TW202308604A - 肌肉量增加用組成物 - Google Patents
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Abstract
本發明之目的在於提供一種哺乳動物之肌肉量增加用組成物，該肌肉量增加用組成物係包含檸檬酸、檸檬酸鹽、或者是此等之水合物或此等之混合物。
Description
本發明係關於檸檬酸、其鹽或者是此等之水合物或此等之混合物在增加肌肉量方面的用途等。
本案係依據在2021年5月10日於日本提出申請之日本特願2021-80076號而主張優先權，並於此援用其內容。
當因生病、受傷而持續臥床安靜休息一定期間時，肌力會減低，而肌肉會萎縮。像這樣因為身體處於非活動狀態而產生的障礙，已知廢用症候群(disuse syndrome)。當成為廢用症候群後，便難以回復至原本的狀態，而很有可能演變成所謂的臥床不起(bedridden)。尤其，高齡者於廢用症候群的進展快速，據稱當臥床2週時下肢肌肉會萎縮2成。近年來，隨著往高齡化社會的快速發展，廢用症候群之預防正受到重視。於此現況下，正尋求可抑制肌肉萎縮、增加肌肉量之安全的食品組成物。
專利文獻1係揭示一種食品組成物，其係含有柚皮素(naringenin)作為有效成分並抑制廢用性肌肉萎縮。
專利文獻2係揭示一種肌肉量增加用食品組成物，其係含有檸檬果汁、寡糖酸與鈣作為有效成分。
[先前技術文獻]
[專利文獻]
[專利文獻1]日本特開2016-136952號公報
[專利文獻2]日本特開2018-153166號公報
本發明之一課題在於提供有用於增加肌肉量之組成物。本發明之一課題在於提供有用於預防廢用症候群之組成物。本發明之一課題在於提供有用於長期臥床者的復健之組成物。
本發明者等為了達成上述課題而進行精心檢討，並發現檸檬酸、檸檬酸鹽、或者是此等之水合物或此等之混合物係增加肌肉量，遂完成本發明。
本發明於一方面係提供一種肌肉量增加用組成物，其係包含檸檬酸、檸檬酸鹽、或者是此等之水合物或此等之混合物。
本發明於一方面係提供一種廢用症候群的預防用組成物，其係包含檸檬酸、檸檬酸鹽、或者是此等之水合物或此等之混合物。
本發明於一方面係提供一種長期臥床者的復健效果強化用組成物，其係包含檸檬酸、檸檬酸鹽、或者是此等之水合物或此等之混合物。
本發明於一方面係提供一種高齡者之肌肉量減低抑制用組成物，其係包含檸檬酸、檸檬酸鹽、或者是此等之水合物或此等之混合物。
亦即，本發明包括以下所述方面。
(1)一種哺乳動物之肌肉量增加用組成物，其係包含檸檬酸、檸檬酸鹽、或者是此等之水合物或此等之混合物。
(2)如(1)所述之組成物，其係食品組成物。
(3)如(1)或(2)所述之組成物，其中，檸檬酸、檸檬酸鹽、或者是此等之水合物或此等之混合物為檸檬酸之鹼金屬鹽。
(4)如(1)至(3)中任一項所述之組成物，其中，檸檬酸、檸檬酸鹽、或者是此等之水合物或此等之混合物為檸檬酸鈉或其水合物與檸檬酸鉀或其水合物之混合物。
(5)如(3)或(4)所述之組成物，其更包含無水檸檬酸(anhydrous citric acid)。
(6)如(1)至(5)中任一項所述之組成物，其係於包裝、容器或說明書標示增加肌肉量之效果的食品組成物。
(7)如(1)至(6)中任一項所述之組成物，其係用於預防廢用症候群。
(8)如(1)至(7)中任一項所述之組成物，其係用於強化長期臥床者的復健效果。
(9)如(1)至(8)中任一項所述之組成物，其係用於抑制高齡者之肌肉量減低。
(10)如(1)至(9)中任一項所述之組成物，其係錠劑。
(11)如(1)至(10)中任一項所述之組成物，其係改善哺乳動物之腎功能。
(12)如(1)、(3)至(5)、及(7)至(11)中任一項所述之組成物，其係醫藥組成物。
藉由服用或攝取本發明所提供之醫藥組成物或食品組成物，肌肉量會增加。
圖1為表示經投予檸檬酸鈉、檸檬酸鉀及檸檬酸之混合物的大鼠及經投予精製水的大鼠之股外側肌之相對肌肉量(每100g體重之股外側肌的重量)之圖。線段表示平均值及標準差。
圖2為表示經投予檸檬酸鈉、檸檬酸鉀及檸檬酸之混合物的大鼠及經投予精製水的大鼠各自之投予前和投予後之肌酸酐廓清率(creatinine clearance)之圖。線段表示平均值及標準差。
本發明所提供之組成物可包含檸檬酸、檸檬酸鹽、或者是此等之水合物或此等之混合物作為有效成分。檸檬酸鹽可係作為醫藥或食品所容許之鹽。就檸檬酸鹽的例子而言，可列舉檸檬酸鹼金屬鹽。就檸檬酸鹼金屬鹽的例子而言，可列舉檸檬酸鉀及檸檬酸鈉，亦可為此等之混合物。就檸檬酸鉀及檸檬酸鈉的例子而言，分別可為穩定的檸檬酸三鉀之一水合物(C6H5K3O7．H2O)及檸檬酸三鈉之二水合物(C6H5Na3O7．2H2O)等水合物。
就較佳有效成分的例子而言，可列舉無水檸檬酸、檸檬酸鈉、檸檬酸鉀或者是其水合物或此等之混合物，例如可為檸檬酸三鉀之一水合物(C6H5K3O7．H2O)及檸檬酸三鈉之二水合物(C6H5Na3O7．2H2O)之混合物；或檸檬酸三鉀之一水合物(C6H5K3O7．H2O)、檸檬酸三鈉之二水合物(C6H5Na3O7．2H2O)及無水檸檬酸之混合物。
所屬技術領域中具有通常知識者可適宜地設定檸檬酸三鉀之一水合物(C6H5K3O7．H2O)及檸檬酸三鈉之二水合物(C6H5Na3O7．2H2O)的混合比，例如，可將檸檬酸三鉀之一水合物與檸檬酸三鈉之二水合物的莫耳比設成：相對於檸檬酸三鉀之一水合物1，檸檬酸三鈉之二水合物為0.01至100。亦可將混合比設成以莫耳比計為約1：1。
於檸檬酸三鉀之一水合物(C6H5K3O7．H2O)、檸檬酸三鈉之二水合物(C6H5Na3O7．2H2O)及無水檸檬酸之混合物中，檸檬酸三鉀之一水合物(C6H5K3O7．H2O)、檸檬酸三鈉之二水合物(C6H5Na3O7．2H2O)及無水檸檬酸的混合比可由所屬技術領域中具有通常知識者作適當設定，例如可將檸檬酸三鉀之一水合物、檸檬酸三鈉之二水合物與無水檸檬酸的莫耳比設成：相對於檸檬酸三鉀之一水合物1，檸檬酸三鈉之二水合物為0.01至100，無水檸檬酸為0.01至100。亦可將混合比設成以莫耳比計為約2：2：1。
再者，較佳有效成分的其他例子可列舉檸檬酸鈉或其水合物，例如可為檸檬酸三鈉之二水合物(C6H5Na3O7．2H2O)。
再者，較佳的有效成分的其他例子可列舉檸檬酸鉀或其水合物，例如可為檸檬酸三鉀之一水合物(C6H5K3O7．H2O)。
於一實施態樣中，本發明所提供之組成物的有效成分可包含檸檬酸或其水合物、檸檬酸鈉或其水合物與檸檬酸鉀或其水合物之混合物，亦可僅由檸檬酸或其水合物、檸檬酸鈉或其水合物與檸檬酸鉀或其水合物之混合物所構成。
於一實施態樣中，本發明所提供之組成物的有效成分可包含檸檬酸鈉或其水合物與檸檬酸鉀或其水合物之混合物，亦可僅由檸檬酸鈉或其水合物與檸檬酸鉀或其水合物之混合物所構成。
於一實施態樣中，本發明所提供之組成物的有效成分係排除檸檬酸鐵(II)、檸檬酸鐵(III)及此等之水合物(例如，檸檬酸鐵(III)水合物)，而為檸檬酸、檸檬酸鹽、或者是此等之水合物或此等之混合物。
本說明書中，當敘及檸檬酸或其水合物、檸檬酸之醫藥上所容許之鹽、或者是其水合物或此等之混合物[例如，檸檬酸三鉀之一水合物(C6H5K3O7．H2O)及檸檬酸三鈉之二水合物(C6H5Na3O7．2H2O)]的重量時，該重量可能為乾燥重量。
藉由投予或攝取本發明所提供之組成物而使得投予或攝取之對象之肌肉量增加。增加之肌肉的例子可列舉骨骼肌。肌肉量例如可為每單位體重之肌肉的重量。
再者，藉由投予或攝取本發明所提供之組成物，而改善經投予或攝取之對象的腎功能(例如，改善肌酸酐廓清率)。
本說明書中，關於肌肉量之增加和腎功能之改善、或肌肉量減低之抑制和腎功能減低之抑制，例如可藉由投予本發明所提供的組成物與投予安慰劑的比較、及/或投予本發明所提供的組成物之前與投予本發明所提供的組成物之後的比較來加以確認。
本發明所提供之組成物的投予對象可為哺乳動物(例如，人類)，並無特別限定，可由所屬技術領域中具有通常知識者進行適當選擇。
本發明所提供之組成物可對長期臥床者(例如，長期臥床的患者)進行投予或令其服用。
當為了生病或受傷等之治療而長期間持續處於安靜休息之狀態時，係有導致廢用症候群發病之情形。本發明所提供之組成物可用於廢用症候群的預防或改善，尤其是可用於預防在廢用症候群會觀察到的身體能力之減低(例如，預防肌力減低、預防肌肉量減少、預防腎功能減低)，或者可用於廢用症候群已發作之人類的身體能力之改善(例如，改善肌力、增加肌肉量、改善腎功能)或是治療。本發明所提供之組成物亦可用於強化以改善身體能力為目的之復健的效果。
再者，本發明所提供之組成物可對高齡者(例如60歲以上、65歲以上、70歲以上、75歲以上、80歲以上、90歲以上、60歲以上未達75歲、60歲以上未達90歲)進行投予或令其服用。本發明所提供之組成物可用於抑制因年齡增加所致之身體能力減低(例如，抑制肌力減低、抑制肌肉量減少、預防腎功能減低)、改善因年齡增加所致之身體能力減低(例如，改善肌力、增加肌肉量、改善腎功能)。
於一實施態樣中，本發明所提供之組成物係無須採取高強度的運動，即抑制肌力減低、抑制肌肉量減少、改善肌力、或使肌肉量增加。
於一實施態樣中，本發明所提供之組成物係抑制腎功能減低、或改善腎功能。
於一實施態樣中，本發明所提供之組成物係抑制肌肉量之減少並抑制腎功能之減低、或使肌肉量增加並改善腎功能。
本發明所提供之組成物的有效成分之檸檬酸、其鹽或者是此等之水合物或此等之混合物(例如，檸檬酸、檸檬酸鈉二水合物、檸檬酸三鉀一水合物)係已確立安全性之物質，而能夠不造成對人類有害的副作用地投予或攝取。
本說明書中，「肌肉量」係可例如藉由生物電阻抗法(生物電阻抗分析，BIA：bioelectrical impedance analysis)，而以體組成測定裝置(例如，InBody770；InBody公司製)來測定。
於一實施態樣中，肌肉量之增加可藉由進行投予本發明所提供之組成物相對於投予安慰劑或對照組之比較來表示，而能夠應用以下之算式(1)。
肌肉量的增加量(%)=[(本發明所提供的組成物投予後之肌肉量(g)-安慰劑或對照組投予後之肌肉量(g))/安慰劑或對照組投予後之肌肉量(g)]×100 (1)
於一實施態樣中，肌肉量之增加可藉由進行投予本發明所提供的組成物之後相對於投予本發明所提供的組成物之前的比較來表示，而能夠應用以下之算式(2)。
肌肉量的增加量(%)=[(本發明所提供的組成物投予後之肌肉量(g)-本發明所提供的組成物投予前之肌肉量(g))/本發明所提供的組成物投予前之肌肉量(g)]×100 (2)
於一實施態樣中，本發明所提供之組成物可連續投予6、12、24週或超過24週。例如，依與投予安慰劑或對照組之比較，本發明所提供之組成物在投予6週後之肌肉量的增加量(%)為1至20%、2至10%、3至15%、5至13%、6至12%、8至11%或9至10%；而依本發明所提供的組成物投予之前與投予之後的比較，本發明所提供之組成物在投予6週後之肌肉量的增加量(%)可為1至20%、2至10%、3至15%、5至13%、6至12%、8至11%、或9至10%。例如，依與投予安慰劑或對照組之比較，本發明所提供之組成物在投予12週後之肌肉量的增加量(%)為1至20%、2至10%、3至15%、5至13%、6至12%、8至11%、或9至10%；依本發明所提供的組成物投予之前與投予之後的比較，
本發明所提供之組成物在投予12週後之肌肉量的增加量(%)可為1至20%、2至10%、3至15%、5至13%、6至12%、8至11%、或9至10%。例如，依與投予安慰劑或對照組之比較，本發明所提供之組成物在投予24週後之肌肉量的增加量(%)為1至20%、2至10%、3至15%、5至13%、6至12%、8至11%、或9至10%；依本發明所提供的組成物投予之前與投予之後的比較，本發明所提供之組成物在投予24週後之肌肉量的增加量(%)可為1至20%、2至10%、3至15%、5至13%、6至12%、8至11%、或9至10%。
上述肌肉量的增加量(%)之算式(1)及(2)亦能夠應用於肌肉量的減少量(%)。此種情況下，將肌肉量的增加量(%)以肌肉量的減少量(%)取代，而在分別代入「本發明所提供的組成物投予後之肌肉量(g)」、「安慰劑或對照組投予後之肌肉量(g)」及「本發明所提供的組成物投予前之肌肉量(g)」後，肌肉量的減少量(%)係以負值呈現。
本說明書中，所謂的「改善」係涵蓋下述概念：使「病態的」、「異常的」或者是「不適的」症狀、狀態或疾病更接近於「健康的」、「正常的」或者是「舒適的」狀態，或為此而採取之行為或是手段；及成為「健康的」、「正常的」或者是「舒適的」狀態，或為此而採取之行為或是手段。因此，於一實施態樣中，所謂的「改善」係包括使作為「病態的」、「異常的」或者是「不適的」症狀或狀態之指標的數值因為前述「改善」而變小、或是變大，而變得接近於正常值、或成為正常值。例如，腎功能之改善即包括肌酸酐廓清率變小或是變大，而接近於正常值、或成為正常值。
本說明書中，所謂的「治療」，係包括使「病態的」、「異常的」或者是「不適的」症狀、狀態或疾病得以消除、完全治癒(complete cure)、治癒
(cure)或緩解，及為此而採取之行為或是手段，而涵蓋將「病態的」、「異常的」或者是「不適的」症狀、狀態或疾病之惡化進行「抑制」，及為此而採取之行為或是手段，並包含「改善」之概念。於一實施態樣中，所謂的「治療」係指使「病態的」、「異常的」或者是「不適的」症狀、狀態或疾病得以消除、完全治癒、治癒或緩解，及為此而採取之行為或是手段。於另一實施態樣中，所謂的「治療」係指使「病態的」、「異常的」或者是「不適的」症狀、狀態或疾病得以消除、完全治癒、治癒或緩解。
本說明書中，所謂的「抑制」係包含使症狀、狀態或疾病之惡化或發展得以停止或速度減緩，及為此而採取之行為或是手段，而且涵蓋將前述症狀、狀態或疾病進行改善、或為此而採取之行為或者是手段之概念。前述「症狀、狀態或疾病之惡化或發展」係包括：「病態的」、「異常的」或者是「不適的」症狀、狀態或疾病之惡化或發展，及由「健康的」或「正常的」狀態往「病態的」、「異常的」或者是「不適的」症狀、狀態或疾病之惡化或發展。於一實施態樣中，所謂的「抑制」係指使症狀、狀態或疾病之惡化或發展得以停止或速度減緩，或為此而採取之行為或者是手段。於另一實施態樣中，所謂的「抑制」係指使症狀、狀態或疾病之惡化或發展得以停止或速度減緩。
本說明書中，所謂的「健康」係表示沒有急性或者是慢性的疾病或障礙之狀態，所謂的「正常」係表示健康的對象一般所呈現的狀態。
本說明書中，所謂的「預防」係涵蓋對於「病態的」、「異常的」或者是「不適的」症狀、狀態或疾病之發病防範於未然、及為此而採取之行為或是手段之概念。
於一實施態樣中，本發明所提供之組成物可應用於廢用症候群的預防，對於因為生病、受傷等之治療而長期持續地處於安靜休息狀態(換言之，有成為長期臥床之風險)的哺乳動物(例如人類)，係能夠在前述安靜休息狀態開始之後攝取或投予本發明所提供之組成物。
本說明書中，所謂的「長期臥床」，係意指連續或間續地長期持續「臥床」。本說明書中，1日當中的「臥床」時間較「離床」時間來得長時，則將該日視為「臥床」。一實施態樣中，所謂的「長期臥床」係指連續或間續地「臥床」，並持續1週以上；於另一實施態樣中，係指連續或間續地持續「臥床」6週以上；於又另一實施態樣中，係指連續或間續地持續「臥床」12週以上；於再另一實施態樣中，係指連續或間續地持續「臥床」24週以上。一實施態樣中，所謂的「長期臥床」，係指連續地持續「臥床」1週以上；於另一實施態樣中，係指連續地持續「臥床」6週以上；於又另一實施態樣中，係指連續地持續「臥床」12週以上；於再另一實施態樣中，係指連續地持續「臥床」24週以上。
本說明書中，「復健(亦稱為康復，rehabilitation)之效果強化」，可藉由投予本發明所提供的組成物相對於投予安慰劑或對照組之比較來表示，例如可將如上所述之肌肉量的增加量(%)設為指標。
本說明書中，[A、B及/或C]之表述方式係表示「選自由A、B及C所組成群組中之至少一者」。
本發明所提供之組成物可為醫藥組成物或食品組成物。
本發明所提供之醫藥組成物係對人類或其他的哺乳動物以經口或非經口方式進行投予，非經口投予的例子可列舉：靜脈內投予、皮下投予、肌肉內投予、
關節內投予、經黏膜投予、經皮投予、經鼻投予、直腸投予、髓腔內投予、腹腔內投予、局部投予。
本發明所提供之醫藥組成物可由檸檬酸、檸檬酸鹽、或者是此等之水合物或此等之混合物直接調製，亦可與藥學上所容許之載體進行混合調製，而可為錠劑、膠囊劑、懸浮劑、注射劑、栓劑等製劑。前述藥學上所容許之載體係例如：賦形劑(例如乳糖、D-甘露醇、結晶纖維素、葡萄糖)、黏結劑[例如羥丙基纖維素(HPC)、明膠、聚乙烯吡咯啶酮(PVP)]、潤滑劑(例如硬脂酸鎂、滑石)、崩解劑[例如澱粉、羧甲基纖維素鈣(CMC-CA)]、稀釋劑(例如注射用水、生理食鹽水)及視需要之其它的添加劑(例如pH調整劑、界面活性劑、助溶解劑、保存劑、乳化劑、等張化劑、穩定化劑)。例如，在作成錠劑時，可將檸檬酸、其藥學上所容許之鹽或者是此等之水合物或該等的混合物與賦形劑(例如乳糖、D-甘露醇、結晶纖維素、葡萄糖)、崩解劑[例如澱粉、羧甲基纖維素鈣(CMC-CA)]、黏結劑[例如羥丙基纖維素(HPC)、明膠、聚乙烯吡咯啶酮(PVP)]、潤滑劑(例如硬脂酸鎂、滑石)等混合而進行製劑化。
屬於檸檬酸、檸檬酸鹽、或者是此等之水合物或該等的混合物之有效成分的投予量，係可因應前述有效成分的種類、投予方法、投予對象的年齡、體重、性別、症狀、對藥劑的感受性等來適當地決定，惟可因應症狀之改善狀況來調節投予量。
本發明又提供一種食品組成物，其係包含檸檬酸、檸檬酸鹽、或者是此等之水合物、或者是此等之混合物。
本發明所提供之食品組成物係能藉由被健康人士攝取而發揮肌肉(例如骨骼肌)量強化效果。
本發明所提供之食品組成物可讓高齡者(例如60歲以上、65歲以上、70歲以上、75歲以上、80歲以上、90歲以上、60歲以上未達75歲、60歲以上未達90歲)攝取。再者，本發明所提供之食品組成物可讓長期臥床者(例如長期臥床患者)攝取，亦可為了強化目的在於改善身體能力之復健的效果而攝取。
本發明所提供之食品組成物中的檸檬酸、檸檬酸鹽、或者是此等之水合物或此等之混合物的含量，係能夠依食品的種類而適當決定。食品組成物的例子可列舉：指定保健用途食品、營養輔助食品、功能宣稱食品、醫院患者用食品、增補劑(supplement)。此等就食品組成物的形態而言，若是包含用以發揮前述效果的有效量之檸檬酸、檸檬酸鹽、或是此等之水合物、或者是此等之混合物，且為可經口攝取之形態，則並非特別限定者，可為一般的飲食品的形態，亦可作為前述組成物所能應用之製劑當中的適於經口投予的製劑來提供，例如作為錠劑、膠囊劑、懸浮劑等製劑來提供。此等製劑之構成及製造方法係可應用公知之製劑技術。
例如，當為指定保健用途食品、營養輔助食品、功能宣稱食品或醫院患者用食品之情況下，每一餐份的食品可包含0.03至0.3g的1/3量之無水檸檬酸，及合計為1至3g的1/3量之檸檬酸三鉀一水合物及檸檬酸三鈉二水合物。當指定保健用途食品、營養輔助食品、功能宣稱食品、醫院患者用食品或增補劑係作成錠劑而提供之情況下，例如在每一錠之300mg至600mg的錠劑中，係可包含70至90重量%之檸檬酸、檸檬酸鹽、或者是此等之水合物或此等之混合物。
當本發明所提供之食品組成物未經製劑化而係以一般飲食品的形態來提供之情況下，可依該食品之種類而由所屬技術領域中具有通常知識者來適宜進行
製造，例如能夠藉由於食品素材中調配檸檬酸、檸檬酸鹽、或者是此等之水合物或此等之混合物來製造。
前述飲食品的形態可列舉：飲料、醬油、牛乳、優格、味噌等液狀、乳狀、或膏狀的食品；膠凍(jelly)、軟糖等半固體狀食品；糖果、口香糖、豆腐、增補劑等固體狀食品；或粉末狀食品等。
飲料可列舉：果汁/果肉飲料、咖啡飲料、烏龍茶飲料、綠茶飲料、紅茶飲料、麥茶飲料、蔬菜飲料、屬於清凉飲料(soft drink)之碳酸飲料、添加果實萃取物之飲料、添加蔬菜萃取物之果汁、風味水(flavored water)、運動飲料、減重飲料等。
飲料中，係可單獨調配或組合調配抗氧化劑、香料、各種酯類、有機酸類、有機酸鹽類、無機酸類、無機酸鹽類、無機鹽類、色素類、乳化劑、保存料、調味料、甘味料、酸味料、果汁萃取物類、蔬菜萃取物類、花蜜萃取物類、pH調整劑、品質穩定劑等添加劑。
於一實施態樣中，本發明所提供之組成物為錠劑，在1錠劑中可包含作為鹼性化劑之檸檬酸三鉀一水合物或檸檬酸三鈉二水合物10mg至1g，較佳為100mg至500mg，更佳為400mg至500mg。
於一實施態樣中，本發明所提供之組成物為錠劑，而在1錠劑中係可包含分別為10mg至300mg且合計20mg至600mg之檸檬酸三鉀一水合物及檸檬酸三鈉二水合物；較佳係檸檬酸三鉀一水合物及檸檬酸三鈉二水合物分別為150至250mg，且合計400至500mg；更佳係檸檬酸三鉀一水合物及檸檬酸三鈉二水合物分別為190至240mg，且合計400至450mg。
於一實施態樣中，本發明所提供之組成物為錠劑，而在1錠劑中係可包含作為鹼性化劑之檸檬酸三鉀一水合物或檸檬酸三鈉二水合物10mg至1g，較佳為100mg至500mg，更佳為400mg至500mg；亦可包含無水檸檬酸10mg至500mg，較佳為10mg至100mg，更佳為50mg至100mg。
於一實施態樣中，本發明所提供之組成物為錠劑，而在1錠劑中係可包含分別為10mg至300mg且合計20mg至600mg之檸檬酸三鉀一水合物及檸檬酸三鈉二水合物；較佳係檸檬酸三鉀一水合物及檸檬酸三鈉二水合物分別為150至250mg，且合計400至500mg；更佳係檸檬酸三鉀一水合物及檸檬酸三鈉二水合物分別為190至240mg，且合計400至450mg；亦可包含無水檸檬酸10mg至500mg，較佳為10mg至100mg，更佳為50mg至100mg。
一實施態樣中，本發明所提供之組成物為錠劑，而包含作為有效成分之檸檬酸三鉀一水合物(C6H5K3O7．H2O)231.5mg及檸檬酸三鈉二水合物(C6H5Na3O7．2H2O)195.0mg，亦可包含作為添加劑之無水檸檬酸、結晶纖維素、局部預糊化澱粉(partly pregelatinized starch)、羥丙基纖維素、硬脂酸鎂、羥丙甲纖維素(hypromellose)、Macrogol 6000、氧化鈦及卡拿巴蠟(carnauba wax)。於此實施態樣中，本發明所提供之錠劑亦可包含作為添加劑之無水檸檬酸72.5mg。
本發明所提供之組成物所含之有效成分的投予量或攝取量，係可由所屬技術領域中具有通常知識者適當設定。
於一實施態樣中，當有效成分為檸檬酸三鉀一水合物及檸檬酸三鈉二水合物的混合物之情況下，係可將檸檬酸三鉀一水合物及檸檬酸三鈉二水合物以分別為0.1至5g/日且合計0.2至10g/日、分別為0.1至3g/日且合計0.2至6g/日、分別為0.5至3g/日且合計1至6g/日來進行投予或攝取；較佳係以分
別為0.5至1.5g/日且合計1至3g/日、分別為1至1.5g/日且合計2至3g/日、或分別為0.5至1g/日且合計1至2g/日來進行投予或攝取；亦可分成1日1至5次、較佳為1日3次來進行投予或攝取。
於一實施態樣中，當有效成分為檸檬酸三鉀一水合物或檸檬酸三鈉二水合物之情況下，係可以1至10g/日、1至6g/日、2至5.5g/日、1至3g/日、2至3g/日或1至1.5g/日來進行投予或攝取；亦可分成1日1至5次，較佳為1日3次來進行投予或攝取。
於一實施態樣中，當有效成分為無水檸檬酸、檸檬酸三鉀一水合物及檸檬酸三鈉二水合物之混合物之情況下，係可將無水檸檬酸以0.1至2g/日來進行投予或攝取，較佳為以0.1至1g/日來進行投予或攝取，更佳為以0.3至0.6g/日來進行投予或攝取；而且，可將檸檬酸三鉀一水合物及檸檬酸三鈉二水合物以分別為0.1至5g/日且合計0.2至10g/日、分別為0.1至3g/日且合計0.2至6g/日、分別為0.5至3g/日且合計1至6g/日來進行投予或攝取；較佳係以分別為0.5至1.5g/日且合計1至3g/日、分別為1至1.5g/日且合計2至3g/日、或分別為0.5至1g/日且合計1至2g/日來進行投予或攝取；亦可分成1日1至5次、較佳為1日3次來進行投予或攝取。
於一實施態樣中，當有效成分為無水檸檬酸之情況下，係可以0.1至2g/日來進行投予或攝取，較佳為以0.1至1g/日來進行投予或攝取，更佳為以0.3至0.6g/日來進行投予或攝取；亦可分成1日1至5次、較佳為分成1日3次來進行投予或攝取。
本發明所提供之組成物的投予或攝取期間係可適當設定，例如可為：5日、1週、2週、1個月、5日以上10日以下、1週以上2週以下、1週以上1個月以下、5日以上、1週以上、2週以上或1個月以上。
本發明所提供之實施態樣的例子可列舉以下者。
(1-1)
一種檸檬酸、檸檬酸鹽或者是此等之水合物、或此等之混合物的用途，其係用於製造肌肉量增加用組成物；
(1-2)
一種檸檬酸、檸檬酸鹽或者是此等之水合物、或此等之混合物的用途，其係用於製造廢用症候群預防用組成物；
(1-3)
一種檸檬酸、檸檬酸鹽或者是此等之水合物、或此等之混合物的用途，其係用於製造長期臥床者的復健效果強化用組成物；
(1-4)
一種檸檬酸、檸檬酸鹽或者是此等之水合物、或此等之混合物的用途，其係用於製造高齡者之肌肉量減低抑制用組成物；
(1-5)
一種檸檬酸、檸檬酸鹽或者是此等之水合物、或此等之混合物的用途，其係用於製造長期臥床者或高齡者之腎功能改善用組成物；
(2-1)
一種組成物，其係包含使用於增加肌肉量用之檸檬酸、檸檬酸鹽或者是此等之水合物、或此等之混合物；
(2-2)
一種組成物，其係包含使用於預防廢用症候群用之檸檬酸、檸檬酸鹽或者是此等之水合物、或此等之混合物；
(2-3)
一種組成物，其係包含使用於強化長期臥床者的復健效果用之檸檬酸、檸檬酸鹽或者是此等之水合物、或此等之混合物；
(2-4)
一種組成物，其係包含使用於抑制高齡者之肌肉量減低用之檸檬酸、檸檬酸鹽或者是此等之水合物、或此等之混合物；
(2-5)
一種組成物，其係包含使用於改善長期臥床者或高齡者之腎功能用之檸檬酸、檸檬酸鹽或者是此等之水合物、或此等之混合物；
(3-1)
一種肌肉量之增加方法，其係包含：對於須增加肌肉量之對象投予包含有效量之檸檬酸、檸檬酸鹽或者是此等之水合物、或此等之混合物的組成物；
(3-2)
一種廢用症候群之預防方法，其係包含：對於須預防廢用症候群之對象投予包含有效量之檸檬酸、檸檬酸鹽或者是此等之水合物、或此等之混合物的組成物；
(3-3)
一種長期臥床者的復健效果之強化方法，其係包含：對於須強化復健效果之對象投予包含有效量之檸檬酸、檸檬酸鹽或者是此等之水合物、或此等之混合物的組成物；
(3-4)
一種高齡者的肌肉量減低之抑制方法，其係包含：對於須抑制肌肉量減低之對象投予包含有效量之檸檬酸、檸檬酸鹽或者是此等之水合物、或此等之混合物的組成物；
(3-5)
一種長期臥床者或高齡者之腎功能改善方法，其係包含：對於須改善腎功能之對象投予包含有效量之檸檬酸、檸檬酸鹽或者是此等之水合物、或此等之混合物的組成物；
(4-1)
如(1-1)至(1-5)、(2-1)至(2-5)及(3-1)至(3-5)中任一項所述之用途、組成物或方法，其中，檸檬酸、檸檬酸鹽或者是此等之水合物、或此等之混合物為檸檬酸之鹼金屬鹽；
(4-2)
如(1-1)至(1-5)、(2-1)至(2-5)及(3-1)至(3-5)中任一項所述之用途、組成物或方法，其中，檸檬酸、檸檬酸鹽或者是此等之水合物、或此等之混合物為檸檬酸鈉或者是其水合物、檸檬酸鉀或者是其水合物、或此等之混合物；
(4-3)
如(1-1)至(1-5)、(2-1)至(2-5)、及(3-1)至(3-5)中任一項所述之用途、組成物或方法，其中，檸檬酸、檸檬酸鹽或者是此等之水合物、或此等之混合物為檸檬酸鈉或其水合物；
(4-4)
如(1-1)至(1-5)、(2-1)至(2-5)、(3-1)至(3-5)及(4-1)至(4-5)中任一項所述之用途、組成物或方法，其中，檸檬酸、檸檬酸鹽或者是此等之水合物、或此等之混合物為檸檬酸三鈉二水合物及檸檬酸三鉀一水合物之混合物；
(4-5)
如(1-1)至(1-5)、(2-1)至(2-5)、(3-1)至(3-5)及(4-1)至(4-5)中任一項所述之用途、組成物或方法，其中，檸檬酸、檸檬酸鹽或者是此等之水合物、或此等之混合物為檸檬酸三鈉二水合物及檸檬酸三鉀一水合物之混合物，各自之經口投予量或攝取量為0.5g至1.5g/日且合計1至3g/日；
(4-6)
如(4-1)至(4-5)中任一項所述之用途、組成物或方法，其中更包含檸檬酸；
(4-7)
如(1-1)至(1-5)、(2-1)至(2-5)、(3-1)至(3-5)及(4-1)至(4-6)中任一項所述之用途、組成物或方法，其中，檸檬酸、檸檬酸鹽或者是此等之水合物、或此等之混合物為檸檬酸、檸檬酸三鈉二水合物及檸檬酸三鉀一水合物之混合物，其重量比為2：2：1；
(4-8)
如(1-1)至(1-5)、(2-1)至(2-5)、(3-1)至(3-5)及(4-1)至(4-7)中任一項所述之用途、組成物或方法，其中，組成物為食品。
(4-9)
如(1-1)至(1-5)、(2-1)至(2-5)、(3-1)至(3-5)及(4-1)至(4-8)中任一項所述之用途、組成物或方法，其中，組成物係於包裝、容器或說明書標示增加肌肉量之效果的食品組成物；
(4-10)
如(1-1)至(1-5)、(2-1)至(2-5)、(3-1)至(3-5)及(4-1)至(4-9)中任一項所述之用途、組成物或方法，其中，檸檬酸、檸檬酸鹽或者是此等之水合物、或此等之混合物為檸檬酸三鈉二水合物及檸檬酸三鉀一水合物之混合物，各自之經口投予量或攝取量為0.5g至1.5g/日且合計1至3g/日，並藉由投予或攝取而確認到肌肉量增加及/或腎功能改善。
以下係藉由實施例來進一步說明本發明，惟本發明並不侷限於此等實施例。
(實施例)
以確認檸檬酸鈉、檸檬酸鉀及檸檬酸之混合物的肌肉量增加效果為目的而進行以下實驗。
雄性Crl：將CD(SD)大鼠(投予開始時8週齡)分為2群，將試驗藥劑水溶液(D群)或者是精製水(C群)於7日中以1日2次強制反復進行經口投予。
將對照群(C群)之投予容量設為10.0mL/kg，並將試驗藥劑投予群(D群)設為投予量2000mg/kg、濃度100mg/mL、投予容量10.0mL/kg。於投予第7日的隔天進行剖檢。
又，上述試驗藥劑水溶液係以下述方式製作。
使檸檬酸三鉀一水合物(C6H5K3O7．H2O)463mg、檸檬酸三鈉二水合物(C6H5Na3O7．2H2O)390mg及無水檸檬酸145mg溶於精製水，而成為100mg/mL。
就其結果而言，相較於C群，在D群之每100g體重的股外側肌重量係顯然較高(圖1)。統計分析係採用非成對t檢定(unpaired t test)。
再者，對於投予第7日的隔天之剖檢時所採集的肌肉進行代謝體分析(Metabolomics Analysis)。
取得大鼠肌肉組織試料後，對試料添加750μL之50%乙腈水溶液(v/v)(內部標準物質濃度：20μM)，並於冷卻下使用粉碎機進行粉碎(3,500rpm，60秒×5次)，再添加相同量的50%乙腈水溶液(v/v)。組織粉碎後，進行離心分離(2,300×g，4℃，5分鐘)。離心分離後，將上層移取400μL至超濾管(Ultrafree MC PLHCC，HMT，離心式過濾單元5kDa)。將此離心(9,100×g，4℃，120分鐘)並進行超過濾處理。使濾液乾涸，再溶解於50μL之Milli-Q水，並供予進行測定。藉由CE-TOFMS及CE-QqQMS的陽離子模式、陰離子模式而實施測定。選出於醣解系統(glycolysis system)、戊醣磷酸途徑、檸檬酸循環、尿素循環、多胺/肌酸代謝途徑、嘌呤代謝途徑、麩胱甘肽代謝途徑、菸鹼醯胺代謝途徑、膽鹼代謝途徑及各種胺基酸代謝途徑中起主要作用之116種(陽離子52種、陰離子64種)代謝物質作為測定對象，進行分析。算出此等代謝物質之絕對定量值，並描繪各物質之代謝途徑。將該結果當中之非成對t檢定(unpaired t test)呈p<0.05之項目[NADPH/NADP+、費氏比率(Fischer’s Ratio)]示於表1。該些項目均為關於能量產生或蛋白質合成/分解之項目。因此，咸認D群之相對肌肉量較C群更高之值的主要原因，是因為能量產生增加、攝取檸檬酸鹽而造成促進蛋白質合成或/及抑制分解。
經測定大鼠股外側肌的重量，相較於C群，D群之每單位體重的肌肉量係顯著增加(圖1)。因為在C群與D群並未觀察到明顯的體重差異，故可排除此等之結果是由於體重增加所致之肌肉量增加所造成。再者，經測定大鼠每單位體重之肌酸酐廓清率(Ccr)，相較於C群，D群之Ccr係在投予試驗藥劑水溶液後有所增加(圖2)。又，Ccr係由體重算出投予前及剖檢日之血清肌酸酐及21小時尿中肌酸酐。具體而言，是在轉換單位後，將每1分鐘的尿中肌酸酐量除以血清肌酸酐及體重而算出。投予前與剖檢日之變化及群之間的檢定方面，係分別使用成對t檢定(paired t test)及非成對t檢定(unpaired t test)。其結果係支持投予試驗藥劑水溶液造成肌肉量增加之結果(圖1)。Ccr本身為腎功能之指標。但已知會有因腎功能減低致使肌肉量減低、因肌肉量增加而帶來保護腎臟之效果。咸認經由此種肌肉與腎臟之間的關連性，亦可能提升腎功能。再者，由於血清肌酸酐會受到肌肉量的影響，因此能夠預測C群之血清肌酸酐為較D群高之值。但是在本試驗中，雖然C群之相對肌肉量為明顯高於D群之值，但就血清肌酸酐而言並未觀察到明顯的差異。據此咸認C群之腎功能較D群更為提升。依以上知見可理解為：在本試驗中係藉由攝取檸檬酸鹽，而經由肌肉腎臟相關性來改善肌肉及腎臟之功能。
[表1]
單位：nmol/g濕組織，*p<0.05(非成對t檢定)
費氏比率(Fischer’s Ratio)：分枝鏈胺基酸/芳香族胺基酸比
(產業上之可利用性)
藉由本發明所提供之組成物等，哺乳動物之肌肉量會增加，而且改善腎功能，並能減輕高齡者、長期臥床者之照護現場的負擔。
Claims (11)
- 一種哺乳動物之肌肉量增加用組成物，其係包含檸檬酸、檸檬酸鹽、或者是此等之水合物或此等之混合物。
- 如請求項1所述之肌肉量增加用組成物，其係食品組成物。
- 如請求項1或2所述之肌肉量增加用組成物，其中，檸檬酸、檸檬酸鹽、或者是此等之水合物或此等之混合物為檸檬酸之鹼金屬鹽。
- 如請求項1或2所述之肌肉量增加用組成物，其中，檸檬酸、檸檬酸鹽、或者是此等之水合物或此等之混合物為檸檬酸鈉或其水合物與檸檬酸鉀或其水合物之混合物。
- 如請求項3所述之肌肉量增加用組成物，其更包含無水檸檬酸。
- 如請求項2所述之肌肉量增加用組成物，其係於包裝、容器或說明書標示增加肌肉量之效果的食品組成物。
- 如請求項1或2所述之肌肉量增加用組成物，其係用於預防廢用症候群。
- 如請求項1或2所述之肌肉量增加用組成物，其係用於強化長期臥床者的復健效果。
- 如請求項1或2所述之肌肉量增加用組成物，其係用於抑制高齡者之肌肉量減低。
- 如請求項1或2所述之肌肉量增加用組成物，其係錠劑。
- 如請求項1或2所述之肌肉量增加用組成物，其係改善哺乳動物之腎功能。
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