TW202243671A

TW202243671A - 乳鐵蛋白、其衍生胜肽及其抑制及/或減緩油脂生成的用途

Info

Publication number: TW202243671A
Application number: TW110116995A
Authority: TW
Inventors: 黃琇琴; 林炫
Original assignee: 肌活麗學創研所股份有限公司
Priority date: 2021-05-11
Filing date: 2021-05-11
Publication date: 2022-11-16
Also published as: TWI780699B; US20220362348A1; CN115322254A

Abstract

本發明提供一種乳鐵蛋白、其衍生胜肽、含其之組合物及其用於抑制及/或減緩油脂生成的用途。該乳鐵蛋白包含SEQ ID NO：01所示之胺基酸序列，該乳鐵蛋白的衍生胜肽包含選自至少一個SEQ ID NO：02、SEQ ID NO：03、SEQ ID NO：04所示之胺基酸序列。

Description

乳鐵蛋白、其衍生胜肽及其抑制及/或減緩油脂生成的用途

本發明關於一種乳鐵蛋白、其衍生胜肽、含其之組合物及其用途，尤指一種乳鐵蛋白、其衍生胜肽、含其之組合物及其用於抑制或減緩油脂生成的用途。

頭皮油脂（皮脂）分泌的多寡，是由基因所調控而和遺傳有關。當頭皮老化、皮脂腺調控油脂分泌的功能減弱，皮脂腺就容易受到生物體本身和外界環境的干擾，而無法適當調控油脂分泌。由皮脂腺所分泌過多的油脂會和頭皮表面的微生物、灰塵等交互作用，因而引起發炎反應，甚至造成毛囊炎和脂漏性皮膚炎。

為解決皮脂腺分泌過多油脂的問題，一般大眾通常使用包含界面活性劑的洗髮精。界面活性劑藉由乳化頭髮與頭皮上的油性汙垢，而能使該汙垢進入水中並易於洗去。頭皮便會保持乾淨且無油性汙垢，直到新的皮脂生成（YangJ （2017） Hair Care Cosmetics. In: Cosmetic Science and Technology: Theoretical Principles and Applications. Elsevier Inc., pp 601–615）。

清潔產品例如肥皂、洗髮精、及清潔劑中所包含的主要成分之界面活性劑或其他添加劑，已知會導致使用者皮膚炎或皮膚過敏。其中十二烷基硫酸钠（Sodium dodecyl sulfate，SDS）是陰離子界面活性劑並具有高去汙力，廣泛應用於清潔產品以及刺激性接觸性皮膚炎的研究中（InamiY, UtaD, AndohT　（2020） Neuronal hyperexcitability and astrocyte activation in spinal dorsal horn of a　dermatitis mouse model with cutaneous hypersensitivity. Neurosci Lett 720:134784.）。

若使用去油效果較強的洗髮精來清洗頭髮與頭皮上的油性汙垢，則細胞會認為頭皮的油脂分泌不足，反而分泌更多的油脂來保護頭皮。若又再把加強分泌的油脂洗掉，細胞就會認為油脂仍然不足而分泌更多油脂。經過幾次的循環後，細胞自我調控的機制可能瓦解，而造成皮脂平衡失調。

本發明發現乳鐵蛋白（LF）、乳鐵蛋白的衍生胜肽能有效抑制及/或減緩皮脂腺細胞的油脂生成，而能作為改善頭皮出油等問題的一個替代性解決方案。

在一方案中，本發明提供一種抑制及/或減緩油脂生成的乳鐵蛋白（LF）、乳鐵蛋白的衍生胜肽或其組合，其中該乳鐵蛋白包含SEQ ID NO：01所示之胺基酸序列，該乳鐵蛋白的衍生胜肽包含選自至少一個SEQ ID NO：02、SEQ ID NO：03、SEQ ID NO：04所示之胺基酸序列。

較佳地，其中該抑制及/或減緩油脂生成係指受施者之細胞的油脂生成被抑制或減緩，使生成的油脂含量降低。

較佳地，其中該生成的油脂含量降低的比例為受施者未施予組合物的生成的油脂含量的10至40%。

在另一方案中，本發明提供一種抑制及/或減緩油脂生成的組合物，其包含乳鐵蛋白、乳鐵蛋白的衍生胜肽或其組合，其中該乳鐵蛋白包含SEQ ID NO：01所示之胺基酸序列，該乳鐵蛋白的衍生胜肽包含選自至少一個SEQ ID NO：02、SEQ ID NO：03、SEQ ID NO：04所示之胺基酸序列。

較佳地，其中該組成物包含約5 μg/mL至1000 μg/mL之乳鐵蛋白、乳鐵蛋白的衍生胜肽或其組合。

較佳地，其中該組成物包含一或多種醫藥上可接受之載體。

較佳地，其中該組成物的劑型為軟膏劑（ointment）、凝膠劑、乳霜劑（cream）、乳液、液劑、蠟劑、粉劑、噴劑、凝膠噴劑、泡沫劑、洗髮劑、護髮劑（treatment agent）、頭皮處理劑、補劑（tonic）、滴劑或貼劑。

又另一方案中，本發明提供一種如上述所記載之組成物用於抑制及/或減緩油脂生成的用途。

較佳地，其中該抑制及/或減緩油脂生成係藉由施予該包含乳鐵蛋白、乳鐵蛋白的衍生胜肽或其組合之組成物予受施者。

較佳地，其中施予組成物予受施者的有效量為5 μg/mL至1000 μg/mL 。

較佳地，其中施予組成物予受施者的途徑為經皮。

較佳地，其中施予組成物予受施者的頻率為每天。

較佳地，其中該受施者之細胞係指皮脂腺細胞。

較佳地，其中該油脂生成係由亞麻油酸所誘發。

又另一方案中，本發明提供一種抑制及/或減緩油脂生成的方法，其包含施予如上述所記載之組成物予受施者。

除非另有定義，本文使用的所有技術及科學術語具有與本領域技術人員對於本發明所屬領域的理解相同的含義。

用語「一」或「一個」在申請專利範圍及/或說明書中與術語「包括」一同使用時，其意義為「一個」，但其亦與「一或多個」、「至少一個」、以及「一或多於一個」的含義一致。

用語「胜肽」在本文中係以其常規含義而被使用。亦即為一種聚合物，其單體為氨基酸，並藉由醯胺鍵而互相連結在一起。另可選擇地，其係指多肽（polypeptide）。當該氨基酸為α-氨基酸時，可使用L-光學異構物或D-光學異構物。此外，亦可包含非天然的氨基酸，例如β-丙氨酸、苯甘氨酸及高精氨酸。使用氨基酸的標準縮寫。

本文中所使用的術語「載體」係指一般用於調製以增進穩定性、無菌性、遞送性的藥物或化妝品組合物的材料。當胜肽遞送系統調製為一種溶液或懸浮液時，該遞送系統係於一可接受載體中。

若個體的頭皮的皮脂腺分泌過多的油脂，其會和頭皮表面的微生物、灰塵等交互作用，因而引起發炎反應，甚至造成毛囊炎和脂漏性皮膚炎，更嚴重者會引發掉髮。為了避免或改善由油脂過多所引發的問題，一般會使用去油效果較強的洗髮精來清洗頭皮或頭髮上的油性汙垢。但是去油效果較強的洗髮精中的介面活性劑可能導致使用者皮膚炎或皮膚過敏。洗髮精的去油效果過強，還可能使細胞認為頭皮的油脂分泌不足，而分泌更多的油脂，最終導致細胞自我調控分泌油脂的機制瓦解，使皮脂平衡失調。

對此，本發明的目的是開發一種新穎的組合物，其不僅不會引發使用者的不適反應，例如發炎反應，或是由此衍生的其他疾病或症狀。此一新穎的組成物還能從問題的源頭著手來抑制皮脂的生成，而非將已生成的油脂清除而可能衍生更嚴重的頭皮問題。

有鑑於此，本發明開發一種乳鐵蛋白（LF）、乳鐵蛋白的衍生胜肽或其組合，其能抑制頭皮的皮脂腺分泌油脂及/或減緩頭皮的皮脂腺分泌油脂的速率。該乳鐵蛋白可以透過化學合成，也可以透過萃取的技術自天然乳汁中分離取得。在一實施例中，該乳鐵蛋白為牛乳鐵蛋白。在一較佳實施例中，該乳鐵蛋白包含SEQ ID NO：01所示之胺基酸序列。該乳鐵蛋白的衍生胜肽可以透過化學合成。在一實施例中，該乳鐵蛋白衍生胜肽選自至少一個乳鐵蛋白胜肽69-75、乳鐵蛋白胜肽85-91或乳鐵蛋白胜肽695-701。在一較佳實施例中，乳鐵蛋白胜肽69-75包含SEQ ID NO：02所示之胺基酸序列、乳鐵蛋白胜肽85-91包含SEQ ID NO：03所示之胺基酸序列、乳鐵蛋白胜肽695-701包含SEQ ID NO：04所示之胺基酸序列。

本發明又開發一種組合物，其包含如上述的乳鐵蛋白、乳鐵蛋白的衍生胜肽或其組合。在一實施例中，該組成物包含乳鐵蛋白、乳鐵蛋白的衍生胜肽或其組合的含量為約5 μg/mL至1000 μg/mL，較佳為約100 μg/mL至500 μg/mL，更佳為約200 μg/mL至400 μg/mL。

本發明的組成物，在不影響乳鐵蛋白、乳鐵蛋白的衍生胜肽或其組合的生物活性下，為增進穩定性、無菌性、遞送性而包含載體。在一實施例中，該組成物包含一或多種醫藥上可接受之載體。在一較佳實施例中，該可接受載體為水性載體。可使用的多種水性載體，例如水、緩衝液、0.8%鹽水、0.3%甘氨酸、透明質酸等。另外，該組合物可含有如所需要而可接近生理條件的生理上可接受的輔助物質，例如pH調整及緩衝劑、溶液張力調節劑、潤濕劑及其類似物。具體舉例如乙酸鈉、乳酸鈉、氯化鈉、氯化鉀、氯化鈣、山梨醇酐單月桂酸酯、油酸三乙醇胺等。

本發明的組成物，在不影響乳鐵蛋白、乳鐵蛋白的衍生胜肽或其組合的生物活性下，得利用已知的廣泛使用的技術來製劑。在一實施例中，該組成物的劑型為外用劑。外用劑只要能將組成物塗佈、噴霧或貼附於欲施予個體的皮膚的欲施予部位（患部），並無特別限制。外用劑舉例如軟膏劑（ointment）、凝膠劑、乳霜劑（cream）、乳液、液劑、蠟劑、粉劑、噴劑、凝膠噴劑、泡沫劑、洗髮劑、護髮劑（treatment agent）、頭皮處理劑、補劑（tonic）、滴劑或貼劑。在一較佳實施例中，該組成物的劑型為軟膏劑（ointment）、凝膠劑、乳霜劑、乳液、液劑、噴劑、洗髮劑、護髮劑、滴劑或貼劑。上述該等外用劑得以是乳鐵蛋白、乳鐵蛋白的衍生胜肽或其組合作為有效成分，再依需要加入藥學上容許的基劑，或是視需要而定的各種添加劑。

本發明的軟膏製劑，得為油脂性基劑與水溶性基劑中的任一者，且兩者均得根據公知方法而容易獲得。凡士林等油脂性基劑刺激感少而無臭，且在皮膚保護作用、柔軟化作用、痂皮去除作用、肉芽形成、上皮化促進作用等方面效果優異。凡士林雖會因溫度而改變黏度、稠度，因此在冬季與夏季的硬度不同，但為安全性高的基劑之一。凡士林包括黃色凡士林與純化度更高的白色凡士林，兩者均可以使用。水溶性基劑為聚乙二醇（macrogol）為主的軟膏，其吸收水性分泌物而去除的作用強。軟膏劑（凡士林製劑）得根據公知或習知的方法，將適量的乳鐵蛋白、乳鐵蛋白的衍生胜肽或其組合溶解於蒸餾水或生理食鹽水中而成為水溶液，再進一步將其與公知或習知的凡士林混合並攪拌，而藉此獲得。

本發明的凝膠劑（懸浮性基劑）得為含水凝膠、無水凝膠、由能夠膨潤的凝膠形成材料所構成的低含水量凝膠。再者，凝膠劑亦得為水溶膠（hydrogel）基劑或水凝膠（lyogel）基劑，以將無機或有機高分子作為基底的透明水溶膠為佳。凝膠本身與含油或含脂肪成分的製劑同樣地不會被皮膚吸收。水溶膠基劑，是無脂肪而具有軟膏般的稠度，目標在於提高藥劑的經皮吸收性的物質。水凝膠基劑則是使硬脂醇等懸浮於丙二醇中並凝膠化而成的物質，其經皮吸收性和吸濕性優異。凝膠劑也可以填充於噴霧容器而作為凝膠噴劑來使用。本發明的凝膠劑得為使乳鐵蛋白、乳鐵蛋白的衍生胜肽或其組合均勻地分散於親水性凝膠基劑中而成的凝膠劑。該親水性凝膠基劑包含羧基乙烯聚合物、聚丙烯酸鈉、（乙烯甲醚/馬來酸乙酯）共聚物、聚甲基丙烯酸酯、丙二醇等。凝膠劑得根據公知或習知的方法，將適量的乳鐵蛋白、乳鐵蛋白的衍生胜肽或其組合溶解於蒸餾水或生理食鹽水中而成為水溶液，再進一步將其與公知或習知的凝膠基劑混合並攪拌，而藉此獲得。

本發明的乳霜劑（乳劑性基劑）得為水中油型基劑（O/W）（消散乳霜（vanishing cream）），亦為油中水型基劑（W/O）（冷霜（cold cream））。水中油型基劑的油溶性成分比水溶性成分少，具有塗佈時乳霜的白色會消失的優點。乳霜的推勻度佳，在出汗的皮膚上的使用感也良好、美容性優異、皮膚吸收性亦佳。油中水型基劑的水溶性成分比油溶性成分少，當於皮膚上推勻並塗佈時具有冷卻作用，因此又稱為冷霜。

本發明的乳液相較於軟膏或乳霜會附著於毛髮上，乳液較適合用於頭髮部位等。乳液的型態得為懸浮性乳液基劑、乳劑性乳液、溶液性乳液基劑中之任一者。

本發明的液劑是使作為有效成分的乳鐵蛋白、乳鐵蛋白的衍生胜肽或其組合溶解於作為基劑的醇、丙二醇、聚乙二醇、水等而成者。在一較佳實施例中，由將乳鐵蛋白、乳鐵蛋白的衍生胜肽或其組合溶解於生理食鹽水而成的水溶液所構成的液劑。水溶液中，除了生理食鹽水外，亦得混合少量的醇、丙二醇、聚乙二醇之類的有機基劑。

本發明的噴劑是將乳鐵蛋白、乳鐵蛋白的衍生胜肽或其組合做成溶液，藉由氣體壓力或手壓操作而噴霧。噴劑劑型在廣範圍使用時相較於其他劑型更為便利。

本發明的泡沫劑是將乳鐵蛋白、乳鐵蛋白的衍生胜肽或其組合做成溶液，並使其含有較溫和之胺基酸類的界面活性劑，藉此以泡狀釋放的噴劑。從頭皮附著性的觀點而言，泡沫劑的效果優異。

本發明的洗髮劑是使乳鐵蛋白、乳鐵蛋白的衍生胜肽或其組合混合或溶解於洗髮乳中，而能於洗髮時同時塗佈的劑型。因為洗髮乳包含較溫和之胺基酸類的界面活性劑，所以具有使乳鐵蛋白、乳鐵蛋白的衍生胜肽或其組合滲透至頭皮的效果。特別在皮脂仍分泌過多的情況下，洗髮劑因能夠去除過剩皮脂而有利。

本發明的護髮劑是使乳鐵蛋白、乳鐵蛋白的衍生胜肽或其組合混合或溶解於洗髮時所使用的護髮劑中，而能於護理頭髮時同時塗佈的劑型。護髮劑能夠於塗佈藥劑時同時對頭皮補充水分和油分。護髮劑因為能夠於塗佈時對頭皮兼具保濕及油分補給的功能而有利。

本發明的頭皮護理劑是指特別調配以頭皮保濕及油分補給為目的之成分而成的護髮劑。頭皮護理劑中，大多調配有迷迭香萃取物、無患子萃取物、椰子萃取物等各式各樣的植物萃取成分。

本發明的補劑得藉由調配乳鐵蛋白、乳鐵蛋白的衍生胜肽或其組合，並同時調配下述基材：50%至70%之醇類與水；檜木醇（hinokitiol）、泛醇（panthenol，維他命原B5）或當藥萃取物（Swertia Japonica extract）等具有保持頭髮、頭皮健康的作用的成分；具有類似女性荷爾蒙作用的甘草酸二鉀，並於其中調配殺菌劑、甘油之類的保濕成分、使頭皮屑易於清除之水楊酸、防止搔癢感並賦予清涼感的薄荷醇、香料等。補劑是為了防止頭皮屑、頭臭並保持頭髮清潔，同時防止搔癢感、悶濕，消除關於頭髮令人不快的症狀，一般是在洗髮後才使用的劑型。

本發明之組成物可應用上述各種劑型，亦可因應需要而於此等中適當地添加一般所用的其他成分，例如增黏劑、維他命類、胺基酸類、抗皺紋劑、海藻萃取物、細胞賦活劑、經皮吸收促進劑、發泡劑、可溶化劑、角質溶解劑、賀爾蒙類、顏料、可塑劑、無機粉末、有機粉末等。

本發明根據如上述的乳鐵蛋白、乳鐵蛋白的衍生胜肽或其組合，以及含其之組合物，再開發一種用於抑制及/或減緩油脂生成的用途及方法。本發明的組成物藉由施予該包含乳鐵蛋白、乳鐵蛋白的衍生胜肽或其組合之組成物予受施者，來達到該抑制及/或減緩受施者細胞之油脂生成的效果。在一實施例中，施予組成物予受施者的有效量為5 μg/mL至1000 μg/mL，較佳為100 μg/mL至500 μg/mL，更佳為200 μg/mL至400 μg/mL。

本發明施予組成物予受施者的途徑取決於該組合物的型態及受施予者所適合的劑量。在一較佳實施例中，施予途徑舉例如經皮。本發明施予組成物予受施者的頻率取決該組合物的型態及受施予者所適合的劑量。在一實施例中，施予頻率舉例如每天、每週。

本發明的組成物藉由包含乳鐵蛋白、乳鐵蛋白的衍生胜肽或其組合，而具有抑制及/或減緩油脂生成的效果。在一實施例中，該抑制油脂生成係指接受施予本發明組合物的個體（受施者）之細胞的油脂生成被抑制，而使受施者在施予組合物後細胞所生成的油脂含量，相較於施予組合物前有所降低。在一實施例中，該減緩油脂生成係指接受施予本發明組合物的個體（受施者）之細胞的油脂生成被減緩，而使受施者在施予組合物後細胞所生成的油脂含量，相較於施予組合物前有所降低。在一實施例中，該生成的油脂含量降低的比例經由下式算出：受施者施予組合物後細胞所生成的油脂含量/受施者施予組合物前細胞所生成的油脂含量x100%。在一實施例中，該生成的油脂含量降低的比例為受施者未施予組合物的生成的油脂含量的10至 40%，較佳為20至30%，更佳為30至40%。

本發明組成物所施予的受施者受施者為人類或動物，較佳為人類。本發明的受施者之細胞係指皮脂腺細胞。本發明組成物所針對的油脂生成的機制並未特別限定。在一實施例中，本發明組成物所針對的油脂生成的機制中，該油脂生成係由亞麻油所誘發。

以下實施例謹記載本發明研發所進行的試驗，以進一步釋明本發明的特徵與優點。惟需理解的是，所列實施例僅是示範性地例示所請發明，不應用於限制本發明的申請專利範圍。

材料與方法

1.樣品備製

牛乳鐵蛋白購自麗豐實業股份有限公司（New Bellus Enterprise Co., Ltd）（台灣，台南），並儲存於常溫備用，若長期使用則存放於冷藏。乳鐵蛋白胜肽69-75、乳鐵蛋白胜肽85-91、乳鐵蛋白胜肽695-701購自丹港生物科技有限公司（DgPeptides Co.,Ltd）（中國，杭州）。以高效液相層析法（HPLC）及質譜儀確認該等乳鐵蛋白胜肽的純度及組成。10mg的胜肽凍乾粉末溶解於1mL的雙去離子水（ddH ₂O），並儲存於-20℃下，以備用作為乳鐵蛋白胜肽的樣本。尼羅紅（Nile red）購自西格瑪奧德里奇公司（Sigma-Aldrich Corporation）（美國，密蘇里州）。尼羅紅溶解於1mg/mL的丙酮，以備用作為染劑。

2.細胞培養

人類皮脂腺細胞（Cat. No. 36079-01, Celprogen, Torrance, CA, USA）培養於達爾伯克改良伊格爾培養基（Dulbecco's Modified Eagle Medium, DMEM）：購自賽默飛世爾科技股份有限公司（Thermo Scientific, Barrington, IL, USA）的營養混合物F-12（Nutrient Mixture F-12, DMEM/F12）與購自Gibco, Grand Island, NY, USA的10%胎牛血清（fetal bovine serum, FBS），以及青黴素/鏈黴素（penicillin/streptomycin （100 IU/50 g/mL），並在37℃、5%CO ₂環境下培養。

3.自然脂肪檢測

人類皮脂腺細胞植入24或96孔盤。培養24小時後，細胞分為負對照組、正對照組及實驗組。負對照組不做任何處理、正對照組添加0.1 mM 亞麻油酸（Linoleic acid，LA）、實驗組添加0.1 mM 亞麻油酸（Linoleic acid，LA）以及100至400 μg/mL的牛乳鐵蛋白、25至100 μg/mL的乳鐵蛋白胜肽69-75、乳鐵蛋白胜肽85-91或乳鐵蛋白胜肽695-701。經處理後的人類皮脂腺細胞培養兩天。人類皮脂腺細胞在室溫下以4%甲醛（formaldehyde）固定。固定60分鐘後，細胞以PBS清洗並以尼羅紅溶液（1 μg/ml in PBS）於37℃下染色15分鐘。接著，清洗細胞並於螢光顯微鏡下觀察。螢光強度以fluorometer Spectra Max i3測量。

實驗結果

圖1顯示皮脂腺細胞在負對照組、正對照組、實驗組100μg/mL、200μg/mL、400μg/mL的乳鐵蛋白下的油脂含量。B正對照組相較於A負對照組的螢光強度增加，說明正對照組添加LA確實誘發油脂生成。C實驗組200μg/mL的乳鐵蛋白相較於B正對照組的螢光強度減少，說明實驗組添加乳鐵蛋白能抑制及/或減緩由LA所誘發的油脂生成，而使最終的油脂含量減少。D的負對照組螢光強度約1.0、正對照組的螢光強度約2.0、實驗組100μg/mL乳鐵蛋白的螢光強度約1.5、實驗組200μg/mL乳鐵蛋白的螢光強度約1.5、實驗組400μg/mL乳鐵蛋白的螢光強度約1.5。正對照組的螢光強度相較於負對照組螢光強度顯示***，說明添加LA所誘發生成的油脂含量存在顯著差異，且油脂含量達2倍以上。實驗組的螢光強度相較於正對照組螢光強度顯示###，說明添加乳鐵蛋白能抑制及/或減緩由LA所誘發生成的油脂含量存在顯著差異，且油脂含量減少達25%。此外，隨著添加的乳鐵蛋白的濃度提升，油脂含量跟著減少，說明乳鐵蛋白抑制及/或減緩由LA所誘發生成的油脂含量存在劑量依存性。更甚者，實驗組中的400μg/mL乳鐵蛋白的螢光強度相較於負對照組螢光強度未顯示*，說明添加乳鐵蛋白至特定濃度能抑制及/或減緩由LA所誘發生成的油脂含量，達到未添加LA而無油脂生成的程度。

圖2顯示皮脂腺細胞在負對照組、正對照組、實驗組25μg/mL、50μg/mL、100μg/mL的乳鐵蛋白胜肽69-75下的油脂含量。B正對照組相較於A負對照組的螢光強度增加，說明正對照組添加LA確實誘發油脂生成。C實驗組50μg/mL的乳鐵蛋白胜肽69-75相較於B正對照組的螢光強度減少，說明實驗組添加乳鐵蛋白胜肽69-75能抑制及/或減緩由LA所誘發的油脂生成，而使最終的油脂含量減少。D的負對照組螢光強度約1.0、正對照組的螢光強度約2.0、實驗組25μg/mL乳鐵蛋白胜肽69-75的螢光強度約1.5、實驗組50μg/mL乳鐵蛋白胜肽69-75的螢光強度約1.5、實驗組100μg/mL乳鐵蛋白胜肽69-75的螢光強度約1.5。正對照組的螢光強度相較於負對照組螢光強度顯示***，說明添加LA所誘發生成的油脂含量存在顯著差異，且油脂含量達2倍以上。實驗組的螢光強度相較於正對照組螢光強度顯示###，說明添加乳鐵蛋白胜肽69-75能抑制及/或減緩由LA所誘發生成的油脂含量存在顯著差異，且油脂含量減少達25%。此外，隨著添加的乳鐵蛋白胜肽69-75的濃度提升，油脂含量跟著減少，說明乳鐵蛋白胜肽69-75抑制及/或減緩由LA所誘發生成的油脂含量存在劑量依存性。

圖3顯示皮脂腺細胞在負對照組、正對照組、實驗組25μg/mL、50μg/mL、100μg/mL的乳鐵蛋白胜肽85-91下的油脂含量。B正對照組相較於A負對照組的螢光強度增加，說明正對照組添加LA確實誘發油脂生成。C實驗組50μg/mL的乳鐵蛋白胜肽85-91相較於B正對照組的螢光強度減少，說明實驗組添加乳鐵蛋白胜肽85-91能抑制及/或減緩由LA所誘發的油脂生成，而使最終的油脂含量減少。D的負對照組螢光強度約1.0、正對照組的螢光強度約2.0、實驗組25μg/mL乳鐵蛋白胜肽85-91的螢光強度約1.5、實驗組50μg/mL乳鐵蛋白胜肽85-91的螢光強度約1.5、實驗組100μg/mL乳鐵蛋白胜肽85-91的螢光強度約1.5。正對照組的螢光強度相較於負對照組螢光強度顯示***，說明添加LA所誘發生成的油脂含量存在顯著差異，且油脂含量達2倍以上。實驗組的螢光強度相較於正對照組螢光強度顯示###，說明添加乳鐵蛋白胜肽85-91能抑制及/或減緩由LA所誘發生成的油脂含量存在顯著差異，且油脂含量減少達25%。此外，隨著添加的乳鐵蛋白胜肽85-91的濃度提升，油脂含量跟著減少，說明乳鐵蛋白胜肽85-91抑制及/或減緩由LA所誘發生成的油脂含量存在劑量依存性。更甚者，實驗組中的100μg/mL乳鐵蛋白胜肽85-91的螢光強度相較於負對照組螢光強度未顯示*，說明添加乳鐵蛋白胜肽85-91至特定濃度能抑制及/或減緩由LA所誘發生成的油脂含量，達到未添加LA而無油脂生成的程度。

圖4顯示皮脂腺細胞在負對照組、正對照組、實驗組25μg/mL、50μg/mL、100μg/mL的乳鐵蛋白胜肽695-701下的油脂含量。B正對照組相較於A負對照組的螢光強度增加，說明正對照組添加LA確實誘發油脂生成。C實驗組50μg/mL的乳鐵蛋白胜肽695-701相較於B正對照組的螢光強度減少，說明實驗組添加乳鐵蛋白胜肽695-701能抑制及/或減緩由LA所誘發的油脂生成，而使最終的油脂含量減少。D的負對照組螢光強度約1.0、正對照組的螢光強度約2.0、實驗組25μg/mL乳鐵蛋白胜肽695-701的螢光強度約1.5、實驗組50μg/mL乳鐵蛋白胜肽695-701的螢光強度約1.5、實驗組100μg/mL乳鐵蛋白胜肽695-701的螢光強度約1.5。正對照組的螢光強度相較於負對照組螢光強度顯示***，說明添加LA所誘發生成的油脂含量存在顯著差異，且油脂含量達2倍以上。實驗組的螢光強度相較於正對照組螢光強度顯示#或###，說明添加乳鐵蛋白胜肽695-701能抑制及/或減緩由LA所誘發生成的油脂含量存在顯著差異，且油脂含量減少達25%。此外，隨著添加的乳鐵蛋白胜肽695-701的濃度提升，油脂含量跟著減少，說明乳鐵蛋白胜肽695-701抑制及/或減緩由LA所誘發生成的油脂含量存在劑量依存性。更甚者，實驗組中的100μg/mL乳鐵蛋白胜肽695-701的螢光強度相較於負對照組螢光強度未顯示*，說明添加乳鐵蛋白胜肽695-701至特定濃度能抑制及/或減緩由LA所誘發生成的油脂含量，達到未添加LA而無油脂生成的程度。

圖5顯示皮脂腺細胞在負對照組、正對照組、實驗組50 μg/mL的乳鐵蛋白胜肽69-75、85-91、695-701、137-146、278-287、291-297下的油脂含量。B正對照組相較於A負對照組的螢光強度增加，說明正對照組添加LA確實誘發油脂生成。C、D、E實驗組相較於B正對照組的螢光強度減少，說明C、D、E實驗組添加乳鐵蛋白胜肽69-75、85-91、695-701能抑制及/或減緩由LA所誘發的油脂生成，而使最終的油脂含量減少。然而，F、G、H實驗組相較於B正對照組的螢光強度未明顯減少，說明F、G、H實驗組添加乳鐵蛋白137-146、278-287、291-297無法顯著抑制及/或減緩由LA所誘發的油脂生成，而不能使最終的油脂含量大量減少。D的負對照組螢光強度約1.0、正對照組的螢光強度約2.5、實驗組乳鐵蛋白胜肽69-75、85-91、695-701的螢光強度約1.5、實驗組乳鐵蛋白胜肽137-146、278-287、291-297的螢光強度約2.0。正對照組的螢光強度相較於負對照組螢光強度達2倍以上，說明添加LA所誘發生成的油脂含量達2倍以上。實驗組乳鐵蛋白胜肽69-75、85-91、695-701的螢光強度相較於正對照組螢光強度顯示***，說明添加乳鐵蛋白胜肽69-75、85-91、695-701能抑制及/或減緩由LA所誘發生成的油脂含量存在顯著差異，且油脂含量減少達40%。實驗組乳鐵蛋白胜肽137-146、278-287、291-297的螢光強度相較於正對照組螢光強度未顯示*，說明添加乳鐵蛋白胜肽137-146、278-287、291-297無法抑制及/或減緩由LA所誘發生成的油脂含量達到顯著差異。由此可見，並非所有乳鐵蛋白的胜肽皆能足以發揮抑制及/或減緩由LA所誘發生成的油脂含量的效果，仍須經過篩選與實驗，始能驗證乳鐵蛋白的胜肽對於抑制及/或減緩油脂含量生成的應用性。

此外，由圖5的實驗顯示，並非任何的乳鐵蛋白胜肽都有抑制及/或減緩油脂生成的含量，必須經由實驗才得以證實。

本領域技術人員會理解在不脫離本發明的廣義發明概念的情況下，可修改上述具體實施例。因此，應可理解本發明並不局限於所揭示的特定具體實施例，而旨在於涵蓋由所附申請專利範圍所定義的本發明精神及範圍內的修飾。

無

圖1顯示皮脂腺細胞在負對照組、正對照組、不同濃度的乳鐵蛋白下的油脂含量。其中A為負對照組、B為正對照組、C為乳鐵蛋白的尼羅紅（Nile red）染色在螢光顯微鏡下的照片。D為各組螢光強度的統計長條圖，其中*顯示與負對照組（control）有顯著差異，#顯示與正對照組（LA）有顯著差異。實驗結果顯示為三個實驗的平均值±標準差。***p＜0.001.### p＜0.001

圖2顯示皮脂腺細胞在負對照組、正對照組、不同濃度的乳鐵蛋白胜肽69-75下的油脂含量。其中A為負對照組、B為正對照組、C為乳鐵蛋白胜肽69-75的尼羅紅（Nile red）染色在螢光顯微鏡下的照片。D為各組螢光強度的統計長條圖，其中*顯示與負對照組（control）有顯著差異，#顯示與正對照組（LA）有顯著差異。實驗結果顯示為三個實驗的平均值±標準差。***p＜0.001.### p＜0.001

圖3顯示皮脂腺細胞在負對照組、正對照組、不同濃度的乳鐵蛋白胜肽85-91下的油脂含量。其中A為負對照組、B為正對照組、C為乳鐵蛋白胜肽85-91的尼羅紅（Nile red）染色在螢光顯微鏡下的照片。D為各組螢光強度的統計長條圖，其中*顯示與負對照組（control）有顯著差異，#顯示與正對照組（LA）有顯著差異。實驗結果顯示為三個實驗的平均值±標準差。***p＜0.001.### p＜0.001

圖4顯示皮脂腺細胞在負對照組、正對照組、不同濃度的乳鐵蛋白胜肽695-701下的油脂含量。其中A為負對照組、B為正對照組、C為乳鐵蛋白胜肽695-701的尼羅紅（Nile red）染色在螢光顯微鏡下的照片。D為各組螢光強度的統計長條圖，其中*顯示與負對照組（control）有顯著差異，#顯示與正對照組（LA）有顯著差異。實驗結果顯示為三個實驗的平均值±標準差。***p＜0.001.### p＜0.001

圖5顯示皮脂腺細胞在負對照組、正對照組、不同種類的乳鐵蛋白胜肽下的油脂含量。A為負對照組、B為正對照組、C為乳鐵蛋白胜肽69-75、D為乳鐵蛋白胜肽85-91、E為乳鐵蛋白胜肽695-701、F為乳鐵蛋白胜肽137-146、G為乳鐵蛋白胜肽278-287、H為乳鐵蛋白胜肽291-297的尼羅紅（Nile red）染色在螢光顯微鏡下的照片。I為各組螢光強度的統計長條圖，其中*顯示與正對照組（LA）有顯著差異。實驗結果顯示為三個實驗的平均值±標準差。***p＜0.001.### p＜0.001

無

Claims

一種抑制及/或減緩油脂生成的乳鐵蛋白（LF）、乳鐵蛋白的衍生胜肽或其組合，其中該乳鐵蛋白包含SEQ ID NO：01所示之胺基酸序列，該乳鐵蛋白的衍生胜肽包含選自至少一個SEQ ID NO：02、SEQ ID NO：03、SEQ ID NO：04所示之胺基酸序列。
如請求項1所述之乳鐵蛋白、乳鐵蛋白的衍生胜肽或其組合，其中該抑制及/或減緩油脂生成係指受施者之細胞的油脂生成被抑制或減緩，使生成的油脂含量降低。
如請求項2所述之乳鐵蛋白、乳鐵蛋白的衍生胜肽或其組合，其中該生成的油脂含量降低的比例為受施者未施予組合物的生成的油脂含量的10至40%。
一種抑制及/或減緩油脂生成的組合物，其包含乳鐵蛋白、乳鐵蛋白的衍生胜肽或其組合，其中該乳鐵蛋白包含SEQ ID NO：01所示之胺基酸序列，該乳鐵蛋白的衍生胜肽包含選自至少一個SEQ ID NO：02、SEQ ID NO：03、SEQ ID NO：04所示之胺基酸序列。
如請求項4所述之組合物，其中該組成物包含約5 μg/mL至1000 μg/mL之乳鐵蛋白、乳鐵蛋白的衍生胜肽或其組合。
如請求項4所述之組合物，其中該組成物包含一或多種醫藥上可接受之載體。
如請求項4所述之組合物，其中該組成物的劑型為軟膏劑（ointment）、凝膠劑、乳霜劑（cream）、乳液、液劑、蠟劑、粉劑、噴劑、凝膠噴劑、泡沫劑、洗髮劑、護髮劑（treatment agent）、頭皮處理劑、補劑（tonic）、滴劑或貼劑。
如請求項4所述之組合物，其中該抑制及/或減緩油脂生成係指受施者之細胞的油脂生成被抑制或減緩，使生成的油脂含量降低。
如請求項8所述之組合物，其中該生成的油脂含量降低的比例為受施者未施予組合物的生成的油脂含量的10至40%。
一種如請求項4至9中任一項所述之組成物用於抑制及/或減緩油脂生成的用途。
如請求項10所述之用途，其中該抑制及/或減緩油脂生成係藉由施予該包含乳鐵蛋白、乳鐵蛋白的衍生胜肽或其組合之組成物予受施者。
如請求項11所述之用途，其中施予組成物予受施者的有效量為5 μg/mL至1000 μg/mL。
如請求項11所述之用途，其中施予組成物予受施者的途徑為經皮。
如請求項11所述之用途，其中施予組成物予受施者的頻率為每天。
如請求項11所述之用途，其中該抑制及/或減緩油脂生成係指受施者之細胞的油脂生成被抑制或減緩，使生成的油脂含量降低。
如請求項15所述之用途，其中該生成的油脂含量降低的比例為受施者未施予組合物的生成的油脂含量的10至40%。
如請求項15所述之用途，其中該受施者之細胞係指皮脂腺細胞。
如請求項10所述之用途，其中該油脂生成係由亞麻油酸所誘發。
一種抑制及/或減緩油脂生成的方法，其包含施予如請求項4至9中任一項記載之組成物予受施者。
如請求項19所述之方法，其中該抑制及/或減緩油脂生成係指受施者之細胞的油脂生成被抑制或減緩，使生成的油脂含量降低。
如請求項20所述之方法，其中該生成的油脂含量降低的比例為受施者未施予組合物的生成的油脂含量的10至40%。