TW202330588A - 含有tnfsf配體之細胞外域的抗原結合多肽複合物 - Google Patents
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Abstract
本發明揭示具有某些結構特徵之抗原結合多肽複合物(例如抗體及其抗原結合片段)。本發明亦揭示編碼此類多肽複合物之聚核苷酸及載體；含有此類多肽複合物之細胞、醫藥組合物及套組；及使用此類多肽複合物之方法。
Description
本發明係關於含有腫瘤壞死因子超家族(tumor necrosis factor superfamily；TNFSF)配體之細胞外域的抗原結合多肽複合物(例如抗體及其抗原結合片段)。本發明亦係關於編碼此類多肽複合物之聚核苷酸及載體；含有此類多肽複合物之細胞、醫藥組合物及套組；及使用此類多肽複合物之方法。
T細胞為在免疫系統及對抗癌症中起重要作用之白血球子類型。癌細胞抗原可藉由抗原呈現細胞(antigen presenting cell；APC)呈現，其轉而可活化T細胞以識別且殺死癌細胞。T細胞活化需要兩個傳訊事件：(i)經由APC上之肽負載之主要組織相容複合物(major histocompatibility complex；MHC)及T細胞上之T細胞受體(T cell receptor；TCR)複合物進行的主要傳訊，及(ii)藉由CD28家族或腫瘤壞死因子受體超家族(tumor necrosis factor receptor superfamily；TNFRSF)成員進行的共刺激傳訊。共刺激傳訊路徑彼此互補，因為CD28為初始T細胞上之主要共刺激路徑，而TNFRSF在抗原刺激(experienced)或記憶T細胞中起更重要作用。
T細胞用抗CD3抗體及抗CD28抗體處理提供接合TCR之共刺激訊號且可用於抗原誘導之T細胞活化。初級T細胞活化訊號通常藉由抗CD3抗體提供，因為CD3為TCR複合物之保守成員。隨後，第二訊號通常藉由抗CD28抗體或CD28配體(B7.1、B7.2等)及抗TNF受體(TNFR)成員或其配體提供。已充分研究TNFRSF成員(諸如OX40及4-1BB)用於使用拮抗或促效途徑來進行癌症之免疫調節及免疫療法的生物治療開發。
除了CD27 (其在初始T細胞上組成性表現)以外，其他TNFRSF均僅在T細胞活化後表現。另外，記憶T細胞及調節T細胞(Treg)組成性表現某些家族成員。此等表現模式已表明，TNFRSF/TNFSF軸在控制效應及記憶反應方面可為重要的。共傳訊受體，且特定言之TNFRSF共刺激受體，在調節效應T細胞反應方面具有實質上作用。CD27、OX40及DR3介導之共刺激促進CD4+及CD8+效應T細胞兩者之增殖及存活，而4-1BB及GITR介導之共刺激優先增強CD8+效應T細胞之擴增及存活。
OX40經由被其配體OX40L結合而活化，且4-1BB藉由接合配體4-1BBL而傳訊。OX40L及4-1BBL為可與T細胞上之三聚OX40或4-1BB形成均三聚體複合物之三聚分子。
經由TNFSF之共刺激已顯現為一種支持抗腫瘤免疫反應之有前景的策略。然而，仍需要可結合特定目標分子或目標分子組合且在抗腫瘤免疫反應中更有效活化T細胞之雙特異性及多特異性抗體。另外需要產生高功效且同時提供較寬治療窗及更佳耐受性的雙特異性及多特異性抗體。
本文提供一種抗原結合多肽複合物，其包含第一多肽、第二多肽及第三多肽；其中該第一多肽具有由以下表示的結構：VL1-L1-CL；VL1-L1-CH1；VH1-L1-CL；或VH1-L1-CH1；其中(i)該第二多肽具有由以下表示的結構：VH1-L2-CH1-L3-Fc-L4-TNF1-L5-TNF2-L6-TNF3；VH1-L2-CL-L3-Fc-L4-TNF1-L5-TNF2-L6-TNF3；VH1-L7-CH1-L8-Fc；VH1-L7-CL-L8-Fc；VL1-L2-CH1-L3-Fc-L4-TNF1-L5-TNF2-L6-TNF3；VL1-L2-CL-L3-Fc-L4-TNF1-L5-TNF2-L6-TNF3；VL1-L7-CH1-L8-Fc；或VL1-L7-CL-L8-Fc；及該第三多肽具有由以下表示的結構：VL2-L9-VH2-L10-Fc-L11-TNF1-L12-TNF2-L13-TNF3；或VH2-L14-VL2-L15-Fc-L16-TNF1-L17-TNF2-L18-TNF3；或(ii)該第二多肽具有由以下表示的結構：VH1-L19-CH1-L20-Fc-L21-TNF1-L22-TNF2-L23-TNF3；VH1-L19-CL-L20-Fc-L21-TNF1-L22-TNF2-L23-TNF3；VL1-L19-CH1-L20-Fc-L21-TNF1-L22-TNF2-L23-TNF3；或VL1-L19-CL-L20-Fc-L21-TNF1-L22-TNF2-L23-TNF3；及該第三多肽具有由以下表示的結構：VL2-L24-VH2-L25-Fc；或VH2-L26-VL2-L27-Fc；其中VL1為第一免疫球蛋白輕鏈可變區；VL2為第二免疫球蛋白輕鏈可變區；VH1為第一免疫球蛋白重鏈可變區；VH2為第二免疫球蛋白重鏈可變區；Fc為包含免疫球蛋白重鏈恆定區2 (CH2)、免疫球蛋白重鏈恆定區3 (CH3)及視情況存在之免疫球蛋白鉸鏈的區域；CH1為免疫球蛋白重鏈恆定區1；CL為免疫球蛋白輕鏈恆定區；TNF1為腫瘤壞死因子超家族(tumor necrosis factor superfamily；TNFSF)配體之第一細胞外域；TNF2為TNFSF配體之第二細胞外域；TNF3為TNFSF配體之第三細胞外域；及L1-L27為胺基酸連接子。
本文提供一種抗原結合多肽複合物，其包含第一多肽、第二多肽及第三多肽；其中該第一多肽具有由以下表示的結構：VL1-L1-CL；VL1-L1-CH1；VH1-L1-CL；或VH1-L1-CH1；其中(i)該第二多肽具有由以下表示的結構：VH1-CH1-L2-Fc-L3-TNF1-L4-TNF2-L5-TNF3；VH1-CL-L2-Fc-L3-TNF1-L4-TNF2-L5-TNF3；VH1-CH1-L6-Fc；VH1-CL-L7-Fc；VL1-CH1-L2-Fc-L3-TNF1-L4-TNF2-L5-TNF3；VL1-CL-L2-Fc-L3-TNF1-L4-TNF2-L5-TNF3；VL1-CH1-L6-Fc；或VL1-CL-L7-Fc；及該第三多肽具有由以下表示的結構：VL2-L8-VH2-L9-Fc-L10-TNF1-L11-TNF2-L12-TNF3；或VH2-L13-VL2-L14-Fc-L15-TNF1-L16-TNF2-L17-TNF3；或(ii)該第二多肽具有由以下表示的結構：VH1-CH1-L18-Fc-L19-TNF1-L20-TNF2-L21-TNF3；VH1-CL-L18-Fc-L19-TNF1-L20-TNF2-L21-TNF3；VL1-CH1-L18-Fc-L19-TNF1-L20-TNF2-L21-TNF3；或VL1-CL-L18-Fc-L19-TNF1-L20-TNF2-L21-TNF3；及該第三多肽具有由以下表示的結構：VL2-L22-VH2-L23-Fc或VH2-L24-VL2-L25-Fc；其中VL1為第一免疫球蛋白輕鏈可變區；VL2為第二免疫球蛋白輕鏈可變區；VH1為第一免疫球蛋白重鏈可變區；VH2為第二免疫球蛋白重鏈可變區；Fc為包含免疫球蛋白重鏈恆定區2 (CH2)、免疫球蛋白重鏈恆定區3 (CH3)及視情況存在之免疫球蛋白鉸鏈的區域；CH1為免疫球蛋白重鏈恆定區1；CL為免疫球蛋白輕鏈恆定區；TNF1為腫瘤壞死因子超家族(TNFSF)配體之第一細胞外域；TNF2為TNFSF配體之第二細胞外域；TNF3為TNFSF配體之第三細胞外域；及L1-L25為胺基酸連接子。
本文提供一種抗原結合多肽複合物，其包含第一多肽及第二多肽；其中(i)該第一多肽具有由以下表示的結構：VL1-L1-VH1-L2-Fc；VH1-L3-VL1-L4-Fc；VL1-L5-VH1-L6-CL-L7-CH1-L8-Fc；VL1-L5-VH1-L6-CH1-L7-CL-L8-Fc；VH1-L5-VL1-L6-CL-L7-CH1-L8-Fc；VH1-L5-VL1-L6-CH1-L7-CL-L8-Fc；VL1-L9-CL-L10-VH1-L11-CH1-L12-Fc；VL1-L9-CH1-L10-VH1-L11-CL-L12-Fc；VH1-L9-CL-L10-VL1-L11-CH1-L12-Fc；VH1-L9-CH1-L10-VL1-L11-CL-L12-Fc；VL1-L13-VH1-L14-Fc-L15-TNF1-L16-TNF2-L17-TNF3；VH1-L18-VL1-L19-Fc-L20-TNF1-L21-TNF2-L22-TNF3；VL1-L23-VH1-L24-CL-L25-CH1-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3；VL1-L23-VH1-L24-CH1-L25-CL-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3；VH1-L23-VL1-L24-CL-L25-CH1-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3；VH1-L23-VL1-L24-CH1-L25-CL-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3；VL1-VH1-L14-Fc-L15-TNF1-L16-TNF2-L17-TNF3；VH1-VL1-L19-Fc-L20-TNF1-L21-TNF2-L22-TNF3；VL1-VH1-L24-CL-L25-CH1-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3；VL1-VH1-L24-CH1-L25-CL-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3；VH1-VL1-L24-CL-L25-CH1-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3；VH1-VL1-L24-CH1-L25-CL-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3；VL1-L30-CL-L31-VH1-L32-CH1-L33-Fc-L34-TNF1-L35-TNF2-L36-TNF3；VL1-L30-CH1-L31-VH1-L32-CL-L33-Fc-L34-TNF1-L35-TNF2-L36-TNF3；VH1-L30-CL-L31-VL1-L32-CH1-L33-Fc-L34-TNF1-L35-TNF2-L36-TNF3；或VH1-L30-CH1-L31-VL1-L32-CL-L33-Fc-L34-TNF1-L35-TNF2-L36-TNF3；及該第二多肽具有由以下表示的結構：VL2-L37-VH2-L38-Fc-L39-TNF1-L40-TNF2-L41-TNF3；VH2-L42-VL2-L43-Fc-L44-TNF1-L45-TNF2-L46-TNF3；VL2-L47-VH2-L48-CL-L49-CH1-L50-Fc-L51-TNF1-L52-TNF2-L53-TNF3；VL2-L54-CL-L55-VH2-L56-CH1-L57-Fc-L58-TNF1-L59-TNF2-L60-TNF3；VL2-L47-VH2-L48-CH1-L49-CL-L50-Fc-L51-TNF1-L52-TNF2-L53-TNF3；VL2-L54-CH1-L55-VH2-L56-CL-L57-Fc-L58-TNF1-L59-TNF2-L60-TNF3；VL2-VH2-L38-Fc-L39-TNF1-L40-TNF2-L41-TNF3；VH2-VL2-L43-Fc-L44-TNF1-L45-TNF2-L46-TNF3；VL2-VH2-L48-CL-L49-CH1-L50-Fc-L51-TNF1-L52-TNF2-L53-TNF3；VL2-CL-L55-VH2-L56-CH1-L57-Fc-L58-TNF1-L59-TNF2-L60-TNF3；VL2-VH2-L48-CH1-L49-CL-L50-Fc-L51-TNF1-L52-TNF2-L53-TNF3；或VL2-CH1-L55-VH2-L56-CL-L57-Fc-L58-TNF1-L59-TNF2-L60-TNF3；或(ii)該第一多肽具有由以下表示的結構：VL1-L61-VH1-L62-Fc-L63-TNF1-L64-TNF2-L65-TNF3；VH1-L66-VL1-L67-Fc-L68-TNF1-L69-TNF2-L70-TNF3；VL1-L71-VH1-L72-CL-L73-CH1-L74-Fc-L75-TNF1-L76-TNF2-L77-TNF3；VL1-L71-VH1-L72-CH1-L73-CL-L74-Fc-L75-TNF1-L76-TNF2-L77-TNF3；VL1-L78-CL-L79-VH1-L80-CH1-L81-Fc-L82-TNF1-L83-TNF2-L84-TNF3；或VL1-L78-CH1-L79-VH1-L80-CL-L81-Fc-L82-TNF1-L83-TNF2-L84-TNF3；及該第二多肽具有由以下表示的結構：VL2-L85-VH2-L86-Fc；VH2-L87-VL2-L88-Fc；VL2-L89-VH2-L90-CL-L91-CH1-L92-Fc；VL2-L89-VH2-L90-CH1-L91-CL-L92-Fc；VL2-L93-CL-L94-VH2-L95-CH1-L96-Fc；或VL2-L93-CH1-L94-VH2-L95-CL-L96-Fc；其中VL1為第一免疫球蛋白輕鏈可變區；VL2為第二免疫球蛋白輕鏈可變區；VH1為第一免疫球蛋白重鏈可變區；VH2為第二免疫球蛋白重鏈可變區；Fc為包含免疫球蛋白重鏈恆定區2 (CH2)、免疫球蛋白重鏈恆定區3 (CH3)及視情況存在之免疫球蛋白鉸鏈的區域；CH1為免疫球蛋白重鏈恆定區1；CL為免疫球蛋白輕鏈恆定區；TNF1為TNFSF配體之第一細胞外域；TNF2為TNFSF配體之第二細胞外域；TNF3為TNFSF配體之第三細胞外域；及L1-L96為胺基酸連接子。
本文提供一種抗原結合多肽複合物，其包含第一多肽及第二多肽；其中(i)該第一多肽具有由以下表示的結構：Fc；VL1-L1-VL2-L2-VH2-L3-VH1-L4-Fc；VH1-L5-VH2-L6-VL2-L7-VL1-L8-Fc；Fc-L9-TNF1-L10-TNF2-L11-TNF3；VL1-L12-VL2-L13-VH2-L14-VH1-L15-Fc-L16-TNF1-L17-TNF2-L18-TNF3；或VH1-L19-VH2-L20-VL2-L21-VL1-L22-Fc-L23-TNF1-L24-TNF2-L25-TNF3；及該第二多肽具有由以下表示的結構：VL3-L26-VL4-L27-VH4-L28-VH3-L29-Fc-L30-TNF1-L31-TNF2-L32-TNF3；或VH3-L33-VH4-L34-VL4-L35-VL3-L36-Fc-L37-TNF1-L38-TNF2-L39-TNF3；或(ii)該第一多肽具有由以下表示的結構：Fc-L40-TNF1-L41-TNF2-L42-TNF3；VL1-L43-VL2-L44-VH2-L45-VH1-L46-Fc-L47-TNF1-L48-TNF2-L49-TNF3；或VH1-L50-VH2-L51-VL2-L52-VL1-L53-Fc-L54-TNF1-L55-TNF2-L56-TNF3；及該第二多肽具有由以下表示的結構：Fc；VL3-L57-VL4-L58-VH4-L59-VH3-L60-Fc；或VH3-L61-VH4-L62-VL4-L63-VL3-L64-Fc；其中VL1為第一免疫球蛋白輕鏈可變區；VL2為第二免疫球蛋白輕鏈可變區；VL3為第三免疫球蛋白輕鏈可變區；VL4為第四免疫球蛋白輕鏈可變區；VH1為第一免疫球蛋白重鏈可變區；VH2為第二免疫球蛋白重鏈可變區；VH3為第三免疫球蛋白重鏈可變區；VH4為第四免疫球蛋白重鏈可變區；Fc為包含免疫球蛋白重鏈恆定區2 (CH2)、免疫球蛋白重鏈恆定區3 (CH3)及視情況存在之免疫球蛋白鉸鏈的區域；TNF1為TNFSF配體之第一細胞外域；TNF2為TNFSF配體之第二細胞外域；TNF3為TNFSF配體之第三細胞外域；及L1-L64為胺基酸連接子。
本文提供一種抗體或其抗原結合片段，其包含本文所描述之抗原結合多肽複合物。
本文提供一種醫藥組合物，其包含本文所描述之抗原結合多肽複合物或抗體或抗原結合片段以及醫藥學上可接受之載劑。
本文提供一種誘導或增強免疫反應之方法，其包含向有需要之個體投與本文所描述之抗原結合多肽複合物或抗體或抗原結合片段或醫藥組合物。
本文提供一種克服癌症介導之免疫抑制之方法，其包含向有需要之個體投與本文所描述之抗原結合多肽複合物、抗體或抗原結合多肽複合物或醫藥組合物。
相關申請案之交互參考
本申請案主張2021年12月17日申請之美國臨時申請案第63/291,305號之優先權，其以全文引用的方式併入本文中。
對以電子方式提交之序列表之參考
以電子方式提交之序列表(名稱：4850_008PC02_Seqlisting_ST26；大小：699,814位元組；創建日期：2022年12月13日)之內容以全文引用之方式併入本文中。
鑒於抗CD3抗體OX40及4-1BB在T細胞活化及抗腫瘤免疫反應中之作用，將抗CD3抗體與OX40或4-1BB共刺激訊號組合可擴寬各種T細胞群體之活化且為T細胞存活及長期擴增提供持續刺激。因此，研發將以下整合之抗原結合多肽複合物(例如抗體或其抗原結合片段)：一或多個抗CD3區域(例如互補決定區(complementarity determining region；CDR)、重鏈可變區(VH)、輕鏈可變區(VL)、單鏈可變片段(scFv)、Fab、單鏈Fab (scFab)、重鏈或輕鏈)；及腫瘤壞死因子超家族(tumor necrosis factor superfamily；TNFSF)配體(例如OX40L或4-1BBL)之細胞外域的一或多種三聚體。在一些態樣中，將一或多個抗腫瘤相關抗原(TAA)區域，諸如一或多個抗HER2結合區(例如CDR、VH、VL、scFv、Fab、scFab、重鏈或輕鏈)，進一步整合至本發明之抗原結合多肽複合物中。在一些態樣中，將一或多個抗免疫刺激受體區域，諸如一或多個抗CD28結合區(例如CDR、VH、VL、scFv、Fab、scFab、重鏈或輕鏈)，進一步整合至本發明之抗原結合複合物中。
因此，本發明係針對具有改良特徵之抗原結合多肽複合物(例如抗體或其抗原結合片段)。在一些態樣中，本發明能夠經由以每個臂單一多肽形式表現之互補自組裝重鏈及輕鏈的表現，以及視情況添加特定胺基酸連接子，而產生多特異性及多功能抗原結合多肽複合物。由於此多功能性，本發明之抗原結合多肽複合物而可與目標分子之特定組合結合以達成選擇性或廣譜/中和，聚集兩種或更多種細胞類型，聚集目標且遞送活化訊號，調節疾病微環境，且增強結合親合力以獲得改善的效力。
整個說明書及申請專利範圍中使用與本發明之態樣有關的各種術語。除非另外指示，否則此類術語將具有其在此項技術中之普通含義。其他特定定義之術語以符合本文所提供之定義的方式解釋。
I. 定義
如本文所用，術語「抗原結合多肽複合物」係指一組兩種、三種或四種相關多肽，其中至少一種多肽能夠與一或多種抗原特異性結合。抗原結合多肽複合物包括但不限於抗體或其抗原結合片段。
術語「抗體」包括但不限於與抗原特異性結合且包含藉由二硫鍵互連之至少兩條重(H)鏈及兩條輕(L)鏈的醣蛋白免疫球蛋白。各H鏈包含重鏈可變區(本文中縮寫為VH)及重鏈恆定區。重鏈恆定區包含三個恆定域CH1、CH2及CH3。各L鏈包含輕鏈可變區(本文中縮寫為VL)及輕鏈恆定區。輕鏈恆定區包含一個恆定域CL。VH及VL區可進一步細分成高變區，稱為互補決定區(complementarity determining region；CDR)，穿插有稱為構架區(framework region；FR)之更保守區。各VH及VL包含三個CDR及四個FR，自胺基端至羧基端按以下次序排列：FR1、CDR1、FR2、CDR2、FR3、CDR3、FR4。重鏈及輕鏈之可變區含有與抗原相互作用之結合域。抗體之恆定區可介導免疫球蛋白與宿主組織或因子的結合，包括與免疫系統之各種細胞(例如效應細胞)及經典補體系統之第一組分(C1q)。重鏈可具有或不具有C端離胺酸。除非本文中另外規定，否則可變區中之胺基酸使用Kabat編號系統來加以編號，而恆定區中之彼等胺基酸使用EU系統來加以編號。
如本文所用，術語「單株抗體」係指由單一B細胞殖株產生且與相同抗原決定基結合的抗體。相比之下，術語「多株抗體」係指由不同B細胞產生且與相同抗原之不同抗原決定基結合的抗體群體。術語「抗體」包括例如單株及多株抗體；嵌合及人源化抗體；人類或非人類抗體；完全合成抗體；及單鏈抗體。非人類抗體可藉由重組方法進行人源化以降低其在人體中之免疫原性。
抗體可為已改變(例如藉由突變、缺失、取代、與非抗體部分結合)之抗體。舉例而言，抗體可包括改變抗體特性(例如功能特性)之一或多個變異胺基酸(相較於天然存在之抗體)。舉例而言，在此項技術中已知若干此類改變，其影響抗體在患者中之例如半衰期、效應功能及/或免疫反應。術語抗體亦包括人工多肽構築體，其包含至少一個抗體來源的抗原結合位點。
「抗原結合片段」係指抗體中保留與完全抗體所結合之抗原特異性結合之能力的一或多個片段或部分。已顯示，抗體之抗原結合功能可由全長抗體之片段或部分執行。抗原結合片段可含有完整抗體之抗原決定區(例如互補決定區(CDR))。抗體之抗原結合片段之實例包括但不限於Fab、Fab'、F(ab')
2及Fv片段、線性抗體及單鏈抗體。抗體之抗原結合片段可來源於任何動物物種，諸如嚙齒動物(例如小鼠、大鼠或倉鼠)及人類或可人工產生。
此外，儘管Fv片段之兩個域VL及VH係由獨立基因編碼，其可使用重組方法，藉由使其能夠製成其中VL及VH區配對形成單價分子之單一蛋白質鏈的合成連接子接合(被稱為單鏈Fv (scFv)；參見例如Bird等人(1988) Science 242:423-426；及Huston等人(1988) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85:5879-5883)。此類單鏈抗體亦意欲涵蓋於術語抗體之「抗原結合片段」內。
抗原結合片段係使用熟習此項技術者已知之習知技術獲得，且以與完整抗體相同之方式來篩選供使用的片段。抗原結合片段可藉由重組DNA技術產生，或藉由完整免疫球蛋白之酶促或化學裂解來產生。
如本文所用，術語「可變區」通常係指抗體之一部分，一般為輕鏈或重鏈之一部分，通常為成熟重鏈中之胺基端約110至120個胺基酸或110至125個胺基酸以及成熟輕鏈中之約90至115個胺基酸，其序列在抗體間有廣泛差異，且用於特定抗體對其特定抗原的結合及特異性。序列中之可變性集中於稱為互補決定區(CDR)之彼等區中，而可變域中之更高度保守區稱為構架區(FR)。在不希望受任何特定機制或理論束縛之情況下，咸信輕鏈及重鏈之CDR主要負責抗體與抗原之相互作用及特異性。在一些態樣中，可變區為哺乳動物可變區，例如人類、小鼠或兔可變區。在一些態樣中，可變區包含嚙齒動物或鼠類CDR以及人類FR。在一些態樣中，可變區為靈長類動物(例如非人類靈長類動物)可變區。在一些態樣中，可變區包含嚙齒動物或鼠類CDR及靈長類動物(例如非人類靈長類動物) FR。
如本文所用，術語「互補決定區」或「CDR」係指抗體可變域之各區域，其序列變高及/或形成結構上限定之環(高變環)及/或含有抗原接觸殘基。抗體可包含六個CDR，例如三個在VH中且三個在VL中。
術語「VL」、「VL區」及「VL域」在本文中可互換地用於指抗原結合多肽複合物、抗體或其抗原結合片段之輕鏈可變區。在一些態樣中，VL區在本文中稱為VL1以表示第一輕鏈可變區，VL2以表示第二輕鏈可變區，VL3以表示第三輕鏈可變區等等。所列舉的VL區(例如VL1)與所列舉的另一VL區(例如VL2)可具有相同或不同的抗原結合特性及/或相同或不同的序列。
術語「VH」、「VH區」及「VH域」在本文中可互換地用於指抗原結合多肽複合物、抗體或其抗原結合片段之重鏈可變區。在一些態樣中，VH區在本文中稱為VH1以表示第一重鏈可變區，VH2以表示第二重鏈可變區，VH3以表示第三重鏈可變區等等。所列舉的VH區(例如VH1)與所列舉的另一VH區(例如VH2)可具有相同或不同的抗原結合特性及/或相同或不同的序列。
如本文所用，「Kabat編號」及類似術語在此項技術中已為公認的且係指對抗體或其抗原結合片段之重鏈及輕鏈可變區中之胺基酸殘基進行編號的系統。在一些態樣中，CDR可根據Kabat編號系統確定(參見例如Kabat EA及Wu TT (1971) Ann NY Acad Sci 190: 382-391，及Kabat EA等人, (1991) Sequences of Proteins of Immunological Interest, 第五版, 美國衛生與公眾服務部(U.S. Department of Health and Human Services), NIH公開案第91-3242號)。使用Kabat編號系統，抗體重鏈分子內之CDR通常存在於胺基酸位置31至35 (CDR1)，其視情況在35 (在Kabat編號方案中稱為35A及35B)之後可包括一或兩個其他胺基酸；胺基酸位置50至65 (CDR2)；及胺基酸位置95至102 (CDR3)。使用Kabat編號系統，抗體輕鏈分子內之CDR通常存在於胺基酸位置24至34 (CDR1)、胺基酸位置50至56 (CDR2)及胺基酸位置89至97 (CDR3)。
如本文所用，術語「恆定區」或「恆定域」可互換地用於指抗原結合多肽複合物、抗體或其抗原結合片段之一部分，例如不直接參與抗體與抗原結合、但可展現不同效應功能(諸如與Fc區相互作用)之輕鏈及/或重鏈的羧基端部分。相對於可變區，恆定區一般具有更保守的胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物、抗體或其抗原結合片段包含足夠達成抗體依賴性細胞介導之細胞毒性(antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity；ADCC)、抗體依賴性細胞吞噬作用(antibody-dependent cellular phagocytosis；ADCP)及補體依賴性細胞毒性(complement-dependent cytotoxicity；CDC)的恆定區或其一部分。
如本文所用，術語「片段可結晶區域」、「Fc區」或「Fc域」在本文中可互換地用於指與細胞表面受體(稱為Fc受體)及補體系統之一些蛋白質相互作用之抗體的尾部區域。Fc區通常包含CH2及CH3區域及視情況存在的免疫球蛋白鉸鏈。
如本文所用，術語「免疫球蛋白鉸鏈」、「鉸鏈」、「鉸鏈域」或「鉸鏈區」可互換地用於指抗原結合多肽複合物、抗體或其抗原結合片段之Fab與Fc部分之間的重鏈區段。鉸鏈提供有助於抗體發揮正常功能(例如用於使兩種抗原交聯或用於結合同一抗原分子上的兩個抗原決定子)的結構、位置及可撓性。免疫球蛋白鉸鏈被分成上、中及下鉸鏈區，其可基於結構及/或基因組件隔開。本發明之免疫球蛋白鉸鏈可含有此等區域中之一者、兩者或所有三者。在結構上，上鉸鏈區自CH1之C端延伸至第一個鉸鏈二硫鍵。中鉸鏈區自鉸鏈中的第一個半胱胺酸延伸至最後一個半胱胺酸。下鉸鏈區自CH2之最後一個半胱胺酸延伸至甘胺酸。存在於鉸鏈中之半胱胺酸形成連接免疫球蛋白單體的鏈間二硫鍵。
如本文所用，術語「Fab」係指抗體中與抗原結合之區域。其通常由重鏈及輕鏈中之各者的一個恆定域及一個可變域構成。
如本文所用，術語「重鏈」係指抗原結合多肽複合物、抗體或其抗原結合片段之一部分，其通常由重鏈可變區(VH)、重鏈恆定區1 (CH1)、重鏈恆定區2 (CH2)及重鏈恆定區3 (CH3)構成。典型抗體由兩條重鏈及兩條輕鏈構成。當參考抗體使用時，重鏈可指基於恆定區之胺基酸序列的任何不同類型，例如alpha (α)、delta (δ)、epsilon (ε)、gamma (γ)及mu (µ)，其分別產生抗體的IgA、IgD、IgE、IgG及IgM類別，包括IgG子類別，例如IgG1、IgG2、IgG3及IgG4。重鏈胺基酸序列為此項技術中已知的。在一些態樣中，重鏈為人類重鏈。
如本文所用，術語「輕鏈」係指抗原結合多肽複合物、抗體或其抗原結合片段之一部分，其通常由輕鏈可變區(VL)及輕鏈恆定區(CL)構成。典型抗體由兩條輕鏈及兩條重鏈構成。當參考抗體使用時，輕鏈可指基於恆定區之胺基酸序列的任何不同類型，例如kappa (κ)或lambda (λ)。輕鏈胺基酸序列為此項技術中已知的。在一些態樣中，輕鏈為人類輕鏈。
術語「嵌合」抗體或其抗原結合片段係指其中胺基酸序列來源於兩種或更多種物種的抗體或其抗原結合片段。通常，輕鏈與重鏈之可變區對應於來源於一個哺乳動物物種(例如小鼠、大鼠、兔等)之具有所需特異性、親和力及能力的抗體或其抗原結合片段之可變區，而恆定區與來源於另一物種(通常人類)之抗體或其抗原結合片段的序列同源以避免在彼物種中引發免疫反應。
術語「人源化」抗體或其抗原結合片段係指非人類(例如鼠類)抗體或抗原結合片段形式，其為含有極少非人類(例如鼠類)序列的特定免疫球蛋白鏈、嵌合免疫球蛋白或其片段。通常，人源化抗體或其抗原結合片段為人類免疫球蛋白，其中來自互補決定區(CDR)之殘基經來自非人類物種(例如小鼠、大鼠、兔、倉鼠)之具有所需特異性、親和力及能力的CDR之殘基置換(Jones等人, Nature 321:522-525 (1986)；Riechmann等人, Nature 332:323-327 (1988)；Verhoeyen等人, Science 239:1534-1536 (1988))。在一些態樣中，人類免疫球蛋白之Fv構架區(FR)殘基經來自非人類物種之具有所需特異性、親和力及能力之抗體或片段中的對應殘基置換。人源化抗體或其抗原結合片段可藉由取代Fv構架區中及/或被置換之非人類殘基內之其他殘基來進一步修飾，以改進且最佳化抗體或其抗原結合片段的特異性、親和力及/或能力。一般而言，人源化抗體或其抗原結合片段將包含實質上所有可變域，至少一個且典型地為兩個或三個可變域，該等可變域含有與非人類免疫球蛋白對應之所有或實質上所有CDR區，而所有或實質上所有的FR區為人類免疫球蛋白共通序列的彼等FR區。人源化抗體或其抗原結合片段亦可包含恆定區(通常為人類免疫球蛋白之恆定區)的至少一部分。用於產生人源化抗體之方法之實例已知且描述於美國專利第5,225,539號；Roguska等人, Proc. Natl. Acad. Sci., USA, 91(3):969-973 (1994)及Roguska等人, Protein Eng. 9(10):895-904 (1996)中。
如本文所用，術語「人類」抗體或其抗原結合片段意謂具有來源於人類免疫球蛋白基因座之胺基酸序列的抗體或其抗原結合片段，其中此類抗體或抗原結合片段係使用此項技術中已知之重組技術製備。人類抗體或其抗原結合片段之此定義包括完整或全長抗體及其片段。
呈「經分離」之多肽複合物、抗體、其抗原結合片段、聚核苷酸、載體或細胞為呈未在自然界中發現之形式的多肽複合物、抗體、其抗原結合片段、聚核苷酸、載體或細胞。經分離之多肽複合物、抗體、其抗原結合片段、聚核苷酸、載體或細胞包括已純化至一定程度以使得其不再呈其在自然界中發現之形式的彼等物。在一些態樣中，呈經分離之多肽複合物、抗體、其抗原結合片段、聚核苷酸、載體或細胞為實質上純的。如本文所用，「實質上純的」係指材料為至少50%純(亦即，不含雜質)，例如至少90%純、至少95%純、至少98%純或至少99%純。
術語「多肽」、「肽」及「蛋白質」在本文中可互換地用於指任何長度之胺基酸之聚合物。聚合物可為線性或分支的，其可包含經修飾之胺基酸，且其可以間雜有非胺基酸。該等術語亦涵蓋經天然修飾或藉由干預修飾之胺基酸聚合物；例如二硫鍵形成、醣基化、脂質化、乙醯化、磷酸化或任何其他操縱或修飾，諸如與標記組分結合。該定義內亦包括例如含有胺基酸之一或多種類似物(包括例如非天然胺基酸等)以及此項技術中已知之其他修飾的多肽。應瞭解，由於本發明之多肽係基於抗體，因此在一些態樣中，多肽可以單鏈或結合的鏈形式存在。
應瞭解，替代物(例如「或」)之使用意謂替代物中之一者、兩者或其任何組合。如本文所用，不定冠詞「一(a)」或「一(an)」係指任何所敍述或所列舉組分中的「一或多者」。
如本文所用，術語「及/或」應視為兩種規定特徵或組分中之各者具有或不具有另一者之特定揭示內容。因此，如在諸如本文中「A及/或B」之片語中所用之術語「及/或」意欲包括「A及B」、「A或B」、「A」(單獨)及「B」(單獨)。同樣，如在諸如「A、B及/或C」之片語中所用之術語「及/或」意欲涵蓋以下態樣中之各者：A、B及C；A、B或C；A或C；A或B；B或C；A及C；A及B；B及C；A (單獨)；B (單獨)；及C (單獨)。
應理解，每當本文中用語言「包含」、「具有」及其類似者描述態樣時，則亦提供用術語「由……組成」及/或「基本上由……組成」所描述之類似態樣。
如本文所用，術語「約」係指在由一般熟習此項技術者所判定之特定值或組成之可接受的誤差範圍內之值或組成，該誤差範圍將部分地取決於如何量測或測定該值或組成，亦即，量測系統之侷限性。舉例而言，「約」可意謂依據此項技術中之實踐，在1個或超過1個標準差內。或者，「約」可意謂至多10%或20%的範圍(亦即，±10%或±20%)。舉例而言，約3 mg可包括2.7 mg與3.3 mg之間(10%)或2.4 mg與3.6 mg之間(20%)的任何數值。此外，尤其在生物系統或過程方面，該術語可意謂值之至多一個數量級或至多5倍。當申請案及申請專利範圍中提供特定值或組成時，除非另外陳述，否則「約」之含義應假定為在該特定值或組成之可接受誤差範圍內。
如本文中所描述，除非另外指示，否則任何數值範圍、濃度範圍、百分比範圍、比率範圍或整數範圍應理解為包括所敍述範圍內之任何整數值及(在適當時)其分數(諸如整數之十分之一及百分之一)。
除非另外定義，否則本文所用之所有技術及科學術語均具有與本發明所屬領域之一般技術者通常所理解相同之含義。舉例而言，the Concise Dictionary of Biomedicine and Molecular Biology, Juo, Pei-Show, 第2版, 2002, CRC Press；The Dictionary of Cell and Molecular Biology, 第5版, 2013, Academic Press；及the Oxford Dictionary Of Biochemistry And Molecular Biology, 2006, Oxford University Press向技術者提供本發明中所使用之多個術語之通用詞典。
單位、前綴及符號以其國際單位制(Système International de Unites，SI)接受形式表示。數值範圍包含界定該範圍之數值。本文提供之標題並非本發明之各種態樣的限制，其可作為整體由說明書提及。因此，本文所定義之術語藉由參考整個說明書更充分定義。
各種態樣進一步詳述於以下章節中。
II. 抗原結合多肽複合物
在一些態樣中，本發明係針對具有某些本文中進一步描述之結構特徵之抗原結合多肽複合物。在一些態樣中，本發明之抗原結合多肽複合物(例如抗體或其抗原結合片段)包含抗CD3區域(例如CDR、VH、VL、scFv、Fab、scFab、重鏈或輕鏈)以及腫瘤壞死因子超家族(TNFSF)配體之細胞外域之一或多種三聚體。在一些態樣中，本發明之抗原結合多肽複合物進一步包含一或多個抗腫瘤相關抗原(TAA)區域，諸如一或多個抗HER2結合區(例如CDR、VH、VL、scFv、Fab、scFab、重鏈或輕鏈)。在一些態樣中，本發明之抗原結合多肽複合物進一步包含一或多個抗免疫刺激受體區域，諸如一或多個抗CD28結合區(例如CDR、VH、VL、scFv、Fab、scFab、重鏈或輕鏈)。在一些態樣中，一或多個恆定區(例如CH1及/或CL)亦可併入抗原結合多肽複合物之多肽中。
A. TNFSF配體之細胞外域以及連接子
如本文所用，「腫瘤壞死因子超家族配體之細胞外域」或「TNFSF配體之細胞外域」係指包含形成三聚體之腫瘤壞死超家族之配體之一部分(亦稱為TNF同源域或胞外域)的肽。因此，TNFSF配體之細胞外域亦可包括全長TNFSF配體序列。在一些態樣中，本文所描述之抗原結合多肽複合物之結構可指TNFSF配體之細胞外域，術語TNF1、TNF2及/或TNF3分別表示TNFSF配體之第一、第二及/或第三細胞外域。
TNFSF配體之細胞外域之實例包括但不限於OX40L (OX40配體，TNFSF4)、4-1BBL (4-1BB配體，TNFSF9)、TNF、TNF相關細胞凋亡誘導配體(TRAIL)、CD40L (TNFSF5)、CD27L (TNFSF7)、CD30L (TNFSF8)、FasL (TNFSF6)、EDAM、LTA (TNFSF1)、LTB (TNFSF3)、CD153 (TNFSF8)、RANKL (TNFSF11)、TWEAK (TNFSF12)、APRIL (TNFSF13)、BAFF (TNFSF13B)、LIGHT (TNFSF14)、VEGI (TNFSF15)及GITRL (TNFSF18)。在一些態樣中，TNFSF配體之細胞外域為OX40L或4-1BBL。在一些態樣中，TNFSF配體之細胞外域為OX40L。在一些態樣中，OX40L包含SEQ ID NO:1之胺基酸序列或與SEQ ID NO:1具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性的序列。舉例而言，OX40L可包含SEQ ID NO:1之胺基酸序列。在一些態樣中，TNFSF配體之細胞外域為4-1BBL。在一些態樣中，4-1BBL包含SEQ ID NO:2之胺基酸序列或與SEQ ID NO:2具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性的序列。舉例而言，4-1BBL可包含SEQ ID NO:2之胺基酸序列。
在一些態樣中，本發明之抗原結合多肽複合物包含TNFSF配體之三種細胞外域之三聚體。在一些態樣中，三聚體包含TNFSF配體之細胞外域之相同類型(例如三個OX40L或三個4-1BBL (均三聚體))或由其組成，或三聚體可包含TNFSF配體之兩個或三個不同細胞外域之混合物或由其組成(例如一個OX40L及兩個4-1BBL，或兩個OX40L及一個4-1BBL，以任何次序)。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物包含TNFSF配體之細胞外域之一個三聚體或由其組成(例如均三聚體)。舉例而言，抗原結合多肽複合物可包含三個OX40L域之三聚體，其中各OX40L包含以下或由以下組成：SEQ ID NO:1之胺基酸序列或與SEQ ID NO:1具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性的序列。舉例而言，三聚體中之各OX40L可包含SEQ ID NO:1之序列或由其組成。舉例而言，抗原結合多肽複合物可包含三個4-1BBL域之三聚體，其中各4-1BBL包含以下或由以下組成：SEQ ID NO:2之胺基酸序列或與SEQ ID NO:2具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性的序列。舉例而言，三聚體中之各4-1BBL可包含SEQ ID NO:2之序列或由其組成。在一些態樣中，本發明之抗原結合多肽複合物包含TNFSF配體之細胞外域之兩個三聚體(例如三聚體之二聚體，諸如均三聚體之二聚體)。舉例而言，抗原結合多肽複合物可包含本文所描述之OX40L三聚體或4-1BBL三聚體之二聚體。
在一些態樣中，TNFSF配體之細胞外域包含以下或由以下組成：SEQ ID NO:1或2之胺基酸序列，或與SEQ ID NO:1或2具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性的序列。舉例而言，TNFSF配體之細胞外域可包含SEQ ID NO:1或2之序列或由其組成。TNFSF配體之細胞外域之其他序列為已知的且包括例如存取編號XP_016857719.1、XP_016857718.1、XP_016857717.1、XP_011508266.2、NP_001284491.1、NP_003317.1、NP_003802.1、P41273.1、6A3V_X、6A3V_W、6A3V_V、6A3V_U、6A3V_S、6A3V_R、6A3V_Q、6A3V_P、6A3V_O、6A3V_N、6A3V_M、6A3V_L及6A3V_K。
在一些態樣中，TNFSF配體之細胞外域之三聚體在TNFSF配體之細胞外域中之一或多者之間含有胺基酸連接子(例如具有由TNF1-L1-TNF2-L2-TNF3表示的結構，其中L1及L2為胺基酸連接子)。在一些態樣中，胺基酸連接子包含以下或由以下組成：SEQ ID NO:3-10及148-175中之任一者的胺基酸序列，或與SEQ ID NO:3-10及148-175中之任一者具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性的序列。舉例而言，胺基酸連接子可包含SEQ ID NO:3-10及148-175中之任一者之胺基酸序列或由其組成。在一些態樣中，胺基酸連接子包含以下或由以下組成：SEQ ID NO:3-10中之任一者的胺基酸序列，或與SEQ ID NO:3-10中之任一者具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性的序列。舉例而言，胺基酸連接子可包含SEQ ID NO:3-10中之任一者之胺基酸序列或由其組成。在一些態樣中，胺基酸連接子包含以下或由以下組成：與SEQ ID NO:3具有至少80% (諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%)一致性之胺基酸序列。舉例而言，胺基酸連接子可包含SEQ ID NO:3之胺基酸序列或由其組成。在一些態樣中，胺基酸連接子包含以下或由以下組成：與SEQ ID NO:10具有至少80% (諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%)一致性之胺基酸序列。舉例而言，胺基酸連接子可包含SEQ ID NO:10之胺基酸序列或由其組成。舉例而言，胺基酸連接子可包含SEQ ID NO:4-10中之任一者之胺基酸序列或由其組成。在一些態樣中，TNFSF配體之細胞外域為OX40L (例如其包含以下或由以下組成：與SEQ ID NO:1具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列)，且胺基酸連接子包含以下或由以下組成：SEQ ID NO:3之胺基酸序列，或與SEQ ID NO:3具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之序列。舉例而言，三聚體中之TNFSF配體之細胞外域可包含SEQ ID NO:1之胺基酸序列或由其組成，且胺基酸連接子可包含SEQ ID NO:3之胺基酸序列或由其組成。在一些態樣中，TNFSF配體之細胞外域為4-1BBL (例如其包含以下或由以下組成：與SEQ ID NO:2具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列)，且胺基酸連接子包含以下或由以下組成：SEQ ID NO:4-10中之任一者，或與SEQ ID NO:4-10中之任一者具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之序列。舉例而言，三聚體中之TNFSF配體之細胞外域可包含SEQ ID NO:2之胺基酸序列或由其組成，且胺基酸連接子可包含SEQ ID NO:4-10中之任一者之胺基酸序列或由其組成。在一些態樣中，TNFSF配體之細胞外域為4-1BBL (例如其包含以下或由以下組成：與SEQ ID NO:2具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列)，且胺基酸連接子包含以下或由以下組成：SEQ ID NO:10，或與SEQ ID NO:10具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之序列。舉例而言，三聚體中之TNFSF配體之細胞外域可包含SEQ ID NO:2之胺基酸序列或由其組成，且胺基酸連接子可包含SEQ ID NO:10之胺基酸序列或由其組成。
在一些態樣中，TNFSF配體之細胞外域之三聚體包含以下或由以下組成：SEQ ID NO:11-18中之任一者的序列，或與SEQ ID NO:11-18中之任一者具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性的序列。舉例而言，TNFSF配體之細胞外域之三聚體可包含SEQ ID NO:11-18中之任一者之序列或由其組成。舉例而言，TNFSF配體之細胞外域之三聚體可包含以下或由以下組成：SEQ ID NO:11之序列，或與SEQ ID NO:11具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性的序列。舉例而言，TNFSF配體之細胞外域之三聚體可包含以下或由以下組成：SEQ ID NO:18之序列，或與SEQ ID NO:18具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性的序列。在一些態樣中，TNFSF配體之細胞外域之三聚體之二聚體包含以下或由以下組成：TNFSF配體之細胞外域之兩個三聚體，各自包含SEQ ID NO:11-18中之任一者的序列，或與SEQ ID NO:11-18中之任一者具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性的序列。在一些態樣中，二聚體之兩個三聚體相同。在一些態樣中，一個三聚體不同於二聚體之另一三聚體。舉例而言，TNFSF配體之細胞外域之三聚體之二聚體可包含以下或由以下組成：TNFSF配體之細胞外域的兩個三聚體，各自包含SEQ ID NO:11-18中之任一者的序列。舉例而言，TNFSF配體之細胞外域之三聚體之二聚體可包含以下或由以下組成：TNFSF配體之細胞外域的兩個三聚體，各自包含SEQ ID NO:11之序列，或與SEQ ID NO:11具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性的序列。舉例而言，TNFSF配體之細胞外域之三聚體之二聚體可包含以下或由以下組成：TNFSF配體之細胞外域的兩個三聚體，各自包含SEQ ID NO:18之序列，或與SEQ ID NO:18具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性的序列。
B. CD3
在一些態樣中，本發明之抗原結合多肽複合物(例如抗體或其抗原結合片段)含有至少一個與CD3特異性結合之區域(例如CDR、VH、VL、scFv、Fab、scFab、重鏈或輕鏈)。
在一些態樣中，抗原結合多肽複合物包含與CD3特異性結合之VL及/或VH。在一些態樣中，VL包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:22、28、185、298及306中之任一者具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:23、29、186、299及307中之任一者具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:24、30、187、300及308中之任一者具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列；及/或VH包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:SEQ ID NO:19、25、182、294及312中之任一者具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:20、26、183、295及313中之任一者具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:21、27、184、296及314中之任一者具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列。在一些態樣中，VL包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:22具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:23具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:24具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或VH包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:19具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:20具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:21具有至少90%一致性的胺基酸序列。在一些態樣中，VL包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:28具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:29具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:30具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或VH包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:25具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:26具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:27具有至少90%一致性的胺基酸序列。在一些態樣中，VL包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:185具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:186具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:187具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或VH包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:182具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:183具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:184具有至少90%一致性的胺基酸序列。在一些態樣中，VL包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:298具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:299具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:300具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或VH包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:294具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:295具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:296具有至少90%一致性的胺基酸序列。在一些態樣中，VL包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:306具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:307具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:308具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或VH包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:302具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:303具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:304具有至少90%一致性的胺基酸序列。如本文所用，「至少90%一致性」包括與所敍述參考序列具有至少91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%及100%一致性。在一些態樣中，VL包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:22之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:23之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:24之胺基酸序列；及/或VH包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:19之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:20之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:21之胺基酸序列。在一些態樣中，VL包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:28之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:29之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:30之胺基酸序列；及/或VH包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:25之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:26之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:27之胺基酸序列。在一些態樣中，VL包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:185之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:186之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:187之胺基酸序列；及/或VH包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:182之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:183之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:184之胺基酸序列。在一些態樣中，VL包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:298之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:299之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:300之胺基酸序列；及/或VH包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:294之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:295之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:296之胺基酸序列。在一些態樣中，VL包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:306之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:307之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:308之胺基酸序列；及/或VH包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:312之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:313之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:314之胺基酸序列。在一些態樣中，VL包含與SEQ ID NO:45具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列，及/或VH包含與SEQ ID NO:43或44具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，VL包含與SEQ ID NO:45具有至少80%一致性(諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性)之胺基酸序列；及/或VH包含與SEQ ID NO:43具有至少80%一致性(諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性)之胺基酸序列。舉例而言，VL可包含SEQ ID NO:45之胺基酸序列；及/或VH可包含SEQ ID NO:43之胺基酸序列。在一些態樣中，VL包含與SEQ ID NO:45具有至少80%一致性(諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性)之胺基酸序列；及/或VH包含與SEQ ID NO:44具有至少80%一致性(諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性)之胺基酸序列。舉例而言，VL可包含SEQ ID NO:45之胺基酸序列；及/或VH可包含SEQ ID NO:44之胺基酸序列。
在一些態樣中，VH包含與SEQ ID NO:188具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，VL包含與SEQ ID NO:297或305具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列，及/或VH包含與SEQ ID NO:188、293或301具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，VL包含與SEQ ID NO:297具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列，及/或VH包含與SEQ ID NO:293具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，VL包含與SEQ ID NO:305具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列，及/或VH包含與SEQ ID NO:301具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列。
在一些態樣中，抗原結合多肽複合物包含與CD3特異性結合之輕鏈。在一些態樣中，輕鏈包含與SEQ ID NO:54或176具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列。舉例而言，輕鏈可包含與SEQ ID NO:54具有至少80%一致性(諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性)之胺基酸序列。舉例而言，輕鏈可包含與SEQ ID NO:176具有至少80%一致性(諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性)之胺基酸序列。舉例而言，輕鏈可包含SEQ ID NO:54之胺基酸序列。舉例而言，輕鏈可包含SEQ ID NO:176之胺基酸序列。在一些態樣中，輕鏈包含由與SEQ ID NO:55或177具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之聚核苷酸編碼的胺基酸序列。舉例而言，輕鏈可包含由與SEQ ID NO:55具有至少80%一致性(諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性)之聚核苷酸編碼的胺基酸序列。舉例而言，輕鏈可包含由與SEQ ID NO:177具有至少80%一致性(諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性)之聚核苷酸編碼的胺基酸序列。舉例而言，輕鏈可包含由SEQ ID NO:55之聚核苷酸序列編碼之胺基酸序列。舉例而言，輕鏈可包含由SEQ ID NO:177之聚核苷酸序列編碼之胺基酸序列。
在一些態樣中，抗原結合多肽複合物包含與CD3特異性結合之重鏈。在一些態樣中，重鏈包含與SEQ ID NO:178具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，重鏈包含SEQ ID NO:178之胺基酸序列。
在一些態樣中，抗原結合多肽複合物包含與CD3特異性結合之重鏈及與CD3特異性結合之輕鏈。在一些態樣中，重鏈包含與SEQ ID NO:178具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列；及輕鏈包含與SEQ ID NO:176具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，重鏈包含SEQ ID NO:178之胺基酸序列；及輕鏈包含SEQ ID NO:176之胺基酸序列。
在一些態樣中，抗原結合多肽複合物包含與CD3特異性結合之重鏈。在一些態樣中，重鏈包含與SEQ ID NO:98具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，重鏈包含與SEQ ID NO:104具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，重鏈包含與SEQ ID NO:120具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，重鏈包含SEQ ID NO:98之胺基酸序列。在一些態樣中，重鏈包含SEQ ID NO:104之胺基酸序列。在一些態樣中，重鏈包含SEQ ID NO:120之胺基酸序列。
在一些態樣中，抗原結合多肽複合物包含與CD3特異性結合之重鏈及與CD3特異性結合之輕鏈。在一些態樣中，重鏈包含與SEQ ID NO:98具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列；及輕鏈包含與SEQ ID NO:54具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，重鏈包含與SEQ ID NO:104具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列；及輕鏈包含與SEQ ID NO:54具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，重鏈包含與SEQ ID NO:120具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列；及輕鏈包含與SEQ ID NO:54具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，重鏈包含SEQ ID NO:98之胺基酸序列；及輕鏈包含SEQ ID NO:54之胺基酸序列。在一些態樣中，重鏈包含SEQ ID NO:104之胺基酸序列；及輕鏈包含SEQ ID NO:54之胺基酸序列。在一些態樣中，重鏈包含SEQ ID NO:120之胺基酸序列；及輕鏈包含SEQ ID NO:54之胺基酸序列。
在一些態樣中，抗原結合多肽複合物包含與CD3特異性結合之輕鏈。在一些態樣中，輕鏈包含與SEQ ID NO:56具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列(ahCD3_h34L鏈)。舉例而言，輕鏈可包含SEQ ID NO:56之胺基酸序列。在一些態樣中，輕鏈包含由與SEQ ID NO:57具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之聚核苷酸編碼的胺基酸序列(ahCD3_h34L鏈)。舉例而言，輕鏈可包含由SEQ ID NO:57之聚核苷酸序列編碼之胺基酸序列。在一些態樣中，輕鏈包含與SEQ ID NO:54具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列。舉例而言，輕鏈可包含SEQ ID NO:54之胺基酸序列。
在一些態樣中，抗原結合多肽複合物包含與CD3特異性結合之重鏈。在一些態樣中，重鏈包含與SEQ ID NO:98具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，重鏈包含與SEQ ID NO:104具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，重鏈包含與SEQ ID NO:120具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，重鏈包含SEQ ID NO:98之胺基酸序列。在一些態樣中，重鏈包含SEQ ID NO:104之胺基酸序列。在一些態樣中，重鏈包含SEQ ID NO:120之胺基酸序列。
在一些態樣中，抗原結合多肽複合物包含與CD3特異性結合之重鏈及與CD3特異性結合之輕鏈。在一些態樣中，重鏈包含與SEQ ID NO:98具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列；及輕鏈包含與SEQ ID NO:54具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，重鏈包含與SEQ ID NO:104具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列；及輕鏈包含與SEQ ID NO:54具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，重鏈包含與SEQ ID NO:120具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列；及輕鏈包含與SEQ ID NO:54具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，重鏈包含SEQ ID NO:98之胺基酸序列；及輕鏈包含SEQ ID NO:54之胺基酸序列。在一些態樣中，重鏈包含SEQ ID NO:104之胺基酸序列；及輕鏈包含SEQ ID NO:54之胺基酸序列。在一些態樣中，重鏈包含SEQ ID NO:120之胺基酸序列；及輕鏈包含SEQ ID NO:54之胺基酸序列。
在一些態樣中，抗原結合多肽複合物包含與CD3特異性結合之重鏈。在一些態樣中，重鏈包含與SEQ ID NO:188具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列。舉例而言，重鏈可包含SEQ ID NO:188之胺基酸序列。
與CD3特異性結合之序列之其他實例已熟知且描述於例如以下中：美國專利第11,186,650號；第11,155,621號；第11,098,120號；第11,072,656號；第11,007,267號；第10,968,276號；第10,961,315號；第10,906,978號；第10,865,251號；第10,759,858號；第10,690,678號；第10,688,186號；第10,669,33號；第10,640,572號；第10,174,124號；第9,850,304號；第9,657,102號；第8,551,478號；第7,994,289號；及第7,993,641號。
C. 腫瘤相關抗原及免疫活化受體
在一些態樣中，本發明之抗原結合多肽複合物(例如抗體或其抗原結合片段)含有與免疫活化受體或腫瘤相關抗原(TAA)特異性結合之一或多個區(例如CDR、VH、VL、scFv、Fab、scFab、重鏈或輕鏈)。
如本文所用，「腫瘤相關抗原」或TAA為相較於正常細胞在癌細胞上更普遍的蛋白質或分子。TAA之實例包括但不限於酪胺酸蛋白激酶Met (cMet)、滋胚層細胞表面抗原2 (Trop2)、CD20、CD19、受體酪胺酸蛋白激酶erbB-2 (HER2)、受體酪胺酸蛋白激酶erbB-3 (HER3)、腺苷A2A受體(A2AR)、增殖誘導性配體(APRIL)、表皮生長因子受體(epidermal growth factor receptor；EGFR)、纖維母細胞生長因子受體(fibroblast growth factor receptor；FGFR)、B細胞活化因子(BAFF)、BAFF受體(BAFFR)、B細胞成熟抗原(B cell maturation antigen；BCMA)、布魯頓氏酪胺酸激酶(Bruton's tyrosine kinase；BTK)、B及T淋巴球弱化子(BTLA)、B7DC (計劃性死亡配體2)、B7同源物1 (B7H1)、B7同源物4 (B7H4)、δ樣配體3 (DLL3)、胞外核苷三磷酸酯二磷酸水解酶1 (ENTPD1)、IgE受體之Fc片段1a (FCER1A)、IgE受體之Fc片段1 (FCER1)、花生四烯酸酯5-脂肪加氧酶-活化蛋白(FLAP)、葉酸羥化酶1 (FOLH1)、黏蛋白1 (MUC-1)、CD133、黏蛋白16 (MUC-16)、溶酶體相關膜蛋白1 (lysosomal-associated membrane protein 1；LAMP1)、CD38、計劃性死亡配體1 (PD-L1)、CEA細胞黏附分子5 (CEACAM5)、前列腺六跨膜上皮抗原1 (STEAP1)及上皮細胞黏附分子(EpCAM)。在一些態樣中，TAA為HER2。
如本文所用，「免疫刺激受體」為用於擴增或抵消提供至T細胞(例如在與抗原/主要組織相容複合物(MHC)相互作用之後，自T細胞受體(TCR))初始活化訊號，從而影響T細胞分化、活化及/或增殖之細胞表面分子的異質群體。免疫刺激受體之實例為熟知的且包括但不限於CD3及CD28。
在一些態樣中，抗原結合多肽複合物包含與TAA或免疫刺激受體(例如CD28)特異性結合之VH及/或VL。舉例而言，抗原結合多肽複合物可包含與CD28特異性結合之VH及/或VL。在一些態樣中，VL包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:34或40具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:35或41具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:36或42具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或VH包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:31或37具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:32或38具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:33或39具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，VL包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:34具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:35具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:36具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或VH包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:31具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:32具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:33具有至少90%一致性的胺基酸序列。在一些態樣中，VL包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:40具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:41具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:42具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或VH包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:37具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:38具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:39具有至少90%一致性的胺基酸序列。如本文所用，「至少90%一致性」包括與所敍述參考序列具有至少91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%及100%一致性。在一些態樣中，VL包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:34之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:35之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:36之胺基酸序列；及/或VH包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:31之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:32之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:33之胺基酸序列。在一些態樣中，VL包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:40之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:41之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:42之胺基酸序列；及/或VH包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:37之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:38之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:39之胺基酸序列。在一些態樣中，VL包含SEQ ID NO:47或49之胺基酸序列或與SEQ ID NO:47或49具有至少80%、至少85%、至少90%或至少95%一致性之序列。在一些態樣中，VL包含與SEQ ID NO:47具有至少80%一致性(諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性)之序列。在一些態樣中，VL包含與SEQ ID NO:49具有至少80%一致性(諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性)之序列。舉例而言，VL可包含SEQ ID NO:47之胺基酸序列。舉例而言，VL可包含SEQ ID NO:49之胺基酸序列。在一些態樣中，VH包含SEQ ID NO:46或48之胺基酸序列或與SEQ ID NO:46或48具有至少80%、至少85%、至少90%或至少95%一致性之序列。在一些態樣中，VH包含與SEQ ID NO:46具有至少80%一致性(諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性)之序列。在一些態樣中，VH包含與SEQ ID NO:48具有至少80%一致性(諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性)之序列。舉例而言，VH可包含SEQ ID NO:46之胺基酸序列。舉例而言，VH可包含SEQ ID NO:48之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物包含：VL，其包含SEQ ID NO:47之胺基酸序列(或與SEQ ID NO:47具有至少80%、至少85%、至少90%或至少95%一致性之序列)；及VH，其包含SEQ ID NO:46之胺基酸序列(或與SEQ ID NO:46具有至少80%、至少85%、至少90%或至少95%一致性之序列)。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物包含：VL，其包含SEQ ID NO:49之胺基酸序列(或與SEQ ID NO:49具有至少80%、至少85%、至少90%或至少95%一致性之序列)；及VH，其包含SEQ ID NO:48之胺基酸序列(或與SEQ ID NO:48具有至少80%、至少85%、至少90%或至少95%一致性之序列)。
在一些態樣中，抗原結合多肽複合物包含與TAA或免疫刺激受體特異性結合之輕鏈。在一些態樣中，輕鏈包含與SEQ ID NO:50或52具有至少80%、至少85%、至少90%、至少95%或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，輕鏈包含與SEQ ID NO:50具有至少80%一致性(諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性)之胺基酸序列。在一些態樣中，輕鏈包含與SEQ ID NO:52具有至少80%一致性(諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性)之胺基酸序列。舉例而言，輕鏈可包含SEQ ID NO:50之胺基酸序列。舉例而言，輕鏈可包含SEQ ID NO:52之胺基酸序列。在一些態樣中，輕鏈包含由與SEQ ID NO:51或53具有至少80%、至少85%、至少90%、至少95%或100%一致性之聚核苷酸編碼之胺基酸序列。在一些態樣中，輕鏈包含由與SEQ ID NO:51具有至少80%一致性(諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性)之聚核苷酸編碼之胺基酸序列。在一些態樣中，輕鏈包含由與SEQ ID NO:53具有至少80%一致性(諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性)之聚核苷酸編碼之胺基酸序列。舉例而言，輕鏈可包含由SEQ ID NO:51之聚核苷酸序列編碼之胺基酸序列。舉例而言，輕鏈可包含由SEQ ID NO:53之聚核苷酸序列編碼之胺基酸序列。
在一些態樣中，抗原結合多肽複合物包含與CD20特異性結合之VH及/或VL。在一些態樣中，VL包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:314或322具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:315或323具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:316或324具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或VH包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:310或318具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:311或319具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:312或320具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，VL包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:314具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:315具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:316具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或VH包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:310具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:311具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:312具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，VL包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:322具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:323具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:324具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或VH包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:318具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:319具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:320具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，VL包含與SEQ ID NO:313或321具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或VH包含與SEQ ID NO:309或317具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，VL包含與SEQ ID NO:313具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或VH包含與SEQ ID NO:309具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，VL包含與SEQ ID NO:321具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或VH包含與SEQ ID NO:317具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列。如本文所用，「至少90%一致性」包括與所敍述參考序列具有至少91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%及100%一致性。
在一些態樣中，抗原結合多肽複合物包含與cMet特異性結合之VH及/或VL。在一些態樣中，VL包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:274具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:275具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:276具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或VH包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:270具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:271具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:272具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，VL包含與SEQ ID NO:273具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或VH包含與SEQ ID NO:269具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列。如本文所用，「至少90%一致性」包括與所敍述參考序列具有至少91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%及100%一致性。
在一些態樣中，抗原結合多肽複合物包含與Trop2特異性結合之VH及/或VL。在一些態樣中，VL包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:282具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:283具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:284具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或VH包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:278具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:279具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:280具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，VL包含與SEQ ID NO:281具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或VH包含與SEQ ID NO:277具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列。如本文所用，「至少90%一致性」包括與所敍述參考序列具有至少91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%及100%一致性。
在一些態樣中，抗原結合多肽複合物包含與CD19特異性結合之VH及/或VL。在一些態樣中，VL包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:290具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:291具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:292具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或VH包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:286具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:287具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:288具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，VL包含與SEQ ID NO:289具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或VH包含與SEQ ID NO:285具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列。如本文所用，「至少90%一致性」包括與所敍述參考序列具有至少91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%及100%一致性。
與TAA特異性結合之序列之其他實例為熟知的且包括但不限於GenBank存取編號AAA39272.1、AAA39159.1、ABN79462.1、AVW80143.1、AVW80142.1、AVW80141.1、AAB34430.1、AAB34429.1、CAD45042.1、4CMH_C及4CMH_B。此類序列亦描述於例如Wernly等人, Cells, 9(2):295, 2020；Arakawa等人, Journal of Biochemistry, 120(3):657-662, 1996；Cole等人, Transplantation, 68(4):563-571, 1999；Li等人, International Immunopharmacology, 62:299-308, 2018；Castella等人, Methods & Clinical Development, 12:134-144, 2019；Sun等人, Molecular Immunology, 41(9):929-938, 2004；Iwaszkiewicz-Grzes等人, Cytotherapy, 22(11):629-641, 2020；Rosinski等人, Transplant Direct, 1(2):e7, 2015；Ellis等人, J Immunology, 155(2):925-937, 1995；Stevenson等人, Blood, 77(5):1071-1079, 1991；Chillemi等人, Molecular Medicine, 19:99-108, 2013，以及國際公開案第WO 2020/076853號中。
D. 抗原結合多肽複合物結構
在一些態樣中，本發明之抗原結合多肽複合物包含第一多肽、第二多肽及第三多肽；其中該第一多肽具有由以下表示的結構：VL1-L1-CL；VL1-L1-CH1；VH1-L1-CL；或VH1-L1-CH1；其中(i)該第二多肽具有由以下表示的結構：VH1-L2-CH1-L3-Fc-L4-TNF1-L5-TNF2-L6-TNF3；VH1-L2-CL-L3-Fc-L4-TNF1-L5-TNF2-L6-TNF3；VH1-L7-CH1-L8-Fc；VH1-L7-CL-L8-Fc；VL1-L2-CH1-L3-Fc-L4-TNF1-L5-TNF2-L6-TNF3；VL1-L2-CL-L3-Fc-L4-TNF1-L5-TNF2-L6-TNF3；VL1-L7-CH1-L8-Fc；或VL1-L7-CL-L8-Fc；及該第三多肽具有由以下表示的結構：VL2-L9-VH2-L10-Fc-L11-TNF1-L12-TNF2-L13-TNF3；或VH2-L14-VL2-L15-Fc-L16-TNF1-L17-TNF2-L18-TNF3；或(ii)該第二多肽具有由以下表示的結構：VH1-L19-CH1-L20-Fc-L21-TNF1-L22-TNF2-L23-TNF3；VH1-L19-CL-L20-Fc-L21-TNF1-L22-TNF2-L23-TNF3；VL1-L19-CH1-L20-Fc-L21-TNF1-L22-TNF2-L23-TNF3；或VL1-L19-CL-L20-Fc-L21-TNF1-L22-TNF2-L23-TNF3；及該第三多肽具有由以下表示的結構：VL2-L24-VH2-L25-Fc；或VH2-L26-VL2-L27-Fc；其中VL1為第一免疫球蛋白輕鏈可變區；VL2為第二免疫球蛋白輕鏈可變區；VH1為第一免疫球蛋白重鏈可變區；VH2為第二免疫球蛋白重鏈可變區；Fc為包含免疫球蛋白重鏈恆定區2 (CH2)、免疫球蛋白重鏈恆定區3 (CH3)及視情況存在之免疫球蛋白鉸鏈的區域；CH1為免疫球蛋白重鏈恆定區1；CL為免疫球蛋白輕鏈恆定區；TNF1為腫瘤壞死因子超家族(TNFSF)配體之第一細胞外域；TNF2為TNFSF配體之第二細胞外域；TNF3為TNFSF配體之第三細胞外域；及L1-L27為胺基酸連接子。在一些態樣中，該第一多肽具有由以下表示的結構：VL1-L1-CL；VL1-L1-CH1；VH1-L1-CL；或VH1-L1-CH1；該第二多肽具有由以下表示的結構：VH1-L2-CH1-L3-Fc-L4-TNF1-L5-TNF2-L6-TNF3；及該第三多肽具有由以下表示的結構：VL2-L9-VH2-L10-Fc-L11-TNF1-L12-TNF2-L13-TNF3。在一些態樣中，該第一多肽具有由以下表示的結構：VL1-L1-CL；VL1-L1-CH1；VH1-L1-CL；或VH1-L1-CH1；該第二多肽具有由以下表示的結構：VH1-L2-CH1-L3-Fc-L4-TNF1-L5-TNF2-L6-TNF3；及該第三多肽具有由以下表示的結構：VH2-L14-VL2-L15-Fc-L16-TNF1-L17-TNF2-L18-TNF3。在一些態樣中，該第一多肽具有由以下表示的結構：VL1-L1-CL；VL1-L1-CH1；VH1-L1-CL；或VH1-L1-CH1；該第二多肽具有由以下表示的結構：VH1-L2-CL-L3-Fc-L4-TNF1-L5-TNF2-L6-TNF3；及該第三多肽具有由以下表示的結構：VL2-L9-VH2-L10-Fc-L11-TNF1-L12-TNF2-L13-TNF3。在一些態樣中，該第一多肽具有由以下表示的結構：VL1-L1-CL；VL1-L1-CH1；VH1-L1-CL；或VH1-L1-CH1；該第二多肽具有由以下表示的結構：VH1-L2-CL-L3-Fc-L4-TNF1-L5-TNF2-L6-TNF3；及該第三多肽具有由以下表示的結構：VH2-L14-VL2-L15-Fc-L16-TNF1-L17-TNF2-L18-TNF3。在一些態樣中，該第一多肽具有由以下表示的結構：VL1-L1-CL；VL1-L1-CH1；VH1-L1-CL；或VH1-L1-CH1；該第二多肽具有由以下表示的結構：VH1-L7-CH1-L8-Fc；及該第三多肽具有由以下表示的結構：VL2-L9-VH2-L10-Fc-L11-TNF1-L12-TNF2-L13-TNF3。在一些態樣中，該第一多肽具有由以下表示的結構：VL1-L1-CL；VL1-L1-CH1；VH1-L1-CL；或VH1-L1-CH1；該第二多肽具有由以下表示的結構：VH1-L7-CH1-L8-Fc；及該第三多肽具有由以下表示的結構：VH2-L14-VL2-L15-Fc-L16-TNF1-L17-TNF2-L18-TNF3。在一些態樣中，該第一多肽具有由以下表示的結構：VL1-L1-CL；VL1-L1-CH1；VH1-L1-CL；或VH1-L1-CH1；該第二多肽具有由以下表示的結構：VH1-L7-CL-L8-Fc；及該第三多肽具有由以下表示的結構：VL2-L9-VH2-L10-Fc-L11-TNF1-L12-TNF2-L13-TNF3。在一些態樣中，該第一多肽具有由以下表示的結構：VL1-L1-CL；VL1-L1-CH1；VH1-L1-CL；或VH1-L1-CH1；該第二多肽具有由以下表示的結構：VH1-L7-CL-L8-Fc；及該第三多肽具有由以下表示的結構：VH2-L14-VL2-L15-Fc-L16-TNF1-L17-TNF2-L18-TNF3。在一些態樣中，該第一多肽具有由以下表示的結構：VL1-L1-CL；VL1-L1-CH1；VH1-L1-CL；或VH1-L1-CH1；該第二多肽具有由以下表示的結構：VL1-L2-CH1-L3-Fc-L4-TNF1-L5-TNF2-L6-TNF3；及該第三多肽具有由以下表示的結構：VL2-L9-VH2-L10-Fc-L11-TNF1-L12-TNF2-L13-TNF3。在一些態樣中，該第一多肽具有由以下表示的結構：VL1-L1-CL；VL1-L1-CH1；VH1-L1-CL；或VH1-L1-CH1；該第二多肽具有由以下表示的結構：VL1-L2-CH1-L3-Fc-L4-TNF1-L5-TNF2-L6-TNF3；及該第三多肽具有由以下表示的結構：VH2-L14-VL2-L15-Fc-L16-TNF1-L17-TNF2-L18-TNF3。在一些態樣中，該第一多肽具有由以下表示的結構：VL1-L1-CL；VL1-L1-CH1；VH1-L1-CL；或VH1-L1-CH1；該第二多肽具有由以下表示的結構：VL1-L2-CL-L3-Fc-L4-TNF1-L5-TNF2-L6-TNF3；及該第三多肽具有由以下表示的結構：VL2-L9-VH2-L10-Fc-L11-TNF1-L12-TNF2-L13-TNF3。在一些態樣中，該第一多肽具有由以下表示的結構：VL1-L1-CL；VL1-L1-CH1；VH1-L1-CL；或VH1-L1-CH1；該第二多肽具有由以下表示的結構：VL1-L2-CL-L3-Fc-L4-TNF1-L5-TNF2-L6-TNF3；及該第三多肽具有由以下表示的結構：VH2-L14-VL2-L15-Fc-L16-TNF1-L17-TNF2-L18-TNF3。在一些態樣中，該第一多肽具有由以下表示的結構：VL1-L1-CL；VL1-L1-CH1；VH1-L1-CL；或VH1-L1-CH1；該第二多肽具有由以下表示的結構：VL1-L7-CH1-L8-Fc；及該第三多肽具有由以下表示的結構：VL2-L9-VH2-L10-Fc-L11-TNF1-L12-TNF2-L13-TNF3。在一些態樣中，該第一多肽具有由以下表示的結構：VL1-L1-CL；VL1-L1-CH1；VH1-L1-CL；或VH1-L1-CH1；該第二多肽具有由以下表示的結構：VL1-L7-CH1-L8-Fc；及該第三多肽具有由以下表示的結構：VH2-L14-VL2-L15-Fc-L16-TNF1-L17-TNF2-L18-TNF3。在一些態樣中，該第一多肽具有由以下表示的結構：VL1-L1-CL；VL1-L1-CH1；VH1-L1-CL；或VH1-L1-CH1；該第二多肽具有由以下表示的結構：VL1-L7-CL-L8-Fc；及該第三多肽具有由以下表示的結構：VL2-L9-VH2-L10-Fc-L11-TNF1-L12-TNF2-L13-TNF3。在一些態樣中，該第一多肽具有由以下表示的結構：VL1-L1-CL；VL1-L1-CH1；VH1-L1-CL；或VH1-L1-CH1；該第二多肽具有由以下表示的結構：VL1-L7-CL-L8-Fc；及該第三多肽具有由以下表示的結構：VH2-L14-VL2-L15-Fc-L16-TNF1-L17-TNF2-L18-TNF3。在一些態樣中，該第一多肽具有由以下表示的結構：VL1-L1-CL；VL1-L1-CH1；VH1-L1-CL；或VH1-L1-CH1；該第二多肽具有由以下表示的結構：VH1-L19-CH1-L20-Fc-L21-TNF1-L22-TNF2-L23-TNF3；及該第三多肽具有由以下表示的結構：VL2-L24-VH2-L25-Fc。在一些態樣中，該第一多肽具有由以下表示的結構：VL1-L1-CL；VL1-L1-CH1；VH1-L1-CL；或VH1-L1-CH1；該第二多肽具有由以下表示的結構：VH1-L19-CH1-L20-Fc-L21-TNF1-L22-TNF2-L23-TNF3；及該第三多肽具有由以下表示的結構：VH2-L26-VL2-L27-Fc。在一些態樣中，該第一多肽具有由以下表示的結構：VL1-L1-CL；VL1-L1-CH1；VH1-L1-CL；或VH1-L1-CH1；該第二多肽具有由以下表示的結構：VH1-L19-CL-L20-Fc-L21-TNF1-L22-TNF2-L23-TNF3；及該第三多肽具有由以下表示的結構：VL2-L24-VH2-L25-Fc。在一些態樣中，該第一多肽具有由以下表示的結構：VL1-L1-CL；VL1-L1-CH1；VH1-L1-CL；或VH1-L1-CH1；該第二多肽具有由以下表示的結構：VH1-L19-CL-L20-Fc-L21-TNF1-L22-TNF2-L23-TNF3；及該第三多肽具有由以下表示的結構：VH2-L26-VL2-L27-Fc。在一些態樣中，該第一多肽具有由以下表示的結構：VL1-L1-CL；VL1-L1-CH1；VH1-L1-CL；或VH1-L1-CH1；該第二多肽具有由以下表示的結構：VL1-L19-CH1-L20-Fc-L21-TNF1-L22-TNF2-L23-TNF3；及該第三多肽具有由以下表示的結構：VL2-L24-VH2-L25-Fc。在一些態樣中，該第一多肽具有由以下表示的結構：VL1-L1-CL；VL1-L1-CH1；VH1-L1-CL；或VH1-L1-CH1；該第二多肽具有由以下表示的結構：VL1-L19-CH1-L20-Fc-L21-TNF1-L22-TNF2-L23-TNF3；及該第三多肽具有由以下表示的結構：VH2-L26-VL2-L27-Fc。在一些態樣中，該第一多肽具有由以下表示的結構：VL1-L1-CL；VL1-L1-CH1；VH1-L1-CL；或VH1-L1-CH1；該第二多肽具有由以下表示的結構：VL1-L19-CL-L20-Fc-L21-TNF1-L22-TNF2-L23-TNF3；及該第三多肽具有由以下表示的結構：VL2-L24-VH2-L25-Fc。在一些態樣中，該第一多肽具有由以下表示的結構：VL1-L1-CL；VL1-L1-CH1；VH1-L1-CL；或VH1-L1-CH1；該第二多肽具有由以下表示的結構：VL1-L19-CL-L20-Fc-L21-TNF1-L22-TNF2-L23-TNF3；及該第三多肽具有由以下表示的結構：VH2-L26-VL2-L27-Fc。在一些態樣中，本發明之抗原結合多肽複合物包含第一多肽、第二多肽及第三多肽；其中該第一多肽具有由以下表示的結構：VL1-L1-CL；VL1-L1-CH1；VH1-L1-CL；或VH1-L1-CH1；其中(i)該第二多肽具有由以下表示的結構：VH1-CH1-L2-Fc-L3-TNF1-L4-TNF2-L5-TNF3；VH1-CL-L2-Fc-L3-TNF1-L4-TNF2-L5-TNF3；VH1-CH1-L6-Fc；VH1-CL-L7-Fc；VL1-CH1-L2-Fc-L3-TNF1-L4-TNF2-L5-TNF3；VL1-CL-L2-Fc-L3-TNF1-L4-TNF2-L5-TNF3；VL1-CH1-L6-Fc；或VL1-CL-L7-Fc；及該第三多肽具有由以下表示的結構：VL2-L8-VH2-L9-Fc-L10-TNF1-L11-TNF2-L12-TNF3；或VH2-L13-VL2-L14-Fc-L15-TNF1-L16-TNF2-L17-TNF3；或(ii)該第二多肽具有由以下表示的結構：VH1-CH1-L18-Fc-L19-TNF1-L20-TNF2-L21-TNF3；VH1-CL-L18-Fc-L19-TNF1-L20-TNF2-L21-TNF3；VL1-CH1-L18-Fc-L19-TNF1-L20-TNF2-L21-TNF3；或VL1-CL-L18-Fc-L19-TNF1-L20-TNF2-L21-TNF3；及該第三多肽具有由以下表示的結構：VL2-L22-VH2-L23-Fc；或VH2-L24-VL2-L25-Fc；其中VL1為第一免疫球蛋白輕鏈可變區；VL2為第二免疫球蛋白輕鏈可變區；VH1為第一免疫球蛋白重鏈可變區；VH2為第二免疫球蛋白重鏈可變區；Fc為包含免疫球蛋白重鏈恆定區2 (CH2)、免疫球蛋白重鏈恆定區3 (CH3)及視情況存在之免疫球蛋白鉸鏈的區域；CH1為免疫球蛋白重鏈恆定區1；CL為免疫球蛋白輕鏈恆定區；TNF1為腫瘤壞死因子超家族(TNFSF)配體之第一細胞外域；TNF2為TNFSF配體之第二細胞外域；TNF3為TNFSF配體之第三細胞外域；及L1-L26為胺基酸連接子。在一些態樣中，該第一多肽具有由以下表示的結構：VL1-L1-CL；VL1-L1-CH1；VH1-L1-CL；或VH1-L1-CH1；該第二多肽具有由以下表示的結構：VH1-CH1-L2-Fc-L3-TNF1-L4-TNF2-L5-TNF3；及該第三多肽具有由以下表示的結構：VL2-L8-VH2-L9-Fc-L10-TNF1-L11-TNF2-L12-TNF3。在一些態樣中，該第一多肽具有由以下表示的結構：VL1-L1-CL；VL1-L1-CH1；VH1-L1-CL；或VH1-L1-CH1；該第二多肽具有由以下表示的結構：VH1-CH1-L2-Fc-L3-TNF1-L4-TNF2-L5-TNF3；及該第三多肽具有由以下表示的結構：VH2-L13-VL2-L14-Fc-L15-TNF1-L16-TNF2-L17-TNF。在一些態樣中，該第一多肽具有由以下表示的結構：VL1-L1-CL；VL1-L1-CH1；VH1-L1-CL；或VH1-L1-CH1；該第二多肽具有由以下表示的結構：VH1-CL-L2-Fc-L3-TNF1-L4-TNF2-L5-TNF3；及該第三多肽具有由以下表示的結構：VL2-L8-VH2-L9-Fc-L10-TNF1-L11-TNF2-L12-TNF3。在一些態樣中，該第一多肽具有由以下表示的結構：VL1-L1-CL；VL1-L1-CH1；VH1-L1-CL；或VH1-L1-CH1；該第二多肽具有由以下表示的結構：VH1-CL-L2-Fc-L3-TNF1-L4-TNF2-L5-TNF3；及該第三多肽具有由以下表示的結構：VH2-L13-VL2-L14-Fc-L15-TNF1-L16-TNF2-L17-TNF。在一些態樣中，該第一多肽具有由以下表示的結構：VL1-L1-CL；VL1-L1-CH1；VH1-L1-CL；或VH1-L1-CH1；該第二多肽具有由以下表示的結構：VH1-CH1-L6-Fc；及該第三多肽具有由以下表示的結構：VL2-L8-VH2-L9-Fc-L10-TNF1-L11-TNF2-L12-TNF3。在一些態樣中，該第一多肽具有由以下表示的結構：VL1-L1-CL；VL1-L1-CH1；VH1-L1-CL；或VH1-L1-CH1；該第二多肽具有由以下表示的結構：VH1-CH1-L6-Fc；及該第三多肽具有由以下表示的結構：VH2-L13-VL2-L14-Fc-L15-TNF1-L16-TNF2-L17-TNF。在一些態樣中，該第一多肽具有由以下表示的結構：VL1-L1-CL；VL1-L1-CH1；VH1-L1-CL；或VH1-L1-CH1；該第二多肽具有由以下表示的結構：VH1-CL-L7-Fc；及該第三多肽具有由以下表示的結構：VL2-L8-VH2-L9-Fc-L10-TNF1-L11-TNF2-L12-TNF3。在一些態樣中，該第一多肽具有由以下表示的結構：VL1-L1-CL；VL1-L1-CH1；VH1-L1-CL；或VH1-L1-CH1；該第二多肽具有由以下表示的結構：VH1-CL-L7-Fc；及該第三多肽具有由以下表示的結構：VH2-L13-VL2-L14-Fc-L15-TNF1-L16-TNF2-L17-TNF。在一些態樣中，該第一多肽具有由以下表示的結構：VL1-L1-CL；VL1-L1-CH1；VH1-L1-CL；或VH1-L1-CH1；該第二多肽具有由以下表示的結構：VL1-CH1-L2-Fc-L3-TNF1-L4-TNF2-L5-TNF3；及該第三多肽具有由以下表示的結構：VL2-L8-VH2-L9-Fc-L10-TNF1-L11-TNF2-L12-TNF3。在一些態樣中，該第一多肽具有由以下表示的結構：VL1-L1-CL；VL1-L1-CH1；VH1-L1-CL；或VH1-L1-CH1；該第二多肽具有由以下表示的結構：VL1-CH1-L2-Fc-L3-TNF1-L4-TNF2-L5-TNF3；及該第三多肽具有由以下表示的結構：VH2-L13-VL2-L14-Fc-L15-TNF1-L16-TNF2-L17-TNF。在一些態樣中，該第一多肽具有由以下表示的結構：VL1-L1-CL；VL1-L1-CH1；VH1-L1-CL；或VH1-L1-CH1；該第二多肽具有由以下表示的結構：VL1-CL-L2-Fc-L3-TNF1-L4-TNF2-L5-TNF3；及該第三多肽具有由以下表示的結構：VL2-L8-VH2-L9-Fc-L10-TNF1-L11-TNF2-L12-TNF3。在一些態樣中，該第一多肽具有由以下表示的結構：VL1-L1-CL；VL1-L1-CH1；VH1-L1-CL；或VH1-L1-CH1；該第二多肽具有由以下表示的結構：VL1-CL-L2-Fc-L3-TNF1-L4-TNF2-L5-TNF3；及該第三多肽具有由以下表示的結構：VH2-L13-VL2-L14-Fc-L15-TNF1-L16-TNF2-L17-TNF。在一些態樣中，該第一多肽具有由以下表示的結構：VL1-L1-CL；VL1-L1-CH1；VH1-L1-CL；或VH1-L1-CH1；該第二多肽具有由以下表示的結構：VL1-CH1-L6-Fc；及該第三多肽具有由以下表示的結構：VL2-L8-VH2-L9-Fc-L10-TNF1-L11-TNF2-L12-TNF3。在一些態樣中，該第一多肽具有由以下表示的結構：VL1-L1-CL；VL1-L1-CH1；VH1-L1-CL；或VH1-L1-CH1；該第二多肽具有由以下表示的結構：VL1-CH1-L6-Fc；及該第三多肽具有由以下表示的結構：VH2-L13-VL2-L14-Fc-L15-TNF1-L16-TNF2-L17-TNF。在一些態樣中，該第一多肽具有由以下表示的結構：VL1-L1-CL；VL1-L1-CH1；VH1-L1-CL；或VH1-L1-CH1；該第二多肽具有由以下表示的結構：VL1-CL-L7-Fc；及該第三多肽具有由以下表示的結構：VL2-L8-VH2-L9-Fc-L10-TNF1-L11-TNF2-L12-TNF3。在一些態樣中，該第一多肽具有由以下表示的結構：VL1-L1-CL；VL1-L1-CH1；VH1-L1-CL；或VH1-L1-CH1；該第二多肽具有由以下表示的結構：VL1-CL-L7-Fc；及該第三多肽具有由以下表示的結構：VH2-L13-VL2-L14-Fc-L15-TNF1-L16-TNF2-L17-TNF。在一些態樣中，該第一多肽具有由以下表示的結構：VL1-L1-CL；VL1-L1-CH1；VH1-L1-CL；或VH1-L1-CH1；該第二多肽具有由以下表示的結構：VH1-CH1-L18-Fc-L19-TNF1-L20-TNF2-L21-TNF3；及該第三多肽具有由以下表示的結構：VL2-L22-VH2-L23-Fc。在一些態樣中，該第一多肽具有由以下表示的結構：VL1-L1-CL；VL1-L1-CH1；VH1-L1-CL；或VH1-L1-CH1；該第二多肽具有由以下表示的結構：VH1-CH1-L18-Fc-L19-TNF1-L20-TNF2-L21-TNF3；及該第三多肽具有由以下表示的結構：VH2-L24-VL2-L25-Fc。在一些態樣中，該第一多肽具有由以下表示的結構：VL1-L1-CL；VL1-L1-CH1；VH1-L1-CL；或VH1-L1-CH1；該第二多肽具有由以下表示的結構：VH1-CL-L18-Fc-L19-TNF1-L20-TNF2-L21-TNF3；及該第三多肽具有由以下表示的結構：VL2-L22-VH2-L23-Fc。在一些態樣中，該第一多肽具有由以下表示的結構：VL1-L1-CL；VL1-L1-CH1；VH1-L1-CL；或VH1-L1-CH1；該第二多肽具有由以下表示的結構：VH1-CL-L18-Fc-L19-TNF1-L20-TNF2-L21-TNF3；及該第三多肽具有由以下表示的結構：VH2-L24-VL2-L25-Fc。在一些態樣中，該第一多肽具有由以下表示的結構：VL1-L1-CL；VL1-L1-CH1；VH1-L1-CL；或VH1-L1-CH1；該第二多肽具有由以下表示的結構：VL1-CH1-L18-Fc-L19-TNF1-L20-TNF2-L21-TNF3；及該第三多肽具有由以下表示的結構：VL2-L22-VH2-L23-Fc。在一些態樣中，該第一多肽具有由以下表示的結構：VL1-L1-CL；VL1-L1-CH1；VH1-L1-CL；或VH1-L1-CH1；該第二多肽具有由以下表示的結構：VL1-CH1-L18-Fc-L19-TNF1-L20-TNF2-L21-TNF3；及該第三多肽具有由以下表示的結構：VH2-L24-VL2-L25-Fc。在一些態樣中，該第一多肽具有由以下表示的結構：VL1-L1-CL；VL1-L1-CH1；VH1-L1-CL；或VH1-L1-CH1；該第二多肽具有由以下表示的結構：VL1-CL-L18-Fc-L19-TNF1-L20-TNF2-L21-TNF3；及該第三多肽具有由以下表示的結構：VL2-L22-VH2-L23-Fc。在一些態樣中，該第一多肽具有由以下表示的結構：VL1-L1-CL；VL1-L1-CH1；VH1-L1-CL；或VH1-L1-CH1；該第二多肽具有由以下表示的結構：VL1-CL-L18-Fc-L19-TNF1-L20-TNF2-L21-TNF3；及該第三多肽具有由以下表示的結構：VH2-L24-VL2-L25-Fc。
在一些態樣中，該第一多肽具有由以下表示的結構：VL1-L1-CL；該第二多肽具有由以下表示的結構：VH1-L2-CH1-L3-Fc-L4-TNF1-L5-TNF2-L6-TNF3；及該第三多肽具有由以下表示的結構：VL2-L9-VH2-L10-Fc-L11-TNF1-L12-TNF2-L13-TNF3。在一些態樣中，該第一多肽具有由以下表示的結構：VL1-L1-CL；該第二多肽具有由以下表示的結構：VH1-CH1-L2-Fc-L3-TNF1-L4-TNF2-L5-TNF3；及該第三多肽具有由以下表示的結構：VL2-L8-VH2-L9-Fc-L10-TNF1-L11-TNF2-L12-TNF3。
在一些態樣中，該第一多肽具有由以下表示的結構：VL1-L1-CL；該第二多肽具有由以下表示的結構：VH1-L2-CH1-L3-Fc-L4-TNF1-L5-TNF2-L6-TNF3；及該第三多肽具有由以下表示的結構：VH2-L14-VL2-L15-Fc-L16-TNF1-L17-TNF2-L18-TNF3。在一些態樣中，該第一多肽具有由以下表示的結構：VL1-L1-CL；該第二多肽具有由以下表示的結構：VH1-L7-CH1-L8-Fc；及該第三多肽具有由以下表示的結構：VL2-L9-VH2-L10-Fc-L11-TNF1-L12-TNF2-L13-TNF3。在一些態樣中，該第一多肽具有由以下表示的結構：VL1-L1-CL；該第二多肽具有由以下表示的結構：VH1-L7-CH1-L8-Fc；及該第三多肽具有由以下表示的結構：VH2-L14-VL2-L15-Fc-L16-TNF1-L17-TNF2-L18-TNF3。在一些態樣中，該第一多肽具有由以下表示的結構：VL1-L1-CL；該第二多肽具有由以下表示的結構：VH1-L19-CH1-L20-Fc-L21-TNF1-L22-TNF2-L23-TNF3；及該第三多肽具有由以下表示的結構：VL2-L24-VH2-L25-Fc。在一些態樣中，該第一多肽具有由以下表示的結構：VL1-L1-CL；該第二多肽具有由以下表示的結構：VH1-L19-CH1-L20-Fc-L21-TNF1-L22-TNF2-L23-TNF3；及該第三多肽具有由以下表示的結構：VH2-L26-VL2-L27-Fc。在一些態樣中，該第一多肽具有由以下表示的結構：VL1-L1-CL；該第二多肽具有由以下表示的結構：VH1-CH1-L2-Fc-L3-TNF1-L4-TNF2-L5-TNF3；及該第三多肽具有由以下表示的結構：VH2-L13-VL2-L14-Fc-L15-TNF1-L16-TNF2-L17-TNF3。在一些態樣中，該第一多肽具有由以下表示的結構：VL1-L1-CL；該第二多肽具有由以下表示的結構：VH1-L6-CH1-L7-Fc；及該第三多肽具有由以下表示的結構：VL2-L8-VH2-L9-Fc-L10-TNF1-L11-TNF2-L12-TNF3。在一些態樣中，該第一多肽具有由以下表示的結構：VL1-L1-CL；該第二多肽具有由以下表示的結構：VH1-L6-CH1-L7-Fc；及該第三多肽具有由以下表示的結構：VH2-L13-VL2-L14-Fc-L15-TNF1-L16-TNF2-L17-TNF3。在一些態樣中，該第一多肽具有由以下表示的結構：VL1-L1-CL；該第二多肽具有由以下表示的結構：VH1-L18-CH1-L19-Fc-L20-TNF1-L21-TNF2-L22-TNF3；及該第三多肽具有由以下表示的結構：VL2-L23-VH2-L24-Fc。在一些態樣中，該第一多肽具有由以下表示的結構：VL1-L1-CL；該第二多肽具有由以下表示的結構：VH1-L18-CH1-L19-Fc-L20-TNF1-L21-TNF2-L22-TNF3；及該第三多肽具有由以下表示的結構：VH2-L25-VL2-L26-Fc。
在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1及VH1係與CD3特異性結合。
在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:22、28、185、298及306中之任一者具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:23、29、186、299及307中之任一者具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:24、30、187、300及308中之任一者具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH1包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:19、25、182、294及302中之任一者具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與20、26、183、295及303中之任一者具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:21、27、184、296及304中之任一者具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:22具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:23具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:24具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH1包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:19具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:20具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:21具有至少90%一致性的胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:28具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:29具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:30具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH1包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:25具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:26具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:27具有至少90%一致性的胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:185具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:186具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:187具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH1包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:182具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:183具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:184具有至少90%一致性的胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:298具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:299具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:300具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH1包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:294具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:295具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:296具有至少90%一致性的胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:306具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:307具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:308具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH1包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:302具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:303具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:304具有至少90%一致性的胺基酸序列。如本文所用，「至少90%一致性」包括與所敍述參考序列具有至少91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%及100%一致性。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:22之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:23之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:24之胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH1包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:19之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:20之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:21之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:28之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:29之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:30之胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH1包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:25之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:26之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:27之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:185之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:186之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:187之胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH1包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:182之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:183之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:184之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:298之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:299之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:300之胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH1包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:294之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:295之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:296之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:306之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:307之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:308之胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH1包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:302之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:303之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:304之胺基酸序列。
在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1包含與SEQ ID NO:45具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH1包含與SEQ ID NO:43或44具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1包含與SEQ ID NO:45具有至少80%一致性(諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性)之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH1包含與SEQ ID NO:43具有至少80%一致性(諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性)之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1包含SEQ ID NO:45之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH1包含SEQ ID NO:43之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1包含與SEQ ID NO:45具有至少80%一致性(諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性)之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH1包含與SEQ ID NO:44具有至少80%一致性(諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性)之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1包含SEQ ID NO:45之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH1包含SEQ ID NO:44之胺基酸序列。
在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1包含與SEQ ID NO:297或305具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH1包含與SEQ ID NO:188、293或301具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1包含與SEQ ID NO:297具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH1包含與SEQ ID NO:293具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1包含與SEQ ID NO:305具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH1包含與SEQ ID NO:301具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列。
在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2及VH2係與腫瘤相關抗原(TAA)或免疫刺激受體特異性結合。在一些態樣中，免疫刺激受體為CD28。在一些態樣中，TAA為酪胺酸蛋白激酶Met (cMet)、滋胚層細胞表面抗原2 (Trop2)、CD20、CD19、受體酪胺酸蛋白激酶erbB-2 (HER2)、受體酪胺酸蛋白激酶erbB-3 (HER3)、腺苷A2A受體(A2AR)、增殖誘導性配體(APRIL)、表皮生長因子受體(EGFR)、纖維母細胞生長因子受體(FGFR)、B細胞活化因子(BAFF)、BAFF受體(BAFFR)、B細胞成熟抗原(BCMA)、布魯頓氏酪胺酸激酶(BTK)、B及T淋巴球弱化子(BTLA)、B7DC (計劃性死亡配體2)、B7同源物1 (B7H1)、B7同源物4 (B7H4)、δ樣配體3 (DLL3)、胞外核苷三磷酸酯二磷酸水解酶1 (ENTPD1)、IgE受體之Fc片段1a (FCER1A)、IgE受體之Fc片段1 (FCER1)、花生四烯酸酯5-脂肪加氧酶-活化蛋白(FLAP)、葉酸羥化酶1 (FOLH1)、黏蛋白1 (MUC-1)、CD133、黏蛋白16 (MUC-16)、溶酶體相關膜蛋白1 (LAMP1)、CD38、計劃性死亡配體1 (PD-L1)、CEA細胞黏附分子5 (CEACAM5)、前列腺六跨膜上皮抗原1 (STEAP1)及上皮細胞黏附分子(EpCAM)。在一些態樣中，TAA為HER2。
在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:34或40具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:35或41具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:36或42具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH2包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:31或37具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:32或38具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:33或39具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:34具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:35具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:36具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH2包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:31具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:32具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:33具有至少90%一致性的胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:40具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:41具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:42具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH2包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:37具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:38具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:39具有至少90%一致性的胺基酸序列。如本文所用，「至少90%一致性」包括與所敍述參考序列具有至少91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%及100%一致性。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:34之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:35之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:36之胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH2包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:31之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:32之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:33之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:40之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:41之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:42之胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH2包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:37之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:38之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:39之胺基酸序列。
在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2包含與SEQ ID NO:47或49具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH2包含與SEQ ID NO:46或48具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2包含與SEQ ID NO:47具有至少80%一致性(諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性)之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH2包含與SEQ ID NO:46具有至少80%一致性(諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性)之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2包含SEQ ID NO:47之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH2包含SEQ ID NO:46之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2包含與SEQ ID NO:49具有至少80%一致性(諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性)之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH2包含與SEQ ID NO:48具有至少80%一致性(諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性)之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2包含SEQ ID NO:49之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH2包含SEQ ID NO:48之胺基酸序列。
在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2及VH2係與CD3特異性結合。
在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:22、28、185、298及306中之任一者具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:23、29、186、299及307中之任一者具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:24、30、187、300及308中之任一者具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH2包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:19、25、182、294及312中之任一者具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:20、26、183、295及313中之任一者具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:21、27、184、296及314中之任一者具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:22具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:23具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:24具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH2包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:19具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:20具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:21具有至少90%一致性的胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:28具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:29具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:30具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH2包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:25具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:26具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:27具有至少90%一致性的胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:185具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:186具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:187具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH2包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:182具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:183具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:184具有至少90%一致性的胺基酸序列。如本文所用，「至少90%一致性」包括與所敍述參考序列具有至少91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%及100%一致性。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:22之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:23之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:24之胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH2包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:19之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:20之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:21之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:28之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:29之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:30之胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH2包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:25之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:26之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:27之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:185之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:186之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:187之胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH2包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:182之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:183之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:184之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:298具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:299具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:300具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH2包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:294具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:295具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:296具有至少90%一致性的胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:306具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:307具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:308具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH2包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:312具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:313具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:314具有至少90%一致性的胺基酸序列。
在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2包含與SEQ ID NO:45具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH2包含與SEQ ID NO:43或44具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2包含與SEQ ID NO:45具有至少80%一致性(諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性)之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH2包含與SEQ ID NO:43具有至少80%一致性(諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性)之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2包含SEQ ID NO:45之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH2包含SEQ ID NO:43之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2包含與SEQ ID NO:45具有至少80%一致性(諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性)之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH2包含與SEQ ID NO:44具有至少80%一致性(諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性)之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2包含SEQ ID NO:45之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH2包含SEQ ID NO:44之胺基酸序列。
在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2包含與SEQ ID NO:297具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH2包含與SEQ ID NO:293具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列。
在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2包含與SEQ ID NO:305具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH2包含與SEQ ID NO:301具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列。
在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1及VH1係與TAA或免疫刺激受體特異性結合。在一些態樣中，免疫刺激受體為CD28。在一些態樣中，TAA為cMet、Trop2、CD20、CD19、HER2、HER3、A2AR、APRIL、EGFR、FGFR、BAFF、BAFFR、BCMA、BTK、BTLA、B7DC、B7H1、B7H4、DLL3、ENTPD1、FCER1A、FCER1、FLAP、FOLH1、MUC-1、CD133、MUC-16、LAMP1、CD38、PD-L1、CEACAM5、STEAP1或EpCAM。在一些態樣中，TAA為HER2。
在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:34或40具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:35或41具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:36或42具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH1包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:31或37具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:32或38具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:33或39具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:34具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:35具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:36具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH1包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:31具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:32具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:33具有至少90%一致性的胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:40具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:41具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:42具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH1包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:37具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:38具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:39具有至少90%一致性的胺基酸序列。如本文所用，「至少90%一致性」包括與所敍述參考序列具有至少91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%及100%一致性。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:34之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:35之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:36之胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH1包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:31之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:32之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:33之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:40之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:41之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:42之胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH1包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:37之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:38之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:39之胺基酸序列。
在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1包含與SEQ ID NO:47或49具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH1包含與SEQ ID NO:46或48具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1包含與SEQ ID NO:47具有至少80%一致性(諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性)之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH1包含與SEQ ID NO:46具有至少80%一致性(諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性)之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1包含與SEQ ID NO:49具有至少80%一致性(諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性)之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH1包含與SEQ ID NO:48具有至少80%一致性(諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性)之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1包含SEQ ID NO:47之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH1包含SEQ ID NO:46之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1包含SEQ ID NO:49之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH1包含SEQ ID NO:48之胺基酸序列。
在一些態樣中，抗原結合多肽複合物包含與CD20特異性結合之VH及/或VL。在一些態樣中，VL包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:314或322具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:315或323具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:316或324具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或VH包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:310或318具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:311或319具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:312或320具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，VL包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:314具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:315具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:316具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或VH包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:310具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:311具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:312具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，VL包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:322具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:323具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:324具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或VH包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:318具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:319具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:320具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，VL包含與SEQ ID NO:313或321具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或VH包含與SEQ ID NO:309或317具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，VL包含與SEQ ID NO:313具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或VH包含與SEQ ID NO:309具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，VL包含與SEQ ID NO:321具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或VH包含與SEQ ID NO:317具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列。如本文所用，「至少90%一致性」包括與所敍述參考序列具有至少91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%及100%一致性。
在一些態樣中，抗原結合多肽複合物包含與cMet特異性結合之VH及/或VL。在一些態樣中，VL包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:274具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:275具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:276具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或VH包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:270具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:271具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:272具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，VL包含與SEQ ID NO:273具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或VH包含與SEQ ID NO:269具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列。如本文所用，「至少90%一致性」包括與所敍述參考序列具有至少91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%及100%一致性。
在一些態樣中，抗原結合多肽複合物包含與Trop2特異性結合之VH及/或VL。在一些態樣中，VL包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:282具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:283具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:284具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或VH包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:278具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:279具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:280具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，VL包含與SEQ ID NO:281具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或VH包含與SEQ ID NO:277具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列。如本文所用，「至少90%一致性」包括與所敍述參考序列具有至少91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%及100%一致性。
在一些態樣中，抗原結合多肽複合物包含與CD19特異性結合之VH及/或VL。在一些態樣中，VL包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:290具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:291具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:292具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或VH包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:286具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:287具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:288具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，VL包含與SEQ ID NO:289具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或VH包含與SEQ ID NO:285具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列。如本文所用，「至少90%一致性」包括與所敍述參考序列具有至少91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%及100%一致性。
在一些態樣中，本發明之抗原結合多肽複合物包含第一多肽及第二多肽；其中(i)該第一多肽具有由以下表示的結構：VL1-L1-VH1-L2-Fc；VH1-L3-VL1-L4-Fc；VL1-L5-VH1-L6-CL-L7-CH1-L8-Fc；VL1-L5-VH1-L6-CH1-L7-CL-L8-Fc；VH1-L5-VL1-L6-CL-L7-CH1-L8-Fc；VH1-L5-VL1-L6-CH1-L7-CL-L8-Fc；VL1-L9-CL-L10-VH1-L11-CH1-L12-Fc；VL1-L9-CH1-L10-VH1-L11-CL-L12-Fc；VH1-L9-CL-L10-VL1-L11-CH1-L12-Fc；VH1-L9-CH1-L10-VL1-L11-CL-L12-Fc；VL1-L13-VH1-L14-Fc-L15-TNF1-L16-TNF2-L17-TNF3；VH1-L18-VL1-L19-Fc-L20-TNF1-L21-TNF2-L22-TNF3；VL1-L23-VH1-L24-CL-L25-CH1-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3；VL1-L23-VH1-L24-CH1-L25-CL-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3；VH1-L23-VL1-L24-CL-L25-CH1-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3；VH1-L23-VL1-L24-CH1-L25-CL-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3；VL1-VH1-L14-Fc-L15-TNF1-L16-TNF2-L17-TNF3；VH1-VL1-L19-Fc-L20-TNF1-L21-TNF2-L22-TNF3；VL1-VH1-L24-CL-L25-CH1-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3；VL1-VH1-L24-CH1-L25-CL-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3；VH1-VL1-L24-CL-L25-CH1-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3；VH1-VL1-L24-CH1-L25-CL-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3；VL1-L30-CL-L31-VH1-L32-CH1-L33-Fc-L34-TNF1-L35-TNF2-L36-TNF3；VL1-L30-CH1-L31-VH1-L32-CL-L33-Fc-L34-TNF1-L35-TNF2-L36-TNF3；VH1-L30-CL-L31-VL1-L32-CH1-L33-Fc-L34-TNF1-L35-TNF2-L36-TNF3；或VH1-L30-CH1-L31-VL1-L32-CL-L33-Fc-L34-TNF1-L35-TNF2-L36-TNF3；及該第二多肽具有由以下表示的結構：VL2-L37-VH2-L38-Fc-L39-TNF1-L40-TNF2-L41-TNF3；VH2-L42-VL2-L43-Fc-L44-TNF1-L45-TNF2-L46-TNF3；VL2-L47-VH2-L48-CL-L49-CH1-L50-Fc-L51-TNF1-L52-TNF2-L53-TNF3；或VL2-L54-CL-L55-VH2-L56-CH1-L57-Fc-L58-TNF1-L59-TNF2-L60-TNF3；VL2-L47-VH2-L48-CH1-L49-CL-L50-Fc-L51-TNF1-L52-TNF2-L53-TNF3；VL2-L54-CH1-L55-VH2-L56-CL-L57-Fc-L58-TNF1-L59-TNF2-L60-TNF3；VL2-VH2-L38-Fc-L39-TNF1-L40-TNF2-L41-TNF3；VH2-VL2-L43-Fc-L44-TNF1-L45-TNF2-L46-TNF3；VL2-VH2-L48-CL-L49-CH1-L50-Fc-L51-TNF1-L52-TNF2-L53-TNF3；VL2-CL-L55-VH2-L56-CH1-L57-Fc-L58-TNF1-L59-TNF2-L60-TNF3；VL2-VH2-L48-CH1-L49-CL-L50-Fc-L51-TNF1-L52-TNF2-L53-TNF3；或VL2-CH1-L55-VH2-L56-CL-L57-Fc-L58-TNF1-L59-TNF2-L60-TNF3；或(ii)該第一多肽具有由以下表示的結構：VL1-L61-VH1-L62-Fc-L63-TNF1-L64-TNF2-L65-TNF3；VH1-L66-VL1-L67-Fc-L68-TNF1-L69-TNF2-L70-TNF3；VL1-L71-VH1-L72-CL-L73-CH1-L74-Fc-L75-TNF1-L76-TNF2-L77-TNF3；VL1-L71-VH1-L72-CH1-L73-CL-L74-Fc-L75-TNF1-L76-TNF2-L77-TNF3；VL1-L78-CL-L79-VH1-L80-CH1-L81-Fc-L82-TNF1-L83-TNF2-L84-TNF3；或VL1-L78-CH1-L79-VH1-L80-CL-L81-Fc-L82-TNF1-L83-TNF2-L84-TNF3；及該第二多肽具有由以下表示的結構：VL2-L85-VH2-L86-Fc；VH2-L87-VL2-L88-Fc；VL2-L89-VH2-L90-CL-L91-CH1-L92-Fc；VL2-L89-VH2-L90-CH1-L91-CL-L92-Fc；VL2-L93-CL-L94-VH2-L95-CH1-L96-Fc；或VL2-L93-CH1-L94-VH2-L95-CL-L96-Fc；其中VL1為第一免疫球蛋白輕鏈可變區；VL2為第二免疫球蛋白輕鏈可變區；VH1為第一免疫球蛋白重鏈可變區；VH2為第二免疫球蛋白重鏈可變區；Fc為包含免疫球蛋白重鏈恆定區2 (CH2)、免疫球蛋白重鏈恆定區3 (CH3)及視情況存在之免疫球蛋白鉸鏈的區域；CH1為免疫球蛋白重鏈恆定區1；CL為免疫球蛋白輕鏈恆定區；TNF1為TNFSF配體之第一細胞外域；TNF2為TNFSF配體之第二細胞外域；TNF3為TNFSF配體之第三細胞外域；及L1-L96為胺基酸連接子。在一些態樣中，該第一多肽具有由以下表示的結構：VL1-L1-VH1-L2-Fc；VH1-L3-VL1-L4-Fc；VL1-L5-VH1-L6-CL-L7-CH1-L8-Fc；VL1-L5-VH1-L6-CH1-L7-CL-L8-Fc；VH1-L5-VL1-L6-CL-L7-CH1-L8-Fc；VH1-L5-VL1-L6-CH1-L7-CL-L8-Fc；VL1-L9-CL-L10-VH1-L11-CH1-L12-Fc；VL1-L9-CH1-L10-VH1-L11-CL-L12-Fc；VH1-L9-CL-L10-VL1-L11-CH1-L12-Fc；VH1-L9-CH1-L10-VL1-L11-CL-L12-Fc；VL1-L13-VH1-L14-Fc-L15-TNF1-L16-TNF2-L17-TNF3；VH1-L18-VL1-L19-Fc-L20-TNF1-L21-TNF2-L22-TNF3；VL1-L23-VH1-L24-CL-L25-CH1-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3；VL1-L23-VH1-L24-CH1-L25-CL-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3；VH1-L23-VL1-L24-CL-L25-CH1-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3；VH1-L23-VL1-L24-CH1-L25-CL-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3；VL1-VH1-L14-Fc-L15-TNF1-L16-TNF2-L17-TNF3；VH1-VL1-L19-Fc-L20-TNF1-L21-TNF2-L22-TNF3；VL1-VH1-L24-CL-L25-CH1-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3；VL1-VH1-L24-CH1-L25-CL-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3；VH1-VL1-L24-CL-L25-CH1-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3；VH1-VL1-L24-CH1-L25-CL-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3；VL1-L30-CL-L31-VH1-L32-CH1-L33-Fc-L34-TNF1-L35-TNF2-L36-TNF3；VL1-L30-CH1-L31-VH1-L32-CL-L33-Fc-L34-TNF1-L35-TNF2-L36-TNF3；VH1-L30-CL-L31-VL1-L32-CH1-L33-Fc-L34-TNF1-L35-TNF2-L36-TNF3；或VH1-L30-CH1-L31-VL1-L32-CL-L33-Fc-L34-TNF1-L35-TNF2-L36-TNF3；及該第二多肽具有由以下表示的結構：VL2-L37-VH2-L38-Fc-L39-TNF1-L40-TNF2-L41-TNF3。在一些態樣中，該第一多肽具有由以下表示的結構：VL1-L1-VH1-L2-Fc；VH1-L3-VL1-L4-Fc；VL1-L5-VH1-L6-CL-L7-CH1-L8-Fc；VL1-L5-VH1-L6-CH1-L7-CL-L8-Fc；VH1-L5-VL1-L6-CL-L7-CH1-L8-Fc；VH1-L5-VL1-L6-CH1-L7-CL-L8-Fc；VL1-L9-CL-L10-VH1-L11-CH1-L12-Fc；VL1-L9-CH1-L10-VH1-L11-CL-L12-Fc；VH1-L9-CL-L10-VL1-L11-CH1-L12-Fc；VH1-L9-CH1-L10-VL1-L11-CL-L12-Fc；VL1-L13-VH1-L14-Fc-L15-TNF1-L16-TNF2-L17-TNF3；VH1-L18-VL1-L19-Fc-L20-TNF1-L21-TNF2-L22-TNF3；VL1-L23-VH1-L24-CL-L25-CH1-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3；VL1-L23-VH1-L24-CH1-L25-CL-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3；VH1-L23-VL1-L24-CL-L25-CH1-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3；VH1-L23-VL1-L24-CH1-L25-CL-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3；VL1-VH1-L14-Fc-L15-TNF1-L16-TNF2-L17-TNF3；VH1-VL1-L19-Fc-L20-TNF1-L21-TNF2-L22-TNF3；VL1-VH1-L24-CL-L25-CH1-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3；VL1-VH1-L24-CH1-L25-CL-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3；VH1-VL1-L24-CL-L25-CH1-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3；VH1-VL1-L24-CH1-L25-CL-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3；VL1-L30-CL-L31-VH1-L32-CH1-L33-Fc-L34-TNF1-L35-TNF2-L36-TNF3；VL1-L30-CH1-L31-VH1-L32-CL-L33-Fc-L34-TNF1-L35-TNF2-L36-TNF3；VH1-L30-CL-L31-VL1-L32-CH1-L33-Fc-L34-TNF1-L35-TNF2-L36-TNF3；或VH1-L30-CH1-L31-VL1-L32-CL-L33-Fc-L34-TNF1-L35-TNF2-L36-TNF3；及該第二多肽具有由以下表示的結構：VH2-L42-VL2-L43-Fc-L44-TNF1-L45-TNF2-L46-TNF3。在一些態樣中，該第一多肽具有由以下表示的結構：VL1-L1-VH1-L2-Fc；VH1-L3-VL1-L4-Fc；VL1-L5-VH1-L6-CL-L7-CH1-L8-Fc；VL1-L5-VH1-L6-CH1-L7-CL-L8-Fc；VH1-L5-VL1-L6-CL-L7-CH1-L8-Fc；VH1-L5-VL1-L6-CH1-L7-CL-L8-Fc；VL1-L9-CL-L10-VH1-L11-CH1-L12-Fc；VL1-L9-CH1-L10-VH1-L11-CL-L12-Fc；VH1-L9-CL-L10-VL1-L11-CH1-L12-Fc；VH1-L9-CH1-L10-VL1-L11-CL-L12-Fc；VL1-L13-VH1-L14-Fc-L15-TNF1-L16-TNF2-L17-TNF3；VH1-L18-VL1-L19-Fc-L20-TNF1-L21-TNF2-L22-TNF3；VL1-L23-VH1-L24-CL-L25-CH1-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3；VL1-L23-VH1-L24-CH1-L25-CL-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3；VH1-L23-VL1-L24-CL-L25-CH1-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3；VH1-L23-VL1-L24-CH1-L25-CL-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3；VL1-VH1-L14-Fc-L15-TNF1-L16-TNF2-L17-TNF3；VH1-VL1-L19-Fc-L20-TNF1-L21-TNF2-L22-TNF3；VL1-VH1-L24-CL-L25-CH1-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3；VL1-VH1-L24-CH1-L25-CL-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3；VH1-VL1-L24-CL-L25-CH1-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3；VH1-VL1-L24-CH1-L25-CL-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3；VL1-L30-CL-L31-VH1-L32-CH1-L33-Fc-L34-TNF1-L35-TNF2-L36-TNF3；VL1-L30-CH1-L31-VH1-L32-CL-L33-Fc-L34-TNF1-L35-TNF2-L36-TNF3；VH1-L30-CL-L31-VL1-L32-CH1-L33-Fc-L34-TNF1-L35-TNF2-L36-TNF3；或VH1-L30-CH1-L31-VL1-L32-CL-L33-Fc-L34-TNF1-L35-TNF2-L36-TNF3；及該第二多肽具有由以下表示的結構：VL2-L47-VH2-L48-CL-L49-CH1-L50-Fc-L51-TNF1-L52-TNF2-L53-TNF3。在一些態樣中，該第一多肽具有由以下表示的結構：VL1-L1-VH1-L2-Fc；VH1-L3-VL1-L4-Fc；VL1-L5-VH1-L6-CL-L7-CH1-L8-Fc；VL1-L5-VH1-L6-CH1-L7-CL-L8-Fc；VH1-L5-VL1-L6-CL-L7-CH1-L8-Fc；VH1-L5-VL1-L6-CH1-L7-CL-L8-Fc；VL1-L9-CL-L10-VH1-L11-CH1-L12-Fc；VL1-L9-CH1-L10-VH1-L11-CL-L12-Fc；VH1-L9-CL-L10-VL1-L11-CH1-L12-Fc；VH1-L9-CH1-L10-VL1-L11-CL-L12-Fc；VL1-L13-VH1-L14-Fc-L15-TNF1-L16-TNF2-L17-TNF3；VH1-L18-VL1-L19-Fc-L20-TNF1-L21-TNF2-L22-TNF3；VL1-L23-VH1-L24-CL-L25-CH1-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3；VL1-L23-VH1-L24-CH1-L25-CL-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3；VH1-L23-VL1-L24-CL-L25-CH1-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3；VH1-L23-VL1-L24-CH1-L25-CL-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3；VL1-VH1-L14-Fc-L15-TNF1-L16-TNF2-L17-TNF3；VH1-VL1-L19-Fc-L20-TNF1-L21-TNF2-L22-TNF3；VL1-VH1-L24-CL-L25-CH1-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3；VL1-VH1-L24-CH1-L25-CL-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3；VH1-VL1-L24-CL-L25-CH1-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3；VH1-VL1-L24-CH1-L25-CL-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3；VL1-L30-CL-L31-VH1-L32-CH1-L33-Fc-L34-TNF1-L35-TNF2-L36-TNF3；VL1-L30-CH1-L31-VH1-L32-CL-L33-Fc-L34-TNF1-L35-TNF2-L36-TNF3；VH1-L30-CL-L31-VL1-L32-CH1-L33-Fc-L34-TNF1-L35-TNF2-L36-TNF3；或VH1-L30-CH1-L31-VL1-L32-CL-L33-Fc-L34-TNF1-L35-TNF2-L36-TNF3；及該第二多肽具有由以下表示的結構：VL2-L54-CL-L55-VH2-L56-CH1-L57-Fc-L58-TNF1-L59-TNF2-L60-TNF3。在一些態樣中，該第一多肽具有由以下表示的結構：VL1-L1-VH1-L2-Fc；VH1-L3-VL1-L4-Fc；VL1-L5-VH1-L6-CL-L7-CH1-L8-Fc；VL1-L5-VH1-L6-CH1-L7-CL-L8-Fc；VH1-L5-VL1-L6-CL-L7-CH1-L8-Fc；VH1-L5-VL1-L6-CH1-L7-CL-L8-Fc；VL1-L9-CL-L10-VH1-L11-CH1-L12-Fc；VL1-L9-CH1-L10-VH1-L11-CL-L12-Fc；VH1-L9-CL-L10-VL1-L11-CH1-L12-Fc；VH1-L9-CH1-L10-VL1-L11-CL-L12-Fc；VL1-L13-VH1-L14-Fc-L15-TNF1-L16-TNF2-L17-TNF3；VH1-L18-VL1-L19-Fc-L20-TNF1-L21-TNF2-L22-TNF3；VL1-L23-VH1-L24-CL-L25-CH1-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3；VL1-L23-VH1-L24-CH1-L25-CL-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3；VH1-L23-VL1-L24-CL-L25-CH1-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3；VH1-L23-VL1-L24-CH1-L25-CL-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3；VL1-VH1-L14-Fc-L15-TNF1-L16-TNF2-L17-TNF3；VH1-VL1-L19-Fc-L20-TNF1-L21-TNF2-L22-TNF3；VL1-VH1-L24-CL-L25-CH1-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3；VL1-VH1-L24-CH1-L25-CL-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3；VH1-VL1-L24-CL-L25-CH1-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3；VH1-VL1-L24-CH1-L25-CL-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3；VL1-L30-CL-L31-VH1-L32-CH1-L33-Fc-L34-TNF1-L35-TNF2-L36-TNF3；VL1-L30-CH1-L31-VH1-L32-CL-L33-Fc-L34-TNF1-L35-TNF2-L36-TNF3；VH1-L30-CL-L31-VL1-L32-CH1-L33-Fc-L34-TNF1-L35-TNF2-L36-TNF3；或VH1-L30-CH1-L31-VL1-L32-CL-L33-Fc-L34-TNF1-L35-TNF2-L36-TNF3；及該第二多肽具有由以下表示的結構：VL2-L47-VH2-L48-CH1-L49-CL-L50-Fc-L51-TNF1-L52-TNF2-L53-TNF3。在一些態樣中，該第一多肽具有由以下表示的結構：VL1-L1-VH1-L2-Fc；VH1-L3-VL1-L4-Fc；VL1-L5-VH1-L6-CL-L7-CH1-L8-Fc；VL1-L5-VH1-L6-CH1-L7-CL-L8-Fc；VH1-L5-VL1-L6-CL-L7-CH1-L8-Fc；VH1-L5-VL1-L6-CH1-L7-CL-L8-Fc；VL1-L9-CL-L10-VH1-L11-CH1-L12-Fc；VL1-L9-CH1-L10-VH1-L11-CL-L12-Fc；VH1-L9-CL-L10-VL1-L11-CH1-L12-Fc；VH1-L9-CH1-L10-VL1-L11-CL-L12-Fc；VL1-L13-VH1-L14-Fc-L15-TNF1-L16-TNF2-L17-TNF3；VH1-L18-VL1-L19-Fc-L20-TNF1-L21-TNF2-L22-TNF3；VL1-L23-VH1-L24-CL-L25-CH1-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3；VL1-L23-VH1-L24-CH1-L25-CL-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3；VH1-L23-VL1-L24-CL-L25-CH1-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3；VH1-L23-VL1-L24-CH1-L25-CL-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3；VL1-VH1-L14-Fc-L15-TNF1-L16-TNF2-L17-TNF3；VH1-VL1-L19-Fc-L20-TNF1-L21-TNF2-L22-TNF3；VL1-VH1-L24-CL-L25-CH1-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3；VL1-VH1-L24-CH1-L25-CL-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3；VH1-VL1-L24-CL-L25-CH1-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3；VH1-VL1-L24-CH1-L25-CL-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3；VL1-L30-CL-L31-VH1-L32-CH1-L33-Fc-L34-TNF1-L35-TNF2-L36-TNF3；VL1-L30-CH1-L31-VH1-L32-CL-L33-Fc-L34-TNF1-L35-TNF2-L36-TNF3；VH1-L30-CL-L31-VL1-L32-CH1-L33-Fc-L34-TNF1-L35-TNF2-L36-TNF3；或VH1-L30-CH1-L31-VL1-L32-CL-L33-Fc-L34-TNF1-L35-TNF2-L36-TNF3；及該第二多肽具有由以下表示的結構：VL2-L54-CH1-L55-VH2-L56-CL-L57-Fc-L58-TNF1-L59-TNF2-L60-TNF3。在一些態樣中，該第一多肽具有由以下表示的結構：VL1-L1-VH1-L2-Fc；VH1-L3-VL1-L4-Fc；VL1-L5-VH1-L6-CL-L7-CH1-L8-Fc；VL1-L5-VH1-L6-CH1-L7-CL-L8-Fc；VH1-L5-VL1-L6-CL-L7-CH1-L8-Fc；VH1-L5-VL1-L6-CH1-L7-CL-L8-Fc；VL1-L9-CL-L10-VH1-L11-CH1-L12-Fc；VL1-L9-CH1-L10-VH1-L11-CL-L12-Fc；VH1-L9-CL-L10-VL1-L11-CH1-L12-Fc；VH1-L9-CH1-L10-VL1-L11-CL-L12-Fc；VL1-L13-VH1-L14-Fc-L15-TNF1-L16-TNF2-L17-TNF3；VH1-L18-VL1-L19-Fc-L20-TNF1-L21-TNF2-L22-TNF3；VL1-L23-VH1-L24-CL-L25-CH1-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3；VL1-L23-VH1-L24-CH1-L25-CL-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3；VH1-L23-VL1-L24-CL-L25-CH1-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3；VH1-L23-VL1-L24-CH1-L25-CL-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3；VL1-VH1-L14-Fc-L15-TNF1-L16-TNF2-L17-TNF3；VH1-VL1-L19-Fc-L20-TNF1-L21-TNF2-L22-TNF3；VL1-VH1-L24-CL-L25-CH1-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3；VL1-VH1-L24-CH1-L25-CL-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3；VH1-VL1-L24-CL-L25-CH1-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3；VH1-VL1-L24-CH1-L25-CL-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3；VL1-L30-CL-L31-VH1-L32-CH1-L33-Fc-L34-TNF1-L35-TNF2-L36-TNF3；VL1-L30-CH1-L31-VH1-L32-CL-L33-Fc-L34-TNF1-L35-TNF2-L36-TNF3；VH1-L30-CL-L31-VL1-L32-CH1-L33-Fc-L34-TNF1-L35-TNF2-L36-TNF3；或VH1-L30-CH1-L31-VL1-L32-CL-L33-Fc-L34-TNF1-L35-TNF2-L36-TNF3；及該第二多肽具有由以下表示的結構：VL2-VH2-L38-Fc-L39-TNF1-L40-TNF2-L41-TNF3。在一些態樣中，該第一多肽具有由以下表示的結構：VL1-L1-VH1-L2-Fc；VH1-L3-VL1-L4-Fc；VL1-L5-VH1-L6-CL-L7-CH1-L8-Fc；VL1-L5-VH1-L6-CH1-L7-CL-L8-Fc；VH1-L5-VL1-L6-CL-L7-CH1-L8-Fc；VH1-L5-VL1-L6-CH1-L7-CL-L8-Fc；VL1-L9-CL-L10-VH1-L11-CH1-L12-Fc；VL1-L9-CH1-L10-VH1-L11-CL-L12-Fc；VH1-L9-CL-L10-VL1-L11-CH1-L12-Fc；VH1-L9-CH1-L10-VL1-L11-CL-L12-Fc；VL1-L13-VH1-L14-Fc-L15-TNF1-L16-TNF2-L17-TNF3；VH1-L18-VL1-L19-Fc-L20-TNF1-L21-TNF2-L22-TNF3；VL1-L23-VH1-L24-CL-L25-CH1-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3；VL1-L23-VH1-L24-CH1-L25-CL-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3；VH1-L23-VL1-L24-CL-L25-CH1-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3；VH1-L23-VL1-L24-CH1-L25-CL-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3；VL1-VH1-L14-Fc-L15-TNF1-L16-TNF2-L17-TNF3；VH1-VL1-L19-Fc-L20-TNF1-L21-TNF2-L22-TNF3；VL1-VH1-L24-CL-L25-CH1-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3；VL1-VH1-L24-CH1-L25-CL-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3；VH1-VL1-L24-CL-L25-CH1-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3；VH1-VL1-L24-CH1-L25-CL-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3；VL1-L30-CL-L31-VH1-L32-CH1-L33-Fc-L34-TNF1-L35-TNF2-L36-TNF3；VL1-L30-CH1-L31-VH1-L32-CL-L33-Fc-L34-TNF1-L35-TNF2-L36-TNF3；VH1-L30-CL-L31-VL1-L32-CH1-L33-Fc-L34-TNF1-L35-TNF2-L36-TNF3；或VH1-L30-CH1-L31-VL1-L32-CL-L33-Fc-L34-TNF1-L35-TNF2-L36-TNF3；及該第二多肽具有由以下表示的結構：VH2-VL2-L43-Fc-L44-TNF1-L45-TNF2-L46-TNF3。在一些態樣中，該第一多肽具有由以下表示的結構：VL1-L1-VH1-L2-Fc；VH1-L3-VL1-L4-Fc；VL1-L5-VH1-L6-CL-L7-CH1-L8-Fc；VL1-L5-VH1-L6-CH1-L7-CL-L8-Fc；VH1-L5-VL1-L6-CL-L7-CH1-L8-Fc；VH1-L5-VL1-L6-CH1-L7-CL-L8-Fc；VL1-L9-CL-L10-VH1-L11-CH1-L12-Fc；VL1-L9-CH1-L10-VH1-L11-CL-L12-Fc；VH1-L9-CL-L10-VL1-L11-CH1-L12-Fc；VH1-L9-CH1-L10-VL1-L11-CL-L12-Fc；VL1-L13-VH1-L14-Fc-L15-TNF1-L16-TNF2-L17-TNF3；VH1-L18-VL1-L19-Fc-L20-TNF1-L21-TNF2-L22-TNF3；VL1-L23-VH1-L24-CL-L25-CH1-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3；VL1-L23-VH1-L24-CH1-L25-CL-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3；VH1-L23-VL1-L24-CL-L25-CH1-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3；VH1-L23-VL1-L24-CH1-L25-CL-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3；VL1-VH1-L14-Fc-L15-TNF1-L16-TNF2-L17-TNF3；VH1-VL1-L19-Fc-L20-TNF1-L21-TNF2-L22-TNF3；VL1-VH1-L24-CL-L25-CH1-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3；VL1-VH1-L24-CH1-L25-CL-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3；VH1-VL1-L24-CL-L25-CH1-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3；VH1-VL1-L24-CH1-L25-CL-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3；VL1-L30-CL-L31-VH1-L32-CH1-L33-Fc-L34-TNF1-L35-TNF2-L36-TNF3；VL1-L30-CH1-L31-VH1-L32-CL-L33-Fc-L34-TNF1-L35-TNF2-L36-TNF3；VH1-L30-CL-L31-VL1-L32-CH1-L33-Fc-L34-TNF1-L35-TNF2-L36-TNF3；或VH1-L30-CH1-L31-VL1-L32-CL-L33-Fc-L34-TNF1-L35-TNF2-L36-TNF3；及該第二多肽具有由以下表示的結構：VL2-VH2-L48-CL-L49-CH1-L50-Fc-L51-TNF1-L52-TNF2-L53-TNF3。在一些態樣中，該第一多肽具有由以下表示的結構：VL1-L1-VH1-L2-Fc；VH1-L3-VL1-L4-Fc；VL1-L5-VH1-L6-CL-L7-CH1-L8-Fc；VL1-L5-VH1-L6-CH1-L7-CL-L8-Fc；VH1-L5-VL1-L6-CL-L7-CH1-L8-Fc；VH1-L5-VL1-L6-CH1-L7-CL-L8-Fc；VL1-L9-CL-L10-VH1-L11-CH1-L12-Fc；VL1-L9-CH1-L10-VH1-L11-CL-L12-Fc；VH1-L9-CL-L10-VL1-L11-CH1-L12-Fc；VH1-L9-CH1-L10-VL1-L11-CL-L12-Fc；VL1-L13-VH1-L14-Fc-L15-TNF1-L16-TNF2-L17-TNF3；VH1-L18-VL1-L19-Fc-L20-TNF1-L21-TNF2-L22-TNF3；VL1-L23-VH1-L24-CL-L25-CH1-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3；VL1-L23-VH1-L24-CH1-L25-CL-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3；VH1-L23-VL1-L24-CL-L25-CH1-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3；VH1-L23-VL1-L24-CH1-L25-CL-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3；VL1-VH1-L14-Fc-L15-TNF1-L16-TNF2-L17-TNF3；VH1-VL1-L19-Fc-L20-TNF1-L21-TNF2-L22-TNF3；VL1-VH1-L24-CL-L25-CH1-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3；VL1-VH1-L24-CH1-L25-CL-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3；VH1-VL1-L24-CL-L25-CH1-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3；VH1-VL1-L24-CH1-L25-CL-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3；VL1-L30-CL-L31-VH1-L32-CH1-L33-Fc-L34-TNF1-L35-TNF2-L36-TNF3；VL1-L30-CH1-L31-VH1-L32-CL-L33-Fc-L34-TNF1-L35-TNF2-L36-TNF3；VH1-L30-CL-L31-VL1-L32-CH1-L33-Fc-L34-TNF1-L35-TNF2-L36-TNF3；或VH1-L30-CH1-L31-VL1-L32-CL-L33-Fc-L34-TNF1-L35-TNF2-L36-TNF3；及該第二多肽具有由以下表示的結構：VL2-CL-L55-VH2-L56-CH1-L57-Fc-L58-TNF1-L59-TNF2-L60-TNF3。在一些態樣中，該第一多肽具有由以下表示的結構：VL1-L1-VH1-L2-Fc；VH1-L3-VL1-L4-Fc；VL1-L5-VH1-L6-CL-L7-CH1-L8-Fc；VL1-L5-VH1-L6-CH1-L7-CL-L8-Fc；VH1-L5-VL1-L6-CL-L7-CH1-L8-Fc；VH1-L5-VL1-L6-CH1-L7-CL-L8-Fc；VL1-L9-CL-L10-VH1-L11-CH1-L12-Fc；VL1-L9-CH1-L10-VH1-L11-CL-L12-Fc；VH1-L9-CL-L10-VL1-L11-CH1-L12-Fc；VH1-L9-CH1-L10-VL1-L11-CL-L12-Fc；VL1-L13-VH1-L14-Fc-L15-TNF1-L16-TNF2-L17-TNF3；VH1-L18-VL1-L19-Fc-L20-TNF1-L21-TNF2-L22-TNF3；VL1-L23-VH1-L24-CL-L25-CH1-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3；VL1-L23-VH1-L24-CH1-L25-CL-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3；VH1-L23-VL1-L24-CL-L25-CH1-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3；VH1-L23-VL1-L24-CH1-L25-CL-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3；VL1-VH1-L14-Fc-L15-TNF1-L16-TNF2-L17-TNF3；VH1-VL1-L19-Fc-L20-TNF1-L21-TNF2-L22-TNF3；VL1-VH1-L24-CL-L25-CH1-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3；VL1-VH1-L24-CH1-L25-CL-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3；VH1-VL1-L24-CL-L25-CH1-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3；VH1-VL1-L24-CH1-L25-CL-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3；VL1-L30-CL-L31-VH1-L32-CH1-L33-Fc-L34-TNF1-L35-TNF2-L36-TNF3；VL1-L30-CH1-L31-VH1-L32-CL-L33-Fc-L34-TNF1-L35-TNF2-L36-TNF3；VH1-L30-CL-L31-VL1-L32-CH1-L33-Fc-L34-TNF1-L35-TNF2-L36-TNF3；或VH1-L30-CH1-L31-VL1-L32-CL-L33-Fc-L34-TNF1-L35-TNF2-L36-TNF3；及該第二多肽具有由以下表示的結構：VL2-VH2-L48-CH1-L49-CL-L50-Fc-L51-TNF1-L52-TNF2-L53-TNF3。在一些態樣中，該第一多肽具有由以下表示的結構：VL1-L1-VH1-L2-Fc；VH1-L3-VL1-L4-Fc；VL1-L5-VH1-L6-CL-L7-CH1-L8-Fc；VL1-L5-VH1-L6-CH1-L7-CL-L8-Fc；VH1-L5-VL1-L6-CL-L7-CH1-L8-Fc；VH1-L5-VL1-L6-CH1-L7-CL-L8-Fc；VL1-L9-CL-L10-VH1-L11-CH1-L12-Fc；VL1-L9-CH1-L10-VH1-L11-CL-L12-Fc；VH1-L9-CL-L10-VL1-L11-CH1-L12-Fc；VH1-L9-CH1-L10-VL1-L11-CL-L12-Fc；VL1-L13-VH1-L14-Fc-L15-TNF1-L16-TNF2-L17-TNF3；VH1-L18-VL1-L19-Fc-L20-TNF1-L21-TNF2-L22-TNF3；VL1-L23-VH1-L24-CL-L25-CH1-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3；VL1-L23-VH1-L24-CH1-L25-CL-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3；VH1-L23-VL1-L24-CL-L25-CH1-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3；VH1-L23-VL1-L24-CH1-L25-CL-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3；VL1-VH1-L14-Fc-L15-TNF1-L16-TNF2-L17-TNF3；VH1-VL1-L19-Fc-L20-TNF1-L21-TNF2-L22-TNF3；VL1-VH1-L24-CL-L25-CH1-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3；VL1-VH1-L24-CH1-L25-CL-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3；VH1-VL1-L24-CL-L25-CH1-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3；VH1-VL1-L24-CH1-L25-CL-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3；VL1-L30-CL-L31-VH1-L32-CH1-L33-Fc-L34-TNF1-L35-TNF2-L36-TNF3；VL1-L30-CH1-L31-VH1-L32-CL-L33-Fc-L34-TNF1-L35-TNF2-L36-TNF3；VH1-L30-CL-L31-VL1-L32-CH1-L33-Fc-L34-TNF1-L35-TNF2-L36-TNF3；或VH1-L30-CH1-L31-VL1-L32-CL-L33-Fc-L34-TNF1-L35-TNF2-L36-TNF3；及該第二多肽具有由以下表示的結構：VL2-CH1-L55-VH2-L56-CL-L57-Fc-L58-TNF1-L59-TNF2-L60-TNF3。舉例而言，第一多肽可具有由以下表示的結構：VL1-L13-VH1-L14-Fc-L15-TNF1-L16-TNF2-L17-TNF3，且第二多肽可具有由以下表示的結構：VL2-L37-VH2-L38-Fc-L39-TNF1-L40-TNF2-L41-TNF3。在一些態樣中，該第一多肽具有由以下表示的結構：VL1-L61-VH1-L62-Fc-L63-TNF1-L64-TNF2-L65-TNF3；VH1-L66-VL1-L67-Fc-L68-TNF1-L69-TNF2-L70-TNF3；VL1-L71-VH1-L72-CL-L73-CH1-L74-Fc-L75-TNF1-L76-TNF2-L77-TNF3；VL1-L71-VH1-L72-CH1-L73-CL-L74-Fc-L75-TNF1-L76-TNF2-L77-TNF3；VL1-L78-CL-L79-VH1-L80-CH1-L81-Fc-L82-TNF1-L83-TNF2-L84-TNF3；或VL1-L78-CH1-L79-VH1-L80-CL-L81-Fc-L82-TNF1-L83-TNF2-L84-TNF3；及該第二多肽具有由以下表示的結構：VL2-L85-VH2-L86-Fc。在一些態樣中，該第一多肽具有由以下表示的結構：VL1-L61-VH1-L62-Fc-L63-TNF1-L64-TNF2-L65-TNF3；VH1-L66-VL1-L67-Fc-L68-TNF1-L69-TNF2-L70-TNF3；VL1-L71-VH1-L72-CL-L73-CH1-L74-Fc-L75-TNF1-L76-TNF2-L77-TNF3；VL1-L71-VH1-L72-CH1-L73-CL-L74-Fc-L75-TNF1-L76-TNF2-L77-TNF3；VL1-L78-CL-L79-VH1-L80-CH1-L81-Fc-L82-TNF1-L83-TNF2-L84-TNF3；或VL1-L78-CH1-L79-VH1-L80-CL-L81-Fc-L82-TNF1-L83-TNF2-L84-TNF3；及該第二多肽具有由以下表示的結構：VH2-L87-VL2-L88-Fc。在一些態樣中，該第一多肽具有由以下表示的結構：VL1-L61-VH1-L62-Fc-L63-TNF1-L64-TNF2-L65-TNF3；VH1-L66-VL1-L67-Fc-L68-TNF1-L69-TNF2-L70-TNF3；VL1-L71-VH1-L72-CL-L73-CH1-L74-Fc-L75-TNF1-L76-TNF2-L77-TNF3；VL1-L71-VH1-L72-CH1-L73-CL-L74-Fc-L75-TNF1-L76-TNF2-L77-TNF3；VL1-L78-CL-L79-VH1-L80-CH1-L81-Fc-L82-TNF1-L83-TNF2-L84-TNF3；或VL1-L78-CH1-L79-VH1-L80-CL-L81-Fc-L82-TNF1-L83-TNF2-L84-TNF3；及該第二多肽具有由以下表示的結構：VL2-L89-VH2-L90-CL-L91-CH1-L92-Fc。在一些態樣中，該第一多肽具有由以下表示的結構：VL1-L61-VH1-L62-Fc-L63-TNF1-L64-TNF2-L65-TNF3；VH1-L66-VL1-L67-Fc-L68-TNF1-L69-TNF2-L70-TNF3；VL1-L71-VH1-L72-CL-L73-CH1-L74-Fc-L75-TNF1-L76-TNF2-L77-TNF3；VL1-L71-VH1-L72-CH1-L73-CL-L74-Fc-L75-TNF1-L76-TNF2-L77-TNF3；VL1-L78-CL-L79-VH1-L80-CH1-L81-Fc-L82-TNF1-L83-TNF2-L84-TNF3；或VL1-L78-CH1-L79-VH1-L80-CL-L81-Fc-L82-TNF1-L83-TNF2-L84-TNF3；及該第二多肽具有由以下表示的結構：VL2-L93-CL-L94-VH2-L95-CH1-L96-Fc。在一些態樣中，該第一多肽具有由以下表示的結構：VL1-L61-VH1-L62-Fc-L63-TNF1-L64-TNF2-L65-TNF3；VH1-L66-VL1-L67-Fc-L68-TNF1-L69-TNF2-L70-TNF3；VL1-L71-VH1-L72-CL-L73-CH1-L74-Fc-L75-TNF1-L76-TNF2-L77-TNF3；VL1-L71-VH1-L72-CH1-L73-CL-L74-Fc-L75-TNF1-L76-TNF2-L77-TNF3；或VL1-L78-CL-L79-VH1-L80-CH1-L81-Fc-L82-TNF1-L83-TNF2-L84-TNF3；或VL1-L78-CH1-L79-VH1-L80-CL-L81-Fc-L82-TNF1-L83-TNF2-L84-TNF3；及該第二多肽具有由以下表示的結構：VL2-L89-VH2-L90-CH1-L91-CL-L92-Fc。在一些態樣中，該第一多肽具有由以下表示的結構：VL1-L61-VH1-L62-Fc-L63-TNF1-L64-TNF2-L65-TNF3；VH1-L66-VL1-L67-Fc-L68-TNF1-L69-TNF2-L70-TNF3；VL1-L71-VH1-L72-CL-L73-CH1-L74-Fc-L75-TNF1-L76-TNF2-L77-TNF3；VL1-L71-VH1-L72-CH1-L73-CL-L74-Fc-L75-TNF1-L76-TNF2-L77-TNF3；或VL1-L78-CL-L79-VH1-L80-CH1-L81-Fc-L82-TNF1-L83-TNF2-L84-TNF3；或VL1-L78-CH1-L79-VH1-L80-CL-L81-Fc-L82-TNF1-L83-TNF2-L84-TNF3；及該第二多肽具有由以下表示的結構：VL2-L93-CH1-L94-VH2-L95-CL-L96-Fc。
在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1及VH1係與CD3特異性結合。
在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:22、28、185、298及306中之任一者具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:23、29、186、299及307中之任一者具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:24、30、187、300及308中之任一者具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH1包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:19、25、182、294及302中之任一者具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:20、26、183、295及303中之任一者具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:21、27、184、296及304中之任一者具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:22具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:23具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:24具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH1包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:19具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:20具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:21具有至少90%一致性的胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:28具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:29具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:30具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH1包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:25具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:26具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:27具有至少90%一致性的胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:185具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:186具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:187具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH1包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:182具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:183具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:184具有至少90%一致性的胺基酸序列。如本文所用，「至少90%一致性」包括與所敍述參考序列具有至少91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%及100%一致性。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:22之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:23之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:24之胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH1包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:19之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:20之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:21之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:28之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:29之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:30之胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH1包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:25之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:26之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:27之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:185之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:186之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:187之胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH1包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:182之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:183之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:184之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:298具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:299具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:300具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH1包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:294具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:295具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:296具有至少90%一致性的胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:306具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:307具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:308具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH1包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:302具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:303具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:304具有至少90%一致性的胺基酸序列。
在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1包含與SEQ ID NO:45具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH1包含與SEQ ID NO:43或44具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1包含與SEQ ID NO:45具有至少80%一致性(諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性)之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH1包含與SEQ ID NO:43具有至少80%一致性(諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性)之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1包含SEQ ID NO:45之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH1包含SEQ ID NO:43之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1包含與SEQ ID NO:45具有至少80%一致性(諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性)之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH1包含與SEQ ID NO:44具有至少80%一致性(諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性)之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1包含SEQ ID NO:45之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH1包含SEQ ID NO:44之胺基酸序列。
在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1包含與SEQ ID NO:297具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH1包含與SEQ ID NO:293具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列。
在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1包含與SEQ ID NO:305具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH1包含與SEQ ID NO:301具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列。
在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2及VH2係與TAA或免疫刺激受體特異性結合。在一些態樣中，免疫刺激受體為CD28。在一些態樣中，TAA為cMet、Trop2、CD20、CD19、HER2、HER3、A2AR、APRIL、EGFR、FGFR、BAFF、BAFFR、BCMA、BTK、BTLA、B7DC、B7H1、B7H4、DLL3、ENTPD1、FCER1A、FCER1、FLAP、FOLH1、MUC-1、CD133、MUC-16、LAMP1、CD38、PD-L1、CEACAM5、STEAP1或EpCAM。在一些態樣中，TAA為HER2。
在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:34或40具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:35或41具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:36或42具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH2包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:31或37具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:32或38具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:33或39具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:34具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:35具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:36具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH2包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:31具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:32具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:33具有至少90%一致性的胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:40具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:41具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:42具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH2包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:37具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:38具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:39具有至少90%一致性的胺基酸序列。如本文所用，「至少90%一致性」包括與所敍述參考序列具有至少91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%及100%一致性。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:34之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:35之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:36之胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH2包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:31之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:32之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:33之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:40之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:41之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:42之胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH2包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:37之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:38之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:39之胺基酸序列。
在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2包含與SEQ ID NO:47或49具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH2包含與SEQ ID NO:46或48具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2包含與SEQ ID NO:47具有至少80%一致性(諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性)之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH2包含與SEQ ID NO:46具有至少80%一致性(諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性)之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2包含SEQ ID NO:47之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH2包含SEQ ID NO:46之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2包含與SEQ ID NO:49具有至少80%一致性(諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性)之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH2包含與SEQ ID NO:48具有至少80%一致性(諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性)之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2包含SEQ ID NO:49之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH2包含SEQ ID NO:48之胺基酸序列。
在一些態樣中，VL2包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:314或322具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:315或323具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:316或324具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或VH2包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:310或318具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:311或319具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:312或320具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，VL2包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:314具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:315具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:316具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或VH2包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:310具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:311具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:312具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，VL2包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:322具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:323具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:324具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或VH2包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:318具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:319具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:320具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，VL2包含與SEQ ID NO:313或321具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或VH2包含與SEQ ID NO:309或317具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，VL2包含與SEQ ID NO:313具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或VH2包含與SEQ ID NO:309具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，VL2包含與SEQ ID NO:321具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或VH2包含與SEQ ID NO:317具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列。如本文所用，「至少90%一致性」包括與所敍述參考序列具有至少91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%及100%一致性。
在一些態樣中，VL2包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:274具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:275具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:276具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或VH2包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:270具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:271具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:272具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，VL2包含與SEQ ID NO:273具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或VH2包含與SEQ ID NO:269具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列。如本文所用，「至少90%一致性」包括與所敍述參考序列具有至少91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%及100%一致性。
在一些態樣中，VL2包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:282具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:283具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:284具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或VH2包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:278具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:279具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:280具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，VL2包含與SEQ ID NO:281具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或VH2包含與SEQ ID NO:277具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列。如本文所用，「至少90%一致性」包括與所敍述參考序列具有至少91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%及100%一致性。
在一些態樣中，VL2包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:290具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:291具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:292具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或VH2包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:286具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:287具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:288具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，VL2包含與SEQ ID NO:289具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或VH2包含與SEQ ID NO:285具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列。如本文所用，「至少90%一致性」包括與所敍述參考序列具有至少91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%及100%一致性。
在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2及VH2係與CD3特異性結合。
在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:22、28、185、298及306中之任一者具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:23、29、186、299及307中之任一者具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:24、30、187、300及308中之任一者具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH2包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:19、25、182、294及302中之任一者具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:20、26、183、295及303中之任一者具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:21、27、184、296及304中之任一者具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:22具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:23具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:24具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH2包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:19具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:20具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:21具有至少90%一致性的胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:28具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:29具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:30具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH2包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:25具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:26具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:27具有至少90%一致性的胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:185具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:186具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:187具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH2包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:182具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:183具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:184具有至少90%一致性的胺基酸序列。如本文所用，「至少90%一致性」包括與所敍述參考序列具有至少91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%及100%一致性。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:22之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:23之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:24之胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH2包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:19之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:20之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:21之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:28之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:29之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:30之胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH2包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:25之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:26之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:27之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:185之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:186之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:187之胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH2包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:182之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:183之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:184之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:298具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:299具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:300具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH2包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:294具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:295具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:296具有至少90%一致性的胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:306具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:307具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:308具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH2包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:302具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:303具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:304具有至少90%一致性的胺基酸序列。
在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2包含與SEQ ID NO:45具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH2包含與SEQ ID NO:43或44具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2包含與SEQ ID NO:45具有至少80%一致性(諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性)之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH2包含與SEQ ID NO:43具有至少80%一致性(諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性)之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2包含SEQ ID NO:45之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH2包含SEQ ID NO:43之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2包含與SEQ ID NO:45具有至少80%一致性(諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性)之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH2包含與SEQ ID NO:44具有至少80%一致性(諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性)之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2包含SEQ ID NO:45之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH2包含SEQ ID NO:44之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2包含與SEQ ID NO:297具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH2包含與SEQ ID NO:293具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2包含與SEQ ID NO:305具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH2包含與SEQ ID NO:301具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列。
在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1及VH1係與TAA或免疫刺激受體特異性結合。在一些態樣中，免疫刺激受體為CD28。在一些態樣中，TAA為cMet、Trop2、CD20、CD19、HER2、HER3、A2AR、APRIL、EGFR、FGFR、BAFF、BAFFR、BCMA、BTK、BTLA、B7DC、B7H1、B7H4、DLL3、ENTPD1、FCER1A、FCER1、FLAP、FOLH1、MUC-1、CD133、MUC-16、LAMP1、CD38、PD-L1、CEACAM5、STEAP1或EpCAM。在一些態樣中，TAA為HER2。
在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:34或40具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:35或41具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:36或42具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH1包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:31或37具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:32或38具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:33或39具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:34具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:35具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:36具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH1包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:31具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:32具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:33具有至少90%一致性的胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:40具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:41具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:42具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH1包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:37具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:38具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:39具有至少90%一致性的胺基酸序列。如本文所用，「至少90%一致性」包括與所敍述參考序列具有至少91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%及100%一致性。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:34之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:35之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:36之胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH1包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:31之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:32之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:33之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:40之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:41之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:42之胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH1包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:37之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:38之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:39之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:274具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:275具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:276具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH1包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:270具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:271具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:272具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:282具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:283具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:284具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH1包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:278具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:279具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:280具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:290具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:291具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:292具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH1包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:286具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:287具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:288具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:314具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:315具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:316具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH1包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:310具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:311具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:312具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:322具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:323具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:324具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH1包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:318具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:319具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:320具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列。
在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1包含與SEQ ID NO:47或49具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH1包含與SEQ ID NO:46或48具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1包含與SEQ ID NO:47具有至少80%一致性(諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性)之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH1包含與SEQ ID NO:46具有至少80%一致性(諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性)之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1包含SEQ ID NO:47之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH1包含SEQ ID NO:46之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1包含與SEQ ID NO:49具有至少80%一致性(諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性)之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH1包含與SEQ ID NO:48具有至少80%一致性(諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性)之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1包含SEQ ID NO:49之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH1包含SEQ ID NO:48之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1包含與SEQ ID NO:273具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH1包含與SEQ ID NO:269具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1包含與SEQ ID NO:281具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH1包含與SEQ ID NO:277具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1包含與SEQ ID NO:289具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH1包含與SEQ ID NO:285具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1包含與SEQ ID NO:313具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH1包含與SEQ ID NO:309具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1包含與SEQ ID NO:321具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH1包含與SEQ ID NO:317具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列。
在一些態樣中，抗原結合多肽之VL1及VH1係與CD3特異性結合，且VL2及VH2係與TAA (例如HER2)或免疫刺激受體(例如CD28)特異性結合。在一些態樣中，抗原結合多肽之VL1及VH1係與CD3特異性結合，且VL2及VH2係與HER2特異性結合。在一些態樣中，抗原結合多肽之VL1及VH1係與CD3特異性結合，且VL2及VH2係與CD28特異性結合。在一些態樣中，抗原結合多肽之VL2及VH2係與CD3特異性結合，且VL1及VH1係與TAA (例如HER2)或免疫刺激受體(例如CD28)特異性結合。在一些態樣中，抗原結合多肽之VL2及VH2係與CD3特異性結合，且VL1及VH1係與HER2特異性結合。在一些態樣中，抗原結合多肽之VL2及VH2係與CD3特異性結合，且VL1及VH1係與CD28特異性結合。
在一些態樣中，本發明之抗原結合多肽複合物包含第一多肽及第二多肽；其中(i)該第一多肽具有由以下表示的結構：Fc；VL1-L1-VL2-L2-VH2-L3-VH1-L4-Fc；VH1-L5-VH2-L6-VL2-L7-VL1-L8-Fc；Fc-L9-TNF1-L10-TNF2-L11-TNF3；VL1-L12-VL2-L13-VH2-L14-VH1-L15-Fc-L16-TNF1-L17-TNF2-L18-TNF3；或VH1-L19-VH2-L20-VL2-L21-VL1-L22-Fc-L23-TNF1-L24-TNF2-L25-TNF3；及該第二多肽具有由以下表示的結構：VL3-L26-VL4-L27-VH4-L28-VH3-L29-Fc-L30-TNF1-L31-TNF2-L32-TNF3；或VH3-L33-VH4-L34-VL4-L35-VL3-L36-Fc-L37-TNF1-L38-TNF2-L39-TNF3；或(ii)該第一多肽具有由以下表示的結構：Fc-L40-TNF1-L41-TNF2-L42-TNF3；VL1-L43-VL2-L44-VH2-L45-VH1-L46-Fc-L47-TNF1-L48-TNF2-L49-TNF3；或VH1-L50-VH2-L51-VL2-L52-VL1-L53-Fc-L54-TNF1-L55-TNF2-L56-TNF3；及該第二多肽具有由以下表示的結構：Fc；VL3-L57-VL4-L58-VH4-L59-VH3-L60-Fc；或VH3-L61-VH4-L62-VL4-L63-VL3-L64-Fc；其中VL1為第一免疫球蛋白輕鏈可變區；VL2為第二免疫球蛋白輕鏈可變區；VL3為第三免疫球蛋白輕鏈可變區；VL4為第四免疫球蛋白輕鏈可變區；VH1為第一免疫球蛋白重鏈可變區；VH2為第二免疫球蛋白重鏈可變區；VH3為第三免疫球蛋白重鏈可變區；VH4為第四免疫球蛋白重鏈可變區；Fc為包含免疫球蛋白重鏈恆定區2 (CH2)、免疫球蛋白重鏈恆定區3 (CH3)及視情況存在之免疫球蛋白鉸鏈的區域；TNF1為TNFSF配體之第一細胞外域；TNF2為TNFSF配體之第二細胞外域；TNF3為TNFSF配體之第三細胞外域；及L1-L64為胺基酸連接子。在一些態樣中，該第一多肽具有由以下表示的結構：Fc；及該第二多肽具有由以下表示的結構：VL3-L26-VL4-L27-VH4-L28-VH3-L29-Fc-L30-TNF1-L31-TNF2-L32-TNF3。在一些態樣中，該第一多肽具有由以下表示的結構：Fc；及該第二多肽具有由以下表示的結構：VH3-L33-VH4-L34-VL4-L35-VL3-L36-Fc-L37-TNF1-L38-TNF2-L39-TNF3。在一些態樣中，該第一多肽具有由以下表示的結構：VL1-L1-VL2-L2-VH2-L3-VH1-L4-Fc；及該第二多肽具有由以下表示的結構：VL3-L26-VL4-L27-VH4-L28-VH3-L29-Fc-L30-TNF1-L31-TNF2-L32-TNF3。在一些態樣中，該第一多肽具有由以下表示的結構：VL1-L1-VL2-L2-VH2-L3-VH1-L4-Fc；及該第二多肽具有由以下表示的結構：VH3-L33-VH4-L34-VL4-L35-VL3-L36-Fc-L37-TNF1-L38-TNF2-L39-TNF3。在一些態樣中，該第一多肽具有由以下表示的結構：VH1-L5-VH2-L6-VL2-L7-VL1-L8-Fc；及該第二多肽具有由以下表示的結構：VL3-L26-VL4-L27-VH4-L28-VH3-L29-Fc-L30-TNF1-L31-TNF2-L32-TNF3。在一些態樣中，該第一多肽具有由以下表示的結構：VH1-L5-VH2-L6-VL2-L7-VL1-L8-Fc；及該第二多肽具有由以下表示的結構：VH3-L33-VH4-L34-VL4-L35-VL3-L36-Fc-L37-TNF1-L38-TNF2-L39-TNF3。在一些態樣中，該第一多肽具有由以下表示的結構：Fc-L9-TNF1-L10-TNF2-L11-TNF3；及該第二多肽具有由以下表示的結構：VL3-L26-VL4-L27-VH4-L28-VH3-L29-Fc-L30-TNF1-L31-TNF2-L32-TNF3。在一些態樣中，該第一多肽具有由以下表示的結構：Fc-L9-TNF1-L10-TNF2-L11-TNF3；及該第二多肽具有由以下表示的結構：VH3-L33-VH4-L34-VL4-L35-VL3-L36-Fc-L37-TNF1-L38-TNF2-L39-TNF3。在一些態樣中，該第一多肽具有由以下表示的結構：VL1-L12-VL2-L13-VH2-L14-VH1-L15-Fc-L16-TNF1-L17-TNF2-L18-TNF3；及該第二多肽具有由以下表示的結構：VL3-L26-VL4-L27-VH4-L28-VH3-L29-Fc-L30-TNF1-L31-TNF2-L32-TNF3。在一些態樣中，該第一多肽具有由以下表示的結構：VL1-L12-VL2-L13-VH2-L14-VH1-L15-Fc-L16-TNF1-L17-TNF2-L18-TNF3；及該第二多肽具有由以下表示的結構：VH3-L33-VH4-L34-VL4-L35-VL3-L36-Fc-L37-TNF1-L38-TNF2-L39-TNF3。在一些態樣中，該第一多肽具有由以下表示的結構：VH1-L19-VH2-L20-VL2-L21-VL1-L22-Fc-L23-TNF1-L24-TNF2-L25-TNF3；及該第二多肽具有由以下表示的結構：VL3-L26-VL4-L27-VH4-L28-VH3-L29-Fc-L30-TNF1-L31-TNF2-L32-TNF3。在一些態樣中，該第一多肽具有由以下表示的結構：VH1-L19-VH2-L20-VL2-L21-VL1-L22-Fc-L23-TNF1-L24-TNF2-L25-TNF3；及該第二多肽具有由以下表示的結構：VH3-L33-VH4-L34-VL4-L35-VL3-L36-Fc-L37-TNF1-L38-TNF2-L39-TNF3。在一些態樣中，該第一多肽具有由以下表示的結構：Fc-L40-TNF1-L41-TNF2-L42-TNF3；及該第二多肽具有由以下表示的結構：Fc。在一些態樣中，該第一多肽具有由以下表示的結構：Fc-L40-TNF1-L41-TNF2-L42-TNF3；及該第二多肽具有由以下表示的結構：VL3-L57-VL4-L58-VH4-L59-VH3-L60-Fc。在一些態樣中，該第一多肽具有由以下表示的結構：Fc-L40-TNF1-L41-TNF2-L42-TNF3；及該第二多肽具有由以下表示的結構：VH3-L61-VH4-L62-VL4-L63-VL3-L64-Fc。在一些態樣中，該第一多肽具有由以下表示的結構：VL1-L43-VL2-L44-VH2-L45-VH1-L46-Fc-L47-TNF1-L48-TNF2-L49-TNF3；及該第二多肽具有由以下表示的結構：Fc。在一些態樣中，該第一多肽具有由以下表示的結構：VL1-L43-VL2-L44-VH2-L45-VH1-L46-Fc-L47-TNF1-L48-TNF2-L49-TNF3；及該第二多肽具有由以下表示的結構：VL3-L57-VL4-L58-VH4-L59-VH3-L60-Fc。在一些態樣中，該第一多肽具有由以下表示的結構：VL1-L43-VL2-L44-VH2-L45-VH1-L46-Fc-L47-TNF1-L48-TNF2-L49-TNF3；及該第二多肽具有由以下表示的結構：VH3-L61-VH4-L62-VL4-L63-VL3-L64-Fc。在一些態樣中，該第一多肽具有由以下表示的結構：VH1-L50-VH2-L51-VL2-L52-VL1-L53-Fc-L54-TNF1-L55-TNF2-L56-TNF3；及該第二多肽具有由以下表示的結構：Fc。在一些態樣中，該第一多肽具有由以下表示的結構：VH1-L50-VH2-L51-VL2-L52-VL1-L53-Fc-L54-TNF1-L55-TNF2-L56-TNF3；及該第二多肽具有由以下表示的結構：VL3-L57-VL4-L58-VH4-L59-VH3-L60-Fc。在一些態樣中，該第一多肽具有由以下表示的結構：VH1-L50-VH2-L51-VL2-L52-VL1-L53-Fc-L54-TNF1-L55-TNF2-L56-TNF3；及該第二多肽具有由以下表示的結構：VH3-L61-VH4-L62-VL4-L63-VL3-L64-Fc。
在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1、VH1、VL3及VH3係與CD3特異性結合。
在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1及VL3包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:22、28、185、298及306中之任一者具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:23、29、186、299及307中之任一者具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:24、30、187、300及308中之任一者具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH1及VH3包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:19、25、182、294及302中之任一者具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:20、26、183、295及303中之任一者具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:21、27、184、296及394中之任一者具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1及VL3包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:22具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:23具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:24具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH1及VH3包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:19具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:20具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:21具有至少90%一致性的胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1及VL3包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:28具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:29具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:30具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH1及VH3包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:25具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:26具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:27具有至少90%一致性的胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1及VL3包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:185具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:186具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:187具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH1及VH3包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:182具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:183具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:184具有至少90%一致性的胺基酸序列。如本文所用，「至少90%一致性」包括與所敍述參考序列具有至少91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%及100%一致性。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1及VL3包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:22之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:23之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:24之胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH1及VH3包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:19之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:20之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:21之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1及VL3包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:28之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:29之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:30之胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH1及VH3包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:25之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:26之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:27之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1及VL3包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:185之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:186之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:187之胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH1及VH3包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:182之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:183之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:184之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1及VL3包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:298具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:299具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:300具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH1及VH3包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:294具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:295具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:296具有至少90%一致性的胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1及VL3包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:306具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:307具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:308具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH1及VH3包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:302具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:303具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:304具有至少90%一致性的胺基酸序列。
在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1及VL3包含與SEQ ID NO:45具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH1及VH3包含與SEQ ID NO:43或44具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1及VL3包含與SEQ ID NO:45具有至少80%一致性(諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性)之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH1及VH3包含與SEQ ID NO:43具有至少80%一致性(諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性)之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1及VL3包含SEQ ID NO:45之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH1及VH3包含SEQ ID NO:43之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1及VL3包含與SEQ ID NO:45具有至少80%一致性(諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性)之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH1及VH3包含與SEQ ID NO:44具有至少80%一致性(諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性)之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1及VL3包含SEQ ID NO:45之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH1及VH3包含SEQ ID NO:44之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1及VL3包含與SEQ ID NO:297具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH1及VH3包含與SEQ ID NO:293具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1及VL3包含與SEQ ID NO:305具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH1及VH3包含與SEQ ID NO:301具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列。
在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2、VH2、VL4及VH4係與TAA或免疫刺激受體特異性結合。在一些態樣中，免疫刺激受體為CD28。在一些態樣中，TAA為cMet、Trop2、CD20、CD19、HER2、HER3、A2AR、APRIL、EGFR、FGFR、BAFF、BAFFR、BCMA、BTK、BTLA、B7DC、B7H1、B7H4、DLL3、ENTPD1、FCER1A、FCER1、FLAP、FOLH1、MUC-1、CD133、MUC-16、LAMP1、CD38、PD-L1、CEACAM5、STEAP1或EpCAM。在一些態樣中，TAA為HER2。
在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2及VL4包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:34或40具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:35或41具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:36或42具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH2及VH4包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:31或37具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:32或38具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:33或39具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2及VL4包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:34具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:35具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:36具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH2及VH4包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:31具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:32具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:33具有至少90%一致性的胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2及VL4包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:40具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:41具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:42具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH2及VH4包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:37具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:38具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:39具有至少90%一致性的胺基酸序列。如本文所用，「至少90%一致性」包括與所敍述參考序列具有至少91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%及100%一致性。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2及VL4包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:34之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:35之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:36之胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH2及VH4包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:31之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:32之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:33之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2及VL4包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:40之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:41之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:42之胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH2及VH4包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:37之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:38之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:39之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2及VL4包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:274具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:275具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:276具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH2及VH4包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:270具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:271具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:272具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2及VL4包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:282具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:283具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:284具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH2及VH4包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:278具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:279具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:280具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2及VL4包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:290具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:291具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:292具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH2及VH4包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:286具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:287具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:288具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2及VL4包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:314具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:315具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:316具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH2及VH4包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:310具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:311具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:312具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2及VL4包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:322具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:323具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:324具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH2及VH4包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:318具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:319具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:320具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列。
在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2及VL4包含與SEQ ID NO:47或49具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH2及VH4包含與SEQ ID NO:46或48具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2及VL4包含與SEQ ID NO:47具有至少80%一致性(諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性)之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH2及VH4包含與SEQ ID NO:46具有至少80%一致性(諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性)之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2及VL4包含SEQ ID NO:47之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH2及VH4包含SEQ ID NO:46之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2及VL4包含與SEQ ID NO:49具有至少80%一致性(諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性)之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH2及VH4包含與SEQ ID NO:48具有至少80%一致性(諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性)之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2及VL4包含SEQ ID NO:49之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH2及VH4包含SEQ ID NO:48之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2及VL4包含與SEQ ID NO:273具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH2及VH4包含與SEQ ID NO:269具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2及VL4包含與SEQ ID NO:281具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH2及VH4包含與SEQ ID NO:277具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2及VL4包含與SEQ ID NO:289具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH2及VH4包含與SEQ ID NO:285具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2及VL4包含與SEQ ID NO:313具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH2及VH4包含與SEQ ID NO:309具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2及VL4包含與SEQ ID NO:321具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH2及VH4包含與SEQ ID NO:317具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列。
在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1、VH1、VL4及VH4係與CD3特異性結合。
在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1及VL4包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:22、28、185、298及306中之任一者具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:23、29、186、299及307中之任一者具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:24、30、187、300及308中之任一者具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH1及VH4包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:19、25、182、294及302中之任一者具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:20、26、183、295及303中之任一者具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:21、27、184、296及304中之任一者具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1及VL4包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:22具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:23具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:24具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH1及VH4包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:19具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:20具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:21具有至少90%一致性的胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1及VL4包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:28具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:29具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:30具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH1及VH4包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:25具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:26具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:27具有至少90%一致性的胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1及VL4包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:185具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:186具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:187具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH1及VH4包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:182具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:183具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:184具有至少90%一致性的胺基酸序列。如本文所用，「至少90%一致性」包括與所敍述參考序列具有至少91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%及100%一致性。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1及VL4包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:22之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:23之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:24之胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH1及VH4包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:19之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:20之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:21之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1及VL4包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:28之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:29之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:30之胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH1及VH4包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:25之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:26之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:27之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1及VL4包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:185之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:186之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:187之胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH1及VH4包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:182之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:183之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:184之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1及VL4包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:298具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:299具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:300具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH1及VH4包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:294具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:295具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:296具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1及VL4包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:306具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:307具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:308具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH1及VH4包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:302具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:303具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:304具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列。
在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1及VL4包含與SEQ ID NO:45具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH1及VH4包含與SEQ ID NO:43或44具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1及VL4包含與SEQ ID NO:45具有至少80%一致性(諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性)之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH1及VH4包含與SEQ ID NO:43具有至少80%一致性(諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性)之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1及VL4包含SEQ ID NO:45之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH1及VH4包含SEQ ID NO:43之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1及VL4包含與SEQ ID NO:45具有至少80%一致性(諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性)之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH1及VH4包含與SEQ ID NO:44具有至少80%一致性(諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性)之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1及VL4包含SEQ ID NO:45之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH1及VH4包含SEQ ID NO:44之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1及VL4包含與SEQ ID NO:297具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH1及VH4包含與SEQ ID NO:293具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1及VL4包含與SEQ ID NO:305具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH1及VH4包含與SEQ ID NO:301具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列。
在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2、VH2、VL3及VH3係與TAA或免疫刺激受體特異性結合。在一些態樣中，免疫刺激受體為CD28。在一些態樣中，TAA為cMet、Trop2、CD20、CD19、HER2、HER3、A2AR、APRIL、EGFR、FGFR、BAFF、BAFFR、BCMA、BTK、BTLA、B7DC、B7H1、B7H4、DLL3、ENTPD1、FCER1A、FCER1、FLAP、FOLH1、MUC-1、CD133、MUC-16、LAMP1、CD38、PD-L1、CEACAM5、STEAP1或EpCAM。在一些態樣中，TAA為HER2。
在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2及VL3包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:34或40具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:35或41具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:36或42具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH2及VH3包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:31或37具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:32或38具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:33或39具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2及VL3包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:34具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:35具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:36具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH2及VH3包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:31具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:32具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:33具有至少90%一致性的胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2及VL3包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:40具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:41具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:42具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH2及VH3包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:37具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:38具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:39具有至少90%一致性的胺基酸序列。如本文所用，「至少90%一致性」包括與所敍述參考序列具有至少91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%及100%一致性。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2及VL3包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:34之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:35之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:36之胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH2及VH3包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:31之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:32之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:33之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2及VL3包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:40之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:41之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:42之胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH2及VH3包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:37之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:38之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:39之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2及VL3包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:274具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:275具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:276具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH2及VH3包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:270具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:271具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:272具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2及VL3包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:282具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:283具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:284具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH2及VH3包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:278具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:279具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:280具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2及VL3包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:314具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:315具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:316具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH2及VH3包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:310具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:311具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:312具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2及VL3包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:322具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:323具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:324具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH2及VH3包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:318具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:319具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:320具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列。
在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2及VL3包含與SEQ ID NO:47或49具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH2及VH3包含與SEQ ID NO:46或48具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2及VL3包含與SEQ ID NO:47具有至少80%一致性(諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性)之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH2及VH3包含與SEQ ID NO:46具有至少80%一致性(諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性)之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2及VL3包含SEQ ID NO:47之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH2及VH3包含SEQ ID NO:46之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2及VL3包含與SEQ ID NO:49具有至少80%一致性(諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性)之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH2及VH3包含與SEQ ID NO:48具有至少80%一致性(諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性)之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2及VL3包含SEQ ID NO:49之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH2及VH3包含SEQ ID NO:48之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2及VL3包含與SEQ ID NO:273具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH2及VH3包含與SEQ ID NO:269具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2及VL3包含與SEQ ID NO:281具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH2及VH3包含與SEQ ID NO:277具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2及VL3包含與SEQ ID NO:289具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH2及VH3包含與SEQ ID NO:285具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2及VL3包含與SEQ ID NO:313具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH2及VH3包含與SEQ ID NO:309具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2及VL3包含與SEQ ID NO:321具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH2及VH3包含與SEQ ID NO:317具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列。
在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2、VH2、VL4及VH4係與CD3特異性結合。
在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2及VL4包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:22、28、185、298及306中之任一者具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:23、29、186、299及307中之任一者具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:24、30、187、300及308中之任一者具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH2及VH4包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:19、25、182、294及302中之任一者具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:20、26、183、295及303中之任一者具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:21、27、184、296及304中之任一者具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2及VL4包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:22具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:23具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:24具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH2及VH4包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:19具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:20具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:21具有至少90%一致性的胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2及VL4包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:28具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:29具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:30具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH2及VH4包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:25具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:26具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:27具有至少90%一致性的胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2及VL4包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:185具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:186具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:187具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH2及VH4包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:182具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:183具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:184具有至少90%一致性的胺基酸序列。如本文所用，「至少90%一致性」包括與所敍述參考序列具有至少91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%及100%一致性。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2及VL4包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:22之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:23之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:24之胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH2及VH4包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:19之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:20之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:21之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2及VL4包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:28之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:29之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:30之胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH2及VH4包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:25之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:26之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:27之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2及VL4包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:185之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:186之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:187之胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH2及VH4包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:182之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:183之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:184之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2及VL4包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:298具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:299具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:300具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH2及VH4包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:294具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:295具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:296具有至少90%一致性的胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2及VL4包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:306具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:307具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:308具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH2及VH4包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:302具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:303具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:304具有至少90%一致性的胺基酸序列。
在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2及VL4包含與SEQ ID NO:45具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH2及VH4包含與SEQ ID NO:43或44具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2及VL4包含與SEQ ID NO:45具有至少80%一致性(諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性)之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH2及VH4包含與SEQ ID NO:43具有至少80%一致性(諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性)之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2及VL4包含SEQ ID NO:45之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH2及VH4包含SEQ ID NO:43之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2及VL4包含與SEQ ID NO:45具有至少80%一致性(諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性)之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH2及VH4包含與SEQ ID NO:44具有至少80%一致性(諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性)之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2及VL4包含SEQ ID NO:45之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH2及VH4包含SEQ ID NO:44之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2及VL4包含與SEQ ID NO:297具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH2及VH4包含與SEQ ID NO:293具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2及VL4包含與SEQ ID NO:305具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH2及VH4包含與SEQ ID NO:301具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列。
在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1、VH1、VL3及VH3係與TAA或免疫刺激受體特異性結合。在一些態樣中，免疫刺激受體為CD28。在一些態樣中，TAA為cMet、Trop2、CD20、CD19、HER2、HER3、A2AR、APRIL、EGFR、FGFR、BAFF、BAFFR、BCMA、BTK、BTLA、B7DC、B7H1、B7H4、DLL3、ENTPD1、FCER1A、FCER1、FLAP、FOLH1、MUC-1、CD133、MUC-16、LAMP1、CD38、PD-L1、CEACAM5、STEAP1或EpCAM。在一些態樣中，TAA為HER2。
在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1及VL3包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:34或40具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:35或41具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:36或42具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH1及VH3包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:31或37具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:32或38具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:33或39具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1及VL3包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:34具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:35具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:36具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH1及VH3包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:31具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:32具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:33具有至少90%一致性的胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1及VL3包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:40具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:41具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:42具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH1及VH3包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:37具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:38具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:39具有至少90%一致性的胺基酸序列。如本文所用，「至少90%一致性」包括與所敍述參考序列具有至少91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%及100%一致性。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1及VL3包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:34之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:35之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:36之胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH1及VH3包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:31之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:32之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:33之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1及VL3包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:40之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:41之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:42之胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH1及VH3包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:37之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:38之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:39之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1及VL3包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:274具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:275具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:276具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH1及VH3包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:270具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:271具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:272具有至少90%一致性的胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1及VL3包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:282具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:283具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:284具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH1及VH3包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:278具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:279具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:280具有至少90%一致性的胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1及VL3包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:290具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:291具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:292具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH1及VH3包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:286具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:287具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:288具有至少90%一致性的胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1及VL3包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:314具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:315具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:316具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH1及VH3包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:310具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:311具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:312具有至少90%一致性的胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1及VL3包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:322具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:323具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:324具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH1及VH3包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:318具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:319具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:320具有至少90%一致性的胺基酸序列。
在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1及VL3包含與SEQ ID NO:47或49具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH1及VH3包含與SEQ ID NO:46或48具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1及VL3包含與SEQ ID NO:47具有至少80%一致性(諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性)之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH1及VH3包含與SEQ ID NO:46具有至少80%一致性(諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性)之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1及VL3包含SEQ ID NO:47之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH1及VH3包含SEQ ID NO:46之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1及VL3包含與SEQ ID NO:49具有至少80%一致性(諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性)之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH1及VH3包含與SEQ ID NO:48具有至少80%一致性(諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性)之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1及VL3包含SEQ ID NO:49之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH1及VH3包含SEQ ID NO:48之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1及VL3包含與SEQ ID NO:273具有至少80%一致性(諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性)之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH1及VH3包含與SEQ ID NO:269具有至少80%一致性(諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性)之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1及VL3包含與SEQ ID NO:281具有至少80%一致性(諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性)之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH1及VH3包含與SEQ ID NO:277具有至少80%一致性(諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性)之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1及VL3包含與SEQ ID NO:289具有至少80%一致性(諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性)之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH1及VH3包含與SEQ ID NO:285具有至少80%一致性(諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性)之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1及VL3包含與SEQ ID NO:313具有至少80%一致性(諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性)之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH1及VH3包含與SEQ ID NO:309具有至少80%一致性(諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性)之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1及VL3包含與SEQ ID NO:321具有至少80%一致性(諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性)胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH1及VH3包含與SEQ ID NO:317具有至少80%一致性(諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性)之胺基酸序列。
在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2、VH2、VL3及VH3係與CD3特異性結合。
在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2及VL3包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:22、28、185、298及306中之任一者具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:23、29、186、299及307中之任一者具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:24、30、187、300及308中之任一者具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH2及VH3包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:19、25、182、294及302中之任一者具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:20、26、183、295及303中之任一者具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:21、27、184、296及304中之任一者具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2及VL3包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:22具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:23具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:24具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH2及VH3包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:19具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:20具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:21具有至少90%一致性的胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2及VL3包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:28具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:29具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:30具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH2及VH3包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:25具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:26具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:27具有至少90%一致性的胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2及VL3包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:185具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:186具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:187具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH2及VH3包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:182具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:183具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:184具有至少90%一致性的胺基酸序列。如本文所用，「至少90%一致性」包括與所敍述參考序列具有至少91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%及100%一致性。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2及VL3包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:22之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:23之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:24之胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH2及VH3包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:19之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:20之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:21之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2及VL3包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:28之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:29之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:30之胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH2及VH3包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:25之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:26之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:27之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2及VL3包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:185之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:186之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:187之胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH2及VH3包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:182之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:183之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:184之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2及VL3包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:298具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:299具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:300具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH2及VH3包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:294具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:295具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:296具有至少90%一致性的胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2及VL3包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:306具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:307具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:308具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH2及VH3包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:302具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:303具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:304具有至少90%一致性的胺基酸序列。
在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2及VL3包含與SEQ ID NO:45具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH2及VH3包含與SEQ ID NO:43或44具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2及VL3包含與SEQ ID NO:45具有至少80%一致性(諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性)之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH2及VH3包含與SEQ ID NO:43具有至少80%一致性(諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性)之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2及VL3包含SEQ ID NO:45之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH2及VH3包含SEQ ID NO:43之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2及VL3包含與SEQ ID NO:45具有至少80%一致性(諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性)之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH2及VH3包含與SEQ ID NO:44具有至少80%一致性(諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性)之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2及VL3包含SEQ ID NO:45之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH2及VH3包含SEQ ID NO:44之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2及VL3包含與SEQ ID NO:297具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH2及VH3包含與SEQ ID NO:293具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2及VL3包含與SEQ ID NO:305具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH2及VH3包含與SEQ ID NO:301具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列。
在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1、VH1、VL4及VH4係與TAA或免疫刺激受體特異性結合。在一些態樣中，免疫刺激受體為CD28。在一些態樣中，TAA為cMet、Trop2、CD20、CD19、HER2、HER3、A2AR、APRIL、EGFR、FGFR、BAFF、BAFFR、BCMA、BTK、BTLA、B7DC、B7H1、B7H4、DLL3、ENTPD1、FCER1A、FCER1、FLAP、FOLH1、MUC-1、CD133、MUC-16、LAMP1、CD38、PD-L1、CEACAM5、STEAP1或EpCAM。在一些態樣中，TAA為HER2。
在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1及VL4包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:34或40具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:35或41具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:36或42具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH1及VH4包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:31或37具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:32或38具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:33或39具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1及VL4包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:34具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:35具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:36具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH1及VH4包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:31具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:32具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:33具有至少90%一致性的胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1及VL4包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:40具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:41具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:42具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH1及VH4包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:37具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:38具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:39具有至少90%一致性的胺基酸序列。如本文所用，「至少90%一致性」包括與所敍述參考序列具有至少91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%及100%一致性。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1及VL4包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:34之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:35之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:36之胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH1及VH4包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:31之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:32之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:33之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1及VL4包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:40之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:41之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:42之胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH1及VH4包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:37之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:38之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:39之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1及VL4包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:274具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:275具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:276具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH1及VH4包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:270具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:271具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:272具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1及VL4包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:282具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:283具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:284具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH1及VH4包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:278具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:279具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:280具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1及VL4包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:290具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:291具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:292具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH1及VH4包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:286具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:287具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:288具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1及VL4包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:314具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:315具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:316具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH1及VH4包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:310具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:311具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:312具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1及VL4包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:322具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:323具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:324具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH1及VH4包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:318具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:319具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:320具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列。
在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1及VL4包含與SEQ ID NO:47或49具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH1及VH4包含與SEQ ID NO:46或48具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1及VL4包含與SEQ ID NO:47具有至少80%一致性(諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性)之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH1及VH4包含與SEQ ID NO:46具有至少80%一致性(諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性)之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1及VL4包含SEQ ID NO:47之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH1及VH4包含SEQ ID NO:46之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1及VL4包含與SEQ ID NO:49具有至少80%一致性(諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性)之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH1及VH4包含與SEQ ID NO:48具有至少80%一致性(諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性)之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1及VL4包含SEQ ID NO:49之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH1及VH4包含SEQ ID NO:48之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1及VL4包含與SEQ ID NO:273具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH1及VH4包含與SEQ ID NO:269具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1及VL4包含與SEQ ID NO:281具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH1及VH4包含與SEQ ID NO:277具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1及VL4包含與SEQ ID NO:289具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH1及VH4包含與SEQ ID NO:285具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1及VL4包含與SEQ ID NO:313具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH1及VH4包含與SEQ ID NO:309具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1及VL4包含與SEQ ID NO:321具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH1及VH4包含與SEQ ID NO:317具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列。
在一些態樣中，本發明之抗原結合多肽複合物包含第一多肽及第二多肽；其中(i)該第一多肽具有由以下表示的結構：VL1-L1-VH1-L2-Fc；VH1-L3-VL1-L4-Fc；VL1-L5-VH1-L6-Fc-L7-TNF1-L8-TNF2-L9-TNF3；或VH1-L10-VL1-L11-Fc-L12-TNF1-L13-TNF2-L14-TNF3；及該第二多肽具有由以下表示的結構：VL2-L15-VL3-L16-VH3-L17-VH2-L18-Fc-L19-TNF1-L20-TNF2-L21-TNF3；或VH2-L22-VH3-L23-VL3-L24-VL2-L25-Fc-L26-TNF1-L27-TNF2-L28-TNF3；或(ii)該第一多肽具有由以下表示的結構：VL1-L29-VH1-L30-Fc-L31-TNF1-L32-TNF2-L33-TNF3；或VH1-L34-VL1-L35-Fc-L36-TNF1-L37-TNF2-L38-TNF3；及該第二多肽具有由以下表示的結構：VL2-L39-VL3-L40-VH3-L41-VH2-L42-Fc；或VH2-L43-VH3-L44-VL3-L45-VL2-L46-Fc；其中VL1為第一免疫球蛋白輕鏈可變區；VL2為第二免疫球蛋白輕鏈可變區；VL3為第三免疫球蛋白輕鏈可變區；VH1為第一免疫球蛋白重鏈可變區；VH2為第二免疫球蛋白重鏈可變區；VH3為第三免疫球蛋白重鏈可變區；Fc為包含免疫球蛋白重鏈恆定區2 (CH2)、免疫球蛋白重鏈恆定區3 (CH3)及視情況存在之免疫球蛋白鉸鏈的區域；TNF1為TNFSF配體之第一細胞外域；TNF2為TNFSF配體之第二細胞外域；TNF3為TNFSF配體之第三細胞外域；及L1-L46為胺基酸連接子。在一些態樣中，該第一多肽具有由以下表示的結構：VL1-L1-VH1-L2-Fc；及該第二多肽具有由以下表示的結構：VL2-L15-VL3-L16-VH3-L17-VH2-L18-Fc-L19-TNF1-L20-TNF2-L21-TNF3。在一些態樣中，該第一多肽具有由以下表示的結構：VL1-L1-VH1-L2-Fc；及該第二多肽具有由以下表示的結構：VH2-L22-VH3-L23-VL3-L24-VL2-L25-Fc-L26-TNF1-L27-TNF2-L28-TNF3。在一些態樣中，該第一多肽具有由以下表示的結構：VH1-L3-VL1-L4-Fc；及該第二多肽具有由以下表示的結構：VL2-L15-VL3-L16-VH3-L17-VH2-L18-Fc-L19-TNF1-L20-TNF2-L21-TNF3。在一些態樣中，該第一多肽具有由以下表示的結構：VH1-L3-VL1-L4-Fc；及該第二多肽具有由以下表示的結構：VH2-L22-VH3-L23-VL3-L24-VL2-L25-Fc-L26-TNF1-L27-TNF2-L28-TNF3。在一些態樣中，該第一多肽具有由以下表示的結構：VL1-L5-VH1-L6-Fc-L7-TNF1-L8-TNF2-L9-TNF3；及該第二多肽具有由以下表示的結構：VL2-L15-VL3-L16-VH3-L17-VH2-L18-Fc-L19-TNF1-L20-TNF2-L21-TNF3。在一些態樣中，該第一多肽具有由以下表示的結構：VL1-L5-VH1-L6-Fc-L7-TNF1-L8-TNF2-L9-TNF3；及該第二多肽具有由以下表示的結構：VH2-L22-VH3-L23-VL3-L24-VL2-L25-Fc-L26-TNF1-L27-TNF2-L28-TNF3。在一些態樣中，該第一多肽具有由以下表示的結構：VH1-L10-VL1-L11-Fc-L12-TNF1-L13-TNF2-L14-TNF3；及該第二多肽具有由以下表示的結構：VL2-L15-VL3-L16-VH3-L17-VH2-L18-Fc-L19-TNF1-L20-TNF2-L21-TNF3。在一些態樣中，該第一多肽具有由以下表示的結構：VH1-L10-VL1-L11-Fc-L12-TNF1-L13-TNF2-L14-TNF3；及該第二多肽具有由以下表示的結構：VH2-L22-VH3-L23-VL3-L24-VL2-L25-Fc-L26-TNF1-L27-TNF2-L28-TNF3。在一些態樣中，該第一多肽具有由以下表示的結構：VL1-L29-VH1-L30-Fc-L31-TNF1-L32-TNF2-L33-TNF3；及該第二多肽具有由以下表示的結構：VL2-L39-VL3-L40-VH3-L41-VH2-L42-Fc。在一些態樣中，該第一多肽具有由以下表示的結構：VL1-L29-VH1-L30-Fc-L31-TNF1-L32-TNF2-L33-TNF3；及該第二多肽具有由以下表示的結構：VH2-L43-VH3-L44-VL3-L45-VL2-L46-Fc。在一些態樣中，該第一多肽具有由以下表示的結構：VH1-L34-VL1-L35-Fc-L36-TNF1-L37-TNF2-L38-TNF3；及該第二多肽具有由以下表示的結構：VL2-L39-VL3-L40-VH3-L41-VH2-L42-Fc。在一些態樣中，該第一多肽具有由以下表示的結構：VH1-L34-VL1-L35-Fc-L36-TNF1-L37-TNF2-L38-TNF3；及該第二多肽具有由以下表示的結構：VH2-L43-VH3-L44-VL3-L45-VL2-L46-Fc。
在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1、VH1、VL2及VH2係與CD3特異性結合。
在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1及VL2包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:22、28、185、298及306中之任一者具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:23、29、186、299及307中之任一者具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:24、30、187、300及308中之任一者具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH1及VH2包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:19、25、182、294及302中之任一者具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:20、26、183、295及303中之任一者具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:21、27、184、296及304中之任一者具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1及VL2包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:22具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:23具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:24具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH1及VH2包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:19具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:20具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:21具有至少90%一致性的胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1及VL2包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:28具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:29具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:30具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH1及VH2包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:25具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:26具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:27具有至少90%一致性的胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1及VL2包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:185具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:186具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:187具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH1及VH2包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:182具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:183具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:184具有至少90%一致性的胺基酸序列。如本文所用，「至少90%一致性」包括與所敍述參考序列具有至少91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%及100%一致性。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1及VL2包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:22之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:23之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:24之胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH1及VH2包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:19之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:20之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:21之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1及VL2包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:28之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:29之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:30之胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH1及VH2包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:25之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:26之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:27之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1及VL2包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:185之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:186之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:187之胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH1及VH2包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:182之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:183之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:184之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1及VL2包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:298具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:299具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:300具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH1及VH2包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:294具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:295具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:296具有至少90%一致性的胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1及VL2包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:306具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:307具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:308具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH1及VH2包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:302具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:303具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:304具有至少90%一致性的胺基酸序列。
在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1及VL2包含與SEQ ID NO:45具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH1及VH2包含與SEQ ID NO:43或44具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1及VL2包含與SEQ ID NO:45具有至少80%一致性(諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性)之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH1及VH2包含與SEQ ID NO:43具有至少80%一致性(諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性)之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1及VL2包含SEQ ID NO:45之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH1及VH2包含SEQ ID NO:43之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1及VL2包含與SEQ ID NO:45具有至少80%一致性(諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性)之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH1及VH2包含與SEQ ID NO:44具有至少80%一致性(諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性)之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1及VL2包含SEQ ID NO:45之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH1及VH2包含SEQ ID NO:44之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1及VL2包含與SEQ ID NO:297具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH1及VH2包含與SEQ ID NO:293具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1及VL2包含與SEQ ID NO:305具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH1及VH2包含與SEQ ID NO:301具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列。
在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL3及VH3係與TAA或免疫刺激受體特異性結合。在一些態樣中，免疫刺激受體為CD28。在一些態樣中，TAA為cMet、Trop2、CD20、CD19、HER2、HER3、A2AR、APRIL、EGFR、FGFR、BAFF、BAFFR、BCMA、BTK、BTLA、B7DC、B7H1、B7H4、DLL3、ENTPD1、FCER1A、FCER1、FLAP、FOLH1、MUC-1、CD133、MUC-16、LAMP1、CD38、PD-L1、CEACAM5、STEAP1或EpCAM。在一些態樣中，TAA為HER2。
在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL3包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:34或40具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:35或41具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:36或42具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH3包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:31或37具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:32或38具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:33或39具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL3包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:34具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:35具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:36具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH3包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:31具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:32具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:33具有至少90%一致性的胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL3包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:40具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:41具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:42具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH3包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:37具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:38具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:39具有至少90%一致性的胺基酸序列。如本文所用，「至少90%一致性」包括與所敍述參考序列具有至少91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%及100%一致性。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL3包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:34之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:35之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:36之胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH3包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:31之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:32之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:33之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL3包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:40之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:41之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:42之胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH3包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:37之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:38之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:39之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL3包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:274具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:275具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:276具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH3包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:270具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:271具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:272具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL3包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:282具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:283具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:284具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH3包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:278具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:279具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:280具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL3包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:290具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:291具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:292具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH3包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:286具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:287具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:288具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL3包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:314具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:315具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:316具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH3包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:310具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:311具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:312具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL3包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:322具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:323具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:324具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH3包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:318具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:319具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:320具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列。
在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL3包含與SEQ ID NO:47或49具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH3包含與SEQ ID NO:46或48具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL3包含與SEQ ID NO:47具有至少80%一致性(諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性)之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH3包含與SEQ ID NO:46具有至少80%一致性(諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性)之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL3包含與SEQ ID NO:49具有至少80%一致性(諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性)之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH3包含與SEQ ID NO:48具有至少80%一致性(諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性)之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL3包含SEQ ID NO:47之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH3包含SEQ ID NO:46之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL3包含SEQ ID NO:49之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH3包含SEQ ID NO:48之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL3包含與SEQ ID NO:273具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH3包含與SEQ ID NO:269具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL3包含與SEQ ID NO:281具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH3包含與SEQ ID NO:277具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL3包含與SEQ ID NO:289具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH3包含與SEQ ID NO:285具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL3包含與SEQ ID NO:313具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH3包含與SEQ ID NO:309具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL3包含與SEQ ID NO:321具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH3包含與SEQ ID NO:317具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列。
在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1、VH1、VL3及VH3係與CD3特異性結合。
在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1及VL3包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:22、28、185、298及306中之任一者具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:23、29、186、299及307中之任一者具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:24、30、187、300及308中之任一者具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH1及VH3包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:19、25、182、294及302中之任一者具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:20、26、183、295及303中之任一者具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:21、27、184、296及304中之任一者具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1及VL3包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:22具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:23具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:24具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH1及VH3包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:19具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:20具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:21具有至少90%一致性的胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1及VL3包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:28具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:29具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:30具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH1及VH3包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:25具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:26具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:27具有至少90%一致性的胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1及VL3包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:185具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:186具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:187具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH1及VH3包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:182具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:183具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:184具有至少90%一致性的胺基酸序列。如本文所用，「至少90%一致性」包括與所敍述參考序列具有至少91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%及100%一致性。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1及VL3包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:22之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:23之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:24之胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH1及VH3包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:19之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:20之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:21之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1及VL3包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:28之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:29之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:30之胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH1及VH3包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:25之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:26之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:27之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1及VL3包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:185之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:186之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:187之胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH1及VH3包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:182之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:183之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:184之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1及VL3包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:298具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:299具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:300具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH1及VH3包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:294具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:295具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:296具有至少90%一致性的胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1及VL3包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:306具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:307具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:308具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH1及VH3包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:302具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:303具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:304具有至少90%一致性的胺基酸序列。
在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1及VL3包含與SEQ ID NO:45具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH1及VH3包含與SEQ ID NO:43或44具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1及VL3包含與SEQ ID NO:45具有至少80%一致性(諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性)之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH1及VH3包含與SEQ ID NO:43具有至少80%一致性(諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性)之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1及VL3包含與SEQ ID NO:45具有至少80%一致性(諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性)之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH1及VH3包含與SEQ ID NO:44具有至少80%一致性(諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性)之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1及VL3包含SEQ ID NO:45之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH1及VH3包含SEQ ID NO:43之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1及VL3包含SEQ ID NO:45之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH1及VH3包含SEQ ID NO:44之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1及VL3包含與SEQ ID NO:297具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH1及VH3包含與SEQ ID NO:293具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL1及VL3包含與SEQ ID NO:305具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH1及VH3包含與SEQ ID NO:301具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列。
在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2及VH2係與TAA或免疫刺激受體特異性結合。在一些態樣中，免疫刺激受體為CD28。在一些態樣中，TAA為cMet、Trop2、CD20、CD19、HER2、HER3、A2AR、APRIL、EGFR、FGFR、BAFF、BAFFR、BCMA、BTK、BTLA、B7DC、B7H1、B7H4、DLL3、ENTPD1、FCER1A、FCER1、FLAP、FOLH1、MUC-1、CD133、MUC-16、LAMP1、CD38、PD-L1、CEACAM5、STEAP1或EpCAM。在一些態樣中，TAA為HER2。
在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:34或40具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:35或41具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:36或42具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH2包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:31或37具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:32或38具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:33或39具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:34具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:35具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:36具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH2包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:31具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:32具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:33具有至少90%一致性的胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:40具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:41具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:42具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH2包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:37具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:38具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:39具有至少90%一致性的胺基酸序列。如本文所用，「至少90%一致性」包括與所敍述參考序列具有至少91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%及100%一致性。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:34之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:35之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:36之胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH2包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:31之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:32之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:33之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:40之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:41之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:42之胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH2包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:37之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:38之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:39之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:274具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:275具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:276具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH2包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:270具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:271具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:272具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:282具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:283具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:284具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH2包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:278具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:279具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:280具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:290具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:291具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:292具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH2包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:286具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:287具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:288具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:314具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:315具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:316具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH2包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:310具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:311具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:312具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:322具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:323具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:324具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或抗原結合多肽複合物之VH2包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:318具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:319具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:320具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列。
在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2包含與SEQ ID NO:47或49具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH2包含與SEQ ID NO:46或48具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2包含與SEQ ID NO:47具有至少80%一致性(諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性)之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH2包含與SEQ ID NO:46具有至少80%一致性(諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性)之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2包含與SEQ ID NO:49具有至少80%一致性(諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性)之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH2包含與SEQ ID NO:48具有至少80%一致性(諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性)之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2包含SEQ ID NO:47之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH2包含SEQ ID NO:46之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2包含SEQ ID NO:49之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH2包含SEQ ID NO:48之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2包含與SEQ ID NO:273具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH2包含與SEQ ID NO:269具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2包含與SEQ ID NO:281具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH2包含與SEQ ID NO:277具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2包含與SEQ ID NO:289具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH2包含與SEQ ID NO:285具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2包含與SEQ ID NO:313具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH2包含與SEQ ID NO:309具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，抗原結合多肽複合物之VL2包含與SEQ ID NO:321具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列，及/或抗原結合多肽複合物之VH2包含與SEQ ID NO:317具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列。
在一些態樣中，與CD3特異性結合之抗原結合多肽複合物之VL包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:22、28、185、298及306中之任一者具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:23、29、186、299及307中之任一者具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:24、30、187、300及308中之任一者具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列。在一些態樣中，與CD3特異性結合之抗原結合多肽複合物之VL包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:22具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:23具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:24具有至少90%一致性的胺基酸序列。在一些態樣中，與CD3特異性結合之抗原結合多肽複合物之VL包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:28具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:29具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:30具有至少90%一致性的胺基酸序列。在一些態樣中，與CD3特異性結合之抗原結合多肽複合物之VL包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:185具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:186具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:187具有至少90%一致性的胺基酸序列。如本文所用，「至少90%一致性」包括與所敍述參考序列具有至少91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%及100%一致性。在一些態樣中，與CD3特異性結合之抗原結合多肽複合物之VL包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:22之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:23之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:24之胺基酸序列。在一些態樣中，與CD3特異性結合之抗原結合多肽複合物之VL包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:28之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:29之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:30之胺基酸序列。在一些態樣中，與CD3特異性結合之抗原結合多肽複合物之VL包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:185之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:186之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:187之胺基酸序列。在一些態樣中，與CD3特異性結合之抗原結合多肽複合物之VL包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:298具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:299具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:300具有至少90%一致性的胺基酸序列。在一些態樣中，與CD3特異性結合之抗原結合多肽複合物之VL包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:306具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:307具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:308具有至少90%一致性的胺基酸序列。
在一些態樣中，與CD3特異性結合之抗原結合多肽複合物之VH包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:19、25、182、294及302中之任一者具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:20、26、183、295及303中之任一者具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:21、27、184、296及304中之任一者具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列。在一些態樣中，與CD3特異性結合之抗原結合多肽複合物之VH包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:19具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:20具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:21具有至少90%一致性的胺基酸序列。在一些態樣中，與CD3特異性結合之抗原結合多肽複合物之VH包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:25具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:26具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:27具有至少90%一致性的胺基酸序列。在一些態樣中，與CD3特異性結合之抗原結合多肽複合物之VH包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:182具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:183具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:184具有至少90%一致性的胺基酸序列。如本文所用，「至少90%一致性」包括與所敍述參考序列具有至少91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%及100%一致性。在一些態樣中，與CD3特異性結合之抗原結合多肽複合物之VH包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:19之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:20之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:21之胺基酸序列。在一些態樣中，與CD3特異性結合之抗原結合多肽複合物之VH包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:25之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:26之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:27之胺基酸序列。在一些態樣中，與CD3特異性結合之抗原結合多肽複合物之VH包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:182之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:183之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:184之胺基酸序列。在一些態樣中，與CD3特異性結合之抗原結合多肽複合物之VH包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:294具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:295具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:296具有至少90%一致性的胺基酸序列。在一些態樣中，與CD3特異性結合之抗原結合多肽複合物之VH包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:302具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:303具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:304具有至少90%一致性的胺基酸序列。
在一些態樣中，與CD3特異性結合之抗原結合多肽複合物之VL包含與SEQ ID NO:45具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性的胺基酸序列，及/或與CD3特異性結合之抗原結合多肽複合物之VH包含與SEQ ID NO:43或44具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性的胺基酸序列。在一些態樣中，與CD3特異性結合之抗原結合多肽複合物之VL包含與SEQ ID NO:45具有至少80%一致性(諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性)的胺基酸序列，及/或與CD3特異性結合之抗原結合多肽複合物之VH包含與SEQ ID NO:43具有至少80%一致性(諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性)的胺基酸序列。在一些態樣中，與CD3特異性結合之抗原結合多肽複合物之VL包含與SEQ ID NO:45具有至少80%一致性(諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性)的胺基酸序列，及/或與CD3特異性結合之抗原結合多肽複合物之VH包含與SEQ ID NO:44具有至少80%一致性(諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性)的胺基酸序列。在一些態樣中，與CD3特異性結合之抗原結合多肽複合物之VL包含SEQ ID NO:45的胺基酸序列，及/或與CD3特異性結合之抗原結合多肽複合物之VH包含SEQ ID NO:43的胺基酸序列。在一些態樣中，與CD3特異性結合之抗原結合多肽複合物之VL包含SEQ ID NO:45的胺基酸序列，及/或與CD3特異性結合之抗原結合多肽複合物之VH包含SEQ ID NO:44的胺基酸序列。在一些態樣中，與CD3特異性結合之抗原結合多肽複合物之VL包含與SEQ ID NO:297具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性的胺基酸序列，及/或與CD3特異性結合之抗原結合多肽複合物之VH包含與SEQ ID NO:293具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性的胺基酸序列。在一些態樣中，與CD3特異性結合之抗原結合多肽複合物之VL包含與SEQ ID NO:305具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性的胺基酸序列，及/或與CD3特異性結合之抗原結合多肽複合物之VH包含與SEQ ID NO:301具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性的胺基酸序列。
在一些態樣中，與TAA或免疫刺激受體特異性結合之抗原結合多肽複合物之VL包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:34或40具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:35或41具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:36或42具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，與TAA或免疫刺激受體特異性結合之抗原結合多肽複合物之VL包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:34具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:35具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:36具有至少90%一致性的胺基酸序列。在一些態樣中，與TAA或免疫刺激受體特異性結合之抗原結合多肽複合物之VL包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:40具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:41具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:42具有至少90%一致性的胺基酸序列。如本文所用，「至少90%一致性」包括與所敍述參考序列具有至少91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%及100%一致性。在一些態樣中，與TAA或免疫刺激受體特異性結合之抗原結合多肽複合物之VL包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:34之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:35之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:36之胺基酸序列。在一些態樣中，與TAA或免疫刺激受體特異性結合之抗原結合多肽複合物之VL包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:40之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:41之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:42之胺基酸序列。在一些態樣中，與TAA或免疫刺激受體特異性結合之抗原結合多肽複合物之VL包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:274具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:275具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:276具有至少90%一致性的胺基酸序列。具有至少90%一致性的胺基酸序列。在一些態樣中，與TAA或免疫刺激受體特異性結合之抗原結合多肽複合物之VL包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:282具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:283具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:284具有至少90%一致性的胺基酸序列。在一些態樣中，與TAA或免疫刺激受體特異性結合之抗原結合多肽複合物之VL包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:290具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:291具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:292具有至少90%一致性的胺基酸序列。在一些態樣中，與TAA或免疫刺激受體特異性結合之抗原結合多肽複合物之VL包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:314具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:315具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:316具有至少90%一致性的胺基酸序列。在一些態樣中，與TAA或免疫刺激受體特異性結合之抗原結合多肽複合物之VL包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:322具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:323具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:324具有至少90%一致性的胺基酸序列。
在一些態樣中，與TAA或免疫刺激受體特異性結合之抗原結合多肽複合物之VH包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:31或37具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:32或38具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:33或39具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列。在一些態樣中，與TAA或免疫刺激受體特異性結合之抗原結合多肽複合物之VH包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:31具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:32具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:33具有至少90%一致性的胺基酸序列。在一些態樣中，與TAA或免疫刺激受體特異性結合之抗原結合多肽複合物之VH包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:37具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:38具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:39具有至少90%一致性的胺基酸序列。如本文所用，「至少90%一致性」包括與所敍述參考序列具有至少91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%及100%一致性。在一些態樣中，與TAA或免疫刺激受體特異性結合之抗原結合多肽複合物之VH包含：CDR1，包含SEQ ID NO:31之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:32之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:33之胺基酸序列。在一些態樣中，與TAA或免疫刺激受體特異性結合之抗原結合多肽複合物之VH包含：CDR1，包含SEQ ID NO:37之胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:38之胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:39之胺基酸序列。在一些態樣中，與TAA或免疫刺激受體特異性結合之抗原結合多肽複合物之VH包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:270具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:271具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:272具有至少90%一致性的胺基酸序列。在一些態樣中，與TAA或免疫刺激受體特異性結合之抗原結合多肽複合物之VH包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:278具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:279具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:280具有至少90%一致性的胺基酸序列。在一些態樣中，與TAA或免疫刺激受體特異性結合之抗原結合多肽複合物之VH包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:286具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:287具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:288具有至少90%一致性的胺基酸序列。在一些態樣中，與TAA或免疫刺激受體特異性結合之抗原結合多肽複合物之VH包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:310具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:312具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:313具有至少90%一致性的胺基酸序列。在一些態樣中，與TAA或免疫刺激受體特異性結合之抗原結合多肽複合物之VH包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:318具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:319具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:320具有至少90%一致性的胺基酸序列。
在一些態樣中，與TAA或免疫刺激受體特異性結合之抗原結合多肽複合物之VL包含與SEQ ID NO:47或49具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性的胺基酸序列，及/或與TAA或免疫刺激受體特異性結合之VH包含與SEQ ID NO:46或48具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性的胺基酸序列。在一些態樣中，與TAA或免疫刺激受體特異性結合之抗原結合多肽複合物之VL包含與SEQ ID NO:47具有至少80%一致性(諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性)的胺基酸序列，及/或與TAA或免疫刺激受體特異性結合之VH包含與SEQ ID NO:46具有至少80%一致性(諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性)的胺基酸序列。在一些態樣中，與TAA或免疫刺激受體特異性結合之抗原結合多肽複合物之VL包含與SEQ ID NO:49具有至少80%一致性(諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性)的胺基酸序列，及/或與TAA或免疫刺激受體特異性結合之VH包含與SEQ ID NO:48具有至少80%一致性(諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性)的胺基酸序列。在一些態樣中，與TAA或免疫刺激受體特異性結合之抗原結合多肽複合物之VL包含SEQ ID NO:47的胺基酸序列，及/或與TAA或免疫刺激受體特異性結合之VH包含SEQ ID NO:46的胺基酸序列。在一些態樣中，與TAA或免疫刺激受體特異性結合之抗原結合多肽複合物之VL包含SEQ ID NO:49的胺基酸序列，及/或與TAA或免疫刺激受體特異性結合之VH包含SEQ ID NO:48的胺基酸序列。在一些態樣中，與TAA或免疫刺激受體特異性結合之抗原結合多肽複合物之VL包含與SEQ ID NO:273具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性的胺基酸序列，及/或與TAA或免疫刺激受體特異性結合之VH包含與SEQ ID NO:269具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性的胺基酸序列。在一些態樣中，與TAA或免疫刺激受體特異性結合之抗原結合多肽複合物之VL包含與SEQ ID NO:281具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性的胺基酸序列，及/或與TAA或免疫刺激受體特異性結合之VH包含與SEQ ID NO:277具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性的胺基酸序列。在一些態樣中，與TAA或免疫刺激受體特異性結合之抗原結合多肽複合物之VL包含與SEQ ID NO:289具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性的胺基酸序列，及/或與TAA或免疫刺激受體特異性結合之VH包含與SEQ ID NO:285具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性的胺基酸序列。在一些態樣中，與TAA或免疫刺激受體特異性結合之抗原結合多肽複合物之VL包含與SEQ ID NO:313具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性的胺基酸序列，及/或與TAA或免疫刺激受體特異性結合之VH包含與SEQ ID NO:309具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性的胺基酸序列。在一些態樣中，與TAA或免疫刺激受體特異性結合之抗原結合多肽複合物之VL包含與SEQ ID NO:321具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性的胺基酸序列，及/或與TAA或免疫刺激受體特異性結合之VH包含與SEQ ID NO:317具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性的胺基酸序列。
為避免疑問，本文所描述之所有抗原結合多肽複合物結構可與本文所描述之任一或多個目標組合。本文中與本發明之抗原結合多肽複合物之目標有關的任何及所有揭示內容一般均適用，且同等地、無條件地適用於本文所描述之每一種抗原結合多肽複合物。為避免疑問，本文所描述之每一種抗原結合多肽複合物中的VL1、VL2、VL3、VL4、VH1、VH2、VH3及/或VH4可獨立地與該等尤其較佳目標中之任一者結合。
在一些態樣中，本文中所描述之抗原結合多肽複合物結構之TNF1、TNF2及TNF3各自為TNFSF配體之細胞外域。在一些態樣中，TNF1、TNF2及TNF3選自由以下組成之群：OX40L (TNFSF4)、4-1BBL (TNFSF9)、TNF、TNF相關細胞凋亡誘導配體(TRAIL)、CD40L (TNFSF5)、CD27L (TNFSF7)、CD30L (TNFSF8)、FasL (TNFSF6)、EDAM、LTA (TNFSF1)、LTB (TNFSF3)、CD153 (TNFSF8)、RANKL (TNFSF11)、TWEAK (TNFSF12)、APRIL (TNFSF13)、BAFF (TNFSF13B)、LIGHT (TNFSF14)、VEGI (TNFSF15)及GITRL (TNFSF18)。在一些態樣中，TNF1、TNF2及TNF3各自為OX40L或4-1BBL。在一些態樣中，TNF1、TNF2及TNF3各自為OX40L。在一些態樣中，TNF1、TNF2及TNF3各自為4-1BBL。在一些態樣中，TNF1、TNF2及TNF3分別為OX40L、OX40L及4-1BBL。在一些態樣中，TNF1、TNF2及TNF3分別為OX40L、4-1BBL及4-1BBL。在一些態樣中，TNF1、TNF2及TNF3分別為OX40L、4-1BBL及OX40L。在一些態樣中，TNF1、TNF2及TNF3分別為4-1BBL、OX40L及OX40L。在一些態樣中，TNF1、TNF2及TNF3分別為4-1BBL、OX40L及4-1BBL。在一些態樣中，TNF1、TNF2及TNF3分別為4-1BBL、4-1BBL及OX40L。可使用之例示性OX40L及4-1BBL序列為已知的且在本文中進一步描述。
在一些態樣中，本文中所描述之抗原結合多肽複合物包含含有與以下中之任一者具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列的多肽：SEQ ID NO:58、60、62、64、66、68、70、72、74、76、78、80、82、84、86、88、90、92、94、96、98、100、102、104、106、108、110、112、114、116、118、120、122、124、126、128、130、132、134、136、138、140、142、144、146、178、180及188-228。在一些態樣中，抗原結合複合物包含含有與SEQ ID NO:58具有至少80% (諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%)一致性之胺基酸序列的多肽。在一些態樣中，抗原結合複合物包含含有與SEQ ID NO:64具有至少80% (諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%)一致性之胺基酸序列的多肽。在一些態樣中，抗原結合複合物包含含有與SEQ ID NO:118具有至少80% (諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%)一致性之胺基酸序列的多肽。在一些態樣中，抗原結合複合物包含含有與SEQ ID NO:120具有至少80% (諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%)一致性之胺基酸序列的多肽。在一些態樣中，抗原結合複合物包含含有與SEQ ID NO:176具有至少80% (諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%)一致性之胺基酸序列的多肽。在一些態樣中，抗原結合複合物包含含有與SEQ ID NO:178具有至少80% (諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%)一致性之胺基酸序列的多肽。在一些態樣中，抗原結合複合物包含含有與SEQ ID NO:180具有至少80% (諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%)一致性之胺基酸序列的多肽。在一些態樣中，抗原結合複合物包含含有SEQ ID NO:58之胺基酸序列的多肽。在一些態樣中，抗原結合複合物包含含有SEQ ID NO:64之胺基酸序列的多肽。在一些態樣中，抗原結合複合物包含含有SEQ ID NO:118之胺基酸序列的多肽。在一些態樣中，抗原結合複合物包含含有SEQ ID NO:120之胺基酸序列的多肽。在一些態樣中，抗原結合複合物包含含有SEQ ID NO:176之胺基酸序列的多肽。在一些態樣中，抗原結合複合物包含含有SEQ ID NO:178之胺基酸序列的多肽。在一些態樣中，抗原結合複合物包含含有SEQ ID NO:180之胺基酸序列的多肽。
在一些態樣中，抗原結合多肽複合物包含與CD3特異性結合之重鏈。在一些態樣中，重鏈包含與SEQ ID NO:178具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，重鏈包含SEQ ID NO:178之胺基酸序列。
在一些態樣中，抗原結合多肽複合物包含與CD3特異性結合之重鏈及與CD3特異性結合之輕鏈。在一些態樣中，重鏈包含與SEQ ID NO:178具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列；及輕鏈包含與SEQ ID NO:176具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，重鏈包含SEQ ID NO:178之胺基酸序列；及輕鏈包含SEQ ID NO:176之胺基酸序列。
在一些態樣中，抗原結合複合物包含：含有與SEQ ID NO:58具有至少80% (諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%)一致性之胺基酸序列的多肽，及含有與SEQ ID NO:64具有至少80% (諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%)一致性之胺基酸序列的多肽。在一些態樣中，抗原結合複合物包含：含有與SEQ ID NO:58具有至少80% (諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%)一致性之胺基酸序列的多肽，及含有與SEQ ID NO:178具有至少80% (諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%)一致性之胺基酸序列的多肽。在一些態樣中，抗原結合複合物包含：含有與SEQ ID NO:118具有至少80% (諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%)一致性之胺基酸序列的多肽，及含有與SEQ ID NO:120具有至少80% (諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%)一致性之胺基酸序列的多肽。在一些態樣中，抗原結合複合物包含：含有與SEQ ID NO:118具有至少80% (諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%)一致性之胺基酸序列的多肽，及含有與SEQ ID NO:180具有至少80% (諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%)一致性之胺基酸序列的多肽。
在一些態樣中，本文中所描述之抗原結合多肽複合物包含含有由與以下中之任一者具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性之聚核苷酸編碼之胺基酸序列的多肽：SEQ ID NO:59、61、63、65、67、69、71、73、75、77、79、81、83、85、87、89、91、93、95、97、99、101、103、105、107、109、111、113、115、117、119、121、123、125、127、129、131、133、135、137、139、141、143、145、147、179、181及229-268。在一些態樣中，抗原結合複合物包含含有由與SEQ ID NO:59具有至少80% (諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%)一致性之聚核苷酸編碼之胺基酸序列的多肽。在一些態樣中，抗原結合複合物包含含有由與SEQ ID NO:65具有至少80% (諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%)一致性之聚核苷酸編碼之胺基酸序列的多肽。在一些態樣中，抗原結合複合物包含含有由與SEQ ID NO:119具有至少80% (諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%)一致性之聚核苷酸編碼之胺基酸序列的多肽。在一些態樣中，抗原結合複合物包含含有由與SEQ ID NO:121具有至少80% (諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%)一致性之聚核苷酸編碼之胺基酸序列的多肽。在一些態樣中，抗原結合複合物包含含有由與SEQ ID NO:177具有至少80% (諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%)一致性之聚核苷酸編碼之胺基酸序列的多肽。在一些態樣中，抗原結合複合物包含含有由與SEQ ID NO:179具有至少80% (諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%)一致性之聚核苷酸編碼之胺基酸序列的多肽。在一些態樣中，抗原結合複合物包含含有由與SEQ ID NO:181具有至少80% (諸如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%)一致性之聚核苷酸編碼之胺基酸序列的多肽。在一些態樣中，抗原結合複合物包含含有由SEQ ID NO:59之聚核苷酸編碼之胺基酸序列的多肽。在一些態樣中，抗原結合複合物包含含有由SEQ ID NO:65之聚核苷酸編碼之胺基酸序列的多肽。在一些態樣中，抗原結合複合物包含含有由SEQ ID NO:119之聚核苷酸編碼之胺基酸序列的多肽。在一些態樣中，抗原結合複合物包含含有由SEQ ID NO:121之聚核苷酸編碼之胺基酸序列的多肽。在一些態樣中，抗原結合複合物包含含有由SEQ ID NO:177之聚核苷酸編碼之胺基酸序列的多肽。在一些態樣中，抗原結合複合物包含含有由SEQ ID NO:179之聚核苷酸編碼之胺基酸序列的多肽。在一些態樣中，抗原結合複合物包含含有由SEQ ID NO:181之聚核苷酸編碼之胺基酸序列的多肽。
用於製備、篩選及工程改造含有此類序列之抗原結合複合物及抗體之分子生物學及重組DNA方法為熟知的且描述於例如Adair等人, Human Antibodies, 5(1-2):41-47, 1994；Kostelny等人, J Immunol, 148(5):1547-1553 (1992)；Shiraiwa等人, Methods, 154:10-20, 2019；及Zola, 「Monoclonal Antibodies: A Manual of Techniques,」 1987, 第1版, CRC Press；以及Steinitz, Human Antibodies, 18(1-2):1-10, 2009中。
在一些態樣中，本發明之抗原結合多肽複合物(例如抗體或其抗原結合片段)包含免疫球蛋白鉸鏈。在一些態樣中，免疫球蛋白鉸鏈包含上鉸鏈區、中鉸鏈區、下鉸鏈區或其組合。
如本文所用，「特異性結合」之抗原結合多肽複合物(例如抗體或其抗原結合片段)或其區域或域係指其藉由其抗原結合域與抗原決定基結合，且結合需要抗原結合域與抗原決定基之間存在一些互補性。在經由抗原結合域與抗原決定基結合比與隨機、不相關抗原決定基結合更容易的情況下，發生針對該抗原決定基的特異性結合。
如本文所用，「抗原決定基」係指可與抗原結合多肽複合物(例如抗體或其抗原結合片段)特異性結合之抗原的局部化區。抗原決定基可為例如多肽之連續胺基酸(線性或連續抗原決定基)，或抗原決定基可例如由一或多個多肽之兩個或更多個非連續區域聚集在一起得到(構形、非線性、不連續或非連續抗原決定基)。在一些態樣中，與抗體或其抗原結合片段結合之抗原決定基可藉由例如NMR光譜分析、X射線繞射結晶學研究、ELISA分析、氫/氘交換偶聯質譜法(例如液相層析-電噴霧質譜分析)、基於陣列之寡肽掃描分析及/或誘變定位(例如定點誘變定位)來測定。參見例如Giegé R等人, (1994) Acta Crystallogr D Biol Crystallogr 50(Pt 4): 339-350；McPherson A (1990) Eur J Biochem 189: 1-23；Chayen NE (1997) Structure 5: 1269-1274；McPherson A (1976) J Biol Chem 251: 6300-6303；Meth Enzymol (1985)第114及115卷, 編者Wyckoff HW等人,美國公開案第2004/0014194號), Bricogne G (1993) Acta Crystallogr D Biol Crystallogr 49(Pt 1): 37-60，Bricogne G (1997) Meth Enzymol 276A: 361-423,編者Carter CW及Roversi等人, (2000) Acta Crystallogr D Biol Crystallogr 56(Pt 10): 1316-1323 (X射線繞射結晶學研究)；及Champe等人, (1995) J Biol Chem 270: 1388-1394以及Cunningham BC及Wells JA (1989) Science 244: 1081-1085 (誘變定位)。
特異性結合可由「結合親和力」表示。結合親和力係指反映結合對(例如抗原結合多肽複合物與抗原)成員之間的1:1相互作用的固有結合親和力。結合親和力可以此項技術中已知之若干方式量測及/或表述，包括但不限於平衡解離常數(K
D)。K
D自k
off/k
on之商計算，其中k
on係指例如抗原結合多肽複合物對於抗原之結合速率常數，且k
off係指例如抗原結合多肽複合物自抗原之解離。k
on及k
off可藉由一般熟習此項技術者已知之技術確定，諸如Octet BLI、BIAcore®或KinExA。
因此，在一些態樣中，本發明之抗原結合多肽複合物為抗體或其抗原結合片段。
在一些態樣中，抗體或其抗原結合片段係以約10 μM至約1 pM之平衡解離常數(K
D)與抗原特異性結合。在一些態樣中，抗體為IgG、IgM、IgE、IgA或IgD。舉例而言，抗體可為IgG。舉例而言，抗體可為IgM。舉例而言，抗體可為IgE。舉例而言，抗體可為IgA。舉例而言，抗體可為IgD。在一些態樣中，IgG為IgG1、IgG2、IgG3或IgG4。舉例而言，抗體可為IgG1。舉例而言，抗體可為IgG2。舉例而言，抗體可為IgG3。舉例而言，抗體可為IgG4。在一些態樣中，抗原結合片段為Fab、scFab、Fab'、F(ab')
2、Fv或scFv。舉例而言，抗原結合片段可為Fab。舉例而言，抗原結合片段可為scFab。舉例而言，抗原結合片段可為Fab'。舉例而言，抗原結合片段可為F(ab')2。舉例而言，抗原結合片段可為Fv。舉例而言，抗原結合片段可為scFv。在一些態樣中，抗體為人類抗體或人源化抗體。舉例而言，抗體可為人類抗體。舉例而言，抗體可為人源化抗體。
在一些態樣中，本發明之抗原結合多肽複合物(例如抗體或其抗原結合片段)為二價、三價、四價、五價或六價的。
III. 胺基酸連接子
在一些態樣中，本發明之抗原結合多肽複合物(例如抗體或其抗原結合片段)在抗原結合多肽複合物之一或多個區之間包含一或多個胺基酸連接子。
如本文所用，「胺基酸連接子」係指單個胺基酸或短胺基酸序列，其能夠使本文所描述之本發明之兩個多肽區域以維持或促進與多肽區域相關之功能的穩定方式接合。在一些態樣中，胺基酸連接子在本文中之抗原結合多肽複合物之結構中由縮寫「l」或「L」及數字表示(例如L1表示第一連接子，L2表示第二連接子，L3表示第三連接子，L4表示第四連接子，L5表示第五連接子，L6表示第六連接子，L7表示第七連接子，L8表示第八連接子等等)。在一些態樣中，此類列舉之胺基酸連接子(例如L1)的序列可與任何其他列舉之胺基酸連接子(例如L2等)相同或不同。此外，在一些態樣中，一個多肽中存在之所列舉之胺基酸連接子(例如本文所描述之抗原結合多肽複合物結構之第一多肽上之L1)的序列可與另一多肽中存在之相同列舉之胺基酸連接子(例如本文所描述之抗原結合多肽複合物結構之第二多肽、第三多肽等上之L1)相同或不同。
在一些態樣中，胺基酸連接子之長度為0個胺基酸(亦即，胺基酸連接子不存在)至約50個胺基酸(例如本文所描述之抗原結合多肽複合物結構之第一、第二、第三、第四等多肽之L1、L2、L3、L4、L5、L6、L7、L8、L9、L10、L11、L12、L13、L14、L15、L16、L17、L18、L19、L20等至L96或更多中之一或多者)。在一些態樣中，胺基酸連接子之長度為0個胺基酸至約45個胺基酸、0個胺基酸至約40個胺基酸、0個胺基酸至約35個胺基酸、0個胺基酸至約30個胺基酸、0個胺基酸至約25個胺基酸、0個胺基酸至約20個胺基酸、0個胺基酸至約15個胺基酸、0個胺基酸至約10個胺基酸、0個胺基酸至約5個胺基酸、約1個胺基酸至約45個胺基酸、約1個胺基酸至約40個胺基酸、約1個胺基酸至約35個胺基酸、約1個胺基酸至約30個胺基酸、約1個胺基酸至約25個胺基酸、約1個胺基酸至約20個胺基酸、1個胺基酸至約15個胺基酸、約1個胺基酸至約10個胺基酸、約1個胺基酸至約5個胺基酸、約5個胺基酸至約50個胺基酸、約5個胺基酸至約45個胺基酸、約5個胺基酸至約40個胺基酸、約5個胺基酸至約35個胺基酸、約5個胺基酸至約30個胺基酸、約5個胺基酸至約25個胺基酸、約5個胺基酸至約20個胺基酸、約5個胺基酸至約15個胺基酸、約5個胺基酸至約10個胺基酸、約10個胺基酸至約50個胺基酸、約10個胺基酸至約45個胺基酸、約10個胺基酸至約40個胺基酸、約10個胺基酸至約35個胺基酸、約10個胺基酸至約30個胺基酸、約10個胺基酸至約25個胺基酸、約10個胺基酸至約20個胺基酸、約10個胺基酸至約15個胺基酸、約15個胺基酸至約50個胺基酸、約15個胺基酸至約45個胺基酸、約15個胺基酸至約40個胺基酸、約15個胺基酸至約35個胺基酸、約15個胺基酸至約30個胺基酸、約15個胺基酸至約25個胺基酸、約15個胺基酸至約20個胺基酸、約20個胺基酸至約50個胺基酸、約20個胺基酸至約45個胺基酸、約20個胺基酸至約40個胺基酸、約20個胺基酸至約35個胺基酸、約20個胺基酸至約30個胺基酸、約20個胺基酸至約25個胺基酸、約25個胺基酸至約50個胺基酸、約25個胺基酸至約45個胺基酸、約25個胺基酸至約40個胺基酸、約25個胺基酸至約35個胺基酸、約25個胺基酸至約30個胺基酸、約30個胺基酸至約50個胺基酸、約30個胺基酸至約45個胺基酸、約30個胺基酸至約40個胺基酸、約30個胺基酸至約35個胺基酸、約40個胺基酸至約50個胺基酸、約40個胺基酸至約45個胺基酸或約45個胺基酸至約50個胺基酸。
在一些態樣中，胺基酸連接子具有0個胺基酸(亦即胺基酸連接子不存在)或約1、約2、約3、約4、約5、約6、約7、約8、約9、約10、約11、約12、約13、約14、約15、約16、約17、約18、約19、約20、約25、約30、約35、約40、約45或約50個胺基酸(例如本文所描述之抗原結合多肽複合物結構之第一、第二、第三、第四等多肽之L1、L2、L3、L4、L5、L6、L7、L8、L9、L10、L11、L12、L13、L14、L15、L16、L17、L18、L19、L20等至L96或更多中之一或多者)。
在一些態樣中，胺基酸連接子由一或多個胺基酸殘基(例如本文所描述之抗原結合多肽複合物結構之第一、第二、第三、第四等多肽之L1、L2、L3、L4、L5、L6、L7、L8、L9、L10、L11、L12、L13、L14、L15、L16、L17、L18、L19、L20等至L96或更多中之一或多者)組成。在一些態樣中，胺基酸殘基選自由以下組成之群：甘胺酸、丙胺酸、絲胺酸、蘇胺酸、半胱胺酸、天冬醯胺、麩醯胺酸、白胺酸、異白胺酸、纈胺酸、脯胺酸、組胺酸、天冬胺酸、麩胺酸、離胺酸、精胺酸、甲硫胺酸、苯丙胺酸、色胺酸及酪胺酸。
在一些態樣中，本發明之胺基酸連接子為非免疫原性。在一些態樣中，非免疫原性連接子由絲胺酸、甘胺酸及/或丙胺酸殘基組成，或由絲胺酸及/或甘胺酸殘基組成。在一些態樣中，本發明之胺基酸連接子不含T細胞抗原決定基或共同T細胞抗原決定基。
在一些態樣中，胺基酸連接子由丙胺酸、半胱胺酸、甘胺酸、異白胺酸、白胺酸、甲硫胺酸、苯丙胺酸、脯胺酸、色胺酸、酪胺酸、纈胺酸中之一或多個殘基組成(例如本文所描述之抗原結合多肽複合物結構之第一、第二、第三、第四等多肽之L1、L2、L3、L4、L5、L6、L7、L8、L9、L10、L11、L12、L13、L14、L15、L16、L17、L18、L19、L20等至L96或更多中之一或多者)。
可與本發明之抗原結合多肽複合物(例如抗體或其抗原結合片段)一起使用之胺基酸連接子序列為熟知的，且可使用常規分子生物學及重組DNA技術併入本發明之抗原結合多肽複合物中。參見例如Chen等人, Adv Drug Deliv Rev., 65(10):1357-1369, 2013；及Chichili等人, Protein Sci., 22(2):153-167, 2013。
在一些態樣中，胺基酸連接子(例如本文所描述之抗原結合多肽複合物結構之第一、第二、第三、第四等多肽之L1、L2、L3、L4、L5、L6、L7、L8、L9、L10、L11、L12、L13、L14、L15、L16、L17、L18、L19、L20等至L96或更多中之一或多者)具有SEQ ID NO:3-10及148-175中之任一者的序列，或與SEQ ID NO:3-10及148-175中之任一者具有至少50%、至少60%、至少70%、至少80%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性的序列。在一些態樣中，胺基酸連接子包含SEQ ID NO:3-10及148-175中之任一者之序列或由其組成。在一些態樣中，胺基酸連接子包含以下或由以下組成：與SEQ ID NO:10至少80% (諸如至少85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%)一致之胺基酸序列。在一些態樣中，胺基酸連接子包含SEQ ID NO:10之序列或由其組成。在一些態樣中，胺基酸連接子包含以下或由以下組成：與SEQ ID NO:3至少80% (諸如至少85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%)一致之胺基酸序列。在一些態樣中，胺基酸連接子包含SEQ ID NO:3之序列或由其組成。
在一些態樣中，本文中所描述之抗原結合多肽複合物之多肽結構中VH與VL之間的胺基酸連接子為GGGGSGGSGSGGGGSASGSG (SEQ ID NO:168)或與SEQ ID NO:168具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性的序列。在一些態樣中，本文中所描述之抗原結合多肽複合物之多肽結構中VH與VL之間的胺基酸連接子包含SEQ ID NO:168之序列或由其組成。
在一些態樣中，本文所描述之抗原結合多肽複合物之多肽結構中Fc與TNFSF配體之第一細胞外域之間的胺基酸連接子為GGSGSGGGSGG (SEQ ID NO:149)、GGSSGSGSGGSGSSG (SEQ ID NO:150)或GGSGSGGGSGLREGPELSPDDPAGLLDLRQG (SEQ ID NO:151)，或與SEQ ID NO:149-151中之任一者具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性的序列。在一些態樣中，胺基酸連接子包含以下或由以下組成：與SEQ ID NO:149至少80% (諸如至少85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%)一致之胺基酸序列。在一些態樣中，胺基酸連接子包含以下或由以下組成：與SEQ ID NO:150至少80% (諸如至少85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%)一致之胺基酸序列。在一些態樣中，胺基酸連接子包含以下或由以下組成：與SEQ ID NO:151至少80% (諸如至少85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%)一致之胺基酸序列。在一些態樣中，胺基酸連接子包含SEQ ID NO:149之序列或由其組成。在一些態樣中，胺基酸連接子包含SEQ ID NO:150之序列或由其組成。在一些態樣中，胺基酸連接子包含SEQ ID NO:151之序列或由其組成。
在一些態樣中，本文中所描述之抗原結合多肽複合物之多肽結構中之VH與Fc之間或CH1與Fc之間的連接子為ASGGSG (SEQ ID NO:161)或與SEQ ID NO:161具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%一致性的序列。在一些態樣中，胺基酸連接子包含SEQ ID NO:161之序列或由其組成。
IV. 可偵測標記及藥物結合物
在一些態樣中，本發明之抗原結合多肽複合物(例如抗體或其抗原結合片段)包含一或多個可偵測標記。含有可偵測標記之抗原結合多肽複合物(例如抗體或其抗原結合片段)適用於治療、診斷、成像(例如放射成像)或基礎研究應用。
在一些態樣中，可偵測標記為放射性標記。放射性標記之實例包括但不限於同位素
3H、
14C、
32P、
35S、
36Cl、
51Cr、
57Co、
58Co、
59Fe、
90Y、
121I、
124I、
125I、
131I、
111In、
117Lu、
211At、
198Au、
67Cu、
225Ac、
213Bi、
99Tc、
186Re及
89Zr。
在一些態樣中，可偵測標記為化學發光標記、螢光標記、酶、生物素或其組合。
在一些態樣中，可偵測標記為肽標籤。在一些態樣中，肽標籤位於多肽或多肽複合物之N端。在一些態樣中，肽標籤位於多肽或多肽複合物之C端。在一些態樣中，肽標籤為親和標籤或融合標籤。
在一些態樣中，可偵測標記為聚組胺酸標籤、聚精胺酸標籤、麩胱甘肽-S-轉移酶(glutathione-S-transferase；GST)、麥芽糖結合蛋白(maltose binding protein；MBP)、幾丁質結合蛋白(chitin binding protein；CBP)、鏈球親生物素蛋白標籤、硫氧還原蛋白(TRX)、聚(NANP)、FLAG標籤、ALFA標籤、V5標籤、Myc標籤、血球凝集素(HA)標籤、Spot標籤、T7標籤、NE標籤或綠色螢光蛋白(green fluorescence protein；GFP)，或其組合。在一些態樣中，聚組胺酸標籤由約4個至約10個組胺酸殘基組成。在一些態樣中，聚組胺酸標籤由約4、約5、約6、約7、約8、約9或約10個組胺酸殘基組成。
可偵測標記及用於將可偵測標記引入多肽中之方法的其他實例為已知的且包括常規的化學、分子生物學及重組DNA技術。參見例如Hnatowich等人, Science, 220(4597):613-615, 1983；Yao等人, Int. J. Mol. Sci., 17(2):194, 2016；Kimple等人, Curr. Protoc. Protein Sci., 73:Unit 9.9, 2013；Sambrook J, Fritsch EF. Molecular Cloning: A Laboratory Manual. Cold Spring Harbor Laboratory Press；Cold Spring Harbor, N.Y.: 1989；Molecular Cell Biology, 第4版, 章節3.5, Purifying, Detecting and Characterizing Proteins；及Mahmoodi等人, Cogent Biology, 5(1):數位物件識別碼(DOI): 10/1080/23312025.2019.1665406。
在一些態樣中，本發明之抗原結合多肽複合物(例如抗體或其抗原結合片段)與藥劑結合作為抗體-藥物結合物(antibody-drug conjugate；ADC)。本發明之ADC適用於治療、診斷、成像(例如放射成像)或基礎研究應用。
在一些態樣中，本發明之抗原結合多肽複合物(例如抗體或其抗原結合片段)與細胞毒性劑、免疫調節劑、成像劑或治療蛋白結合，通常係經由連接子。連接子可包含可裂解單元或可為不可裂解的。可裂解單元包括例如可經由二硫鍵交換裂解之含二硫鍵連接子、可在酸性pH下裂解之酸不穩定連接子及可藉由水解酶、酯酶、肽酶及葡萄糖醛酸苷酶裂解之連接子(例如肽連接子及葡萄糖醛酸苷連接子)。咸信不可裂解連接子經由蛋白水解抗體降解機制釋放藥物。
ADC製備方法為已知的且包括但不限於經由硫醇、醯胺、醛或疊氮化物結合，以及其他常規化學、分子生物學及重組DNA技術。參見例如Yao等人, Int. J. Mol. Sci., 17(2):194, 2016；Sambrook J, Fritsch EF. Molecular Cloning: A Laboratory Manual. Cold Spring Harbor Laboratory Press；Cold Spring Harbor, N.Y.: 1989；Molecular Cell Biology,第4版,章節3.5, Purifying, Detecting and Characterizing Proteins；及Mahmoodi等人, Cogent Biology, 5(1):數位物件識別碼: 10/1080/23312025.2019.1665406。
V. 修飾
在一些態樣中，本發明係針對包含效應功能突變或半衰期延長突變之抗原結合多肽複合物(例如抗體或其抗原結合片段)。
效應功能為體液免疫反應的重要部分且形成先天性與後天性免疫之間的聯繫。大部分效應功能經由抗體之Fc區誘導，該Fc區可與補體蛋白及特定Fc受體相互作用。如本文所用，「效應功能突變」係指胺基酸序列(通常在Fc區中)中之變化，其增加或降低效應功能，例如增加Fc對特定Fc受體之結合親和力或增加抗體依賴性細胞毒性(antibody-dependent cellular cytotoxicity；ADCC)活性。
醫藥活性物質的「半衰期」為一定量之物質投與身體後減少一半所耗費的時間。本發明之抗原結合多肽複合物之「半衰期延長突變」係指胺基酸序列中(通常Fc區中)之變化，其增加抗原結合多肽複合物之半衰期(例如藉由增加Fc受體結合親和力、減緩Fc及Fc受體之解離速率及/或增加的唾液酸化)。
增加功能之效應功能突變之實例包括但不限於Fc區中的以下取代(基於EU編號方案)：S298A/E333A/K334A、S239D/I332E、S239D/A330L/I332E及G236A/S239D/I332E。減少功能之效應功能突變之實例包括但不限於Fc區中的以下取代(基於EU編號方案)：N297A及L234A/L235A。效應功能突變、半衰期延伸部分突變及用於將其併入胺基酸序列中之方法之其他實例為已知的且描述於例如Saunders, 「Conceptual Approaches to Modulating Antibody Effector Functions and Circulation Half-Life」, Front. Immunol. 2019年6月7日中。
在一些態樣中，本發明係針對包含一或多個杵-臼修飾之抗原結合多肽複合物(例如抗體或其抗原結合片段)。
如本文所用，術語「杵-臼修飾」係指導引兩種多肽配對以促成異二聚化的基因修飾。在一些態樣中，修飾係在兩種多肽相互作用的界面處將隆凸(杵)引入一種多肽且將空腔(臼)引入另一種多肽。在一些態樣中，可藉由僅引入臼修飾來產生杵-臼修飾，例如藉由置換側鏈比原始胺基酸殘基更小的胺基酸殘基來產生(例如一或多個絲胺酸、蘇胺酸、纈胺酸或丙胺酸殘基的取代，或其組合)。在一些態樣中，可藉由僅引入杵修飾來產生杵-臼修飾，例如藉由置換側鏈比原始胺基酸殘基更大的胺基酸殘基來產生(例如一或多個色胺酸或酪胺酸殘基的取代，或其組合)。
在一些態樣中，臼包杵修飾存在於兩個Fc區的結合界面、兩個CH2區的結合界面、兩個CH3區的結合界面、CL區與CH1區的結合界面，或VH區與VL區的結合界面中。參見例如美國公開案第2007/0178552號、國際公開案第WO 96/027011號、國際公開案第WO 98/050431號及Zhu等人, Protein Science 6:781-788, 1987。
在一些態樣中，抗原結合多肽複合物包含一個、兩個、三個、四個、五個、六個、七個、八個、九個、十個或更多個杵-臼修飾。
杵-臼修飾為熟知的，且可使用常規分子生物學及重組DNA技術併入本發明之抗原結合多肽複合物中。參見例如美國公開案第2003/0078385號；國際公開案第WO 96/027011號；Ridgway等人, Protein Eng., 9:617-621, 1996；及Merchant等人, Nat. Biotechnol., 16:677-681, 1998。
在一些態樣中，杵-臼修飾為胺基酸取代。如本文所用，此類取代係基於Kabat之EU編號方案描述，該EU編號方案對應於蛋白質資料庫(Protein Data Bank；PDB)中之編號。
在一些態樣中，杵-臼修飾為S354C及/或T366W之杵取代，基於EU編號方案。
在一些態樣中，杵-臼修飾為Y349C、T366S、L368A、Y407V、L234A、L235A、P329A、M428L、N433S、M252Y、S254T、T256E或其任何組合之臼取代，基於EU編號方案。
在一些態樣中，杵-臼修飾為Y349C、T366S、L368A及Y407V之臼取代，基於EU編號方案。在一些態樣中，杵-臼修飾為L234A、L235A及P329A之臼取代，基於EU編號方案。在一些態樣中，杵-臼修飾為L234A及L235A之臼取代，基於EU編號方案。在一些態樣中，杵-臼修飾為M428L及N433S之臼取代，基於EU編號方案。在一些態樣中，杵-臼修飾為M252Y、S254T及T256E之臼取代，基於EU編號方案。
在一些態樣中，抗原結合多肽複合物為IgG1或IgG4抗體，且杵-臼修飾為S354C及T366W之杵取代以及Y349C、T366S、L368A及Y407V之臼取代。
在一些態樣中，抗原結合多肽複合物為IgG1或IgG4抗體，且杵-臼修飾為L234A、L235A及P329A之臼取代。
在一些態樣中，抗原結合多肽複合物為IgG1或IgG4抗體，且杵-臼修飾為L234A及L235A之臼取代。
在一些態樣中，抗原結合多肽複合物為IgG1或IgG4抗體，且杵-臼修飾為M428L及N433S之臼取代。
在一些態樣中，抗原結合多肽複合物為IgG1或IgG4抗體，且杵-臼修飾為M252Y、S254T及T256E之臼取代。
VI. 多肽、聚核苷酸、載體、細胞及蛋白質產生方法
在一些態樣中，本發明係針對包含本文所描述之抗原結合多肽複合物(例如抗體或其抗原結合片段)之一部分的多肽。
在一些態樣中，本發明係針對一種多肽，其包含以下或由以下組成：SEQ ID NO:1-228及269-324中之一或多者的胺基酸序列，或與SEQ ID NO:1-228及269-324中之一或多者具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%一致性的胺基酸序列。在一些態樣中，多肽包含以下或由以下組成：與SEQ ID NO:58具有至少80% (諸如至少85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%)一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，多肽包含以下或由以下組成：與SEQ ID NO:64具有至少80% (諸如至少85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%)一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，多肽包含以下或由以下組成：與SEQ ID NO:118具有至少80% (諸如至少85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%)一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，多肽包含以下或由以下組成：與SEQ ID NO:120具有至少80% (諸如至少85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%)一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，多肽包含以下或由以下組成：與SEQ ID NO:176具有至少80% (諸如至少85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%)一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，多肽包含以下或由以下組成：與SEQ ID NO:178具有至少80% (諸如至少85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%)一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，多肽包含以下或由以下組成：與SEQ ID NO:180具有至少80% (諸如至少85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%)一致性之胺基酸序列。在一些態樣中，多肽包含SEQ ID NO:1-228及269-324中之一或多者之胺基酸序列或由其組成。在一些態樣中，多肽包含SEQ ID NO:58之胺基酸序列或由其組成。在一些態樣中，多肽包含SEQ ID NO:64之胺基酸序列或由其組成。在一些態樣中，多肽包含SEQ ID NO:118之胺基酸序列或由其組成。在一些態樣中，多肽包含SEQ ID NO:120之胺基酸序列或由其組成。在一些態樣中，多肽包含SEQ ID NO:176之胺基酸序列或由其組成。在一些態樣中，多肽包含SEQ ID NO:178之胺基酸序列或由其組成。在一些態樣中，多肽包含SEQ ID NO:180之胺基酸序列或由其組成。
在一些態樣中，本發明係針對一種多肽，其包含以下或由以下組成：SEQ ID NO:12-18、58-147、178、180、188-228及269-324中之一或多者的胺基酸序列，或與SEQ ID NO:12-18、58-147、178及180中之一或多者具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%一致性的胺基酸序列。在一些態樣中，多肽包含以下或由以下組成：SEQ ID NO:12-18、58-147、178、180、188-228及269-324中之一或多者的胺基酸序列。
在一些態樣中，本發明係針對一種多肽，其包含以下或由以下組成：SEQ ID NO:58、60、62、64、66、68、70、72、74、76、78、80、82、84、86、88、90、92、94、96、98、100、102、104、106、108、110、112、114、116、118、120、122、124、126、128、130、132、134、136、138、140、142、144、146、178、180、188-228及269-324中之一或多者的胺基酸序列，或與SEQ ID NO:58、60、62、64、66、68、70、72、74、76、78、80、82、84、86、88、90、92、94、96、98、100、102、104、106、108、110、112、114、116、118、120、122、124、126、128、130、132、134、136、138、140、142、144、146、178、180、188-228及269-324中之一或多者具有至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%一致性的胺基酸序列。在一些態樣中，多肽包含以下或由以下組成：SEQ ID NO:58、60、62、64、66、68、70、72、74、76、78、80、82、84、86、88、90、92、94、96、98、100、102、104、106、108、110、112、114、116、118、120、122、124、126、128、130、132、134、136、138、140、142、144、146、178、180、188-228及269-324中之一或多者的胺基酸序列。
在一些態樣中，本發明係針對一種編碼本文中所描述之抗原結合多肽複合物(例如抗體或其抗原結合片段)之一部分的聚核苷酸。如本文所用，「聚核苷酸」包括DNA及RNA (例如mRNA)。
在一些態樣中，本發明係針對一種聚核苷酸，其包含以下或由以下組成：SEQ ID NO:1-175及229-268中之一或多者的聚核苷酸序列；或一種與SEQ ID NO:1-175及229-268中之一或多者具有至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%一致性的聚核苷酸。在一些態樣中，本發明係針對一種聚核苷酸，其包含SEQ ID NO:1-175及229-268中之一或多者的聚核苷酸序列。在一些態樣中，聚核苷酸包含以下或由以下組成：與SEQ ID NO:59具有至少80% (諸如至少85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%)一致性之聚核苷酸序列。在一些態樣中，聚核苷酸包含以下或由以下組成：與SEQ ID NO:65具有至少80% (諸如至少85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%)一致性之聚核苷酸序列。在一些態樣中，聚核苷酸包含以下或由以下組成：與SEQ ID NO:119具有至少80% (諸如至少85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%)一致性之聚核苷酸序列。在一些態樣中，聚核苷酸包含以下或由以下組成：與SEQ ID NO:121具有至少80% (諸如至少85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%)一致性之聚核苷酸序列。在一些態樣中，聚核苷酸包含以下或由以下組成：與SEQ ID NO:177具有至少80% (諸如至少85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%)一致性之聚核苷酸序列。在一些態樣中，聚核苷酸包含以下或由以下組成：與SEQ ID NO:179具有至少80% (諸如至少85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%)一致性之聚核苷酸序列。在一些態樣中，聚核苷酸包含以下或由以下組成：與SEQ ID NO:181具有至少80% (諸如至少85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%)一致性之聚核苷酸序列。在一些態樣中，聚核苷酸包含SEQ ID NO:59之聚核苷酸序列或由其組成。在一些態樣中，聚核苷酸包含SEQ ID NO:65之聚核苷酸序列或由其組成。在一些態樣中，聚核苷酸包含SEQ ID NO:119之聚核苷酸序列或由其組成。在一些態樣中，聚核苷酸包含SEQ ID NO:121之聚核苷酸序列或由其組成。在一些態樣中，聚核苷酸包含SEQ ID NO:177之聚核苷酸序列或由其組成。在一些態樣中，聚核苷酸包含SEQ ID NO:179之聚核苷酸序列或由其組成。在一些態樣中，聚核苷酸包含SEQ ID NO:181之聚核苷酸序列或由其組成。
在一些態樣中，本發明係針對一種聚核苷酸，其包含以下或由以下組成：SEQ ID NO:59、61、63、65、67、69、71、73、75、77、79、81、83、85、87、89、91、93、95、97、99、101、103、105、107、109、111、113、115、117、119、121、123、125、127、129、131、133、135、137、139、141、143、145、147、179、181及229-268中之一或多者的聚核苷酸序列；或一種與SEQ ID NO:59、61、63、65、67、69、71、73、75、77、79、81、83、85、87、89、91、93、95、97、99、101、103、105、107、109、111、113、115、117、119、121、123、125、127、129、131、133、135、137、139、141、143、145、147、179、181及229-268中之一或多者具有至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%一致性的聚核苷酸。在一些態樣中，本發明係針對一種聚核苷酸，其包含以下或由以下組成：SEQ ID NO:59、61、63、65、67、69、71、73、75、77、79、81、83、85、87、89、91、93、95、97、99、101、103、105、107、109、111、113、115、117、119、121、123、125、127、129、131、133、135、137、139、141、143、145、147、179、181及229-268中之一或多者的聚核苷酸序列。
在一些態樣中，本發明係針對一種載體，其包含本文所描述之一或多種聚核苷酸。
在又一些態樣中，本發明係針對一種宿主細胞，其包含本文所描述之一或多種聚核苷酸及/或載體。
如本文所用，術語「宿主細胞」可為任何類型之細胞，例如原代細胞、培養中之細胞或來自細胞株之細胞。在一些態樣中，術語「宿主細胞」係指含有外源基因之細胞[例如經歷基因遞送或經編碼基因之聚核苷酸(例如DNA或mRNA)轉染的細胞]及此類細胞之後代或潛在後代。例如歸因於繼代中可能存在突變或環境影響或核酸分子整合至宿主細胞基因體中，此類細胞之後代可能與用核酸分子轉染之親本細胞不一致。
熟習此項技術者熟知之方法可用於構築編碼抗原結合多肽複合物之載體(例如CDR、VH、VL、scFv、Fab、scFab、重鏈或輕鏈編碼序列以及適當轉錄及轉譯控制訊號)。此等方法包括例如活體外重組DNA技術、合成技術及活體內遺傳重組。
載體可藉由習知技術轉移至宿主細胞，且所得細胞接著可藉由習知技術進行培養以產生包含例如六個CDR、VH、VL、scFv、Fab、scFab、重鏈或輕鏈或其域的抗原結合多肽複合物。因此，本文提供含有編碼抗原結合多肽複合物之聚核苷酸之宿主細胞，該抗原結合多肽複合物包含例如六個CDR、VH、VL、scFv、Fab、scFab、重鏈或輕鏈或其域，其與啟動子可操作地連接以用於在宿主細胞中表現此類序列。在一些態樣中，分別編碼重鏈及輕鏈兩者或其域的載體可在用於表現的宿主細胞中共表現。在一些態樣中，宿主細胞含有載體，該載體包含編碼重鏈及輕鏈兩者或其域的聚核苷酸。在一些態樣中，宿主細胞含有兩種不同載體：包含編碼重鏈或其域之聚核苷酸的第一載體，及包含編碼輕鏈或其域之聚核苷酸的第二載體。在一些態樣中，第一宿主細胞包含含有編碼重鏈或其域之聚核苷酸的第一載體，且第二宿主細胞包含含有編碼輕鏈或其域之聚核苷酸的第二載體。在一些態樣中，本文提供包含此類第一宿主細胞及此類第二宿主細胞之宿主細胞群。
在一些態樣中，本文提供載體群，其包含含有編碼輕鏈或其域之聚核苷酸的第一載體及含有編碼重鏈或其域之聚核苷酸的第二載體。或者，可使用編碼且能夠表現重鏈及輕鏈多肽兩者或其域的單一載體。
多種宿主-載體系統可用於表現本文所描述之多肽及多肽複合物。此類宿主-載體系統不僅代表可藉以產生所關注之編碼序列且隨後使其純化的運載體，且亦代表當經適當核苷酸編碼序列轉型或轉染時，原位表現本文所描述之多肽或多肽複合物的細胞。此等包括但不限於微生物，諸如用含有抗體編碼序列之重組噬菌體DNA、質體DNA或黏質體DNA表現載體轉型的細菌(例如大腸桿菌(E. coli)及枯草桿菌(B. subtilis))；用含有抗體編碼序列之重組酵母表現載體轉型的酵母(例如畢赤酵母屬(Saccharomyces pichia))；用含有抗體編碼序列之重組病毒表現載體(例如桿狀病毒)感染的昆蟲細胞系統；用重組病毒表現載體(例如花椰菜嵌紋病毒(cauliflower mosaic virus)，CaMV；煙草嵌紋病毒，TMV)感染或用含有抗體編碼序列之重組質體表現載體(例如Ti質體)轉型的植物細胞系統(例如綠藻，諸如萊茵衣藻(Chlamydomonas reinhardtii))；或哺乳動物細胞系統(例如COS (例如COS1或COS)、CHO、BHK、MDCK、HEK 293、NS0、PER.C6、VERO、CRL7O3O、HsS78Bst、希拉細胞(HeLa)、及NIH 3T3、HEK-293T、HepG2、SP210、R1.1、B-W、L-M、BSC1、BSC40、YB/20及BMT10細胞)，其具有含有來源於哺乳動物細胞基因體(例如金屬硫蛋白啟動子)或哺乳動物病毒(例如腺病毒晚期啟動子；痘瘡病毒7.5K啟動子)之啟動子的重組表現構築體。在一些態樣中，用於表現本文所描述之多肽或多肽複合物的細胞為CHO細胞，例如來自CHO GS System™ (Lonza)的CHO細胞。在一些態樣中，用於表現本發明之多肽或多肽複合物的細胞為人類細胞，例如人類細胞株。在一些態樣中，哺乳動物表現載體為pOptiVEC™或pcDNA3.3。在一些態樣中，使用細菌細胞(諸如大腸桿菌)或真核細胞(例如哺乳動物細胞)表現重組多肽。舉例而言，哺乳動物細胞(諸如中國倉鼠卵巢(Chinese hamster ovary；CHO)細胞)連同載體(諸如來自人類巨細胞病毒之主要中間早期基因啟動子元件)為多肽之有效表現系統(Foecking MK及Hofstetter H (1986) Gene 45: 101-105；及Cockett MI等人, (1990) Biotechnology 8: 662-667)。在一些態樣中，本文所描述之多肽或多肽複合物係由HEK-293T細胞產生。
另外，可選擇調節插入序列之表現或以所需特定方式修飾及加工基因產物的宿主細胞品系。蛋白質產物之此類修飾(例如醣基化)及加工(例如裂解)可有助於蛋白質的功能。為了此目的，可使用具有恰當加工初級轉錄本、基因產物之醣基化及磷酸化的細胞機制之真核宿主細胞。此類哺乳動物宿主細胞包括但不限於：CHO、VERO、BHK、希拉細胞、MDCK、HEK 293、NIH 3T3、W138、BT483、Hs578T、HTB2、BT2O及T47D、NS0 (不內源性產生任何免疫球蛋白鏈之鼠類骨髓瘤細胞株)、CRL7O3O、COS (例如，COS1或COS)、PER.C6、VERO、HsS78Bst、HEK-293T、HepG2、SP210、R1.1、B-W、L-M、BSC1、BSC40、YB/20、BMT10及HsS78Bst細胞。
本文所描述之多肽或多肽複合物已藉由重組表現產生後，其可藉由此項技術中已知用於純化蛋白質或免疫球蛋白分子的任何方法純化，例如層析(例如離子交換層析、親和層析，尤其蛋白A層析之後對特定抗原的親和層析，及尺寸排阻層析)、離心、溶解度差異或用於純化蛋白質的任何其他標準技術。另外，可將本文所描述之多肽或多肽複合物與本文所描述或此項技術中另外已知之異源多肽序列(例如標籤)融合以有助於純化。
在一些態樣中，本文所描述之多肽或多肽複合物經分離或純化。一般而言，經分離之多肽或多肽複合物為實質上不含具有不同抗原特異性之其他多肽或多肽複合物的多肽或多肽複合物。舉例而言，在一些態樣中，本文所描述之多肽或多肽複合物製劑實質上不含細胞材料及/或化學前驅體。
VII. 醫藥組合物及套組
在一些態樣中，本發明係針對一種醫藥組合物，其包含本文所描述之抗原結合多肽複合物(例如抗體或其抗原結合片段)、多肽、聚核苷酸、載體或細胞。
在一些態樣中，本發明係關於一種醫藥組合物，其包含(1)本文所描述之抗原結合多肽複合物(例如抗體或其抗原結合片段)、聚核苷酸、載體或細胞，及(2)醫藥學上可接受之載劑。術語「醫藥學上可接受之載劑」包括在生物學上或在其他方面無不良作用的任何及所有溶劑、共溶劑、複合劑、分散介質、包衣、抗細菌劑及抗真菌劑、等張劑及吸收延遲劑及其類似物。此類介質及藥劑用於醫藥活性物質的用途為此項技術中已知的。除非任何習知介質或藥劑與活性成分不相容，否則考慮將其用於治療調配物中。亦可將補充活性成分併入本發明之醫藥組合物中。另外，可以包括各種賦形劑，諸如此項技術中常用的賦形劑。此等及其他此類化合物描述於文獻中，例如Merck Index, Merck & Company, Rahway, NJ中。在醫藥組合物中包括各種組分之考慮因素描述於例如Gilman等人(編) (2010); Goodman and Gilman's: The Pharmacological Basis of Therapeutics, 第12版, The McGraw-Hill Companies中。在一些態樣中，醫藥組合物物係用於非經腸、靜脈內或皮下投與。
調配醫藥組合物後，可將其以溶液、懸浮液、凝膠、乳液、固體、晶體或脫水或凍乾粉末形式儲存於無菌小瓶中。此類調配物可呈即用形式或在投與前復原之形式(例如，凍乾形式)儲存。
在一些態樣中，本發明係針對一種套組，其包含本文所描述之抗原結合多肽複合物(例如抗體或其抗原結合片段)、多肽、聚核苷酸、載體、細胞或醫藥組合物，或其組合，視情況具有使用說明書。在一些態樣中，本發明提供用於產生單次劑量投與單元之套組。在一些態樣中，本發明之套組可含有具有乾燥蛋白質之第一容器與具有水性調配物之第二容器。在一些態樣中，亦提供含有單室及多室預填充注射器(例如液體注射器及凍乾物注射器)之套組。在一些態樣中，套組含有供靜脈內或皮下投與的組分。
VIII. 使用方法
在一些態樣中，本發明係針對本文中所描述之抗原結合多肽複合物(例如抗體或其抗原結合片段)、多肽、聚核苷酸、載體、細胞或醫藥組合物或其組合之某些使用方法。靶向本文所描述之目標中之一或多者的本文所描述之任一抗原結合多肽複合物結構可用於本發明之任一方法及用途中。
在一些態樣中，本發明係針對一種治療或預防疾病或病狀之方法，其包含向有需要之個體投與本文所描述之抗原結合多肽複合物(例如抗體或其抗原結合片段)、多肽、聚核苷酸、載體、細胞或醫藥組合物，或其組合。在一些態樣中，本發明係針對一種治療或預防疾病或病狀之方法，其包含向有需要之個體投與治療有效量之本文所描述之抗原結合多肽複合物(例如抗體或其抗原結合片段)、多肽、聚核苷酸、載體、細胞或醫藥組合物，或其組合。本發明進一步提供一種本文所描述之抗原結合多肽複合物(例如抗體或其抗原結合片段)、多肽、聚核苷酸、載體、細胞或醫藥組合物，或其組合，其用於治療或預防個體之疾病或病狀。本發明進一步提供一種本文所描述之抗原結合多肽複合物(例如抗體或其抗原結合片段)、多肽、聚核苷酸、載體、細胞或醫藥組合物或其組合之用途，其用於製造用於治療或預防個體之疾病或病狀的藥劑。該治療可包含誘導或增強個體之免疫反應或由其組成。因此，本發明提供一種本文中所描述之抗原結合多肽複合物(例如抗體或其抗原結合片段)、多肽、聚核苷酸、載體、細胞或醫藥組合物或其組合，其用於誘導或增強個體之免疫反應以治療或預防該個體的疾病或病狀。本發明進一步提供一種本文所描述之抗原結合多肽複合物(例如抗體或其抗原結合片段)、多肽、聚核苷酸、載體、細胞或醫藥組合物或其組合之用途，其用於製造用於誘導或增強個體之免疫反應以治療或預防該個體的疾病或病狀的藥劑。
在一些態樣中，本發明係針對一種誘導或增強免疫反應之方法，其包含向有需要之個體投與本文所描述之抗原結合多肽複合物、抗體或其抗原結合片段、多肽、聚核苷酸、載體、細胞或醫藥組合物。本發明進一步提供一種本文所描述之抗原結合多肽複合物(例如抗體或其抗原結合片段)、多肽、聚核苷酸、載體、細胞或醫藥組合物或其組合，其用於誘導或增強個體之免疫反應。本發明進一步提供一種本文所描述之抗原結合多肽複合物(例如抗體或其抗原結合片段)、多肽、聚核苷酸、載體、細胞或醫藥組合物或其組合之用途，其用於製造用於誘導或增強個體之免疫反應的藥劑。
如本文所用，「誘導或增強免疫反應」包括但不限於增加免疫細胞(例如淋巴球(T細胞、B細胞及/或NK細胞)、嗜中性球及/或單核球/巨噬細胞)之活化、增殖、分化及/或成熟。因此，「誘導或增強免疫反應」可適用於治療或預防其中誘導或增強免疫反應諸如在治療癌症或如本文所描述之其他疾病或病症中具有潛在臨床益處的疾病。本發明之抗原結合多肽複合物可用於調節對於腫瘤相關抗原(TAA)或癌症之免疫反應之幅度、持續時間及/或品質。免疫細胞之免疫細胞活化、增殖、分化及/或成熟增強可藉由常規分析，諸如本文所描述之T細胞增殖及結合分析來測定。
在一些態樣中，該方法增強識別TAA或癌症之抗體之產生。抗體產生增強可藉由常規分析來測定，諸如偵測相較於未接受抗原結合多肽複合物之個體中之抗體含量，用本發明之抗原結合多肽複合物處理之個體中之增加的抗體含量。
本發明之方法可用於預防性及治療性調節或增強免疫反應。
因此，在一些態樣中，本發明係針對一種克服癌症介導之免疫抑制之方法，其包含向有需要之個體投與本文所描述之抗原結合多肽複合物、抗體或其抗原結合片段、多肽、聚核苷酸、載體、細胞或醫藥組合物。
在一些態樣中，本發明係針對一種治療或預防癌症之方法，其包含向有需要之個體投與本文中所描述之抗原結合多肽複合物(例如抗體或其抗原結合片段)、多肽、聚核苷酸、載體、細胞或醫藥組合物，或其組合。本發明進一步提供一種本文所描述之抗原結合多肽複合物(例如抗體或其抗原結合片段)、多肽、聚核苷酸、載體、細胞或醫藥組合物，或其組合，其用於治療或預防個體的癌症。本發明進一步提供一種本文所描述之抗原結合多肽複合物(例如抗體或其抗原結合片段)、多肽、聚核苷酸、載體、細胞或醫藥組合物或其組合之用途，其用於製造用於治療或預防個體之癌症的藥劑。該治療可包含如本文所描述「誘導或增強」個體之「免疫反應」或由其組成。如本文所用，術語「個體」意謂人類或非人類哺乳動物，例如狗、貓、小鼠、大鼠、牛、綿羊、豬、山羊、非人類靈長類動物或禽類(例如雞)，以及任何其他脊椎動物或無脊椎動物。在一些態樣中，個體為人類。在一些態樣中，個體為獸醫學動物。在一些態樣中，個體為哺乳動物。
表 1 ： 抗體序列
表 2 ：質體序列
| 抗體 | 肽 SEQ ID NO (DNA SEQ ID NO) |
| MX169 | 54 (55), 58 (59), 104 (105) |
| MX170 | 54 (55), 72 (73), 98 (99) |
| MX306 | 54 (55), 118 (119), 120 (121) |
| MX318 | 54 (55), 120 (121) |
| MX368 | 132 (133), 134 (135) |
| MX369 | 54 (55), 132 (133) |
| MX424 | 140 (141), 142 (143) |
| MX425 | 118 (119), 140 (141) |
| MX485 | 193, 189 |
| MX487 | 193 |
| MX620 | 193, 208 |
| MX622 | 208, 209 |
| 質體 | 描述 | 蛋白質SEQ ID NO | DNA SEQ ID NO |
| MD668 | ScFab_CD28_Kcc_4-1 BBL LALAPA | 189 | 229 |
| MD703 | ScFab_CD3_Glo_Hcc_hOx40L LALAPA | 190 | 230 |
| MD704 | ScFab_CD3_Glo_Hcc_h4-1 BBL LALAPA | 191 | 231 |
| MD705 | ScFab_CD3_SAR_Hcc_hOx40L LALAPA | 192 | 232 |
| MD706 | ScFab_CD3_SAR_Hcc_h4-1 BBL LALAPA | 193 | 233 |
| MD747 | ahTrop2_h20xCD3_hOKT_Kcc LALAPA | 194 | 234 |
| MD748 | ahTrop2_h20xCD3_hOKT_Kcc_41BBLrw8 LALAPA | 195 | 235 |
| MD749 | ahcMetxahCD3_hOKT_Kcc_LALAPA | 196 | 236 |
| MD750 | ahcMetxahCD3_hOKTKcc_LALAPA_4-1BBL | 197 | 237 |
| MD751 | ahcMetxahTrop2_h20_Kcc_41 BBLrw8 LALAPA | 198 | 238 |
| MD752 | ahTrop2_h20xahcMet_Kcc_41 BBLrw8 LALAPA | 199 | 239 |
| MD753 | ahTrop2_h20Hrw3_Hcc_41 BBLrw8 LALAPA | 200 | 240 |
| MD754 | ahcMet_Hrw5_Hcc_41BBLrw8 LALAPA | 201 | 241 |
| MD778 | VRC01.23scFab_Kcc_4-1 BBL LALAPA | 202 | 242 |
| MD779 | VRC01.23H_Kcc_4-1 BBL LALAPA | 203 | 243 |
| MD780 | VRC01.23scFv_Kcc_hOx40L LALAPA | 204 | 244 |
| MD781 | VRC01.23scFv_Kcc_4-1 BBL LALAPA | 205 | 245 |
| MD797 | ahCD20_hRitxahCD19_Kcc_41 BBL LALAPA | 206 | 246 |
| MD798 | ahCD19xahCD20_hRit_Kcc_41BBL LALAPA | 207 | 247 |
| MD799 | ScFab_CD28_TGNcs_LALAPA_Kcc | 208 | 248 |
| MD800 | ScFab_CD3_SAR_Hcc_LALAPA | 209 | 249 |
| MD885 | CD3_SAR x VRC01.23_Hcc_hOx40L LALAPA | 210 | 250 |
| MD886 | CD28 x VRC01.23_Kcc_hOx40L LALAPA | 211 | 251 |
| MD900 | VRC01.23H_Kcc_Ox40L LALAPA | 212 | 252 |
| MD901 | VRC01.23scFab_Kcc_Ox40L LALAPA | 213 | 253 |
| MD902 | ahCD19axahCD20PS_Kcc_41BBL LALAPA | 214 | 254 |
| MD903 | ahCD20_PSxahCD19_Kcc_41 BBL LALAPA | 215 | 255 |
| MD918 | ScFab_CD3_hOKT_v23_Hcc_LALAPA | 216 | 256 |
| MD956 | CD20_PSxCD19 LALAPA_41 BBL | 217 | 257 |
| MD957 | CD19 x CD20_PS LALAPA_41BBL | 218 | 258 |
| MD958 | cMetxTrop2_h20_41BBL | 219 | 259 |
| MD959 | ahT rop2_h20xahcMet 41 BBL | 220 | 260 |
| MD962 | ScFab_CD3_Hcc_mono4-lBBL8 | 221 | 261 |
| MD963 | ScFab_CD28_Kcc_mono4-1 BBL8 | 222 | 262 |
| MD964 | ScFab_CD3_Hcc_mono4-1 BBL7 | 223 | 263 |
| MD965 | ScFab_CD28_Kcc_mono4-1 BBL7 | 224 | 264 |
| MD966 | ahCD20_ofxahCD19_Kcc_41BBL LALAPA | 225 | 265 |
| MD967 | ahCD20_ofx ahCD19_41BBLrw8 | 226 | 266 |
| MD968 | ahCD19xahCD20_of_Kcc_41 BBL LALAPA | 227 | 267 |
| MD969 | ahCD19xahCD20_of_41BBLrw8 | 228 | 268 |
關於本發明之態樣之條項
1. 一種抗原結合多肽複合物，其包含第一多肽、第二多肽及第三多肽；
其中該第一多肽具有由以下表示的結構：VL1-L1-CL；VL1-L1-CH1；VH1-L1-CL；或VH1-L1-CH1；
其中：
(i) 該第二多肽具有由以下表示的結構：VH1-L2-CH1-L3-Fc-L4-TNF1-L5-TNF2-L6-TNF3；VH1-L2-CL-L3-Fc-L4-TNF1-L5-TNF2-L6-TNF3；VH1-L7-CH1-L8-Fc；VH1-L7-CL-L8-Fc；VL1-L2-CH1-L3-Fc-L4-TNF1-L5-TNF2-L6-TNF3；VL1-L2-CL-L3-Fc-L4-TNF1-L5-TNF2-L6-TNF3；VL1-L7-CH1-L8-Fc；或VL1-L7-CL-L8-Fc；及該第三多肽具有由以下表示的結構：VL2-L9-VH2-L10-Fc-L11-TNF1-L12-TNF2-L13-TNF3；或VH2-L14-VL2-L15-Fc-L16-TNF1-L17-TNF2-L18-TNF3；或
(ii) 該第二多肽具有由以下表示的結構：VH1-L19-CH1-L20-Fc-L21-TNF1-L22-TNF2-L23-TNF3；VH1-L19-CL-L20-Fc-L21-TNF1-L22-TNF2-L23-TNF3；VL1-L19-CH1-L20-Fc-L21-TNF1-L22-TNF2-L23-TNF3；或VL1-L19-CL-L20-Fc-L21-TNF1-L22-TNF2-L23-TNF3；及該第三多肽具有由以下表示的結構：VL2-L24-VH2-L25-Fc；或VH2-L26-VL2-L27-Fc；
其中：VL1為第一免疫球蛋白輕鏈可變區；VL2為第二免疫球蛋白輕鏈可變區；VH1為第一免疫球蛋白重鏈可變區；VH2為第二免疫球蛋白重鏈可變區；Fc為包含免疫球蛋白重鏈恆定區2 (CH2)、免疫球蛋白重鏈恆定區3 (CH3)及視情況存在之免疫球蛋白鉸鏈的區域；CH1為免疫球蛋白重鏈恆定區1；CL為免疫球蛋白輕鏈恆定區；TNF1為腫瘤壞死因子超家族(TNFSF)配體之第一細胞外域；TNF2為TNFSF配體之第二細胞外域；TNF3為TNFSF配體之第三細胞外域；及L1-L27為胺基酸連接子。
2. 一種抗原結合多肽複合物，其包含第一多肽、第二多肽及第三多肽；
其中該第一多肽具有由以下表示的結構：VL1-L1-CL；VL1-L1-CH1；VH1-L1-CL；或VH1-L1-CH1；
其中：
(i) 該第二多肽具有由以下表示的結構：VH1-CH1-L2-Fc-L3-TNF1-L4-TNF2-L5-TNF3；VH1-CL-L2-Fc-L3-TNF1-L4-TNF2-L5-TNF3；VH1-CH1-L6-Fc；VH1-CL-L7-Fc；VL1-CH1-L2-Fc-L3-TNF1-L4-TNF2-L5-TNF3；VL1-CL-L2-Fc-L3-TNF1-L4-TNF2-L5-TNF3；VL1-CH1-L6-Fc；或VL1-CL-L7-Fc；及該第三多肽具有由以下表示的結構：VL2-L8-VH2-L9-Fc-L10-TNF1-L11-TNF2-L12-TNF3；或VH2-L13-VL2-L14-Fc-L15-TNF1-L16-TNF2-L17-TNF3；或
(ii) 該第二多肽具有由以下表示的結構：VH1-CH1-L18-Fc-L19-TNF1-L20-TNF2-L21-TNF3；VH1-CL-L18-Fc-L19-TNF1-L20-TNF2-L21-TNF3；VL1-CH1-L18-Fc-L19-TNF1-L20-TNF2-L21-TNF3；或VL1-CL-L18-Fc-L19-TNF1-L20-TNF2-L21-TNF3；及該第三多肽具有由以下表示的結構：VL2-L22-VH2-L23-Fc；或VH2-L24-VL2-L25-Fc；
其中：VL1為第一免疫球蛋白輕鏈可變區；VL2為第二免疫球蛋白輕鏈可變區；VH1為第一免疫球蛋白重鏈可變區；VH2為第二免疫球蛋白重鏈可變區；Fc為包含免疫球蛋白重鏈恆定區2 (CH2)、免疫球蛋白重鏈恆定區3 (CH3)及視情況存在之免疫球蛋白鉸鏈的區域；CH1為免疫球蛋白重鏈恆定區1；CL為免疫球蛋白輕鏈恆定區；TNF1為腫瘤壞死因子超家族(TNFSF)配體之第一細胞外域；TNF2為TNFSF配體之第二細胞外域；TNF3為TNFSF配體之第三細胞外域；及L1-L25為胺基酸連接子。
3. 如條項1之抗原結合多肽複合物，其中該第一多肽具有由以下表示的結構：VL1-L1-CL；該第二多肽具有由以下表示的結構：VH1-L2-CH1-L3-Fc-L4-TNF1-L5-TNF2-L6-TNF3；及該第三多肽具有由以下表示的結構：VL2-L9-VH2-L10-Fc-L11-TNF1-L12-TNF2-L13-TNF3。
4. 如條項2之抗原結合多肽複合物，其中該第一多肽具有由以下表示的結構：VL1-L1-CL；該第二多肽具有由以下表示的結構：VH1-CH1-L2-Fc-L3-TNF1-L4-TNF2-L5-TNF3；及該第三多肽具有由以下表示的結構：VL2-L8-VH2-L9-Fc-L10-TNF1-L11-TNF2-L12-TNF3。
5. 一種抗原結合多肽複合物，其包含第一多肽及第二多肽；其中：
(i) 該第一多肽具有由以下表示的結構：VL1-L1-VH1-L2-Fc；VH1-L3-VL1-L4-Fc；VL1-L5-VH1-L6-CL-L7-CH1-L8-Fc；VL1-L5-VH1-L6-CH1-L7-CL-L8-Fc；VH1-L5-VL1-L6-CL-L7-CH1-L8-Fc；VH1-L5-VL1-L6-CH1-L7-CL-L8-Fc；VL1-L9-CL-L10-VH1-L11-CH1-L12-Fc；VL1-L9-CH1-L10-VH1-L11-CL-L12-Fc；VH1-L9-CL-L10-VL1-L11-CH1-L12-Fc；VH1-L9-CH1-L10-VL1-L11-CL-L12-Fc；VL1-L13-VH1-L14-Fc-L15-TNF1-L16-TNF2-L17-TNF3；VH1-L18-VL1-L19-Fc-L20-TNF1-L21-TNF2-L22-TNF3；VL1-L23-VH1-L24-CL-L25-CH1-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3；VL1-L23-VH1-L24-CH1-L25-CL-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3；VH1-L23-VL1-L24-CL-L25-CH1-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3；VH1-L23-VL1-L24-CH1-L25-CL-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3；VL1-VH1-L14-Fc-L15-TNF1-L16-TNF2-L17-TNF3；VH1-VL1-L19-Fc-L20-TNF1-L21-TNF2-L22-TNF3；VL1-VH1-L24-CL-L25-CH1-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3；VL1-VH1-L24-CH1-L25-CL-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3；VH1-VL1-L24-CL-L25-CH1-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3；VH1-VL1-L24-CH1-L25-CL-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3；VL1-L30-CL-L31-VH1-L32-CH1-L33-Fc-L34-TNF1-L35-TNF2-L36-TNF3；VL1-L30-CH1-L31-VH1-L32-CL-L33-Fc-L34-TNF1-L35-TNF2-L36-TNF3；VH1-L30-CL-L31-VL1-L32-CH1-L33-Fc-L34-TNF1-L35-TNF2-L36-TNF3；或VH1-L30-CH1-L31-VL1-L32-CL-L33-Fc-L34-TNF1-L35-TNF2-L36-TNF3；及該第二多肽具有由以下表示的結構：VL2-L37-VH2-L38-Fc-L39-TNF1-L40-TNF2-L41-TNF3；VH2-L42-VL2-L43-Fc-L44-TNF1-L45-TNF2-L46-TNF3；VL2-L47-VH2-L48-CL-L49-CH1-L50-Fc-L51-TNF1-L52-TNF2-L53-TNF3；VL2-L54-CL-L55-VH2-L56-CH1-L57-Fc-L58-TNF1-L59-TNF2-L60-TNF3；VL2-L47-VH2-L48-CH1-L49-CL-L50-Fc-L51-TNF1-L52-TNF2-L53-TNF3；VL2-L54-CH1-L55-VH2-L56-CL-L57-Fc-L58-TNF1-L59-TNF2-L60-TNF3；VL2-VH2-L38-Fc-L39-TNF1-L40-TNF2-L41-TNF3；VH2-VL2-L43-Fc-L44-TNF1-L45-TNF2-L46-TNF3；VL2-VH2-L48-CL-L49-CH1-L50-Fc-L51-TNF1-L52-TNF2-L53-TNF3；VL2-CL-L55-VH2-L56-CH1-L57-Fc-L58-TNF1-L59-TNF2-L60-TNF3；VL2-VH2-L48-CH1-L49-CL-L50-Fc-L51-TNF1-L52-TNF2-L53-TNF3；或VL2-CH1-L55-VH2-L56-CL-L57-Fc-L58-TNF1-L59-TNF2-L60-TNF3；或
(ii) 該第一多肽具有由以下表示的結構：VL1-L61-VH1-L62-Fc-L63-TNF1-L64-TNF2-L65-TNF3；VH1-L66-VL1-L67-Fc-L68-TNF1-L69-TNF2-L70-TNF3；VL1-L71-VH1-L72-CL-L73-CH1-L74-Fc-L75-TNF1-L76-TNF2-L77-TNF3；VL1-L71-VH1-L72-CH1-L73-CL-L74-Fc-L75-TNF1-L76-TNF2-L77-TNF3；VL1-L78-CL-L79-VH1-L80-CH1-L81-Fc-L82-TNF1-L83-TNF2-L84-TNF3；或VL1-L78-CH1-L79-VH1-L80-CL-L81-Fc-L82-TNF1-L83-TNF2-L84-TNF3；及該第二多肽具有由以下表示的結構：VL2-L85-VH2-L86-Fc；VH2-L87-VL2-L88-Fc；VL2-L89-VH2-L90-CL-L91-CH1-L92-Fc；VL2-L89-VH2-L90-CH1-L91-CL-L92-Fc；VL2-L93-CL-L94-VH2-L95-CH1-L96-Fc；或VL2-L93-CH1-L94-VH2-L95-CL-L96-Fc；
其中：VL1為第一免疫球蛋白輕鏈可變區；VL2為第二免疫球蛋白輕鏈可變區；VH1為第一免疫球蛋白重鏈可變區；VH2為第二免疫球蛋白重鏈可變區；Fc為包含免疫球蛋白重鏈恆定區2 (CH2)、免疫球蛋白重鏈恆定區3 (CH3)及視情況存在之免疫球蛋白鉸鏈的區域；CH1為免疫球蛋白重鏈恆定區1；CL為免疫球蛋白輕鏈恆定區；TNF1為TNFSF配體之第一細胞外域；TNF2為TNFSF配體之第二細胞外域；TNF3為TNFSF配體之第三細胞外域；及L1-L96為胺基酸連接子。
6. 如條項5之抗原結合多肽複合物，其中該第一多肽具有由以下表示的結構：VL1-L13-VH1-L14-Fc-L15-TNF1-L16-TNF2-L17-TNF3；及該第二多肽具有由以下表示的結構：VL2-L37-VH2-L38-Fc-L39-TNF1-L40-TNF2-L41-TNF3。
7. 一種抗原結合多肽複合物，其包含第一多肽及第二多肽；其中：
(i) 該第一多肽具有由以下表示的結構：Fc；VL1-L1-VL2-L2-VH2-L3-VH1-L4-Fc；VH1-L5-VH2-L6-VL2-L7-VL1-L8-Fc；Fc-L9-TNF1-L10-TNF2-L11-TNF3；VL1-L12-VL2-L13-VH2-L14-VH1-L15-Fc-L16-TNF1-L17-TNF2-L18-TNF3；或VH1-L19-VH2-L20-VL2-L21-VL1-L22-Fc-L23-TNF1-L24-TNF2-L25-TNF3；及該第二多肽具有由以下表示的結構：VL3-L26-VL4-L27-VH4-L28-VH3-L29-Fc-L30-TNF1-L31-TNF2-L32-TNF3；或VH3-L33-VH4-L34-VL4-L35-VL3-L36-Fc-L37-TNF1-L38-TNF2-L39-TNF3；或
(ii) 該第一多肽具有由以下表示的結構：Fc-L40-TNF1-L41-TNF2-L42-TNF3；VL1-L43-VL2-L44-VH2-L45-VH1-L46-Fc-L47-TNF1-L48-TNF2-L49-TNF3；或VH1-L50-VH2-L51-VL2-L52-VL1-L53-Fc-L54-TNF1-L55-TNF2-L56-TNF3；及該第二多肽具有由以下表示的結構：Fc；VL3-L57-VL4-L58-VH4-L59-VH3-L60-Fc；或VH3-L61-VH4-L62-VL4-L63-VL3-L64-Fc；
其中：VL1為第一免疫球蛋白輕鏈可變區；VL2為第二免疫球蛋白輕鏈可變區；VL3為第三免疫球蛋白輕鏈可變區；VL4為第四免疫球蛋白輕鏈可變區；VH1為第一免疫球蛋白重鏈可變區；VH2為第二免疫球蛋白重鏈可變區；VH3為第三免疫球蛋白重鏈可變區；VH4為第四免疫球蛋白重鏈可變區；Fc為包含免疫球蛋白重鏈恆定區2 (CH2)、免疫球蛋白重鏈恆定區3 (CH3)及視情況存在之免疫球蛋白鉸鏈的區域；TNF1為TNFSF配體之第一細胞外域；TNF2為TNFSF配體之第二細胞外域；TNF3為TNFSF配體之第三細胞外域；及L1-L64為胺基酸連接子。
8. 如條項1至7中任一項之抗原結合多肽複合物，其中連接子L1-L96中之一或多者之長度為約0個胺基酸至約50個胺基酸。
9. 如條項1至8中任一項之抗原結合多肽複合物，其中連接子L1-L96中之一或多者為非免疫原性。
10. 如條項1至9中任一項之抗原結合多肽複合物，其中連接子L1-L96中之一或多者不含有共同T細胞抗原決定基
11. 如條項1至10中任一項之抗原結合多肽複合物，其中連接子L1-L96中之一或多者包含SEQ ID NO:3-10及148-175中之任一者的胺基酸序列，或與SEQ ID NO:3-10及148-175中之任一者具有至少50%、至少60%、至少70%、至少80%、至少90%或至少95%一致性的序列。
12. 如條項11之抗原結合多肽，其中：
(i)連接子L1-L96中之一或多者包含與SEQ ID NO:3具有至少80%一致性之胺基酸序列；
(ii)連接子L1-L96中之一或多者包含與SEQ ID NO:10具有至少80%一致性之胺基酸序列；
(iii)連接子L1-L96中之一或多者包含與SEQ ID NO:150具有至少80%一致性之胺基酸序列；
(iv)連接子L1-L96中之一或多者包含與SEQ ID NO:151具有至少80%一致性之胺基酸序列；
(v)連接子L1-L96中之一或多者包含與SEQ ID NO:161具有至少80%一致性之胺基酸序列；及/或
(vi)連接子L1-L96中之一或多者包含與SEQ ID NO:168具有至少80%一致性之胺基酸序列。
13. 如條項1至6及8至12中任一項之抗原結合多肽複合物，其中VL1及VH1係與CD3特異性結合。
14. 如條項13之抗原結合多肽複合物，其中VL1包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:22、28及185中之任一者具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:23、29及186中之任一者具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列；及CDR3，其包含與SEQ ID NO:24、30及187中之任一者具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列；且其中VH1包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:19、25及182中之任一者具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:20、26及183中之任一者具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列；及CDR3，其包含與SEQ ID NO:21、27及184中之任一者具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列。
15. 如條項14之抗原結合多肽複合物，其中VL1包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:22具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:23具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:24具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或其中VH1包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:19具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:20具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:21具有至少90%一致性的胺基酸序列；視情況其中VL1包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:22的胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:23的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:24的胺基酸序列；及/或其中VH1包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:19的胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:20的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:21的胺基酸序列。
16. 如條項14之抗原結合多肽複合物，其中VL1包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:28具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:29具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:30具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或其中VH1包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:25具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:26具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:27具有至少90%一致性的胺基酸序列；視情況其中VL1包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:28的胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:29的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:30的胺基酸序列；及/或其中VH1包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:25的胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:26的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:27的胺基酸序列。
17. 如條項14之抗原結合多肽複合物，其中VL1包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:185具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:186具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:187具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或其中VH1包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:182具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:183具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:184具有至少90%一致性的胺基酸序列；視情況其中VL1包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:185的胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:186的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:187的胺基酸序列；及/或VH1包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:182的胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:183的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:184的胺基酸序列。
18. 如條項14之抗原結合多肽複合物，其中VL1包含與SEQ ID NO:45具有至少80%、至少85%、至少90%、至少95%或100%一致性之胺基酸序列，及VH1包含與SEQ ID NO:43或44具有至少80%、至少85%、至少90%、至少95%或100%一致性之胺基酸序列；視情況其中VL1包含與SEQ ID NO:45具有至少80%、至少85%、至少90%、至少95%或100%一致性之胺基酸序列，及VH1包含與SEQ ID NO:43具有至少80%、至少85%、至少90%、至少95%或100%一致性之胺基酸序列；或其中VL1包含與SEQ ID NO:45具有至少80%、至少85%、至少90%、至少95%或100%一致性之胺基酸序列，及VH1包含與SEQ ID NO:44具有至少80%、至少85%、至少90%、至少95%或100%一致性之胺基酸序列。
19. 如條項1至6及8至18中任一項之抗原結合多肽複合物，其中VL2及VH2係與腫瘤相關抗原(TAA)或免疫刺激受體特異性結合。
20. 如條項19之抗原結合多肽複合物，其中該腫瘤相關抗原為酪胺酸蛋白激酶Met (cMet)、滋胚層細胞表面抗原2 (Trop2)、CD20、CD19、受體酪胺酸蛋白激酶erbB-2 (HER2)、受體酪胺酸蛋白激酶erbB-3 (HER3)、腺苷A2A受體(A2AR)、增殖誘導性配體(APRIL)、表皮生長因子受體(EGFR)、纖維母細胞生長因子受體(FGFR)、B細胞活化因子(BAFF)、BAFF受體(BAFFR)、B細胞成熟抗原(BCMA)、布魯頓氏酪胺酸激酶(BTK)、B及T淋巴球弱化子(BTLA)、B7DC (計劃性死亡配體2)、B7同源物1 (B7H1)、B7同源物4 (B7H4)、δ樣配體3 (DLL3)、胞外核苷三磷酸酯二磷酸水解酶1 (ENTPD1)、IgE受體之Fc片段1a (FCER1A)、IgE受體之Fc片段1 (FCER1)、花生四烯酸酯5-脂肪加氧酶活化蛋白(FLAP)、葉酸羥化酶1 (FOLH1)、黏蛋白1 (MUC-1)、CD133、黏蛋白16 (MUC-16)、溶酶體相關膜蛋白1 (LAMP1)、CD38、計劃性死亡配體1 (PD-L1)、CEA細胞黏附分子5 (CEACAM5)、前列腺六跨膜上皮抗原1 (STEAP1)或上皮細胞黏附分子(EpCAM)；或其中該免疫刺激受體為CD28。
21. 如條項19或條項20之抗原結合多肽複合物，其中該VL2及該VH2係與HER2特異性結合。
22. 如條項19之抗原結合多肽複合物，其中該VL2及該VH2係與該免疫刺激受體CD28特異性結合。
23. 如條項19至21中任一項之抗原結合多肽複合物，其中VL2包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:34或40具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:35或41具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及CDR3，其包含與SEQ ID NO:36或42具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；且其中VH2包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:31或37具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:32或38具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及CDR3，其包含與SEQ ID NO:33或39具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列。
24. 如條項23之抗原結合多肽複合物，其中VL2包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:34具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:35具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:36的胺基酸序列；及/或其中VH2包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:31具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:32具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:33的胺基酸序列；視情況其中VL2包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:34的胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:35的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:36的胺基酸序列；及/或其中VH2包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:31的胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:32的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:33的胺基酸序列。
25. 如條項23之抗原結合多肽複合物，其中VL2包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:40具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:41具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:42的胺基酸序列；及/或其中VH2包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:37具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:38具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:39的胺基酸序列；視情況其中VL2包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:40的胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:41的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:42的胺基酸序列；及/或其中VH2包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:37的胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:38的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:39的胺基酸序列。
26. 如條項23之抗原結合多肽複合物，其中VL2包含與SEQ ID NO:47或49具有至少80%、至少85%、至少90%、至少95%或100%一致性之胺基酸序列，及VH2包含與SEQ ID NO:46或48具有至少80%、至少85%、至少90%、至少95%或100%一致性之胺基酸序列。
27. 如條項26之抗原結合多肽複合物，其中VL2包含與SEQ ID NO:47具有至少80%一致性之序列，及/或VH2包含與SEQ ID NO:46具有至少80%一致性之序列；視情況其中VL2包含SEQ ID NO:47之胺基酸序列，及/或VH2包含SEQ ID NO:46之胺基酸序列。
28. 如條項26之抗原結合多肽複合物，其中VL2包含與SEQ ID NO:49具有至少80%一致性之序列，及/或VH2包含與SEQ ID NO:48具有至少80%一致性之序列；視情況其中VL2包含SEQ ID NO:49之胺基酸序列，及/或VH2包含SEQ ID NO:48之胺基酸序列。
29. 如條項1至6及8至12中任一項之抗原結合多肽複合物，其中VL2及VH2係與CD3特異性結合。
30. 如條項29之抗原結合多肽複合物，其中VL2包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:22、28、185、298及306中之任一者具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:23、29、186、299及307中之任一者具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列；及CDR3，其包含與SEQ ID NO:24、30、187、300及308中之任一者具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列；且其中VH2包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:19、25、182、294及302中之任一者具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:20、26、183、295及303中之任一者具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列；及CDR3，其包含與SEQ ID NO:21、27、184、296及304中之任一者具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列。
31. 如條項30之抗原結合多肽複合物，其中VL2包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:22具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:23具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:24的胺基酸序列；及/或其中VH2包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:19具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:20具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:21的胺基酸序列；視情況其中VL2包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:22的胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:23的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:24的胺基酸序列；及/或其中VH2包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:19的胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:20的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:21的胺基酸序列。
32. 如條項30之抗原結合多肽複合物，其中VL2包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:28具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:29具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:30的胺基酸序列；及/或其中VH2包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:25具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:26具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:27的胺基酸序列；視情況其中VL2包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:28的胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:29的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:30的胺基酸序列；及/或其中VH2包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:25的胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:26的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:27的胺基酸序列。
33. 如條項30之抗原結合多肽複合物，其中VL2包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:185具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:186具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:187的胺基酸序列；及/或其中VH2包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:182具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:183具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:184的胺基酸序列；視情況其中VL2包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:185的胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:186的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:187的胺基酸序列；及/或VH2包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:182的胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:183的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:184的胺基酸序列。
34. 如條項30之抗原結合多肽複合物，其中VL2包含與SEQ ID NO:45、297及305具有至少80%、至少85%、至少90%、至少95%或100%一致性之胺基酸序列，及VH2包含與SEQ ID NO:43、44、188、293及301具有至少80%、至少85%、至少90%、至少95%或100%一致性之胺基酸序列；視情況其中VL2包含與SEQ ID NO:45具有至少80%、至少85%、至少90%、至少95%或100%一致性之胺基酸序列，及VH2包含與SEQ ID NO:43具有至少80%、至少85%、至少90%、至少95%或100%一致性之胺基酸序列；其中VL2包含與SEQ ID NO:45具有至少80%、至少85%、至少90%、至少95%或100%一致性之胺基酸序列，及VH2包含與SEQ ID NO:44具有至少80%、至少85%、至少90%、至少95%或100%一致性之胺基酸序列；其中VL2包含與SEQ ID NO:297具有至少80%、至少85%、至少90%、至少95%或100%一致性之胺基酸序列，及VH2包含與SEQ ID NO:293具有至少80%、至少85%、至少90%、至少95%或100%一致性之胺基酸序列；或其中VL2包含與SEQ ID NO:305具有至少80%、至少85%、至少90%、至少95%或100%一致性之胺基酸序列，及VH2包含與SEQ ID NO:301具有至少80%、至少85%、至少90%、至少95%或100%一致性之胺基酸序列。
35. 如條項1至6、8至12及29至34中任一項之抗原結合多肽複合物，其中VL1及VH1係與TAA或免疫刺激受體特異性結合。
36. 如條項35之抗原結合多肽複合物，其中該VL1及該VH1係與選自以下之TAA特異性結合：cMet、Trop2、CD20、CD19、HER2、HER3、A2AR、APRIL、EGFR、FGFR、BAFF、BAFFR、BCMA、BTK、BTLA、B7DC、B7H1、B7H4、DLL3、ENTPD1、FCER1A、FCER1、FLAP、FOLH1、MUC-1、CD133、MUC-16、LAMP1、CD38、PD-L1、CEACAM5、STEAP1及EpCAM。
37. 如條項35或條項36之抗原結合多肽複合物，其中該TAA為HER2。
38. 如條項35之抗原結合多肽複合物，其中該VL1及該VH1係與該免疫刺激受體CD28特異性結合。
39. 如條項35至38中任一項之抗原結合多肽複合物，其中VL1包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:34、40、274、282、290、314或322具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:35、41、275、283、291、315或323中之任一者具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及CDR3，其包含與SEQ ID NO:36、42、275、284、292、316或324具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；且其中VH1包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:31、37、270、278、286、310或318具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:32、38、271、279、287、311或319具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列；及CDR3，其包含與SEQ ID NO:33、39、272、280、288、312或320具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性之胺基酸序列。
40. 如條項39之抗原結合多肽複合物，其中VL1包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:34具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:35具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:36具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或其中VH1包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:31具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:32具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:33具有至少90%一致性的胺基酸序列；視情況其中VL1包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:34的胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:35的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:36的胺基酸序列；及/或其中VH1包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:31的胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:32的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:33的胺基酸序列。
41. 如條項39之抗原結合多肽複合物，其中VL1包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:40具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:41具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:42具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或其中VH1包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:37具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:38具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:39具有至少90%一致性的胺基酸序列；視情況其中VL1包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:40的胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:41的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:42的胺基酸序列；及/或其中VH1包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:37的胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:38的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:39的胺基酸序列。
42. 如條項39之抗原結合多肽複合物，其中VL1包含與SEQ ID NO:47或49具有至少80%、至少85%、至少90%、至少95%或100%一致性之胺基酸序列，及VH1包含與SEQ ID NO:46或48具有至少80%、至少85%、至少90%、至少95%或100%一致性之胺基酸序列。
43. 如條項42之抗原結合多肽複合物，其中VL1包含與SEQ ID NO:47具有至少80%一致性之序列，及/或VH1包含與SEQ ID NO:46具有至少80%一致性之序列；視情況其中VL1包含SEQ ID NO:47之胺基酸序列，及/或VH1包含SEQ ID NO:46之胺基酸序列。
44. 如條項42之抗原結合多肽複合物，其中VL1包含與SEQ ID NO:49具有至少80%一致性之序列，及/或VH1包含與SEQ ID NO:48具有至少80%一致性之序列；視情況其中VL1包含SEQ ID NO:49之胺基酸序列，及/或VH1包含SEQ ID NO:48之胺基酸序列。
45. 如條項1至6及8至28中任一項之抗原結合多肽複合物，其中該抗原結合多肽之該VL1及該VH1係與CD3特異性結合，且該VL2及該VH2係與TAA或免疫刺激受體特異性結合。
46. 如條項1至6、8至12及29至44中任一項之抗原結合多肽複合物，其中該抗原結合多肽之該VL2及該VH2係與CD3特異性結合，且該VL1及該VH1係與TAA或免疫刺激受體特異性結合。
47. 如條項7至12中任一項之抗原結合多肽複合物，其中VL1、VH1、VL3及VH3係與CD3特異性結合。
48. 如條項7至12及47中任一項之抗原結合多肽複合物，其中VL2、VH2、VL4及VH4係與TAA或免疫刺激受體特異性結合。
49. 如條項48之抗原結合多肽複合物，其中該TAA為HER2，或該免疫刺激受體為CD28。
50. 如條項7至12中任一項之抗原結合多肽複合物，其中VL1、VH1、VL4及VH4係與CD3特異性結合。
51. 如條項7至12及50中任一項之抗原結合多肽複合物，其中VL2、VH2、VL3及VH3係與TAA或免疫刺激受體特異性結合。
52. 如條項51之抗原結合多肽複合物，其中該TAA為HER2，或該免疫刺激受體為CD28。
53. 如條項7至12中任一項之抗原結合多肽複合物，其中VL2、VH2、VL4及VH4係與CD3特異性結合。
54. 如條項7至12及53中任一項之抗原結合多肽複合物，其中VL1、VH1、VL3及VH3係與TAA或免疫刺激受體特異性結合。
55. 如條項54之抗原結合多肽複合物，其中該TAA為HER2，或該免疫刺激受體為CD28。
56. 如條項7至12中任一項之抗原結合多肽複合物，其中VL2、VH2、VL3及VH3係與CD3特異性結合。
57. 如條項7至12及56中任一項之抗原結合多肽複合物，其中VL1、VH1、VL4及VH4係與TAA或免疫刺激受體特異性結合。
58. 如條項57之抗原結合多肽複合物，其中該TAA為HER2，或該免疫刺激受體為CD28。
59. 如條項47至58中任一項之抗原結合多肽複合物，其中與CD3特異性結合之該等VL包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:22、28、185、298及306中之任一者具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:23、29、186、299及307中之任一者具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列；及CDR3，其包含與SEQ ID NO:24、30、187、300及308中之任一者具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列；且其中與CD3特異性結合之該等VH包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:19、25、182、294及302中之任一者具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:20、26、183、295及303中之任一者具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列；及CDR3，其包含與SEQ ID NO:21、27、184、296及304中之任一者具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列。
60. 如條項59之抗原結合多肽複合物，其中與CD3特異性結合之該等VL包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:22具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:23具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:24具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或其中與CD3特異性結合之該等VH包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:19具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:20具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:21具有至少90%一致性的胺基酸序列；視情況其中該等VL包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:22的胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:23的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:24的胺基酸序列；及/或其中該等VH包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:19的胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:20的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:21的胺基酸序列。
61. 如條項59之抗原結合多肽複合物，其中與CD3特異性結合之該等VL包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:28具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:29具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:30具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或其中與CD3特異性結合之該等VH包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:25具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:26具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:27具有至少90%一致性的胺基酸序列；視情況其中該等VL包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:28的胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:29的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:30的胺基酸序列；及/或其中該等VH包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:25的胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:26的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:27的胺基酸序列。
62. 如條項59之抗原結合多肽複合物，其中與CD3特異性結合之該等VL包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:185具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:186具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:187具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或其中特異性結合CD3之該等VH包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:，其包含與SEQ ID NO:182具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:183具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:184具有至少90%一致性的胺基酸序列；視情況其中該等VL包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:185的胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:186的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:187的胺基酸序列；及/或該等VH包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:182的胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:183的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:184的胺基酸序列。
63. 如條項59之抗原結合多肽複合物，其中與CD3特異性結合之該等VL包含與SEQ ID NO:45、297或305具有至少80%、至少85%、至少90%、至少95%或100%一致性的胺基酸序列，及與CD3特異性結合之該等VH包含與SEQ ID NO:43、44、188、293或301具有至少80%、至少85%、至少90%、至少95%或100%一致性的胺基酸序列。
64. 如條項63之抗原結合多肽複合物，其中與CD3特異性結合之該等VL包含與SEQ ID NO:45具有至少80%、至少85%、至少90%、至少95%或100%一致性的胺基酸序列，及與CD3特異性結合之該等VH包含與SEQ ID NO:43具有至少80%、至少85%、至少90%、至少95%或100%一致性的胺基酸序列；或其中與CD3特異性結合之該等VL包含與SEQ ID NO:45具有至少80%、至少85%、至少90%、至少95%或100%一致性的胺基酸序列，及與CD3特異性結合之該等VH包含與SEQ ID NO:44具有至少80%、至少85%、至少90%、至少95%或100%一致性的胺基酸序列。
65. 如條項47至64中任一項之抗原結合多肽複合物，其中與TAA或免疫刺激受體特異性結合之該等VL包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:34、40、274、282、289、314或322具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:35、41、275、283、290、315或323具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列；及CDR3，其包含與SEQ ID NO:36、42、276、284、291、316或324具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列；且其中與TAA或免疫刺激受體特異性結合之該等VH包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:31、37、270、278、286、310或318具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:32、38、271、279、287、311或319具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列；及CDR3，其包含與SEQ ID NO:33、39、272、280、288、312或320具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列。
66. 如條項65之抗原結合多肽複合物，其中特異性結合免疫刺激受體之該等VL包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:34具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:35具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:36具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或其中特異性結合免疫刺激受體之該等VH包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:31具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:32具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:33具有至少90%一致性的胺基酸序列；視情況其中該等VL包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:34的胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:35的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:36的胺基酸序列；及/或其中該等VH包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:31的胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:32的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:33的胺基酸序列。
67. 如條項65之抗原結合多肽複合物，其中與TAA特異性結合之該等VL包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:40具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:41具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:42具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或其中與TAA特異性結合之該等VH包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:37具有至少90%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:38具有至少90%一致性的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含與SEQ ID NO:39具有至少90%一致性的胺基酸序列；視情況其中該等VL包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:40的胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:41的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:42的胺基酸序列；及/或其中該等VH包含：CDR1，其包含SEQ ID NO:37的胺基酸序列；CDR2，其包含SEQ ID NO:38的胺基酸序列；及/或CDR3，其包含SEQ ID NO:39的胺基酸序列。
68. 如條項65之抗原結合多肽複合物，其中與TAA或免疫刺激受體特異性結合之該等VL包含與SEQ ID NO:47或49具有至少80%、至少85%、至少90%、至少95%或100%一致性的胺基酸序列，及與TAA或免疫刺激受體特異性結合之該等VH包含與SEQ ID NO:46或48具有至少80%、至少85%、至少90%、至少95%或100%一致性的胺基酸序列。
69. 如條項68之抗原結合多肽複合物，其中與免疫刺激受體特異性結合之該等VL包含與SEQ ID NO:47具有至少80%一致性的序列，及/或與免疫刺激受體特異性結合之該等VH包含與SEQ ID NO:46具有至少80%一致性的序列；視情況其中該等VL包含SEQ ID NO:47的胺基酸序列，及/或該等VH包含SEQ ID NO:46的胺基酸序列。
70. 如條項68之抗原結合多肽複合物，其中與TAA特異性結合之該等VL包含與SEQ ID NO:49具有至少80%一致性的序列，及/或與TAA特異性結合之該等VH包含與SEQ ID NO:48具有至少80%一致性的序列；視情況其中該等VL包含SEQ ID NO:49的胺基酸序列，及/或該等VH包含SEQ ID NO:48的胺基酸序列。
71. 如條項1至70中任一項之抗原結合多肽複合物，其中TNF1、TNF2及TNF3各自選自由以下組成之群：OX40L (TNFSF4)、4-1BBL (TNFSF9)、TNF、TNF相關細胞凋亡誘導配體(TRAIL)、CD40L (TNFSF5)、CD27L (TNFSF7)、CD30L (TNFSF8)、FasL (TNFSF6)、EDAM、LTA (TNFSF1)、LTB (TNFSF3)、CD153 (TNFSF8)、RANKL (TNFSF11)、TWEAK (TNFSF12)、APRIL (TNFSF13)、BAFF (TNFSF13B)、LIGHT (TNFSF14)、VEGI (TNFSF15)及GITRL (TNFSF18)。
72. 如條項1至71中任一項之抗原結合多肽複合物，其中TNF1、TNF2及TNF3各自為OX40L。
73. 如條項1至72中任一項之抗原結合多肽複合物，其中TNF1、TNF2及TNF3各自為4-1BBL。
74. 如條項1至73中任一項之抗原結合多肽複合物，其中該抗原結合多肽複合物為抗體或其抗原結合片段。
75. 如條項1至74中任一項之抗原結合多肽複合物，其中該免疫球蛋白鉸鏈包含上鉸鏈區、中鉸鏈區、下鉸鏈區或其組合。
76. 如條項1至75中任一項之抗原結合多肽複合物，其中該Fc區包含至少一個杵-臼修飾。
77. 如條項76之抗原結合多肽複合物，其中該抗原結合多肽複合物為IgG1或IgG4抗體，且該杵-臼修飾包含：(i) S354C及T366W之杵取代以及Y349C、T366S、L368A及Y407V之臼取代；(ii) L234A、L235A及P329A之臼取代；(iii) L234A及L235A之臼取代；(iv) M428L及N433S之臼取代；(v) M252Y、S254T及T256E之臼取代；或(vi)其組合；基於EU編號方案。
78. 一種抗體或其抗原結合片段，其包含如條項1至77中任一項之抗原結合多肽複合物。
79. 一種醫藥組合物，其包含如條項1至77中任一項之抗原結合多肽複合物或如條項78之抗體或其抗原結合片段，及醫藥學上可接受之載劑。
80. 如條項1至77中任一項之抗原結合多肽複合物、如條項78之抗體或其抗原結合片段或如條項79之醫藥組合物，其用於治療患者的疾病或病狀。
81. 如條項1至77中任一項之抗原結合多肽複合物、如條項78之抗體或抗原結合多肽複合物或如條項79之醫藥組合物，其用於治療患者的癌症。
實例
提供以下實例以進一步說明本發明之態樣，且不意欲將本發明限制於任何特定的應用或操作理論。
實例1
多特異性 TNFSF 融合抗體表現及純化
以2.5-3.0 × 10
6/mL之密度，使用聚乙烯亞胺(PEI) (Polyscience)，藉由將表現質體暫時性轉染至Expi293F細胞中產生本發明之多特異性腫瘤壞死因子超家族(TNFSF)融合抗體。將質體DNA及PEI分別稀釋於OPTi-MEM (LifeTech)中且稍後混合。混合之後10分鐘，將質體/PEI混合物以1:3 (w:w)的比率添加至細胞培養物中。轉染後16-20小時，添加丙戊酸及丙酸鈉，分別直至0.5 mM及5 mM之最終濃度。轉染後5天收集上清液，且經由0.45 μm過濾器過濾。
接著首先藉由使用蛋白A樹脂的親和層析，根據製造商標準程序，以分批模式純化多特異性抗體。在使用3M氯化鎂自蛋白A溶離出抗體之後，在兩次改變緩衝液之情況下，將其透析至10 mM組胺酸(pH 6.0) + 150 mM NaCl中隔夜。使用Hiload 16/600 Superdex 200 PG或Superdex 200 Increase 10/300 GL (Cytiva Lifesciences)，藉由尺寸排阻層析進一步純化抗體。收集具有正確溶離概況之溶離份且濃縮，以用於進一步表徵。
實例2
多特異性 OX40L 融合抗體 ELISA 結合分析
如實例1中所闡述製備及純化與CD3及CD28結合且含有OX40L三聚體之二聚體的三種多特異性抗體(MX169、MX368及MX369)。為了評定抗體與其目標蛋白之結合，進行酶聯免疫吸附分析(enzyme-linked immunosorbent assay；ELISA)。
在4℃下，將多特異性抗體之各結合位點的目標蛋白塗覆於96孔Immuno培養盤(Thermo Fisher Scientific)之孔中隔夜。在室溫下，使用含5%脫脂乳+ 2%牛血清白蛋白(bovine serum albumin；BSA)之磷酸鹽緩衝鹽水(phosphate buffered saline；PBS) + 0.25% Tween將所塗覆培養盤阻斷一小時，接著用PBS + 0.25% Tween 20洗滌三次。將連續稀釋的抗體及對照分子添加至培養盤且在室溫下培育1小時。培養盤用PBS + 0.25% Tween 20洗滌三次，與辣根過氧化酶(HRP)結合的偵測抗體一起在室溫下培育一小時，再次洗滌，且接著用過氧化酶受質(KPL, Gaithersburg, MD, USA)顯色。藉由添加100 μl之KPL TMB BlueSTOP溶液終止反應之後，使用讀盤器在OD650讀取培養盤，且在GraphPad Prism中分析資料。
圖 2A顯示MX169、MX368及MX369與人類CD3之ELISA結合結果。
圖 2B顯示MX169、MX368及MX369與人類CD28之ELISA結合結果。
圖 2C顯示MX169、MX368及MX369與人類OX40之ELISA結合結果。此等結果顯示，所有三種多特異性抗體均為功能活性的且與CD3、CD28及OX40目標蛋白結合。
實例3
螢光素酶報導子分析 - MX169 、 MX368 及 MX369
為了評定多特異性抗體MX169、MX368及MX369對於T細胞活化之影響，進行活體外螢光素酶報導子分析。根據製造商之方案製備NF-kB螢光素酶報導子Jurkat穩定細胞株(Signosis, CA, USA)及Jurkat-Lucia™ NFAT細胞(InvivoGen, CA, USA)。簡言之，使細胞在37℃水浴中解凍2分鐘且輕緩地轉移至含有10 mL預溫熱之R10培養基的15 mL錐形離心管中。將細胞在室溫下以300 g離心(pelleted) 5分鐘。移除上清液之後，將細胞再懸浮於20 mL預溫熱培養基中且轉移至75 cm
2培養瓶中，隨後在哺乳動物組織培養培育箱中培育直至細胞生長且穩定(
~3-4天)。使細胞在培養基+選擇性抗生素中維持且在解凍之後大致7天使用。
對於抗體刺激，將多特異性抗體或對照抗體連續稀釋於PBS中，且藉由在37℃組織培養培育箱中培育2-4小時塗覆至96孔平底培養盤上。用100 μL細胞添加至含有抗體之各孔中，將NF-kB螢光素酶報導子Jurkat穩定細胞再懸浮至2×10
6個細胞/毫升，且在哺乳動物培育箱中培育24小時。接著，取出分析培養盤且使其平衡至環境溫度(10-15分鐘)。在分析培養盤的各孔中添加50 μl的Bio-Glo™試劑(Promega目錄號G7941) (環境溫度)。5分鐘之後，使用Varioskan微定量盤式讀取器(Thermo Fisher)量測發光活性。使用GraphPad Prism軟體繪製資料。
用200 μL細胞添加至含有抗體之各孔中，將Jurkat-Lucia™ NFAT細胞再懸浮至7.5×10
5個細胞/毫升，且在哺乳動物培育箱中培育24小時。將20 μL細胞培養上清液吸移至新的96孔白壁微量滴定盤中。接著將50 μL的Quanti-Luc溶液(InvivoGen)添加至各孔中，之後使用Varioskan微定量盤式讀取器(Thermo Fisher)量測發光活性。使用GraphPad Prism軟體繪製資料。
圖 3A顯示對於MX169、MX368及MX369而言，在NF-κB (NFkB)啟動子控制下表現螢光素酶之Jurkat細胞株中測試之T細胞活化的倍數變化。
圖 3B顯示對於MX169、MX368及MX369而言，在NFAT啟動子控制下表現螢光素酶之Jurkat細胞株中測試之T細胞活化的倍數變化。亦顯示對照IgG1同型抗體之結果(IgG1同型)。此等結果顯示，所有三種多特異性抗體均為功能活性的且使用任一啟動子引起T細胞之劑量依賴性活化。
實例4
T 細胞增殖 分析 - MX169 、 MX368 及 MX369
為了評定多特異性抗體MX169、MX368及MX369對於T細胞之影響，進行活體外T細胞增殖分析及流式細胞分析技術。將經純化之人類周邊血液單核細胞(peripheral blood mononuclear cell；PBMC) (Blood Research Component, Brookline, MA, USA)再懸浮於培養基(具有10%胎牛血清(FBS)且補充有青黴素鏈黴素之RPMI1640) (Gibco) (2.5 × 10
5個細胞/毫升)中。藉由在37℃組織培養培育箱中培育2-4小時，首先將連續稀釋的多特異性抗體及對照抗體塗覆至96孔平底培養盤上。接著將PBMC (200 μL)添加至含有抗體的各孔中，且在37℃組織培養培育箱中培育7天。
在培育期間4天後更換細胞培養基。將細胞離心，洗滌，且用經螢光標記之抗體(針對T細胞標記(諸如CD2、CD4及CD8))以及存活染料及Precision Count Beads™ (Biolegend)進行染色，之後在Attune流式細胞儀(Thermo Fisher Scientific, USA)上獲取。使用FlowJo軟體分析資料。藉由除以來自第7天及第0天之細胞濃度，計算在處理之情況下CD4+及CD8+ T細胞增殖的倍數變化。
圖 4A 至圖 4F顯示在用MX169、MX368及MX369處理後，三個不同供體之原代人類CD4+ T細胞(
圖 4A 至圖 4C)及CD8+ T細胞(
圖 4D 至圖 4F)之增殖的倍數變化。亦顯示對照IgG1同型抗體之結果(IgG1同型)。此等結果顯示，所有三種多特異性抗體均誘導CD4+及CD8+ T細胞增殖。
實例5
多特異性 4-1BBL 融合抗體 ELISA 結合分析
如實例1中所闡述製備及純化與CD3及CD28結合且含有4-1BBL三聚體之三種多特異性抗體(MX306、MX424及MX425)。為了評定抗體與其目標蛋白之結合，進行ELISA結合分析。
在4℃下，將多特異性抗體之各結合位點的目標蛋白塗覆於96孔Immuno培養盤(Thermo Fisher Scientific)之孔中隔夜。在室溫下，使用含5%脫脂乳+ 2%牛血清白蛋白(BSA)之磷酸鹽緩衝鹽水(PBS) + 0.25% Tween將所塗覆培養盤阻斷一小時，接著用PBS + 0.25% Tween 20洗滌三次。將連續稀釋的抗體及對照分子添加至培養盤且在室溫下培育1小時。培養盤用PBS + 0.25% Tween 20洗滌三次，與辣根過氧化酶(HRP)結合的偵測抗體一起在室溫下培育一小時，再次洗滌，且接著用過氧化酶受質(KPL, Gaithersburg, MD, USA)顯色。藉由添加100 μl之KPL TMB BlueSTOP溶液終止反應之後，使用讀盤器在OD650讀取培養盤，且在GraphPad Prism中分析資料。
圖 5A顯示MX306、MX424及MX425與人類CD3之ELISA結合結果。
圖 5B顯示MX306、MX424及MX425與人類CD28之ELISA結合結果。
圖 5C顯示MX306、MX424及MX425與人類4-1BBL之ELISA結合結果。此等結果顯示，所有三種多特異性抗體均為功能活性的且與CD3、CD28及4-1BBL目標蛋白結合。
實例6
T 細胞增殖 分析 - MX306 、 MX424 及 MX425
為了評定多特異性抗體MX306、MX424及MX425對於T細胞之影響，進行活體外T細胞增殖分析及流式細胞分析技術。將PBMC (Blood Research Component, Brookline, MA, USA)再懸浮於培養基(具有10%胎牛血清(FBS)且補充有青黴素鏈黴素之RPMI1640) (Gibco) (2.5 × 10
5個細胞/毫升)中。藉由在37℃組織培養培育箱中培育2-4小時，首先將連續稀釋的多特異性抗體及對照抗體塗覆至96孔平底培養盤上。接著將PBMC (200 μL)添加至含有抗體的各孔中，且在37℃組織培養培育箱中培育7天。
在培育期間4天後更換細胞培養基。將細胞離心，洗滌，且用經螢光標記之抗體(針對T細胞標記(諸如CD2、CD4及CD8))以及存活染料及Precision Count Beads™ (Biolegend)進行染色，之後在Attune流式細胞儀(Thermo Fisher Scientific, USA)上獲取。使用FlowJo軟體分析資料。藉由除以來自第7天及第0天之細胞濃度，計算在處理之情況下CD4+及CD8+ T細胞增殖的倍數變化。
圖 6A 至圖 6F顯示在用MX306、MX424及MX425處理後，三個不同供體之原代人類CD4+ T細胞(
圖 6A 至圖 6C)及CD8+ T細胞(
圖 6D 至圖 6F)之增殖的倍數變化。亦顯示對照IgG1同型抗體之結果(IgG1同型)。此等結果顯示，所有三種多特異性抗體均誘導CD4+及CD8+ T細胞增殖。
實例7
在 OX40L 融合抗體之情況下 ， 人類 CD4 記憶 T 細胞 之增殖
為了評定多特異性抗體對於T細胞之影響，進行活體外T細胞增殖分析及流式細胞分析技術。如實例1中所闡述製備MX169。亦如實例1中所闡述製備含有OX40L三聚體之二聚體以及CD3及CD28之結合位點的MX240，如
圖 7A 至圖 7B中所示。
對於分析，將經純化之人類PBMC (Blood Research Component, Brookline, MA, USA)再懸浮於培養基(具有10% FBS且補充有青黴素鏈黴素之RPMI1640) (Gibco) (2.5×10
5個細胞/毫升)中。或者，將經純化之石蟹獼猴PBMC (Humancells Biosciences)再懸浮於培養基(具有10% FBS且補充有青黴素鏈黴素及rIL-2 (50 單位/mL)之RPMI1640) (Gibco)中。藉由在37℃組織培養培育箱中培育2-4小時，首先將連續稀釋的多特異性抗體及對照抗體(IgG1同型)塗覆至96孔平底培養盤上。接著將PBMC (200 μL)添加至含有抗體之各孔中，且在37℃組織培養培育箱中培育多個時間點(至多10天)。在培育4天後更換細胞培養基。將細胞離心，洗滌，且用經螢光標記之抗體(針對T細胞標記(諸如CD4及CD8))以及存活染料及Precision Count Beads™ (Biolegend)進行染色，之後在Attune流式細胞儀(Thermo Fisher Scientific, USA)上獲取。鑑別CD4及CD8 T細胞，且藉由CD45RA及CCR7表現表徵記憶T細胞子集。藉由除以來自第7天及第0天之細胞濃度計算倍數變化。使用FlowJo軟體分析資料。
圖 7A 至圖 7B顯示由MX169及MX240引起之T細胞增殖，其量測為來自兩個供體(分別
圖 7A及
圖 7B)之PBMC中CD4的倍數變化。亦顯示對照抗體(IgG1同型)之結果。此等結果顯示，MX169及MX240兩者均誘導CD4記憶T細胞增殖。
實例8
在 OX40L 融合抗體時程之情況下 ， 人類 CD4 記憶 T 細胞 之增殖
為了評定多特異性抗體對於T細胞之影響，進行活體外T細胞增殖分析及流式細胞分析技術。如實例1中所闡述製備MX169、MX368及MX369。如實例7中所闡述進行分析。將PBMC與多特異性抗體一起培育3、7及10天。
圖 8顯示來自三個供體之由MX169、MX368及MX369引起之T細胞增殖，其量測為PBMC中CD4的倍數變化。亦顯示對照抗體(IgG1同型)之結果。此等結果顯示，MX169、MX368及MX369均誘導CD4記憶T細胞增殖。
實例9
在 OX40L 融合抗體之情況下 ， 人類 CD8 記憶 T 細胞 之增殖
為了評定多特異性抗體對於T細胞之影響，進行活體外T細胞增殖分析及流式細胞分析技術。如實例1中所闡述製備MX169。如實例7中所闡述製備MX240。如實例7中所闡述進行分析。
圖 9顯示來自兩個供體之由MX169及MX240引起之T細胞增殖，其量測為PBMC中CD8的倍數變化。亦顯示對照抗體(IgG1同型)之結果。此等結果顯示，MX169及MX240均誘導CD8記憶T細胞增殖。
實例10
在 OX40L 融合抗體時程之情況下 ， 人類 CD8 記憶 T 細胞 之增殖
為了評定多特異性抗體對於T細胞之影響，進行活體外T細胞增殖分析及流式細胞分析技術。如實例1中所闡述製備MX169、MX368及MX369。如實例7中所闡述進行分析。將PBMC與多特異性抗體一起培育3、7及10天。
圖 10顯示來自三個供體之由MX169、MX368及MX369引起之T細胞增殖，其量測為PBMC中CD8的倍數變化。亦顯示對照抗體(IgG1同型)之結果。此等結果顯示，MX169、MX368及MX369均誘導CD8記憶T細胞增殖。
實例11
在 4-1BBL 融合抗體之情況下 ， 人類 CD4 及 CD8 記憶 T 細胞 之增殖
為了評定多特異性抗體對於T細胞之影響，進行活體外T細胞增殖分析及流式細胞分析技術。如實例5中所闡述製備MX306。亦如實例5中所闡述製備含有4-1BBL三聚體之二聚體以及CD3及CD28之結合位點的MX321，如
圖 11中所示。如實例7中所闡述進行分析。
圖 11顯示來自兩個供體之由MX306及MX321引起之T細胞增殖，其量測為PBMC中CD4或CD8的倍數變化。亦顯示對照抗體(IgG1同型)之結果。此等結果顯示，MX306及MX321均誘導CD4及CD8記憶T細胞增殖。
實例12
在 4-1BBL 融合抗體時程之情況下 ， 人類 CD4 記憶 T 細胞 之增殖
為了評定多特異性抗體對於T細胞之影響，進行活體外T細胞增殖分析及流式細胞分析技術。如實例5中所闡述製備MX306、MX424及MX425。如實例7中所闡述進行分析。將PBMC與多特異性抗體一起培育3、7及10天。
圖 12顯示來自三個供體之由MX306、MX424及MX425引起之T細胞增殖，其量測為PBMC中CD4的倍數變化。亦顯示對照抗體(IgG1同型)之結果。此等結果顯示，MX306、MX424及MX425均誘導CD4記憶T細胞增殖。
實例13
在 4-1BBL 融合抗體時程之情況下 ， 人類 CD8 記憶 T 細胞 之增殖
為了評定多特異性抗體對於T細胞之影響，進行活體外T細胞增殖分析及流式細胞分析技術。如實例5中所闡述製備MX306、MX424及MX425。如實例7中所闡述進行分析。將PBMC與多特異性抗體一起培育3、7及10天。
圖 13顯示來自三個供體之由MX306、MX424及MX425引起之T細胞增殖，其量測為PBMC中CD8的倍數變化。亦顯示對照抗體(IgG1同型)之結果。此等結果顯示，MX306、MX424及MX425均誘導CD4記憶T細胞增殖。
實例14
在 OX40L 融合抗體之情況下 ， 自原代人類 T 細胞供體之 Th1 細胞介素釋放濃度
為了評定多特異性抗體對於細胞介素釋放之影響，進行以下分析。如上文所描述製備MX169、MX368及MX369。亦使用上述方法製備MX170及MX250，其中所得結構顯示於
圖 14B中。
對於分析，使用MILLIPLEX® MAP多重分析(Millipore Sigma)，採用Drop Array系統(Curiox Biosystems, Singapore)，來分析細胞培養上清液。使用ProcartaPlex™免疫分析(Thermo Fisher)，採用Drop Array系統來分析血漿樣本。簡言之，將磁性分析物珠粒混合物添加至DropArray分析培養盤中之孔中。接著將標準品、品質對照及稀釋樣本添加至培養盤中；測試所有標準品及品質對照，重複兩次，其中樣本測試重複多次。將培養盤置於加濕箱中之磁性台架上且在4℃下振盪隔夜。培養盤用DropArray LT210洗滌台(Curiox Biosystems)洗滌。將偵測抗體及鏈球菌親生物素蛋白-PE受質添加至各孔中且在振盪下培育。洗滌培養盤，之後藉由Luminex MAGPIX儀讀取。使用EMD Millipore Milliplex Analyst軟體或Thermofisher Procartaplex Analysis Tool分析資料。
圖 14A顯示由MX169、MX170、MX250、MX369及MX369引起之自原代人類T細胞之IFNγ、IL-2、IL-6及TNFa釋放。亦顯示對照抗體(IgG1同型 iso)之結果。
實例15
在 OX40L 融合抗體之情況下 ， 自原代人類 T 細胞 供體 50 之 Th2 細胞介素釋放濃度
為了評定多特異性抗體對於細胞介素釋放之影響，進行以下分析。如上文所描述製備MX169、MX170、MX250、MX368及MX369且使用實例14中描述之方法分析。將PBMC與1 nM多特異性抗體一起培育4及7天。
圖 15顯示由MX169、MX170、MX250、MX368及MX369引起之自原代人類T細胞之IL-4、IL-5及IL-10釋放。亦顯示對照抗體(IgG1同型 iso)之結果。
實例16
在 OX40L 融合抗體之情況下 ， 自原代人類 T 細胞供體 51 之 Th1 細胞介素釋放濃度
為了評定多特異性抗體對於細胞介素釋放之影響，進行以下分析。如上文所描述製備MX169、MX170、MX250、MX368及MX369且使用實例14中描述之方法分析。將PBMC與1 nM多特異性抗體一起培育4及7天。
圖 16顯示由MX169、MX170、MX250、MX368及MX369引起之自原代人類T細胞之IFNγ、IL-2、IL-6及TNFa釋放。亦顯示對照抗體(IgG1同型 iso)之結果。
實例17
在 OX40L 融合抗體之情況下 ， 自原代人類 T 細胞 供體 51 之 Th2 細胞介素釋放濃度
為了評定多特異性抗體對於細胞介素釋放之影響，進行以下分析。如上文所描述製備MX169、MX170、MX250、MX368及MX369且使用實例14中描述之方法分析。將PBMC與1 nM多特異性抗體一起培育4及7天。
圖 17顯示由MX169、MX170、MX250、MX368及MX369引起之自原代人類T細胞之IL-4、IL-5及IL-10釋放。亦顯示對照抗體(IgG1同型 iso)之結果。
實例18
在 4-1BBL 融合抗體之情況下 ， 自原代人類 T 細胞 供體 50 之 Th1 細胞介素釋放濃度
為了評定多特異性抗體對於細胞介素釋放之影響，進行以下分析。如上文所描述製備MX306、MX170、MX424及MX425。亦使用上述方法製備MX318，其中所得結構顯示於
圖 18B中。使用實例14中描述之方法分析多特異性抗體。將PBMC與1 nM多特異性抗體一起培育4及7天。
FIG. 18A顯示由MX306、MX170、MX318、MX424及MX425引起之自原代人類T細胞之IFNγ、IL-2、IL-6及TNFa釋放。亦顯示對照抗體(IgG1同型 iso)之結果。
實例19
在 4-1BBL 融合抗體之情況下 ， 自原代人類 T 細胞 供體 50 之 Th2 細胞介素釋放濃度
為了評定多特異性抗體對於細胞介素釋放之影響，進行以下分析。如上文所描述製備MX306、MX170、MX318、MX424及MX425且使用實例14中描述之方法分析。將PBMC與1 nM多特異性抗體一起培育4及7天。
圖 19顯示由MX306、MX170、MX318、MX424及MX425引起之自原代人類T細胞之IL-4、IL-5及IL-10釋放。亦顯示對照抗體(IgG1同型 iso)之結果。
實例20
在 4-1BBL 融合抗體之情況下 ， 自原代人類 T 細胞 供體 51 之 Th1 細胞介素釋放濃度
為了評定多特異性抗體對於細胞介素釋放之影響，進行以下分析。如上文所描述製備MX306、MX170、MX318、MX424及MX425且使用實例14中描述之方法分析。將PBMC與1 nM多特異性抗體一起培育4及7天。
圖 20顯示由MX306、MX170、MX318、MX424及MX425引起之自原代人類T細胞的IFNγ、IL-2、IL-6及TNFa釋放。亦顯示對照抗體(IgG iso)之結果。
實例21
在 4-1BBL 融合抗體之情況下 ， 自原代人類 T 細胞 供體 51 之 Th2 細胞介素釋放濃度
為了評定多特異性抗體對於細胞介素釋放之影響，進行以下分析。如上文所描述製備MX306、MX170、MX318、MX424及MX425且使用實例14中描述之方法分析。將PBMC與1 nM多特異性抗體一起培育4及7天。
圖 21顯示由MX306、MX170、MX318、MX424及MX425引起之自原代人類T細胞之IL-4、IL-5及IL10釋放。亦顯示對照抗體(IgG iso)之結果。
實例22
在 4-1BBL 融合抗體之情況下 ， 猴 T 細胞 之活化
為了評定多特異性抗體對於細胞介素釋放之影響，進行以下分析。如上文所描述製備MX424。亦如上文所描述製備MX485、MX487、MX620及MX622，其具有
圖 22B中顯示之結構。使用實例14中描述之方法分析多特異性抗體，其中變化如下：將NHP PBMC與1 nM多特異性抗體在補充有rIL-2之培養基中一起培育3天。接著將細胞進行染色以用於流式細胞分析技術。鑑別出CD4及CD8細胞，且藉由CD25表現百分比來測定其活化狀態。僅具有NHP反應性抗-CD3之抗體展現T細胞活化。
圖 22A顯示由MX424、MX485、MX487、MX620及MX622引起之猴CD4及CD8 T細胞的活化。亦顯示對照抗體(IgG1同型)之結果。
實例23
在 4-1BBL 融合抗體之情況下 ， 猴 T 細胞 之增殖
亦測試在用MX424、MX485、MX487、MX620及MX622處理後猴T細胞之增殖。將石蟹獼猴非人類靈長類動物(NHP) PBMC與1 nM多特異性抗體在補充有rIL-2之培養基中一起培育8天。接著將細胞進行染色以用於流動式細胞測量術。鑑別出CD4及CD8細胞，且使用Precision Count Beads™ (Biolegend)測定其濃度。藉由用來自各時間點之細胞濃度除以第0天之細胞濃度計算倍數變化。僅具有NHP反應性抗-CD3之抗體展現T細胞增殖。對於探索性NHP研究，對石蟹獼猴使用根據經機構動物照護及使用委員會(Institutional Animal Care and Use Committee)批准之方案進行的所有動物程序及實驗。經由多個1小時IV (10-30-100 μg/kg)輸注投與來投與MX487及MX620，或經由多個1小時IV (100-300 μg/kg)輸注投與來投與MX620。在注射之前及在投與後直至第14天之所設計之多個時間點收集全血樣本。使用一組細胞表面標記進行基於循環細胞之免疫表型的流式細胞分析技術，以鑑別細胞亞群(CD2、CD4、CD8、CD45RA及CCR7)。
圖 23顯示由MX424、MX485、MX487、MX620及MX622引起之CD4及CD8細胞之倍數變化。亦顯示對照抗體(IgG1同型)之結果。
實例24
自與 4-1BBL 融合抗體一起培育之猴 T 細胞的 細胞介素釋放濃度
測試在用MX424、MX485、MX487、MX620及MX622處理後猴T細胞之細胞介素釋放。將石蟹獼猴非人類靈長類動物(NHP) PBMC與1 nM多特異性抗體在補充有rIL-2之培養基中一起培育3天。收集上清液且使用Luminex®分析進行多重分析以測定細胞介素濃度。(此分析中偵測到rIL-2補充劑)。
圖 24顯示由MX424、MX485、MX487、MX620及MX622引起之IFNγ、IL-6、IL-2及TNFa釋放。亦顯示對照抗體(IgG1同型)之結果。
實例25
在 OX40L 融合抗體之情況下 ， 猴 T 細胞 之活化
測試在用MX368及MX489處理後猴T細胞之活化。如上文所論述製備MX368。亦如上文所論述製備MX489，其具有
圖 25B中顯示之結構。為了測試活化，將石蟹獼猴非人類靈長類動物(NHP) PBMC與1 nM多特異性抗體在補充有rIL-2之培養基中一起培育3天。接著將細胞進行染色以用於流式細胞分析技術。鑑別出CD4及CD8細胞，且藉由CD25表現百分比來測定其活化狀態。僅具有NHP反應性抗-CD3之抗體展現T細胞活化。
圖 25A顯示由MX368及MX489引起之CD4及CD8猴T細胞之活化。亦顯示對照抗體(IgG1同型)之結果。
實例26
在 OX40L 融合抗體之情況下 ， 猴 T 細胞 之增殖
如上文所闡述測試在用MX368及MX489處理後，猴T細胞之增殖。將石蟹獼猴非人類靈長類動物(NHP) PBMC與1 nM多特異性抗體在補充有rIL-2之培養基中一起培育8天。接著將細胞進行染色以用於流式細胞分析技術。鑑別出CD4及CD8細胞，且使用Precision Count Beads™ (Biolegend)測定其濃度。藉由用來自各時間點之細胞濃度除以第0天之細胞濃度計算倍數變化。僅具有NHP反應性抗-CD3之抗體展現T細胞增殖。
圖 26顯示由MX368及MX489引起之CD4及CD8猴T細胞之增殖。亦顯示對照抗體(IgG1同型)之結果。
實例27
自與 OX40L 融合抗體一起培育之猴 T 細胞的 細胞介素釋放濃度
如上文所闡述測試在用MX368及MX489處理後，自猴T細胞之細胞介素釋放。將石蟹獼猴非人類靈長類動物(NHP) PBMC與1 nM多特異性抗體在培養基中一起培育3天。收集上清液且使用Luminex®分析進行多重分析以測定細胞介素濃度。
圖 27顯示由MX368及MX489引起之自猴T細胞之IFNγ (IFNg)、IL-6、IL-2及TNFa釋放。亦顯示對照抗體(IgG1同型)之結果。
實例28
NHP 中之 T 細胞 擴增且接著在給藥 4-1BBL 融合抗體 MX487 後返回至基線
對兩個石蟹獼猴非人類靈長類動物(NHP)給與3個動物內遞增劑量之4-1BBL融合抗體MX487，其以0.01、0.03 mg/kg開始，且最終劑量為0.1 mg/kg。在各時間點收集血液且藉由流式細胞分析技術進行免疫表型分型。結果顯示於
圖 28中。箭頭指示抗體給藥。此等結果顯示，靈長類動物中之T細胞擴增且接著在給藥MX487後返回至基線。
實例29
在給藥 4-1BBL 融合抗體 MX487 後 ， 初始 T 細胞 記憶子集在 NHP 中佔主導
對石蟹獼猴NHP給與3個動物內遞增劑量之4-1BBL融合抗體MX487，其中0.01、0.03及0.1 mg/kg作為最終劑量。在第一次給藥後1週收集血液且藉由流動式細胞測量術進行免疫表型分型。記憶T細胞子集之特徵在於CD45RA及CCR7表現。
圖 29顯示來自兩個不同動物之CD4及CD8 T細胞之初始、Tcm、Teff及Tem群體的百分比。此等結果顯示，在用MX487處理後，初始CD4及CD8記憶T細胞為靈長類動物中之主要群體。
實例30
在給藥 4-1BBL 融合抗體 MX620 後 ， NHP 中之 T 細胞 極大地擴增
對石蟹獼猴NHP給與3個動物內遞增劑量之4-1BBL融合抗體MX620，其中0.01、0.03及0.1 mg/kg作為最終劑量。在各時間點收集血液且藉由流式細胞分析技術進行免疫表型分型。
圖 30顯示來自用MX620處理之兩個NHP之T細胞數目以及CD4及CD8 T細胞活化。箭頭指示Ab給藥。此等結果顯示，用MX620處理後，T細胞極大地擴增。
實例31
在給藥 4-1BBL 融合抗體 MX620 後 ， 效應記憶 T 細胞 子集在 NHP 中佔主導
對石蟹獼猴NHP給與3個動物內遞增劑量之4-1BBL融合抗體MX620，其中0.01、0.03及0.1 mg/kg作為最終劑量。在第一次給藥後1週收集血液且藉由流動式細胞測量術進行免疫表型分型。記憶T細胞子集之特徵在於CD45RA及CCR7表現。
圖 31顯示來自兩個不同動物之CD4及CD8 T細胞之初始、Tcm、Teff及Tem群體的百分比。
實例32
在給藥 4-1BBL 融合抗體 MX620 後 ， NHP 中之 T 細胞 擴增
對石蟹獼猴NHP給與兩個動物內遞增劑量之4-1BBL融合抗體MX620，0.1及0.3 mg/kg。在各時間點收集血液且藉由流式細胞分析技術進行免疫表型分型。使用Precision Count Beads™ (Biolegend)測定細胞濃度。藉由用來自各時間點之細胞濃度除以第-2天值來計算倍數變化。
圖 32顯示在用MX620處理後，來自2個NHP之T細胞數目的倍數變化以及CD4及CD8 T細胞活化。箭頭指示Ab給藥。此等結果顯示，在給藥MX620後，來自NHP之T細胞擴增。
實例33
在給藥 4-1BBL 融合抗體 MX620 後 ， 效應記憶 CD8 T 細胞 子集在 NHP 中佔主導
對石蟹獼猴NHP給與兩個動物內遞增劑量之4-1BBL融合抗體MX620，0.1及0.3 mg/kg。在各時間點收集血液且藉由流式細胞分析技術進行免疫表型分型。記憶T細胞子集之特徵在於CD45RA及CCR7表現。使用Precision Count Beads™ (Biolegend)測定細胞濃度。藉由用來自各時間點之細胞濃度除以第-2天值來計算倍數變化。
圖 33顯示來自二個不同NHP之CD8 T細胞之初始、Tcm、Teff及Tem群體的倍數變化。箭頭指示Ab給藥。
實例34
Z138 細胞之活體外殺滅係由 CD19xCD20/CD3_4-1BBL 融合抗體介導
如上文所描述製備具有
圖 34中顯示之結構的MX582及MX583融合抗體。使用以下分析測試在用MX582及MX583處理48小時(E:T比率為3:1)後之Z138細胞殺滅。Z138腫瘤目標細胞用PKH26染料標記且接著在培養基中洗滌。將目標細胞以2 × 10
4個細胞之最終濃度塗鋪至96孔U形底培養盤中。製備Pan-T細胞，且以6×10
4個細胞/孔之最終濃度，以3:1之E:T比率添加。將抗體連續稀釋於培養基中且添加，最終濃度在2.5 nM降至0.8 pM之間。在37℃下在5% CO
2中培育培養盤48小時。在培育後將細胞離心(pelleted)且用紫色死細胞染料(Violet dead stain) 1:1000染色20分鐘。洗滌染料且將細胞再懸浮於FACS固定緩衝液中。藉由Attune Cytpix流式細胞儀分析細胞，隨後使用FloJo軟體分析。目標細胞閘控為PE陽性。鑑別出呈APC陽性之死目標細胞。活體外殺滅活化效果計算為細胞溶解活性百分比。溶解% = 100-(實驗活目標細胞/對照抗體組活目標細胞之平均值)×100。在GraphPad Prism中處理細胞毒性百分比。
圖 34顯示在用增加濃度之MX582及MX583處理後，Z138細胞之溶解百分比。亦顯示用對照抗體(hIgG1LALAPA)處理。此等結果顯示，MX582及MX583介導針對Z138細胞之細胞殺滅。
實例35
Z138 細胞之活體外殺滅係由 CD19xCD20/CD3_of_4-1BBL 融合抗體介導
如上文所描述製備具有
圖 35中顯示之結構的MX751、MX777及MX778融合抗體。如上文所描述測試在用MX751、MX777及MX778處理48小時(E:T比率為3:1)後之Z138細胞殺滅。
圖 35顯示在用增加濃度之MX751、MX777及MX778處理後，Z138細胞之溶解百分比。亦顯示用對照抗體(hIgG1LALAPA)處理。此等結果顯示，MX751、MX777及MX778介導針對Z138細胞之細胞殺滅。
本申請案中提及之所有公開案、專利、專利申請案及生物寄存在本文中以其全文引用之方式併入說明書中，其程度如同各個別公開案、專利、專利申請案或生物寄存專門且分別指示為以引用之方式併入本文中一般。另外，本申請案中對任何參考文獻之引用或識別不應解釋為承認此類參考文獻可作為本發明之先前技術。就使用之章節標題而言，其不應解釋為必定限制性的。
圖 1A 至圖 1F繪示本發明之例示性抗原結合多肽複合物。Fv1及Fv2表示與免疫活化受體或腫瘤相關抗原(tumor associated antigen；TAA)結合之區域。在一些態樣中，Fv1及Fv2係與人類CD3或CD28結合。在一些態樣中，Fv1及Fv2呈單鏈可變片段(scFv)形式。在一些態樣中，Fv1及Fv2呈Fab或單鏈Fab (scFab)形式，視情況具有CH1及CL區域。TNFSF表示與Fc融合之TNF超家族成員細胞外域之三聚體。在一些態樣中，TNFSF呈融合均三聚體形式。在一些態樣中，TNFSF為融合均三聚體之二聚體。
圖 2A顯示含有OX40L三聚體之三種例示性抗原結合多肽複合物(MX169、MX368及MX369)與人類CD3之ELISA結合結果。
圖 2B顯示含有OX40L三聚體之三種例示性抗原結合多肽複合物(MX169、MX368及MX369)與人類CD28之ELISA結合結果。
圖 2C顯示含有OX40L三聚體之三種例示性抗原結合多肽複合物(MX169、MX368及MX369)與人類OX40之ELISA結合結果。
圖 3A顯示在用不同濃度之含有OX40L三聚體之三種例示性抗原結合多肽複合物(MX169、MX368及MX369)刺激隔夜之後，在NF-κB (NFkb)啟動子之控制下表現螢光素酶之Jurkat細胞株中測試之T細胞活化的倍數變化。亦顯示對照IgG1同型抗體之結果(IgG1同型)。
圖 3B顯示在用不同濃度之含有OX40L三聚體之三種例示性抗原結合多肽複合物(MX169、MX368及MX369)刺激隔夜之後，在NFAT啟動子之控制下表現螢光素酶之Jurkat細胞株中測試之T細胞活化的倍數變化。亦顯示對照IgG1同型抗體之結果(IgG1同型)。
圖 4A 至圖 4F顯示來自在用含有OX40L三聚體之三種例示性抗原結合多肽複合物(MX169、MX368及MX369)中之一者處理後，三個不同供體之原代人類CD4+ T細胞(
圖 4A 至圖 4C)及CD8+ T細胞(
圖 4D 至圖 4F)之增殖的倍數變化。亦顯示對照IgG1同型抗體之結果(IgG1同型)。將人類周邊血液單核細胞(peripheral blood mononuclear cell；PBMC)與抗原結合多肽複合物一起培育7天，且進行染色用於流式細胞分析技術。鑑別CD4+及CD8+ T細胞，且使用Precision Count Beads™測定其濃度。藉由除以來自第7天及第0天之細胞濃度計算倍數變化。
圖 5A顯示含有4-1BBL三聚體之三種例示性抗原結合多肽複合物(MX306、MX424及MX425)與人類CD3之ELISA結合結果。
圖 5B顯示含有4-1BBL三聚體之三種例示性抗原結合多肽複合物(MX306、MX424及MX425)與人類CD28之ELISA結合結果。
圖 5C顯示含有4-1BBL三聚體之三種例示性抗原結合多肽複合物(MX306、MX424及MX425)與人類4-1BB之ELISA結合結果。
圖 6A 至圖 6F顯示來自在用含有4-1BBL三聚體之三種例示性抗原結合多肽複合物(MX306、MX424及MX425)處理後，三個不同供體之原代人類CD4+ T細胞(
圖 6A 至圖 6C)及CD8+ T細胞(
圖 6D 至圖 6F)之增殖的倍數變化。亦顯示對照IgG1同型抗體之結果(IgG1同型)。將人類PBMC與抗原結合多肽複合物一起培育7天，且進行染色用於流式細胞分析技術。鑑別CD4+及CD8+ T細胞，且使用Precision Count Beads™測定其濃度。藉由除以來自第7天及第0天之細胞濃度計算倍數變化。
圖 7A 至圖 7B顯示由MX169及MX240引起之T細胞增殖，其量測為來自兩個供體(分別
圖 7A及
圖 7B)之周邊血液單核細胞(PBMC)中CD4 Tcm及Tem的倍數變化。亦顯示對照抗體(hIgG1同型)之結果。
圖 8顯示來自三個供體之由MX169、MX368及MX369引起之T細胞增殖，其量測為PBMC中之CD4 Tcm及Tem的倍數變化。亦顯示對照抗體(IgG1同型)之結果。
圖 9顯示來自兩個供體之由MX169及MX240引起之T細胞增殖，其量測為PBMC中之CD8 Tcm及Tem的倍數變化。亦顯示對照抗體(IgG1同型)之結果。
圖 10顯示來自三個供體之由MX169、MX368及MX369引起之T細胞增殖，其量測為PBMC中之CD8 Tcm及Tem的倍數變化。亦顯示對照抗體(IgG1同型)之結果。
圖 11顯示來自兩個供體之由MX306及MX321引起之T細胞增殖，其量測為PBMC中之CD4 Tcm及Tem或CD8 Tcm及Tem的倍數變化。亦顯示對照抗體(IgG1同型)之結果。
圖 12顯示來自三個供體之由MX306、MX424及MX425引起之T細胞增殖，其量測為PBMC中之CD4 Tcm及Tem的倍數變化。亦顯示對照抗體(IgG1同型)之結果。
圖 13顯示來自三個供體之由MX306、MX424及MX425引起之T細胞增殖，其量測為PBMC中之CD8 Tcm及Tem的倍數變化。亦顯示對照抗體(IgG1同型)之結果。
圖 14A顯示由MX169、MX170、MX250、MX368及MX369引起之自原代人類T細胞之IFNγ、IL-2、IL-6及TNFa釋放。亦顯示對照抗體(IgG iso)之結果。
圖 14B顯示MX169、MX170、MX250、MX368及MX369之結構。
圖 15顯示由MX169、MX170、MX250、MX368及MX369引起之自原代人類T細胞之IL-4、IL-5及IL-10釋放。亦顯示對照抗體(IgG iso)之結果。
圖 16顯示由MX169、MX170、MX250、MX368及MX369引起之自原代人類T細胞之IFNγ、IL-2、IL-6及TNFa釋放。亦顯示對照抗體(IgG iso)之結果。
圖 17顯示由MX169、MX170、MX250、MX368及MX369引起之自原代人類T細胞之IL-4、IL-5及IL-10釋放。亦顯示對照抗體(IgG iso)之結果。
圖 18A顯示由MX306、MX170、MX318、MX424及MX425引起之自原代人類T細胞之IFNγ、IL-2、IL-6及TNFa釋放。亦顯示對照抗體(IgG iso)之結果。
圖 18B顯示MX306、MX170、MX318、MX424及MX425之結構。
圖 19顯示由MX306、MX170、MX318、MX424及MX425引起之自原代人類T細胞之IL-4、IL-5及IL-10釋放。亦顯示對照抗體(IgG iso)之結果。
圖 20顯示由MX306、MX170、MX318、MX424及MX425引起之自原代人類T細胞之IFNγ、IL-2、IL-6及TNFa釋放。亦顯示對照抗體(IgG iso)之結果。
圖 21顯示由MX306、MX170、MX318、MX424及MX425引起之自原代人類T細胞之IL-4、IL-5及IL10釋放。亦顯示對照抗體(IgG iso)之結果。
圖 22A顯示由MX424、MX485、MX487、MX620及MX622引起之非人類靈長類動物(non-human primate；NHP) CD4及CD8 T細胞之活化。亦顯示對照抗體(IgG1同型)之結果。
圖 22B顯示MX424、MX485、MX487、MX620及MX622之結構。
圖 23顯示由MX424、MX485、MX487、MX620及MX622引起之CD4及CD8細胞之倍數變化。亦顯示對照抗體(IgG1同型)之結果。
圖 24顯示由MX424、MX485、MX487、MX620及MX622引起之IFNγ、IL-6、IL-2及TNFa釋放。亦顯示對照抗體(IgG1同型)之結果。
圖 25A顯示由MX368及MX489引起之CD4及CD8 NHP T細胞之活化。亦顯示對照抗體(IgG1同型)之結果。
圖 25B顯示MX368及MX489之結構。
圖 26顯示由MX368及MX489引起之CD4及CD8 NHP T細胞之增殖。亦顯示對照抗體(IgG1同型)之結果。
圖 27顯示由MX368及MX489引起之自NHP T細胞之IFNγ、IL-6、IL-2及TNFa釋放。亦顯示對照抗體(IgG1同型)之結果。
圖 28顯示在兩個供體中用MX487處理後，NHP中之T細胞計數及T細胞活化百分比。
圖 29顯示在用MX487處理後，來自兩個不同NHP之CD4及CD8細胞之初始、Tcm、Teff及Tem群體的百分比。
圖 30顯示來自用MX620處理之兩個NHP之T細胞數目以及CD4及CD8 T細胞活化百分比。箭頭指示抗體給藥。
圖 31顯示在用MX620處理後，來自兩種供體之CD4及CD8 T細胞之初始、Tcm、Teff及Tem群體的百分比。
圖 32顯示在用MX620處理後，來自兩個NHP之T細胞數目的倍數變化以及CD4及CD8 T細胞活化。箭頭指示抗體給藥。
圖 33顯示來自兩個供體NHP之CD8 T細胞之初始、Tcm、Teff及Tem群體的倍數變化。箭頭指示抗體給藥。
圖 34顯示在用增加濃度之MX582及MX583處理後，Z138細胞之溶解百分比。亦顯示用對照抗體(hIgG1LALAPA)處理。
圖 35顯示在用增加濃度之MX751、MX777及MX778處理後，Z138細胞之溶解百分比。亦顯示用對照抗體(hIgG1LALAPA)處理。
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Claims (56)
- 一種抗原結合多肽複合物，其包含第一多肽、第二多肽及第三多肽； (a) 其中該第一多肽具有由以下表示的結構： VL1-L1-CL； VL1-L1-CH1； VH1-L1-CL；或 VH1-L1-CH1； 其中： (i) 該第二多肽具有由以下表示的結構： VH1-L2-CH1-L3-Fc-L4-TNF1-L5-TNF2-L6-TNF3； VH1-L2-CL-L3-Fc-L4-TNF1-L5-TNF2-L6-TNF3； VH1-L7-CH1-L8-Fc； VH1-L7-CL-L8-Fc； VL1-L2-CH1-L3-Fc-L4-TNF1-L5-TNF2-L6-TNF3； VL1-L2-CL-L3-Fc-L4-TNF1-L5-TNF2-L6-TNF3； VL1-L7-CH1-L8-Fc；或 VL1-L7-CL-L8-Fc；及 該第三多肽具有由以下表示的結構： VL2-L9-VH2-L10-Fc-L11-TNF1-L12-TNF2-L13-TNF3；或 VH2-L14-VL2-L15-Fc-L16-TNF1-L17-TNF2-L18-TNF3； 或 (ii) 該第二多肽具有由以下表示的結構： VH1-L19-CH1-L20-Fc-L21-TNF1-L22-TNF2-L23-TNF3； VH1-L19-CL-L20-Fc-L21-TNF1-L22-TNF2-L23-TNF3； VL1-L19-CH1-L20-Fc-L21-TNF1-L22-TNF2-L23-TNF3；或 VL1-L19-CL-L20-Fc-L21-TNF1-L22-TNF2-L23-TNF3；及 該第三多肽具有由以下表示的結構： VL2-L24-VH2-L25-Fc；或 VH2-L26-VL2-L27-Fc； 其中： VL1為第一免疫球蛋白輕鏈可變區； VL2為第二免疫球蛋白輕鏈可變區； VH1為第一免疫球蛋白重鏈可變區； VH2為第二免疫球蛋白重鏈可變區； Fc為包含免疫球蛋白重鏈恆定區2 (CH2)、免疫球蛋白重鏈恆定區3 (CH3)及視情況存在之免疫球蛋白鉸鏈的區域； CH1為免疫球蛋白重鏈恆定區1； CL為免疫球蛋白輕鏈恆定區； TNF1為腫瘤壞死因子超家族(tumor necrosis factor superfamily；TNFSF)配體之第一細胞外域； TNF2為TNFSF配體之第二細胞外域； TNF3為TNFSF配體之第三細胞外域；及 L1-L27為胺基酸連接子；或 (b) 其中該第一多肽具有由以下表示的結構： VL1-L1-CL； VL1-L1-CH1； VH1-L1-CL；或 VH1-L1-CH1； 其中： (i) 該第二多肽具有由以下表示的結構： VH1-CH1-L2-Fc-L3-TNF1-L4-TNF2-L5-TNF3； VH1-CL-L2-Fc-L3-TNF1-L4-TNF2-L5-TNF3； VH1-CH1-L6-Fc； VH1-CL-L7-Fc； VL1-CH1-L2-Fc-L3-TNF1-L4-TNF2-L5-TNF3； VL1-CL-L2-Fc-L3-TNF1-L4-TNF2-L5-TNF3； VL1-CH1-L6-Fc；或 VL1-CL-L7-Fc；及 該第三多肽具有由以下表示的結構： VL2-L8-VH2-L9-Fc-L10-TNF1-L11-TNF2-L12-TNF3；或 VH2-L13-VL2-L14-Fc-L15-TNF1-L16-TNF2-L17-TNF3； 或 (ii) 該第二多肽具有由以下表示的結構： VH1-CH1-L18-Fc-L19-TNF1-L20-TNF2-L21-TNF3； VH1-CL-L18-Fc-L19-TNF1-L20-TNF2-L21-TNF3； VL1-CH1-L18-Fc-L19-TNF1-L20-TNF2-L21-TNF3；或 VL1-CL-L18-Fc-L19-TNF1-L20-TNF2-L21-TNF3；及 該第三多肽具有由以下表示的結構： VL2-L22-VH2-L23-Fc；或 VH2-L24-VL2-L25-Fc； 其中： VL1為第一免疫球蛋白輕鏈可變區； VL2為第二免疫球蛋白輕鏈可變區； VH1為第一免疫球蛋白重鏈可變區； VH2為第二免疫球蛋白重鏈可變區； Fc為包含免疫球蛋白重鏈恆定區2 (CH2)、免疫球蛋白重鏈恆定區3 (CH3)及視情況存在之免疫球蛋白鉸鏈的區域； CH1為免疫球蛋白重鏈恆定區1； CL為免疫球蛋白輕鏈恆定區； TNF1為腫瘤壞死因子超家族(TNFSF)配體之第一細胞外域； TNF2為TNFSF配體之第二細胞外域； TNF3為TNFSF配體之第三細胞外域；及 L1-L25為胺基酸連接子。
- 一種抗原結合多肽複合物，其包含第一多肽及第二多肽； 其中： (i) 該第一多肽具有由以下表示的結構： VL1-L1-VH1-L2-Fc； VH1-L3-VL1-L4-Fc； VL1-L5-VH1-L6-CL-L7-CH1-L8-Fc； VL1-L5-VH1-L6-CH1-L7-CL-L8-Fc； VH1-L5-VL1-L6-CL-L7-CH1-L8-Fc； VH1-L5-VL1-L6-CH1-L7-CL-L8-Fc； VL1-L9-CL-L10-VH1-L11-CH1-L12-Fc； VL1-L9-CH1-L10-VH1-L11-CL-L12-Fc； VH1-L9-CL-L10-VL1-L11-CH1-L12-Fc； VH1-L9-CH1-L10-VL1-L11-CL-L12-Fc； VL1-L13-VH1-L14-Fc-L15-TNF1-L16-TNF2-L17-TNF3； VH1-L18-VL1-L19-Fc-L20-TNF1-L21-TNF2-L22-TNF3； VL1-L23-VH1-L24-CL-L25-CH1-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3； VL1-L23-VH1-L24-CH1-L25-CL-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3； VH1-L23-VL1-L24-CL-L25-CH1-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3； VH1-L23-VL1-L24-CH1-L25-CL-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3； VL1-VH1-L14-Fc-L15-TNF1-L16-TNF2-L17-TNF3； VH1-VL1-L19-Fc-L20-TNF1-L21-TNF2-L22-TNF3； VL1-VH1-L24-CL-L25-CH1-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3； VL1-VH1-L24-CH1-L25-CL-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3； VH1-VL1-L24-CL-L25-CH1-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3； VH1-VL1-L24-CH1-L25-CL-L26-Fc-L27-TNF1-L28-TNF2-L29-TNF3； VL1-L30-CL-L31-VH1-L32-CH1-L33-Fc-L34-TNF1-L35-TNF2-L36-TNF3； VL1-L30-CH1-L31-VH1-L32-CL-L33-Fc-L34-TNF1-L35-TNF2-L36-TNF3； VH1-L30-CL-L31-VL1-L32-CH1-L33-Fc-L34-TNF1-L35-TNF2-L36-TNF3；或 VH1-L30-CH1-L31-VL1-L32-CL-L33-Fc-L34-TNF1-L35-TNF2-L36-TNF3；及 該第二多肽具有由以下表示的結構： VL2-L37-VH2-L38-Fc-L39-TNF1-L40-TNF2-L41-TNF3； VH2-L42-VL2-L43-Fc-L44-TNF1-L45-TNF2-L46-TNF3； VL2-L47-VH2-L48-CL-L49-CH1-L50-Fc-L51-TNF1-L52-TNF2-L53-TNF3； VL2-L54-CL-L55-VH2-L56-CH1-L57-Fc-L58-TNF1-L59-TNF2-L60-TNF3； VL2-L47-VH2-L48-CH1-L49-CL-L50-Fc-L51-TNF1-L52-TNF2-L53-TNF3； VL2-L54-CH1-L55-VH2-L56-CL-L57-Fc-L58-TNF1-L59-TNF2-L60-TNF3； VL2-VH2-L38-Fc-L39-TNF1-L40-TNF2-L41-TNF3； VH2-VL2-L43-Fc-L44-TNF1-L45-TNF2-L46-TNF3； VL2-VH2-L48-CL-L49-CH1-L50-Fc-L51-TNF1-L52-TNF2-L53-TNF3； VL2-CL-L55-VH2-L56-CH1-L57-Fc-L58-TNF1-L59-TNF2-L60-TNF3； VL2-VH2-L48-CH1-L49-CL-L50-Fc-L51-TNF1-L52-TNF2-L53-TNF3；或 VL2-CH1-L55-VH2-L56-CL-L57-Fc-L58-TNF1-L59-TNF2-L60-TNF3； 或 (ii) 該第一多肽具有由以下表示的結構： VL1-L61-VH1-L62-Fc-L63-TNF1-L64-TNF2-L65-TNF3； VH1-L66-VL1-L67-Fc-L68-TNF1-L69-TNF2-L70-TNF3； VL1-L71-VH1-L72-CL-L73-CH1-L74-Fc-L75-TNF1-L76-TNF2-L77-TNF3； VL1-L71-VH1-L72-CH1-L73-CL-L74-Fc-L75-TNF1-L76-TNF2-L77-TNF3； VL1-L78-CL-L79-VH1-L80-CH1-L81-Fc-L82-TNF1-L83-TNF2-L84-TNF3；或 VL1-L78-CH1-L79-VH1-L80-CL-L81-Fc-L82-TNF1-L83-TNF2-L84-TNF3；及 該第二多肽具有由以下表示的結構： VL2-L85-VH2-L86-Fc； VH2-L87-VL2-L88-Fc； VL2-L89-VH2-L90-CL-L91-CH1-L92-Fc； VL2-L89-VH2-L90-CH1-L91-CL-L92-Fc； VL2-L93-CL-L94-VH2-L95-CH1-L96-Fc；或 VL2-L93-CH1-L94-VH2-L95-CL-L96-Fc； 其中： VL1為第一免疫球蛋白輕鏈可變區； VL2為第二免疫球蛋白輕鏈可變區； VH1為第一免疫球蛋白重鏈可變區； VH2為第二免疫球蛋白重鏈可變區； Fc為包含免疫球蛋白重鏈恆定區2 (CH2)、免疫球蛋白重鏈恆定區3 (CH3)及視情況存在之免疫球蛋白鉸鏈的區域； CH1為免疫球蛋白重鏈恆定區1； CL為免疫球蛋白輕鏈恆定區； TNF1為TNFSF配體之第一細胞外域； TNF2為TNFSF配體之第二細胞外域； TNF3為TNFSF配體之第三細胞外域；及 L1-L96為胺基酸連接子。
- 一種抗原結合多肽複合物，其包含第一多肽及第二多肽； 其中： (i) 該第一多肽具有由以下表示的結構： Fc； VL1-L1-VL2-L2-VH2-L3-VH1-L4-Fc； VH1-L5-VH2-L6-VL2-L7-VL1-L8-Fc； Fc-L9-TNF1-L10-TNF2-L11-TNF3； VL1-L12-VL2-L13-VH2-L14-VH1-L15-Fc-L16-TNF1-L17-TNF2-L18-TNF3；或 VH1-L19-VH2-L20-VL2-L21-VL1-L22-Fc-L23-TNF1-L24-TNF2-L25-TNF3；及 該第二多肽具有由以下表示的結構： VL3-L26-VL4-L27-VH4-L28-VH3-L29-Fc-L30-TNF1-L31-TNF2-L32-TNF3；或 VH3-L33-VH4-L34-VL4-L35-VL3-L36-Fc-L37-TNF1-L38-TNF2-L39-TNF3； 或 (ii) 該第一多肽具有由以下表示的結構： Fc-L40-TNF1-L41-TNF2-L42-TNF3； VL1-L43-VL2-L44-VH2-L45-VH1-L46-Fc-L47-TNF1-L48-TNF2-L49-TNF3；或 VH1-L50-VH2-L51-VL2-L52-VL1-L53-Fc-L54-TNF1-L55-TNF2-L56-TNF3；及 該第二多肽具有由以下表示的結構： Fc； VL3-L57-VL4-L58-VH4-L59-VH3-L60-Fc；或 VH3-L61-VH4-L62-VL4-L63-VL3-L64-Fc； 其中： VL1為第一免疫球蛋白輕鏈可變區； VL2為第二免疫球蛋白輕鏈可變區； VL3為第三免疫球蛋白輕鏈可變區； VL4為第四免疫球蛋白輕鏈可變區； VH1為第一免疫球蛋白重鏈可變區； VH2為第二免疫球蛋白重鏈可變區； VH3為第三免疫球蛋白重鏈可變區； VH4為第四免疫球蛋白重鏈可變區； Fc為包含免疫球蛋白重鏈恆定區2 (CH2)、免疫球蛋白重鏈恆定區3 (CH3)及視情況存在之免疫球蛋白鉸鏈的區域； TNF1為TNFSF配體之第一細胞外域； TNF2為TNFSF配體之第二細胞外域； TNF3為TNFSF配體之第三細胞外域；及 L1-L64為胺基酸連接子。
- 如請求項1至3中任一項之抗原結合多肽複合物，其中連接子L1-L96中之一或多者之長度為約0個胺基酸至約50個胺基酸。
- 如請求項1至4中任一項之抗原結合多肽複合物，其中連接子L1-L96中之一或多者為非免疫原性。
- 如請求項1至5中任一項之抗原結合多肽複合物，其中連接子L1-L96中之一或多者不含有共同T細胞抗原決定基。
- 如請求項1至6中任一項之抗原結合多肽複合物，其中連接子L1-L96中之一或多者包含SEQ ID NO:3-10及148-175中之任一者的胺基酸序列或與SEQ ID NO:3-10及148-175中之任一者具有至少50%、至少60%、至少70%、至少80%、至少90%或至少95%一致性的序列。
- 如請求項1之抗原結合多肽複合物，其中VL1及VH1係與CD3特異性結合。
- 如請求項8之抗原結合多肽複合物， 其中VL1包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:22、28、185、298及306中之任一者具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:23、29、186、299及307中之任一者具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列；及CDR3，其包含與SEQ ID NO:24、30、187、300及308中之任一者具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列；及 其中VH1包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:19、25、182、294及302中之任一者具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:20、26、183、295及303中之任一者具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列；及CDR3，其包含與SEQ ID NO:21、27、184、296及304中之任一者具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列。
- 如請求項9之抗原結合多肽複合物，其中VL1包含與SEQ ID NO:45具有至少80%、至少85%、至少90%、至少95%或100%一致性之胺基酸序列，且VH1包含與SEQ ID NO:43或44具有至少80%、至少85%、至少90%、至少95%或100%一致性之胺基酸序列。
- 如請求項1及8至10中任一項之抗原結合多肽複合物，其中VL2及VH2係與腫瘤相關抗原(tumor-associated antigen；TAA)或免疫刺激受體特異性結合。
- 如請求項11之抗原結合多肽複合物，其中該腫瘤相關抗原為酪胺酸蛋白激酶Met (cMet)、滋胚層細胞表面抗原2 (Trop2)、CD20、CD19、受體酪胺酸蛋白激酶erbB-2 (HER2)、受體酪胺酸蛋白激酶erbB-3 (HER3)、腺苷A2A受體(A2AR)、增殖誘導性配體(APRIL)、表皮生長因子受體(epidermal growth factor receptor；EGFR)、纖維母細胞生長因子受體(fibroblast growth factor receptor；FGFR)、B細胞活化因子(BAFF)、BAFF受體(BAFFR)、B細胞成熟抗原(B cell maturation antigen；BCMA)、布魯頓氏酪胺酸激酶(Bruton's tyrosine kinase；BTK)、B及T淋巴球弱化子(BTLA)、B7DC (計劃性死亡配體2)、B7同源物1 (B7H1)、B7同源物4 (B7H4)、δ樣配體3 (DLL3)、胞外核苷三磷酸酯二磷酸水解酶1 (ENTPD1)、IgE受體之Fc片段1a (FCER1A)、IgE受體之Fc片段1 (FCER1)、花生四烯酸酯5-脂肪加氧酶活化蛋白(FLAP)、葉酸羥化酶1 (FOLH1)、黏蛋白1 (MUC-1)、CD133、黏蛋白16 (MUC-16)、溶酶體相關膜蛋白1 (lysosomal-associated membrane protein 1；LAMP1)、CD38、計劃性死亡配體1 (PD-L1)、CEA細胞黏附分子5 (CEACAM5)、前列腺六跨膜上皮抗原1 (STEAP1)或上皮細胞黏附分子(EpCAM)。
- 如請求項11之抗原結合多肽複合物，其中該TAA為HER2，或該免疫刺激受體為CD28。
- 如請求項1及8至13中任一項之抗原結合多肽複合物， 其中VL2包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:34、40、274、282、290、314或322具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:35、41、275、283、291、315或323具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列；及CDR3，其包含與SEQ ID NO:36、42、276、284、292、316或324具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列；及 其中VH2包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:31、37、270、278、286、310或318具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:32、38、271、279、287、311或319具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列；及CDR3，其包含與SEQ ID NO:33、39、272、280、288、312或320具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列。
- 如請求項14之抗原結合多肽複合物，其中VL2包含與SEQ ID NO:47、49、273、281、289、313或321具有至少80%、至少85%、至少90%、至少95%或100%一致性的胺基酸序列，且VH2包含與SEQ ID NO:46、48、269、277、285、309或317具有至少80%、至少85%、至少90%、至少95%或100%一致性的胺基酸序列。
- 如請求項1之抗原結合多肽複合物，其中VL2及VH2係與CD3特異性結合。
- 如請求項16之抗原結合多肽複合物，其中VL1及VH1係與TAA或免疫刺激受體特異性結合。
- 如請求項17之抗原結合多肽複合物，其中該TAA為HER2，或該免疫刺激受體為CD28。
- 如請求項2之抗原結合多肽複合物，其中VL1及VH1係與CD3特異性結合。
- 如請求項19之抗原結合多肽複合物， 其中VL1包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:22、28、185、298及306中之任一者具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:23、29、186、299及307中之任一者具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列；及CDR3，其包含與SEQ ID NO:24、30、187、300及308中之任一者具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列；及 其中VH1包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:19、25、182、294及302中之任一者具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:20、26、183、295及303中之任一者具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列；及CDR3，其包含與SEQ ID NO:21、27、184、296及304中之任一者具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列。
- 如請求項20之抗原結合多肽複合物，其中VL1包含與SEQ ID NO:45、297或305具有至少80%、至少85%、至少90%、至少95%或100%一致性的胺基酸序列，且VH1包含與SEQ ID NO:43、44、188、293及301具有至少80%、至少85%、至少90%、至少95%或100%一致性的胺基酸序列。
- 如請求項2及19至21中任一項之抗原結合多肽複合物，其中VL2及VH2係與TAA或免疫刺激受體特異性結合。
- 如請求項22之抗原結合多肽複合物，其中該TAA為cMet、Trop2、CD20、CD19、HER2、HER3、A2AR、APRIL、EGFR、FGFR、BAFF、BAFFR、BCMA、BTK、BTLA、B7DC、B7H1、B7H4、DLL3、ENTPD1、FCER1A、FCER1、FLAP、FOLH1、MUC-1、CD133、MUC-16、LAMP1、CD38、PD-L1、CEACAM5、STEAP1或EpCAM。
- 如請求項22之抗原結合多肽複合物，其中該TAA為HER2，或該免疫刺激受體為CD28。
- 如請求項2及19至24中任一項之抗原結合多肽複合物， (i) 其中VL2包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:34、40、274、282、290、314及322具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:35、41、275、283、291、315及323中之任一者具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列；及CDR3，其包含與SEQ ID NO:36、42、276、284、292、316及324具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列；及 其中VH2包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:31、37、270、278、286、310及318具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:32、38、271、279、287、311及319具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列；及CDR3，其包含與SEQ ID NO:33、39、272、280、288、312及320具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列；或 (ii) 其中VL2包含與SEQ ID NO:47、49、273、281、289、313或321具有至少80%、至少85%、至少90%、至少95%或100%一致性的胺基酸序列，且VH2包含與SEQ ID NO:46、48、269、277、285、309或317具有至少80%、至少85%、至少90%、至少95%或100%一致性的胺基酸序列。
- 如請求項2之抗原結合多肽複合物，其中VL2及VH2係與CD3特異性結合。
- 如請求項2或26之抗原結合多肽複合物，其中VL1及VH1係與TAA或免疫刺激受體特異性結合。
- 如請求項27之抗原結合多肽複合物，其中該TAA為HER2，或該免疫刺激受體為CD28。
- 如請求項2之抗原結合多肽複合物，其中該抗原結合多肽之該VL1及該VH1係與CD3特異性結合，且該VL2及該VH2係與TAA或免疫刺激受體特異性結合；或該抗原結合多肽之該VL2及該VH2係與CD3特異性結合，且該VL1及該VH1係與TAA或免疫刺激受體特異性結合。
- 如請求項3之抗原結合多肽複合物，其中VL1、VH1、VL3及VH3係與CD3特異性結合。
- 如請求項3或30之抗原結合多肽複合物，其中VL2、VH2、VL4及VH4係與TAA或免疫刺激受體特異性結合。
- 如請求項31之抗原結合多肽複合物，其中該TAA為HER2，或該免疫刺激受體為CD28。
- 如請求項3之抗原結合多肽複合物，其中VL1、VH1、VL4及VH4係與CD3特異性結合。
- 如請求項3或30之抗原結合多肽複合物，其中VL2、VH2、VL3及VH3係與TAA或免疫刺激受體特異性結合。
- 如請求項34之抗原結合多肽複合物，其中該TAA為HER2，或該免疫刺激受體為CD28。
- 如請求項3之抗原結合多肽複合物，其中VL2、VH2、VL4及VH4係與CD3特異性結合。
- 如請求項3或30之抗原結合多肽複合物，其中VL1、VH1、VL3及VH3係與TAA或免疫刺激受體特異性結合。
- 如請求項37之抗原結合多肽複合物，其中該TAA為HER2，或該免疫刺激受體為CD28。
- 如請求項3之抗原結合多肽複合物，其中VL2、VH2、VL3及VH3係與CD3特異性結合。
- 如請求項3或30之抗原結合多肽複合物，其中VL1、VH1、VL4及VH4係與TAA或免疫刺激受體特異性結合。
- 如請求項40之抗原結合多肽複合物，其中該TAA為HER2，或該免疫刺激受體為CD28。
- 如請求項30至41中任一項之抗原結合多肽複合物， 其中與CD3特異性結合之該等VL包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:22、28、185、298及306中之任一者具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:23、29、186、299及307中之任一者具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列；及CDR3，其包含與SEQ ID NO:24、30、187、300及308中之任一者具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列；及 其中與CD3特異性結合之該等VH包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:19、25、182、294及302中之任一者具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:20、26、183、295及303中之任一者具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列；及CDR3，其包含與SEQ ID NO:21、27、184、296及304中之任一者具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列。
- 如請求項42之抗原結合多肽複合物，其中與CD3特異性結合之該等VL包含與SEQ ID NO:45、297或305具有至少80%、至少85%、至少90%、至少95%或100%一致性的胺基酸序列，且與CD3特異性結合之該等VH包含與SEQ ID NO:43、44、188、293或301具有至少80%、至少85%、至少90%、至少95%或100%一致性的胺基酸序列。
- 如請求項30至43中任一項之抗原結合多肽複合物， 其中與TAA或免疫刺激受體特異性結合之該等VL包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:34、40、274、282、290、314或322具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:35、41、275、283、291、315或323具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列；及CDR3，其包含與SEQ ID NO:36、42、276、284、292、316或324具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列；及 其中與TAA或免疫刺激受體特異性結合之該等VH包含：CDR1，其包含與SEQ ID NO:31、37、270、278、286、310或318具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列；CDR2，其包含與SEQ ID NO:32、38、271、279、287、311或319具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列；及CDR3，其包含與SEQ ID NO:33、39、272、280、288、312或320具有至少90%一致性、至少95%一致性或100%一致性的胺基酸序列。
- 如請求項44之抗原結合多肽複合物，其中與TAA或免疫刺激受體特異性結合之該等VL包含與SEQ ID NO:47、49、273、281、289、313或321具有至少80%、至少85%、至少90%、至少95%或100%一致性的胺基酸序列，且與TAA或免疫刺激受體特異性結合之該等VH包含與SEQ ID NO:46、48、269、277、285、309或317具有至少80%、至少85%、至少90%、至少95%或100%一致性的胺基酸序列。
- 如請求項1至45中任一項之抗原結合多肽複合物，其中TNF1、TNF2及TNF3各自選自由以下組成之群：OX40L (TNFSF4)、4-1BBL (TNFSF9)、TNF、TNF相關細胞凋亡誘導配體(TRAIL)、CD40L (TNFSF5)、CD27L (TNFSF7)、CD30L (TNFSF8)、FasL (TNFSF6)、EDAM、LTA (TNFSF1)、LTB (TNFSF3)、CD153 (TNFSF8)、RANKL (TNFSF11)、TWEAK (TNFSF12)、APRIL (TNFSF13)、BAFF (TNFSF13B)、LIGHT (TNFSF14)、VEGI (TNFSF15)及GITRL (TNFSF18)。
- 如請求項1至46中任一項之抗原結合多肽複合物，其中TNF1、TNF2及TNF3各自為OX40L。
- 如請求項1至46中任一項之抗原結合多肽複合物，其中TNF1、TNF2及TNF3各自為4-1BBL。
- 如請求項1至48中任一項之抗原結合多肽複合物，其中該抗原結合多肽複合物為抗體或其抗原結合片段。
- 如請求項1至49中任一項之抗原結合多肽複合物，其中該免疫球蛋白鉸鏈包含上鉸鏈區、中鉸鏈區、下鉸鏈區或其組合。
- 如請求項1至50中任一項之抗原結合多肽複合物，其中該Fc區包含至少一個杵-臼修飾。
- 如請求項51之抗原結合多肽複合物，其中該抗原結合多肽複合物為IgG1或IgG4抗體，且該杵-臼修飾包含： (i) S354C及T366W之杵取代以及Y349C、T366S、L368A及Y407V之臼取代； (ii) L234A、L235A及P329A之臼取代； (iii) L234A及L235A之臼取代； (iv) M428L及N433S之臼取代； (v) M252Y、S254T及T256E之臼取代；或 (vi) 其組合； 其係基於EU編號方案。
- 一種抗體或其抗原結合片段，其包含如請求項1至52中任一項之抗原結合多肽複合物。
- 一種醫藥組合物，其包含如請求項1至52中任一項之抗原結合多肽複合物或如請求項53之抗體或其抗原結合片段，以及醫藥學上可接受之載劑。
- 一種誘導或增強免疫反應之方法，其包含向有需要之個體投與如請求項1至52中任一項之抗原結合多肽複合物、如請求項53之抗體或其抗原結合片段、或如請求項54之醫藥組合物。
- 一種克服癌症介導之免疫抑制之方法，其包含向有需要之個體投與如請求項1至52中任一項之抗原結合多肽複合物、如請求項53之抗體或抗原結合多肽複合物、或如請求項54之醫藥組合物。
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