TW202233228A

TW202233228A - 適用於新生兒的組成物

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Publication number: TW202233228A
Application number: TW110138769A
Authority: TW
Inventors: 米勒納孜拉薩拉馬特; 凱薩琳泰勒; 冰何; 塔洽雅印卓尼爾柏哈塔; 琳達韓; 班尼塔阿姆斯丹; 詹姆士克蘭茲
Original assignee: 美商舒爾人類基因療法公司
Priority date: 2020-10-19
Filing date: 2021-10-19
Publication date: 2022-09-01
Also published as: MX2023004426A; JP2023550203A; AU2021364523A1; IL301688A; EP4228676A1; WO2022086953A1; CA3194764A1; US20230381285A1; WO2022086953A9; KR20230113287A; CN117098547A

Abstract

本發明提供針對向新生兒及/或早產嬰兒投與而最佳化之穩定、純且強效的組成物，及其在治療腦室內出血（IVH）、支氣管肺發育不良（BPD）及/或早產兒慢性肺病（CLD）之方法中的用途，其包含以在低體積下在嬰兒中引起高血清IGF-1暴露以及IVH、BPD及/或CLD之治療的高有效劑量向需要治療之受試者投與包含似胰島素生長因子-1（IGF-1）及似胰島素生長因子結合蛋白-3（IGFBP-3）以及聚山梨醇酯20界面活性劑之醫藥組成物。在一些態樣中，本文提供用於製造該等組成物之方法，其包含一次性袋子，其中該等組成物具有改良之穩定性、減少之氧化及增加之效力。在一些態樣中，該等所提供方法引起腦室內出血、支氣管肺發育不良、右心室肥大（RVH）、肺高血壓（PH）、壞死性小腸結腸炎或早產兒慢性肺病之症狀及特徵的發生率降低。

Description

適用於新生兒的組成物

極需要經最佳化以用於新生兒及/或早產嬰兒之治療用途的組成物，例如以治療諸如腦室內出血、支氣管肺發育不良及早產兒慢性肺病之病況或降低其發生率。

腦室內出血（IVH）為早產嬰兒的危及生命之病況，其特徵為腦室內及周圍出血，導致急性及慢性腦損傷以及可能的長期不良神經發育結果。

IVH為早產兒之主要併發症。IVH可與嚴重併發症相關，包括腦室周圍出血性梗塞、出血後腦室擴張、腦室周圍白質軟化症及小腦出血，導致高死亡率及發生率。其他併發症包括出血後腦積水、腦性麻痹及智力遲鈍，以及長期神經發育障礙。

IVH可導致早產嬰兒死亡及發病。當前的標準護理係基於腦血流動力學之早期管理及穩定以及呼吸支持。預後與出血嚴重程度、腦實質損傷、癲癇發作之存在以及腦室周圍出血性梗塞之嚴重程度有關。

早產兒慢性肺病（CLD）為早產嬰兒的另一嚴重且危及生命之病況。超早產的嬰兒尤其具有罹患CLD之極高風險。糾正胎齡36週時之支氣管肺發育不良（BPD）通常為CLD之最早表現，但未患有BPD之嬰兒亦可能出現CLD。術語「早產兒慢性肺病」涵蓋常常與BPD之表現重疊的廣泛症狀及特徵。

BPD及CLD之當前標準護理治療及預防選擇方案包括呼吸支持（諸如補充氧氣，經由使用持續氣道正壓通氣之無創經鼻流動及使用氣管內插管之機械通氣）、肺界面活性劑投與、有助於打開氣道之支氣管擴張劑、有助於減少呼吸停頓（呼吸暫停（apnea））且改善呼吸肌肉功能之咖啡鹼，及有助於減少發炎之類固醇、有助於減少肺部中之過量流體的利尿劑、有助於降低肺部血壓之血管擴張劑以及抵抗感染之抗生素。超早產出生之嬰兒的肺結果之長期軌跡通常始於產前風險因素，接著為在生命之最初幾小時或幾天中需要呼吸支持的呼吸窘迫症候群（RDS），從而導致BPD，其通常在糾正胎齡36週時診斷出，且最終在嬰兒期、兒童期、青春期且甚至成年期形成慢性肺病。CLD可導致更頻繁的針對呼吸病因之再入院及ER就診，需要呼吸系統藥物或家庭呼吸支持，且許多兒童罹患一種持續限制其生活品質之反應性呼吸道疾病（哮喘）。

有時體重為約1至2磅（450至900 g）之早產新生兒之醫學治療存在許多挑戰，尤其因為可投與之量太小。藉由輸注將準確劑量之蛋白質遞送至此患者群體且確保醫藥組成物與臨床投與組件（例如輸注設備）之相容性至關重要。

此外，此類患者極虛弱且脆弱。必須謹慎評估由於在醫藥治療過程中暴露於諸如賦形劑等物質而造成的毒理學風險。與成人及年齡更大的兒童相比，新生兒對化學物質，諸如調配物中所用之賦形劑的敏感性可能不同。此為試圖治療此患者群體者造成了巨大挑戰。

另外，每一種治療性蛋白質都具有不同特性，例如摺疊分子表面上之疏水性部分與帶電部分之平衡。因此，每一種治療性蛋白質都需要針對其特性而特定最佳化的調配物，例如使得該調配物與治療性蛋白質之藥理學活性及穩定性及其投與適用性相容。當治療實體為蛋白質複合物時，此挑戰甚至更大。

本發明係關於針對向新生兒及/或早產嬰兒投與而最佳化之組成物，及採用該等組成物之治療方法，該組成物例如用於治療（尤其用於該患者群體中），例如用於治療腦室內出血、支氣管肺發育不良及早產兒慢性肺病。在另一獨立態樣中，提供用於製造組成物之調配物的方法，例如採用一次性袋子，特定言之使調配物與不鏽鋼之接觸最小化，以提供用於達成調配物之氧化減少的穩健方法。

本文所提供之組成物適用於新生兒且具有以下益處中之一或多者（諸如全部）：賦形劑最少化（以使患者群體中之不良作用降至最低且使不耐受性/毒性達到最大）；當組成物非經腸投與（例如使用管子、橡膠及/或塑膠材料及/或過濾器，例如經由靜脈內（IV）輸注）時蛋白質複合物之損失最小化；穩定（例如物理及/或化學穩定，其有利地提供至少3至6個月之保存期限）；以及能夠以適當的濃度水準將活性治療劑遞送至新生兒患者群體中。

因此，在一個態樣中，提供一種適合於向新生兒投與治療性蛋白質複合物之低濃度醫藥組成物，其包含：似胰島素生長因子1（IGF-1）與似胰島素生長因子結合蛋白3之複合物（例如以0.75至1.25:1或1:0.75至1.25之範圍複合，諸如以等莫耳量複合）；及0.0025%至0.0075%範圍內之非離子型界面活性劑（例如聚山梨醇酯界面活性劑，諸如聚山梨醇酯20或聚山梨醇酯80，特定言之聚山梨醇酯20）。

在一個實施例中，醫藥組成物為等張的。

在一個實施例中，醫藥組成物為液體。

在一個實施例中，治療複合物之濃度在10至100 mg/L之範圍內（例如15、20、25、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85、90、95或100 mg/L），諸如45-55 mg/L，特定言之50 mg/L。

在一個實施例中，醫藥組成物為水性的。

在一個實施例中，調配物以儲存在2℃至8℃（36°F至46°F）下、pH 5.5的包含rhIGF-1/rhIGFBP-3於50 mM乙酸鈉及105 mM氯化鈉中之50微克/毫升溶液及0.005%（v/v）聚山梨醇酯20之單位形式提供。

在一個實施例中，根據本發明之醫藥組成物以最終產品形式提供於含有大約6.5 mL可抽取體積之輸注袋或玻璃小瓶中。

在一個實施例中，醫藥調配物可非經腸投與而不損失治療性蛋白質複合物（諸如不損失治療性蛋白質複合物之活性）。

在一個實施例中，組成物具有最小數目及/或數量之賦形劑，例如1、2、3、4或5種賦形劑。

在一個實施例中，組成物之活性或另一特性藉由本文諸如在實例中所揭示之分析或方法來量測。

在一個實施例中，聚山梨醇酯界面活性劑，諸如聚山梨醇酯20或聚山梨醇酯80，特定言之聚山梨醇酯20 %在0.0025%至0.0075% v/v之範圍內。

在一個實施例中，組成物之pH在pH 5至pH 7或pH 5.3至pH 5.8之範圍內，諸如pH 5.3、5.4、5.5、5.6、5.7、5.8，特定言之pH 5.5。

在一個實施例中，調配物將治療性蛋白質複合物之劑量的至少80%以活性形式遞送至新生兒，例如81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%。

因此，在較佳實施例中，提供一種適合於向新生兒投與（特定言之以活性形式投與）治療性蛋白質複合物之低濃度醫藥組成物，其包含10至1000微克/毫升（例如10至100微克/毫升，亦即例如15、20、25、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85、90、95或100微克/毫升，諸如45-55微克/毫升，特定言之50微克/毫升）的似胰島素生長因子1（IGF-1）與似胰島素生長因子結合蛋白3（IGFBP-3）之複合物（例如以0.75至1.25:1或1:0.75至1.25之範圍複合，諸如以等莫耳量複合）；及0.0025%至0.0075%範圍內（例如0.005%）之非離子型界面活性劑（例如聚山梨醇酯界面活性劑，諸如聚山梨醇酯20或聚山梨醇酯80，特定言之聚山梨醇酯20）；緩衝液（例如50 mM乙酸鈉）、鹽（例如105 mM氯化鈉），其中該調配物之pH在pH 5.3至5.8之範圍內（例如pH 5.5）。

在其他實施例中，本發明提供對早產兒之疾病及併發症之有效治療，尤其包括腦室內出血（IVH）、支氣管肺發育不良（BPD）及早產兒慢性肺病（CLD）。本發明部分提供方法及醫藥組成物，其包含似胰島素生長因子-1（IGF-1）與似胰島素生長因子結合蛋白-3（IGFBP-3）之組合，且進一步包含界面活性劑（例如聚山梨醇酯20），其兩者一起例如當在出生後立即例如經靜脈內投與以代替失去母體供應之IGF-1時，可改善或減少腦室內出血（IVH）、支氣管肺發育不良及/或早產兒慢性肺病。本發明部分基於以下出人意料的發現：向IGF-1/IGFBP-3醫藥組成物添加低濃度（例如0.0025%至0.0075% v/v）的界面活性劑（例如聚山梨醇酯20）可提高效力且增加穩定性。不希望受任何特定理論束縛，經考慮，例如此低濃度的界面活性劑（例如聚山梨醇酯20）將吸附相關之產品損失減至最少，從而消除了在藥品投與之前灌注及沖洗靜脈內輸注套件之需求，顯著減少了藥品損失且提高了效力。本發明亦部分地基於在混配複合物與調配溶液期間經由使用除不鏽鋼以外的接觸表面（諸如一次性袋子）達成的經氧化物質積聚之減少及穩定性之改良。在約25℃（例如約23℃至約27℃）下儲存或在約40℃（例如約38℃至約42℃）下儲存期間達成經改良之穩定性，例如儲存約3至6個月。除了減少聚集以及增加穩定性及純度以外，包含界面活性劑之調配物亦允許向處於罹患早產兒併發症，例如腦室內出血、支氣管肺發育不良及/或早產兒慢性肺病之風險下的超早產新生兒（參見[0008]）準確給藥且投與較小劑量體積。如本文所使用，慢性肺病（CLD）與早產兒慢性肺病可互換使用。本發明之調配物為穩定的，且在10微克/毫升至1000微克/毫升（例如20微克/毫升、30、40、50微克/毫升）之濃度範圍下展示減少之聚集。相比之下，在不存在聚山梨醇酯的情況下且當暴露於常規壓力時，高分子量物質積聚，此導致穩定性降低、聚集增加及潛在免疫原性增加。概言之，本發明尤其提供IGF-1/IGFBP-3之經改良調配物，其優點為效力提高及儲存期間之穩定性改良，特定言之具有最小毒性，從而提供用於向治療早產兒疾病之新生兒投與的安全且有效的產品。

在一個態樣中，包含界面活性劑的rIGF-1/rIGFBP-3之穩定調配物可以諸如約400微克/公斤/24小時之劑量製備及遞送。在一個態樣中，包含界面活性劑的rIGF-1/rIGFBP-3之穩定調配物可以諸如約1000微克/公斤/24小時之劑量製備及遞送。添加界面活性劑亦藉由減少由吸附引起之蛋白質損失而增加產品之穩定性。在一個態樣中，本文所提供之方法藉由在界面活性劑存在下以約250微克/公斤/24小時或更低之劑量投與rIGF-1/rIGFBP-3醫藥組成物而引起血清IGF-1之高效暴露。

本申請案部分基於由聚山梨醇酯界面活性劑，例如聚山梨醇酯20或聚山梨醇酯80併入rIGF-1/rIGFBP-3醫藥組成物中產生的優點。本申請案揭示一種高效的穩定調配物，其在以約10微克/毫升至1000微克/毫升之濃度投與rIGF-1/rIGFBP-3時引起高rIGF-1血清暴露量，以用於治療早產兒之疾病及併發症，例如腦室內出血、支氣管肺發育不良及早產兒慢性肺病。

在本發明之一個態樣中，本文提供一種醫藥組成物，其包含：蛋白質複合物，其包含重組似胰島素生長因子-1（rIGF-1）、重組似胰島素生長因子結合蛋白-3（rIGFBP-3）；及聚山梨醇酯界面活性劑，其濃度在約0.0025% v/v與0.0075% v/v之間，其中rIGF-1及rIGFBP-3以等莫耳量複合，且其中rIGF-1/IGFBP-3之濃度為約10微克/毫升至1000微克/毫升。

在一些態樣中，本文提供一種醫藥組成物，其包含：蛋白質複合物，其包含重組似胰島素生長因子1（rIGF-1）、重組似胰島素生長因子結合蛋白3（rIGFBP-3）；及聚山梨醇酯界面活性劑，其濃度在約0.0025%與0.0075%之間，其中rIGF-1及rIGFBP-3以0.75至1.25:1或1:0.75至1.25之範圍複合，例如以等莫耳量複合。在一些實施例中，聚山梨醇酯界面活性劑為聚山梨醇酯20或聚山梨醇酯80。

在一些實施例中，聚山梨醇酯界面活性劑為聚山梨醇酯20。聚山梨醇酯20亦被稱作聚氧乙烯山梨糖醇單月桂酸酯。

在一些實施例中，聚山梨醇酯界面活性劑為聚山梨醇酯80。聚山梨醇酯80亦被稱作聚氧乙烯山梨糖醇單油酸酯。

在一些實施例中，聚山梨醇酯界面活性劑之濃度在約0.001%至2.4% v/v之間。在一些實施例中，聚山梨醇酯界面活性劑之濃度在約0.2%至0.4% v/v之間。在一些實施例中，聚山梨醇酯界面活性劑之濃度為約0.001%、0.005%、0.01%、0.02%、0.03%、0.05%、0.10%、0.15%、0.2%、0.5%、0.7%、1.0%、1.2%、1.5%、1.8%、2.0%、2.2%或2.4% v/v。

在一些實施例中，聚山梨醇酯界面活性劑之濃度在約0.0025%與0.0075% v/v之間。在一些實施例中，聚山梨醇酯界面活性劑之濃度為約0.0025%、約0.005%或約0.0075% v/v。在一些實施例中，聚山梨醇酯界面活性劑之濃度為約0.005% v/v。

在一些實施例中，在25℃下儲存約6個月之後，組成物中少於約20%的IGF-1以經氧化物質形式存在。在一些實施例中，在25℃下儲存約6個月之後，組成物中少於約15%的IGF-1以經氧化物質形式存在。在一些實施例中，在25℃下儲存約6個月之後，少於10%的IGF-1以經氧化物質形式存在。在一些實施例中，在25℃下儲存約6個月之後，少於5%的IGF-1以經氧化物質形式存在。在一些實施例中，在25℃下儲存約6個月之後，少於4%的IGF-1以經氧化物質形式存在。在一些實施例中，在25℃下儲存約6個月之後，少於2%的IGF-1以經氧化物質形式存在。在一些實施例中，在25℃下儲存約3個月之後，少於4%的IGF-1以經氧化物質形式存在。在一些實施例中，在25℃下儲存約3個月之後，少於2%的IGF-1以經氧化物質形式存在。

在一些實施例中，在40℃下儲存約3個月之後，少於10%的IGF-1以經氧化物質形式存在。在一些實施例中，在40℃下儲存約3個月之後，少於8%的IGF-1以經氧化物質形式存在。在一些實施例中，在40℃下儲存約3個月之後，少於6%的IGF-1以經氧化物質形式存在。在一些實施例中，在40℃下儲存約3個月之後，少於5%的IGF-1以經氧化物質形式存在。在一些實施例中，在40℃下儲存約3個月之後，少於4%的IGF-1以經氧化物質形式存在。在一些實施例中，在40℃下儲存約3個月之後，少於10%的IGF-1以經氧化物質形式存在。在一些實施例中，在40℃下儲存約3個月之後，少於3%的IGF-1以經氧化物質形式存在。在一些實施例中，在40℃下儲存約1個月之後，少於8%的IGF-1以經氧化物質形式存在。在一些實施例中，在40℃下儲存約1個月之後，少於6%的IGF-1以經氧化物質形式存在。在一些實施例中，在40℃下儲存約1個月之後，少於5%的IGF-1以經氧化物質形式存在。在一些實施例中，在40℃下儲存約1個月之後，少於4%的IGF-1以經氧化物質形式存在。在一些實施例中，在40℃下儲存約1個月之後，少於3%的IGF-1以經氧化物質形式存在。在一些實施例中，在40℃下儲存約1個月之後，少於2%的IGF-1以經氧化物質形式存在。

在一些實施例中，組成物中經氧化物質之百分比藉由逆相超高效液相層析（RP-UPLC）測定。在一些實施例中，IGFBP-3包含少於5%的三硫化物變體。

在一些實施例中，組成物進一步包含含有乙酸鈉、乙酸及/或氯化鈉之緩衝液。在一些實施例中，組成物進一步包含含有乙酸鈉或乙酸之緩衝液。在一些實施例中，組成物進一步包含含有氯化鈉之緩衝液。

在一些實施例中，乙酸鈉或乙酸之濃度在約10與100 mM之間。在一些實施例中，乙酸鈉或乙酸之濃度為約10 mM、15 mM、20 mM、25 mM、30 mM、35 mM、40 mM、45 mM、50 mM、55 mM、60 mM、65 mM、70 mM、75 mM、80 mM、85 mM、90 mM、95 mM、100 mM。在一些實施例中，乙酸鈉或乙酸之濃度為約50 mM。

在一些實施例中，氯化鈉之濃度為約20 mM至200 mM。在一些實施例中，氯化鈉之濃度為約20 mM、25 mM、30 mM、35 mM、40 mM、45 mM、50 mM、55 mM、60 mM、65 mM、70 mM、75 mM、80 mM、85 mM、90 mM、約95 mM、約100 mM、約105 mM、約110 mM、約115 mM、約120 mM、約125 mM、約130 mM、約135 mM、約140 mM、約145 mM、約150 mM、約155 mM、約160 mM、約165 mM、約170 mM、約175 mM、約180 mM、約185 mM、約190 mM、約195 mM或約200 mM。在一些實施例中，氯化鈉之濃度為約105 mM。

在一些實施例中，組成物之pH在約5.0與7.0之間。在一些實施例中，pH為約5.0、約5.2、約5.4、約5.6、約5.8、約6.0、約6.2、約6.4、約6.6、約6.8或約7.0。在一些實施例中，組成物之pH為約5.1、約5.3、約5.5、約5.7或約5.9、約6.1、約6.3、約6.5、約6.7或約6.9。在一些實施例中，組成物之pH在約5.3與5.8之間。在一些實施例中，組成物之pH為約5.5。

在一些實施例中，rIGF-1/IGFBP-3之濃度在約10微克/毫升至1000微克/毫升之間。在一些實施例中，rIGF-1/IGFBP-3之濃度在約10微克/毫升至100微克/毫升之間。在一些實施例中，rIGF-1/IGFBP-3之濃度在約20微克/毫升至100微克/毫升之間。在一些實施例中，rIGF-1/IGFBP-3之濃度為約10微克/毫升、約20微克/毫升、約30微克/毫升、約40微克/毫升、約50微克/毫升、約60微克/毫升、約70微克/毫升、約80微克/毫升、約90微克/毫升或約100微克/毫升。在一些實施例中，rIGF-1/IGFBP-3之濃度為約10微克/毫升、25微克/毫升、50微克/毫升、75微克/毫升、100微克/毫升。在一些實施例中，rIGF-1/IGFBP-3之濃度為約45至55微克/毫升。在一些實施例中，rIGF-1/IGFBP-3之濃度為約50微克/毫升。在一些實施例中，rIGF-1/rIGFBP-3之濃度為約75微克/毫升。

在一些實施例中，rIGF-1/IGFBP-3之濃度在約100微克/毫升至1000微克/毫升之間。在一些實施例中，rIGF-1/IGFBP-3之濃度為約100微克/毫升、約200微克/毫升、約300微克/毫升、約400微克/毫升、約500微克/毫升、約600微克/毫升、約700微克/毫升、約800微克/毫升、約900微克/毫升、約1000微克/毫升。

在一些實施例中，醫藥組成物適用於皮下或靜脈內注射。在一些實施例中，醫藥組成物適用於皮下注射。在一些實施例中，醫藥組成物適用於靜脈內注射。

在一些實施例中，醫藥組成物在2至8℃之間的溫度下具有20個月或更長時間之儲存期限。在一些實施例中，醫藥組成物在2至8℃之間的溫度下具有至少24個月之儲存期限。在一些實施例中，醫藥組成物在室溫下及/或在環境光線下穩定。在一些實施例中，醫藥組成物在室溫下及/或在環境光線下在至少8個小時、12個小時、24個小時、36個小時或48個小時內穩定。在一些實施例中，醫藥組成物在室溫下及/或在環境光線下在至少8個小時內穩定。在一些實施例中，醫藥組成物在室溫下及/或在環境光線下在至少12個小時內穩定。在一些實施例中，醫藥組成物在室溫下及/或在環境光線下在至少24個小時內穩定。在一些實施例中，醫藥組成物在室溫下及/或在環境光線下在至少48個小時內穩定。

在一些實施例中，醫藥組成物包含以0.75至1.25:1或1:0.75至1.25之範圍複合，例如以等莫耳量複合的rIGF-1及rIGFBP-3。在一些實施例中，IGF-1以重組方式產生。在一些實施例中，IGFBP-3以重組方式產生。在一些實施例中，IGF-1及IGFBP-3在向受試者投與之前複合。

在一些實施例中，包含重組似胰島素生長因子1（rIGF-1）、重組似胰島素生長因子結合蛋白3（rIGFBP-3）及聚山梨醇酯20之醫藥組成物與包含重組似胰島素生長因子1（rIGF-1）、重組似胰島素生長因子結合蛋白3（rIGFBP-3）但不含聚山梨醇酯20之醫藥組成物相比在室溫下更穩定。

在一些實施例中，包含重組似胰島素生長因子1（rIGF-1）、重組似胰島素生長因子結合蛋白3（rIGFBP-3）及聚山梨醇酯20之醫藥組成物與包含重組似胰島素生長因子1（rIGF-1）、重組似胰島素生長因子結合蛋白3（rIGFBP-3）但不含聚山梨醇酯20之醫藥組成物相比在室溫下具有更少氧化。

在一些實施例中，當在約25℃之溫度下儲存時，在三個月之後，經氧化IGF-1物質之百分比增加不超過25%。在一些實施例中，當在約25℃之溫度下儲存時，在三個月之後，經氧化IGF-1物質之百分比增加不超過10%。

在一些實施例中，本文提供一種醫藥組成物，其進一步包含醫藥學上可接受之載劑。

在一些實施例中，本文提供一種治療或預防腦室內出血（IVH）之方法，其包含向需要治療之受試者投與包含重組似胰島素生長因子1（rIGF-1）及重組似胰島素生長因子結合蛋白3（rIGFBP-3）之組成物。

在一些態樣中，本文提供一種治療或預防腦室內出血之方法，其包含向有需要之受試者投與包含重組似胰島素生長因子1（rIGF-1）、重組似胰島素生長因子結合蛋白3（rIGFBP-3）及聚山梨醇酯界面活性劑（例如聚山梨醇酯20）之組成物。

在一些態樣中，本文提供一種治療或預防腦室內出血（IVH）之方法，其包含向有需要之受試者投與醫藥組成物，該醫藥組成物包含重組似胰島素生長因子1（rIGF-1）、重組似胰島素生長因子結合蛋白3（rIGFBP-3）及濃度在約0.0025% v/v與0.0075% v/v之間的聚山梨醇酯界面活性劑（例如聚山梨醇酯20），其中rIGF-1及rIGFBP-3以0.75至1.25:1或1:0.75至1.25之範圍複合，例如以等莫耳量複合，且其中rIGF-1/IGFBP-3之濃度為約10微克/毫升至1000微克/毫升。

在一些態樣中，本文提供一種治療或預防腦室內出血（IVH）之方法，其包含向有需要之受試者投與包含重組似胰島素生長因子1（rIGF-1）、重組似胰島素生長因子結合蛋白3（rIGFBP-3）之組成物，其中該有需要之受試者具有小於26週之胎齡。在一些實施例中，本文提供一種治療或預防IVH之方法，其包含向有需要之受試者投與包含重組似胰島素生長因子1（rIGF-1）、重組似胰島素生長因子結合蛋白3（rIGFBP-3）之組成物，其中該有需要之受試者具有約23週至25週+6天之間的胎齡。在一些態樣中，本文提供一種治療或預防腦室內出血（IVH）之方法，其包含以足以達成相對於對照而言腦室內出血發生率降低的治療量向有需要之受試者投與包含重組似胰島素生長因子1（rIGF-1）、重組似胰島素生長因子結合蛋白3（rIGFBP-3）之組成物。

在一些實施例中，發生率降低在糾正胎齡（PMA）約36至40週之間達成，如藉由超音波或MRI所評定。在一些實施例中，發生率降低在糾正胎齡約35至42週之間達成，如藉由超音波或MRI所評定。在一些實施例中，發生率降低在糾正胎齡35週時達成，如藉由超音波或MRI所評定。在一些實施例中，發生率降低在糾正胎齡36週時達成，如藉由超音波或MRI所評定。在一些實施例中，發生率降低在糾正胎齡37週時達成，如藉由超音波或MRI所評定。在一些實施例中，發生率降低在糾正胎齡38週時達成，如藉由超音波或MRI所評定。在一些實施例中，發生率降低在糾正胎齡39週時達成，如藉由超音波或MRI所評定。在一些實施例中，發生率降低在糾正胎齡40週時達成，如藉由超音波或MRI所評定。在一些實施例中，發生率降低在糾正胎齡41週時達成，如藉由超音波或MRI所評定。在一些實施例中，發生率降低在糾正胎齡42週時達成，如藉由超音波或MRI所評定。

在一些實施例中，發生率降低係藉由超音波評定。

在一些實施例中，IVH之發生率降低為II級、III級或IV級IVH之發生率之至少約30%降低。在一些實施例中，IVH之發生率降低為II級IVH之發生率之至少約30%降低。在一些實施例中，IVH之發生率降低為III級IVH之發生率之至少約30%降低。在一些實施例中，IVH之發生率降低為IV級IVH之發生率之至少約30%降低。

在一些實施例中，本文提供一種治療或預防支氣管肺發育不良之方法，其包含向有需要之受試者投與組成物。在一些實施例中，本文提供一種治療或預防早產兒慢性肺病之方法，其包含向需要治療之受試者投與組成物。

在一個態樣中，本文提供一種治療或預防早產兒慢性肺病之方法，其包含向有需要之受試者投與包含重組似胰島素生長因子1（rIGF-1）、重組似胰島素生長因子結合蛋白3（rIGFBP-3）及界面活性劑之組成物。

在一些實施例中，界面活性劑為聚山梨醇酯界面活性劑。在一些實施例中，聚山梨醇酯界面活性劑係選自聚山梨醇酯20（P20）或聚山梨醇酯80（P80）。在一些實施例中，聚山梨醇酯界面活性劑為P20。在一些實施例中，聚山梨醇酯界面活性劑為P80。

在一些實施例中，聚山梨醇酯界面活性劑之濃度在約0.001%至2.4% v/v之間。在一些實施例中，聚山梨醇酯界面活性劑之濃度在約0.2%至0.4% v/v之間。在一些實施例中，聚山梨醇酯界面活性劑之濃度為約0.001%、0.005%、0.01%、0.02%、0.03%、0.05%、0.10%、0.15%、0.2%、0.5%、0.7%、1.0%、1.2%、1.5%、1.8%、2.0%、2.2%或2.4% v/v。在一些實施例中，聚山梨醇酯界面活性劑之濃度為約0.0025%、約0.005%或約0.0075% v/v。在一些實施例中，聚山梨醇酯之濃度為0.005%。

在一些實施例中，需要治療之受試者為嬰兒。

在一些實施例中，嬰兒早產至少1週、2週、3週、4週、1個月、2個月或3個月。在一些實施例中，嬰兒之糾正胎齡（PMA）在約23至34週之間。在一些實施例中，嬰兒之PMA為約23週、約24週、約25週、約26週、約27週、約28週、約29週、約30週、約31週、約32週、約33週或約34週。在一些實施例中，嬰兒之PMA為約23週。在一些實施例中，嬰兒之PMA小於36週。在一些實施例中，嬰兒之PMA小於35週。在一些實施例中，嬰兒之PMA小於34週。在一些實施例中，嬰兒之PMA小於33週。在一些實施例中，嬰兒之PMA小於32週。在一些實施例中，嬰兒之PMA小於31週。在一些實施例中，嬰兒之PMA小於30週。在一些實施例中，嬰兒之PMA小於29週。在一些實施例中，嬰兒之PMA小於28週。在一些實施例中，嬰兒之PMA小於27週。在一些實施例中，嬰兒之PMA小於26週。在一些實施例中，嬰兒之PMA小於25週。在一些實施例中，嬰兒之PMA小於24週。在一些實施例中，嬰兒之PMA小於23週。

在一些實施例中，嬰兒在小於32週之胎齡（GA）時出生。在一些實施例中，嬰兒在小於31週之GA時出生。在一些實施例中，嬰兒在小於30週之GA時出生。在一些實施例中，嬰兒在小於29週之GA時出生。在一些實施例中，嬰兒在小於28週之GA時出生。在一些實施例中，嬰兒在28至32週之間的GA時出生。

在一些實施例中，經皮下、經靜脈內、經肌肉內或經口向需要治療之受試者投與組成物。在一些實施例中，該方法包含經皮下或經靜脈內投與之組成物。在一些實施例中，組成物係經靜脈內投與。

在一些實施例中，組成物以約100至1000微克/公斤/24小時之劑量投與。在一些實施例中，組成物以約100至800微克/公斤/24小時之劑量投與。在一些實施例中，組成物以約100至500微克/公斤/24小時之劑量投與。在一些實施例中，組成物以100微克/公斤/24小時與450微克/公斤/24小時之間的劑量投與。在一些實施例中，組成物以100微克/公斤/24小時與400微克/公斤/24小時之間的劑量投與。在一些實施例中，組成物以150微克/公斤/24小時與400微克/公斤/24小時之間的劑量投與。在一些實施例中，組成物以200微克/公斤/24小時與400微克/公斤/24小時之間的劑量投與。在一些實施例中，組成物以約250至1000微克/公斤/24小時之劑量投與。在一些實施例中，組成物以約800微克/公斤/24小時之劑量投與。在一些實施例中，組成物以約250至800微克/公斤/24小時之劑量投與。在一些實施例中，組成物以250微克/公斤/24小時與400微克/公斤/24小時之間的劑量投與。在一些實施例中，組成物以約250微克/公斤/24小時之劑量投與。在一些實施例中，組成物以約400微克/公斤/24小時之劑量投與。

在一些實施例中，組成物在24小時時段內投與一次、兩次、三次或四次。在一些實施例中，組成物在24小時時段內投與一次。在一些實施例中，組成物在24小時時段內藉由連續輸注投與。

在一些實施例中，組成物在自出生起直至糾正胎齡（PMA）約23至34週期間投與。在一些實施例中，組成物在自出生起直至PMA約23至32週期間投與。在一些實施例中，組成物在自出生起直至PMA約29週加6天期間投與。「PMA」或「糾正胎齡」係指胎齡加實齡。在一些實施例中，治療或預防早產兒慢性肺病（CLD）引起支氣管肺發育不良（BPD）、右心室肥大（RVH）、肺高血壓（PH）、壞死性小腸結腸炎或腦室內出血之發生率降低。本文所提供之方法包含其中IGF-I或促效劑或類似物之投與引起12個月校正年齡（CA）內早產兒慢性肺病（CLD）之發生率降低的實施例。嬰兒之校正年齡為嬰兒基於他或她的分娩預產期調整後的年齡。將妊娠期視作40週（亦即預產期），自嬰兒之真實年齡減去嬰兒在母體外存在之多餘時間（亦即嬰兒早產之週數），即得到該早產嬰兒之校正年齡（CA）。在一些實施例中，醫藥組成物之投與引起糾正胎齡（PMA）23週至12個月內早產兒慢性肺病之發生率降低。舉例而言，醫藥組成物之投與引起至少PMA 23週、24週、25週、26週、27週、28週、29週、30週、31週、32週、33週、34週、35週、36週、37週、38週、39週、40週、41週、42週、43週、44週、45週、46週、47週、48週、49週、50週、51週或52週內CLD之發生率降低。在一些其他實施例中，醫藥組成物之投與引起至少PMA 6個月、7個月、8個月、9個月、10個月、11個月或12個月內CLD之發生率降低。在一些實施例中，組成物之投與引起糾正胎齡（PMA）23週至12個月內支氣管肺發育不良（BPD）之發生率降低。舉例而言，醫藥組成物之投與引起至少PMA 23週、24週、25週、26週、27週、28週、29週、30週、31週、32週、33週、34週、35週、36週、37週、38週、39週、40週、41週、42週、43週、44週、45週、46週、47週、48週、49週、50週、51週或52週內BPD之發生率降低。在一些其他實施例中，醫藥組成物之投與引起至少PMA 6個月、7個月、8個月、9個月、10個月、11個月或12個月內BPD之發生率降低。在一些實施例中，醫藥組成物之投與引起至少糾正胎齡（PMA）23週、24週、25週、26週、27週、28週、29週、30週、31週、32週、33週、34週、35週、36週、37週、38週、39週、40週、6個月、7個月、8個月、9個月、10個月、11個月、12個月、13個月、14個月、15個月、16個月、17個月、18個月、19個月、20個月、21個月、22個月、23個月或24個月內II級、III級或IV級重度腦室內出血（IVH）之發生率降低。在一些實施例中，醫藥組成物之投與引起糾正胎齡（PMA）23週、24週、25週、26週、27週、28週、29週、30週、31週、32週、33週、34週、35週、36週、37週、38週、39週、40週、6個月、8個月、10個月、12個月、13個月、14個月、15個月、16個月、17個月、18個月、19個月、20個月、21個月、22個月、23個月或24個月內右心室肥大（RVH）之發生率降低。在一些實施例中，醫藥組成物之投與引起（PMA）23週、24週、25週、26週、27週、28週、29週、30週、31週、32週、33週、34週、35週、36週、37週、38週、39週、40週、6個月、8個月、10個月、12個月、13個月、14個月、15個月、16個月、17個月、18個月、19個月、20個月、21個月、22個月、23個月或24個月內肺高血壓（PH）之發生率降低。在一些實施例中，醫藥組成物之投與引起（PMA）23週、24週、25週、26週、27週、28週、29週、30週、31週、32週、33週、34週、35週、36週、37週、38週、39週、40週、6個月、8個月、10個月、12個月、13個月、14個月、15個月、16個月、17個月、18個月、19個月、20個月、21個月、22個月、23個月或24個月內壞死性小腸結腸炎之發生率降低。

在一些實施例中，受試者具有降低的IGF-1血清水準。在一些實施例中，受試者之IGF-1水準低於60微克/公升。在一些實施例中，受試者之IGF-1水準低於50微克/公升。在一些實施例中，受試者之IGF-1水準低於40微克/公升。在一些實施例中，受試者之IGF-1水準低於30微克/公升。在一些實施例中，受試者之IGF-1水準在約30至50微克/公升之間。

在一些實施例中，醫藥組成物之投與引起IGF-1血清水準相較於基線值之升高。在本發明之一些實施例中，未經治療嬰兒中IGF-1血清水準之基線值低於60微克/公升。在一些實施例中，IGF-1血清水準之基線值低於50微克/公升。在一些實施例中，IGF-1血清水準之基線值低於40微克/公升。在一些實施例中，IGF-1血清水準之基線值低於30微克/公升。在一些實施例中，IGF-1血清水準之基線值為約30至50微克/公升。

在一些實施例中，IGF-1血清水準與基線值相比升高至少約25%至50%。在一些實施例中，IGF-1血清水準與基線值相比升高至少約10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%或60%。在一些實施例中，IGF-1血清水準與基線值相比升高至少約10%。在一些實施例中，IGF-1血清水準與基線值相比升高至少約15%。在一些實施例中，IGF-1血清水準與基線值相比升高至少約20%。在一些實施例中，IGF-1血清水準與基線值相比升高至少約25%。在一些實施例中，IGF-1血清水準與基線值相比升高至少約30%。在一些實施例中，IGF-1血清水準與基線值相比升高至少約35%。在一些實施例中，IGF-1血清水準與基線值相比升高至少約40%。在一些實施例中，IGF-1血清水準與基線值相比升高至少約45%。在一些實施例中，IGF-1血清水準與基線值相比升高至少約50%。在一些實施例中，IGF-1血清水準與基線值相比升高至少約55%。在一些實施例中，IGF-1血清水準與基線值相比升高至少約60%。

在一些實施例中，IGF-1血清水準在投與後至少24小時內保持升高。在一些實施例中，IGF-1血清水準在約48小時內保持升高。在一些實施例中，IGF-1血清水準在約72小時內保持升高。在一些實施例中，IGF-1血清水準在至少約7天內保持升高。在一些實施例中，IGF-1血清水準在糾正胎齡（PMA）至少約23週至34週內保持升高。在一些實施例中，IGF-1血清水準在糾正胎齡（PMA）至少約23週至12個月內保持升高。

在一些實施例中，醫藥組成物之投與引起糾正胎齡（PMA）23週、24週、25週、26週、27週、28週、29週、30週、31週、32週、33週、34週、35週、36週、37週、38週、39週、40週、6個月、7個月、8個月、9個月、10個月、11個月、12個月、13個月、14個月、15個月、16個月、17個月、18個月、19個月、20個月、21個月、22個月、23個月或24個月內早產兒慢性肺病、支氣管肺發育不良、右心室肥大（RVH）、肺高血壓（PH）、壞死性小腸結腸炎或腦室內出血之發生率降低。本文所提供之方法包含其中醫藥組成物之投與引起12個月校正年齡（CA）內早產兒慢性肺病（CLD）之發生率降低的實施例。嬰兒之校正年齡為嬰兒基於他或她的預產期調整後的年齡。將妊娠期視作40週（亦即預產期），自早產出生嬰兒之真實年齡減去其在母體外存在之多餘時間，即得到該早產嬰兒之校正年齡。在一些實施例中，醫藥組成物之投與引起糾正胎齡（PMA）23週至24個月內支氣管肺發育不良（BPD）之發生率降低。舉例而言，醫藥組成物之投與引起PMA 23週、24週、25週、26週、27週、28週、29週、30週、31週、32週、33週、34週、35週、36週、37週、38或40週、45週、50週或52週內BPD之發生率降低。在一些其他實施例中，醫藥組成物之投與引起PMA 6個月、7個月、8個月、9個月、10個月、11個月、12個月、13個月、14個月、15個月、16個月、17個月、18個月、19個月、20個月、21個月、22個月、23個月或24個月內BPD之發生率降低。在一些實施例中，醫藥組成物之投與引起糾正胎齡（PMA）23週、24週、25週、26週、27週、28週、29週、30週、31週、32週、33週、34週、35週、36週、37週、38週、39週、40週、6個月、7個月、8個月、9個月、10個月、11個月、12個月、13個月、14個月、15個月、16個月、17個月、18個月、19個月、20個月、21個月、22個月、23個月或24個月內I級、II級、III級或IV級腦室內出血（IVH）之發生率降低。在一些實施例中，醫藥組成物之投與引起糾正胎齡（PMA）23週、24週、25週、26週、27週、28週、29週、30週、31週、32週、33週、34週、35週、36週、37週、38週、39週、40週、6個月、7個月、8個月、9個月、10個月、11個月或12個月內右心室肥大（RVH）之發生率降低。在一些實施例中，醫藥組成物之投與引起（PMA）23週、24週、25週、26週、27週、28週、29週、30週、31週、32週、33週、34週、35週、36週、37週、38週、39週、40週、6個月、7個月、8個月、9個月、10個月、11個月、12個月、13個月、14個月、15個月、16個月、17個月、18個月、19個月、20個月、21個月、22個月、23個月或24個月內肺高血壓（PH）之發生率降低。在一些實施例中，醫藥組成物之投與引起（PMA）23週、24週、25週、26週、27週、28週、29週、30週、31週、32週、33週、34週、35週、36週、37週、38週、39週、40週、6個月、7個月、8個月、9個月、10個月、11個月、12個月、13個月、14個月、15個月、16個月、17個月、18個月、19個月、20個月、21個月、22個月、23個月或24個月內壞死性小腸結腸炎之發生率降低。

在一些實施例中，醫藥組成物之投與引起糾正胎齡（PMA）23週、24週、25週、26週、27週、28週、29週、30週、31週、32週、33週、34週、35週、36週、37週、38週、39週或40週內如藉由早產嬰兒指數（PREMature Infant Index，PREMII）評定的功能狀態之提昇。

在一些實施例中，醫藥組成物之投與引起約28至109微克/毫升（µg/ml）之IGF-1血清目標水準升高。在一些實施例中，醫藥組成物之投與引起約30 µg/ml、約40 µg/ml、約50 µg/ml、約60 µg/ml、約70 µg/ml、約80 µg/ml、約90 µg/ml、約100 µg/ml或約110 µg/ml之IGF-1血清目標水準升高。

在一些實施例中，相對於未治療對照，發生率降低至少約20%至50%。在一些實施例中，相對於未治療對照，發生率降低約10%、約20%、約30%、約40%、約50%、約60%或約70%。

在一些實施例中，相對於接受標準護理之對照，發生率降低至少約20%至50%。在一些實施例中，相對於接受標準護理之對照，發生率降低約10%、約20%、約30%、約40%、約50%、約60%或約70%。

在一些實施例中，相對於未治療對照，功能狀態提昇至少約20%至50%。在一些實施例中，相對於接受標準護理之對照，功能狀態提昇約10%、約20%、約30%、約40%、約50%、約60%或約70%。

在一些實施例中，相對於接受標準護理之對照，功能狀態提昇至少約20%至50%。在一些實施例中，相對於接受標準護理之對照，功能狀態提昇約20%、約30%、約40%、約50%、約60%或約70%。

在一些實施例中，本文提供一種治療或預防早產兒慢性肺病之方法，其包含向有需要之受試者投與包含重組似胰島素生長因子1（rIGF-1）、重組似胰島素生長因子結合蛋白3（rIGFBP-3）及聚山梨醇酯20界面活性劑之組成物。

本文所揭示之方法包含其中組成物之投與引起糾正胎齡（PMA）23週、24週、25週、26週、27週、28週、29週、30週、31週、32週、33週、34週、35週、36週、37週、38週、39週或40週內如藉由早產嬰兒指數（PREMII）評定的功能狀態之提昇的實施例。

在一些態樣中，本文提供一種製造包含似胰島素生長因子1（IGF-1）及似胰島素生長因子結合蛋白3（IGFBP-3）之蛋白質複合物的方法，其中該方法包含在混配複合物與調配溶液期間使用除不鏽鋼以外的接觸表面（諸如一次性袋子），其中在由此類方法製造之蛋白質複合物中，在25℃下儲存6個月後，IGF-1之經氧化物質之增加少於20%。在一些實施例中，IGF-1之經氧化物質之增加少於18%。在一些實施例中，IGF-1之經氧化物質之增加少於16%。在一些實施例中，在25℃下儲存6個月後，IGF-1之經氧化物質之增加少於15%。在一些實施例中，在25℃下儲存6個月後，IGF-1之經氧化物質之增加少於12%。在一些實施例中，在25℃下儲存6個月後，IGF-1之經氧化物質之增加少於10%。在一些實施例中，在25℃下儲存6個月後，IGF-1之經氧化物質之增加少於8%。在一些實施例中，在25℃下儲存6個月後，IGF-1之經氧化物質之增加少於6%。在一些實施例中，在25℃下儲存6個月後，IGF-1之經氧化物質之增加少於4%。在一些實施例中，在25℃下儲存6個月後，IGF-1之經氧化物質之增加少於3%。在一些實施例中，在25℃下儲存6個月後，IGF-1之經氧化物質之增加少於2%。在一些實施例中，在25℃下儲存6個月後，IGF-1之經氧化物質之增加少於1%。在一些實施例中，在25℃下儲存6個月後，IGF-1之經氧化物質之增加少於0.5%。

在一些實施例中，在40℃下儲存3個月後，IGF-1之經氧化物質之增加少於12%。在一些實施例中，在40℃下儲存3個月後，IGF-1之經氧化物質之增加少於10%。在一些實施例中，在40℃下儲存3個月後，IGF-1之經氧化物質之增加少於8%。在一些實施例中，在40℃下儲存3個月後，IGF-1之經氧化物質之增加少於6%。在一些實施例中，在40℃下儲存3個月後，IGF-1之經氧化物質之增加少於5%。在一些實施例中，在40℃下儲存3個月後，IGF-1之經氧化物質之增加少於4%。在一些實施例中，在40℃下儲存3個月後，IGF-1之經氧化物質之增加少於3%。在一些實施例中，在40℃下儲存3個月後，IGF-1之經氧化物質之增加少於2%。在一些實施例中，在40℃下儲存3個月後，IGF-1之經氧化物質之增加少於1%。

在一些實施例中，在藥品過濾步驟期間進一步使用一次性袋子。在一些實施例中，該方法包含在混配步驟及/或過濾步驟期間用蛋白質複合物填充一次性袋子的至少30%。在一些實施例中，該方法包含在混配步驟及/或過濾步驟期間用蛋白質複合物填充一次性袋子的至少40%。在一些實施例中，該方法包含在混配步驟及/或過濾步驟期間用蛋白質複合物填充一次性袋子的40%。在一些實施例中，該方法包含在混配步驟及/或過濾步驟期間用蛋白質複合物填充一次性袋子的50%。在一些實施例中，該方法包含在混配步驟及/或過濾步驟期間用蛋白質複合物填充一次性袋子的60%。在一些實施例中，該方法包含在混配步驟及/或過濾步驟期間用蛋白質複合物填充一次性袋子的70%。在一些實施例中，該方法包含在混配步驟及/或過濾步驟期間用蛋白質複合物填充一次性袋子的至少75%。在一些實施例中，該方法包含在混配步驟及/或過濾步驟期間用蛋白質複合物填充一次性袋子的80%。在一些實施例中，該方法包含在混配步驟及/或過濾步驟期間用蛋白質複合物填充一次性袋子的85%。在一些實施例中，該方法包含在混配步驟及/或過濾步驟期間用蛋白質複合物填充一次性袋子的90%。在一些實施例中，該方法包含在混配步驟及/或過濾步驟期間用蛋白質複合物填充一次性袋子的95%。

在一些實施例中，該方法包含在混配步驟及/或過濾步驟期間用蛋白質複合物填充一次性袋子的75%至95%。在一些實施例中，該方法包含在混配步驟及/或過濾步驟期間用蛋白質複合物填充一次性袋子的75%至90%。在一些實施例中，該方法包含在混配步驟及/或過濾步驟期間用蛋白質複合物填充一次性袋子的75%至85%。在一些實施例中，該方法包含在混配步驟及/或過濾步驟期間用蛋白質複合物填充一次性袋子的75%至80%。

在一些實施例中，該方法包含在混配步驟及/或過濾步驟期間用蛋白質複合物填充一次性袋子的25%至80%。在一些實施例中，該方法包含在混配步驟及/或過濾步驟期間用蛋白質複合物填充一次性袋子的25%至75%。在一些實施例中，該方法包含在混配步驟及/或過濾步驟期間用蛋白質複合物填充一次性袋子的25%至70%。在一些實施例中，該方法包含在混配步驟及/或過濾步驟期間用蛋白質複合物填充一次性袋子的25%至65%。在一些實施例中，該方法包含在混配步驟及/或過濾步驟期間用蛋白質複合物填充一次性袋子的25%至60%。在一些實施例中，該方法包含在混配步驟及/或過濾步驟期間用蛋白質複合物填充一次性袋子的25%至55%。在一些實施例中，該方法包含在混配步驟及/或過濾步驟期間用蛋白質複合物填充一次性袋子的25%至50%。

在一些實施例中，一次性袋子為約或大於500L。在一些實施例中，一次性袋子為約或大於10L。在一些實施例中，一次性袋子為約或大於50L。在一些實施例中，一次性袋子為約或大於100L。在一些實施例中，一次性袋子為約或大於150L。在一些實施例中，一次性袋子為約或大於200L。在一些實施例中，一次性袋子為約或大於250L。在一些實施例中，一次性袋子為約或大於300L。在一些實施例中，一次性袋子為約或大於350L。在一些實施例中，一次性袋子為約或大於400L。在一些實施例中，一次性袋子為約或大於450L。在一些實施例中，一次性袋子為約或大於500L。在一些實施例中，一次性袋子為約或大於550L。

在一些實施例中，在40℃下儲存6個月後，少於25%的蛋白質複合物以低分子量物質形式存在。在一些實施例中，在40℃下儲存6個月後，少於20%的蛋白質複合物以低分子量物質形式存在。在一些實施例中，在40℃下儲存6個月後，少於18%的蛋白質複合物以低分子量物質形式存在。在一些實施例中，在40℃下儲存6個月後，少於15%的蛋白質複合物以低分子量物質形式存在。在一些實施例中，在40℃下儲存6個月後，少於12%的蛋白質複合物以低分子量物質形式存在。在一些實施例中，在40℃下儲存6個月後，少於10%的蛋白質複合物以低分子量物質形式存在。在一些實施例中，在40℃下儲存6個月後，少於5%的蛋白質複合物以低分子量物質形式存在。

在一些實施例中，在40℃下儲存3個月後，少於15%的蛋白質複合物以低分子量物質形式存在。在一些實施例中，在40℃下儲存3個月後，少於10%的蛋白質複合物以低分子量物質形式存在。在一些實施例中，在40℃下儲存3個月後，少於5%的蛋白質複合物以低分子量物質形式存在。

在一些實施例中，在40℃下儲存1個月後，少於15%的蛋白質複合物以低分子量物質形式存在。在一些實施例中，在40℃下儲存8個月後，少於15%的蛋白質複合物以低分子量物質形式存在。在一些實施例中，在40℃下儲存10個月後，少於15%的蛋白質複合物以低分子量物質形式存在。在一些實施例中，在40℃下儲存12個月後，少於15%的蛋白質複合物以低分子量物質形式存在。

在一些實施例中，包含含有似胰島素生長因子1（IGF-1）及似胰島素生長因子結合蛋白3（IGFBP-3）之經分離蛋白質複合物的醫藥組成物係藉由上文所描述之態樣或實施例之方法製造。在一些實施例中，組成物包含界面活性劑，例如聚山梨醇酯界面活性劑。

在一些態樣中，本文提供一種醫藥組成物，其包含藉由包含使用一次性袋子之方法製造的包含似胰島素生長因子1（IGF-1）及似胰島素生長因子結合蛋白3（IGFBP-3）之經分離蛋白質複合物。

在一些實施例中，醫藥組成物包含50 mM乙酸鈉、105 mM氯化鈉及0.005%（v/v）P20，pH 5.5。

在一些實施例中，醫藥組成物之pH在約5.0與7.0之間。在一些實施例中，pH為約5.0、約5.2、約5.4、約5.6、約5.8、約6.0、約6.2、約6.4、約6.6、約6.8或約7.0。在一些實施例中，組成物之pH為約5.1、約5.3、約5.5、約5.7或約5.9、約6.1、約6.3、約6.5、約6.7或約6.9。在一些實施例中，組成物之pH在約5.3與5.8之間。在一些實施例中，組成物之pH為約5.5。

在一些態樣中，本文提供一種醫藥組成物，其包含：蛋白質複合物，其包含等莫耳量的重組似胰島素生長因子1（rIGF-1）及重組似胰島素生長因子結合蛋白3（rIGFBP-3）；聚山梨醇酯20界面活性劑，其濃度為約0.005%；及緩衝液，其包含乙酸鈉、乙酸及/或氯化鈉，其中該醫藥組成物之pH為約5.3至5.8，其中rIGF-1/IGFBP-3之濃度為約50微克/毫升，且其中少於2%的IGF-1以經氧化物質形式存在。

在一些態樣中，提供一種醫藥組成物，其包含：蛋白質複合物，其包含在0.75至1.25:1或1:0.75至1.25之範圍內的，例如等莫耳量的重組似胰島素生長因子1（rIGF-1）及重組似胰島素生長因子結合蛋白3（rIGFBP-3）；聚山梨醇酯20界面活性劑，其濃度為約0.005%；及緩衝液，其包含乙酸鈉、乙酸及/或氯化鈉，其中該組成物之pH為約5.3至5.8，其中rIGF-1/IGFBP-3之濃度為約50微克/毫升，且其中少於1.5%的IGF-1以經氧化物質形式存在。應理解，雖然本發明已結合其較佳特定實施例進行描述，但前述描述以及以下實例意欲說明且不限制本發明之範疇。本發明之範疇內的其他態樣、優勢及修改對於熟習本發明所涉及之技術者而言將為顯而易見的。

相關申請案之交叉參考

本申請案主張2020年10月19日申請之美國臨時申請案第63/093,696號之優先權及權益，其內容特此以全文引用之方式併入。

在一些態樣中，本發明提供一種針對向新生兒及/或早產嬰兒投與而最佳化之組成物，及治療早產兒之疾病及併發症的方法，該等疾病及併發症尤其包括腦室內出血（IVH）、支氣管肺發育不良（BPD）及早產兒慢性肺病。本文提供之組成物及方法尤其有效治療早產嬰兒，尤其超早產嬰兒之腦室內出血、支氣管肺發育不良及/或慢性肺病。在本發明之一些實施例中，本文提供一種適合於向新生兒及/或早產嬰兒投與治療複合物之低濃度醫藥組成物，其包含複合的似胰島素生長因子-1（IGF-1）、似胰島素生長因子結合蛋白-3（IGFBP-3）以及非離子型界面活性劑（例如聚山梨醇酯界面活性劑，諸如聚山梨醇酯20或聚山梨醇酯80，特定言之聚山梨醇酯20，其濃度在約0.0025% v/v與0.0075% v/v之間（例如0.005% v/v））。在一些實施例中，聚山梨醇酯界面活性劑為聚山梨醇酯20（P20）或聚山梨醇酯80（P80）。在一些實施例中，rIGF-1及rIGFBP-3以0.75至1.25:1或1:0.75至1.25之範圍複合，例如以等莫耳量複合，且rIGF-1/IGFBP-3之濃度為約10微克/毫升至1000微克/毫升（例如50微克/毫升）。在一些態樣中，本發明之方法涉及向需要治療之受試者（例如早產嬰兒）投與前述醫藥組成物。在另一獨立態樣中，本文提供用於製造組成物之調配物的方法，例如採用一次性袋子，特定言之使調配物與不鏽鋼之接觸最小化，以提供用於達成調配物之氧化減少的穩健方法。

本發明之各種態樣在以下章節中加以詳細描述。章節之使用並不意欲限制本發明。各章節可適用於本發明之任何態樣。在本申請案中，除非另外說明，否則使用「或」意謂「及/或」。定義

「早產（preterm）」或「早產出生（preterm birth）」或「早產兒（prematurity）」或「早產嬰兒（premature infant）」或「早產嬰兒（premature baby）」或文法等效物係指嬰兒在妊娠37週之前出生或體重比嬰兒胎齡之平均體重輕10%。舉例而言，在22至37週之間出生的嬰兒將被視作早產的。「GA」或「胎齡」為自女性最後一次月經週期之第一天至當前日期以週為單位量測的描述妊娠進展至何程度的通用術語。在一些實施例中，早產嬰兒係指早產至少1週、2週、3週、4週、1個月、2個月或3個月之嬰兒。在一些實施例中，早產嬰兒係指在小於32週之胎齡（GA）時出生的嬰兒。在一些實施例中，早產嬰兒係指在小於28週之胎齡（GA）時出生的嬰兒。「PMA」或「糾正胎齡」係指胎齡加實齡。「CA」或「校正年齡」為實齡減去在妊娠40週之前出生的週數。

如本文所使用，術語「胎齡」（整週）意謂：最後一次月經週期之第一天與分娩當天之間所經過的時間。若妊娠係使用輔助生殖技術達成，則胎齡藉由受孕計年齡加2週來計算。

如本文所使用，術語「實齡」（天數、週數、月數或年數）意謂：自出生起經過之時間。

如本文所使用，術語「糾正胎齡」（週數）意謂：胎齡加實齡。

如本文所使用，術語「校正年齡」（週數或月數）意謂：實齡減去在妊娠40週之前出生的週數；該術語應僅用於早產出生的至多3歲兒童。

在圍產期新生兒住院期間，較佳用「糾正胎齡」來描述早產嬰兒之年齡。在圍產期之後，「校正年齡」為首選術語。

「IGF-I」係指來自任何物種，包括牛科動物、綿羊科動物、豬科動物、馬科動物及人類，較佳人類之似胰島素生長因子I，且若指外源投與，則係指來自任何來源，無論天然、合成或重組來源之似胰島素生長因子I，其限制條件為其將在適當位點處結合IGF結合蛋白。IGF-I可以重組方式產生，例如如PCT公開案WO 95/04076中所描述。

「IGFBP」或「IGF結合蛋白」係指來自似胰島素生長因子結合蛋白家族且通常與IGF-I締合或結合或複合的蛋白質或多肽，無論其是否循環（亦即，在血清或組織中循環）。此類結合蛋白不包括受體。此定義包括IGFBP-1、IGFBP-2、IGFBP-3、IGFBP-4、IGFBP-5、IGFBP-6、Mac 25（IGFBP-7）及前列環素刺激因子（PSF）或內皮細胞特異性分子（ESM-1）以及與IGFBP具有高同源性的其他蛋白質。Mac 25描述於例如Swisshelm等人, 美國國家科學院院刊（Proc. Natl. Acad. Sci. USA）, 92: 4472-4476 (1995)及Oh等人, 生物化學 雜誌（J. Biol. Chem.）, 271: 30322-30325 (1996)中。PSF描述於Yamauchi等人, 生物化學雜誌（Biochemical Journal）, 303: 591-598 (1994)中。ESM-1描述於Lassalle等人, 生物化學 雜誌, 271: 20458-20464 (1996)中。關於其他經鑑定之IGFBP，參見例如1990年6月27日公開之EP 375,438；1990年5月23日公開之EP 369,943；1989年10月5日公開之WO 89/09268；Wood等人, 分子內分泌學（Molecular Endocrinology）, 2: 1176-1185 (1988)；Brinkman等人, 歐洲分子生物學學會雜誌（The EMBO J.）, 7: 2417-2423 (1988)；Lee等人, 分子 內分泌學, 2: 404-411 (1988)；Brewer等人, BBRC, 152: 1289-1297 (1988)；1988年12月7日公開之EP 294,021；Baxter等人, BBRC, 147: 408-415 (1987)；Leung等人, 自然（Nature）, 330: 537-543 (1987)；Martin等人, 生物化學 雜誌, 261: 8754-8760 (1986)；Baxter等人, 比較 生物化學 與生理學（Comp. Biochem. Physiol.）, 91B: 229-235 (1988)；1989年9月21日公開之WO 89/08667；1989年10月19日公開之WO 89/09792；及Binkert等人, 歐洲分子生物學學會雜誌, 8: 2497-2502 (1989)。

「IGFBP-3」係指似胰島素生長因子結合蛋白3。IGFBP-3為似胰島素生長因子結合蛋白家族之成員。IGFBP-3可來自任何物種，包括牛科動物、綿羊科動物、豬科動物及人類，呈天然序列或變體形式，包括但不限於天然存在之等位基因變體。IGFBP-3可來自任何來源，無論天然、合成或重組來源，其限制條件為其將在適當位點處結合IGF-I。IGFBP-3可以重組方式產生，如PCT公開案WO 95/04076中所描述。

如本文所使用，「治療組成物」被定義為包含IGF-I、其類似物或IGF-I與其結合蛋白IGFBP-3之組合（IGF-I/IGFBP-3複合物）。治療組成物亦可含有其他物質，諸如水、礦物質、載劑(諸如蛋白質)及熟習此項技術者已知之其他賦形劑。在一些實施例中，治療組成物包含界面活性劑，諸如聚山梨醇酯20（P20）或聚山梨醇酯80（P80）。

IGF-I之「類似物」為在人類或動物中具有與IGF-I相同之治療作用的化合物。此等類似物可為IGF-I之天然存在類似物（例如截短IGF-I）或IGF-I之任何已知合成類似物。IGF-I之類似化合物參見例如美國專利第5,473,054號。

IGF-I之「促效劑」為能夠增加哺乳動物中且尤其人類中之IGF（尤其IGF-I）之血清及組織水準的化合物，包括肽。IGF促效劑分子參見例如美國專利第6,251,865號。

如本文所使用之「發育遲緩」係指在達成發育里程碑中可能造成智力進展遲緩的異常神經形成。在一些情況下，發育遲緩可藉助於腦電圖判定。

如本文所使用之「受試者」意謂任何哺乳動物，包括人類。在本發明之某些實施例中，受試者為成人、青少年或嬰兒。本發明亦涵蓋醫藥組成物之投與及/或子宮內治療方法之進行。

如本文所使用，術語「治療（treatment）」（以及「治療（treat）」或「治療（treating）」）係指部分或完全緩解、改善、減輕、抑制、預防特定疾病、病症及/或病況（例如腦室內出血、支氣管肺發育不良、早產兒慢性肺病）之一或多個症狀或特徵、延遲其發作、降低其嚴重程度及/或降低其發生率之治療組成物（例如IGF-1/IGFBP-3）的任何投與。該治療可屬於不展現相關疾病、病症及/或病況之徵象之受試者及/或僅展現疾病、病症及/或病況之早期徵象之受試者。可替代地或另外，該治療可屬於展現相關疾病、病症及/或病況之一或多種已確立徵象之受試者。因此，在一些實施例中，治療意謂預防疾病之發作或進展。

「IGF-1之基線水準」係指在接受任何治療之前受試者中之IGF-1之血清水準。

「儲存期限」或「保存期限」係指藥品保留使其適合於治療用途之特性及性質的儲存時間段。舉例而言，在一些實施例中，在藥品之儲存期限期間，包括經氧化物質之非所需物質、高分子量物質、降解產物之量較低（例如低於10%）。儲存期限例如在特定儲存溫度（例如5℃、25℃、40℃ 等）下加以描述。

「穩定性」或「穩定」係指藥品在其儲存及使用時間段期間保留在製造時具有的使其適合於治療用途之特性及性質之程度。穩定性包括關於以下之態樣：其調配、IGF-1及IGFBP3成分之穩定性、IGF-1/IGFBP3複合物之完整性及穩定性、容器及密閉、製造及處理條件、包裝組件、儲存及裝運條件、溫度、光照及濕度以及藥房保存期限及患者使用之預期持續時間及條件。在一些實施例中，穩定性係指包括經氧化物質之非所需物質之量較低、引起聚集之高分子量物質較少及/或由降解產物表示之低分子量物質較少。在一些實施例中，穩定性係指少於10%的非所需物質。在一些實施例中，穩定性係指少於5%的非所需物質。在一些實施例中，穩定性係指少於2%的非所需物質。

「標準新生兒護理」或「標準護理」係指由美國兒科學會（American Academy of Pediatrics）針對在小於32週胎齡時出生之嬰兒描述的III級新生兒加護病房（NICU）之標準護理。

「CLD及/或BPD之標準護理」係指包括呼吸支持之治療措施，諸如補充氧氣、持續氣道正壓通氣及使用氣管內插管之機械通氣。用以下藥物來管理症狀：諸如有助於打開氣道之支氣管擴張劑、有助於減少發炎之類固醇、有助於減少肺部中之過量流體的利尿劑、有助於降低肺部血壓之血管擴張劑以及抵抗感染之抗生素。

「IVH之標準護理」係指以下預防及/或治療措施，包括產前類固醇及腦血流動力學之早期管理及穩定以及呼吸支持。IVH治療係指用藥物對症狀進行支持性管理，以減少腦部出血及損傷，且預防癲癇發作。

如本文所使用，術語「改善」、「增加」或「減少」或文法等效物指示相對於基線量測結果之值，該基線量測結果諸如在開始本文所描述之治療之前同一受試者中的量測結果或在不存在本文所描述之治療的情況下對照受試者（或多個對照受試者）中的量測結果或歷史參考或資料。「對照受試者」為患有與所治療受試者相同形式之早產兒疾病（例如IVH、BPD、CLD以及其他）的受試者，其年齡與所治療受試者大約相同（以確保所治療受試者與對照受試者之疾病階段類似）。 IGF-1/IGFBP-3

IGF-1或其促效劑或類似物可用於實踐本發明。IGF-I為眾所周知的出生後生長及代謝之調節劑。參見Baker J、Liu J P、Robertson E J、Efstratiadis A。其具有大約7.5千道爾頓（Kd）之分子量。大部分循環的IGF結合至IGF結合蛋白，且更特定言之，結合至IGFBP-3。可在血清中量測IGF-I以診斷異常生長相關病況。

通常，適用於治療本文所描述之疾病，包括例如IVH、BPD或CLD的治療組成物含有IGF-1及IGF-1結合蛋白，諸如IGF結合蛋白（IGFBP）。已在各種組織及體液中鑑別出至少六種不同的IGF結合蛋白（IGFBP）。在一些實施例中，根據本發明之適合治療組成物含有IGF-1及IGFBP-3。IGF-1及IGFBP-3可以蛋白質複合物之形式使用或單獨使用。在一些實施例中，IGF-1及IGFBP-3以等莫耳量複合。在一些實施例中，治療組成物包含美卡舍明-林菲培（mecasermin rinfabate）。在一些實施例中，治療組成物包含美卡舍明-林菲培及界面活性劑。在一些實施例中，治療組成物包含美卡舍明-林菲培及聚山梨醇酯20。在一些實施例中，治療組成物包含美卡舍明-林菲培及聚山梨醇酯80。

IGF-I及IGF-I結合蛋白（諸如IGFBP-3）可自天然來源純化或藉由重組方式產生。舉例而言，IGF-I自人類血清之純化為此項技術中熟知的（Rinderknecht等人(1976) 美國國家科學院院刊73:2365-2369）。IGF-I藉由重組方法之產生展示於1984年12月公開之EP 0128733中。IGFBP-3可使用諸如Baxter等人（1986, 生物化學與生物物理研究通訊（ Biochem. Biophys. Res. Comm. ）139:1256-1261）所展示之方法自天然來源純化。替代地，IGFBP-3可以重組方式合成，如Sommer等人, 第715至728頁, 似胰島素生長因子之現代概念（Modern Concepts Of Insulin-Like Growth Factors）（E. M. Spencer編, Elsevier, N.Y., 1991）所論述。重組IGFBP-3以1:1莫耳比（等莫耳量）結合IGF-I。 醫藥組成物及治療用途

本發明提供一種適合於向新生兒投與治療性蛋白質複合物之醫藥組成物，其包含：複合（例如以0.75至1.25:1或1:0.75至1.25之範圍複合，諸如以等莫耳量複合）的似胰島素生長因子1及似胰島素生長因子結合蛋白3；及0.0025%至0.0075%之非離子型界面活性劑（例如聚山梨醇酯界面活性劑，諸如聚山梨醇酯20或聚山梨醇酯80，特定言之聚山梨醇酯20）。在一個實施例中，醫藥組成物為等張的。在一個實施例中，醫藥組成物為液體。在一個實施例中，醫藥組成物為水性的。

本發明亦提供治療（例如改善或降低其風險）早產兒之疾病及併發症，例如腦室內出血（IVH）、支氣管肺發育不良（BPD）或慢性肺病（CLD），諸如與早產相關之CLD的方法。舉例而言，在一些實施例中，本發明可用於治療早產嬰兒，例如以改善IVH或與IVH相關之併發症或降低其風險。在一些其他實施例中，本發明可用於治療早產嬰兒，例如以改善CLD或與CLD相關之併發症或降低其風險。在其他實施例中，本發明可用於治療早產嬰兒，例如以改善BPD或與BPD相關之併發症或降低其風險。在一些實施例中，本發明可用於治療早產至少1週、2週、3週、4週、1個月、2個月或3個月之嬰兒。在一些實施例中，本發明可用於治療超早產嬰兒。

在本發明之一個實施例中，包含IGF-I之醫藥組成物與能夠結合IGF-I之IGF結合蛋白及界面活性劑組合投與。在一些實施例中，能夠結合IGF-I之IGF結合蛋白為IGF結合蛋白3（IGFBP-3）。在一些實施例中，組成物包含選自聚山梨醇酯20或聚山梨醇酯80之界面活性劑。

在一些實施例中，包含rIGF-1/IGFBP-3之治療性複合物之濃度在10至1000微克/毫升之範圍內（例如10至100微克/毫升，15、20、25、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85、90、95或100微克/毫升），諸如45至55微克/毫升，特定言之50微克/毫升。

在一些實施例中，包含rIGF-1/IGFBP-3之醫藥組成物之濃度在約10微克/毫升至1000微克/毫升之間。在一些實施例中，包含rIGF-1/IGFBP-3之醫藥組成物之濃度在約10微克/毫升至100微克/毫升之間。舉例而言，在一些實施例中，包含rIGF-1/IGFBP-3之醫藥組成物之醫藥濃度在約45至55微克/毫升之間。在一些實施例中，包含rIGF-1/IGFBP-3之醫藥組成物之濃度為約50微克/毫升。在一些實施例中，醫藥濃度為約10至100微克/毫升的包含rIGF-1/IGFBP-3之醫藥組成物適合於靜脈內投與。在一些實施例中，濃度為約45至55微克/毫升的包含rIGF-1/IGFBP-3之醫藥組成物適合於靜脈內投與。在一些實施例中，濃度為約50微克/毫升的包含rIGF-1/IGFBP-3之醫藥組成物適合於靜脈內投與。

在一些實施例中，包含rIGF-1/IGFBP-3之醫藥組成物之濃度在約1000微克/毫升至5000微克/毫升之間。舉例而言，在一些實施例中，包含rIGF-1/IGFBP-3之醫藥組成物之濃度在2000微克/毫升至3000微克/毫升之間。在一些實施例中，包含rIGF-1/IGFBP-3之醫藥組成物之濃度為約2500微克/毫升。在一些實施例中，濃度在約1000至5000微克/毫升之間的包含rIGF-1/IGFBP-3之醫藥組成物適合於皮下投與。在一些實施例中，濃度在約2000微克/毫升至3000微克/毫升之間的包含rIGF-1/IGFBP-3之醫藥組成物適合於皮下投與。在一些實施例中，濃度為約2500微克/毫升的包含rIGF-1/IGFBP-3之醫藥組成物適合於皮下投與。

在一些實施例中，可使用包含0.75至1.25:1或1:0.75至1.25範圍內之IGF-1及IGFBP-3，例如等莫耳量之IGF-I及IGF結合蛋白3的醫藥組成物。在一些實施例中，IGF-I及IGF結合蛋白3在投與之前複合。複合物可藉由混合溶解於生理上相容的載劑（諸如生理鹽水或磷酸鹽緩衝鹽水溶液）中的大約等莫耳量之IGF-I及IGF結合蛋白3來形成。在一些實施例中，將重組人類IGF-I之濃縮溶液與重組人類IGF結合蛋白3之濃縮溶液混合在一起持續足夠的時間，以形成0.75至1.25:1或1:0.75至1.25範圍內之複合物，例如等莫耳複合物。在一些實施例中，重組人類IGF-I及重組人類IGF結合蛋白3在純化期間組合形成複合物，如國際專利申請案第WO 96/40736號中所描述。

在一些實施例中，提供一種包含本文所描述之組成物及一或多種適合醫藥賦形劑之醫藥組成物。在一個實施例中，組成物具有最小數目及/或數量之賦形劑，例如1、2、3、4或5種賦形劑。

在一些實施例中，醫藥組成物包含聚山梨醇酯20。在一些實施例中，聚山梨醇酯20界面活性劑之濃度在約0.001%至2.4% v/v之間。在一些實施例中，聚山梨醇酯20界面活性劑之濃度在約0.2%至0.4% v/v之間。在一些實施例中，聚山梨醇酯20界面活性劑之濃度為約0.001%、0.005%、0.01%、0.02%、0.03%、0.05%、0.10%、0.15%、0.2%、0.5%、0.7%、1.0%、1.2%、1.5%、1.8%、2.0%、2.2%或2.4% v/v。在一些實施例中，聚山梨醇酯20界面活性劑之濃度為約0.0025%、約0.005%或約0.0075% v/v。在一些實施例中，聚山梨醇酯20之濃度為0.005%。

在一些實施例中，醫藥組成物包含聚山梨醇酯80。在一些實施例中，聚山梨醇酯80界面活性劑之濃度在約0.001%至2.4% v/v之間。在一些實施例中，聚山梨醇酯80界面活性劑之濃度在約0.2%至0.4% v/v之間。在一些實施例中，聚山梨醇酯80界面活性劑之濃度為約0.001%、0.005%、0.01%、0.02%、0.03%、0.05%、0.10%、0.15%、0.2%、0.5%、0.7%、1.0%、1.2%、1.5%、1.8%、2.0%、2.2%或2.4% v/v。在一些實施例中，聚山梨醇酯80界面活性劑之濃度為約0.0025%、約0.005%或約0.0075% v/v。在一些實施例中，聚山梨醇酯80之濃度為0.005%。

在一些實施例中，界面活性劑%為w/w。

在一個實施例中，界面活性劑%為w/v，亦即組成物之重量比界面活性劑之體積或界面活性劑之重量比組成物之體積。

在一個實施例中，界面活性劑%為v/v。

在一些實施例中，醫藥組成物進一步包含含有乙酸鈉、乙酸及/或氯化鈉之緩衝液。在一些實施例中，組成物進一步包含含有乙酸鈉或乙酸之緩衝液。在一些實施例中，組成物進一步包含含有氯化鈉之緩衝液。

在一些實施例中，乙酸鈉或乙酸之濃度在約10與100 mM之間。在一些實施例中，乙酸鈉或乙酸之濃度為約10 mM、15 mM、20 mM、25 mM、30 mM、35 mM、40 mM、45 mM、50 mM、55 mM、60 mM、65 mM、70 mM、75 mM、80 mM、85 mM、90 mM、95 mM或100 mM。在一些實施例中，乙酸鈉或乙酸之濃度為約50 mM。

在一些實施例中，氯化鈉之濃度為約20 mM至200 mM。在一些實施例中，氯化鈉之濃度為約20 mM、約25 mM、30 mM、35 mM、40 mM、45 mM、50 mM、55 mM、60 mM、65 mM、70 mM、75 mM、80 mM、約90 mM、約95 mM、約100 mM、約105 mM、約110 mM、約115 mM、約120 mM、約125 mM、約130 mM、約135 mM、約140 mM、約145 mM、約150 mM、約155 mM、約160 mM、約165 mM、約170 mM、約175 mM、約180 mM、約185 mM、約190 mM、約195 mM或約200 mM。在一些實施例中，氯化鈉之濃度為約105 mM。

在一些實施例中，組成物之pH在約5.0與6.0之間。在一些實施例中，pH為約5.0、約5.2、約5.4、約5.6、約5.8、約6.0、約6.2、約6.4、約6.6、約6.8或約7.0。在一些實施例中，組成物之pH為約5.1、約5.3、約5.5、約5.7、約5.9、約6.1、約6.3、約6.5、約6.7或約6.9。在一些實施例中，組成物之pH為約5.3至5.8，例如5.3、5.4、5.5、5.6、5.7、5.8，特定言之pH 5.5。

本發明之醫藥組成物包括適用於經口、經鼻、局部（包括經頰及舌下）或非經腸（包括皮下、肌肉內、靜脈內及皮內）投與之彼等組成物。調配物可宜以單位劑型（例如錠劑及持續釋放膠囊）及脂質體形式呈現，且可藉由藥劑學技術中熟知之任何方法製備。參見例如雷明頓的醫藥科學（Remington's Pharmaceutical Sciences）, 馬克出版公司（Mack Publishing Company）, 賓夕法尼亞州費城（Philadelphia, Pa.）（第17版，1985）。在一些實施例中，組成物係經靜脈內投與。

此類製備方法包括使成分（諸如構成一或多種附屬成分之載劑）與待投與分子締合的步驟。一般而言，藉由使活性成分與液體載劑、脂質體或細粉狀固體載劑或兩者均勻且緊密締合且隨後視需要使產物成形來製備組成物。

適合於經口投與的本發明組成物可呈現為離散單元形式，諸如各自含有預定量之活性成分的膠囊、扁囊劑或錠劑；粉末或顆粒形式；於水性液體或非水性液體中之溶液或懸浮液形式；或水包油液體乳液或油包水液體乳液形式；或封裝於脂質體中；及藥團形式等。

錠劑可藉由視情況與一或多種附屬成分一起壓縮或模製來製造。壓縮錠劑可藉由在適合機器中壓縮視情況與黏合劑、潤滑劑、惰性稀釋劑、防腐劑、表面活性劑或分散劑混合的呈自由流動形式（諸如粉末或顆粒）之活性成分來製備。可藉由使經惰性液體稀釋劑濕潤之粉末狀化合物之混合物在適合機器中模製來製得經模製錠劑。錠劑視情況可包覆包衣或刻痕，且可經調配以便提供其中的活性成分之緩慢或控制釋放。

適合於非經腸投與之組成物包括可含有抗氧化劑、緩衝劑、抑菌劑及使調配物與預期接受者之血液等張之溶質的水性及非水性無菌注射溶液；及可包括懸浮劑及增稠劑之水性及非水性無菌懸浮液。調配物可提供於單位劑量或多劑量容器（例如密封的安瓿及小瓶）中，且可在冷凍乾燥（凍乾）條件下儲存，僅需要在即將使用之前添加無菌液體載劑（例如注射用水）。即用型注射溶液及懸浮液可由無菌粉劑、顆粒及錠劑製備。

在一些實施例中，本文所揭示之方法提供適合於向新生兒投與（特定言之以活性形式投與）治療性蛋白質複合物之低濃度等張醫藥組成物向需要此類治療之嬰兒之非經腸投與，該醫藥組成物包含在非離子型界面活性劑（例如0.005%聚山梨醇酯20或聚山梨醇酯80）存在下與IGF結合蛋白3複合之IGF-I。

在一個實施例中，醫藥調配物可非經腸投與而不損失治療性蛋白質複合物（諸如不損失治療性蛋白質複合物之活性）。在一個實施例中，活性藉由本文諸如在實例中所揭示之分析來量測。在一個實施例中，調配物將治療性蛋白質複合物之劑量的至少80%以活性形式遞送至新生兒，例如81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%。

非經腸投與包括（但不限於）靜脈內（IV）、肌肉內（IM）、皮下（SC）、腹膜內（IP）、鼻內及吸入途徑。在一些實施例中，IGF-I/IGFBP-3醫藥組成物係經靜脈內投與。IV、IM、SC及IP投與可藉由彈丸注射或輸注，且亦可藉由緩慢釋放的可植入裝置，包括（但不限於）泵、緩慢釋放調配物及機械裝置。調配物、投與之途徑及方法以及劑量將視所治療之病症及患者之病史而定。因此，在一些實施例中，本文所揭示之方法提供包含在界面活性劑（例如0.005% v/v聚山梨醇酯20或聚山梨醇酯80）存在下與IGF結合蛋白3複合之IGF-I的醫藥組成物向需要此類治療之嬰兒之靜脈內投與。在一些實施例中，本文所揭示之方法提供包含在界面活性劑（例如0.005% v/v聚山梨醇酯20或聚山梨醇酯80）存在下與IGF結合蛋白3複合之IGF-I的醫藥組成物向需要此類治療之嬰兒之皮下投與。

根據本發明之醫藥組成物可以各種劑量投與。舉例而言，適合劑量可在約100至1000微克/公斤/24小時之範圍內。在一些實施例中，適合劑量可為或大於約100微克/公斤/24小時、150微克/公斤/24小時、200微克/公斤/24小時、250微克/公斤/24小時、300微克/公斤/24小時、350微克/公斤/24小時、400微克/公斤/24小時、450微克/公斤/24小時、500微克/公斤/24小時、550微克/公斤/24小時、600微克/公斤/24小時、650微克/公斤/24小時、700微克/公斤/24小時、750微克/公斤/24小時、800微克/公斤/24小時、850微克/公斤/24小時、900微克/公斤/24小時、950微克/公斤/24小時或1000微克/公斤/24小時。在一些實施例中，適合劑量為約250微克/公斤/24小時。在一些實施例中，適合劑量為約400微克/公斤/24小時。在一些實施例中，適合劑量為約750微克/公斤/24小時。在一些實施例中，適合劑量為約1000微克/公斤/24小時。在一些實施例中，根據本發明之醫藥組成物在自出生起直至糾正胎齡（PMA）約23至34週、直至PMA約28至32週、直至PMA約29週加6天期間投與。

本文所提供之方法包含其中醫藥IGF-I/IGFBP-3組成物之投與引起12個月校正年齡（CA）內早產兒慢性肺病之發生率降低的實施例。在一些實施例中，醫藥IGF-I/IGFBP-3組成物之投與引起糾正胎齡（PMA）23週、26週、30週、34週、36週、40週、6個月、8個月、10個月或12個月內支氣管肺發育不良（BPD）之發生率降低。在一些實施例中，醫藥IGF-I/IGFBP-3組成物之投與引起糾正胎齡（PMA）23週、26週、30週、34週、36週、40週、6個月、8個月、10個月或12個月內III級或IV級重度腦室內出血（IVH）之發生率降低。在一些實施例中，醫藥IGF-I/IGFBP-3組成物之投與引起糾正胎齡（PMA）23週、26週、30週、34週、36週、40週、6個月、8個月、10個月或12個月內右心室肥大（RVH）之發生率降低。在一些實施例中，醫藥IGF-I/IGFBP-3組成物之投與引起糾正胎齡（PMA）23週、26週、30週、34週、36週、40週、6個月、8個月、10個月或12個月內肺高血壓（PH）之發生率降低。在一些實施例中，醫藥IGF-I/IGFBP-3組成物之投與引起糾正胎齡（PMA）23週、26週、30週、34週、36週、40週、6個月、8個月、10個月或12個月內壞死性小腸結腸炎之發生率降低。

在一些實施例中，本文所揭示之方法包含其中醫藥IGF-I/IGFBP-3組成物之投與引起糾正胎齡（PMA）36週或40週內如藉由早產嬰兒指數（PREMII）評定的功能狀態之提昇的實施例。

對於非經腸或經口投與，複合物之組成物可為半固體或液體製劑，諸如液體、懸浮液及其類似者。生理上相容之載劑係在所用劑量及濃度下對接受者無毒且與調配物之其他成分相容的載劑。舉例而言，調配物較佳不包括氧化劑及已知對多肽有害之其他化合物。因此，生理上相容之載劑包括（但不限於）生理鹽水、血清白蛋白、5%右旋糖、血漿製劑及其他含蛋白質溶液。視情況，載劑亦可包括清潔劑或界面活性劑。

在本發明之又一態樣中，提供IGF-I/IGFBP-3醫藥組成物之用途，其用以製造用於治療早產併發症之治療組成物。

在一個較佳實施例中，提供一種適合於向新生兒投與（特定言之以活性形式投與）治療性蛋白質複合物之低濃度等張醫藥組成物，其包含10至1000微克/毫升（例如10至100微克/毫升，亦即例如15、20、25、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85、90、95或100微克/毫升，諸如45至55微克/毫升，特定言之50微克/毫升）的似胰島素生長因子1（IGF-1）與似胰島素生長因子結合蛋白3（IGFBP-3）之複合物（例如以0.75至1.25:1或1:0.75至1.25之範圍複合，諸如以等莫耳量複合）；及0.0025%至0.0075%範圍內（例如0.005%）之非離子型界面活性劑（例如聚山梨醇酯界面活性劑，諸如聚山梨醇酯20或聚山梨醇酯80，特定言之聚山梨醇酯20）；緩衝液（例如50 mM乙酸鈉）、鹽（例如105 mM氯化鈉），其中該調配物之pH在pH 5.3至5.8之範圍內（例如pH 5.5）。 慢性肺病 早產兒慢性肺病

超早產嬰兒罹患早產兒慢性肺病之風險非常高。早產嬰兒可能需要呼吸機（呼吸器）及額外氧氣來呼吸。早產兒慢性肺病可能在呼吸機或氧氣損傷早產嬰兒的肺部時發生。在肺損傷之情況下，嬰兒肺部內之組織發炎。組織會破裂，導致疤痕。疤痕會導致呼吸困難，且嬰兒可能需要更多氧氣。肺部損傷可由以下引起： ● 早產：早產嬰兒的肺部尚未完全形成。對肺泡而言尤其如此。 ● 界面活性 劑含量低：此為肺部中有助於保持微小肺泡打開之物質。 ●氧氣使用：大量氧氣會傷害肺部中之細胞。 ●呼吸 機（機械通氣）：空氣壓力會傷害肺布。此壓力可來自呼吸機、氣道之吸入及氣管內（ET）導管之使用。ET導管為放置在您嬰兒氣管（windpipe/trachea）中且連接至呼吸機之導管。

超早產出生之嬰兒的肺結果之長期軌跡通常始於產前危險因素，接著為在生命之最初幾小時或幾天中需要呼吸支持的呼吸窘迫症候群（RDS），其常常導致在存活到術語對等期之彼等嬰兒中診斷出BPD，且最終在其成長至嬰兒期、幼兒期且通常甚至學齡或青春期時形成慢性肺病，其導致更頻繁的針對呼吸病因之再入院及ER就診，需要呼吸系統藥物或家庭呼吸支持，且許多人罹患一種持續限制其生活品質之反應性呼吸道疾病。

早產兒慢性肺病為一個廣義的術語，包括診斷出患有支氣管肺發育不良之嬰兒，但亦可包括在超早產出生後從未接受支氣管肺發育不良診斷且表現持續性肺病之嬰兒。早產兒慢性肺病可藉由脫離氧氣支持之延長時間來診斷，但在實踐中，早產兒慢性肺病之臨床終點可包括（但不限於）持續存在的氧依賴、咳嗽及喘鳴症狀、呼吸疾病及住院、對持續氣道壓力之依賴、機械通氣及對呼吸系統藥物之依賴以及肺高血壓（PH）之診斷。在一些實施例中，早產兒慢性肺病（CLD）可持續至成年。在一些實施例中，CLD涉及一系列疾病及病症，包括（但不限於）COPD（肺氣腫及慢性支氣管炎）、哮喘、囊腫性纖維化、限制性肺病及持續性感染。

在一些實施例中，本文所描述之組成物及方法引起CLD之發生率降低。在一些實施例中，本文所描述之組成物及方法用於治療CLD。

在一些態樣中，本文描述用於治療CLD或降低其發生率之方法，其包含向有需要之受試者投與包含重組似胰島素生長因子1（rIGF-1）、重組似胰島素生長因子結合蛋白3（rIGFBP-3）及界面活性劑（例如聚山梨醇酯界面活性劑，例如聚山梨醇酯20）之組成物。

在一些態樣中，本文描述治療CLD或降低其發生率之方法，其包含向有需要之受試者投與組成物，該組成物包含重組似胰島素生長因子1（rIGF-1）、重組似胰島素生長因子結合蛋白3（rIGFBP-3）及濃度在約0.0025%與0.0075%之間（例如0.005%）的聚山梨醇酯界面活性劑，其中rIGF-1及rIGFBP-3以0.75至1.25:1或1:0.75至1.25之範圍複合，例如以等莫耳量複合，且其中rIGF-1/IGFBP-3之濃度為約10微克/毫升至1000微克/毫升（例如50微克/毫升）。在一些態樣中，本文描述治療CLD或降低其發生率之方法，其包含以足以達成相對於對照而言CLD發生率降低的治療量向有需要之受試者投與包含重組似胰島素生長因子1（rIGF-1）、重組似胰島素生長因子結合蛋白3（rIGFBP-3）之組成物。

在一些實施例中，CLD之發生率降低或治療係藉由第1天至12個月校正年齡（CA）內最終脫離呼吸技術支持（RTS）之時間評定（時間範圍：基線至12個月校正年齡（CA））。在此上下文中，RTS定義為以下中之任一者：（1）補充供氧小於（＜）2公升/分鐘（L/min），無正壓（包括鼻插管），（2）正壓支持（包括持續氣道正壓通氣[CPAP]，鼻插管供氧大於（＞）2 L/min），（3）正壓通氣（高頻振盪通氣以及具有正壓潮氣量呼吸之技術，諸如機械通氣、間歇性鼻正壓通氣[NIPPV]）。在一些實施例中，本文所描述之組成物及方法引起與基線對照相比CLD之發生率降低，如藉由最終脫離RTS之時間評定。

在一些實施例中，CLD之發病率降低或治療係藉由糾正胎齡（PMA）36週內支氣管肺發育不良（BPD）或死亡之發生率來評定（時間範圍：基線至36週糾正胎齡（PMA））。BPD可例如藉由修訂版國家兒童健康與人類發展研究所（National Institute of Child Health and Human Development；NICHD）嚴重程度分級來評定，且藉由氧氣挑戰測試標準化。在一些實施例中，，本文所描述之組成物及方法引起與基線對照相比CLD之發生率降低，如藉由糾正胎齡（PMA）36週內支氣管肺發育不良（BPD）或死亡之發生率評定。

在一些實施例中，CLD之發生率降低或治療係藉由自出生起至12個月校正年齡（CA）內依靠呼吸技術支持（RTS）之總天數評定（時間範圍：出生至12個月CA）。在此上下文中，RTS可定義為以下中之任一者：（1）任何吸入氧氣分數（FiO2）大於（＞）百分之二十一（21%）；（2）經由鼻介面遞送之無創呼吸支持（例如，持續氣道正壓通氣[CPAP]、雙水準氣道正壓通氣[BiPAP]、高流量療法、間歇性鼻正壓通氣[NIPPV]、鼻插管）；（3）經由氣管內導管或氣管切開術之有創呼吸支持（機械通氣）。將報告自出生起至12個月CA內依靠RTS之總天數。在一些實施例中，本文所描述之組成物及方法引起與基線對照相比CLD之發生率降低，如藉由自出生起至12個月校正年齡（CA）內依靠呼吸技術支持（RTS）之總天數評定（時間範圍：出生至12個月CA）。

在一些實施例中，CLD之發生率降低或治療係藉由再入院持續時間來評定（時間範圍：新生兒加護病房（NICU）轉出至12個月CA）。在一些實施例中，本文所描述之組成物及方法引起與基線對照相比CLD之發生率降低，如藉由再入院持續時間評定。

在一些實施例中，CLD之發生率降低或治療係藉由急診室就診次數來評定（時間範圍：NICU轉出至12個月CA）。在一些實施例中，本文所描述之組成物及方法引起CLD之發生率降低，如藉由急診室就診次數評定。

在一些實施例中，本文所描述之組成物及方法引起CLD之發生率降低，如藉由呼吸系統藥物使用之天數評定（時間範圍：NICU轉出至12個月CA）。在一些實施例中，本文所描述之組成物及方法引起與基線對照相比CLD之發生率降低，如藉由呼吸系統藥物使用之天數評定。呼吸系統藥物使用可包括例如支氣管擴張劑、類固醇、白三烯抑制劑、利尿劑。

在一些實施例中，CLD之發生率降低或治療係藉由呼吸道疾病之徵象及/或症狀之發生率評定，如藉由在12個月校正年齡（CA）時結束之28天照顧者管理日記評定（時間範圍：11個月CA至12個月CA）。在一些實施例中，本文所描述之組成物及方法引起與基線對照相比CLD之發生率降低，如藉由在12個月校正年齡（CA）時結束之28天照顧者管理日記評定。

在一些實施例中，CLD之發生率降低或治療係藉由12個月校正年齡（CA）內慢性呼吸發病（CRM1）之發生率來評定（時間範圍：NICU轉出至12個月CA）。若受試者經歷/需要以下3種臨床/治療事件中之至少1者，如父母/照顧者所報告且由12個月時間段內至少兩個3個月季度之肺部發病評定所獲取，則將該受試者定義為患有CRM1：1. 與呼吸診斷相關之急診室就診或入院，2. 家庭RTS，3. 每日使用呼吸系統藥物（例如支氣管擴張劑、類固醇、白三烯抑制劑、利尿劑），如照顧者在肺部發病評定中報告。將報告12個月CA內CRM1之發生率。在一些實施例中，本文所描述之組成物及方法引起與基線對照相比CLD之發生率降低，如藉由12個月校正年齡（CA）內慢性呼吸發病（CRM1）之發生率評定。

在一些實施例中，CLD之發生率降低或治療係藉由12個月校正年齡（CA）內包括呼吸道疾病症狀之慢性呼吸發病（CRM2）之發生率來評定（時間範圍：NICU轉出至12個月CA）。若受試者經歷/需要以下4種臨床/治療事件中之至少1者，如父母/照顧者所報告且由12個月時間段內至少兩個3個月季度之肺部發病評定所獲取，則將該受試者定義為患有CRM2：1. 與呼吸診斷相關之急診室就診或入院，2. 家庭RTS，3. 每日使用呼吸系統藥物（例如支氣管擴張劑、類固醇、白三烯抑制劑、利尿劑），如照顧者在肺部發病評定中報告，4. 呼吸道疾病症狀，如定義為出現無感冒咳嗽，或每週至少喘息一次。將報告12個月CA內CRM2之發生率。在一些實施例中，本文所描述之組成物及方法引起與基線對照相比CLD之發生率降低，如藉由12個月校正年齡（CA）內包括呼吸道疾病症狀之慢性呼吸發病（CRM2）之發生率評定。

在一些實施例中，CLD之發生率降低或治療係藉由12個月校正年齡（CA）內慢性呼吸發病之嚴重程度（CRM3）來評定，如藉由嬰兒慢性肺病（CLD）嚴重程度評分所判定（時間範圍：NICU轉出至12個月CA）。此係藉由例如嬰兒CLD嚴重程度評分來判定，該嚴重程度評分將包括諸如呼吸入院、RTS使用及呼吸系統藥物使用之組成部分。在一些實施例中，本文所描述之組成物及方法引起與基線對照相比CLD之發生率降低，如藉由12個月校正年齡（CA）內慢性呼吸發病之嚴重程度（CRM3）評定，如藉由嬰兒慢性肺病（CLD）嚴重程度評分所判定。

在一些實施例中，CLD之發生率降低或治療係藉由糾正胎齡（PMA）40週內如藉由顱超音波所評定的腦室內出血（IVH）之發生率來評定（時間範圍：基線至40週PMA）。在一些實施例中，本文所描述之組成物及方法引起與基線對照相比CLD之發生率降低，如藉由糾正胎齡（PMA）40週內如藉由顱超音波所評定的腦室內出血（IVH）之發生率評定。

在一些實施例中，CLD之發生率降低或治療係藉由糾正胎齡（PMA）約36至40週內如藉由顱超音波所評定的腦室內出血（IVH）之發生率來評定（時間範圍：基線至36至40週PMA）。在一些實施例中，本文所描述之組成物及方法引起與基線對照相比CLD之發生率降低，如藉由糾正胎齡（PMA）36至40週內如藉由顱超音波所評定的腦室內出血（IVH）之發生率評定。

在一些實施例中，CLD之發生率降低或治療係藉由糾正胎齡（PMA）36週內如藉由顱超音波所評定的腦室內出血（IVH）之發生率來評定（時間範圍：基線至36週PMA）。在一些實施例中，本文所描述之組成物及方法引起與基線對照相比CLD之發生率降低，如藉由糾正胎齡（PMA）36週內如藉由顱超音波所評定的腦室內出血（IVH）之發生率評定。

在一些實施例中，CLD之發生率降低或治療係藉由12個月校正年齡（CA）時如藉由Alberta嬰兒運動量表（AIMS）所量測之運動功能來評定（時間範圍：12個月CA時）。AIMS為用於評定有運動發育遲緩風險之嬰兒的早期運動成熟度量測，其著重於運動里程碑之達成及姿勢控制之發展。其由58個項目組成，包括4個姿勢位置評定：俯臥（21個項目）、仰臥（9個項目）、坐立（12個項目）及站立（16個項目）。每個項目按『觀察到』或『未觀察到』評分。評分者辨別出所觀察到的最不成熟及最成熟的項目。在一些實施例中，本文所描述之組成物及方法引起與基線對照相比CLD之發生率降低，如藉由在12個月校正年齡（CA）時如藉由Alberta嬰兒運動量表（AIMS）所量測之運動功能評定。

在一些實施例中，CLD之發生率降低或治療係藉由糾正胎齡（PMA）36週內如藉由早產嬰兒指數（PREMII）所評定之功能狀態來評定（時間範圍：36週PMA時）。PREMII為用於獲取超早產新生兒之整體功能成熟度的臨床醫師報告結果（ClinRO）評定。功能狀態定義為嬰兒在8個關鍵功能領域（進食、體重增加、體溫調節、呼吸支持、呼吸暫停、心搏過緩、去氧飽和事件及氧氣吸入）可以做的事情，作為嬰兒整體健康及發育之反映。在一些實施例中，本文所描述之組成物及方法引起與基線對照相比CLD之發生率降低，如藉由糾正胎齡（PMA）36週時如藉由早產嬰兒指數（PREMII）所評定的功能狀態評定。

在一些實施例中，CLD之發生率降低或治療係藉由死亡之發生率來評定（時間範圍：出生至12個月CA）。在一些實施例中，本文所描述之組成物及方法引起與基線對照相比CLD之發生率降低，如藉由死亡之發生率評定。

在一些實施例中，CLD之發生率降低或治療係藉由似胰島素生長因子-1（IGF-1）之暴露反應來評定（時間範圍：直至12個月CA）。例如使用呼吸終點與神經終點之間的IGF-1之（藥物動力學/藥效學[PK/PD]）關係來評估IGF-1。在一些實施例中，本文所描述之組成物及方法引起CLD之發生率降低，如藉由似胰島素生長因子之暴露反應評定。 腦室內出血

腦室內出血（IVH）為早產嬰兒的危及生命之病況，其特徵為腦室（腦部中含有腦脊髓液之空間）內及周圍出血。腦室內出血最常見於早產嬰兒，尤其是在28週胎齡之前出生的彼等早產嬰兒。

具有呼吸問題，諸如呼吸窘迫症候群（RDS）或其他早產兒併發症的嬰兒更可能患有IVH。

IVH與嚴重併發症相關，包括腦室周圍出血性梗塞、出血後腦室擴張、腦室周圍白質軟化症及小腦出血，導致死亡及發病。其他併發症包括出血後腦積水、腦性麻痹及智力遲鈍，以及長期神經發育障礙。

預防及/或治療IVH之當前標準護理係基於產前類固醇及腦血流動力學之早期管理及穩定以及呼吸支持。預後與出血嚴重程度、腦實質損傷、癲癇發作之存在以及腦室周圍出血性梗塞之嚴重程度有關。IVH治療包含用藥物對症狀進行支持性管理，以減少腦部出血及損傷，且預防癲癇發作。

在一些態樣中，本文描述用於治療或預防IVH之方法，其包含向有需要之受試者投與包含重組似胰島素生長因子1（rIGF-1）、重組似胰島素生長因子結合蛋白3（rIGFBP-3）及界面活性劑（例如聚山梨醇酯界面活性劑，例如聚山梨醇酯20）之組成物。

在一些態樣中，本文描述一種治療或預防腦室內出血（IVH）之方法，其包含向有需要之受試者投與包含重組似胰島素生長因子1（rIGF-1）、重組似胰島素生長因子結合蛋白3（rIGFBP-3）及聚山梨醇酯界面活性劑之組成物，該聚山梨醇酯界面活性劑之濃度在約0.0025%與0.0075%之間，其中rIGF-1及rIGFBP-3以等莫耳量複合，且其中rIGF-1/IGFBP-3之濃度為約10微克/毫升至1000微克/毫升。在一些態樣中，本文描述一種治療或預防腦室內出血（IVH）之方法，其包含以足以達成相對於對照而言腦室內出血發生率降低的治療量向有需要之受試者投與包含重組似胰島素生長因子1（rIGF-1）、重組似胰島素生長因子結合蛋白3（rIGFBP-3）之組成物。

IVH等級限定如下：I級 - 生發基質區域出血，腦室內極少量出血或無出血；II級 - 填充10-50%腦室之出血；III級 - 填充超過50%腦室之出血；IV級（PVHI） - 腦室周圍回聲密度。此出血先前命名為IV級，目前分類為腦室周圍出血性梗塞（PVI）。I級及II級定義為輕度等級，且III級及PVHI定義為高等級。表1展示IVH之顱超音波影像定級。

表 1 ： IVH 之顱超音波影像定級

根據 *Volpe* *方法之* *IVH* 等級
嚴重程度	描述
I級	具有無或極少IVH之GMH（旁矢狀面視圖上＜10%腦室面積）
II級	旁矢狀面視圖上10-50%腦室面積之IVH
III級	旁矢狀面視圖上＞50%腦室面積之IVH；通常使側腦室擴張
IV級	由於腦室周圍白質中之出血性靜脈梗塞惡化的IVH

在一些實施例中，本文所描述之組成物及方法引起II級IVH、III級IVH及IV級IVH或PVHI之發生率降低。在一些實施例中，本文所描述之組成物及方法引起II級IVH之發生率降低。在一些實施例中，本文所描述之組成物及方法引起III級IVH之發生率降低。在一些實施例中，本文所描述之組成物及方法引起PVHI之發生率降低。在一些實施例中，本文所描述之組成物及方法用於治療II級IVH、III級IVH及IV級IVH或PVHI。在一些實施例中，本文所描述之組成物及方法用於治療II級IVH。在一些實施例中，本文所描述之組成物及方法用於治療III級IVH。在一些實施例中，本文所描述之組成物及方法用於治療IV級IVH或PVHI。

在一些實施例中，IVH之發生率藉由顱超音波掃描檢查或超音波評定。在不同時間間隔進行篩查以偵測及評定腦出血，在一些實施例中包含（例如）第0、1、2、3、7、14及21天。在一些實施例中，在32週PMA、33週PMA、34週PMA、35週PMA、36週PMA、37週PMA、38週PMA、39週PMA或40週PMA時進一步進行超音波。在一些實施例中，在36週PMA時進一步進行超音波。在一些實施例中，在40週PMA時進一步進行超音波。在一些實施例中，使用單個閱讀者（對治療不知情）根據Papile及Bowerman方法來評估所有超音波影像之最高GMH-IVH級別。（Papile LA等人, 室管膜下及腦室內出血之發生及演變：有關出生體重小於1,500 gm之嬰兒的研究（Incidence and evolution of subependymal and intraventricular hemorrhage: a study of infants with birth weights less than 1,500 gm）. J. Pediatr.(1978). 92: 529-34；Bowerman RA等人, 新生兒腦室周圍/腦室內出血及其併發症之自然病史：超音波觀測結果（Natural history of neonatal periventricular/intraventricular hemorrhage and its complications: sonographic observations）. AJR Am J. Roentgenol.(1984) 143: 1041-52）。

在一些實施例中，將無IVH及I級IVH分組在一起。在一些實施例中，使用同樣對治療不知情的兩個獨立閱讀者進行事後分析，以評定腦室周圍出血性梗塞（PVHI），且藉由協商一致解決分歧。基於根據Volpe之嚴重強度對IVH進行分級。在一些實施例中，PHI係藉由Dudink方法，藉由評定尾狀靜脈、顳部靜脈、前終靜脈及完全終靜脈梗塞之位置而分級。（Dudink J.等人, 早產兒腦室周圍出血性梗塞之靜脈亞型（Venous subtypes of preterm periventricular haemorrhagic infarction）. 兒童疾病檔案 - 胎兒及新生兒版（ Arch Dis Child Fetal Neonatal Ed. ）(2008) 93:F201-6）。

在一些實施例中，當僅尾狀靜脈或顳部靜脈受影響，或在顱超音波中觀測到少量前終靜脈梗塞時，評定為有限PHI。在一些實施例中，在完全終靜脈梗塞或尾狀靜脈、顳部靜脈及前靜脈梗塞之組合的情況下評定為大範圍PHI。顱超音波影像亦用於偵測出血後腦室擴張（PHVD）及白質損傷（WMI）。（Davies, M.W.等人, 早產新生兒之顱內腦室之線性尺寸的參考範圍（Reference ranges for the linear dimensions of the intracranial ventricles in preterm neonates）. 兒童疾病檔案 - 胎兒及新生兒版, 2000 82:F218-23；Govaert P.等人, 新生兒腦部超音波掃描圖譜（An Atlas of Neonatal Brain Sonography）. 第 2 版 . London: Mac Keith Press, 2010）。在一些實施例中，使用如表2中所示之四級量表來對WMI進行評分。

表 2. 出血後腦室擴張（ PHVD ）及白質損傷之等級

根據 *Davies* *方法之* *PHVD* 等級
嚴重程度	描述
0	正常，前角寬度＜ 3 mm
1	輕度，前角寬度3至＜ 5 mm
2	中度，前角寬度5-10 mm
3	重度，前角寬度＞10 mm
根據 *Govaert* 及 *deVries* *方法之白質損傷*
評分	描述
0	持續腦室周圍高回音或點狀病變，無囊腫，無明顯白質損失（白質損失被確認為無出血之腦室擴張）
1	持續腦室周圍高回音或大量點狀病變，發展為無囊腫之彌漫性白質損失
2	持續腦室周圍高回音，發展為小的局部額頂囊性病變（有限囊性PVL）
3	持續腦室周圍高回音，發展為廣泛囊性病變（廣泛囊性PVL）
*腦損傷嚴重強度評分*
評分	描述
0	無腦部異常
1	GMH，無白質或灰質損失之腦室周圍高回音，及輕度至中度腦損傷
2	IVH II，輕度PHVD，穿支動脈梗死
3	IVH III，無需分流或Rickham裝置之持續中度PHVD，在足月顱超音波時伴隨白質及/或灰質損失之持續腦室周圍高回音
4	有限PHI，有限PVL，需要分流或Rickham裝置之PHVD，前腦動脈梗死，後腦動脈梗死，重度小腦損傷
5	單側廣泛PHI，廣泛囊性PVL，輕度腦動脈梗死，嚴重整體腦部萎縮
6	兩側廣泛PHI

在一些實施例中，IVH係藉由磁共振成像（MRI）進行評定。MRI評估與神經發育結果相關之白質損傷及出血尺寸及位置。

在一些實施例中，基於由單一閱讀者或在一些情況下由多個閱讀者（聯合致盲的閱讀者）觀測之最高IVH級別向每一受試者分派一致的IVH級別。

在一些實施例中，IVH之發生率降低係關於將受試者評定為表現比不存在治療之情況下的IVH級別更低的IVH級別。舉例而言，在一些實施例中，發生率降低係指I級IVH代替治療之前的II級、III級或IV級IVH。在一些實施例中，發生率降低係指II級IVH代替治療之前的III級或IV級IVH。在一些實施例中，發生率降低係指III級IVH代替治療之前的IV級IVH。

在一些實施例中，根據治療組之IVH嚴重強度係根據針對群體中之每一嬰兒所觀測到的最大級別出血來判定。在一些實施例中，IVH之發生率降低係指群體中之IVH發生率降低20-50%。在一些實施例中，IVH之發生率降低係指群體中之IVH發生率降低20%。在一些實施例中，IVH之發生率降低係指群體中之IVH發生率降低30%。在一些實施例中，IVH之發生率降低係指群體中之IVH發生率降低40%。在一些實施例中，IVH之發生率降低係指群體中之IVH發生率降低50%。

在一些實施例中，IVH之發生率降低係指群體中之IV級IVH（或PHVI）發生率降低20-50%。在一些實施例中，IVH之發生率降低係指群體中之IV級IVH（或PHVI）發生率降低20%。在一些實施例中，IVH之發生率降低係指群體中之IV級IVH（或PHVI）發生率降低30%。在一些實施例中，IVH之發生率降低係指群體中之IV級IVH（或PHVI）發生率降低40%。在一些實施例中，IVH之發生率降低係指群體中之IV級IVH（或PHVI）發生率降低50%。

在一些實施例中，IVH之發生率降低係指群體中之III級IVH發生率降低20-50%。%。在一些實施例中，IVH之發生率降低係指群體中之III級IVH發生率降低20%。在一些實施例中，IVH之發生率降低係指群體中之III級IVH發生率降低30%。在一些實施例中，IVH之發生率降低係指群體中之III級IVH發生率降低40%。在一些實施例中，IVH之發生率降低係指群體中之III級IVH發生率降低50%。

在一些實施例中，IVH之發生率降低係指群體中之II級IVH發生率降低20-50%。在一些實施例中，IVH之發生率降低係指群體中之II級IVH發生率降低20%。在一些實施例中，IVH之發生率降低係指群體中之II級IVH發生率降低30%。在一些實施例中，IVH之發生率降低係指群體中之II級IVH發生率降低40%。在一些實施例中，IVH之發生率降低係指群體中之II級IVH發生率降低50%。

在一些實施例中，IVH之發生率降低係指群體中之I級IVH發生率降低20-50%。%。在一些實施例中，IVH之發生率降低係指群體中之I級IVH發生率降低20%。在一些實施例中，IVH之發生率降低係指群體中之I級IVH發生率降低30%。在一些實施例中，IVH之發生率降低係指群體中之I級IVH發生率降低40%。在一些實施例中，IVH之發生率降低係指群體中之I級IVH發生率降低50%。

在一些實施例中，IVH之治療係指部分或完全緩解、改善、減輕、抑制、預防腦室內出血之一或多個症狀或特徵、延遲其發作、降低其嚴重強度及/或降低其發生率之治療組成物（例如IGF-1/IGFBP-3）的投與。在一些實施例中，接受治療之受試者並未表現IVH之徵象及/或僅表現出IVH之早期或輕度徵象。在一些其他實施例中，接受治療之受試者表現IVH之一或多種已確立徵象。因此，在一些實施例中，治療係指預防IVH發作或自輕度形式進展為重度形式。

在一些實施例中，本文所描述之組成物及方法引起IVH之發生率降低。在一些實施例中，本文所描述之組成物及方法用於治療IVH。 支氣管肺發育不良

支氣管肺發育不良（BPD）為影響新生兒之嚴重肺部病況。BPD主要影響早產嬰兒，且為一種呼吸障礙，其中嬰兒的肺部發炎且發育不正常。BPD主要影響需要氧氣療法之早產新生兒，該氧氣療法為經由鼻套管、面罩或呼吸管給與之氧氣。其最常發生在提前超過10週出生或在出生時體重小於2磅的低體重嬰兒中。

由於其首次描述於1967年，因此BPD之定義已演變。原始定義包括需要氧氣持續28天並伴隨相關放射影像變化的嬰兒。隨後BPD之此定義改進為在出生體重＜ 1,500 g之嬰兒中在36週PMA時需要氧氣支持之嬰兒。在2001年，NIH將BPD定義為「針對在胎齡＜ 32週時出生之嬰兒，BPD係指需要氧氣支持（＞21%）持續至少28天以及在36週PMA或出院（看哪個先發生）時之後續評定。在GA ＞32週時出生之嬰兒中，BPD係指需要補充氧氣（＜21%）持續至少28天以及在產後56天或出院（看哪個先發生）時之後續評定」。無氧氣需求之嬰兒被分類為患有輕度BPD。對於需要＜30%氧氣的嬰兒，診斷為中度BPD，且對於需要正壓通氣/持續正壓及/或氧氣需求＞30%的嬰兒，診斷為重度BPD。2003年提出的BPD之「生理學定義」分類為患有「在36週PMA時需要正壓及≥0.3之氧氣」的BPD之嬰兒。相比之下，需要FiO2 ＜0.3之嬰兒需要基於氧飽和度進行長達2週之氧氣減少測試。然而，與生理學定義相比，功能標準更流行，亦即若早產新生兒在其達到糾正胎齡36週時仍需要氧氣療法，則將其診斷為患有BPD。

罹患BPD的嬰兒通常出生時患有呼吸窘迫症候群（RDS）。支氣管肺發育不良通常可與早產嬰兒慢性肺病互換地提及，但BPD實際上為36週時之單一時間點評定，而CLD廣義上係指慢性及長期或持續性肺病，有時出現在先前診斷患有BPD之嬰兒中或尚未接受BPD診斷之嬰兒中。出於實用目的，BPD提供一個相關的容易量測之臨床終點以量測CLD之結果，因為其定義更明確。因此，在一些實施例中，本文所描述之方法引起BPD之發生率降低。在一些實施例中，本文所描述之方法用於治療BPD。在一些實施例中，本文所描述之方法引起無、輕度或較不嚴重BPD。

一些新生兒可能需要來自經鼻持續氣道正壓通氣（NCPAP）機器、呼吸器及如支氣管擴張劑之藥物的長期氧氣或呼吸支持。他們可能因為早產兒慢性肺病而在整個兒童期甚至成年期間持續具有呼吸問題。

在一些實施例中，本文所描述之組成物及方法引起支氣管肺發育不良之發生率降低。在一些實施例中，本文所描述之組成物及方法用於治療支氣管肺發育不良。 肺高血壓

諸如絨膜羊膜炎（CA）及先兆子癇（PE）之產前因素及產後損傷，包括暴露於高水準之氧氣補充，在很大程度上與早產出生之後的支氣管肺發育不良（BPD）及肺高血壓（PH）之風險增加有關。

當新生兒之循環系統無法適應子宮外部之呼吸時，便會出現新生兒之持續肺高血壓。在子宮中時，胎兒經由臍帶接受氧氣，因此肺部需要極少血液供應。此可導致諸如呼吸加快、呼吸困難及/或低氧飽和度之症狀。

在一些實施例中，本文所描述之組成物及方法引起肺高血壓之發生率降低。在一些實施例中，本文所描述之組成物及方法用於治療肺高血壓。 右心室肥大

右心室肥大（RVH）為回應於壓力過載的右心室之肌肉質量之異常增大或病理增大，最常見原因為嚴重肺病。右心室顯著小於左心室，且其產生之電力大部分被較大左心室產生之電力遮擋。

在一些實施例中，本文所描述之組成物及方法引起RVH之發生率降低。在一些實施例中，本文所描述之組成物及方法用於治療RVH。 壞死性小腸結腸炎

壞死性小腸結腸炎（NEC）為一種早產兒共生病症，其亦可能出現在表現早產兒慢性肺病之嬰兒中。壞死性小腸結腸炎主要影響早產嬰兒之腸道。腸道壁被細菌侵入，引起局部感染及發炎，其最終可破壞腸（腸道）壁。

在一些實施例中，本文所描述之組成物及方法引起NEC之發生率降低。在一些實施例中，本文所描述之組成物及方法用於治療NEC。

在另一態樣中，提供一種製造包含似胰島素生長因子1（IGF-1）及似胰島素生長因子結合蛋白3（IGFBP-3）之蛋白質複合物的方法，其中該方法包含在混配該複合物與調配溶液期間使用除不鏽鋼外之接觸表面，諸如一次性袋子，其中在藉由此類方法製造之蛋白質複合物中，在25℃下儲存6個月後，IGF-1之經氧化物質之增加例如少於20%。在一些實施例中，在25℃下儲存6個月後，IGF-1之經氧化物質之增加少於5%。在一些實施例中，在25℃下儲存6個月後，IGF-1之經氧化物質之增加少於2%。在一些實施例中，在40℃下儲存3個月後，IGF-1之經氧化物質之增加例如少於10%。在一些實施例中，在40℃下儲存3個月後，IGF-1之經氧化物質之增加例如少於2%。在一些實施例中，在40℃下儲存6個月後，少於約5-25%（例如少於約10%）的蛋白質複合物以低分子量物質形式存在。在一些實施例中，在40℃下儲存3個月後，少於5-15%（例如少於約10%）的蛋白質複合物以低分子量物質形式存在。在一些實施例中，調配溶液包含濃度在約0.0025 v/v至0.0075 v/v之間（例如0.0025% v/v）的界面活性劑（例如聚山梨醇酯20）。

一次性袋子為包含除不鏽鋼外之惰性接觸表面的拋棄式處理容器。在一些實施例中，一次性袋子由高度純淨的醫療級複合膜製成，其堅固、可撓且具有極佳的氣體阻擋性能，使得其適合於在無菌條件下進行藥品生物加工，減少經氧化物質，改良藥品之效力及穩定性。在一些實施例中，在混配期間使用一次性袋子，其中進行IGF-1/IGFBP-3原料藥於包含賦形劑（氯化鈉、乙酸鈉、乙酸及聚山梨醇酯20）之調配溶液中之混合、摻合及製備以產生IGF-1/IGFBP-3藥品，其中組成物之pH為約5.3至5.8。在一些實施例中，在藥品過濾步驟期間進一步使用一次性袋子。舉例而言，該方法包含在混配步驟及/或過濾步驟期間用蛋白質複合物填充一次性袋子的約20-80%。在一些實施例中，一次性袋子為約或大於500 L。

此外，在一些實施例中，儲存及運輸亦在一次性袋子中進行。在一些實施例中，一次性袋子之厚度範圍在0.1 mm至約0.5 mm之間。在一些實施例中，一次性袋子之厚度範圍在0.25 mm至約0.35 mm之間。

在一些實施例中，一次性袋子包含與流體接觸之超低密度聚乙烯（ULDPE）。在一些實施例中，一次性袋子包含氣體阻擋層，其包含聚乙烯乙烯醇共聚物（EVOH）。在一些實施例中，一次性袋子之外層包含聚乙烯乙酸乙烯酯（EVA）及ULDPE。在一些實施例中，一次性袋子包含與流體表面接觸之聚乙烯乙酸乙烯酯（EVA）。在一些實施例中，氣體阻擋層包含聚乙烯乙烯醇共聚物（EVOH）。在一些實施例中，一次性袋子之外層包含直鏈低密度聚乙烯（LLDPE）。在一些實施例中，提供用於實施本文所描述之方法的套組。在某些實施例中，套組包含組成物，其包含rIGF-1、rIGFBP-3及聚山梨醇酯界面活性劑（諸如聚山梨醇酯20或聚山梨醇酯80）。在一些實施例中，套組在玻璃或其他適合材料之小瓶中含有本文所描述之組成物。

在一些實施例中，亦提供一種製品，其包含包裝材料及包含在包裝材料內之醫藥劑。包裝材料包含標籤，該標籤指示藥品可以有效劑量投與足夠的時期以用於治療及/或預防與早產相關之併發症。醫藥劑包含IGF-I/IGFBP-3組成物以及醫藥學上可接受之載劑。

本發明將藉由以下實例進一步表徵，該等實例意欲作本發明之例示。

在本發明之上下文中，包含意謂「包括」。

在技術上適當時，可組合本發明之實施例，尤其當方法描述組成要素時，可採用此特徵組合來定義組成物本身，且反之亦然。

背景含有技術資訊且可用作修正之基礎。

本文中將實施例描述為包含某些特點/要素。本發明亦擴展至由或主要由該等特徵/要素組成之獨立實施例。

諸如專利及申請案之技術參考文獻以引用之方式併入本文中。

本文中專門及明確引述之任何實施例可單獨或與一或多個其他實施例組合形成免責聲明之基礎。

本申請案主張2020年10月19日申請之美國臨時申請案第63/093,696號之優先權，其以引用之方式併入本文中。此等文獻可用作更正之基礎。

本發明現將參考以下實例進行描述，其僅為說明性的且不應視為限制本發明之範疇。實例儘管已根據某些實施例具體描述本文所描述之某些化合物、組成物及方法，但以下實例僅用於說明本文所描述之化合物且並不意欲限制該等化合物。實例 1. 評定美卡舍明 - 林菲培藥品在存在及不存在 0.005% （ v/v ）聚山梨醇酯 20 （ P20 ）時之使用中穩定性

此實例說明在室溫下在48小時之時間段內，在2期瑞典模式輸注套件中進行之最壞情況投與模擬期間，rhIGF-1/rhIGFBP-3藥品在存在及不存在0.005%聚山梨醇酯20（P20）時之使用中穩定性及/或相容性。

簡言之，用兩種藥品調配物進行評定：不存在聚山梨醇酯20之2期（方法A）藥品調配物（於50 mM乙酸鈉及105 mM氯化鈉中之50 µg/mL美卡舍明-林菲培，pH 5.5）；及由含有0.005%（v/v）聚山梨醇酯20之2期調配物組成的3期（方法B）藥品調配物。

在2期臨床研究期間，輸注套件必須用藥品灌注及沖洗至少一小時，以避免輸注套件發生吸附相關之產品損失，且確保早產新生兒接受250μ微克/公斤/24小時投與劑量之藥品。觀察到，當使用在投與前未用藥品或任何其他溶液進行任何灌注或沖洗之「乾燥」輸注套件時，輸注套件發生吸附相關之產品損失（「最壞情況投與」）。

由於藥品之濃度極低（50 μg/mL）且2期調配物緩衝液不含有防止或減少蛋白質吸附至不同聚合物表面之任何界面活性劑，因此進行一項研究，以研究在藥品中包括0.005% P20對於吸附相關之產品損失及藥品之整體品質屬性（諸如純度、pH、外觀及投與期間之效力）的作用。

用作此研究之模型的實驗輸注套件先前用於2期研究中之Karolinska, Sweden中。將呈含有及不含有P20之調配物形式的大約19 mL藥品放入20 mL注射器中，且每一輸注套件都標註有適當的調配物；選擇注射器中之藥品體積以實現測試要求。隨後將注射器連接至已組裝之（乾燥）輸注套件（圖1）。立即自輸注套件施配約3 mL藥品且收集在乾淨的玻璃小瓶中；此樣品充當未在輸注套件中停留較長時間之基線藥品。

對於每種藥品（含或不含P20），準備兩個獨立的輸注套件。準備兩個對照輸注套件以充當緩衝液背景，其用於蛋白質濃度校正。由於藥品的蛋白質濃度低以及使用可變路徑長度技術來進行蛋白質濃度測定，因此必須克服可能來自瀝濾之吸附干擾。為此，產生用於研究之對應緩衝液對照，且與藥品完全一樣地進行處理；將緩衝液放入注射器中，且在輸注套件中保持0、1、4、8、24及48小時。隨後使用緩衝液對照來校正造成背景之未知光吸收物質的蛋白質濃度。

資料表明，在48小時內在模型輸注套件中投與期間，添加0.005%（v/v）P20減少吸附相關之產品損失並且改良藥品之其他品質屬性（例如效力），且在藥品投與之前無需灌注及沖洗輸注套件。

研究結果表明，在藥品調配物緩衝液中包括0.005% P20之後，當在室溫下在暴露於環境光線及溫度的情況下儲存時，3期調配物中之藥品之品質在輸注套件中維持長達48小時。

在收集注射器暴露之藥品基線樣品之後，將藥品在暴露於環境光線及溫度的情況下保持在輸注套件中，且在1、4、8、24及48小時進行取樣（表3）。在取樣之後立即以目視觀察樣品。將樣品冷藏直至準備好在48小時研究結束時進行pH、蛋白質濃度（A276 nm）、RP-UPLC及SE-HPLC測試。亦使用低通量細胞增殖能力分析來選擇性地測試樣品之效力（在基線及48小時時）。準備額外的藥品小瓶，且放在一旁充當所有分析之非注射器暴露之藥品對照（基線）。

表3. 在P20不存在及存在下測試的藥品之性質。

取樣時間（小時）	不含 P20 之藥品調配物	含 P20 之藥品調配物
目視觀察	pH	濃度 Solo VPE	RP-UPLC	SE-HPLC	目視觀察	pH	濃度 Solo VPE	RP -UPLC	SE-HPLC
注射器暴露之基線對照	+	+	+	+	+	+	+	+	+	+
1	+	+	+	+	+	+	+	+	+	+
4	+	+	+	+	+	+	+	+	+	+
8	+	+	+	+	+	+	+	+	+	+
24	+	+	+	+	+	+	+	+	+	+
48	+	+	+	+	+	+	+	+	+	+

在各時間點目視觀察藥品及兩種調配物（含及不含P20）之調配物緩衝液對照。藥品及調配物樣品未展現關於存在微粒或纖維之趨勢。在研究期間在任何時間均未觀測到藥品調配物（含及不含P20）之pH變化。

在緩衝液校正之前及之後，在48小時研究內量測藥品之蛋白質濃度（圖2）。在蛋白質濃度量測期間，觀測到較晚時間點處之濃度增加，其歸因於干擾蛋白質濃度量測之潛在未知物質。因此，亦產生含有及不含有P20之調配物對照以校正未知物質之蛋白質濃度。

資料顯示，當調配物中存在P20時，觀測到的吸附相關蛋白質損失較少。舉例而言，在4小時之初始輸注時間段內，且在未知光吸收物質之蛋白質含量校正之後，含有P20之調配物中之藥品觀測到比不含P20之調配物中之藥品少3倍的蛋白質損失。即使在緩衝液校正之後，在48小時時間點之蛋白質濃度之增加係歸因於由瀝濾導致之背景。

總體而言，結果表明，P20之添加可避免在室溫下在48小時內在模型輸注套件中之吸附相關產品損失。當首先將藥品暴露於「乾燥」輸注套件長達4小時時，觀察到改良。在藥品調配物中包括0.005%聚山梨醇酯20之後，不需要在藥品投與之前灌注及沖洗輸注套件。

評定兩個例示性串聯過濾器之串聯過濾器相容性。測試用於約1 kg新生兒之約5.5 mL平均劑量。

表4. 串聯過濾之前及之後的蛋白質含量評定

過濾器	藥品	蛋白質濃度（微克/毫升）
		過濾之前	過濾之後
MX1480過濾器組件	藥品	48.1	32.1
含0.005%（v/v）聚山梨醇酯20之藥品	48.6	45.5
新生兒/兒科0.22微米，96小時IV過濾器	藥品	46.6 ± 1.1	31.5 ± 0.6
含0.005%（v/v）聚山梨醇酯20之藥品	50.8 ± 0.8	53.8 ± 0.4

在不存在聚山梨醇酯20的情況下，在例示性串聯過濾器之兩個實例中觀測到藥品顯著損失。

在P20不存在下觀測到之蛋白質含量損失為不合需要的，因為無法在新生兒中增加劑量體積以遞送較高有效劑量，因為新生兒每天之流體攝入有限。實例 2. 藉由 SE-HPLC 及 RP-UPLC 量測在存在及不存在 0.005% （ v/v ）聚山梨醇酯 20 （ P20 ）的情況下調配物中之美卡舍明 - 林菲培藥品之純度

此實例說明在0.005%（v/v）聚山梨醇酯20（P20）存在及不存在下調配物中藥品之純度。

為了比較在0.005%（v/v）聚山梨醇酯20（P20）存在及不存在下藥品之純度，進行尺寸排阻高效液相層析（SE-HPLC）分析。該分析之特徵在於最佳特徵曲線及信號偵測之管柱負載之最佳化。

表5. 在環境溫度下在不具有聚山梨醇酯20之情況下輸注套件中之藥品的穩定性概述 ¹

分析	*提出之目標準則*		基線 ²	*注射器暴露之基線*	1 小時	4 小時	8 小時	24 小時	48 小時
*外觀及描述*
外觀	透明至略帶乳白色，無色至略帶顏色，基本無顆粒。	測試	符合	透明，無色，小纖維及大纖維 ³	符合	透明，無色，1個小的白色片狀物	透明，無色，具有1個短纖維	符合	透明，無色，具有一些小纖維
緩衝液	NA	透明，無色，小纖維及大纖維	透明，無色，小纖維及1個大纖維	NT	NT	NT	透明，無色，具有1個小纖維
*純度及雜質*
尺寸排阻HPLC	≥92%主峰面積	93.9%	94.4%	94.5%	94.8%	94.6%	94.9%	95.3%
≤8%高分子量峰面積 ⁴	4.1%	3.8%	3.8%	3.7%	3.7%	3.7%	3.1%
RP-UPLC	≥95%主峰面積	97.3%	97.3%	97.0%	96.1%	96.0%	95.3%	95.6%
經氧化rhIGF1峰面積之報告結果	2.1%	2.1%	2.3%	3.2%	3.2%	3.4%	3.5%
效力
細胞增殖分析	50%至150%相對效力	76%	NT	57%
含量
蛋白質濃度	45至55 µg/ml	43 ⁵	32	38	38	NT	39	48
*一般情況*
pH	5.5±0.3	5.5	5.5	5.5	5.5	5.5	5.5	5.5
NT：未測試 NA：不適用 1. 除了外觀及濃度之所選時間點外，展示兩個輸注套件之平均資料。 2. 基線樣品為小瓶中之藥品（n=1）。 3. 當在2個小瓶中之至少1個中觀測到顆粒時，針對最壞情況報告資料。儘管對接收小瓶進行了洗滌及去熱源，但在接收小瓶（3 ml）中進行的純化水之對照研究表明在水的情況下觀測到小纖維及大纖維。針對時間點4至48小時，將接收小瓶變更為乾淨的5 ml接收小瓶。 4. 高分子量物質為SE-HPLC特徵曲線中之峰4、5及6之總和。報告值為來自兩個獨立使用中研究之資料的平均值。 5. 在緩衝液校正之後報告濃度值：無緩衝液校正之值為47 µg/ml。

表6. 在環境溫度下在具有聚山梨醇酯20之情況下輸注套件中之藥品的穩定性概述 ¹

分析	*提出之目標準則*		基線 ²	*注射器暴露之基線* ¹	1 小時	4 小時	8 小時	24 小時	48 小時
*外觀及描述*
外觀	透明至略帶乳白色，無色至略帶顏色，基本無顆粒。	測試組	符合	透明，無色，小纖維及大纖維 ³	透明，無色，小纖維及大纖維 ³	透明，無色，1至2個小纖維	透明，無色，1個長纖維	符合	透明，無色，小纖維及大纖維
緩衝液組	NA	透明，無色，1個小纖維及1個大纖維 ⁴	透明，無色，1個大纖維 ³	透明，無色，1個小纖維，1個小薄片	透明，無色，大纖維、中等纖維及小纖維 ⁴	透明，無色，1個長纖維，1個短纖維	符合
*純度及雜質*
尺寸排阻HPLC	≥92%主峰面積	95%	94.6%	93.8%	94.4%	94.6%	94.7%	95.3%
≤8%高分子量峰面積 ⁵	3.7%	3.7%	3.8%	3.6%	3.5%	3.5%	3.1%
RP-UPLC	≥95%主峰面積	98%	97.7%	97.5%	97.1%	96.3%	95.8%	95.6%
經氧化rhIGF1峰面積之報告結果	1.7%	1.7%	1.9%	2.3%	2.9%	3.4%	3.5%
效力
細胞增殖分析	50至150%相對效力		90%	未測試	83%
*外觀及描述*
蛋白質濃度	45至55 µg/ml	49	45	45	47	45	41	49
*一般情況*
pH	5.5±0.3	5.5	5.5	5.5	5.5	5.5	5.5	5.5
NA：不適用 NT：未測試 1. 除了外觀及濃度之所選時間點外，展示兩個輸注套件之平均資料。 2. 基線樣品為小瓶中之藥品（n=1）。 3. 當在2個小瓶中之至少1個中觀測到顆粒時，針對最壞情況報告資料。儘管對接收小瓶進行了洗滌及去熱源，但在接收小瓶（3 ml）中進行的純化水之對照研究表明在水的情況下觀測到小纖維及大纖維。針對時間點4至48小時，將接收小瓶變更為乾淨的5 ml接收小瓶。 4. 設置單獨的輸注步驟，以觀察在原始研究之後4天含有P20之調配物緩衝液之外觀。 5. 高分子量物質為SE-HPLC特徵曲線中之峰4、5及6之總和。報告值為來自兩個獨立使用中研究之資料的平均值。

資料顯示在P20的情況下觀測到更少吸附相關蛋白質損失。SE-HPLC資料表明在輸注套件中保持長達48小時之調配物中之藥品的純度類似（複合物峰面積百分比）（表5及6）。觀測到三種高分子量（HMW）物質，將其相加以報告在P20不存在下（圖3A）及P20存在下（圖3B）調配物中HMW物質之定性值。HMW為不合需要的，因為其導致產品穩定性降低、聚集增加及免疫原性增加。實例 3. 藉由 RP-UPLC 量測在存在及不存在 0.005% （ v/v ）聚山梨醇酯 20 （ P20 ）的情況下調配物中之美卡舍明 - 林菲培藥品之降解

此實例說明氧化對美卡舍明-林菲培之例示性降解。

為了研究美卡舍明-林菲培之降解程度，進行逆相超高效層析（RP-UPLC）以監測IGF-1/IGF1-BP3蛋白質複合物中之IGF1之氧化。

RP-UPLC資料表明，在兩種調配物中，在輸注套件中保持48小時時間之後的經氧化IGF1百分比與基線相比增加較少（圖4）。

此分析亦單獨監測IGF-1及IGFBP-3蛋白質之峰面積百分比；IGF-1氧化之增加與IGF-1峰面積百分比之減少一致，而IGFBP-3百分比無顯著變化。未含P20之調配物之IGFBP-3的減少百分比為大約0.6%，與之相比，當調配物中存在P20時減少百分比為0.1%。表5及6報告經氧化IGF-1百分比以及IGF-1及IGFBP-3峰面積之總和；後者報告為主峰面積百分比。實例 4. 量測在存在及不存在 0.005% （ v/v ）聚山梨醇酯 20 （ P20 ）的情況下調配物中之美卡舍明 - 林菲培藥品之效力

此實例說明美卡舍明-林菲培調配物中0.005%（v/v）聚山梨醇酯20（P20）之存在對藥品之效力的例示性影響。

為了研究調配物中存在或不存在0.005%（v/v）聚山梨醇酯20（P20）對美卡舍明-林菲培藥品之影響，在基線及48小時保持時間，測試在含有0.005%（v/v）P20或不存在0.005% P20之調配物中所選樣品之效力。

在未用藥品灌注及沖洗輸注套件之最差情境中，當調配物緩衝液不含P20時，效力降低25%，與之相比，當存在聚山梨醇酯20時，效力僅降低8%（表7）。儘管兩個值可視為在典型基於細胞之分析變化（70%至130%）範圍內，但當藥品調配物中不存在聚山梨醇酯20時觀測到低大約3倍的效力。

表7. 48小時保持時間之後含有及不含有聚山梨醇酯20之調配物中藥品之相對效力百分比

藥品樣品	相對效力百分比 ¹
無聚山梨醇酯 20	有聚山梨醇酯 20
基線	76%	90%
48小時保持時間之後的藥品樣品	57%	83%

1相對效力表示為原料藥示範運行之百分比

添加聚山梨醇酯20改良產品之整體品質，因為在藥品中存在聚山梨醇酯20的情況下觀測到較高效力。

總體而言，此等研究之結果表明，當在室溫下在暴露於環境光線及溫度的情況下儲存時，3期藥品之品質在輸注套件中維持長達48小時。實例 5. 存在及不存在 0.005% （ v/v ）聚山梨醇酯 20 （ P20 ）或聚山梨醇酯 80 （ P80 ）的情況下調配物中之美卡舍明 - 林菲培藥品

在此實例中，比較美卡舍明-林菲培藥品之調配物中聚山梨醇酯20及聚山梨醇酯80暴露之安全性及毒性。

使用聚山梨醇酯20及80之非臨床資料，推導出早產新生兒之IV允許暴露值為0.02毫克/公斤體重/天，且足月嬰兒及未滿1歲之兒童的IV允許暴露值為0.08毫克/公斤體重/天（表8）。

表8. 來自rhIGF-1/rhIGFBP-3藥品及其他來源之聚山梨醇酯20暴露量概述

患者體重	來自rhIGF-1/rhIGFBP-3之每日P20暴露量	來自TPN之每日P20暴露量	來自rhIGF-1/rhIGFBP-3及TPN之每日P20暴露量	來自TPN之每日P80暴露量	來自TPN之每日總P20+P80暴露量	無E-Ferol毒性跡象之每日P20暴露量	無E-Ferol毒性跡象之每日P80暴露量
0.4 kg	0.11 mg	0.24 mg	0.36 mg	15 mg	15.24 mg	3.2 mg	28.8 mg
1.7 kg	0.47 mg	0.52 mg	0.99 mg	32.5 mg	33.02 mg	13.6 mg	122.4 mg

TPN = 總非經腸營養

基於此等比較，相對於患者已自總非經腸營養產品接受的聚山梨醇酯20及聚山梨醇酯80之量，不存在與患者將自rhIGF-1/rhIGFBP-3藥品接受之輕微額外量聚山梨醇酯20相關之毒理學問題。實例 6. 在一次性袋子中製造美卡舍明 - 林菲培

此實例展現接觸材料在IGF-1/IGFBP-3之氧化百分比及穩定性方面的作用。

分析使用不鏽鋼容器或一次性袋子製造之藥品之氧化。簡言之，將賦形劑（氯化鈉、乙酸鈉、乙酸及聚山梨醇酯20）混合。隨後將賦形劑過濾且與解凍原料藥混合，該解凍原料藥與藥品IGF-1/IGFBP-3複合物混配。將與緩衝液混配之散裝藥品放入1000L不鏽鋼容器或500L一次性袋子（包括磁性攪拌器之Mobius MIX0500L袋子Gold）中，且經由過濾器（Opticap XL10 0.22 μm，Durapore PVDF膜）將其過濾至接收不鏽鋼容器或袋子（包括磁性攪拌器）中。在發佈時及儲存期間，藉由RP-UPLC分析兩批藥品之經氧化IGF-1百分比。

圖 5展示在小規模模型中，在不鏽鋼中，隨時間及藥品濃度變化的經氧化IGF-1之百分比。觀測到，在所有濃度中，與不鏽鋼無任何接觸之藥品不易發生IGF-1氧化。

藉由在玻璃容器中混配藥品來重複類似實驗，且與在一次性袋子中混配之藥品相比。圖 6概述隨時間以及一次性袋子及玻璃容器之液面上空間變化的經氧化IGF-1百分比。觀測到在一次性袋子中混配之藥物產生最低氧化，接著為在具有20%填充之玻璃中混配之調配物。接著，藉由在不同溫度下繪製隨時間變化之主峰（未氧化IGF-1）百分比來測試IGF-1之穩定性。觀測到與不鏽鋼容器產生之藥品相比，一次性袋子產生之藥品在所有測試溫度下均保持IGF-1之穩定性。穩定性（繪製為主峰百分比）展示於圖 7A 至圖 7C中。另外，繪製隨時間變化的經氧化IGF-1百分比。觀測到，與不鏽鋼容器產生的藥品相比，一次性袋子產生的藥品在所有測試溫度下具有較低經氧化IGF-1百分比。繪製為時間之函數的經氧化IGF-1百分比展示於圖 8A 至圖 8C中。實例 7. 治療超早產嬰兒之 CLD

研究包含似胰島素生長因子-1/似胰島素生長因子結合蛋白-3（rhIGF-1/rhIGFBP-3）複合物之研究性藥物在CLD中之治療作用。所使用藥品調配物為含有0.005%（v/v）聚山梨醇酯20的pH 5.5的於50 mM乙酸鈉及105 mM氯化鈉中之50 µg/mL美卡舍明-林菲培。

其經設計為多中心、隨機分組、開放標記、受控制的3組研究，以評估治療組成物在預防人類早產兒慢性肺病中之臨床功效及安全性。對受試者進行此研究直至12個月校正年齡（CA），與超早產嬰兒中之標準新生兒護理進行比較。本研究由負責機構之機構審查委員會（IRB）/獨立倫理委員會（IEC）審查及核准。

目的：此研究之目的為確定與僅接受標準新生兒護理之超早產嬰兒相比，包含rhIGF-1/rhIGFBP-3之研究性藥物（之後稱為治療組成物）是否可減少12個月校正年齡（CA）內超早產嬰兒的呼吸併發症。

研究受試者：受試者之胎齡（GA）在23週+0天與27週+6天之間。受試者包括兩種性別。研究中包括至少五十個受試者。

排除準則：根據研究者意見，排除準則包括可偵測之嚴重畸形、已知或疑似染色體異常、遺傳病症或症候群。排除準則亦包括在基線就診時持續血糖水準低於（＜）2.5毫莫耳/公升(mmol/L)以排除嚴重的先天性葡萄糖代謝異常；根據研究者意見之臨床顯著神經疾病；單合子多倍；及可能對受試者造成風險或干擾受試者遵從方案之能力或干擾結果解釋之任何其他病況。若受試者正參與或計劃參與另一研究性研究藥物、裝置或程序之臨床研究，則排除（根據具體情況允許參與觀察性研究）。若受試者或受試者的家長或法定代理人無法遵從方案，或不太可能依據研究者之判定進行長期隨訪，則該受試者亦將予以排除。

研究設計之細節：本研究之主要目的為預防支氣管肺發育不良及早產兒慢性肺病。其為開放標記研究，且干預模型將為並行分配。所監測病況將為BPD及CLD。

自出生起直至糾正胎齡（PMA）29週+6天期間，藉由靜脈內投與（IV）向一組參與者（A組）投與250微克/公斤/24小時之治療組成物。自出生起直至糾正胎齡（PMA）29週+6天期間，藉由靜脈內投與（IV）向另一組參與者（B組）投與400微克/公斤/24小時之治療組成物。向第三組（C組或對照組）僅提供標準新生兒護理。

量測之主要結果為12個月校正年齡（CA）內早產兒慢性肺病（CLD）之發生率[時間範圍：基線至12個月校正年齡（CA）]。CLD為早產出生之常見不良結果，其尤其在一歲期間導致需要用肺部藥物（諸如支氣管擴張劑）治療的復發性呼吸症狀、需要家庭氧氣補充、頻繁的急診室就診或再次入院。將藉由呼吸健康護理利用及呼吸症狀來量測CLD。

次要結果包括在糾正胎齡（PMA）36週時支氣管肺發育不良（BPD）之發生率[時間範圍：PMA 36週]。BPD係一種慢性肺病，其特徵為肺發育未成熟、存在透明膜及肺不張之未分化肺泡、浸沒於間質中之擴張毛細管以及細胞外基質之畸變沈積。BPD會對肺部功能造成殘餘影響，且與兒童後期的神經發育問題有關。

次要結果亦包括 ●糾正胎齡（PMA）40週內III級或IV級重度腦室內出血（IVH）之發生率[時間範圍：基線至PMA 40週] ●糾正胎齡（PMA）40週內支氣管肺發育不良（BPD）之發生率[時間範圍：PMA 40週] ●6個月校正年齡（CA）內慢性肺病（CLD）或死亡之發生率[時間範圍：基線至6個月校正年齡（CA）]。CLD為早產出生之常見不良結果，其尤其在一歲期間導致需要用肺部藥物（諸如支氣管擴張劑）治療的復發性呼吸症狀、需要家庭氧氣補充、頻繁的急診室就診或再次入院。將藉由呼吸健康護理利用及呼吸症狀來量測CLD。 ●糾正胎齡（PMA）40週內如藉由早產嬰兒指數（PREMII）評定的功能狀態[時間範圍：PMA 36週]。PREMII為用於獲取超早產新生兒之整體功能成熟度的臨床醫師報告結果（ClinRO）評定。功能狀態定義為嬰兒在8個關鍵功能領域（進食、體重增加、體溫調節、呼吸支持、呼吸暫停、心搏過緩、去氧飽和事件及氧氣投與）可以做的事情，作為嬰兒整體健康及發育之反映。實例 8. 超早產低胎齡嬰兒中之腦室內出血（ IVH ）治療

研究包含似胰島素生長因子-1/似胰島素生長因子結合蛋白-3（rhIGF-1/rhIGFBP-3）複合物之研究性藥物（包含0.005%（v/v）聚山梨醇酯20的pH 5.5的於50 mM乙酸鈉及105 mM氯化鈉中之50 µg/mL美卡舍明-林菲培）在腦室內出血（IVH）中的治療作用。其經設計為多中心、隨機分組、開放標記、受控制的三組研究，以評估治療組成物在預防腦室內出血中之臨床功效及安全性。對受試者進行此研究直至36週PMA，與胎齡＜26週之超早產嬰兒中之標準新生兒護理（SNC）進行比較。本研究由負責機構之機構審查委員會（IRB）/獨立倫理委員會（IEC）審查及核准。

目的：此研究之目的為確定與僅接受標準新生兒護理之超早產嬰兒相比，包含rhIGF-1/rhIGFBP-3之研究性藥物（之後稱為治療組成物）是否可降低36週PMA內超早產嬰兒之腦室內出血之發生率。

研究受試者：受試者為胎齡（GA）小於26週或＜ 25週+6天之嬰兒。受試者包括兩種性別。研究中包括至少五十個受試者。

研究設計：自出生起直至糾正胎齡（PMA）29週+6天期間，藉由靜脈內投與（IV）向一組參與者（A組）投與250微克/公斤/24小時之治療組成物。自出生起直至糾正胎齡（PMA）29週+6天期間，藉由靜脈內投與（IV）向另一組參與者（B組）投與400微克/公斤/24小時之治療組成物。向第三組（C組或對照組）僅提供標準新生兒護理。

在IVH發生率較高之較低胎齡嬰兒中，評定IVH II/III/PHVI之發生率。

量測之主要結果為糾正胎齡（PMA）36週時腦室內出血之發生率及嚴重強度[時間範圍：PMA 36週]。IVH為早產出生之常見不良結果且將藉由顱超音波進行監測。

次要結果包括在糾正胎齡（PMA）36週時支氣管肺發育不良（BPD）之嚴重強度及發生率[時間範圍：PMA 36週]。BPD係一種慢性肺病，其組織學特徵為肺發育未成熟、存在透明膜及肺不張之未分化肺泡、浸沒於間質中之擴張毛細管以及細胞外基質之畸變沈積。BPD會對肺部功能造成殘餘影響，且與兒童後期的神經發育障礙有關。

將在36週PMA時對＜26週GA之嬰兒進行功效分析。評定II級IVH/III級IVH/IV級IVH（PHVI）之相對減少。在一些實施例中，受試者被隨訪至約40週、12個月或24個月CA。實例 9. 超早產嬰兒之 BPD 預防

用並行分配之干預模型進行針對IGF-1/IGFBP-3在超早產兒併發症中之作用的隨機研究。本研究在2010年6月18日至2016年3月30日之間在意大利、荷蘭、波蘭、瑞典、英國及美國之多個中心中進行。

當認為受試者之內源性IGF-1產生足以維持生理血清IGF-1水準時，自研究第0天（出生當天）直至（且包括）PMA 29週+6天期間在受試者中以連續靜脈內輸注形式投與藥物美卡舍明-林菲培，亦即IGF-1/IGFBP-3。在停止研究藥物輸注之後，將對每一受試者隨訪至PMA 40週±4天。該研究旨在確定在早產嬰兒中建立並維持生理水準內之縱向血清IGF-1水準以預防早產兒視網膜病變所需的以連續輸注（CI）形式投與的rhIGF-1/rhIGFBP-3劑量。此為rhIGF-1/rhIGFBP-3之2期、隨機分組、受控制、評估者盲、劑量確定、藥物動力學、安全性及功效。61個參與者在第0天直至糾正胎齡（PMA）29週6天期間經由連續靜脈內（IV）輸注持續24小時接受250微克/公斤（mcg/kg）之似胰島素生長因子（rhIGF-I）/似胰島素生長因子結合蛋白-3（rhIGFBP-3）。作為對照組，60個參與者僅接受標準護理。表3說明整體研究之參與者流程。表 9 參與者流程：整體研究

	rhIGF-1/rhIGFBP-3	標準護理（對照）
開始	61	60
完成	46	46
未完成	15	14
受試者退出	2	1
不良事件	11	9
方案偏離	2	2
管理決策	0	1
其他未指明	0	1

表 10 說明研究中之群體。

	rhIGF-1/rhIGFBP-3	標準護理（對照）	總計
分析之整體參與者 [單位：參與者]	61	60	121
年齡 [單位：週] 平均值（標準差）	25.60（1.207）	25.62（1.397）	25.61（1.300）
性別：女性，男性 [單位：參與者] 參與者計數
女性	22 36.1%	21 35.0%	43 35.5%
男性	39 63.9%	39 65.0%	78 64.5%

次要結果包括在其他參數中： ●自新生兒加護病房轉出之時間（TDNIC）[時間範圍：第0天至糾正胎齡40週（EOS）] ●患上支氣管肺發育不良（BPD）之參與者數目[時間範圍：糾正胎齡36週時] ●如輕度、中度及重度之BPD嚴重強度係基於針對在胎齡（GA）小於（＜）32週時出生之早產嬰兒的國家兒童健康與人類發展研究所（NICHD）準則。 ●輕度：前28天需要氧氣，但在PMA 36週或出院回家（看哪個先發生）時呼吸室內空氣。 ●中度BPD：前28天需要氧氣，且PMA 36週或出院回家（看哪個先發生）時氧氣＜百分之三十（30%）。 ●重度BPD：前28天需要氧氣，且在PMA 36週或出院回家（看哪個先發生）時經由頭罩或鼻插管之氧氣大於等於（≥）30%、或持續氣道正壓通氣、或機械通氣、或高流量鼻插管≥2 L/min。 ●體重變化速率[時間範圍：第0天至糾正胎齡40週（EOS）]。變化速率為特定體重每天變化之速率，以公斤（kg）為單位。 ●體長變化速率[時間範圍：第0天至糾正胎齡40週（EOS）] ●變化速率為每天之體長變化，以公分（cm）為單位。具有治療中出現的不良事件（TEAE）及治療中出現的嚴重不良事件（TESAE）的參與者數目[時間範圍：第0天至糾正胎齡40週（EOS）] ●不良事件（AE）為接受研究藥物之參與者中之任何不良醫療發生，而不考慮因果關係之可能性。嚴重不良事件（SAE）為導致以下結果中之任一者或出於任何其他原因認為顯著的AE：死亡；初次或長期住院治療；危及生命的經歷（直接死亡風險）；持續或顯著的殘疾/失能；先天性異常。 ●治療中出現的不良事件被定義為在研究產品之第一次給藥日期當天或之後的任何時間任何AE之發作或先前已存在的AE之嚴重強度惡化。 ●在輸注rhIGF-1/rhIGFBP-3之後血清IGF-1濃度落入目標範圍內的百分比[時間範圍：第0天至糾正胎齡40週（EOS）] ●自經治療之參與者及對照參與者收集血清樣品以使用經驗證之免疫分析來定量IGF-1。血清IGF-1之目標範圍為28至109 mcg/L。報告經治療參與者中血清IGF-1水準落入該範圍內的百分比。 ●靜脈內（IV）輸注rhIGF-1/rhIGFBP-3之後IGFBP-3之血清濃度[時間範圍：第0天及糾正胎齡40週] ●靜脈內（IV）輸注rhIGF-1/rhIGFBP-3之後酸不穩定亞單位（ALS）之血清濃度[時間範圍：第7天及糾正胎齡40週] 表 11 說明作為次要結果的 BPD 之量測值。

	rhIGF-1/rhIGFBP-3	標準護理（對照）
分析之參與者[單位：參與者]	47	49
患上支氣管肺發育不良（BPD）之參與者數目 [單位：參與者]
無BPD	4	4
輕度	23	16
中度	9	5
重度	10	22
無法判定	1	2

未提供患有支氣管肺發育不良（BPD）之參與者數目之統計分析。實例 10. 在早產嬰兒中投與 IGF-1 及 IGFBP-3 之後 IGF-1 之暴露反應分析

此實例說明用IGF-1/IGFBP-3治療之超早產嬰兒之血清中的IGF-1暴露反應。

簡言之，向早產嬰兒投與IGF-1及似胰島素生長因子結合蛋白-3（rhIGF-1/rhIGFBP-3）之天然存在蛋白質複合物之人類重組形式。

每日以靜脈內輸注形式向約96名早產嬰兒投與rhIGF-1/rhIGFBP-3，在出生24小時內開始，且在糾正胎齡（PMA）30週時結束。對照受試者接受標準新生兒護理（SOC）。BPD之出現藉由在PMA 36週時進行氧氣挑戰測試來評定。

出生時之胎齡中位數為25.9週（且範圍為23.1至27.9週）。出生體重中位數為0.790（範圍為0.425至1.22）。構建邏輯回歸模型以評定IGF-1暴露度量值與出現BPD之機率（亦即無/輕度BPD與中度/重度BPD）之間的關係。評定及考慮BPD反應之變化來源，諸如胎齡、出生體重、性別、第1天之氧飽和度、1分鐘時之APGAR評分及研究組。

隨後進行臨床試驗模擬，以確定將產生與BPD預防或改善相關之血清IGF-1水準的給藥方案，亦即相對於標準護理，在接受治療之早產嬰兒中提供高機率的無/輕度BPD症狀。基於群體PK模型，模擬以1:1:1比率用250及400微克/公斤/天之rhIGF-1/rhIGFBP-3或無劑量（SOC）治療之75個受試者之總共500次試驗。

來自此等模擬之結果顯示，在第7天觀測到的平均IGF-1水準（CavD7）較高與更大機率的無/輕度BPD相關，顯示出統計顯著的暴露反應關係。無/輕度或中度/重度BPD之機率在各試驗中根據上述暴露反應模型基於模擬CavD7確定。

此外，亦觀測到其他變數之影響。舉例而言，觀測到出生體重及性別之統計顯著影響，由此預期更重的女性有更高的機率出現無/輕度BPD。出生時之氧飽和度及1分鐘時之APGAR評分均不是無/輕度BPD之預測因子。

來自模擬之結果顯示，相對於用於治療CLD之標準護理，用rhIGF-1/rhIGFBP-3治療進行治療使得不出現BPD或出現輕度BPD之機率更高（圖9，表12）。在圖11處可看到用250及400微克/公斤/天之rhIGF-1/rhIGFBP-3或無劑量（SOC）治療之受試者之間的比較。

基於早產嬰兒之IGF-1的濃度-時間資料，評估輸注（或外源性）IGF-1之藥物動力學特徵。總體而言，具有線性消除之一室配置模型與考慮體重隨時間變化之基線模型結合，其分別充分表徵輸注及內源性IGF-1之濃度-時間特徵曲線。另外，該模型亦包括關於分佈體積及清除率之受試者間差異（BSV），以及關於內源性模型（出生時之IGF-1濃度（C _endo,0）及在較成熟嬰兒中關於IGF-1初始減退半衰期（C _{endo, mat}））之BSV。由於年齡及體重為內源性IGF-1產生以及在IV輸注rhIGF-1/rhIGFBP-3之後IGF-1之清除率的重要組分，建立成熟模型以表徵隨早產嬰兒之PMA變化的體重增加。如相對於接受標準護理之對照受試者或未經治療之對照，投與250微克/公斤/天之rIGF-1/rIGFBP-3或更低劑量的受試者隨時間推移之IGF-1濃度曲線所展示來驗證該模型（圖10）。

表12. 在75及150名早產嬰兒中進行臨床試驗模擬，以比較活躍組與標準護理相比之成功機率（亦即無/輕度BPD）

組	CavD7 （ μ g/L ）	機率（ % ） 95% CI	中位數 OR （ 95% CI ）
受試者人數（1:1:1）			75	150
400微克/公斤/天	50.3	73.2 [52.96，86.93]	0.345 [0.831，1.52]	0.351 [0.135，0.901]
250微克/公斤/天	36.8	61.9 [47.85，74.14]	0.531 [0.138，2.21]	0.548 [0.212，1.34]
SOC	19.2	45.1 [34.47，56.21]

在rIGF-1/rIGFBP-3之400微克/公斤/24小時方案下，使用標準護理資料及IGF-1資料建立群體PK模型。該模型用於模擬治療持續時間內IGF-1 PK濃度之95%預測區間，以預測相對於目標治療範圍，平均及第5及第95區間之落入位置（圖12）。

結果顯示，平均IGF-1水準在400微克/公斤/24小時之劑量下比在250微克/公斤/24小時之劑量下更高。到第7天，預期投與400微克/公斤/24小時之受試者中有大約95%會處於治療範圍內。在EOI時，預期90%的受試者低於109 ng/ml，且95%的受試者高於28 ng/ml。預期大部分投與400微克/公斤/24小時之劑量的受試者在第7天時達到目標IGF-1水準（28至109 ng/ml），且預期該等受試者在輸注結束時超越目標IGF-1水準的風險較低。輸注結束為例如糾正胎齡（PMA）約28、29、30、31或32週。在一些實施例中，輸注結束為糾正胎齡（PMA）約28週。在一些實施例中，輸注結束為糾正胎齡（PMA）29週。在一些實施例中，輸注結束為糾正胎齡（PMA）約30週。在一些實施例中，輸注結束為糾正胎齡（PMA）約31週。在一些實施例中，輸注結束為糾正胎齡（PMA）約32週。

為了評估早期或較高IGF-1血清暴露是否引起更佳BPD結果，在第7天（圖13A）及PMA 40週（圖13B）量測IGF-1血清暴露量。

進行探索性邏輯回歸分析，以探究不同時間點之血清IGF-1暴露量與BPD結果之間的關係。較早時間點展示較高IGF-1暴露量與有利BPD結果（輕度或無BPD）之間的顯著關係。為了減小偏差，選擇7天內之IGF-1平均濃度以用於模型建立。出生體重（較高WT-較佳結果）及性別（女性-較佳結果）被確認為影響BPD結果之共變數。

模擬結果進一步顯示，相對於250微克/公斤/24小時方案，以400微克/公斤/24小時方案投與之rhIGF-1/rhIGFBP-3與無BPD或輕度BPD之更高機率相關。基於模擬研究，400微克/公斤/24小時之較高劑量被認為與BPD預防及CLD改善高度相關。

儘管已根據某些實施例具體描述本文所描述之某些化合物、組成物及方法，但以下實例僅用於說明本發明化合物且並不意欲限制該等化合物。

如本文在說明書和申請專利範圍中使用的冠詞「一(a)」和「一(an)」，除非明確指出相反，否則應理解為包括複數參考物。除非另有說明，否則若該群組之一個、多個或所有成員存在於、使用於或以其他方式相關於一特定產物或方法，則在一或多個群組成員之間包括「或」的申請專利範圍或描述被視為已滿足，除非上下文相反或以其他方式明顯指出。本發明包括其中該群組中恰好有一個成員存在於、使用於或以其他方式相關於特定的產品或過程的實施例。本發明亦包括其中大於一個或整個群組成員存在於、使用於或以其他方式相關於特定的產品或過程的實施例。此外，應當理解，本發明涵蓋所有變化、組合及排列，其中來自所列申請專利範圍中之一或多者的一或多個限制、要件、子句、描述性術語等，係引入另一從屬申請專利範圍中相同的基本申請專利範圍（或相關的任何其他申請專利範圍）中，除非另有說明或除非本領域普通技術人員可明顯看出矛盾或不一致。在要件以列表形式呈現的情況下（例如，以馬庫什組（Markush group）或類似格式），應當理解，亦揭示該要件的每個子群，且可從該群組中移除任一要件。應當理解，一般而言，本發明或本發明態樣被稱為包含特定要件、特徵等的情況下，本發明的某些實施例或本發明的各態樣由或基本上由此類要件、特徵等組成。為了簡單起見，在本文中這些實施例並未在每種情況下以如此多的詞語具體闡述。亦應當理解，本發明的任何實施例或態樣都可明確地從申請專利範圍中排除，而不論特定的排除是否在說明書中有陳述。用於描述本發明的背景並提供關於其實施的額外細節所引用的文獻、網站和其他參考資料均以引用方式併入本文中。

圖式僅出於說明之目的；不具有限制性。

圖 1為在IGF-1/IGFBP-3輸注研究中使用的瑞典模式輸注套件（Swedish Model Infusion Set）之組件的照片。

圖 2為在緩衝液校正之前及之後在存在及不存在0.005%聚山梨醇酯20的情況下IGF-1/IGFBP-3藥品之蛋白質濃度的曲線圖。

圖 3A為展示在不存在聚山梨醇酯20的情況下藉由SE-HPLC量測之樣品純度的曲線圖。圖 3B描繪在存在聚山梨醇酯20的情況下樣品之SE-HPLC曲線圖。針對兩個輸注套件之平均值展示峰面積百分比。

圖 4為如藉由RP-UPLC所量測，在48小時內在存在及不存在P20的情況下IGF-1/IGFBP-3調配物中之IGF-1之氧化的圖式。

圖 5為展示隨時間、藥品濃度及所用材料變化的經氧化IGF-1百分比的圖式。

圖 6為隨時間以及一次性袋子及玻璃容器之液面上空間變化的經氧化IGF-1百分比的圖式。

圖 7A為展示在2℃至8℃（例如5℃）下隨時間變化的IGF-1/IGFBP-3之穩定性（主峰百分比）的圖式。圖 7B為展示在23℃至27℃（25℃）下隨時間變化的IGF-1/IGFBP-3之穩定性（主峰百分比）的圖式。圖 7C為展示在38℃至42℃下隨時間變化的IGF-1/IGFBP-3之穩定性（主峰百分比）的圖式。

圖 8A為在5℃下作為時間之函數繪製的經氧化IGF-1百分比之圖式。圖 8B為在25℃下作為時間之函數繪製的經氧化IGF-1百分比之圖式。圖 8C為在40℃下作為時間之函數繪製的經氧化IGF-1百分比之圖式。

圖 9描繪與接受標準護理之受試者相比，用250微克/公斤/24小時或400微克/公斤/24小時之IGF-1/IGFBP-3治療之樣品隨時間推移之IGF-1濃度的圖式。

圖 10顯示基於在未經治療之對照、接受標準護理之受試者及接受低劑量或250微克/公斤/24小時之rIGF-1/IGFBP-3治療之受試者中模擬及觀測到的IGF-1濃度來驗證模擬模型的圖式。

圖 11為展示臨床試驗模擬之結果的圖式，其中受試者不患上支氣管肺發育不良（BPD）或患上輕度BPD之機率係基於用250微克/公斤/24小時或400微克/公斤/24小時之IGF-1/IGFBP-3進行治療產生之血清IGF-1暴露水平與接受標準護理之受試者的比較結果而測定。

圖 12為在治療持續時間內IGF-1 PK濃度之模擬95%預測區間之模型，以預測在第7天及輸注結束時，相較於接受標準護理之受試者，用250微克/公斤/24小時或400微克/公斤/24小時之IGF-1/IGFBP-3治療之受試者中平均值及第5與第95區間將相對於目標治療範圍（28至109 ng/ml）落在何處。

圖 13A為第7天之血清IGF-1暴露量與BPD結果機率（輕度或無BPD）的圖式。圖 13B為40週PMA時之血清IGF-1暴露量與BPD結果機率（輕度或無BPD）的圖式。

Claims

一種組成物，其包含：蛋白質複合物，其包含重組似胰島素生長因子1（rIGF-1）、重組似胰島素生長因子結合蛋白3（rIGFBP-3）；及聚山梨醇酯界面活性劑，其濃度在約0.0025%與0.0075%之間，其中rIGF-1及rIGFBP-3係以等莫耳量複合。
如請求項1之組成物，其中rIGF-1/IGFBP-3之濃度為約10微克/毫升至1000微克/毫升。
如請求項1或2之組成物，其中該聚山梨醇酯界面活性劑係選自聚山梨醇酯20（P20）或聚山梨醇酯80（P80）。
如請求項3之組成物，其中該聚山梨醇酯界面活性劑為P20。
如請求項1或2之組成物，其中該聚山梨醇酯界面活性劑以約0.005%之濃度存在於該組成物中。
如請求項1或2之組成物，其中在25℃下儲存約6個月之後，少於20%的IGF-1以經氧化物質形式存在。
如請求項1或2之組成物，其中在40℃下儲存約3個月之後，少於10%的IGF-1以經氧化物質形式存在。
如前述請求項中任一項之組成物，其中經氧化物質之百分比係藉由逆相超高效液相層析（RP-UPLC）測定。
如前述請求項中任一項之組成物，其中IGFBP-3包含少於5%的三硫化物變體。
如前述請求項中任一項之組成物，其進一步包含含有乙酸鈉、乙酸及/或氯化鈉之緩衝液。
如請求項10之組成物，其中乙酸鈉或乙酸之濃度在約10與100 mM之間。
如請求項10之組成物，其中乙酸鈉或乙酸之濃度為約50 mM。
如請求項10至12中任一項之組成物，其中氯化鈉之濃度為約20 mM至200 mM。
如請求項13之組成物，其中氯化鈉之濃度為約105 mM。
如前述請求項中任一項之組成物，其中該組成物之pH在約5.0與7.0之間。
如請求項15之組成物，其中該pH為約5.3至5.8。
如請求項1之組成物，其中rIGF-1/IGFBP-3之濃度為約45至55微克/毫升。
如請求項17之組成物，其中rIGF-1/IGFBP-3之濃度為約50微克/毫升。
如請求項17或18之組成物，其中該組成物適用於靜脈內投與。
如前述請求項中任一項之組成物，其中該組成物在2至8℃之間的溫度下具有約20個月至24個月之間的儲存期限。
如請求項20之組成物，其中該組成物在2至8℃之間的溫度下具有至少24個月之儲存期限。
如前述請求項中任一項之組成物，其中該組成物在室溫及/或環境光線下穩定至少8個小時、12個小時、24個小時、36個小時或48個小時。
如前述請求項中任一項之組成物，其中包含重組似胰島素生長因子1（rIGF-1）、重組似胰島素生長因子結合蛋白3（rIGFBP-3）及聚山梨醇酯20之組成物與包含重組似胰島素生長因子1（rIGF-1）、重組似胰島素生長因子結合蛋白3（rIGFBP-3）但不含聚山梨醇酯20之組成物相比在室溫下更穩定。
如請求項1至23中任一項之組成物，其中包含重組似胰島素生長因子1（rIGF-1）、重組似胰島素生長因子結合蛋白3（rIGFBP-3）及聚山梨醇酯20之組成物與包含重組似胰島素生長因子1（rIGF-1）、重組似胰島素生長因子結合蛋白3（rIGFBP-3）但不含聚山梨醇酯20之組成物相比在室溫下具有更少氧化。
如請求項1至24中任一項之組成物，其中當在約25℃之溫度下儲存時，在六個月之後，經氧化IGF-1物質之百分比增加不超過12%。
如請求項1至24中任一項之組成物，其中當在約25℃之溫度下儲存時，在六個月之後，經氧化IGF-1物質之百分比增加不超過10%。
一種醫藥組成物，其包含如前述請求項中任一項之組成物及醫藥學上可接受之載劑。
一種治療或預防腦室內出血（IVH）、支氣管肺發育不良（BPD）或早產兒慢性肺病（CLD）之方法，其包含向需要治療之受試者投與如前述請求項中任一項之組成物。
一種治療或預防腦室內出血（IVH）、支氣管肺發育不良（BPD）或早產兒慢性肺病（CLD）之方法，其包含向有需要之受試者投與包含重組似胰島素生長因子1（rIGF-1）、重組似胰島素生長因子結合蛋白3（rIGFBP-3）及聚山梨醇酯20界面活性劑之組成物。
一種治療或預防腦室內出血（IVH）、支氣管肺發育不良（BPD）或早產兒慢性肺病（CLD）之方法，其包含向有需要之受試者投與包含重組似胰島素生長因子1（rIGF-1）、重組似胰島素生長因子結合蛋白3（rIGFBP-3）及聚山梨醇酯界面活性劑之組成物，該聚山梨醇酯界面活性劑之濃度在約0.0025%與0.0075%之間，其中rIGF-1及rIGFBP-3以等莫耳量複合，且其中rIGF-1/IGFBP-3之濃度為約10微克/毫升至1000微克/毫升。
一種治療或預防腦室內出血（IVH）、支氣管肺發育不良（BPD）或早產兒慢性肺病（CLD）之方法，其包含向有需要之受試者投與包含重組似胰島素生長因子1（rIGF-1）、重組似胰島素生長因子結合蛋白3（rIGFBP-3）之組成物，其中該有需要之受試者之胎齡為23至25週+6天。
一種治療或預防腦室內出血（IVH）、支氣管肺發育不良（BPD）或早產兒慢性肺病（CLD）之方法，其包含以足以達成相對於對照而言腦室內出血發生率降低的治療量向有需要之受試者投與包含重組似胰島素生長因子1（rIGF-1）、重組似胰島素生長因子結合蛋白3（rIGFBP-3）之組成物。
如請求項32之方法，其中發生率降低在約36至40週胎齡之間達成，如藉由超音波或磁共振成像（MRI）評定。
如請求項33之方法，其中發生率降低在36週時達成。
如請求項33之方法，其中發生率降低在40週時達成。
如請求項32之方法，其中發生率降低藉由超音波評定。
如請求項32之方法，其中腦室內出血（IVH）之發生率降低為II級、III級或IV級IVH之發生率之至少約30%降低。
一種治療或預防腦室內出血（IVH）、支氣管肺發育不良（BPD）或早產兒慢性肺病（CLD）之方法，其包含向有需要之受試者投與如請求項1或2之組成物。
如請求項29或30之方法，其中該聚山梨醇酯界面活性劑係選自聚山梨醇酯20（P20）或聚山梨醇酯80（P80）。
如請求項39之方法，其中該聚山梨醇酯界面活性劑為P20。
如請求項29或30之方法，其中該聚山梨醇酯之濃度為0.005%。
如請求項29或30之方法，其中在儲存約3個月之後，少於20%的IGF-1以經氧化物質形式存在。
如請求項29或30之方法，其中經氧化物質之百分比係藉由RP-UPLC測定。
如請求項29或30之方法，其中IGFBP-3包含少於5%的三硫化物變體。
如請求項29至44之方法，其中該需要治療之受試者為嬰兒。
如請求項45之方法，其中該嬰兒早產至少1週、2週、3週、4週、5週、6週、7週、8週、9週、10週、11週、12週、1個月、2個月或3個月。
如請求項45之方法，其中該嬰兒在小於32週之胎齡（GA）時出生。
如請求項45之方法，其中該嬰兒在小於28週之胎齡（GA）時出生。
如請求項45之方法，其中該嬰兒在＜ 26週之胎齡（GA）時出生。
如請求項45之方法，其中該嬰兒之糾正胎齡（PMA）在約23至34週之間。
如請求項50之方法，其中該嬰兒之糾正胎齡（PMA）為約23週。
如請求項50之方法，其中該嬰兒之糾正胎齡（PMA）小於34週。
如請求項29至52中任一項之方法，其中該組成物經靜脈內投與。
如請求項29至52中任一項之方法，其中該組成物以約100至1000微克/公斤/24小時之劑量投與。
如請求項54之方法，其中該組成物以約800微克/公斤/24小時之劑量投與。
如請求項54之方法，其中該組成物以約400微克/公斤/24小時之劑量投與。
如請求項54之方法，其中該組成物以約250微克/公斤/24小時之劑量投與。
如請求項51至54中任一項之方法，其中該組成物在24小時時段內投與一次、兩次、三次或四次。
如請求項58之方法，其中該組成物在24小時時段內投與一次。
如請求項58之方法，其中該組成物在24小時時段內藉由連續輸注投與。
如請求項29至60中任一項之方法，其中該組成物在自出生起直至糾正胎齡（PMA）約23至34週期間投與。
如請求項29至60中任一項之方法，其中該組成物在自出生起直至PMA約23至32週期間投與。
如請求項29至60中任一項之方法，其中該組成物在自出生起直至PMA約29週加6天期間投與。
如請求項29至63中任一項之方法，其中該受試者具有降低的IGF-1血清水準。
如請求項29至64中任一項之方法，其中該組成物之投與引起IGF-1血清水準相較於基線值之升高。
如請求項65之方法，其中IGF-1血清水準與基線值相比升高至少約25%至50%。
如請求項65之方法，其中IGF-1血清水準在投與後至少24小時內保持升高。
如請求項65之方法，其中IGF-1血清水準在約48小時內保持升高。
如請求項65之方法，其中IGF-1血清水準在至少約7天內保持升高。
如請求項65之方法，其中IGF-1血清水準在糾正胎齡（PMA）至少約23週至34週內保持升高。
如請求項65之方法，其中IGF-1血清水準在糾正胎齡（PMA）至少約23週至12個月內保持升高。
如請求項29至71中任一項之方法，其中該組成物之投與引起糾正胎齡（PMA）23週、24週、25週、26週、27週、28週、29週、30週、31週、32週、33週、34週、35週、36週、37週、38週、39週、40週、6個月、8個月、10個月、12個月或24個月內腦室內出血之發生率降低。
如請求項29至72中任一項之方法，其中該組成物之投與引起糾正胎齡（PMA）23週、24週、25週、26週、27週、28週、29週、30週、31週、32週、33週、34週、35週、36週、37週、38週、39週、40週、6個月、8個月、10個月、12個月或24個月內支氣管肺發育不良之發生率降低。
如請求項29至73中任一項之方法，其中該組成物之投與引起糾正胎齡（PMA）23週、24週、25週、26週、27週、28週、29週、30週、31週、32週、33週、34週、35週、36週、37週、38週、39週或40週內如藉由早產嬰兒指數（PREMature Infant Index；PREMII）評定的功能狀態之提昇。
如請求項29至74中任一項之方法，其中該組成物之投與引起約28至109 ng/ml之IGF-1血清目標水準升高。
如請求項72或73之方法，其中相對於未治療對照，發生率降低至少約20%至50%。
如請求項72或73之方法，其中相對於接受標準護理之對照，發生率降低至少約20%至50%。
如請求項74之方法，其中相對於未治療對照，功能狀態提昇至少約20%至50%。
如請求項74之方法，其中相對於接受標準護理之對照，功能狀態提昇至少約20%至50%。
一種用於製造醫藥組成物之方法，該方法包含提供包含似胰島素生長因子1（IGF-1）及似胰島素生長因子結合蛋白3（IGFBP-3）之蛋白質複合物，其中該方法包含在混合該複合物與調配溶液期間使用一次性袋子，藉此製造醫藥組成物，其中在25℃下儲存6個月後，該醫藥組成物中IGF-1之經氧化物質之增加少於20%。
如請求項80之方法，其中該調配溶液包含界面活性劑。
如請求項80之方法，其中在過濾步驟期間進一步使用該一次性袋子。
如請求項82之方法，其中該方法包含在該混合步驟及/或該過濾步驟期間用該蛋白質複合物填充該一次性袋子的至少30%。
如請求項82之方法，其中該方法包含在該混合步驟及/或該過濾步驟期間用該蛋白質複合物填充該一次性袋子的至少40%。
如請求項82之方法，其中該方法包含在該混合步驟及/或該過濾步驟期間用該蛋白質複合物填充該一次性袋子的至少75%。
如請求項82之方法，其中該方法包含在該混合步驟及/或該過濾步驟期間用該蛋白質複合物填充該一次性袋子的75%至90%。
如請求項80至86之方法，其中該一次性袋子為約或大於500L。
如請求項80至87之方法，其中在25℃下儲存6個月後，IGF-1之經氧化物質之增加少於5%。
如請求項80至88之方法，其中在25℃下儲存6個月後，該蛋白質複合物中少於2%的IGF-1以經氧化物質形式存在。
如請求項80至89之方法，其中在40℃下儲存3個月後，少於10%的該蛋白質複合物以低分子量物質形式存在。
如請求項80至90之方法，其中在40℃下儲存6個月後，少於5%的該蛋白質複合物以低分子量物質形式存在。
一種組成物，其包含含有似胰島素生長因子1（IGF-1）及似胰島素生長因子結合蛋白3（IGFBP-3）之經分離蛋白質複合物，其係藉由如請求項80至91中任一項之方法製造。
如請求項92之組成物，其中該組成物包含50 mM乙酸鈉、105 mM氯化鈉及0.005%（v/v）P20，pH 5.5。
一種組成物，其包含：蛋白質複合物，其包含等莫耳量的重組似胰島素生長因子1（rIGF-1）及重組似胰島素生長因子結合蛋白3（rIGFBP-3）；聚山梨醇酯20界面活性劑，其濃度為約0.005%（v/v）；及緩衝液，其包含乙酸鈉、乙酸及/或氯化鈉，其中該組成物之pH為約5.3至5.8，其中rIGF-1/IGFBP-3之濃度為約50微克/毫升，且其中在產品發佈時少於1.5%的IGF-1以經氧化物質形式存在。