TW202214229A - 投與樹脂毒素(Resiniferatoxin)以治療膀胱痛或膀胱癌 - Google Patents

投與樹脂毒素(Resiniferatoxin)以治療膀胱痛或膀胱癌 Download PDF

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Abstract

本文揭示膀胱內投與樹脂毒素(resiniferatoxin, RTX)用於治療膀胱痛之方法及用於該等方法中之組合物。

Description

投與樹脂毒素(Resiniferatoxin)以治療膀胱痛或膀胱癌
本揭示內容提供治療膀胱痛及/或膀胱癌之方法，其包含膀胱內投與樹脂毒素(resiniferatoxin, RTX)；及用於該等方法中之樹脂毒素。
膀胱痛可發生於多種病況中，包括特發性膀胱炎及膀胱癌。該等病況中之膀胱痛可係適應不良的，即，與當前損傷或其他外部疼痛源無關之疼痛。導致適應不良性疼痛之病況發作後之神經元誤形成可導致不適當神經元連接及傳入傷害感受性神經元之不期望活動。
膀胱痛之治療可具有挑戰性。由於關於副作用及/或依賴/成癮之問題，長期全身性投與止痛藥係不期望的。同時，直接在傷害感受性神經末梢位點將疼痛抑制物質投與至膀胱已顯示矛盾的結果。
樹脂毒素(RTX)充當辣椒素(紅辣椒之辛辣味主要成分)之超強效類似物。RTX係自大戟屬( Euphorbia)之某些物種分離之三環二萜。高香草基係辣椒素之重要結構特徵且係辨別樹脂毒素與典型佛波醇(phorbol)相關化合物之最突出特徵。天然RTX具有以下結構：
Figure 02_image003
RTX及類似物化合物(例如亭牙毒素(tinyatoxin)及其他化合物(二萜之20-高香草基酯，例如12-去氧佛波醇13-苯基乙酸酯20-高香草酸酯及歐瑞香素(mezerein) 20-高香草酸酯))闡述於美國專利第4,939,194號；第5,021,450號；及第5,232,684號。亦已鑑別出其他樹脂毒素型類佛波醇(phorboid)類香草素(Szallasi等人(1999) Brit. J. Pharmacol.128:428-434)。
RTX已知作為TrpV1激動劑。TrpV1 (即，瞬態受體電位陽離子通道亞家族V成員1) (亦稱為類香草素受體-1 (VR1))係主要表現於傷害感受性初級傳入神經元中之多聚體陽離子通道(Caterina等人(1997) Nature389:816-824；Tominaga等人(1998) Neuron 21:531-543)。TrpV1之活化通常經由施加疼痛性熱發生於神經末梢，且在某些類型之發炎刺激期間上調。藉由化學激動劑活化周圍組織中之TrpV1導致打開鈣通道並傳導痛覺(Szalllasi等人(1999) Mol. Pharmacol.56:581-587)。然而，將某些TrpV1激動劑直接施加至表現TrpV1之神經元(神經節)之細胞體打開鈣通道並觸發一系列事件，導致程式性細胞死亡(「細胞凋亡」)(Karai等人(2004) J. of Clin. Invest.113:1344-1352)。
RTX先前已研究用於治療膀胱痛，但該等研究之結果通常係矛盾的且並不支持關於RTX對此適應症之效能的明確結論。參見例如Mourtzoukou等人(2008) Int. Urogynecol. J.19:1571-76摘要中(「Six studies provided contradictory results regarding the effectiveness of resiniferatoxin treatment [of interstitital cystitis]…. [T]he effectiveness of resiniferatoxin in the treatment of interstitial cystitis remains unknown.」)。
舉例而言，在Mourtzoukou等人上文文獻中，在第1573頁表1中匯總了一組研究，其中遞送至膀胱之劑量為3.14 mcg或約0.05 mcg/kg (即，100 ml 50 nM溶液，其中RTX之分子量為628.71 g/mol且一個普通人具有62 kg質量)或以下。此外，文獻中膀胱痛之討論表明，作為人類間質性膀胱炎/膀胱痛症候群之模型，與貓特發性膀胱炎相關之周圍變化係由「中樞介導之無菌發炎」引起。參見Kullman等人(2018) Front. Systems Neurosci.12:13 (15頁) 12。因此，現有教示指示，周圍治療可能係無效的且治療應針對中樞神經系統(CNS)。然而，鞘內及硬膜外投與由於(例如)接近脊髓而承擔較高風險度。
另外，膀胱痛可係適應不良的。適應不良性疼痛可出現於其中出現不適當量之疼痛且與中樞神經系統中之疼痛調節機制有關之任何慢性病況中，例如，在慢性或持續性傳入傷害感受性神經元活動之後。現有出版物涉及背根神經節及中樞神經系統在某些形式之適應不良性疼痛(包括幻肢痛)中之活動。參見例如Subedi等人， Pain Res. Treatment(2011) 2011:864605, 8頁(討論涉及皮質重組之中樞神經改變在適應不良幻肢痛機制中之參與)；Borkum, J. Rat-Emo. Cognitive-Behav. Ther.(2010) 28:4-24 (討論適應不良性認知在慢性疼痛中之作用)。目前觀點認為，適應不良性疼痛之發展通常開始於周圍，但導致中樞神經系統之敏化，在這一點上，敏化成為持續問題且預期周圍療法不能成功對抗敏化。綜上所述，該等出版物導致如下預期：將治療集中於背根神經節周圍之神經系統元件而不治療背根神經節或中樞神經系統可具有較低或低於針對背根神經節或中樞神經系統之治療的效能。該等教示與上面所討論關於RTX遞送至膀胱的發現相吻合，此顯示現有方法不充分。
因此，業內需要RTX用於治療膀胱痛之經改良方法及用途。本揭示內容旨在滿足此需求及/或提供其他益處。
值得注意地，本文中意識到相對於先前研究中所用之彼等劑量， 增加之劑量更有效地消融神經元且因此認為更有效。舉例而言，本文提供向有需要之個體膀胱內投與RTX以治療膀胱痛之方法，其中該RTX係以至少約10 mcg或至少約0.1 mcg/kg之劑量投與，其可提供高於現有方法之效能。
業內亦需要用於膀胱癌之經改良及/或替代治療選擇。如本文所述，已發現，RTX治療可提供對抗膀胱癌之有益效應。
因此，提供以下實例性實施例。實施例1係治療膀胱痛或膀胱癌之方法，其包含向需要治療膀胱痛或膀胱癌之個體膀胱內投與樹脂毒素(RTX)，其中該RTX係以至少約10 mcg或至少約0.1 mcg/kg之劑量投與，或該RTX係以使得RTX在膀胱中之膀胱內濃度為至少約0.1 mcg/ml之濃度及體積投與。
實施例2係用於治療膀胱痛或膀胱癌之方法中之包含樹脂毒素(RTX)之組合物，該方法包含以至少約10 mcg或至少約0.1 mcg/kg之劑量向需要治療膀胱痛或膀胱癌之個體膀胱內投與RTX，或該RTX係以使得RTX在膀胱中之膀胱內濃度為至少約0.1 mcg/ml之濃度及體積投與。
實施例3係根據實施例1或2之方法或使用之組合物，其中該膀胱痛包含適應不良性膀胱痛。
實施例4係前述實施例中之任一者之方法或使用之組合物，其中該治療減小該適應不良性疼痛之局部及中樞效應。
實施例5係根據前述實施例中之任一者之方法或使用之組合物，其中該個體患有膀胱炎。
實施例6係根據前述實施例中之任一者之方法或使用之組合物，其中該個體患有特發性膀胱炎。
實施例7係根據前述實施例中之任一者之方法或使用之組合物，其中該個體患有膀胱癌。
實施例8係根據前述實施例中之任一者之方法或使用之組合物，其中該膀胱痛包含神經性膀胱痛。
實施例9係根據前述實施例中之任一者之方法或使用之組合物，其中該膀胱痛係由C纖維之基於壓力之活化(stress-based activation)引起或與其相關。
實施例10係根據前述實施例中之任一者之方法或使用之組合物，其中該個體先前經歷膀胱手術。
實施例11係根據前述實施例中之任一者之方法或使用之組合物，其中該膀胱痛係在損傷之後，該損傷視情況係脊柱或下背損傷，例如椎間盤損傷。
實施例12係根據前述實施例中之任一者之方法或使用之組合物，其中該個體已經歷一次細菌性膀胱感染或複數次細菌性膀胱感染。
實施例13係根據前述實施例中之任一者之方法或使用之組合物，其中該個體具有高反應性膀胱及/或膀胱收縮及/或小便衝動之降低臨限值。
實施例14係根據前述實施例中之任一者之方法或使用之組合物，其中該方法包含以以下濃度投與RTX：0.1 mcg/ml - 0.2 mcg/ml、0.2 mcg/ml - 0.3 mcg/ml、0.3 mcg/ml - 0.4 mcg/ml、0.4 mcg/ml - 0.5 mcg/ml、0.5 mcg/ml - 0.6 mcg/ml、0.6 mcg/ml - 0.7 mcg/ml、0.7 mcg/ml - 0.8 mcg/ml、0.8 mcg/ml - 0.9 mcg/ml、0.9 mcg/ml - 1.0 mcg/ml、1.0 mcg/ml - 1.1 mcg/ml、1.1 mcg/ml - 1.2 mcg/ml、1.2 mcg/ml - 1.3 mcg/ml、1.3 mcg/ml - 1.4 mcg/ml、1.4 mcg/ml - 1.5 mcg/ml、1.5 mcg/ml - 2 mcg/ml、2 mcg/ml - 3 mcg/ml、3 mcg/ml - 4 mcg/ml、4 mcg/ml - 5 mcg/ml、5 mcg/ml - 6 mcg/ml、6 mcg/ml - 7 mcg/ml、7 mcg/ml - 8 mcg/ml、8 mcg/ml - 9 mcg/ml、9 mcg/ml - 10 mcg/ml、10 mcg/ml - 11 mcg/ml、11 mcg/ml - 12 mcg/ml、12 mcg/ml - 13 mcg/ml、13 mcg/ml - 14 mcg/ml或14 mcg/ml - 15 mcg/ml。
實施例14a係實施例14之方法或使用之組合物，其中該方法包含以0.3 mcg/ml - 0.4 mcg/ml之濃度投與RTX。實施例14b係實施例14之方法或使用之組合物，其中該方法包含以0.4 mcg/ml - 0.5 mcg/ml之濃度投與RTX。實施例14c係實施例14之方法或使用之組合物，其中該方法包含以0.5 mcg/ml - 0.6 mcg/ml之濃度投與RTX。實施例14d係實施例14之方法或使用之組合物，其中該方法包含以0.6 mcg/ml - 0.7 mcg/ml之濃度投與RTX。實施例14e係實施例14之方法或使用之組合物，其中該方法包含以0.7 mcg/ml - 0.8 mcg/ml之濃度投與RTX。實施例14f係實施例14之方法或使用之組合物，其中該方法包含以0.8 mcg/ml - 0.9 mcg/ml之濃度投與RTX。實施例14g係實施例14之方法或使用之組合物，其中該方法包含以0.9 mcg/ml - 1.0 mcg/ml之濃度投與RTX。實施例14h係實施例14之方法或使用之組合物，其中該方法包含以1.0 mcg/ml - 1.1 mcg/ml之濃度投與RTX。實施例14i係實施例14之方法或使用之組合物，其中該方法包含以1.1 mcg/ml - 1.2 mcg/ml之濃度投與RTX。實施例14j係實施例14之方法或使用之組合物，其中該方法包含以1.2 mcg/ml - 1.3 mcg/ml之濃度投與RTX。實施例14k係實施例14之方法或使用之組合物，其中該方法包含以1.3 mcg/ml - 1.4 mcg/ml之濃度投與RTX。實施例14l係實施例14之方法或使用之組合物，其中該方法包含以1.4 mcg/ml - 1.5 mcg/ml之濃度投與RTX。實施例14m係實施例14之方法或使用之組合物，其中該方法包含以1.5 mcg/ml - 2 mcg/ml之濃度投與RTX。實施例14n係實施例14之方法或使用之組合物，其中該方法包含以2 mcg/ml - 3 mcg/ml之濃度投與RTX。實施例14o係實施例14之方法或使用之組合物，其中該方法包含以3 mcg/ml - 4 mcg/ml之濃度投與RTX。實施例14p係實施例14之方法或使用之組合物，其中該方法包含以4 mcg/ml - 5 mcg/ml之濃度投與RTX。實施例14q係實施例14之方法或使用之組合物，其中該方法包含以5 mcg/ml - 6 mcg/ml之濃度投與RTX。實施例14r係實施例14之方法或使用之組合物，其中該方法包含以6 mcg/ml - 7 mcg/ml之濃度投與RTX。實施例14s係實施例14之方法或使用之組合物，其中該方法包含以7 mcg/ml - 8 mcg/ml之濃度投與RTX。實施例14t係實施例14之方法或使用之組合物，其中該方法包含以8 mcg/ml - 9 mcg/ml之濃度投與RTX。實施例14u係實施例14之方法或使用之組合物，其中該方法包含以9 mcg/ml - 10 mcg/ml之濃度投與RTX。實施例14v係實施例14之方法或使用之組合物，其中該方法包含以10 mcg/ml - 11 mcg/ml之濃度投與RTX。實施例14w係實施例14之方法或使用之組合物，其中該方法包含以11 mcg/ml - 12 mcg/ml之濃度投與RTX。實施例14x係實施例14之方法或使用之組合物，其中該方法包含以12 mcg/ml - 13 mcg/ml之濃度投與RTX。實施例14y係實施例14之方法或使用之組合物，其中該方法包含以13 mcg/ml - 14 mcg/ml之濃度投與RTX。實施例14z係實施例14之方法或使用之組合物，其中該方法包含以14 mcg/ml - 15 mcg/ml之濃度投與RTX。
實施例15係根據前述實施例中之任一者之方法或使用之組合物，其中膀胱內投與10 mcg - 20 mcg、20 mcg - 30 mcg、30 mcg - 40 mcg、40 mcg - 50 mcg、50 mcg - 60 mcg、60 mcg - 70 mcg、70 mcg - 80 mcg、80 mcg - 90 mcg、90 mcg - 100 mcg、100 mcg - 110 mcg、110 mcg - 120 mcg、120 mcg - 130 mcg、130 mcg - 140 mcg、140 mcg - 150 mcg、150 mcg - 160 mcg、160 mcg - 170 mcg、170 mcg - 180 mcg、180 mcg - 190 mcg、190 mcg - 200 mcg、200 mcg - 210 mcg、210 mcg - 220 mcg、220 mcg - 230 mcg、230 mcg - 240 mcg、240 mcg - 250 mcg、250 mcg - 260 mcg、260 mcg - 270 mcg、270 mcg - 280 mcg、280 mcg - 290 mcg或290 mcg - 300 mcg之劑量的RTX。
實施例15a係實施例15之方法或使用之組合物，其中膀胱內投與之RTX之該劑量係10 mcg - 20 mcg。實施例15b係實施例15之方法或使用之組合物，其中膀胱內投與之RTX之該劑量係20 mcg - 30 mcg。實施例15c係實施例15之方法或使用之組合物，其中膀胱內投與之RTX之該劑量係30 mcg - 40 mcg。實施例15d係實施例15之方法或使用之組合物，其中膀胱內投與之RTX之該劑量係40 mcg - 50 mcg。實施例15e係實施例15之方法或使用之組合物，其中膀胱內投與之RTX之該劑量係50 mcg - 60 mcg。實施例15f係實施例15之方法或使用之組合物，其中膀胱內投與之RTX之該劑量係60 mcg - 70 mcg。實施例15g係實施例15之方法或使用之組合物，其中膀胱內投與之RTX之該劑量係70 mcg - 80 mcg。實施例15h係實施例15之方法或使用之組合物，其中膀胱內投與之RTX之該劑量係80 mcg - 90 mcg。實施例15i係實施例15之方法或使用之組合物，其中膀胱內投與之RTX之該劑量係90 mcg - 100 mcg。實施例15j係實施例15之方法或使用之組合物，其中膀胱內投與之RTX之該劑量係100 mcg - 110 mcg。實施例15k係實施例15之方法或使用之組合物，其中膀胱內投與之RTX之該劑量係110 mcg - 120 mcg。實施例15l係實施例15之方法或使用之組合物，其中膀胱內投與之RTX之該劑量係120 mcg - 130 mcg。實施例15m係實施例15之方法或使用之組合物，其中膀胱內投與之RTX之該劑量係130 mcg - 140 mcg。實施例15n係實施例15之方法或使用之組合物，其中膀胱內投與之RTX之該劑量係140 mcg - 150 mcg。實施例15o係實施例15之方法或使用之組合物，其中膀胱內投與之RTX之該劑量係150 mcg - 160 mcg。實施例15p係實施例15之方法或使用之組合物，其中膀胱內投與之RTX之該劑量係160 mcg - 170 mcg。實施例15q係實施例15之方法或使用之組合物，其中膀胱內投與之RTX之該劑量係170 mcg - 180 mcg。實施例15r係實施例15之方法或使用之組合物，其中膀胱內投與之RTX之該劑量係180 mcg - 190 mcg。實施例15s係實施例15之方法或使用之組合物，其中膀胱內投與之RTX之該劑量係190 mcg - 200 mcg。實施例15t係實施例15之方法或使用之組合物，其中膀胱內投與之RTX之該劑量係200 mcg - 210 mcg。實施例15u係實施例15之方法或使用之組合物，其中膀胱內投與之RTX之該劑量係210 mcg - 220 mcg。實施例15v係實施例15之方法或使用之組合物，其中膀胱內投與之RTX之該劑量係220 mcg - 230 mcg。實施例15x係實施例15之方法或使用之組合物，其中膀胱內投與之RTX之該劑量係230 mcg - 240 mcg。實施例15y係實施例15之方法或使用之組合物，其中膀胱內投與之RTX之該劑量係240 mcg - 250 mcg。實施例15z係實施例15之方法或使用之組合物，其中膀胱內投與之RTX之該劑量係250 mcg - 260 mcg。實施例15aa係實施例15之方法或使用之組合物，其中膀胱內投與之RTX之該劑量係260 mcg - 270 mcg。實施例15bb係實施例15之方法或使用之組合物，其中膀胱內投與之RTX之該劑量係270 mcg - 280 mcg。實施例15cc係實施例15之方法或使用之組合物，其中膀胱內投與之RTX之該劑量係280 mcg - 290 mcg。實施例15dd係實施例15之方法或使用之組合物，其中膀胱內投與之RTX之該劑量係290 mcg - 300 mcg。
實施例16係根據前述實施例中之任一者之方法或使用之組合物，其中膀胱內投與0.1 mcg/kg - 0.2 mcg/kg、0.2 mcg/kg - 0.3 mcg/kg、0.3 mcg/kg - 0.4 mcg/kg、0.4 mcg/kg - 0.5 mcg/kg、0.5 mcg/kg - 0.6 mcg/kg、0.6 mcg/kg - 0.7 mcg/kg、0.7 mcg/kg - 0.8 mcg/kg、0.8 mcg/kg - 0.9 mcg/kg、0.9 mcg/kg - 1 mcg/kg、1 mcg/kg - 1.2 mcg/kg、1.2 mcg/kg - 1.4 mcg/kg、1.4 mcg/kg - 1.6 mcg/kg、1.6 mcg/kg - 1.8 mcg/kg、1.8 mcg/kg - 2.0 mcg/kg、2.0 mcg/kg - 2.2 mcg/kg、2.2 mcg/kg - 2.4 mcg/kg、2.4 mcg/kg - 2.6 mcg/kg、2.6 mcg/kg - 2.8 mcg/kg、2.8 mcg/kg - 3.0 mcg/kg、3.0 mcg/kg - 3.2 mcg/kg、3.2 mcg/kg - 3.4 mcg/kg、3.4 mcg/kg - 3.6 mcg/kg、3.6 mcg/kg - 3.8 mcg/kg、4.0 mcg/kg - 4.2 mcg/kg、4.2 mcg/kg - 4.4 mcg/kg、4.4 mcg/kg - 4.6 mcg/kg、4.6 mcg/kg - 4.8 mcg/kg、4.8 mcg/kg - 5.0 mcg/kg、5.0 mcg/kg - 5.2 mcg/kg、5.2 mcg/kg - 5.4 mcg/kg、5.4 mcg/kg - 5.6 mcg/kg、5.6 mcg/kg - 5.8 mcg/kg或5.8 mcg/kg - 6.0 mcg/kg之劑量之RTX。
實施例16a係實施例16之方法或使用之組合物，其中膀胱內投與之RTX之該劑量係0.1 mcg/kg - 0.2 mcg/kg。實施例16b係實施例16之方法或使用之組合物，其中膀胱內投與之RTX之該劑量係0.2 mcg/kg - 0.3 mcg/kg。實施例16c係實施例16之方法或使用之組合物，其中膀胱內投與之RTX之該劑量係0.3 mcg/kg - 0.4 mcg/kg。實施例16d係實施例16之方法或使用之組合物，其中膀胱內投與之RTX之該劑量係0.4 mcg/kg - 0.5 mcg/kg。實施例16e係實施例16之方法或使用之組合物，其中膀胱內投與之RTX之該劑量係0.5 mcg/kg - 0.6 mcg/kg。實施例16f係實施例16之方法或使用之組合物，其中膀胱內投與之RTX之該劑量係0.6 mcg/kg - 0.7 mcg/kg。實施例16g係實施例16之方法或使用之組合物，其中膀胱內投與之RTX之該劑量係0.7 mcg/kg - 0.8 mcg/kg。實施例16h係實施例16之方法或使用之組合物，其中膀胱內投與之RTX之該劑量係0.8 mcg/kg - 0.9 mcg/kg。實施例16i係實施例16之方法或使用之組合物，其中膀胱內投與之RTX之該劑量係0.9 mcg/kg - 1 mcg/kg。實施例16j係實施例16之方法或使用之組合物，其中膀胱內投與之RTX之該劑量係1 mcg/kg - 1.2 mcg/kg。實施例16k係實施例16之方法或使用之組合物，其中膀胱內投與之RTX之該劑量係1.2 mcg/kg - 1.4 mcg/kg。實施例16l係實施例16之方法或使用之組合物，其中膀胱內投與之RTX之該劑量係1.4 mcg/kg - 1.6 mcg/kg。實施例16m係實施例16之方法或使用之組合物，其中膀胱內投與之RTX之該劑量係1.6 mcg/kg - 1.8 mcg/kg。實施例16n係實施例16之方法或使用之組合物，其中膀胱內投與之RTX之該劑量係1.8 mcg/kg - 2.0 mcg/kg。
實施例17係根據前述實施例中之任一者之方法或使用之組合物，其中該RTX係在具有以下體積之組合物中遞送：1 ml -10 ml、10 ml - 20 ml、20 ml - 30 ml、30 ml - 40 ml、40 ml - 50 ml、50 ml - 60 ml、60 ml - 70 ml、70 ml - 80 ml、80 ml - 90 ml、90 ml - 100 ml、100 ml - 110 ml、110 ml - 120 ml、120 ml - 130 ml、130 ml - 140 ml、140 ml - 150 ml、160 ml - 170 ml、170 ml - 180 ml、180 ml - 190 ml、190 ml - 200 ml、200 ml - 210 ml、210 ml - 220 ml、220 ml - 230 ml、230 ml - 240 ml、240 ml - 250 ml、260 ml - 270 ml、270 ml - 280 ml、280 ml - 290 ml或290 ml - 300 ml。
實施例17a係實施例17之方法或使用之組合物，其中該RTX係在體積為20 ml - 30 ml之組合物中遞送。實施例17b係實施例17之方法或使用之組合物，其中該RTX係在體積為30 ml - 40 ml之組合物中遞送。實施例17c係實施例17之方法或使用之組合物，其中該RTX係在體積為40 ml - 50 ml之組合物中遞送。實施例17d係實施例17之方法或使用之組合物，其中該RTX係在體積為50 ml - 60 ml之組合物中遞送。實施例17e係實施例17之方法或使用之組合物，其中該RTX係在體積為60 ml - 70 ml之組合物中遞送。實施例17f係實施例17之方法或使用之組合物，其中該RTX係在體積為70 ml - 80 ml之組合物中遞送。實施例17g係實施例17之方法或使用之組合物，其中該RTX係在體積為80 ml - 90 ml之組合物中遞送。實施例17h係實施例17之方法或使用之組合物，其中該RTX係在體積為90 ml - 100 ml之組合物中遞送。實施例17i係實施例17之方法或使用之組合物，其中該RTX係在體積為100 ml - 110 ml之組合物中遞送。實施例17j係實施例17之方法或使用之組合物，其中該RTX係在體積為110 ml - 120 ml之組合物中遞送。實施例17k係實施例17之方法或使用之組合物，其中該RTX係在體積為120 ml - 130 ml之組合物中遞送。實施例17m係實施例17之方法或使用之組合物，其中該RTX係在體積為130 ml - 140 ml之組合物中遞送。實施例17n係實施例17之方法或使用之組合物，其中該RTX係在體積為140 ml - 150 ml之組合物中遞送。實施例17o係實施例17之方法或使用之組合物，其中該RTX係在體積為1 ml - 10 ml之組合物中遞送。實施例17p係實施例17之方法或使用之組合物，其中該RTX係在體積為10 ml - 20 ml之組合物中遞送。
實施例18係根據前述實施例中之任一者之方法或使用之組合物，其中該RTX係以使得RTX在膀胱中之膀胱內濃度為至少約0.1 mcg/ml之濃度及體積投與，例如0.1 mcg/ml - 0.2 mcg/ml、0.2 mcg/ml - 0.3 mcg/ml、0.3 mcg/ml - 0.4 mcg/ml、0.4 mcg/ml - 0.5 mcg/ml、0.5 mcg/ml - 0.6 mcg/ml、0.6 mcg/ml - 0.7 mcg/ml、0.7 mcg/ml - 0.8 mcg/ml、0.8 mcg/ml - 0.9 mcg/ml或0.9 mcg/ml - 1 mcg/ml。
實施例19係根據前述實施例中之任一者之方法或使用之組合物，其中該RTX係以使得RTX在膀胱中之膀胱內濃度為至少約1 mcg/ml之濃度及體積投與，例如1 mcg/ml - 1.1 mcg/ml、1.1 mcg/ml - 1.2 mcg/ml、1.2 mcg/ml - 1.3 mcg/ml、1.3 mcg/ml - 1.4 mcg/ml、1.4 mcg/ml - 1.5 mcg/ml、1.5 mcg/ml - 1.6 mcg/ml、1.6 mcg/ml - 1.7 mcg/ml、1.7 mcg/ml - 1.8 mcg/ml、1.8 mcg/ml - 1.9 mcg/ml或1.9 mcg/ml - 2 mcg/ml。
實施例20係前述實施例中之任一者之方法或使用之組合物，其中該RTX係以至少0.25 mcg/ml之濃度投與。
實施例21係前述實施例中之任一者之方法或使用之組合物，其中該RTX係以至少0.3 mcg/ml之濃度投與。
實施例22係前述實施例中之任一者之方法或使用之組合物，其中該RTX係以至少0.4 mcg/ml之濃度投與。
實施例23係前述實施例中之任一者之方法或使用之組合物，其中該RTX係以至少0.5 mcg/ml之濃度投與。
實施例23a係前述實施例中之任一者之方法或使用之組合物，其中該RTX係以至少1.0 mcg/ml之濃度投與。
實施例23b係前述實施例中之任一者之方法或使用之組合物，其中該RTX係以至少2.0 mcg/ml之濃度投與。
實施例24係前述實施例中之任一者之方法或使用之組合物，其中該個體係哺乳動物。
實施例25係實施例24之方法或使用之組合物，其中該哺乳動物係貓或狗。
實施例26係實施例24之方法或使用之組合物，其中該哺乳動物係人類。
實施例27係實施例26之方法或使用之組合物，其中該RTX係在具有以下體積之組合物中遞送：50 ml - 60 ml、60 ml - 70 ml、70 ml - 80 ml、80 ml - 90 ml、90 ml - 100 ml、100 ml - 110 ml、110 ml - 120 ml、120 ml - 130 ml、130 ml - 140 ml、140 ml - 150 ml、160 ml - 170 ml、170 ml - 180 ml、180 ml - 190 ml、190 ml - 200 ml、200 ml - 210 ml、210 ml - 220 ml、220 ml - 230 ml、230 ml - 240 ml或240 ml - 250 ml。
實施例28係根據前述實施例中之任一者之方法或使用之組合物，其中該方法包含投與醫藥調配物，該醫藥調配物包含該RTX及醫藥上可接受之載劑。
實施例29係實施例28之方法或使用之組合物，其中該醫藥上可接受之載劑包含水。
實施例30係實施例27或28之方法或使用之組合物，其中該醫藥上可接受之載劑包含聚山梨醇酯80。
實施例31係實施例28至30中之任一者之方法或使用之組合物，其中該醫藥上可接受之載劑包含緩衝劑，視情況其中該緩衝劑係磷酸鹽緩衝劑及/或該調配物之pH係約7.0-7.5或約7.2。
此專利申請案主張2020年6月19日提交之美國臨時申請案第63/041,577號及2020年12月1日提交之美國臨時申請案第63/120,044號之優先權，該兩者之內容出於所有目的以引用的方式整體併入本文中。
現將詳細參考本發明之某些實施例，在附圖中圖解說明該等實施例之實例。儘管將結合所闡釋實施例來闡述本發明，但應理解，該等實施例並不意欲將本發明限於彼等實施例。相反，本發明意欲涵蓋可包括於隨附申請專利範圍所界定之本發明內之所有替代、修飾及等效形式。
在詳細闡述本教示之前，應理解，本揭示內容並不限於特定組合物或製程步驟，因為該等可有所變化。應注意，除非上下文另外明確指定，否則本說明書及隨附申請專利範圍中所用之單數形式「一(a、an)」及「該」皆包括複數個指示物。因此，舉例而言，對「結合物」之提及包括複數個結合物且對「細胞」之提及包括複數個細胞及諸如此類。
數字範圍包括界定該範圍之數字。慮及有效數位及與量測相關之誤差，量測值及可量測值應理解為近似值。而且，「包含(comprise, comprises, comprising)」、「含有(contain, contains, containing)」、「包括(include, includes, including)」之使用亦不意欲具有限制性。應瞭解，前述一般說明及詳細說明二者僅為例示性及解釋性且並不限制教示內容。
除非在以上說明書中特別指出，否則說明書中列舉「包含」各種組分之實施例亦涵蓋「由所列舉組分組成」或「基本上由所列舉組分組成」；說明書中列舉「由各種組分組成」之實施例亦涵蓋「包含」所列舉組分或「基本上由所列舉組分組成」；且說明書中列舉「基本上由各種組分組成」之實施例亦涵蓋「由所列舉組分組成」或「包含」所列舉組分(此可互換性不適用於該等術語在申請專利範圍中之使用)。
本文所用之各部分標題僅出於組織目的，而不能解釋為以任何方式限制所述標的物。倘若以引用的方式併入之任何文獻與本說明書中定義之任何術語相矛盾，則以本說明書為準。儘管連同各種實施例闡述本發明教示，但並不意欲將本發明教示限制於該等實施例。相反，本發明教示囊括各種替代、修改及等效形式，如所屬領域的技術人員將瞭解。 A. 定義
「膀胱內」投與藥劑係指將該藥劑遞送至膀胱內部以便其接觸膀胱之內部表面。膀胱內投與可使用例如導尿管完成。或者，藥劑可藉由注射穿過腹壁並進入膀胱來膀胱內遞送。
「膀胱癌」係指膀胱中存在惡性細胞之任何病況。
「與膀胱癌相關之疼痛」係指患有膀胱癌之個體之來自膀胱之疼痛感覺，其中該等感覺並非由與癌症完全無關之一個原因或一組原因引起。認為部分由膀胱癌引起且部分由不相關原因引起之來自膀胱之疼痛感覺與膀胱癌相關。
「適應不良性疼痛」係指在組織癒合後及/或在不存在成比例的組織損傷之情況下持續存在之與實際組織損傷不成比例的疼痛，因此除任何潛在之當前疼痛源(例如損傷)以外，疼痛本身即係問題。適應不良性疼痛與神經性疼痛不同。
「神經性疼痛」係指由影響感覺神經元之損壞或疾病引起之疼痛。
如本文所用，術語「或其組合(or a combination thereof, or combinations thereof)」係指在該術語前之所列術語之任何及所有排列及組合。舉例而言，「A、B、C或其組合」意欲包括以下中之至少一者：A、B、C、AB、AC、BC或ABC，且若順序在特定上下文中很重要，則亦包括BA、CA、CB、ACB、CBA、BCA、BAC或CAB。繼續此實例，明確包括含有一或多個項目或術語之重複的組合，如BB、AAA、AAB、BBC、AAABCCCC、CBBAAA、CABABB等。熟習此項技術者應理解，除非自上下文另外顯而易見，否則通常對任何組合中之項目或術語之數量沒有限制。
除非上下文另有要求，否則術語「或」以包括性含義使用，亦即等同於「及/或」。 B. 實例性方法及使用之組合物
本文提供治療膀胱痛之方法，其包含向需要治療膀胱痛之個體膀胱內投與樹脂毒素(RTX)。亦提供用於治療膀胱痛之方法中之包含RTX之組合物，該方法包含向需要治療膀胱痛之個體膀胱內投與RTX，其中該RTX係以至少約10 mcg或至少約0.1 mcg/kg之劑量投與。本揭示內容部分地基於以下認識：儘管文獻中之陳述(例如Mourtzoukou等人，上文文獻)質疑RTX用於治療膀胱痛之有效性，但如本文所述投與RTX可有效消融膀胱中之傷害感受性神經末梢或神經纖維，此被認為係有效疼痛治療之指示。
膀胱痛可以多種不同方式出現。在一些實施例中，本文所治療之膀胱痛係適應不良的。適應不良性疼痛可在針對膀胱之手術之出現。在一些實施例中，本文所治療之膀胱痛係神經性的。膀胱痛可由C纖維之基於壓力之活化引起或與其相關。膀胱痛可由特發性膀胱炎(例如無菌特發性膀胱炎)引起或與其相關。膀胱痛可在使膀胱敏感及/或使其更具反應性之損傷(例如，脊柱或下背之損傷(例如椎間盤損傷))之後出現。膀胱之低含量細菌定植及/或相關免疫活動引起之復發性感染可導致膀胱痛或使膀胱中之神經末梢對疼痛更敏感。在一些實施例中，膀胱痛發生於具有高反應性膀胱(其可與脊椎損傷有關)及/或膀胱收縮及/或小便衝動之降低臨限值之個體中。可施加本文所述膀胱痛之治療以治療任何上述形式之膀胱痛。
關於適應不良性疼痛，儘管文獻表明中樞神經系統在適應不良性疼痛(包括其起源)中起實質性作用，但膀胱內投與RTX以治療膀胱痛可提供顯著緩解。不希望受限於任何具體理論，膀胱內投與RTX可中斷由傳入傷害感受性神經元攜帶之信號達足夠程度並持續足夠持續時間以提供局部以及中樞神經系統效應，從而導致適應不良性疼痛之長期減小或控制，而無需直接治療背根神經節或中樞神經系統，此與以下觀點相反：適應不良性疼痛涉及中樞神經系統之敏化，作為一持續問題，不太可能藉助周圍治療解決。因此，如本文所揭示膀胱內投與RTX以治療適應不良性疼痛可提供無法自文獻預測之益處，例如在無背根神經節或中樞神經系統之治療或全身性治療及其伴隨風險之情況下允許有效的疼痛緩解及/或相對於其他治療具有減小之頻率。
本文所述之組合物及方法適用於RTX在其中有效(例如，能夠結合並活化TrpV1或其同源物)且需要治療膀胱痛之任何個體。在一些實施例中，個體係哺乳動物。在一些實施例中，哺乳動物係人類。在一些實施例中，哺乳動物係貓。在一些實施例中，哺乳動物係狗。
在一些實施例中，個體患有膀胱癌。在一些實施例中，個體患有膀胱炎，例如特發性膀胱炎或間質性膀胱炎。
RTX可使用導尿管(例如Foley導尿管)膀胱內投與。 1. 劑量
在一些實施例中，RTX係以至少10 mcg之劑量投與，例如10 mcg - 20 mcg、20 mcg - 30 mcg、30 mcg - 40 mcg、40 mcg - 50 mcg、50 mcg - 60 mcg、60 mcg - 70 mcg、70 mcg - 80 mcg、80 mcg - 90 mcg、90 mcg - 100 mcg、100 mcg - 110 mcg、110 mcg - 120 mcg、120 mcg - 130 mcg、130 mcg - 140 mcg、140 mcg - 150 mcg、150 mcg - 160 mcg、160 mcg - 170 mcg、170 mcg - 180 mcg、180 mcg - 190 mcg、190 mcg - 200 mcg、200 mcg - 210 mcg、210 mcg - 220 mcg、220 mcg - 230 mcg、230 mcg - 240 mcg、240 mcg - 250 mcg、250 mcg - 260 mcg、260 mcg - 270 mcg、270 mcg - 280 mcg、280 mcg - 290 mcg或290 mcg - 300 mcg。
在一些實施例中，RTX係以至少約0.1 mcg/kg之劑量投與，例如0.1 mcg/kg - 0.2 mcg/kg、0.2 mcg/kg - 0.3 mcg/kg、0.3 mcg/kg - 0.4 mcg/kg、0.4 mcg/kg - 0.5 mcg/kg、0.5 mcg/kg - 0.6 mcg/kg、0.6 mcg/kg - 0.7 mcg/kg、0.7 mcg/kg - 0.8 mcg/kg、0.8 mcg/kg - 0.9 mcg/kg、0.9 mcg/kg - 1 mcg/kg、1 mcg/kg - 1.2 mcg/kg、1.2 mcg/kg - 1.4 mcg/kg、1.4 mcg/kg - 1.6 mcg/kg、1.6 mcg/kg - 1.8 mcg/kg、1.8 mcg/kg - 2.0 mcg/kg、2.0 mcg/kg - 2.2 mcg/kg、2.2 mcg/kg - 2.4 mcg/kg、2.4 mcg/kg - 2.6 mcg/kg、2.6 mcg/kg - 2.8 mcg/kg、2.8 mcg/kg - 3.0 mcg/kg、3.0 mcg/kg - 3.2 mcg/kg、3.2 mcg/kg - 3.4 mcg/kg、3.4 mcg/kg - 3.6 mcg/kg、3.6 mcg/kg - 3.8 mcg/kg、4.0 mcg/kg - 4.2 mcg/kg、4.2 mcg/kg - 4.4 mcg/kg、4.4 mcg/kg - 4.6 mcg/kg、4.6 mcg/kg - 4.8 mcg/kg、4.8 mcg/kg - 5.0 mcg/kg、5.0 mcg/kg - 5.2 mcg/kg、5.2 mcg/kg - 5.4 mcg/kg、5.4 mcg/kg - 5.6 mcg/kg、5.6 mcg/kg - 5.8 mcg/kg或5.8 mcg/kg - 6.0 mcg/kg。
在一些實施例中，RTX係以至少約0.25 mcg/ml之劑量投與。
在一些實施例中，RTX係以至少約0.3 mcg/ml之劑量投與。
在一些實施例中，RTX係以至少約0.4 mcg/ml之劑量投與。
在一些實施例中，RTX係以至少約0.5 mcg/ml之劑量投與。
在一些實施例中，RTX係以至少約1.0 mcg/ml之劑量投與。
在一些實施例中，RTX係以至少約2.0 mcg/ml之劑量投與。
在一些實施例中，RTX係在具有以下體積之組合物中遞送：1 ml -10 ml、10 ml - 20 ml、20 ml - 30 ml、30 ml - 40 ml、40 ml - 50 ml、50 ml - 60 ml、60 ml - 70 ml、70 ml - 80 ml、80 ml - 90 ml、90 ml - 100 ml、100 ml - 110 ml、110 ml - 120 ml、120 ml - 130 ml、130 ml - 140 ml、140 ml - 150 ml、160 ml - 170 ml、170 ml - 180 ml、180 ml - 190 ml、190 ml - 200 ml、200 ml - 210 ml、210 ml - 220 ml、220 ml - 230 ml、230 ml - 240 ml、240 ml - 250 ml、260 ml - 270 ml、270 ml - 280 ml、280 ml - 290 ml或290 ml - 300 ml。在一些實施例中，RTX係在體積為5 ml -15 ml之組合物中遞送。
劑量及體積可端視個體之大小及/或個體膀胱之內部容積進行調整。應注意，RTX特定針對TRPV1受體且因此對沒有足夠TRPV1受體對RTX敏感之非目標神經之影響程度要小得多。在一些實施例中，RTX係以使得RTX在膀胱中之膀胱內濃度為至少約0.1 mcg/ml之濃度及體積投與，例如0.1 mcg/ml - 0.2 mcg/ml、0.2 mcg/ml - 0.3 mcg/ml、0.3 mcg/ml - 0.4 mcg/ml、0.4 mcg/ml - 0.5 mcg/ml、0.5 mcg/ml - 0.6 mcg/ml、0.6 mcg/ml - 0.7 mcg/ml、0.7 mcg/ml - 0.8 mcg/ml、0.8 mcg/ml - 0.9 mcg/ml或0.9 mcg/ml - 1 mcg/ml。在一些實施例中，RTX係以使得RTX在膀胱中之膀胱內濃度為至少約1 mcg/ml之濃度及體積投與，例如1 mcg/ml - 1.1 mcg/ml、1.1 mcg/ml - 1.2 mcg/ml、1.2 mcg/ml - 1.3 mcg/ml、1.3 mcg/ml - 1.4 mcg/ml、1.4 mcg/ml - 1.5 mcg/ml、1.5 mcg/ml - 1.6 mcg/ml、1.6 mcg/ml - 1.7 mcg/ml、1.7 mcg/ml - 1.8 mcg/ml、1.8 mcg/ml - 1.9 mcg/ml或1.9 mcg/ml - 2 mcg/ml。 2. 調配物
RTX調配物之多個實例可在文獻中獲得。參見例如Ueda等人(2008) J. of Cardiovasc. Pharmacol.51:513-520及US 2015/0190509 A1。可使用RTX之任何適宜調配物用於膀胱內投與。在一些實施例中，RTX經製備以藉由在鹽水中稀釋投與。
在一些實施例中，可為上文所討論劑量之RTX係與醫藥上可接受之載劑一起投與。在一些實施例中，醫藥上可接受之載劑包含水。在一些實施例中，醫藥上可接受之載劑包含鹽水。在一些實施例中，醫藥上可接受之載劑包含聚山梨醇酯80。在一些實施例中，醫藥上可接受之載劑包含聚乙二醇。在一些實施例中，醫藥上可接受之載劑包含糖或糖醇。在一些實施例中，醫藥上可接受之載劑包含甘露醇。在一些實施例中，醫藥上可接受之載劑包含右旋糖。在一些實施例中，醫藥上可接受之載劑包含醫藥上可接受之緩衝劑。在一些實施例中，醫藥上可接受之載劑包含磷酸鹽緩衝劑。在一些實施例中，醫藥上可接受之載劑包含醫藥上可接受之鹽。在一些實施例中，醫藥上可接受之載劑包含NaCl。在一些實施例中，醫藥上可接受之載劑包含有機溶劑(例如乙醇或DMSO)，例如作為在稀釋於主要水性組合物中之前用作溶解RTX之助劑之少數或殘留組分。
RTX在調配物中之濃度可為用於遞送期望劑量之任何適宜值。在一些實施例中，RTX在醫藥調配物中之濃度在0.1至300 mcg/ml之範圍內。在一些實施例中，RTX在醫藥調配物中之濃度在以下範圍內：0.1-1 mcg/ml、1-5 mcg/ml、5-10 mcg/ml、10-20 mcg/ml、10-30 mcg/ml、20-30 mcg/ml、20-50 mcg/ml、50-100 mcg/ml、100-150 mcg/ml、150-200 mcg/ml、200-250 mcg/ml或250-300 mcg/ml。在一些實施例中，RTX在醫藥調配物中之濃度係0.1 mcg/ml - 0.2 mcg/ml、0.2 mcg/ml - 0.3 mcg/ml、0.3 mcg/ml - 0.4 mcg/ml、0.4 mcg/ml - 0.5 mcg/ml、0.5 mcg/ml - 0.6 mcg/ml、0.6 mcg/ml - 0.7 mcg/ml、0.7 mcg/ml - 0.8 mcg/ml、0.8 mcg/ml - 0.9 mcg/ml、0.9 mcg/ml - 1.0 mcg/ml、1.0 mcg/ml - 1.1 mcg/ml、1.1 mcg/ml - 1.2 mcg/ml、1.2 mcg/ml - 1.3 mcg/ml、1.3 mcg/ml - 1.4 mcg/ml、1.4 mcg/ml - 1.5 mcg/ml、1.5 mcg/ml - 2 mcg/ml、2 mcg/ml - 3 mcg/ml、3 mcg/ml - 4 mcg/ml、4 mcg/ml - 5 mcg/ml、5 mcg/ml - 6 mcg/ml、6 mcg/ml - 7 mcg/ml、7 mcg/ml - 8 mcg/ml、8 mcg/ml - 9 mcg/ml、9 mcg/ml - 10 mcg/ml、10 mcg/ml - 11 mcg/ml、11 mcg/ml - 12 mcg/ml、12 mcg/ml - 13 mcg/ml、13 mcg/ml - 14 mcg/ml或14 mcg/ml - 15 mcg/ml。
調配物可具有適於膀胱內投與之任何pH。在一些實施例中，醫藥調配物包含RTX且醫藥上可接受之載劑具有在6至7.6範圍內之pH。在一些實施例中，醫藥調配物包含RTX且醫藥上可接受之載劑具有在6至6.4、6.3至6.7、6.4至6.8、6.8至7.2、7至7.4或7.2至7.6範圍內之pH。在一些實施例中，醫藥調配物包含RTX且醫藥上可接受之載劑具有6.5或7.2之pH。
在一些實施例中，調配物包含聚山梨醇酯80。在一些實施例中，聚山梨醇酯80之濃度為0.03-7% w/v。在一些實施例中，聚山梨醇酯80之濃度為2-4% w/v。在一些實施例中，聚山梨醇酯80之濃度為3% w/v。調配物可進一步包含緩衝劑，例如磷酸鹽緩衝劑(例如磷酸鈉緩衝劑)。在一些實施例中，磷酸鹽緩衝劑之濃度為10-50 mM。在一些實施例中，磷酸鹽緩衝劑之濃度為10-30 mM。在一些實施例中，磷酸鹽緩衝劑之濃度為10 mM。在一些實施例中，磷酸鹽緩衝劑之濃度為30 mM。調配物可具有在7-7.5範圍內(例如約7.2)之pH。在一些實施例中，在上述調配物之任一者中，RTX之濃度可為10-30 mcg/ml，例如10 mcg/ml或25 mcg/ml。在一些實施例中，調配物進一步包含磷酸鹽緩衝劑，例如處於表1中針對磷酸鹽緩衝劑所示之濃度及pH。在一些實施例中，調配物進一步包含NaCl，例如處於表1中針對NaCl所示之濃度。當二者均存在時，磷酸鹽緩衝劑及NaCl可(但不一定)以針對個別調配物所示之濃度及磷酸鹽緩衝液pH之組合存在。
RTX之實例性調配物顯示於下表中。
表1. 實例性RTX溶液調配物
調配物編號 調配物組分 組分濃度
   1 RTX 聚山梨醇酯80 右旋糖 30 mM磷酸鹽緩衝劑w/ 0.44% NaCl 200 mcg/mL 7.0% w/v 0.8% w/v 30 mM, pH 7.2
2 RTX 聚乙二醇300 聚山梨醇酯80 右旋糖 10 mM磷酸鹽緩衝劑w/ 0.73% NaCl 200 mcg/mL 3.0% v/v 0.1% w/v 0.8% w/v 10 mM, pH 6.5
3 RTX 聚乙二醇300 聚山梨醇酯80 10 mM磷酸鹽緩衝劑w/ 0.86% NaCl 200 mcg/mL 30.0% v/v 1.0% w/v 10 mM, pH 6.5
4 RTX 聚乙二醇300 聚山梨醇酯80 10 mM磷酸鹽緩衝劑w/ 0.88% NaCl 200 mcg/mL 30.0% v/v 0.04% w/v 10 mM, pH 6.5
5 RTX 聚山梨醇酯80 右旋糖 30 mM磷酸鹽緩衝劑w/ 0.54% NaCl 200 mcg/mL 3.0% w/v 0.8% w/v 30 mM, pH 7.2
6 RTX 聚山梨醇酯80 甘露醇 30 mM磷酸鹽緩衝劑w/ 0.54% NaCl 200 mcg/mL 3.0% w/v 0.8% w/v 30 mM, pH 7.2
7 RTX 聚山梨醇酯80 甘露醇 30 mM磷酸鹽緩衝劑w/ 0.45% NaCl 200 mcg/mL 7.0% w/v 0.8% w/v 30 mM, pH 7.2
8 RTX 聚乙二醇300 聚山梨醇酯80 甘露醇 10 mM磷酸鹽緩衝劑w/ 0.74% NaCl 200 mcg/mL 3.0% v/v 0.1% w/v 0.8% w/v 10 mM, pH 6.5
9 RTX 聚乙二醇300 聚山梨醇酯80 右旋糖 10 mM磷酸鹽緩衝劑w/ 0.34% NaCl 200 mcg/mL 3.0% v/v 0.1% w/v 3.0% w/v 10 mM, pH 6.5
10 RTX 聚乙二醇300 聚山梨醇酯80 甘露醇 10 mM磷酸鹽緩衝劑w/ 0.36% NaCl 200 mcg/mL 3.0% v/v 0.1% w/v 3.0% w/v 10 mM, pH 6.5
11 RTX 聚山梨醇酯80 右旋糖 30 mM磷酸鹽緩衝劑w/ 0.54% NaCl 200 mcg/mL 0.03% w/v 0.05% w/v 30 mM, pH 7.2
12 RTX 聚山梨醇酯80 右旋糖 30 mM磷酸鹽緩衝劑w/ 0.54% NaCl 200 mcg/mL 3.0% w/v 5.0% w/v 30 mM, pH 7.2
13 RTX 聚山梨醇酯80 右旋糖 30 mM磷酸鹽緩衝劑w/ 0.54% NaCl 25 mcg/mL 3.0% w/v 5.0% w/v 30 mM, pH 7.2
14 RTX 聚山梨醇酯80 右旋糖 30 mM磷酸鹽緩衝劑w/ 0.54% NaCl 25 mcg/mL 0.03% w/v 0.05% w/v 30 mM, pH 7.2
15 RTX 聚山梨醇酯80 右旋糖 30 mM磷酸鹽緩衝劑w/ 0.54% NaCl 100 mcg/mL 0.03% w/v 0.05% w/v 30 mM, pH 7.2
16 RTX 聚山梨醇酯80 右旋糖 30 mM磷酸鹽緩衝劑w/ 0.54% NaCl 200 mcg/mL 7.0% w/v 5.0% w/v 30 mM, pH 7.2
在一些實施例中，表1中之調配物包括右旋糖。在實施例中，右旋糖之濃度為0.05-5% w/v。在一些實施例中，右旋糖之濃度為0.8-5% w/v。在一些實施例中，右旋糖之濃度為0.05% w/v。在一些實施例中，右旋糖之濃度為0.8% w/v。在一些實施例中，右旋糖之濃度為3.0% w/v。在一些實施例中，右旋糖之濃度為5.0% w/v。
在一些實施例中，表1中之調配物包括甘露醇。在一些實施例中，甘露醇之濃度為0.8-3.0% w/v。在一些實施例中，甘露醇之濃度為0.8% w/v。在一些實施例中，甘露醇之濃度為3.0% w/v。
在一些實施例中，自表1中所示之調配物省略右旋糖或甘露醇。
在一些實施例中，RTX在表1中所示調配物中之濃度調整至本文所揭示RTX濃度或濃度範圍中之任一者。舉例而言，在一些實施例中，RTX在表1中所示調配物中之濃度調整至0.3-200 mcg/ml。在一些實施例中，RTX在表1中所示調配物中之濃度為200 mcg/ml。在一些實施例中，RTX在表1中所示調配物中之濃度為0.3-100 mcg/ml。在一些實施例中，RTX在表1中所示調配物中之濃度為100 mcg/ml。在一些實施例中，RTX在表1中所示調配物中之濃度調整至0.3-50 mcg/ml。在一些實施例中，RTX在表1中所示調配物中之濃度為25 mcg/ml。作為另一實例，在一些實施例中，RTX在表1中所示調配物中之濃度調整至0.3-15 mcg/ml。作為另一實例，在一些實施例中，RTX在表1中所示調配物中之濃度調整至0.5-10 mcg/ml。作為另一實例，在一些實施例中，RTX在表1中所示調配物中之濃度調整至0.6-1.5 mcg/ml。自具有經調整RTX濃度之任一此調配物省略右旋糖或甘露醇。
表1中之調配物可根據以下實例性方法製備，該等方法係經提供用於調配物3及5，但可由熟習此項技術者調適以用於其他調配物。調配物3可藉由將46 mg磷酸二氫鈉一水合物、94.7 mg無水磷酸氫二鈉及860 mg NaCl添加至100 ml容量瓶製得。添加50 ml注射用水(WFI)以溶解燒瓶中之組分，隨後添加1.0 g聚山梨醇酯80以形成水性組分。將20 mg RTX添加至容量瓶中之水性組分，並利用鹽酸/氫氧化鈉將pH調整至7.2。然後添加30 mL PEG 300並將溶液音波處理以溶解固體。應注意，RTX初始有時將沈澱於水溶液與PEG之界面處，但在音波處理時將回到溶液中。利用水(WFI)將燒瓶中之全部混合物稀釋至體積(100.00 ml)並藉由顛倒過程將此混合。全部調配物藉助0.2 µm聚四氟乙烯(PTFE)過濾器過濾。
調配物5可藉由將138 mg磷酸二氫鈉一水合物、284.1 mg無水磷酸氫二鈉及540 mg NaCl添加至100 ml容量瓶製得。添加50 ml注射用水(WFI)以溶解燒瓶中之組分，隨後添加3.0 g聚山梨醇酯80及800 mg右旋糖以形成水性組分。將20 mg RTX添加至容量瓶中之水性組分，並利用鹽酸/氫氧化鈉將pH調整至7.2。然後將溶液音波處理以溶解所有固體。(或者，可將RTX初始溶解於小體積乙醇或DMSO中，並然後將此溶液添加至水性組分。) 利用水(WFI)將燒瓶中之全部混合物稀釋至體積(100.00 ml)並藉由顛倒過程將此混合。將全部調配物藉助0.2 µm PTFE過濾器過濾。
根據調配物11之調配物係使用以下各項製備：200 mcg RTX、300 mcg聚山梨醇酯80 (使用市售聚山梨醇酯80)；5.4 mg氯化鈉、500 mcg右旋糖、1.38 mg磷酸二氫鈉一水合物、2.84 mg無水磷酸氫二鈉及水(WFI)至1 mL，然後利用鹽酸/氫氧化鈉將pH調整至7.2。如上所述，可省略右旋糖。
根據調配物13之調配物係使用以下各項製備：25 mcg RTX、30 mg聚山梨醇酯80 (使用市售聚山梨醇酯80)；5.4 mg氯化鈉、50 mg右旋糖、1.38 mg磷酸二氫鈉一水合物、2.84 mg無水磷酸氫二鈉、水(WFI)至1 mL，然後利用鹽酸/氫氧化鈉將pH調整至7.2。如上所述，可省略右旋糖。
關於調配及投與技術之其他細節可見於Gennaro, A.編輯，Remington's Pharmaceutical Sciences, 第18版(1990) (Mack Publishing Co., Easton, Pa.)。 V.     實例  A．  膀胱內滴注RTX使健康貓膀胱中之傳入神經消融
為檢查膀胱內滴注RTX對膀胱之效應，將6隻年齡在2-5歲間之健康貓用5 (低劑量)、25 (中劑量)或50 mcg (高劑量)之RTX (體積為25 ml；濃度為0.2、1及2 mcg/ml)進行治療。該等劑量視為等效於以100 ml之體積在人類中投與20、100或200 mcg。第七隻貓僅接受鹽水並作為對照。將經麻醉貓之膀胱排空且然後利用無菌鹽水經由foley導尿管沖洗。一旦去除鹽水，經60秒投與利用RTX (試驗貓)或僅鹽水(對照貓)之治療並在膀胱中停留20分鐘。
將每隻貓之膀胱排空並在RTX治療前及在RTX治療後0.5、1及4小時收集用於藥物動力學分析之血液樣品。使用HPLC量測RTX之血漿濃度且結果顯示於下表2中。
表2.利用RTX治療後之RTX血漿濃度
RTX 滴注後貓之 RTX 血漿濃度 (pg/mL)
時間 (小時) 鹽水 5 mcg ，總計 25 mcg ，總計 50 mcg ，總計
KPX6 JFD8 IOS7 JIB5 JIR6 KQD5 JIL6
0 BQL BQL BQL BQL BQL BQL BQL
0.5 BQL BQL BQL 55.5 10.1* 8.77* BQL
1 BQL BQL BQL 13.5* BQL BQL BQL
4 - BQL BQL BQL BQL BQL BQL
*：樣品含有足夠信號雜訊比；值作為估計值報告. BQL = 低於可量化限值(＜ 50.0 pg/mL)。
除對於25 mcg及50 mcg組在0.5 h時(其中在0.5小時觀察到在8.77至55.5 pg/mL範圍內之峰值)且對於25 mcg組在1 h時以外，在所有時間點(0、0.5、1及4 h)，所有3組之RTX血漿含量均低於50 pg/mL。在4小時時，所有組中血漿中之RTX均低於可量化含量。
在第0、7及14天實施身體檢查、全血球計數及化學參數。全血球計數及化學參數係在University of Georgia之Clinical Pathology Laboratory進行分析。在整個研究時期監測食物消耗及異常排尿跡象。RTX耐受良好，其中在所有測試劑量(5 mcg、25 mcg或50 mcg)投與期間或之後均未注意到臨床不良效應。
在第14天，貓經麻醉並灌注鹽水，隨後灌注10%福馬林(formalin)。在確認成功安樂死後，採集脊髓之腰及薦段以及相應背根神經節、膀胱及尿道並準備組織用於免疫組織化學。
先前研究已顯示，TRPV1-免疫反應性軸突共同表現降鈣素基因相關肽(CGRP)及物質P (SP) (例如，參見Sharrad等人(2015) Neurosci. Lett., 599: 164-171；Bae等人(2004) J. Comp. Neurol.478: 62-71)。由於貓膀胱結締組織、平滑肌及S2 DRG之細胞體表現CGRP+及SP+軸突，因此該等研究中使用CGRP及SP之表現鑑別支配貓膀胱之大多數TRPV1軸突及貓S2背根神經節(DRG)中之TRPV1+ 細胞體。
圖1A-1H顯示代表性共焦影像，其證實在以5、25及50 mcg之劑量單次投與RTX後支配貓膀胱體之CGRP (圖1B、1C及1D)及SP (圖1F、1G及1H)軸突之存在。與對照(鹽水)相比，用RTX治療之貓(治療後14天)之兩種標記物之密度均降低。該等結果指示，支配膀胱體之CGRP及SP軸突均存在減少。
圖2A-2F顯示每一個別貓之膀胱之體部、三角區及底部中CGRP及SP傳入神經纖維之密度。圖3A-3F顯示膀胱之體部、三角區及底部中CGRP及SP傳入神經纖維之平均密度。利用於25 ml鹽水中之5 mcg RTX治療之貓通常顯示CGRP或SP纖維密度之適度降低。與對照相比，於25 ml鹽水中之25或50 mcg治療組中之貓在體部、三角區及底部中顯示CGRP及SP纖維密度之更顯著降低。數據指示，在彼程序中，於25 ml鹽水中之25 mcg及50 mcg劑量之RTX有效消融傳入神經。
如上所述，亦使用免疫組織化學及共焦雷射顯微鏡檢查膀胱內施加對照(鹽水)或RTX (5、25或50 mcg)後，來自貓膀胱之表現SP及CGRP之S1及S2 DRG的細胞體百分比。在S1及S2 DRG二者樣品中，在細胞體及其軸突中均觀察到CGRP免疫染色。CGRP陽性細胞體為小至中等大小。DRG中SP之定量免疫組織化學分析揭示，與CGRP相比，此神經肽在較少神經元中表現，且其表現僅限於小至中等大小之初級傳入神經元。如圖4A-4D所示，來自用鹽水對照(圖4A及4C)或以25 mcg膀胱內RTX (圖4B及4D)治療之貓之S2 DRG的共焦影像顯示，表現CGRP及SP之細胞體數量在RTX治療後未減少。
圖5A-5D顯示與對照相比，以5、25或50 mcg之劑量膀胱內RTX治療不影響S1及S2 DRG中表現CGRP及SP之細胞體的百分比。S1及S2 DRG中CRGP陽性細胞之百分比分別顯示於圖5A及5B中，且S1及S2 DRG中SP陽性細胞之百分比分別顯示於圖5C及5D中。 B．   在狗膀胱中膀胱內滴注之後RTX之藥物動力學及毒物動力學輪廓
在狗(n = 6)之膀胱中單次滴注RTX後，測定狗中RTX之局部耐受性及藥物動力學(PK)及毒物動力學(TK)輪廓。RTX調配物係使用無菌技術在生物安全櫃(BSC)中藉由將適量稀釋劑與適量RTX混合來製備。所用給藥調配物濃度為1及10 mcg/ml。
在此研究中使用重量在5.95至8.60 kg範圍內之三隻雄性及三隻雌性狗。將狗分配至第1組(接受1 mcg/mL劑量之RTX)或第2組(接受10 mcg/mL劑量之RTX)，如下表3所示。
表3. 試驗設計
組編號 RTX劑量(mcg) 劑量體積 a (mL) 劑量濃度 (mcg/mL) 動物數量 b
雄性 雌性
1 25 25 1 1 1
2 250 25 10 2 2
a兩組之投與途徑均為膀胱內滴注至膀胱中。 b將動物維持至第8天。
RTX係經由膀胱內滴注投與至膀胱中。在第1天經1小時(± 5分鐘)之時期以25 mL之總體積對動物給予25或250 mcg/劑量之單次劑量。RTX及稀釋劑係在全身麻醉下經由置於膀胱中之Foley導尿管投與給狗達1小時(± 5分鐘)。
對於所有動物，每天兩次實施發病率、死亡率、損傷以及食物及水之利用率之觀察。在第2天對所有動物之臨床症狀進行觀察。觀察包括評估皮膚、毛皮、眼睛、耳朵、鼻子、口腔、胸部、腹部、外生殖器、四肢及腳、呼吸及循環效應、自主神經效應(例如流涎)及神經系統效應(包括顫抖、驚厥、對處置之反應及異常行為)。
在第1天給藥前及在給藥後0.5、1、2、4、6、12、24、36、48、60及72小時自所有動物收集血液樣品。根據平均濃度-時間數據測定RTX及若適當代謝物之毒物動力學(TK)參數。
在雄性及雌性狗中給藥後2小時時，第1組狗中以1 mcg/mL 25 mL膀胱內投與RTX (總計25 mcg/劑量)後之RTX血漿濃度(pg/mL)低於可量化限值(＜50.0 pg/mL)。結果顯示於下表4中。250 mcg劑量後之狗(第2組)中RTX之血漿濃度及TK參數之個別值、平均值、SD及%CV值呈現於表5(雄性)及表6(雌性)中。在對雄性及雌性狗以250 mcg單次膀胱內滴注RTX至膀胱中後，RTX被迅速吸收於體循環中。在雄性及雌性二者中在0.75 ± 0.354小時之Tmax值下觀察到最高RTX濃度，並在給藥後4小時降至零。在雄性中，RTX Cmax值為352 ± 124 pg/mL且AUC(0-T)值為361 ± 6.36 pg∙h/mL，如表5中所示。
表4.利用25 mcg劑量之RTX治療之狗的血漿濃度.
時間 (h) 雄性狗 I.D. 雌性狗 I.D.
1001 1002
給藥前 BQL BQL
0.5 BQL 39.2*
1 15.5* 20.3*
2 BQL BQL
4 BQL BQL
6 BQL BQL
12 BQL BQL
24 BQL BQL
36 BQL BQL
48 BQL BQL
60 BQL BQL
72 BQL BQL
* BQL - 低於可量化限值(＜ 50.0 pg/mL)；足夠信號雜訊比使報告值能作為估計值
表5. 在250 mcg膀胱內滴注RTX至膀胱中後雄性狗中RTX之血漿濃度(pg/mL)及毒物動力學參數.
時間 (h) 雄性狗 I.D. 平均值 SD %CV
1003 1005
給藥前 0.00 0.00 0.00 0.00 -
0.5 257 440 349 129 37.1
1 264 151 208 79.9 38.5
2 59.7 63.3 61.5 2.55 4.14
4 0.00 0.00 0.00 0.00 -
6 0.00 0.00 0.00 0.00 -
12 0.00 0.00 0.00 0.00 -
24 0.00 0.00 0.00 0.00 -
36 0.00 0.00 0.00 0.00 -
48 0.00 0.00 0.00 0.00 -
60 0.00 0.00 0.00 0.00 -
72 0.00 0.00 0.00 0.00 -
Cmax, pg/mL 264 440 352 124 35.2
Cmax /劑量, pg/mL/(mcg) 1.06 1.76 1.41 0.495 35.1
Tmax, h 1.0 0.5 0.75 0.354 47.2
AUC(0-T), pg∙h/mL 356 365 361 6.36 1.76
AUC(0-T)/劑量, pg∙h/mL/(mcg) 1.42 1.46 1.44 0.0254 1.76
Cmax比率(雄性/雌性) - - 1.28 - -
AUC(0-T)比率(雄性/雌性) - - 1.23 - -
C max係自給藥開始所觀察到之最大血漿濃度。T max係達到C max之時間。AUC (0-T)係藉由線性梯形法則所計算自時間零至最後一個可量測時間點之血漿濃度-時間曲線下面積。
在雌性中，RTX C max值係274 ± 161 pg/mL且AUC (0-T)值係294 ± 209 pg∙h/mL，如下表6中所示。
表6. 在250 mcg膀胱內滴注RTX至膀胱中後雌性狗中RTX之血漿濃度(pg/mL)及毒物動力學參數.
時間 (h) 雌性狗 I.D. 平均值 SD %CV
1004 1006
給藥前 0.00 0.00 0.00 0.00 -
0.5 388 0.00 194 274 141
1 289 160 225 91.2 40.5
2 60.2 51.1 55.7 6.43 11.5
4 0.00 0.00 0.00 0.00 -
6 0.00 0.00 0.00 0.00 -
12 0.00 0.00 0.00 0.00 -
24 0.00 0.00 0.00 0.00 -
36 0.00 0.00 0.00 0.00 -
48 0.00 0.00 0.00 0.00 -
60 0.00 0.00 0.00 0.00 -
72 0.00 0.00 0.00 0.00 -
Cmax, pg/mL 388 160 274 161 58.8
Cmax /劑量, pg/mL/(mcg) 1.55 0.640 1.10 0.643 58.5
Tmax, h 0.5 1.0 0.75 0.354 47.2
AUC(0-T), pg∙h/mL 441 146 294 209 71.1
AUC(0-T)/劑量, pg∙h/mL/(mcg) 1.76 0.584 1.18 0.832 70.5
當以250 mcg單次膀胱內滴注至膀胱中投與給雄性及雌性狗時，RTX之全身TK暴露在狗中得到證實。數據顯示，RTX被迅速吸收至體循環中，其中在雄性及雌性中在T max值為0.75小時時觀察到最高RTX濃度。RTX暴露在雄性中看起來與在雌性中類似。RTX雄性/雌性比率對於C max為1.28且對於AUC (0-T)為1.23。
總之，RTX投與耐受良好且不會導致任何詳細的臨床觀察或體重變化。 C.     膀胱內滴注RTX消融健康犬膀胱中之傳入神經
類似於以上實例中所闡述之貓膀胱，免疫組織化學染色揭示來自未灌注動物之健康狗膀胱亦受呈現為單一軸突或神經纖維束之CGRP及SP陽性軸突(如圖6及7中分別顯示)支配。準備來自健康狗(對照)及以2個不同劑量(25 mcg及250 mcg)膀胱內施加樹脂毒素(RTX)之犬膀胱用於免疫組織化學及共焦雷射顯微鏡，以量化表現物質P (SP)及降鈣素基因相關肽(CGRP)之軸突。共焦影像係以40x放大率使用具有Z-堆疊功能之Carl Zeiss掃描共焦雷射顯微鏡(型號LSM 800, Jena, Germany)獲得。
圖8顯示代表性共焦影像，該等影像圖解說明支配來自健康狗(圖8A及8D)、利用RTX以25 mcg (圖8B及8E)或250 mcg (圖8C及8F)之劑量治療之動物之犬膀胱體之CGRP (圖8A-8C)及SP (圖8D-8F)免疫反應性軸突的存在。與來自對照狗之組織相比，以25 mcg及250 mcg之劑量的膀胱內RTX治療導致支配膀胱體之CGRP及SP軸突/兩者急劇減少。
為量化犬膀胱之不同區域中SP及CGRP免疫反應性軸突之密度，在10x放大率下觀察切片(對於對照n=1，對於25 mcg RTX，n=2，且對於250 mcg，n=4)以鑑別具有最大神經纖維密度之區。如圖9A-C及10A-C中所示，量化分析揭示與對照組織相比，在兩個劑量下之膀胱內RTX治療降低支配體部、三角區及底部之CGRP及SP神經纖維之密度。與接受25 mcg RTX之狗相比，250 mcg之劑量在降低CGRP及SP二者之密度方面具有更大作用。 D.     膀胱內滴注RTX消融病變膀胱中之傳入神經
如下利用RTX治療患有膀胱癌之狗。在全身麻醉下，將RTX使用foley導尿管直接輸注至膀胱中。使RTX在膀胱中保留30分鐘，然後去除。
6隻狗經入選並以以下劑量治療： ＜ 10 kg：RTX 25 ug，稀釋於24 ml NaCl中(1.0 ug/ml溶液) ＞ 10 kg：RTX 50 ug，稀釋於48 ml NaCl中(1.0 ug/ml溶液)
然後7隻狗經入選並以以下劑量治療： ＜ 10 kg：RTX 25 ug稀釋於11.5 ml NaCl中(2.0 ug/ml溶液) 10-25 kg：RTX 50 ug稀釋於23 ml NaCl中(2.0 ug/ml溶液) ＞25 kg：RTX 100 ug稀釋於46 ml NaCl中(2.0 ug/ml溶液)
三隻狗治療兩次，其中治療之間間隔至少28天。在第0天後，兩隻狗失訪。
就所發生不良事件之程度而言，其係最小、輕度及瞬時的。
主要終點係利用4點下尿路症狀量表(排尿特徵/緊張程度；排尿頻率(白天)；排尿頻率(夜間)；及尿血)評價下尿路症狀之改良。次要終點係抗癌症效果(如藉由膀胱超音波量測)及生活品質。
表8. 主要終點結果.
   所治療狗之總數 第 7 天 第 14 天 第 23 天 第 56 天 第 34 天
主要效能變量 n=13 n=11 n=11 n=8 n=5 n=3
至少1個得分改良    6 (54.5%) 8 (72.7%) 6 (75.0%) 5 (100%) 3 (100%)
至少2個得分改良    4 (36.4%) 5 (45.5%) 4 (50.0%) 3 (60.0%) 2 (66.7%)
主要抗癌癥結果係如下獲得：
病例03-01. 9.0 kg經閹割雄性. RTX劑量：25 ug (2.8 ug/kg)。TCC最長直徑總和：6.6 cm。認為可能歸因於RTX之不良事件：第0天：膀胱痙攣，在導尿管周圍排尿(1級)。最佳整體腫瘤反應：在第84天，-30%最大腫瘤直徑變化(注意：在第28天觀察到轉移性肝結節及局部淋巴結病變)。
病例41-02. 38.8 kg切除卵巢之雌性. RTX劑量= 50 ug (1.3 ug/kg)，間隔28天給藥兩次。TCC最長直徑總和 = 3.4 cm。認為可能歸因於RTX之不良事件：第1天：排尿後喊叫(1級)。最佳整體反應：在第28天，-24%腫瘤體積(第56天疾病進展並退出研究)。
病例47-02. 25.0 kg經閹割雄性. RTX劑量：50 ug (2.0 ug/kg)。TCC最長直徑：4.4 cm。認為可能歸因於RTX之不良事件：第0天：腹瀉、嘔吐、食慾減少(1級)。最佳整體反應：N/A (未記錄治療後量測值；在第14天前因進行性下尿路症狀而自研究移除)。
病例03-02. 19.1 kg切除卵巢之雌性。RTX劑量：50 ug (2.6 ug/kg)。TCC最長直徑：2.5 cm。認為可能歸因於RTX之不良事件：無。最佳整體反應：N/A、第0天後失訪。
總之，RTX在所有測試劑量下均耐受，包括間隔28天給藥兩次之50 ug或2.8 ug/kg之最大劑量。所有不良事件均為1級。未觀察到劑量限制性毒性。 E.     在患有貓特發性膀胱炎之貓中膀胱內滴注RTX
患有FIC (貓特發性膀胱炎)之貓經歷刺激中樞可塑性之持續信號傳導。此信號傳導之中斷可藉由破壞神經性發炎性中樞刺激長期控制來自膀胱之適應不良性疼痛。為確定膀胱內滴注RTX對患有FIC (貓特發性膀胱炎)之貓的效應，將一組貓如下所述利用RTX進行治療。
評估單次膀胱內滴注RTX之有效性及安全性以管理與貓之非梗阻性FIC相關之臨床及行為跡象。主要有效性終點係第28天獸醫特定結果量度(Veterinary-specific Outcome Measure, VSOM)及膀胱炎事件調查之改良。
總VSOM係三個個別VSOM得分之總和，每一得分均具有在1至5範圍內之整數值。每一個別VSOM得分對應於由貓之擁有者或法定代表在研究員之幫助下為個別貓所選擇與FIC相關之臨床症狀/活動/行為。臨床症狀/活動/行為之實例係觸診時之疼痛或怨恨。每一個別VSOM得分之最小可能得分為1，其指示沒有問題，且最大值為5，其指示不可能的活動/行為或最大嚴重臨床症狀。最小及最大總VSOM得分為3及15。在篩選日(例如，第0天及第28天)，研究員完成VSOM問卷並將得分分配給所選3個臨床症狀/活動/行為中之每一者。
治療成功定義為「與第0天之VSOM得分相比，第3天及第28天之總VSOM得分降低至少2」。將降低少於2、無變化或總得分增加定義為治療失敗。無論總VSOM得分如何，呈現任一個別VSOM得分增加之貓均視為治療失敗。
膀胱炎事件調查由5點量表組成，範圍自0 = 正常貓至5 = 極嚴重之膀胱炎症狀。此調查中所膀胱炎之臨床症狀包括：排尿頻率增加；排尿時緊張；排尿時喊叫/發聲；尿液中存在血液；在垃圾箱外排尿；及會陰周圍之梳理增加。
膀胱炎事件調查之使用係探索性的且不將嚴格的成功定義應用於該等結果。然而且基於已發表文獻，結果闡述如下：(1)在第28天具有2點或以上之平均改良且任一個別得分沒有增加之每同類群組貓之百分比；(2) 在第28天具有3點或以上之平均改良且任一個別得分沒有增加之每同類群組貓之百分比。
RTX係作為25 µg/mL (2.4 mL)溶液提供，其係利用聚山梨醇酯、葡萄糖及磷酸鹽緩衝液調配並在滴注前於鹽水中稀釋至1 µg/mL。膀胱內滴注：在貓已達到足夠麻醉程度後，使用標準無菌技術準備會陰區。準備好後，使用無菌技術放置導尿管(類型及大小基於具體情況而定)。然後，使膀胱排空並利用20 ml無菌鹽水沖洗。一旦去除沖洗溶液，便藉助導尿管經2分鐘輸注RTX溶液。一旦輸注完溶液之總體積，使溶液在膀胱中停留20 min。在此時期結束時，去除IVP (研究用獸醫產品)溶液。最後，去除導尿管並用20 ml鹽水沖洗會陰區。記錄自膀胱中去除溶液之總量。
治療24隻貓且同類群組及其各別IVP治療闡述於下表9中。同類群組經填充並依次給藥。入選於同類群組2、3及4之貓在前一同類群組結束後至少3天給藥。
表9. 同類群組之闡述
同類群組 n 總劑量 膀胱內滴注體積 最終 IVP 濃度
1 6 25 µg 25 mL 1 µg /mL
2 6 6.25 µg 25 mL 0.25 µg/mL
3 6 12.5 µg 25 mL 0.5 µg/mL
4 6 12.5 µg 10 mL 1.25 µg/mL
慮及25 µg RTX作為膀胱內治療之良好耐受性、平均大小貓(25 mL)之可耐受膀胱內輸注體積，選擇同類群組1之劑量範式。選擇同類群組2之劑量以確定最小有效劑量。隨後在同類群組3及4組中分別增加劑量及濃度。此劑量範式旨在確定在有效性結果中劑量對濃度之效應。
RTX溶液係作為25 µg/mL (2.4 mL)溶液提供，其係利用聚山梨醇酯、葡萄糖、磷酸鹽緩衝劑、右旋糖一水合物及氯化鈉調配。
對入選於同類群組1-4之貓進行28天評估且結果匯總如下 – 關於VSOM及膀胱炎事件調查得分之描述性統計分別顯示於表10及11中。
表10. VSOM之描述性統計
劑量 研究日 n 平均值 SD 最小值 中值 最大值
25 µg 第0天 6 10.00 1.095 9.0 10.00 12.0
(1 µg/mL) 第28天 5 1.80 1.643 0.0 1.00 4.0
6.25 µg 第0天 6 10.00 1.414 8.0 10.00 12.0
(0.25 µg/mL) 第28天 6 6.00 3.162 1.0 6.50 10.0
12.5 µg 第0天 6 9.67 1.633 8.0 9.50 12.0
(0.5 µg/mL) 第28天 5 1.60 1.517 0.0 1.00 4.0
12.5 µg 第0天 6 9.83 0.408 9.0 10.00 10.0
(1.25 µg/mL) 第28天 6 3.83 1.602 2.0 4.00 6.0
表11. 膀胱炎事件調查之描述性統計
劑量 研究日 n 平均值 SD 最小值 中值 最大值
25 µg 第0天 6 16.67 3.830 11.0 16.50 22.0
(1 µg/mL) 第28天 5 4.40 2.510 2.0 4.00 7.0
6.25 µg 第0天 6 13.00 3.347 10.0 12.00 18.0
(0.25 µg/mL) 第28天 6 8.33 3.615 3.0 8.00 14.0
12.5 µg 第0天 6 11.33 1.366 10.0 11.00 13.0
(0.5 µg/mL) 第28天 5 5.20 1.483 3.0 5.00 7.0
12.5 µg 第0天 6 12.5 2.739 9.0 12.50 16.0
(1.25 µg/mL) 第28天 6 5.33 1.966 3.0 6.00 8.0
同類群組1-4中貓之VSOM治療的成功或失敗顯示於下表12中。與第0天相比，在第28天評估總共22隻貓(22/24)之VSOM成功/失敗。同類群組1之一隻動物在用藥後死亡；未進行驗屍。同類群組3之一隻動物因貓傳染性腹膜炎(FIP)而在最終評估之前安樂死。各同類群組間之成功率均係顯著的，其中同類群組2 (6.25 µg/mL)之最低成功率為50%且同類群組1 (25 µg/25mL)及3 (12.5 µg/25mL)之最大成功率為100%。
表12. 按同類群組之VSOM治療成功
成功 / 失敗 同類群組 1 25µg/25mL 同類群組 2 6.25µg/25 mL 同類群組 3 12.5µg/25mL 同類群組 4 12.5µg/10mL 整體
成功* n (%) 5 (100.0%) 3 (50.0%) 5 (100.0%) 4 (66.7%) 17 (77.2%)
失敗 n (%) 0 (0.0%) 3 (50.0%) 0 (0.0%) 2 (33.3%) 5 (22.8%)
*與第0天進行比較。每一成功定義包括無任一個別得分之增加。
膀胱炎事件調查之結果顯示於下表13中。除同類群組2 (6.25 µg/25mL)以外，在第28天呈現 ＞2點或 ＞3點降低之貓的百分比在各同類群組間沒有變化。在同類群組2中，在第28天呈現 ＞2點降低之貓的數量為具有 ＞3點降低之貓的2倍(分別為66.7%對33.3%)。
表13. 按同類群組之膀胱炎事件調查
RTX 劑量 ( 同類群組 ) 第 28 天
25µg/25mL (1) 膀胱炎改良 ＞2點 4/5 (80%)
   膀胱炎改良 ＞3點 4/5 (80%)
6.25µg/25mL (2) 膀胱炎改良 ＞2點 4/6 (66.7%)
   膀胱炎改良 ＞3點 2/6 (33.3%)
12.5 µg/25mL (3) 膀胱炎改良 ＞2點 5/5 (100%)
   膀胱炎改良 ＞3點 5/5 (100%)
12.5µg/10mL (4) 膀胱炎改良 ＞2點 6/6 (100%)
   膀胱炎改良 ＞3點 6/6 (100%)
將VSOM及膀胱炎事件調查組合並顯示於表14中。當VSOM改良 ＞2及膀胱炎改良 ＞3之結果組合時，有效性自100%降至80% (參見同類群組1)。當VSOM改良 ＞2與膀胱炎改良 ＞2之結果組合時，有效性自50%降至33.3% (參見同類群組2)。總之，在同類群組1-2中下降約20%。
表14. VSOM及膀胱炎事件調查組合效應
RTX 劑量 ( 同類群組 ) 成功 第 28 天
25 µg/25mL (1) VSOM改良 ＞2點 5/5 (100%)
   膀胱炎 ＞2及VSOM ＞2點 4/5(80%)
   膀胱炎 ＞3及VSOM ＞2點 4/5(80%)
6.25µg/25mL (2) VSOM改良 ＞2點 3/6 (50%)
   膀胱炎 ＞2及VSOM ＞2點 3/6 (50%)
   膀胱炎 ＞3及VSOM ＞2點 2/6 (33.3%)
12.5µg/25mL (3) VSOM改良 ＞2點 6/6 (100%)
   膀胱炎 ＞2及VSOM ＞2點 6/6 (100%)
   膀胱炎 ＞3及VSOM ＞2點 6/6 (100%)
12.5µg/10mL (4) VSOM改良 ＞2點 4/6 (66.7%)
   膀胱炎 ＞2及VSOM ＞2點 4/6 (66.7%)
   膀胱炎 ＞3及VSOM ＞2點 4/6 (66.7%)
作為監測入選貓之實驗安全性之方式，在第14天及第28天對貓實施身體檢查。記錄體重、體溫、心率及呼吸速率之量測值。收集所有同類群組之體重，同時收集接受最高總劑量RTX (25µg/25mL)之同類群組1的其餘變量。在任何變量中均未觀察到臨床上顯著變化。亦收集全血球計數(CBC)、血清化學、尿液分析及培養之結果。未觀察到顯著變化。
在投與時及整個28天隨訪期，所有劑量均總體耐受良好。此研究報告一項認為與投與時之治療相關之嚴重不良事件(AE) (上文所討論同類群組1貓之死亡)。此同類群組之貓未報告其他不良事件。其他同類群組中之不良事件被認為與治療不相關或不嚴重。
描述性統計(表10及11)顯示，當第28天之VSOM與第0天相比時，所有組均具有高成功率。在同類群組2 (6.25 µg/25mL)中達成50%之最小成功率，在同類群組1 (25 µg/25mL)及3 (12.5 µg/25mL)中看到100%成功率，且在同類群組4 (12.5 µg/10mL)中觀察到66.7%之中間成功率。儘管同類群組4中之貓接受與同類群組3 (12.5 µg總計)相同之總劑量及低於同類群組1 (25 µg 總計)之劑量，但同類群組4中所用溶液之濃度係所有組中最高者(1.25 µg/mL對1、0.25 µg/mL及0.5 µg/mL)。與同類群組1及3相比，同類群組4中所觀察到之較低效能可能與同類群組4中所用之較高濃度有關。 F.     藉助導尿法將RTX投與至膀胱以管理患有膀胱移行細胞癌(TTC)之狗的下尿路不適
犬TCC係尿路上皮腫瘤，其可侵入膀胱深層且在多達50%之狗中轉移至局部淋巴結及遠端位置，例如肝、肺及骨骼。體現為排尿困難、尿頻及血尿之尿不適在此組織學中係常見的。利用習用治療選擇進行管理具有挑戰性，該等治療選擇可係多模式的且包括非類固醇消炎藥(NSAID)、習用化學療法及放射療法。自該等治療獲得持續症狀性益處具有挑戰性。此研究之主要目的係評價患有膀胱TCC之狗中與RTX膀胱內療法相關之下尿路症狀之狀況。此研究之次要目的係藉助連續腹部超音波及安全性評價RTX膀胱內療法之抗癌症效應。研究設計為開放標籤、多中心、臨床現場研究，其中無隨機化。
研究動物係客戶擁有之狗，該等狗診斷出與膀胱完全相關之TCC (轉移係可接受的)並伴隨與膀胱癌相關之下尿路臨床症狀，前提係膀胱病灶不妨礙導尿管之通過。研究動物未同時進行包括化學療法、分子靶向療法、免疫療法或放射療法之抗癌症療法，或抗癌症療法失敗且顯示持續下尿路症狀。NSAID及其他止痛藥係可接受的，只要狗顯示持續下尿路症狀且藥物在入選前使用至少14天即可。
在RTX投與前30-45分鐘投與肌內注射苯海拉明HCl (2 mg/kg)之預治療。將入選狗麻醉並藉由聽診及胸部運動觀察進行監測。在整個麻醉持續時間使用脈衝血氧計監測心率及氧合。監測血壓。使用加熱水毯或等效之熱障(例如Vetko)維持體溫。使用乳酸林格氏溶液(Lactated Ringers Solution, LRS)或其他醫學上適當之流體療法維持足夠之水合(大約2mL/kg/hr靜脈內(IV))及視需要LRS之流體濃注(2-5mL/kg IV)。
RTX在第0天作為一次性治療投與至膀胱，其中在未來研究日選擇重複RTX。使用無菌標準技術放置Foley導尿管。同時實施腹部超音波以確保導尿管尖端位於膀胱腔內。使用帶導尿管尖端之注射器取出尿液。
將RTX稀釋於0.9% NaCl中且然後輸注至膀胱中。然後用5-6 mL之0.9% NaCl沖洗導尿管以確保投與整個IVP體積。將Foley導尿管加蓋並在輸注後留在原位達30分鐘之時期。然後在去除Foley導尿管之前將膀胱排空。恢復時間係基於個體進行管理，但建議在RTX輸注後約10分鐘開始恢復。
RTX總劑量在25-100 µg (1.17- 5.21 µg/kg)之範圍內。RTX係以1.0 µg/mL、2.0 µg/mL或2.5 µg/mL之濃度滴注。
該研究中入選十六(16)隻客戶擁有之狗。在該等中，8隻狗完成研究。表15匯總按總劑量、按體重之劑量及濃度之RTX投與。
表15：按總劑量、按體重之劑量及濃度之RTX投與
動物 ID 研究日 體重 (kg) RTX 劑量 (µg) RTX 劑量 (µg/kg) RTX 濃度 (µg /mL)
1 0 9.1 25 2.77 1.00
2 0 38.8 50 1.29 1.00
3 28 40.7 50 1.23 1.00
4 0 25.0 50 2.00 1.00
5 0 19.1 50 2.62 1.00
6 0 42.6 50 1.17 1.00
7 0 32.9 100 3.04 2.00
8 0 5.4 25 4.63 2.00
9 0 5.6 25 4.46 2.00
10 0 9.0 25 2.78 2.00
11 0 8.1 25 3.09 2.00
12 0 11.3 50 4.42 2.00
13 0 15.4 50 3.25 2.00
14 28 11.2 50 4.48 2.00
15 84 5.0 25 5.00 2.00
16 0 9.2 25 2.72 2.00
17 28 9.3 25 2.69 2.00
18 56 14.8 50 3.38 2.00
19 0 44 100 2.27 2.00
20 0 4.8 25 5.21 2.50
21 0 8.3 25 3.01 2.50
22 28 8.3 25 3.01 2.50
主要有效性變量：使用下尿路症狀(如由擁有者所報告)之評估作為研究之主要有效性終點。監測排尿特徵、排尿頻率(白天)、排尿頻率(夜間)及尿血(Knapp, 2010)。尿血係由擁有者藉助每天收集第一份早上樣品來評價且擁有者完成「擁有者尿液收集日誌」。對第0天與第7天(±2)、第14天(±2)、第28天(±2)、第56天(±2)及第84天(±2)之隨後研究訪視之間之每一參數進行比較。治療成功定義為每一參數之至少一個等級改良。
主要有效性變量- 下尿路症狀之變化：在所入選之16隻狗中，14隻狗在第0天之後進行至少一次研究訪視以評價下尿路等級之變化。六(6)隻狗(37.5%)接受第二次RTX治療：四(4)隻狗在第28天接受其第二次治療，1隻狗在第56天再次治療且1隻狗在第84天再次治療。
在每一研究訪視時，研究員根據擁有者之輸入對下尿路症狀進行分級。1或2級之改良按總RTX劑量匯總於表16中，且然後在表17中比較接受RTX劑量＜ 3 µg/kg及3 µg/kg之彼等狗。
將兩種成功定義應用於數據：至少1個得分改良及至少2個得分改良。在第14天10/14隻狗(71.4%)、在第28天8/11隻狗(72.7%)、在第56天7/10隻狗(70.0 %)及在第84天4/7隻狗(57.1%)報告至少1個得分之改良。在第14天7/14隻狗(50.0%)、在第28天5/11隻狗(45.5%)、在第56天5/10隻狗(50.0%)及在第84天3/7隻狗(42.9%)報告至少2個得分之改良。在接受第2次RTX投與之6隻狗中，僅1隻在第28天重新治療之狗顯示經改良尿液得分之證據。與第56天相比，此隻狗在第84天2個得分得到改良。
表16：按RTX劑量之下尿路等級之變化
研究日 : n/N (%)
RTX 劑量 成功 第 7 天 第 14 天 第 28 天 第 56 天 第 84 天
25 µg 至少1個得分改良 3/7 (42.9%) 6/7 (85.7%) 5/7 (71.4%) 4/6 (66.7%) 3/4 (75.0%)
   至少2個得分改良 1/7 (14.3%) 3/7 (42.9%) 2/7 (28.6%) 2/6 (33.3%) 2/4 (50.0%)
50 µg 至少1個得分改良 3/5 (60.0%) 3/5 (60.0%) 3/4 (75.0%) 3/4 (75.0%) 1/3 (33.3%)
   至少2個得分改良 2/5 (40.0%) 2/5 (40.0%) 3/4 (75.0%) 3/4 (75.0%) 1/3 (33.3%)
100 µg 至少1個得分改良 1/2 (50.0%) 1/2 (50.0%)         
   至少2個得分改良 1/2 (50.0%) 1/2 (50.0%)         
表17：按RTX µg /kg之下尿路等級之變化
RTX 劑量 (ug/kg) 成功 第 7 天 第 14 天 第 28 天 第 56 天 第 84 天
＜ 3 µg/kg 至少1個得分改良 4/7 (57.1%) 5/7 (71.4%) 4/5 (80.0%) 4/5 (80.0%) 2/2 (100.0%)
   至少2個得分改良 2/7 (28.6%) 3/7 (42.9%) 3/5 (60.0%) 3/5 (60.0%) 2/2 (100.0%)
＞=3 µg/kg 至少1個得分改良 3/7 (42.9%) 5/7 (71.4%) 4/6 (66.7%) 3/5 (60.0%) 2/5 (40.0%)
   至少2個得分改良 2/7 (28.6%) 3/7 (42.9%) 2/6 (33.3%) 2/5 (40.0%) 1/5 (20.0%)
次要有效性變量：抗癌症活性係基於客觀反應(OR)使用連續腹部超音波測定。使用實體腫瘤之犬反應評估準則(cRECIST) v 1.0 (Nguyen等人，2013)來評價研究期間之治療反應。在超音波時報告膀胱病灶之最長直徑。OR定義為完全反應(CR)或部分反應(PR)。另外，生物反應包括CR、PR及穩定疾病(SD)。為確定SD為生物反應，在第56天或第84天測定SD。在膀胱病灶係「彌漫性」且不可量測之情形中，研究員與超音波檢查醫師交流而主觀地判定治療反應。
次要有效性變量 - 客觀反應及QOL之變化 在篩選時(基線)且然後在第28天、第56天及第84天報告使用超音波之腫瘤量測結果(最長直徑)。客觀反應定義為CR或PR且生物反應定義為CR、PR或SD。膀胱中可量測目標病灶之OR的匯總提供於表18中。
在第28天利用重複腹部超音波評估之10隻狗中，未注意到OR。然而，一隻狗(11.1%)在第56天具有PR，該PR持續至第84天。認為持續至少28天之SD對患有膀胱TCC之狗係臨床上顯著的。八(8)隻狗(80.0%)在第28天具有SD，7隻狗(77.8%)在第56天具有SD，且3隻狗 (42.9%)在第84天具有SD。 表18：所有狗之客觀反應匯總
研究日： n/N (%)
反應 第 28 天 第 56 天 第 84 天
CR/PR 0/10 (0.0%) 1/9 (11.1.0%) 1/7 (14.3%)
SD 8/10 (80.0%) 7/9 (77.8%) 3/7 (42.9%)
PD 2/10 (20.0%) 1/9 (11.1%) 3/7 (42.9%)
不良效應(AE)：16隻狗中之最常見AE係6隻狗(37.5%)嘔吐、5隻狗(31.3%)腹瀉、4隻狗(25.0%)厭食且4隻狗(25.0%)嗜睡。所有該等事件均認為係輕度至中度(1或2級)，惟一(1)例厭食事件認為係嚴重的且導致狗被安樂死。
在16隻狗之此研究中觀察到臨床症狀之改良。對於在第14-84天可評估之狗，多於50%之該等狗在每次訪視時具有至少1個尿路症狀等級之改良且多於40%具有至少2個等級之改良。鑒於RTX在僅1或2次治療後持續症狀緩解之潛力，第84天之症狀改良尤其顯著。儘管6隻狗接受第二次RTX投與，但僅1隻在第二次治療後顯示尿路症狀改良之證據。
鑒於少量嚴重AE及僅1隻狗具有SAE (認為最可能與腫瘤進展有關)，RTX在此研究中耐受性極好。3種最常報告之AE本質上係胃腸道(嘔吐、腹瀉及厭食)，除1種之外，所有該等AE均係輕度或中度且似乎沒有劑量依賴性。
圖1A-1H顯示在利用5、25及50微克(mcg)之單劑量RTX治療後第14天貓膀胱中降鈣素基因相關肽(CGRP)陽性軸突(面板A-D)及物質P (SP)陽性軸突(面板EH)之共焦顯微鏡影像。與對照鹽水治療相比時，膀胱內RTX治療在25及50 mcg劑量下降低支配貓膀胱體之CGRP及SP免疫反應性軸突之密度。
圖2A-2F顯示個別貓膀胱中傳入神經纖維之密度(mm/mm 3)，如由免疫組織化學(IHC)所揭示。顯示膀胱之體部(圖2A)、三角區(圖2B)及底部(圖2C)中之CGRP神經纖維之密度。亦顯示體部(圖2D)、三角區(圖2E)及底部(圖2F)中之SP神經纖維之密度。每一線條代表接受對照鹽水治療或指定劑量之RTX的單隻貓。
圖3A-3F顯示來自每一RTX治療組之貓膀胱中傳入神經纖維之密度(mm/mm 3)。顯示膀胱之體部(圖3A)、三角區(圖3B)及底部(圖3C)中之CGRP神經纖維之密度。亦顯示體部(圖3F)、三角區(圖3E)及底部(圖3D)中之SP神經纖維之密度。每一線條代表纖維之平均密度± S.E.M。
圖4A-4D顯示來自用鹽水治療之對照貓或用單一25 mcg劑量之RTX治療之貓的薦背根神經節(S2 DRG)之神經元的代表性IHC共焦顯微鏡影像。對照動物中CGRP及SP之表現分別顯示於圖4A及4C中，且對於RTX治療之貓顯示於圖4B及4D。與對照相比，RTX治療並未改變表現該等標記物之神經元數量。
圖5A-5D顯示治療後14天，對照及RTX治療之貓的S1及S2背根神經節(DRG)中CGRP及SP陽性神經元之百分比。與對照相比，5、25及50 mcg劑量之RTX不影響S1 DRG (圖5A)或S2 DRG (圖5B)中CGRP+神經元之百分比。在治療後14天，S1 DRG (圖5C)或S2 DRG (圖5D)二者中SP+神經元之百分比與對照相當。每一線條代表平均值 ± SEM。
圖6顯示支配健康狗膀胱之CGRP+軸突的代表性共焦顯微鏡成像。
圖7顯示支配健康狗膀胱之SP+軸突的代表性共焦顯微鏡成像。
圖8A-8F顯示支配對照之狗膀胱(圖8A及8D)、利用單次膀胱內施加25 mcg (圖8B及8E)或250 mcg (圖8C及8F)之劑量之RTX治療之狗膀胱之CGRP+ (圖8A-8C)及SP+ (圖8D-8F)軸突之密度。
圖9A-9C顯示對照及RTX治療之狗膀胱中傳入神經纖維之密度(mm/mm 3)，如由免疫組織化學(IHC)所揭示。顯示膀胱之體部(圖9A)、底部(圖9B)及三角區(圖9C)中之CGRP+神經纖維之密度。當n≥2時，每一線條代表平均值 ± SEM。
圖10A-10C顯示對照及RTX治療之狗膀胱中傳入神經纖維之密度(mm/mm 3)，如由免疫組織化學(IHC)所揭示。顯示體部(圖10A)、底部(圖10B)及三角區(圖10C)中之SP+神經纖維之密度。當n≥2時，每一線條代表平均值 ± SEM。
圖11A-圖11I顯示經H&E染色並評估組織病理學之狗膀胱底部之代表性切片。對照狗膀胱顯示於圖11A、11D及10G中。利用25 mcg RTX治療之狗膀胱顯示於圖11B、11E及11H中。利用250 mcg RTX治療之狗膀胱顯示於圖11C、11F及11I。
Figure 110122312-A0101-11-0001-1

Claims (31)

  1. 一種治療膀胱痛或膀胱癌之方法，其包含向需要治療膀胱痛或膀胱癌之個體膀胱內投與樹脂毒素(resiniferatoxin, RTX)，其中該RTX係以至少約10 mcg或至少約0.1 mcg/kg之劑量投與，或該RTX係以使得RTX在膀胱中之膀胱內濃度為至少約0.1 mcg/ml之濃度及體積投與。
  2. 一種用於治療膀胱痛或膀胱癌之方法中之包含樹脂毒素(RTX)之組合物，該方法包含向需要治療膀胱痛或膀胱癌之個體以至少約10 mcg或至少約0.1 mcg/kg之劑量膀胱內投與RTX，或該RTX係以使得RTX在膀胱中之膀胱內濃度為至少約0.1 mcg/ml之濃度及體積投與。
  3. 如請求項1或2之方法或使用之組合物，其中該膀胱痛包含適應不良性膀胱痛。
  4. 如前述請求項中任一項之方法或使用之組合物，其中該治療減小該適應不良性疼痛之局部及中樞效應。
  5. 如前述請求項中任一項之方法或使用之組合物，其中該個體患有膀胱炎。
  6. 如前述請求項中任一項之方法或使用之組合物，其中該個體患有特發性膀胱炎。
  7. 如前述請求項中任一項之方法或使用之組合物，其中該個體患有膀胱癌。
  8. 如前述請求項中任一項之方法或使用之組合物，其中該膀胱痛包含神經性膀胱痛。
  9. 如前述請求項中任一項之方法或使用之組合物，其中該膀胱痛係由C纖維之基於壓力之活化(stress-based activation)引起或與其相關。
  10. 如前述請求項中任一項之方法或使用之組合物，其中該個體先前經歷膀胱手術。
  11. 如前述請求項中任一項之方法或使用之組合物，其中該膀胱痛係在損傷之後，該損傷視情況係脊柱或下背損傷，例如椎間盤損傷。
  12. 如前述請求項中任一項之方法或使用之組合物，其中該個體已經歷一次細菌性膀胱感染或複數次細菌性膀胱感染。
  13. 如前述請求項中任一項之方法或使用之組合物，其中該個體具有高反應性膀胱及/或膀胱收縮及/或小便衝動之降低臨限值。
  14. 如前述請求項中任一項之方法或使用之組合物，其中該方法包含以以下濃度投與RTX：0.1 mcg/ml - 0.2 mcg/ml、0.2 mcg/ml - 0.3 mcg/ml、0.3 mcg/ml - 0.4 mcg/ml、0.4 mcg/ml - 0.5 mcg/ml、0.5 mcg/ml - 0.6 mcg/ml、0.6 mcg/ml - 0.7 mcg/ml、0.7 mcg/ml - 0.8 mcg/ml、0.8 mcg/ml - 0.9 mcg/ml、0.9 mcg/ml - 1.0 mcg/ml、1.0 mcg/ml - 1.1 mcg/ml、1.1 mcg/ml - 1.2 mcg/ml、1.2 mcg/ml - 1.3 mcg/ml、1.3 mcg/ml - 1.4 mcg/ml、1.4 mcg/ml - 1.5 mcg/ml、1.5 mcg/ml - 2 mcg/ml、2 mcg/ml - 3 mcg/ml、3 mcg/ml - 4 mcg/ml、4 mcg/ml - 5 mcg/ml、5 mcg/ml - 6 mcg/ml、6 mcg/ml - 7 mcg/ml、7 mcg/ml - 8 mcg/ml、8 mcg/ml - 9 mcg/ml、9 mcg/ml - 10 mcg/ml、10 mcg/ml - 11 mcg/ml、11 mcg/ml - 12 mcg/ml、12 mcg/ml - 13 mcg/ml、13 mcg/ml - 14 mcg/ml或14 mcg/ml - 15 mcg/ml。
  15. 如前述請求項中任一項之方法或使用之組合物，其中膀胱內投與10 mcg - 20 mcg、20 mcg - 30 mcg、30 mcg - 40 mcg、40 mcg - 50 mcg、50 mcg - 60 mcg、60 mcg - 70 mcg、70 mcg - 80 mcg、80 mcg - 90 mcg、90 mcg - 100 mcg、100 mcg - 110 mcg、110 mcg - 120 mcg、120 mcg - 130 mcg、130 mcg - 140 mcg、140 mcg - 150 mcg、150 mcg - 160 mcg、160 mcg - 170 mcg、170 mcg - 180 mcg、180 mcg - 190 mcg、190 mcg - 200 mcg、200 mcg - 210 mcg、210 mcg - 220 mcg、220 mcg - 230 mcg、230 mcg - 240 mcg、240 mcg - 250 mcg、250 mcg - 260 mcg、260 mcg - 270 mcg、270 mcg - 280 mcg、280 mcg - 290 mcg或290 mcg - 300 mcg之劑量的RTX。
  16. 如前述請求項中任一項之方法或使用之組合物，其中膀胱內投與0.1 mcg/kg - 0.2 mcg/kg、0.2 mcg/kg - 0.3 mcg/kg、0.3 mcg/kg - 0.4 mcg/kg、0.4 mcg/kg - 0.5 mcg/kg、0.5 mcg/kg - 0.6 mcg/kg、0.6 mcg/kg - 0.7 mcg/kg、0.7 mcg/kg - 0.8 mcg/kg、0.8 mcg/kg - 0.9 mcg/kg、0.9 mcg/kg - 1 mcg/kg、1 mcg/kg - 1.2 mcg/kg、1.2 mcg/kg - 1.4 mcg/kg、1.4 mcg/kg - 1.6 mcg/kg、1.6 mcg/kg - 1.8 mcg/kg、1.8 mcg/kg - 2.0 mcg/kg、2.0 mcg/kg - 2.2 mcg/kg、2.2 mcg/kg - 2.4 mcg/kg、2.4 mcg/kg - 2.6 mcg/kg、2.6 mcg/kg - 2.8 mcg/kg、2.8 mcg/kg - 3.0 mcg/kg、3.0 mcg/kg - 3.2 mcg/kg、3.2 mcg/kg - 3.4 mcg/kg、3.4 mcg/kg - 3.6 mcg/kg、3.6 mcg/kg - 3.8 mcg/kg、4.0 mcg/kg - 4.2 mcg/kg、4.2 mcg/kg - 4.4 mcg/kg、4.4 mcg/kg - 4.6 mcg/kg、4.6 mcg/kg - 4.8 mcg/kg、4.8 mcg/kg - 5.0 mcg/kg、5.0 mcg/kg - 5.2 mcg/kg、5.2 mcg/kg - 5.4 mcg/kg、5.4 mcg/kg - 5.6 mcg/kg、5.6 mcg/kg - 5.8 mcg/kg或5.8 mcg/kg - 6.0 mcg/kg之劑量的RTX。
  17. 如前述請求項中任一項之方法或使用之組合物，其中該RTX係在具有以下體積之組合物中遞送：1 ml -10 ml、10 ml - 20 ml、20 ml - 30 ml、30 ml - 40 ml、40 ml - 50 ml、50 ml - 60 ml、60 ml - 70 ml、70 ml - 80 ml、80 ml - 90 ml、90 ml - 100 ml、100 ml - 110 ml、110 ml - 120 ml、120 ml - 130 ml、130 ml - 140 ml、140 ml - 150 ml、160 ml - 170 ml、170 ml - 180 ml、180 ml - 190 ml、190 ml - 200 ml、200 ml - 210 ml、210 ml - 220 ml、220 ml - 230 ml、230 ml - 240 ml、240 ml - 250 ml、260 ml - 270 ml、270 ml - 280 ml、280 ml - 290 ml或290 ml - 300 ml。
  18. 如前述請求項中任一項之方法或使用之組合物，其中該RTX係以使得RTX在膀胱中之膀胱內濃度為至少約0.1 mcg/ml之濃度及體積投與，例如0.1 mcg/ml - 0.2 mcg/ml、0.2 mcg/ml - 0.3 mcg/ml、0.3 mcg/ml - 0.4 mcg/ml、0.4 mcg/ml - 0.5 mcg/ml、0.5 mcg/ml - 0.6 mcg/ml、0.6 mcg/ml - 0.7 mcg/ml、0.7 mcg/ml - 0.8 mcg/ml、0.8 mcg/ml - 0.9 mcg/ml或0.9 mcg/ml - 1 mcg/ml。
  19. 如前述請求項中任一項之方法或使用之組合物，其中該RTX係以使得RTX在膀胱中之膀胱內濃度為至少約1 mcg/ml之濃度及體積投與，例如1 mcg/ml - 1.1 mcg/ml、1.1 mcg/ml - 1.2 mcg/ml、1.2 mcg/ml - 1.3 mcg/ml、1.3 mcg/ml - 1.4 mcg/ml、1.4 mcg/ml - 1.5 mcg/ml、1.5 mcg/ml - 1.6 mcg/ml、1.6 mcg/ml - 1.7 mcg/ml、1.7 mcg/ml - 1.8 mcg/ml、1.8 mcg/ml - 1.9 mcg/ml或1.9 mcg/ml - 2 mcg/ml。
  20. 如前述請求項中任一項之方法或使用之組合物，其中該RTX係以至少0.25 mcg/ml之濃度投與。
  21. 如前述請求項中任一項之方法或使用之組合物，其中該RTX係以至少0.5 mcg/ml之濃度投與。
  22. 如前述請求項中任一項之方法或使用之組合物，其中該RTX係以至少1.0 mcg/ml之濃度投與。
  23. 如前述請求項中任一項之方法或使用之組合物，其中該RTX係以至少2.0 mcg/ml之濃度投與。
  24. 如前述請求項中任一項之方法或使用之組合物，其中該個體係哺乳動物。
  25. 如請求項24之方法或使用之組合物，其中該哺乳動物係貓或狗。
  26. 如請求項24之方法或使用之組合物，其中該哺乳動物係人類。
  27. 如請求項26之方法或使用之組合物，其中該RTX係在具有以下體積之組合物中遞送：50 ml - 60 ml、60 ml - 70 ml、70 ml - 80 ml、80 ml - 90 ml、90 ml - 100 ml、100 ml - 110 ml、110 ml - 120 ml、120 ml - 130 ml、130 ml - 140 ml、140 ml - 150 ml、160 ml - 170 ml、170 ml - 180 ml、180 ml - 190 ml、190 ml - 200 ml、200 ml - 210 ml、210 ml - 220 ml、220 ml - 230 ml、230 ml - 240 ml或240 ml - 250 ml。
  28. 如前述請求項中任一項之方法或使用之組合物，其中該方法包含投與醫藥調配物，該醫藥調配物包含該RTX及醫藥上可接受之載劑。
  29. 如請求項28之方法或使用之組合物，其中該醫藥上可接受之載劑包含水。
  30. 如請求項27或28之方法或使用之組合物，其中該醫藥上可接受之載劑包含聚山梨醇酯80。
  31. 如請求項28至30中任一項之方法或使用之組合物，其中該醫藥上可接受之載劑包含緩衝劑，視情況其中該緩衝劑係磷酸鹽緩衝劑及/或該調配物之pH係約7.0-7.5或約7.2。
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