TW202228761A - 包含水凝膠及環孢菌素之持續釋放可生物降解淚小管內插入物 - Google Patents
包含水凝膠及環孢菌素之持續釋放可生物降解淚小管內插入物 Download PDFInfo
- Publication number
- TW202228761A TW202228761A TW110135433A TW110135433A TW202228761A TW 202228761 A TW202228761 A TW 202228761A TW 110135433 A TW110135433 A TW 110135433A TW 110135433 A TW110135433 A TW 110135433A TW 202228761 A TW202228761 A TW 202228761A
- Authority
- TW
- Taiwan
- Prior art keywords
- insert
- cyclosporine
- intracanalicular
- hydrogel
- sustained release
- Prior art date
Links
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
- A61K9/0048—Eye, e.g. artificial tears
- A61K9/0051—Ocular inserts, ocular implants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- A61K38/12—Cyclic peptides, e.g. bacitracins; Polymyxins; Gramicidins S, C; Tyrocidins A, B or C
- A61K38/13—Cyclosporins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
- A61K47/08—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing oxygen, e.g. ethers, acetals, ketones, quinones, aldehydes, peroxides
- A61K47/10—Alcohols; Phenols; Salts thereof, e.g. glycerol; Polyethylene glycols [PEG]; Poloxamers; PEG/POE alkyl ethers
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
- A61K47/22—Heterocyclic compounds, e.g. ascorbic acid, tocopherol or pyrrolidones
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/30—Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
- A61K47/34—Macromolecular compounds obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyesters, polyamino acids, polysiloxanes, polyphosphazines, copolymers of polyalkylene glycol or poloxamers
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
- A61P27/02—Ophthalmic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/04—Antibacterial agents
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Ophthalmology & Optometry (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Inorganic Chemistry (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Oncology (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
Abstract
本文提供包含水凝膠及環孢菌素之持續釋放可生物降解淚小管內插入物、藉由投與此類插入物來治療或預防有需要個體之眼部疾病的方法以及製造此類插入物之方法。
Description
本發明係關於眼部疾病，諸如影響眼表之疾病，諸如乾眼症或乾眼病「DED」之治療。根據本發明，眼部疾病係藉由投與，例如淚小管內投與插入物來治療，該插入物係可生物降解的並提供環孢菌素(cyclosporine)之持續釋放。
眼部疾病及病症，特別是影響眼表之疾病及病症極為常見。例如，乾眼病(DED)，又稱為乾燥性角膜結膜炎(KCS)，係最常見的眼科疾病之一。在眼科診所就診之患者經常報告乾眼症之症狀，這使其成為一個日益嚴重的公共健康問題，且亦成為眼科醫師最常見的疾患之一。患病率隨著年齡的增長而顯著增加且在女性中患病率較高。據估計，超過1600萬美國(US)成年人被診斷出患有該病症，其中有900萬人被歸類為中度至重度。
DED係淚膜及眼表之多因性病症，可能導致眼睛不適症狀，諸如乾燥、燒灼感、搔癢、發紅、刺痛、視力模糊、砂磨感、疼痛、異物感、視覺障礙、淚膜不穩定、眼疲勞及常見的眼表損傷。DED亦可能使患者難以佩戴或無法佩戴隱形眼鏡、閱讀、在電腦上工作或在夜間開車。
經顯示，淚腺及眼表發炎在乾眼症中起到作用。不利地影響淚膜穩定性及滲透性之因素會引起眼表損傷並引發發炎級聯，由此產生先天性及適應性免疫反應。此等免疫發炎性反應導致進一步的眼表損傷及自持續性發炎循環之發展。例如，眼表發炎導致淚液產生減少，由此使該等疾患進一步惡化並可能反過來導致眼表發炎及上皮細胞損傷。在動物模型中，T細胞介導之發炎確實為乾眼症之原因及結果。在人類中發現，與對照組相比，乾眼症與結膜T細胞之存在及淚液中炎性細胞介素含量升高有關，由此證實發炎係該病症之驅動源。
DED可分為急性、陣發性或慢性的。在一些情況下，DED可以歸類為伴隨急性發作的慢性病。慢性DED可能需要全年關注。已經探索了幾種DED藥理學療法，且該等療法包括階梯式方法，該方法以非處方潤滑劑及人工淚液替代品(以滴劑形式遞送)開始，進展至局部抗炎療法及使用淚點塞阻止淚液排出之淚道閉塞術。
人工淚液增加淚液量，但由於淚液排出及液體因例如經眼上皮蒸發或吸收而喪失，淚液量可能會恢復到其原始狀態，因此需要頻繁投與。雖然可以藉由添加粘度增強劑來增加停留時間，但高粘度淚液替代品可能會導致視力模糊。儘管淚點塞已被證明對DED患者有效，但塞子可能會丟失(顯示出較差的保留能力)且可能會很少遷移至鼻淚管中，由此導致發炎或其他危急情況。在一些情況下，可以用高溫燒灼術手術關閉淚點來治療DED。在美國，其他批准用於DED患者的療法係增加淚液產生之Restasis
®(環孢菌素)、增加淚液產生之Cequa
®(環孢菌素)以及針對DED之病徵及症狀的Xiidra
®(利非司特(lifitegrast))。近來，Eysuvis
TM(洛替潑諾(loteprednol))被批准用於DED之急性治療。
環孢菌素A係在土壤真菌中發現的一種環狀多肽鈣調神經磷酸酶抑制因子免疫抑制劑/免疫調節劑，且其免疫調節活性可用於治療免疫病症，諸如移植排斥、牛皮癬、潰瘍性結腸炎及類風濕性關節炎。鈣調神經磷酸酶係一種活化T細胞之酶，在細胞介導之免疫中起著關鍵作用。因為鈣調神經磷酸酶抑制因子抑制免疫系統，所以該等抑制因子被稱為免疫抑制劑。
環孢菌素改善乾燥性角膜結膜炎(KCS)之病徵及症狀的確切機制尚未完全確定，但普遍認為其可用作部分免疫調節劑。在DED中，環孢菌素可抑制淋巴細胞浸潤，減少免疫發炎反應並抑制淚腺及結膜上皮細胞之凋亡。環孢菌素藉由進入T細胞並結合親環蛋白來干擾T細胞之活性及生長，由此影響免疫功能。該複合物藉由阻斷鈣調神經磷酸酶之作用並阻止NFATc去磷酸化以及對促炎性細胞介素諸如IL-2、IL-4、干擾素-γ及TNF-α之產生的調控來影響T細胞活性。
經顯示，環孢菌素A之局部投與可增加淚液分泌，此可能係藉由促進副交感神經系統相關神經傳遞質之局部釋放實現。獸醫眼科醫師對124只患有KCS之犬隻進行了臨床現場試驗以評估在每天兩次用2.0 mg/mL環孢菌素(OPTIMMUNE®眼藥膏，Intervet Inc.)或媒劑眼藥膏治療約90天後的功效，該治療使淚液產生增加，不過，一些犬隻之臨床症狀有所改善，但淚液沒有增加。
此被認為是由環孢菌素抑制眼表發炎而發生的。在81% (對比媒劑治療之百分比)的使用OPTIMMUNE®眼藥膏治療之眼睛中觀察到整體改善且停止療法引起除一隻測試眼外的所有測試眼均出現快速臨床退化，表明需要長期持續療法。在犬隻KCS之管理中，關於環孢菌素引起流淚增加之機制知之甚少，但認為臨床改善未必取決於淚液產生之增加。在人類中，環孢菌素A治療對於DED之有益作用得到了較佳的確證，且幾項臨床試驗之發現均表明，用局部環孢菌素長期治療在例如角膜表面染色、Schirmer測試、視力模糊、人工淚液施用頻率以及疾病嚴重程度之細胞及分子標誌物方面可得到積極的結果。
供眼科使用之環孢菌素於1995年首次被批准用於治療犬隻之KCS。在2003年，環孢菌素作為Restasis
®(0.5 mg/mL環孢菌素眼用乳液，Allergan)被批准用於人類眼科，並適用於增加推測淚液產生因KCS相關眼部發炎而受到抑制之患者的淚液產生。經顯示，局部用環孢菌素滴眼液可減少發炎介質並增加淚液產生。商業化且市場化之局部用環孢菌素滴眼液在世界各地均有銷售，用於治療DED/KCS、春季角膜結膜炎(VKC)及眼部發炎。環孢菌素眼用溶液目前在市場上可用於多個管轄區中多種產品之局部使用，如下所示。
然而，局部用滴劑之施用存在局限，會影響患者之管理。此等局限包括難以處理瓶子、滴注精度有限、滴劑可能洗除以及局部用滴眼液之生物利用度有限(Aldrich等人, 2013, Ophthalmic preparations, USP, 39(5), 第1-21頁)。當前可用之環孢菌素滴眼液調配物的具體問題係耐受性問題，諸如灼痛及刺痛，以及可能持續數週至數月的緩慢起效時間。較高的投與頻率(例如每天數次)會嚴重影響患者之日常生活。在人類中，到達眼組織之局部用滴眼液的生物利用度低於5%。其他局限包括起效延遲(數週至數月)，以及滴劑中之藥物劑量高，這可能成為導致不良反應之原因，諸如與局部用環孢菌素滴眼液(Restasis
®NDA #021023)相關之眼部灼痛。
因此，對於克服當前市面上局部用調配物之缺點的環孢菌素A治療形式，特別是對於允許環孢菌素A持續釋放及相關投與頻率降低之劑型的需求有待滿足，該形式可提高生活品質及患者順應性，具有較低的感染風險及較少的不良反應，諸如眼灼痛及刺痛。
由淚點塞進行藥物遞送優於局部用滴劑，因為淚點塞藉由形成緩慢釋放藥物之貯庫來實現藥物隨時間之持續釋放。投與由一次性投與淚點塞組成，該方式解決了以上提到的長期投與局部用滴眼液固有的局限。
然而，淚小管內塞亦伴隨著挑戰。淚小管內投與途徑在解剖學上具有一些潛在的限制(該塞需要足夠小以進入淚點)，且難以開發出這樣一種眼科用淚小管內塞，該塞易於投與且必要時，在藥物貯庫耗盡後可移除，配合良好，亦即，提供適當的保留能力，由此使其不會無意中丟失，且同時亦不會引起任何不適或意外的投與部位反應，諸如發炎。
此外，還需要在一段持續的時間內具有適當且一致的藥物釋放。鑑於塞子之大小較小，將其調配成包括足夠的載藥量及持續釋放特性具有挑戰性。
在此背景下，很明顯，需要可有效治療眼部疾病諸如DED之替代性環孢菌素劑型。
本文所揭示的所有參考文獻均以全文引用之方式併入本文中用於所有目的。
本發明某些實施例之一個目的係提供一種包含環孢菌素之淚小管內插入物，其可在較長時段內有效治療患者之眼部疾病，特別是DED。
本發明某些實施例之另一個目的係提供一種包含環孢菌素之淚小管內插入物，其可在較長時段內有效治療患者之眼部疾病，特別是瞼炎。
本發明某些實施例之另一個目的係提供一種包含環孢菌素之淚小管內插入物，其可在較長時段內有效治療患者之眼部疾病，特別是瞼炎、過敏性結膜炎，特定言之，異位性角膜結膜炎及春季角膜結膜炎。
如上所述，當前市售的環孢菌素調配物，例如局部用滴眼液的一個主要缺點係需要頻繁投與。本發明旨在藉由一次性投與單個插入物，連續地釋放活性劑，持續一段較長時間，諸如數週，來實現有效的長期療法，由此解決該問題。
因此，本發明某些實施例之另一個目的係提供一種包含環孢菌素之淚小管內插入物，其提供環孢菌素在眼表之持續釋放。
為了確保在插入物佩戴期間提供有效療法，環孢菌素之釋放應保持實質上恆定之水準(例如在治療窗內)，以提供治療作用。
因此，本發明某些實施例之另一個目的係提供一種包含環孢菌素之淚小管內插入物，其提供環孢菌素在眼表之持續釋放且特別是恆定釋放。
本發明某些實施例之另一個目的亦在於，提供一種包含環孢菌素之淚小管內插入物，其起效更快，例如在數天內或甚至是數小時內起效。
此外，本發明亦旨在維持及改善患者之順應性，這在當前之商業產品中仍有改進的空間。
因此，本發明某些實施例之另一個目的係提供一種包含環孢菌素之淚小管內插入物，其耐受性良好且在插入淚小管期間或之後不會提供無法忍受的不適。
本發明某些實施例之另一個目的亦在於，提供一種包含環孢菌素之淚小管內插入物，其易於投與，亦即，易於插入淚小管中。
本發明某些實施例之另一個目的係提供一種包含環孢菌素之淚小管內插入物，其易於處理且不會如同滴眼液一般溢出，或容易破裂。
本發明某些實施例之另一個目的係提供一種包含環孢菌素之淚小管內插入物，其不易被患者錯誤投與並因此避免給藥過量及給藥不足。
本發明某些實施例之另一個目的係提供一種包含環孢菌素之淚小管內插入物，該插入物在插入後，即較佳地配合於淚小管中，且不容易丟失或不會無意地經由淚管排出。
本發明某些實施例之另一個目的係提供一種包含環孢菌素之淚小管內插入物，其易於移除或更換，或者不需要移除。
因此，本發明某些實施例之另一個目的係提供一種包含環孢菌素之淚小管內插入物，當與諸如滴眼液之類常見治療相比時，該插入物具有較少副作用，諸如眼部灼熱、刺痛或搔癢。
因此，本發明某些實施例之另一個目的係提供一種包含環孢菌素之淚小管內插入物，當與諸如滴眼液之類常見治療相比時，該插入物具有降低的相關風險，諸如眼部感染或全身毒性。
因此，本發明某些實施例之另一個目的係提供一種包含環孢菌素之淚小管內插入物，其幾乎沒有例如經由療法相關的限制，諸如不能或僅有限可能進行隱形眼鏡佩戴、或閱讀、在電腦上工作或夜間開車引起的生活品質損害。
本發明某些實施例之另一個目的係提供一種包含環孢菌素之淚小管內插入物，該插入物製造簡單。
本發明某些實施例之另一個目的係提供一種包含環孢菌素之淚小管內插入物，其易於儲存且在儲存時穩定。
本發明某些實施例之另一個目的係提供一種包含環孢菌素之淚小管內插入物，其增加淚液產生並在較長時段內為患者提供適合的淚液量。
本發明某些實施例之另一個目的係提供一種包含環孢菌素之淚小管內插入物，其在較長時段內解決或減輕患者之眼表疾病，特別是DED之症狀，諸如眼乾、燒灼感、搔癢、發紅、刺痛、砂磨感、疼痛、異物感、視覺障礙、淚膜不穩定、眼疲勞及眼表損傷。
本發明某些實施例之另一個目的係提供一種在較長時段內治療或預防患者之眼部疾病，特別是DED的方法，該方法可以解決以上所列目的中所提及的一或多個問題。
本發明某些實施例之另一個目的係提供一種在較長時段內治療患者之眼部疾病，特別是瞼炎的方法，該方法可以解決以上所列目的中所提及的一或多個問題。
本發明某些實施例之另一個目的係提供一種在較長時段內治療患者之眼部疾病，特別是瞼炎、過敏性結膜炎，且特定言之，異位性角膜結膜炎及春季角膜結膜炎的方法，該方法可以解決以上所列目的中所提及的一或多個問題。
本發明某些實施例之另一個目的係提供一種治療或預防DED之方法，該方法包括將包含水凝膠及環孢菌素之可生物降解插入物插入患者之淚小管中，其中該方法可以解決以上所列針對提供淚小管內插入物之目的之一或多個問題。
本發明某些實施例之另一個目的係提供一種治療或預防DED之方法，該方法包括將包含水凝膠及環孢菌素之可生物降解插入物插入患者之淚小管中，並在較長時段，諸如至少約2個月後，將包含水凝膠及環孢菌素之第二可生物降解插入物插入同一淚小管中，其中該方法可以解決以上所列針對提供淚小管內插入物之目的之一或多個問題。
本發明某些實施例之另一個目的係提供一種在較長時段內治療或預防患者之眼部疾病，特別是DED的方法，其中實現的治療作用超過由無藥物淚點塞閉塞淚點與投與環孢菌素滴眼液相結合之治療所實現的治療作用。
本發明某些實施例之另一個目的係提供一種製造淚小管內插入物之方法，該方法可以解決以上所列與淚小管內插入物相關之目的中所提及之一或多個問題。
本發明此等目的中之一或多個以及其他目的係藉由本文所揭示及主張之一或多個實施例來解決。
本發明各個態樣揭示於說明書中並主張於獨立請求項中，而附屬請求項主張本發明此等態樣之特定實施例及變化形式。以下詳細描述將提供本發明各個態樣之詳情。
定義
如本文所使用，術語「淚小管內插入物」係指投與，亦即插入淚小管中的含有活性劑，具體言之環孢菌素之物體，該物體在淚小管中保持一定時段，同時其將活性劑釋放至周圍環境中。插入物可為任何預定形狀，最常見的是在插入之前呈桿狀，在將該插入物放置於希望位置時，該形狀可以在一定程度上得到保持，不過，插入物之尺寸(例如長度及/或直徑)可在投與後因水合而變化，本文將進一步揭示。換言之，插入眼中的並非溶液或懸浮液，而是已經成形的、附著的物體。因此，在投與之前，該插入物已經例如根據本文所揭示之方法完全形成。淚小管內插入物可以設計成隨時間推移可生物降解的(如下文所揭示)，且因此可藉此軟化，改變其形狀及/或減小其大小，且最後可能藉由溶解或崩解而消除，此時插入物之其餘部分將沿淚管排出。在本發明中，術語「插入物」用於指當含有水時(例如插入物在投與眼睛或以其他方式浸入水性環境中後(再)水合後)呈水合(又稱為「溶脹」)狀態之插入物以及例如當經乾燥至例如不超過1重量%之低水含量時呈乾(經乾燥/脫水)狀態之插入物。
本發明中使用的術語「眼部」一般係指眼睛，或眼睛的任何部件或部分(「眼部插入物」原則上可以投與眼睛之任何部件或部分)。在某些實施例中，本發明係關於眼部插入物之淚小管內注射，以及乾眼病(DED)之治療，下文將進一步揭示。
術語「可生物降解」係指一種材料或物體(諸如根據本發明之淚小管內插入物)在活體內，亦即當放置於人體或動物體內時降解。在本發明某些實施例之情形中，如下文詳細揭示的，包括含有環孢菌素之水凝膠的插入物在被投與眼睛淚小管中後，就會隨著時間緩慢生物降解。在某些實施例中，生物降解至少部分經由在淚小管之水性環境中進行酯水解而發生。插入物慢慢變軟並崩解，經由鼻淚管清除。
「水凝膠」係由一或多種親水性天然或合成聚合物(如本文所揭示)構成之三維網狀結構，其可在水中溶脹並保持一定量的水，同時因例如各個聚合物鏈之化學或物理交聯而維持或實質上維持其結構。由於含水量高，水凝膠柔軟而有可撓性，由此使其與天然組織極其相似。在本發明中，術語「水凝膠」用於指當含有水時(例如在水溶液中形成水凝膠之後，或在水凝膠插入眼中或以其他方式浸入水性環境中後水合或(再)水合之後)呈水合狀態以及當例如乾燥至例如不超過1重量%之低水含量時呈乾(乾燥/脫水)狀態的水凝膠。在本發明中，在活性成分包含(例如分散)於水凝膠中時，水凝膠亦可被稱為「基質」。
術語「聚合物網路」描述由聚合物鏈(具有相同或不同分子結構及相同或不同分子量之聚合物鏈)彼此交聯形成的結構。適於本發明目的之聚合物的類型揭示於下文中。
術語「非晶形」係指在X射線或電子散射實驗中未展現出結晶結構的聚合物或聚合物網路。
術語「半結晶」係指在X射線或電子散射實驗中具有某種結晶性質，亦即展現出一些結晶特性之聚合物或聚合物網路。
術語「前驅物」在本文中係指相互反應並由此經由交聯連接形成聚合物網路且由此形成水凝膠基質的分子或化合物。雖然其他材料可能存在於水凝膠中，諸如活性劑或緩衝劑，但該等材料不被稱為「前驅物」。
仍存在於最終聚合物網路中之前驅物分子各部分在本文中又稱為「單元」。因此，「單元」係形成水凝膠之聚合物網路的結構單元或成分。例如，適用於本發明中的聚合物網路可含有相同或不同的聚乙二醇單元，本文將進一步揭示。
出於本發明之目的，術語「持續釋放」意圖表徵這樣一類產品，該等產品被調配成使環孢菌素在較長時段內可用，由此使給藥頻率相較於立即釋放劑型，諸如局部施用至眼睛之環孢菌素溶液(亦即，含環孢菌素之滴眼液)降低。可在本文中與「持續釋放」互換使用的其他術語有「延長釋放」或「控制釋放」。在本發明之含義內，術語「持續釋放」包含環孢菌素之恆定釋放、環孢菌素之遞減釋放以及其任何組合，諸如環孢菌素之恆定釋放，繼之以環孢菌素之遞減釋放。在本發明之含義內，術語「遞減(tapered/tapering)」係指環孢菌素之釋放量隨時間減少。
如本文所使用，術語「較長時段」係指一般熟習此項技術者認為就治療疾病而言延長之任何時段，且具體言之，指諸如以下時段：至少約1週、或至少約1個月或更長時間，諸如至多約12個月，或任何中間時段，諸如約1至約6個月、約2至約4個月、約2至約3個月或約3至約4個月。
如本文所使用，術語「佩戴時間」係指淚小管內插入物存在於淚小管中的時段，亦即，自投與插入物直至插入物自淚小管去除之時段。在某些實施例中，插入物可藉由移除插入物(此可能為有意或無意的，但在沒有施加外力情況下不會自發地發生)或藉由在插入物完全生物降解、完全崩解或實質上崩解後較長時段之後自發清除，由此排出插入物之剩餘部分來去除。在某些實施例中，佩戴時間係至少約1週，或至少約1個月或更長時間，諸如至多約12個月，或任何中間時段，諸如約1至約6個月、約2至約4個月、約2至約3個月或約3至約4個月。
如本文所使用，術語「顯現劑」係指當插入至眼睛之淚小管中時可使插入物容易地可見的包含在插入物之水凝膠內的分子或組成物。顯現劑可為螢光團如螢光素、羅丹明(rhodamine)、香豆素及花青。在某些實施例中，顯現劑係螢光素或包括螢光素部分。
如本文所使用，「眼表」包括結膜及/或角膜，以及諸如淚器之類元件，包括淚點，以及淚小管及相關眼瞼結構。
如本文所使用，術語「淚液」或「眼淚」係指由淚腺分泌之液體，其潤滑眼睛並由此形成淚膜。眼淚由水、電解質、蛋白質、脂質及黏蛋白構成。
如本文所使用，在本發明之上下文中，術語「投與(administration)」、「插入(insertion)」、「投與(administering)」及「插入(inserting)」係同義詞，意思指例如根據實例4.II (插入物放置)中所描述之程序，將插入物放置到淚小管中，且特定言之，放置於淚小管之垂直部分中。
如本文所使用，術語「兩側地(bilaterally)」或「兩側(bilateral)」在投與本發明之插入物之情形中係指將插入物投與患者之雙眼中。對於每隻眼睛，插入物可插入眼睛之上淚小管或下淚小管中，或同時插入眼睛之上淚小管及下淚小管中。
術語「塞」係指這樣一種裝置，該裝置能夠閉塞、實質上閉塞或部分閉塞淚管(「淚管閉塞」)，由此防止或減少淚液排出，這有助於保持眼睛濕潤。塞可分為「淚點塞」及「淚小管內塞」。淚小管內塞在文獻中又稱為「淚小管塞」。兩類塞係經由眼睛之上淚點及/或下淚點插入。淚點塞安置於淚點開口處，使其很容易看到，且因此，可以毫不費力地移除。然而，淚點塞顯示出較差的保持率，且會因其組成物暴露而被微生物污染，在極少數情況下會導致感染。相比之下，淚小管內塞係不可見的，且與淚點塞相比，由於淚小管內塞被放置在垂直或水平淚小管內，故提供較佳之保持率。然而，淚小管內塞不容易移除且其遷移之風險較高。市售塞通常由膠原蛋白、丙烯酸系物或矽酮製成。
如本文所使用，術語「淚小管(canaliculus)」(複數「淚小管(canaliculi)」)或者「淚管」係指淚小管，亦即，在每個眼瞼中之小通道，用於將淚液自淚點排到鼻淚管(亦參見圖1)。因此，淚小管形成淚器之一部分，用於將淚液自眼睛表面排到鼻腔。上眼瞼中之淚小管稱為「上淚小管」或「上部淚小管」，而下眼瞼中之淚小管被稱為「下淚小管」或「下部淚小管」。每個淚小管包含沿淚點之垂直區域，稱為「垂直淚小管」；及沿垂直淚小管之水平區域，稱為「水平淚小管」，其中水平淚小管併入鼻淚管中。
術語「淚點(punctum)」(複數「淚點(puncta)」)係指淚點(lacrimal punctum)，亦即，在眼瞼邊緣之微小開口，代表淚小管之入口。當眼淚產生時，一些淚液在每次眨眼之間蒸發，且一些淚液經由淚點排出。上眼瞼及下眼瞼均顯示淚點，因此淚點分別稱為「上部淚點」或「上淚點」及「下部淚點」或「下淚點」(亦參見圖1)。
術語「淚小管內插入物」係指這樣一種插入物，該插入物可經由上淚點或下淚點或經由上淚點及下淚點兩者投與眼睛之上淚小管或下淚小管中或眼睛之上淚小管及下淚小管兩者中，特定言之，投與眼睛之上垂直淚小管或下垂直淚小管中或投與眼睛之上垂直淚小管及下垂直淚小管中。由於插入物定位於淚小管內，插入物藉助於淚道閉塞而阻止淚液排出，如同關於淚小管內塞所觀察到的那樣。在某些實施例中，本發明之淚小管內插入物經兩側插入眼睛之下垂直淚小管中。根據本發明之某些實施例，淚小管內插入物係持續釋放可生物降解插入物。
術語「API」、「活性(醫藥)成分(ingredient)」、「活性(醫藥)劑」、「活性(醫藥)成分(principle)」、「(活性)治療劑」、「活性劑」及「藥物」在本文中可互換使用且指在成品藥 (FPP)中使用的物質以及用於製備此類成品藥之物質，旨在提供藥理學活性或以其他方式對診斷、治愈、減輕、治療或預防疾病產生直接作用，或對恢復、矯正或改變患者之生理功能產生直接作用。
根據本發明使用之API係環孢菌素A。如本文所使用，術語「環孢菌素」係指環孢菌素A，且特定言之，並非指作為環孢菌素A之代謝物的環孢菌素B、C、D、E、H及L；亦並非指可作為雜質包含在環孢菌素A中的環孢菌素U、G、二氫環孢菌素A或異環孢菌素A。在某些實施例中，環孢菌素A可含有各自之濃度不超過1.0%或各自之濃度不超過0.7%的環孢菌素B、C、D、E、G、H、L及U、二氫環孢菌素A及異環孢菌素A作為雜質；亦可含有各自之濃度不超過0.3%或各自之濃度不超過0.1%之未知雜質，且可含有總量不超過2.5%或不超過1.5%之雜質。
環孢菌素A之分子式係C
62H
111N
11O
12且其IUPAC名稱為30-乙基-33-(1-羥基-2-甲基己-4-烯基)-1,4,7,10,12,15,19,25,28-九甲基-6,9,18,24-肆(2-甲基丙基)-3,21-二(丙-2-基)-1,4,7,10,13,16,19,22,25,28,31-十一氮雜環三十三烷-2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32-十一酮(CAS編號59865-13-3)。其分子量為1203道爾頓。其具有以下化學結構：
環孢菌素係一種白色至類白色粉末，可溶於各種有機溶劑，諸如丙酮、甲醇及乙醇(96% v/v)中，但幾乎不溶於水。在某些實施例中，環孢菌素經微粉化。
 |
出於本發明之目的，可使用所有可能形式的環孢菌素，包括多晶型物或任何醫藥學上可接受之鹽、無水物、水合物、其他溶劑合物或衍生物。當在本說明書或申請專利範圍中提及環孢菌素且無進一步說明時，即使沒有明確陳述，其亦指呈環孢菌素之任何此類多晶型物、醫藥學上可接受之鹽、無水物、溶劑合物(包括水合物)或衍生物形式的環孢菌素A (參見上文)。對於環孢菌素，適合的固體形式包括但不限於一般熟習此項技術者已知之任何物理形式的純物質形式。例如，環孢菌素可為顆粒形式。顆粒可為非晶形或結晶的，或呈現該兩種形式之混合物，且可製成任何大小，其可分類為粗顆粒、細顆粒或超細顆粒，但不限於此，該等顆粒之尺寸可尤其為肉眼可見的或在顯微鏡下可見的，且具有諸如單個微粒及聚集體之類形狀。顆粒亦可經微粉化。如本文所使用，術語「微粉化」係指大小較小之顆粒，特別是微觀尺寸之顆粒，該等顆粒藉由例如但不限於噴射研磨、顎式破碎、錘磨、濕磨、在非溶劑中沈澱、低溫研磨(在液氮或乾冰下研磨)及球磨來減小粒度。環孢菌素亦可呈溶解或分散之狀態，例如溶解或分散於溶劑內或水性介質中，例如呈分散於水性懸浮液中之顆粒形式，其可視情況包括其他賦形劑，諸如界面活性劑。
如本文所使用，術語「治療有效」係指在投與後產生所希望之治療結果所需的環孢菌素之量。例如，在本發明之上下文中，一個希望之治療結果將為DED相關症狀之減少，例如該減少係藉由一般熟習此項技術者已知之活體內測試量測，諸如Schirmer淚液測試評分增加；如藉由結膜麗絲胺綠染色(conjunctival lissamine green staining)或角膜螢光素染色所量測的染色值減小；在視覺模擬量表(VAS)上眼乾嚴重程度及/或眼乾頻率評分降低；眼表疾病指數及/或標準患者眼乾評估評分降低；以及最佳矯正視敏度降低。在一個實施例中，「治療有效」係指持續釋放淚小管內插入物中能夠在較長時段內達到0.236μg/mL淚液濃度(此被視為免疫調節所需的；Tang-Liu及Acheampong, Clin. Pharmacokinet. 44(3), 第247-261頁)，且特定言之，在達到該淚液濃度後，使該插入物在佩戴期間實質上保持完整的環孢菌素之量。
如本文所使用，值「d10」、「d50」、「d90」及「d100」係指表徵粒度分佈中滿足特定粒度之顆粒之量的值。在給定粒度分佈中，10%顆粒呈現之粒度係d10或更小，50%顆粒呈現之粒度係d50或更小，90%顆粒呈現之粒度係d90或更小，且實質上所有顆粒呈現之粒度係d100或更小。該百分比可以由一般熟習此項技術者已知的不同參數給出，例如該百分比可基於顆粒之體積、重量或數量。因此，d50可以示例性地為基於體積、基於重量或基於數量之中值粒度。例如，基於體積之d90係43 μm意味著，以體積計90%顆粒之粒度係43 μm或更小。在某些實施例中，d10、d50及d90係基於體積之值。粒度分佈PSD通常可藉由一般熟習此項技術者已知之方法量測，且包括篩分法及雷射繞射法。在某些實施例中，PSD係根據USP ＜429＞光繞射粒度量測法中之雷射繞射法量測。在某些實施例中，PSD係使用Beckman Coulter LS 13 320，基於光學模型「Fraunhofer.rf780z」藉由雷射繞射法量測，其中遮光率值(obscuration value)在7至9%範圍內。
如本文所使用，與量測之數量相關的術語「約」係指一般熟習此項技術者在進行量測及付出與量測之物體及量測設備之精度相稱之謹慎程度時所預期的量測之數量的正常變化。
與量測之數量相關的術語「至少約」係指一般熟習此項技術者在進行量測及付出與量測之物體及量測設備之精度相稱之謹慎程度時所預期的量測之數量的正常變化，及高於該數量之任何數量。
除非上下文另有明確指示，否則如本文所使用，單數形式「一個/種(a/an)」及「該」包括複數個/種參考物。
在諸如「A及/或B」之類短語中所使用的術語「及/或」在本文中意欲包括「A及B」及「A或B」。
開放式術語諸如「包括(include/including)」、「含有(contain/containing)」及類似術語意謂「包含(comprsing)」。此等開放式過渡短語用於說明要素、方法步驟或類似物之開放式清單，不排除附加的、未列舉之要素或方法步驟。
I. 淚小管內插入物
根據某些實施例，本發明之淚小管內插入物的特徵在於，該等插入物提供持續釋放，為可生物降解的且包含水凝膠及環孢菌素。
同樣如以上定義部分所概述，在本發明之上下文中，提供持續釋放意味著，該等插入物能夠使環孢菌素在較長時段內可用。插入物係投與至眼中並將環孢菌素緩慢釋放至淚液中。當淚液藉由自淚腺產生新淚液而緩慢更新，替代眼表上已經存在的經由淚管排出之淚液時，存在於插入物中的環孢菌素隨著每次眨眼緩慢釋放至淚液中，無需患者採取任何行動。因此，插入物為傳統滴眼液提供一種有利的無需手操作之替代方案。
典型地，持續釋放維持例如數週，由此可明顯降低當前產品每天多次的給藥頻率(因為該產品係呈易於迅速洗脫的局部用滴眼液形式)。此意味著，患者可以自插入物之治療作用中受益，無需每天數次提醒自己投與滴眼液，這本身即為一個巨大的優勢，而且亦降低由於不凖確滴注或不正確處理/投與引起之不正確給藥的風險以及由於重複使用滴眼液瓶而導致的感染風險。
此外，如以上定義部分中再次概述的，在某些實施例中，本發明插入物係設計成在投與後經預先指定之時間緩慢生物降解。此意味著，該等插入物可以保留在淚小管中且不需要外植。通常，不需要移除該插入物，但患者可以僅僅留下該插入物，直至其被清除。另一方面，在例如過敏反應、佩戴不適或其他不良事件如刺激感等意外事件中，可以藉由施加輕微壓力將插入物經淚點逐出至外部或使插入物沿淚小管進一步向下移動以經由鼻淚管清除來移除(部分生物降解之)插入物。在佩戴時間結束，插入物中之環孢菌素耗盡，由此需要用新插入物更換該插入物以保持治療作用的情況下，移除及/或易於移除之能力亦係有利的。
本發明之淚小管內插入物亦包含水凝膠。如定義部分詳細解釋的，水凝膠能夠吸水並自乾燥狀態轉變為水合狀態。在某些實施例中，水凝膠之水合作用使得插入物改變其形狀。在特定實施例中，插入物之直徑膨脹且長度收縮，使得細棒狀插入物在乾燥狀態下能夠容易地插入淚小管中，且在經投與且正確定位後，其直徑在淚小管中膨脹，由此使其牢固地配合且降低插入物遷移或丟失的風險。儘管牢固地固定在適合位置，但水合插入物柔軟，且因此佩戴舒適。
在某些實施例中，水凝膠包含聚合物網路。以下進一步提供關於聚合物網路之詳情。
例如，U.S. 8,409,606(特此以引用方式併入用於所有目的，在有矛盾的情況下以本說明書為準)中已揭示此類高度溶脹以牢固定位之水凝膠塞的成分。
活性成分：
關於環孢菌素、其化學結構及其特性之詳情提供於以上定義部分中。如其中所概述，環孢菌素實際上不溶於水，且因此，不希望受理論束縛，假設在與淚液接觸時，在生理條件下的低藥物溶解度(約10μg/mL)與接觸淚液之插入物的橫截面積以及淚液之有限體積相結合被認為可調控藥物之釋放速率。
另一方面，覆埋於水凝膠中的環孢菌素之形式及量亦可能影響環孢菌素之溶解以及治療有效釋放速率之實現。
本發明某些實施例之一個態樣係一種包含水凝膠及環孢菌素之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中環孢菌素係呈顆粒形式且其中環孢菌素顆粒分散於水凝膠內。
在本發明之某些實施例中，環孢菌素顆粒均勻地分散於水凝膠內。如本文所使用，分散於水凝膠內係指環孢菌素顆粒係以覆埋於基質內的實質上純之物質形式存在，但不排除會在基質表面上發現少量環孢菌素。在某些實施例中，環孢菌素顆粒形成獨立的疏水相，該疏水相不含除環孢菌素外之其他賦形劑及可能存在於所用活性材料中之任何雜質，且特定言之，其並非指包埋藥物且包含其他材料，諸如油、脂肪、脂肪酸、蠟、碳氟化合物或早前所提出之其他不與水混溶的任何微球、微粒或疏水性微區。以實質上純形式存在的環孢菌素具有易於製造的優點，因為不需要進一步處理活性材料來製備例如微球、微粒或疏水性微區。
在某些實施例中，環孢菌素可具有：在60℃及壓力不超過5毫米汞柱之真空中於毛細管塞瓶中以100 mg測定的不超過1.5% w/w之乾燥失重；不超過0.002%之重金屬含量；如實例2之產品規格部分中所定義的有機雜質，且特定言之，如藉由HPLC所測定的不超過1.5%之所有雜質總和；如藉由HPLC測定的不低於97.0%且不超過101.5%的環孢菌素含量；以及如藉由GC頂隙量測的不超過4500 ppm之殘留丙酮及不超過2000 ppm之殘留乙酸乙酯。
在某些實施例中且亦如實例(具體參見實例2)中所示，本發明之插入物在儲存時穩定，且環孢菌素含量在長期儲存後實質上不改變。
因此，在某些實施例中，在2至8℃溫度下儲存至少3個月後、至少6個月後或至少12個月後藉由HPLC所量測的環孢菌素含量以及在儲存前直接藉由HPLC所量測的初始環孢菌素含量係約300至約410 μg。
在某些實施例中，在2至8℃溫度下儲存至少3個月後、至少6個月後或至少12個月後藉由HPLC量測的環孢菌素含量在儲存前直接藉由HPLC所量測之初始環孢菌素含量的90至110重量%範圍內，或在95至105重量%範圍內，或在98至102重量%範圍內。
在某些實施例中，在2至8℃溫度下儲存至少3個月後、至少6個月後或至少12個月後藉由HPLC所量測的雜質量不超過3.0%。
在本發明之某些實施例中，環孢菌素係顆粒形式。在某些實施例中，顆粒係微粉化顆粒。不希望受理論束縛，咸信環孢菌素顆粒，且特定言之小的環孢菌素顆粒在分散狀態下能夠使活性劑足夠快地溶解以允許快速起效。
在本發明之某些實施例中，如藉由雷射繞射所量測，環孢菌素顆粒具有小於約50μm之d50值，或小於約43μm之d90值，或小於約45μm之d100值。如實例(參見實例1.4)所示，咸信大顆粒對淚小管內插入物之機械特性有影響。此外，大顆粒亦往往會堵塞管子，由此使澆鑄前驅物混合物(如下文進一步概述)變得困難，甚至不可能。
在本發明之某些實施例中，環孢菌素顆粒之d50值範圍為約3至約17 μm，或約4至約12 μm，或約5至約8μm。如實例(參見實例1.4)所示，粒度對插入物之密度、溶脹行為以及表面品質有很大影響，且需要在較小顆粒所能實現之高密度及較光滑之插入物表面與大顆粒之較佳水合作用及溶脹行為之間作出權衡。
在某些實施例中，d50、d90及d100值係指用於製造插入物的環孢菌素顆粒之值，或存在於插入物中的環孢菌素顆粒之值。
就插入物中所含環孢菌素之量而言，在某些實施例中，需要插入物中具有高濃度活性劑，因為此將允許在相同插入物尺寸下，或相同劑量但較小的產品尺寸下有高劑量活性劑(引起持續較長時間及/或以恆定速率進行之持續釋放，下文將進一步論述)，而相同劑量但較小的產品尺寸在投藥便利性及佩戴舒適度方面係較佳的。另一方面，濃度對插入物品質具有不可忽略之影響，如實例1.1中所示。亦即，過高或過低的濃度往往會導致製造的插入物「像吸管(strawed)」，具有較大乾直徑及中空孔。此外，較低的藥物濃度看來會改善溶脹/水合行為。
在本發明之某些實施例中，插入物在乾燥狀態下含有以插入物之總重量計約15重量%至約80重量%，或約30重量%至約65重量%，或約45重量%至約55重量%的環孢菌素。
本發明之一個態樣係一種包含水凝膠及環孢菌素之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中該插入物在乾燥狀態下含有以插入物之總重量計約40重量%至約80重量%的環孢菌素。
就活性劑之絕對量而言，劑量係實現持續釋放的重要因素。
在本發明之某些實施例中，插入物包含在約100 μg至約800 μg範圍內之量的環孢菌素。
環孢菌素係以一定劑量範圍包含在本發明之插入物中，例如約100 μg至約800 μg、約100 μg至約300 μg、約300 μg至約450 μg或約500 μg約 800 µg。可以使用在此等範圍內之任何量，例如約250 μg、約360 μg、約600 μg或約670 μg，所有值還包括+25%及-20%之變異數，或+/- 15%之變異數，或 +/- 10%之變異數。
所揭示的環孢菌素量，包括所提及之變異數在內，係指插入物中活性成分之最終含量，以及在製造插入物時用作起始組分之活性成分的量。
聚合物網路：
如上所述，在某些實施例中，水凝膠包含聚合物網路。水凝膠可由具有官能基之前驅物形成，該等官能基形成交聯以產生此類聚合物網路。聚合物鏈或臂之間的此等交聯可為化學性的(亦即，可為共價鍵)及/或物理性的(諸如離子鍵、疏水性締合、氫橋等)。
聚合物網路可由前驅物製備，該等前驅物係來自一種類型之前驅物或來自能夠反應的兩種或多於兩種類型之前驅物。前驅物係考慮所得水凝膠所希望之特性來選擇。有多種適合的前驅物可用於製造水凝膠。一般而言，形成水凝膠的任何醫藥學上可接受且可交聯之聚合物均可用於本發明之目的。水凝膠且由此併入其中之組分，包括用於製造聚合物網路之聚合物在內，應當為生理上安全的，由此使其不會引起例如免疫反應或其他不良作用。水凝膠可由天然、合成或生物合成聚合物形成。
天然聚合物可包括醣胺聚醣、多醣(例如聚葡萄糖)、聚胺基酸及蛋白質，或其混合物或組合。
合成聚合物一般可為由多種原料，藉由不同類型之聚合反應合成製造的任何聚合物，該聚合反應包括自由基聚合、陰離子或陽離子聚合、鏈增長或加成聚合、縮聚、開環聚合等。該聚合反應可由某些引發劑、由光及/或熱引發，且可由催化劑介導。
一般而言，出於本發明之目的，可使用包含一或多個單元之聚乙二醇(PEG)、聚氧化乙烯、聚氧化丙烯、聚乙烯醇、聚(乙烯基吡咯啶酮)、聚乳酸、聚乳酸-共-乙醇酸、無規或嵌段共聚物或其中任一種之組合/混合物之群的一或多種合成聚合物，但此清單並不意欲作為限制。
為了形成共價交聯之聚合物網路，前驅物可以彼此共價交聯。在某些實施例中，具有至少兩個反應性中心的前驅物(例如在自由基聚合中)可用作交聯劑，因為每個反應性基團均可參與形成不同的生長聚合物鏈。
前驅物可具有呈生物惰性及親水性之部分，例如核心。在分支聚合物之情況下，核心係指分子中與自核心延伸之臂接合的連續部分，其中該等臂帶有官能基，該官能基通常位於臂或分支之末端。多臂PEG前驅物係此類前驅物之實例且在下文中將進一步揭示。
因此，用於本發明之水凝膠可由例如具有第一(組)官能基之一種多臂前驅物及具有第二(組)官能基之另一種多臂前驅物製成。舉例而言，多臂前驅物可具有親水性臂，例如聚乙二醇單元，以一級胺封端(親核試劑)，或者可以具有活性酯端基(親電子試劑)。根據本發明之聚合物網路可含有彼此交聯的相同或不同聚合物單元。前驅物可為高分子量組分(諸如具有官能基之聚合物)或低分子量組分(諸如低分子量胺、硫醇、酯等)。
藉由使用活化基團可以使某些官能基更具反應性。此類活化基團包括(但不限於)羰基二咪唑、磺醯氯、芳基鹵化物、磺基琥珀醯亞胺酯、N-羥基琥珀醯亞胺(NHS)酯、琥珀醯亞胺酯、環氧化物、醛、馬來醯亞胺、醯亞胺酯、丙烯酸酯及類似物。NHS酯係用於交聯親核聚合物，例如一級胺封端或硫醇封端之聚乙二醇的有用基團。NHS-胺交聯反應可在水溶液中並在緩衝液，例如磷酸鹽緩衝液(pH 5.0-7.5)、三乙醇胺緩衝液(pH 7.5-9.0)、硼酸鹽緩衝液(pH 9.0-12)或碳酸氫鈉緩衝液(pH 9.0-10.0)存在下進行。
在某些實施例中，每種前驅物可僅包含親核官能基或僅包含親電子官能基，只要在交聯反應中使用親核前驅物及親電子前驅物兩者即可。因此，例如，若交聯劑僅具有親核官能基，諸如胺，則前驅物聚合物可具有親電子官能基，諸如N-羥基琥珀醯亞胺。另一方面，若交聯劑具有親電子官能基，諸如磺基琥珀醯亞胺，則官能性聚合物可具有親核官能基，諸如胺或硫醇。因此，官能性聚合物，諸如蛋白質、聚(烯丙基胺)或胺封端之雙官能或多官能聚(乙二醇)，亦可用於製備本發明之聚合物網路。
在本發明之一個實施例中，形成水凝膠之聚合物網路的前驅物各自具有約2至約16個親核官能基(稱為官能度)，在該水凝膠中分散有環孢菌素以形成根據本發明之插入物，且在另一個實施例中，前驅物各自具有約2至約16個親電子官能基(稱為官能度)。具有4的倍數個反應性(親核或親電子)基團，因此例如具有4、8及16個反應性基團的反應性前驅物，特別適用於本發明。根據本發明使用的前驅物可具有任何數量個官能基，諸如包括2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15或16個中任一數量個基團，同時確保官能度足以形成充分交聯之網路。
PEG水凝膠：
在本發明之某個實施例中，形成水凝膠之聚合物網路含有聚乙二醇(PEG)單元。此項技術中已知PEG在交聯時形成水凝膠，且此等PEG水凝膠適於醫藥應用，例如作為意欲投與人體或動物體所有部分之藥物的基質。
本發明之水凝膠插入物的聚合物網路可包含一或多個具有2至10個臂、或4至8個臂、或4、5、6、7或8個臂的多臂PEG單元。在某些實施例中，本發明之水凝膠中使用的PEG單元具有4個及/或8個臂。在某些特定實施例中，使用4臂PEG。
所用PEG之臂數有助於控制所得水凝膠之可撓性或柔軟度。例如，由4臂PEG交聯形成的水凝膠一般比由相同分子量之8臂PEG形成的水凝膠要柔軟且更具可撓性。特定言之，若如下文在與插入物之製造相關之部分中所揭示，需要在乾燥之前(或之後)拉伸水凝膠，則可以使用可撓性較高之PEG單元，諸如4臂PEG，視情況結合使用另一種多臂PEG，諸如上文所揭示之8臂PEG，或另一種(不同的)4臂PEG。
在本發明之某些實施例中，用作前驅物之聚乙二醇單元的平均分子量在約2,000至約100,000道爾頓範圍內，或在約10,000至約60,000道爾頓範圍內。在某些特定實施例中，聚乙二醇單元之平均分子量在約10,000至約40,000道爾頓範圍內。在具體實施例中，用於製造根據本發明之水凝膠的聚乙二醇單元具有約20,000道爾頓之分子量。
聚乙二醇及聚乙二醇衍生物的分子量可以藉由若干方法測定，包括凝膠電泳，諸如SDS-PAGE (十二烷基硫酸鈉-聚丙烯醯胺凝膠電泳)；凝膠滲透層析法(GPC)；GPC結合動態光散射(DLS)；以及基質輔助雷射脫附/離子化飛行時間(MALDI-TOF)光譜法。本文所揭示之聚乙二醇前驅物的分子量可藉由一般熟習此項技術者已知的任何方法測定，包括SDS-PAGE、GPC及MALDI-TOF，且特定言之，使用已知分子量(例如由MALDI-TOF測定)及多分散性(例如由GPC測定)之PEG標準品，藉由GPC測定。若需要高精度，則可使用MALDI-TOF。
聚乙二醇之分子量係指平均分子量，其可選自一般熟習此項技術者已知的各種平均值，包括數量平均分子量(Mn)、重量平均分子量(Mw)及峰值平均分子量。在本發明之上下文中，可以使用任何此類平均值，且特別是上述三種平均分子量。在某些實施例中，本文所揭示之聚乙二醇單元及前驅物之平均分子量係以數量平均分子量給出。
如本文所使用，具有特定分子量之多臂PEG單元可縮寫為例如4a20kPEG形式，意思指分子量為20,000之4臂PEG單元。
在4臂PEG中，每個臂的平均臂長(或分子量)可為PEG之總分子量除以4。因此，作為特別適合用於本發明之前驅物，4a20kPEG前驅物具有平均分子量各為約5,000道爾頓的4個臂。因此，可與4a20kPEG前驅物組合使用或作為其替代用於本發明中的8a20k PEG前驅物具有平均分子量各為2,500道爾頓的8個臂。與較短的臂相比，較長的臂可提供較高的可撓性。與臂較短之PEG相比，臂較長之PEG可溶脹得更大。相較於臂數較多的PEG，臂數較少的PEG亦可能溶脹得更大且可能更具可撓性。在某些特定實施例中，本發明僅使用4臂PEG前驅物。在某些特定實施例中，本發明使用兩種不同的4臂PEG前驅物。在某些其他實施例中，本發明使用4臂PEG前驅物及8臂前驅物的組合。此外，較長的PEG臂在乾燥時具有較高的熔化溫度，由此在儲存期間可提供較高的尺寸穩定性。
在某些實施例中，與用於製備本發明之水凝膠的PEG前驅物一起使用的親電子端基係N-羥基琥珀醯亞胺(NHS)酯，包括但不限於NHS二羧酸酯，諸如琥珀醯亞胺丙二酸酯基團、琥珀醯亞胺馬來酸酯基團、琥珀醯亞胺富馬酸酯基團、表示琥珀醯亞胺壬二酸酯端基之「SAZ」、表示琥珀醯亞胺己二酸酯端基之「SAP」、表示琥珀醯亞胺戊二酸酯端基之「SG」及表示琥珀醯亞胺琥珀酸酯端基之「SS」。
因此，在某些實施例中，PEG前驅物係NHS二羧酸酯封端的多臂PEG前驅物，其可由下式表示：
其中n由各別PEG臂之分子量決定，m係0至10之整數，且具體言之為1、2、3、4、5、6、7、8、9或10，且x係臂數(且因此可為例如2、4、8等，見上文)。
當m係1時，每個臂以琥珀醯亞胺琥珀酸酯(SS)端基封端；當m係2時，每個臂以琥珀醯亞胺戊二酸酯(SG)基團封端；當m係3時，每個臂以琥珀醯亞胺己二酸酯(SAP)基團封端；且當m係6時，每個臂以琥珀醯亞胺壬二酸酯(SAZ)基團封端。在此等特定親電子端基存在下，多臂PEG單元可以縮寫為例如4a20kPEG-SAP形式，意思指具有琥珀醯亞胺己二酸酯端基且分子量為20,000(4臂，各約5,000道爾頓)之4臂PEG。在上式中，R係適合提供所需臂數之核心結構。對於4臂PEG單元及前驅物，R可為新戊四醇結構，而對於8臂PEG單元及前驅物，R可為六甘油結構。
在某些實施例中，PEG前驅物係4a20kPEG-SG或4a20kPEG-SAP。
在某些實施例中，與用於製備本發明之水凝膠的含親電子基團之PEG前驅物一起使用的親核端基係胺(表示為「NH
2」)端基。硫醇(-SH)端基或其他親核端基亦係可能的。
在某些實施例中，具有約20,000道爾頓之平均分子量及如上所揭示之親電子端基(諸如SAZ、SAP、SG及SS端基)的4臂PEG交聯形成聚合物網路並因此形成根據本發明之水凝膠。
例如含親核基團之交聯劑與含親電子基團之PEG單元反應，諸如含胺基之交聯劑與含活性酯基之PEG單元反應，產生藉由交聯劑經醯胺基團交聯的多個PEG單元。
對於具有NHS-酯端基之PEG，諸如琥珀醯亞胺壬二酸酯(SAZ)封端、琥珀醯亞胺己二酸酯(SAP)封端或琥珀醯亞胺戊二酸酯(SG)封端之PEG單元(見上文)，與含胺基之交聯劑的反應產生藉由交聯劑經具有下式之可水解連接基團交聯的多個PEG單元：
，其中m係0至10的整數，且具體言之為1、2、3、4、5、6、7、8、9或10。對於SAZ端基，m係6。對於SAP端基，m係3；對於SG端基，m係2；對於SS端基，m係1。
在特定實施例中，本發明使用SG或SAP端基。當與使用其他琥珀醯亞胺端基(SS基團除外)，諸如SAZ端基相比時，SG端基在水凝膠生物降解之前可保持的時間較短，而SAZ端基在連接基團中具有較多數量的碳原子，且由此可能具有較高疏水性，並因此相較於SG端基，不太容易發生酯水解。
在某些實施例中，含親電子基團之多臂聚合物前驅物，且特定言之，具有SG或SAP端基(如上定義)之多臂PEG前驅物與含親核基團之交聯劑交聯。親核基團可為胺，且特定言之為一級胺。
在某些實施例中，含親核基團之交聯劑係含親核基團之多臂聚合物前驅物。
在某些其他實施例中，所使用的交聯劑係含有諸如胺或硫醇端基之類親核端基的低分子量組分。在某些實施例中，含親核基團之交聯劑係分子量低於1,000 Da之小分子胺，其包含兩個或更多個一級脂族胺基。用於本發明之特定交聯劑係例如二離胺酸、三離胺酸、四離胺酸、乙二胺、1,3-二胺基丙烷、1,3-二胺基丙烷、二伸乙基三胺、三甲基六亞甲基二胺、其醫藥學上可接受之鹽、水合物，以及衍生物，諸如結合物(只要存在足夠的供交聯之親核基團)，以及其任何混合物。在某些較佳實施例中，三離胺酸用作交聯劑。應理解，本文所使用的三離胺酸係指任何形式的三離胺酸，包括三離胺酸鹽，諸如乙酸三離胺酸或三離胺酸衍生物，諸如經標記之三離胺酸。
在某些實施例中，含親核基團之交聯劑係經標記之交聯劑，且特定言之為經標記之三離胺酸。交聯劑可以用顯現劑標記以幫助醫師在例如對照檢查過程中確認插入物的存在。螢光團如螢光素、羅丹明、香豆素及花青可用作標記交聯劑之顯現劑。標記可以例如藉由化學結合，且特定言之，藉由使用交聯劑之親核基團與標記結合來實現。由於交聯需要足夠量的親核基團(至少超過一莫耳當量)，故「結合(conjugated/conjugation)」一般包括部分結合，意味著只有一部分親核基團用於與標記結合。因此，在某些實施例中，交聯劑係藉由與顯現劑部分結合進行標記之三離胺酸，其中特定言之，約1%至約20%、或約5%至約10%、或約8%之三離胺酸胺基與顯現劑結合。
在某些實施例中，含親核基團之交聯劑係螢光素結合之三離胺酸。螢光素結合之三離胺酸可藉由使乙酸三離胺酸與N-羥基琥珀醯亞胺(NHS)-螢光素反應獲得。
在某些實施例中，多臂聚合物單元包含4a20kPEG單元且交聯單元包含螢光素結合之三離胺酸醯胺單元。
在某些實施例中，聚合物網路係藉由使4a20kPEG-SG與螢光素結合之三離胺酸以在約1:2至約2:1範圍內之莫耳比反應獲得。在某些其他實施例中，聚合物網路係藉由使4a20kPEG-SS或4a20kPEG-SAZ與螢光素結合之三離胺酸以在約1:2至約2:1範圍內之莫耳比反應獲得。
在某些實施例中，彼此反應的親核端基與親電子端基之莫耳比係約1:1，亦即，每個親電子基團，諸如SG或SAP端基提供一個胺基。在作為含親電子基團之聚合物單元的4a20kPEG-SG或4a20kPEG-SAP及螢光素結合之三離胺酸的情況下，假設三離胺酸平均使用四個一級胺中之一個進行部分結合，三離胺酸則具有三個一級胺基可與親電子SG或SAP酯基反應，由此兩種組分之莫耳比為約1:1。然而，可使用過量的親電子(例如NHS端基，諸如SG)端基前驅物或親核(例如胺)端基前驅物。
因此，在某些實施例中，聚合物網路係藉由使4a20kPEG-SG與螢光素結合之三離胺酸以在約1:2至約2:1範圍內，且特定言之以約1:1之莫耳比反應獲得。
在某些實施例中，聚合物網路係藉由使4a20kPEG-SAP與螢光素結合之三離胺酸以在約1:2至約2:1範圍內之莫耳比，且特定言之以約1:1之莫耳比反應獲得。
界面活性劑：
本發明之一個態樣係一種包含水凝膠及環孢菌素之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中該插入物含有界面活性劑。
如上文進一步概述的，環孢菌素係實際上不與親水性水凝膠材料混溶的疏水性活性劑，且在某些實施例中，其以具有特定粒度之分散顆粒的形式存在。經顯示，就插入物特性而言，一定粒度係有利的。然而，小顆粒亦易於聚集。不希望受理論束縛，咸信界面活性劑之存在可防止聚集並改善水凝膠之含量均一性。
此外，實驗結果指示，界面活性劑之存在有助於防止在插入物製造期間澆鑄之水凝膠發生不希望管粘附(參見實例1.2)並改善插入物之品質。
因此，在某些實施例中，插入物含有界面活性劑。
在某些實施例中，插入物在乾燥狀態下含有以插入物之總重量計約0.01重量%至約5重量%、或約0.01重量%至約2重量%、或約0.2重量%至約2重量%、或約0.05重量%至約0.5重量%之界面活性劑。
如實例1.2中所示，考慮到防止環孢菌素顆粒聚集之能力，界面活性劑類型可能很重要。在某些實施例中，插入物含有非離子型界面活性劑。非離子型界面活性劑可包含聚(乙二醇)鏈。可用於本文中的例示性非離子型界面活性劑係以Tween®市售之聚(乙二醇)脫水山梨糖醇單月桂酸酯(且特定言之，Tween® 20，即PEG-20-脫水山梨糖醇單月桂酸酯；或Tween®80，即PEG-80-脫水山梨糖醇單月桂酸酯)；以Cremophor市售的蓖麻油之聚(乙二醇)酯(且特定言之，Cremophor40，其係PEG-40-蓖麻油)；以及以Tyloxapol市售之乙氧基化4-三級辛基苯酚/甲醛縮聚物。
附加成分：
除了如上所揭示的形成聚合物網路之聚合物單元、活性成分及界面活性劑之外，本發明之插入物還可含有其他附加成分。此類附加成分係例如來源於在水凝膠製備期間使用之緩衝液的鹽，諸如磷酸鹽、硼酸鹽、碳酸氫鹽或其他緩沖劑，諸如三乙醇胺。在本發明之某些實施例中，使用磷酸鈉緩衝液(特別是磷酸二氫鈉及磷酸氫二鈉)。
視情況，防腐劑可用於本發明之插入物中。然而，如實例中另藉助於儲存穩定性測試資料以及展示插入物保持安全之臨床結果所展示，本發明之插入物不需要防腐劑之存在，與例如某些滴眼液形成對比。由於咸信防腐劑亦為引起受試者不適，諸如眼睛刺痛及刺激的原因，故在本發明之一個實施例中，插入物不含或基本上不含防腐劑。
調配物：
在某些實施例中，根據本發明之插入物包含環孢菌素；由一或多種如上文所揭示之聚合物前驅物製成的呈水凝膠形式之聚合物網路；以及視情況選用之附加組分，諸如界面活性劑，而且亦包含插入物中由製造製程殘留之鹽(諸如用作緩衝劑之磷酸鹽等)等。
在某些實施例中，根據本發明之插入物在乾燥狀態下含有以插入物之總重量計約15重量%至約80重量%的環孢菌素及以插入物之總重量計約20重量%至約60重量%的聚合物單元；或以插入物之總重量計約30重量%至約65重量%的環孢菌素及以插入物之總重量計約25重量%至約50重量%的聚合物單元；或以插入物之總重量計約45重量%至約55重量%的環孢菌素及以插入物之總重量計約37重量%至約47重量%的聚合物單元。
在另一個特定實施例中，以乾重計，環孢菌素與PEG的比率以插入物之總重量係約50重量%至60重量%的環孢菌素比約40重量%的PEG，餘量係磷酸鹽及其他賦形劑。
在某些實施例中，呈乾燥狀態之插入物的餘量(亦即，當已計算入環孢菌素、聚合物水凝膠諸如PEG水凝膠，及視情況選用之界面活性劑時，調配物之其餘部分)可為由如以上所揭示之緩衝溶液殘留的鹽。在某些實施例中，此類鹽係磷酸鹽、硼酸鹽或碳酸(氫)鹽。在一個實施例中，緩衝鹽係磷酸鈉(磷酸二氫鈉及/或磷酸氫二鈉)。
環孢菌素及聚合物之量可變化，且環孢菌素及聚合物水凝膠之其他量可用於製備根據本發明之插入物。
在某些實施例中，調配物內藥物之量小於聚合物(例如PEG)單元之量的約兩倍，但在某些情況下可能較高，而且希望包含例如前驅物、緩衝液及藥物(在水凝膠完全膠凝之前的狀態)之混合物可均一地澆鑄於模具或管中。
在本發明之一個實施例中，水凝膠在形成之後且在乾燥之前，亦即在潮濕狀態下，包含約3%至約20%的聚乙二醇，表示聚乙二醇重量除以流體重量×100。在一個實施例中，水凝膠在潮濕狀態下包含約7.5%至約15%的聚乙二醇，表示聚乙二醇重量除以流體重量×100。
在某些實施例中，利用約10%至約30% (w/v)的固體含量(其中「固體」係指溶液中之一或多種聚合物前驅物、鹽及藥物之總重量)形成用於根據本發明之插入物的水凝膠。
在某些實施例中，水凝膠在乾(脫水/經乾燥)狀態下的水含量，例如在插入眼睛淚小管中之前的水含量，可能極低，諸如不超過1重量%水。換言之，在某些實施例中，插入物在乾燥狀態下含有不超過約1重量%之水。在某些實施例中，以插入物之總重量計，水含量亦可低於該值，例如不超過0.25重量%或不超過0.1重量%。
插入物之尺寸及在水合後經由拉伸引起之尺寸變化：
乾燥的插入物可取決於製造方法，諸如模具或管之使用而具有不同的幾何形狀，含包括環孢菌素之水凝膠前驅物的混合物在完全膠凝之前將澆鑄於該模具或管中。在一個實施例中，插入物具有橫截面呈圓形或基本上呈圓形的呈圓柱形或基本上呈圓柱形的形狀。插入物之形狀亦可描述為纖維狀(因為圓柱體之長度遠超過直徑)或桿狀。
根據本發明某些實施例之水凝膠插入物的聚合物網路，諸如PEG網路，在室溫或低於室溫下於乾燥狀態下可為半結晶，而在潮濕狀態下可為非晶形的。甚至在拉伸形式中，乾插入物在室溫或低於室溫下亦可為尺寸穩定的，此可有利於將插入物插入淚小管中。
在插入物於眼中水合後(此可以藉由在37℃下將插入物浸入pH 7.4 PBS中模擬)，根據本發明之插入物的尺寸可能會改變：一般地，插入物之直徑可能會增加，而其長度可能減小或至少可以保持不變或基本上不變。此尺寸變化的一個優點在於，雖然插入物在乾燥狀態下足夠薄以便容易地插入淚小管中，但在將其放入淚小管中後，插入物不僅會變短而改善在淚小管較短之垂直部分及相應的有限可用空間中之佩戴舒適度，而且其直徑亦變大，由此使其緊密配合淚小管壁，將插入物鎖定於適當位置，並由此防止插入物之意外遷移及丟失。由於插入物亦可能變軟，故儘管緊密配合，佩戴起來亦很舒適。在某些實施例中，尺寸變化至少部分地藉由在製造期間藉助於在縱向方向上拉伸插入物而引入插入物中的「形狀記憶」效應來實現(在下文「製造方法」部分中亦有揭示)。在某些實施例中，拉伸可以在乾狀態或潮濕狀態下執行，亦即，在乾燥水凝膠插入物之後，或在乾燥之前執行。需要注意的是，若不執行拉伸，而僅將水凝膠插入物乾燥並切成所需長度，則插入物之尺寸實質上不會發生變化，或者水合後，插入物之直徑及長度皆會增加。若此並非所希望的，則水凝膠纖維可經歷乾拉伸或濕拉伸，亦即，在乾燥之前或之後進行拉伸。具體言之，纖維可以在乾燥之前進行拉伸。
在預先形成之乾燥水凝膠中，可以藉由對材料進行乾拉伸，接著使其固化，鎖定分子定向來賦予一定程度之分子取向。在某些實施例中，此可以藉由牽拉材料(視情況同時將材料加熱至高於該材料可結晶區之熔點的溫度)，接著使該等可結晶區結晶來實現。或者，在某些實施例中，可使用乾燥水凝膠之玻璃化轉變溫度鎖定諸如PVA之類具有適合玻璃化轉變溫度之聚合物的分子定向。另一個替代方案係在完全乾燥之前拉伸凝膠(又稱為「濕拉伸」)，且接著在張力下乾燥材料。分子定向提供在引入水合介質諸如玻璃體中後進行各向異性溶脹的一種機制。在水合時，某些實施例之插入物將僅在徑向維度上溶脹，而長度將減小或保持或基本上保持不變。術語「各向異性溶脹」係指相對於另一個方向，優先在一個方向上溶脹，如在圓柱體中，主要在直徑上溶脹，但在縱向維度上未明顯膨脹(或甚至發生收縮)。
水合時的尺寸變化程度尤其可取決於拉伸因子。如本文所使用，拉伸因子係指在拉伸方向上量測的水凝膠被拉伸之因子，亦即，在即將拉伸前及拉伸後長度而非直徑之變化，不考慮任何最終的進一步尺寸變化(例如由乾燥或再水合引起之尺寸變化)。舉例而言，以例如約1.3之拉伸因子拉伸(例如藉助於濕拉伸)可能具有不太明顯之效果或在水合期間中不會大幅改變長度。相比之下，以例如約1.8之拉伸因子拉伸(例如藉助於濕拉伸)可在水合期間中使長度明顯縮短。以例如4之拉伸因子拉伸(例如藉助於乾拉伸)可在水合時使長度變短(例如長度自15 mm減小至8 mm)。熟習此項技術者應了解，除拉伸之外的其他因素亦可影響溶脹行為。
本發明之一個態樣係一種包含水凝膠及環孢菌素之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，該插入物呈纖維形式，其中該纖維經拉伸。
在某些實施例中，在縱向方向上以約1.0至約4.0、或約1.5至約3.0、或約2.7之拉伸因子拉伸纖維。
影響拉伸水凝膠及在水合時引起插入物之尺寸變化可能性的因素有聚合物網路之組成。在使用PEG前驅物的情況下，相較於臂數較多之PEG前驅物(諸如8臂PEG前驅物)，臂數較少之PEG前驅物(諸如4臂PEG前驅物)有助於使水凝膠具有較高可撓性。若水凝膠含有較多可撓性較低之組分(例如含有較多臂數之PEG前驅物的量較多，諸如8臂PEG單元)，則該水凝膠可能較硬且不太容易在不造成破裂的情況下拉伸。另一方面，含有可撓性較高之組分的水凝膠(諸如含有較少臂數之PEG前驅物，諸如4臂PEG單元)可能更容易拉伸且更柔軟，而且在水合時溶脹程度更大。因此，一旦將插入物放入眼中(亦即，一旦水凝膠變得(再)水合)，即可藉助於改變結構特徵以及在最初形成插入物後，藉由改變該插入物之加工來定制插入物之行為及特性。
下文實例中使用之插入物的例示性尺寸提供於實例部分之
表 2.1中。乾燥插入物之尺寸尤其取決於所併入之環孢菌素的量以及環孢菌素與聚合物單元之比率，且亦可藉由允許水凝膠膠凝之模具或管的直徑及形狀來控制。此外，在插入物形成後，插入物之直徑尤其由(濕或乾)拉伸水凝膠纖維進一步測定。將乾燥纖維(拉伸後)切成所需長度之片段以形成插入物。因此，可以根據需要調整插入物之直徑及長度。另一方面，淚小管之解剖尺寸提供對於要滿足之淚小管內插入物的某些尺寸要求。
在某些實施例中，插入物係呈纖維形式。纖維可具有約1.5 mm至約4.0 mm之平均長度及在其乾燥狀態下不超過0.8 mm之平均直徑；約2.0 mm至約2.5 mm之平均長度及在其乾燥狀態下不超過0.62 mm之平均直徑；或約2.5 mm至約2.9 mm之平均長度及在其乾燥狀態下不超過0.62 mm之平均直徑。
在某些實施例中，且如實例(具體參見實例2)中所示，本發明之插入物在儲存時穩定，且產品尺寸在長期儲存時不會改變或實質上不改變。
因此，在某些實施例中，在2至8℃溫度下儲存至少3個月、至少6個月或至少12個月後，插入物呈平均長度為約2.5 mm至約2.9 mm且在乾燥狀態下平均直徑不超過0.62 mm的纖維形式。
插入物之尺寸可以例如藉由根據併入插入物中之環孢菌素的劑量，選擇適當活性劑濃度來調整。藉由增加活性劑濃度，可以減小插入物之尺寸。另一方面，活性劑濃度亦影響釋放行為以及插入物之特性及品質，諸如溶脹行為或乾燥後的直徑(具體參見實例1.1)。在某些實施例中，發明人意外地發現，插入物尺寸、活性劑濃度及/或劑量之某些組合不僅會產生具有適當溶脹行為，易於製造、易於投與及有高佩戴舒適性的高品質插入物，而且亦在較長時段內提供有效的釋放。
鑑於上述，本發明一個態樣係一種持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其包含水凝膠及約360 μg量之環孢菌素，該插入物呈平均長度為約2.5 mm至約2.9 mm且在其乾燥狀態下平均直徑不超過約0.62 mm之纖維(或圓柱體)形式。本發明之另一態樣係一種持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其包含水凝膠及以插入物之總重量計約45重量%至約55重量%之環孢菌素，該插入物呈平均長度為約2.5 mm至約2.9 mm且在其乾燥狀態下平均直徑不超過約0.62 mm之纖維(或圓柱體)形式。
此類插入物，以及在某些其他實施例中本發明之插入物在活體內於眼睛中，亦即在淚小管中，或在活體外(其中活體外水合係在37℃下於pH 7.4之磷酸鹽緩衝鹽水中24小時後量測)水合後可減小長度且增加直徑，即活體外在37℃下於pH 7.4之磷酸鹽緩衝鹽水中水合10分鐘後，在膨脹狀態下的平均直徑為至少1.0 mm，或活體外在37℃下於pH 7.4之磷酸鹽緩衝鹽水中水合24小時後，在平衡狀態下的平均直徑為至少1.3 mm。在一個實施例中，此類尺寸變化可藉由以約1至約4之拉伸因子、或約1.5至約3.0之因子、或約2.7之因子乾拉伸水凝膠纖維來實現。
在某些實施例中，拉伸由此產生形狀記憶，意味著插入物當投與淚小管中時水合後將縮小長度(又稱為回彈)且增寬直徑，直至其接近(或多或少)其平衡尺寸，該等平衡尺寸係由原始模製尺寸及組成變量決定。雖然狹窄的乾尺寸有助於將產品插入淚小管中，但在投與後增寬之直徑及縮短之長度產生較短且較厚的插入物，該插入物佩戴舒適且仍牢固鎖定於適當位置，由此最大限度地減少意外遷移的風險。因此，在一個態樣中，本發明亦關於一種藉由在縱向方向上拉伸水凝膠混合物纖維來賦予水凝膠混合物纖維形狀記憶的方法，該水凝膠混合物纖維包含環孢菌素顆粒分散於水凝膠中。
活體外釋放：
本發明之插入物中環孢菌素之活體外釋放可藉由各種方法且例如在37℃下，在PBS (磷酸鹽緩衝鹽水，pH 7.4)中之非漏槽模擬生理條件下確定，並每天更換與人眼中之淚液體積相當之體積的PBS。
活體外釋放測試可用於比較不同插入物(例如屬於不同製造批次、具有不同組成及不同劑量濃度等)，例如以實現品質控製或其他定性評定的目的。
活體內釋放及耐久性：
在本發明之一個實施例中，當將本發明之乾燥插入物插入淚小管中時，如上文所揭示，該插入物變得水合且改變其尺寸，且接著隨時間推移而出現生物降解及崩解，直至其完全崩解且任何殘留物自淚管排出。當插入物生物降解，諸如經由酯水解而生物降解時，其可能會逐漸溶脹及軟化。發明人自下文實例部分中所呈現之臨床研究將認識到，根據本發明某些實施例之插入物可保持數月，諸如約2至約4個月或更長時間，亦使環孢菌素能夠經數月持續釋放。
在插入物完全崩解後，任何殘留的未溶解之環孢菌素顆粒均可經由淚液排泄系統排出。因此，若包括足量的環孢菌素，持續插入物完全崩解所需之時間，則持續釋放之時間長度尤其可以藉由調整崩解時間來設計。若在某些實施例中，使用兩個插入物治療一隻眼睛，例如每個下淚小管及上淚小管各一個插入物，以達到希望的總劑量，則該等插入物可設計成經相同或實質上相同之時間崩解。
在某些實施例中，在淚小管中，本發明之插入物在較長時段內，例如在插入後約1至約6個月內，或在插入後約2至約4個月內，或在插入後約2至約3個月內，或在插入後約3至約4個月內崩解。此已在臨床試驗中得到證實，參見實例部分，特定言之，
實例 4。
在一個實施例中，在插入淚小管後，插入物在插入後經至少約1個月、至少約2個月、至少約3個月或至少4個月之時段釋放治療有效量之環孢菌素。
在本發明之一個實施例中，在插入物插入後，環孢菌素係以每天約0.1 µg至每天約10 µg、或每天約1 µg至每天約5 µg、或每天約2 μg至每天約4 µg之平均速率自插入物中釋放。
在本發明之一個實施例中，在插入物插入人類個體後，環孢菌素係以每天約0.1 µg至每天約10 µg、或每天約1 µg至每天約5 µg、或每天約2 μg至每天約4 µg之平均速率自插入物中釋放。
如本文實例部分中所示，在動物中進行之臨床前研究以及在人體中進行之臨床研究顯示，本發明某些實施例之插入物可經較長時段連續釋放治療有效量的環孢菌素，直至插入物完全崩解。然而，在某些實施例中，在插入物完全生物降解之前，插入物中所包含的全部量之環孢菌素已自插入物中釋放。
本發明一個態樣係一種持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其包含水凝膠及約360 μg量的分散於水凝膠內之環孢菌素，其中在插入淚小管後，插入物在插入後經至少約3個月時段釋放治療有效量的環孢菌素。
在某些實施例中，在插入人類個體後，環孢菌素之淚液濃度在約0.1 µg/mL至約10 µg/mL範圍內。
在某些實施例中，在插入插入物後，環孢菌素之淚液濃度在約0.1 µg/mL至約10 µg/mL範圍內，或在約1µg/mL至約5 µg/mL範圍內。
在某些實施例中，在插入物中所包含之環孢菌素顆粒完全溶解之前，插入物於淚小管中崩解。
在某些實施例中，本發明之插入物可設計成在插入後約1至約6個月內，或在插入後約2至約4個月內，或在插入後約2至約3個月內，或在插入後約3至約4個月內於淚小管內崩解。
在一個實施例中，在水凝膠之聚合物網路係基於衍生自NHS酯端基，諸如SG端基、SAP端基或如上所揭示之類似基團的連接基團交聯之情況下，水凝膠在水性環境中及在淚小管內之耐久性尤其取決於可降解酯基附近碳鏈之疏水性。在本文實例中使用之插入物中，該碳鏈包含3或4個碳原子，因為該碳鏈係源自4a20k PEG前驅物之SG及SAP官能基。此可在人眼中分別提供約2至約3個月或約3至約4個月的較長耐久性。在其他實施例中，可使用不同於4a20kPEG-SG-/-SAP及交聯劑三離胺酸之前驅物來製備在人眼中生物降解且具有與實例中舉例說明之插入物類似或不同之耐久性的水凝膠插入物。
在某些實施例中，水凝膠插入物隨著其降解而隨時間軟化，此尤其可取決於水凝膠中交聯PEG單元之連接基團的結構。本申請案實例中使用的由4a20kPEG-SAZ及8a20kPEG-NH
2形成之插入物隨時間相當緩慢地軟化。
釋放機制：
不希望受理論束縛，環孢菌素自本發明之插入物釋放的機制可解釋如下：
如上所概述，疏水性活性劑環孢菌素實際上與親水性水凝膠材料不混溶。在插入物插入並放置於淚小管中後，該插入物就會與淚液接觸，淚液會慢慢吸收並滲透親水性水凝膠。生物降解，亦即水凝膠基質之水解降解導致水凝膠變軟並允許淚液滲透得更遠，但疏水性活性劑，特別是呈均勻分散之環孢菌素顆粒形式的疏水性活性劑，仍被包埋在水凝膠基質中並因在水溶液中之低溶解度而藉由緩慢分配至水凝膠中來釋放。
此外，不希望受特定理論束縛，據信淚液在淚小管內插入物頂部提供流體柱，該流體柱往往會使活性劑釋放受柱塞近端部分之截面積限制。淚小管壁看來以比治療劑經由流體柱耗盡要慢得多的速度釋放藥物，及/或淚小管壁可能會充滿藥物，由此減慢通過壁之釋放。因此，在某些實施例中，如先前所提出的，本發明之淚小管內插入物不需要且特定言之，不包含任何複雜且比較難以製造的屏障或儲庫系統(例如插入物側壁上的塗層阻止並將活性劑之釋放局限於自截面區域之釋放)。
藥物自插入物之截面區域釋放至淚液中可能最先在水凝膠的與液體環境接觸之外部區域發生(亦即，位於水凝膠靠近淚點之區域中的藥物顆粒最先溶解及擴散，而靠近插入物另一端，即靠近淚管的藥物顆粒最後擴散)。因此，在某些實施例中，水凝膠中比較靠近淚點的區域變得沒有藥物顆粒。因此，該區域亦稱為「清除區」，僅限於溶解之藥物，藥物濃度等於或低於藥物之溶解度。
在清除區係在藥物溶解並擴散出水凝膠時形成的某些實施例中，水凝膠的此區域形成空隙並變軟且易破。在藥物自水凝膠中擴散出來的同時，水凝膠亦可藉助於在例如眼睛水性環境中之酯水解而緩慢降解。此降解在整個水凝膠中均一地發生。在降解之晚期階段，水凝膠開始發生變形及侵蝕(如本文所使用，又稱為崩解)。當這種情況發生時，水凝膠變軟且流動性變高(且因此其形狀變得扭曲)，直至水凝膠最終完全崩解，且水凝膠及/或活性劑之任何剩餘部分被淚液排出系統清除。
由於環孢菌素係溶解度相對較低的藥物，故在插入物完全崩解時，未溶解的環孢菌素顆粒可能保留，亦即，在插入物中所包含的環孢菌素顆粒完全溶解之前，插入物可能已在淚小管中崩解，但如上文所概述，在此類情形中，任何殘留的活性劑顆粒均被淚液排出系統清除掉。
然而，在一個實施例中，在水凝膠完全崩解之前，釋放出全部量的環孢菌素。由於水凝膠可以將環孢菌素顆粒保持在適當位置並防止其聚集，故水凝膠中環孢菌素之釋放可以維持相對恆定的速率。
II. 插入物之製造
在某些實施例中，本發明亦關於一種製造本文所揭示之持續釋放可生物降解淚小管內插入物之方法，該插入物包含水凝膠及環孢菌素。在某些實施例中，該方法包括以下步驟：
a) 製備含有水凝膠前驅物之前驅物混合物及分散於該前驅物混合物中之環孢菌素顆粒，
b) 使該前驅物混合物成形，並使該等水凝膠前驅物交聯形成聚合物網路並獲得包含該聚合物網路之成形水凝膠混合物，及
c) 乾燥該水凝膠混合物以提供該插入物。
在一個實施例中，可使用微粉化形式之環孢菌素顆粒製備插入物，亦即，該等環孢菌素顆粒係以微粉化顆粒形式使用及分散以製備前驅物混合物，該等微粉化顆粒均勻分散於該前驅物混合物中。在另一個實施例中，可使用非微粉化形式之環孢菌素製備插入物。關於活性成分環孢菌素之進一步細節已在上文詳細揭示，且在所有態樣均適用於該製造中所使用之活性劑。
用於形成某些實施例之水凝膠的前驅物已在上文關於插入物本身之部分中詳細揭示。
在某些實施例中，在步驟a)中，藉由在微粉化環孢菌素顆粒存在下在緩沖水溶液中混合含親電子基團之多臂聚合物前驅物與含親核基團之交聯劑來製備前驅物混合物。
在某些實施例中，在步驟a)中，藉由將多臂聚合物前驅物溶解於水性緩衝溶液中來製備緩衝水性前驅物溶液，且接著在例如60分鐘內將其與包括含親核基團之交聯劑及微粉化環孢菌素顆粒之緩沖水性前驅物懸浮液混合。
在使用PEG前驅物製備交聯PEG網路之情況下，在某些實施例中，製造插入物之方法可包括在微粉化環孢菌素顆粒存在下，在緩沖水溶液中將含親電子基團之多臂聚乙二醇諸如4a20kPEG-SG或4a20kPEG-SAP與親核基團之交聯劑諸如三離胺酸混合。
在某些實施例中，PEG前驅物中親電子基團與親核基團之莫耳比為約1:1，但親核基團(諸如胺基)亦可在親電子基團過量情況下使用，或反之亦然，例如莫耳比範圍為約1:2至2:1。在某些實施例中，該方法包括使4a20kPEG-SG或4a20kPEG-SAP與螢光素結合之三離胺酸以在約30:1至約50:1範圍內之重量比反應。
如實例1.4中所示，藉由真空脫氣處理前驅物混合物對插入物品質有很大影響。特定言之，可以防止環孢菌素顆粒聚集。因此，在某些實施例中，在步驟a)中，在混合含有環孢菌素顆粒之前驅物混合物之組分後，將其在真空下脫氣。
在某些實施例中，在如上文步驟a)所概述而製備出前驅物混合物後，可在步驟b)中，藉由將該混合物澆鑄至適合模具或管中，隨後使其完全膠凝來使其成形，以便提供所需最終形狀之水凝膠，亦即，在步驟b)中，前驅物混合物之成形由以下組成：在完全交聯之前，將該前驅物混合物填充至模具或管中，以便提供所需最終形狀之水凝膠混合物並使水凝膠前驅物交聯。
在插入物應具有纖維形狀之情況下，可將反應混合物填充至細直徑管，諸如聚胺酯(PU)管中，以便提供延伸之圓柱形狀。取決於所需的水凝膠纖維之最終截面幾何形狀、其初始直徑(該直徑亦可藉由拉伸減小)，且亦取決於反應混合物均勻填充管之能力，可以使用不同幾何形狀及直徑之管。
因此，管內部可具有圓形幾何形狀或非圓形幾何形狀，諸如十字形幾何形狀。管可以具有內徑為例如約1 mm至約3 mm或約2.0 mm之圓形幾何形狀。
在某些實施例中，在水凝膠形成並固化而完成膠凝之後，水凝膠可在潮濕狀態或乾燥狀態下縱向拉伸，此已於上文關於插入物於水合後之尺寸變化的部分中詳細揭示。在某些實施例中，拉伸因子可以在約1至約4.5之範圍內，或在如上文亦揭示之其他範圍內。當在某些實施例中執行乾拉伸時，先乾燥水凝膠，且接著拉伸。當在某些實施例中執行濕拉伸時，水凝膠在潮濕(基本上未乾燥)狀態下拉伸，且接著在張力下乾燥。視情況，可在拉伸時施加熱。又視情況，纖維可另外經扭轉。
在某些實施例中，插入物可藉由以下方式獲得：製備含水凝膠前驅物及環孢菌素之前驅物混合物，將該前驅物混合物填充至管中，使該等水凝膠前驅物在管中交聯以提供呈纖維狀之水凝膠混合物，並拉伸該水凝膠混合物纖維以提供插入物。
在某些實施例中，插入物即使在拉伸之後亦維持其尺寸，只要其在室溫或低於室溫下保持乾燥狀態即可。
在某些實施例中，插入物係單獨包裝及滅菌，例如藉助於γ射線照射滅菌。
拉伸之形狀記憶效應已於上文關於插入物之特性進行詳細揭示。在某些實施例中，水合時收縮之程度尤其取決於上文已揭示之拉伸因子。
在某些實施例中，本發明亦關於一種藉由在縱向方向上拉伸水凝膠混合物纖維來賦予水凝膠混合物纖維形狀記憶的方法，該水凝膠混合物纖維包含分散於水凝膠中之環孢菌素顆粒。
用於本發明此等方法中之拉伸因子可如上文所揭示那樣使用。
III. 療法
在某些實施例中，本發明進一步關於治療或預防有需要患者之眼部疾病的方法，該方法包括向該患者投與如上所揭示的第一持續釋放可生物降解淚小管內插入物，該插入物包含水凝膠及環孢菌素。
在某些實施例中，該第一插入物留在淚小管中直至完全崩解，或在完全崩解之前被移除。在某些實施例中，該第一插入物可設計成在插入後在較長時段內，例如約1至約6個月內、約2至約4個月內、或約2至約3個月內、或約3至約4個月內於淚小管中崩解，但在一些情況下，其將需要更長時間崩解。在正常情況下，由於插入物之崩解不需要患者方採取任何行動，故該插入物可以保留在淚小管中直至完全崩解。此係有利的，因為患者不需要諮詢醫生或配鏡師以便移除插入物。另一方面，持續生物降解將軟化插入物，若發生例如過敏反應、佩戴不適或其他不良事件諸如刺激感等意外事件，則必要時，藉由施加輕微壓力將插入物經由淚點排出至外部或將插入物沿淚小管進一步向下移動以經由鼻淚管清除，由此促進過早移除。此外，第一插入物之柔軟性允許插入第二插入物，而無需預先移除第一插入物。藉由插入第二插入物，將第一插入物進一步推入淚小管中並保留在該處，而不會感到佩戴不適，直至完全崩解，或將第一插入物下推至淚液排出系統。例如，一旦第一插入物之預定治療期已經過去，或者若患者感覺治療效果消失，即可插入第二插入物。
因此，在某些實施例中，第二插入物可在至少1個月或至少2個月後，在未預先移除該第一插入物的情況下插入。在其他實施例中，該第一插入物係在完全崩解之前移除且投與第二插入物以替換移除之第一插入物。
本發明一個態樣係一種治療個體之乾眼病的方法，該方法包括以下步驟：
(a) 將第一可生物降解插入物插入該個體之第一隻眼之第一淚小管中，其中該插入物包含：
(1) 可生物降解水凝膠；
(2) 約100 μg至約800 μg分散於該水凝膠中之環孢菌素；
(3) 其中該環孢菌素自該第一插入物插入該個體之日起經至少約2個月時段以每天約0.1 μg至每天10 µg之平均速率自該插入物釋放；及
(b) 自插入該第一插入物之日起至少約2個月後，將第二插入物插入該個體之第一隻眼之第一淚小管中，其中該第二插入物與該第一插入物類似或實質上類似。
在某些實施例中，該第一插入物係設計成在插入後約2至約3個月內於淚小管中崩解且該第一插入物係在投與後2個月內移除。
在某些實施例中，在至少2個月之治療期內一次投與每隻眼的環孢菌素之劑量係約300 μg至約400 μg環孢菌素。其他適合的劑量於上文進一步揭示。
在某些實施例中，眼部疾病係淚膜及眼表之病症。
在某些實施例中，眼部疾病係乾眼病。在替代實施例中，本發明之插入物及方法可用於治療其他眼表疾病，諸如瞼炎、過敏性結膜炎，且特定言之，異位性角膜結膜炎及春季角膜結膜炎。
在一些實施例中，眼部疾病與一或多種選自由以下組成之群的疾患相關：燒灼感、搔癢、發紅、刺痛、疼痛、異物感、視覺障礙、淚腺發炎、眼表發炎、T細胞介導之發炎、淚液中存在結膜T細胞及淚液中炎性細胞介素含量升高。
在一些實施例中，本發明的包含水凝膠及環孢菌素之持續釋放可生物降解淚小管內插入物可用於預防有發展乾眼病或任何相關疾患之風險之個體，例如佩戴隱形眼鏡之個體的此類眼部疾患。
在一些實施例中，治療有效改善在投與前Schirmer評分小於10 mm之患者的淚液產生，此係藉由Schirmer淚液測試量測；及/或有效減少眼乾症狀，此係藉由一或多種選自由以下組成之群的評定測定：在視覺模擬量表上對眼乾症狀之嚴重程度進行評級；在視覺模擬量表上對眼乾症狀之頻率進行評級；淚膜破裂時間之測定；角膜螢光素染色；結膜麗絲胺綠染色；最佳矯正視敏度；眼表疾病指數之測定；及標準患者眼乾評估。
在一些實施例中，治療有效改善在投與前Schirmer評分小於10 mm之患者的淚液產生，此係藉由Schirmer淚液測試量測。
在某些實施例中，在治療期間一次投與每隻眼的劑量係包含在一個插入物或兩個插入物中。
在某些實施例中，在下淚小管中插入插入物，或在上淚小管中插入插入物，或在下淚小管及上淚小管中各插入一個插入物。插入物可插入淚小管之垂直部分中。
在治療期間一次投與每隻眼之環孢菌素可包含在一個或兩個插入物中。
在某些實施例中，在治療期間一次投與每隻眼的劑量係包含在一個插入物中，例如包含在一個包含約250 μg或約360 μg劑量之環孢菌素的插入物中。
在某些實施例中，插入物可藉助於選自由鉗子、鑷子及施藥器組成之群的抓握裝置插入淚小管中。
在投與兩個插入物之實施例中，插入物係如上文所揭示同時插入。同時插入之插入物可以相同或不同。
在某些實施例中，治療期係至少1個月、至少2個月或至少3個月。根據本發明之一個實施例，「治療期」意思指，本發明之插入物在插入後於該時間段內維持或基本上維持治療效果。換言之，在某些實施例中，僅需要一次插入(本發明插入物之插入)即可在本文稱為「治療期」的較長時段內維持治療效果。與需要每天數次比較頻繁地投藥的當前用於治療乾眼病之滴眼液相比，這是一個相當大的優勢，且由此明顯改善患者之生活品質。
本發明一個態樣係一種治療有需要患者之乾眼病的方法，該方法包括向該患者投與包含水凝膠及環孢菌素之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中眼中淚點閉塞及環孢菌素釋放提供協同作用。
此類協同作用可能在於，當與投與含有環孢菌素且設計成提供相同每日釋放量之環孢菌素的滴眼液相比時，環孢菌素具有較高的生物利用度，環孢菌素之每日釋放量可例如藉由基於環孢菌素淚液濃度隨時間的變化所計算的釋放至淚液中之環孢菌素的量確定。
在某些實施例中，環孢菌素之全身濃度低於可量化之量。由於環孢菌素之全身濃度保持在最低水準，故藥物間相互作用或全身毒性之風險亦保持在最低水準。因此，在一個實施例中，患者服用的額外藥物不會提供顯著風險。這對於常常發生眼部疾病且另外正在服用其他藥物之老年患者尤其有益。
本發明一個態樣係如上文所揭示的包含水凝膠及環孢菌素之持續釋放可生物降解淚小管內插入物在製備用於治療有需要患者的如上文所揭示之眼部疾病，或用於治療有需要患者的如上文所揭示之乾眼病/乾燥性角膜結膜炎之藥劑中的用途。
本發明一個態樣係用於治療有需要患者的如上文所揭示之眼部疾病，或用於治療有需要患者的如上文所揭示之乾眼病/乾燥性角膜結膜炎的如上文所揭示的包含水凝膠及環孢菌素之持續釋放可生物降解淚小管內插入物。
本發明一個態樣係一種增加在投與前Schirmer評分低於 10 mm之患者之淚液產生的方法，該淚液產生係藉由Schirmer淚液測試量測，該方法包括向該患者投與如上文所揭示的包含水凝膠及環孢菌素之持續釋放可生物降解淚小管內插入物。
在某些實施例中，在此類方法中，Schirmer評分可在插入物插入後6週增加至少2 mm或在12週增加至少3 mm。
本發明一個態樣係一種減少眼乾症狀之方法，該等眼乾症狀之減少係藉由一或多種選自由以下組成之群的評定測定：在視覺模擬量表上對眼乾症狀之嚴重程度進行評級；在視覺模擬量表上對眼乾症狀之頻率進行評級；淚膜破裂時間之測定；角膜螢光素染色；結膜麗絲胺綠染色；最佳矯正視敏度；眼表疾病指數OSDI之測定；及標準患者眼乾評估SPEED，該方法包括向該患者投與如上文所揭示的包含水凝膠及環孢菌素之持續釋放可生物降解淚小管內插入物。
在某些實施例中，在此類方法中，總角膜螢光素染色值tCFS可在插入物插入後6週時減小至少1.5或在12週時減小至少3。
在某些實施例中，在此類方法中，在視覺模擬量表對眼乾症狀之嚴重程度進行的評級可在插入物插入後2週時降低至少10，或在6週時降低至少15。
實例
包括以下實例以展示如申請專利範圍中所描述的本發明之某些態樣及實施例。然而，熟習此項技術者應了解，以下描述僅為示例性的，且決不應視為對本發明之限制。
實例1：環孢菌素插入物之製備
本申請案之環孢菌素插入物基本上呈圓柱形(呈纖維狀)，其中環孢菌素均勻地分散並包埋在基於PEG之水凝膠基質中，基於該水凝膠基質在淚液中之低溶解度提供環孢菌素之持續釋放。
I. 實例1.1：藥物濃度評估
為了評估藥物濃度之影響，製備出具有低、中等及高劑量環孢菌素的三種不同調配物。三種調配物之組成示於下
表 1.1.1中。
表1.1.1： 環孢菌素插入物調配物之組成
| 水凝膠前驅物混合物 ( 預乾燥 ) | |||
| 低劑量 | 中等劑量 | 高劑量 | |
| 環孢菌素濃度(% w/w) | 5.12% | 9.90% | 14.58% |
| 4a20K PEG SG濃度(% w/w) | 7.96% | 7.55% | 7.13% |
| 磷酸氫二鈉濃度(% w/w) | 0.55% | 0.52% | 0.50% |
| TLA濃度(% w/w) | 0.22% | 0.21% | 0.20% |
| NHS-螢光素濃度(% w/w) | 0.07% | 0.07% | 0.06% |
| 磷酸二氫鈉濃度(% w/w) | 0.22% | 0.21% | 0.19% |
| 固體含量 | 14.13% | 18.46% | 22.66% |
| 乾燥插入物 | |||
| 載藥量(% w/w) | 36.2% | 53.6% | 64.3% |
低、中等及高劑量之插入物基本上係根據關於研究產品插入物所概述的製造方法製備(參見以下實例1.5)。然而，沒有使用tyloxapol，先將含有環孢菌素之注射器與含有多臂PEG溶液之注射器混合，隨後與含有乙酸三離胺酸(TLA)/螢光素溶液之注射器混合，且不進行真空脫氣。
在澆鑄後，水凝膠立即固化，亦即發生交聯，且接著，拉伸管束並在培養箱中在氮氣流下乾燥。自可撓性管取出乾燥的管束並切成一定長度。尺寸及物理特性如下：
表1.1.2： 低、中等及高劑量插入物之尺寸及物理特性
| 操作名稱 | 乾長度(mm) | 乾直徑1 (mm) | 乾直徑2 (mm) | 乾直徑平均值(mm) | 乾體積(mm 3) | 乾縱橫比(-) | 乾質量(mg) | 乾密度(mg/mm 3) |
| 低劑量 | 3.54 ± 0.51 | 0.56 ± 0.04 | 0.57 ± 0.05 | 0.57 ± 0.04 | 0.92 ± 0.26 | 0.97 ± 0.03 | 0.56 ± 0.15 | 0.61 |
| 中等劑量 | 3.57 ± 0.36 | 0.47 ± 0.03 | 0.68 ± 0.07 | 0.58 ± 0.03 | 0.91 ± 0.15 | 0.7 ± 0.1 | 0.83 ± 0.13 | 0.90 |
| 高劑量 | 3.59 ± 0.34 | 0.81 ± 0.11 | 0.89 ± 0.13 | 0.85 ± 0.12 | 2.09 ± 0.7 | 0.91 ± 0.06 | 0.89 ± 0.3 | 0.43 |
低劑量及高劑量調配物產生具有不希望之「吸管狀」的纖維，亦即，此等纖維具有較大的乾直徑且在纖維中間顯示出中空孔。因此，吸管狀纖維之密度較低。
為了測定纖維之「圓度」，量測粗邊以及細邊上之截面直徑，將較低的直徑值標識為直徑1，將較高的直徑值標識為直徑2，且縱橫比如下計算：
縱橫比 = 直徑1/直徑2
雖然中等劑量調配物沒有顯示出吸管狀現象，但其產生具有極低縱橫比之扁平纖維。縱橫比係0.7，表明缺乏圓度。儘管低劑量及高劑量調配物形成之吸管狀纖維較圓，但低密度產生之纖維比希望的要大得多。如下表1.1.3中所概述，藥物濃度對插入物之水合特性亦有影響：
表1.1.3： 低、中等及高劑量插入物之水合特性
| 操作名稱 | 濕(10分鐘)長度(mm) | 濕(10分鐘)直徑(mm) | 收縮因子(%) | 濕平衡(24小時)長度(mm) | 濕平衡(24小時)直徑(mm) | 收縮因子(%) |
| 低劑量 | 2.46 ± 0.29 | 1.78 ± 0.05 | 30% ± 3% | 2.55 ± 0.34 | 1.86 ± 0.04 | 27.9% ± 2% |
| 中等劑量 | 2.99 ± 0.28 | 1.59 ± 0.09 | 16.3% ± 2.1% | 2.93 ± 0.3 | 1.7 ± 0.09 | 18% ± 1.5% |
| 高劑量 | 3.19 ± 0.3 | 1.61 ± 0.12 | 11.1% ± 2.2% | 3.14 ± 0.26 | 1.63 ± 0.09 | 12.3% ± 2.3% |
可以看出，水合直徑均顯著高於1.45 mm之目標且隨著劑量之增加而減小，且收縮因子亦隨著劑量之增加而減小。
II. 實例1.2：界面活性劑之評估
存在界面活性劑
為了評估插入物中存在界面活性劑之影響，製備出三種不同的調配物，其中一種調配物不含界面活性劑(對照，操作1)，一種含有0.05% Tween
®20 (操作2)，且第三種不含界面活性劑，但使用乙醇製備(操作3)。三種調配物之組成示於下
表 1.2.1中。
表1.2.1： 含及不含界面活性劑之環孢菌素插入物調配物的組成
| 水凝膠前驅物混合物 ( 預乾燥 ) | |||
| 操作 1 | 操作 2 | 操作 3 | |
| 環孢菌素濃度(% w/w) | 9.79% | 9.84% | 10.66% |
| 4a20K PEG SG濃度(% w/w) | 7.56% | 7.58% | 8.24% |
| 磷酸氫二鈉濃度(% w/w) | 0.52% | 0.52% | 0.57% |
| TLA濃度(% w/w) | 0.21% | 0.21% | 0.22% |
| NHS-螢光素濃度(% w/w) | 0.07% | 0.07% | 0.07% |
| 磷酸二氫鈉濃度(% w/w) | 0.21% | 0.21% | 0.21% |
| Tween® 20 濃度(% w/w) | 0.000% | 0.050% | 0.000% |
| 固體含量 | 18.35% | 18.48% | 19.98% |
| 4a20K PEG SG濃度(% w/w) | 9.27% | 9.30% | 9.28% |
| 乾燥插入物 | |||
| 載藥量(% w/w) | 53.3% | 53.3% | 53.4% |
操作1至3之插入物基本上根據關於研究產品插入物所概述之製造方法製備(參見以下實例1.5)，亦即，藉由製備一種在乙酸三離胺酸(TLA)/螢光素水溶液中含有環孢菌素懸浮液的水凝膠懸浮液前驅物注射器(操作1：不含tyloxapol；操作2：含有Tween
®20代替tyloxapol；操作3：不含tyloxapol，但溶解於乙醇而非水中)及第二種含有多臂PEG水溶液之水凝膠溶液前驅物注射器，將該兩個注射器混合，且接著藉由注射液體懸浮液將其澆鑄至一組可撓性管件中，隨後使該材料交聯並凝固。不進行真空脫氣。在澆鑄後，水凝膠立即固化，亦即發生交聯，且接著，拉伸管束並在培養箱中在氮氣流下乾燥。自可撓性管取出乾燥的管束並切成一定長度。尺寸及物理特性如下：
表1.2.2： 含及不含界面活性劑之插入物的尺寸及物理特性
| 操作編號 | 乾長度(mm) | 乾直徑1 (mm) | 乾直徑2 (mm) | 乾直徑平均值(mm) | 乾縱橫比(-) | 乾質量(mg) | 乾密度(mg/mm 3) | |
| 無界面活性劑 | 1 | 3.12 ± 0.03 | 0.41 ± 0.02 | 0.72 ± 0.04 | 0.57 ± 0.02 | 0.57 ± 0.05 | 0.76 ± 0.05 | 1.02 |
| 0.05% Tween-20 | 2 | 3.16 ± 0.03 | 0.53 ± 0.02 | 0.54 ± 0.01 | 0.53 ± 0.01 | 0.96 ± 0.01 | 0.76 ± 0.05 | 1.07 |
| 乙醇 | 3 | 3.3 ± 0.18 | 0.76 ± 0.12 | 0.79 ± 0.18 | 0.77 ± 0.15 | 0.95 ± 0.06 | 1.63 ± 0.62 | 1.01 |
為了測定纖維之「圓度」，量測粗邊以及細邊上之截面直徑，將較低的直徑值標識為直徑1，將較高的直徑值標識為直徑2，且縱橫比如下計算：
縱橫比 = 直徑1/直徑2
可以看出，添加Tween
®20產生高縱橫比，表明纖維呈圓形。其平均直徑小於對照且密度較高，此有利於容易地插入產品。操作1之對照纖維在乾燥期間粘在管上且具有低縱橫比，表明纖維係扁平的(參見
圖 1.2A)。
操作3研究乙醇之使用，遇到了重大問題。溶液在固化開始後1分鐘內開始蒸發，在纖維中產生氣泡。當自培養箱中取出時，纖維全部斷裂及變形，如
圖 1.2B中所示。
在界面活性劑存在下的藥物濃度
為了評估在界面活性劑存在下藥物濃度之影響，在0.05% Tween
®20存在下，用低、中等及高劑量環孢菌素製備三種不同的調配物。三種調配物之組成示於下
表 1.2.3中。
表1.2.3： 包含界面活性劑之環孢菌素插入物調配物的組成
| 水凝膠前驅物混合物 ( 預乾燥 ) | |||
| 低劑量 | 中等劑量 | 高劑量 | |
| 環孢菌素濃度(% w/w) | 5.70% | 10.84% | 15.20% |
| 4a20K PEG SG濃度(% w/w) | 7.87% | 7.45% | 7.08% |
| 磷酸氫二鈉濃度(% w/w) | 0.54% | 0.51% | 0.49% |
| TLA濃度(% w/w) | 0.22% | 0.20% | 0.19% |
| NHS-螢光素濃度(% w/w) | 0.07% | 0.07% | 0.06% |
| 磷酸二氫鈉濃度(% w/w) | 0.21% | 0.20% | 0.19% |
| Tween ®20濃度(% w/w) | 0.053% | 0.051% | 0.049% |
| 固體含量 | 14.67% | 19.33% | 23.27% |
| 4a20K PEG SG濃度(% w/w) | 9.23% | 9.23% | 9.23% |
| 乾燥插入物 | |||
| 載藥量(% w/w) | 38.9% | 56.1% | 65.3% |
操作1至3之三個插入物係基本上根據關於研究產品插入物所概述之製造方法製備(參見以下實例1.5)，但使用Tween® 20代替tyloxapol。不進行真空脫氣。在澆鑄後，水凝膠立即固化，亦即發生交聯，且接著，拉伸管束並在培養箱中在氮氣流下乾燥。自可撓性管取出乾燥的管束並切成一定長度。不進行滅菌。尺寸及物理特性如下：
表1.2.4： 包含界面活性劑之插入物的尺寸及物理特性
| 乾長度(mm) | 乾直徑1 (mm) | 乾直徑2 (mm) | 乾直徑平均值(mm) | 乾體積(mm3) | 乾縱橫比(-) | 乾質量(mg) | 乾密度(mg/mm 3) | |
| 低劑量 | 2.72 ± 0.03 | 0.47 ± 0.02 | 0.47 ± 0.02 | 0.47 ± 0.02 | 0.48 ± 0.04 | 0.98 ± 0.01 | 0.54 ± 0.05 | 1.13 |
| 中等劑量 | 2.73 ± 0.02 | 0.57 ± 0.02 | 0.56 ± 0.01 | 0.56 ± 0.01 | 0.69 ± 0.04 | 0.95 ± 0.03 | 0.72 ± 0.04 | 1.05 |
| 高劑量 | 2.71 ± 0.03 | 0.64 ± 0.07 | 0.65 ± 0.05 | 0.64 ± 0.05 | 0.89 ± 0.14 | 0.92 ± 0.08 | 0.87 ± 0.14 | 0.98 |
縱橫比均高於0.9，表明纖維呈圓形。乾纖維直徑隨著劑量之增加而增加。然而，乾纖維直徑均略有增加，此可能與纖維密度有關，纖維密度隨著劑量之增加而降低。
圖 1.2C顯示在此操作中製造之乾插入物及水合插入物。可以看出，藥物濃度越高，似乎發生的聚集就越多。
下表1.2.5顯示在37℃下用PBS水合後10分鐘及24小時水合插入物之特徵。可以看出，水合直徑及收縮因子均隨著劑量之增加而減小。此表明，藥物含量對再水合率有明顯不利影響。
表1.2.5： 低、中等及高劑量插入物之水合特性
界面活性劑類型
| 濕(10分鐘) | 濕平衡(24小時) | |||||
| 長度(mm) | 直徑(mm) | 收縮因子(%) | 長度(mm) | 直徑(mm) | 收縮因子(%) | |
| 低劑量 | 2.11 ± 0.09 | 1.65 ± 0.04 | 22.4% ± 2.8% | 2.14 ± 0.12 | 1.74 ± 0.05 | 21.5% ± 4.1% |
| 中等劑量 | 2.49 ± 0.04 | 1.46 ± 0.03 | 8.7% ± 1.8% | 2.47 ± 0.03 | 1.49 ± 0.02 | 9.1% ± 1.7% |
| 高劑量 | 2.62 ± 0.05 | 1.37 ± 0.04 | 3.3% ± 1.9% | 2.56 ± 0.08 | 1.41 ± 0.06 | 5.4% ± 3.5% |
為了解決聚集的問題，確定各種界面活性劑對環孢菌素粒度的影響。根據FDA指南，在最大界面活性劑濃度下測試界面活性劑。
在玻璃小瓶中，藉由將PBS添加至已知重量之界面活性劑中來製備含0.05% Tween
®20 (PEG-20脫水山梨醇單月桂酸酯)、4% Tween
®80 (PEG-80脫水山梨糖醇單月桂酸酯)、0.5% Cremophor RH 40 (PEG-40氫化蓖麻油)及0.3%Tyloxapol(乙氧基化4-三級辛基苯酚/甲醛縮聚物)之儲備溶液。接著，對界面活性劑溶液進行渦旋及音波處理。在小瓶中，藉由將約1 mL界面活性劑/緩衝劑儲備溶液添加至約100 mg環孢菌素中來製備含有約9-10% (w/w)環孢菌素之溶液。對照係用蒸餾水(DIW)或磷酸鹽緩衝鹽水(PBS)製備且不含界面活性劑。接著，將該溶液渦旋並使用基於光學模型「Fraunhofer.rf780z」之Beckman Coulter LS 13 320，藉由雷射繞射法量測粒度，其中遮光率值在7至9%範圍內。
表1.2.6顯示溶液濃度及粒度。可以看出，使用界面活性劑使粒度明顯減小，表明聚集減少。在測試的界面活性劑中，Tyloxapol顯示出最大幅度的粒度減小。此外，使用tyloxapol量測之粒度與供應商提供的粒度最為接近，供應商指出D10、D50及D90分別為0.5、2.1及7.5 µm。
表1.2.6： 界面活性劑對環孢菌素粒度之影響
I. 實例1.3：真空脫氣評估
| 界面活性劑溶液 | 環孢菌素規格 | ||||||
| 界面活性劑 | - (DIW) | - (PBS) | Tween® 20 | Tween® 80 | Chemophor RH 40 | Tyloxapol | |
| 添加界面活性劑(mg) | 0 | 0 | 4.1 | 201.87 | 36.7 | 11.16 | |
| 界面活性劑濃度(%) | 0.000% | 0.000% | 0.050% | 3.826% | 0.496% | 0.298% | |
| 環孢菌素A濃度(%) | 9.782% | 9.581% | 9.654% | 9.711% | 8.683% | 10.128% | |
| D90 [平均值] (µm) | 31.6 | 31.8 | 26.7 | 22.7 | 9.5 | 5.4 | 7.5 |
| D50 [平均值] (µm) | 17.4 | 16.9 | 11.8 | 4 | 3 | 2.3 | 2.1 |
| D10 [平均值] (µm) | 4 | 4.1 | 1.7 | 1.1 | 0.9 | 0.9 | 0.5 |
| D90 [StDev] (微米) | 2.8 | 2.4 | 1.7 | 13.4 | 0.1 | 0.1 | |
| D50 [StDev] (µm) | 1.6 | 1.9 | 0 | 0.1 | 0.1 | 0.1 | |
| D10 [StDev] (µm) | 0.6 | 0.8 | 0 | 0 | 0 | 0 |
為了評估真空脫氣之作用，對於Tyloxapol用0.3% (w/w)濃度且對於4a20k PEG-SG用9% (w/v)濃度之水凝膠前驅物混合物製備出600μg劑量之環孢菌素插入物。插入物調配物之組成如下
表 1.3.1中所示。
表1.3.1 用於評估真空脫氣之環孢菌素插入物調配物的組成
| 水凝膠前驅物混合物 ( 預乾燥 ) | 乾插入物 | |
| 環孢菌素濃度(% w/w) | 15.34% | 64.825% |
| 4a20K PEG SG濃度(% w/w) | 7.10% | 30.013% |
| 磷酸氫二鈉濃度(% w/w) | 0.49% | 2.077% |
| TLA濃度(% w/w) | 0.20% | 0.829% |
| NHS-螢光素濃度(% w/w) | 0.06% | 0.271% |
| 磷酸二氫鈉濃度(% w/w) | 0.18% | 0.759% |
| Tyloxapol濃度(% w/w) | 0.290% | 1.225% |
| 固體含量 | 23.67% | 100.000% |
| 乾燥插入物 | ||
| 載藥量(% w/w) | 64.8% |
除了以下有關在混合各組分之後且在與含PEG之水凝膠溶液前驅物進一步混合之前處理含有環孢菌素、tyloxapol及乙酸三離胺酸/螢光素之水凝膠懸浮液前驅物注射器之詳情外，使用相同的製造方法製備出三組不同的插入物。
對於第一組插入物，包含在注射器中的水凝膠懸浮液係藉由以下方式處理：(i)灌注該注射器(遵循所有調配物之慣例進行)，將懸浮液渦旋3分鐘並手動脫氣。手動脫氣係藉由退出用蓋封閉之注射器柱塞以產生真空，且接著打開注射器，由此釋放真空並使大氣泡破裂來進行。作為下一步驟(ii)，將水凝膠懸浮液前驅物放入真空室中並脫氣，隨後與水凝膠溶液前驅物混合。用於第二組插入物之水凝膠懸浮液前驅物係基本上以相同的方式處理，不過該水凝膠懸浮液前驅物在步驟(ii)之後的步驟(iii)中進一步進行音波處理。用於第三組插入物之水凝膠懸浮液前驅物係以與第二組相同的方式製備，但省略步驟(ii)在真空室中脫氣。下表1.3.2中給出製備步驟之概述。
表1.3.2： 真空脫氣評估
| 步驟 | 第一組插入物 | 第二組插入物 | 第三組插入物 |
| (i)灌注注射器，渦旋3分鐘，接著手動脫氣 | 是 | 是 | 是 |
| (ii)在真空室中脫氣 | 是 | 是 | 否 |
| (iii)音波處理 | 否 | 是 | 是 |
僅藉由真空脫氣獲得的第一組插入物幾乎沒有聚集體。藉由真空脫氣及音波處理獲得的第二組插入物具有許多較大的聚集體且無法裝入切割裝置中。藉由音波處理但未真空脫氣而獲得的第三組插入物有一些聚集體，但看起來其他方面均很好(
圖 1.3)。
II. 實例1.4：藥物粒度之評估
已製備出其他插入物來評估及測定藥物物質之最佳粒度。
篩分環孢菌素大顆粒之作用
為了評估篩分排除較大顆粒之作用，對於Tyloxapol用0.3% (w/w)濃度且對於4a20k PEG-SG用9% (w/v)濃度之水凝膠前驅物混合物製備出400μg劑量之環孢菌素插入物。插入物調配物之組成如下
表 1.4.1中所示。
表1.4.1 用於評估篩分作用的環孢菌素插入物調配物之組成
| 水凝膠前驅物混合物 ( 預乾燥 ) | 乾插入物 | |
| 環孢菌素濃度(% w/w) | 9.818% | 53.010% |
| 4a20K PEG SG濃度(% w/w) | 7.530% | 40.656% |
| 磷酸氫二鈉濃度(% w/w) | 0.525% | 2.833% |
| TLA濃度(% w/w) | 0.206% | 1.110% |
| NHS-螢光素濃度(% w/w) | 0.069% | 0.371% |
| 磷酸二氫鈉濃度(% w/w) | 0.065% | 0.351% |
| Tyloxapol濃度(% w/w) | 0.309% | 1.670% |
| 固體含量 | 18.521% | 100.000% |
| 乾燥插入物 | ||
| 載藥量(% w/w) | 53.01% |
對所使用的環孢菌素進行篩分並使用下表1.4.1中所示之粒度級分。在製造過程中，某些澆鑄管束斷裂且無法使用，亦概述於下表1.4.2中。每個插入物之乾密度及載藥量示於圖1.4A中。
表1.4.2 所用粒度級分及澆鑄管束之斷裂失敗
* 鑑別出斷裂失敗之其他原因，例如在澆鑄過程中凝膠中夾帶有空氣
| 級分1 | 級分2 | 級分3 | |
| 粒度級分 | 25 – 32 μm | 32 – 53μm | 53 – 76μm |
| 澆鑄管束之斷裂失敗率 | 1/2* | 1/6 | 所有管束均斷裂 |
由此可以得出結論，高粒度具有嚴重的負面影響。
環孢菌素粒度對水合作用、乾密度及機械故障之影響
為了評估不同粒度之影響，使用具有五種不同粒度分佈 (PSD)之微粉化環孢菌素顆粒製備插入物。五種調配物之組成示於下
表 1.4.3中。
表1.4.3： 環孢菌素插入物調配物之組成
| 水凝膠前驅物混合物( 預乾燥) | |||||
| 小粒度1 | 小粒度2 | 中等-小粒度 | 中等粒度 | 大粒度 | |
| 環孢菌素濃度(% w/w) | 9.88% | 14.01% | 9.78% | 9.86% | 9.89% |
| 多臂PEG 4a20K PEG SG 4a20K PEG SAP 濃度(% w/w) | 7.58% - | 3.79% 3.97% | 3.77% 3.79% | 3.77% 3.77% | 3.78% 3.78% |
| 磷酸氫二鈉濃度(% w/w) | 0.52% | 0.50% | 0.52% | 0.52% | 0.52% |
| TLA濃度(% w/w) | 0.21% | 0.20% | 0.21% | 0.21% | 0.21% |
| NHS-螢光素濃度(% w/w) | 0.07% | 0.07% | 0.07% | 0.07% | 0.07% |
| 磷酸二氫鈉濃度(% w/w) | 0.07% | 0.06% | 0.07% | 0.07% | 0.07% |
| Tyloxapol濃度(% w/w) | 0.31% | 0.29% | 0.31% | 0.31% | 0.31% |
| 固體含量 | 22.34% | 22.34% | 18.66% | 18.58% | 18.63% |
| 乾燥插入物 | |||||
| 載藥量(% w/w) | 53.00% | 62.70% | 52.43% | 53.07% | 53.07% |
所用環孢菌素之d10、d50及d90值示於下表1.4.4中。
表1.4.4： 所用環孢菌素之粒度
| 小粒度1 | 小粒度2 | 中等-小粒度 | 中等粒度 | 大粒度 | |
| d10 [μm] | 1.0 | 1.1 | 1.3 | 1.5 | 1.8 |
| d50 [μm] | 4.4 | 5.57 | 8.7 | 12.3 | 17.9 |
| d90 [μm] | 28.9 | 37.6 | 34.8 | 38.4 | 43.2 |
在製造後觀察到以下：用較大CSI顆粒製備之插入物往往具有較大的乾直徑(參見
圖 1.4B)，而密度隨CSI粒度增加而減小(參見
圖 1.4C)。較小的CSI顆粒產生較光滑的插入物表面(參見
圖 1.4D，顯示在帶相機之立體顯微鏡下拍攝的顯微圖像)。表面上具有小顆粒及小/中等顆粒之插入物看起來被PEG覆蓋。在用中等及大顆粒製備的插入物上發現具有明顯不規則性及變形的粗糙表面。中等顆粒在乾燥期間引起的斷裂率最高。較大的顆粒產生較佳的水合行為及溶脹(參見
圖 1.4E)。
總之，雖然較大的顆粒改善溶脹及回彈，但其亦導致較多的管束斷裂。此外，高劑量調配物展示的斷裂率要高於低劑量及中等劑量調配物，且經由篩分移除極大微粒(＞45微米)使斷裂率明顯改善。
總而言之，介於「小粒度」與「中等粒度」之間的粒度平衡了小顆粒的密度增益及纖維光滑度以及中等顆粒的再水合率，由此減少管束斷裂。
III. 實例1.5：支持臨床試驗之插入物的製備
在下文中，將描述用於人類臨床研究(調配物1、2A、2B及3，參見實例4)及高劑量比格犬研究(調配物4A及4B，參見實例3.6)之研究產品插入物的製備。研究產品插入物係基於：基於PEG-SG之中等耐久性環孢菌素/水凝膠調配物(調配物1及4A，設計成持續約2至3個月)；基於PEG-SAP之長耐久性環孢菌素/水凝膠調配物(調配物2A及4B，設計成持續約3至4個月)；以及兩種不含環孢菌素之水凝膠媒劑(HV)調配物作為安慰劑，一種為基於PEG-SAP之長耐久性調配物(調配物2B，設計成持續約3至4個月)且一種基於PEG-SS之短耐久性調配物(調配物3，設計成持續約1週)。
含環孢菌素之插入物的目標直徑係0.55 mm ± 0.03 mm且目標長度為2.72 mm ± 0.08 mm，而HV插入物的目標直徑係0.41 mm ± 0.05 mm且目標長度為2.72 mm ± 0.08 mm。該等調配物之組成示於下
表 1.5中。
表1.5 環孢菌素研究產品插入物調配物之組成
I. 製備程序之簡述
| 成分 | 標稱組成(μ g ，以乾重計) | |||||
| 調配物1 ，SG | 調配物2A ，SAP | 調配物2B ，SAP | 調配物3 ，SS | 調配物4A SG | 調配物4B SAP | |
| 環孢菌素 | 384 | 390 | 0 | 0 | 773 | 772 |
| PEG 4臂20K PEG SG 4臂20K PEG SAP 4臂20K PEG SS | 295 - - | - 300 - | - 307 - | - - 350 | 389% - - | - 389% - |
| 乙酸三離胺酸 | 8 | 8 | 8 | 10 | 11 | 11 |
| 磷酸氫二鈉，USP | 21 | 56 | 58 | 24 | 27 | 27 |
| 磷酸二氫鈉，USP | 3 | 3 | 3 | 3 | 3 | 3 |
| NHS-螢光素 | 3 | 3 | 3 | 3 | 4 | 4 |
| Tyloxapol，USP | 12 | 12 | 13 | 14 | 16 | 16 |
| 總計 | 725 | 771 | 390 | 404 | 1222 | 1221 |
為了形成含環孢菌素之插入物的聚合物網路，製備出兩個前驅物注射器：一個在tyloxapol及乙酸三離胺酸(TLA)/螢光素溶液中含有環孢菌素懸浮液的水凝膠懸浮體前驅物注射器，以及第二個含有多臂PEG(基於新戊四醇核心結構之4臂20K PEG，含有胺反應性NHS基團)溶液的水凝膠溶液前驅物注射器。將兩個注射器混合，且接著藉由注射液體懸浮液，將其澆鑄至一小組可撓性管件中，隨後使材料交聯及凝固。在澆鑄後，水凝膠立即固化，亦即發生交聯。接著，拉伸含有包埋於水凝膠網路內之環孢菌素的管束且在培養箱中在氮氣流下乾燥。自可撓性管中取出乾燥的管束，切成一定長度，並儲存於小瓶中。接著，將藥品包裝於保護性發泡體載體中，該載體在氮氣環境下熱封至層壓箔袋中。對於含有環孢菌素之調配物使用電子束輻射且對於HV調配物使用γ射線照射，對藥品進行滅菌。
HV安慰劑插入物係以相同方式製備，不過所用賦形劑之量係根據表1之組成(多臂PEG變化)進行調整，且特定言之，不使用環孢菌素。
II. 水凝膠懸浮液前驅物注射器之製備
除了多臂PEG之類型及所用磷酸氫二鈉之量之外，對調配物1及2A使用相同的程序及數量。對於調配物4及5，亦根據上表1.5中給出之組成調整環孢菌素之量。
水凝膠懸浮液前驅物注射器由兩個不同的額外前驅物注射器之混合物組成。
一個注射器含有懸浮於tyloxapol溶液中之微粉化環孢菌素，其係藉由稱取704.8 mg ± 5.0 mg微粉化環孢菌素(d50：5~8μm；d100：≤45μm)並使其懸浮於2,775.0 mg ± 20.0 mg的0.8 wt%tyloxapol於注射用水(WFI)中之溶液中來製備。對於HV調配物(調配物2B及3)，注射器僅含0.8 wt%之tyloxapol溶液。
另一個注射器含有經磷酸氫二鈉緩衝之三離胺酸-螢光素結合物溶液，其係藉由以下製備：(i)將25.0 mg ± 0.5 mg NHS-螢光素與8,025.0 mg ± 5.0 mg的在9,750.0 ± 10.0 mg WFI中包含97.5 mg ± 2.5 mg乙酸三離胺酸及243.75 mg ± 2.5 mg (調配物1及3)或690 mg ± 5.0 mg (調配物2A及2B)磷酸氫二鈉之溶液混合；(ii)使所得混合物在室溫下反應1至24小時；(iii)過濾該溶液；及(iv)填充注射器，其中每個注射器填充所得溶液之1,575.0 mg ± 10.0 mg部分。步驟(ii)中反應之完成係藉由反相(RP) HPLC方法，使用UV偵測來確認，該方法允許藉由滯留時間(RT)區分未反應之組分與產物醯胺。在步驟(ii)之後，沒有RT與NHS-螢光素一致(RT ≈ 6.6分鐘)的可量化之峰保留，且在較高RT (RT為約8.2 分鐘)處出現由產物醯胺之形成所產生的新峰。在最初的研究中，結果展示在1小時後轉化為醯胺，且顯示反應產物在溶液中可穩定保持長達7天(
圖 2)。
將兩個額外的前驅物注射器用母到母魯爾鎖連接器連接在一起，且其內容物藉由在各注射器之間來回傳遞總共25次而混合在一起，由此形成水凝膠懸浮液前驅物注射器。將USPTyloxapol添加至用於懸浮環孢菌素之溶液中，以幫助分散環孢菌素並減少任何聚集，因為環孢菌素極難溶於水並易於聚集，且亦幫助防止水凝膠混合物粘附至管內壁上，而水凝膠混合物粘附被認為是產生具有低縱橫比之扁平形狀插入物的原因。
III. 水凝膠溶液前驅物注射器之製備
水凝膠溶液前驅物注射器含有PEG之緩衝溶液，該緩衝溶液係藉由將1,565.0 mg ± 10.0 mg的在7,985.0 mg ± 50.0 mg WFI中包含24.5 mg ± 1.0 mg磷酸二氫鈉之溶液與542.0 mg ± 5.0 mg的4a20K PEG-SG (具有N-羥基琥珀醯亞胺戊二酸酯端基之4臂20 kDa PEG，用於調配物1)或4a20K PEG-SAP (具有N-羥基琥珀醯亞胺己二酸酯端基之4臂20 kDa PEG，用於調配物 2A)組合來製備。
IV. 澆鑄、拉伸及乾燥
為了形成水凝膠/環孢菌素懸浮液，先藉由將包含環孢菌素、tyloxapol及三離胺酸-螢光素結合物之水凝膠懸浮液前驅物注射器，以及包含4a20k PEG-SG、4a20k PEG-SAP或4a20k PEG-SS之水凝膠溶液前驅物注射器放入真空室中並暴露於程式化真空循環進行脫氣，且接著將其用與母到母魯爾鎖連接器連接。藉由在各注射器之間來回傳遞總共25 次，將前驅物注射器之內容物混合在一起，並將由此產生的水凝膠/環孢菌素懸浮液轉移至一個注射器中。
接著，將水凝膠/環孢菌素懸浮液注射器連接至在內徑為2.0 mm且外徑為2.8 mm的經高壓釜滅菌之聚胺酯管上之倒鉤配件，切割成適當的長度，並經由所製備之管澆鑄懸浮液，隨後使材料交聯並凝固。
在管裝滿後，就將管自注射器中移除，並封蓋該管上之倒鉤配件。膠凝時間係藉由執行凝膠輕敲測試來確認。在凝膠輕敲測試中，將少量殘留的水凝膠/環孢菌素懸浮液放置於載玻片上並用移液器尖輕敲，直至懸浮液開始凝成股，表明當懸浮液膠凝時，聚合在約2-8分鐘內開始(亦即，在完整輕敲循環期間保持連接至移液器尖)。
將填充有水凝膠/環孢菌素懸浮液之管子，在下文中稱為「澆鑄之管束(casted strands)」，垂直放入且儲存於固化室(環境溫度及濕度)，保持3至6小時，以使凝膠固化。
固化時間結束後，將澆鑄之管束放置於拉伸夾具中並用動態夾板固定於適當位置。將澆鑄之管束拉伸至拉伸夾具之固定長度，該長度係約初始管長度之2.7倍。接著，將拉伸夾具移動並垂直放置於設定為32.0 ± 2.0℃且氮氣流速為53 ± 3 SCFH (標準立方呎/小時)之培養箱內進行乾燥。澆鑄之管束在培養箱中保持數天以使其完全乾燥。
V. 切割、包裝、滅菌及檢查
自管中取出乾燥的澆鑄之管束並切成約2.7 mm長度。使用Vision System在10倍放大率下對插入物進行100%製程目測及尺寸檢查(驗收標準：微粒狀，圓柱形，無可見的表面缺陷，含環孢菌素之插入物的直徑為0.55 mm ± 0.03 mm，HV插入之直徑為0.41 mm ± 0.05 mm，且所有插入物之長度為2.72 mm ± 0.08 mm)。
符合所有製程規格之插入物以單個插入物包裝於發泡體載體中，並密封於鋁-LDPE箔袋中，使用者可以將其撕開。為了保持插入物，發泡體載體具有在底部處有開口之V形凹口，用鉗子將插入物放入該V形凹口中，其中該插入物之一部分伸出以方便取出。將帶有插入物之發泡體載體放入箔袋中。將未密封之箔袋轉移至提供惰性氮氣環境之手套箱中，以減少來自發泡體及袋材料之殘餘水分，在其中儲存最少16小時但不超過96小時之持續時間，且接著使用袋密封器在袋上形成完整、連續的密封，將其密封於手套箱內。檢查袋封口並將包裝在2-8℃下儲存直至滅菌。
對包裝好的插入物進行電子束或γ射線照射滅菌，並在2 – 8℃下儲存，直至進行最終品質檢查。
在袋裝插入物滅菌後，就對藥品執行最終品質檢查。
實例2：插入物規格
獲得的插入物係藉助於可見性測試、顯微鏡檢查分析、HPLC分析以及儲存穩定性測試表徵。
I. 可見性測試
對插入物進行目測檢查，以確認在用藍光照射時可經由替代測試模型目測觀察插入物。
II. 顯微鏡檢查分析
使用Unitron Z850/NSZ-606顯微鏡，以顯微鏡檢查插入物以確認呈乾燥狀態，以及在37℃下於pH 7.4之磷酸鹽緩衝鹽水中水合10分鐘(膨脹狀態)及24小時(平衡狀態)後呈水合狀態的產品之尺寸(表2.1)。
表2.1 不同調配物之顯微鏡檢查分析之結果
III. 其他產品規格測試
| 尺寸 | 目標規格 | 批量分析 | |||
| 調配物1 SG | 調配物2A SAP | 調配物2B SAP | 調配物3 SS | ||
| 乾燥狀態 • 直徑 • 長度 | 0.62 mm 2.5 – 2.90 mm | 通過 通過 | 通過 通過 | 通過 通過 | 通過 通過 |
| 水合狀態(膨脹，10分鐘) • 直徑 • 長度 | ≥ 1.00 mm 待報告 | 通過 | 通過 | 通過 | 通過 |
| 水合狀態(平衡，24小時) • 直徑 • 長度 | ≥ 1.30 mm 待報告 | 通過 | 通過 | 通過 | 通過 |
根據下表2.2對其他產品規格進行測試及報告。
表2.2 其他產品規格測試之結果
* 環孢菌素峰之RT (滯留時間)對應於參考標準 ± 0.5分鐘
** 雜質之目標規格如下：
- 異環孢菌素A，≤ 1.0%
- 環孢菌素C，≤ 1.0%
- 環孢菌素B，≤ 1.0%
- 二氫環孢菌素A/吉环孢素(Geclosporine)，≤ 1.4%
- 環孢菌素D，≤ 1.0%
- 任何單個雜質：≤ 1.0%
- 總雜質：≤ 6.0%
IV. 儲存穩定性測試
| 產品規格測試 | 目標規格 | 批量分析 | |||
| 調配物1 SG | 調配物2A SAP | 調配物2B SAP | 調配物3 SS | ||
| HPLC： • 特性 • 分析(%) • 分析(絕對值) • 雜質 | RT ± 0.5分鐘* 85.0至115.0% 306 – 414 µg(目標：360 µg) 如下文所說明** | 通過 96% 346 µg 通過 | 通過 101% 362 µg 通過 | N/A N/A N/A N/A | N/A N/A N/A N/A |
| 含水量 (Karl Fischer - USP ＜921＞) | ＜ 1.0% | 0.37% | 0.58% | 0.30% | 0.49% |
| 在顯微鏡下可見之微粒物質 (遮光率 - USP ＜ 788＞ ) | ≥ 10 µm：NMT 6000個顆粒/插入物 ≥ 25 µm：NMT 600個顆粒/插入物 | 78 4 | 128 10 | 22 2 | 81 44 |
| 可見微粒物質 (可見度 - USP ＜ 790＞) | 插入物溶液基本上不含可見微粒 | 通過 | 通過 | 通過 | 通過 |
| 內毒素 (動力學顯色LAL - USP ＜ 85＞) | ≤ 0.5 EU/插入物 | 通過 | 通過 | 通過 | 通過 |
| 無菌 USP ＜71＞ | 無微生物生長 | 通過 | 通過 | 通過 | 通過 |
根據調配物1及2A的含環孢菌素之插入物的穩定性已在冷藏條件 (2-8℃)下經12個月進行評估。
儲存穩定性測試之結果可見於表2.3.1及2.3.2(調配物1)以及表2.3.3及2.3.4 (調配物2A)。
表2.3.1 儲存穩定性測試之結果：外觀、尺寸、分析及特性(調配物1)(翻譯見文末)
表2.3.2 儲存穩定性測試之結果：雜質及其他規格(調配物1)
表2.3.3 儲存穩定性測試之結果：外觀、尺寸、分析及特性(調配物2A)
表2.3.4 結果儲存穩定性測試：雜質和進一步規格(調配物2A)
經過12個月獲得的穩定性資料仍滿足預定的穩定性規格。根據ICH Q1E，對於冷藏產品，若長期資料顯示隨時間幾乎沒有改變且顯示幾乎沒有變化，則提出的儲存期限可為至多兩倍，但不應超過12個月，該提議得到分析結果及相關支持數據的支持。即時長期穩定性資料遵循在95%信賴區間(CI)下穩定性規格之上限及下限趨勢。總體而言，在定量資料中觀察到的趨勢很少，甚至沒有。統計分析展示，基於在23個月處顯示可能截距的分析之降解分析，該產品將滿足23個月的儲存期限。所有其他穩定性指示參數均顯示超過36個月的可能截距。因此，可以預期至少23個月的儲存期限。
實例3：在比格犬中進行之環孢菌素插入物的評估
為了研究含有環孢菌素之插入物的藥物動力學，在比格犬藥物動力學研究中測試不同的調配物。
進行六項不同的比格犬研究，其中測定在研究持續時間內自插入物釋放的藥物量及/或淚液中環孢菌素之濃度。研究及調配物之概述在表3中給出。
表3 比格犬研究之概述
實例3.1：概念驗證PK研究
| 比格犬研究 | 研究設計 |
| 實例3.1： 概念驗證 PK研究 | N=4隻比格犬 0.7 mg環孢菌素劑量於12.7% (w/v) 4a20K SAZ/三離胺酸PEG水凝膠中 10週兩側給藥 在第2週、第4週、第6週、第8週及第10週進行淚液取樣 在6週時取出一小組插入物 |
| 實例3.2： 概念驗證 PK研究 | N=20隻比格犬 0.44 mg環孢菌素劑量於9% (w/v) 4a20K SG/三離胺酸PEG水凝膠中 28天兩側給藥 第1天、第7天、第14天、第21天及第28天之淚液 在第32天取出插入物 |
| 實例3.3： 概念驗證 PK研究 | N=11隻比格犬 0.67 mg環孢菌素劑量於9% (w/v) 4a20K SG/三離胺酸PEG水凝膠中 28天及50天給藥 在第28天及第50天取出插入物 |
| 實例3.4： 乾眼症模型研究 | N=12隻比格犬 每組12隻眼睛 0.36 mg環孢菌素劑量於9% (w/v) 4a20K SG/三離胺酸中 調配物1 28天兩側給藥 第1組：手術乾眼症眼為右眼(OD) 第2組：健康眼為左眼(OS) |
| 實例3.5： PK研究 | N=24隻比格犬 每組12隻 0.36 mg環孢菌素劑量 調配物1及2A 12週兩側給藥 第1組：調配物1插入物(9% (w/v) 4a20K SG/三離胺酸) 第2組：調配物2A插入物(9% (w/v) 4a20K SAP/三離胺酸) |
| 實例3.6： 高劑量研究 | N=54隻比格犬 12M/12F活性劑，12M/12F對照，3M/3F假對照 90天給藥 0.7 mg環孢菌素劑量 調配物4A插入物用於OD眼中(9% (w/v) 4a20K SG/三離胺酸) 調配物4B插入物用於OS眼中(9% (w/v) 4a20K SAP/三離胺酸) |
將含0.7 mg標稱劑量之環孢菌素的插入物投與比格犬，如表3中所概述。
隨時間評估自插入物釋放之藥物量，並在研究持續時間內測定淚液中環孢菌素之濃度。
在研究持續時間內環孢菌素之中值淚液濃度範圍為1.1至1.9μg，參見下表3.1。在6週時取出一小組插入物以測定與投與劑量相比的殘餘藥物量。在6週內釋放之環孢菌素的平均量係0.37 mg。假設在該給藥期內每日之釋放速率一致(如由淚液濃度保持相對恆定所證實)，由此計算出估計的每日遞送劑量為每日8.8 μg。
表3.1： 比格犬眼中之環孢菌素淚液濃度
實例3.2：概念驗證PK研究
| 時間 | 中值(µg/mL) | SD(µg/mL) |
| 2週 | 1.5 | 0.7 |
| 4週 | 1.2 | 0.6 |
| 6週 | 1.4 | 0.9 |
| 8週 | 1.9 | 1.4 |
| 10週 | 1.1 | 0.5 |
將含0.44 mg標稱劑量之環孢菌素的插入物投與比格犬，如表3中所概述。
隨時間評估自插入物釋放之藥物量，並在研究持續時間內測定淚液中環孢菌素之濃度。
在研究持續時間內環孢菌素之平均淚液濃度範圍為1.1至2.8μg，參見下表3.2。在32天時取出插入物以測定與投與劑量相比的殘餘藥物量。在32天內釋放之環孢菌素的平均量係0.2 mg。假設在該給藥期內每日之釋放率一致，由此計算出估計的每日遞送劑量為每日6.3 μg。
表3.2：比格犬眼中之環孢菌素淚液濃度
實例3.3：概念驗證PK研究
| 時間 | 平均值(µg/mL) | SD(µg/mL) |
| 1天 | 2.7 | 1.8 |
| 7天 | 2.1 | 1.8 |
| 14天 | 2.8 | 1.5 |
| 21天 | 1.7 | 1.4 |
| 28天 | 1.1 | 0.3 |
對於n=總計10份樣品，投與前插入物中之初始環孢菌素劑量係671 ± 13 µg (平均值加標準偏差)。分別在28天及50天時取出四個及五個插入物，並分析環孢菌素含量。左眼及右眼提供類似的結果，由此計算出所有取出之插入物的平均值，得到釋放量(初始量減去在取出之插入物中的剩餘量，該等量分別為576 ± 18 µg及494 ± 32 µg)分別為3.4及3.5 µg，如表3.3中所示。藉由比較初始劑量與釋放劑量來確定平均每日釋放速率。研究結果展示，在28天及50天內的每日估計遞送劑量為約每日3.5 µg。研究期間插入物之藥物釋放量在低至每日2.7 µg到高達每日4.4 µg範圍內。
表3.3： 比格犬中自插入物釋放之環孢菌素
實例3.4：乾眼症模型研究
| 天 | 每個插入物之環孢菌素量 | 每個插入物之環孢菌素量 平均值 ±SD [µg] | 每日釋放的環孢菌素量 平均值 (Min, Max) [µg] | |
| OD | OS | |||
| 28 | 578 | 576 ± 18 | 3.4 (2.7, 4.2) | |
| 579 | ||||
| 596 | ||||
| 553 | ||||
| 50 | 451 | 494 ± 32 | 3.5 (3.0, 4.4) | |
| 507 | ||||
| 520 | ||||
| 471 | ||||
| 521 |
將含0.36 mg標稱劑量之環孢菌素且具有1.5 mm水合直徑及2.5 mm水合長度之插入物投與比格犬，如表3中所概述。
預先藉由手術切除比格犬右眼之淚腺以建立人工乾眼症模型。左眼未經處理，且由此用作健康對照。藉由Schirmer淚液測試隨時間跟踪淚液產生情況，且測試顯示，右眼之淚液產生量減少至接近於零，為乾眼症模型提供概念證明(參見圖3.1)。隨時間評估自插入物釋放之藥物量，並在研究持續時間內測定淚液中環孢菌素之濃度。
環孢菌素之平均淚液濃度在健康眼中在0.8至1.4μg/mL範圍內且在乾眼症眼中在1.4至4.8 μg/mL範圍內，參見下表3.4。比格犬乾眼症模型中較高的淚液環孢菌素濃度(與健康眼相比)表明，環孢菌素可成功地轉運至淚液中且在乾眼症條件下很可能自插入物轉運至眼表，且當與在健康眼中觀察到的環孢菌素濃度相比較時，由於淚液量減少(由淚液產生減少引起)且由此藥物稀釋度較低，故在乾眼症條件下，眼表上之環孢菌素濃度可能較高。
表3.4： 比格犬之乾眼症眼及健康眼中之環孢菌素淚液濃度
實例3.5：藥物動力學研究
| 眼睛 | 時間 | N | 平均值(µg/mL) | 最小值(µg/mL) | 中值(µg/mL) | 最大值(µg/mL) | SD(µg/mL) | CV | 95% CI(µg/mL) |
| 乾眼症眼(OD) | 3小時 | 12 | 1.4 | 0.0 | 1.4 | 3.5 | 0.9 | 63% | 0.5 |
| 1天 | 12 | 3.3 | 0.3 | 1.8 | 19.9 | 5.3 | 163% | 3.0 | |
| 7天 | 12 | 4.8 | 0.0 | 2.3 | 18.5 | 6.1 | 125% | 3.4 | |
| 14天 | 10 | 2.8 | 0.3 | 1.3 | 12.3 | 3.8 | 135% | 2.3 | |
| 28天 | 5 | 4.8 | 0.8 | 5.4 | 8.5 | 3.1 | 65% | 2.7 | |
| 健康眼 (OS) | 3小時 | 12 | 1.4 | 0.5 | 1.0 | 3.1 | 0.8 | 61% | 0.5 |
| 1天 | 12 | 1.1 | 0.5 | 1.0 | 2.2 | 0.5 | 49% | 0.3 | |
| 7天 | 11 | 0.8 | 0.3 | 0.6 | 2.8 | 0.7 | 85% | 0.4 | |
| 14天 | 11 | 0.9 | 0.4 | 0.7 | 2.5 | 0.7 | 72% | 0.4 | |
| 28天 | 7 | 1.1 | 0.4 | 0.6 | 3.3 | 1.0 | 92% | 0.8 |
如表3中所概述，將調配物1及2A之插入物(PEG-SG及PEG-SAP水凝膠，0.36 mg環孢菌素)經兩側投與24隻比格犬。在給藥後1小時、3小時及6小時、第1天及第3天、第1週、第2週、第4週、第6週、第8週、第10週及第12週，獲取淚液樣品。結果顯示於下表3.5以及
圖 3.2A 及圖 3.2B中。對於調配物1 (第1組)及調配物2A (第2組)，環孢菌素經12週自插入物釋放至比格犬之淚液中。結果表明該兩種調配物在約3小時出現的最大淚液濃度相當，即2.7 µg/mL。在前六週內，該兩種調配物的藥物釋放曲線及淚液濃度看來相當(在95%信賴區間內)。
在第8週至第12週之間，相對於SAP水凝膠調配物，利用SG水凝膠調配物，觀察到比格犬之環孢菌素淚液濃度的潛在降低。此差異可能由SG水凝膠比SAP水凝膠降解快引起。
表3.5 比格犬之環孢菌素淚液濃度
實例3.6：高劑量研究
| 時間 | 平均值 ± 95% CI (µg/mL) | |
| 調配物 1 插入物 | 調配物 2 插入物 | |
| 1小時 | 1.4 ± 0.4 | 2.4 ± 1.1 |
| 3小時 | 2.7 ± 0.5 | 2.7 ± 0.9 |
| 6小時 | 2.1 ± 1.0 | 2.5 ± 1.0 |
| 1天 | 1.5 ± 0.4 | 1.1 ± 0.2 |
| 3天 | 1.2 ± 0.3 | 1.3 ± 0.4 |
| 1週 | 1.1 ± 0.3 | 1.8 ± 0.9 |
| 2週 | 1.1 ± 0.4 | 1.6 ± 0.5 |
| 4週 | 1.0 ± 0.2 | 2.4 ± 1.4 |
| 6週 | 1.3 ± 0.7 | 0.9 ± 0.3 |
| 8週 | 0.4 ± 0.2 | 1.0 ± 0.5 |
| 10週 | 0.3 ± 0.1 | 0.8 ± 0.5 |
| 12週 | 0.5 ± 0.4 | 1.3 ± 0.5 |
如表3中所概述，在符合GLP之毒理學研究中，評定根據兩種水凝膠調配物4A及4B (PEG-SG及PEG-SAP)的具有較高劑量(0.7 mg環孢菌素)之插入物的藥物動力學。
在給藥前以及給藥後1小時、2小時、4小時、24小時及第7天、第30天、第60天、第90天及第104天獲取淚液樣品。淚液中之環孢菌素濃度示於表3.6.1以及
圖 3.3中。結果表明，在本比格犬研究中，在研究持續時間內該兩種調配物的淚液濃度相當(在95%信賴區間內)，且在恢復動物中藥物含量低於定量下限 (LLOQ = 30 ng/mL) (在104天取樣前兩週取出測試物)。
該兩種調配物之藥物動力學特徵相當，且在研究持續時間內展示持續的穩態劑量暴露。因為在研究持續時間內，淚液濃度在給藥期間的一小時劑量暴露內達到明顯穩態，所以真正的最大濃度並非顯而易見的。
表3.6.1： 比格犬之環孢菌素淚液濃度
實例4：隨機化、多中心、雙盲、媒劑對照之人類1/2期臨床研究
| 時間 | 平均值 ± 95% CI (µg/mL) | |
| 調配物 4A 插入物 | 調配物 4B 插入物 | |
| 給藥前 | 未偵測到 | 未偵測到 |
| 1小時 | 2.9 ± 1.2 | 3.1 ± 1.7 |
| 2小時 | 3.1 ± 1.0 | 2.9 ± 0.9 |
| 4小時 | 2.7 ± 0.7 | 2.7 ± 1.0 |
| 1天 | 3.5 ± 1.0 | 3.4 ± 1.4 |
| 7天 | 2.4 ± 0.7 | 2.2 ± 0.7 |
| 30天 | 3.1 ± 0.9 | 3.1 ± 0.6 |
| 60天 | 2.3 ± 0.8 | 2.3 ± 0.8 |
| 90天 | 3.3 ± 1.1 | 4.1 ± 1.1 |
| 104天 | ＜ LLOQ | ＜ LLOQ |
設計一項隨機化、多中心、雙盲、媒劑對照之1/2期臨床研究以評估環孢菌素插入物用於淚小管內以治療患有DED之個體的安全性、耐受性及功效，該研究包括145名個體(290隻眼)，分兩個隊列招募，亦即，隊列1，一個由約5名用調配物2A水凝膠/環孢菌素插入物治療之個體(10隻眼)組成的開放性試驗組；以及隊列2，一個由約140名用2種不同的調配物1及2A水凝膠/環孢菌素插入物以及2種不同的調配物2B及3HV插入物治療之個體組成的隨機化雙盲組。
兩隻眼均用相同的治療/調配物治療。若兩隻眼均符合乾眼症的症狀，則將具有較高總角膜螢光素染色評分的眼睛指定為研究眼，且將另一隻眼指定為非研究眼。若兩隻眼之總角膜螢光素染色評分相同，則在分析之前，由生物統計學家確定研究眼。若只有一隻眼符合條件，則該眼將為研究眼，但兩隻眼仍接受相同的治療/調配物。
治療概述於下表4中。
表4： 治療概述(HV= 水凝膠媒劑)
I. 研究時程
| 隊列編號 | 個體數量 | 治療 | 調配物編號 |
| 1 開放試驗 | 5 | 水凝膠/環孢菌素 | 2A |
| 2 隨機化、雙盲 | 40 | 水凝膠/環孢菌素 | 1 |
| 40 | 水凝膠/環孢菌素 | 2A | |
| 40 | HV (安慰劑) | 2B | |
| 20 | HV (安慰劑) | 3 |
兩個隊列組均遵循基本上相同的研究時程。在以下情況下，個體入選：
• 自報告之乾眼病史或臨床上由眼保健專業人員在雙眼中確診≥6個月的乾眼病，
• 在篩選訪視期，如藉由視覺模擬量表(VAS)眼乾嚴重程度評分≥30所定義的研究眼中持續存在乾眼病，及
• 在同一隻合格眼中或兩隻眼中，總角膜螢光素染色(tCFS)評分≥ 6且≤ 15 (NEI量表，參見以下評定部分)且Schirmer評分(未麻醉) ＞ 0 mm且≤ 10 mm潤濕(在5分鐘時)，其中
• 其他納入及排除標準適用。
個體在插入前14天/第1天(第2次訪視)經歷篩選且在第2次訪視確認合格性。在第2次訪視時，將隊列2中之個體以2:2:2:1比率隨機分配至四個治療組之一中。對於所有個體，預定自第2週至第16週以規律間隔進行進一步治療隨訪(第3次至第8次訪視)，以便尤其確定插入物之存在，其中該等插入物之存在係藉由用藍光照射相應區域並使用黃光濾光片，以非侵入性方式評定。
對於兩個隊列，若插入物在第16週(第8次訪視)時可見，則個體在30天(± 10天；第9次訪視)內返回診所，並根據需要，每30天繼續返回診所，直至插入物不再可見且醫師確定沒有生物活性之證據。若在第16週(第8次訪視)時無法看到插入物且醫師確定沒有生物活性之證據，則個體退出研究。
該研究之一般示意圖如
圖 4A中所示。
每次訪視均會進行各種評定。具體言之，除TBUT評定(僅在第1次、第2次、第5次及第7次訪視時發生)外，在以下第III點概述之所有眼科評定係在全部第1次至第8次訪視以及第9次訪視(在個別患者進行第9次訪視情況下)時進行。
根據以下第III點，任何不良事件之發生同樣係在自插入日/第1天起的每次訪視中進行評定(在第1天插入之前出現的任何徵象、症狀及狀況均記錄為病史)。
II. 插入物放置
將眼科插入物放置於淚小管之垂直部分中(參見
圖 5B)。在本文所揭示之臨床研究中，插入物係放置於下淚點中。
為了將插入物放置在淚小管中，施加側向壓力以使淚小管系統伸長，並暫時拉下淚點附近的皮膚(
圖 5A)。使用淚點擴張器朝向鼻子擴張下淚點，確保該系統伸長，且淚小管較深地擴張穿過淚點達到一定深度及寬度，必要時，以旋轉運動旋轉擴張器以幫助擴張程序(
圖 5B)。
使用眼科海綿乾燥淚點開口周圍的表面(
圖 5C)。
用鉗子將水凝膠/環孢菌素或HV插入物朝向鼻子以較小角度插入(
圖 5D)，旨在於第一次運動中插入70%，並使用鉗子輕敲或推動插入物之其餘部分進入，由此避免過度擠壓插入物以防止變形。確認插入物定位於淚點開口偏下位置。
若插入物在放置於淚點開口偏下位置之前發生水合(類似於喇叭形)，或在理想定位之前發生水合，或若插入物之一部分伸出而無法插入，則丟棄插入物並使用新插入物。
眼科插入物之插入難易程度分級為「容易」(1)、「中等」(2)或「困難」(3)。
III. 評定
該研究採用以下評定：
Schirmer淚液測試
Schirmer測試確定所產生的淚液量並藉由毛細管作用起作用，由此允許淚液沿紙質測試條之長度行進。沿測試條行進之速率與淚液產生之速率成正比。個體被要求抬頭並施加測試條之彎曲端，使其位於下眼瞼之下瞼結膜與眼睛之球結膜之間。五分鐘後，患者被要求睜開雙眼並向上看，且取出測試條。Schirmer測試評分係由測試條濕潤區域之長度決定。兩隻眼同時進行測試。麻醉時，僅量測基礎淚液分泌量。
Schirmer評分 ≥ 10 mm潤濕被認為是正常的，而＜ 5 mm表示淚液不足。
淚膜破裂時間(TBUT)及總角膜螢光素染色(tCFS)
眨眼後淚膜破裂所需之時間稱為TBUT。其係量測淚膜穩定性之定量測試。正常淚膜破裂時間超過15秒。為了評定TBUT，將螢光素條用鹽水潤濕並施加於下盲管。眨眼數次後，使用帶有藍光濾光片之寬束裂隙燈檢查淚膜，以確定角膜上第一個乾斑的出現。
小於5-10秒的TBUT值表明淚液不穩定且在輕度至中度乾眼病患者中觀察到。
量測總角膜螢光素染色(tCFS)值以評定角膜狀況。藉由螢光素染料染色使可能例如由乾眼病引起的如角膜表面擦傷之類損傷變得可見。
為了評定tCFS，將螢光素條用鹽水溶液/洗眼劑潤濕，個體被要求抬頭並將濕潤之測試條施加於下眼瞼結膜上，測試條不得接觸球結膜。由於TBUT亦藉由應用螢光素來評定，若tCFS量測係在TBUT之後立即進行，則不需要額外應用螢光素染料。個體被要求眨眼數次以分配螢光素染料，且在等待2至3分鐘後，使用鈷藍照射及Wratten黃光濾光片，使用NEI (國家眼科研究所) 0-3分量表(0 = 無染色，1 = 輕微染色，2 = 中等染色，3 = 嚴重染色)評定角膜中央、下部、鼻、顳及上部5個區域中每個區域之角膜染色，其中CFS總分係五個區域之總和(0至15)。
tCFS評分越高，則角膜表面之損傷就越大。
結膜麗絲胺綠染色(LGS)
量測LGS值以評定結膜之狀況。將螢光素條用鹽水溶液/洗眼劑潤濕，個體被要求抬頭並將濕潤之測試條施加於下眼瞼結膜上，測試條不得接觸球結膜。個體被要求眨眼數次以分配麗絲胺染料，且在等待1至4分鐘後，使用中等光照，使用NEI 0-3評分量表評定結膜6個區域，即顳、上顳、下顳以及上鼻、下鼻及鼻中每個區域之結膜染色情況，其中LGS總分係六個區域之總和(0至18)。
由升高之睑裂斑產生的染色可能無法改善。與睑裂斑相關之染色可能始終被排除在總麗絲胺評分之外。
LGS評分越高，則結膜表面之損傷程度越高。
最佳矯正視敏度BCVA
視敏度測試應在任何需要與眼接觸或滴注研究染料之檢查之前進行。LogMAR視敏度須使用早期治療糖尿病性視網膜病變研究(Early Treatment Diabetic Retinopathy Study，ETDRS)或修改後的ETDRS圖表進行評定，該圖表每行由五個字母組成，每行代表0.1×在給定測試距離下最小分辨角之對數單位(log unit of the minimum angle of resolution，logMAR)。
視敏度測試係使用早期治療糖尿病性視網膜病變研究(ETDRS)或修改後的ETDRS圖表執行，並使用個體自身之矯正鏡片(僅限眼鏡)或針孔折射進行最佳矯正。ETDRS或修改後的 ETDRS圖表由每行五個字母組成，每行代表0.1×在給定測試距離下最小分辨角之對數單位(logMAR)。
視敏度(VA)係以logMAR值評分，其中正確讀出最後一行中的字母將視為基礎 logMAR讀取，向其中加上N × 0.02，其中N係錯過字母總數並包括在最後一行讀取中。此總和(基礎logMAR + N × 0.02)代表該眼之BCVA。
BCVA評分越低，則視敏度越好。
眼乾評分/視覺模擬量表VAS
為了評定眼乾評分，個體被要求根據放置於水平線上之垂直記號(代表0至100%值)對眼乾症狀之嚴重程度及頻率進行評級，以指示個體雙眼當前所經歷之眼睛不適程度及所經歷之眼乾之頻率，其中0%對應於「無不適」且100%對應於「最大程度(最)不適」。
眼表疾病指數OSDI©
OSDI允許基於12項問卷迅速地評定乾眼症患者之眼部刺激症狀，該問卷評定乾眼症之症狀及其對個體在過去一週生活中視力相關功能之影響(參見例如R. M. Schiffman等人,
Arch Ophthalmol. 2000;118(5):615-621，特此以引用之方式併入)。
最終評分越高，則能力喪失程度越高。
標準患者眼乾評估(SPEED)之評估
SPEED問卷(參見Korb及Blackie,
Ocular Surgery NewsEurope版, 2012 ，特此以引用之方式併入本文)係另一種隨時間監測乾眼症之症狀的評定，該問卷由8個項目0至28分評定包括乾燥、砂磨感、搔癢、刺激、灼痛、流淚、酸痛及眼疲勞在內之症狀的頻率及嚴重程度。
較高的評分指示較高的能力喪失程度。
IV. 不良事件
不良事件(AE)係投與醫藥產品之患者或臨床研究個體的任何不幸醫學事件，且未必與該治療有因果關係。因此，AE可為在時間上與藥物(研究)產品之使用相關的任何不利且非預期之病徵(包括異常實驗室發現)、症狀或疾病，無論是否與藥物(研究)產品相關。
嚴重不良事件(SAE)係在任何劑量下發生的任何不幸的醫學事件：
• 引起死亡
• 危及生命(指個體在事件發生時有死亡風險的事件，但並非假設情況變嚴重時可能導致死亡的事件)
• 需要住院治療或延長現有住院時間。(擇期手術住院不構成SAE)
• 引起持續或顯著的能力喪失/無能力。
• 先天異常/出生缺陷。
在每次訪視期間，使用開放性問題向個體詢問不良事件，注意不要影響個體之回答。
記錄下個體自第2次訪視(插入/第1天)至第9次訪視(30天的隨訪)中所經歷之任何AE以及SAE，不管事件之嚴重程度或其與研究治療之關係如何。
必要時，在先前評定中已記錄並被指明持續發生之任何AE將在後續訪視中進行審查，且若此等AE已解決，則將其記錄在案。
AE強度或頻率之變化係作為獨立事件記錄(亦即，開始新記錄)。
跟踪當個體完成研究或中止研究時正在經歷之任何SAE，直至事件解決、穩定或恢復成基線狀態。
評定所有事件以確定事件是否符合SAE之標準、事件之嚴重程度以及事件與研究治療之關係。
實例4.1：隊列1 – 開放性單中心1期研究
隊列1係一項開放性1期研究，旨在評估水凝膠/環孢菌素插入物之安全性、耐受性、耐久性及生物活性，且申辦者、研究者及個體均了解治療分配，且研究時程如以上在I下所概述。遵循研究時程。隊列1中之全部5名入選個體(10隻眼)在第2次訪視時，根據以上在II下所概述之程序接受調配物2A插入物。在確認合格性後放置插入物。
I. 安全性及耐受性
所有個體均完成16週之研究期，沒有個體退出。沒有報告嚴重不良反應。觀察到插入物具有良好耐受性，且沒有報告或觀察到刺痛、刺激、視力模糊或流淚之類不良事件。不需要更換插入物。插入物之插入難易程度評級如下：
• 8隻眼：簡單
• 1隻眼：中等
• 1隻眼：困難
中等及困難等級係針對同一個體之右眼及左眼。此顯示，為便於插入物之投與，插入物之整體尺寸及溶脹行為得到極佳調整。
II. 耐久性
所有插入物在第8次訪視時最後一次可見。
III. 生物活性/功效
根據每次訪視時進行的眼科評定來評估插入物治療之功效。
藉由Schirmer測試(未麻醉)量測的淚液產生量自基線時之平均值4.2 mm增加至在第12週時的8.2 mm，其中五名個體中有一名(20%)在第12週時之Schirmer評分相對於基線增加≥ 10 mm(參見
圖 6A 及 6B)。
如藉由tCFS所量測，個體展示乾眼病(DED)之徵象改善。tCFS自基線時之平均值6.7增加至第12週時之平均值2.7 (參見
圖 7A)，引起在第12週時-4.0的相對於基線之變化(CFB)(參見
圖 7B)。
DED之症狀亦有所改善，此係藉由以下量測：
(i) 視覺模擬量表(VAS)眼乾嚴重程度評分，該評分自基線時之平均值51改善為第12週時之平均值33(參見
圖 8A 及 8B)；及
(ii) VAS乾眼症頻率評分，該評分自基線時之平均值51改善為第12週時之平均值31 (參見
圖 9)。
對於DED之病徵及症狀，插入物早在兩週時就開始發揮作用(藉由VAS眼乾嚴重程度及頻率評分來度量)，並持續16週之研究時段。
此外，在16週期間，眼表疾病指數(OSDI)及標準患者眼乾評估(SPEED)評分均下降(參見
圖 10及
11)。
實例4.2：隊列2 – 隨機化、多中心、雙盲、媒劑對照之2期研究
隊列2係一項持續進行的隨機化、雙盲、媒劑對照之2期研究，旨在評估水凝膠/環孢菌素插入物之安全性、耐受性及功效，且個體以及研究者及其工作人員及申辦人員對治療分配不知情，且研究時程如以上在I下所概述。遵循研究時程。
隨機化時程係由獨立於研究實施或計劃團隊的合格生物統計學家以電腦生成的，且在雙盲治療期中隨機化時投與個體的水凝膠/環孢菌素以及HV插入物在外觀上係相同的。在最終資料庫被鎖定之前，研究個體以及研究者及其工作人員對治療身份不知情，且參與研究實施及監測之申辦人員在研究及資料庫鎖定完成之前保持不知情。
在第2次訪視時，隊列2中入選的140名個體在確認資格後，根據第2次訪視時的隨機化時程接受一個插入物(調配物1、2A、2B及3)。程序如以上在II下所概述。插入物放置遵循插入物投與。
若需要公開，則藉由將公開資料之訪問限制為不參與研究實施的兩個人(申辦者醫療監察員及申辦者統計員)或在緊急情況下直接由研究者維護研究評定及目標之完整性。
IV. 安全性及耐受性
持續評定包括發生刺痛、刺激、視力模糊或流淚之類不良事件。
V. 耐久性
藉由監測插入物之存在來評定插入物之耐久性。
VI. 生物活性/功效
根據每次訪視時進行的眼科評定來評估插入物治療之功效。功效終點確定如下：
主要終點
• 在Schirmer測試(未麻醉)中，在第12週時相對於基線之變化(CFB)及絕對值
次要終點
病徵：
• 第12週Schirmer評分增加 ≥ 10 mm之個體的百分比
• 在每次基線後研究訪視時使用NEI量表得到的總角膜螢光素染色(tCFS)之CFB及絕對值
• 在每次基線後訪視時使用NEI量表得到的角膜螢光素染色分區之CFB及絕對值。
• 在每次基線後訪視時使用NEI量表得到的結膜麗絲胺綠染色之CFB及絕對值。
症狀(個體報告)：
• 在每次基線後研究訪視時眼乾評分(VAS)之CFB及絕對值
• 在每次基線後訪視時眼表疾病指數(OSDI©總分，三個領域中之每一個及個別問題)之CFB及絕對值。
• 在每次基線後訪視時SPEED問卷之CFB (總體評分及個別問題)。
探索性：
• 在第12週時的淚膜破裂時間(TBUT)之CFB
• 在所有基線後訪視時插入物之存在
• 研究者評定之插入難易度
• 研究者評定之可視化難易度
儘管已經描述許多實施例，但顯而易見的是，可改變基本實例以提供利用本揭示案之化合物及方法的其他實施例。因此，應了解，本揭示案之範圍由所附申請專利範圍而非藉助於實例表示之具體實施例限定。
在本申請案通篇引用了各種參考文獻。此等參考文獻之揭示內容特此以引用之方式併入本揭示案中。
本發明特別關於以下其他實施例：
1. 一種包含水凝膠及環孢菌素之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中該環孢菌素係呈顆粒形式且其中該等環孢菌素顆粒分散於該水凝膠內。
2. 如實施例1之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中該等環孢菌素顆粒均勻地分散於該水凝膠內。
3. 如實施例1或2之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中該等環孢菌素顆粒具有小於約50 μm之d50值。
4. 如實施例3之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中該等環孢菌素顆粒具有在3至17 μm範圍內之d50值。
5. 如實施例4之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中該等環孢菌素顆粒具有在4至12 μm範圍內之d50值。
6. 如實施例5之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中該等環孢菌素顆粒具有在5至8 μm範圍內之d50值。
7. 如實施例1至6中任一個之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中該等環孢菌素顆粒具有小於43 μm之d90值。
8. 如實施例1至7中任一個之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中該等環孢菌素顆粒具有小於45 μm之d100值。
9. 如實施例1至8中任一個之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其包含在約100 μg至約800 μg範圍內之量的該環孢菌素。
10. 如實施例9之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其包含在100 μg至300 μg範圍內之量的該環孢菌素。
11. 如實施例9之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其包含在300 μg至450 μg範圍內之量的該環孢菌素。
12. 如實施例9之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其包含在約500 μg至約800 μg範圍內之量的該環孢菌素。
13. 如實施例9之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其包含約250 μg量的該環孢菌素。
14. 如實施例9之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其包含約360 μg量的該環孢菌素。
15. 如實施例9之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其包含約600 μg量的該環孢菌素。
16. 如實施例9之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其包含約670 μg量的該環孢菌素。
17. 如實施例1至16中任一個之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中該插入物係用於插入下淚小管及上淚小管中。
18. 如實施例1至16中任一個之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中該插入物係用於插入該下淚小管中。
19. 如實施例1至16中任一個之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中該插入物係用於插入該上淚小管中。
20. 如實施例17至19中任一個之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中該插入物係用於插入該淚小管之垂直部分中。
21. 如實施例1至20中任一個之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中該插入物在插入之前呈乾燥狀態且在插入眼中後變得水合。
22. 如實施例1至21中任一個之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中該水凝膠包含聚合物網路。
23. 如實施例22之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中該水凝膠包含聚合物網路，該聚合物網路包含一或多個單元之聚乙二醇、聚氧化乙烯、聚氧化丙烯、聚乙烯醇、聚(乙烯基吡咯啶酮)、聚乳酸、聚乳酸-共-乙醇酸、無規或嵌段共聚物或其中任一者之組合或混合物，或一或多個單元之聚胺基酸、醣胺聚醣、多醣或蛋白質。
24. 如實施例22或23之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中該水凝膠包含聚合物網路，該聚合物網路包含相同或不同的交聯聚合物單元。
25. 如實施例24之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中該等交聯聚合物單元係一或多個交聯聚乙二醇單元。
26. 如實施例22至25中任一個之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中該聚合物網路包含平均分子量在約2,000至約100,000道爾頓範圍內之聚乙二醇單元。
27. 如實施例26之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中該等聚乙二醇單元之平均分子量在約10,000至約60,000道爾頓範圍內。
28. 如實施例27之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中該等聚乙二醇單元之平均分子量在約20,000至約40,000道爾頓範圍內。
29. 如實施例28之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中該等聚乙二醇單元之平均分子量係約20,000道爾頓。
30. 如實施例22至29中任一個之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中該聚合物網路包含一或多個交聯多臂聚合物單元。
31. 如實施例30之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中該等多臂聚合物單元包含一或多個2臂至10臂聚乙二醇單元。
32. 如實施例31之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中該等多臂聚合物單元包含一或多個4臂至8臂聚乙二醇單元。
33. 如實施例32之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中該等多臂聚合物單元包含一個4臂聚乙二醇單元。
34. 如實施例33之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中該等4臂聚乙二醇單元的四個臂連接至核心新戊四醇分子。
35. 如實施例22至34中任一個之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中該聚合物網路進一步包含一或多個交聯單元。
36. 如實施例22至35中任一個之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中該聚合物網路係藉由使含親電子基團之多臂聚合物前驅物與含親核基團之交聯劑反應來形成。
37. 如實施例36之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中該親電子基團係活性酯基團。
38. 如實施例37之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中該親電子基團係N-羥基琥珀醯亞胺(NHS)酯基團。
39. 如實施例38之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中該親電子基團選自由以下組成之群：琥珀醯亞胺丙二酸酯基團、琥珀醯亞胺琥珀酸酯(SS)基團、琥珀醯亞胺馬來酸酯基團、琥珀醯亞胺富馬酸酯基團、琥珀醯亞胺戊二酸酯(SG)基團、琥珀醯亞胺己二酸酯(SAP)基團、琥珀醯亞胺庚二酸酯基團、琥珀醯亞胺辛二酸酯基團及琥珀醯亞胺壬二酸酯(SAZ)基團。
40. 如實施例36至39中任一個之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中該含親核基團之交聯劑係含親核基團之多臂聚合物前驅物。
41. 如實施例36至39中任一個之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中該含親核基團之交聯劑係胺。
42. 如實施例41之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中該含親核基團之交聯劑係包含兩個或更多個一級脂族胺基的分子量低於1,000 Da之小分子胺。
43. 如實施例42之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中該含親核基團之交聯劑係選自由以下組成之群的小分子胺：二離胺酸、三離胺酸、四離胺酸、乙二胺、1,3-二胺基丙烷、1,3-二胺基丙烷、二伸乙基三胺及三甲基六亞甲基二胺。
44. 如實施例43之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中該含親核基團之交聯劑係三離胺酸。
45. 如實施例44之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中該含親核基團之交聯劑係乙酸三離胺酸。
46. 如實施例44之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中該含親核基團之交聯劑係經標記之三離胺酸。
47. 如實施例46之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中該三離胺酸係用顯現劑標記。
48. 如實施例47之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中該三離胺酸係用選自由以下組成之群之顯現劑標記：螢光團諸如螢光素、羅丹明、香豆素及花青。
49. 如實施例48之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中該含親核基團之交聯劑係螢光素結合之三離胺酸。
50. 如實施例49之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中該螢光素結合之三離胺酸係藉由使乙酸三離胺酸與N-羥基琥珀醯亞胺(NHS)-螢光素反應獲得。
51. 如實施例46至50中任一個之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中該三離胺酸係藉由與顯現劑部分結合進行標記。
52. 如實施例51之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中約1%至約20%的三離胺酸胺基團與顯現劑結合。
53. 如實施例52之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中5%至10%的該等三離胺酸胺基團與顯現劑結合。
54. 如實施例53之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中8%的該等三離胺酸胺基團與顯現劑結合。
55. 如實施例30至54中任一個之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中該等多臂聚合物單元包含4a20kPEG單元且該等交聯單元包含螢光素結合之三離胺酸醯胺單元。
56. 如實施例22至55中任一個之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中該聚合物網路係藉由使4a20kPEG-SG與螢光素結合之三離胺酸以在約1:2至約2:1範圍內之莫耳比反應來獲得。
57. 如實施例56之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中該聚合物網路係藉由使4a20kPEG-SG與螢光素結合之三離胺酸以約1:1之莫耳比反應來獲得。
58. 如實施例22至55中任一個之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中該聚合物網路係藉由使4a20kPEG-SAP與螢光素結合之三離胺酸以在約1:2至約2:1範圍內之莫耳比反應來獲得。
59. 如實施例58之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中該聚合物網路係藉由使4a20kPEG-SAP與螢光素結合之三離胺酸以約1:1之莫耳比反應來獲得。
60. 如實施例1至59中任一個之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中該插入物在乾燥狀態下包含以該插入物之總重量計約15重量%至約80重量%之該環孢菌素及以該插入物之總重量計約20重量%至約60重量%的聚合物單元。
61. 如實施例60之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中該插入物在乾燥狀態下包含以該插入物之總重量計30重量%至65重量%之該環孢菌素及以該插入物之總重量計25重量%至50重量%的聚合物單元。
62. 如實施例61之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中該插入物在乾燥狀態下包含以該插入物之總重量計45重量%至55重量%之該環孢菌素及以該插入物之總重量計37重量%至47重量%的聚合物單元。
63. 一種包含水凝膠及環孢菌素之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中該插入物在乾燥狀態下含有以該插入物之總重量計約40重量%至約80重量%之該環孢菌素。
64. 如實施例1至63中任一個之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中該插入物在乾燥狀態下含有以該插入物之總重量計45重量%至55重量%之該環孢菌素。
65. 如實施例1至64中任一個之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中該插入物在乾燥狀態下含有以該插入物之總重量計約20重量%至約60重量%的聚合物單元。
66. 如實施例65之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中該插入物在乾燥狀態下含有以該插入物之總重量計25重量%至50重量%的聚合物單元。
67. 如實施例66之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中該插入物在乾燥狀態下含有以該插入物之總重量計37重量%至47重量%的聚合物單元。
68. 如實施例1至67中任一個之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中該插入物含有界面活性劑。
69. 一種包含水凝膠及環孢菌素之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中該插入物含有界面活性劑。
70. 如實施例68或69之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中該插入物在乾燥狀態下含有以該插入物之總重量計約0.01重量%至約5重量%的界面活性劑。
71. 如實施例70之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中該插入物在乾燥狀態下含有以該插入物之總重量計0.2重量%至2重量%的界面活性劑。
72. 如實施例68至71中任一個之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中該插入物含有非離子型界面活性劑。
73. 如實施例72之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中該插入物含有包含聚(乙二醇)鏈之非離子型界面活性劑。
74. 如實施例73之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中該插入物含有選自由以下組成之群的界面活性劑：聚(乙二醇)脫水山梨糖醇單月桂酸酯、蓖麻油之聚(乙二醇)酯及乙氧基化4-三級辛基苯酚/甲醛縮聚物。
75. 如實施例74之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中該界面活性劑係選自由以下組成之群：聚(乙二醇)-20-脫水山梨糖醇單月桂酸酯、聚(乙二醇)-80-脫水山梨糖醇單月桂酸酯、蓖麻油之聚(乙二醇)-35酯及乙氧基化4-三級辛基苯酚/甲醛縮聚物。
76. 如實施例75之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中該插入物含有乙氧基化4-三級辛基苯酚/甲醛縮聚物。
77. 如實施例1至76中任一個之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中該插入物含有一或多種磷酸鹽、硼酸鹽或碳酸鹽。
78. 如實施例77之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中該插入物含有來源於在該水凝膠製備期間使用之磷酸鹽緩衝液的磷酸鹽。
79. 如實施例1至78中任一個之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中該插入物在乾燥狀態下含有以該插入物之總重量計不超過約1重量%的水。
80. 如實施例1至79中任一個之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中該插入物具有橫截面基本上呈圓形的基本上呈圓柱形之形狀。
81. 如實施例1至80中任一個之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中在2至8℃溫度下儲存至少3個月後藉由HPLC所量測，該環孢菌素之含量係約300至約410 μg。
82. 如實施例1至81中任一個之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中在2至8℃溫度下儲存至少6個月後藉由HPLC所量測，該環孢菌素之含量係約300至約410 μg。
83. 如實施例1至82中任一個之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中在2至8℃溫度下儲存至少12個月後藉由HPLC所量測，該環孢菌素之含量係約300至約410 μg。
84. 如實施例1至83中任一個之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中在2至8℃溫度下儲存至少3個月後藉由HPLC所量測，該環孢菌素之含量係約90重量%至約110重量%。[吾人已在說明書中保留較多的範圍]
85. 如實施例1至84中任一個之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中在2至8℃溫度下儲存至少6個月後藉由HPLC所量測，該環孢菌素之含量係約90重量%至約110重量%。
86. 如實施例1至85中任一個之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中在2至8℃溫度下儲存至少12個月後藉由HPLC所量測，該環孢菌素之含量係約90重量%至約110重量%。
87. 如實施例1至86中任一個之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中在2至8℃溫度下儲存至少3個月後藉由HPLC所量測，雜質量不超過3.0%。
88. 如實施例1至87中任一個之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中在2至8℃溫度下儲存至少6個月後藉由HPLC所量測，該雜質量不超過3.0%。
89. 如實施例1至88中任一個之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中在2至8℃溫度下儲存至少12個月後藉由HPLC所量測，該雜質量不超過3.0%。
90. 如實施例1至89中任一個之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中該插入物呈纖維形式。
91. 如實施例90之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中該插入物呈平均長度為約1.5 mm至約4.0 mm且在其乾燥狀態下平均直徑不超過0.8 mm之纖維形式。
92. 如實施例91之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中該插入物呈平均長度為2.0 mm至2.5 mm且在其乾燥狀態下平均直徑不超過0.62 mm之纖維形式。
93. 如實施例92之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中該插入物呈平均長度為2.5 mm至2.9 mm且在其乾燥狀態下平均直徑不超過0.62 mm之纖維形式。
94. 如實施例1至93中任一個之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中在2至8℃溫度下儲存至少3個月後，該插入物呈平均長度為約2.5 mm至約2.9 mm且在其乾燥狀態下平均直徑不超過0.62 mm之纖維形式。
95. 如實施例1至94中任一個之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中在2至8℃溫度下儲存至少6個月後，該插入物呈平均長度為約2.5 mm至約2.9 mm且在其乾燥狀態下平均直徑不超過0.62 mm之纖維形式。
96. 如實施例1至95中任一個之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中在2至8℃溫度下儲存至少12個月後，該插入物呈平均長度為約2.5 mm至約2.9 mm且在其乾燥狀態下平均直徑不超過0.62 mm之纖維形式。
97. 如實施例1至96中任一個之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中在37℃下在活體外於pH 7.4之磷酸鹽緩衝鹽水中水合10分鐘後，該插入物呈在膨脹狀態下平均直徑為至少1.0 mm之纖維形式。
98. 如實施例1至97中任一個之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中在37℃下在活體外於pH 7.4之磷酸鹽緩衝鹽水中水合24小時後，該插入物呈在平衡狀態下平均直徑為至少1.3 mm之纖維形式。
99. 如實施例1至98中任一個之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中該插入物係在選自由鉗子、鑷子及施藥器之抓握裝置的幫助下插入該淚小管中。
100. 如實施例1至99中任一個之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中在活體內於眼中或在活體外水合時，該插入物之直徑增加，或在該插入物之直徑增加的同時，其長度減小。
101. 如實施例100之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中水合作用係在37℃下在活體外於pH 7.4之磷酸鹽緩衝鹽水中24小時後量測。
102. 如實施例1至101中任一個之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中該插入物在插入後約1至約6個月內於該淚小管中崩解。
103. 如實施例102之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中該插入物在插入後2至4個月內於該淚小管中崩解。
104. 如實施例103之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中該插入物在插入後2至3個月內於該淚小管中崩解。
105. 如實施例103之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中該插入物在插入後3至4個月內於該淚小管中崩解。
106. 如實施例1至105中任一個之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中在插入至該淚小管中後，該插入物在插入後經至少約1個月時段釋放治療有效量之環孢菌素。
107. 如實施例106之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中在插入至該淚小管中後，該插入物在插入後經至少2個月時段釋放治療有效量之環孢菌素。
108. 如實施例107之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中在插入至該淚小管中後，該插入物在插入後經至少3個月時段釋放治療有效量之環孢菌素。
109. 如實施例1至108中任一個之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中在該插入物插入人類個體中後，環孢菌素以每天約0.1 µg至每天約10 µg之平均速率自該插入物釋放。
110. 如實施例1至108中任一個之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中在該插入物插入後，環孢菌素以每天約0.1 µg至每天約10 µg之平均速率自該插入物釋放。
111. 如實施例109或110之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中在該插入物插入後，環孢菌素以每天1 µg至每天5 µg之平均速率自該插入物釋放。
112. 如實施例111之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中在該插入物插入後，環孢菌素以每天2 µg至每天4 µg之平均速率自該插入物釋放。
113. 如實施例1至112中任一個之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中在插入人類個體後，環孢菌素之淚液濃度在約0.1 µg/mL至約10 µg/mL範圍內。
114. 如實施例1至112中任一個之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中在該插入物插入後，環孢菌素之淚液濃度在約0.1 µg/mL至約10 µg/mL範圍內。
115. 如實施例113或114之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中在該插入物插入後，環孢菌素之淚液濃度在約1 µg/mL至約5 µg/mL範圍內。
116. 如實施例1至115中任一個之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中在該插入物中所包含之環孢菌素顆粒完全溶解之前，該插入物於該淚小管中崩解。
117. 如實施例1至116中任一個之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中該插入物可藉由以下方式獲得：製備含水凝膠前驅物及環孢菌素之前驅物混合物，將該前驅物混合物填充至管中，使該等水凝膠前驅物在該管中交聯以提供呈纖維狀之水凝膠混合物，並拉伸該水凝膠混合物纖維以提供該插入物。
118. 如實施例1至117中任一個之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中該纖維在乾燥之前或之後已經拉伸。
119. 如實施例118之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中該纖維在乾燥之前已經拉伸。
120. 一種包含水凝膠及環孢菌素之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，該插入物呈纖維形式，其中該纖維經拉伸。
121. 如實施例118至120中任一個之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中該纖維已在縱向方向上以約1.0至約4.0之拉伸因子拉伸。
122. 如實施例121之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中該纖維已在縱向方向上以約1.5至約3.0之拉伸因子拉伸。
123. 如實施例122之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中該纖維已在縱向方向上以約2.7之拉伸因子拉伸。
124. 一種持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其包含水凝膠及分散於該水凝膠內的約360 μg量之環孢菌素，其中該水凝膠包括含聚乙二醇單元之聚合物網路，且其中該插入物在插入之前呈乾燥狀態。
125. 一種持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其包含水凝膠及約360 μg量之環孢菌素，該插入物呈平均長度為約2.5 mm至約2.9 mm且在其乾燥狀態下平均直徑不超過0.62 mm之纖維形式。
126. 一種持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其包含水凝膠及以該插入物之總重量計約45重量%至約55重量%之環孢菌素，該插入物呈平均長度為約2.5 mm至約2.9 mm且在其乾燥狀態下平均直徑不超過0.62 mm之纖維形式。
127. 一種持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其包含水凝膠及分散於該水凝膠內的約360 μg量之環孢菌素，其中在插入淚小管後，該插入物在插入後經至少約3個月時段釋放治療有效量之環孢菌素。
128. 一種包含水凝膠及環孢菌素之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中
該環孢菌素呈顆粒形式，
該等環孢菌素顆粒分散於該水凝膠內且具有小於約50 μm之d50值，且其中
在該插入物插入人類個體後，該環孢菌素以每天約0.1 µg至每天約10 µg之平均速率自該插入物中釋放。
129. 一種持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其包含：
包含聚合物網路之水凝膠，該聚合物網路包含
一或多個交聯多臂聚合物單元，其包含約300 μg 4a20K PEG單元及
包含螢光素結合之三離胺酸醯胺單元的交聯單元，以及
約360 μg量之環孢菌素，
該插入物呈平均長度為約2.5 mm至約2.9 mm且在其乾燥狀態下平均直徑不超過0.62 mm之纖維形式。
130. 一種持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其包含：
包含聚合物網路之水凝膠，該聚合物網路係藉由使4a20kPEG-SG與螢光素結合之三離胺酸以約1:1之莫耳比反應獲得，
及約360 μg量之環孢菌素，
該插入物呈平均長度為約2.5 mm至約2.9 mm且在其乾燥狀態下平均直徑不超過0.62 mm之纖維形式。
131. 一種持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其包含：
包含聚合物網路之水凝膠，該聚合物網路係藉由使4a20kPEG-SAP與螢光素結合之三離胺酸以約1:1之莫耳比反應獲得，
及約360 μg量之環孢菌素，
該插入物呈平均長度為約2.5 mm至約2.9 mm且在其乾燥狀態下平均直徑不超過0.62 mm之纖維形式。
132. 如實施例1至131中任一個之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中該水凝膠包含聚合物網路，該聚合物網路在室溫或低於室溫下於乾燥狀態下為半結晶，而在潮濕狀態下為非晶形的。
133. 如實施例1至132中任一個之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中該插入物在製造期間經歷濕拉伸或乾拉伸，且其中當在室溫或低於室溫下處於乾燥狀態時，呈拉伸形式之該插入物在尺寸上穩定。
134. 一種治療或預防有需要之個體之眼部疾病的方法，該方法包括將第一如實施例1至132中任一個之包含水凝膠及環孢菌素之持續釋放可生物降解淚小管內插入物插入該個體之淚小管中。
135. 如實施例134之方法，其中該第一插入物留在該淚小管中直至完全崩解。
136. 如實施例134或135之方法，其中該第一插入物係設計成在插入後約3至約4個月內於該淚小管中崩解。
137. 如實施例134至136中任一個之方法，其中第二插入物係在至少2個月後，在不預先移除該第一插入物情況下插入。
138. 一種治療個體之乾眼病的方法，該方法包括以下步驟：
將第一可生物降解插入物插入該個體之第一隻眼之第一淚小管中，其中該插入物包含：
水凝膠；
約100 μg至約800 μg分散於該水凝膠中之環孢菌素；
其中該環孢菌素自該第一插入物插入該個體之日起經至少約2個月時段以每天約0.1 μg至每天約10 µg之平均速率自該插入物釋放；及
自插入該第一插入物之日起至少約2個月後，將第二插入物插入該個體之該第一隻眼之第一淚小管中，其中該第二插入物與該第一插入物實質上類似。
139. 如實施例138之方法，其中將該第一插入物在完全崩解之前移除。
140. 如實施例139之方法，其中該第一插入物係在完全崩解之前移除且將第二插入物插入以替換移除的第一插入物。
141. 如實施例138至140中任一個之方法，其中該第一插入物係設計成在插入後約2至約3個月內於該淚小管中崩解。
142. 如實施例134至141中任一個之方法，其中該第一插入物留在該淚小管中直至完全崩解。
143. 如實施例134至142中任一個之方法，其中第二插入物係在至少2個月後，在不預先移除該第一插入物情況下插入。
144. 如實施例134至142中任一個之方法，其中該第一插入物係在完全崩解之前移除且將第二插入物插入以替換移除的第一插入物。
145. 如實施例134至142中任一個之方法，其中該第一插入物係設計成在插入後約2至約3個月內於該淚小管中崩解，且其中該第一插入物係在插入後2個月內移除。
146. 如實施例134至145中任一個之方法，其中在至少2個月之治療期內一次投與每隻眼的劑量係約300 μg至約400 μg的該環孢菌素。
147. 如實施例134至146中任一個之方法，其中該眼部疾病係淚膜及眼表之病症。
148. 如實施例134至146中任一個之方法，其中該眼部疾病係乾眼病。
149. 如實施例134至146中任一個之方法，其中該眼部疾病與一或多種選自由以下組成之群的疾患相關：燒灼感、搔癢、發紅、刺痛、疼痛、異物感、視覺障礙、淚腺發炎、眼表發炎、T細胞介導之發炎、淚液中存在結膜T細胞及淚液中炎性細胞介素含量升高。
150. 如實施例134至149中任一個之方法，其中如藉由Schirmer淚液測試所量測，該治療有效改善在該插入物插入之前Schirmer評分小於10 mm之個體的淚液產生。
151. 如實施例134至150中任一個之方法，其中如藉由一或多種選自由以下組成之群的評定所測定，該治療有效減少眼乾症狀：在視覺模擬量表上對眼乾症狀之嚴重程度進行評級；在視覺模擬量表上對眼乾症狀之頻率進行評級；淚膜破裂時間之測定；角膜螢光素染色；結膜麗絲胺綠染色；最佳矯正視敏度；眼表疾病指數之測定；及標準患者眼乾評估。
152. 如實施例134至151中任一個之方法，其中在該治療期內一次投與每隻眼的劑量係包含在一個插入物中。
153. 如實施例134至151中任一個之方法，其中在該治療期內一次投與每隻眼的劑量係包含在兩個插入物中。
154. 如實施例134至153中任一個之方法，其中該插入物係插入下淚小管中。
155. 如實施例134至154中任一個之方法，其中該治療期係至少1個月、至少2個月或至少3個月。
156. 一種治療有需要個體之乾眼病的方法，該方法包括將包含水凝膠及環孢菌素之持續釋放可生物降解淚小管內插入物插入個體之淚小管中，其中眼中淚點閉塞及環孢菌素釋放提供協同作用。
157. 如實施例156之方法，其中該協同作用在於當與投與設計成提供相同的環孢菌素日釋放量的含有環孢菌素之滴眼液相比較時，該環孢菌素具有較高的生物利用度。
158. 如實施例157之方法，其中該較高的生物利用度係由隨時間以環孢菌素淚液濃度計算的釋放至該淚液中之環孢菌素的量測定。
159. 一種製造如實施例1至133中任一個之包含水凝膠及環孢菌素的持續釋放可生物降解淚小管內插入物的方法，該方法包括以下步驟：
製備含有水凝膠前驅物之前驅物混合物及分散於該前驅物混合物中之環孢菌素顆粒，
使該前驅物混合物成形，並使該等水凝膠前驅物交聯形成聚合物網路並獲得包含該聚合物網路之成形水凝膠混合物，及
乾燥該水凝膠混合物以提供該插入物。
160. 如實施例159之方法，其中該等環孢菌素顆粒係均勻分散於該前驅物混合物中的微粉化顆粒。
161. 如實施例159或160之方法，其中在步驟a)中，該前驅物混合物係藉由在微粉化環孢菌素顆粒存在下在緩沖水溶液中混合含親電子基團之多臂聚合物前驅物與含親核基團之交聯劑來製備。
162. 如實施例161之方法，其中在步驟a)中，該含親電子基團之多臂聚合物前驅物係提供於緩衝水性前驅物溶液中且該含親核基團之交聯劑係提供於包含該等微粉化環孢菌素顆粒之緩衝水性前驅物懸浮液中。
163. 如實施例161或162之方法，其中在步驟a)中，該緩衝水性前驅物溶液係藉由將該多臂聚合物前驅物溶解於水性緩衝溶液中來製備，且接著在60分鐘內，將其與包含該含親核基團之交聯劑及該等微粉化環孢菌素顆粒之緩沖水性前驅物懸浮液混合。
164. 如實施例159至163中任一個之方法，其中在步驟a)中，在混合該含有環孢菌素顆粒之前驅物混合物之組分之後，將其在真空下脫氣。
165. 如實施例159至164中任一個之方法，其包括使4a20kPEG-SAP與螢光素結合之三離胺酸以在約30:1至約50:1範圍內之重量比反應。
166. 如實施例159至164中任一個之方法，其包括使4a20kPEG-SG與螢光素結合之三離胺酸以在約30:1至約50:1範圍內之重量比反應。
167. 如實施例159至166中任一個之方法，其中在步驟b)中，該使該前驅物混合物成形由以下組成：在完成交聯之前，將該前驅物混合物填充至模具或管中以提供所需的該水凝膠混合物之最終形狀並使該等水凝膠前驅物交聯。
168. 如實施例159至167中任一個之方法，其中在步驟b)中，將該前驅物混合物填充至細直徑管中以製備水凝膠混合物纖維。
169. 如實施例168之方法，其中該管之內部具有圓形幾何形狀。
170. 如實施例169之方法，其中該管之內部具有內徑為約2.0 mm之圓形幾何形狀。
171. 如實施例169之方法，其中該管之內部具有非圓形幾何形狀。
172. 如實施例159至171中任一個之方法，其中該方法進一步包括拉伸該水凝膠混合物纖維。
173. 如實施例172之方法，其中該拉伸係在乾燥該水凝膠混合物之前或之後執行。
174. 如實施例172或173之方法，其中該纖維係以約1至約4.5之拉伸因子拉伸。
175. 一種可藉由如實施例159至174中任一個之方法獲得的持續釋放可生物降解淚小管內插入物。
176. 一種藉由在縱向方向上拉伸水凝膠混合物纖維賦予該水凝膠混合物纖維形狀記憶之方法，該水凝膠混合物纖維包含分散於水凝膠中之環孢菌素顆粒。
177. 一種如實施例1至133中任一個之包含水凝膠及環孢菌素之持續釋放可生物降解淚小管內插入物在製備用於根據實施例134至158中任一個治療有需要個體之眼部疾病之藥劑中的用途。
178. 如實施例1至133中任一個之包含水凝膠及環孢菌素之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其係用於根據實施例134至158中任一個治療有需要個體之眼部疾病。
179. 一種增加在插入淚小管內插入物之前Schirmer評分小於10 mm之個體之淚液產生的方法，該淚液產生係藉由Schirmer淚液測試量測，該方法包括向該個體投與如實施例1至133中任一個之包含水凝膠及環孢菌素之持續釋放可生物降解淚小管內插入物。
180. 如實施例179之方法，其中該Schirmer評分在插入後6週增加至少2 mm。
181. 如實施例180之方法，其中該Schirmer評分在插入後12週增加至少3 mm。
182. 一種減少眼乾症狀之方法，該等眼乾症狀之減少係藉由一或多種選自由以下組成之群的評定測定：在視覺模擬量表上對眼乾症狀之嚴重程度進行評級；在視覺模擬量表上對眼乾症狀之頻率進行評級；淚膜破裂時間之測定；角膜螢光素染色；結膜麗絲胺綠染色；最佳矯正視敏度；眼表疾病指數OSDI之測定；及標準患者眼乾評估SPEED，該方法包括向該個體投與如實施例1至133中任一個之包含水凝膠及環孢菌素之持續釋放可生物降解淚小管內插入物。
183. 如請求項182之方法，其中總角膜螢光素染色值tCFS在插入後6週減小至少1.5。
184. 如請求項183之方法，其中該總角膜螢光素染色值tCFS在插入後12週減小至少3。
185. 如請求項182至184中任一項之方法，其中該在視覺模擬量表上對眼乾症狀之嚴重程度的評級在插入後2週降低至少10。
186. 如請求項185之方法，其中該在視覺模擬量表上對眼乾症狀之嚴重程度的評級在插入後6週降低至少15。
108:淚腺
114:上淚管
116:下淚管
118:淚囊
120:鼻淚管
圖 1係眼睛及淚系統之示意圖。
圖 1.2A描繪在實例1.2 (操作1及操作2)中製備的乾插入物纖維及水合插入物纖維。
圖 1.2B描繪在實例1.2 (操作3)中製備的乾插入物纖維及水合插入物纖維。
圖 1.2C描繪在實例1.2 (低、中等及高劑量)中製備的乾插入物纖維及水合插入物纖維。所製備的乾插入物纖維之主要部分與劑量無關，呈顆粒狀、圓柱形，沒有任何明顯的表面缺陷(左)。此外，還展示出每次劑量具有最高表面變形之插入物(右)。
圖 1.3描繪在實例1.3中製備的乾插入物纖維及水合插入物纖維。
圖 1.4A 至 1.4E描繪插入物乾密度及每個插入物之載藥量、乾直徑、乾密度、顯微圖像以及顯示實例1.4中製備之插入物纖維的乾直徑及水合直徑分別隨水合時間之變化的圖。
圖 2描繪示出NHS-螢光素轉化為螢光素-三離胺酸結合物的層析圖。
圖 3.1描繪藉由實例3.4之Schirmer淚液測試測定的淚液產生情況隨時間變化的結果。
圖 3.2A 及 3.2B描繪實例3.5在比格犬(beagle)淚液中量測的環孢菌素A (CsA)濃度隨時間之變化。
圖 3.3描繪實例3.6在比格犬淚液中量測的環孢菌素A (CsA)濃度隨時間之變化。
圖 4A描繪實例4之人體臨床研究大綱的一般示意圖。
圖 4B描繪插入物放置於人眼淚小管內之例示性一般示意圖。
圖 5A 至 5D描繪將插入物放置於人眼淚小管內所需步驟之例示性示意圖。
圖 6A 及 6B描繪由實例4.1之Schirmer淚液測試測定的研究眼(圖6A)及非研究眼(圖6B)之淚液產生情況隨時間變化的結果。黑色實線代表所有分析個體之平均Schirmer評分，其中虛線代表單一個體之Schirmer評分。
圖 7A 及 7B描繪實例4.1中以隨時間變化的絕對值以及相對於基線之變化表示的總角膜螢光素染色(tCFS)值(所有眼睛之平均值)
圖 8A 及 8B描繪實例4.1中以隨時間變化的絕對值以及相對於基線之變化表示的在視覺模擬量表(VAS)上眼乾嚴重程度評分之結果。
圖 9描繪實例4.1中以隨時間變化之絕對值表示的在視覺模擬量表(VAS)上眼乾頻率評分之結果。
圖 10描繪實例4.1中以隨時間變化之平均絕對值表示的OSDI之結果。
圖 11描繪實例4.1中以隨時間變化之絕對值表示的SPEED評分之結果。
Claims (50)
- 一種包含水凝膠及環孢菌素之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中該環孢菌素係呈顆粒形式且其中該等環孢菌素顆粒分散於該水凝膠內。
- 如請求項1之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中該等環孢菌素顆粒具有小於約50 μm之d50值。
- 如請求項2之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中該等環孢菌素顆粒具有在3至17 μm範圍內，較佳地在4至12 μm範圍內且更佳在5至8 μm範圍內之d50值。
- 如請求項1至3中任一項之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中該水凝膠包含聚合物網路，其中較佳地，該聚合物網路包含相同或不同的交聯聚合物單元，且該等交聯聚合物單元更佳地為一或多個交聯聚乙二醇單元。
- 如請求項4之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中該聚合物網路包含平均分子量範圍為約2,000至約100,000道爾頓，較佳地為約10,000至約60,000道爾頓且更佳地為約20,000至約40,000道爾頓的聚乙二醇單元。
- 如請求項4或5之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中該聚合物網路包含一或多個交聯多臂聚合物單元，其中較佳地，該等多臂聚合物單元包含一或多個2臂至10臂聚乙二醇單元，更佳地包含一或多個4臂至8臂聚乙二醇單元且最佳地包含一個4臂聚乙二醇單元。
- 如請求項6之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中該等4臂聚乙二醇單元的四個臂連接至核心新戊四醇分子。
- 如請求項6或7之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中該聚合物網路係藉由使含親電子基團之多臂聚合物前驅物與含親核基團之交聯劑反應來形成。
- 如請求項8之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中該親電子基團係活性酯基團，且更佳地為N-羥基琥珀醯亞胺(NHS)酯基團，且更佳地選自由以下組成之群：琥珀醯亞胺丙二酸酯基團、琥珀醯亞胺琥珀酸酯(SS)基團、琥珀醯亞胺馬來酸酯基團、琥珀醯亞胺富馬酸酯基團、琥珀醯亞胺戊二酸酯(SG)基團、琥珀醯亞胺己二酸酯(SAP)基團、琥珀醯亞胺庚二酸酯基團、琥珀醯亞胺辛二酸酯基團及琥珀醯亞胺壬二酸酯(SAZ)基團。
- 如請求項8或9之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中該含親核基團之交聯劑係胺，較佳地為包含兩個或更多個一級脂族胺基的分子量低於1,000 Da之小分子胺，更佳地為選自由以下組成之群的小分子胺：二離胺酸、三離胺酸、四離胺酸、乙二胺、1,3-二胺基丙烷、1,3-二胺基丙烷、二伸乙基三胺及三甲基六亞甲基二胺，甚至更佳地為三離胺酸且最佳為乙酸三離胺酸。
- 如請求項10之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中該含親核基團之交聯劑係經標記，較佳地用顯現劑標記，更佳地用選自由以下組成之群之顯現劑標記的三離胺酸：螢光團如螢光素、羅丹明、香豆素及花青，且甚至更佳地為螢光素結合之三離胺酸，且最佳地為藉由使乙酸三離胺酸與N-羥基琥珀醯亞胺(NHS)-螢光素反應獲得的螢光素結合之三離胺酸。
- 如請求項6至11中任一項之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中該等多臂聚合物單元包含4a20kPEG單元且該等交聯單元包含螢光素結合之三離胺酸醯胺單元。
- 如請求項4至12中任一項之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中該聚合物網路係藉由使4a20kPEG-SG或4a20kPEG-SAP與螢光素結合之三離胺酸以在約1:2至約2:1範圍內之莫耳比，較佳地以約1:1之莫耳比反應而獲得。
- 如請求項1至13中任一項之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中該插入物在乾燥狀態下含有以該插入物之總重量計約15重量%至約80重量%的該環孢菌素及以該插入物之總重量計約20重量%至約60重量%的聚合物單元，較佳地含有以該插入物之總重量計30重量%至65重量%的該環孢菌素及以該插入物之總重量計25重量%至50重量%的聚合物單元，且更較佳地含有以該插入物之總重量計45重量%至55重量%的該環孢菌素及以該插入物之總重量計37重量%至47重量%的聚合物單元。
- 一種包含水凝膠及環孢菌素之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中該插入物在乾燥狀態下含有以該插入物之總重量計約40重量%至約80重量%之該環孢菌素。
- 如請求項1至15中任一項之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中該插入物在乾燥狀態下含有以該插入物之總重量計45重量%至55重量%之該環孢菌素。
- 如請求項1至16中任一項之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中該插入物含有界面活性劑。
- 一種包含水凝膠及環孢菌素之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中該插入物含有界面活性劑。
- 如請求項17或18之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中該插入物在乾燥狀態下含有以該插入物之總重量計約0.01重量%至約5重量%，較佳地0.2重量%至2重量%的界面活性劑。
- 如請求項17至19中任一項之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中該插入物含有非離子型界面活性劑，較佳地包含聚(乙二醇)鏈之非離子型界面活性劑，其中該界面活性劑更佳地選自由以下組成之群：聚(乙二醇)脫水山梨糖醇單月桂酸酯、蓖麻油之聚(乙二醇)酯及乙氧基化 4-三級辛基苯酚/甲醛縮聚物，且甚至更佳地選自由以下組成之群：聚(乙二醇)-20-脫水山梨糖醇單月桂酸酯、聚(乙二醇)-80-脫水山梨糖醇單月桂酸酯、蓖麻油之聚(乙二醇)-35酯及乙氧基化4-三級辛基苯酚/甲醛縮聚物，且最佳地係乙氧基化4-三級辛基苯酚/甲醛縮聚物。
- 如請求項1至20中任一項之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中在2至8℃溫度下儲存至少3個月，較佳地至少6個月且更佳地至少12個月後藉由HPLC所量測，該環孢菌素之含量係約300至約410 μg或約90重量%至約110重量%。
- 如請求項1至21中任一項之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中在2至8℃溫度下儲存至少3個月，較佳地至少6個月且更佳地至少12個月後藉由HPLC所量測，雜質之量不超過3.0%。
- 如請求項1至22中任一項之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中該插入物呈纖維形式，其中該纖維較佳地具有約1.5 mm至約4.0 mm之平均長度及在其乾燥狀態下不超過0.8 mm之平均直徑，更佳地具有2.0 mm至2.5 mm之平均長度及在其乾燥狀態下不超過0.62 mm之平均直徑，且甚至更佳地具有2.5 mm至2.9 mm之平均長度及在其乾燥狀態下不超過0.62 mm之平均直徑。
- 如請求項1至23中任一項之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中在2至8℃溫度下儲存至少3個月後，較佳地至少6個月且更佳地至少12個月後，該插入物呈平均長度為約2.5 mm至約2.9 mm且在其乾燥狀態下平均直徑不超過0.62 mm之纖維形式。
- 如請求項1至24中任一項之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中該插入物係呈在37℃下在活體外於pH 7.4之磷酸鹽緩衝鹽水中水合10分鐘後在膨脹狀態下平均直徑為至少1.0 mm或在水合24小時後在平衡狀態下平均直徑為至少1.3 mm之纖維形式。
- 如請求項1至25中任一項之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中該插入物在插入後約1至約6個月內、較佳地在2至4個月內、更佳地在2至3個月內或在3至4個月內於該淚小管中崩解。
- 如請求項1至26中任一項之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中在插入該淚小管中後，該插入物在插入後經至少約1個月，較佳地至少2個月且更佳地至少約3個月之時段釋放治療有效量的環孢菌素。
- 如請求項1至27中任一項之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中在該插入物插入人類個體後，環孢菌素係以每天約0.1 µg至每天約10 µg之平均速率，較佳地以每天1 µg至每天5 µg之平均速率且更佳地以每天2 µg至每天4 µg之平均速率自該插入物釋放。
- 如請求項1至28中任一項之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中在插入人類個體後，環孢菌素之淚液濃度在約0.1 µg/mL至約10 µg/mL範圍內，且較佳地在約1µg/mL至約5 µg/mL範圍內。
- 如請求項1至29中任一項之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中在該插入物中所包含之該等環孢菌素顆粒完全溶解之前，該插入物於該淚小管中崩解。
- 如請求項1至30中任一項之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中該纖維在乾燥之前或之後已經拉伸，且較佳地在乾燥之前已經拉伸。
- 一種包含水凝膠及環孢菌素之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，該插入物呈纖維形式，其中該纖維經拉伸。
- 如請求項31或32之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其中該纖維已在縱向上以約1.0至約4.0、較佳地以約1.5至約3.0、更佳地以約2.7之拉伸因子拉伸。
- 一種持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其包含： 包含聚合物網路之水凝膠，該聚合物網路係藉由使4a20kPEG-SG與螢光素結合之三離胺酸以約1:1之莫耳比反應獲得， 及約360 μg量之環孢菌素， 該插入物呈平均長度為約2.5 mm至約2.9 mm且在其乾燥狀態下平均直徑不超過0.62 mm之纖維形式。
- 一種持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其包含： 包含聚合物網路之水凝膠，該聚合物網路係藉由使4a20kPEG-SAP與螢光素結合之三離胺酸以約1:1之莫耳比反應獲得， 及約360 μg量之環孢菌素， 該插入物呈平均長度為約2.5 mm至約2.9 mm且在其乾燥狀態下平均直徑不超過0.62 mm之纖維形式。
- 一種治療或預防有需要之人類個體之眼部疾病的方法，該方法包括將第一如請求項1至35中任一項之包含水凝膠及環孢菌素之持續釋放可生物降解淚小管內插入物插入該人類個體之淚小管中。
- 如請求項36之方法，其中 該第一插入物留在該淚小管中直至完全崩解及/或 該第一插入物係設計成在插入後約3至約4個月內在該淚小管中崩解。
- 一種治療個體之乾眼病的方法，該方法包括以下步驟： (a) 將第一可生物降解插入物插入該個體之第一隻眼之第一淚小管中，其中該插入物包含： (1) 水凝膠； (2) 約100 μg至約800 μg分散於該水凝膠中之環孢菌素； (3) 其中該環孢菌素自該第一插入物插入該個體之日起經至少約2個月時段以每天約0.1 μg至每天約10 µg之平均速率自該插入物釋放；及 (b) 自插入該第一插入物之日起至少約2個月後，將第二插入物插入該個體之該第一隻眼之第一眼淚小管中，其中該第二插入物與該第一插入物實質上類似。
- 如請求項38之方法，其中 該第一插入物係在完全崩解之前移除且較佳地，將第二插入物插入以替換移除的第一插入物，及/或 該第一插入物係設計成在插入後約2至約3個月內在該淚小管中崩解，及/或 該第一插入物留在該淚小管中直至完全崩解。
- 如請求項36至39中任一項之方法，其中第二插入物係在至少2個月之後，在沒有預先移除該第一插入物的情況下插入，或其中該第一插入物係在完全崩解之前移除且將第二插入物插入以替換移除的第一插入物，其中較佳地，該第一插入物係設計成在插入後約2至約3個月內在該淚小管中崩解且該第一插入物係在插入後2個月內移除。
- 如請求項36至40中任一項之方法，其中該眼部疾病係淚膜及眼表之病症，較佳地為乾眼病，其中更佳地，該眼部疾病與一或多種選自由以下組成之群的疾患相關：灼燒感、搔癢、發紅、刺痛、疼痛、異物感、視覺障礙、淚腺發炎、眼表發炎、T細胞介導之發炎、淚液中存在結膜T細胞及淚液中炎性細胞介素之含量升高。
- 如請求項36至41中任一項之方法，其中如藉由Schirmer淚液測試所量測，該治療有效改善在該插入物插入之前Schirmer評分小於10 mm之個體中的淚液產生，且其中較佳地，該Schirmer評分在插入後6週增加至少 2 mm及/或在插入後12週增加至少3 mm，及/或 其中如藉由一或多種選自由以下組成之群的評定所測定，該治療有效減少眼乾症狀：在視覺模擬量表上對眼乾症狀之嚴重程度進行評級；在視覺模擬量表上對眼乾症狀之頻率進行評級；淚膜破裂時間之測定；角膜螢光素染色；結膜麗絲胺綠染色；最佳矯正視敏度；眼表疾病指數之測定；及標準患者眼乾評估，其中較佳地，總角膜螢光素染色值tCFS在插入後6週減小至少1.5及/或在插入後12週減小至少3，且其中較佳地，該在視覺模擬量表上對眼乾症狀之嚴重程度的評級在插入後2週降低至少10及/或在插入後6週降低至少15。
- 如請求項36至42中任一項之方法，其中治療期係至少1個月、至少2個月或至少3個月。
- 一種製造如請求項1至35中任一項之包含水凝膠及環孢菌素之持續釋放可生物降解淚小管內插入物的方法，該方法包括以下步驟： a) 製備含有水凝膠前驅物之前驅物混合物及分散於該前驅物混合物中之環孢菌素顆粒， b) 使該前驅物混合物成形，並使該等水凝膠前驅物交聯形成聚合物網路並獲得包含該聚合物網路之成形水凝膠混合物，及 c) 乾燥該水凝膠混合物以提供該插入物。
- 如請求項44之方法，其中在步驟a)中，該前驅物混合物係藉由在微粉化環孢菌素顆粒存在下在緩沖水溶液中混合含親電子基團之多臂聚合物前驅物與含親核基團之交聯劑來製備，其中較佳地，該含親電子基團之多臂聚合物前驅物係提供於緩衝水性前驅物溶液中且該含親核基團之交聯劑係提供於包含該等微粉化環孢菌素顆粒之緩沖水性前驅物懸浮液中。
- 如請求項44或45之方法，其中在步驟a)中，在混合含有環孢菌素顆粒之該前驅物混合物之組分之後，將其在真空下脫氣。
- 如請求項44至46中任一項之方法，其中該方法進一步包括拉伸水凝膠混合物纖維，且該拉伸係在乾燥該水凝膠混合物之前或之後執行，其中較佳地，該纖維係以約1至約4.5之拉伸因子拉伸。
- 一種藉由在縱向方向上拉伸水凝膠混合物纖維賦予該水凝膠混合物纖維形狀記憶之方法，該水凝膠混合物纖維包含分散於水凝膠中之環孢菌素顆粒。
- 一種如請求項1至35中任一項之包含水凝膠及環孢菌素之持續釋放可生物降解淚小管內插入物在製備用於根據請求項36至43中任一項治療有需要之人類個體之眼部疾病之藥劑中的用途。
- 如請求項1至35中任一項之包含水凝膠及環孢菌素之持續釋放可生物降解淚小管內插入物，其用於根據請求項36至43中任一項治療有需要之人類個體之眼部疾病。
Applications Claiming Priority (4)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US202063082505P | 2020-09-24 | 2020-09-24 | |
| US63/082,505 | 2020-09-24 | ||
| US202063124204P | 2020-12-11 | 2020-12-11 | |
| US63/124,204 | 2020-12-11 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| TW202228761A true TW202228761A (zh) | 2022-08-01 |
Family
ID=77913038
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| TW110135433A TW202228761A (zh) | 2020-09-24 | 2021-09-23 | 包含水凝膠及環孢菌素之持續釋放可生物降解淚小管內插入物 |
Country Status (13)
| Country | Link |
|---|---|
| US (4) | US11291627B1 (zh) |
| EP (2) | EP4344745A2 (zh) |
| KR (1) | KR20230074160A (zh) |
| CN (1) | CN116194091A (zh) |
| AU (1) | AU2021347318A1 (zh) |
| BR (1) | BR112023004378A2 (zh) |
| CA (1) | CA3174203A1 (zh) |
| DK (1) | DK3973952T3 (zh) |
| ES (1) | ES2975148T3 (zh) |
| IL (1) | IL300089A (zh) |
| MX (1) | MX2023003274A (zh) |
| TW (1) | TW202228761A (zh) |
| WO (1) | WO2022066884A1 (zh) |
Families Citing this family (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2022066891A1 (en) * | 2020-09-24 | 2022-03-31 | Ocular Therapeutix, Inc. | Sustained release biodegradable intracanalicular inserts comprising a hydrogel and an active agent |
| KR20230074160A (ko) * | 2020-09-24 | 2023-05-26 | 오큘라 테라퓨틱스, 인코포레이티드 | 하이드로겔 및 사이클로스포린을 포함하는 지속 방출 생분해성 소관내 삽입체 |
| WO2024035690A1 (en) * | 2022-08-12 | 2024-02-15 | Ocular Therapeutix, Inc. | Organogels for sustained drug delivery, methods of preparation and use thereof |
Family Cites Families (44)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3993071A (en) | 1971-09-09 | 1976-11-23 | Alza Corporation | Bioerodible ocular device |
| US4915684A (en) | 1988-06-21 | 1990-04-10 | Mackeen Donald L | Method and apparatus for modulating the flow of lacrimal fluid through a punctum and associated canaliculus |
| US5469867A (en) | 1992-09-02 | 1995-11-28 | Landec Corporation | Cast-in place thermoplastic channel occluder |
| US6027470A (en) | 1998-06-10 | 2000-02-22 | Eagle Vision, Inc. | Punctum plug and method for inserting the same into the punctual opening |
| US5902598A (en) | 1997-08-28 | 1999-05-11 | Control Delivery Systems, Inc. | Sustained release drug delivery devices |
| US6646001B2 (en) | 1997-12-19 | 2003-11-11 | Alcon Manufacturing, Ltd. | Use of non-steroidal anti-inflammatory agents in combination with prostaglandin FP receptor agonists to treat glaucoma and ocular hypertension |
| US6632457B1 (en) | 1998-08-14 | 2003-10-14 | Incept Llc | Composite hydrogel drug delivery systems |
| US6703047B2 (en) | 2001-02-02 | 2004-03-09 | Incept Llc | Dehydrated hydrogel precursor-based, tissue adherent compositions and methods of use |
| US6179862B1 (en) * | 1998-08-14 | 2001-01-30 | Incept Llc | Methods and apparatus for in situ formation of hydrogels |
| US7347850B2 (en) | 1998-08-14 | 2008-03-25 | Incept Llc | Adhesion barriers applicable by minimally invasive surgery and methods of use thereof |
| US6509327B1 (en) | 1998-09-30 | 2003-01-21 | Alcon Manufacturing, Ltd. | Compositions and methods for treating otic, ophthalmic and nasal infections |
| EP1137373A4 (en) | 1998-12-04 | 2004-05-19 | Chandrashekhar P Pathak | BIOCOMPATIBLE, CROSSLINKED POLYMERS |
| ATE324417T1 (de) | 1999-12-17 | 2006-05-15 | Biopolymer Products Of Sweden | Polyphenolisches protein enthaltende bioadhäsive zusammensetzung |
| US6982090B2 (en) | 2001-05-10 | 2006-01-03 | Gillespie Donald E | More easily visualized punctum plug configurations |
| US20050283109A1 (en) | 2003-03-07 | 2005-12-22 | Peyman Gholam A | Method and apparatus for lacrimal canal obstruction |
| US20050197614A1 (en) | 2004-03-04 | 2005-09-08 | Wilson Pritchard | Occlusive biomedical devices, punctum plugs, and methods of use thereof |
| US20050232972A1 (en) | 2004-04-15 | 2005-10-20 | Steven Odrich | Drug delivery via punctal plug |
| WO2005107708A1 (en) | 2004-04-30 | 2005-11-17 | Allergan, Inc. | Biodegradable intravitreal tyrosine kinase inhibitors implants |
| EP1652552B1 (en) | 2004-11-02 | 2008-09-17 | Sydney Biotech Pty. Ltd. | Extraocular device |
| US7998497B2 (en) | 2006-03-31 | 2011-08-16 | Qlt Inc. | Nasolacrimal drainage system implants for drug therapy |
| US9173773B2 (en) | 2006-06-21 | 2015-11-03 | Johnson & Johnson Vision Care, Inc. | Punctal plugs for the delivery of active agents |
| US9127130B2 (en) * | 2006-08-11 | 2015-09-08 | Starpharma Pty Ltd. | Polylysine dendrimer contrast agent |
| US20080114076A1 (en) | 2006-11-09 | 2008-05-15 | Alcon Manufacturing Ltd. | Punctal plug comprising a water-insoluble polymeric matrix |
| US8080593B2 (en) | 2006-11-29 | 2011-12-20 | University Of Southern California | Reversible thermoresponsive adhesives for implants |
| US8673286B2 (en) | 2007-04-09 | 2014-03-18 | Northwestern University | DOPA-functionalized, branched, poly(aklylene oxide) adhesives |
| US9125807B2 (en) | 2007-07-09 | 2015-09-08 | Incept Llc | Adhesive hydrogels for ophthalmic drug delivery |
| AU2010213612B2 (en) | 2009-02-12 | 2015-04-30 | Incept, Llc | Drug delivery through hydrogel plugs |
| KR101091028B1 (ko) * | 2009-07-02 | 2011-12-09 | 아주대학교산학협력단 | 체내 주입형 하이드로젤 및 이의 생의학적 용도 |
| US8821457B2 (en) | 2010-09-08 | 2014-09-02 | Johnson & Johnson Vision Care, Inc. | Punctal plug containing drug formulation |
| US8961501B2 (en) | 2010-09-17 | 2015-02-24 | Incept, Llc | Method for applying flowable hydrogels to a cornea |
| JP6158177B2 (ja) * | 2011-06-06 | 2017-07-05 | スターファーマ・ピーティーワイ・リミテッド | 高分子 |
| CA2843875C (en) * | 2011-08-12 | 2020-01-07 | Ascendis Pharma A/S | High-loading water-soluble carrier-linked prodrugs |
| US10226417B2 (en) | 2011-09-16 | 2019-03-12 | Peter Jarrett | Drug delivery systems and applications |
| KR20190090048A (ko) | 2011-12-05 | 2019-07-31 | 인셉트, 엘엘씨 | 의료용 유기젤 방법 및 조성물 |
| JP7092502B2 (ja) | 2014-12-10 | 2022-06-28 | インセプト・リミテッド・ライアビリティ・カンパニー | ハイドロゲル薬物送達インプラント |
| EP4279064A3 (en) | 2015-05-12 | 2024-02-28 | Incept, LLC | Drug delivery from hydrogels |
| US10617563B2 (en) | 2015-07-22 | 2020-04-14 | Incept, Llc | Coated implants |
| WO2017015616A1 (en) | 2015-07-22 | 2017-01-26 | Envisia Therapeutics, Inc. | Ocular protein delivery |
| WO2017091749A1 (en) | 2015-11-25 | 2017-06-01 | Incept, Llc | Shape changing drug delivery devices and methods |
| KR20240051303A (ko) * | 2016-09-23 | 2024-04-19 | 인셉트, 엘엘씨 | 전안방내 약물 전달 데포 |
| US10603274B2 (en) * | 2016-09-30 | 2020-03-31 | Mati Therapeutics Inc. | Ophthalmic drug sustained release formulation and uses thereof |
| CN107550921B (zh) * | 2017-08-24 | 2020-04-14 | 南京邮电大学 | 一种纳米颗粒-高分子可注射复合水凝胶双载药体系及其制备方法 |
| US11311267B2 (en) * | 2018-01-31 | 2022-04-26 | Siemens Healthcare Gmbh | Method of position planning for a recording system of a medical imaging device and medical imaging device |
| KR20230074160A (ko) * | 2020-09-24 | 2023-05-26 | 오큘라 테라퓨틱스, 인코포레이티드 | 하이드로겔 및 사이클로스포린을 포함하는 지속 방출 생분해성 소관내 삽입체 |
-
2021
- 2021-09-23 KR KR1020237010657A patent/KR20230074160A/ko unknown
- 2021-09-23 DK DK21198676.5T patent/DK3973952T3/da active
- 2021-09-23 CN CN202180065169.3A patent/CN116194091A/zh active Pending
- 2021-09-23 ES ES21198676T patent/ES2975148T3/es active Active
- 2021-09-23 US US17/483,250 patent/US11291627B1/en active Active
- 2021-09-23 BR BR112023004378A patent/BR112023004378A2/pt unknown
- 2021-09-23 US US17/483,220 patent/US11331267B2/en active Active
- 2021-09-23 MX MX2023003274A patent/MX2023003274A/es unknown
- 2021-09-23 CA CA3174203A patent/CA3174203A1/en active Pending
- 2021-09-23 AU AU2021347318A patent/AU2021347318A1/en active Pending
- 2021-09-23 EP EP24156258.6A patent/EP4344745A2/en active Pending
- 2021-09-23 TW TW110135433A patent/TW202228761A/zh unknown
- 2021-09-23 EP EP21198676.5A patent/EP3973952B1/en active Active
- 2021-09-23 IL IL300089A patent/IL300089A/en unknown
- 2021-09-23 WO PCT/US2021/051724 patent/WO2022066884A1/en active Application Filing
-
2022
- 2022-02-25 US US17/681,238 patent/US11779536B2/en active Active
-
2023
- 2023-07-28 US US18/227,463 patent/US20240041758A1/en active Pending
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| US20220087931A1 (en) | 2022-03-24 |
| US11291627B1 (en) | 2022-04-05 |
| KR20230074160A (ko) | 2023-05-26 |
| EP3973952A1 (en) | 2022-03-30 |
| US20220202706A1 (en) | 2022-06-30 |
| IL300089A (en) | 2023-03-01 |
| CN116194091A (zh) | 2023-05-30 |
| BR112023004378A2 (pt) | 2023-04-04 |
| EP4344745A2 (en) | 2024-04-03 |
| EP3973952B1 (en) | 2024-02-14 |
| US11331267B2 (en) | 2022-05-17 |
| US20220087932A1 (en) | 2022-03-24 |
| US11779536B2 (en) | 2023-10-10 |
| US20240041758A1 (en) | 2024-02-08 |
| ES2975148T3 (es) | 2024-07-03 |
| WO2022066884A1 (en) | 2022-03-31 |
| MX2023003274A (es) | 2023-04-12 |
| DK3973952T3 (da) | 2024-03-18 |
| AU2021347318A1 (en) | 2023-03-23 |
| CA3174203A1 (en) | 2022-03-31 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| TW202228761A (zh) | 包含水凝膠及環孢菌素之持續釋放可生物降解淚小管內插入物 | |
| EP2086502B1 (en) | Punctal plug comprising a water-insoluble polymeric matrix | |
| WO2016172712A2 (en) | Ophthalmic composition | |
| HU220864B1 (en) | Reversible, thermally gelling water-base medicinal compositions | |
| AU2018371787A1 (en) | Ophthalmic composition and delivery device thereof | |
| WO2011063606A1 (zh) | 一种含加替沙星的眼用凝胶剂及其制备方法 | |
| PT109154B (pt) | Tecnologia não-invasiva de inserto ocular para libertação controlada de fármacos | |
| US20230338281A1 (en) | Sustained release biodegradable intracanalicular inserts comprising a hydrogel and an active agent | |
| JP2022116147A (ja) | 一酸化窒素放出プロスタミドを含有する眼科用組成物 | |
| KR102268002B1 (ko) | 효과 지속성 점안제 조성물 | |
| Kesarwani et al. | Ocular implants: A novel approach to ocular drug delivery | |
| Mundada | Update on Polymers for Ocular Drug Delivery | |
| US20220183969A1 (en) | Ocular insert containing a glucocorticoid | |
| RU2781022C2 (ru) | Офтальмологические композиции, содержащие простамид, высвобождающий окись азота | |
| CA3174217A1 (en) | Ocular insert containing a glucocorticoid | |
| WO2023133278A1 (en) | Intracanalicular insert comprising an antimicrobial agent | |
| RU2340327C1 (ru) | Офтальмологический гель и способ его приготовления |