 2 | 10 | 1 | 5 | |||
| 6天 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | |||
| 7天 | 0 | 0 | 1 | 7 | 1 | 7 | 1 | 7 | |||
| 8天 | 0 | 0 | 0 | 0 | 1 | 8 | 0 | 0 | |||
| 9天 | 0 | 0 | 0 | 0 | 1 | 9 | 2 | 18 | |||
| 10天 | 0 | 0 | 0 | 0 | 1 | 10 | 1 | 10 | |||
| 11天 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 1 | 11 | |||
| 12天 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 1 | 12 | |||
| 13天 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | |||
| 14天 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | |||
| 15天 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | |||
| 合計3頭 | 平均 3.3天 | 合計5頭 | 平均 4.4天 | 合計7頭 | 平均 6.9天 | 合計9頭 | 平均 7.9天 | ||||
如表37～表38與第95圖～第96圖所示，KS組中與TK組中，感冒的發生件數能被抑制至牛的半數以下。
在KS組與TK組中，治療天數也少於其他組。可知藉由將本發明的甘草萃取物作為飼料添加劑進行給予，可抑制感冒的發生且即便罹患感冒仍不易重症化，並且能夠在較短的治療時間恢復。
如同以上，確認到：藉由對哺乳動物或家畜給予本發明的甘草萃取物或包含甘草萃取物之營養補充品或飼料添加劑，而能夠藉由哺乳動物或家畜的選自由餌食攝取量的增量、血液中的總膽固醇值的增加、血液中的維生素A值的增加、血液中的GOT值的降低、體重的增加、腹瀉的預防、腹瀉的治療天數的降低、感冒的預防及感冒的治療天數的降低所組成的群組中的至少一種作用來改善健康狀態。
此外，如同以上，在哺乳、離乳、肥育中的任一階段實行的試驗中，即便KS組、K組、無給予組中在甘草萃取物以外給予相同種類、相同量的飼料，KS組比起其他組，剩食量少(餌食攝取量多)，並且具有如下效果：體重增加和屠體重的增加、屠宰率的增大、食用肝臟廢棄率的降低。確認到藉由對哺乳動物或家畜給予本發明的甘草萃取物或包含甘草萃取物之營養補充品或飼料添加劑，會使經給予的飼料與肉品生產量的重量比(飼料效率)增大。
以上所揭示的實施形態與實施例，在全部的要點上應考慮為例示而不具限制性。本發明的範圍除了以上的說明，還包含由發明申請專利範圍所表示並且與發明申請專利範圍具有均等意義及範圍內的全部變化。
無
第1圖是顯示試驗1的各組的雄性10頭平均的剩食量的比較的圖。
第2圖是顯示試驗1的各組的雌性10頭平均的剩食量的比較的圖。
第3圖是顯示試驗1的各組的雄性10頭平均的總膽固醇值的圖。
第4圖是顯示試驗1的各組的雌性10頭平均的總膽固醇值的圖。
第5圖是顯示試驗1的各組的雄性8頭平均的總膽固醇值的圖。
第6圖是顯示試驗1的各組的雌性8頭平均的總膽固醇值的圖。
第7圖是顯示試驗1的各組的雄性10頭平均的維生素A值的圖。
第8圖是顯示試驗1的各組的雌性10頭平均的維生素A值的圖。
第9圖是顯示試驗1的各組的雄性8頭平均的維生素A值的圖。
第10圖是顯示試驗1的各組的雌性8頭平均的維生素A值的圖。
第11圖是顯示試驗1的各組的雄性10頭平均的GOT值的圖。
第12圖是顯示試驗1的各組的雌性10頭平均的GOT值的圖。
第13圖是顯示試驗1的各組的雄性8頭平均的GOT值的圖。
第14圖是顯示試驗1的各組的雌性8頭平均的GOT值的圖。
第15圖是顯示試驗1的各組的雄性10頭平均的拍賣市場出貨時的重量的圖。
第16圖是顯示試驗1的各組的雌性10頭平均的拍賣市場出貨時的重量的圖。
第17圖是顯示試驗1的各組的雄性8頭平均的拍賣市場出貨時的重量的圖。
第18圖是顯示試驗1的各組的雌性8頭平均的拍賣市場出貨時的重量的圖。
第19圖是顯示試驗2的各組的雄性10頭平均的剩食量的比較的圖。
第20圖是顯示試驗2的各組的雌性10頭平均的剩食量的比較的圖。
第21圖是顯示試驗2的各組的雄性10頭平均的總膽固醇值的圖。
第22圖是顯示試驗2的各組的雌性10頭平均的總膽固醇值的圖。
第23圖是顯示試驗2的各組的雄性8頭平均的總膽固醇值的圖。
第24圖是顯示試驗2的各組的雌性8頭平均的總膽固醇值的圖。
第25圖是顯示試驗2的各組的雄性10頭平均的維生素A值的圖。
第26圖是顯示試驗2的各組的雌性10頭平均的維生素A值的圖。
第27圖是顯示試驗2的各組的雄性8頭平均的維生素A值的圖。
第28圖是顯示試驗2的各組的雌性8頭平均的維生素A值的圖。
第29圖是顯示試驗2的各組的雄性10頭平均的GOT值的圖。
第30圖是顯示試驗2的各組的雌性10頭平均的GOT值的圖。
第31圖是顯示試驗2的各組的雄性8頭平均的GOT值的圖。
第32圖是顯示試驗2的各組的雌性8頭平均的GOT值的圖。
第33圖是顯示試驗2的各組的雄性在導入時的體重的圖。
第34圖是顯示試驗2的各組的雌性在導入時的體重的圖。
第35圖是顯示試驗2的各組的雄性在到達時的體重的圖。
第36圖是顯示試驗2的各組的雌性在到達時的體重的圖。
第37圖是顯示試驗2的各組的雄性的增加體重的圖。
第38圖是顯示試驗2的各組的雌性的增加體重的圖。
第39圖是顯示試驗2的各組的雄性的食用肝臟廢棄率的圖。
第40圖是顯示試驗2的各組的雌性的食用肝臟廢棄率的圖。
第41圖是顯示試驗2的各組的雄性的屠體重的圖。
第42圖是顯示試驗2的各組的雌性的屠體重的圖。
第43圖是顯示試驗2的各組的雄性10頭平均的屠宰率的圖。
第44圖是顯示試驗2的各組的雌性10頭平均的屠宰率的圖。
第45圖是顯示試驗2的各組的雄性8頭平均的屠宰率的圖。
第46圖是顯示試驗2的各組的雌性8頭平均的屠宰率的圖。
第47圖是顯示試驗3的各組的雄性12頭平均的剩食量的圖。
第48圖是顯示試驗3的各組的雌性12頭平均的剩食量的圖。
第49圖是顯示試驗3的各組的雄性12頭平均的吃完飼料為止的天數的圖。
第50圖是顯示試驗3的各組的雌性12頭平均的吃完飼料為止的天數的圖。
第51圖是顯示試驗4的各組的雄性10頭平均的剩食量的比較的圖。
第52圖是顯示試驗4的各組的雌性10頭平均的剩食量的比較的圖。
第53圖是顯示試驗4的各組的雄性10頭平均的總膽固醇值的圖。
第54圖是顯示試驗4的各組的雌性10頭平均的總膽固醇值的圖。
第55圖是顯示試驗4的各組的雄性8頭平均的總膽固醇值的圖。
第56圖是顯示試驗4的各組的雌性8頭平均的總膽固醇值的圖。
第57圖是顯示試驗4的各組的雄性10頭平均的維生素A值的圖。
第58圖是顯示試驗4的各組的雌性10頭平均的維生素A值的圖。
第59圖是顯示試驗4的各組的雄性8頭平均的維生素A值的圖。
第60圖是顯示試驗4的各組的雌性8頭平均的維生素A值的圖。
第61圖是顯示試驗4的各組的雄性10頭平均的GOT值的圖。
第62圖是顯示試驗4的各組的雌性10頭平均的GOT值的圖。
第63圖是顯示試驗4的各組的雄性8頭平均的GOT值的圖。
第64圖是顯示試驗4的各組的雌性8頭平均的GOT值的圖。
第65圖是顯示試驗5的腹瀉的發生比例的圖。
第66圖是顯示試驗5的腹瀉的治療天數平均的圖。
第67圖是顯示試驗5的感冒的發生比例的圖。
第68圖是顯示試驗5的感冒的治療天數平均的圖。
第69圖是顯示試驗7的各組的雄性5頭平均的剩食量的比較的圖。
第70圖是顯示試驗7的各組的雌性5頭平均的剩食量的比較的圖。
第71圖是顯示試驗7的各組的雄性5頭平均的GOT值的圖。
第72圖是顯示試驗7的各組的雌性5頭平均的GOT值的圖。
第73圖是顯示試驗7的各組的雄性3頭平均的GOT值的圖。
第74圖是顯示試驗7的各組的雌性3頭平均的GOT值的圖。
第75圖是顯示試驗7的各組的雄性5頭平均的拍賣市場出貨時的重量的圖。
第76圖是顯示試驗7的各組的雌性5頭平均的拍賣市場出貨時的重量的圖。
第77圖是顯示試驗7的各組的雄性3頭平均的拍賣市場出貨時的重量的圖。
第78圖是顯示試驗7的各組的雌性3頭平均的拍賣市場出貨時的重量的圖。
第79圖是顯示試驗8的腹瀉的發生比例的圖。
第80圖是顯示試驗8的腹瀉的治療天數平均的圖。
第81圖是顯示試驗8的感冒的發生比例的圖。
第82圖是顯示試驗8的感冒的治療天數平均的圖。
第83圖是顯示試驗9的各組的雄性5頭平均的剩食量的比較的圖。
第84圖是顯示試驗9的各組的雌性5頭平均的剩食量的比較的圖。
第85圖是顯示試驗9的各組的雄性5頭平均的GOT值的圖。
第86圖是顯示試驗9的各組的雌性5頭平均的GOT值的圖。
第87圖是顯示試驗9的各組的雄性3頭平均的GOT值的圖。
第88圖是顯示試驗9的各組的雌性3頭平均的GOT值的圖。
第89圖是顯示試驗9的各組的雄性5頭平均的拍賣市場出貨時的重量的圖。
第90圖是顯示試驗9的各組的雌性5頭平均的拍賣市場出貨時的重量的圖。
第91圖是顯示試驗9的各組的雄性3頭平均的拍賣市場出貨時的重量的圖。
第92圖是顯示試驗9的各組的雌性3頭平均的拍賣市場出貨時的重量的圖。
第93圖是顯示試驗10的腹瀉的發生比例的圖。
第94圖是顯示試驗10的腹瀉的治療天數平均的圖。
第95圖是顯示試驗10的感冒的發生比例的圖。
第96圖是顯示試驗10的感冒的治療天數平均的圖。
國內寄存資訊(請依寄存機構、日期、號碼順序註記)
無
國外寄存資訊(請依寄存國家、機構、日期、號碼順序註記)
無
Claims (16)
- 一種甘草萃取物，其包含： (A)選自由甘草酸、甘草酸衍生物、甘草次酸及甘草次酸衍生物所組成之群組中的一種以上； (B)前述(A)以外的甘草皂苷類；及， (C)甘草黃酮類；並且， 前述(B)至少包含1.7質量%以上的甘草皂苷H2、 0.2質量%以上的甘草皂苷G2、0.2質量%以上的馬其頓苷A， 前述(C)至少包含0.1質量%以上的芹糖甘草苷、0.1質量%以上的芹糖異甘草苷、0.1質量%以上的異甘草苷。
- 如請求項1所述之甘草萃取物，其中， 前述(B)至少包含1.7質量%以上的甘草皂苷H2、 0.2質量%以上的甘草皂苷G2、0.9質量%以上的馬其頓苷A， 前述(C)至少包含0.1質量%以上的芹糖甘草苷、0.1質量%以上的芹糖異甘草苷、0.1質量%以上的異甘草苷。
- 如請求項1所述之甘草萃取物，其中， 前述(B)至少包含2.9質量%以上的甘草皂苷H2、 0.5質量%以上的甘草皂苷G2、0.2質量%以上的馬其頓苷A， 前述(C)至少包含0.9質量%以上的芹糖甘草苷、0.1質量%以上的芹糖異甘草苷、0.1質量%以上的異甘草苷。
- 如請求項1所述之甘草萃取物，其中， 前述(B)至少包含2質量%以上的甘草皂苷H2、0.5質量%以上的甘草皂苷G2、0.5質量%以上的馬其頓苷A， 前述(C)至少包含2.4質量%以上的芹糖甘草苷、0.4質量%以上的芹糖異甘草苷、0.3質量%以上的異甘草苷。
- 如請求項1所述之甘草萃取物，其中， 前述(B)至少包含6.3質量%以上的甘草皂苷H2、0.8質量%以上的甘草皂苷G2、2.6質量%以上的馬其頓苷A， 前述(C)至少包含5.6質量%以上的芹糖甘草苷、1.8質量%以上的芹糖異甘草苷、2.7質量%以上的異甘草苷。
- 如請求項1所述之甘草萃取物，其中，包含：9質量%以上的前述(A)及/或2質量%以上的前述(B)及/或4質量%以上的前述(C)。
- 如請求項1所述之甘草萃取物，其中，包含：15質量%以上的前述(A)及/或2質量%以上的前述(B)及/或4質量%以上的前述(C)。
- 如請求項1所述之甘草萃取物，其中，包含：9質量%以上的前述(A)及/或3質量%以上的前述(B)及/或10質量%以上的前述(C)。
- 如請求項1所述之甘草萃取物，其中，包含：14質量%以上的前述(A)及/或9質量%以上的前述(B)及/或19質量%以上的前述(C)。
- 一種哺乳動物或家畜的飼料添加劑，其包含請求項1～請求項9中任一項所述之甘草萃取物。
- 如請求項10所述之飼料添加劑，其中，包含水溶性膳食纖維。
- 如請求項11所述之飼料添加劑，其中，以甘草萃取物：水溶性膳食纖維=10：90～40：60的質量比包含前述甘草萃取物與前述水溶性膳食纖維。
- 如請求項11所述之飼料添加劑，其中，前述水溶性膳食纖維是葡甘聚醣。
- 一種哺乳動物或家畜的飼養方法，其藉由對哺乳動物或家畜給予請求項10所述之飼料添加劑，而藉由哺乳動物或家畜的選自由餌食攝取量的增量、血液中的總膽固醇值的增加、血液中的維生素A值的增加、血液中的GOT值的降低、體重的增加、腹瀉的預防、腹瀉的治療天數的降低、感冒的預防及感冒的治療天數的降低所組成的群組中的至少一種作用，來改善健康狀態。
- 一種哺乳動物或家畜的飼養方法，前述哺乳動物或家畜為肉品生產用途的家畜， 藉由對哺乳動物或家畜給予請求項10所述之飼料添加劑，來增加屠體重、改善屠宰率及/或降低肉畜的肝臟廢棄率。
- 一種使飼料效率增大的方法，其藉由對哺乳動物或家畜給予請求項10所述之飼料添加劑來增加飼料效率，前述哺乳動物或家畜為肉品生產用途的家畜。
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