TW202210517A - 抗ｂｃｍａ抗體－藥物軛合物及其使用方法 - Google Patents

抗ｂｃｍａ抗體－藥物軛合物及其使用方法 Download PDF

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Abstract

揭露了結合BCMA的抗體、抗原結合片段和軛合物（例如，抗體-藥物軛合物（ADC），如包含剪接調節劑的那些）。本揭露進一步關於用於藉由施用本文提供的組成物來治療癌症之方法及組成物。

Description

抗BCMA抗體-藥物軛合物及其使用方法
本揭露關於抗B細胞成熟抗原（BCMA）抗體及其抗原結合片段，以及軛合物如抗體-藥物軛合物（ADC），例如包含剪接調節劑的那些軛合物，以及它們之用途。
人類基因組中的大部分蛋白質編碼基因由藉由內含子（非編碼區）間隔開的多個外顯子（包括編碼區）構成。基因表現產生先質信使RNA（pre-mRNA）。隨後，藉由稱為剪接之方法自pre-mRNA移除內含子序列，產生成熟信使RNA（mRNA）。藉由包括不同外顯子組合，可變剪接產生編碼不同蛋白質同種型的mRNA。
RNA剪接藉由剪接體催化，該剪接體為由五個小核RNA（snRNA U1、U2、U4、U5及U6）及相關蛋白質構成的動態多蛋白質-RNA複合物。剪接體在pre-mRNA上組裝以建立催化內含子的切除及外顯子的接合的多個RNA及蛋白質相互作用的動態級聯（Matera及Wang (2014) Nat Rev Mol Cell Biol.[自然分子細胞生物學綜述] 15(2):108-21）。越來越多的證據將人類疾病與影響許多基因的RNA剪接中的調節異常聯繫起來（Scotti及Swanson (2016) Nat Rev Genet.[遺傳學自然評論] 17(1):19-32）。幾項研究現已記錄癌細胞剪接概況中的以及自身剪接因素中的更改（Agrawal等人 (2018) Curr Opin Genet Dev.[遺傳與發育的最新觀點] 48:67-74）。可變剪接可引起差異性外顯子包括/排除、內含子滯留或隱藏剪接位點的使用（Seiler等人 (2018) Cell Rep.[細胞報告] 23(1):282-96）。總而言之，該等事件造成可能促成腫瘤形成或對療法的抗性的功能改變（Siegfried及Karni (2018) Curr Opin Genet Dev.[遺傳與發育的最新觀點] 48:16-21）。
某些產物可結合SF3b剪接體複合物。該等小分子藉由促進內含子滯留和/或外顯子跳讀來調節剪接（Teng等人 (2017) Nat Commun.[自然通訊]8:15522）。所得轉錄物的相當大一部分含有提前終止密碼子，觸發無義介導的mRNA衰變（NMD）。此外，因為典型剪接受損，故典型轉錄物大幅減少，此可能不利地影響細胞功能及活力。出於此原因，剪接調節劑已變為一類用於治療癌症的有前景的藥物（Puthenveetil等人 (2016) Bioconjugate Chem. [生物軛合化學] 27:1880-8）。將該等剪接調節劑遞送至相關致癌組織同時避免或最小化潛在毒性係該領域的一項持續挑戰。因此，改進小分子剪接調節劑的靶向性將是令人希望的。
BCMA，也稱為TNFRSF17或CD269，係腫瘤壞死因子受體（TNFR）超家族的成員（Madry等人 (1998) Int Immunol.[國際免疫學] 10:1693-702；Sanchez等人 (2012) Br J Haematol.[英國血液學雜誌]158:727-38）。BCMA的配位基包括B細胞活化因子（BAFF）和增殖誘導配位基（APRIL）（Rennert等人 (2000) J Exp Med.[實驗醫學雜誌] 192:1677-83）。BCMA優先由成熟B淋巴細胞表現，在造血幹細胞和非造血組織中表現最少，並且在長命的骨髓漿細胞（PC）的存活中起作用（Novak等人 (2004) Blood.[血液]103:689-94；O’Connor等人 (2004) 199:91-7）。
與來自健康供體的正常骨髓單核細胞（BMMC）相比，BCMA在自多發性骨髓瘤（MM）患者收集的惡性PC上高度表現（Sanchez等人 (2012) Br J Haematol.[英國血液學雜誌]158:727-38）。BCMA的過表現和激活還與臨床前模型和人類的多發性骨髓瘤的進展有關（Sanchez等人 (2012) Br J Haematol.[英國血液學雜誌] 158:727-38；Tai等人 (2016) Blood.[血液] 127:3225-36；Sanchez等人 (2016) Clin Cancer Res.[臨床癌症研究] 22:3383-97）。具有誘導的BCMA過表現的鼠異種移植物比BCMA陰性對照生長得更快，並且在APRIL誘導了BCMA在離體人多發性骨髓瘤細胞中的激活後觀察到類似的結果（Tai等人 (2016) Blood.[血液]127:3225-36）。BCMA的這種過表現和激活可能導致經典和非經典核因子κ-B（NFĸB）通路的上調，以及對生存、生長、黏附、破骨細胞激活、血管生成、轉移和免疫抑制至關重要的基因的表現增強。BCMA代表可用於靶向多發性骨髓瘤和其他B細胞/漿細胞惡性腫瘤和/或提供新的癌症治療的有前景的抗原（Shah等人(2020) Leukemia.[白血病]34(4):985-1005）。然而，仍然需要改進的有效靶向BCMA之方法。
特別地，雖然在本領域中（包括在ADC背景中）已經報導了剪接調節劑的使用，但仍然需要以靶向方式更好地將剪接調節劑遞送至特定組織，例如表現BCMA的癌組織。同樣地，本領域仍然需要改進的結合BCMA的抗體，其具有優異的特性，例如，在抗原結合和/或有效遞送有效載荷（如剪接調節劑）至表現BCMA的靶細胞或組織的能力方面。
在各種實施方式中，本揭露部分地提供了新的抗體和抗原結合片段，它們可以單獨使用、連接至一種或多種另外的藥劑（例如，作為ADC）、或作為更大的大分子的一部分（例如，雙特異性抗體或多特異性抗體，單獨或作為連接至ADC形式的有效載荷的多特異性抗體的一部分）使用。該等抗體和抗原結合片段可以作為藥物組成物或組合療法的一部分投與。
在一些實施方式中，本文揭露之抗BCMA抗體和抗原結合片段係人源化的。在一些實施方式中，本文揭露之抗BCMA抗體和抗原結合片段含有源自非人（例如，小鼠）抗體的最小序列並保留非人抗體的反應性，同時在人中具有較低的免疫原性。在一些實施方式中，本文揭露之抗BCMA抗體和抗原結合片段能夠結合BCMA。在一些實施方式中，本文揭露之抗BCMA抗體和抗原結合片段與BCMA結合並且與參考抗BCMA抗體或抗原結合片段相比具有一種或多種優越特性。在一些實施方式中，與參考抗BCMA抗體或抗原結合片段相比，本文揭露之抗BCMA抗體和抗原結合片段具有對BCMA的更高的親和力（例如，如在結合測定中使用具有高或中等水平BCMA表現的癌細胞所評估的）。在一些實施方式中，與包含參考抗BCMA抗體或抗原結合片段的ADC相比，包含本文揭露之抗BCMA抗體和抗原結合片段的ADC表現出有利的藥物負載量、聚集、穩定性、活性和/或效力。在一些實施方式中，包含本文揭露之抗BCMA抗體和抗原結合片段的ADC顯示出治療性ADC所需的特性。在一些實施方式中，與參考抗BCMA抗體和/或參考抗BCMA ADC相比，該等特性包括但不限於例如有效藥物負載水平、低聚集水平、提高的穩定性、與未軛合抗體相當的對BCMA表現細胞的留存親和力、對表現BCMA的細胞的有效細胞毒性、提高的細胞毒性和/或針對不分裂和/或緩慢分裂細胞的細胞生長抑制活性、低水平的脫靶細胞殺傷、高水平的旁觀者殺傷、和/或有效的體內抗癌活性。在一些實施方式中，增加的效力、細胞毒性、和/或抗癌活性在表現高水平的由本文揭露之抗體、抗原結合片段、或ADC靶向的抗原（例如，高BCMA表現）的癌症中。在一些實施方式中，增加的效力、細胞毒性、和/或抗癌活性在表現中等水平的由本文揭露之抗體、抗原結合片段、或ADC靶向的抗原（例如，中等BCMA表現）的癌症中。在一些實施方式中，該等抗體、抗原結合片段、和/或ADC可用於治療人類癌症患者。
在一些實施方式中，待用本文揭露之抗體、抗原結合片段、或ADC治療的癌症係多發性骨髓瘤。大多數多發性骨髓瘤患者最終會復發。不希望受理論束縛，骨髓瘤患者可能會復發至少部分係由於「休眠」（例如，不分裂或緩慢分裂的）骨髓瘤細胞的存在，如存在於遍及全身的骨骼壁龕中的那些骨髓瘤細胞（Figueroa-Vazquez等人 (2021) Mol Cancer Ther.[分子癌症治療學]20(2):367-378；Franqui-Machin等人 (2015) Oncotarget.[腫瘤標靶]6:40496-40506）。這種休眠的骨髓瘤細胞可能在很大程度上抵抗標準護理療法（包括許多FDA批准的化學療法），該等標準療法可以藉由抑制或異常調節DNA複製和細胞分裂所需的細胞通路來發揮其抗增殖作用（Cheung-Ong等人 (2013) Chem Biol.[化學生物學] 20(5):648-659）。因此，在不分裂和/或緩慢分裂細胞中保留抗增殖活性的治療劑可以提供一種有效的手段來治療新診斷的和復發/難治性形式的多發性骨髓瘤、以及其他B細胞/漿細胞惡性腫瘤。在一些實施方式中，本文揭露之抗體、抗原結合片段、軛合物、和/或ADC複合物保留不依賴於細胞增殖狀態的細胞毒性和/或細胞生長抑制活性。在一些實施方式中，所述抗體、抗原結合片段、軛合物、和/或ADC複合物可靶向活躍分裂和休眠的細胞（例如，活躍分裂、不分裂、和/或緩慢分裂的骨髓瘤細胞）。
基於例如遺傳背景、基因表現譜、或癌症的其他定義特徵，某些癌症類型可能特別適合用本文揭露之抗體、抗原結合片段、軛合物、和/或ADC化合物進行治療。在一些實施方式中，本文揭露之抗體、抗原結合片段、或ADC的增加的效力、細胞毒性、和/或抗癌活性（例如，與參考抗BCMA抗體和/或參考抗BCMA ADC相比）在表現高或中等水平的由該抗體、抗原結合片段、或ADC靶向的抗原（例如高或中等BCMA表現）的癌症中。在一些實施方式中，本文揭露之抗體、抗原結合片段、或ADC的增加的效力、細胞毒性、和/或抗癌活性在包含至少一些休眠細胞（例如，不分裂或緩慢分裂的骨髓瘤細胞）的癌症中。在一些實施方式中，本文揭露之抗體、抗原結合片段、或ADC的增加的效力、細胞毒性、和/或抗癌活性在多發性骨髓瘤中。在一些實施方式中，本文揭露之抗體、抗原結合片段、或ADC的增加的效力、細胞毒性、和/或抗癌活性在表現MCL1的癌症中，例如，在具有高或中等水平MCL1表現的癌症中。
MCL1係BCL2基因家族的成員，該等基因通常被認為係計劃性細胞死亡的凋亡形式的主要調節因子。已經描述了MCL1的三種主要可變剪接同種型，最長的同種型（MCL1-長、MCL1-L、MCL1L）作為一種有效的促存活/抗凋亡因子，對抗成孔和僅有BH3的家族成員的促死亡功能。在人類中，MCL1在正常生理條件下的大多數正常組織中廣泛表現，並且特別富含骨髓細胞類型（包括漿B細胞，該細胞類型會導致骨髓瘤）。MCL1表現經常被許多癌症類型（包括骨髓瘤）的不同機制上調，並且已顯示在骨髓瘤的一些標準護理方案後進一步表現增加，從而賦予對此類療法的抵抗力。因此，不受理論的束縛，能夠抑制MCL1（例如MCL1L功能）和/或抑制MCL（例如MCL1L表現）的治療劑可以為骨髓瘤患者提供臨床益處，尤其是在具有高MCL1L表現或依賴性的復發性/難治性形式的疾病中。
不希望受理論束縛，將剪接調節劑遞送至癌細胞（例如表現BCMA的癌細胞）可藉由減少或抑制MCL1表現來誘導細胞死亡（Aird等人 (2019) Nat Commun [自然通訊] 10:137）。MCL1 mRNA和蛋白質的壽命相對較短，各自在幾種人類癌細胞系中半衰期通常為約30分鐘。編碼短壽命RNA轉錄物和蛋白質的基因可能特別適合藉由剪接調節劑進行調節，因為正確剪接的RNA和蛋白質產物的預先存在池可能會在處理後迅速降解，而異常剪接的轉錄產物開始積累。該等異常剪接事件通常會引入誤義或無義突變，導致很少或沒有功能性蛋白輸出。除了影響整體基因表現外，剪接調節劑處理還可能導致具有新功能或與正確剪接基因的功能對立的功能的蛋白質產物的表現。與破壞微管或損害DNA的有效載荷相比，本文所述之ADC中使用的剪接調節劑可以破壞MCL1剪接並提供通路特異性凋亡機制來殺死難以治療的癌細胞（例如，骨髓瘤細胞）。藉由靶向癌細胞對MCL1剪接的依賴性，所述抗體、抗原結合片段、軛合物、和/或ADC複合物可以為當前的臨床挑戰（如克服多發性骨髓瘤和其他表現BCMA的癌症中的抗藥性）提供有效的治療方案。
在各種實施方式中，本揭露更具體地關於能夠結合表現BCMA的癌細胞的抗體、抗原結合片段和ADC。在各種實施方式中，該等抗體、抗原結合片段和ADC還能夠在結合後內化到靶細胞中。揭露了包含連接子（linker）的ADC，該連接子將剪接調節劑連接至抗體部分。抗體部分（單獨或作為ADC的一部分）可以是全長抗體或其抗原結合片段。
在一些實施方式中，本揭露提供了分離的抗體或抗原結合片段，其中該抗體或抗原結合片段能夠結合BCMA並且包含： (i) 三個重鏈互補決定區（HCDR）和三個輕鏈互補決定區（LCDR），如由Kabat編號系統所定義的，包含： HCDR1，其包含以下胺基酸序列：NYWIH（SEQ ID NO: 1）； HCDR2，其包含以下胺基酸序列： X1 TYRX5 X6 SX8 TX10 YX12 QKX15 K S（SEQ ID NO: 67），其中： X1 係A或G； X5 係S或I； X6 係H或Q； X8 係D或T； X10 係Y或N； X12 係N或A；並且 X15 係F或Y； HCDR3，其包含以下胺基酸序列： GAX3 YHGYDVIX11 N（SEQ ID NO: 68），其中： X3 係I或V；並且 X11 係E或D； LCDR1，其包含以下胺基酸序列： RASQSISSYX10 N（SEQ ID NO: 69），其中： X10 係L或I； LCDR2，其包含以下胺基酸序列： ATSNLQX7 （SEQ ID NO: 70），其中： X7 係S或I；以及 LCDR3，其包含以下胺基酸序列： QQX3 RRX6 PWX9 （SEQ ID NO: 71），其中： X3 係F或Y； X6 係L或I；並且 X9 係T或S；或 (ii) 三個重鏈互補決定區（HCDR）和三個輕鏈互補決定區（LCDR），如由IMGT編號系統所定義的，包含： HCDR1，其包含以下胺基酸序列： GGTFX5 NYW（SEQ ID NO: 72），其中： X5 係S或T； HCDR2，其包含以下胺基酸序列： TYRX4 X5 SX7 T（SEQ ID NO: 73），其中： X4 係S或I； X5 係H或Q；並且 X7 係D或T； HCDR3，其包含以下胺基酸序列： ARGAX5 YHGYDVIX13 N（SEQ ID NO: 74），其中： X5 係I或V；並且 X13 係D或E； LCDR1，其包含以下胺基酸序列：QSISSY（SEQ ID NO: 40）； LCDR2，其包含以下胺基酸序列：ATS（SEQ ID NO: 41）；並且 LCDR3，其包含以下胺基酸序列： QQX3 RRX6 PWX9 （SEQ ID NO: 75），其中： X3 係Y或F； X6 係L或I；並且 X9 係T或S。
在一些實施方式中，本揭露提供了分離的抗體或抗原結合片段，其中該抗體或抗原結合片段能夠結合BCMA並且包含： (a) 三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 1（HCDR1）、SEQ ID NO: 2（HCDR2）和SEQ ID NO: 3（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 4（LCDR1）、SEQ ID NO: 5（LCDR2）和SEQ ID NO: 6（LCDR3），如由Kabat編號系統所定義的；或者三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 37（HCDR1）、SEQ ID NO: 38（HCDR2）和SEQ ID NO: 39（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 40（LCDR1）、SEQ ID NO: 41（LCDR2）和SEQ ID NO: 42（LCDR3），如由IMGT編號系統所定義的； (b) 三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 1（HCDR1）、SEQ ID NO: 7（HCDR2）和SEQ ID NO: 8（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 9（LCDR1）、SEQ ID NO: 10（LCDR2）和SEQ ID NO: 11（LCDR3），如由Kabat編號系統所定義的；或者三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 43（HCDR1）、SEQ ID NO: 44（HCDR2）和SEQ ID NO: 45（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 40（LCDR1）、SEQ ID NO: 41（LCDR2）和SEQ ID NO: 46（LCDR3），如由IMGT編號系統所定義的； (c) 三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 1（HCDR1）、SEQ ID NO: 12（HCDR2）和SEQ ID NO: 13（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 14（LCDR1）、SEQ ID NO: 15（LCDR2）和SEQ ID NO: 16（LCDR3），如由Kabat編號系統所定義的；或者三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 47（HCDR1）、SEQ ID NO: 48（HCDR2）和SEQ ID NO: 49（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 40（LCDR1）、SEQ ID NO: 41（LCDR2）和SEQ ID NO: 50（LCDR3），如由IMGT編號系統所定義的； (d) 三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 1（HCDR1）、SEQ ID NO: 17（HCDR2）和SEQ ID NO: 18（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 19（LCDR1）、SEQ ID NO: 20（LCDR2）和SEQ ID NO: 21（LCDR3），如由Kabat編號系統所定義的；或者三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 51（HCDR1）、SEQ ID NO: 52（HCDR2）和SEQ ID NO: 53（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 40（LCDR1）、SEQ ID NO: 41（LCDR2）和SEQ ID NO: 54（LCDR3），如由IMGT編號系統所定義的； (e) 三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 1（HCDR1）、SEQ ID NO: 22（HCDR2）和SEQ ID NO: 23（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 24（LCDR1）、SEQ ID NO: 25（LCDR2）和SEQ ID NO: 26（LCDR3），如由Kabat編號系統所定義的；或者三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 55（HCDR1）、SEQ ID NO: 56（HCDR2）和SEQ ID NO: 57（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 40（LCDR1）、SEQ ID NO: 41（LCDR2）和SEQ ID NO: 58（LCDR3），如由IMGT編號系統所定義的； (f) 三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 1（HCDR1）、SEQ ID NO: 27（HCDR2）和SEQ ID NO: 28（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 29（LCDR1）、SEQ ID NO: 30（LCDR2）和SEQ ID NO: 31（LCDR3），如由Kabat編號系統所定義的；或者三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 59（HCDR1）、SEQ ID NO: 60（HCDR2）和SEQ ID NO: 61（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 40（LCDR1）、SEQ ID NO: 41（LCDR2）和SEQ ID NO: 62（LCDR3），如由IMGT編號系統所定義的；或 (g) 三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 1（HCDR1）、SEQ ID NO: 32（HCDR2）和SEQ ID NO: 33（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 34（LCDR1）、SEQ ID NO: 35（LCDR2）和SEQ ID NO: 36（LCDR3），如由Kabat編號系統所定義的；或者三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 63（HCDR1）、SEQ ID NO: 64（HCDR2）和SEQ ID NO: 65（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 40（LCDR1）、SEQ ID NO: 41（LCDR2）和SEQ ID NO: 66（LCDR3），如由IMGT編號系統所定義的。
在一些實施方式中，本揭露提供了分離的抗體或抗原結合片段，其中該抗體或抗原結合片段能夠結合BCMA並且包含： (a) 來自包含SEQ ID NO: 76的胺基酸序列的重鏈可變區的三個HCDR，以及來自包含SEQ ID NO: 77的胺基酸序列的輕鏈可變區的三個LCDR； (b) 來自包含SEQ ID NO: 78的胺基酸序列的重鏈可變區的三個HCDR，以及來自包含SEQ ID NO: 79的胺基酸序列的輕鏈可變區的三個LCDR； (c) 來自包含SEQ ID NO: 80的胺基酸序列的重鏈可變區的三個HCDR，以及來自包含SEQ ID NO: 81的胺基酸序列的輕鏈可變區的三個LCDR； (d) 來自包含SEQ ID NO: 82的胺基酸序列的重鏈可變區的三個HCDR，以及來自包含SEQ ID NO: 83的胺基酸序列的輕鏈可變區的三個LCDR； (e) 來自包含SEQ ID NO: 84的胺基酸序列的重鏈可變區的三個HCDR，以及來自包含SEQ ID NO: 85的胺基酸序列的輕鏈可變區的三個LCDR； (f) 來自包含SEQ ID NO: 86的胺基酸序列的重鏈可變區的三個HCDR，以及來自包含SEQ ID NO: 87的胺基酸序列的輕鏈可變區的三個LCDR；或 (g) 來自包含SEQ ID NO: 88的胺基酸序列的重鏈可變區的三個HCDR，以及來自包含SEQ ID NO: 89的胺基酸序列的輕鏈可變區的三個LCDR。
在一些實施方式中，本文揭露之抗體或抗原結合片段包含人重鏈和輕鏈可變區框架，或具有一個或多個回復突變的人重鏈和輕鏈可變區框架。
在一些實施方式中，本文揭露之抗體或抗原結合片段包含： (a) 與SEQ ID NO: 76的胺基酸序列具有至少90%同一性的重鏈可變區，以及與SEQ ID NO: 77的胺基酸序列具有至少90%同一性的輕鏈可變區； (b) 與SEQ ID NO: 78的胺基酸序列具有至少90%同一性的重鏈可變區，以及與SEQ ID NO: 79的胺基酸序列具有至少90%同一性的輕鏈可變區； (c) 與SEQ ID NO: 80的胺基酸序列具有至少90%同一性的重鏈可變區，以及與SEQ ID NO: 81的胺基酸序列具有至少90%同一性的輕鏈可變區； (d) 與SEQ ID NO: 82的胺基酸序列具有至少90%同一性的重鏈可變區，以及與SEQ ID NO: 83的胺基酸序列具有至少90%同一性的輕鏈可變區； (e) 與SEQ ID NO: 84的胺基酸序列具有至少90%同一性的重鏈可變區，以及與SEQ ID NO: 85的胺基酸序列具有至少90%同一性的輕鏈可變區； (f) 與SEQ ID NO: 86的胺基酸序列具有至少90%同一性的重鏈可變區，以及與SEQ ID NO: 87的胺基酸序列具有至少90%同一性的輕鏈可變區；或 (g) 與SEQ ID NO: 88的胺基酸序列具有至少90%同一性的重鏈可變區，以及與SEQ ID NO: 89的胺基酸序列具有至少90%同一性的輕鏈可變區。
在一些實施方式中，本文揭露之抗體或抗原結合片段包含： (a) 含有SEQ ID NO: 76的胺基酸序列的重鏈可變區，以及含有SEQ ID NO: 77的胺基酸序列的輕鏈可變區； (b) 含有SEQ ID NO: 78的胺基酸序列的重鏈可變區，以及含有SEQ ID NO: 79的胺基酸序列的輕鏈可變區； (c) 含有SEQ ID NO: 80的胺基酸序列的重鏈可變區，以及含有SEQ ID NO: 81的胺基酸序列的輕鏈可變區； (d) 含有SEQ ID NO: 82的胺基酸序列的重鏈可變區，以及含有SEQ ID NO: 83的胺基酸序列的輕鏈可變區； (e) 含有SEQ ID NO: 84的胺基酸序列的重鏈可變區，以及含有SEQ ID NO: 85的胺基酸序列的輕鏈可變區； (f) 含有SEQ IDNO: 86的胺基酸序列的重鏈可變區，以及含有SEQ ID NO: 87的胺基酸序列的輕鏈可變區；或 (g) 含有SEQ ID NO: 88的胺基酸序列的重鏈可變區，以及含有SEQ ID NO: 89的胺基酸序列的輕鏈可變區。
在一些實施方式中，本文揭露之抗體或抗原結合片段包含： (a) 三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 1（HCDR1）、SEQ ID NO: 2（HCDR2）和SEQ ID NO: 3（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 4（LCDR1）、SEQ ID NO: 5（LCDR2）和SEQ ID NO: 6（LCDR3），如由Kabat編號系統所定義的；或者三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 37（HCDR1）、SEQ ID NO: 38（HCDR2）和SEQ ID NO: 39（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 40（LCDR1）、SEQ ID NO: 41（LCDR2）和SEQ ID NO: 42（LCDR3），如由IMGT編號系統所定義的；或 (b) 三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 1（HCDR1）、SEQ ID NO: 22（HCDR2）和SEQ ID NO: 23（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 24（LCDR1）、SEQ ID NO: 25（LCDR2）和SEQ ID NO: 26（LCDR3），如由Kabat編號系統所定義的；或者三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 55（HCDR1）、SEQ ID NO: 56（HCDR2）和SEQ ID NO: 57（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 40（LCDR1）、SEQ ID NO: 41（LCDR2）和SEQ ID NO: 58（LCDR3），如由IMGT編號系統所定義的。
在一些實施方式中，抗體或抗原結合片段包含： (a) 含有SEQ ID NO: 76的胺基酸序列的重鏈可變區，以及含有SEQ ID NO: 77的胺基酸序列的輕鏈可變區；或 (b) 含有SEQ ID NO: 84的胺基酸序列的重鏈可變區，以及含有SEQ ID NO: 85的胺基酸序列的輕鏈可變區。
在一些實施方式中，本文揭露之抗體或抗原結合片段包含三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 1（HCDR1）、SEQ ID NO: 22（HCDR2）和SEQ ID NO: 23（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 24（LCDR1）、SEQ ID NO: 25（LCDR2）和SEQ ID NO: 26（LCDR3），如由Kabat編號系統所定義的；或者三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 55（HCDR1）、SEQ ID NO: 56（HCDR2）和SEQ ID NO: 57（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 40（LCDR1）、SEQ ID NO: 41（LCDR2）和SEQ ID NO: 58（LCDR3），如由IMGT編號系統所定義的。在一些實施方式中，抗體或抗原結合片段包含含有SEQ ID NO: 84的胺基酸序列的重鏈可變區以及含有SEQ ID NO: 85的胺基酸序列的輕鏈可變區。
在一些實施方式中，本揭露提供了分離的抗體或抗原結合片段，其中該抗體或抗原結合片段能夠結合BCMA並且包含： (a) 含有SEQ ID NO: 119的胺基酸序列的重鏈可變區，該胺基酸序列被修飾以包括在位置30、34、50、54、55、57、59、61、64、66、101、103、108和109中的一個或多個處的胺基酸取代；以及 (b) 含有SEQ ID NO: 120的胺基酸序列的輕鏈可變區，該胺基酸序列被修飾以包括在位置24、28、31、33、50、55、56、91、93、94和97中的一個或多個處的胺基酸取代。
在一些實施方式中，抗體或抗原結合片段包含含有SEQ ID NO: 119的胺基酸序列的重鏈可變區，該胺基酸序列被修飾以包括在位置30、34、50、54、55、57、59、61、64、66、101、103、108和109中的一個或多個處的胺基酸取代，其中： SEQ ID NO: 119的位置30處的胺基酸被T取代； SEQ ID NO: 119的位置34處的胺基酸被I取代； SEQ ID NO: 119的位置50處的胺基酸被G取代； SEQ ID NO: 119的位置54處的胺基酸被S或I取代； SEQ ID NO: 119的位置55處的胺基酸被Q取代； SEQ ID NO: 119的位置57處的胺基酸被T取代； SEQ ID NO: 119的位置59處的胺基酸被N取代； SEQ ID NO: 119的位置61處的胺基酸被A取代； SEQ ID NO: 119的位置64處的胺基酸被Y取代； SEQ ID NO: 119的位置66處的胺基酸被S取代； SEQ ID NO: 119的位置101處的胺基酸被V取代； SEQ ID NO: 119的位置103處的胺基酸被H取代； SEQ ID NO: 119的位置108處的胺基酸被I取代；和/或 SEQ ID NO: 119的位置109處的胺基酸被E取代。
在一些實施方式中，抗體或抗原結合片段包含含有SEQ ID NO: 119的胺基酸序列的重鏈可變區，該胺基酸序列被修飾以包括在位置103處的至少一個胺基酸取代。在一些實施方式中，SEQ ID NO: 119的位置103處的胺基酸被H取代。
在一些實施方式中，抗體或抗原結合片段包含含有SEQ ID NO: 119的胺基酸序列的重鏈可變區，該胺基酸序列被修飾以包括至少四個胺基酸取代。在一些實施方式中，抗體或抗原結合片段包含含有SEQ ID NO: 119的胺基酸序列的重鏈可變區，該胺基酸序列被修飾以在位置34、66、103和108處至少包括胺基酸取代。在一些實施方式中，SEQ ID NO: 119的位置34處的胺基酸被I取代；SEQ ID NO: 119的位置66處的胺基酸被S取代；SEQ ID NO: 119的位置103處的胺基酸被H取代；並且SEQ ID NO: 119的位置108處的胺基酸被I取代。
在一些實施方式中，抗體或抗原結合片段包含含有SEQ ID NO: 120的胺基酸序列的輕鏈可變區，該胺基酸序列被修飾以包括在位置24、28、31、33、50、55、56、91、93、94和97中的一個或多個處的胺基酸取代，其中： SEQ ID NO: 120的位置24處的胺基酸被R取代； SEQ ID NO: 120的位置28處的胺基酸被S取代； SEQ ID NO: 120的位置31處的胺基酸被S取代； SEQ ID NO: 120的位置33處的胺基酸被I取代； SEQ ID NO: 120的位置50處的胺基酸被A取代； SEQ ID NO: 120的位置55處的胺基酸被Q取代； SEQ ID NO: 120的位置56處的胺基酸被I取代； SEQ ID NO: 120的位置91處的胺基酸被F取代； SEQ ID NO: 120的位置93處的胺基酸被R取代； SEQ ID NO: 120的位置94處的胺基酸被I取代；和/或 SEQ ID NO: 120的位置97處的胺基酸被S取代。
在一些實施方式中，抗體或抗原結合片段包含含有SEQ ID NO: 120的胺基酸序列的輕鏈可變區，該胺基酸序列被修飾以包括至少六個胺基酸取代。在一些實施方式中，抗體或抗原結合片段包含含有SEQ ID NO: 120的胺基酸序列的輕鏈可變區，該胺基酸序列被修飾以在位置24、28、31、50、55和93處至少包括胺基酸取代。在一些實施方式中，SEQ ID NO: 120的位置24處的胺基酸被R取代；SEQ ID NO: 120的位置28處的胺基酸被S取代；SEQ ID NO: 120的位置31處的胺基酸被S取代；SEQ ID NO: 120的位置50處的胺基酸被A取代；SEQ ID NO: 120的位置55處的胺基酸被Q取代；並且SEQ ID NO: 120的位置93處的胺基酸被R取代。
在一些實施方式中，抗體或抗原結合片段包含： (a) 與SEQ ID NO: 76的胺基酸序列具有至少90%同一性的重鏈可變區，以及與SEQ ID NO: 77的胺基酸序列具有至少90%同一性的輕鏈可變區； (b) 與SEQ ID NO: 78的胺基酸序列具有至少90%同一性的重鏈可變區，以及與SEQ ID NO: 79的胺基酸序列具有至少90%同一性的輕鏈可變區； (c) 與SEQ ID NO: 80的胺基酸序列具有至少90%同一性的重鏈可變區，以及與SEQ ID NO: 81的胺基酸序列具有至少90%同一性的輕鏈可變區； (d) 與SEQ ID NO: 82的胺基酸序列具有至少90%同一性的重鏈可變區，以及與SEQ ID NO: 83的胺基酸序列具有至少90%同一性的輕鏈可變區； (e) 與SEQ ID NO: 84的胺基酸序列具有至少90%同一性的重鏈可變區，以及與SEQ ID NO: 85的胺基酸序列具有至少90%同一性的輕鏈可變區； (f) 與SEQ ID NO: 86的胺基酸序列具有至少90%同一性的重鏈可變區，以及與SEQ ID NO: 87的胺基酸序列具有至少90%同一性的輕鏈可變區；或 (g) 與SEQ ID NO: 88的胺基酸序列具有至少90%同一性的重鏈可變區，以及與SEQ ID NO: 89的胺基酸序列具有至少90%同一性的輕鏈可變區。
在一些實施方式中，抗體或抗原結合片段包含： (a) 含有SEQ ID NO: 76的胺基酸序列的重鏈可變區，以及含有SEQ ID NO: 77的胺基酸序列的輕鏈可變區； (b) 含有SEQ ID NO: 78的胺基酸序列的重鏈可變區，以及含有SEQ ID NO: 79的胺基酸序列的輕鏈可變區； (c) 含有SEQ ID NO: 80的胺基酸序列的重鏈可變區，以及含有SEQ ID NO: 81的胺基酸序列的輕鏈可變區； (d) 含有SEQ ID NO: 82的胺基酸序列的重鏈可變區，以及含有SEQ ID NO: 83的胺基酸序列的輕鏈可變區； (e) 含有SEQ ID NO: 84的胺基酸序列的重鏈可變區，以及含有SEQ ID NO: 85的胺基酸序列的輕鏈可變區； (f) 含有SEQ ID NO: 86的胺基酸序列的重鏈可變區，以及含有SEQ ID NO: 87的胺基酸序列的輕鏈可變區；或 (g) 含有SEQ ID NO: 88的胺基酸序列的重鏈可變區，以及含有SEQ ID NO: 89的胺基酸序列的輕鏈可變區。
在一些實施方式中，本文揭露之抗體或抗原結合片段包含人IgG1重鏈恒定區。在一些實施方式中，抗體或抗原結合片段包含含有SEQ ID NO: 90的胺基酸序列的重鏈恒定區。在一些實施方式中，重鏈恒定區進一步包含C-末端離胺酸（K）。在一些實施方式中，本文揭露之抗體或抗原結合片段包含人IgG4重鏈恒定區。
在一些實施方式中，本文揭露之抗體或抗原結合片段包含人Igκ輕鏈恒定區。在一些實施方式中，抗體或抗原結合片段包含含有SEQ ID NO: 91的胺基酸序列的輕鏈恒定區。在一些實施方式中，本文揭露之抗體或抗原結合片段包含人Igλ輕鏈恒定區。
在一些實施方式中，本文揭露之抗體或抗原結合片段包含含有SEQ ID NO: 90的胺基酸序列的重鏈恒定區以及含有SEQ ID NO: 91的胺基酸序列的輕鏈恒定區。
在一些實施方式中，本文揭露之抗體或抗原結合片段包含： (a) 含有SEQ ID NO: 92的胺基酸序列的重鏈，以及含有SEQ ID NO: 93的胺基酸序列的輕鏈； (b) 含有SEQ ID NO: 94的胺基酸序列的重鏈，以及含有SEQ ID NO: 95的胺基酸序列的輕鏈； (c) 含有SEQ ID NO: 96的胺基酸序列的重鏈，以及含有SEQ ID NO: 97的胺基酸序列的輕鏈； (d) 含有SEQ ID NO: 98的胺基酸序列的重鏈，以及含有SEQ ID NO: 99的胺基酸序列的輕鏈； (e) 含有SEQ ID NO: 100的胺基酸序列的重鏈，以及含有SEQ ID NO: 101的胺基酸序列的輕鏈； (f) 含有SEQ ID NO: 102的胺基酸序列的重鏈，以及含有SEQ ID NO: 103的胺基酸序列的輕鏈；或 (g) 含有SEQ ID NO: 104的胺基酸序列的重鏈，以及含有SEQ ID NO: 105的胺基酸序列的輕鏈。在一些實施方式中，重鏈進一步包含C-末端離胺酸（K）。
在一些實施方式中，本文揭露之抗體或抗原結合片段包含： (a) 含有SEQ ID NO: 76的胺基酸序列的重鏈可變區，以及含有SEQ ID NO: 77的胺基酸序列的輕鏈可變區；或 (b) 含有SEQ ID NO: 84的胺基酸序列的重鏈可變區，以及含有SEQ ID NO: 85的胺基酸序列的輕鏈可變區。
在一些實施方式中，抗體或抗原結合片段包含： (a) 含有SEQ ID NO: 92的胺基酸序列的重鏈，以及含有SEQ ID NO: 93的胺基酸序列的輕鏈；或 (b) 含有SEQ ID NO: 100的胺基酸序列的重鏈，以及含有SEQ ID NO: 101的胺基酸序列的輕鏈。
在一些實施方式中，本文揭露之抗體或抗原結合片段包含含有SEQ ID NO: 84的胺基酸序列的重鏈可變區以及含有SEQ ID NO: 85的胺基酸序列的輕鏈可變區。在一些實施方式中，抗體或抗原結合片段包含含有SEQ ID NO: 100的胺基酸序列的重鏈以及含有SEQ ID NO: 101的胺基酸序列的輕鏈。在一些實施方式中，重鏈進一步包含C-末端離胺酸（K）。
在一些實施方式中，本文揭露之抗體或抗原結合片段與治療劑軛合。在一些實施方式中，治療劑係剪接調節劑。在一些實施方式中，治療劑係普拉二烯內酯或普拉二烯內酯衍生物。在一些實施方式中，治療劑係普拉二烯內酯D或普拉二烯內酯D衍生物。
在一些實施方式中，治療劑係D1：
Figure 02_image001
(D1)。
在一些實施方式中，治療劑係D2：
Figure 02_image002
(D2)。
在一些實施方式中，本文揭露之抗體-藥物軛合物（ADC）包含式 (I)： Ab-(L-D) p (I) 其中 Ab係本文揭露之抗體或抗原結合片段； D係剪接調節劑； L係將Ab共價連接至D的連接子；並且p 為1至15的整數。
在一些實施方式中，連接子為可裂解連接子。
在一些實施方式中，連接子包含可裂解肽部分。在一些實施方式中，可裂解肽部分可被酶裂解。在一些實施方式中，可裂解肽部分或連接子包含胺基酸單元。在一些實施方式中，胺基酸單元包含纈胺酸-瓜胺酸（Val-Cit）。在一些實施方式中，胺基酸單元包含纈胺酸-丙胺酸（Val-Ala）。在一些實施方式中，胺基酸單元包含丙胺酸-丙胺酸-天冬胺酸（Ala-Ala-Asp）。在一些實施方式中，胺基酸單元包含麩醯胺酸-纈胺酸-瓜胺酸（Glu-Val-Cit）。
在一些實施方式中，連接子包含可裂解葡糖苷酸部分。在一些實施方式中，可裂解葡糖苷酸部分可被酶裂解。在一些實施方式中，可裂解葡糖苷酸部分可被葡糖苷酸酶裂解。在一些實施方式中，可裂解葡糖苷酸部分可被β-葡糖苷酸酶裂解。在一些實施方式中，可裂解葡糖苷酸部分或連接子包含β-葡糖苷酸。
在一些實施方式中，連接子包含馬來醯亞胺部分。在一些實施方式中，馬來醯亞胺部分包含馬來醯亞胺基己醯基（MC）。在一些實施方式中，馬來醯亞胺部分與抗體或抗原結合片段上的半胱胺酸殘基反應。在一些實施方式中，馬來醯亞胺部分經由抗體或抗原結合片段上的半胱胺酸殘基連接至該抗體或抗原結合片段。
在一些實施方式中，連接子包含馬來醯亞胺部分和可裂解肽部分。在一些實施方式中，可裂解肽部分包含胺基酸單元。在一些實施方式中，可裂解肽部分或胺基酸單元包含Val-Cit。在一些實施方式中，可裂解肽部分或胺基酸單元包含Val-Ala。在一些實施方式中，可裂解肽部分或胺基酸單元包含Ala-Ala-Asp。在一些實施方式中，可裂解肽部分或胺基酸單元包含Glu-Val-Cit。在一些實施方式中，連接子包含馬來醯亞胺部分和可裂解葡糖苷酸部分。在一些實施方式中，可裂解葡糖苷酸部分包含β-葡糖苷酸。
在一些實施方式中，連接子包含至少一個間隔子單元。在一些實施方式中，連接子中的間隔子單元包含聚乙二醇（PEG）部分。在一些實施方式中，PEG部分包含-(PEG) m -且m 為1至10的整數。在一些實施方式中，m 為2。在一些實施方式中，連接子中的間隔子單元經由馬來醯亞胺部分（「Mal-間隔子單元」）連接至抗體或抗原結合片段。在一些實施方式中，Mal-間隔子單元包含PEG部分。在一些實施方式中，Mal-間隔子單元包含MC。
在一些實施方式中，連接子包含Mal-間隔子單元和可裂解肽部分。在一些實施方式中，可裂解肽部分包含胺基酸單元。在一些實施方式中，可裂解肽部分或胺基酸單元包含Val-Cit、Val-Ala、Ala-Ala-Asp或Glu-Val-Cit。在一些實施方式中，連接子包含Mal-間隔子單元和可裂解葡糖苷酸部分。在一些實施方式中，可裂解葡糖苷酸部分包含β-葡糖苷酸。
在一些實施方式中，馬來醯亞胺部分或Mal-間隔子單元將抗體或抗原結合片段連接至連接子中的可裂解部分。
在一些實施方式中，連接子中的可裂解部分包含可裂解肽部分。在一些實施方式中，可裂解肽部分包含胺基酸單元。在一些實施方式中，可裂解肽部分或胺基酸單元包含Val-Cit、Val-Ala、Ala-Ala-Asp或Glu-Val-Cit。在一些實施方式中，連接子包含MC-Val-Cit。在一些實施方式中，連接子包含MC-Val-Ala。在一些實施方式中，連接子包含MC-Ala-Ala-Asp。在一些實施方式中，連接子包含MC-Glu-Val-Cit。在一些實施方式中，連接子包含MC-(PEG)2 -Val-Cit。
在一些實施方式中，連接子中的可裂解部分包含可裂解葡糖苷酸部分。在一些實施方式中，可裂解葡糖苷酸部分包含β-葡糖苷酸。在一些實施方式中，連接子包含MC-β-葡糖苷酸。
在一些實施方式中，連接子中的可裂解部分直接連接至剪接調節劑。在一些其他實施方式中，間隔子單元將連接子中的可裂解部分連接至剪接調節劑。在一些實施方式中，軛合物的裂解使剪接調節劑自抗體或抗原結合片段和連接子釋放。在一些實施方式中，將連接子中的可裂解部分連接至剪接調節劑的間隔子單元係自消融型的（self-immolative）。
在一些實施方式中，將連接子中的可裂解部分連接至剪接調節劑的間隔子單元包含對胺基苄氧基羰基（pABC）。在一些實施方式中，pABC將連接子中的可裂解部分連接至剪接調節劑。在一些實施方式中，連接子中的可裂解部分包含可裂解肽部分。在一些實施方式中，可裂解肽部分包含胺基酸單元。在一些實施方式中，可裂解肽部分或胺基酸單元包含Val-Cit、Val-Ala、Ala-Ala-Asp或Glu-Val-Cit。在一些實施方式中，連接子包含Val-Cit-pABC。在一些實施方式中，連接子包含Val-Ala-pABC。在一些實施方式中，連接子包含Ala-Ala-Asp-pABC。在一些實施方式中，連接子包含Glu-Val-Cit-pABC。在一些實施方式中，連接子中的可裂解部分包含可裂解葡糖苷酸部分。在一些實施方式中，可裂解葡糖苷酸部分包含β-葡糖苷酸。在一些實施方式中，連接子包含β-葡糖苷酸-pABC。
在一些實施方式中，可裂解連接子包含MC-Val-Cit-pABC、MC-Val-Ala-pABC、MC-Ala-Ala-Asp-pABC、MC-Glu-Val-Cit-pABC、MC-(PEG)2 -Val-Cit-pABC或MC-β-葡糖苷酸。在一些實施方式中，可裂解連接子包含MC-Val-Cit-pABC。在一些實施方式中，可裂解連接子包含MC-Val-Ala-pABC。在一些實施方式中，可裂解連接子包含MC-Ala-Ala-Asp-pABC。在一些實施方式中，可裂解連接子包含MC-Glu-Val-Cit-pABC。在一些實施方式中，可裂解連接子包含MC-(PEG)2 -Val-Cit-pABC。在一些實施方式中，可裂解連接子包含MC-β-葡糖苷酸。
在一些實施方式中，連接子為不可裂解連接子。
在一些實施方式中，剪接調節劑包含SF3b複合體的調節劑。在一些實施方式中，剪接調節劑包含普拉二烯內酯或普拉二烯內酯衍生物。在一些實施方式中，剪接調節劑包含普拉二烯內酯D或普拉二烯內酯D衍生物。在一些實施方式中，剪接調節劑包含D1或D2。在一些實施方式中，剪接調節劑包含D1。在一些實施方式中，剪接調節劑包含D2。
在一些實施方式中，p 為1至12。在一些實施方式中，p 為2至8。在一些實施方式中，p 為4至8。在一些實施方式中，p 為4。在一些實施方式中，p 為8。
在一些實施方式中，本文揭露之ADC包含式 (I)： Ab-(L-D) p (I) 其中 Ab係本文揭露之抗體或抗原結合片段； D係D1； L係將Ab共價連接至D的連接子；並且p 為1至15的整數。
在一些實施方式中，本文揭露之ADC包含式 (I)： Ab-(L-D) p (I) 其中 Ab係本文揭露之抗體或抗原結合片段； D係D2； L係將Ab共價連接至D的連接子；並且p 為1至15的整數。
在一些實施方式中，本文揭露之ADC的抗體或抗原結合片段包含： (a) 三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 1（HCDR1）、SEQ ID NO: 2（HCDR2）和SEQ ID NO: 3（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 4（LCDR1）、SEQ ID NO: 5（LCDR2）和SEQ ID NO: 6（LCDR3），如由Kabat編號系統所定義的；或者三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 37（HCDR1）、SEQ ID NO: 38（HCDR2）和SEQ ID NO: 39（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 40（LCDR1）、SEQ ID NO: 41（LCDR2）和SEQ ID NO: 42（LCDR3），如由IMGT編號系統所定義的； (b) 三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 1（HCDR1）、SEQ ID NO: 7（HCDR2）和SEQ ID NO: 8（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 9（LCDR1）、SEQ ID NO: 10（LCDR2）和SEQ ID NO: 11（LCDR3），如由Kabat編號系統所定義的；或者三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 43（HCDR1）、SEQ ID NO: 44（HCDR2）和SEQ ID NO: 45（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 40（LCDR1）、SEQ ID NO: 41（LCDR2）和SEQ ID NO: 46（LCDR3），如由IMGT編號系統所定義的； (c) 三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 1（HCDR1）、SEQ ID NO: 12（HCDR2）和SEQ ID NO: 13（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 14（LCDR1）、SEQ ID NO: 15（LCDR2）和SEQ ID NO: 16（LCDR3），如由Kabat編號系統所定義的；或者三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 47（HCDR1）、SEQ ID NO: 48（HCDR2）和SEQ ID NO: 49（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 40（LCDR1）、SEQ ID NO: 41（LCDR2）和SEQ ID NO: 50（LCDR3），如由IMGT編號系統所定義的； (d) 三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 1（HCDR1）、SEQ ID NO: 17（HCDR2）和SEQ ID NO: 18（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 19（LCDR1）、SEQ ID NO: 20（LCDR2）和SEQ ID NO: 21（LCDR3），如由Kabat編號系統所定義的；或者三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 51（HCDR1）、SEQ ID NO: 52（HCDR2）和SEQ ID NO: 53（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 40（LCDR1）、SEQ ID NO: 41（LCDR2）和SEQ ID NO: 54（LCDR3），如由IMGT編號系統所定義的； (e) 三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 1（HCDR1）、SEQ ID NO: 22（HCDR2）和SEQ ID NO: 23（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 24（LCDR1）、SEQ ID NO: 25（LCDR2）和SEQ ID NO: 26（LCDR3），如由Kabat編號系統所定義的；或者三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 55（HCDR1）、SEQ ID NO: 56（HCDR2）和SEQ ID NO: 57（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 40（LCDR1）、SEQ ID NO: 41（LCDR2）和SEQ ID NO: 58（LCDR3），如由IMGT編號系統所定義的； (f) 三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 1（HCDR1）、SEQ ID NO: 27（HCDR2）和SEQ ID NO: 28（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 29（LCDR1）、SEQ ID NO: 30（LCDR2）和SEQ ID NO: 31（LCDR3），如由Kabat編號系統所定義的；或者三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 59（HCDR1）、SEQ ID NO: 60（HCDR2）和SEQ ID NO: 61（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 40（LCDR1）、SEQ ID NO: 41（LCDR2）和SEQ ID NO: 62（LCDR3），如由IMGT編號系統所定義的；或 (g) 三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 1（HCDR1）、SEQ ID NO: 32（HCDR2）和SEQ ID NO: 33（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 34（LCDR1）、SEQ ID NO: 35（LCDR2）和SEQ ID NO: 36（LCDR3），如由Kabat編號系統所定義的；或者三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 63（HCDR1）、SEQ ID NO: 64（HCDR2）和SEQ ID NO: 65（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 40（LCDR1）、SEQ ID NO: 41（LCDR2）和SEQ ID NO: 66（LCDR3），如由IMGT編號系統所定義的。
在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含人重鏈和輕鏈可變區框架，或具有一個或多個回復突變的人重鏈和輕鏈可變區框架。
在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含： (a) 與SEQ ID NO: 76的胺基酸序列具有至少90%同一性的重鏈可變區，以及與SEQ ID NO: 77的胺基酸序列具有至少90%同一性的輕鏈可變區； (b) 與SEQ ID NO: 78的胺基酸序列具有至少90%同一性的重鏈可變區，以及與SEQ ID NO: 79的胺基酸序列具有至少90%同一性的輕鏈可變區； (c) 與SEQ ID NO: 80的胺基酸序列具有至少90%同一性的重鏈可變區，以及與SEQ ID NO: 81的胺基酸序列具有至少90%同一性的輕鏈可變區； (d) 與SEQ ID NO: 82的胺基酸序列具有至少90%同一性的重鏈可變區，以及與SEQ ID NO: 83的胺基酸序列具有至少90%同一性的輕鏈可變區； (e) 與SEQ ID NO: 84的胺基酸序列具有至少90%同一性的重鏈可變區，以及與SEQ ID NO: 85的胺基酸序列具有至少90%同一性的輕鏈可變區； (f) 與SEQ ID NO: 86的胺基酸序列具有至少90%同一性的重鏈可變區，以及與SEQ ID NO: 87的胺基酸序列具有至少90%同一性的輕鏈可變區；或 (g) 與SEQ ID NO: 88的胺基酸序列具有至少90%同一性的重鏈可變區，以及與SEQ ID NO: 89的胺基酸序列具有至少90%同一性的輕鏈可變區。
在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含： (a) 含有SEQ ID NO: 76的胺基酸序列的重鏈可變區，以及含有SEQ ID NO: 77的胺基酸序列的輕鏈可變區； (b) 含有SEQ ID NO: 78的胺基酸序列的重鏈可變區，以及含有SEQ ID NO: 79的胺基酸序列的輕鏈可變區； (c) 含有SEQ ID NO: 80的胺基酸序列的重鏈可變區，以及含有SEQ ID NO: 81的胺基酸序列的輕鏈可變區； (d) 含有SEQ ID NO: 82的胺基酸序列的重鏈可變區，以及含有SEQ ID NO: 83的胺基酸序列的輕鏈可變區； (e) 含有SEQ ID NO: 84的胺基酸序列的重鏈可變區，以及含有SEQ ID NO: 85的胺基酸序列的輕鏈可變區； (f) 含有SEQ ID NO: 86的胺基酸序列的重鏈可變區，以及含有SEQ ID NO: 87的胺基酸序列的輕鏈可變區；或 (g) 含有SEQ ID NO: 88的胺基酸序列的重鏈可變區，以及含有SEQ ID NO: 89的胺基酸序列的輕鏈可變區。
在一些實施方式中，本文揭露之ADC的抗體或抗原結合片段包含： (a) 三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 1（HCDR1）、SEQ ID NO: 2（HCDR2）和SEQ ID NO: 3（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 4（LCDR1）、SEQ ID NO: 5（LCDR2）和SEQ ID NO: 6（LCDR3），如由Kabat編號系統所定義的；或者三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 37（HCDR1）、SEQ ID NO: 38（HCDR2）和SEQ ID NO: 39（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 40（LCDR1）、SEQ ID NO: 41（LCDR2）和SEQ ID NO: 42（LCDR3），如由IMGT編號系統所定義的；或 (b) 三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 1（HCDR1）、SEQ ID NO: 22（HCDR2）和SEQ ID NO: 23（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 24（LCDR1）、SEQ ID NO: 25（LCDR2）和SEQ ID NO: 26（LCDR3），如由Kabat編號系統所定義的；或者三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 55（HCDR1）、SEQ ID NO: 56（HCDR2）和SEQ ID NO: 57（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 40（LCDR1）、SEQ ID NO: 41（LCDR2）和SEQ ID NO: 58（LCDR3），如由IMGT編號系統所定義的。
在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含： (a) 含有SEQ ID NO: 76的胺基酸序列的重鏈可變區，以及含有SEQ ID NO: 77的胺基酸序列的輕鏈可變區；或 (b) 含有SEQ ID NO: 84的胺基酸序列的重鏈可變區，以及含有SEQ ID NO: 85的胺基酸序列的輕鏈可變區。
在一些實施方式中，本文揭露之ADC的抗體或抗原結合片段包含三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 1（HCDR1）、SEQ ID NO: 22（HCDR2）和SEQ ID NO: 23（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 24（LCDR1）、SEQ ID NO: 25（LCDR2）和SEQ ID NO: 26（LCDR3），如由Kabat編號系統所定義的；或者三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 55（HCDR1）、SEQ ID NO: 56（HCDR2）和SEQ ID NO: 57（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 40（LCDR1）、SEQ ID NO: 41（LCDR2）和SEQ ID NO: 58（LCDR3），如由IMGT編號系統所定義的。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含含有SEQ ID NO: 84的胺基酸序列的重鏈可變區以及含有SEQ ID NO: 85的胺基酸序列的輕鏈可變區。
在一些實施方式中，本文揭露之ADC包含式 (I)： Ab-(L-D) p (I) 其中 Ab係抗體或抗原結合片段，其中該抗體或抗原結合片段能夠結合BCMA，並且包含三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 1（HCDR1）、SEQ ID NO: 22（HCDR2）和SEQ ID NO: 23（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 24（LCDR1）、SEQ ID NO: 25（LCDR2）和SEQ ID NO: 26（LCDR3），如由Kabat編號系統所定義的；或者三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 55（HCDR1）、SEQ ID NO: 56（HCDR2）和SEQ ID NO: 57（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 40（LCDR1）、SEQ ID NO: 41（LCDR2）和SEQ ID NO: 58（LCDR3），如由IMGT編號系統所定義的； D係D1； L係將Ab共價連接至D的連接子；並且p 為1至15的整數。
在一些實施方式中，本文揭露之ADC的抗體或抗原結合片段包含人重鏈和輕鏈可變區框架，或具有一個或多個回復突變的人重鏈和輕鏈可變區框架。
在一些實施方式中，本文揭露之ADC的抗體或抗原結合片段包含與SEQ ID NO: 84的胺基酸序列具有至少90%同一性的重鏈可變區以及與SEQ ID NO: 85的胺基酸序列具有至少90%同一性的輕鏈可變區。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含含有SEQ ID NO: 84的胺基酸序列的重鏈可變區以及含有SEQ ID NO: 85的胺基酸序列的輕鏈可變區。
在一些實施方式中，本文揭露之ADC的抗體或抗原結合片段包含人IgG1重鏈恒定區和人Igκ輕鏈恒定區。在一些實施方式中，本文揭露之ADC的抗體或抗原結合片段包含人IgG1重鏈恒定區和人Igλ輕鏈恒定區。在一些實施方式中，本文揭露之ADC的抗體或抗原結合片段包含人IgG4重鏈恒定區和人Igκ輕鏈恒定區。在一些實施方式中，本文揭露之ADC的抗體或抗原結合片段包含人IgG4重鏈恒定區和人Igλ輕鏈恒定區。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含含有SEQ ID NO: 90的胺基酸序列的重鏈恒定區以及含有SEQ ID NO: 91的胺基酸序列的輕鏈恒定區。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含含有SEQ ID NO: 100的胺基酸序列的重鏈以及含有SEQ ID NO: 101的胺基酸序列的輕鏈。在一些實施方式中，重鏈恒定區或重鏈進一步包含C-末端離胺酸（K）。
在一些實施方式中，本文揭露之ADC的連接子係可裂解連接子。在一些實施方式中，可裂解連接子包含MC-Val-Cit-pABC。在一些實施方式中，可裂解連接子包含MC-Val-Ala-pABC。在一些實施方式中，可裂解連接子包含MC-Ala-Ala-Asp-pABC。在一些實施方式中，可裂解連接子包含MC-Glu-Val-Cit-pABC。在一些實施方式中，可裂解連接子包含MC-(PEG)2 -Val-Cit-pABC。在一些實施方式中，可裂解連接子包含MC-β-葡糖苷酸。
在一些實施方式中，本文揭露之ADC的p 為1至12。在一些實施方式中，p 為2至8。在一些實施方式中，p 為4至8。在一些實施方式中，p 為4。在一些實施方式中，p 為8。
在一些實施方式中，本文揭露之ADC包含式 (I)： Ab-(L-D) p (I) 其中 Ab係抗體或抗原結合片段，其中該抗體或抗原結合片段能夠結合BCMA，並且包含三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 1（HCDR1）、SEQ ID NO: 22（HCDR2）和SEQ ID NO: 23（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 24（LCDR1）、SEQ ID NO: 25（LCDR2）和SEQ ID NO: 26（LCDR3），如由Kabat編號系統所定義的；或者三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 55（HCDR1）、SEQ ID NO: 56（HCDR2）和SEQ ID NO: 57（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 40（LCDR1）、SEQ ID NO: 41（LCDR2）和SEQ ID NO: 58（LCDR3），如由IMGT編號系統所定義的； D係D1； L係包含MC-Val-Cit-pABC（ADL1）的連接子；並且p 為1至15的整數。
在一些實施方式中，本文揭露之ADC中的抗體或抗原結合片段包含人重鏈和輕鏈可變區框架，或具有一個或多個回復突變的人重鏈和輕鏈可變區框架。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含含有SEQ ID NO: 84的胺基酸序列的重鏈可變區以及含有SEQ ID NO: 85的胺基酸序列的輕鏈可變區。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含人IgG1重鏈恒定區和人Igκ輕鏈恒定區。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含含有SEQ ID NO: 90的胺基酸序列的重鏈恒定區以及含有SEQ ID NO: 91的胺基酸序列的輕鏈恒定區。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含含有SEQ ID NO: 100的胺基酸序列的重鏈以及含有SEQ ID NO: 101的胺基酸序列的輕鏈。在一些實施方式中，重鏈恒定區或重鏈進一步包含C-末端離胺酸（K）。在一些實施方式中，p 為1至12。在一些實施方式中，p 為2至8。在一些實施方式中，p 為4至8。在一些實施方式中，p 為4。在一些實施方式中，p 為8。
在一些實施方式中，本文揭露之ADC包含式 (I)： Ab-(L-D) p (I) 其中 Ab係抗體或抗原結合片段，其中該抗體或抗原結合片段能夠結合BCMA並且包含含有SEQ ID NO: 84的胺基酸序列的重鏈可變區以及含有SEQ ID NO: 85的胺基酸序列的輕鏈可變區； D係D1； L係包含MC-Val-Cit-pABC（ADL1）的連接子；並且p 為1至15的整數。
在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含人IgG1重鏈恒定區和人Igκ輕鏈恒定區。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含含有SEQ ID NO: 90的胺基酸序列的重鏈恒定區以及含有SEQ ID NO: 91的胺基酸序列的輕鏈恒定區。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含含有SEQ ID NO: 100的胺基酸序列的重鏈以及含有SEQ ID NO: 101的胺基酸序列的輕鏈。在一些實施方式中，重鏈恒定區或重鏈進一步包含C-末端離胺酸（K）。在一些實施方式中，p 為1至12。在一些實施方式中，p 為2至8。在一些實施方式中，p 為4至8。在一些實施方式中，p 為4。在一些實施方式中，p 為8。
在各種實施方式中，本文提供了包含所述抗體、抗原結合片段、軛合物、和/或ADC的藥物組成物。在一些實施方式中，藥物組成物包含一種或多種抗體、一種或多種抗原結合片段、和/或一種或多種本文所述之ADC以及至少一種藥學上可接受的載體。在一些實施方式中，藥物組成物包含抗體、抗原結合片段、和/或ADC的多個拷貝。在一些實施方式中，藥物組成物包含本文揭露之ADC的多個拷貝，其中組成物中ADC的平均p 為約2至約8。在一些實施方式中，組成物中ADC的平均p 為約4。
在一些實施方式中，本文提供了所描述的抗體、抗原結合片段、軛合物、和/或ADC複合物或組成物的治療方法和用途，例如用於治療癌症。在某些方面中，本揭露提供了治療患有或疑似患有癌症的受試者之方法，該等方法藉由向受試者投與治療有效量和/或治療有效方案的本文所述抗體、抗原結合片段、ADC、和/或藥物組成物中的任一種來進行。在某些方面中，本揭露提供了減少或減慢受試者中癌細胞群的生長之方法，該等方法藉由向受試者投與治療有效量和/或治療有效方案的本文所述抗體、抗原結合片段、ADC、和/或藥物組成物中的任一種來進行。在一些實施方式中，抗體、抗原結合片段、ADC、和/或藥物組成物的投與使癌細胞群減少至少約10%、至少約20%、至少約50%、至少約70%、至少約80%、至少約90%、至少約95%、或至少約99%。在一些實施方式中，抗體、抗原結合片段、ADC、和/或藥物組成物的投與使癌細胞群的生長減慢至少約10%、至少約20%、至少約50%、至少約70%、至少約80%、至少約90%、至少約95%、或至少約99%。在一些實施方式中，抗體、抗原結合片段、ADC、和/或藥物組成物與一種或多種另外的治療劑組合投與。在一些實施方式中，一種或多種另外的治療劑包括BCL2抑制劑、BCLxL抑制劑、BCL2/BCLxL抑制劑、和/或γ分泌酶抑制劑。
在本文揭露之治療方法和用途的一些實施方式中，用所述抗體、抗原結合片段、ADC、和/或藥物組成物進行的治療誘導旁觀者殺傷不表現靶抗原但與表現靶抗原的癌細胞相鄰的癌細胞。在一些實施方式中，受試者具有一種或多種表現靶抗原的癌細胞。在一些實施方式中，靶抗原為BCMA。在一些實施方式中，與參考例如替代性抗BCMA ADC（例如AB200-ADL10-MMAF）相比，所述抗體、抗原結合片段、ADC、和/或藥物組成物誘導旁觀者殺傷癌細胞水平增加。
在本文揭露之治療方法和用途的一些實施方式中，癌症表現BCMA。在一些實施方式中，癌症係漿細胞惡性腫瘤。在一些實施方式中，漿細胞惡性腫瘤或癌症係白血病、淋巴瘤、漿細胞瘤或骨髓瘤。在一些實施方式中，漿細胞惡性腫瘤或癌症係多發性骨髓瘤、彌漫性大B細胞淋巴瘤、外膜細胞淋巴瘤、漿母細胞性淋巴瘤、漿母細胞性骨髓瘤或柏基特氏淋巴瘤。在一些實施方式中，漿細胞惡性腫瘤或癌症係多發性骨髓瘤。在一些實施方式中，漿細胞惡性腫瘤或癌症係復發性/難治性多發性骨髓瘤。在一些實施方式中，漿細胞惡性腫瘤或癌症包括活躍分裂的細胞、休眠細胞或兩者。在一些實施方式中，漿細胞惡性腫瘤或癌症包含至少一些休眠細胞，例如，不分裂或緩慢分裂的骨髓瘤細胞。在一些實施方式中，漿細胞惡性腫瘤或癌症表現MCL1。在一些實施方式中，漿細胞惡性腫瘤或癌症具有高或中等水平的MCL1表現。
在一些實施方式中，本文提供了所述抗體、抗原結合片段、軛合物、和/或ADC複合物或組成物的治療方法和用途，例如用於確定患有或疑似患有癌症（例如，表現BCMA的癌症）的受試者是否會對用靶向BCMA的藥劑（例如，本文所述之抗體、抗原結合片段、ADC、和/或藥物組成物）的治療產生應答。在一些實施方式中，該方法包括提供來自受試者的生物樣本；使樣本與本文揭露之抗體或抗原結合片段接觸；以及檢測抗體或抗原結合片段與樣本中的一種或多種癌細胞的結合。在一些實施方式中，一種或多種癌細胞表現BCMA。在一些實施方式中，癌症係漿細胞惡性腫瘤。在一些實施方式中，漿細胞惡性腫瘤或癌症係白血病、淋巴瘤、漿細胞瘤或骨髓瘤。在一些實施方式中，漿細胞惡性腫瘤或癌症係多發性骨髓瘤、彌漫性大B細胞淋巴瘤、外膜細胞淋巴瘤、漿母細胞性淋巴瘤、漿母細胞性骨髓瘤或柏基特氏淋巴瘤。在一些實施方式中，漿細胞惡性腫瘤或癌症係多發性骨髓瘤。在一些實施方式中，漿細胞惡性腫瘤或癌症係復發性/難治性多發性骨髓瘤。在一些實施方式中，生物樣本係血液樣本或骨髓穿刺樣本。在一些實施方式中，血液樣本係血液、血液成分、或從血液或血液成分中獲得的一種或多種細胞。
在某些其他方面，本揭露提供了包含抗體、抗原結合片段、軛合物、和/或ADC以及藥學上可接受的稀釋劑、載體和/或賦形劑的藥物組成物。在一些實施方式中，還提供了編碼本揭露的抗體或抗原結合片段、或本揭露的軛合物和/或ADC中的抗體部分的一種或多種核酸。該等核酸可以是分離的核酸、摻入分離的運載體中的核酸、和/或由細胞或細胞群在適合產生抗體或抗原結合片段的條件下表現的抗體或抗原結合片段的形式。
在又其他方面，本揭露提供了產生所述抗體、抗原結合片段、軛合物、和/或ADC複合物或組成物之方法。在一些實施方式中，本揭露提供了產生抗體或抗原結合片段之方法，該方法藉由在適合產生抗體或抗原結合片段的條件下培養經修飾以包含編碼本文所述之抗體或抗原結合片段的一種或多種核酸的宿主細胞或細胞群來進行。在一些實施方式中，本揭露提供了產生ADC之方法，該方法藉由在允許軛合的條件下使本文所述之抗體或抗原結合片段與連接至剪接調節劑的連接子反應來進行。在一些實施方式中，本揭露提供了產生ADC之方法，該方法藉由在允許軛合的條件下使本文所述之抗體或抗原結合片段與連接子和剪接調節劑反應來進行。
在一些實施方式中，本文揭露之方法包括使抗體或抗原結合片段與連接子和剪接調節劑順序地反應，其中首先使抗體或抗原結合片段與連接子反應形成抗體-連接子中間體，然後使抗體-連接子中間體與剪接調節劑反應。在一些其他實施方式中，本文揭露之方法包括使抗體或抗原結合片段與連接子和剪接調節劑同時反應。在一些實施方式中，連接子為可裂解連接子。在一些實施方式中，可裂解連接子包含MC-Val-Cit-pABC。在一些實施方式中，可裂解連接子包含MC-Val-Ala-pABC。在一些實施方式中，可裂解連接子包含MC-Ala-Ala-Asp-pABC。在一些實施方式中，可裂解連接子包含MC-Glu-Val-Cit-pABC。在一些實施方式中，可裂解連接子包含MC-(PEG)2 -Val-Cit-pABC。在一些實施方式中，可裂解連接子包含MC-β-葡糖苷酸。在一些實施方式中，剪接調節劑包含D1。在一些實施方式中，剪接調節劑包含D2。
所揭露之組成物及方法可參照以下詳細描述來更容易地理解。
在本文通篇，描述關於組成物及使用這類組成物之方法。當本揭露描述或主張與組成物相關聯的特點或實施方式時，此類特點或實施方式同等地適用於使用該組成物之方法。同樣，當本揭露描述或主張與使用該組成物之方法相關聯的特點或實施方式時，此類特點或實施方式同等地適用於該組成物。
當值的範圍得以表示時，其包括使用該範圍內的任何特定值的實施方式。此外，對按範圍陳述的值的提及包括該範圍內的每一值。所有範圍均包括其端點且可組合。當藉由在前面使用「約」，以近似值表示值時，應理解特定值形成另一實施方式。除非上下文另外明確地指示，否則對特定數值的提及至少包括該特定值。除非另外指示其具體使用情形，否則「或」的使用意指「和/或」。
應瞭解，出於清楚起見在單獨實施方式的情形下描述於本文中的所揭露之組成物及方法的某些特點還可以單個實施方式的組合形式提供。相反地，出於簡便起見在單個實施方式的情形下描述的所揭露之組成物及方法的各種特點還可單獨地或以任何子組合形式提供。
本文所引用的所有參考文獻均出於任何目的藉由引用併入。在參考文獻與本說明書矛盾的情況下，以本說明書為準。
在本說明書及請求項通篇使用與描述的方面相關的各種術語。除非另外指示，否則將給與這類術語以其在本領域中的普通含義。其他特別定義的術語以與本文所提供的定義一致的方式來解釋。
如本文所使用，單數形式「一個/種（a/an）」和「該（the）」包括複數形式，除非上下文另外明確地指示。
如技術人員自本文所含的教導顯而易見的是，在數值及範圍的情形下，術語「約」或「近似地」係指近似或接近所述值或範圍的值或範圍，使得實施方式可根據預期執行，如在反應混合物中具有所需量的核酸或多肽。在一些實施方式中，「約」意指數值量± 10%。
術語「抗體」在最廣泛意義上用於指經由免疫球蛋白分子的可變區內的至少一個抗原識別位點識別且特異性結合如蛋白質、多肽、碳水化合物、多核苷酸、脂質或前述物質的組合等的靶標的免疫球蛋白分子。抗體的重鏈由重鏈可變區（VH ）和重鏈恒定區（CH ）構成。輕鏈由輕鏈可變區（VL ）和輕鏈恒定區（CL ）構成。出於本申請的目的，成熟的重鏈和輕鏈可變區各自包含從N-末端至C-末端排列的四個框架區（FR1、FR2、FR3和FR4）內的三個互補決定區（CDR1、CDR2和CDR3）：FR1、CDR1、FR2、CDR2、FR3、CDR3和FR4。「抗體」可為天然存在的或人造的，諸如藉由常規雜交瘤技術產生的單株抗體。抗體可以包含一條或多於一條重鏈和/或輕鏈。術語「抗體」包括全長單株抗體和全長多株抗體，以及諸如Fab、Fab'、F(ab')2 、Fv的抗體片段，以及單鏈抗體。抗體可以是免疫球蛋白的五種主要類別中的任一種：IgA、IgD、IgE、IgG、以及IgM，或其亞類（例如，同種型IgG1、IgG2、IgG3、IgG4）。該術語進一步涵蓋人抗體、嵌合抗體、人源化抗體以及含有抗原識別位點的任何經修飾的免疫球蛋白分子，只要其展現所需生物活性（例如，結合靶抗原（例如，BCMA）、在表現靶抗原的細胞內內化）中的一種或多種即可。
描述抗體中CDR和FR區位置的編號系統已由不同的團體定義。本領域已知和/或本文所述之任何編號系統可用於定義本揭露的抗體和抗原結合片段中的CDR和FR區。
在一些實施方式中，本揭露的抗體和抗原結合片段包含由Kabat編號系統定義的CDR和FR區（參見，例如，Kabat等人 「Sequences of Proteins of Immunological Interest [免疫學感興趣的蛋白質的序列]」, Diane Publishing Company [戴安出版公司] (1992)；還參見，Kabat等人 「Sequences of Proteins of Immunological Interest [免疫學感興趣的蛋白質的序列]」, U.S. Department of Health and Human Services [美國衛生與公眾服務部], U.S. Government Printing Office [美國政府印刷局] (1987和1991)）。由Kabat編號系統定義的示例性CDR序列在表3中列出並且可以用於本文揭露之任何示例性抗體和抗原結合片段中。在一些實施方式中，Kabat編號系統還可以用於描述CDR和/或FR區內位置處的一個或多個單獨胺基酸。在一些實施方式中，除了使用在抗體或抗原結合片段中的絕對位置描述一個或多個胺基酸之外（或作為其替代），使用Kabat編號系統。在一些實施方式中，本文揭露之抗體或抗原結合片段中的胺基酸和/或胺基酸修飾可以藉由其Kabat位置來指代。例如，在一些實施方式中，本文揭露之抗體或抗原結合片段包含重鏈可變區，該重鏈可變區包含經修飾以在位置103（即，在絕對位置103）處包括至少一個胺基酸取代的SEQ ID NO: 119的胺基酸序列。在一些實施方式中，SEQ ID NO: 119的位置103可藉由其Kabat位置（即，SEQ ID NO: 119的Kabat位置99）指代。在一些實施方式中，SEQ ID NO: 119的位置103（對應於Kabat位置99）處的胺基酸被H取代。
在一些實施方式中，本揭露的抗體和抗原結合片段包含由IMGT編號系統（國際免疫遺傳資訊系統（IMGT®））定義的CDR和FR區。由IMGT編號系統定義的示例性CDR序列在表4中列出並且可以用於本文揭露之任何示例性抗體和抗原結合片段中。
另外的編號系統，如Chothia編號系統（參見，例如，Al-Lazikani等人 J Mol Biol.[分子生物學雜誌] 1997;273:927-48）和化學計算集團（CCG）編號系統（參見，例如，Molecular Operating Environment [分子操作環境]（MOE）, 2013.08；Chemical Computing Group ULC [化學計算集團], Montreal, QC, Canada [加拿大魁北克省蒙特利爾], H3A 2R7, 2018）係本領域已知的，可以用於定義本揭露的抗體和抗原結合片段中的CDR和FR區。在一些實施方式中，本揭露的抗體和抗原結合片段包含與本文所述之CDR序列匹配有100%同源性的CDR序列。
如本文所使用，術語「單株抗體」係指自實質上均質的抗體群體獲得的抗體，即除可能少量存在的可能性天然存在的突變以外，構成該群體的個別抗體為相同的。單株抗體針對單一抗原性表位具有高度特異性。相反，常規的（多株）抗體製劑通常包括針對不同表位或對其具有特異性的多種抗體。修飾語「單株」表示從基本上均質的抗體群體獲得的抗體的特徵，而不應解釋為要求藉由任何特定方法生產抗體。例如，根據本揭露使用的單株抗體可藉由首先由Kohler等人 (1975) Nature [自然] 256:495描述的雜交瘤方法來製造，或可藉由重組DNA方法（參見，例如，美國專利號4,816,567）來製造。單株抗體還可使用例如Clackson等人 (1991) Nature [自然] 352:624-8和Marks等人 (1991) J Mol Biol.[分子生物學雜誌] 222:581-97中所述之技術自噬菌體抗體文庫分離。
本文所述之單株抗體具體地包括「嵌合」抗體，其中重鏈和/或輕鏈的一部分與來源於特定物種或屬於特定抗體類別或亞類的抗體中的對應序列相同或同源，而鏈的其餘部分與來源於另一物種或屬於另一抗體類別或亞類的抗體、以及此類抗體的片段中的對應序列相同或同源；只要它們特異性結合靶抗原和/或表現出所需的生物學活性。
如本文所使用，術語「人抗體」係指由人產生的抗體或具有由人產生的抗體的胺基酸序列的抗體。
如本文所使用，術語「嵌合抗體」係指如下抗體，其中 (a) 恒定區被改變、替換或交換，使得抗原結合位點（可變區）連接至類別、效應子功能和/或種類不同或改變的恒定區；和/或 (b) 可變區或其部分被改變、替換或交換為抗原特異性不同或改變的可變區或其部分。為了產生嵌合抗體，在一些實施方式中，可以使用本領域已知之方法將來自非人供體抗體（例如，小鼠、兔或大鼠供體抗體）的可變區序列連接至人恒定區（參見，例如，美國專利號4,816,567（Cabilly等人））。例如，可以藉由用來自人免疫球蛋白的恒定區替換小鼠恒定區來修飾小鼠抗BCMA抗體。由於用人恒定區替換，所以嵌合抗體可以保留其識別人BCMA的特異性而與原始的小鼠抗體相比在人中具有減少的免疫原性。
如本文所使用，術語「人源化抗體」係指包含至少一些人序列和至少一些非人序列的抗體形式。典型地，抗體包含賦予對靶抗原的結合特異性的人序列和一小部分的非人序列。此類抗體係嵌合抗體，其包含衍生自非人抗體的最小序列並保留非人抗體的反應性，同時在人中的免疫原性較低。典型地，人源化抗體係藉由用與目的抗原（例如，BCMA）結合的非人供體抗體（例如，小鼠、兔或大鼠供體抗體）的高變區序列替換人受體抗體的高變區序列來產生。在一些情況下，受體抗體的框架區序列也可以用供體抗體的相應序列替換（例如，經由回復突變）。除了衍生自供體和受體抗體的序列外，人源化抗體還可以藉由在框架區和/或替換的非人殘基內進行殘基取代來修飾，以改善和優化如本文所討論的抗體特異性、選擇性、親和力和/或活性。
在一些實施方式中，本文揭露之抗體和抗原結合片段係人源化的。在一些實施方式中，所揭露之抗體和抗原結合片段含有衍生自非人抗體例如鼠抗體CA8的最小序列（參見，例如，美國專利號9,273,141，將其關於示例性非人抗體序列藉由引用併入本文）。在一些實施方式中，所揭露之抗體和抗原結合片段保留了非人抗體的親和力，但在一個或多個CDR和/或框架中包含修飾。在一些實施方式中，所揭露之抗體和抗原結合片段還表現出非人抗體未表現出的一種或多種所需特性，包括但不限於較低的免疫原性和降低的毒性。在一些實施方式中，非人抗體係小鼠抗體。在一些實施方式中，非人抗體係小鼠抗BCMA抗體。在一些實施方式中，將非人抗體或其抗原結合片段或抗原結合結構域用作比較或「參考」抗體、抗原結合片段或抗原結合結構域，例如以評估可比較之結合親和力。在其他實施方式中，將非人抗體或其抗原結合片段或抗原結合結構域的變體（例如，人源化變體）用作比較或「參考」抗體、抗原結合片段或抗原結合結構域。
在一些實施方式中，參考抗體或其抗原結合片段或抗原結合結構域係包含重鏈可變區和輕鏈可變區的人源化抗BCMA抗體，該重鏈可變區包含SEQ ID NO: 119的胺基酸序列，該輕鏈可變區包含SEQ ID NO: 120的胺基酸序列（參見，例如，美國專利號9,273,141，將其關於示例性參考抗體序列藉由引用併入本文）。此類參考抗體、抗原結合片段和/或抗原結合結構域在本文中可稱為「AB200」。
如本文所使用，術語抗體的「抗原結合片段」或「抗原結合部分」係指抗體或蛋白質中保留特異性結合抗原（例如，BCMA）的能力的一個或多個片段。抗原結合片段還可保留內化至表現抗原的細胞中的能力。在一些實施方式中，抗原結合片段還保留免疫效應子活性。經顯示，全長抗體的片段可執行全長抗體的抗原結合功能。術語抗體的「抗原結合片段」或「抗原結合部分」內所涵蓋的結合片段的實例包括 (i) Fab片段，即由VL 結構域、VH 結構域、CL 結構域和CH1 結構域組成的單價片段；(ii) F(ab')2 片段，即包含藉由鉸鏈區處的二硫橋鍵連接的兩個Fab片段的二價片段；(iii) 由VH 結構域和CH1 結合域組成的Fd片段；(iv) 由抗體的單臂的VL 結構域和VH 結構域組成的Fv片段；(v) dAb片段，其包含單一可變結構域，例如VH 結構域（參見，例如，Ward等人 (1989) Nature [自然] 341:544-6；以及國際公開案號WO 1990/005144）；以及 (vi) 分離的互補決定區（CDR）。此外，儘管Fv片段的兩個結構域VL 和VH 由單獨基因編碼，但它們可使用重組方法藉由使它們能夠以單一蛋白鏈形式製造的合成連接子來接合，其中VL 區和VH 區配對以形成單價分子（稱為單鏈Fv（scFv））。參見，例如，Bird等人, (1988) Science [科學] 242:423-6；和Huston等人 (1988) Proc Natl Acad Sci. USA [美國科學院院刊] 85:5879-83。此類單鏈抗體還意欲涵蓋在術語抗體的「抗原結合片段」或「抗原結合部分」內，且其在本領域中已知為當結合時可內化至細胞中的示例性結合片段類型（參見，例如，Zhu等人 (2010) 9:2131-41；He等人 (2010) J Nucl Med. [核醫學雜誌] 51:427-32；和Fitting等人, (2015) MAbs 7:390-402）。在某些實施方式中，scFv分子可摻入融合蛋白中。還涵蓋諸如雙功能抗體的單鏈抗體的其他形式。雙抗體係二價雙特異性抗體，其中VH 和VL 結構域係在單一多肽鏈上表現，但使用太短而不允許同一鏈上的兩個結構域之間配對的連接子，由此迫使該等結構域與另一鏈的互補結構域配對且產生兩個抗原結合位點（參見，例如，Holliger等人 (1993) Proc Natl Acad Sci. USA [美國科學院院刊] 90:6444-8；和Poljak等人 (1994) Structure [結構] 2:1121-3）。抗原結合片段使用熟悉該項技術者已知的常規技術獲得，且結合片段以與完整抗體相同的方式進行效用（例如，結合親和力、內化）篩選。抗原結合片段可藉由裂解完整蛋白，例如藉由蛋白酶或化學裂解來製備。
術語「抗體-藥物軛合物」、「抗體軛合物」、「免疫軛合物」和「ADC」可互換使用，且是指連接至一種或多種抗體或抗原結合片段的一種或多種治療性化合物（例如，剪接調節劑）且其由以下通式定義：Ab-(L-D) p （式I），其中Ab = 抗體或抗原結合片段，L = 連接子部分，D = 藥物部分（例如，剪接調節劑），且p = 藥物部分的數量/抗體或抗原結合片段。包含剪接調節劑的ADC還可在本文中更具體地稱為「負載剪接調節劑的抗體」或「SMLA」。在包含剪接調節劑藥物部分的ADC中，「p 」係指連接至抗體或抗原結合片段的剪接調節劑的數量。在一些實施方式中，連接子L可包括位於抗體或抗原結合片段與剪接調節劑之間的可裂解部分。在一些實施方式中，連接子L可包括可裂解部分，該可裂解部分可藉由一個或多個間隔子單元連接至抗體或抗原結合片段和剪接調節劑中的任一者或兩者。在一些實施方式中，當間隔子單元將可裂解部分連接至剪接調節劑時，其為自消融型間隔子單元。在其他實施方式中，連接子L不包括可裂解部分且為不可裂解連接子。在一些實施方式中，連接子L可包括至少一個間隔子單元，該至少一個間隔子單元可直接地連接至抗體或抗原結合片段和剪接調節劑。本文描述了示例性可裂解連接子和不可裂解連接子。
如本文關於抗體或抗原結合片段所使用的術語「內化」係指抗體或抗原結合片段在與細胞結合後能夠穿過細胞的脂質雙層膜進入內部隔室（即，「內化」），通常進入細胞中的降解隔室中。例如，內化性抗BCMA抗體為在結合細胞膜上的BCMA之後能夠吸收至細胞中的抗體。在一些實施方式中，本文揭露之ADC中所使用的抗體或抗原結合片段靶向細胞表面抗原（例如，BCMA）且為內化性抗體或內化性抗原結合片段（即，ADC在抗原結合之後轉移透過細胞膜）。在一些實施方式中，內化性抗體或抗原結合片段結合細胞表面上的受體。靶向細胞膜上的受體的內化性抗體或內化性抗原結合片段可誘導受體介導的胞吞作用。在一些實施方式中，內化性抗體或內化性抗原結合片段經由受體介導的胞吞作用吸收至細胞中。
如本文所使用，術語「B細胞成熟抗原」或「BCMA」係指人BCMA的任何天然形式。BCMA也可稱為「腫瘤壞死因子受體超家族成員17（TNFRSF17）」或「CD269」。術語「BCMA」涵蓋全長BCMA（例如，NCBI GenBank參考序列：BAB60895.1；UniProt參考序列：Q02223；SEQ ID NO: 106），以及可由細胞表現或加工（例如，可變剪接事件、可變啟動子使用、轉錄後修飾、翻譯後修飾等）產生的任何形式的人BCMA。該術語還涵蓋人BCMA的功能變體或片段，包括但不限於保留人BCMA的一種或多種生物功能的剪接變體、等位基因變體和同種型（即，除非上下文指示該術語僅用於指野生型蛋白質，否則涵蓋變體和片段）。BCMA可自人類分離，或可以重組方式或藉由合成方法產生。該術語還可包括抗BCMA抗體（例如，本文揭露之抗體或抗原結合片段）可特異性結合的任何合成變體。
術語「抗BCMA抗體」或「結合BCMA的抗體」係指結合例如特異性結合BCMA的任何形式的抗體或其抗原結合片段。它涵蓋單株抗體（包括全長單株抗體）、多株抗體和生物學功能性抗體片段，只要它們結合例如特異性結合BCMA。更具體地，在一些實施方式中，本文揭露之抗BCMA抗體或抗原結合片段可以結合例如特異性結合BCMA的細胞外結構域中的一個或多個胺基酸。在一些實施方式中，BCMA的細胞外結構域包含SEQ ID NO: 106（表8）的胺基酸1-54。
如本文所使用，術語「特異性」、「特異性結合（specifically binds和binds specifically）」係指抗體或抗原結合片段（例如，抗BCMA抗體）與異質蛋白質和其他生物製品群體中的靶抗原（例如，BCMA）之間的結合反應。可藉由在一組給定條件下將與適當抗原的結合同與替代性抗原或抗原混合物的結合進行比較來測試抗體的結合特異性。如果抗體結合適當抗原且親和力為與替代性抗原或抗原混合物的結合親和力的至少2、5、7、10倍或更多倍，則認為其具有特異性。「特異性抗體」或「靶標特異性抗體」為僅結合靶抗原（例如，BCMA）但不結合其他抗原（或展現與其他抗原的最小結合）的抗體。在某些實施方式中，特異性結合靶抗原（例如，BCMA）的抗體或抗原結合片段對靶標的KD 小於1×10-6 M、小於1×10-7 M、小於1×10-8 M、小於1×10-9 M、小於1×10-10 M、小於1×10-11 M、小於1×10-12 M或小於1×10-13 M。在一些實施方式中，KD 係1 pM至500 pM。在一些實施方式中，KD 在500 pM至1 µM、1 µM至100 nM、或100 mM至10 nM之間。
術語「表位」係指能夠由抗體識別且特異性結合的抗原的部分。當抗原為多肽時，表位可由連續胺基酸或藉由多肽的三級折疊而鄰接的非連續胺基酸形成。抗體所結合的表位可使用本領域中已知的任何表位定位技術來識別，該表位定位技術包括用於表位識別的X射線結晶學（其藉由直接目測抗原-抗體複合物），以及監測抗體與抗原的片段或突變型變體的結合，或監測抗體和抗原的不同部分的溶劑可及性。用於給抗體表位作圖的示例性策略包括但不限於基於陣列的寡肽掃描、限制性蛋白水解、定點誘變、高通量誘變作圖、氫-氘交換和質譜法（參見，例如，Gershoni等人 (2007) 21:145-56；以及Hager-Braun和Tomer (2005) Expert Rev Proteomics [蛋白質組學專家評論] 2:745-56）。
還可使用競爭性結合和表位分箱（epitope binning）來確定共有相同或重疊表位的抗體。競爭性結合可使用交叉阻斷測定法來評估，如「Antibodies, A Laboratory Manual [抗體，實驗室手冊]」, Cold Spring Harbor Laboratory [冷泉港實驗室出版社], Harlow和Lane（1988年第1版, 2014年第2版）中所述之測定法。在一些實施方式中，當在交叉阻斷測定中，測試抗體或結合蛋白使參考抗體或結合蛋白（例如，包含CDR和/或選自表3-5中所鑒定的可變區的結合蛋白）與靶抗原（如BCMA）的結合減少至少約50%（例如，50%、60%、70%、80%、90%、95%、99%、99.5%或更高或其間的任何百分比）時，鑒定出競爭性結合，和/或反之亦然。在一些實施方式中，競爭性結合可歸因於共用或類似（例如，部分重疊）的表位，或由於其中抗體或結合蛋白在鄰近表位處結合的位阻（參見，例如，Tzartos, Methods in Molecular Biology [分子生物學中之方法]（Morris, 編(1998) 第66卷, 第55-66頁））。在一些實施方式中，可使用競爭性結合來分選共有類似表位的結合蛋白的群組。例如，競爭結合的結合蛋白可「分箱」為具有重疊或鄰近表位的結合蛋白組，而不競爭的結合蛋白歸入不具有重疊或鄰近表位的不同結合蛋白組。
術語「p 」或「藥物負載」或「藥物:抗體比率」或「藥物與抗體比率」或「DAR」係指藥物部分的數量/抗體或抗原結合片段，即本文揭露之ADC（例如，具有式 (I) 的ADC）中-L-D部分的數量/抗體或抗原結合片段。在包含剪接調節劑藥物部分的ADC中，「p 」係指連接至抗體或抗原結合片段的剪接調節劑的數量。例如，如果有兩種剪接調節劑（例如，各自具有D1的結構的兩種化合物）連接至抗體或抗原結合片段，則p = 2。在包含ADC（例如，具有式 (I) 的ADC）的多個拷貝的組成物中，「平均p 」係指-L-D部分的平均數量/抗體或抗原結合片段，也稱為「平均藥物負載」。
在本文中使用「連接子」或「連接子部分」用於指能夠將化合物（通常為藥物部分，如剪接調節劑）共價接合至另一部分（如抗體或抗原結合片段）的任何化學部分。連接子可能在使化合物或抗體保持活性的條件下易於發生或實質上抵抗酸誘導的裂解、肽酶誘導的裂解、基於光的裂解、酯酶誘導的裂解和/或二硫鍵裂解。
術語「藥劑」在本文中用於指化合物、化合物的混合物、生物大分子或由生物材料製成的提取物。術語「治療劑」或「藥物」係指能夠調節生物過程和/或具有生物活性的藥劑。本文所述之剪接調節劑化合物係示例性治療劑。
術語「化學治療劑」或「抗癌劑」在本文中用於指不管作用機制如何，均有效治療癌症的所有藥劑。轉移或血管生成的抑制常常為化學治療劑的特性。化學治療劑包括抗體、生物分子和小分子，且涵蓋本文所述之剪接調節劑化合物。化學治療劑可為細胞毒性劑或細胞生長抑制劑。術語「細胞生長抑制劑」係指抑制或遏制細胞生長和/或細胞增殖的藥劑。術語「細胞毒性劑」係指主要藉由干擾細胞的表現活性和/或運作而造成細胞死亡的物質。
如本文所使用，術語「剪接調節劑（splicing modulator）」、「剪接體調節劑」和「剪接調節劑（splice modulator）」係指藉由與剪接體各組分相互作用而具有抗癌活性的化合物。在一些實施方式中，剪接調節劑改變靶細胞中剪接的速率或形式。充當抑制劑的剪接調節劑例如可以減少不受控制的細胞增殖。在一些實施方式中，剪接調節劑可藉由結合SF3b剪接體複合物起作用。此類調節劑可以為天然存在的化合物或合成化合物。剪接調節劑的非限制性實例和此類調節劑的類別包括普拉二烯內酯（例如普拉二烯內酯D或普拉二烯內酯B）、普拉二烯內酯衍生物（例如普拉二烯內酯D或普拉二烯內酯B衍生物）、赫伯西地（herboxidiene）、赫伯西地衍生物、思普力西歐他汀（spliceostatin）、思普力西歐他汀衍生物、蘇地黴素（sudemycin）和蘇地黴素衍生物。如本文所使用，當提及剪接調節劑或類似物時，術語「衍生物」和「類似物」意指保持與原始化合物基本上相同、相似或增強的生物功能或活性但具有改變的化學或生物結構的任何此類化合物。在一些實施方式中，該剪接調節劑係普拉二烯內酯或普拉二烯內酯衍生物。
如本文所使用，「普拉二烯內酯衍生物」係指結構上與稱為普拉二烯內酯的天然產物家族的成員相關且保持該起始化合物的一種或多種生物功能的化合物。普拉二烯內酯最先在細菌普拉特鏈黴菌（Streptomyces platensis ）中鑒定（Mizui等人 (2004) J Antibiot.[抗生素雜誌] 57:188-96）為具有強效的細胞毒性且導致細胞週期停滯於細胞週期的G1和G2/M期（例如Bonnal等人 (2012) Nat Rev Drug Dis [自然評論：藥物發現] 11:847-59）。有七種天然存在的普拉二烯內酯，即普拉二烯內酯A-G（Mizui等人 (2004) J Antibiot.[抗生素雜誌] 57:188-96；Sakai等人 (2004) J Antibiotics. [抗生素雜誌] 57:180-7）。美國專利號7,884,128和7,816,401描述了合成普拉二烯內酯B和D的示例性方法，並且將該等文獻各自關於該等方法藉由引用併入本文。普拉二烯內酯B和D的合成還可使用Kanada等人（(2007) Angew Chem Int Ed.[應用化學國際版] 46:4350-5）中所述之示例性方法進行。Kanada等人和國際公開案號WO 2003/099813描述了自普拉二烯內酯D（WO 2003/099813的11107D）合成E7107（D11）（WO 2003/099813的化合物45）的示例性方法。對應的美國專利號為Kotake等人的7,550,503。將該等參考文獻的每一個關於所述合成方法併入本文。
如本文所使用，「剪接調節劑藥物部分」係指ADC或組成物中提供剪接調節劑化合物的結構的組分，例如具有式 (I) 的ADC中的剪接調節劑（D）組分。
如本文所使用，「剪接體」係指自諸如pre-mRNA區段的一個或多個RNA區段移除內含子的核糖核蛋白複合物。
術語「同源物」係指藉由例如在對應位置處具有相同或類似的化學殘基的序列而展現與另一分子的同源性的分子。
如本文所使用，術語「抑制（inhibit或inhibition of）」意指減少可測量的量，且可包括但不需要完全預防或抑制。
術語「靶標陰性」、「靶抗原陰性」和「抗原陰性」係指細胞或組織不存在靶抗原表現（或缺少可檢測水平）。術語「靶標陽性」、「靶抗原陽性」和「抗原陽性」係指存在靶抗原表現（或可檢測水平）。例如，不表現靶抗原的細胞或細胞系可描述為靶標陰性的，而表現靶抗原的細胞或細胞系可描述為靶標陽性的。
術語「旁觀者殺傷」或「旁觀者效應」係指在靶標陽性細胞存在的情況下對靶標陰性細胞的殺傷，其中在靶標陽性細胞不存在的情況下未觀測到靶標陰性細胞的殺傷。細胞間接觸或至少靶標陽性細胞與靶標陰性細胞之間的鄰近使得能夠進行旁觀者殺傷。此類殺傷可與「脫靶殺傷」相區分，該「脫靶殺傷」係指對靶標陰性細胞的無差別殺傷。在靶標陽性細胞不存在的情況下可觀測到「脫靶殺傷」。
如本文所使用，術語「癌症」、「贅生物」和「腫瘤」可互換使用，並且以單數或複數形式表示，係指已經歷惡性轉化的細胞，該惡性轉化使它們對宿主生物體係致病的。藉由成熟的技術，如組織學檢查，可以容易地將原代癌細胞與非癌細胞區分開來。如本文所使用，癌細胞的定義不僅包括原代癌細胞，還包括源自癌細胞祖先的任何細胞。這包括轉移的癌細胞，以及源自癌細胞的體外培養物和細胞系。癌症可以表現為實性瘤，例如藉由諸如電腦斷層攝影（CT）掃描、磁共振成像（MRI）、X射線、超音波或體格檢查觸診等程序基於腫瘤塊可檢測到的腫瘤，和/或由於可從患者獲得的樣本中一種或多種癌症特異性抗原的表現而可檢測到的腫瘤。腫瘤還可以是造血（或血液學或血液相關）癌症，例如源自血細胞或免疫細胞的癌症，其可被稱為「液體腫瘤」。基於血液腫瘤的臨床病症的具體實例包括白血病，如慢性髓細胞性白血病、急性髓細胞性白血病、慢性淋巴細胞性白血病和急性淋巴細胞性白血病；漿細胞惡性腫瘤，如多發性骨髓瘤、意義未明（或未知或不清楚）的單株丙種球蛋白病（MGUS）和瓦爾登斯特倫巨球蛋白血症；淋巴瘤，如非何杰金氏淋巴瘤和何杰金氏淋巴瘤；等。
在一些實施方式中，本文所述之癌症可以是任何血液癌症。血液癌症包括淋巴和骨髓惡性腫瘤、以及漿細胞疾病或癌症，如多發性骨髓瘤、MGUS、漿細胞瘤（骨、髓外）、淋巴漿細胞性淋巴瘤（LPL）、瓦爾登斯特倫巨球蛋白血症、漿細胞白血病和原發性澱粉樣變性（AL）。血液癌症還可以包括其他類型的造血細胞（包括多形核白血球（或嗜中性粒細胞）、嗜鹼性粒細胞、嗜酸性粒細胞、樹突細胞、血小板、紅血球和自然殺傷細胞）癌症。包括造血細胞的組織可稱為「造血細胞組織」，並且包括骨髓；外周血；胸腺；和周圍淋巴組織，如脾臟、淋巴結、與黏膜相關的淋巴組織（如腸道相關淋巴組織）、扁桃體、派爾集合淋巴結和闌尾、以及與其他黏膜相關的淋巴組織（例如，支氣管內皮）。
本文所述之BCMA癌症的具體實例包括漿細胞癌。在一些實施方式中，癌症係漿細胞惡性腫瘤。在一些實施方式中，漿細胞惡性腫瘤或癌症係白血病、淋巴瘤、漿細胞瘤或骨髓瘤。在一些實施方式中，漿細胞惡性腫瘤或癌症係多發性骨髓瘤、彌漫性大B細胞淋巴瘤、外膜細胞淋巴瘤、漿母細胞性淋巴瘤、漿母細胞性骨髓瘤或柏基特氏淋巴瘤。在一些實施方式中，漿細胞惡性腫瘤或癌症係多發性骨髓瘤。在一些實施方式中，漿細胞惡性腫瘤或癌症係復發性/難治性多發性骨髓瘤。在一些實施方式中，漿細胞惡性腫瘤或癌症包括活躍分裂的細胞、休眠細胞或兩者。在一些實施方式中，漿細胞惡性腫瘤或癌症包含至少一些休眠細胞，例如，不分裂或緩慢分裂的骨髓瘤細胞。
當用於描述細胞時，術語「休眠」係指不分裂或以低於正常速度的速率（例如，在低血清條件下觀察到的速率）分裂的細胞。參見，例如，Khoo等人 (2019) Blood.[血液]134(1):30-43。該術語涵蓋不分裂（靜止）和緩慢分裂的細胞。術語「靜止」係指處於可逆狀態的細胞，其中細胞不分裂但保留重新進入細胞分裂過程的能力。靜止細胞可以藉由RNA含量低、缺乏細胞增殖標記和/或細胞更新水平低來識別。在一些實施方式中，靜止細胞係靜止癌細胞。與「休眠」細胞相反，「活躍分裂」細胞係處於分裂過程中或正積極準備以正常速率（例如，在正常血清條件下觀察到的速率）分裂的細胞。
術語「受試者」與「患者」在本文中可互換用於指任何動物，諸如任何哺乳動物，包括但不限於人、非人靈長類動物、齧齒動物等。在一些實施方式中，受試者或患者係哺乳動物。在一些實施方式中，受試者或患者係人。
術語「共投與」或「組合」投與一種或多種治療劑包括同時投與以及按任何次序連續投與。
「藥物組成物」係指呈准許投與活性成分且隨後提供一種或多種活性成分的預期生物活性和/或達成治療效果的形式，且不含對應投與配製物的受試者具有不可接受毒性的額外組分的製劑。藥物組成物可為無菌的。
「藥物賦形劑」包含諸如輔助劑、載體、pH調節劑和緩衝劑、張力調節劑、潤濕劑、防腐劑等的物質。
術語「藥學上可接受的」意指經聯邦管制機構或洲政府審批藉由或可由其審批藉由，或在美國藥典或其他普遍公認藥典中列出以用於動物且更具體地用於人類。
「藥學上可接受的鹽」為保持母體化合物的所需生物活性且不賦予非所需毒理學作用的鹽。這類鹽的實例為：(a) 與無機酸（例如鹽酸、氫溴酸、硫酸、磷酸、硝酸等）形成的酸加成鹽；以及與有機酸（例如，乙酸、草酸、酒石酸、琥珀酸、馬來酸、富馬酸、葡萄糖酸、檸檬酸、蘋果酸、抗壞血酸、苯甲酸、鞣酸、棕櫚酸、海藻酸、聚麩胺酸、萘磺酸、甲磺酸、對甲苯磺酸、萘二磺酸、聚半乳糖醛酸等）形成的鹽；和 (b) 由元素陰離子（如氯、溴和碘）形成的鹽。參見，例如，Haynes等人, 「Commentary: Occurrence of Pharmaceutically Acceptable Anions and Cations in the Cambridge Structural Database [評論：劍橋結構數據庫中藥學上可接受的陰離子和陽離子的存在], 」 J. Pharmaceutical Sciences [藥物科學雜誌], 第94卷, 第10期 (2005)，和Berge等人, 「Pharmaceutical Salts [藥用鹽] 」, J. Pharmaceutical Sciences [藥物科學雜誌], 第66卷, 第1期 (1977)，將其藉由引用併入本文。
例如，本文揭露之抗體、抗原結合片段、和/或ADC的「有效量」係足以執行具體陳述的目的（例如，在投與後產生治療效果，如減小腫瘤生長速率或腫瘤體積、減少癌症症狀、或治療功效的某些其他指標）的量。術語「治療有效量」係指抗體、抗原結合片段、和/或ADC的有效治療受試者的疾病或障礙的量。在癌症的情況下，治療有效量的抗體、抗原結合片段、和/或ADC可以減少癌細胞的數量、減小腫瘤大小、抑制（例如，減緩或停止）腫瘤轉移、抑制（例如，減緩或停止）腫瘤生長、和/或緩解一種或多種症狀。「預防有效量」係指在必需劑量和時間段下有效達到所需預防結果的量。典型地，由於預防劑量在疾病之前或在疾病早期階段時用於受試者中，所以預防有效量將小於治療有效量。
如本文所使用，術語「治療（treat或treatment）」或「治療性」係指疾病的任何後果的任何改善，如延長的存活期、較低發病率和/或由替代性治療模式引起的副作用減輕。如本領域容易理解的，治療操作涵蓋但不需要疾病的完全根除。如本文所使用，術語「治療（treat或treatment）」還可指將所述抗體、抗原結合片段、和/或ADC投與於受試者，例如患有或疑似患有癌症的患者。治療可用於治癒、癒合、減輕、緩解、更改、補救、改善、緩和、改進或影響疾病（例如，癌症）、疾病的症狀或患疾病的傾向性。在一些實施方式中，除了治療患有病症的受試者之外，還可預防性提供本文揭露之組成物以預防或降低罹患該病症的可能性。
在一些實施方式中，使用標記的抗體、抗原結合片段、和/或ADC。合適的「標記」包括放射性核素、酶、受質、輔因子、抑制因子、螢光部分、化學發光部分、磁性粒子等。
如本文所使用，術語「蛋白質」係指至少兩個共價連接的胺基酸。該術語涵蓋多肽、寡肽和肽。在一些實施方式中，兩個或更多個共價連接的胺基酸藉由肽鍵連接。蛋白質可由天然存在的胺基酸和肽鍵構成，例如當蛋白質使用表現系統和宿主細胞以重組方式製成時如此。可替代地，蛋白質可包括合成胺基酸（例如，高苯丙胺酸、瓜胺酸、鳥胺酸和正白胺酸）。「重組蛋白」係使用重組技術、使用本領域中已知的任何技術和方法，即藉由表現重組核酸而製成的蛋白質。用於產生重組蛋白之方法和技術係本領域眾所周知的。
如本文所使用，術語「胺基酸」和「殘基」係指天然存在的和合成的胺基酸，連同以與天然存在的胺基酸類似的方式起作用的胺基酸類似物和胺基酸模擬物。天然存在的胺基酸係由遺傳密碼子編碼的胺基酸，連同隨後在體內修飾的那些胺基酸，例如，羥基脯胺酸、γ-羧基麩胺酸和鄰磷酸絲胺酸。胺基酸類似物係指如下化合物，其與天然發生的胺基酸具有相同的基本化學結構，即，與氫結合的α碳、羧基基團、胺基基團和R基團，例如硒代半胱胺酸、高絲胺酸、正白胺酸和甲硫胺酸亞碸。這種類似物可具有經修飾的R基團（例如，硒代半胱胺酸、正白胺酸）或經修飾的肽骨架，但是依然保留與天然胺基酸一樣的基本化學結構。胺基酸模擬物係指其結構與胺基酸的一般化學結構不同的化合物，但是其以與天然存在的胺基酸類似的方式起作用。表1中提供了示例性胺基酸的三字母和單字母代碼。[ 表 1]. 示例性胺基酸的三字母和單字母代碼
胺基酸 三字母代碼 單字母代碼
丙胺酸 Ala A
精胺酸 Arg R
天冬醯胺 Asn N
天冬胺酸 Asp D
半胱胺酸 Cys C
麩胺酸 Glu E
麩醯胺酸 Gln Q
甘胺酸 Gly G
組胺酸 His H
異白胺酸 Ile I
白胺酸 Leu L
離胺酸 Lys K
甲硫胺酸 Met M
苯丙胺酸 Phe F
脯胺酸 Pro P
絲胺酸 Ser S
蘇胺酸 Thr T
色胺酸 Trp W
酪胺酸 Tyr Y
纈胺酸 Val V
對於胺基酸序列，術語「同一性」或「同源性」係指藉由比較兩個或更多個多肽的序列而確定的其之間的關係。術語「同一性」還意指多肽之間的序列相關性程度，如由兩個或更多個胺基酸殘基的串之間的匹配數所確定的。兩個序列之間的同一性百分比係序列共用的相同位置數量的函數（即，同一性百分比等於相同位置數量/位置總數 x 100），將缺口數量和每個缺口的長度考慮在內，需要引入缺口以便最佳比對這兩個序列。序列比較以及兩個序列之間的百分比同一性的確定可以使用數學演算法完成。對於序列比較，典型地一個序列充當參考序列，將測試序列與該參考序列進行比較。當使用序列比較演算法時，將測試序列和參考序列輸入到電腦中，必要時指定子序列座標，並且指定序列演算法程式參數。可以使用預設程式參數，或者可以指定替代參數。然後，序列比較演算法將基於程式參數計算測試序列相對於參考序列的序列同一性百分比。另外地或者可替代地，本揭露的蛋白質序列可以進一步用作「查詢序列」以對公共數據庫進行檢索，例如鑒定相關序列。例如，可以使用Altschul等人（(1990) J Mol Biol.[分子生物學雜誌] 215(3):403-10）的BLAST程式進行這種檢索。
通常，本文揭露之蛋白質與其變體（包括靶抗原（如BCMA）的變體和抗體可變結構域的變體（包括單個變體CDR））之間的胺基酸同一性或同源性為與本文所述序列具有至少80%的同一性或同源性，例如，至少85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%、幾乎100%、或100%的同一性或同源性。
以類似方式，關於編碼本文所鑒定的抗體和其他蛋白質的核酸序列的「核酸序列同一性百分比」被定義為與抗原結合蛋白的編碼序列中的核苷酸殘基相同的候選序列中的核苷酸殘基百分比。具體之方法利用設定成預設參數的WU-BLAST-2的BLASTN模組，其中重疊間隔和重疊分數分別設定成1和0.125。 抗BCMA抗體和抗原結合片段
在各種實施方式中，本揭露關於能夠結合和/或殺傷癌細胞（例如，表現BCMA的癌細胞）的抗體及其抗原結合片段，以及它們在軛合物（例如，ADC）和治療性組成物中之用途。
在一些實施方式中，本文揭露之抗體和抗原結合片段可以單獨使用、作為藥物組成物或組合療法的一部分投與、和/或作為ADC中的抗體部分投與。在一些實施方式中，抗體和抗原結合片段能夠結合BCMA。在一些實施方式中，本文揭露之抗BCMA抗體和抗原結合片段可單獨使用（即，以未軛合形式）並用作ADC中的抗體部分。
在一些實施方式中，本文揭露之抗BCMA抗體和抗原結合片段係人源化的。在一些實施方式中，抗BCMA抗體和抗原結合片段含有源自非人（例如小鼠）抗體的最小序列並保留非人抗體的反應性，同時在人中具有較低的免疫原性。在一些實施方式中，與本領域已知的一種或多種抗BCMA抗體相比，該等抗BCMA抗體和抗原結合片段提供對結合親和力、穩定性、可配製性和/或治療功效的一項或多項改進，和/或提供降低的聚集和/或脫靶毒性。
在一些實施方式中，與參考抗BCMA抗體或抗原結合片段（例如，包含AB200的參考）相比，本文揭露之抗BCMA抗體和抗原結合片段提供改善的結合親和力，無論是單獨使用還是作為較大分子（如ADC）的一部分使用。在一些實施方式中，與參考抗BCMA抗體或抗原結合片段相比，所揭露之抗體和抗原結合片段對BCMA（例如，人BCMA）具有更高的親和力。在一些實施方式中，與參考抗BCMA抗體或抗原結合片段相比，所揭露之抗體和抗原結合片段對人BCMA、猴BCMA或兩者具有更高的親和力。在一些實施方式中，抗體或抗原結合片段對BCMA（例如，人BCMA和/或猴BCMA）的結合親和力可以藉由例如使用人BCMA和/或猴BCMA的細胞外結構域的Octet結合測定來確定。在一些實施方式中，抗體或抗原結合片段對BCMA（例如，人BCMA）的結合親和力可以藉由例如使用具有高或中等BCMA表現水平的癌細胞的一種或多種結合測定來確定。
在一些實施方式中，與參考抗BCMA抗體或抗原結合片段（例如，包含AB200的參考）相比，本文揭露之抗BCMA抗體和抗原結合片段提供改善的穩定性，無論是單獨使用還是作為較大分子（如ADC）的一部分使用。在一些實施方式中，與參考抗BCMA抗體或抗原結合片段相比，所揭露之抗體和抗原結合片段表現出增加的熱穩定性。在一些實施方式中，與參考抗BCMA抗體或抗原結合片段相比，所揭露之抗體和抗原結合片段具有更高的解鏈溫度（Tm ）。在一些實施方式中，抗體或抗原結合片段的穩定性（例如，熱穩定性）可以藉由例如基於溫度的穩定性測定，例如差示掃描量熱法（DSC）或ThermoFluor測定來確定。
憑藉該等改進特性中的一些或全部，所揭露之抗體和抗原結合片段（單獨或作為ADC的一部分）可用作治療劑，例如用於治療、預防和/或診斷癌症（例如，表現BCMA的癌症）。
在一些實施方式中，本文揭露之抗體和抗原結合片段結合（例如，特異性結合）BCMA（例如，如在癌細胞上表現的）。抗體或抗原結合片段可結合BCMA，其中解離常數（KD ）≤1 mM、≤100 nM或≤10 nM或其間任何量，如藉由例如流動式細胞測量術分析所測量的。在一些實施方式中，KD 在0.5 nM至10 nM之間，如藉由例如流動式細胞測量術分析所測量的。
在一些實施方式中，抗體或抗原結合片段係包含兩個重鏈和兩個輕鏈的四鏈抗體（還稱為免疫球蛋白）。在一些實施方式中，抗體或抗原結合片段係雙鏈半抗體（一個輕鏈和一個重鏈）或免疫球蛋白的抗原結合片段。在一些實施方式中，抗體或抗原結合片段係保留結合靶標癌抗原（例如，BCMA）的能力和/或提供免疫球蛋白的功能的免疫球蛋白的抗原結合片段。
在一些實施方式中，本文揭露之抗體或抗原結合片段係內化性抗體或其內化性抗原結合片段。在一些實施方式中，內化性抗體或其內化性抗原結合片段結合細胞表面上表現的靶標癌抗原且在結合後進入細胞。在一些實施方式中，抗體或抗原結合片段以ADC形式連接至剪接調節劑藥物部分，並且在ADC進入且存在於表現靶標癌抗原的細胞中之後（即，在ADC已經內化之後），例如藉由裂解、藉由抗體或抗原結合片段降解或藉由任何其他合適的釋放機制，ADC的剪接調節劑藥物部分自ADC中的抗體或抗原結合片段釋放。
在一些實施方式中，本文揭露之抗體或抗原結合片段可包含取自表5中所列的重鏈和輕鏈可變區的配對組，或來自重鏈和輕鏈配對組的六個CDR序列的組，例如，表3或表4中列出的一組CDR。在一些實施方式中，抗體或抗原結合片段進一步包含人重鏈和輕鏈框架（視需要具有一個或多個回復突變以提高結合親和力）和/或人重鏈和輕鏈恒定區或其片段。例如，抗體或抗原結合片段可包含人IgG重鏈恒定區（如IgG1或IgG4）和人κ或λ輕鏈恒定區。在一些實施方式中，抗體或抗原結合片段包含人免疫球蛋白G亞型1（IgG1）重鏈恒定區和人Ig κ輕鏈恒定區。在一些實施方式中，抗體或抗原結合片段包含人IgG1重鏈恒定區和人Ig λ輕鏈恒定區。在一些實施方式中，抗體或抗原結合片段包含人免疫球蛋白G亞型4（IgG4）重鏈恒定區和人Ig κ輕鏈恒定區。在一些實施方式中，抗體或抗原結合片段包含人IgG4重鏈恒定區和人Ig λ輕鏈恒定區。
表3-7列出了本揭露的示例性抗體的胺基酸序列。表8和表9分別列出了示例性靶抗原和示例性參考抗體的胺基酸序列。[ 表 2]. 抗 BCMA 抗體
mAb 類型 靶標
AB212 人源化 BCMA
AB213 人源化 BCMA
AB214 人源化 BCMA
AB215 人源化 BCMA
AB216 人源化 BCMA
AB217 人源化 BCMA
AB218 人源化 BCMA
[ 表 3]. 抗 BCMA 抗體的 Kabat CDR 的胺基酸序列
mAb Ig 鏈 CDR SEQ ID NO 胺基酸序列
AB212 HCDR1 1 NYWIH
HCDR2 2 GTYRSHSDTNYNQKFKS
HCDR3 3 GAIYHGYDVIEN
LCDR1 4 RASQSISSYLN
LCDR2 5 ATSNLQI
LCDR3 6 QQFRRLPWT
AB213 HCDR1 1 NYWIH
HCDR2 7 GTYRSHSTTYYNQKFKS
HCDR3 8 GAVYHGYDVIDN
LCDR1 9 RASQSISSYLN
LCDR2 10 ATSNLQI
LCDR3 11 QQFRRLPWT
AB214 HCDR1 1 NYWIH
HCDR2 12 ATYRSQSDTYYNQKYKS
HCDR3 13 GAVYHGYDVIDN
LCDR1 14 RASQSISSYLN
LCDR2 15 ATSNLQI
LCDR3 16 QQYRRIPWT
AB215 HCDR1 1 NYWIH
HCDR2 17 GTYRSHSTTYYNQKFKS
HCDR3 18 GAVYHGYDVIDN
LCDR1 19 RASQSISSYLN
LCDR2 20 ATSNLQI
LCDR3 21 QQYRRIPWT
AB216 HCDR1 1 NYWIH
HCDR2 22 ATYRIQSDTYYNQKYKS
HCDR3 23 GAVYHGYDVIDN
LCDR1 24 RASQSISSYIN
LCDR2 25 ATSNLQI
LCDR3 26 QQYRRLPWS
AB217 HCDR1 1 NYWIH
HCDR2 27 ATYRSHSDTYYAQKYKS
HCDR3 28 GAVYHGYDVIDN
LCDR1 29 RASQSISSYIN
LCDR2 30 ATSNLQS
LCDR3 31 QQYRRIPWT
AB218 HCDR1 1 NYWIH
HCDR2 32 ATYRSQSTTYYNQKFKS
HCDR3 33 GAVYHGYDVIDN
LCDR1 34 RASQSISSYLN
LCDR2 35 ATSNLQI
LCDR3 36 QQFRRLPWT
[ 表 4]. 抗 BCMA 抗體的 IMGT CDR 的胺基酸序列
mAb Ig 鏈 CDR SEQ ID NO 胺基酸序列
AB212 HCDR1 37 GGTFSNYW
HCDR2 38 TYRSHSDT
HCDR3 39 ARGAIYHGYDVIEN
LCDR1 40 QSISSY
LCDR2 41 ATS
LCDR3 42 QQFRRLPWT
AB213 HCDR1 43 GGTFTNYW
HCDR2 44 TYRSHSTT
HCDR3 45 ARGAVYHGYDVIDN
LCDR1 40 QSISSY
LCDR2 41 ATS
LCDR3 46 QQFRRLPWT
AB214 HCDR1 47 GGTFSNYW
HCDR2 48 TYRSQSDT
HCDR3 49 ARGAVYHGYDVIDN
LCDR1 40 QSISSY
LCDR2 41 ATS
LCDR3 50 QQYRRIPWT
AB215 HCDR1 51 GGTFTNYW
HCDR2 52 TYRSHSTT
HCDR3 53 ARGAVYHGYDVIDN
LCDR1 40 QSISSY
LCDR2 41 ATS
LCDR3 54 QQYRRIPWT
AB216 HCDR1 55 GGTFSNYW
HCDR2 56 TYRIQSDT
HCDR3 57 ARGAVYHGYDVIDN
LCDR1 40 QSISSY
LCDR2 41 ATS
LCDR3 58 QQYRRLPWS
AB217 HCDR1 59 GGTFTNYW
HCDR2 60 TYRSHSDT
HCDR3 61 ARGAVYHGYDVIDN
LCDR1 40 QSISSY
LCDR2 41 ATS
LCDR3 62 QQYRRIPWT
AB218 HCDR1 63 GGTFSNYW
HCDR2 64 TYRSQSTT
HCDR3 65 ARGAVYHGYDVIDN
LCDR1 40 QSISSY
LCDR2 41 ATS
LCDR3 66 QQFRRLPWT
[ 表 5]. 抗 BCMA 抗體的可變區的胺基酸序列
mAb Ig 鏈 SEQ ID NO 胺基酸序列
AB212 重鏈 76 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSNYWIHWVRQAPGQGLEWMGGTYRSHSDTNYNQKFKSRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGAIYHGYDVIENWGQGTLVTVSS
輕鏈 77 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYATSNLQIGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQFRRLPWTFGQGTKLEIK
AB213 重鏈 78 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFTNYWIHWVRQAPGQGLEWMGGTYRSHSTTYYNQKFKSRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGAVYHGYDVIDNWGQGTLVTVSS
輕鏈 79 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYATSNLQIGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQFRRLPWTFGQGTKLEIK
AB214 重鏈 80 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSNYWIHWVRQAPGQGLEWMGATYRSQSDTYYNQKYKSRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGAVYHGYDVIDNWGQGTLVTVSS
輕鏈 81 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYATSNLQIGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYRRIPWTFGQGTKLEIK
AB215 重鏈 82 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFTNYWIHWVRQAPGQGLEWMGGTYRSHSTTYYNQKFKSRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGAVYHGYDVIDNWGQGTLVTVSS
輕鏈 83 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYATSNLQIGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYRRIPWTFGQGTKLEIK
AB216 重鏈 84 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSNYWIHWVRQAPGQGLEWMGATYRIQSDTYYNQKYKSRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGAVYHGYDVIDNWGQGTLVTVSS
輕鏈 85 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYINWYQQKPGKAPKLLIYATSNLQIGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYRRLPWSFGQGTKLEIK
AB217 重鏈 86 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFTNYWIHWVRQAPGQGLEWMGATYRSHSDTYYAQKYKSRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGAVYHGYDVIDNWGQGTLVTVSS
輕鏈 87 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYINWYQQKPGKAPKLLIYATSNLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYRRIPWTFGQGTKLEIK
AB218 重鏈 88 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSNYWIHWVRQAPGQGLEWMGATYRSQSTTYYNQKFKSRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGAVYHGYDVIDNWGQGTLVTVSS
輕鏈 89 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYATSNLQIGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQFRRLPWTFGQGTKLEIK
[ 表 6]. 抗 BCMA 抗體的恒定區的胺基酸序列
mAb Ig 鏈 類別 SEQ ID NO 胺基酸序列
AB212 重鏈 IgG1 90 ASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG
輕鏈 κ 91 RTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
AB213 重鏈 IgG1 90 ASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG
輕鏈 κ 91 RTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
AB214 重鏈 IgG1 90 ASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG
輕鏈 κ 91 RTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
AB215 重鏈 IgG1 90 ASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG
輕鏈 κ 91 RTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
AB216 重鏈 IgG1 90 ASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG
輕鏈 κ 91 RTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
AB217 重鏈 IgG1 90 ASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG
輕鏈 κ 91 RTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
AB218 重鏈 IgG1 90 ASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG
輕鏈 κ 91 RTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
[ 表 7]. 抗 BCMA 抗體的全長 Ig 鏈的胺基酸序列
mAb Ig 鏈 SEQ ID NO 胺基酸序列
AB212 重鏈 92 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSNYWIHWVRQAPGQGLEWMGGTYRSHSDTNYNQKFKSRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGAIYHGYDVIENWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG
輕鏈 93 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYATSNLQIGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQFRRLPWTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
AB213 重鏈 94 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFTNYWIHWVRQAPGQGLEWMGGTYRSHSTTYYNQKFKSRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGAVYHGYDVIDNWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG
輕鏈 95 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYATSNLQIGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQFRRLPWTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
AB214 重鏈 96 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSNYWIHWVRQAPGQGLEWMGATYRSQSDTYYNQKYKSRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGAVYHGYDVIDNWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG
輕鏈 97 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYATSNLQIGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYRRIPWTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
AB215 重鏈 98 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFTNYWIHWVRQAPGQGLEWMGGTYRSHSTTYYNQKFKSRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGAVYHGYDVIDNWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG
輕鏈 99 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYATSNLQIGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYRRIPWTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
AB216 重鏈 100 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSNYWIHWVRQAPGQGLEWMGATYRIQSDTYYNQKYKSRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGAVYHGYDVIDNWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG
輕鏈 101 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYINWYQQKPGKAPKLLIYATSNLQIGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYRRLPWSFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
AB217 重鏈 102 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFTNYWIHWVRQAPGQGLEWMGATYRSHSDTYYAQKYKSRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGAVYHGYDVIDNWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG
輕鏈 103 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYINWYQQKPGKAPKLLIYATSNLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYRRIPWTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
AB218 重鏈 104 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSNYWIHWVRQAPGQGLEWMGATYRSQSTTYYNQKFKSRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGAVYHGYDVIDNWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG
輕鏈 105 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYATSNLQIGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQFRRLPWTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
[ 表 8]. 示例性靶抗原的胺基酸序列
抗原 SEQ ID NO 胺基酸序列
BCMA 106 MLQMAGQCSQNEYFDSLLHACIPCQLRCSSNTPPLTCQRYCNASVTNSVKGTNA ILWTCLGLSLIISLAVFVLMFLLRKISSEPLKDEFKNTGSGLLGMANIDLEKSRTGDEIILPRGLEYTVEECTCEDCIKSKPKVDSDHCFPLPAMEEGATILVTTKTNDYCKSLPAALSATEIEKSISAR
* 底線表示細胞外結構域。[ 表 9]. 示例性參考抗體的胺基酸序列
mAb （ AB200 ） SEQ ID NO 胺基酸序列
HCDR1（Kabat） 107 NYWMH
HCDR2（Kabat） 108 ATYRGHSDTYYNQKFKG
HCDR3（Kabat） 109 GAIYDGYDVLDN
LCDR1（Kabat） 110 SASQDISNYLN
LCDR2（Kabat） 111 YTSNLHS
LCDR3（Kabat） 112 QQYRKLPWT
HCDR1（IMGT） 113 GGTFSNYW
HCDR2（IMGT） 114 TYRGHSDT
HCDR3（IMGT） 115 ARGAIYDGYDVLDN
LCDR1（IMGT） 116 QDISNY
LCDR2（IMGT） 117 YTS
LCDR3（IMGT） 118 QQYRKLPWT
重鏈可變區 119 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSNYWMHWVRQAPGQGLEWMGATYRGHSDTYYNQKFKGRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGAIYDGYDVLDNWGQGTLVTVSS
輕鏈可變區 120 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCSASQDISNYLNWYQQKPGKAPKLLIYYTSNLHSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYRKLPWTFGQGTKLEIK
重鏈恒定區 121 ASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG
輕鏈恒定區 122 RTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
重鏈 123 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSNYWMHWVRQAPGQGLEWMGATYRGHSDTYYNQKFKGRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGAIYDGYDVLDNWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG
輕鏈 124 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCSASQDISNYLNWYQQKPGKAPKLLIYYTSNLHSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYRKLPWTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
在一些實施方式中，本文揭露之ADC的抗體、抗原結合片段或抗體部分可包含上表中所列的重鏈和輕鏈可變區的任何組，或例如藉由將六個CDR移植至所選人供體抗體框架中得到的來自重鏈和輕鏈組的六個CDR序列的組。在一些實施方式中，本文揭露之ADC的抗體、抗原結合片段或抗體部分可包含與上表中所列的序列同源的胺基酸序列，只要該抗體、抗原結合片段或抗體部分保留結合其靶標癌抗原（例如，KD 小於1x10-8 M）的能力和/或保留本文揭露之抗體、抗原結合片段或抗體部分的一種或多種功能特性（例如，內化、調節RNA剪接等的能力）即可。
在一些實施方式中，抗BCMA抗體或其抗原結合片段包含三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 1（HCDR1）、SEQ ID NO: 2（HCDR2）和SEQ ID NO: 3（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 4（LCDR1）、SEQ ID NO: 5（LCDR2）和SEQ ID NO: 6（LCDR3），如由Kabat編號系統所定義的；或者三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 37（HCDR1）、SEQ ID NO: 38（HCDR2）和SEQ ID NO: 39（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 40（LCDR1）、SEQ ID NO: 41（LCDR2）和SEQ ID NO: 42（LCDR3），如由IMGT編號系統所定義的。
在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段包含如下三個HCDR和三個LCDR：由SEQ ID NO: 1組成的HCDR1，由SEQ ID NO: 2組成的HCDR2，由SEQ ID NO: 3組成的HCDR3；以及由SEQ ID NO: 4組成的LCDR1，由SEQ ID NO: 5組成的LCDR2，和由SEQ ID NO: 6組成的LCDR3，如由Kabat編號系統所定義的；或者由SEQ ID NO: 37組成的HCDR1，由SEQ ID NO: 38組成的HCDR2，由SEQ ID NO: 39組成的HCDR3；以及由SEQ ID NO: 40組成的LCDR1，由SEQ ID NO: 41組成的LCDR2，和由SEQ ID NO: 42組成的LCDR3，如由IMGT編號系統所定義的。
在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段包含含有SEQ ID NO: 76的胺基酸序列的重鏈可變區以及包含SEQ ID NO: 77的胺基酸序列的輕鏈可變區。在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段包含重鏈可變區胺基酸序列SEQ ID NO: 76和輕鏈可變區胺基酸序列SEQ ID NO: 77，或與所揭露之序列具有至少90%同一性的序列。在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段包含與SEQ ID NO: 76的胺基酸序列具有至少90%同一性的重鏈可變區以及與SEQ ID NO: 77的胺基酸序列具有至少90%同一性的輕鏈可變區。在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段包含與SEQ ID NO: 76具有至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%同一性的重鏈可變區胺基酸序列；和/或與SEQ ID NO: 77具有至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%同一性的輕鏈可變區胺基酸序列。
在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段包含人重鏈和輕鏈可變區框架，或具有一個或多個回復突變的人重鏈和輕鏈可變區框架。在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段係內化性抗體或內化性抗原結合片段。
在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段包含人IgG1重鏈恒定區和/或人Ig κ輕鏈恒定區。在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段包含人IgG1重鏈恒定區和/或人Ig λ輕鏈恒定區。在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段包含人IgG4重鏈恒定區和/或人Ig κ輕鏈恒定區。在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段包含人IgG4重鏈恒定區和/或人Ig λ輕鏈恒定區。在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段包含含有SEQ ID NO: 90的胺基酸序列的重鏈恒定區和包含SEQ ID NO: 91的胺基酸序列的輕鏈恒定區。在一些實施方式中，重鏈恒定區進一步包含C-末端離胺酸（K）。
在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段包含含有SEQ ID NO: 92的胺基酸序列的重鏈以及含有SEQ ID NO: 93的胺基酸序列的輕鏈。在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段包含與SEQ ID NO: 92的胺基酸序列具有至少90%同一性的重鏈以及與SEQ ID NO: 93的胺基酸序列具有至少90%同一性的輕鏈。在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段包含與SEQ ID NO: 92具有至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%同一性的重鏈胺基酸序列；和/或與SEQ ID NO: 93具有至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%同一性的輕鏈胺基酸序列。在一些實施方式中，重鏈進一步包含C-末端離胺酸（K）。在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段係AB212。
在一些實施方式中，抗BCMA抗體或其抗原結合片段包含三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 1（HCDR1）、SEQ ID NO: 7（HCDR2）和SEQ ID NO: 8（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 9（LCDR1）、SEQ ID NO: 10（LCDR2）和SEQ ID NO: 11（LCDR3），如由Kabat編號系統所定義的；或者三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 43（HCDR1）、SEQ ID NO: 44（HCDR2）和SEQ ID NO: 45（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 40（LCDR1）、SEQ ID NO: 41（LCDR2）和SEQ ID NO: 46（LCDR3），如由IMGT編號系統所定義的。
在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段包含如下三個HCDR和三個LCDR：由SEQ ID NO: 1組成的HCDR1，由SEQ ID NO: 7組成的HCDR2，由SEQ ID NO: 8組成的HCDR3；以及由SEQ ID NO: 9組成的LCDR1，由SEQ ID NO: 10組成的LCDR2，和由SEQ ID NO: 11組成的LCDR3，如由Kabat編號系統所定義的；或者由SEQ ID NO: 43組成的HCDR1，由SEQ ID NO: 44組成的HCDR2，由SEQ ID NO: 45組成的HCDR3；以及由SEQ ID NO: 40組成的LCDR1，由SEQ ID NO: 41組成的LCDR2，和由SEQ ID NO: 46組成的LCDR3，如由IMGT編號系統所定義的。
在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段包含含有SEQ ID NO: 78的胺基酸序列的重鏈可變區以及包含SEQ ID NO: 79的胺基酸序列的輕鏈可變區。在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段包含重鏈可變區胺基酸序列SEQ ID NO: 78和輕鏈可變區胺基酸序列SEQ ID NO: 79，或與所揭露之序列具有至少90%同一性的序列。在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段包含與SEQ ID NO: 78的胺基酸序列具有至少90%同一性的重鏈可變區以及與SEQ ID NO: 79的胺基酸序列具有至少90%同一性的輕鏈可變區。在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段包含與SEQ ID NO: 78具有至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%同一性的重鏈可變區胺基酸序列；和/或與SEQ ID NO: 79具有至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%同一性的輕鏈可變區胺基酸序列。
在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段包含人重鏈和輕鏈可變區框架，或具有一個或多個回復突變的人重鏈和輕鏈可變區框架。在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段係內化性抗體或內化性抗原結合片段。
在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段包含人IgG1重鏈恒定區和/或人Ig κ輕鏈恒定區。在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段包含人IgG1重鏈恒定區和/或人Ig λ輕鏈恒定區。在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段包含人IgG4重鏈恒定區和/或人Ig κ輕鏈恒定區。在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段包含人IgG4重鏈恒定區和/或人Ig λ輕鏈恒定區。在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段包含含有SEQ ID NO: 90的胺基酸序列的重鏈恒定區和包含SEQ ID NO: 91的胺基酸序列的輕鏈恒定區。在一些實施方式中，重鏈恒定區進一步包含C-末端離胺酸（K）。
在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段包含含有SEQ ID NO: 94的胺基酸序列的重鏈以及含有SEQ ID NO: 95的胺基酸序列的輕鏈。在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段包含與SEQ ID NO: 94的胺基酸序列具有至少90%同一性的重鏈以及與SEQ ID NO: 95的胺基酸序列具有至少90%同一性的輕鏈。在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段包含與SEQ ID NO: 94具有至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%同一性的重鏈胺基酸序列；和/或與SEQ ID NO: 95具有至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%同一性的輕鏈胺基酸序列。在一些實施方式中，重鏈進一步包含C-末端離胺酸（K）。在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段係AB213。
在一些實施方式中，抗BCMA抗體或其抗原結合片段包含三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 1（HCDR1）、SEQ ID NO: 12（HCDR2）和SEQ ID NO: 13（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 14（LCDR1）、SEQ ID NO: 15（LCDR2）和SEQ ID NO: 16（LCDR3），如由Kabat編號系統所定義的；或者三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 47（HCDR1）、SEQ ID NO: 48（HCDR2）和SEQ ID NO: 49（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 40（LCDR1）、SEQ ID NO: 41（LCDR2）和SEQ ID NO: 50（LCDR3），如由IMGT編號系統所定義的。
在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段包含如下三個HCDR和三個LCDR：由SEQ ID NO: 1組成的HCDR1，由SEQ ID NO: 12組成的HCDR2，由SEQ ID NO: 13組成的HCDR3；以及由SEQ ID NO: 14組成的LCDR1，由SEQ ID NO: 15組成的LCDR2，和由SEQ ID NO: 16組成的LCDR3，如由Kabat編號系統所定義的；或者由SEQ ID NO: 47組成的HCDR1，由SEQ ID NO: 48組成的HCDR2，由SEQ ID NO: 49組成的HCDR3；以及由SEQ ID NO: 40組成的LCDR1，由SEQ ID NO: 41組成的LCDR2，和由SEQ ID NO: 50組成的LCDR3，如由IMGT編號系統所定義的。
在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段包含含有SEQ ID NO: 80的胺基酸序列的重鏈可變區以及包含SEQ ID NO: 81的胺基酸序列的輕鏈可變區。在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段包含重鏈可變區胺基酸序列SEQ ID NO: 80和輕鏈可變區胺基酸序列SEQ ID NO: 81，或與所揭露之序列具有至少90%同一性的序列。在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段包含與SEQ ID NO: 80的胺基酸序列具有至少90%同一性的重鏈可變區以及與SEQ ID NO: 81的胺基酸序列具有至少90%同一性的輕鏈可變區。在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段包含與SEQ ID NO: 80具有至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%同一性的重鏈可變區胺基酸序列；和/或與SEQ ID NO: 81具有至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%同一性的輕鏈可變區胺基酸序列。
在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段包含人重鏈和輕鏈可變區框架，或具有一個或多個回復突變的人重鏈和輕鏈可變區框架。在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段係內化性抗體或內化性抗原結合片段。
在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段包含人IgG1重鏈恒定區和/或人Ig κ輕鏈恒定區。在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段包含人IgG1重鏈恒定區和/或人Ig λ輕鏈恒定區。在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段包含人IgG4重鏈恒定區和/或人Ig κ輕鏈恒定區。在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段包含人IgG4重鏈恒定區和/或人Ig λ輕鏈恒定區。在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段包含含有SEQ ID NO: 90的胺基酸序列的重鏈恒定區和包含SEQ ID NO: 91的胺基酸序列的輕鏈恒定區。在一些實施方式中，重鏈恒定區進一步包含C-末端離胺酸（K）。
在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段包含含有SEQ ID NO: 96的胺基酸序列的重鏈以及含有SEQ ID NO: 97的胺基酸序列的輕鏈。在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段包含與SEQ ID NO: 96的胺基酸序列具有至少90%同一性的重鏈以及與SEQ ID NO: 97的胺基酸序列具有至少90%同一性的輕鏈。在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段包含與SEQ ID NO: 96具有至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%同一性的重鏈胺基酸序列；和/或與SEQ ID NO: 97具有至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%同一性的輕鏈胺基酸序列。在一些實施方式中，重鏈進一步包含C-末端離胺酸（K）。在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段係AB214。
在一些實施方式中，抗BCMA抗體或其抗原結合片段包含三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 1（HCDR1）、SEQ ID NO: 17（HCDR2）和SEQ ID NO: 18（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 19（LCDR1）、SEQ ID NO: 20（LCDR2）和SEQ ID NO: 21（LCDR3），如由Kabat編號系統所定義的；或者三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 51（HCDR1）、SEQ ID NO: 52（HCDR2）和SEQ ID NO: 53（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 40（LCDR1）、SEQ ID NO: 41（LCDR2）和SEQ ID NO: 54（LCDR3），如由IMGT編號系統所定義的。
在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段包含如下三個HCDR和三個LCDR：由SEQ ID NO: 1組成的HCDR1，由SEQ ID NO: 17組成的HCDR2，由SEQ ID NO: 18組成的HCDR3；以及由SEQ ID NO: 19組成的LCDR1，由SEQ ID NO: 20組成的LCDR2，和由SEQ ID NO: 21組成的LCDR3，如由Kabat編號系統所定義的；或者由SEQ ID NO: 51組成的HCDR1，由SEQ ID NO: 52組成的HCDR2，由SEQ ID NO: 53組成的HCDR3；以及由SEQ ID NO: 40組成的LCDR1，由SEQ ID NO: 41組成的LCDR2，和由SEQ ID NO: 54組成的LCDR3，如由IMGT編號系統所定義的。
在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段包含含有SEQ ID NO: 82的胺基酸序列的重鏈可變區以及包含SEQ ID NO: 83的胺基酸序列的輕鏈可變區。在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段包含重鏈可變區胺基酸序列SEQ ID NO: 82和輕鏈可變區胺基酸序列SEQ ID NO: 83，或與所揭露之序列具有至少90%同一性的序列。在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段包含與SEQ ID NO: 82的胺基酸序列具有至少90%同一性的重鏈可變區以及與SEQ ID NO: 83的胺基酸序列具有至少90%同一性的輕鏈可變區。在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段包含與SEQ ID NO: 82具有至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%同一性的重鏈可變區胺基酸序列；和/或與SEQ ID NO: 83具有至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%同一性的輕鏈可變區胺基酸序列。
在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段包含人重鏈和輕鏈可變區框架，或具有一個或多個回復突變的人重鏈和輕鏈可變區框架。在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段係內化性抗體或內化性抗原結合片段。
在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段包含人IgG1重鏈恒定區和/或人Ig κ輕鏈恒定區。在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段包含人IgG1重鏈恒定區和/或人Ig λ輕鏈恒定區。在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段包含人IgG4重鏈恒定區和/或人Ig κ輕鏈恒定區。在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段包含人IgG4重鏈恒定區和/或人Ig λ輕鏈恒定區。在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段包含含有SEQ ID NO: 90的胺基酸序列的重鏈恒定區和包含SEQ ID NO: 91的胺基酸序列的輕鏈恒定區。在一些實施方式中，重鏈恒定區進一步包含C-末端離胺酸（K）。
在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段包含含有SEQ ID NO: 98的胺基酸序列的重鏈以及含有SEQ ID NO: 99的胺基酸序列的輕鏈。在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段包含與SEQ ID NO: 98的胺基酸序列具有至少90%同一性的重鏈以及與SEQ ID NO: 99的胺基酸序列具有至少90%同一性的輕鏈。在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段包含與SEQ ID NO: 98具有至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%同一性的重鏈胺基酸序列；和/或與SEQ ID NO: 99具有至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%同一性的輕鏈胺基酸序列。在一些實施方式中，重鏈進一步包含C-末端離胺酸（K）。在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段係AB215。
在一些實施方式中，抗BCMA抗體或其抗原結合片段包含三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 1（HCDR1）、SEQ ID NO: 22（HCDR2）和SEQ ID NO: 23（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 24（LCDR1）、SEQ ID NO: 25（LCDR2）和SEQ ID NO: 26（LCDR3），如由Kabat編號系統所定義的；或者三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 55（HCDR1）、SEQ ID NO: 56（HCDR2）和SEQ ID NO: 57（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 40（LCDR1）、SEQ ID NO: 41（LCDR2）和SEQ ID NO: 58（LCDR3），如由IMGT編號系統所定義的。
在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段包含如下三個HCDR和三個LCDR：由SEQ ID NO: 1組成的HCDR1，由SEQ ID NO: 22組成的HCDR2，由SEQ ID NO: 23組成的HCDR3；以及由SEQ ID NO: 24組成的LCDR1，由SEQ ID NO: 25組成的LCDR2，和由SEQ ID NO: 26組成的LCDR3，如由Kabat編號系統所定義的；或者由SEQ ID NO: 55組成的HCDR1，由SEQ ID NO: 56組成的HCDR2，由SEQ ID NO: 57組成的HCDR3；以及由SEQ ID NO: 40組成的LCDR1，由SEQ ID NO: 41組成的LCDR2，和由SEQ ID NO: 58組成的LCDR3，如由IMGT編號系統所定義的。
在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段包含含有SEQ ID NO: 84的胺基酸序列的重鏈可變區以及包含SEQ ID NO: 85的胺基酸序列的輕鏈可變區。在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段包含重鏈可變區胺基酸序列SEQ ID NO: 84和輕鏈可變區胺基酸序列SEQ ID NO: 85，或與所揭露之序列具有至少90%同一性的序列。在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段包含與SEQ ID NO: 84的胺基酸序列具有至少90%同一性的重鏈可變區以及與SEQ ID NO: 85的胺基酸序列具有至少90%同一性的輕鏈可變區。在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段包含與SEQ ID NO: 84具有至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%同一性的重鏈可變區胺基酸序列；和/或與SEQ ID NO: 85具有至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%同一性的輕鏈可變區胺基酸序列。
在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段包含人重鏈和輕鏈可變區框架，或具有一個或多個回復突變的人重鏈和輕鏈可變區框架。在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段係內化性抗體或內化性抗原結合片段。
在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段包含人IgG1重鏈恒定區和/或人Ig κ輕鏈恒定區。在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段包含人IgG1重鏈恒定區和/或人Ig λ輕鏈恒定區。在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段包含人IgG4重鏈恒定區和/或人Ig κ輕鏈恒定區。在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段包含人IgG4重鏈恒定區和/或人Ig λ輕鏈恒定區。在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段包含含有SEQ ID NO: 90的胺基酸序列的重鏈恒定區和包含SEQ ID NO: 91的胺基酸序列的輕鏈恒定區。在一些實施方式中，重鏈恒定區進一步包含C-末端離胺酸（K）。
在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段包含含有SEQ ID NO: 100的胺基酸序列的重鏈以及含有SEQ ID NO: 101的胺基酸序列的輕鏈。在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段包含與SEQ ID NO: 100的胺基酸序列具有至少90%同一性的重鏈以及與SEQ ID NO: 101的胺基酸序列具有至少90%同一性的輕鏈。在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段包含與SEQ ID NO: 100具有至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%同一性的重鏈胺基酸序列；和/或與SEQ ID NO: 101具有至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%同一性的輕鏈胺基酸序列。在一些實施方式中，重鏈進一步包含C-末端離胺酸（K）。在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段係AB216。
在一些實施方式中，抗BCMA抗體或其抗原結合片段包含三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 1（HCDR1）、SEQ ID NO: 27（HCDR2）和SEQ ID NO: 28（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 29（LCDR1）、SEQ ID NO: 30（LCDR2）和SEQ ID NO: 31（LCDR3），如由Kabat編號系統所定義的；或者三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 59（HCDR1）、SEQ ID NO: 60（HCDR2）和SEQ ID NO: 61（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 40（LCDR1）、SEQ ID NO: 41（LCDR2）和SEQ ID NO: 62（LCDR3），如由IMGT編號系統所定義的。
在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段包含如下三個HCDR和三個LCDR：由SEQ ID NO: 1組成的HCDR1，由SEQ ID NO: 27組成的HCDR2，由SEQ ID NO: 28組成的HCDR3；以及由SEQ ID NO: 29組成的LCDR1，由SEQ ID NO: 30組成的LCDR2，和由SEQ ID NO: 31組成的LCDR3，如由Kabat編號系統所定義的；或者由SEQ ID NO: 59組成的HCDR1，由SEQ ID NO: 60組成的HCDR2，由SEQ ID NO: 61組成的HCDR3；以及由SEQ ID NO: 40組成的LCDR1，由SEQ ID NO: 41組成的LCDR2，和由SEQ ID NO: 62組成的LCDR3，如由IMGT編號系統所定義的。
在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段包含含有SEQ ID NO: 86的胺基酸序列的重鏈可變區以及包含SEQ ID NO: 87的胺基酸序列的輕鏈可變區。在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段包含重鏈可變區胺基酸序列SEQ ID NO: 86和輕鏈可變區胺基酸序列SEQ ID NO: 87，或與所揭露之序列具有至少90%同一性的序列。在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段包含與SEQ ID NO: 86的胺基酸序列具有至少90%同一性的重鏈可變區以及與SEQ ID NO: 87的胺基酸序列具有至少90%同一性的輕鏈可變區。在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段包含與SEQ ID NO: 86具有至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%同一性的重鏈可變區胺基酸序列；和/或與SEQ ID NO: 87具有至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%同一性的輕鏈可變區胺基酸序列。
在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段包含人重鏈和輕鏈可變區框架，或具有一個或多個回復突變的人重鏈和輕鏈可變區框架。在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段係內化性抗體或內化性抗原結合片段。
在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段包含人IgG1重鏈恒定區和/或人Ig κ輕鏈恒定區。在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段包含人IgG1重鏈恒定區和/或人Ig λ輕鏈恒定區。在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段包含人IgG4重鏈恒定區和/或人Ig κ輕鏈恒定區。在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段包含人IgG4重鏈恒定區和/或人Ig λ輕鏈恒定區。在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段包含含有SEQ ID NO: 90的胺基酸序列的重鏈恒定區和包含SEQ ID NO: 91的胺基酸序列的輕鏈恒定區。在一些實施方式中，重鏈恒定區進一步包含C-末端離胺酸（K）。
在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段包含含有SEQ ID NO: 102的胺基酸序列的重鏈以及含有SEQ ID NO: 103的胺基酸序列的輕鏈。在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段包含與SEQ ID NO: 102的胺基酸序列具有至少90%同一性的重鏈以及與SEQ ID NO: 103的胺基酸序列具有至少90%同一性的輕鏈。在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段包含與SEQ ID NO: 102具有至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%同一性的重鏈胺基酸序列；和/或與SEQ ID NO: 103具有至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%同一性的輕鏈胺基酸序列。在一些實施方式中，重鏈進一步包含C-末端離胺酸（K）。在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段係AB217。
在一些實施方式中，抗BCMA抗體或其抗原結合片段包含三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 1（HCDR1）、SEQ ID NO: 32（HCDR2）和SEQ ID NO: 33（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 34（LCDR1）、SEQ ID NO: 35（LCDR2）和SEQ ID NO: 36（LCDR3），如由Kabat編號系統所定義的；或者三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 63（HCDR1）、SEQ ID NO: 64（HCDR2）和SEQ ID NO: 65（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 40（LCDR1）、SEQ ID NO: 41（LCDR2）和SEQ ID NO: 66（LCDR3），如由IMGT編號系統所定義的。
在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段包含如下三個HCDR和三個LCDR：由SEQ ID NO: 1組成的HCDR1，由SEQ ID NO: 32組成的HCDR2，由SEQ ID NO: 33組成的HCDR3；以及由SEQ ID NO: 34組成的LCDR1，由SEQ ID NO: 35組成的LCDR2，和由SEQ ID NO: 36組成的LCDR3，如由Kabat編號系統所定義的；或者由SEQ ID NO: 63組成的HCDR1，由SEQ ID NO: 64組成的HCDR2，由SEQ ID NO: 65組成的HCDR3；以及由SEQ ID NO: 40組成的LCDR1，由SEQ ID NO: 41組成的LCDR2，和由SEQ ID NO: 66組成的LCDR3，如由IMGT編號系統所定義的。
在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段包含含有SEQ ID NO: 88的胺基酸序列的重鏈可變區以及包含SEQ ID NO: 89的胺基酸序列的輕鏈可變區。在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段包含重鏈可變區胺基酸序列SEQ ID NO: 88和輕鏈可變區胺基酸序列SEQ ID NO: 89，或與所揭露之序列具有至少90%同一性的序列。在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段包含與SEQ ID NO: 88的胺基酸序列具有至少90%同一性的重鏈可變區以及與SEQ ID NO: 89的胺基酸序列具有至少90%同一性的輕鏈可變區。在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段包含與SEQ ID NO: 88具有至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%同一性的重鏈可變區胺基酸序列；和/或與SEQ ID NO: 89具有至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%同一性的輕鏈可變區胺基酸序列。
在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段包含人重鏈和輕鏈可變區框架，或具有一個或多個回復突變的人重鏈和輕鏈可變區框架。在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段係內化性抗體或內化性抗原結合片段。
在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段包含人IgG1重鏈恒定區和/或人Ig κ輕鏈恒定區。在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段包含人IgG1重鏈恒定區和/或人Ig λ輕鏈恒定區。在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段包含人IgG4重鏈恒定區和/或人Ig κ輕鏈恒定區。在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段包含人IgG4重鏈恒定區和/或人Ig λ輕鏈恒定區。在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段包含含有SEQ ID NO: 90的胺基酸序列的重鏈恒定區和包含SEQ ID NO: 91的胺基酸序列的輕鏈恒定區。在一些實施方式中，重鏈恒定區進一步包含C-末端離胺酸（K）。
在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段包含含有SEQ ID NO: 104的胺基酸序列的重鏈以及含有SEQ ID NO: 105的胺基酸序列的輕鏈。在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段包含與SEQ ID NO: 104的胺基酸序列具有至少90%同一性的重鏈以及與SEQ ID NO: 105的胺基酸序列具有至少90%同一性的輕鏈。在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段包含與SEQ ID NO: 104具有至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%同一性的重鏈胺基酸序列；和/或與SEQ ID NO: 105具有至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%同一性的輕鏈胺基酸序列。在一些實施方式中，重鏈進一步包含C-末端離胺酸（K）。在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段係AB218。
本文揭露之抗體和抗原結合片段可以包括另外的修飾（例如，一個或多個胺基酸取代、缺失和/或插入）同時保持結合BCMA的能力。在一些實施方式中，抗體或抗原結合片段包含指定的修飾（例如，相對於參考抗體），並且除了指定的修飾之外，視需要包含多達約1、約2、約3、約4、約5、約6、約7、約8、約9、或約10個胺基酸修飾。在一些實施方式中，抗體或抗原結合片段包含重鏈可變區，該重鏈可變區除了任何指定的胺基酸修飾之外，還包含多達約2個、多達約5個、或多達約10個胺基酸修飾（例如，相對於參考抗體）。在一些實施方式中，抗體或抗原結合片段包含輕鏈可變區，該輕鏈可變區除了任何指定的胺基酸修飾之外，還包含多達約2個、多達約5個、或多達約10個胺基酸修飾。
在一些實施方式中，胺基酸取代具有單個殘基。插入的數量級通常為約1至約20個胺基酸殘基，但顯著更大的插入可為容許的，只要保持生物功能（例如，結合BCMA）即可。缺失通常在約1至約20個胺基酸殘基範圍內，但在一些情況下，缺失可能要大得多。取代、缺失、插入或其任何組合可用於獲得最終衍生物或變體。通常，對數個胺基酸作出該等改變以將對分子、特別是抗原結合蛋白的免疫原性和特異性的更改減至最少。然而，在某些情況下，更多變化可為容許的。保守取代通常根據提供功能相似胺基酸的表（如下面描述為表10的示例性表）進行，並且其他取代係本領域已知的。[ 表 10] 原始殘基                   示例性取代 Ala                           Ser Arg                           Lys Asn                          Gln、His Asp                          Glu Cys                           Ser Gln                           Asn Glu                           Asp Gly                           Pro His                           Asn、Gln Ile                            Leu、Val Leu                           Ile、Val Lys                           Arg、Gln、Glu Met                           Leu、Ile Phe                           Met、Leu、Tyr Ser                           Thr Thr                           Ser Trp                           Tyr Tyr                           Trp、Phe Val                           Ile、Leu
在各種實施方式中，可以藉由選擇保守性低於表10中所示的取代的取代來作出功能或免疫屬性中的實質性改變。例如，可進行更顯著地影響以下的取代：更改區域中多肽主鏈的結構，例如α-螺旋或β-折疊結構；靶位點處該分子的電荷或疏水性；或側鏈的體積。通常可在多肽性質上產生最大變化的取代係以下取代，其中：(a) 親水性殘基（例如絲胺醯基或蘇胺醯基）被取代為（或被以下取代）疏水性殘基（例如亮胺醯基、異亮胺醯基、苯丙胺醯基、纈胺醯基或丙胺醯基）；(b) 半胱胺酸或脯胺酸被取代為（或被以下取代）任何其他殘基；(c) 具有正電性側鏈的殘基（例如賴胺醯基、精胺醯基或組胺醯基）被取代為（或被以下取代）負電性殘基（例如穀胺醯基或天冬胺醯基）；或 (d) 具有大體積側鏈的殘基（例如苯丙胺酸）被取代為（或被以下取代）不具有側鏈的殘基（例如甘胺酸）。
在其中變異抗體序列用於抗體、抗原結合片段或ADC中的一些實施方式中，變體通常展現相同定性生物活性且引發相同免疫反應，但還可視需要選擇變體以修改抗原結合蛋白的特徵。除了在框架區或CDR區內進行的修飾之外，還可以將本揭露的抗體工程改造以包含Fc區內的修飾，通常是為了改變抗體或抗原結合片段的一種或多種功能特性，如血清半衰期、補體結合、Fc受體結合和/或抗原依賴性細胞毒性。此外，在一些實施方式中，本揭露的抗體可以被化學修飾（例如，可以將一個或多個化學物部分連接至該抗體），或被修飾以改變其糖基化作用，例如，以改變該抗體或抗原結合片段的一個或多個功能特性。
本文所述之胺基酸取代可以藉由列出絕對殘基位置然後是經取代（即，替換）的胺基酸的三字母或單字母代碼來表示。例如，SEQ ID NO: 119的位置30處的絲胺酸被蘇胺酸取代可以表示為「Ser30Thr」或「S30T」。在這個實例中，絲胺酸係「被替換的」胺基酸，蘇胺酸係「取代」或「替換」胺基酸。
在一些實施方式中，本文所述之胺基酸取代可使用抗體或抗原結合片段中的取代的絕對位置、Kabat編號系統或本領域已知的另一編號系統來指代。除非另有說明，使用抗體或抗原結合片段中取代的絕對位置來指代胺基酸取代。然而，在一些實施方式中，本文揭露之抗體或抗原結合片段中的胺基酸取代可藉由其Kabat位置來指代。在一些實施方式中，本文揭露之抗體或抗原結合片段包含重鏈可變區，該重鏈可變區包含經修飾以在位置103（即，在絕對位置103）處包括至少一個胺基酸取代的SEQ ID NO: 119的胺基酸序列。在一些實施方式中，SEQ ID NO: 119的位置103可藉由其Kabat位置（即，SEQ ID NO: 119的Kabat位置99）指代。在一些實施方式中，SEQ ID NO: 119的位置103（對應於Kabat位置99）處的胺基酸被H取代。不受理論的束縛，在一些實施方式中，與缺乏以下所述取代的抗體或抗原結合片段相比，包含在SEQ ID NO: 119的位置103（對應於Kabat位置99）處的天冬胺酸被組胺酸取代的抗體或抗原結合片段可表現出對BCMA的更高親和力。在一些實施方式中，D103H（Kabat D99H）取代可提高抗體或抗原結合片段對人BCMA、猴BCMA或兩者之結合親和力。在一些實施方式中，D103H（Kabat D99H）取代提高了抗體或抗原結合片段對人BCMA和猴BCMA兩者的結合親和力，如藉由例如Octet結合測定所確定的。
在一些實施方式中，本文揭露之抗體或抗原結合片段包含： (a) 含有SEQ ID NO: 119的胺基酸序列的重鏈可變區，該胺基酸序列被修飾以包括在位置30、34、50、54、55、57、59、61、64、66、101、103、108和109中的一個或多個處的胺基酸取代；和 (b) 含有SEQ ID NO: 120的胺基酸序列的輕鏈可變區，該胺基酸序列被修飾以包括在位置24、28、31、33、50、55、56、91、93、94和97中的一個或多個處的胺基酸取代。
在一些實施方式中，抗體或抗原結合片段包含含有SEQ ID NO: 119的胺基酸序列的重鏈可變區，該胺基酸序列被修飾以包括在位置30、34、50、54、55、57、59、61、64、66、101、103、108和109中的一個或多個處的胺基酸取代，其中： SEQ ID NO: 119的位置30處的胺基酸被T取代； SEQ ID NO: 119的位置34處的胺基酸被I取代； SEQ ID NO: 119的位置50處的胺基酸被G取代； SEQ ID NO: 119的位置54處的胺基酸被S或I取代； SEQ ID NO: 119的位置55處的胺基酸被Q取代； SEQ ID NO: 119的位置57處的胺基酸被T取代； SEQ ID NO: 119的位置59處的胺基酸被N取代； SEQ ID NO: 119的位置61處的胺基酸被A取代； SEQ ID NO: 119的位置64處的胺基酸被Y取代； SEQ ID NO: 119的位置66處的胺基酸被S取代； SEQ ID NO: 119的位置101處的胺基酸被V取代； SEQ ID NO: 119的位置103處的胺基酸被H取代； SEQ ID NO: 119的位置108處的胺基酸被I取代；和/或 SEQ ID NO: 119的位置109處的胺基酸被E取代。
在一些實施方式中，抗體或抗原結合片段包含含有SEQ ID NO: 119的胺基酸序列的重鏈可變區，該胺基酸序列被修飾以包括在位置103處的至少一個胺基酸取代。在一些實施方式中，SEQ ID NO: 119的位置103（對應於Kabat位置99）處的胺基酸被H取代。
在一些實施方式中，抗體或抗原結合片段包含含有SEQ ID NO: 119的胺基酸序列的重鏈可變區，該胺基酸序列被修飾以包括至少四個胺基酸取代。在一些實施方式中，抗體或抗原結合片段包含含有SEQ ID NO: 119的胺基酸序列的重鏈可變區，該胺基酸序列被修飾以在位置34、66、103和108處至少包括胺基酸取代。在一些實施方式中，SEQ ID NO: 119的位置34處的胺基酸被I取代；SEQ ID NO: 119的位置66處的胺基酸被S取代；SEQ ID NO: 119的位置103處的胺基酸被H取代；並且SEQ ID NO: 119的位置108處的胺基酸被I取代。
在一些實施方式中，抗體或抗原結合片段包含含有SEQ ID NO: 120的胺基酸序列的輕鏈可變區，該胺基酸序列被修飾以包括在位置24、28、31、33、50、55、56、91、93、94和97中的一個或多個處的胺基酸取代，其中： SEQ ID NO: 120的位置24處的胺基酸被R取代； SEQ ID NO: 120的位置28處的胺基酸被S取代； SEQ ID NO: 120的位置31處的胺基酸被S取代； SEQ ID NO: 120的位置33處的胺基酸被I取代； SEQ ID NO: 120的位置50處的胺基酸被A取代； SEQ ID NO: 120的位置55處的胺基酸被Q取代； SEQ ID NO: 120的位置56處的胺基酸被I取代； SEQ ID NO: 120的位置91處的胺基酸被F取代； SEQ ID NO: 120的位置93處的胺基酸被R取代； SEQ ID NO: 120的位置94處的胺基酸被I取代；和/或 SEQ ID NO: 120的位置97處的胺基酸被S取代。
在一些實施方式中，抗體或抗原結合片段包含含有SEQ ID NO: 120的胺基酸序列的輕鏈可變區，該胺基酸序列被修飾以包括至少六個胺基酸取代。在一些實施方式中，抗體或抗原結合片段包含含有SEQ ID NO: 120的胺基酸序列的輕鏈可變區，該胺基酸序列被修飾以在位置24、28、31、50、55和93處至少包括胺基酸取代。在一些實施方式中，SEQ ID NO: 120的位置24處的胺基酸被R取代；SEQ ID NO: 120的位置28處的胺基酸被S取代；SEQ ID NO: 120的位置31處的胺基酸被S取代；SEQ ID NO: 120的位置50處的胺基酸被A取代；SEQ ID NO: 120的位置55處的胺基酸被Q取代；並且SEQ ID NO: 120的位置93處的胺基酸被R取代。在各種實施方式中，任何經修飾的重鏈和輕鏈可以在本文揭露之抗體或抗原結合片段或ADC中配對。
在一些實施方式中，本文揭露之抗體或抗原結合片段可以單獨（例如，作為抗體或抗原結合片段）、連接至一種或多種另外的藥劑連接（例如，作為ADC）、或作為較大大分子（例如，雙特異性抗體或多特異性抗體）的一部分使用。例如，在一些實施方式中，抗體或抗原結合片段係雙特異性或多特異性抗體中的抗原結合結構域和/或係雙特異性或多特異性抗體的一部分。在一些實施方式中，抗原結合結構域係抗原結合片段。在一些實施方式中，抗原結合結構域和/或抗原結合片段係單鏈可變片段（scFv）或Fab片段。在一些實施方式中，本文揭露之抗體和抗原結合片段（單獨使用或作為較大大分子的一部分使用）可包括另外的修飾（例如，一個或多個胺基酸取代、缺失和/或插入）同時保留BCMA結合功能。
在一些實施方式中，本文揭露之抗體或抗原結合片段與治療劑軛合。在一些實施方式中，治療劑係剪接調節劑。在一些實施方式中，治療劑係普拉二烯內酯或普拉二烯內酯衍生物。在一些實施方式中，治療劑係普拉二烯內酯D或普拉二烯內酯D衍生物。在一些實施方式中，治療劑係D1、D2、或者本文所述之或本文藉由引用併入的另一種示例性剪接調節劑。在一些實施方式中，治療劑係D1。在一些實施方式中，治療劑係D2。
在一些實施方式中，本揭露提供了分離的和/或基本上純化的核酸分子（也稱為多核苷酸），其編碼包含本文所述之抗體和抗原結合片段的全長多肽或包含本文所述之抗體和抗原結合片段的區段的多肽。如本文所使用，「分離的」意指在干預之前，從核酸的正常環境中發現的一種或多種組分中去除的。在一些實施方式中，單個核酸可包含本文揭露之抗體或抗原結合片段的重鏈可變區和輕鏈可變區的編碼序列，並且視需要還包含其一個或多個恒定區的編碼序列。可替代地，該等編碼序列中的一些或全部可以位於單獨的核酸分子上。當從適當的表現運載體表現時，由該等多核苷酸編碼的多肽能夠結合BCMA（例如，人BCMA）。
本文還提供了如下多核苷酸，其編碼來自本揭露的示例性抗BCMA抗體或抗原結合片段的重鏈和/或輕鏈的至少一個CDR區和通常所有三個CDR區。本文進一步提供了如下多核苷酸，其編碼本揭露的示例性抗BCMA抗體或抗原結合片段的重鏈和/或輕鏈的所有或基本上所有的可變區序列。由於遺傳密碼的簡並性，多種核酸序列將編碼本文揭露之示例性胺基酸序列中的每一種。
本文還提供了用於產生本揭露的抗BCMA抗體和抗原結合片段的表現運載體、宿主細胞和方法。
示例性實施方式係編碼本文揭露之抗體或抗原結合片段的分離的核酸。另一個示例性實施方式係分離的運載體，其包含編碼本文揭露之抗體或抗原結合片段的分離的核酸。另一個示例性實施方式係分離的細胞或細胞群，其包含編碼本文揭露之抗體或抗原結合片段的分離的核酸，或包含含有分離的核酸的運載體。另一個示例性實施方式係產生抗體或抗原結合片段之方法，該方法藉由在適合產生抗體或抗原結合片段的條件下培養經修飾以包含編碼本文所述之抗體或抗原結合片段的一種或多種核酸序列的宿主細胞或細胞群來進行。在一些實施方式中，該方法進一步包括分離、純化和/或回收所產生的抗體或抗原結合片段的步驟。
術語「運載體」旨在指能夠轉運與其連接的另一多核苷酸和/或控制與其連接的另一多核苷酸的表現的多核苷酸分子。一種類型的運載體係「質體」，其係指可以向其中連接另外的DNA區段的環狀雙股DNA環。另一類型的運載體係病毒運載體，其中另外的DNA區段可以連接到病毒基因組中。某些運載體（例如，具有細菌複製起點的細菌運載體和附加型哺乳動物運載體）能夠在它們被引入的宿主細胞中自主複製。其他運載體（例如，非附加型哺乳動物運載體）可以在一旦被引入宿主細胞時整合進宿主細胞基因組中，並且由此與宿主基因組一起複製。此外，某些運載體可以指導與它們可操作地連接的基因的表現。此類運載體在本文中稱為「表現運載體」或「重組表現運載體」。通常，在重組DNA技術中有用的表現運載體通常呈質體的形式。本揭露旨在包括質體，以及起到等同功能的其他形式的表現運載體，如病毒運載體（例如，複製缺陷型反轉錄病毒或慢病毒、腺病毒和腺相關病毒）。
用於接收編碼抗BCMA抗體重鏈和/或輕鏈可變區的序列的運載體有時也編碼恒定區或其部分。此類運載體允許將可變區表現為具有恒定區的融合蛋白，從而導致產生全長抗體或其抗原結合片段。通常，此類恒定區係人恒定區。在一些實施方式中，恒定區係人IgG1重鏈恒定區。在一些實施方式中，恒定區係人IgG4重鏈恒定區。在一些實施方式中，恒定區係人Ig κ輕鏈恒定區。在一些實施方式中，恒定區係人Ig λ輕鏈恒定區。
術語「宿主細胞」係指如下細胞（或細胞群），其被人工工程改造以包含編碼肽序列的核酸，並且轉錄並翻譯，並視需要分泌肽至細胞生長培養基中。出於重組生產的目的，典型地藉由常規方法合成或選殖編碼肽的胺基酸序列的核酸，並整合至表現運載體中。術語「宿主細胞」不僅指特定的受試者細胞，還指這種細胞的子代。因為某些修飾可以因突變或環境影響而出現在後續世代中，所以這類子代實際上可以與親代細胞不同，但仍包含於本文所使用的該術語範圍內。
攜帶和表現編碼抗BCMA抗體鏈或抗原結合片段的核酸的宿主細胞可以是原核或真核細胞。在一些實施方式中，哺乳動物宿主細胞用於表現和產生本揭露的抗BCMA多肽。例如，它們可以是表現內源性免疫球蛋白基因的雜交瘤細胞系或攜帶外源表現運載體的哺乳動物細胞系。該等包括任何正常的必死動物或人細胞或正常或異常的永生動物或人細胞。例如，已經開發了許多能夠分泌完整免疫球蛋白的合適宿主細胞系，包括CHO細胞系、各種COS細胞系、HeLa細胞、骨髓瘤細胞系、轉化的B細胞和雜交瘤。示例性宿主細胞包括但不限於中國倉鼠卵巢（CHO）細胞、人胚腎（HEK）細胞（例如，293T）、猴腎（COS）細胞（例如，COS-1、COS-7）、幼倉鼠腎（BHK）細胞（例如，BHK-21）、非洲綠猴腎細胞（例如，BSC-1）、HeLa細胞、人肝細胞癌細胞（例如，Hep G2）、骨髓瘤細胞（例如，NS0、653、SP2/0）、以及淋巴瘤細胞，或其任何衍生的、永生化或轉化的細胞。
在一些實施方式中，可以將編碼抗BCMA抗體或抗原結合片段的重鏈和/或輕鏈的一種或多種核酸分子或包含此類核酸分子的一種或多種表現運載體使用適合所選宿主細胞的任何方法（例如，轉化、轉染、電穿孔、感染）引入合適的宿主細胞以產生重組宿主細胞，使得核酸分子可操作地連接至一個或多個表現控制元件（例如，在運載體中，在由細胞中的過程創建的構建體中，整合到宿主細胞基因組中）。在一些實施方式中，所得重組宿主細胞可以維持在適合表現或生產的條件下（例如，在誘導劑的存在下，在合適的非人動物中，在補充有合適的鹽、生長因子、抗生素、營養補充劑等的合適的培養基中），由此產生所編碼的多肽。如果需要，可以（例如，從動物、宿主細胞、培養基）分離或回收所編碼的蛋白質。該過程包括在轉基因非人動物的宿主細胞中的表現（參見，例如，國際公開案號WO 1992/003918）。此外，可以使用已知技術增強來自生產細胞系的抗體鏈或抗原結合片段的表現。例如，麩醯胺酸合成酶和DHFR基因表現系統係在某些條件下增強表現的常用方法。可以使用常規技術，如有限稀釋殖株、凝膠微滴技術或本領域已知的任何其他方法來鑒定高表現的細胞選殖。 抗體-藥物軛合物
本揭露的抗體-藥物軛合物（ADC）包括具有抗癌活性的那些軛合物。特別地，該等ADC包括軛合（即，藉由連接子共價連接）至藥物部分（例如，剪接調節劑）的抗體或抗原結合片段，其中該藥物部分當未軛合至抗體或抗原結合片段時具有細胞毒性作用或細胞生長抑制作用。在各種實施方式中，該藥物部分當未軛合至抗體或抗原結合片段時能夠與SF3b剪接體複合物結合和/或相互作用。在各種實施方式中，該藥物部分當未軛合至抗體或抗原結合片段時能夠調節體外和/或體內RNA剪接。在各種實施方式中，藉由靶向RNA剪接，本文揭露之藥物部分和ADC提供了強效抗增殖劑。在各種實施方式中，本文揭露之藥物部分和ADC可以靶向活躍分裂和休眠的細胞（例如，活躍分裂、不分裂和/或緩慢分裂的骨髓瘤細胞）。
在各種實施方式中，本揭露至少部分地基於以下發現：本文揭露之新型抗體和抗原結合片段在連接至某些生物活性剪接調節劑並用於ADC中時可以提供改進的特性。雖然剪接調節劑在單獨使用時可能表現出期望的改進特徵（例如，強大的SF3b剪接體複合物結合、RNA剪接的有效調節），但它優先靶向患病組織的能力可能有限。而且，在各種實施方式中，當軛合至一些抗體或抗原結合片段時，剪接調節劑可能表現出較少的期望特徵。因此，用作人類治療劑（例如，用作腫瘤藥劑）的ADC的研發和生產可能不僅僅需要鑒定能夠結合一個或多個所需靶標且連接至單獨使用以治療癌症的藥物的抗體。抗體與藥物的連接可對該抗體和該藥物中的一者或兩者的活性具有顯著影響，該影響將根據所選連接子和/或藥物的類型而變化。因此，在一些實施方式中，對ADC的組分進行選擇以 (i) 保持分離的抗體和藥物部分所展現的一種或多種治療特性；(ii) 維持抗體或抗原結合片段的特異性結合特性；(iii) 優化藥物負載以及藥物與抗體比率；(iv) 允許經由穩定連接至抗體或抗原結合片段而遞送（例如，細胞內遞送）藥物部分；(v) 保持ADC作為完整軛合物的穩定性直至轉運或遞送至靶位點為止；(vi) 將投與之前或之後的ADC的聚集減至最少；(vii) 在細胞環境中的裂解或其他釋放機制之後，允許實現藥物部分的治療作用，例如細胞毒性作用；(viii) 展現類似於或優於分離的抗體和藥物部分的體內抗癌治療功效；(ix) 使藥物部分引起的脫靶殺傷最小化；和/或 (x) 展現所需的藥物動力學和藥效學特性、可配製性和毒理/免疫特徵。可能需要該等特性中的一些或各種以鑒定用於治療用途的經改善的ADC（Ab等人 (2015) Mol Cancer Ther.[分子癌症治療學]14:1605-13）。
在各種實施方式中，本文揭露之ADC表現出上文所列一些或各個類別中的出乎意料地有利的特性。例如，在一些實施方式中，與包含替代性抗體、連接子和/或藥物部分（例如，替代性抗體（例如，參考抗體）和/或替代性剪接調節劑）的ADC相比，本文揭露之ADC構建體表現出令人驚訝的有利的藥物負載、聚集和/或穩定性特徵，和/或保持或改善抗體結合功能、藥物活性和/或旁觀者殺傷活性，同時減少脫靶殺傷。在一些實施方式中，與包含替代性抗體、連接子和/或藥物部分（例如，替代性抗體（例如，參考抗體）和/或替代性剪接調節劑）的ADC相比，本文揭露之ADC構建體對不分裂和/或緩慢分裂的細胞表現出改善的細胞毒性和/或細胞生長抑制活性。在一些實施方式中，與使用替代性抗體、連接子和/或藥物部分（例如，替代性抗體（例如，參考抗體）和/或替代性剪接調節劑）的ADC相比，本文揭露之ADC構建體表現出對BCMA的更高親和力和/或優異的穩定性、活性、效力或其他作用（在體內或體外測量的）。在一些實施方式中，比較或參考ADC係包含相同連接子和/或剪接調節劑有效載荷但包含替代性抗體（例如，AB200或其他示例性抗BCMA抗體）的ADC。
在一些實施方式中，與例如包含相同連接子和/或剪接調節劑有效載荷但包含替代性抗體（例如，AB200或其他示例性抗BCMA抗體）的ADC相比，本文揭露之ADC構建體表現出改進之結合親和力。在一些實施方式中，與包含相同連接子和/或剪接調節劑有效載荷但包含替代性抗體的ADC相比，所揭露之ADC對BCMA（例如，人BCMA）具有更高的親和力。在一些實施方式中，所揭露之ADC包含示例性抗BCMA抗體或抗原結合片段、連接子和剪接調節劑有效載荷。在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段係抗體AB212、AB213、AB214、AB215、AB216、AB217或AB218中的任一種（例如AB212或AB216，例如AB216）。在一些實施方式中，參考ADC係與所揭露之ADC（例如，ADL1-D2）包含相同的連接子和相同的剪接調節劑有效載荷但包含替代性抗體（例如，AB200）的ADC。在一些實施方式中，ADC對BCMA（例如，人BCMA）的結合親和力可以藉由例如使用具有高或中等BCMA表現水平的癌細胞的一種或多種結合測定來確定。
在一些實施方式中，與例如包含相同連接子和/或剪接調節劑有效載荷但包含替代性抗體（例如，AB200或其他示例性抗BCMA抗體）的ADC相比，本文揭露之ADC構建體表現出改進的細胞毒性和/或細胞生長抑制活性。在一些實施方式中，與包含相同連接子和/或剪接調節劑有效載荷但包含替代性抗體的ADC相比，所揭露之ADC表現出針對表現BCMA的細胞（例如，NCI-H929和/或OPM2細胞）的增加的效力。在一些實施方式中，所揭露之ADC的活性不依賴於細胞週期。在一些實施方式中，所揭露之ADC保留不依賴於細胞增殖狀態的細胞毒性和/或細胞生長抑制活性。在一些實施方式中，所揭露之ADC可以靶向活躍分裂和休眠的細胞兩者。在一些實施方式中，與替代抗BCMA ADC（例如，包含替代性抗體、連接子和/或有效載荷的抗BCMA ADC，例如AB200-ADL10-MMAF）相比，所揭露之ADC表現出針對休眠細胞（例如，不分裂和/或緩慢分裂的骨髓瘤細胞）的增加的效力。在一些實施方式中，所揭露之ADC不抑制不表現BCMA的細胞（例如，BCMA陰性細胞，例如Jurkat細胞）的生長和/或不殺死它們。在一些實施方式中，所揭露之ADC包含示例性抗BCMA抗體或抗原結合片段、連接子和剪接調節劑有效載荷。在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段係抗體AB212、AB213、AB214、AB215、AB216、AB217或AB218中的任一種（例如AB212或AB216，例如AB216）。在一些實施方式中，參考ADC係與所揭露之ADC包含相同的連接子和相同的剪接調節劑有效載荷但包含替代性抗體（例如，AB200）的ADC。在一些實施方式中，ADC的細胞毒性和/或細胞生長抑制活性可以藉由例如使用具有高或中等BCMA表現水平的癌細胞的體外活性測定來確定。
在一些實施方式中，與例如包含相同連接子和/或剪接調節劑有效載荷但包含替代性抗體（例如，AB200或其他示例性抗BCMA抗體）的ADC相比，本文揭露之ADC構建體表現出改進的體內抗癌活性。在一些實施方式中，與包含相同連接子和/或剪接調節劑有效載荷但包含替代性抗體的ADC相比，所揭露之ADC表現出針對表現BCMA的腫瘤（例如，OPM2和/或MOLP8腫瘤）的增加的腫瘤生長抑制作用。在一些實施方式中，所揭露之ADC包含示例性抗BCMA抗體或抗原結合片段、連接子和剪接調節劑有效載荷。在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段係抗體AB212、AB213、AB214、AB215、AB216、AB217或AB218中的任一種（例如AB212或AB216，例如AB216）。在一些實施方式中，參考ADC係與所揭露之ADC（例如，ADL1-D2）包含相同的連接子和相同的剪接調節劑有效載荷但包含替代性抗體（例如，AB200）的ADC。在一些實施方式中，ADC的體內抗癌活性可以藉由例如在具有高或中等BCMA表現水平的異種移植模型中的活性測定來確定。
在一些實施方式中，本文揭露之ADC構建體表現出治療性ADC所需的特性。在一些實施方式中，該等特性包括但不限於有效藥物負載水平、低聚集水平、穩定性、與未軛合的抗體相當的對表現BCMA的細胞的留存親和力、對表現BCMA的細胞的強細胞毒性、低水平的脫靶細胞殺傷、和/或有效的體內抗癌活性。在一些實施方式中，本文揭露之ADC構建體在以單次劑量投與時表現出體內治療功效。
本揭露的ADC可將有效劑量的細胞毒性劑或細胞生長抑制劑選擇性遞送至癌細胞。在一些實施方式中，所揭露之ADC對表現靶抗原（例如，BCMA）的細胞具有有效的細胞毒性和/或細胞生長抑制活性。在一些實施方式中，ADC的細胞毒性和/或細胞生長抑制活性依賴於細胞中的靶抗原表現。在一些實施方式中，與表現低水平的相同抗原的癌細胞相比，所揭露之ADC在殺傷表現高水平靶抗原的癌細胞方面特別有效。在一些實施方式中，與表現低水平的相同抗原的癌細胞相比，所揭露之ADC在殺傷表現中等水平靶抗原的癌細胞方面特別有效。示例性高表現BCMA的癌細胞包括但不限於人骨髓瘤NCI-H929細胞。示例性中等表現BCMA的癌細胞包括但不限於人骨髓瘤OPM2細胞和人骨髓瘤MOLP8細胞。在一些實施方式中，所揭露之ADC特別有效地殺傷表現靶抗原的癌細胞，同時將脫靶殺傷減至最少。在一些實施方式中，所揭露之ADC不對不表現靶抗原的癌細胞表現出細胞毒性和/或細胞生長抑制作用。
在一些實施方式中，ADC的裂解使剪接調節劑自抗體或抗原結合片段和連接子釋放。在一些實施方式中，連接子和/或剪接調節劑被設計成用於促進旁觀者殺傷（鄰近細胞殺傷）。在一些實施方式中，連接子和/或剪接調節劑被設計成促進在細胞內化以及連接子-剪接調節劑部分和/或單獨的剪接調節劑部分擴散至鄰近細胞之後經由裂解進行的旁觀者殺傷。在一些實施方式中，連接子促進細胞內化。在一些實施方式中，連接子被設計成將細胞外環境中的裂解減至最少並由此降低針對脫靶細胞或組織（例如，非癌細胞或組織）的毒性，同時保持ADC結合靶標細胞或組織和/或對癌組織（該癌組織不表現由ADC的抗體或抗原結合片段所靶向的抗原但環繞表現該抗原的靶標癌組織）的旁觀者殺傷。在一些實施方式中，由ADC裂解產生的藥物部分或藥物部分的分解代謝物被設計成促進被靶細胞或鄰近細胞攝取（即，細胞可滲透的）。此類剪接調節劑部分和分解代謝物可以稱為「旁觀者活躍的（bystander active）」，而細胞滲透性降低的藥物部分或分解代謝物可以稱為「旁觀者不活躍的（bystander inactive）」。
在一些實施方式中，所揭露之ADC還表現出旁觀者殺傷活性。不受理論束縛，在ADC向實性瘤中的滲透受到限制和/或腫瘤細胞中的靶抗原表現具有異質性時，ADC的旁觀者殺傷活性可為特別有益的。在一些實施方式中，本文揭露之ADC表現出相比於單獨藥物部分而言經改善的溶解性和靶細胞滲透性。在一些實施方式中，本文揭露之ADC相比於單獨藥物部分而言表現出改善的細胞毒性。在一些實施方式中，本文揭露之ADC使用當作為單獨藥物評價時表現出較低細胞毒性的藥物部分，但其又意外地優於包含當作為單獨藥物評價時具有較高細胞毒性的其他藥物部分的ADC。在一些實施方式中，相對於用包含不可裂解連接子的ADC進行的可比治療，剪接調節劑的裂解和釋放改善了ADC的細胞毒性。在其他實施方式中，剪接調節劑的裂解和釋放並不是ADC具有所需生物活性所需的。
本文提供了ADC，其包含能夠結合BCMA的抗體或其抗原結合片段（Ab）、剪接調節劑藥物部分（D）以及將Ab共價連接至D的連接子部分（L）。在一些實施方式中，抗體或抗原結合片段可以按高特異性和高親和力結合BCMA。在一些實施方式中，抗體或抗原結合片段在結合後內化至靶細胞中，例如內化至該細胞中的降解隔室中。在一些實施方式中，可以使用在結合靶細胞時內化、經歷降解、並釋放剪接調節劑藥物部分以殺傷癌細胞的ADC。剪接調節劑藥物部分可藉由酶促作用、水解、氧化或任何其他機制自ADC中的抗體和/或連接子部分釋放。
示例性ADC具有式 (I)： Ab-(L-D) p (I) 其中Ab = 抗體或抗原結合片段，L = 連接子部分，D = 剪接調節劑藥物部分，且p = 剪接調節劑藥物部分的數量/抗體或抗原結合片段。
在一些實施方式中，用於所述ADC和組成物中的抗體或抗原結合片段（Ab）係本文揭露之抗BCMA抗體或抗原結合片段。 連接子
在一些實施方式中，本文揭露之ADC中的連接子以足以具有治療有效性的方式具有細胞外穩定性。在一些實施方式中，連接子在細胞外部穩定以使得ADC在存在於細胞外條件（例如，在轉運或遞送至細胞中之前）中時保持完整。在ADC的上下文中使用的術語「完整」意指抗體或抗原結合片段保持連接至藥物部分（例如，剪接調節劑）。如本文所使用，在連接子或包含連接子的ADC的情形下，「穩定」意指當ADC存在於細胞外條件中時，ADC樣本中的不超過20%、不超過約15%、不超過約10%、不超過約5%、不超過約3%、或不超過約1%（或其間任何百分比）的連接子被裂解（或在總體ADC在其他方面不完整的情況下）。在一些實施方式中，與替代性連接子、和/或具有替代性連接子和/或剪接調節劑有效載荷的ADC相比，本文揭露之連接子和/或ADC出奇穩定。在一些實施方式中，本文揭露之ADC可保持完整達超過約48小時、超過60小時、超過約72小時、超過約84小時或超過約96小時。
可例如藉由在血漿中包括ADC達預先確定的時間段（例如，2、4、6、8、16、24、48或72小時）且隨後定量血漿中存在的游離藥物部分的量來確定連接子在細胞外是否穩定。穩定性可以讓ADC有時間定位至靶標癌細胞並且防止藥物部分過早釋放，該過早釋放可能因無差別地損害正常細胞和癌細胞兩者而降低ADC的治療指數。在一些實施方式中，連接子在靶細胞外部穩定且一旦處於細胞內部則自ADC釋放藥物部分，使得藥物可結合其靶標（例如，結合至SF3b剪接體複合物）。因此，在一些實施方式中，有效連接子將：(i) 維持抗體或抗原結合片段的特異性結合特性；(ii) 允許經由穩定連接至抗體或抗原結合片段而遞送（例如，細胞內遞送）藥物部分；(iii) 保持穩定和完整性直至ADC已經轉運或遞送至靶位點；以及 (iv) 允許裂解或替代性釋放機制之後的藥物部分的治療作用，例如，細胞毒性作用。
連接子可能影響ADC的物理-化學特性。由於許多細胞毒性劑本質上具疏水性，故將其連接至具有額外疏水性部分的抗體可能引起聚集。ADC聚集物不可溶且通常限制抗體上可實現的藥物負載，這可能不利地影響ADC的效力。通常，生物製品的蛋白質聚集物還與免疫原性增加相關。如下文所示，本文揭露之連接子使ADC具有低聚集水平以及所需藥物負載水平。
國際申請案號PCT/US2019/035015（公開案號WO 2019/232449）中所述之連接子可與本文揭露之ADC起使用。針對所有示例性連接子和連接子與抗體的連接點，將國際申請案號PCT/US2019/035015（公開案號WO 2019/232449）藉由引用併入本文。
連接子可為「可裂解的」或「不可裂解的」（Ducry和Stump (2010) Bioconjugate Chem.[生物軛合化學] 21:5-13）。可裂解連接子被設計成當經受某些環境因素（例如當內化至靶細胞中）時釋放出藥物部分（例如剪接調節劑），而不可裂解連接子通常依賴於抗體或抗原結合片段本身的降解。
在一些實施方式中，連接子為不可裂解連接子。在一些實施方式中，ADC的剪接調節劑藥物部分藉由抗體或抗原結合片段的降解而釋放。在經靶細胞內化且在靶細胞內降解時，不可裂解連接子傾向於保持與抗體的至少一個胺基酸和藥物共價締合。本文描述了多種示例性不可裂解連接子，且其他不可裂解連接子為本領域中已知的。示例性不可裂解連接子可包含硫醚、環己基、N-琥珀醯亞胺基4-(N-馬來醯亞胺基甲基)環己烷-1甲酸酯（SMCC）或N-羥基琥珀醯亞胺（NHS）、一個或多個聚乙二醇（PEG）部分（例如，1、2、3、4、5或6個PEG部分）或一個或多個烷基部分（例如，1、2、3、4、5或6個烷基部分）。
在一些其他實施方式中，連接子為可裂解連接子。可裂解連接子係指包含可裂解部分的任何連接子。如本文所使用，術語「可裂解部分」係指可被裂解的任何化學鍵。合適的可裂解化學鍵在本領域中眾所周知且包括但不限於酸不穩定性鍵、蛋白酶/肽酶不穩定性鍵、光不穩定性鍵、二硫鍵和酯酶不穩定性鍵。包含可裂解部分的連接子可經由在該連接子中的特定位點處裂解而允許剪接調節劑藥物部分自ADC釋放。
在一些實施方式中，連接子可在細胞內條件下裂解，連接子的裂解使剪接調節劑藥物部分在胞內環境中充分地從抗體或抗原結合片段釋放，以激活藥物和/或使藥物在治療上有效。在一些實施方式中，直至ADC進入表現對ADC中的抗體或抗原結合片段具有特異性的抗原的細胞，剪接調節劑藥物部分才從抗體或抗原結合片段裂解，且在進入細胞後，該剪接調節劑藥物部分從該抗體或抗原結合片段裂解。在一些實施方式中，該連接子包含可裂解部分，該可裂解部分被固定放置使得連接子的任何部分或抗體或抗原結合片段在裂解後都不會與剪接調節劑藥物部分保持結合。示例性可裂解連接子包括酸不穩定性連接子、蛋白酶/肽酶敏感性連接子、光不穩定性連接子、含二甲基連接子、含二硫化物連接子或含磺醯胺連接子。
在一些實施方式中，連接子為pH敏感性連接子，且在某些pH值下對水解敏感。通常，pH敏感性連接子可在酸性條件下水解。該裂解策略一般在胞內體胞內區室（pH約5-6）和溶酶體胞內區室（pH約4.8）中利用相較於細胞溶質（pH約7.4）較低的pH，以觸發諸如腙等連接子中的酸不穩定性基團的水解（Jain等人 (2015) Pharm Res [藥學研究] 32:3526-40）。在一些實施方式中，連接子為酸不穩定性連接子和/或可水解連接子。例如，可使用可在溶酶體中水解且含有酸不穩定性基團的酸不穩定性連接子（例如，腙、半卡巴腙、硫半卡巴腙、順式烏頭酸醯胺、原酸酯、縮醛、縮酮或其類似物）。參見，例如，美國專利號5,122,368；5,824,805；5,622,929；Dubowchik和Walker (1999) Pharm Therapeutics [藥理學和治療學] 83:67-123；Neville等人 (1989) Biol Chem.[生物化學] 264:14653-61。這類連接子在中性pH條件（如血液中的pH條件）下相對穩定，但在低於pH 5.5或5.0（溶酶體的近似pH）下不穩定。在一些實施方式中，可水解連接子為硫醚連接子（例如，經由醯腙鍵連接至治療劑的硫醚）（參見，例如，美國專利號5,622,929）。
在一些實施方式中，連接子可在還原條件下裂解。在一些實施方式中，連接子可在諸如麩胱甘肽 或二硫蘇糖醇等還原劑存在下裂解。在一些實施方式中，連接子為可裂解二硫化物連接子或可裂解磺醯胺連接子。
在一些實施方式中，連接子為可裂解二硫化物連接子。各種二硫化物連接子為本領域中已知的，包括例如可使用SATA（N-琥珀醯亞胺基-5-乙醯基硫代乙酸酯）、SPDP（N-琥珀醯亞胺基-3-(2-吡啶基二硫代)丙酸酯）、SPDB（N-琥珀醯亞胺基-3-(2-吡啶基二硫代)丁酸酯）和SMPT（N-琥珀醯亞胺基氧基羰基-α-甲基-α-(2-吡啶基-二硫代)甲苯）、SPDB和SMPT形成的二硫化物連接子。參見，例如，Thorpe等人 (1987) Cancer Res.[癌症研究] 47:5924-31；Wawrzynczak等人, 在Immunoconjugates: Antibody Conjugates in Radioimagery and Therapy of Cancer [免疫軛合物：放射成像和癌症治療中的抗體軛合物]（C.W. Vogel編輯, Oxford U. Press [牛津大學出版社], 1987）。還參見美國專利號4,880,935。通常使用二硫化物連接子來開發胞內硫醇的豐度，這可促進其二硫鍵的裂解。最大豐度胞內硫醇、減少的麩胱甘肽 的細胞內濃度通常在1-10 nM範圍內，比血液中最豐富的低分子硫醇（即，半胱胺酸）的細胞內濃度約5 µM高約1,000倍（Goldmacher等人, 在Cancer Drug Discovery and Development: Antibody-Drug Conjugates and Immunotoxins [癌症藥物的發現和開發：抗體-藥物軛合物和免疫毒素]（G. L. Phillips編輯, Springer, 2013）)。蛋白質二硫化物異構酶家族的胞內酶還可促進二硫化物連接子的胞內裂解。如本文所使用，可裂解二硫化物連接子係指包含可裂解二硫化物部分的任何連接子。術語「可裂解二硫化物部分」係指可例如被硫醇或酶裂解和/或還原的二硫鍵。
在一些實施方式中，連接子為可裂解磺醯胺連接子。如本文所使用，可裂解磺醯胺連接子係指包含可裂解磺醯胺部分的任何連接子。術語「可裂解磺醯胺部分」係指磺醯胺基團，即連接至胺基的磺醯基，其中硫-氮鍵可經裂解。
在一些實施方式中，連接子可為用於經由分支的多官能連接子部分將超過一個藥物部分共價連接至抗體或抗原結合片段的樹突型連接子。參見，例如，Sun等人 (2002) Bioorg Med Chem Lett. [生物有機化學與藥物化學快報]12:2213-5；Sun等人 (2003) Bioorg Med Chem.[生物有機化學與藥物化學] 11:1761-8。樹突狀連接子可增加藥物與抗體的莫耳比，即藥物負載量，其與ADC的效力有關。因此，在抗體或抗原結合片段只具有一個反應性半胱胺酸硫醇基團的情況下，例如多個剪接調節劑藥物部分可經由樹突狀連接子連接。在一些實施方式中，連接子部分或連接子-藥物部分可經由經還原的二硫橋連化學物質或限制性離胺酸利用技術連接至抗體或抗原結合片段。參見，例如，國際公開案號WO 2013/173391和WO 2013/173393。
在一些實施方式中，連接子可被胞內環境中（例如，溶酶體或胞內體或小凹內）存在的裂解劑（例如，酶）裂解。連接子可為例如被胞內肽酶或蛋白酶（包括但不限於溶酶體或胞內體蛋白酶）裂解的肽連接子。在一些實施方式中，連接子包含可裂解肽部分。在一些實施方式中，連接子包含可裂解葡糖苷酸部分。
在一些實施方式中，連接子為可裂解肽連接子。如本文所使用，可裂解肽連接子係指包含可裂解肽部分的任何連接子。術語「可裂解肽部分」係指可被胞內環境中存在的藥劑裂解的任何化學鍵連接的胺基酸（天然或合成胺基酸衍生物）。在一些實施方式中，可裂解肽部分可被酶裂解。例如，連接子可以包含纈胺酸-丙胺酸（Val-Ala）序列、或纈胺酸-瓜胺酸（Val-Cit）序列，該等序列可被肽酶（如組織蛋白酶，例如組織蛋白酶B）裂解。在一些實施方式中，連接子可以包含丙胺酸-丙胺酸-天冬胺酸（Ala-Ala-Asp）序列。在一些實施方式中，連接子可以包含麩胺酸-纈胺酸-瓜胺酸（Glu-Val-Cit）序列。在一些實施方式中，連接子為酶可裂解連接子且連接子中的可裂解肽部分可被酶裂解。在一些實施方式中，可裂解肽部分可被溶酶體酶（例如，組織蛋白酶）裂解。在一些實施方式中，連接子為組織蛋白酶可裂解連接子。在一些實施方式中，連接子中的可裂解肽部分可被溶酶體半胱胺酸組織蛋白酶（如組織蛋白酶B、C、F、H、K、L、O、S、V、X或W）裂解。在一些實施方式中，可裂解肽部分可被組織蛋白酶B裂解。可被組織蛋白酶B裂解的示例性二肽為纈胺酸-瓜胺酸（Val-Cit）（Dubowchik等人 (2002) Bioconjugate Chem.[生物軛合化學] 13:855-69）。
在一些實施方式中，連接子或連接子中的可裂解肽部分包含胺基酸單元。在一些實施方式中，該胺基酸單元使連接子可被蛋白酶裂解，由此在暴露於一種或多種細胞內蛋白酶（如一種或多種溶酶體酶）時，促進剪接調節劑藥物部分從該ADC釋放（Doronina等人 (2003) Nat Biotechnol.[自然生物技術] 21:778-84；Dubowchik和Walker (1999) Pharm Therapeutics [藥理學和治療學] 83:67-123）。示例性胺基酸單元包括但不限於二肽、三肽、四肽和五肽。示例性二肽包括但不限於纈胺酸-丙胺酸（Val-Ala）、纈胺酸-瓜胺酸（Val-Cit）、丙胺酸-天冬醯胺（Ala-Asn）、丙胺酸-苯丙胺酸（Ala-Phe）、苯丙胺酸-離胺酸（Phe-Lys）、丙胺酸-離胺酸（Ala-Lys）、丙胺酸-纈胺酸（Ala-Val）、纈胺酸-離胺酸（Val-Lys）、離胺酸-離胺酸（Lys-Lys）、苯丙胺酸-瓜胺酸（Phe-Cit）、白胺酸-瓜胺酸（Leu-Cit）、異白胺酸-瓜胺酸（Ile-Cit）、色胺酸-瓜胺酸（Trp-Cit）和苯丙胺酸-丙胺酸（Phe-Ala）。示例性三肽包括但不限於丙胺酸-丙胺酸-天冬醯胺（Ala-Ala-Asn）、甘胺酸-纈胺酸-瓜胺酸（Gly-Val-Cit）、甘胺酸-甘胺酸-甘胺酸（Gly-Gly-Gly）、苯丙胺酸-苯丙胺酸-離胺酸（Phe-Phe-Lys）、丙胺酸-丙胺酸-天冬胺酸（Ala-Ala-Asp）、麩胺酸-纈胺酸-瓜胺酸（Glu-Val-Cit）（參見Anami等人 (2018) Nat Comm.[自然通訊]9:2512）和甘胺酸-苯丙胺酸-離胺酸（Gly-Phe-Lys）。其他示例性胺基酸單元包括但不限於如例如美國專利號6,214,345中所述之Gly-Phe-Gly-Gly（SEQ ID NO:125）、Gly-Phe-Leu-Gly（SEQ ID NO:126）、Ala-Leu-Ala-Leu（SEQ ID NO:127）、Phe-N9 -甲苯磺醯基-Arg和Phe-N9 -硝基-Arg。在一些實施方式中，連接子中的胺基酸單元包含Val-Ala。在一些實施方式中，連接子中的胺基酸單元包含Val-Cit。在一些實施方式中，連接子中的胺基酸單元包含Ala-Ala-Asp。在一些實施方式中，連接子中的胺基酸單元包含Glu-Val-Cit。胺基酸單元可包含天然存在的胺基酸殘基和/或次級胺基酸和/或非天然存在的胺基酸類似物（如瓜胺酸）。胺基酸單元可針對特定酶（例如，腫瘤相關蛋白酶、溶酶體蛋白酶（如組織蛋白酶B、C、D或S）或纖溶酶蛋白酶）。
在一些實施方式中，連接子為可裂解葡糖苷酸連接子。如本文所使用，可裂解葡糖苷酸連接子係指包含可裂解葡糖苷酸部分的任何連接子。在一些實施方式中，可裂解葡糖苷酸部分可被酶裂解。示例性可裂解葡糖苷酸連接子包含以下結構：
Figure 02_image003
術語「可裂解葡糖苷酸部分」係指可被具有葡糖苷酸酶活性的藥劑裂解的糖苷鍵。在一些實施方式中，可裂解葡糖苷酸部分可被葡糖苷酸酶裂解。在一些實施方式中，可裂解葡糖苷酸部分可被β-葡糖苷酸酶裂解。在一些實施方式中，可裂解的葡糖苷酸部分或連接子包含β-葡糖苷酸，即，可以被β-葡糖苷酸酶裂解的糖苷鍵。β-葡糖苷酸酶為催化具有β-組態的葡糖苷酸的糖苷鍵的水解的UDP-葡糖醛酸基轉移酶。
在一些實施方式中，本文揭露之ADC包含可被酶裂解的連接子中的可裂解β-葡糖苷酸部分。在一些實施方式中，連接子中的可裂解β-葡糖苷酸部分可被溶酶體酶（例如，β-葡糖苷酸酶）裂解。在一些實施方式中，連接子為β-葡糖苷酸酶可裂解連接子。在一些實施方式中，連接子中的可裂解β-葡糖苷酸部分允許在ADC內化之後由β-葡糖苷酸酶裂解連接子，由此促進細胞環境中藥物部分自ADC的釋放。
在一些實施方式中，本文揭露之ADC中的連接子包含馬來醯亞胺部分。如本文所使用，術語「Mal」或「馬來醯亞胺部分」意指含有馬來醯亞胺基團且可與硫氫基（例如抗體或抗原結合片段上的半胱胺酸殘基的硫氫基）反應的化合物。可與硫氫基（硫醇）反應的其他官能基包括但不限於碘乙醯胺、溴乙醯胺、乙烯基吡啶、二硫化物、吡啶基二硫化物、異氰酸酯和異硫氰酸酯。在一些實施方式中，馬來醯亞胺部分包含馬來醯亞胺基己醯基（MC）。在一些實施方式中，馬來醯亞胺部分與抗體或抗原結合片段上的半胱胺酸殘基反應。在一些實施方式中，馬來醯亞胺部分經由抗體或抗原結合片段上的半胱胺酸殘基連接至該抗體或抗原結合片段。
在一些實施方式中，連接子包含馬來醯亞胺部分和可裂解肽部分。在一些實施方式中，可裂解肽部分包含胺基酸單元。在一些實施方式中，可裂解肽部分或胺基酸單元包含Val-Cit。在一些實施方式中，可裂解肽部分或胺基酸單元包含Val-Ala。在一些實施方式中，可裂解肽部分或胺基酸單元包含Ala-Ala-Asp。在一些實施方式中，可裂解肽部分或胺基酸單元包含Glu-Val-Cit。在一些實施方式中，連接子包含馬來醯亞胺部分和可裂解葡糖苷酸部分。在一些實施方式中，可裂解葡糖苷酸部分包含β-葡糖苷酸。
在一些實施方式中，本文揭露之ADC中的連接子可以包含至少一個間隔子單元，該間隔子單元將抗體或抗原結合片段接合至藥物部分（例如，剪接調節劑藥物部分）。在一些實施方式中，位於抗體或抗原結合片段與可裂解部分之間的間隔子單元當存在時將連接子中的裂解位點（例如，可裂解肽部分）接合至抗體或抗原結合片段。在一些實施方式中，位於藥物部分與可裂解部分之間的間隔子單元當存在時將連接子中的裂解位點（例如，可裂解肽部分或可裂解葡糖苷酸）接合至藥物部分。在一些實施方式中，不存在裂解位點，且使用間隔子單元來將抗體或抗原結合片段連接至藥物部分。
在一些實施方式中，連接子和/或連接子中的間隔子單元實質上具有親水性。親水性連接子可用於降低可經由多重抗藥性（MDR）轉運子或功能上類似的轉運子自抗藥性癌細胞中泵送出藥物的程度。在一些實施方式中，親水性連接子可包括一個或多個聚乙二醇（PEG）部分，例如1、2、3、4、5或6個PEG部分。
在一些實施方式中，連接子中的間隔子單元包含至少一個PEG部分。在一些實施方式中，PEG部分或間隔子單元包含一個或多個-(PEG) m -，且m 為1至10的整數（即，m 可為1、2、3、4、5、6、7、8、9或10）。在一些實施方式中，m 在1至10範圍內；在2至8範圍內；在2至6範圍內；在2至5範圍內；在2至4範圍內；或在2至3範圍內。在一些實施方式中，m 為2。在一些實施方式中，PEG部分或間隔子單元包含(PEG)2 、(PEG)3 、(PEG)4 、(PEG)5 、(PEG)6 、(PEG)7 、(PEG)8 、(PEG)9 或(PEG)10 。在一些實施方式中，PEG部分或間隔子單元包含(PEG)2 。
在一些實施方式中，連接子中的間隔子單元包含烷基部分。在一些實施方式中，烷基部分或間隔子單元包含一個或多個-(CH2 ) n -，且n 為1至10的整數（即，n 可為1、2、3、4、5、6、7、8、9或10）。在一些實施方式中，n 在1至10範圍內；在2至8範圍內；在2至6範圍內；在2至5範圍內；在2至4範圍內；或在2至3範圍內。在一些實施方式中，n 為2。在一些實施方式中，n 為5。在一些實施方式中，n 為6。在一些實施方式中，間隔子單元包含(CH2 )2 、(CH2 )3 、(CH2 )4 、(CH2 )5 、(CH2 )6 、(CH2 )7 、(CH2 )8 、(CH2 )9 或(CH2 )10 。在一些實施方式中，烷基部分或間隔子單元包含(CH2 )2 （「Et」）。在一些實施方式中，烷基部分或間隔子單元包含(CH2 )6 （「Hex」）。在一些實施方式中，烷基部分或間隔子單元包含(CH2 )2 -O-(CH2 )2 （「Et-O-Et」）。
可使用間隔子單元例如以將抗體或抗原結合片段直接地或間接地連接至藥物部分。在一些實施方式中，間隔子單元將抗體或抗原結合片段直接地連接至剪接調節劑藥物部分。在一些實施方式中，抗體或抗原結合片段和剪接調節劑藥物部分經由包含一個或多個PEG部分（例如(PEG)2 ）或一個或多個烷基部分（例如(CH2 )2 、(CH2 )6 或(CH2 )2 -O-(CH2 )2 ）的間隔子單元連接。在一些實施方式中，間隔子單元將抗體或抗原結合片段間接地連接至剪接調節劑藥物部分。在一些實施方式中，間隔子單元經由可裂解部分（例如可裂解肽或可裂解β-葡糖苷酸）和/或用於將間隔子單元接合至抗體或抗原結合片段的連接部分（例如馬來醯亞胺部分）將抗體或抗原結合片段間接地連接至剪接調節劑藥物部分。
在各種實施方式中，間隔子單元經由馬來醯亞胺部分連接至抗體或抗原結合片段（即，抗體或抗原結合片段）。經由馬來醯亞胺部分連接至抗體或抗原結合片段的間隔子單元在本文中稱為「Mal-間隔子單元」。在一些實施方式中，Mal-間隔子單元包含PEG部分。在一些實施方式中，Mal-間隔子單元包含烷基部分。在一些實施方式中，Mal-間隔子單元包含馬來醯亞胺基己醯基（MC）。
在一些實施方式中，連接子包含以下結構：Mal-間隔子單元。在一些實施方式中，Mal-間隔子單元或連接子包含MC。在一些實施方式中，連接子包含以下結構：MC。在一些實施方式中，連接子包含以下結構：Mal-(CH2 )2 （「Mal-Et」）。在一些實施方式中，連接子包含以下結構：Mal-(CH2 )6 （「Mal-Hex」）。在一些實施方式中，連接子包含以下結構：Mal-(CH2 )2 -O-(CH2 )2 （「Mal-Et-O-Et」）。在一些實施方式中，連接子包含以下結構：Mal-(PEG)2 。在一些實施方式中，連接子包含以下結構：Mal-(PEG)2 -CO。
在一些實施方式中，連接子包含Mal-間隔子單元和可裂解肽部分。在一些實施方式中，可裂解肽部分包含胺基酸單元。在一些實施方式中，可裂解肽部分或胺基酸單元包含Val-Cit、Val-Ala、Ala-Ala-Asp或Glu-Val-Cit。在一些實施方式中，可裂解肽部分或胺基酸單元包含Val-Cit。在一些實施方式中，可裂解肽部分或胺基酸單元包含Val-Ala。在一些實施方式中，可裂解肽部分或胺基酸單元包含Ala-Ala-Asp。在一些實施方式中，可裂解肽部分或胺基酸單元包含Glu-Val-Cit。在一些實施方式中，連接子包含Mal-間隔子單元和可裂解葡糖苷酸部分。在一些實施方式中，可裂解葡糖苷酸部分包含β-葡糖苷酸。
在一些實施方式中，馬來醯亞胺部分或Mal-間隔子單元將抗體或抗原結合片段連接至連接子中的可裂解部分。在一些實施方式中，連接子中的可裂解部分包含可裂解肽部分。在一些實施方式中，可裂解肽部分包含胺基酸單元。在一些實施方式中，可裂解肽部分或胺基酸單元包含Val-Cit、Val-Ala、Ala-Ala-Asp或Glu-Val-Cit。在一些實施方式中，連接子中的可裂解部分包含可裂解葡糖苷酸部分。在一些實施方式中，可裂解葡糖苷酸部分包含β-葡糖苷酸。
在一些實施方式中，Mal-間隔子單元將抗體或抗原結合片段連接至可裂解肽部分。在一些實施方式中，連接子包含Mal-間隔子單元-肽。
在一些實施方式中，連接子包含以下結構：Mal-間隔子單元-Val-Cit。在一些實施方式中，Mal-間隔子單元包含MC。在一些實施方式中，連接子包含MC-Val-Cit。在一些實施方式中，連接子包含MC-(PEG)2 -Val-Cit。
在一些實施方式中，連接子包含以下結構：Mal-間隔子單元-Val-Ala。在一些實施方式中，Mal-間隔子單元包含MC。在一些實施方式中，連接子包含MC-Val-Ala。
在一些實施方式中，連接子包含以下結構：Mal-間隔子單元-Ala-Ala-Asp。在一些實施方式中，Mal-間隔子單元包含MC。在一些實施方式中，連接子包含MC-Ala-Ala-Asp。
在一些實施方式中，連接子包含以下結構：Mal-間隔子單元-Glu-Val-Cit。在一些實施方式中，Mal-間隔子單元包含MC。在一些實施方式中，連接子包含MC-Glu-Val-Cit。
在一些實施方式中，Mal-間隔子單元將抗體或抗原結合片段連接至可裂解葡糖苷酸部分。在一些實施方式中，連接子包含以下結構：Mal-間隔子單元-β-葡糖苷酸。在一些實施方式中，Mal-間隔子單元包含MC。在一些實施方式中，連接子包含MC-β-葡糖苷酸。
在一些實施方式中，連接子中的可裂解部分直接連接至剪接調節劑藥物部分。在其他實施方式中，間隔子單元將連接子中的可裂解部分連接至剪接調節劑藥物部分。在一些實施方式中，剪接調節劑藉由間隔子單元連接至連接子中的可裂解部分。
間隔子單元可為「自消融型」或「非自消融型」間隔子單元。「非自消融型」間隔子單元係在連接子裂解時間隔子單元的一部分或全部仍結合剪接調節劑藥物部分的間隔子單元。非自消融型間隔子單元的實例包括但不限於甘胺酸間隔子單元和甘胺酸-甘胺酸間隔子單元。非自消融型間隔子單元最終可隨時間推移而降解，但在細胞條件下不會容易地完全釋放所連接的天然藥物部分。「自消融型」間隔子單元允許在胞內條件下釋放天然藥物部分。「天然藥物」或「天然藥物部分」為在間隔子單元裂解/降解之後不保留間隔子單元的部分或其他化學修飾的天然藥物或天然藥物部分。
自消融型化學物質為本領域中已知的且可針對所揭露之ADC容易地選擇。在一些實施方式中，將連接子中的可裂解部分連接至剪接調節劑藥物部分的間隔子單元係自消融型的，且在細胞內條件下裂解可裂解部分的同時或之前/之後不久經歷自消融。在一些實施方式中，軛合物的裂解使剪接調節劑自抗體或抗原結合片段和連接子釋放。
在一些實施方式中，將連接子中的可裂解部分連接至剪接調節劑的間隔子單元係自消融型的。在某些實施方式中，剪接調節劑藉由自消融型間隔子單元連接至連接子中的可裂解部分，該可裂解部分包含Val-Cit，且MC將該可裂解部分接合至抗體或抗原結合片段。在某些實施方式中，剪接調節劑藉由自消融型間隔子單元連接至連接子中的可裂解部分，該可裂解部分包含Val-Cit，且MC-(PEG)2 將該可裂解部分接合至抗體或抗原結合片段。在某些實施方式中，剪接調節劑藉由自消融型間隔子單元連接至連接子中的可裂解部分，該可裂解部分包含Val-Ala，且MC將該可裂解部分接合至抗體或抗原結合片段。在某些實施方式中，剪接調節劑藉由自消融型間隔子單元連接至連接子中的可裂解部分，該可裂解部分包含Ala-Ala-Asp，且MC將該可裂解部分接合至抗體或抗原結合片段。在某些實施方式中，剪接調節劑藉由自消融型間隔子單元連接至連接子中的可裂解部分，該可裂解部分包含Glu-Val-Cit，且MC將該可裂解部分接合至抗體或抗原結合片段。在某些實施方式中，剪接調節劑藉由自消融型間隔子單元連接至連接子中的可裂解部分，該可裂解部分包含β-葡糖苷酸，且MC將該可裂解部分接合至抗體或抗原結合片段。
在一些實施方式中，將連接子中的可裂解部分連接至剪接調節劑的間隔子單元（例如，自消融型間隔子單元）包含對胺基苄基單元。在一些實施方式中，對胺基苯甲醇（pABOH）經由醯胺鍵連接至連接子中的胺基酸單元或其他可裂解部分，且在pABOH與藥物部分之間形成胺基甲酸酯、胺基甲酸甲酯或碳酸酯（Hamann等人 (2005) Expert Opin Ther Patents.[治療劑專利專家評論]15:1087-103）。
在一些實施方式中，將連接子中的可裂解部分連接至剪接調節劑的間隔子單元（例如，自消融型間隔子單元）係或包含對胺基苄氧基羰基（pABC）。不受理論束縛，認為pABC的自消融關於自發的1,6-消除反應（Jain等人 (2015) Pharm Res.[藥物研究] 32:3526-40）。在一些實施方式中，將連接子中的可裂解部分連接至剪接調節劑的間隔子單元（例如，自消融型間隔子單元）係或包含對胺基苄基（pAB）。在一些實施方式中，pAB的自消融關於自發的1,6-消除反應。
在各種實施方式中，自消融型間隔子單元將連接子中的可裂解部分連接至剪接調節劑。在一些實施方式中，連接子中的自消融型間隔子單元包含對胺基苄基單元。
在一些實施方式中，連接子中的自消融型間隔子單元包含pABC或由其組成。在一些實施方式中，pABC將連接子中的可裂解部分連接至剪接調節劑。在一些實施方式中，pABC在可裂解部分裂解後經歷自消融，且剪接調節劑以其天然、活性形式從ADC釋放。
在一些實施方式中，所揭露之ADC中使用的pABC的結構顯示於下：
Figure 02_image005
在一些實施方式中，連接子中的可裂解部分包含可裂解肽部分。在一些實施方式中，可裂解肽部分包含胺基酸單元。在一些實施方式中，連接子包含胺基酸單元-pABC。在一些實施方式中，可裂解肽部分或胺基酸單元包含Val-Cit、Val-Ala、Ala-Ala-Asp或Glu-Val-Cit。在一些實施方式中，連接子包含Val-Cit-pABC。在一些實施方式中，連接子包含Val-Ala-pABC。在一些實施方式中，連接子包含Ala-Ala-Asp-pABC。在一些實施方式中，連接子包含Glu-Val-Cit-pABC。在一些實施方式中，連接子中的可裂解部分包含可裂解葡糖苷酸部分。在一些實施方式中，可裂解葡糖苷酸部分包含β-葡糖苷酸。在一些實施方式中，連接子包含β-葡糖苷酸-pABC。
在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段經由連接子軛合至剪接調節劑藥物部分，其中該連接子包含Mal-間隔子單元（例如，MC、MC-(PEG)2 ）、可裂解胺基酸單元和pABC。在一些實施方式中，間隔子單元包含PEG部分。在一些實施方式中，Mal-間隔子單元包含MC。在一些實施方式中，可裂解連接子包含Mal-間隔子單元-胺基酸單元-pABC。在一些實施方式中，可裂解連接子包含MC-胺基酸單元-pABC。在一些實施方式中，可裂解連接子包含MC-Val-Cit-pABC、MC-Val-Ala-pABC、MC-Ala-Ala-Asp-pABC、MC-Glu-Val-Cit-pABC或MC-(PEG)2 -Val-Cit-pABC。在一些實施方式中，可裂解連接子包含MC-Val-Cit-pABC。在一些實施方式中，可裂解連接子包含MC-Val-Ala-pABC。在一些實施方式中，可裂解連接子包含MC-Ala-Ala-Asp-pABC。在一些實施方式中，可裂解連接子包含MC-Glu-Val-Cit-pABC。在一些實施方式中，可裂解連接子包含MC-(PEG)2 -Val-Cit-pABC。
在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段經由連接子軛合至剪接調節劑藥物部分，其中該連接子包含Mal-間隔子單元（例如MC）、可裂解β-葡糖苷酸和pABC。在一些實施方式中，Mal-間隔子單元包含MC。在一些實施方式中，可裂解連接子包含Mal-間隔子單元-β-葡糖苷酸-pABC。在一些實施方式中，可裂解連接子包含MC-β-葡糖苷酸-pABC。
在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段藉由包含MC-Val-Cit-pABC的連接子接合至剪接調節劑。在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段藉由包含MC-Val-Ala-pABC的連接子接合至剪接調節劑。在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段藉由包含MC-Ala-Ala-Asp-pABC的連接子接合至剪接調節劑。在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段藉由包含MC-Glu-Val-Cit-pABC的連接子接合至剪接調節劑。在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段藉由包含MC-(PEG)2 -Val-Cit-pABC的連接子接合至剪接調節劑。在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段藉由包含MC-β-葡糖苷酸-pABC的連接子接合至剪接調節劑。
在一些實施方式中，連接子中的自消融型間隔子單元包含對胺基苄基（pAB）或由其組成。在一些實施方式中，pAB將連接子中的可裂解部分連接至剪接調節劑。在一些實施方式中，pAB在可裂解部分裂解後經歷自消融，且剪接調節劑以其天然、活性形式從ADC釋放。
在一些實施方式中，所揭露之ADC中使用的pAB的結構顯示於下：
Figure 02_image007
在一些實施方式中，連接子中的可裂解部分包含可裂解肽部分。在一些實施方式中，可裂解肽部分包含胺基酸單元。在一些實施方式中，連接子包含胺基酸單元-pAB。在一些實施方式中，可裂解肽部分或胺基酸單元包含Val-Cit、Val-Ala、Ala-Ala-Asp或Glu-Val-Cit。在一些實施方式中，連接子包含Val-Cit-pAB。在一些實施方式中，連接子包含Val-Ala-pAB。在一些實施方式中，連接子包含Ala-Ala-Asp-pAB。在一些實施方式中，連接子包含Glu-Val-Cit-pAB。在一些實施方式中，連接子中的可裂解部分包含可裂解葡糖苷酸部分。在一些實施方式中，可裂解葡糖苷酸部分包含β-葡糖苷酸。在一些實施方式中，連接子包含β-葡糖苷酸-pAB。
在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段經由連接子軛合至剪接調節劑藥物部分，其中該連接子包含Mal-間隔子單元（例如，MC、MC-(PEG)2 ）、可裂解胺基酸單元和pAB。在一些實施方式中，間隔子單元包含PEG部分。在一些實施方式中，Mal-間隔子單元包含MC。在一些實施方式中，可裂解連接子包含Mal-間隔子單元-胺基酸單元-pAB。在一些實施方式中，可裂解連接子包含MC-Val-Cit-pAB、MC-Val-Ala-pAB、MC-Ala-Ala-Asp-pAB、MC-Glu-Val-Cit-pAB或MC-(PEG)2 -Val-Cit-pAB。在一些實施方式中，可裂解連接子包含MC-Val-Cit-pAB。在一些實施方式中，可裂解連接子包含MC-Val-Ala-pAB。在一些實施方式中，可裂解連接子包含MC-Ala-Ala-Asp-pAB。在一些實施方式中，可裂解連接子包含MC-Glu-Val-Cit-pAB。在一些實施方式中，可裂解連接子包含MC-(PEG)2 -Val-Cit-pAB。
在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段經由連接子軛合至剪接調節劑藥物部分，其中該連接子包含Mal-間隔子單元（例如MC）、可裂解β-葡糖苷酸和pAB。在一些實施方式中，Mal-間隔子單元包含MC。在一些實施方式中，可裂解連接子包含Mal-間隔子單元-β-葡糖苷酸-pAB。在一些實施方式中，可裂解連接子包含MC-β-葡糖苷酸-pAB。
在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段藉由包含MC-Val-Cit-pAB的連接子接合至剪接調節劑。在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段藉由包含MC-Val-Ala-pAB的連接子接合至剪接調節劑。在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段藉由包含MC-Ala-Ala-Asp-pAB的連接子接合至剪接調節劑。在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段藉由包含MC-Glu-Val-Cit-pAB的連接子接合至剪接調節劑。在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段藉由包含MC-(PEG)2 -Val-Cit-pAB的連接子接合至剪接調節劑。在一些實施方式中，抗BCMA抗體或抗原結合片段藉由包含MC-β-葡糖苷酸-pAB的連接子接合至剪接調節劑。
在一些實施方式中，剪接調節劑經由連接子中的Mal-間隔子單元接合至抗體或抗原結合片段，該連接子接合至Val-Cit可裂解部分和pABC或pAB自消融型間隔子單元。在一些其他實施方式中，剪接調節劑經由連接子中的Mal-間隔子單元接合至抗體或抗原結合片段，該連接子接合至Val-Ala可裂解部分和pABC或pAB自消融型間隔子單元。在一些其他實施方式中，剪接調節劑經由連接子中的Mal-間隔子單元接合至抗體或抗原結合片段，該連接子接合至Ala-Ala-Asp可裂解部分和pABC或pAB自消融型間隔子單元。在一些其他實施方式中，剪接調節劑經由連接子中的Mal-間隔子單元接合至抗體或抗原結合片段，該連接子接合至Glu-Val-Cit可裂解部分和pABC或pAB自消融型間隔子單元。在一些其他實施方式中，剪接調節劑經由連接子中的Mal-間隔子單元接合至抗體或抗原結合片段，該連接子接合至β-葡糖苷酸可裂解部分和pABC或pAB自消融型間隔子單元。在一些實施方式中，間隔子單元包含PEG部分。在一些實施方式中，Mal-間隔子單元包含MC。在一些實施方式中，Mal-間隔子單元包含MC和PEG部分。在一些實施方式中，Mal-間隔子單元包含MC-(PEG) m -，且m 為1至10的整數（即，m可為1、2、3、4、5、6、7、8、9或10）。在一些實施方式中，Mal-間隔子單元包含MC-(PEG)2 。
在一些其他實施方式中，剪接調節劑經由連接子中的Mal-間隔子單元接合至抗體或抗原結合片段，該連接子接合至Val-Cit可裂解部分和非自消融型間隔子單元。在一些其他實施方式中，剪接調節劑經由連接子中的Mal-間隔子單元接合至抗體或抗原結合片段，該連接子接合至Val-Ala可裂解部分和非自消融型間隔子單元。在一些其他實施方式中，剪接調節劑經由連接子中的Mal-間隔子單元接合至抗體或抗原結合片段，該連接子接合至Ala-Ala-Asp可裂解部分和非自消融型間隔子單元。在一些其他實施方式中，剪接調節劑經由連接子中的Mal-間隔子單元接合至抗體或抗原結合片段，該連接子接合至Glu-Val-Cit可裂解部分和非自消融型間隔子單元。在一些其他實施方式中，剪接調節劑經由連接子中的Mal-間隔子單元接合至抗體或抗原結合片段，該連接子接合至β-葡糖苷酸可裂解部分和非自消融型間隔子單元。在一些實施方式中，間隔子單元包含PEG部分。在一些實施方式中，Mal-間隔子單元包含MC。在一些實施方式中，Mal-間隔子單元包含MC和PEG部分。在一些實施方式中，Mal-間隔子單元包含MC-(PEG) m -，且m 為1至10的整數（即，m可為1、2、3、4、5、6、7、8、9或10）。在一些實施方式中，Mal-間隔子單元包含MC-(PEG)2 。
在一些實施方式中，本揭露的ADC包含式 (I)： Ab-(L-D) p (I) 其中 Ab係能夠結合BCMA的抗體或抗原結合片段； D係剪接調節劑； L係將Ab共價連接至D的連接子；並且p 為1至15的整數。
在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段（Ab）經由連接子軛合至剪接調節劑藥物部分，其中該連接子係所揭露或藉由引用併入本文的連接子中的任一種、或包含所揭露或藉由引用併入本文的連接子中的任一種的一種或多種組分。
在一些實施方式中，連接子為不可裂解連接子。在一些實施方式中，連接子包含將抗體或抗原結合片段接合至藥物部分的至少一個間隔子單元。在一些實施方式中，間隔子單元包含至少一個烷基部分。在一些實施方式中，間隔子單元包含至少一個PEG部分。
在一些實施方式中，連接子中的間隔子單元經由馬來醯亞胺部分（「Mal-間隔子單元」）連接至抗體或抗原結合片段。在一些實施方式中，Mal-間隔子單元包含至少一個烷基部分。在一些實施方式中，Mal-間隔子單元包含至少一個PEG部分。在一些實施方式中，Mal-間隔子單元包含MC。在一些實施方式中，Mal-間隔子單元將抗體或抗原結合片段連接至藥物部分。
在一些實施方式中，Mal-間隔子單元或連接子包含Mal-(PEG)2 、Mal-(PEG)3 、Mal-(PEG)4 、Mal-(PEG)5 、Mal-(PEG)6 、Mal-(PEG)7 或Mal-(PEG)8 。在一些實施方式中，Mal-間隔子單元或連接子包含Mal-(PEG)2 。在一些實施方式中，Mal-間隔子單元或連接子包含Mal-(PEG)2 -CO、Mal-(PEG)3 -CO、Mal-(PEG)4 -CO、Mal-(PEG)5 -CO、Mal-(PEG)6 -CO、Mal-(PEG)7 -CO或Mal-(PEG)8- CO。在一些實施方式中，Mal-間隔子單元或連接子包含Mal-(PEG)2 -CO。在一些實施方式中，Mal-間隔子單元或連接子包含MC。在一些實施方式中，Mal-間隔子單元或連接子包含Mal-(CH2 )6 （「Mal-Hex」）。在一些實施方式中，Mal-間隔子單元或連接子包含Mal-(CH2 )2 （「Mal-Et」）。在一些實施方式中，Mal-間隔子單元或連接子包含Mal-(CH2 )2 -O-(CH2 )2 （「Mal-Et-O-Et」）。
在一些實施方式中，Mal-間隔子單元或連接子包含Mal-(PEG)2 -CO。在一些實施方式中，Mal-間隔子單元或連接子包含Mal-(PEG)2 -CO和至少一個額外間隔子單元。在一些實施方式中，Mal-(PEG)2 -CO將抗體或抗原結合片段連接至藥物部分。在一些實施方式中，連接子包含Mal-(PEG)2 -CO或由其組成。「Mal-(PEG)2 -CO」連接子的實例在本文中還稱為「ADL2」或「ADL2」連接子。
在一些實施方式中，Mal-間隔子單元或連接子包含MC。在一些實施方式中，Mal-間隔子單元或連接子包含MC和至少一個額外間隔子單元。在一些實施方式中，MC將抗體或抗原結合片段連接至藥物部分。在一些實施方式中，連接子包含MC或由其組成。「MC」連接子的實例在本文中還稱為「ADL10」或「ADL10」連接子。
在一些實施方式中，Mal-間隔子單元或連接子包含Mal-(CH2 )6 （「Mal-Hex」）。在一些實施方式中，Mal-間隔子單元或連接子包含Mal-Hex和至少一個額外間隔子單元。在一些實施方式中，Mal-Hex將抗體或抗原結合片段連接至藥物部分。在一些實施方式中，連接子包含Mal-Hex。「Mal-Hex」連接子的實例在本文中還稱為「ADL12」或「ADL12」連接子。
在一些實施方式中，Mal-間隔子單元或連接子包含Mal-(CH2 )2 （「Mal-Et」）。在一些實施方式中，Mal-間隔子單元或連接子包含Mal-Et和至少一個額外間隔子單元。在一些實施方式中，Mal-Et將抗體或抗原結合片段連接至藥物部分。在一些實施方式中，連接子包含Mal-Et。「Mal-Et」連接子的實例在本文中還稱為「ADL14」或「ADL14」連接子。
在一些實施方式中，Mal-間隔子單元或連接子包含Mal-(CH2 )2 -O-(CH2 )2 （「Mal-Et-O-Et」）。在一些實施方式中，Mal-間隔子單元或連接子包含Mal-Et-O-Et和至少一個額外間隔子單元。在一些實施方式中，Mal-Et-O-Et將抗體或抗原結合片段連接至藥物部分。在一些實施方式中，連接子包含Mal-Et-O-Et。「Mal-Et-O-Et」連接子的實例在本文中還稱為「ADL15」或「ADL15」連接子。
在一些其他實施方式中，Mal-間隔子單元將抗體或抗原結合片段連接至連接子中的可裂解部分。在一些實施方式中，連接子中的可裂解部分為可裂解肽部分，例如胺基酸單元。在一些實施方式中，可裂解肽部分係胺基酸單元。在一些實施方式中，可裂解肽部分或胺基酸單元係Val-Cit、Val-Ala、Ala-Ala-Asp或Glu-Val-Cit。在一些實施方式中，連接子中的可裂解部分為可裂解葡糖苷酸部分，例如β-葡糖苷酸。在一些實施方式中，可裂解葡糖苷酸部分係β-葡糖苷酸。在一些實施方式中，Mal-間隔子單元包含MC。在一些實施方式中，Mal-間隔子單元包含MC和PEG部分。在一些實施方式中，Mal-間隔子單元包含MC-(PEG) m -，且m 為1至10的整數（即，m可為1、2、3、4、5、6、7、8、9或10）。在一些實施方式中，Mal-間隔子單元包含MC-(PEG)2 。
在一些實施方式中，連接子包含MC-Val-Cit。在一些實施方式中，連接子包含MC-(PEG)2 -Val-Cit。在一些實施方式中，連接子包含MC-Val-Ala。在一些實施方式中，連接子包含MC-Ala-Ala-Asp。在一些實施方式中，連接子包含MC-Glu-Val-Cit。在一些實施方式中，連接子包含MC-β-葡糖苷酸。
在一些實施方式中，該間隔子單元將連接子中的可裂解部分連接至剪接調節劑。在一些實施方式中，將可裂解部分連接至剪接調節劑的間隔子單元係自消融型的。
在一些實施方式中，將連接子中的可裂解部分連接至剪接調節劑的間隔子單元包含pABC。在一些實施方式中，pABC將可裂解部分連接至剪接調節劑。在一些實施方式中，可裂解部分為可裂解肽部分，例如胺基酸單元。在一些實施方式中，可裂解肽部分係胺基酸單元。在一些實施方式中，連接子包含胺基酸單元-pABC。在一些實施方式中，胺基酸單元包含Val-Cit、Val-Ala、Ala-Ala-Asp或Glu-Val-Cit。在一些實施方式中，連接子包含Val-Cit-pABC。在一些實施方式中，連接子包含Val-Ala-pABC。在一些實施方式中，連接子包含Ala-Ala-Asp-pABC。在一些實施方式中，連接子包含Glu-Val-Cit-pABC。在一些實施方式中，可裂解部分為可裂解葡糖苷酸部分，例如β-葡糖苷酸。在一些實施方式中，可裂解葡糖苷酸部分係β-葡糖苷酸。在一些實施方式中，連接子包含β-葡糖苷酸-pABC。
在一些實施方式中，連接子包含Val-Cit-pABC。在一些實施方式中，連接子包含將連接子接合至抗體或抗原結合片段的Val-Cit-pABC和MC Mal-間隔子單元。在一些實施方式中，連接子包含MC-Val-Cit-pABC。在一些實施方式中，連接子包含MC-Val-Cit-pABC和至少一個額外間隔子單元。MC-Val-Cit-pABC連接子的實例在本文中還稱為「ADL1」或「ADL1」連接子。ADL1和其他示例性連接子的結構示於表13中。
在一些實施方式中，連接子包含Val-Ala-pABC。在一些實施方式中，連接子包含將連接子接合至抗體或抗原結合片段的Val-Ala-pABC和MC Mal-間隔子單元。在一些實施方式中，連接子包含MC-Val-Ala-pABC。在一些實施方式中，連接子包含MC-Val-Ala-pABC和至少一個額外間隔子單元。MC-Val-Ala-pABC連接子的實例在本文中還稱為「ADL6」或「ADL6」連接子。ADL6和其他示例性連接子的結構示於表13中。
在一些實施方式中，連接子包含β-葡糖苷酸-pABC。在一些實施方式中，連接子包含將連接子接合至抗體或抗原結合片段的β-葡糖苷酸-pABC和MC Mal-間隔子單元。在一些實施方式中，連接子包含MC-β-葡糖苷酸-pABC。在一些實施方式中，連接子包含MC-β-葡糖苷酸-pABC和至少一個額外間隔子單元。MC-β-葡糖苷酸-pABC的實例在本文中還稱為「ADL13」或「ADL13」連接子。ADL13和其他示例性連接子的結構示於表13中。
在一些實施方式中，連接子包含Ala-Ala-Asp-pABC。在一些實施方式中，連接子包含將連接子接合至抗體或抗原結合片段的Ala-Ala-Asp-pABC和MC Mal-間隔子單元。在一些實施方式中，連接子包含MC-Ala-Ala-Asp-pABC。在一些實施方式中，連接子包含MC-Ala-Ala-Asp-pABC和至少一個額外間隔子單元。MC-Ala-Ala-Asp-pABC連接子的實例在本文中還稱為「ADL21」或「ADL21」連接子。ADL21和其他示例性連接子的結構示於表13中。
在一些實施方式中，連接子包含Val-Cit-pABC。在一些實施方式中，連接子包含將連接子接合至抗體或抗原結合片段的Val-Cit-pABC和MC-(PEG)2 Mal-間隔子單元。在一些實施方式中，連接子包含MC-(PEG)2 -Val-Cit-pABC。在一些實施方式中，連接子包含MC-(PEG)2 -Val-Cit-pABC和至少一個額外間隔子單元。MC-(PEG)2 -Val-Cit-pABC連接子的實例在本文中還稱為「ADL22」或「ADL22」連接子。ADL22和其他示例性連接子的結構示於表13中。
在一些實施方式中，連接子包含Glu-Val-Cit-pABC。在一些實施方式中，連接子包含將連接子接合至抗體或抗原結合片段的Glu-Val-Cit-pABC和MC Mal-間隔子單元。在一些實施方式中，連接子包含MC-Glu-Val-Cit-pABC。在一些實施方式中，連接子包含MC-Glu-Val-Cit-pABC和至少一個額外間隔子單元。MC-Glu-Val-Cit-pABC連接子的實例在本文中還稱為「ADL23」或「ADL23」連接子。ADL23和其他示例性連接子的結構示於表13中。
在一些實施方式中，將連接子中的可裂解部分連接至剪接調節劑的間隔子單元包含pAB。在一些實施方式中，pAB將可裂解部分連接至剪接調節劑。在一些實施方式中，可裂解部分為可裂解肽部分，例如胺基酸單元。在一些實施方式中，可裂解肽部分係胺基酸單元。在一些實施方式中，連接子包含胺基酸單元-pAB。在一些實施方式中，胺基酸單元包含Val-Cit、Val-Ala、Ala-Ala-Asp或Glu-Val-Cit。在一些實施方式中，連接子包含Val-Cit-pAB。在一些實施方式中，連接子包含Val-Ala-pAB。在一些實施方式中，連接子包含Ala-Ala-Asp-pAB。在一些實施方式中，連接子包含Glu-Val-Cit-pAB。在一些實施方式中，可裂解部分為可裂解葡糖苷酸部分，例如β-葡糖苷酸。在一些實施方式中，可裂解葡糖苷酸部分係β-葡糖苷酸。在一些實施方式中，連接子包含β-葡糖苷酸-pAB。
在一些實施方式中，連接子包含Val-Ala-pAB。在一些實施方式中，連接子包含將連接子接合至抗體或抗原結合片段的Val-Ala-pAB和MC Mal-間隔子單元。在一些實施方式中，連接子包含MC-Val-Ala-pAB。在一些實施方式中，連接子包含MC-Val-Ala-pAB和至少一個額外間隔子單元。MC-Val-Ala-pAB連接子的實例在本文中還稱為「ADL5」或「ADL5」連接子。
在一些實施方式中，連接子包含Val-Cit-pAB。在一些實施方式中，連接子包含將連接子接合至抗體或抗原結合片段的Val-Cit-pAB和MC Mal-間隔子單元。在一些實施方式中，連接子包含MC-Val-Cit-pAB。在一些實施方式中，連接子包含MC-Val-Cit-pAB和至少一個額外間隔子單元。MC-Val-Cit-pAB連接子的實例在本文中還稱為「ADL7」或「ADL7」連接子。
在一些實施方式中，抗體或抗原結合片段經由ADL1、ADL2、ADL5、ADL6、ADL7、ADL10、ADL12、ADL13、ADL14、ADL15、ADL21、ADL22或ADL23連接子軛合至剪接調節劑藥物部分。在一些實施方式中，抗體或抗原結合片段經由ADL1、ADL6、ADL13、ADL21、ADL22或ADL23連接子軛合至剪接調節劑藥物部分。已發現，在各種實施方式中，包含ADL1、ADL6、ADL13、ADL21、ADL22或ADL23連接子（例如，ADL1連接子）和本文揭露之剪接調節劑藥物部分的ADC表現出治療性ADC所需的特性。在一些實施方式中，該等特性包括但不限於有效藥物負載水平、低聚集水平、在儲存條件下或當在體內循環時的穩定性（例如，血清穩定性）、與未軛合的抗體相當的對表現靶抗原的細胞的留存親和力、對表現靶抗原的細胞的強細胞毒性、低水平的脫靶細胞殺傷、和/或有效的體內抗癌活性，全部特性均與使用其他連接子-有效載荷的ADC相比較而言。
在一些實施方式中，ADC包含ADL1-剪接調節劑和能夠結合BCMA的抗體或抗原結合片段。在一些實施方式中，ADC包含ADL2-剪接調節劑和能夠結合BCMA的抗體或抗原結合片段。在一些實施方式中，ADC包含ADL5-剪接調節劑和能夠結合BCMA的抗體或抗原結合片段。在一些實施方式中，ADC包含ADL6-剪接調節劑和能夠結合BCMA的抗體或抗原結合片段。在一些實施方式中，ADC包含ADL7-剪接調節劑和能夠結合BCMA的抗體或抗原結合片段。在一些實施方式中，ADC包含ADL10-剪接調節劑和能夠結合BCMA的抗體或抗原結合片段。在一些實施方式中，ADC包含ADL12-剪接調節劑和能夠結合BCMA的抗體或抗原結合片段。在一些實施方式中，ADC包含ADL13-剪接調節劑和能夠結合BCMA的抗體或抗原結合片段。在一些實施方式中，ADC包含ADL14-剪接調節劑和能夠結合BCMA的抗體或抗原結合片段。在一些實施方式中，ADC包含ADL15-剪接調節劑和能夠結合BCMA的抗體或抗原結合片段。在一些實施方式中，ADC包含ADL21-剪接調節劑和能夠結合BCMA的抗體或抗原結合片段。在一些實施方式中，ADC包含ADL22-剪接調節劑和能夠結合BCMA的抗體或抗原結合片段。在一些實施方式中，ADC包含ADL23-剪接調節劑和能夠結合BCMA的抗體或抗原結合片段。在一些實施方式中，ADC保留靶向表現BCMA的癌細胞並在該癌細胞中內化的能力。
在一些實施方式中，本文揭露之ADC中的抗體或抗原結合片段係內化性抗體或內化性抗原結合片段。在一些實施方式中，抗體或抗原結合片段能夠結合BCMA，並且包含三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 1（HCDR1）、SEQ ID NO: 2（HCDR2）和SEQ ID NO: 3（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 4（LCDR1）、SEQ ID NO: 5（LCDR2）和SEQ ID NO: 6（LCDR3），如由Kabat編號系統所定義的；或者三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 37（HCDR1）、SEQ ID NO: 38（HCDR2）和SEQ ID NO: 39（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 40（LCDR1）、SEQ ID NO: 41（LCDR2）和SEQ ID NO: 42（LCDR3），如由IMGT編號系統所定義的。
在一些實施方式中，ADC具有式 (I)： Ab-(L-D) p (I) 其中 Ab係抗體或抗原結合片段，其中該抗體或抗原結合片段能夠結合BCMA，並且包含三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 1（HCDR1）、SEQ ID NO: 2（HCDR2）和SEQ ID NO: 3（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 4（LCDR1）、SEQ ID NO: 5（LCDR2）和SEQ ID NO: 6（LCDR3），如由Kabat編號系統所定義的；或者三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 37（HCDR1）、SEQ ID NO: 38（HCDR2）和SEQ ID NO: 39（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 40（LCDR1）、SEQ ID NO: 41（LCDR2）和SEQ ID NO: 42（LCDR3），如由IMGT編號系統所定義的； D係剪接調節劑； L係包含ADL1、ADL6、ADL13、ADL21、ADL22或ADL23的連接子；並且p 為1至15的整數。
在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含人重鏈和輕鏈可變區框架，或具有一個或多個回復突變的人重鏈和輕鏈可變區框架。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含含有SEQ ID NO: 76的胺基酸序列的重鏈可變區以及含有SEQ ID NO: 77的胺基酸序列的輕鏈可變區。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含人IgG1重鏈恒定區和人Igκ輕鏈恒定區。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含人IgG1重鏈恒定區和人Igλ輕鏈恒定區。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含人IgG4重鏈恒定區和人Igκ輕鏈恒定區。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含人IgG4重鏈恒定區和人Igλ輕鏈恒定區。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含含有SEQ ID NO: 90的胺基酸序列的重鏈恒定區以及含有SEQ ID NO: 91的胺基酸序列的輕鏈恒定區。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含含有SEQ ID NO: 92的胺基酸序列的重鏈以及含有SEQ ID NO: 93的胺基酸序列的輕鏈。在一些實施方式中，重鏈恒定區或重鏈進一步包含C-末端離胺酸（K）。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段係AB212。在一些實施方式中，p 為1至12、1至10、2至8、或4至8的整數。在一些實施方式中，p 為4。在一些實施方式中，p 為8。
在一些實施方式中，本文揭露之ADC中的抗體或抗原結合片段係內化性抗體或內化性抗原結合片段。在一些實施方式中，抗體或抗原結合片段能夠結合BCMA，並且包含三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 1（HCDR1）、SEQ ID NO: 7（HCDR2）和SEQ ID NO: 8（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 9（LCDR1）、SEQ ID NO: 10（LCDR2）和SEQ ID NO: 11（LCDR3），如由Kabat編號系統所定義的；或者三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 43（HCDR1）、SEQ ID NO: 44（HCDR2）和SEQ ID NO: 45（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 40（LCDR1）、SEQ ID NO: 41（LCDR2）和SEQ ID NO: 46（LCDR3），如由IMGT編號系統所定義的。
在一些實施方式中，ADC具有式 (I)： Ab-(L-D) p (I) 其中 Ab係抗體或抗原結合片段，其中該抗體或抗原結合片段能夠結合BCMA，並且包含三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 1（HCDR1）、SEQ ID NO: 7（HCDR2）和SEQ ID NO: 8（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 9（LCDR1）、SEQ ID NO: 10（LCDR2）和SEQ ID NO: 11（LCDR3），如由Kabat編號系統所定義的；或者三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 43（HCDR1）、SEQ ID NO: 44（HCDR2）和SEQ ID NO: 45（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 40（LCDR1）、SEQ ID NO: 41（LCDR2）和SEQ ID NO: 46（LCDR3），如由IMGT編號系統所定義的； D係剪接調節劑； L係包含ADL1、ADL6、ADL13、ADL21、ADL22或ADL23的連接子；並且p 為1至15的整數。
在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含人重鏈和輕鏈可變區框架，或具有一個或多個回復突變的人重鏈和輕鏈可變區框架。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含含有SEQ ID NO: 78的胺基酸序列的重鏈可變區以及含有SEQ ID NO: 79的胺基酸序列的輕鏈可變區。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含人IgG1重鏈恒定區和人Igκ輕鏈恒定區。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含人IgG1重鏈恒定區和人Igλ輕鏈恒定區。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含人IgG4重鏈恒定區和人Igκ輕鏈恒定區。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含人IgG4重鏈恒定區和人Igλ輕鏈恒定區。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含含有SEQ ID NO: 90的胺基酸序列的重鏈恒定區以及含有SEQ ID NO: 91的胺基酸序列的輕鏈恒定區。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含含有SEQ ID NO: 94的胺基酸序列的重鏈以及含有SEQ ID NO: 95的胺基酸序列的輕鏈。在一些實施方式中，重鏈恒定區或重鏈進一步包含C-末端離胺酸（K）。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段係AB213。在一些實施方式中，p 為1至12、1至10、2至8、或4至8的整數。在一些實施方式中，p 為4。在一些實施方式中，p 為8。
在一些實施方式中，本文揭露之ADC中的抗體或抗原結合片段係內化性抗體或內化性抗原結合片段。在一些實施方式中，抗體或抗原結合片段能夠結合BCMA，並且包含三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 1（HCDR1）、SEQ ID NO: 12（HCDR2）和SEQ ID NO: 13（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 14（LCDR1）、SEQ ID NO: 15（LCDR2）和SEQ ID NO: 16（LCDR3），如由Kabat編號系統所定義的；或者三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 47（HCDR1）、SEQ ID NO: 48（HCDR2）和SEQ ID NO: 49（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 40（LCDR1）、SEQ ID NO: 41（LCDR2）和SEQ ID NO: 50（LCDR3），如由IMGT編號系統所定義的。
在一些實施方式中，ADC具有式 (I)： Ab-(L-D) p (I) 其中 Ab係抗體或抗原結合片段，其中該抗體或抗原結合片段能夠結合BCMA，並且包含三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 1（HCDR1）、SEQ ID NO: 12（HCDR2）和SEQ ID NO: 13（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 14（LCDR1）、SEQ ID NO: 15（LCDR2）和SEQ ID NO: 16（LCDR3），如由Kabat編號系統所定義的；或者三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 47（HCDR1）、SEQ ID NO: 48（HCDR2）和SEQ ID NO: 49（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 40（LCDR1）、SEQ ID NO: 41（LCDR2）和SEQ ID NO: 50（LCDR3），如由IMGT編號系統所定義的； D係剪接調節劑； L係包含ADL1、ADL6、ADL13、ADL21、ADL22或ADL23的連接子；並且p 為1至15的整數。
在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含人重鏈和輕鏈可變區框架，或具有一個或多個回復突變的人重鏈和輕鏈可變區框架。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含含有SEQ ID NO: 80的胺基酸序列的重鏈可變區以及含有SEQ ID NO: 81的胺基酸序列的輕鏈可變區。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含人IgG1重鏈恒定區和人Igκ輕鏈恒定區。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含人IgG1重鏈恒定區和人Igλ輕鏈恒定區。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含人IgG4重鏈恒定區和人Igκ輕鏈恒定區。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含人IgG4重鏈恒定區和人Igλ輕鏈恒定區。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含含有SEQ ID NO: 90的胺基酸序列的重鏈恒定區以及含有SEQ ID NO: 91的胺基酸序列的輕鏈恒定區。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含含有SEQ ID NO: 96的胺基酸序列的重鏈以及含有SEQ ID NO: 97的胺基酸序列的輕鏈。在一些實施方式中，重鏈恒定區或重鏈進一步包含C-末端離胺酸（K）。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段係AB214。在一些實施方式中，p 為1至12、1至10、2至8、或4至8的整數。在一些實施方式中，p 為4。在一些實施方式中，p 為8。
在一些實施方式中，本文揭露之ADC中的抗體或抗原結合片段係內化性抗體或內化性抗原結合片段。在一些實施方式中，抗體或抗原結合片段能夠結合BCMA，並且包含三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 1（HCDR1）、SEQ ID NO: 17（HCDR2）和SEQ ID NO: 18（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 19（LCDR1）、SEQ ID NO: 20（LCDR2）和SEQ ID NO: 21（LCDR3），如由Kabat編號系統所定義的；或者三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 51（HCDR1）、SEQ ID NO: 52（HCDR2）和SEQ ID NO: 53（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 40（LCDR1）、SEQ ID NO: 41（LCDR2）和SEQ ID NO: 54（LCDR3），如由IMGT編號系統所定義的。
在一些實施方式中，ADC具有式 (I)： Ab-(L-D) p (I) 其中 Ab係抗體或抗原結合片段，其中該抗體或抗原結合片段能夠結合BCMA，並且包含三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 1（HCDR1）、SEQ ID NO: 17（HCDR2）和SEQ ID NO: 18（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 19（LCDR1）、SEQ ID NO: 20（LCDR2）和SEQ ID NO: 21（LCDR3），如由Kabat編號系統所定義的；或者三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 51（HCDR1）、SEQ ID NO: 52（HCDR2）和SEQ ID NO: 53（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 40（LCDR1）、SEQ ID NO: 41（LCDR2）和SEQ ID NO: 54（LCDR3），如由IMGT編號系統所定義的； D係剪接調節劑； L係包含ADL1、ADL6、ADL13、ADL21、ADL22或ADL23的連接子；並且p 為1至15的整數。
在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含人重鏈和輕鏈可變區框架，或具有一個或多個回復突變的人重鏈和輕鏈可變區框架。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含含有SEQ ID NO: 82的胺基酸序列的重鏈可變區以及含有SEQ ID NO: 83的胺基酸序列的輕鏈可變區。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含人IgG1重鏈恒定區和人Igκ輕鏈恒定區。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含人IgG1重鏈恒定區和人Igλ輕鏈恒定區。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含人IgG4重鏈恒定區和人Igκ輕鏈恒定區。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含人IgG4重鏈恒定區和人Igλ輕鏈恒定區。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含含有SEQ ID NO: 90的胺基酸序列的重鏈恒定區以及含有SEQ ID NO: 91的胺基酸序列的輕鏈恒定區。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含含有SEQ ID NO: 98的胺基酸序列的重鏈以及含有SEQ ID NO: 99的胺基酸序列的輕鏈。在一些實施方式中，重鏈恒定區或重鏈進一步包含C-末端離胺酸（K）。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段係AB215。在一些實施方式中，p 為1至12、1至10、2至8、或4至8的整數。在一些實施方式中，p 為4。在一些實施方式中，p 為8。
在一些實施方式中，本文揭露之ADC中的抗體或抗原結合片段係內化性抗體或內化性抗原結合片段。在一些實施方式中，抗體或抗原結合片段能夠結合BCMA，並且包含三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 1（HCDR1）、SEQ ID NO: 22（HCDR2）和SEQ ID NO: 23（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 24（LCDR1）、SEQ ID NO: 25（LCDR2）和SEQ ID NO: 26（LCDR3），如由Kabat編號系統所定義的；或者三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 55（HCDR1）、SEQ ID NO: 56（HCDR2）和SEQ ID NO: 57（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 40（LCDR1）、SEQ ID NO: 41（LCDR2）和SEQ ID NO: 58（LCDR3），如由IMGT編號系統所定義的。
在一些實施方式中，ADC具有式 (I)： Ab-(L-D) p (I) 其中 Ab係抗體或抗原結合片段，其中該抗體或抗原結合片段能夠結合BCMA，並且包含三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 1（HCDR1）、SEQ ID NO: 22（HCDR2）和SEQ ID NO: 23（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 24（LCDR1）、SEQ ID NO: 25（LCDR2）和SEQ ID NO: 26（LCDR3），如由Kabat編號系統所定義的；或者三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 55（HCDR1）、SEQ ID NO: 56（HCDR2）和SEQ ID NO: 57（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 40（LCDR1）、SEQ ID NO: 41（LCDR2）和SEQ ID NO: 58（LCDR3），如由IMGT編號系統所定義的； D係剪接調節劑； L係包含ADL1、ADL6、ADL13、ADL21、ADL22或ADL23的連接子；並且p 為1至15的整數。
在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含人重鏈和輕鏈可變區框架，或具有一個或多個回復突變的人重鏈和輕鏈可變區框架。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含含有SEQ ID NO: 84的胺基酸序列的重鏈可變區以及含有SEQ ID NO: 85的胺基酸序列的輕鏈可變區。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含人IgG1重鏈恒定區和人Igκ輕鏈恒定區。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含人IgG1重鏈恒定區和人Igλ輕鏈恒定區。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含人IgG4重鏈恒定區和人Igκ輕鏈恒定區。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含人IgG4重鏈恒定區和人Igλ輕鏈恒定區。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含含有SEQ ID NO: 90的胺基酸序列的重鏈恒定區以及含有SEQ ID NO: 91的胺基酸序列的輕鏈恒定區。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含含有SEQ ID NO: 100的胺基酸序列的重鏈以及含有SEQ ID NO: 101的胺基酸序列的輕鏈。在一些實施方式中，重鏈恒定區或重鏈進一步包含C-末端離胺酸（K）。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段係AB216。在一些實施方式中，p 為1至12、1至10、2至8、或4至8的整數。在一些實施方式中，p 為4。在一些實施方式中，p 為8。
在一些實施方式中，本文揭露之ADC中的抗體或抗原結合片段係內化性抗體或內化性抗原結合片段。在一些實施方式中，抗體或抗原結合片段能夠結合BCMA，並且包含三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 1（HCDR1）、SEQ ID NO: 27（HCDR2）和SEQ ID NO: 28（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 29（LCDR1）、SEQ ID NO: 30（LCDR2）和SEQ ID NO: 31（LCDR3），如由Kabat編號系統所定義的；或者三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 59（HCDR1）、SEQ ID NO: 60（HCDR2）和SEQ ID NO: 61（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 40（LCDR1）、SEQ ID NO: 41（LCDR2）和SEQ ID NO: 62（LCDR3），如由IMGT編號系統所定義的。
在一些實施方式中，ADC具有式 (I)： Ab-(L-D) p (I) 其中 Ab係抗體或抗原結合片段，其中該抗體或抗原結合片段能夠結合BCMA，並且包含三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 1（HCDR1）、SEQ ID NO: 27（HCDR2）和SEQ ID NO: 28（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 29（LCDR1）、SEQ ID NO: 30（LCDR2）和SEQ ID NO: 31（LCDR3），如由Kabat編號系統所定義的；或者三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 59（HCDR1）、SEQ ID NO: 60（HCDR2）和SEQ ID NO: 61（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 40（LCDR1）、SEQ ID NO: 41（LCDR2）和SEQ ID NO: 62（LCDR3），如由IMGT編號系統所定義的； D係剪接調節劑； L係包含ADL1、ADL6、ADL13、ADL21、ADL22或ADL23的連接子；並且p 為1至15的整數。
在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含人重鏈和輕鏈可變區框架，或具有一個或多個回復突變的人重鏈和輕鏈可變區框架。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含含有SEQ ID NO: 86的胺基酸序列的重鏈可變區以及含有SEQ ID NO: 87的胺基酸序列的輕鏈可變區。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含人IgG1重鏈恒定區和人Igκ輕鏈恒定區。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含人IgG1重鏈恒定區和人Igλ輕鏈恒定區。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含人IgG4重鏈恒定區和人Igκ輕鏈恒定區。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含人IgG4重鏈恒定區和人Igλ輕鏈恒定區。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含含有SEQ ID NO: 90的胺基酸序列的重鏈恒定區以及含有SEQ ID NO: 91的胺基酸序列的輕鏈恒定區。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含含有SEQ ID NO: 102的胺基酸序列的重鏈以及含有SEQ ID NO: 103的胺基酸序列的輕鏈。在一些實施方式中，重鏈恒定區或重鏈進一步包含C-末端離胺酸（K）。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段係AB217。在一些實施方式中，p 為1至12、1至10、2至8、或4至8的整數。在一些實施方式中，p 為4。在一些實施方式中，p 為8。
在一些實施方式中，本文揭露之ADC中的抗體或抗原結合片段係內化性抗體或內化性抗原結合片段。在一些實施方式中，抗體或抗原結合片段能夠結合BCMA，並且包含三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 1（HCDR1）、SEQ ID NO: 32（HCDR2）和SEQ ID NO: 33（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 34（LCDR1）、SEQ ID NO: 35（LCDR2）和SEQ ID NO: 36（LCDR3），如由Kabat編號系統所定義的；或者三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 63（HCDR1）、SEQ ID NO: 64（HCDR2）和SEQ ID NO: 65（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 40（LCDR1）、SEQ ID NO: 41（LCDR2）和SEQ ID NO: 66（LCDR3），如由IMGT編號系統所定義的。
在一些實施方式中，ADC具有式 (I)： Ab-(L-D) p (I) 其中 Ab係抗體或抗原結合片段，其中該抗體或抗原結合片段能夠結合BCMA，並且包含三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 1（HCDR1）、SEQ ID NO: 32（HCDR2）和SEQ ID NO: 33（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 34（LCDR1）、SEQ ID NO: 35（LCDR2）和SEQ ID NO: 36（LCDR3），如由Kabat編號系統所定義的；或者三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 63（HCDR1）、SEQ ID NO: 64（HCDR2）和SEQ ID NO: 65（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 40（LCDR1）、SEQ ID NO: 41（LCDR2）和SEQ ID NO: 66（LCDR3），如由IMGT編號系統所定義的； D係剪接調節劑； L係包含ADL1、ADL6、ADL13、ADL21、ADL22或ADL23的連接子；並且p 為1至15的整數。
在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含人重鏈和輕鏈可變區框架，或具有一個或多個回復突變的人重鏈和輕鏈可變區框架。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含含有SEQ ID NO: 88的胺基酸序列的重鏈可變區以及含有SEQ ID NO: 89的胺基酸序列的輕鏈可變區。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含人IgG1重鏈恒定區和人Igκ輕鏈恒定區。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含人IgG1重鏈恒定區和人Igλ輕鏈恒定區。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含人IgG4重鏈恒定區和人Igκ輕鏈恒定區。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含人IgG4重鏈恒定區和人Igλ輕鏈恒定區。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含含有SEQ ID NO: 90的胺基酸序列的重鏈恒定區以及含有SEQ ID NO: 91的胺基酸序列的輕鏈恒定區。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含含有SEQ ID NO: 104的胺基酸序列的重鏈以及含有SEQ ID NO: 105的胺基酸序列的輕鏈。在一些實施方式中，重鏈恒定區或重鏈進一步包含C-末端離胺酸（K）。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段係AB218。在一些實施方式中，p 為1至12、1至10、2至8、或4至8的整數。在一些實施方式中，p 為4。在一些實施方式中，p 為8。 藥物部分
本文所述之ADC中的藥物部分（D）可以為任何化學治療劑。有用的化學治療劑種類包括例如RNA剪接調節劑。在一些實施方式中，藥物部分係剪接調節劑。本文中描述並舉例說明了示例性剪接調節劑化合物。
在一些實施方式中，藥物部分選自在國際申請案號PCT/US2019/035015（公開案號WO 2019/232449）中示出和描述的那些，將其關於其所有揭露的剪接調節劑化合物和合成該等化合物之方法藉由引用併入本文。在一些實施方式中，國際申請案號PCT/US2019/035015（公開案號WO 2019/232449）還提供了用於將剪接調節劑接合至抗體的所有示例性連接子和連接子連接點，將該申請關於上述內容藉由引用併入本文。在一些實施方式中，本文揭露之ADC中使用的剪接調節劑和連接子各自選自在國際申請案號PCT/US2019/035015（公開案號WO 2019/232449）中示出和描述的那些。在一些實施方式中，剪接調節劑經由國際申請案號PCT/US2019/035015（公開案號WO 2019/232449）中揭露的連接子接合至抗體部分。
如本文所使用，「烷基」或「烷基基團」意指完全飽和的直鏈、支鏈或環烴鏈。在某些實施方式中，烷基基團可含有1-8個碳原子（「C1 -C8 烷基」）。在某些實施方式中，烷基基團可含有1-6個碳原子（「C1 -C6 烷基」）。在某些實施方式中，烷基基團含有1-3個碳原子。在又其他實施方式中，烷基基團含有2-3個碳原子，且在又其他實施方式中，烷基基團含有1-2個碳原子。
如本文所使用，「烷基烷氧基」意指被烷氧基基團取代的烷基基團。如本文所使用，「烷氧基」係指經由氧（「烷氧基」）原子連接至主碳鏈的如先前所定義的烷基基團。
如本文所使用，「烷基胺基」意指被胺基取代的烷基基團。如本文所使用，「胺基」係指-NH2 、-NH(烷基)或-N(烷基)(烷基)。
如本文所使用，「烷基羥基」意指被胺基基團取代的烷基基團。如本文所使用，「羥基（hydroxy或hydroxyl）」係指-OH。
「伸烷基」係指烷基基團的二價基基團。例如，-CH2 -、-CH2 CH2 -、-CH2 CH2 CH2 -、-CH2 CH2 CH2 CH2 -、-CH2 CH2 CH2 CH2 CH2 -和-CH2 CH2 CH2 CH2 CH2 CH2 -分別是指亞甲基、伸乙基、伸正丙基、伸正丁基、伸正戊基和伸正己基。
如本文所使用，「碳環」包括芳族基團（例如芳基）和非芳族基團（例如環烷基）兩者。在某些實施方式中，碳環基團含有3-10個碳原子（「3至10員碳環」）。在某些實施方式中，碳環基團含有3-8個碳原子（「3至8員碳環」）。在某些實施方式中，碳環基團含有3-6個碳原子（「3至6員碳環」）。在某些實施方式中，碳環基團含有3-5個碳原子（「3至5員碳環」）。
「鹵素」係指任何鹵素基團，例如-F、-Cl、-Br或-I。
如本文所使用，術語「雜環」、「雜環基」和「雜環的」意指在環中含有至少一個雜原子的單環雜環、雙環雜環或三環雜環。
單環雜環係含有至少一個獨立地選自O、N和S的雜原子的3員、4員、5員、6員、7員或8員環。在一些實施方式中，雜環係含有一個選自O、N和S的雜原子的3員或4員環。在一些實施方式中，雜環係含有零個或一個雙鍵以及一個、兩個或三個選自O、N和S的雜原子的5員環。在一些實施方式中，雜環係含有零個、一個或兩個雙鍵以及一個、兩個或三個選自O、N和S的雜原子的6員、7員或8員環。單環雜環的代表性實例包括但不限於氮雜環丁烷基、氮雜環庚烷基、吖環丙烷基、二氮雜環庚烷基、1,3-二㗁𠮿基、1,3-二氧戊環基、二氫哌喃基（包括3,4-二氫-2H-哌喃-6-基）、1,3-二硫雜環戊烷基、1,3-二噻𠮿基、咪唑啉基、咪唑啶基、異噻唑啉基、異四氫噻唑基、異㗁唑啉基、異㗁唑啶基、𠰌啉基、㗁二唑啉基、㗁二唑烷基、㗁唑啉基、㗁唑啶基、哌𠯤基、哌啶基、哌喃基、吡唑啉基、吡唑啶基、吡咯啉基、吡咯啶基、四氫呋喃基、四氫哌喃基（包括四氫-2H-哌喃-4-基）、四氫噻吩基、噻二唑啉基、噻二唑啶基、噻唑啉基、四氫噻唑基、硫代𠰌啉基、1,1-二氧化硫代𠰌啉基（硫代𠰌啉碸）、硫代哌喃基、以及三噻𠮿基。
本揭露的雙環雜環可包括與芳基稠合的單環雜環、或與單環環烷基稠合的單環雜環、或與單環環烯基稠合的單環雜環、或與具有總計5至12個環原子的單環雜環稠合的單環雜環。雙環雜環的實例包括但不限於3,4-二氫-2H-哌喃基、1,3-苯并間二氧雜環戊烯基、1,3-苯并二硫雜環戊烯基、2,3-二氫-1,4-苯并間二氧雜環己烯基、2,3-二氫-1-苯并呋喃基、2,3-二氫-1-苯并噻吩基、2,3-二氫-1H-吲哚基以及1,2,3,4-四氫喹啉基。
術語「雜環」、「雜環基」和「雜環的」涵蓋雜芳基。「雜芳基」係指具有一個或多個閉合環且在該等環中的至少一個中具有一個或多個雜原子（氧、氮或硫）的環狀部分，其中該等環中的至少一個為芳族環，且其中該一個或多個環可獨立地是稠合和/或橋連的。實例包括不限於苯基、噻吩基、三唑基、吡啶基、嘧啶基、嗒𠯤基和吡𠯤基。
如本文所述，本揭露的化合物可含有「視需要經取代的」部分。通常，術語「經取代的」無論前面是否有術語「視需要」均意指指定部分的一個或多個氫被合適取代基替換。除非另外指示，否則「視需要經取代的」基團可在該基團的每個可取代位置處具有合適取代基，且當任何給定結構中的超過一個位置可被超過一個選自指定群組的取代基取代時，在每個位置處的取代基可相同或不同。依據本揭露預想的取代基組合通常為引起形成穩定或化學上可行的化合物的取代基組合。
熟悉該項技術者將理解，「取代」或「被取代」或「不存在」係根據被取代的原子和取代基的允許化合價而定的，並且取代或不存在產生穩定的化合物，例如，其不自發地經歷如藉由重排、環化、消除等進行的轉化。出於本揭露的目的，雜原子例如氮可以具有氫取代基，和/或滿足雜原子的化合價的本文所述有機化合物的任何可允許的取代基。
「穩定」係指如下化合物：在出於本文所述之一個或多個目的而經受允許其生產、檢測以及在某些實施方式中其回收、純化和使用的條件時，它們在化學上和/或物理上基本上不改變。在一些實施方式中，穩定化合物或化學上可行的化合物為當在水分或其他化學反應性條件不存在的情況下保持在40°C或更低的溫度達至少一週時基本上不改變的化合物。在一些實施方式中，本文所述之化合物係穩定的。
本文所教示的鏡像異構物可以包括「鏡像異構純的」異構物，其在一個或多個特定不對稱中心處基本上包含單個鏡像異構物，例如大於或等於90%、92%、95%、98%或99%或等於100%的單個鏡像異構物。「不對稱中心」或「手性中心」係指包含四個不同取代基的四面體碳原子。
本文所述之化合物還可在構成這類化合物的原子中的一個或多個處含有非天然比例的原子同位素。例如，化合物可被諸如氘（2 H）、氚（3 H）、碳-13（13 C）或碳-14（14 C）等放射性同位素放射性標記。本文所述之化合物的所有同位素變體無論是否具有放射性均意欲涵蓋在本揭露的範圍內。另外，本文所述之化合物的所有互變異構形式均意欲處於本揭露的範圍內。
在一些實施方式中，藥物部分係具有式 (II) 的剪接調節劑化合物：
Figure 02_image008
(II)，或其藥學上可接受的鹽，其中： R1 選自不存在、氫、C1 -C6 烷基基團、C1 -C6 烷基烷氧基基團、C1 -C6 烷基胺基基團、C1 -C6 烷基羧酸基團、C1 -C6 烷基羥基基團、C3 -C8 環烷基基團、苄基基團、C3 -C8 雜環基基團、-O-C(=O)-(C1 -C6 烷基)基團和-CD3 ； R3 選自氫、C1 -C6 烷基基團、C1 -C6 烷基烷氧基基團、C1 -C6 烷基胺基基團、C1 -C6 烷基羧酸基團、C1 -C6 烷基羥基基團、C3 -C8 環烷基基團、苄基基團、C3 -C8 雜環基基團和-O-C(=O)-(C1 -C6 烷基)基團；並且 R4 、R5 和R8 各自獨立地選自氫、羥基基團、-O-(C1 -C6 烷基)基團、-O-C(=O)-(C1 -C6 烷基)基團和C1 -C6 烷基基團； R6 和R7 各自獨立地選自氫、-O-R17 、-O-C(=O)-R17 、-O-C(=O)-NR15 R16 、C1 -C6 烷基基團和-NR15 R16 ； R15 和R16 各自獨立地選自氫、R17 、-C(=O)-R17 和-C(=O)-O-R17 ； R17 選自氫、C1 -C6 烷基基團、C3 -C8 環烷基基團、苄基基團和C3 -C8 雜環基基團；並且 Z選自
Figure 02_image010
、
Figure 02_image012
、
Figure 02_image014
、
Figure 02_image016
和
Figure 02_image018
； 其中R1 、R3 、R4 、R5 、R6 、R7 、R8 、R15 、R16 和R17 各自獨立地被0至3個獨立地選自以下的基團取代：鹵素、羥基基團、C1 -C6 烷基基團、-O-(C1 -C6 烷基)基團、-NR15 R16 、C3 -C8 環烷基基團、C1 -C6 烷基羥基基團、C1 -C6 烷基烷氧基基團、苄基基團和C3 -C8 雜環基基團， 其中R6 和R7 中至少一個係氫。
在一些實施方式中，R1 選自氫、C1 -C4 烷基基團、C1 -C4 烷基羧酸基團和C3 -C8 環烷基基團。在一些實施方式中，R1 係氫。在一些實施方式中，R1 係C1 -C4 烷基基團。在一些實施方式中，R1 係甲基。在一些實施方式中，R1 係乙基。在一些實施方式中，R1 係C1 -C4 烷基羧酸基團。在一些實施方式中，R1 係-CH2 CH2 CH2 CO2 H。在一些實施方式中，R1 係C3 -C8 環烷基基團。在一些實施方式中，R1 係環庚基。
在一些實施方式中，R3 選自氫、C1 -C4 烷基基團、C1 -C4 烷基烷氧基基團、C1 -C4 烷基羧酸基團和C1 -C4 烷基羥基基團。在一些實施方式中，R3 選自氫和C1 -C4 烷基羧酸基團。在一些實施方式中，R3 係氫。在一些實施方式中，R3 係C1 -C4 烷基羧酸基團。在一些實施方式中，R3 係-CH2 CH2 CO2 H。
在一些實施方式中，R4 選自氫、羥基基團、-O-(C1 -C4 烷基)基團、-O-C(=O)-(C1 -C4 烷基)基團和C1 -C4 烷基基團。在一些實施方式中，R4 係氫。在一些實施方式中，R4 係羥基。在一些實施方式中，R4 係-O-(C1 -C4 烷基)基團。在一些實施方式中，R4 係-OCH3 。在一些實施方式中，R4 係-OCH2 CH3 。在一些實施方式中，R4 係-O-C(=O)-(C1 -C4 烷基)基團。在一些實施方式中，R4 係-O-C(=O)-CH3 。在一些實施方式中，R4 係-O-C(=O)-CH2 CH3 。在一些實施方式中，R4 係C1 -C4 烷基基團。在一些實施方式中，R4 係甲基。在一些實施方式中，R4 係乙基。
在一些實施方式中，R5 選自氫、羥基基團、-O-(C1 -C4 烷基)基團和C1 -C4 烷基基團。在一些實施方式中，R5 係氫。在一些實施方式中，R5 係羥基。在一些實施方式中，R5 係-O-(C1 -C4 烷基)基團。在一些實施方式中，R5 係C1 -C4 烷基基團。
在一些實施方式中，R6 係氫。在一些實施方式中，R7 係氫。在一些實施方式中，R6 係氫且R7 係-O-R17 。在一些實施方式中，R6 係氫且R7 係-OR17 ，其中R17 選自氫和C1 -C4 烷基基團。在一些實施方式中，R6 係氫且R7 係-O-R17 ，其中R17 係氫。在一些實施方式中，R6 係-O-R17 且R7 係氫。在一些實施方式中，R6 係-O-R17 且R7 係氫，其中R17 選自氫和C1 -C4 烷基基團。在一些實施方式中，R6 係-O-R17 且R7 係氫，其中R17 係氫。在一些實施方式中，R6 係氫且R7 係-NR15 R16 。在一些實施方式中，R6 係氫且R7 係-NR15 R16 ，其中R15 係H且R16 選自氫、R17 、-C(=O)-R17 和-C(=O)-O-R17 。在一些實施方式中，R6 係氫且R7 係-NR15 R16 ，其中R15 係H且R16 選自氫、R17 、-C(=O)-R17 和-C(=O)-O-R17 ，且其中R17 選自氫、C1 -C6 烷基基團、C3 -C8 環烷基基團和C3 -C8 雜環基基團。在一些實施方式中，R6 係-O-R17 。在一些實施方式中，R6 係-O-C(=O)-R17 。在一些實施方式中，R6 係C1 -C6 烷基。在一些實施方式中，R6 係C1 -C4 烷基。在一些實施方式中，R6 係C1 烷基。在一些實施方式中，R6 係-NR15 R16 。在一些實施方式中，R7 係-O-R17 。在一些實施方式中，R7 係-O-C(=O)-R17 。在一些實施方式中，R7 係C1 -C6 烷基。在一些實施方式中，R7 係C1 -C4 烷基。在一些實施方式中，R7 係C1 烷基。在一些實施方式中，R7 係-NR15 R16 。
在一些實施方式中，R8 選自氫、羥基基團、-O-(C1 -C4 烷基)基團和(C1 -C4 烷基)。在一些實施方式中，R8 係氫。在一些實施方式中，R8 係羥基基團。在一些實施方式中，R8 係-O-(C1 -C4 烷基)基團。在一些實施方式中，R8 係-O-(C1 烷基)基團。
在一些實施方式中，R15 係氫。在一些實施方式中，R15 係R17 。在一些實施方式中，R15 係-C(=O)-R17 。在一些實施方式中，R15 係-C(=O)-O-R17 。
在一些實施方式中，R16 係氫。在一些實施方式中，R16 係R17 。在一些實施方式中，R16 係-C(=O)-R17 。在一些實施方式中，R16 係-C(=O)-O-R17 。
在一些實施方式中，R17 選自氫、C1 -C4 烷基基團、C3 -C6 環烷基基團和C3 -C8 雜環基基團。在一些實施方式中，R17 係氫。在一些實施方式中，R17 係C1 -C4 烷基基團。在一些實施方式中，R17 係C1 烷基基團。在一些實施方式中，R17 係C3 -C6 環烷基基團。在一些實施方式中，R17 係C3 環烷基基團。在一些實施方式中，R17 係C4 環烷基基團。在一些實施方式中，R17 係C5 環烷基基團。在一些實施方式中，R17 係C6 環烷基基團。在一些實施方式中，R17 係C3 -C8 雜環基基團。在一些實施方式中，R17 係C3 雜環基基團。在一些實施方式中，R17 係C4 雜環基基團。在一些實施方式中，R17 係C5 雜環基基團。在一些實施方式中，R17 係C6 雜環基基團。在一些實施方式中，R17 係C7 雜環基基團。在一些實施方式中，R17 係C8 雜環基基團。
在一些實施方式中，Z係
Figure 02_image020
。
在一些實施方式中，Z係
Figure 02_image022
。
在一些實施方式中，Z係
Figure 02_image024
。
在一些實施方式中，Z係
Figure 02_image026
。
在一些實施方式中，Z係
Figure 02_image028
。
在一些實施方式中，具有式 (II) 的剪接調節劑化合物連接至例如具有式 (I) 的ADC中的連接子L，如以下式 (II-A) 所示：
Figure 02_image030
(II-A)， 其中Z'選自
Figure 02_image032
、
Figure 02_image034
、
Figure 02_image036
、
Figure 02_image038
和
Figure 02_image040
；並且 其中所有其他變數係如關於式 (II) 所定義。
在一些其他實施方式中，藥物部分係具有式 (IV) 的剪接調節劑化合物：
Figure 02_image042
(IV)，或其藥學上可接受的鹽，其中： R1 選自氫、C1 -C6 烷基基團、C1 -C6 烷基烷氧基基團、C1 -C6 烷基胺基基團、C1 -C6 烷基羧酸基團、C1 -C6 烷基羥基基團、C3 -C8 環烷基基團、苄基基團、C3 -C8 雜環基基團、-O-C(=O)-(C1 -C6 烷基)基團和-CD3 ； R3 選自氫、C1 -C6 烷基基團、C1 -C6 烷基烷氧基基團、C1 -C6 烷基胺基基團、C1 -C6 烷基羧酸基團、C1 -C6 烷基羥基基團、C3 -C8 環烷基基團、苄基基團、C3 -C8 雜環基基團和-O-C(=O)-(C1 -C6 烷基)基團；並且 R4 、R5 和R8 各自獨立地選自氫、羥基基團、-O-(C1 -C6 烷基)基團、-O-C(=O)-(C1 -C6 烷基)基團和C1 -C6 烷基基團； R6 和R7 各自獨立地選自氫、-O-R17 、-O-C(=O)-R17 、-O-C(=O)-NR15 R16 、C1 -C6 烷基基團和-NR15 R16 ； R15 和R16 各自獨立地選自氫、R17 、-C(=O)-R17 和-C(=O)-O-R17 ；並且 R17 選自氫、C1 -C6 烷基基團、C3 -C8 環烷基基團、苄基基團和C3 -C8 雜環基基團； 其中R1 、R3 、R4 、R5 、R6 、R7 、R8 、R15 、R16 和R17 各自獨立地被0至3個獨立地選自以下的基團取代：鹵素、羥基基團、C1 -C6 烷基基團、-O-(C1 -C6 烷基)基團、-NR15 R16 、C3 -C8 環烷基基團、C1 -C6 烷基羥基基團、C1 -C6 烷基烷氧基基團、苄基基團和C3 -C8 雜環基基團， 其中R6 和R7 中至少一個係氫。
在一些實施方式中，R1 選自氫、C1 -C4 烷基基團、C1 -C4 烷基羧酸基團和C3 -C8 環烷基基團。在一些實施方式中，R1 係氫。在一些實施方式中，R1 係C1 -C4 烷基基團。在一些實施方式中，R1 係甲基。在一些實施方式中，R1 係乙基。在一些實施方式中，R1 係C1 -C4 烷基羧酸基團。在一些實施方式中，R1 係-CH2 CH2 CH2 CO2 H。在一些實施方式中，R1 係C3 -C8 環烷基基團。在一些實施方式中，R1 係環庚基。
在一些實施方式中，R3 選自氫、C1 -C4 烷基基團、C1 -C4 烷基烷氧基基團、C1 -C4 烷基羧酸基團和C1 -C4 烷基羥基基團。在一些實施方式中，R3 選自氫和C1 -C4 烷基羧酸基團。在一些實施方式中，R3 係氫。在一些實施方式中，R3 係C1 -C4 烷基羧酸基團。在一些實施方式中，R3 係-CH2 CH2 CO2 H。
在一些實施方式中，R4 選自氫、羥基基團、-O-(C1 -C4 烷基)基團、-O-C(=O)-(C1 -C4 烷基)基團和C1 -C4 烷基基團。在一些實施方式中，R4 係氫。在一些實施方式中，R4 係羥基。在一些實施方式中，R4 係-O-(C1 -C4 烷基)基團。在一些實施方式中，R4 係-OCH3 。在一些實施方式中，R4 係-OCH2 CH3 。在一些實施方式中，R4 係-O-C(=O)-(C1 -C4 烷基)基團。在一些實施方式中，R4 係-O-C(=O)-CH3 。在一些實施方式中，R4 係-O-C(=O)-CH2 CH3 。在一些實施方式中，R4 係C1 -C4 烷基基團。在一些實施方式中，R4 係甲基。在一些實施方式中，R4 係乙基。
在一些實施方式中，R5 選自氫、羥基基團、-O-(C1 -C4 烷基)基團和C1 -C4 烷基基團。在一些實施方式中，R5 係氫。在一些實施方式中，R5 係羥基。在一些實施方式中，R5 係-O-(C1 -C4 烷基)基團。在一些實施方式中，R5 係C1 -C4 烷基基團。
在一些實施方式中，R6 係氫。在一些實施方式中，R7 係氫。在一些實施方式中，R6 係氫且R7 係-O-R17 。在一些實施方式中，R6 係氫且R7 係-OR17 ，其中R17 選自氫和C1 -C4 烷基基團。在一些實施方式中，R6 係氫且R7 係-O-R17 ，其中R17 係氫。在一些實施方式中，R6 係-O-R17 且R7 係氫。在一些實施方式中，R6 係-O-R17 且R7 係氫，其中R17 選自氫和C1 -C4 烷基基團。在一些實施方式中，R6 係-O-R17 且R7 係氫，其中R17 係氫。在一些實施方式中，R6 係氫且R7 係-NR15 R16 。在一些實施方式中，R6 係氫且R7 係-NR15 R16 ，其中R15 係H且R16 選自氫、R17 、-C(=O)-R17 和-C(=O)-O-R17 。在一些實施方式中，R6 係氫且R7 係-NR15 R16 ，其中R15 係H且R16 選自氫、R17 、-C(=O)-R17 和-C(=O)-O-R17 ，且其中R17 選自氫、C1 -C6 烷基基團、C3 -C8 環烷基基團和C3 -C8 雜環基基團。在一些實施方式中，R6 係-O-R17 。在一些實施方式中，R6 係-O-C(=O)-R17 。在一些實施方式中，R6 係C1 -C6 烷基。在一些實施方式中，R6 係C1 -C4 烷基。在一些實施方式中，R6 係C1 烷基。在一些實施方式中，R6 係-NR15 R16 。
在一些實施方式中，R7 係-O-R17 。在一些實施方式中，R7 係-O-C(=O)-R17 。在一些實施方式中，R7 係C1 -C6 烷基。在一些實施方式中，R7 係C1 -C4 烷基。在一些實施方式中，R7 係C1 烷基。在一些實施方式中，R7 係-NR15 R16 。
在一些實施方式中，R8 選自氫、羥基基團、-O-(C1 -C4 烷基)基團和(C1 -C4 烷基)。在一些實施方式中，R8 係氫。在一些實施方式中，R8 係羥基基團。在一些實施方式中，R8 係-O-(C1 -C4 烷基)基團。在一些實施方式中，R8 係-O-(C1 烷基)基團。
在一些實施方式中，R15 係氫。在一些實施方式中，R15 係R17 。在一些實施方式中，R15 係-C(=O)-R17 。在一些實施方式中，R15 係-C(=O)-O-R17 。
在一些實施方式中，R16 係氫。在一些實施方式中，R16 係R17 。在一些實施方式中，R16 係-C(=O)-R17 。在一些實施方式中，R16 係-C(=O)-O-R17 。
在一些實施方式中，R17 選自氫、C1 -C4 烷基基團、C3 -C6 環烷基基團和C3 -C8 雜環基基團。在一些實施方式中，R17 係氫。在一些實施方式中，R17 係C1 -C4 烷基基團。在一些實施方式中，R17 係C1 烷基基團。在一些實施方式中，R17 係C3 -C6 環烷基基團。在一些實施方式中，R17 係C3 環烷基基團。在一些實施方式中，R17 係C4 環烷基基團。在一些實施方式中，R17 係C5 環烷基基團。在一些實施方式中，R17 係C6 環烷基基團。在一些實施方式中，R17 係C3 -C8 雜環基基團。在一些實施方式中，R17 係C3 雜環基基團。在一些實施方式中，R17 係C4 雜環基基團。在一些實施方式中，R17 係C5 雜環基基團。在一些實施方式中，R17 係C6 雜環基基團。在一些實施方式中，R17 係C7 雜環基基團。在一些實施方式中，R17 係C8 雜環基基團。
在一些實施方式中，具有式 (IV) 的剪接調節劑化合物連接至例如具有式 (I) 的ADC中的連接子L，如以下式 (IV-A) 所示：
Figure 02_image044
(IV-A)。
在一些其他實施方式中，藥物部分係具有式 (VI) 的剪接調節劑化合物：
Figure 02_image046
(VI)，或其藥學上可接受的鹽，其中： R1 和R9 各自獨立地選自氫、C1 -C6 烷基基團、C1 -C6 烷基烷氧基基團、C1 -C6 烷基胺基基團、C1 -C6 烷基羧酸基團、C1 -C6 烷基羥基基團、C3 -C8 環烷基基團、苄基基團、C3 -C8 雜環基基團、-O-C(=O)-(C1 -C6 烷基)基團和-CD3 ； R3 選自氫、C1 -C6 烷基基團、C1 -C6 烷基烷氧基基團、C1 -C6 烷基胺基基團、C1 -C6 烷基羧酸基團、C1 -C6 烷基羥基基團、C3 -C8 環烷基基團、苄基基團、C3 -C8 雜環基基團和-O-C(=O)-(C1 -C6 烷基)基團； R4 、R5 和R8 各自獨立地選自氫、羥基基團、-O-(C1 -C6 烷基)基團、-O-C(=O)-(C1 -C6 烷基)基團和C1 -C6 烷基基團； R6 和R7 各自獨立地選自氫、-O-R17 、-O-C(=O)-R17 、-O-C(=O)-NR15 R16 、C1 -C6 烷基基團、-NR15 R16 和連接子； R10 選自氫、C1 -C6 烷基基團、-C(=O)-(C1 -C6 烷基)基團和-CD3 ； R15 和R16 各自獨立地選自氫、R17 、-C(=O)-R17 和-C(=O)-O-R17 ； R17 選自氫、C1 -C6 烷基基團、C3 -C8 環烷基基團、苄基基團和C3 -C8 雜環基基團；並且 a係1、2、3、4、5、6、7、8、9或10； 其中R1 、R3 、R4 、R5 、R6 、R7 、R8 、R9 、R10 、R15 、R16 和R17 各自獨立地被0至3個獨立地選自以下的基團取代：鹵素、羥基基團、C1 -C6 烷基基團、-O-(C1 -C6 烷基)基團、-NR15 R16 、C3 -C8 環烷基基團、C1 -C6 烷基羥基基團、C1 -C6 烷基烷氧基基團、苄基基團和C3 -C8 雜環基基團； 其中R6 和R7 中至少一個係氫；並且 其中R1 和R9 不能同時不存在。
在一些實施方式中，R1 選自氫、C1 -C4 烷基基團、C1 -C4 烷基羧酸基團和C3 -C8 環烷基基團。在一些實施方式中，R1 係氫。在一些實施方式中，R1 係C1 -C4 烷基基團。在一些實施方式中，R1 係甲基。在一些實施方式中，R1 係乙基。在一些實施方式中，R1 係C1 -C4 烷基羧酸基團。在一些實施方式中，R1 係-CH2 CH2 CH2 CO2 H。在一些實施方式中，R1 係C3 -C8 環烷基基團。在一些實施方式中，R1 係環庚基。
在一些實施方式中，R3 選自氫、C1 -C4 烷基基團、C1 -C4 烷基烷氧基基團、C1 -C4 烷基羧酸基團和C1 -C4 烷基羥基基團。在一些實施方式中，R3 選自氫和C1 -C4 烷基羧酸基團。在一些實施方式中，R3 係氫。在一些實施方式中，R3 係C1 -C4 烷基羧酸基團。在一些實施方式中，R3 係-CH2 CH2 CO2 H。
在一些實施方式中，R4 選自氫、羥基基團、-O-(C1 -C4 烷基)基團、-O-C(=O)-(C1 -C4 烷基)基團和C1 -C4 烷基基團。在一些實施方式中，R4 係氫。在一些實施方式中，R4 係羥基。在一些實施方式中，R4 係-O-(C1 -C4 烷基)基團。在一些實施方式中，R4 係-OCH3 。在一些實施方式中，R4 係-OCH2 CH3 。在一些實施方式中，R4 係-O-C(=O)-(C1 -C4 烷基)基團。在一些實施方式中，R4 係-O-C(=O)-CH3 。在一些實施方式中，R4 係-O-C(=O)-CH2 CH3 。在一些實施方式中，R4 係C1 -C4 烷基基團。在一些實施方式中，R4 係甲基。在一些實施方式中，R4 係乙基。
在一些實施方式中，R5 選自氫、羥基基團、-O-(C1 -C4 烷基)基團和C1 -C4 烷基基團。在一些實施方式中，R5 係氫。在一些實施方式中，R5 係羥基。在一些實施方式中，R5 係-O-(C1 -C4 烷基)基團。在一些實施方式中，R5 係C1 -C4 烷基基團。
在一些實施方式中，R9 選自不存在、氫、C1 -C4 烷基基團、-(C=O)-(C1 -C4 烷基)基團和-CD3 。在一些實施方式中，R9 不存在。在一些實施方式中，R9 係氫。在一些實施方式中，R9 係C1 -C4 烷基基團。在一些實施方式中，C1 -C4 烷基基團係甲基。在一些實施方式中，C1 -C4 烷基基團係乙基。在一些實施方式中，R9 係-(C=O)-(C1 -C4 烷基)基團。在一些實施方式中，-(C=O)-(C1 -C4 烷基)基團係-(C=O)-甲基。在一些實施方式中，R9 係-CD3 。
在一些實施方式中，R10 選自氫、C1 -C4 烷基基團、-(C=O)-(C1 -C4 烷基)基團和-CD3 。在一些實施方式中，R10 係氫。在一些實施方式中，R10 係C1 -C4 烷基基團。在一些實施方式中，C1 -C4 烷基基團係甲基。在一些實施方式中，C1 -C4 烷基基團係乙基。在一些實施方式中，R10 係-(C=O)-(C1 -C4 烷基)基團。在一些實施方式中，-(C=O)-(C1 -C4 烷基)基團係-(C=O)-甲基。在一些實施方式中，R10 係-CD3 。
在一些實施方式中，R6 係氫。在一些實施方式中，R7 係氫。在一些實施方式中，R6 係氫且R7 係-O-R17 。在一些實施方式中，R6 係氫且R7 係-OR17 ，其中R17 選自氫和C1 -C4 烷基基團。在一些實施方式中，R6 係氫且R7 係-O-R17 ，其中R17 係氫。在一些實施方式中，R6 係-O-R17 且R7 係氫。在一些實施方式中，R6 係-O-R17 且R7 係氫，其中R17 選自氫和C1 -C4 烷基基團。在一些實施方式中，R6 係-O-R17 且R7 係氫，其中R17 係氫。在一些實施方式中，R6 係氫且R7 係-NR15 R16 。在一些實施方式中，R6 係氫且R7 係-NR15 R16 ，其中R15 係H且R16 選自氫、R17 、-C(=O)-R17 和-C(=O)-O-R17 。在一些實施方式中，R6 係氫且R7 係-NR15 R16 ，其中R15 係H且R16 選自氫、R17 、-C(=O)-R17 和-C(=O)-O-R17 ，且其中R17 選自氫、C1 -C6 烷基基團、C3 -C8 環烷基基團和C3 -C8 雜環基基團。在一些實施方式中，R6 係-O-R17 。在一些實施方式中，R6 係-O-C(=O)-R17 。在一些實施方式中，R6 係C1 -C6 烷基。在一些實施方式中，R6 係C1 -C4 烷基。在一些實施方式中，R6 係C1 烷基。在一些實施方式中，R6 係-NR15 R16 。
在一些實施方式中，R7 係-O-R17 。在一些實施方式中，R7 係-O-C(=O)-R17 。在一些實施方式中，R7 係C1 -C6 烷基。在一些實施方式中，R7 係C1 -C4 烷基。在一些實施方式中，R7 係C1 烷基。在一些實施方式中，R7 係-NR15 R16 。
在一些實施方式中，R8 選自氫、羥基基團、-O-(C1 -C4 烷基)基團和(C1 -C4 烷基)。在一些實施方式中，R8 係氫。在一些實施方式中，R8 係羥基基團。在一些實施方式中，R8 係-O-(C1 -C4 烷基)基團。在一些實施方式中，R8 係-O-(C1 烷基)基團。
在一些實施方式中，R15 係氫。在一些實施方式中，R15 係R17 。在一些實施方式中，R15 係-C(=O)-R17 。在一些實施方式中，R15 係-C(=O)-O-R17 。
在一些實施方式中，R16 係氫。在一些實施方式中，R16 係R17 。在一些實施方式中，R16 係-C(=O)-R17 。在一些實施方式中，R16 係-C(=O)-O-R17 。
在一些實施方式中，R17 選自氫、C1 -C4 烷基基團、C3 -C6 環烷基基團和C3 -C8 雜環基基團。在一些實施方式中，R17 係氫。在一些實施方式中，R17 係C1 -C4 烷基基團。在一些實施方式中，R17 係C1 烷基基團。在一些實施方式中，R17 係C3 -C6 環烷基基團。在一些實施方式中，R17 係C3 環烷基基團。在一些實施方式中，R17 係C4 環烷基基團。在一些實施方式中，R17 係C5 環烷基基團。在一些實施方式中，R17 係C6 環烷基基團。在一些實施方式中，R17 係C3 -C8 雜環基基團。在一些實施方式中，R17 係C3 雜環基基團。在一些實施方式中，R17 係C4 雜環基基團。在一些實施方式中，R17 係C5 雜環基基團。在一些實施方式中，R17 係C6 雜環基基團。在一些實施方式中，R17 係C7 雜環基基團。在一些實施方式中，R17 係C8 雜環基基團。
在一些實施方式中，a係1、2、3、4、5、6、7、8、9或10。在一些實施方式中，a係1、2、3、4、5或6。在一些實施方式中，a係1、2、3、4或5。在一些實施方式中，a係1、2、3或4。在一些實施方式中，a係1、2或3。在一些實施方式中，a係1或2。在一些實施方式中，a係1。在一些實施方式中，a係2。在一些實施方式中，a係3。在一些實施方式中，a係4。在一些實施方式中，a係5。在一些實施方式中，a係6。在一些實施方式中，a係7。在一些實施方式中，a係8。在一些實施方式中，a係9。在一些實施方式中，a係10。
在一些實施方式中，具有式 (VI) 的剪接調節劑化合物連接至例如具有式 (I) 的ADC中的連接子L，如以下式 (VI-A) 所示：
Figure 02_image048
(VI-A)。
在一些其他實施方式中，藥物部分係具有式 (VIII) 的剪接調節劑化合物：
Figure 02_image050
(VIII)，或其藥學上可接受的鹽，其中： R1 選自不存在、氫、C1 -C6 烷基基團、C1 -C6 烷基烷氧基基團、C1 -C6 烷基胺基基團、C1 -C6 烷基羧酸基團、C1 -C6 烷基羥基基團、C3 -C8 環烷基基團、苄基基團、C3 -C8 雜環基基團、-O-C(=O)-(C1 -C6 烷基)基團和-CD3 ； R3 選自氫、C1 -C6 烷基基團、C1 -C6 烷基烷氧基基團、C1 -C6 烷基胺基基團、C1 -C6 烷基羧酸基團、C1 -C6 烷基羥基基團、C3 -C8 環烷基基團、苄基基團、C3 -C8 雜環基基團和-O-C(=O)-(C1 -C6 烷基)基團； R4 選自氫、羥基基團、-O-(C1 -C6 烷基)基團、-O-C(=O)-(C1 -C6 烷基)基團和C1 -C6 烷基基團；並且 R10 選自3至10員碳環和3至10員雜環，其各自被0至3個Ra 取代，其中每個Ra 獨立地選自鹵素、C1 -C6 烷基基團、-O-(C1 -C6 )烷基基團、C1 -C6 烷基烷氧基基團、C1 -C6 烷基羥基基團、-S(=O)w -(4至7員雜環)、4至7員碳環和4至7員雜環； R15 和R16 各自獨立地選自氫、R17 、-C(=O)-R17 和-C(=O)-O-R17 ；並且 R17 選自氫、C1 -C6 烷基基團、C3 -C8 環烷基基團、苄基基團和C3 -C8 雜環基基團； 其中R1 、R3 、R4 、R10 、R15 、R16 和R17 各自獨立地被0至3個獨立地選自以下的基團取代：鹵素、羥基基團、C1 -C6 烷基基團、-O-(C1 -C6 烷基)基團、-NR15 R16 、C3 -C8 環烷基基團、C1 -C6 烷基羥基基團、C1 -C6 烷基烷氧基基團、苄基基團和C3 -C8 雜環基基團；並且 其中每個Ra 獨立地被0至3個獨立地選自以下的基團取代：鹵素、羥基基團、-NR15 R16 、C1 -C6 烷基基團、-(C=O)-(C1 -C6 烷基)基團、-(C=O)-(C1 -C6 烷基)-(C3 -C10 雜環基基團)和C1 -C6 烷基羧酸基團，其各自被0、1或2個獨立地選自以下的基團取代：鹵素、羥基基團、-NR15 R16 和C1 -C3 烷基基團；並且 w係0、1或2。
在一些實施方式中，R1 選自不存在、氫、C1 -C4 烷基基團、C1 -C4 烷基羧酸基團和C3 -C8 環烷基基團。在一些實施方式中，R1 係氫。在一些實施方式中，R1 係C1 -C4 烷基基團。在一些實施方式中，R1 係甲基。在一些實施方式中，R1 係乙基。在一些實施方式中，R1 係C1 -C4 烷基羧酸基團。在一些實施方式中，R1 係-CH2 CH2 CH2 CO2 H。在一些實施方式中，R1 係C3 -C8 環烷基基團。在一些實施方式中，R1 係環庚基。
在一些實施方式中，R3 選自氫、C1 -C4 烷基基團、C1 -C4 烷基烷氧基基團、C1 -C4 烷基羧酸基團和C1 -C4 烷基羥基基團。在一些實施方式中，R3 選自氫和C1 -C4 烷基羧酸基團。在一些實施方式中，R3 係氫。在一些實施方式中，R3 係C1 -C4 烷基羧酸基團。在一些實施方式中，R3 係-CH2 CH2 CO2 H。
在一些實施方式中，R4 選自氫、羥基基團、-O-(C1 -C4 烷基)基團、-O-C(=O)-(C1 -C4 烷基)基團和C1 -C4 烷基基團。在一些實施方式中，R4 係氫。在一些實施方式中，R4 係羥基。在一些實施方式中，R4 係-O-(C1 -C4 烷基)基團。在一些實施方式中，R4 係-OCH3 。在一些實施方式中，R4 係-OCH2 CH3 。在一些實施方式中，R4 係-O-C(=O)-(C1 -C4 烷基)基團。在一些實施方式中，R4 係-O-C(=O)-CH3 。在一些實施方式中，R4 係-O-C(=O)-CH2 CH3 。在一些實施方式中，R4 係C1 -C4 烷基基團。在一些實施方式中，R4 係甲基。在一些實施方式中，R4 係乙基。
在一些實施方式中，R10 選自6至9員碳環和6至9員雜環，其各自被0至2個Ra 取代，其中每個Ra 獨立地被0至3個獨立地選自以下的基團取代：鹵素、羥基基團、C1 -C6 烷基基團、-(C=O)-(C1 -C6 烷基)基團、-(C=O)-(C1 -C6 烷基)-(3至10員雜環)基團和C1 -C6 烷基羧酸基團。
在一些實施方式中，該碳環係被0至2個Ra 取代的苯基，其中每個Ra 獨立地被0至3個獨立地選自以下的基團取代：鹵素、羥基基團、C1 -C6 烷基基團、-(C=O)-(C1 -C6 烷基)基團、-(C=O)-(C1 -C6 烷基)-(3至10員雜環)基團和C1 -C6 烷基羧酸基團。在一些實施方式中，該苯基被2個Ra 取代，其中每個Ra 獨立地被0至3個獨立地選自以下的基團取代：鹵素、羥基基團、C1 -C6 烷基基團、-(C=O)-(C1 -C6 烷基)基團、-(C=O)-(C1 -C6 烷基)-(3至10員雜環)基團和C1 -C6 烷基羧酸基團。在一些實施方式中，該苯基係
Figure 02_image052
。
在一些實施方式中，該雜環係被0至2個Ra 取代的9員雜環，其中每個Ra 獨立地被0至3個獨立地選自以下的基團取代：鹵素、羥基基團、C1 -C6 烷基基團、-(C=O)-(C1 -C6 烷基)基團、-(C=O)-(C1 -C6 烷基)-(3至10員雜環)基團和C1 -C6 烷基羧酸基團。在一些實施方式中，該9員雜環係
Figure 02_image054
。
在一些實施方式中，Ra 選自鹵素、3至10員碳環和3至10員雜環，其中每個Ra 獨立地被0至3個獨立地選自以下的基團取代：鹵素、羥基基團、C1 -C6 烷基基團、-(C=O)-(C1 -C6 烷基)基團、-(C=O)-(C1 -C6 烷基)-(3至10員雜環)基團和C1 -C6 烷基羧酸基團。在一些實施方式中，Ra 選自鹵素、
Figure 02_image056
、
Figure 02_image058
、
Figure 02_image060
和
Figure 02_image062
。
在一些實施方式中，R15 係氫。在一些實施方式中，R15 係R17 。在一些實施方式中，R15 係-C(=O)-R17 。在一些實施方式中，R15 係-C(=O)-O-R17 。
在一些實施方式中，R16 係氫。在一些實施方式中，R16 係R17 。在一些實施方式中，R16 係-C(=O)-R17 。在一些實施方式中，R16 係-C(=O)-O-R17 。
在一些實施方式中，R17 選自氫、C1 -C4 烷基基團、C3 -C6 環烷基基團和C3 -C8 雜環基基團。在一些實施方式中，R17 係氫。在一些實施方式中，R17 係C1 -C4 烷基基團。在一些實施方式中，R17 係C1 烷基基團。在一些實施方式中，R17 係C3 -C6 環烷基基團。在一些實施方式中，R17 係C3 環烷基基團。在一些實施方式中，R17 係C4 環烷基基團。在一些實施方式中，R17 係C5 環烷基基團。在一些實施方式中，R17 係C6 環烷基基團。在一些實施方式中，R17 係C3 -C8 雜環基基團。在一些實施方式中，R17 係C3 雜環基基團。在一些實施方式中，R17 係C4 雜環基基團。在一些實施方式中，R17 係C5 雜環基基團。在一些實施方式中，R17 係C6 雜環基基團。在一些實施方式中，R17 係C7 雜環基基團。在一些實施方式中，R17 係C8 雜環基基團。
在一些實施方式中，具有式 (VIII) 的剪接調節劑化合物連接至例如具有式 (I) 的ADC中的連接子L，如以下式 (VIII-A) 所示：
Figure 02_image064
(VIII-A)。
在一些實施方式中，藥物部分係選自D1和D2的剪接調節劑。
在一些實施方式中，藥物部分係D1或其藥學上可接受的鹽。在一些實施方式中，所揭露之ADC中使用的D1藥物部分的結構顯示於下：
Figure 02_image001
D1
在一些實施方式中，本文所述之ADC（例如，具有式 (I) 的ADC）中的連接子經由哌𠯤基團上的胺共價連接至D1藥物部分。在各種實施方式中，藥物部分係D1的衍生物。在一些實施方式中，D1衍生物保持D1的至少一種生物功能或活性（例如SF3b複合體結合、體外剪接活性、細胞毒性），但具有改變的化學結構。
在一些實施方式中，藥物部分係D2或其藥學上可接受的鹽。在一些實施方式中，所揭露之ADC中使用的D2藥物部分的結構顯示於下：
Figure 02_image002
D2
在一些實施方式中，本文所述之ADC（例如，具有式 (I) 的ADC）中的連接子經由哌𠯤基團上的胺共價連接至D2藥物部分。在一些實施方式中，藥物部分係D2的衍生物。在一些實施方式中，D2衍生物保持D2的至少一種生物功能或活性（例如SF3b複合體結合、體外剪接活性、細胞毒性），但具有改變的化學結構。
在一些實施方式中，剪接調節劑包含D1：
Figure 02_image001
(D1)。
在一些實施方式中，剪接調節劑包含D2：
Figure 02_image002
(D2)。
在一些實施方式中，剪接調節劑包含D2’：
Figure 02_image066
(D2’)。
在一些實施方式中，剪接調節劑包含D3：
Figure 02_image068
(D3)。
在一些實施方式中，剪接調節劑包含D4：
Figure 02_image070
(D4)。
在一些實施方式中，剪接調節劑包含D5：
Figure 02_image072
(D5)。
在一些實施方式中，剪接調節劑包含D6：
Figure 02_image074
(D6)。
在一些實施方式中，剪接調節劑包含D7：
Figure 02_image076
(D7)。
在一些實施方式中，剪接調節劑包含D8：
Figure 02_image078
(D8)。
在一些實施方式中，剪接調節劑包含D9：
Figure 02_image080
(D9)。
在一些實施方式中，剪接調節劑包含D10：
Figure 02_image082
(D10)。
在一些實施方式中，剪接調節劑包含D11：
Figure 02_image084
(D11)。
在一些實施方式中，剪接調節劑包含D12：
Figure 02_image086
(D12)。
在一些實施方式中，剪接調節劑包含D13：
Figure 02_image088
(D13)。
在一些實施方式中，剪接調節劑包含D14：
Figure 02_image090
(D14)。
在一些實施方式中，剪接調節劑包含D15：
Figure 02_image092
(D15)。
在一些實施方式中，剪接調節劑包含D16：
Figure 02_image094
(D16)。
在一些實施方式中，剪接調節劑包含D17：
Figure 02_image096
(D17)。
在一些實施方式中，剪接調節劑包含D18：
Figure 02_image098
(D18)。
在一些實施方式中，剪接調節劑包含D19：
Figure 02_image100
(D19)。
在一些實施方式中，剪接調節劑包含D20：
Figure 02_image102
(D20)。
在一些實施方式中，剪接調節劑包含D21：
Figure 02_image104
(D21)。
在一些實施方式中，剪接調節劑包含D22：
Figure 02_image106
(D22)。
在一些實施方式中，剪接調節劑包含D23：
Figure 02_image108
(D23)。
在一些實施方式中，剪接調節劑包含D24：
Figure 02_image110
(D24)。
在一些實施方式中，剪接調節劑包含D25：
Figure 02_image112
(D25)。
在一些實施方式中，剪接調節劑包含D26：
Figure 02_image114
(D26)。
在一些實施方式中，剪接調節劑包含D27：
Figure 02_image116
(D27)。
在一些實施方式中，剪接調節劑包含D28：
Figure 02_image118
(D28)。
在一些實施方式中，剪接調節劑包含D29：
Figure 02_image120
(D29)。
在一些實施方式中，剪接調節劑包含D30：
Figure 02_image122
(D30)。
在一些實施方式中，剪接調節劑包含D31：
Figure 02_image124
(D31)。
在一些實施方式中，剪接調節劑包含D32：
Figure 02_image126
(D32)。
在一些實施方式中，剪接調節劑包含D33：
Figure 02_image128
(D33)。
在一些實施方式中，剪接調節劑包含D34：
Figure 02_image130
(D34)。
在一些實施方式中，剪接調節劑包含D35：
Figure 02_image132
(D35)。
示例性ADC具有式 (I)： Ab-(L-D) p (I) 其中 Ab係能夠結合BCMA的抗體或抗原結合片段； D係D1或D2； L係將Ab共價連接至D的連接子；並且p 為1至15的整數。
在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段靶向表現BCMA的細胞。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段係內化性抗體或內化性抗原結合片段。
在一些實施方式中，ADC具有式 (I)： Ab-(L-D) p (I) 其中 Ab係抗體或抗原結合片段，其中該抗體或抗原結合片段能夠結合BCMA，並且包含三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 1（HCDR1）、SEQ ID NO: 2（HCDR2）和SEQ ID NO: 3（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 4（LCDR1）、SEQ ID NO: 5（LCDR2）和SEQ ID NO: 6（LCDR3），如由Kabat編號系統所定義的；或者三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 37（HCDR1）、SEQ ID NO: 38（HCDR2）和SEQ ID NO: 39（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 40（LCDR1）、SEQ ID NO: 41（LCDR2）和SEQ ID NO: 42（LCDR3），如由IMGT編號系統所定義的； D係D1或D2； L係將Ab共價連接至D的連接子；並且p 為1至15的整數。
在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含人重鏈和輕鏈可變區框架，或具有一個或多個回復突變的人重鏈和輕鏈可變區框架。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含含有SEQ ID NO: 76的胺基酸序列的重鏈可變區以及含有SEQ ID NO: 77的胺基酸序列的輕鏈可變區。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含人IgG1重鏈恒定區和人Igκ輕鏈恒定區。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含人IgG1重鏈恒定區和人Igλ輕鏈恒定區。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含人IgG4重鏈恒定區和人Igκ輕鏈恒定區。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含人IgG4重鏈恒定區和人Igλ輕鏈恒定區。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含含有SEQ ID NO: 90的胺基酸序列的重鏈恒定區以及含有SEQ ID NO: 91的胺基酸序列的輕鏈恒定區。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含含有SEQ ID NO: 92的胺基酸序列的重鏈以及含有SEQ ID NO: 93的胺基酸序列的輕鏈。在一些實施方式中，重鏈恒定區或重鏈進一步包含C-末端離胺酸（K）。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段係AB212。
在一些實施方式中，D係D1。在一些實施方式中，D係D2。
在一些實施方式中，L選自本文揭露之連接子中的任一種或本文揭露之連接子組分的任何組合。在一些實施方式中，L為ADL1、ADL2、ADL5、ADL6、ADL7、ADL10、ADL12、ADL13、ADL14、ADL15、ADL21、ADL22或ADL23連接子。在一些實施方式中，ADL1、ADL2、ADL5、ADL6、ADL7、ADL10、ADL12、ADL13、ADL14、ADL15、ADL21、ADL22或ADL23連接子還可包含一個或多個額外間隔子單元。在一些實施方式中，L係ADL1、ADL6、ADL13、ADL21、ADL22或ADL23連接子。在一些實施方式中，ADL1、ADL6、ADL13、ADL21、ADL22或ADL23連接子還可包含一個或多個額外間隔子單元。
在一些實施方式中，L係可裂解連接子。在一些實施方式中，可裂解連接子包含MC-Val-Cit-pABC、MC-Val-Ala-pABC、MC-Ala-Ala-Asp-pABC、MC-Glu-Val-Cit-pABC、MC-(PEG)2 -Val-Cit-pABC或MC-β-葡糖苷酸。在一些實施方式中，可裂解連接子還可包含一個或多個額外間隔子單元。在一些實施方式中，L係不可裂解連接子。
在一些實施方式中，p 為1至12。在一些實施方式中，p 為2至8。在一些實施方式中，p 為4至8。在一些實施方式中，p 為4。在一些實施方式中，p 為8。
在一些實施方式中，ADC具有式 (I)： Ab-(L-D) p (I) 其中 Ab係抗體或抗原結合片段，其中該抗體或抗原結合片段能夠結合BCMA，並且包含三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 1（HCDR1）、SEQ ID NO: 7（HCDR2）和SEQ ID NO: 8（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 9（LCDR1）、SEQ ID NO: 10（LCDR2）和SEQ ID NO: 11（LCDR3），如由Kabat編號系統所定義的；或者三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 43（HCDR1）、SEQ ID NO: 44（HCDR2）和SEQ ID NO: 45（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 40（LCDR1）、SEQ ID NO: 41（LCDR2）和SEQ ID NO: 46（LCDR3），如由IMGT編號系統所定義的； D係D1或D2； L係將Ab共價連接至D的連接子；並且p 為1至15的整數。
在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含人重鏈和輕鏈可變區框架，或具有一個或多個回復突變的人重鏈和輕鏈可變區框架。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含含有SEQ ID NO: 78的胺基酸序列的重鏈可變區以及含有SEQ ID NO: 79的胺基酸序列的輕鏈可變區。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含人IgG1重鏈恒定區和人Igκ輕鏈恒定區。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含人IgG1重鏈恒定區和人Igλ輕鏈恒定區。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含人IgG4重鏈恒定區和人Igκ輕鏈恒定區。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含人IgG4重鏈恒定區和人Igλ輕鏈恒定區。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含含有SEQ ID NO: 90的胺基酸序列的重鏈恒定區以及含有SEQ ID NO: 91的胺基酸序列的輕鏈恒定區。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含含有SEQ ID NO: 94的胺基酸序列的重鏈以及含有SEQ ID NO: 95的胺基酸序列的輕鏈。在一些實施方式中，重鏈恒定區或重鏈進一步包含C-末端離胺酸（K）。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段係AB213。
在一些實施方式中，D係D1。在一些實施方式中，D係D2。
在一些實施方式中，L選自本文揭露之連接子中的任一種或本文揭露之連接子組分的任何組合。在一些實施方式中，L為ADL1、ADL2、ADL5、ADL6、ADL7、ADL10、ADL12、ADL13、ADL14、ADL15、ADL21、ADL22或ADL23連接子。在一些實施方式中，ADL1、ADL2、ADL5、ADL6、ADL7、ADL10、ADL12、ADL13、ADL14、ADL15、ADL21、ADL22或ADL23連接子還可包含一個或多個額外間隔子單元。在一些實施方式中，L係ADL1、ADL6、ADL13、ADL21、ADL22或ADL23連接子。在一些實施方式中，ADL1、ADL6、ADL13、ADL21、ADL22或ADL23連接子還可包含一個或多個額外間隔子單元。
在一些實施方式中，L係可裂解連接子。在一些實施方式中，可裂解連接子包含MC-Val-Cit-pABC、MC-Val-Ala-pABC、MC-Ala-Ala-Asp-pABC、MC-Glu-Val-Cit-pABC、MC-(PEG)2 -Val-Cit-pABC或MC-β-葡糖苷酸。在一些實施方式中，可裂解連接子還可包含一個或多個額外間隔子單元。在一些實施方式中，L係不可裂解連接子。
在一些實施方式中，p 為1至12。在一些實施方式中，p 為2至8。在一些實施方式中，p 為4至8。在一些實施方式中，p 為4。在一些實施方式中，p 為8。
在一些實施方式中，ADC具有式 (I)： Ab-(L-D) p (I) 其中 Ab係抗體或抗原結合片段，其中該抗體或抗原結合片段能夠結合BCMA，並且包含三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 1（HCDR1）、SEQ ID NO: 12（HCDR2）和SEQ ID NO: 13（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 14（LCDR1）、SEQ ID NO: 15（LCDR2）和SEQ ID NO: 16（LCDR3），如由Kabat編號系統所定義的；或者三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 47（HCDR1）、SEQ ID NO: 48（HCDR2）和SEQ ID NO: 49（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 40（LCDR1）、SEQ ID NO: 41（LCDR2）和SEQ ID NO: 50（LCDR3），如由IMGT編號系統所定義的； D係D1或D2； L係將Ab共價連接至D的連接子；並且p 為1至15的整數。
在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含人重鏈和輕鏈可變區框架，或具有一個或多個回復突變的人重鏈和輕鏈可變區框架。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含含有SEQ ID NO: 80的胺基酸序列的重鏈可變區以及含有SEQ ID NO: 81的胺基酸序列的輕鏈可變區。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含人IgG1重鏈恒定區和人Igκ輕鏈恒定區。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含人IgG1重鏈恒定區和人Igλ輕鏈恒定區。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含人IgG4重鏈恒定區和人Igκ輕鏈恒定區。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含人IgG4重鏈恒定區和人Igλ輕鏈恒定區。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含含有SEQ ID NO: 90的胺基酸序列的重鏈恒定區以及含有SEQ ID NO: 91的胺基酸序列的輕鏈恒定區。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含含有SEQ ID NO: 96的胺基酸序列的重鏈以及含有SEQ ID NO: 97的胺基酸序列的輕鏈。在一些實施方式中，重鏈恒定區或重鏈進一步包含C-末端離胺酸（K）。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段係AB214。
在一些實施方式中，D係D1。在一些實施方式中，D係D2。
在一些實施方式中，L選自本文揭露之連接子中的任一種或本文揭露之連接子組分的任何組合。在一些實施方式中，L為ADL1、ADL2、ADL5、ADL6、ADL7、ADL10、ADL12、ADL13、ADL14、ADL15、ADL21、ADL22或ADL23連接子。在一些實施方式中，ADL1、ADL2、ADL5、ADL6、ADL7、ADL10、ADL12、ADL13、ADL14、ADL15、ADL21、ADL22或ADL23連接子還可包含一個或多個額外間隔子單元。在一些實施方式中，L係ADL1、ADL6、ADL13、ADL21、ADL22或ADL23連接子。在一些實施方式中，ADL1、ADL6、ADL13、ADL21、ADL22或ADL23連接子還可包含一個或多個額外間隔子單元。
在一些實施方式中，L係可裂解連接子。在一些實施方式中，可裂解連接子包含MC-Val-Cit-pABC、MC-Val-Ala-pABC、MC-Ala-Ala-Asp-pABC、MC-Glu-Val-Cit-pABC、MC-(PEG)2 -Val-Cit-pABC或MC-β-葡糖苷酸。在一些實施方式中，可裂解連接子還可包含一個或多個額外間隔子單元。在一些實施方式中，L係不可裂解連接子。
在一些實施方式中，p 為1至12。在一些實施方式中，p 為2至8。在一些實施方式中，p 為4至8。在一些實施方式中，p 為4。在一些實施方式中，p 為8。
在一些實施方式中，ADC具有式 (I)： Ab-(L-D) p (I) 其中 Ab係抗體或抗原結合片段，其中該抗體或抗原結合片段能夠結合BCMA，並且包含三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 1（HCDR1）、SEQ ID NO: 17（HCDR2）和SEQ ID NO: 18（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 19（LCDR1）、SEQ ID NO: 20（LCDR2）和SEQ ID NO: 21（LCDR3），如由Kabat編號系統所定義的；或者三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 51（HCDR1）、SEQ ID NO: 52（HCDR2）和SEQ ID NO: 53（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 40（LCDR1）、SEQ ID NO: 41（LCDR2）和SEQ ID NO: 54（LCDR3），如由IMGT編號系統所定義的； D係D1或D2； L係將Ab共價連接至D的連接子；並且p 為1至15的整數。
在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含人重鏈和輕鏈可變區框架，或具有一個或多個回復突變的人重鏈和輕鏈可變區框架。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含含有SEQ ID NO: 82的胺基酸序列的重鏈可變區以及含有SEQ ID NO: 83的胺基酸序列的輕鏈可變區。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含人IgG1重鏈恒定區和人Igκ輕鏈恒定區。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含人IgG1重鏈恒定區和人Igλ輕鏈恒定區。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含人IgG4重鏈恒定區和人Igκ輕鏈恒定區。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含人IgG4重鏈恒定區和人Igλ輕鏈恒定區。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含含有SEQ ID NO: 90的胺基酸序列的重鏈恒定區以及含有SEQ ID NO: 91的胺基酸序列的輕鏈恒定區。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含含有SEQ ID NO: 98的胺基酸序列的重鏈以及含有SEQ ID NO: 99的胺基酸序列的輕鏈。在一些實施方式中，重鏈恒定區或重鏈進一步包含C-末端離胺酸（K）。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段係AB215。
在一些實施方式中，D係D1。在一些實施方式中，D係D2。
在一些實施方式中，L選自本文揭露之連接子中的任一種或本文揭露之連接子組分的任何組合。在一些實施方式中，L為ADL1、ADL2、ADL5、ADL6、ADL7、ADL10、ADL12、ADL13、ADL14、ADL15、ADL21、ADL22或ADL23連接子。在一些實施方式中，ADL1、ADL2、ADL5、ADL6、ADL7、ADL10、ADL12、ADL13、ADL14、ADL15、ADL21、ADL22或ADL23連接子還可包含一個或多個額外間隔子單元。在一些實施方式中，L係ADL1、ADL6、ADL13、ADL21、ADL22或ADL23連接子。在一些實施方式中，ADL1、ADL6、ADL13、ADL21、ADL22或ADL23連接子還可包含一個或多個額外間隔子單元。
在一些實施方式中，L係可裂解連接子。在一些實施方式中，可裂解連接子包含MC-Val-Cit-pABC、MC-Val-Ala-pABC、MC-Ala-Ala-Asp-pABC、MC-Glu-Val-Cit-pABC、MC-(PEG)2 -Val-Cit-pABC或MC-β-葡糖苷酸。在一些實施方式中，可裂解連接子還可包含一個或多個額外間隔子單元。在一些實施方式中，L係不可裂解連接子。
在一些實施方式中，p 為1至12。在一些實施方式中，p 為2至8。在一些實施方式中，p 為4至8。在一些實施方式中，p 為4。在一些實施方式中，p 為8。
在一些實施方式中，ADC具有式 (I)： Ab-(L-D) p (I) 其中 Ab係抗體或抗原結合片段，其中該抗體或抗原結合片段能夠結合BCMA，並且包含三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 1（HCDR1）、SEQ ID NO: 22（HCDR2）和SEQ ID NO: 23（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 24（LCDR1）、SEQ ID NO: 25（LCDR2）和SEQ ID NO: 26（LCDR3），如由Kabat編號系統所定義的；或者三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 55（HCDR1）、SEQ ID NO: 56（HCDR2）和SEQ ID NO: 57（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 40（LCDR1）、SEQ ID NO: 41（LCDR2）和SEQ ID NO: 58（LCDR3），如由IMGT編號系統所定義的； D係D1或D2； L係將Ab共價連接至D的連接子；並且p 為1至15的整數。
在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含人重鏈和輕鏈可變區框架，或具有一個或多個回復突變的人重鏈和輕鏈可變區框架。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含含有SEQ ID NO: 84的胺基酸序列的重鏈可變區以及含有SEQ ID NO: 85的胺基酸序列的輕鏈可變區。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含人IgG1重鏈恒定區和人Igκ輕鏈恒定區。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含人IgG1重鏈恒定區和人Igλ輕鏈恒定區。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含人IgG4重鏈恒定區和人Igκ輕鏈恒定區。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含人IgG4重鏈恒定區和人Igλ輕鏈恒定區。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含含有SEQ ID NO: 90的胺基酸序列的重鏈恒定區以及含有SEQ ID NO: 91的胺基酸序列的輕鏈恒定區。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含含有SEQ ID NO: 100的胺基酸序列的重鏈以及含有SEQ ID NO: 101的胺基酸序列的輕鏈。在一些實施方式中，重鏈恒定區或重鏈進一步包含C-末端離胺酸（K）。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段係AB216。
在一些實施方式中，D係D1。在一些實施方式中，D係D2。
在一些實施方式中，L選自本文揭露之連接子中的任一種或本文揭露之連接子組分的任何組合。在一些實施方式中，L為ADL1、ADL2、ADL5、ADL6、ADL7、ADL10、ADL12、ADL13、ADL14、ADL15、ADL21、ADL22或ADL23連接子。在一些實施方式中，ADL1、ADL2、ADL5、ADL6、ADL7、ADL10、ADL12、ADL13、ADL14、ADL15、ADL21、ADL22或ADL23連接子還可包含一個或多個額外間隔子單元。在一些實施方式中，L係ADL1、ADL6、ADL13、ADL21、ADL22或ADL23連接子。在一些實施方式中，ADL1、ADL6、ADL13、ADL21、ADL22或ADL23連接子還可包含一個或多個額外間隔子單元。
在一些實施方式中，L係可裂解連接子。在一些實施方式中，可裂解連接子包含MC-Val-Cit-pABC、MC-Val-Ala-pABC、MC-Ala-Ala-Asp-pABC、MC-Glu-Val-Cit-pABC、MC-(PEG)2 -Val-Cit-pABC或MC-β-葡糖苷酸。在一些實施方式中，可裂解連接子還可包含一個或多個額外間隔子單元。在一些實施方式中，L係不可裂解連接子。
在一些實施方式中，p 為1至12。在一些實施方式中，p 為2至8。在一些實施方式中，p 為4至8。在一些實施方式中，p 為4。在一些實施方式中，p 為8。
在一些實施方式中，ADC具有式 (I)： Ab-(L-D) p (I) 其中 Ab係抗體或抗原結合片段，其中該抗體或抗原結合片段能夠結合BCMA，並且包含三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 1（HCDR1）、SEQ ID NO: 22（HCDR2）和SEQ ID NO: 23（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 24（LCDR1）、SEQ ID NO: 25（LCDR2）和SEQ ID NO: 26（LCDR3），如由Kabat編號系統所定義的；或者三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 55（HCDR1）、SEQ ID NO: 56（HCDR2）和SEQ ID NO: 57（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 40（LCDR1）、SEQ ID NO: 41（LCDR2）和SEQ ID NO: 58（LCDR3），如由IMGT編號系統所定義的； D係D1； L係包含MC-Val-Cit-pABC（ADL1）的連接子；並且p 為1至15的整數。
在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含人重鏈和輕鏈可變區框架，或具有一個或多個回復突變的人重鏈和輕鏈可變區框架。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含含有SEQ ID NO: 84的胺基酸序列的重鏈可變區以及含有SEQ ID NO: 85的胺基酸序列的輕鏈可變區。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含人IgG1重鏈恒定區和人Igκ輕鏈恒定區。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含含有SEQ ID NO: 90的胺基酸序列的重鏈恒定區以及含有SEQ ID NO: 91的胺基酸序列的輕鏈恒定區。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含含有SEQ ID NO: 100的胺基酸序列的重鏈以及含有SEQ ID NO: 101的胺基酸序列的輕鏈。在一些實施方式中，重鏈恒定區或重鏈進一步包含C-末端離胺酸（K）。在一些實施方式中，p 為1至12。在一些實施方式中，p 為2至8。在一些實施方式中，p 為4至8。在一些實施方式中，p 為4。在一些實施方式中，p 為8。
在一些實施方式中，ADC具有式 (I)： Ab-(L-D) p (I) 其中 Ab係抗體或抗原結合片段，其中該抗體或抗原結合片段能夠結合BCMA並且包含含有SEQ ID NO: 84的胺基酸序列的重鏈可變區以及含有SEQ ID NO: 85的胺基酸序列的輕鏈可變區； D係D1； L係包含MC-Val-Cit-pABC（ADL1）的連接子；並且p 為1至15的整數。
在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含人IgG1重鏈恒定區和人Igκ輕鏈恒定區。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含含有SEQ ID NO: 90的胺基酸序列的重鏈恒定區以及含有SEQ ID NO: 91的胺基酸序列的輕鏈恒定區。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含含有SEQ ID NO: 100的胺基酸序列的重鏈以及含有SEQ ID NO: 101的胺基酸序列的輕鏈。在一些實施方式中，重鏈恒定區或重鏈進一步包含C-末端離胺酸（K）。在一些實施方式中，p 為1至12。在一些實施方式中，p 為2至8。在一些實施方式中，p 為4至8。在一些實施方式中，p 為4。在一些實施方式中，p 為8。
在一些實施方式中，ADC具有式 (I)： Ab-(L-D) p (I) 其中 Ab係抗體或抗原結合片段，其中該抗體或抗原結合片段能夠結合BCMA，並且包含三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 1（HCDR1）、SEQ ID NO: 27（HCDR2）和SEQ ID NO: 28（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 29（LCDR1）、SEQ ID NO: 30（LCDR2）和SEQ ID NO: 31（LCDR3），如由Kabat編號系統所定義的；或者三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 59（HCDR1）、SEQ ID NO: 60（HCDR2）和SEQ ID NO: 61（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 40（LCDR1）、SEQ ID NO: 41（LCDR2）和SEQ ID NO: 62（LCDR3），如由IMGT編號系統所定義的； D係D1或D2； L係將Ab共價連接至D的連接子；並且p 為1至15的整數。
在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含人重鏈和輕鏈可變區框架，或具有一個或多個回復突變的人重鏈和輕鏈可變區框架。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含含有SEQ ID NO: 86的胺基酸序列的重鏈可變區以及含有SEQ ID NO: 87的胺基酸序列的輕鏈可變區。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含人IgG1重鏈恒定區和人Igκ輕鏈恒定區。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含人IgG1重鏈恒定區和人Igλ輕鏈恒定區。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含人IgG4重鏈恒定區和人Igκ輕鏈恒定區。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含人IgG4重鏈恒定區和人Igλ輕鏈恒定區。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含含有SEQ ID NO: 90的胺基酸序列的重鏈恒定區以及含有SEQ ID NO: 91的胺基酸序列的輕鏈恒定區。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含含有SEQ ID NO: 102的胺基酸序列的重鏈以及含有SEQ ID NO: 103的胺基酸序列的輕鏈。在一些實施方式中，重鏈恒定區或重鏈進一步包含C-末端離胺酸（K）。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段係AB217。
在一些實施方式中，D係D1。在一些實施方式中，D係D2。
在一些實施方式中，L選自本文揭露之連接子中的任一種或本文揭露之連接子組分的任何組合。在一些實施方式中，L為ADL1、ADL2、ADL5、ADL6、ADL7、ADL10、ADL12、ADL13、ADL14、ADL15、ADL21、ADL22或ADL23連接子。在一些實施方式中，ADL1、ADL2、ADL5、ADL6、ADL7、ADL10、ADL12、ADL13、ADL14、ADL15、ADL21、ADL22或ADL23連接子還可包含一個或多個額外間隔子單元。在一些實施方式中，L係ADL1、ADL6、ADL13、ADL21、ADL22或ADL23連接子。在一些實施方式中，ADL1、ADL6、ADL13、ADL21、ADL22或ADL23連接子還可包含一個或多個額外間隔子單元。
在一些實施方式中，L係可裂解連接子。在一些實施方式中，可裂解連接子包含MC-Val-Cit-pABC、MC-Val-Ala-pABC、MC-Ala-Ala-Asp-pABC、MC-Glu-Val-Cit-pABC、MC-(PEG)2 -Val-Cit-pABC或MC-β-葡糖苷酸。在一些實施方式中，可裂解連接子還可包含一個或多個額外間隔子單元。在一些實施方式中，L係不可裂解連接子。
在一些實施方式中，p 為1至12。在一些實施方式中，p 為2至8。在一些實施方式中，p 為4至8。在一些實施方式中，p 為4。在一些實施方式中，p 為8。
在一些實施方式中，ADC具有式 (I)： Ab-(L-D) p (I) 其中 Ab係抗體或抗原結合片段，其中該抗體或抗原結合片段能夠結合BCMA，並且包含三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 1（HCDR1）、SEQ ID NO: 32（HCDR2）和SEQ ID NO: 33（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 34（LCDR1）、SEQ ID NO: 35（LCDR2）和SEQ ID NO: 36（LCDR3），如由Kabat編號系統所定義的；或者三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 63（HCDR1）、SEQ ID NO: 64（HCDR2）和SEQ ID NO: 65（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 40（LCDR1）、SEQ ID NO: 41（LCDR2）和SEQ ID NO: 66（LCDR3），如由IMGT編號系統所定義的； D係D1或D2； L係將Ab共價連接至D的連接子；並且p 為1至15的整數。
在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含人重鏈和輕鏈可變區框架，或具有一個或多個回復突變的人重鏈和輕鏈可變區框架。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含含有SEQ ID NO: 88的胺基酸序列的重鏈可變區以及含有SEQ ID NO: 89的胺基酸序列的輕鏈可變區。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含人IgG1重鏈恒定區和人Igκ輕鏈恒定區。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含人IgG1重鏈恒定區和人Igλ輕鏈恒定區。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含人IgG4重鏈恒定區和人Igκ輕鏈恒定區。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含人IgG4重鏈恒定區和人Igλ輕鏈恒定區。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含含有SEQ ID NO: 90的胺基酸序列的重鏈恒定區以及含有SEQ ID NO: 91的胺基酸序列的輕鏈恒定區。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段包含含有SEQ ID NO: 104的胺基酸序列的重鏈以及含有SEQ ID NO: 105的胺基酸序列的輕鏈。在一些實施方式中，重鏈恒定區或重鏈進一步包含C-末端離胺酸（K）。在一些實施方式中，ADC中的抗體或抗原結合片段係AB218。
在一些實施方式中，D係D1。在一些實施方式中，D係D2。
在一些實施方式中，L選自本文揭露之連接子中的任一種或本文揭露之連接子組分的任何組合。在一些實施方式中，L為ADL1、ADL2、ADL5、ADL6、ADL7、ADL10、ADL12、ADL13、ADL14、ADL15、ADL21、ADL22或ADL23連接子。在一些實施方式中，ADL1、ADL2、ADL5、ADL6、ADL7、ADL10、ADL12、ADL13、ADL14、ADL15、ADL21、ADL22或ADL23連接子還可包含一個或多個額外間隔子單元。在一些實施方式中，L係ADL1、ADL6、ADL13、ADL21、ADL22或ADL23連接子。在一些實施方式中，ADL1、ADL6、ADL13、ADL21、ADL22或ADL23連接子還可包含一個或多個額外間隔子單元。
在一些實施方式中，L係可裂解連接子。在一些實施方式中，可裂解連接子包含MC-Val-Cit-pABC、MC-Val-Ala-pABC、MC-Ala-Ala-Asp-pABC、MC-Glu-Val-Cit-pABC、MC-(PEG)2 -Val-Cit-pABC或MC-β-葡糖苷酸。在一些實施方式中，可裂解連接子還可包含一個或多個額外間隔子單元。在一些實施方式中，L係不可裂解連接子。
在一些實施方式中，p 為1至12。在一些實施方式中，p 為2至8。在一些實施方式中，p 為4至8。在一些實施方式中，p 為4。在一些實施方式中，p 為8。
在一些實施方式中，相對於包含替代性藥物部分（例如，替代性剪接調節劑藥物部分）的ADC，包含如本文揭露之D1或D2藥物部分的ADC表現出改善的藥物負載（藥物與抗體比率）、較低聚集水平、增加的穩定性、增加的對癌細胞的中靶殺傷、降低的對非癌細胞的脫靶殺傷、和/或增加的細胞毒性和/或效力。在一些實施方式中，包含如本文揭露之D1或D2藥物部分的ADC提供良好或優異的上文所列類別中的一種或多種特性、或治療性ADC的一系列功能特性。在一些實施方式中，相較於包含替代性藥物部分（例如，替代性剪接調節劑藥物部分）的ADC，包含D1或D2藥物部分的ADC表現出令人驚訝地有效的效力以及對表現該ADC所靶向的抗原的細胞的細胞生長和/或增殖的增加的抑制。 藥物負載
藥物負載由p 表示，且在本文中也稱為藥物與抗體比率（DAR）。藥物負載可在1至15個藥物部分/抗體或抗原結合片段的範圍內。在一些實施方式中，p 為1至15的整數。在一些實施方式中，p 為1至12的整數。在一些實施方式中，p 為1至10的整數。在一些實施方式中，p 為1至10、1至9、1至8、1至7、1至6、1至5、1至4、1至3或1至2的整數。在一些實施方式中，p 為2至10、2至9、2至8、2至7、2至6、2至5、2至4或2至3的整數。在一些實施方式中，p 為1至8的整數。在一些實施方式中，p 為1至5的整數。在一些實施方式中，p 為2至6的整數。在一些實施方式中，p 為2至4的整數。在一些實施方式中，p 為3或4。在其他實施方式中，p 為4至8的整數。在其他實施方式中，p 為1、2、3、4、5、6、7或8，例如4或8。在一些實施方式中，p 為4。在一些實施方式中，p 為8。
藥物負載可受抗體或抗原結合片段上的連接位點的數目限制。在一些實施方式中，ADC中的連接子部分（L）經由抗體或抗原結合片段上的一個或多個胺基酸殘基上的化學活性基團連接至抗體或抗原結合片段。例如，連接子可經由游離胺基、亞胺基、羥基、硫醇或羧基基團連接至抗體或抗原結合片段（例如，連接至N-末端或C-末端、連接至一個或多個離胺酸殘基的ε胺基基團、連接至一個或多個麩胺酸或天冬胺酸殘基的游離羧酸基團或連接至一個或多個半胱胺酸殘基的硫氫基基團）。與連接子連接的位點可為抗體或抗原結合片段的胺基酸序列中的天然殘基，或其可例如藉由DNA重組技術（例如，藉由將半胱胺酸殘基引入胺基酸序列中）或藉由蛋白質生物化學（例如，藉由還原、pH調節或水解）引入抗體或抗原結合片段中。
在一些實施方式中，可結合抗體或抗原結合片段的藥物部分的數目受游離半胱胺酸殘基的數目限制。例如，在連接為半胱胺酸硫醇基團的情況下，抗體可具有僅一個或數個半胱胺酸硫醇基團，或可具有僅一個或數個連接子可經由其連接的具有足夠反應性的硫醇基團。通常，抗體不含有許多可連接至藥物部分的游離反應性半胱胺酸硫醇基團。實際上，抗體中的大部分半胱胺酸硫醇殘基包含在鏈間或鏈內二硫鍵中。因此，在一些實施方式中，軛合至半胱胺酸可能需要至少部分還原抗體。連接子-藥物與抗體的過量連接可藉由還原可用於形成二硫鍵的半胱胺酸殘基來使抗體脫穩定。因此，最佳的藥物與抗體比率應增加ADC的效力（藉由增加經連接的藥物部分的數目/抗體），且不使抗體或抗原結合片段脫穩定。在一些實施方式中，最佳比率可為2、3、4、5、6、7或8。在一些實施方式中，最佳比率可為約4。在一些實施方式中，最佳比率可為約8。
在一些實施方式中，使抗體或抗原結合片段在軛合之前暴露於還原條件以生成一個或多個游離半胱胺酸殘基。在一些實施方式中，可在部分或總體還原條件下用諸如二硫蘇糖醇（DTT）或三(2-羧乙基)膦（TCEP）等還原劑還原抗體以生成反應性半胱胺酸硫醇基團。可經由用受限莫耳當量的TCEP進行部分還原來生成未配對的半胱胺酸，該受限莫耳當量的TCEP可還原連接輕鏈和重鏈（一對/H-L配對）以及鉸鏈區中的兩個重鏈（在人IgG1的情況下，兩對/H-H配對）的鏈間二硫鍵，但使鏈內二硫鍵完整（Stefano等人 (2013) Methods Mol Biol.[分子生物學方法] 1045:145-71）。在實施方式中，例如藉由採用施加交替還原和氧化電壓的工作電極來以電化學方式還原抗體內的二硫鍵。此方法可允許二硫鍵還原與分析裝置（例如，電化學檢測裝置、NMR光譜儀或質譜儀）或化學分離裝置（例如，液相層析（例如HPLC））或電泳裝置的線上偶合（參見，例如，美國公開案號20140069822）。在一些實施方式中，抗體經受變性條件以顯露胺基酸殘基（如半胱胺酸）上的反應性親核基團。
ADC的藥物負載量可以不同方式控制，例如藉由：(i) 限制藥物-連接子中間體或連接子試劑相對於抗體的莫耳過量；(ii) 限制軛合反應時間或溫度；(iii) 用於半胱胺酸硫醇修飾的部分或限制性還原條件；和/或 (iv) 藉由重組技術工程改造抗體的胺基酸序列，使得半胱胺酸殘基的數目和位置得到改變以控制連接子-藥物連接的數目和/或位置。
在一些實施方式中，將游離半胱胺酸殘基引入抗體或抗原結合片段的胺基酸序列中。例如，可製備經半胱胺酸工程改造的抗體，其中親本抗體的一個或多個胺基酸被半胱胺酸胺基酸替換。任何形式的抗體均可經如此工程改造，即突變。例如，親本Fab抗體片段可經工程改造以形成經半胱胺酸工程改造的Fab，稱為「ThioFab」。類似地，親本單株抗體可經工程改造以形成「ThioMab」。單位點突變在ThioFab中產生單個經工程改造的半胱胺酸殘基，而由於IgG抗體的二聚體性質，單位點突變在ThioMab中產生兩個經工程改造的半胱胺酸殘基。編碼親本多肽的胺基酸序列變體的DNA可由本領域已知的多種方法製備（參見，例如，國際公開案號WO 2006/034488中所述之方法）。該等方法包括但不限於藉由先前所製備的編碼多肽的DNA的定點（或寡核苷酸介導的）誘變、PCR誘變和盒式誘變進行的製備。重組抗體的變體還可藉由限制性片段操作或藉由用合成寡核苷酸進行重疊延伸PCR來構建。具有式 (I) 的ADC包括但不限於具有1、2、3或4個工程改造的半胱胺酸胺基酸的抗體（Lyon等人 (2012) Methods Enzymol.[酶學方法]502:123-38）。在一些實施方式中，在不使用工程改造的情況下，一個或多個游離半胱胺酸殘基已存在於抗體或抗原結合片段中，在此情況下可使用現有游離半胱胺酸殘基來將抗體或抗原結合片段軛合至藥物部分。
在一些實施方式中，使用一種或多種位點特異性軛合技術來生產具有確定的藥物負載量（即，確定的p 或藥物與抗體比率（DAR））的均質ADC產物。在一些實施方式中，可以在抗體的輕鏈或重鏈中產生游離半胱胺酸殘基以經由殘基特異性軛合技術（RESPECT）進行位點特異性軛合。Albone等人 (2017) Cancer Biol. Ther.[癌症生物學與治療] 18(5):347-357以及國際公開案號WO/2016205618和WO/2017106643描述了用於生成RESPECT形式的抗體的示例性方案，將該等文獻各自關於進行位點特異性軛合之方法藉由引用併入本文。在一些實施方式中，使用位點特異性軛合以經由連接子將抗體部分共價連接至藥物部分來產生本文揭露之ADC。
在包含抗體或抗原結合片段和連接子部分的多個拷貝的反應混合物中，在超過一個親核基團與藥物-連接子中間體或連接子部分試劑反應、隨後與藥物部分試劑反應的情況下，所得產物可為ADC的混合物，該混合物中分佈有連接至混合物中的抗體或抗原結合片段的各拷貝的一個或多個藥物部分。在一些實施方式中，由軛合反應得到的ADC混合物中的藥物負載量在1至10個經連接的藥物部分/抗體或抗原結合片段的範圍內。藥物部分的平均數目/抗體或抗原結合片段（即，平均藥物負載量或平均p ）可藉由本領域中已知的任何常規方法，例如藉由質譜法（例如，反相LC-MS）和/或高效液相層析法（例如，疏水相互作用層析法-高效液相層析法（HIC-HPLC））來計算。在一些實施方式中，由HIC-HPLC確定藥物部分的平均數目/抗體或抗原結合片段。在一些實施方式中，由反相液相層析法-質譜法（LC-MS）確定藥物部分的平均數目/抗體或抗原結合片段。在一些實施方式中，藥物部分的平均數目/抗體或抗原結合片段為約1.5至約3.5、約2.5至約4.5、約3.5至約5.5、約4.5至約6.5、約5.5至約7.5、約6.5至約8.5、或約7.5至約9.5。在一些實施方式中，藥物部分的平均數目/抗體或抗原結合片段為約2至約6、約2至約4、約3至約5、約4至約6、約5至約7、約6至約8、約7至約9、約2至約8、約2至約10、約4至約8、或約4至約10。在一些實施方式中，藥物部分的平均數目/抗體或抗原結合片段為約2至約8。在一些實施方式中，藥物部分的平均數目/抗體或抗原結合片段為約2至約6。在一些實施方式中，藥物部分的平均數目/抗體或抗原結合片段為約4。在一些實施方式中，藥物部分的平均數目/抗體或抗原結合片段為約8。
在一些實施方式中，藥物部分的平均數目/抗體或抗原結合片段為約2。在一些實施方式中，藥物部分的平均數目/抗體或抗原結合片段為約1.5、約1.6、約1.7、約1.8、約1.9、約2、約2.1、約2.2、約2.3、約2.4或約2.5。在一些實施方式中，藥物部分的平均數目/抗體或抗原結合片段為2。
在一些實施方式中，藥物部分的平均數目/抗體或抗原結合片段為約3。在一些實施方式中，藥物部分的平均數目/抗體或抗原結合片段為約2.5、約2.6、約2.7、約2.8、約2.9、約3、約3.1、約3.2、約3.3、約3.4或約3.5。在一些實施方式中，藥物部分的平均數目/抗體或抗原結合片段為3。
在一些實施方式中，藥物部分的平均數目/抗體或抗原結合片段為約4。在一些實施方式中，藥物部分的平均數目/抗體或抗原結合片段為約3.5、約3.6、約3.7、約3.8、約3.9、約4、約4.1、約4.2、約4.3、約4.4或約4.5。在一些實施方式中，藥物部分的平均數目/抗體或抗原結合片段為4。
在一些實施方式中，藥物部分的平均數目/抗體或抗原結合片段為約5。在一些實施方式中，藥物部分的平均數目/抗體或抗原結合片段為約4.5、約4.6、約4.7、約4.8、約4.9、約5、約5.1、約5.2、約5.3、約5.4或約5.5。在一些實施方式中，藥物部分的平均數目/抗體或抗原結合片段為5。
在一些實施方式中，藥物部分的平均數目/抗體或抗原結合片段為約6。在一些實施方式中，藥物部分的平均數目/抗體或抗原結合片段為約5.5、約5.6、約5.7、約5.8、約5.9、約6、約6.1、約6.2、約6.3、約6.4或約6.5。在一些實施方式中，藥物部分的平均數目/抗體或抗原結合片段為6。
在一些實施方式中，藥物部分的平均數目/抗體或抗原結合片段為約7。在一些實施方式中，藥物部分的平均數目/抗體或抗原結合片段為約6.5、約6.6、約6.7、約6.8、約6.9、約7、約7.1、約7.2、約7.3、約7.4或約7.5。在一些實施方式中，藥物部分的平均數目/抗體或抗原結合片段為7。
在一些實施方式中，藥物部分的平均數目/抗體或抗原結合片段為約8。在一些實施方式中，藥物部分的平均數目/抗體或抗原結合片段為約7.5、約7.6、約7.7、約7.8、約7.9、約8、約8.1、約8.2、約8.3、約8.4或約8.5。在一些實施方式中，藥物部分的平均數目/抗體或抗原結合片段為8。
在各種實施方式中，如關於藥物部分的平均數目/抗體或抗原結合片段所使用的術語「約」意指±10%。
各個ADC複合物或「種類」可在混合物中藉由質譜法鑒定出且藉由UPLC或HPLC（例如，疏水性相互作用層析法（HIC-HPLC））分離。在一些實施方式中，具有單一負載值的均質或接近均質的ADC產物可例如藉由層析法自軛合混合物分離。
在一些實施方式中，較高藥物負載量（例如，p ＞ 10）可引起某些ADC的聚集、不可溶、毒性、或細胞滲透性損失。較高藥物負載量還可能不利地影響某些ADC的藥物動力學（例如，清除率）。在一些實施方式中，較低藥物負載量（例如，p ＜ 2）可能降低某些ADC針對表現靶抗原細胞和/或旁觀者細胞的效力。在一些實施方式中，本揭露的ADC的藥物負載量在約2至約10；約2至約8；約2至約6；約2至約5；約3至約5；約2至約4；約4至約8；或約4至約10的範圍內。
在一些實施方式中，例如使用抗體或抗原結合片段上的鏈內二硫化物的部分還原來達成約2的藥物負載量和/或平均藥物負載量，且其提供有益特性。在一些實施方式中，例如使用抗體或抗原結合片段上的鏈內二硫化物的部分還原來達成約4的藥物負載量和/或平均藥物負載量，且其提供有益特性。在一些實施方式中，例如使用抗體或抗原結合片段上的鏈內二硫化物的部分還原來達成約8的藥物負載量和/或平均藥物負載量，且其提供有益特性。在一些實施方式中，小於約2的藥物負載量和/或平均藥物負載量可能產生不可接受地高水平的未經軛合的抗體種類，該等種類可與ADC競爭結合靶抗原和/或提供降低的治療功效。在一些實施方式中，大於約8的藥物負載量和/或平均藥物負載量可能產生不可接受地高水平的產物異質性和/或ADC聚集。大於約8的藥物負載量和/或平均藥物負載量還可能由於抗體或抗原結合片段穩定所需的一個或多個化學鍵的損失而影響ADC的穩定性。
本揭露包括產生所述ADC之方法。簡言之，在一些實施方式中，ADC包含作為該抗體或抗原結合片段的抗體或抗原結合片段、藥物部分（例如，剪接調節劑）以及接合該藥物部分和該抗體或抗原結合片段的連接子。在一些實施方式中，可使用具有用於共價連接至藥物部分以及共價連接至抗體或抗原結合片段的反應性官能基的連接子來製備ADC。例如，在一些實施方式中，抗體或抗原結合片段的半胱胺酸硫醇可與連接子或藥物-連接子中間體的反應性官能基（例如，馬來醯亞胺部分，例如MC）一起形成鍵以製造ADC。ADC的生成可藉由技術人員已知的任何技術來實現。
在一些實施方式中，本揭露提供了產生ADC之方法，該方法藉由在允許軛合的條件下使本文所述之抗體或抗原結合片段與連接至剪接調節劑的連接子反應來進行。連接子-剪接調節劑複合物在接觸抗體或抗原結合片段之前可經受或可不經受純化步驟。
在一些實施方式中，本揭露提供了產生ADC之方法，該方法藉由在允許軛合的條件下使本文所述之抗體或抗原結合片段與連接子和剪接調節劑反應來進行。在一些實施方式中，該方法包括使抗體或抗原結合片段與連接子和剪接調節劑順序地反應，其中首先使抗體或抗原結合片段與連接子反應形成抗體-連接子中間體，然後使抗體-連接子中間體與剪接調節劑反應。抗體-連接子中間體在接觸剪接調節劑之前可經受或可不經受純化步驟。在一些實施方式中，該方法包括使抗體或抗原結合片段與連接子和剪接調節劑同時反應。在此方法中，在一些實施方式中，抗體或抗原結合片段接觸一種反應混合物中的連接子和剪接調節劑，這允許在抗體或抗原結合片段與連接子之間以及連接子與剪接調節劑之間同時形成共價鍵。這種產生ADC之方法可以包括以下反應，其中抗體或抗原結合片段在連接子添加至反應混合物中之前接觸抗體或抗原結合片段，且反之亦然。
在本文揭露之方法的一些實施方式中，連接子為可裂解連接子。在一些實施方式中，可裂解連接子包含MC-Val-Cit-pABC。在一些實施方式中，可裂解連接子包含MC-Val-Ala-pABC。在一些實施方式中，可裂解連接子包含MC-Ala-Ala-Asp-pABC。在一些實施方式中，可裂解連接子包含MC-Glu-Val-Cit-pABC。在一些實施方式中，可裂解連接子包含MC-(PEG)2 -Val-Cit-pABC。在一些實施方式中，可裂解連接子包含MC-β-葡糖苷酸。在一些實施方式中，剪接調節劑包含D1。在一些實施方式中，剪接調節劑包含D2。在一些實施方式中，藉由以下產生ADC：使抗體或抗原結合片段與接合至藥物部分的連接子（如ADL1-剪接調節劑（例如ADL1-D1））在允許軛合的條件下反應。
根據上文所述之方法製備的ADC可經受純化步驟。純化步驟可關於本領域中已知用於純化蛋白質的任何生物化學方法或其任何方法組合。該等方法包括但不限於切向流過濾（TFF）、親和層析法、離子交換層析法、基於電荷或等電點的任何層析法、混合模式層析法（例如，CHT（陶瓷羥磷灰石））、疏水相互作用層析法、尺寸排阻層析法、透析、過濾、選擇性沈澱或其任何組合。 藥物組成物
在一些實施方式中，本揭露進一步提供了藥物組成物，其包含本文揭露之一種或多種抗體、抗原結合片段、軛合物和/或ADC以及至少一種藥學上可接受的載體。
合適的載體包括在與治療性組成物組合時保持治療性組成物的抗癌功能且一般不可與患者免疫系統反應的任何材料。藥學上可接受的載體包括生理上相容的任何及所有溶劑、分散介質、包衣劑、抗細菌劑和抗真菌劑、等張劑和吸收延遲劑等。藥學上可接受的載體的實例包括水、鹽水、磷酸鹽緩衝鹽水（PBS）、組胺酸、右旋糖、甘油、乙醇、甲磺酸鹽等以及其組合中的一種或多種。在一些實施方式中，組成物中包括等張劑，例如，糖、多元醇（如甘露糖醇、山梨糖醇）或氯化鈉。藥物可接受的載體可進一步包含少量輔助物質，如濕潤劑或乳化劑、防腐劑或緩衝劑，其增加抗體、抗原結合片段、軛合物、和/或ADC的保存期或有效性。
在一些實施方式中，本文所述之藥物組成物包含本文揭露之抗體、抗原結合片段、軛合物、和/或ADC的多個拷貝。在一些實施方式中，藥物組成物包含本文揭露之ADC的多個拷貝，其中組成物中ADC的平均p 為約2至約8。在一些實施方式中，組成物中ADC的平均p為約4。
在一些實施方式中，本文所述之藥物組成物包含至少一種另外的藥劑。在一些實施方式中，藥物組成物可以包含一種或多種另外的治療劑，例如，一種或多種能夠治療表現BCMA的癌症的藥劑。此類治療劑的非限制性實例包括BCL2抑制劑、BCLxL抑制劑、BCL2/BCLxL抑制劑和γ分泌酶抑制劑。在一些實施方式中，一種或多種另外的治療劑包括BCL2抑制劑、BCLxL抑制劑、BCL2/BCLxL抑制劑、和/或γ分泌酶抑制劑。 治療用途和組成物
本文揭露了使用所揭露之抗體、抗原結合片段、軛合物（例如，ADC）、和/或藥物組成物治療受試者的癌症或其他增殖性病症（例如，關於BCMA異常表現的那些）之方法。抗體、抗原結合片段和/或ADC可以單獨投與或與一種或多種另外的治療劑組合投與，並且可以以任何藥學上可接受的配製物、劑量和給藥方案投與。可以評估抗體、抗原結合片段和/或ADC治療功效的毒性以及功效指標，並相應地進行調整。功效量度包括但不限於體外或體內觀測到的細胞生長抑制和/或細胞毒性作用、腫瘤體積減小、腫瘤生長抑制和/或延長的存活期。
確定抗體、抗原結合片段、和/或ADC是否對細胞發揮細胞生長抑制和/或細胞毒性作用之方法係已知的。例如，抗體、抗原結合片段、和/或ADC的細胞毒性或細胞生長抑制活性可藉由以下測量：使表現抗體、抗原結合片段、和/或ADC的靶蛋白的哺乳動物細胞暴露於細胞培養基中；培養細胞達約6小時至約6天的時段；以及測量細胞活力。基於細胞的體外測定可用於測量抗體、抗原結合片段、和/或ADC的活力、增殖、細胞毒性和細胞凋亡誘導（半胱天冬酶激活）。對癌細胞的該等影響中的任一者的測定可以指示，抗體、抗原結合片段、和/或ADC可用於治療癌症。
例如，可以使用CellTiter-Glo® 2.0發光細胞活力測定法來測量細胞活力。細胞活力還可以例如藉由測定細胞中染料（如中性紅、錐蟲藍、結晶紫或ALAMAR™藍）的吸收來測量（參見，例如，Page等人 (1993) Intl. J. Oncology [國際腫瘤學雜誌] 3:473-6）。在此類測定中，在含有染料的培養基中孵育細胞，洗滌細胞，且以分光亮度法測量反映細胞對染料的吸收的剩餘染料。在一些實施方式中，使用結晶紫測定法評估所製備的抗體、抗原結合片段、和/或ADC的體外效力和/或細胞毒性。結晶紫係一種三芳基甲烷染料，可積聚在活細胞的細胞核中。在該測定中，使細胞暴露於抗體、抗原結合片段、和/或ADC或對照劑一段時間，然後用結晶紫染色細胞，用水充分洗滌，然後用1% SDS溶解並藉由分光光度法讀取。還可使用蛋白質結合性染料磺醯羅丹明B（SRB）來測量細胞毒性（Skehan等人 (1990) J Natl Cancer Inst.[美國癌症研究所雜誌]82:1107-12）。
為測定細胞毒性，可測量壞死或細胞凋亡（計劃性細胞死亡）。壞死通常伴隨質膜滲透性的增加、細胞膨脹和質膜破裂。細胞凋亡的典型特徵係膜起泡、細胞質凝聚和內源性核酸內切酶的激活。細胞凋亡可例如藉由測量DNA斷裂來定量。用於定量體外測定DNA斷裂的商業測光方法係可用的。此類測定法的實例（包括TUNEL（其檢測摻入片段化DNA中的標記核苷酸）和基於ELISA的測定法）在Biochemica [生物化學] (1999) 第2期, 第34-37頁（羅氏分子生物化學公司（Roche Molecular Biochemicals））中有所描述。
細胞凋亡還可藉由測量細胞中的形態變化來測定。例如，如同壞死一樣，質膜完整性的損失可藉由測量對某些染料（例如，螢光染料，如吖啶橙或溴化乙錠）的吸收來測定。用於測量凋亡細胞數目的示例性方法已由Duke和Cohen, Current Protocols in Immunology [免疫學實驗指南]（Coligan等人, 編輯(1992) 第3.17.1-3.17.16頁）描述。細胞還可被DNA染料（例如，吖啶橙、溴化乙錠或碘化丙錠）標記且觀測細胞的沿內部核膜的染色體凝聚和邊聚。可經測量以確定細胞凋亡的其他形態變化包括例如細胞質凝聚、增加的膜起泡和細胞收縮。
還可評估所揭露之ADC的旁觀者殺傷活性。旁觀者殺傷活性可例如藉由採用兩個細胞系的測定法來測定，這兩個細胞系中的一個對靶抗原呈陽性，一個對靶抗原呈陰性。在某些實施方式中，測定法的設計允許僅追蹤靶標陰性細胞。在某些實施方式中，將細胞在以下三個條件下鋪板：(i) 單獨的靶標陰性細胞（加標籤或經標記）；(ii) 單獨的靶標陽性細胞；(iii) 靶標陰性細胞與靶標陽性細胞的共培養物。隨後，用ADC治療細胞，接著監測細胞毒性。當用CellTiter-Glo®試劑讀取板時，可監測所有細胞群的活力。當用OneGlo®試劑讀取板時，僅加標籤或經標記的靶標陰性細胞產生信號。靶標陰性細胞與靶標陽性細胞混合時的殺傷指示旁觀者殺傷，而在靶標陽性細胞不存在的情況下的靶標陰性細胞的殺傷指示脫靶殺傷。
在某些方面中，本揭露的特徵在於藉由破壞RNA剪接來殺傷癌細胞或組織、抑制或調節癌細胞或組織的生長、或干擾癌細胞或組織的代謝之方法。該方法可用於RNA剪接破壞提供治療效益的任何受試者。可能受益於破壞RNA剪接的受試者包括但不限於那些患有癌症（例如，表現BCMA的癌症）或有患癌症的風險的受試者。在一些實施方式中，癌症為血液惡性腫瘤。在一些實施方式中，癌症為B細胞惡性腫瘤、血液癌症（白血病）、漿細胞癌症（骨髓瘤，例如多發性骨髓瘤）或淋巴結癌症（淋巴瘤）。在一些實施方式中，癌症為淋巴樣惡性腫瘤或髓樣惡性腫瘤。在一些實施方式中，癌症係漿細胞疾病或癌症，如多發性骨髓瘤、意義未明（或未知或不清楚）的單株丙種球蛋白病（MGUS）、漿細胞瘤（骨、髓外）、淋巴漿細胞性淋巴瘤（LPL）、瓦爾登斯特倫巨球蛋白血症、漿細胞白血病和原發性澱粉樣變性（AL）。在一些實施方式中，癌症係另一種類型的造血細胞（包括多形核白血球（或嗜中性粒細胞）、嗜鹼性粒細胞、嗜酸性粒細胞、樹突細胞、血小板、紅血球和自然殺傷細胞）癌症。在一些實施方式中，癌症係漿細胞惡性腫瘤，其中漿細胞惡性腫瘤表現BCMA。在一些實施方式中，漿細胞惡性腫瘤或癌症係白血病、淋巴瘤、漿細胞瘤或骨髓瘤。在一些實施方式中，漿細胞惡性腫瘤或癌症係多發性骨髓瘤、彌漫性大B細胞淋巴瘤、外膜細胞淋巴瘤、漿母細胞性淋巴瘤、漿母細胞性骨髓瘤或柏基特氏淋巴瘤。在一些實施方式中，漿細胞惡性腫瘤或癌症係多發性骨髓瘤。在一些實施方式中，漿細胞惡性腫瘤或癌症係復發性/難治性多發性骨髓瘤。
在一些實施方式中，本文所述之抗體、抗原結合片段、ADC、和/或藥物組成物可用於治療多發性骨髓瘤。在一些實施方式中，多發性骨髓瘤係復發性/難治性多發性骨髓瘤。
在各種實施方式中，所揭露之抗體、抗原結合片段、和/或ADC可以與表現BCMA的任何細胞或組織接觸和/或投與於表現BCMA的任何細胞或組織。示例性實施方式包括抑制BCMA介導的細胞傳訊之方法或殺傷細胞之方法。該方法可用於表現BCMA的任何細胞或組織，如癌細胞或轉移性病變。表現BCMA的細胞的非限制性實例包括漿細胞、人骨髓瘤NCI-H929細胞（高細胞表面BCMA密度）、人骨髓瘤OPM2細胞（中等細胞表面BCMA密度）、人骨髓瘤MOLP8細胞（中等細胞表面BCMA密度）以及包含編碼BCMA的重組核酸或其一部分的細胞。
示例性方法包括使細胞與有效量（例如，足以殺死細胞和/或足以看到癌症的生長速度減少或減緩的量）的抗體、抗原結合片段、和/或ADC接觸的步驟。該方法可用於培養物（例如，體外、體內、離體或原位）中的細胞。例如，可在培養基中體外培養表現BCMA的細胞（例如，藉由腫瘤或轉移性病變的活檢而收集的細胞；自血液或骨髓穿刺收集的細胞；來自已建立的癌細胞系的細胞；或重組細胞），並且可藉由將抗體、抗原結合片段、和/或ADC添加至培養基中來影響接觸步驟。在一些實施方式中，該方法將導致對表現BCMA的細胞（特別包括表現BCMA的癌細胞）的殺傷。可替代地，在一些實施方式中，抗體、抗原結合片段、和/或ADC可以藉由任何合適的投與途徑（例如，靜脈內、皮下、或與癌細胞或組織直接接觸）投與於受試者以在體內產生作用。
可以在合適的動物模型中評估所揭露之抗體、抗原結合片段、和/或ADC治療性組成物的體內作用。例如，可使用異種癌症模型，其中將癌症外植體或所傳代的異種移植組織引入免疫受損動物（如裸小鼠或SCID小鼠）中（Klein等人 (1997) Nature Med. [自然醫學] 3:402-8）。可使用測量對腫瘤形成、腫瘤消退或轉移等的抑制的測定法預測功效。還可使用體內測定法，該等體內測定法評估藉由諸如細胞凋亡等機制進行的腫瘤死亡促進。在一些實施方式中，可檢查來自用治療性組成物治療的荷瘤小鼠的異種移植物是否存在細胞凋亡灶點且與未經治療的對照荷異種移植物小鼠進行比較。在經治療的小鼠的腫瘤中發現的細胞凋亡灶點的程度提供了關於組成物治療功效的指示。
本文進一步提供了治療癌症之方法。出於治療目的，可以將本文揭露之抗體、抗原結合片段、和/或ADC投與於受試者（例如，非人哺乳動物或人）。在一些實施方式中，該等方法包括向患有或疑似患有癌症的受試者投與治療有效量的抗體、抗原結合片段、和/或ADC，該抗體、抗原結合片段、和/或ADC結合所表現的、易於結合的、或定位於癌細胞表面上的抗原（例如，BCMA）。在一些實施方式中，將抗體、抗原結合片段、和/或ADC配製在本文揭露之藥物組成物中。
在一些實施方式中，本揭露提供了將剪接調節劑遞送至表現BCMA的細胞之方法，該方法包括使剪接調節劑與免疫特異性結合BCMA表位的抗體或抗原結合片段軛合以及使細胞暴露於ADC。表現BCMA（針對其，示出了本揭露的抗體、抗原結合片段、和/或ADC）的示例性癌細胞包括多發性骨髓瘤細胞、彌漫性大B細胞淋巴瘤細胞、外膜細胞淋巴瘤細胞、漿母細胞性淋巴瘤細胞、漿母細胞性骨髓瘤細胞和柏基特氏淋巴瘤細胞。
在一些實施方式中，本揭露提供了治療患有或疑似患有癌症的受試者之方法，該方法藉由向受試者投與治療有效量和/或治療有效方案的本文所述抗體、抗原結合片段、ADC、和/或藥物組成物中的任一種來進行。
在一些實施方式中，本揭露提供了減少或減慢癌細胞群的生長之方法，該方法藉由向受試者投與治療有效量和/或治療有效方案的本文所述抗體、抗原結合片段、ADC、和/或藥物組成物中的任一種來進行。在一些實施方式中，抗體、抗原結合片段、ADC、和/或藥物組成物的投與使癌細胞群減少至少約10%、至少約20%、至少約50%、至少約70%、至少約80%、至少約90%、至少約95%、或至少約99%。在一些實施方式中，抗體、抗原結合片段、ADC、和/或藥物組成物的投與使癌細胞群的生長減慢至少約10%、至少約20%、至少約50%、至少約70%、至少約80%、至少約90%、至少約95%、或至少約99%。
在一些實施方式中，用本文所述之抗體、抗原結合片段、ADC、和/或藥物組成物進行的治療足以減少或減慢癌細胞群的生長、減少或抑制腫瘤的生長、減少轉移性病變的數量或大小、減少腫瘤負荷、減少原發性腫瘤負荷、減少侵襲性、延長存活時間、和/或維持或改善受試者的生活品質。在一些實施方式中，當單獨投與時，癌細胞群和/或腫瘤對用ADC中的抗體或抗原結合片段（例如，抗BCMA抗體）進行的治療具有抗性或難治性，和/或當單獨投與時，癌細胞群和/或腫瘤對用ADC中的剪接調節劑藥物部分（例如，本文所述之剪接調節劑）進行的治療具有抗性或難治性。
此外，本揭露的抗體、抗原結合片段、和/或ADC可以投與於出於獸用目的或作為人類疾病的動物模型的非人哺乳動物。就後者而言，此類動物模型可用於評估所揭露之抗體、抗原結合片段、和/或ADC的治療功效（例如，測試劑量和投與時程）。
本文進一步提供了所揭露之抗體、抗原結合片段、和/或ADC的治療用途，例如在治療癌症中之用途。在一些實施方式中，本揭露提供了本文所述之抗體、抗原結合片段、ADC、和/或藥物組成物，其用於治療患有或疑似患有癌症（例如，表現BCMA的癌症）的受試者。在一些實施方式中，本揭露提供了本文所述之抗體、抗原結合片段、ADC、和/或藥物組成物在治療患有或疑似患有癌症（例如，表現BCMA的癌症）的受試者中之用途。在一些實施方式中，本揭露提供了本文所述之抗體、抗原結合片段、ADC、和/或藥物組成物在製造用於治療患有或疑似患有癌症（例如，表現BCMA的癌症）的受試者的藥物之方法中之用途。用於鑒定患有表現靶抗原（例如，BCMA）的癌症的受試者之方法（如本文揭露之那些）可用於鑒定適合用所揭露之抗體、抗原結合片段、ADC、和/或藥物組成物治療的患者。
本文進一步提供了所揭露之抗體、抗原結合片段、和/或ADC的治療用途，例如，用於確定患有或疑似患有癌症（例如，表現BCMA的癌症）的受試者是否會對用靶向BCMA的藥劑（例如，本文所述之抗體、抗原結合片段、ADC、和/或藥物組成物）進行的治療有應答。可以評估受試者的樣本中靶抗原的水平（例如，表現BCMA的細胞的水平）以幫助確定最有效的給藥方案等。在一些實施方式中，該方法包括提供來自受試者的生物樣本；使樣本與本文揭露之抗體或抗原結合片段接觸；以及檢測抗體或抗原結合片段與樣本中的一種或多種癌細胞的結合。在一些實施方式中，一種或多種癌細胞表現BCMA。在一些實施方式中，癌症表現BCMA。在一些實施方式中，癌症係漿細胞惡性腫瘤。在一些實施方式中，漿細胞惡性腫瘤或癌症係白血病、淋巴瘤、漿細胞瘤或骨髓瘤。在一些實施方式中，漿細胞惡性腫瘤或癌症係多發性骨髓瘤、彌漫性大B細胞淋巴瘤、外膜細胞淋巴瘤、漿母細胞性淋巴瘤、漿母細胞性骨髓瘤或柏基特氏淋巴瘤。在一些實施方式中，漿細胞惡性腫瘤或癌症係多發性骨髓瘤。在一些實施方式中，漿細胞惡性腫瘤或癌症係復發性/難治性多發性骨髓瘤。
示例性生物樣本包括組織或體液，如炎性滲出液、血液、血清、腸液、糞便、腫瘤活檢或骨髓穿刺樣本。在一些實施方式中，生物樣本係血液樣本或骨髓穿刺樣本。在一些實施方式中，血液樣本係血液、血液成分、或從血液或血液成分中獲得的一種或多種細胞。在一些實施方式中，生物樣本（例如，組織和/或體液）從患有或疑似患有癌症（例如，表現BCMA的癌症）的受試者獲得。在一些實施方式中，合適的免疫學方法可用於檢測和/或測量樣本中靶抗原（例如，BCMA）的蛋白質表現。此類評估還在整個療法中用於監測目的，和/或可與其他參數的評估組合用於衡量治療成功性。
在一些實施方式中，本揭露的抗體、抗原結合片段、和/或ADC可用作治療劑，例如用於治療、預防和/或診斷表現BCMA的癌症。表現BCMA的示例性癌症包括但不限於多發性骨髓瘤、彌漫性大B細胞淋巴瘤、外膜細胞淋巴瘤、漿母細胞性淋巴瘤、漿母細胞性骨髓瘤和柏基特氏淋巴瘤。在一些實施方式中，癌症係漿細胞惡性腫瘤。在一些實施方式中，漿細胞惡性腫瘤或癌症係白血病、淋巴瘤、漿細胞瘤或骨髓瘤。在一些實施方式中，漿細胞惡性腫瘤或癌症係多發性骨髓瘤、彌漫性大B細胞淋巴瘤、外膜細胞淋巴瘤、漿母細胞性淋巴瘤、漿母細胞性骨髓瘤或柏基特氏淋巴瘤。在一些實施方式中，漿細胞惡性腫瘤或癌症係多發性骨髓瘤。在一些實施方式中，漿細胞惡性腫瘤或癌症係復發性/難治性多發性骨髓瘤。在一些實施方式中，漿細胞惡性腫瘤或癌症包括活躍分裂的細胞、休眠細胞或兩者。在一些實施方式中，所述抗體、抗原結合片段、軛合物、和/或ADC複合物保留不依賴於細胞增殖狀態的細胞毒性和/或細胞生長抑制活性。在一些實施方式中，所述抗體、抗原結合片段、軛合物、和/或ADC複合物可靶向活躍分裂和休眠的細胞（例如，活躍分裂、不分裂、和/或緩慢分裂的骨髓瘤細胞）。
在本文揭露之方法和用途的一些實施方式中，本揭露的抗體、抗原結合片段、和/或ADC與一種或多種另外的治療劑組合投與或使用。此類示例性治療劑包括但不限於BCL2抑制劑、BCLxL抑制劑、BCL2/BCLxL抑制劑和γ分泌酶抑制劑。在一些實施方式中，一種或多種另外的治療劑包括BCL2抑制劑、BCLxL抑制劑、BCL2/BCLxL抑制劑、和/或γ分泌酶抑制劑。在一些實施方式中，該等治療（例如，本揭露的抗BCMA抗體、抗原結合片段、和/或ADC，以及至少一種另外的治療劑（例如，BCL2抑制劑等））包括在同一組成物中。此類組成物可以任何適當形式且藉由任何合適途徑投與。在其他實施方式中，在分開的組成物中以任何適當形式且藉由任何合適途徑投與該等治療（例如，本揭露的抗BCMA抗體、抗原結合片段、和/或ADC，以及至少一種另外的治療劑（例如，BCL2抑制劑等））。例如，包含本揭露的抗BCMA抗體、抗原結合片段、和/或ADC的組成物和包含另外的治療劑的組成物可以在不同時間點以任何順序同時或順序投與；在任一情況下，其投與時間應充分地接近以便提供所需治療性效果或預防性效果。
在一些實施方式中，將本文揭露之方法和用途中使用的治療性組成物配製成藥物組成物，該藥物組成物包含適用於所需遞送方法的藥學上可接受的稀釋劑、載體和/或賦形劑。示例性實施方式為包含本揭露的抗體或抗原結合片段、和/或ADC以及藥學上可接受的載體的藥物組成物。
治療性配製物可溶解且經由能夠將治療性組成物遞送至癌症的任何途徑投與。潛在有效的投與途徑包括但不限於靜脈內、腸胃外、腹膜內、肌內、瘤內、真皮內、器官內、正位等。治療性蛋白製劑可凍乾且以無菌粉末形式儲存在例如真空下，且隨後在注射之前於抑菌水（含有例如苯甲醇防腐劑）或無菌水中重構。治療性配製物可包含抗體、抗原結合片段、和/或ADC，或其藥學上可接受的鹽（例如，甲磺酸鹽）。
在一些實施方式中，每天、每兩個月或其間的任何時間段向患者投與抗體、抗原結合片段、和/或ADC。使用前述方法治療癌症的劑量和投與方案將隨方法和靶標癌症而變化，且通常依賴於本領域中所瞭解的其他因素。
各種遞送系統係已知的且可用於投與一種或多種本揭露的抗體、抗原結合片段、和/或ADC。投與抗體、抗原結合片段、和/或ADC之方法包括但不限於腸胃外投與（例如，真皮內、肌內、腹膜內、靜脈內和皮下）、硬膜外投與、瘤內投與和黏膜投與（例如，鼻內和經口途徑）。另外，可採用肺部投與，例如藉由使用吸入器或噴霧器以及具有氣霧劑的配製物。參見，例如，用於肺部投與的組成物和方法描述於美國專利號6,019,968、5,985,320、5,985,309、5,934,272、5,874,064、5,855,913、5,290,540和4,880,078；以及國際公開案號WO 1992/019244、WO 1997/032572、WO 1997/044013、WO 1998/031346和WO 1999/066903中。可以藉由任何方便的途徑投與抗體、抗原結合片段、和/或ADC，例如藉由輸注或推注（bolus injection），或藉由經由上皮或皮膚黏膜內層（例如，口腔黏膜、直腸和腸黏膜等）吸收。投與可為全身或局部的。在本文揭露之方法和用途的一些實施方式中，用本揭露的抗體、抗原結合片段、和/或ADC進行的治療關於經由可接受的投與途徑的單次推注劑量或重複劑量的抗體、抗原結合片段、和/或ADC製劑。
本文揭露之治療性組成物可在製造和儲存條件下無菌且穩定。在一些實施方式中，抗體、抗原結合片段、和/或ADC、或藥物組成物中的一種或多種以乾燥滅菌凍乾粉末或無水濃縮物形式供應於氣密密封式容器中且可重構（例如，用水或鹽水）至適當濃度以向受試者投與。在一些實施方式中，治療劑或藥物組成物中的一種或多種以至少5 mg、至少10 mg、至少15 mg、至少25 mg、至少35 mg、至少45 mg、至少50 mg、至少75 mg或至少100 mg或其間任何量的單位劑量以乾燥無菌凍乾粉末形式供應於氣密密封式容器中。在一些實施方式中，經凍乾的抗體、抗原結合片段、和/或ADC或藥物組成物在原始容器中在2°C與8°C之間儲存。在一些實施方式中，抗體、抗原結合片段、和/或ADC、或其藥物組成物中的一種或多種以液體形式供應於氣密密封式容器中，例如，指示藥劑的量和濃度的容器中。在一些實施方式中，液體形式的所投與的組成物供應於具有至少0.25 mg/mL、至少0.5 mg/mL、至少1 mg /mL、至少2.5 mg/mL、至少5 mg/mL、至少8 mg/mL、至少10 mg/mL、至少15 mg/mL、至少25 mg/mL、至少50 mg/mL、至少75 mg/mL或至少100 mg/mL ADC的氣密密封式容器中。液體形式可在原始容器中在2°C與8°C之間儲存。
在一些實施方式中，所揭露之抗體、抗原結合片段、和/或ADC可摻入適用於腸胃外投與的藥物組成物中。可注射溶液可由在弗林特（flint）或琥珀色小瓶、安瓿或預填充注射器或其他已知遞送或儲存裝置中的液體或凍乾劑型構成。本文所述之治療性組成物可呈多種形式。該等形式包括例如液體、半固體和固體劑型，如液體溶液（例如，可注射溶液和可輸注溶液）、分散液或懸浮液、片劑、丸劑、粉末劑、脂質體和栓劑。形式取決於預期投與模式和治療應用。
在一些實施方式中，可藉由使來自受試者的腫瘤樣本與抗體、抗原結合片段、和/或ADC接觸且評估腫瘤生長速率或體積來評估抗體、抗原結合片段、和/或ADC的功效。在一些實施方式中，當已確定抗體、抗原結合片段、和/或ADC有效時，可將其投與至受試者。
以上治療方法可與多種額外手術、化學療法或放射療法方案中的任一種組合。在一些實施方式中，本文揭露之抗體、抗原結合片段、和/或ADC與一種或多種另外的治療劑（例如，一種或多種化學治療劑）共配製和/或共投與。在一些實施方式中，第一治療的遞送在第二治療的遞送開始時仍存在，於是存在重疊。在一些實施方式中，第一治療和第二治療同時開始。該等類型的遞送可以稱為「同時（simultaneous/concurrent）」或「伴隨」遞送。在其他實施方式中，第一治療的遞送在第二治療的遞送開始之前結束。這種類型的遞送可以稱為「連續」或「順序」遞送。在一些實施方式中，同時投與本揭露的抗BCMA抗體、抗原結合片段、和/或ADC以及至少一種另外的治療方案和/或藥劑。在一些實施方式中，順序投與本揭露的抗BCMA抗體、抗原結合片段、和/或ADC以及至少一種另外的治療方案和/或藥劑。
化學治療劑的非限制性實例包括烷基化劑，例如氮芥、乙撐亞胺化合物和烷基磺酸酯；抗代謝物，例如葉酸、嘌呤或嘧啶拮抗劑；抗有絲分裂劑，例如抗微管蛋白劑，如艾日布林（eribulin）或甲磺酸艾日布林（Halaven™）、長春花生物鹼（vinca alkaloid）和奧瑞他汀（auristatin）；細胞毒性抗生素；損害或干擾DNA表現或複製的化合物，例如DNA小溝結合劑；以及生長因子受體拮抗劑。在一些實施方式中，化學治療劑可為細胞毒性劑或細胞生長抑制劑。細胞毒性劑的實例包括但不限於抗有絲分裂劑，如艾日布林或甲磺酸艾日布林（Halaven™）、奧瑞他汀（例如，單甲基奧瑞他汀E（MMAE）、單甲基奧瑞他汀F（MMAF））、美登木素生物鹼（例如，美登素）、尾海兔素、多斯他汀（duostatin）、念珠藻素、長春花生物鹼（例如，長春新鹼、長春花鹼）、紫杉烷、紫杉醇和秋水仙鹼；蒽環黴素（例如，道諾黴素、阿黴素、二羥基炭疽菌素二酮（dihydroxyanthracindione））；細胞毒性抗生素（例如，絲裂黴素、放線菌素、倍癌黴素（例如，CC-1065）、金黴素（auromycin/duomycin）、卡奇黴素（calicheamicin）、內黴素、酚黴素）；烷基化劑（例如，順鉑）；嵌入劑（例如，溴化乙錠）；拓樸異構酶抑制劑（例如，依託泊苷（etoposide）、替尼泊苷（tenoposide））；放射性同位素，如At211 、I131 、I125 、Y90 、Re186 、Re188 、Sm153 、Bi212 或Bi213 、P32 以及鑥放射性同位素（例如Lu177 ）；以及細菌、真菌、植物或動物起源的毒素（例如，蓖麻毒素（例如蓖麻毒素A鏈）、白喉毒素、假單胞菌外毒素A（例如PE40）、內毒素、有絲分裂素、康普瑞汀（combrestatin）、局限麴菌素、白樹素（gelonin）、α-帚麴菌素、相思子毒素（例如，相思子毒素A鏈）、莫迪素（例如，莫迪素A鏈）、麻瘋樹逆境蛋白（curicin）、巴豆毒素、肥皂草抑制劑（Sapaonaria officinalis inhibitor）、糖皮質素）。在一些實施方式中，本文揭露之抗體、抗原結合片段、和/或ADC與一種或多種BCL2抑制劑、BCLxL抑制劑、BCL2/BCLxL抑制劑和/或γ分泌酶抑制劑共同配製和/或共同投與。
在以下實施方式中，用於本文所述之實驗室應用和治療性應用的套組（kit）處於本揭露的範圍內。此類套組可包含經分隔以容納一個或多個容器（如小瓶、管等）的載架、封裝物或容器，該等容器中的每一者均包含待用於本文揭露之方法中的獨立元素中的一種以及含有諸如本文所述用途的使用說明書的標籤或插頁。套組可包含含有藥物部分的容器。本揭露還提供了封裝在指示藥劑的量的氣密密封式容器（如安瓿或藥囊）中的抗體、抗原結合片段、和/或ADC、或其藥物組成物中的一種或多種。
套組可包含如上所述之容器以及與其相聯的一個或多個其他容器，該一個或多個其他容器包含：自商業及使用者觀點看合乎需要的材料，包括緩衝劑、稀釋劑、過濾器、針、注射器；載架、封裝、容器、小瓶、和/或列出內容物和/或使用說明的管標籤；以及具有使用說明的包裝插頁。
標籤可存在於容器上或容器中以指示組成物用於特定療法或非治療性應用，如預後、預防、診斷或實驗室應用。標籤還可指示關於體內或體外用途（如本文所述之用途）的指導。在包括在套組中或套組上的插頁和/或標籤上還可包括指導和或其他資訊。標籤可處於容器上或與容器相聯。當將形成標籤的字母、數字或其他字元模製或蝕刻至容器自身中時，標籤可處於容器上。當標籤存在於還固持容器的接受器或載架內時，標籤可例如以包裝插頁形式與容器相聯。標籤可指示組成物用於診斷或治療病症（如本文所述之癌症）。實例
以下實例提供了本揭露的說明性實施方式。熟悉該項技術者將認識到可以在不改變本揭露的精神或範圍的情況下進行多種修改和變型。此類修改和變型涵蓋在本揭露的範圍內。該等實例絕不限制本揭露。實例 1
描述了具有表12-14中所示結構的有效載荷、連接子和可軛合連接子-有效載荷（連接子-藥物，即L-D）複合物的合成方法。使用可結合連接子-有效載荷來製備抗體-藥物軛合物（ADC）。示例性ADC描述於實例4-6中。1.1 試劑和材料
所描述的可軛合連接子-有效載荷可使用本文所述之反應和技術來製備。在描述以下所描述的合成方法時，應理解，除非另外指示，否則可選擇或修改所有所提出的反應條件（包括溶劑、反應氛圍、反應溫度、實驗持續時間和處理常式的選擇）來用作該反應的標準條件。
使用Waters自動純化系統和XTerra MS C18柱（5 µm，19 mm x 100 mm）在酸性流動相條件下進行液相層析法-質譜法（LC/MS）。使用Varian儀器（安捷倫科技公司（Agilent Technologies））在400 MHz下記錄核磁共振（NMR）譜。使用Teledyne Isco Combiflash Rf200d進行柱層析法。使用由美國德拉瓦州步琦公司（BUCHI Corporation, DE, USA）製造並根據製造商的說明使用的Büchi旋轉蒸發器，或由英國Genevac公司（Genevac Ltd., United Kingdom）製造並根據製造商的說明使用的Genevac離心蒸發器進行溶劑去除。
在此實例中，除非另有說明，(i) 溫度以攝氏度（°C）給出；在室溫或環境溫度進行操作，即在18°C-25°C的範圍內進行操作；(ii) 有機溶液經無水硫酸鈉乾燥，除非另有說明；使用旋轉蒸發器在減壓（4.5-30 mmHg）下在高達60°C的浴溫下進行有機溶劑的蒸發；(iii) 層析法係指矽膠快速層析法；在矽膠板上進行薄層層析（TLC）；(iv) 通常，藉由TLC或LC/MS跟蹤反應過程，並且給出反應時間僅用於說明；(v) 最終產物具有令人滿意的質子核磁共振（NMR）譜和/或質譜數據；(vi) 給出產率僅用於說明；如果需要更多材料，則重複製備過程；(vii) 當給出時，NMR數據為主要診斷性質子的δ值形式，以相對於作為內標的四甲基矽烷（TMS）的百萬分之一（ppm）給出，並且在400 MHz下在CD3 OD中測定，除非另有說明；(viii) 化學符號具有其通常的含義；(ix) 溶劑比率以體積比體積（v/v）方式給出；(x) 「ISCO」係指使用預填充矽膠柱（12 g、40 g等）的正相快速柱層析，該柱根據製造商的說明使用並從美國內布拉斯加州特利丹ISCO公司（Teledyne ISCO, Inc., NE, USA）獲得；(xi) 示例性化合物係根據IUPAC命名法命名的；以及 (xii) 使用美國麻塞諸塞州珀金埃爾默公司（Perkin-Elmer Inc., MA, USA）生產的Chemdraw Professional 17.0.0.206生成示例性化合物的IUPAC名稱。
術語/縮寫：如本文所使用，術語「惰性化」係指用基本上不含水分的惰性氣體（如氮氣或氬氣）置換反應器（例如，反應容器、燒瓶、玻璃反應器）中的空氣。表11列出了本文使用的示例性縮寫。[ 表 11]. 縮寫
縮寫 含義
Ala 丙胺酸
Asp 天冬醯胺
Cit 瓜胺酸
DCM 二氯甲烷
DCE 1,2-二氯乙烷
DMAP N ,N- 二甲基-4-胺基吡啶
DMF N ,N'- 二甲基甲醯胺
DMSO 二甲亞碸
DIPEA N ,N -二異丙基乙胺
EtOAc 乙酸乙酯
Glu 麩胺酸
HPLC 高效液相層析法
LC/MS 液相層析法-質譜法
Mc 馬來醯亞胺基己醯基
MeOH 甲醇
p ABC 對胺基苄氧基羰基
PNP 對硝基苯酚
PPTS 對甲苯磺酸吡啶鎓
RT 室溫
TEA 三乙胺
TES 三乙基矽基
THF 四氫呋喃
TLC 薄層層析法
Val 纈胺酸
使用以下縮寫表示多重性：s = 單峰，d = 二重峰，t = 三重峰，q = 四重峰，quint = 五重峰，sxt = 六重峰，m = 多重峰，dd = 雙二重峰，ddd = 雙重雙二重峰，dt = 雙三重峰，br s = 寬單峰。
LC/MS ： 流動相=A（在H2 O中的0.1%甲酸）和B（在乙腈中的0.1%甲酸）。梯度=1.8 min內B 5%至95%。柱=Waters Acquity BEH C18柱（1.7 µm，2.1 x 50 mm），根據製造商的說明使用並從美國麻塞諸塞州沃特世公司（Waters Corporation, MA, USA）獲得。
HPLC ： 使用Waters質量導向自動純化系統和Waters 19 x 100 mm XBridge 5微米CSH18柱在酸性條件下進行製備型LC/MS，該柱根據製造商的說明使用並從美國麻塞諸塞州沃特世公司獲得。流動相=A（在H2 O中的0.1%甲酸）和B（在乙腈中的0.1%甲酸）。
參考文獻：美國專利號7,884,128和7,816,401描述了合成普拉二烯內酯B和D的示例性方法，並且將該等文獻各自關於該等方法藉由引用併入本文。普拉二烯內酯B和D的合成還可使用Kanada等人（(2007) Angew.Chem. Int. Ed. [應用化學國際版] 46:4350-5）所述之方法進行。Kanada等人和國際公開案號WO 2003/099813描述了自普拉二烯內酯D（WO 2003/099813的11107D）合成E7107（D11）（WO 2003/099813的化合物45）的示例性方法。對應的美國專利號為Kotake等人的7,550,503。將該等參考文獻的每一個關於所述合成方法併入本文。[ 表 12]. 示例性藥物部分（有效載荷）的結構
有效載荷 /ID
Figure 02_image134
D1 (2S ,3S ,6S ,7R ,10R ,E )-7,10-二羥基-2-((R ,2E ,4E )-6-羥基-7-((2R ,3R )-3-((2R ,3S )-3-羥基戊-2-基)環氧乙烷-2-基)-6-甲基庚-2,4-二烯-2-基)-3,7-二甲基-12-側氧基氧雜環十二-4-烯-6-基 哌𠯤-1-甲酸酯
Figure 02_image136
D2 (2S ,3S ,6S ,7R ,10R ,E )-7-乙醯氧基-10-羥基-2-((R ,2E ,4E )-6-羥基-7-((2R ,3R )-3-((2R ,3S )-3-羥基戊-2-基)環氧乙烷-2-基)-6-甲基庚-2,4-二烯-2-基)-3,7-二甲基-12-側氧基氧雜環十二-4-烯-6-基 哌𠯤-1-甲酸酯
[ 表 13]. 示例性連接子的結構
連接子結構 /ID
Figure 02_image138
ADL1 - 「MC-Val-Cit-p ABC」
Figure 02_image140
ADL6 - 「MC-Val-Ala-p ABC」
Figure 02_image142
ADL13 - 「MC-β-葡糖苷酸」
Figure 02_image144
ADL21 - 「MC-Ala-Ala-Asp-p ABC」
Figure 02_image146
ADL22 - 「MC-PEG2 -Val-Cit-p ABC」
Figure 02_image148
ADL23 - 「MC-Glu-Val-Cit-p ABC」
[ 表 14]. 示例性可軛合連接子 - 有效載荷（ L-D ）複合物的結構
Figure 02_image150
ADL1-D1 1-((2S ,3S ,6S ,7R ,10R ,E )-7,10-二羥基-2-((R ,2E ,4E )-6-羥基-7-((2R ,3R )-3-((2R ,3S )-3-羥基戊-2-基)環氧乙烷-2-基)-6-甲基庚-2,4-二烯-2-基)-3,7-二甲基-12-側氧基氧雜環十二-4-烯-6-基) 4-(4-((S )-2-((S )-2-(6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H -吡咯-1-基)己醯胺基)-3-甲基丁醯胺基)-5-脲基戊醯胺基)苄基) 哌𠯤-1,4-二甲酸酯
Figure 02_image152
ADL1-D2 1-((2S ,3S ,6S ,7R ,10R ,E )-7-乙醯氧基-10-羥基-2-((R ,2E ,4E )-6-羥基-7-((2R ,3R )-3-((2R ,3S )-3-羥基戊-2-基)環氧乙烷-2-基)-6-甲基庚-2,4-二烯-2-基)-3,7-二甲基-12-側氧基氧雜環十二-4-烯-6-基) 4-(4-((S )-2-((S )-2-(6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H -吡咯-1-基)己醯胺基)-3-甲基丁醯胺基)-5-脲基戊醯胺基)苄基) 哌𠯤-1,4-二甲酸酯
Figure 02_image154
ADL6-D1 1-((2S ,3S ,6S ,7R ,10R ,E )-7,10-二羥基-2-((R ,2E ,4E )-6-羥基-7-((2R ,3R )-3-((2R ,3S )-3-羥基戊-2-基)環氧乙烷-2-基)-6-甲基庚-2,4-二烯-2-基)-3,7-二甲基-12-側氧基氧雜環十二-4-烯-6-基) 4-(4-((S )-2-((S )-2-(6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H -吡咯-1-基)己醯胺基)-3-甲基丁醯胺基)丙醯胺基)苄基) 哌𠯤-1,4-二甲酸酯
Figure 02_image156
ADL6-D2 1-((2S ,3S ,6S ,7R ,10R ,E )-7-乙醯氧基-10-羥基-2-((R ,2E ,4E )-6-羥基-7-((2R ,3R )-3-((2R ,3S )-3-羥基戊-2-基)環氧乙烷-2-基)-6-甲基庚-2,4-二烯-2-基)-3,7-二甲基-12-側氧基氧雜環十二-4-烯-6-基) 4-(4-((S )-2-((S )-2-(6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H -吡咯-1-基)己醯胺基)-3-甲基丁醯胺基)丙醯胺基)苄基) 哌𠯤-1,4-二甲酸酯
Figure 02_image158
ADL13-D1 (2S ,3S ,4S ,5R ,6S )-6-(4-(((4-((((2S ,3S ,6S ,7R ,10R ,E )-7,10-二羥基-2-((R ,2E ,4E )-6-羥基-7-((2R ,3R )-3-((2R ,3S )-3-羥基戊-2-基)環氧乙烷-2-基)-6-甲基庚-2,4-二烯-2-基)-3,7-二甲基-12-側氧基氧雜環十二-4-烯-6-基)氧基)羰基)哌𠯤-1-羰基)氧基)甲基)-2-(3-(6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H -吡咯-1-基)己醯胺基)丙醯胺基)苯氧基)-3,4,5-三羥基四氫-2H-哌喃-2-甲酸
Figure 02_image160
ADL13-D2 (2S ,3S ,4S ,5R ,6S )-6-(4-(((4-((((2S,3S ,6S ,7R ,10R ,E )-7-乙醯氧基-10-羥基-2-((R ,2E ,4E )-6-羥基-7-((2R ,3R )-3-((2R ,3S )-3-羥基戊-2-基)環氧乙烷-2-基)-6-甲基庚-2,4-二烯-2-基)-3,7-二甲基-12-側氧基氧雜環十二-4-烯-6-基)氧基)羰基)哌𠯤-1-羰基)氧基)甲基)-2-(3-(6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H -吡咯-1-基)己醯胺基
Figure 02_image162
ADL21-D1 1-(4-((S )-4-胺基-2-((S )-2-((S )-2-(6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H -吡咯-1-基)己醯胺基)丙醯胺基)丙醯胺基)-4-側氧基丁醯胺基)苄基) 4-((2S ,3S ,6S ,7R ,10R ,E )-7,10-二羥基-2-((R ,2E ,4E )-6-羥基-7-((2R ,3R )-3-((2R ,3S )-3-羥基戊-2-基)環氧乙烷-2-基)-6-甲基庚-2,4-二烯-2-基)-3,7-二甲基-12-側氧基氧雜環十二-4-烯-6-基) 哌𠯤-1,4-二甲酸酯
Figure 02_image164
ADL21-D2 1-((2S ,3S ,6S ,7R ,10R ,E )-7-乙醯氧基-10-羥基-2-((R ,2E ,4E )-6-羥基-7-((2R ,3R )-3-((2R ,3S )-3-羥基戊-2-基)環氧乙烷-2-基)-6-甲基庚-2,4-二烯-2-基)-3,7-二甲基-12-側氧基氧雜環十二-4-烯-6-基) 4-(4-((S )-4-胺基-2-((S )-2-((S )-2-(6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H -吡咯-1-基)己醯胺基)丙醯胺基)丙醯胺基)-4-側氧基丁醯胺基)苄基) 哌𠯤-1,4-二甲酸酯
Figure 02_image166
ADL22-D1 1-((2S ,3S ,6S ,7R ,10R ,E )-7,10-二羥基-2-((R ,2E ,4E )-6-羥基-7-((2R ,3R )-3-((2R ,3S )-3-羥基戊-2-基)環氧乙烷-2-基)-6-甲基庚-2,4-二烯-2-基)-3,7-二甲基-12-側氧基氧雜環十二-4-烯-6-基) 4-(4-((2S ,5S )-15-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H -吡咯-1-基)-5-異丙基-4,7-二側氧基-2-(3-脲基丙基)-10,13-二氧雜-3,6-二氮雜十五烷醯胺基)苄基) 哌𠯤-1,4-二甲酸酯
Figure 02_image168
ADL22-D2 1-((2S ,3S ,6S ,7R ,10R ,E )-7-乙醯氧基-10-羥基-2-((R ,2E ,4E )-6-羥基-7-((2R ,3R )-3-((2R ,3S )-3-羥基戊-2-基)環氧乙烷-2-基)-6-甲基庚-2,4-二烯-2-基)-3,7-二甲基-12-側氧基氧雜環十二-4-烯-6-基) 4-(4-((2S ,5S )-15-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H -吡咯-1-基)-5-異丙基-4,7-二側氧基-2-(3-脲基丙基)-10,13-二氧雜-3,6-二氮雜十五烷醯胺基)苄基) 哌𠯤-1,4-二甲酸酯
Figure 02_image170
ADL23-D1 (S )-5-(((S )-1-(((S )-1-((4-(((4-((((2S ,3S ,6S ,7R ,10R,E )-7,10-二羥基-2-((R ,2E ,4E )-6-羥基-7-((2R ,3R )-3-((2R ,3S )-3-羥基戊-2-基)環氧乙烷-2-基)-6-甲基庚-2,4-二烯-2-基)-3,7-二甲基-12-側氧基氧雜環十二-4-烯-6-基)氧基)羰基)哌𠯤-1-羰基)氧基)甲基)苯基)胺基)-1-側氧基-5-脲基戊-2-基)胺基)-3-甲基-1-側氧基丁-2-基)胺基)-4-(6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H -吡咯-1-基)己醯胺基)-5-側氧基戊酸
Figure 02_image172
ADL23-D2 (S )-5-(((S )-1-(((S )-1-((4-(((4-((((2S ,3S ,6S ,7R ,10R ,E )-7-乙醯氧基-10-羥基-2-((R ,2E ,4E )-6-羥基-7-((2R ,3R )-3-((2R ,3S )-3-羥基戊-2-基)環氧乙烷-2-基)-6-甲基庚-2,4-二烯-2-基)-3,7-二甲基-12-側氧基氧雜環十二-4-烯-6-基)氧基)羰基)哌𠯤-1-羰基)氧基)甲基)苯基)胺基)-1-側氧基-5-脲基戊-2-基)胺基)-3-甲基-1-側氧基丁-2-基)胺基)-4-(6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H -吡咯-1-基)己醯胺基)-5-側氧基戊酸
1.2 概述 - 通用程序 1
Figure 02_image174
方案 1
步驟 1 ：(2S ,3S ,6S ,7R ,10R ,E )-7- 羥基 -3,7- 二甲基 -2-((R ,2E ,4E )-6- 甲基 -6-(( 三乙基矽基 ) 氧基 )-7-((2R ,3R )-3-((2S ,3S )-3-(( 三乙基矽基 ) 氧基 ) 戊 -2- 基 ) 環氧乙烷 -2- 基 ) 庚 -2,4- 二烯 -2- 基 )-12- 側氧基 -10-(( 三乙基矽基 ) 氧基 ) 氧雜環十二 -4- 烯 -6- 基 乙酸酯。 在室溫，向(2S ,3S ,6S ,7R ,10R ,E )-7,10-二羥基-2-((R ,2E ,4E )-6-羥基-7-((2R ,3R )-3-((2R ,3S )-3-羥基戊-2-基)環氧乙烷-2-基)-6-甲基庚-2,4-二烯-2-基)-3,7-二甲基-12-氧雜環十二-4-烯-6-基 乙酸酯（1.7 g，3.2 mmol）在1,2-二氯乙烷（31.5 mL）中的攪拌溶液中添加三乙胺（4.40 mL，31.5 mmol）和DMAP（390 mg，3.2 mmol）。添加氯三乙基矽烷（2.1 mL，12.6 mmol），並將反應混合物攪拌16小時。添加鹽水，並將反應混合物攪拌30 min。將有機層分離，並將水層用DCM萃取（3X）。將有機層合併，乾燥，過濾，濃縮至乾，並藉由矽膠層析法（用在己烷中的0-100% EtOAc洗脫）純化，得到標題產物。1 H-NMR (400 MHz, CDCl3 ): δ ppm 0.57 - 0.67 (m, 18 H), 0.80 - 0.90 (m, 10 H), 0.93 - 1.01 (m, 28 H), 1.20 - 1.23 (m, 4 H), 1.36 - 1.42 (m, 4 H), 1.43 - 1.54 (m, 4 H), 1.57 (s, 3 H), 1.90 (m, 1 H), 2.10 (m, 4 H), 2.38 - 2.53 (m, 3 H), 2.57 (m, 1 H), 2.82- 2.87 (m, 1 H), 3.74 (m, 1 H), 3.81 - 3.89 (m, 1 H), 4.99 (m, 1 H), 5.06- 5.11 (m, 1 H), 5.60 - 5.75 (m, 3 H), 6.11 (m, 1 H), 6.42 (m, 1 H)。
步驟 2 ：(2S ,3S ,6S ,7R ,10R ,E )-7-((R )-1- 乙氧基乙氧基 )-3,7- 二甲基 -2-((R ,2E ,4E )-6- 甲基 -6-(( 三乙基矽基 ) 氧基 )-7-((2R ,3R )-3-((2S ,3S )-3-(( 三乙基矽基 ) 氧基 ) 戊 -2- 基 ) 環氧乙烷 -2- 基 ) 庚 -2,4- 二烯 -2- 基 )-12- 側氧基 -10-(( 三乙基矽基 ) 氧基 ) 氧雜環十二 -4- 烯 -6- 基 乙酸酯和 (2S ,3S ,6S ,7R ,10R ,E )-7-((S )-1- 乙氧基乙氧基 )-3,7- 二甲基 -2-((R ,2E ,4E )-6- 甲基 -6-(( 三乙基矽基 ) 氧基 )-7-((2R ,3R )-3-((2S,3S )-3-(( 三乙基矽基 ) 氧基 ) 戊 -2- 基 ) 環氧乙烷 -2- 基 ) 庚 -2,4- 二烯 -2- 基 )-12- 側氧基 -10-(( 三乙基矽基 ) 氧基 ) 氧雜環十二 -4- 烯 -6- 基 乙酸酯。 向(2S ,3S ,6S ,7R ,10R ,E )-7-羥基-3,7-二甲基-2-((R,2E ,4E )-6-甲基-6-((三乙基矽基)氧基)-7-((2R ,3R )-3-((2S ,3S )-3-((三乙基矽基)氧基)戊-2-基)環氧乙烷-2-基)庚-2,4-二烯-2-基)-12-側氧基-10-((三乙基矽基)氧基)氧雜環十二-4-烯-6-基 乙酸酯（4.3 g，4.8 mmol）在THF（60 mL）中的攪拌溶液中添加乙烯基乙醚（18.4 mL，192 mmol），然後添加PPTS（0.3 g，1.0 mmol）。將反應混合物在室溫攪拌15小時。添加TEA（0.6 mL），並將混合物在室溫攪拌5 min。將EtOAc（60 mL）和飽和NaHCO3 水溶液添加至混合物中。將有機層分離，乾燥，過濾，並在真空中濃縮。將殘餘物藉由矽膠層析法（用在己烷中的0-100% EtOAc洗脫）純化，得到呈非鏡像異構物的混合物的(2S ,3S ,6S ,7R ,10R ,E )-7-((S )1-乙氧基乙氧基)-2-((R ,2E ,4E )-6-羥基-6-甲基-7-((2R ,3R )-3-((2S ,3S )-3-((三乙基矽基)氧基)戊-2-基)環氧乙烷-2-基)庚-2,4-二烯-2-基)-3,7-二甲基-12-側氧基-10-((三乙基矽基)氧基)氧雜環十二-4-烯-6-基 乙酸酯和(2S ,3S ,6S ,7R ,10R ,E )-7-((R )1-乙氧基乙氧基)-2-((R ,2E ,4E )-6-羥基-6-甲基-7-((2R ,3R )-3-((2S ,3S )-3-((三乙基矽基)氧基)戊-2-基)環氧乙烷-2-基)庚-2,4-二烯-2-基)-3,7-二甲基-12-側氧基-10-((三乙基矽基)氧基)氧雜環十二-4-烯-6-基 乙酸酯。1 H-NMR (400 MHz, CD3 OD): δ ppm 0.48 - 0.60 (m, 18 H), 0.73 - 0.94 (m, 37 H), 1.10 - 1.24 (m, 8 H), 1.26 - 1.53 (m, 13 H), 1.62 - 1.70 (m, 3 H), 1.82 (m, 1 H), 1.96 - 2.03 (m, 3 H), 2.30 - 2.52 (m, 4 H), 2.74 - 2.79 (m, 1 H), 3.41 - 3.68 (m, 3 H), 3.71 - 3.79 (m, 1 H), 4.90 - 5.12 (m, 3 H), 5.51 - 5.72 (m, 3 H), 6.03 (m 1 H), 6.34 (m, 1 H)。
步驟 3 ：(2S ,3S ,6S ,7R ,10R ,E )-7-((R)- 1- 乙氧基乙氧基 )-3,7- 二甲基 -2-((R ,2E ,4E )-6- 甲基 -6-(( 三乙基矽基 ) 氧基 )-7-((2R ,3R )-3-((2S ,3S )-3-(( 三乙基矽基 ) 氧基 ) 戊 -2- 基 ) 環氧乙烷 -2- 基 ) 庚 -2,4- 二烯 -2- 基 )-12- 側氧基 -10-(( 三乙基矽基 ) 氧基 ) 氧雜環十二 -4- 烯 -6- 基 哌 𠯤 -1- 甲酸酯和 (2S ,3S ,6S ,7R ,10R ,E )-7-((S)- 1- 乙氧基乙氧基 )-3,7- 二甲基 -2-((R ,2E ,4E )-6- 甲基 -6-(( 三乙基矽基 ) 氧基 )-7-((2R ,3R )-3-((2S ,3S )-3-(( 三乙基矽基 ) 氧基 ) 戊 -2- 基 ) 環氧乙烷 -2- 基 ) 庚 -2,4- 二烯 -2- 基 )-12- 側氧基 -10-(( 三乙基矽基 ) 氧基 ) 氧雜環十二 -4- 烯 -6- 基 哌 𠯤 -1- 甲酸酯。 向(2S ,3S ,6S ,7R ,10R ,E )-7-((R)-1- 乙氧基乙氧基)-3,7-二甲基-2-((R ,2E ,4E )-6-甲基-6-((三乙基矽基)氧基)-7-((2R ,3R )-3-((2S ,3S )-3-三乙基矽基)氧基)戊-2-基)環氧乙烷-2-基)庚-2,4-二烯-2-基)-12-側氧基-10-((三乙基矽基)氧基)氧雜環十二-4-烯-6-基 乙酸酯和(2S ,3S ,6S ,7R ,10R ,E )-7-((S )1-乙氧基乙氧基)-3,7-二甲基-2-((R ,2E ,4E )-6-甲基-6-((三乙基矽基)氧基)-7-((2R ,3R )-3-((2S ,3S )-3-三乙基矽基)氧基)戊-2-基)環氧乙烷-2-基)庚-2,4-二烯-2-基)-12-側氧基-10-((三乙基矽基)氧基)氧雜環十二-4-烯-6-基 乙酸酯（2.6 g，2.6 mmol）在MeOH（25 mL）中的溶液中添加碳酸鉀（0.7 g，5.3 mmol）。將反應混合物在室溫攪拌3小時。將混合物用EtOAc稀釋並且用水和鹽水洗滌。將有機層乾燥，過濾，並濃縮至乾。將所得物質（2.45 g，2.6 mmol）溶解在DCM（30 mL）中。將DIPEA（2.3 mL，13.2 mmol）、4-硝基苯基氯甲酸酯（1.6 g，4.0 mmol）和DMAP（0.130 g，1.1 mmol）添加至反應混合物中。將反應混合物在室溫攪拌6小時並且然後用DCM稀釋。將混合物用鹽水洗滌，乾燥，過濾，並濃縮至乾。將獲得的殘餘物溶解在DCM（30 mL）中。添加DIPEA（2.3 mL，13.2 mmol）和哌𠯤（0.7 g，7.9 mmol），並且將反應混合物在室溫攪拌4小時。將反應混合物用DCM稀釋並用水和鹽水洗滌。將有機層乾燥，過濾並蒸發至乾。將獲得的殘餘物使用NH-矽膠層析法（ISCO RediSep®胺官能化柱）（用在DCM中的0-10% MeOH洗脫）純化，得到呈非鏡像異構物的混合物的標題化合物。1 H-NMR (400 MHz, CD3 OD): δ ppm 0.57 - 0.69 (m, 19 H) 0.80 - 1.01 (m, 39 H) 1.16 - 1.41 (m, 15 H) 1.44 - 1.62 (m, 7 H) 1.73 (m, 4 H) 1.83 - 1.96 (m, 4 H) 2.38 - 2.61 (m, 4 H) 2.78 - 2.91 (m, 5 H) 3.05 (s, 1 H) 3.42 - 3.65 (m, 7 H) 3.75 (td, 1 H) 3.84 (br s, 1 H), 4.97 - 5.08 (m, 3 H), 5.11 - 5.20 (m, 1 H), 5.60 - 5.79 (m, 3 H), 6.12 (br d, 1 H), 6.43 (dd, 1 H), 6.54 (d, 1 H) 8.18 - 8.29 (m, 1 H)。LC/MS (ESI, m/z), 1038.7 [M+H]+ 。
步驟 4 ：(2S ,3S ,6S ,7R ,10R ,E )-7- 羥基 -3,7- 二甲基 -2-((R ,2E ,4E )-6- 甲基 -6-(( 三乙基矽基 ) 氧基 )-7-((2R ,3R )-3-((2S ,3S )-3-(( 三乙基矽基 ) 氧基 ) 戊 -2- 基 ) 環氧乙烷 -2- 基 ) 庚 -2,4- 二烯 -2- 基 )-12- 側氧基 -10-(( 三乙基矽基 ) 氧基 ) 氧雜環十二 -4- 烯 -6- 基 哌 𠯤 -1- 甲酸酯。 向(2S ,3S ,6S ,7R ,10R ,E )-7-((R )-1-乙氧基乙氧基)-3,7-二甲基-2-((R ,2E ,4E )-6-甲基-6-((三乙基矽基)氧基)-7-((2R ,3R )-3-((2S ,3S )-3-((三乙基矽基)氧基)戊-2-基)環氧乙烷-2-基)庚-2,4-二烯-2-基)-12-側氧基-10-((三乙基矽基)氧基)氧雜環十二-4-烯-6-基 哌𠯤-1-甲酸酯和(2S ,3S ,6S ,7R ,10R ,E )-7-((S )-1-乙氧基乙氧基)-3,7-二甲基-2-((R ,2E ,4E )-6-甲基-6-((三乙基矽基)氧基)-7-((2R ,3R )-3-((2S ,3S )-3-((三乙基矽基)氧基)戊-2-基)環氧乙烷-2-基)庚-2,4-二烯-2-基)-12-側氧基-10-((三乙基矽基)氧基)氧雜環十二-4-烯-6-基 哌𠯤-1-甲酸酯（970 mg，0.7 mmol）在THF（15 mL）和水（5 mL）中的溶液中添加4-甲基苯磺酸水合物（208 mg，1.1 mmol）。將反應混合物在室溫攪拌4小時並藉由添加飽和NaHCO3 水溶液淬滅。將所得混合物用DCM萃取。將合併的有機層用水和鹽水洗滌，然後乾燥，過濾並濃縮至乾，得到(2S ,3S ,6S ,7R ,10R ,E )-7-羥基-3,7-二甲基-2-((R ,2E ,4E )-6-甲基-6-((三乙基矽基)氧基)-7-((2R ,3R )-3-((2S ,3S )-3-((三乙基矽基)氧基)戊-2-基)環氧乙烷-2-基)庚-2,4-二烯-2-基)-12-側氧基-10-((三乙基矽基)氧基)氧雜環十二-4-烯-6-基 哌𠯤-1-甲酸酯。將該物質不經進一步純化即用於步驟5中。LC/MS (ESI, m/z), 966.3 [M+H]+ 。
步驟 5 ：(2S ,3S ,6S ,7R ,10R ,E )-7,10- 二羥基 -2-((R ,2E ,4E )-6- 羥基 -7-((2R ,3R )-3-((2R ,3S )-3- 羥基戊 -2- 基 ) 環氧乙烷 -2- 基 )-6- 甲基庚 -2,4- 二烯 -2- 基 )-3,7- 二甲基 -12- 側氧基氧雜環十二 -4- 烯 -6- 基 哌 𠯤 -1- 甲酸酯。 在-78°C，向(2S ,3S ,6S ,7R ,10R ,E )-7-羥基-3,7-二甲基-2-((R ,2E ,4E )-6-甲基-6-((三乙基矽基)氧基)-7-((2R ,3R )-3-((2S ,3S )-3-((三乙基矽基)氧基)戊-2-基)環氧乙烷-2-基)庚-2,4-二烯-2-基)-12-側氧基-10-((三乙基矽基)氧基)氧雜環十二-4-烯-6-基 哌𠯤-1-甲酸酯（670 mg，0.69 mmol）在DCM（15 mL）和DIPEA（15 mL，85.9 mmol）中的溶液中逐滴添加氟化氫-吡啶（CAS號62778-11-4，1.9 mL，20.8 mmol）。使反應混合物溫熱至室溫並攪拌16小時。將所得混合物用DCM稀釋並用飽和NaHCO3 水溶液、水和鹽水洗滌。將有機層乾燥、過濾、在真空中濃縮，並藉由NH-矽膠層析法（ISCO RediSep®胺官能化柱）和HPLC純化，得到(2S ,3S ,6S ,7R ,10R ,E )-7,10-二羥基-2-((R ,2E ,4E )-6-羥基-7-((2R ,3R )-3-((2R ,3S )-3-羥基戊-2-基)環氧乙烷-2-基)-6-甲基庚-2,4-二烯-2-基)-3,7-二甲基-12-側氧基氧雜環十二-4-烯-6-基 哌𠯤-1-甲酸酯。1 H-NMR (400 MHz, CDCl3 ): δ ppm 0.86 - 0.93 (m, 6 H), 0.94 - 0.99 (t, 3 H), 1.24 (s, 3 H), 1.26-1.44 (m, 7H), 1.47 - 1.65 (m, 5 H), 1.66 - 1.79 (m, 7 H), 1.82 (br d, 3 H), 2.45 - 2.67 (m, 4 H), 2.76 (dd, 1 H), 2.88 (br d, 3 H), 2.94 - 3.04 (m, 1 H), 3.66 (br d, 1 H), 3.72 - 3.82 (m, 1 H), 5.00 - 5.06 (m, 1 H), 5.17 (d, 1 H), 5.57 - 5.77 (m, 2 H), 5.85 (d, 1 H), 6.12 (br d, 1 H), 6.53 (dd, 1 H)。LC/MS (ESI, m/z), 623.6 [M+H]+ 。1.3 ADL1-D1
1-((2S ,3S ,6S,7R ,10R ,E )-7,10-二羥基-2-((R ,2E ,4E )-6-羥基-7-((2R ,3R )-3-((2R ,3S )-3-羥基戊-2-基)環氧乙烷-2-基)-6-甲基庚-2,4-二烯-2-基)-3,7-二甲基-12-側氧基氧雜環十二-4-烯-6-基) 4-(4-((S )-2-((S )-2-(6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H -吡咯-1-基)己醯胺基)-3-甲基丁醯胺基)-5-脲基戊醯胺基)苄基) 哌𠯤-1,4-二甲酸酯（ADL1-D1）的合成：
Figure 02_image176
方案 2
向(2S ,3S ,6S ,7R ,10R ,E )-7,10-二羥基-2-((R ,2E ,4E )-6-羥基-7-((2R ,3R )-3-((2R ,3S )-3-羥基戊-2-基)環氧乙烷-2-基)-6-甲基庚-2,4-二烯-2-基)-3,7-二甲基-12-側氧基氧雜環十二-4-烯-6-基 哌𠯤-1-甲酸酯（177 mg，0.28 mmol）在DMF（2 mL）中的攪拌溶液中添加DIPEA（50 µL，0.27 mmol），然後添加4-((S )-2-((S )-2-(6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯胺基)-3-甲基丁醯胺基)-5-脲基戊醯胺基)苄基 (4-硝基苯基) 碳酸酯（200 mg，0.27 mmol）。將反應混合物在室溫攪拌2小時。將所得混合物濃縮至乾並藉由製備型HPLC純化，得到標題化合物。1 H-NMR (400 MHz, CD3 OD): δ ppm 0.86 - 1.04 (m, 16 H), 1.22 - 1.42 (m, 7 H), 1.45 - 1.71 (m, 12 H), 1.75 - 1.82 (m, 4 H), 1.84 - 1.97 (m, 2H), 2.04 - 2.14 (m, 1 H), 2.29 (m, 2 H), 2.49 - 2.64 (m, 3 H), 2.69 (m, 1 H), 2.92 (m, 1 H), 3.09 - 3.30 (m,3 H), 3.35 - 3.41 (m, 1 H), 3.41 - 3.61 (m, 10 H), 3.68 - 3.84 (m, 1 H), 4.16 - 4.21 (m, 1 H), 4.52 (dd, 1 H), 4.86 - 4.99 (m, 1 H) 5.06 -5.13 (m, 3 H), 5.60 (dd, 1 H), 5.74 (dd, 1 H), 5.89 (d, 1 H), 6.15 (d, 1 H), 6.55 (dd, 1 H), 6.80 (s, 2 H), 7.34 (m, 2 H), 7.60 (m, 2 H)。LC/MS (ESI, m/z), 1222.6 [M+H]+ 。1.4 ADL1-D2
1-((2S ,3S ,6S ,7R ,10R ,E)-7-乙醯氧基-10-羥基-2-((R, 2E ,4E )-6-羥基-7-((2R ,3R )-3-((2R ,3S )-3-羥基戊-2-基)環氧乙烷-2-基)-6-甲基庚-2,4-二烯-2-基)-3,7-二甲基-12-側氧基氧雜環十二-4-烯-6-基) 4-(4-((S )-2-((S )-2-(6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H -吡咯-1-基)己醯胺基)-3-甲基丁醯胺基)-5-脲基戊醯胺基)苄基) 哌𠯤-1,4-二甲酸酯（ADL1-D2）的合成：
Figure 02_image178
方案 3
步驟 1 ：(2S ,3S ,6S ,7R ,10R ,E )-7- 乙醯氧基 -3,7- 二甲基 -2-((R ,2E ,4E )-6- 甲基 -6-(( 三乙基矽基 ) 氧基 )-7-((2R ,3R )-3-((2S ,3S )-3-(( 三乙基矽基 ) 氧基 ) 戊 -2- 基 ) 環氧乙烷 -2- 基 ) 庚 -2,4- 二烯 -2- 基 )-12- 側氧基 -10-(( 三乙基矽基 ) 氧基 ) 氧雜環十二 -4- 烯 -6- 基 哌 𠯤 -1- 甲酸酯和 (2S ,3S ,6S ,7R ,10R ,E )-6- 乙醯氧基 -3,7- 二甲基 -2-((R ,2E ,4E )-6- 甲基 -6-(( 三乙基矽基 ) 氧基 )-7-((2R ,3R )-3-((2S ,3S )-3-(( 三乙基矽基 ) 氧基 ) 戊 -2- 基 ) 環氧乙烷 -2- 基 ) 庚 -2,4- 二烯 -2- 基 )-12- 側氧基 -10-(( 三乙基矽基 ) 氧基 ) 氧雜環十二烷 -4- 烯 -7- 基 哌 𠯤 -1- 甲酸酯。 在20°C，向(2S ,3S ,6S ,7R ,10R ,E )-7-羥基-3,7-二甲基-2-((R ,2E ,4E )-6-甲基-6-((三乙基矽基)氧基)-7-((2R ,3R )-3-((2S ,3S )-3-((三乙基矽基)氧基)戊-2-基)環氧乙烷-2-基)庚-2,4-二烯-2-基)-12-側氧基-10-((三乙基矽基)氧基)氧雜環十二-4-烯-6-基 乙酸酯（160 mg，0.18 mmol）在1,2-二氯乙烷（5 mL）中的溶液中添加DMAP（32.7 mg，0.27 mmol）、三乙胺（0.75 mL，5.36 mmol）和4-硝基苯基氯甲酸酯（360 mg，1.79 mmol）。將反應混合物在40°C攪拌4天，然後在60°C攪拌2小時。然後將反應混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將水層用EtOAc萃取（2X）。將合併的有機萃取物依次用水和鹽水洗滌，經無水MgSO4 乾燥，過濾，並在真空中濃縮。將殘餘物藉由矽膠層析法（用在己烷中的0-100% EtOAc洗脫）純化，得到呈區域異構物的混合物的(2S ,3S ,6S ,7R ,10R ,E )-3,7-二甲基-2-((R ,2E ,4E )-6-甲基-6-((三乙基矽基)氧基)-7-((2R ,3R )-3-((2S ,3S )-3-((三乙基矽基)氧基)戊-2-基)環氧乙烷-2-基)庚-2,4-二烯-2-基)-6-(((4-硝基苯氧基)羰基)氧基)-12-側氧基-10-((三乙基矽基)氧基)氧雜環十二-4-烯-7-基 乙酸酯和(2S ,3S ,6S ,7R ,10R ,E )-3,7-二甲基-2-((R ,2E ,4E )-6-甲基-6-((三乙基矽基)氧基)-7-((2R ,3R )-3-((2S ,3S )-3-((三乙基矽基)氧基)戊-2-基)環氧乙烷-2-基)庚-2,4-二烯-2-基)-7-(((4-硝基苯氧基)羰基)氧基)-12-側氧基-10-((三乙基矽基)氧基)氧雜環十二-4-烯-6-基 乙酸酯。
向(2S ,3S ,6S ,7R ,10R ,E )-3,7-二甲基-2-((R ,2E ,4E )-6-甲基-6-((三乙基矽基)氧基)-7-((2R ,3R )-3-((2S ,3S )-3-((三乙基矽基)氧基)戊-2-基)環氧乙烷-2-基)庚-2,4-二烯-2-基)-6-(((4-硝基苯氧基)羰基)氧基)-12-側氧基-10-((三乙基矽基)氧基)氧雜環十二-4-烯-7-基 乙酸酯和(2S ,3S ,6S ,7R ,10R ,E )-3,7-二甲基-2-((R ,2E ,4E )-6-甲基-6-((三乙基矽基)氧基)-7-((2R ,3R )-3-((2S ,3S )-3-((三乙基矽基)氧基)戊-2-基)環氧乙烷-2-基)庚-2,4-二烯-2-基)-7-(((4-硝基苯氧基)羰基)氧基)-12-側氧基-10-((三乙基矽基)氧基)氧雜環十二-4-烯-6-基 乙酸鹽在DCM（1.0 mL）中的攪拌溶液中添加哌𠯤（0.447 g，5.20 mmol）和DIPEA（0.9 mL，5.20 mmol）。將所得淺黃色懸浮液在室溫攪拌6小時。將所得混合物在真空中濃縮並藉由矽膠層析法（用在DCM中的0-10% MeOH洗脫）純化，得到呈區域異構物的混合物的(2S ,3S ,6S ,7R ,10R ,E )-7-乙醯氧基-3,7-二甲基-2-((R ,2E ,4E )-6-甲基-6-((三乙基矽基)氧基)-7-((2R ,3R )-3-((2S ,3S )-3-((三乙基矽基)氧基)戊-2-基)環氧乙烷-2-基)庚-2,4-二烯-2-基)-12-側氧基-10-((三乙基矽基)氧基)氧雜環十二-4-烯-6-基 哌𠯤-1-甲酸酯和(2S ,3S ,6S ,7R ,10R ,E )-6-乙醯氧基-3,7-二甲基-2-((R ,2E ,4E )-6-甲基-6-((三乙基矽基)氧基)-7-((2R ,3R )-3-((2S ,3S )-3-((三乙基矽基)氧基)戊-2-基)環氧乙烷-2-基)庚-2,4-二烯-2-基)-12-側氧基-10-((三乙基矽基)氧基)氧雜環十二-4-烯-7-基 哌𠯤-1-甲酸酯。LC/MS (ESI, m/z), 1008.1 [M+H]+ 。
步驟 2 ：(2S ,3S ,6S ,7R ,10R ,E )-7- 乙醯氧基 -10- 羥基 -2-((R ,2E ,4E )-6- 羥基 -7-((2R ,3R )-3-((2R ,3S )-3- 羥基戊 -2- 基 ) 環氧乙烷 -2- 基 )-6- 甲基庚 -2,4- 二烯 -2- 基 )-3,7- 二甲基 -12- 側氧基氧雜環十二 -4- 烯 -6- 基 哌 𠯤 -1- 甲酸酯。 向(2S ,3S ,6S ,7R ,10R ,E )-7-乙醯氧基-3,7-二甲基-2-((R ,2E ,4E )-6-甲基-6-((三乙基矽基)氧基)-7-((2R ,3R )-3-((2S ,3S )-3-((三乙基矽基)氧基)戊-2-基)環氧乙烷-2-基)庚-2,4-二烯-2-基)-12-側氧基-10-((三乙基矽基)氧基)氧雜環十二-4-烯-6-基 哌𠯤-1-甲酸酯和(2S ,3S ,6S ,7R ,10R ,E )-6-乙醯氧基-3,7-二甲基-2-((R ,2E ,4E )-6-甲基-6-((三乙基矽基)氧基)-7-((2R ,3R )-3-((2S ,3S )-3-((三乙基矽基)氧基)戊-2-基)環氧乙烷-2-基)庚-2,4-二烯-2-基)-12-側氧基-10-((三乙基矽基)氧基)氧雜環十二烷-4-烯-7-基 哌𠯤-1-甲酸酯（1.09 g，0.92 mmol）在DCM（21.0 mL）中的攪拌溶液中添加DIPEA（19.9 mL，114.0 mmol）。將反應混合物冷卻至-78°C。將氟化氫-吡啶（CAS號62778-11-4，0.518 g，5.23 mmol）添加至反應混合物中，然後使反應混合物溫熱至室溫並攪拌過夜。將所得混合物在冰浴中冷卻並添加飽和NaHCO3 水溶液。將反應混合物用DCM萃取，並且將有機層乾燥，過濾，並在真空中濃縮。將所得產物進行HPLC純化，得到(2S ,3S ,6S ,7R ,10R ,E )-7-乙醯氧基-10-羥基-2-((R ,2E ,4E )-6-羥基-7-((2R ,3R )-3-((2R ,3S )-3-羥基戊-2-基)環氧乙烷-2-基)-6-甲基庚-2,4-二烯-2-基)-3,7-二甲基-12-側氧基氧雜環十二-4-烯-6-基 哌𠯤-1-甲酸酯。1 H-NMR (400 MHz, CD3 OD): δ ppm 0.87 - 0.92 (m, 6 H), 0.94 (t, 3 H), 1.16 - 1.31 (m, 1 H), 1.35 (s, 3 H), 1.40 - 1.56 (m, 4 H), 1.59 (s, 3 H), 1.66 (m, 3 H), 1.76 - 1.80 (m, 3 H), 1.87 (m, 1 H), 2.05 (s, 3 H), 2.30 - 2.41 (m, 1 H), 2.50 (d, 2 H), 2.56 - 2.72 (m, 2 H), 2.90 (td, 1 H), 3.19 (m, 4 H), 3.50 - 3.59 (m, 1 H), 3.71 (br s, 4 H), 3.77 - 3.89 (m, 1 H), 5.05 (dd, 2 H), 5.65 (dd, 1 H), 5.76 (dd, 1 H), 5.88 (d, 1 H), 6.14 (d, 1 H), 6.53 (dd, 1 H)。LC/MS (ESI, m/z), 665.6 [M+H]+ 。
步驟 3 ：1-((2S ,3S ,6S ,7R ,10R ,E)-7- 乙醯氧基 -10- 羥基 -2-((R, 2E ,4E )-6- 羥基 -7-((2R ,3R )-3-((2R ,3S )-3- 羥基戊 -2- 基 ) 環氧乙烷 -2- 基 )-6- 甲基庚 -2,4- 二烯 -2- 基 )-3,7- 二甲基 -12- 側氧基氧雜環十二 -4- 烯 -6- 基 ) 4-(4-((S )-2-((S )-2-(6-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H - 吡咯 -1- 基 ) 己醯胺基 )-3- 甲基丁醯胺基 )-5- 脲基戊醯胺基 ) 苄基 ) 哌 𠯤 -1,4- 二甲酸酯（ ADL1-D2 ）。
Figure 02_image180
使用(2S ,3S ,6S ,7R ,10R ,E )-7-乙醯氧基-10-羥基-2-((R ,2E ,4E )-6-羥基-7-((2R ,3R )-3-((2R ,3S )-3-羥基戊-2-基)環氧乙烷-2-基)-6-甲基庚-2,4-二烯-2-基)-3,7-二甲基-12-側氧基氧雜環十二-4-烯-6-基 哌𠯤-1-甲酸酯作為起始物質，使用1.3節中所述之程序製備標題化合物。1 H-NMR (400 MHz, CD3 OD): δ ppm 0.83 - 1.03 (m, 15 H) 1.20 - 1.38 (m, 7 H) 1.40 - 1.70 (m, 15 H) 1.71 - 1.81 (m, 4 H) 1.83 - 1.96 (m, 2 H) 2.01 - 2.14 (m, 4 H) 2.27 (t, 2 H) 2.32 - 2.43 (m, 1 H) 2.47 - 2.53 (m, 2 H) 2.55 - 2.65 (m, 1 H) 2.67 (dd, 1 H) 2.87 - 2.94 (m, 1 H) 3.05 - 3.25 (m, 2 H) 3.43 - 3.55 (m, 11 H) 3.73 - 3.85 (m, 1 H) 4.11 - 4.21 (m, 1 H) 4.46 - 4.53 (m, 1 H) 4.53 - 4.60 (m, 1 H) 5.05 (dd, 2 H) 5.09 (s, 2 H) 5.49 (s, 1 H) 5.64 (dd, 1 H) 5.76 (dd, 1 H) 5.87 (d, 1 H) 6.15 (d, 1 H) 6.53 (dd, 1 H) 6.79 (s, 2 H) 7.32 (d, 2 H) 7.58 (d, 2 H)。LC/MS (ESI, m/z), 1263.8 [M+H]+ 。1.5 ADL22-D1
1-((2S ,3S ,6S ,7R ,10R ,E )-7,10-二羥基-2-((R ,2E ,4E )-6-羥基-7-((2R ,3R )-3-((2R ,3S )-3-羥基戊-2-基)環氧乙烷-2-基)-6-甲基庚-2,4-二烯-2-基)-3,7-二甲基-12-側氧基氧雜環十二-4-烯-6-基) 4-(4-((2S ,5S )-15-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H -吡咯-1-基)-5-異丙基-4,7-二側氧基-2-(3-脲基丙基)-10,13-二氧雜-3,6-二氮雜十五烷醯胺基)苄基) 哌𠯤-1,4-二甲酸酯（ADL22-D1）的合成：
Figure 02_image182
向(2S ,3S ,6S ,7R ,10R ,E )-7,10-二羥基-2-((R ,2E ,4E )-6-羥基-7-((2R ,3R )-3-((2R ,3S )-3-羥基戊-2-基)環氧乙烷-2-基)-6-甲基庚-2,4-二烯-2-基)-3,7-二甲基-12-側氧基氧雜環十二-4-烯-6-基 哌𠯤-1-甲酸酯（14.2 mg，0.023 mmol）和4-((2S ,5S )-15-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H -吡咯-1-基)-5-異丙基-4,7-二側氧基-2-(3-脲基丙基)-10,13-二氧雜-3,6-二氮雜十五烷醯胺基)苄基 (4-硝基苯基)碳酸酯（17.9 mg，0.023 mmol）在DMF（1 mL）中的攪拌溶液中添加DIPEA（8 µL，0.046 mmol）。將反應混合物在室溫攪拌2小時。將所得混合物藉由反相快速層析法（C18，H2 O/乙腈/甲酸 = 95/5/0.1至0/100/0.1）純化，得到標題化合物。1 H-NMR (400 MHz, CD3 OD): δ 0.86 - 1.07 (m, 17 H), 1.17 - 1.32 (m, 5 H), 1.34 - 1.43 (m, 5 H), 1.47 - 1.70 (m, 8 H), 1.74 - 1.81 (m, 4H), 1.85 - 1.98 (m, 2 H), 2.08 - 2.17 (m, 1 H), 2.50 - 2.63 (m, 5 H), 2.69 (m, 1 H) ,2.88 - 2.94 (m, 1 H), 3.10 - 3.31 (m, 3 H), 3.43 (m, 1 H), 3.48 - 3.76 (m, 19 H), 3.77 - 3.83 (m, 1 H), 4.20 - 4.24 (m, 1 H), 4.49 - 4.55 (m, 1 H), 4.84 - 4.87 (m, 2 H), 4.90 - 4.99 (m, 3 H), 5.06 - 5.14 (m, 3H), 5.60 (dd, 1 H), 5.74 (dd, 1 H), 5.89 (d, 1 H), 6.16 (d, 1 H), 6.55 (dd, 1 H), 6.83 (s, 2 H), 7.35 (m, 2 H), 7.63 (m, 2 H), 8.01 (d, 1 H), 8.25 (m, 1 H)。LC/MS (ESI, m/z), 1263.8 [M+H]+ 。1.6 ADL22-D2
1-((2S ,3S ,6S ,7R ,10R ,E )-7-乙醯氧基-10-羥基-2-((R ,2E ,4E )-6-羥基-7-((2R ,3R )-3-((2R ,3S )-3-羥基戊-2-基)環氧乙烷-2-基)-6-甲基庚-2,4-二烯-2-基)-3,7-二甲基-12-側氧基氧雜環十二-4-烯-6-基) 4-(4-((2S ,5S )-15-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H -吡咯-1-基)-5-異丙基-4,7-二側氧基-2-(3-脲基丙基)-10,13-二氧雜-3,6-二氮雜十五烷醯胺基)苄基) 哌𠯤-1,4-二甲酸酯（ADL22-D2）的合成：
Figure 02_image184
向(2S ,3S ,6S ,7R ,10R ,E )-7-乙醯氧基-10-羥基-2-((R ,2E ,4E )-6-羥基-7-((2R ,3R )-3-((2R ,3S )-3-羥基戊-2-基)環氧乙烷-2-基)-6-甲基庚-2,4-二烯-2-基)-3,7-二甲基-12-側氧基氧雜環十二-4-烯-6-基 哌𠯤-1-甲酸酯（12 mg，0.018 mmol）在DMF（2 mL）中的攪拌溶液中添加4-((2S ,5S )-15-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)-5-異丙基-4,7-二側氧基-2-(3-脲基丙基)-10,13-二氧雜-3,6-二氮雜十五烷醯胺基)苄基 (4-硝基苯基) 碳酸酯（17 mg，0.022 mmol）和DIPEA（9.4 µL，0.054 mmol）。將反應混合物在室溫攪拌1小時。將所得混合物在真空中直接濃縮到矽膠上並藉由矽膠層析法（用在DCM中的0-20% MeOH洗脫）純化，得到標題化合物。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ ppm 0.73 - 0.89 (m, 17 H), 1.03 - 1.13 (m, 1 H), 1.21 - 1.25 (m, 4 H), 1.25 - 1.40 (m, 5 H), 1.42 - 1.47 (m, 4 H), 1.48, (br s, 3 H), 1.69 (s, 4 H), 1.73 - 1.83 (m, 1 H), 1.99 (s, 2 H), 2.10 - 2.25 (m, 1 H), 2.36 (br s, 3 H), 2.40 - 2.48 (m, 2 H), 2.54 - 2.66 (m, 2 H), 2.72 - 2.80, (m, 1 H), 2.88 - 3.08 (m, 2 H), 3.34 - 3.44 (m, 9 H), 3.44 - 3.48 (m, 3 H), 3.48 - 3.52 (m, 2 H), 3.52 - 3.59 (m, 3 H), 3.64 - 3.75 (m, 1 H), 4.24 (s, 1 H), 4.40 (m, 2 H), 4.62 (m, 1 H), 4.80 - 4.85 (m, 1 H), 4.90 (m, 2 H), 5.01 (s, 2 H), 5.40 (s, 2 H), 5.48 - 5.57 (m, 1 H), 5.66 - 5.76 (m, 1 H), 5.81 - 5.91 (m, 1 H), 5.94 - 6.01 (m, 1 H), 6.02 - 6.11 (m, 1 H), 6.36 - 6.45 (m, 1 H), 7.02 (s, 2 H), 7.27 - 7.33 (m, 2 H), 7.58 (s, 2H), 7.81 - 7.89 (m, 1 H), 8.11 (m, 1 H), 9.96 - 10.02 (m, 1 H)。LC/MS (ESI, m/z), 1310.2 [M+H]+ 。1.7 ADL6-D2
1-((2S ,3S ,6S ,7R ,10R ,E )-7-乙醯氧基-10-羥基-2-((R ,2E ,4E )-6-羥基-7-((2R ,3R )-3-((2R ,3S )-3-羥基戊-2-基)環氧乙烷-2-基)-6-甲基庚-2,4-二烯-2-基)-3,7-二甲基-12-側氧基氧雜環十二-4-烯-6-基) 4-(4-((S )-2-((S )-2-(6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H -吡咯-1-基)己醯胺基)-3-甲基丁醯胺基)丙醯胺基)苄基) 哌𠯤-1,4-二甲酸酯（ADL6-D2）的合成：
Figure 02_image186
步驟 1 ： 1-(4-((S )-2-((S )-2-((((9H- 茀 -9- 基 ) 甲氧基 ) 羰基 ) 胺基 )-3- 甲基丁醯胺基 ) 丙醯胺基 ) 苄基 ) 4-((2S ,3S ,6S ,7R ,10R ,E )-7- 乙醯氧基 -10- 羥基 -2-((R ,2E ,4E )-6- 羥基 -7-((2R ,3R )-3-((2R ,3S )-3- 羥基戊 -2- 基 ) 環氧乙烷 -2- 基 )-6- 甲基庚 -2,4- 二烯 -2- 基 )-3,7- 二甲基 -12- 側氧基氧雜環十二 -4- 烯 -6- 基 ) 哌 𠯤 -1,4- 二甲酸酯。 向(2S ,3S ,6S ,7R ,10R ,E )-7-乙醯氧基-10-羥基-2-((R ,2E ,4E )-6-羥基-7-((2R ,3R )-3-((2R ,3S )-3-羥基戊-2-基)環氧乙烷-2-基)-6-甲基庚-2,4-二烯-2-基)-3,7-二甲基-12-側氧基氧雜環十二-4-烯-6-基 哌𠯤-1-甲酸酯（35 mg，0.053 mmol）和(9H -茀-9-基)甲基 ((S )-3-甲基-1-(((S )-1-((4-((((4-硝基苯氧基)羰基)氧基)甲基)苯基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基)-1-側氧基丁-2-基)胺基甲酸酯（43 mg，0.06 mmol）在DMF（530 µL）中的攪拌溶液中添加DIPEA（28 µL，0.16 mmol）。將反應混合物在室溫攪拌30 min然後在真空中濃縮，並且然後乾裝載到矽膠上。將殘餘物藉由矽膠層析法純化，得到1-(4-((S )-2-((S )-2-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-3-甲基丁醯胺基)丙醯胺基)苄基) 4-((2S ,3S ,6S ,7R ,10R ,E )-7-乙醯氧基-10-羥基-2-((R ,2E ,4E )-6-羥基-7-((2R ,3R )-3-((2R ,3S )-3-羥基戊-2-基)環氧乙烷-2-基)-6-甲基庚-2,4-二烯-2-基)-3,7-二甲基-12-側氧基氧雜環十二-4-烯-6-基) 哌𠯤-1,4-二甲酸酯。LC/MS (ESI, m/z), 1228.0 [M+Na]+ 。
步驟 2 ： ADL6-D2 。 向1-(4-((S )-2-((S )-2-((((9H- 茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-3-甲基丁醯胺基)丙醯胺基)苄基) 4-((2S ,3S ,6S ,7R ,10R ,E )-7-乙醯氧基-10-羥基-2-((R ,2E ,4E )-6-羥基-7-((2R ,3R )-3-((2R ,3S )-3-羥基戊-2-基)環氧乙烷-2-基)-6-甲基庚-2,4-二烯-2-基)-3,7-二甲基-12-側氧基氧雜環十二-4-烯-6-基) 哌𠯤-1,4-二甲酸酯（45 mg，0.04 mmol）在DMF（1.4 mL）中的攪拌溶液中添加二乙胺（195 µL，1.86 mmol）。將反應混合物攪拌30 min，用乙酸乙酯稀釋，並在真空中濃縮以除去過量的二乙胺。將殘餘物溶解在DMF（1.4 mL）中並將2,5-二側氧基吡咯啶-1-基 6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H- 吡咯-1-基)己酸酯（17 mg，0.06 mmol）添加到反應混合物中，然後添加DIPEA（10 µL，0.06 mmol）。將反應混合物在室溫攪拌16小時。將所得混合物在真空中濃縮，然後乾裝載到矽膠上。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用在DCM中的0-15% MeOH洗脫）純化，得到標題化合物。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ ppm 0.77 (d, 3 H), 0.79 - 0.89 (m, 15 H), 1.04 - 1.13 (m, 2 H), 1.15 - 1.20 (m, 5 H), 1.22 (s, 3 H), 1.24 -1.26 (m, 2 H), 1.30 (m, 4 H), 1.32 - 1.39 (m, 2 H), 1.45 (s, 5 H), 1.47 - 1.62 (m, 5 H), 1.67 - 1.71 (m, 3 H), 1.75 - 1.82 (m, 1 H), 1.90 - 1.99 (m, 4 H), 1.99 - 2.02 (m, 3 H), 2.06 - 2.25 (m, 3 H), 2.30 - 2.41 (m, 2 H), 2.59 (s, 2 H), 2.71 - 2.80 (m, 1 H), 3.64 - 3.74 (m, 2 H), 4.03 (m, 2H), 4.16 (m, 1 H), 4.32 - 4.46 (m, 2 H), 4.79 - 4.97 (m, 2 H), 5.01 (s, 2 H), 5.52 (m, 1 H), 5.64 - 5.77 (m, 1 H), 5.85 (m, 1 H), 6.00 - 6.09 (m, 1 H), 6.41 (m, 1 H), 7.00 (s, 2 H), 7.30 (m, 2 H), 7.58 (d, 2 H), 7.80 (d, 1 H), 8.15 (d, 1 H)。LC/MS (ESI, m/z), 1200.4 [M+Na]+ 。1.8 ADL21-D2
1-((2S ,3S ,6S ,7R ,10R ,E )-7-乙醯氧基-10-羥基-2-((R ,2E ,4E )-6-羥基-7-((2R ,3R )-3-((2R ,3S )-3-羥基戊-2-基)環氧乙烷-2-基)-6-甲基庚-2,4-二烯-2-基)-3,7-二甲基-12-側氧基氧雜環十二-4-烯-6-基) 4-(4-((R )-4-胺基-2-((R )-2-((S )-2-(6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H -吡咯-1-基)己醯胺基)丙醯胺基)丙醯胺基)-4-側氧基丁醯胺基)苄基) 哌𠯤-1,4-二甲酸酯（ADL21-D2）的合成：
Figure 02_image188
步驟 1 ： 1-((2S ,3S ,6S ,7R ,10R ,E )-7- 乙醯氧基 -10- 羥基 -2-((R ,2E ,4E )-6- 羥基 -7-((2R ,3R )-3-((2R ,3S )-3- 羥基戊 -2- 基 ) 環氧乙烷 -2- 基 )-6- 甲基庚 -2,4- 二烯 -2- 基 )-3,7- 二甲基 -12- 側氧基氧雜環十二 -4- 烯 -6- 基 ) 4-(4-((5S ,8S ,11S )-11-(2- 胺基 -2- 側氧基乙基 )-1-(9H- 茀 -9- 基 )-5,8- 二甲基 -3,6,9- 三側氧基 -2- 氧雜 -4,7,10- 三氮雜十二烷 -12- 醯胺基 ) 苄基 ) 哌 𠯤 -1,4- 二甲酸酯。 向(2S ,3S ,6S ,7R ,10R ,E )-7-乙醯氧基-10-羥基-2-((R ,2E ,4E )-6-羥基-7-((2R ,3R )-3-((2R ,3S )-3-羥基戊-2-基)環氧乙烷-2-基)-6-甲基庚-2,4-二烯-2-基)-3,7-二甲基-12-側氧基氧雜環十二-4-烯-6-基 哌𠯤-1-甲酸酯（75 mg，0.11 mmol）在DMF（1.1 mL）中的攪拌溶液中添加(9H- 茀-9-基)甲基((S )-1-(((S )-1-(((S )-4-胺基-1-((4-((((4硝基苯氧基)羰基)氧基)甲基)苯基)胺基)-1,4-二側氧基丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸酯（86 mg，0.11 mmol）和DIPEA（59 µL，0.34 mmol）。將反應混合物在室溫攪拌90 min。將反應混合物在真空中濃縮並藉由矽膠層析法（用在DCM中的0-15% MeOH洗脫）純化，得到1-((2S ,3S ,6S ,7R ,10R ,E )-7-乙醯氧基-10-羥基-2-((R ,2E ,4E )-6-羥基-7-((2R ,3R )-3-((2R ,3S )-3-羥基戊-2-基)環氧乙烷-2-基)-6-甲基庚-2,4-二烯-2-基)-3,7-二甲基-12-側氧基氧雜環十二-4-烯-6-基) 4-(4-((5S ,8S ,11S )-11-(2-胺基-2-側氧基乙基)-1-(9H -茀-9-基)-5,8-二甲基-3,6,9-三側氧基-2-氧雜-4,7,10-三氮雜十二烷-12-醯胺基)苄基) 哌𠯤-1,4-二甲酸酯。LC/MS (ESI, m/z), 1293.4 [M+H]+ 。
Figure 02_image190
步驟 2 和 3 ： 1-((2S ,3S ,6S ,7R ,10R ,E )-7- 乙醯氧基 -10- 羥基 -2-((R ,2E ,4E )-6- 羥基 -7-((2R ,3R )-3-((2R ,3S )-3- 羥基戊 -2- 基 ) 環氧乙烷 -2- 基 )-6- 甲基庚 -2,4- 二烯 -2- 基 )-3,7- 二甲基 -12- 側氧基氧雜環十二 -4- 烯 -6- 基 ) 4-(4-((S )-4- 胺基 -2-((S )-2-((S )-2-(6-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H - 吡咯 -1- 基 ) 己醯胺基 ) 丙醯胺基 ) 丙醯胺基 )-4- 側氧基丁醯胺基 ) 苄基 ) 哌 𠯤 -1,4- 二甲酸酯。 向1-((2S ,3S ,6S ,7R ,10R ,E )-7-乙醯氧基-10-羥基-2-((R ,2E ,4E )-6-羥基-7-((2R ,3R )-3-((2R ,3S )-3-羥基戊-2-基)環氧乙烷-2-基)-6-甲基庚-2,4-二烯-2-基)-3,7-二甲基-12-側氧基氧雜環十二-4-烯-6-基) 4-(4-((5S,8R,11R)-11-(2-胺基-2-側氧基乙基)-1-(9H- 茀-9-基)-5,8-二甲基-3,6,9-三側氧基-2-氧雜-4,7,10-三氮雜十二烷-12-醯胺基)苄基)哌𠯤-1,4-二甲酸酯（125 mg，0.097 mmol）在DMF（1.9 mL）中的攪拌溶液中添加二乙胺（202 µL，1.934 mmol）。將反應混合物在室溫攪拌1小時。將反應混合物用乙酸乙酯稀釋並濃縮以除去過量的二乙胺。將所得產物溶解在DMF（1.9 mL）中並將2,5-二側氧基吡咯啶-1-基-6-(2,5-二氧-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己酸酯（36 mg，0.12 mmol）和DIPEA（42 µL，0.24 mmol）添加到反應混合物中並在室溫攪拌1小時。將反應混合物濃縮並藉由矽膠柱層析法（用0-15% MeOH/DCM洗脫）純化，得到標題化合物。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ ppm 0.71 - 0.87 (m, 9 H), 1.04 - 1.12 (m, 1 H), 1.14 - 1.26 (m, 13 H), 1.27 - 1.40 (m, 3 H), 1.40 - 1.52 (m, 9 H), 1.52 - 1.62 (m, 1 H), 1.69 (s, 3 H), 1.74 - 1.83 (m, 1 H), 1.99 (m, 4 H), 2.03 - 2.14 (m, 2 H), 2.15 - 2.26 (m, 1 H), 2.31 - 2.41 (m, 2 H), 2.54 - 2.65 (m, 4 H), 2.72 - 2.80 (m, 1 H), 3.17 (d, 3 H), 3.63 - 3.74 (m, 1 H), 3.99 - 4.12 (m, 2 H), 4.14 - 4.22 (m, 1 H), 4.23 - 4.30 (m, 1 H), 4.40 (d, 1 H), 4.55 - 4.65 (m, 2 H), 4.82 (s, 1 H), 4.87 - 4.93 (m, 2 H), 5.01 (s, 2 H), 5.47 - 5.57 (m, 1 H), 5.66 - 5.77 (m, 1 H), 6.01 - 6.09 (m, 1 H), 6.35 - 6.45 (m, 1 H), 6.89 - 6.96 (m, 1 H), 6.99 (s, 2 H), 7.30 (m, 2 H), 7.36 - 7.42 (m, 1 H), 7.62 (m, 2 H), 7.97 - 8.21 (m, 3 H), 9.62 - 9.72 (m, 1 H)。LC/MS (ESI, m/z), 1285.0 [M+Na]+ 。1.9 ADL21-D1
1-(4-((S )-4-胺基-2-((S )-2-((S )-2-(6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H -吡咯-1-基)己醯胺基)丙醯胺基)丙醯胺基)-4-側氧基丁醯胺基)苄基) 4-((2S ,3S ,6S ,7R ,10R ,E )-7,10-二羥基-2-((R ,2E ,4E )-6-羥基-7-((2R ,3R )-3-((2R ,3S )-3-羥基戊-2-基)環氧乙烷-2-基)-6-甲基庚-2,4-二烯-2-基)-3,7-二甲基-12-側氧基氧雜環十二-4-烯-6-基) 哌𠯤-1,4-二甲酸酯（ADL21-D1）的合成：
Figure 02_image192
ADL21-D1 。 向(2S ,3S ,6S ,7R ,10R ,E )-7,10-二羥基-2-((R ,2E ,4E )-6-羥基-7-((2R ,3R )-3-((2R ,3S )-3-羥基戊-2-基)環氧乙烷-2-基)-6-甲基庚-2,4-二烯-2-基)-3,7-二甲基-12-側氧基氧雜環十二-4-烯-6-基 哌𠯤-1-甲酸酯（50 mg，0.08 mmol）在DMF（1 mL）中的攪拌溶液中添加(9H- 茀-9-基)甲基 ((S )-1-(((S )-1-(((S )-4-胺基-1-((4-((((4-硝基苯氧基)羰基)氧基)甲基)苯基)胺基)-1,4-二側氧基丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸酯（73.9 mg，0.096 mmol），然後添加DIPEA（140 µL，0.803 mmol）。將反應混合物攪拌1小時。然後，將反應混合物濃縮至乾並藉由矽膠柱層析法（用在DCM中的0-15% MeOH洗脫）純化。將含有所希望的化合物的級分濃縮，得到透明油狀物，將其直接進行後續步驟。將獲得的油狀物溶解在DMF（2 mL）中並將二乙胺（83 µL，0.80 mmol）添加至反應混合物中。將所得混合物在室溫攪拌1小時，然後將反應混合物在真空中濃縮。將殘餘物再溶解於DMF（1 mL）中，並且添加2,5-二側氧基吡咯啶-1-基 6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H -吡咯-1-基)己酸酯（32.2 mg，0.104 mmol）和DIPEA（130 µL，0.803 mmol）。將所得混合物攪拌1小時。將所得混合物濃縮至乾並藉由反相HPLC純化，得到標題化合物。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ ppm 0.74 - 0.87 (m, 9 H), 1.06 (s, 3 H), 1.12 - 1.26 (m, 13 H) 1.29 - 1.41 (m, 4 H), 1.42 - 1.52 (m, 7 H), 1.66 - 1.72 (m, 3 H), 1.73 - 1.83 (m, 1 H), 2.05 - 2.12 (m, 2 H), 2.31 - 2.39 (m, 3 H), 2.54 - 2.58 (m, 2 H), 3.28 - 3.30 (m, 3 H), 3.33 - 3.45 (m, 9 H), 3.56 - 3.71 (m, 2 H), 4.16 - 4.21 (m, 1 H), 4.24 - 4.29 (m, 1 H), 4.38 - 4.45 (m, 1 H), 4.47 - 4.51 (m, 1 H), 4.51 - 4.55 (m, 1 H), 4.56 - 4.64 (m, 1 H), 4.75 - 4.93 (m, 3H), 5.02 (s, 2 H), 5.34 - 5.48 (m, 1 H), 5.61 - 5.72 (m, 1 H), 5.79 - 5.92 (m, 1 H), 6.00 - 6.11 (m, 1 H), 6.33 - 6.46 (m, 1 H), 6.99 (s, 2 H), 7.30 (m, 2 H), 7.63 (m, 2 H), 7.97 - 8.04 (m, 1 H), 8.05 - 8.11 (m, 1 H), 8.12 - 8.20 (m, 1 H), 9.56 - 9.73 (m, 1 H)。LC/MS (ESI, m/z), 1222.28 [M+H]+ 。1.10 ADL23-D2
Figure 02_image194
(S)-5-(((S)-1-(((S)-1-((4-(((4-((((2S,3S,6S,7R,10R,E)-7- 乙醯氧基 -10- 羥基 -2-((R,2E,4E)-6- 羥基 -7-((2R,3R)-3-((2R,3S)-3- 羥基戊 -2- 基 ) 環氧乙烷 -2- 基 )-6- 甲基庚 -2,4- 二烯 -2- 基 )-3,7- 二甲基 -12- 側氧基氧雜環十二 -4- 烯 -6- 基 ) 氧基 ) 羰基 ) 哌 𠯤 -1- 羰基 ) 氧基 ) 甲基 ) 苯基 ) 胺基 )-1- 側氧基 -5- 脲基戊 -2- 基 ) 胺基 )-3- 甲基 -1- 側氧基丁 -2- 基 ) 胺基 )-4-(6-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 己醯胺基 )-5- 側氧基戊酸（ ADL23-D2 ）。 向(2S ,3S ,6S ,7R ,10R ,E )-7-乙醯氧基-10-羥基-2-((R ,2E ,4E )-6-羥基-7-((2R ,3R )-3-((2R ,3S )-3-羥基戊-2-基)環氧乙烷-2-基)-6-甲基庚-2,4-二烯-2-基)-3,7-二甲基-12-側氧基氧雜環十二-4-烯-6-基 哌𠯤-1-甲酸酯（20 mg，0.03 mmol）在DMF（1 mL）中的攪拌溶液中添加(S )-4-((((9H -茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-5-(((S )-3-甲基-1-(((S )-1-((4-((((4-硝基苯氧基)羰基)氧基)甲基)苯基)胺基)-1-側氧基-5-脲基戊-2-基)胺基)-1-側氧基丁-2-基)胺基)-5-側氧基戊酸（32.3 mg，0.036 mmol）和DIPEA（16 µL，0.09 mmol）。將反應混合物在室溫攪拌1小時，然後添加二乙胺（155 µL，1.504 mmol）。將所得混合物在20°C再攪拌30 min。將反應混合物用乙酸乙酯稀釋並在真空中濃縮。將所得殘餘物溶解在DMF（1 mL）中，然後添加2,5-二側氧基吡咯啶-1-基-6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己酸酯（14 mg，0.045 mmol）和DIPEA（16 µL，0.09 mmol）。將反應混合物攪拌50 min，然後用乙酸乙酯稀釋（以幫助共沸去除DMF）。將混合物濃縮至乾並使用製備型HPLC純化，得到(S )-5-(((S )-1-(((S )-1-((4-(((4-((((2S ,3S ,6S ,7R ,10R ,E )-7-乙醯氧基-10-羥基-2-((R ,2E ,4E )-6-羥基-7-((2R ,3R )-3-((2R ,3S )-3-羥基戊-2-基)環氧乙烷-2-基)-6-甲基庚-2,4-二烯-2-基)-3,7-二甲基-12-側氧基氧雜環十二-4-烯-6-基)氧基)羰基)哌𠯤-1-羰基)氧基)甲基)苯基)胺基)-1-側氧基-5-脲基戊-2-基)胺基)-3-甲基-1-側氧基丁-2-基)胺基)-4-(6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H -吡咯-1-基)己醯胺基)-5-側氧基戊酸。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ ppm 0.74 - 0.89 (m, 16 H), 1.03 - 1.66 (m, 25 H), 1.69 (s, 4 H), 1.74 - 1.94 (m, 2 H), 2.00 (s, 4 H), 2.09 (br d, 2 H), 2.21 (br d, 3 H), 2.31 - 2.42 (m, 2 H), 2.53 - 2.84 (m, 3 H), 2.89 - 3.09 (m, 2 H), 3.34 - 3.48 (m, 10 H), 3.65 - 3.74 (m, 1 H), 4.19, (dd, 1 H), 4.26 - 4.45 (m, 3 H), 4.57 - 4.64 (m, 1 H), 4.79 - 4.85 (m, 1 H), 4.90 (br d, 2 H), 5.01 (s, 2 H), 5.43 (br s, 2 H), 5.47 - 5.59 (m, 1 H), 5.67 - 5.80 (m, 1 H), 5.81 - 5.93 (m, 1 H), 5.94 - 6.14 (m, 2 H), 6.35 - 6.47 (m, 1 H), 6.99 (s, 2 H), 7.30 (d, 2 H), 7.58, (d, 2 H), 7.63 - 7.71 (m, 1 H), 7.98 - 8.06 (m, 1 H), 8.15 - 8.27 (m, 1 H), 9.99 - 10.09 (m, 1 H)。LC/MS (ESI, m/z), 1393.4 [M+H]+ 。實例 2
如下所述評估用於製備ADC的示例性拼接調製劑有效載荷。2.1    SF3B1 結合 / 閃爍近接測定法（ SPA ）
執行閃爍近接測定法以測量化合物（「有效載荷」）與SF3b複合體之結合親和力。準備抗SF3B1抗體（MBL）在抗小鼠PVT SPA閃爍珠粒（珀金埃爾默公司（PerkinElmer））上的批量固定。對於每2.5 mg核提取物，將5 μg抗SF3B1抗體和1.5 mg珠粒混合在150 μL PBS中。將抗體-珠粒混合物在室溫（RT）孵育30 min並以18,000g 離心5 min。每1.5 mg抗體-珠粒混合物使用150 μL PBS再懸浮。使珠粒懸浮並將其添加至所製備的核提取物中。將漿液在4°C在輕柔混合下孵育2小時。然後藉由以18,000g 離心5 min來收集珠粒，並將其用PBS + 0.1% Triton X-100洗滌兩次。在最後一個離心步驟之後，每1.5 mg珠粒用150 μL PBS懸浮。測試SF3b複合體與如先前所述合成的[3 H]標記的普拉二烯內酯B探針（[3 H]-PB）的結合（Kotake等人 (2007) Nat Chem Biol.[自然化學生物學] 3(9):570-5）。用50 μL珠粒漿液並藉由添加不同濃度的PB或PB-OH製備100 µL結合反應物，且在30 min預孵育之後，添加2.5 nM [3 H]-PB。將該混合物孵育30 min，並使用MicroBeta2板計數器（珀金埃爾默公司）讀取發光信號。使用Prism 7（Graphpad）對數據進行非線性回歸曲線擬合。
對於測試的有效載荷D1和D2，觀察到類似的結合概況（表15）。通常，特異性結合係在低納莫耳範圍內，這表明所測試的有效載荷均為強效SF3b複合體結合劑且為用於ADC中的候選化合物。2.2 體外剪接（ IVS ）
為評估有效載荷在無細胞系統中的活性，執行體外剪接測定。將有效載荷與核提取物和pre-mRNA受質微小基因一起孵育。
HeLa核提取物的製備：使HeLa S3細胞沈澱物再懸浮於低滲緩衝液（10 mM HEPES pH 7.9、1.5 mM MgCl2 、10 mM KCl、0.2 mM PMSF、0.5 mM DTT）中，並使懸浮液達到總計5個紅血球壓積（packed cell volume，PCV）。離心之後，丟棄上清液，並用低滲緩衝液使細胞達到3 PCV且在冰上孵育10 min。使用dounce均質機溶解細胞且隨後進行離心。丟棄上清液，並用½核壓積（packed nuclear volume，PNV）的低鹽緩衝液（20 mM HEPES pH 7.9、1.5 mM MgCl2 、20 mM KCl、0.2 mM EDTA、25%甘油、0.2 mM PMSF、0.5 mM DTT）使沈澱物再懸浮，然後用½ PNV的高鹽緩衝液（除1.4 M KCl之外其餘與低鹽緩衝液相同）使沈澱物再懸浮。將核輕輕地混合30 min，之後進行離心。然後，將上清液（核提取物）透析至存儲緩衝液（20 mM HEPES pH 7.9、100 mM KCl、0.2 mM EDTA、20%甘油、0.2 mM PMSF、0.5 mM DTT）中。使用NanoDrop 8000 UV-Vis分光光度計（賽默飛世爾科學公司（ThermoFisher Scientific））測定蛋白質濃度。
IVS：Ad2.1和Ad2.2係對U2 snRNP具有較強親和力（Ad2.1）和較弱親和力（Ad2.2）的經工程改造的剪接底物，用於IVS測定（Finci等人 (2018) Genes Dev.[基因與發育] 32(3-4):309-320）。使用5' EcoRI和3' XbaI限制位點將所有Ad2源性序列（Pellizzoni等人 (1998) Cell [細胞] 95(5):615-24）選殖至pcDNA3.1(+)運載體（普洛麥格公司（Promega））中。使用XbaI使質體線性化並將該等質體用作體外轉錄反應中的DNA模板。使用EcoRI使Ftz∆i無內含子質體（Luo和Reed (1999) 96(26):14937-42）線性化。使所有RNA進行體外轉錄，然後分別使用MEGAScript T7（英傑公司（Invitrogen））和MegaClear（英傑公司）套組純化。對於使用Ad2變體pre-mRNA進行的剪接反應，使用由HeLa S3、2 ng pre-mRNA、0.2 ng FTZ∆i以及變化濃度的化合物或DMSO製備的8 µg核提取物來製備1 µL反應物。在30°C預孵育15 min之後，添加1 µL剪接活化緩衝液（0.5 mM ATP、20 mM磷酸肌酸、1.6 mM MgCl2 ），並將反應物在30°C孵育90 min。然後，將反應用13 µL DMSO淬滅，並使用25 nL以進行RT-qPCR。使用以下準備RT-qPCR反應：TaqMan RNA-to-CT 1步套組（生命技術公司（Life Technologies））、來自剪接反應的RNA、Ad2（正向：ACTCTCTTCCGCATCGCTGT（SEQ ID NO: 128）；反向：CCGACGGGTTTCCGATCCAA（SEQ ID NO: 129）；探針：CTGTTGGGCTCGCGGTTG（SEQ ID NO: 130））和Ftz（正向：TGGCATCAGATTGCAAAGAC（SEQ ID NO: 131）；反向：ACGCCGGGTGATGTATCTAT（SEQ ID NO: 132）；探針：CGAAACGCACCCGTCAGACG（SEQ ID NO: 133））mRNA引物-探針組。使用Prism 7（Graphpad）對所形成的剪接產物進行非線性回歸曲線擬合併相對於對照（DMSO）樣本歸一化。
測試的有效載荷D1和D2均調節Ad2.2 pre-mRNA的剪接（表15）。通常，在有效載荷存在下，觀測到剪接產物的量減少。2.3 細胞活力
將NCI-H929（美國菌種中心（American Type Culture Collection，ATCC））多發性骨髓瘤細胞以2000個細胞/孔鋪板於平底96孔組織培養板（康寧公司（Corning））中的補充有10%胎牛血清的90 μL總體積的組織培養基（賽默飛世爾科學公司）中。用200 nM至0.03 nM的3倍連續稀釋的化合物處理細胞。一式三份測試各濃度。在處理時，根據製造商的建議（普洛麥格；#G9241），使用CellTiter-Glo® 2.0發光細胞活力測定法來評估具有未經處理的細胞的板。將CellTiter-Glo® 2.0試劑添加至培養基中，孵育，並在EnVision多標記讀取器（珀金埃爾默公司）上進行測定。值表示零時間（T0）。還使用CellTiter-Glo® 2.0發光細胞活力測定法測定化合物處理144小時（T144）之後的活細胞的數目。使用零時間（T0）的發光值、DMSO對照生長（C）以及在化合物存在下的測試生長（T144），計算在各種化合物濃度水平下的生長百分比。生長抑制百分比計算如下：對於T144≥T0的濃度，[(T144-T0)/(C-T0)] x 100；或對於T144＜T0的濃度，[(T144-T0)/T0] x 100。使用Prism 7（Graphpad）生成劑量反應曲線圖並使用非線性回歸分析和log（抑制劑）相對於反應-可變斜率（四個參數）進行擬合。
在表現BCMA的細胞系（包括NCI-H929、MM1.S、MM1.R和OPM2多發性骨髓瘤細胞）中確定了經測試的有效載荷的細胞活力劑量反應。D1和D2均表現出在兩位數納莫耳範圍內的GI50 值（即，導致細胞增殖減少50%的化合物濃度）（表15），這通常與滲透性數據一致。示例性滲透性數據在下文描述並示於表15中。2.4 Caco-2 滲透性
將Caco-2細胞在37°C、95%濕度、5% CO2 下在transwell 24孔板中培養21天。藉由TEER（經上皮電阻）和螢光黃確認細胞單層的完整性。將10 µM有效載荷以一式兩份分別摻加於細胞單層的兩側上。藉由在處理（t=0）之後以及孵育2小時之後立即自兩個隔室取樣等分試樣來測定自頂部至底外側（A-B）方向以及自底外側至頂部（B-A）方向的滲透速率。用含內標的有機溶劑使樣本中的蛋白質沈澱並藉由LC-MS/MS（SCIEX；API 5500）進行分析。使用在兩個方向上隨時間推移的有效載荷/內標的面積比反應來生成滲透性（cm/sec）值。藉由B-A/A-B相除來計算流出比。對照化合物的低滲透性和高滲透性以及流出表現正如預期。D1和D2的滲透性值示於表15中。2.5 化學穩定性
在Mcilvane（檸檬酸鹽-磷酸鹽）緩衝液（pH 5.5，終濃度為20 μM（低於儲備溶液中的0.5% DMSO））（波士頓生物製品公司（Boston Bioproducts）；#BB-2466）中孵育有效載荷。將有效載荷溶液和內標吸移到96孔板中，在UPLC（Waters Aquity H類別）上運行，並分析初始層析信號（t=0）。柱為Waters UPLC HSS T3 1.8 μm 2.1 x 50 mm柱（#186003538）。採用經1 min從95%至10%的流動相A梯度，其中A為在水中的0.1%甲酸，流動相B為在乙腈中的0.1%甲酸（流速0.9 mL/min）。在37°C，將有效載荷溶液的其餘部分保持在板振盪器（Eppendorf ThermoMixer）中。在37°C孵育後24小時、72小時和96小時，重複藉由UPLC進行的樣本分析。測定在以下三個時間點的有效載荷和內標的面積比反應：時間0、第1天、以及第3天或第4天。時間0設定成100。比較稍後時間點與時間0的面積比反應。殘餘物百分比計算如下：(第X天的面積比 / 時間0的面積比)*100 = %殘餘物。在比較殘餘物%的對數與時間點的Excel中計算直線斜率。在Excel中藉由ln(2)/斜率計算半衰期且示於表15中。[ 表 15]. 示例性 ADC 有效載荷的生物化學 / 物理化學表徵
測定 有效載荷
D1 D2
SPA IC50 （ nM ） 21.3 12.6
qPCR-IVS HELA Ad2.1 IC50 （ nM ） 16.5 27.3
qPCR-IVS HELA Ad2.2 IC50 （ nM ） 25 118.9
CTGlo 平均 GI50 MM1.S 96 h （ nM ） 37.08 1.69
CTGlo 平均 LD50 MM1.S 96 h （ nM ） 98.2 7.74
CTGlo 平均 GI50 MM1.R 96 h （ nM ） 146.9 7.59
CTGlo 平均 LD50 MM1.R 96 h （ nM ） 510.8 21.4
CTGlo 平均 GI50 OPM2 96 h （ nM ） 287.4 1.69
CTGlo 平均 LD50 OPM2 96 h （ nM ） 67.1 7.74
CTGlo 平均 GI50 H929 96 h （ nM ） 75.5 ND
CTGlo 平均 LD50 H929 96 h （ nM ） 201 ND
CTGlo 平均 GI50 MOLP8 96 h （ nM ） ND 1.15
CTGlo 平均 LD50 MOLP8 96 h （ nM ） ND 12.99
滲透性；平均值； Caco-2 A-B Perm （ 10e-6 cm/s ） 0.2 0.94
滲透性；平均值； Caco-2 B-A Perm （ 10e-6 cm/s ） 0.3 0.1
滲透性；平均值； Caco-2 流出率 1.5 9.4
穩定性；平均值； Perm PAMPA （ 10e-6 cm/s ） ＜0.1 ＜0.1
穩定性 % ；平均值； t1/2 pH 5.5 1 4
ND = 無數據；SPA = 閃爍近接測定法；qPCR-IVS = 體外剪接測定，qPCR讀數；CTGlo = CellTiter-Glo®細胞活力測定。實例 3
如下所述進行用於鑒定人源化抗BCMA抗體的誘變篩選。3.1 篩選概述
使用結合機器學習和實驗設計（DOE）技術的迭代方法，生成了AB200抗體選殖的各種重鏈和輕鏈變體。AB200描述於例如美國專利號9,273,141中，將其藉由引用併入本文。示例性AB200序列還提供在表9中。該篩選使用Fab片段而不是全長IgG1抗體，並且分三輪進行（第0、1和2輪）。3.1.1 第 0 輪
在最初的篩選輪（第0輪）中，篩選胺基酸以替換AB200重鏈中Kabat位置99（絕對位置103）處的天冬胺酸（D）。在Kabat位置99處進行了六個單獨的天冬胺酸突變，並將其與AB200的非突變輕鏈Fab片段配對。
藉由Octet測定法（ForteBio）測定每個突變殖株對人和猴BCMA的細胞外結構域之結合親和力。生成裝載有人或恒河猴BCMA的細胞外結構域的胺反應性第2代（AR2G）吸頭（胺基連接的），並將其在每個抗體殖株（所有殖株均為Fab形式）的200 nM溶液中孵育。經600秒（每個階段300秒）測定配位基締合和解離。對於在第1輪和第2輪篩選中鑒定的所有後續殖株，使用相同的Octet測定條件評估BCMA結合親和力。
第0輪的結果匯總在表16和表17中。分析AB200_Fab（D99D）殖株以提供用於評估每個取代對BCMA結合親和力的影響的基準。
D99N變體（在Kabat位置99/絕對位置103處帶有天冬醯胺（N））顯示出對人和猴BCMA的最強結合。不希望受理論束縛，一些天冬醯胺會脫醯胺，這可能導致藥物產品的化學、製造和控制（CMC）挑戰和/或增加的異質性。此外，已經證明位於CDR內的天冬醯胺的脫醯胺可能對抗原結合產生負面影響，例如降低抗原結合。因此評估了另外的變體。
D99H變體（在Kabat位置99/絕對位置103處帶有組胺酸（H））顯示出比D99D參考殖株提高的結合親和力，以及對人和猴BCMA的高結合親和力。選擇該變體用於另幾輪誘變。[ 表 16]. BCMA （人）的結合動力學
殖株 ID Kon （ nM-1 s-1 ） +/- SEM Koff （ s-1 ） +/- SEM Kd （ nM ） +/- SEM
                    
AB200_Fab （ D99D ） 0.00017 1.97E-06 0.00058 2.32E-06 3.45 0.05
AB200_Fab+D99N 0.00019 2.06E-06 0.00023 3.33E-06 1.23 0.00
AB200_Fab+D99S 0.00011 1.44E-06 0.00044 8.08E-06 3.86 0.02
AB200_Fab+D99T 0.00008 6.43E-07 0.00030 9.46E-06 3.72 0.09
AB200_Fab+D99E 0.00015 2.17E-06 0.00091 4.34E-06 5.92 0.06
AB200_Fab+D99H 0.00018 2.49E-06 0.00037 1.30E-05 2.08 0.10
AB200_Fab+D99Q 0.00017 1.02E-05 0.00053 8.52E-06 3.06 0.13
[ 表 17]. BCMA （恒河猴）的結合動力學
殖株 ID Kon （ nM-1 s-1 ） +/- SEM Koff （ s-1 ） +/- SEM Kd （ nM ） +/- SEM
                    
AB200_Fab （ D99D ） 0.0002 3.33E-06 0.00118 1.75E-06 5.89 0.11
AB200_Fab+D99N 0.0002 1.85E-06 0.00066 9.77E-06 3.32 0.02
AB200_Fab+D99S 0.00012 8.83E-07 0.00114 1.73E-05 9.75 0.07
AB200_Fab+D99T 0.00009 1.65E-06 0.00099 3.59E-06 11.5 0.18
AB200_Fab+D99E 0.00016 2.96E-06 0.00219 1.83E-05 13.61 0.14
AB200_Fab+D99H 0.00018 3.64E-06 0.00105 1.16E-05 5.7 0.05
AB200_Fab+D99Q 0.00018 2.12E-06 0.0014 1.65E-05 7.63 0
3.1.2 第 1 輪
在下一輪篩選（第1輪）中，AB200_Fab（D99H）重鏈片段與39個含有CDR突變的獨特κ輕鏈配對。對於所有對，藉由Octet測定法（ForteBio）測定對人和猴BCMA的細胞外結構域的結合親和力，並且使用ThermoFluor測定法評估熱穩定性（Tm ）（表38）。在所測試的殖株中，AB200 κ變體6（AB200-R1a-Fab_Vk6）與人和猴BCMA的結合親和力最高（分別為1.11和4.261 nM），並以比AB200_Fab（D99H）親本殖株更高的親和力結合（對於人和猴，分別為2.08和5.7 nM）。
接下來，設計、表現AB200_D99H_Fab的在CDR中含有突變的60個獨特重鏈變體，將其與AB200_Vk6_Fab配對並篩選BCMA結合和熱穩定性（表39）。AB200-R1a-Fab_VH26和 AB200-R1a-Fab_VH32均以高親和力與人和猴BCMA結合：對於人和猴，分別為AB200-R1a-Fab_VH26（0.926和2.311 nM）和AB200-R1a-Fab_VH32（1.088和4.169 nM）。3.1.3 第 2 輪
在最後一輪篩選（第2輪）中，使48個輕鏈變體（R2Vk1-R2Vk48）與第1輪重鏈AB200-R1a-Fab_VH26配對，並且除了其中一個輕鏈變體（R2Vk1-R2Vk47）以外，所以輕鏈變體均與第1輪重鏈AB200-R1a-Fab_VH32配對。評估了對人和猴BCMA的熱穩定性和結合親和力（表40和41）。
還創建了具有88個重鏈變體的文庫，該文庫的子集與來自第2輪篩選的五個輕鏈配對（表42-46），總結如下： •  AB200-(2Vk30) + 19個第2輪重鏈變體 •  AB200-(2Vk31) + 25個第2輪重鏈變體 •  AB200-(2Vk8) + 8個第2輪重鏈變體 •  AB200-(2Vk35) + 19個第2輪重鏈變體 •  AB200-(2Vk44) + 19個第2輪重鏈變體
基於幾個參數，如相對於AB200參考抗體殖株的改進的特性（例如，對人BCMA的結合親和力提高、對人與猴BCMA的結合親和力相似、和/或改進的熱穩定性），選擇重鏈和輕鏈變體的六種組合以轉化為全長IgG1抗體並進行表現放大（AB212、AB213、AB214、AB216、AB217和AB218）。基於從單個重鏈和輕鏈的數據外推而選擇了第七種組合（AB215）。經選擇的殖株的數據示於表18中。[ 表 18]. 經選擇的殖株
殖株 ID-1 殖株 ID-2 Kd hsBCMA （ nM ） Kd RhBCMA （ nM ） Tm （ °C ）  
AB212 AB200_VH2-20_VK2-31 38.64 79.29 81.2  
 
AB213 AB200_VH2-03_VK2-31 2.70 5.03 85.9  
 
AB214 AB200_VH2-37_VK2-30 1.14 6.33 81.9  
 
AB215 AB200_VH2-03_VK2-30 ND ND ND  
 
AB216 AB200_VH2-75_VK2-44 1.07 5.53 78.4  
 
AB217 AB200_VH2-06_VK2-35 1.66 9.60 78.0  
 
AB218 AB200_VH2-27_VK2-31 6.43 13.95 86.0  
 
ND = 無數據；hsBCMA = 人BCMA；RhBCMA = 恒河猴BCMA
實例 4
將實例1和2中所述之有效載荷經由抗體上的半胱胺酸殘基軛合至示例性抗BCMA抗體（參見下文第4.2節）。下文描述了示例性抗BCMA ADC的製備和評估。4.1 抗體
使用抗BCMA抗體AB212、AB213、AB214、AB215、AB216、AB217和AB218來製備抗BCMA ADC。ADC在本文中也可稱為負載剪接調節劑的抗體（SMLA）。4.2 生物軛合
將PBS緩衝液（pH 7.0）中的10 mg/mL的每種抗體與5 mM TCEP（2-4莫耳當量）（賽默飛世爾科學公司；#77720）混合以使鏈間二硫鍵斷裂。將反應物在22°C輕輕地混合3小時。然後添加8-12莫耳當量的連接子-有效載荷（在DMSO中的6 mM儲備液），並使液充分地混合。將反應物置於在22°C孵育箱中的旋轉盤上。在2小時的軛合之後，將反應混合物藉由AKTA GE M150（HiTrapTM 26/10脫鹽柱；40 kDa，10 mL）（GE醫療生物科學集團（GE Healthcare Bio-Sciences））純化以將未軛合的有效載荷移至20 mM組胺酸/乙酸緩衝液（pH 6.0）中。將所得軛合物經由Amicon超濾器（30 kDa，Ultra-4）（EMD Millipore公司）濃縮，並且經由0.22 μm PVDF一次性過濾器（EMD Millipore公司）進行無菌過濾。藉由UV-VIS測量最終的澄清溶液，以根據Beer-Lambert定律（A=E *c *l）和以下公式測定抗體濃度（[mAb]；mol/L）和經軛合的有效載荷的濃度（[LD]；mol/L）： A280nm =E mAb 280nm * [mAb] * l+E LD 280nm * [LD] * l A252nm =E mAb 252nm * [mAb] * l+E LD 252nm * [LD] * l[ 表 19].EmAb 280nm 值
mAb EmAb 280nm （ cm-1 M-1 ）
AB212 220420
AB213 223400
AB214 229360
AB215 226380
AB216 229360
AB217 229360
AB218 223400
ELD 280nm = 800 cm-1 M-1 ELD 252nm = 31,000 cm-1 M-1 縮寫：c - 莫耳濃度；l -光路長度（Nanodrop：0.1 cm）；E - 莫耳消光係數；A - 吸光度。4.3 生物物理學表徵
分別藉由液相層析-質譜法（LC/MS）、尺寸排阻層析法（SEC）和反相高效液相層析法（HPLC）分析示例性抗BCMA ADC的藥物與抗體比率（DAR）、聚集百分比和未軛合的有效載荷的百分比。通常，經測試的ADC含有少於2%的游離藥物且含有少於10%的聚集物。4.3.1 LC/MS 分析 - DAR
使用與Agilent G6224A精確質量TOF質譜儀連接的Agilent 1290 UPLC系統執行LC/MS分析。在37°C，用PNGase F（新英格蘭實驗室（New England Biolabs）；#P0705L）使每種軛合物脫糖基化4小時，用8 M Gdn-HCl（西格瑪公司（Sigma）；#G9284）使其變性，並且使用DTT（5 mM的終濃度）（普洛麥格公司；#V3151）將其分成輕鏈和重鏈結構域。將所製備的樣本注射至Agilent PLRP-S柱（2.1 x 150 mm，8 µm）上並在室溫（RT）用經28 min從25% B至50% B的梯度進行洗脫。流動相A為具有0.05% TFA的水，流動相B為具有0.04% TFA的乙腈，且流速為1 mL/min。由解卷積的質譜，藉由對關於輕鏈（L0或L1）和重鏈（H0、H1、H2和H3）的未軛合峰和藥物軛合峰的強度求加權平均值來計算DAR。使用以下公式計算完整軛合物的總DAR：(DARLC *2) + (DARHC *2) = 總DAR。示例性抗BCMA ADC的DAR值示於表20中。4.3.2 SEC 分析 - 聚集
使用TOSON-G3000SWXL（#008541）柱，在具有0.25 mM氯化鉀和15%（v/v）IPA的0.2 M磷酸鉀（pH 7）中以0.75 mL/min的流速執行尺寸排阻層析法。藉由曲線下面積積分測定高分子量單體軛合物組分在280 nm處的峰面積吸光度。示例性抗BCMA ADC的單體百分比示於表20中。4.3.3 HPLC 分析 - 游離藥物
用10體積乙腈使軛合物在冰上沈澱2小時並短暫離心。然後，將含有殘餘未軛合的有效載荷的上清液注射至Agilent Poroshell 120 SB-C18 120A柱（4.6 x 100 mm，2.7 µm）上，並在RT用經10 min從45% B至70% B的梯度進行洗脫。流動相A為100%水，流動相B為100%乙腈，且流速為0.6 mL/min，在252 nm處檢測。經由UV檢測來定量殘留的游離藥物的量，並與未軛合的連接子-有效載荷的外標曲線相比較。示例性抗BCMA ADC的游離藥物百分比示於表20中。[ 表 20]. 示例性抗 BCMA ADC 的生物物理學表徵
SMLA 批次 ID 抗體 樣本 連接子 DAR 濃度 （ mg/mL ） 外毒素 游離藥物（ % ） 單體百分比
AB200ADL1-D2-04 AB200 D2-01 ADL1-01 4.25 3.04         
AB200-ADL1-D1-03 AB200 D1-01 ADL1-01 3.98 4.73 ＜0.106 ＜0.20 98.58
AB216-ADL1-D1-02 AB216-01 D1-01 ADL1-01 7.69 5.65 ＜0.088 0.13 99
AB216-ADL1-D1-01 AB216-01 D1-01 ADL1-01 4.87 4.67 ＜0.16 ＜0.25 99.20
AB216-ADL1-D1-04 AB216-02 D1-01 ADL1-01 4.01 5.22 0.11 0.18 97.06
AB215-ADL1-D2-03 AB215-01 D2-02 ADL1-01 7.91 4.05 ＜0.12 0.95 99.07
AB216-ADL1-D2-02 AB216-01 D2-02 ADL1-01 3.8 4.91 0.102 1.63 99.11
AB214-ADL21-D2-01 AB214-01 D2-02 ADL21-01 4.0 0.76 ND ND 99
AB217-ADL1-D2-02 AB217-01 D2-02 ADL1-01 3.7 4.25 0.12 0.5 97.88
AB218-ADL1-D2-02 AB218-01 D2-02 ADL1-01 3.77 4.68 0.13 0.26 99.9
AB214-ADL1-D2-02 AB214-01 D2-02 ADL1-01 4.12 3.94 0.127 0.5 100
AB212-ADL1-D1-02 AB212-02 D1-01 ADL1-01 3.92 4.8 ＜0.28 0.51 99.16
AB215-ADL21-D2-03 AB215-01 D2-01 ADL21-01 4.04 4.31 ＜0.116 0.29 99.32
AB216-ADL1-D2-03 AB216-01 D2-02 ADL1-01 3.93 4.17 ＜0.17 0.76 99.11
AB213-ADL1-D2-02 AB213-01 D2-02 ADL1-01 4.18 4.66 0.107 0.0 99
AB215-ADL1-D2-02 AB215-01 D2-02 ADL1-01 3.96 3.97 0.126 0.35 99.13
AB212-ADL1-D2-02 AB212-01 D2-02 ADL1-01 5.17 4.79 0.104 2.1 100
AB212-ADL1-D1-04 AB212-02 D1-01 ADL1-01 3.84 4.0 ND 3.87 100
AB212-ADL1-D2-03 AB212-01 D2-01 ADL1-01 4.08 4.64 0.003 0.14 99.58
AB212-ADL1-D1-05 AB212-04 D1-01 ADL1-01 3.99 4.99 0.13 0.23 98.24
AB216-ADL21-D1-01 AB216-01 D1-01 ADL21-01 4.38 5.63 ND ND 97.7
AB216-ADL21-D2-01 AB216-01 D2-01 ADL21-01 4.54 4.62 0.11 0.19 99.33
AB216-ADL1-D2-04 AB216-01 D2-02 ADL1-01 7.83 4.66 0.11 1.40 98.19
AB215-ADL1-D1-01 AB215-01 D1-01 ADL1-01 2.84 1.55 ND ND ND
AB214-ADL1-D1-02 AB214-01 D1-01 ADL1-01 3.91 4.9 0.29 0.41 97.99
AB214-ADL1-D1-01 AB214-01 D1-01 ADL1-01 4 0.96 ND ND 97.7
AB212-ADL1-D1-03 AB212-02 D1-01 ADL1-01 7.86 3.89 0.32 0.14 97.71
ND = 無數據。4.4 加速穩定性測試
將示例性抗BCMA ADC（在微量離心管中各自約1 mg，約4-5 mg/mL）離心並藉由280 nm下的UV吸光度（NanoDrop）測量以測定蛋白質濃度。然後，將樣本在37°C水浴中孵育並在以下四個時間點取樣：0（新鮮製備時）、1天、2天和4天。將在不同時間點獲取的樣本在-80°C儲存，直至完成最後一次取樣。在22°C解凍之後，用SEC和疏水相互作用層析法（HIC）分析樣本以定量抗體聚集和DAR。在四個時間點的示例性抗BCMA ADC的聚集百分比、濃度和DAR值示於表21中。[ 表 21]. 示例性抗 BCMA ADC 的加速穩定性測試
SMLA 批次 ID 存儲緩衝液 在 37°C 的天數 聚集（ % ） 濃度 （ mg/mL ） DAR （ HIC ）
AB214-ADL1-D2-06 20 mM組胺酸/HOAc pH 6.0 0 d 1.13% 4.35 3.90
1 d 1.57% 4.45 3.89
2d 1.71% 4.53 3.85
4d 3.39% 4.55 3.87
AB214-ADL1-D1-01 20 mM組胺酸/HOAc pH 6.0 0d 1.32% 4.87 3.89
1d 1.39% 4.93 3.92
2d 1.41% 4.93 3.92
4d 3.59% 5.06 3.92
AB212-ADL1-D2-03 20 mM組胺酸/HOAc pH 6.0 0d 1.06% 3.92 4.05
1d 1.42% 3.93 4.04
2d 1.56% 4.00 4.06
4d 4.48% 3.68 4.06
AB212-ADL1-D1-02 20 mM組胺酸/HOAc pH 6.0 0d 1.10% 4.97 3.90
1d 1.24% 5.02 3.90
2d 1.26% 5.02 3.90
4d 4.82% 4.47 3.87
AB216-ADL1-D2-03 20 mM組胺酸/HOAc pH 6.0 0d 0.87% 4.12 3.91
1d 0.92% 4.15 3.92
2d 1.17% 4.14 3.88
4d 1.92% 4.18 3.92
AB216-ADL1-D2-04    20 mM組胺酸/HOAc pH 6.0 0d 1.61% 4.65 7.88
1d 2.83% 4.67 7.86
2d 3.81% 4.70 7.86
4d 6.72% 4.88 7.83
AB212-ADL1-D1-03 20 mM組胺酸/HOAc pH 6.0 0d 4.58% 3.87 7.81
1d 5.02% 3.90 7.87
2d 5.82% 4.04 7.81
4d 10.13% 3.77 7.78
AB212-ADL1-D2-02 20 mM組胺酸/HOAc pH 6.0 0d 1.10% 4.96 5.19
1d 1.52% 4.85 5.24
2d 1.83% 4.95 5.19
4d 1.62% 5.01 5.21
AB213-ADL1-D2-02 20 mM組胺酸/HOAc pH 6.0 0d 0.72% 4.73 4.20
1d 2.02% 4.56 4.20
2d 1.71% 4.61 4.29
4d 1.98% 4.81 4.40
AB214-ADL1-D2-02 20 mM組胺酸/HOAc pH 6.0 0d 0.58% 4.58 4.30
1d 0.87% 4.48 4.30
2d 1.18% 4.53 4.26
4d 1.01% 4.70 4.61
AB215-ADL1-D2-02 20 mM組胺酸/HOAc pH 6.0 0d 1.25% 5.28 4.80
1d 1.72% 4.99 4.74
2d 1.59% 5.21 4.77
4d 2.14% 5.69 5.01
AB216-ADL1-D2-02 20 mM組胺酸/HOAc pH 6.0 0d 0.65% 4.92 3.81
1d 0.92% 4.52 3.82
2d 1.60% 5.56 3.81
4d 2.73% 5.31 3.84
AB217-ADL1-D2-02 20 mM組胺酸/HOAc pH 6.0 0d 1.91% 4.24 3.78
1d 2.20% 4.18 3.77
2d 2.22% 4.21 3.71
4d 2.46% 4.47 3.75
AB218-ADL1-D2-02 20 mM組胺酸/HOAc pH 6.0 0d 0.39% 4.86 3.75
1d 0.60% 5.26 3.71
2d 0.95% 5.39 3.72
4d 1.71% 5.09 3.71
AB215-ADL1-D2-03 20 mM組胺酸/HOAc pH 6.0 0d 0.93% 3.95 NA
1d 1.61% 3.96 NA
2d 2.20% 4.01 NA
4d 4.64% 4.09 NA
AB215-ADL21-D2-03 20 mM組胺酸/HOAc pH 6.0 0d 0.74% 4.27 NA
1d 0.82% 4.29 NA
2d 0.93% 4.31 NA
4d 1.09% 4.40 NA
AB216-ADL21-D2-01 20 mM組胺酸/HOAc pH 6.0 0d 0.23% 5.74 4.60
1d 0.72% 5.58 4.62
2d 0.91% 6.95 4.60
4d 0.94% 6.01 4.64
AB216-ADL1-D1-01 20 mM組胺酸/HOAc pH 6.0 0d 1.09% 4.93 4.88
1d 0.67% 4.95 4.91
2d 0.94% 4.95 4.93
4d 1.03% 5.06 4.94
AB216-ADL1-D1-02 20 mM組胺酸/HOAc pH 6.0 0d 2.12% 5.53 7.75
1d 2.59% 5.58 7.72
2d 3.49% 5.57 7.75
4d 5.26% 4.48 7.70
AB214-ADL1-D2-06 20 mM組胺酸/HOAc pH 6.0 0d 1.13% 4.35 3.90
1d 1.57% 4.45 3.89
2d 1.71% 4.53 3.85
4d 3.39% 4.55 3.87
AB214-ADL1-D1-02 20 mM組胺酸/HOAc pH 6.0 0d 1.32% 4.87 3.89
1d 1.39% 4.93 3.92
2d 1.41% 4.93 3.92
4d 3.59% 5.06 3.92
AB212-ADL1-D2-03 20 mM組胺酸/HOAc pH 6.0 0d 1.06% 3.92 4.05
1d 1.42% 3.93 4.04
2d 1.56% 4.00 4.06
4d 4.48% 3.68 4.06
AB212-ADL1-D1-02    20 mM組胺酸/HOAc pH 6.0 0d 1.10% 4.97 3.90
1d 1.24% 5.02 3.90
2d 1.26% 5.02 3.90
4 d 4.82% 4.47 3.87
AB216-ADL1-D2-03 20 mM組胺酸/HOAc pH 6.0 0d 0.87% 4.12 3.91
1d 0.92% 4.15 3.92
2d 1.17% 4.14 3.88
4d 1.92% 4.18 3.92
AB216-ADL1-D2-04 20 mM組胺酸/HOAc pH 6.0 0d 1.61% 4.65 7.88
1d 2.83% 4.67 7.86
2d 3.81% 4.70 7.86
4d 6.72% 4.88 7.83
AB212-ADL1-D1-03 20 mM組胺酸/HOAc pH 6.0 0d 4.58% 3.87 7.81
1d 5.02% 3.90 7.87
2d 5.82% 4.04 7.81
4d 10.13% 3.77 7.78
AB216-ADL1-D1-04 20 mM組胺酸/HOAc pH 6.0 0d 3.87 5.25 3.93
1d 3.91 5.27 3.96
2d 4.43 5.25 3.91
4d 7.38 5.29 3.97
AB212-ADL1-D1-05 20 mM組胺酸/HOAc pH 6.0 0d 1.55% 4.81 3.96
1d 1.63% 4.89 3.96
2d 1.75% 4.92 3.96
4d 3.00% 5.13 3.96
4.5 結合表徵 抗體
方法：為了評估示例性抗BCMA抗體與人細胞的結合，對在細胞表面表現低、中等或高水平BCMA的細胞系進行了劑量反應結合實驗。使NCI-H929（BCMA高 ）、OPM2（BCMA中 ）和Raji（BCMA低 ）細胞在ATCC建議的培養條件下生長，收集在無菌層流罩中，以1200 rpm沈澱5 min並傾析出上清液。將沈澱物重懸浮在流動式細胞測量術緩衝液（含2%（v/v）FBS的1X PBS）中，使其密度達到約5.56 x 104 個細胞/mL，並將90 µL細胞懸浮液添加至96孔板的每個孔中。將抗體或同種型對照添加至適當的孔中至終體積為10 µL，並在4°C在黑暗中孵育1-2小時。初次孵育後，將細胞以1200 rpm離心5 min，並除去上清液。將細胞沈澱物藉由重懸浮在150 µL流動式細胞測量術緩衝液中而洗滌三次，以1200 rpm離心5 min，並傾析出上清液。最後一次洗滌後，將細胞重懸浮在流動式細胞測量術緩衝液中，並與螢光標記的抗人IgG1第二抗體在冰上在黑暗中一起孵育40-60 min。然後，將細胞以1200 rpm離心5 min，並完全像以前一樣洗滌沈澱物。在傾析出最終洗滌溶液後，將細胞重懸浮在流動式細胞測量術緩衝液中至最終密度為2 x 104 至5 x 104 個細胞/mL，並在BD LSRFortessa儀（BD公司（Becton-Dickinson））上進行分析。
結果：所有七個示例性抗體殖株（AB212-AB218）都以濃度依賴性方式結合每個細胞系（圖 1-3 ；表22-24）。藉由流動式細胞測量術確定結合每種細胞系的表觀Kd ，將該等數據在Prism（v8.0）中繪圖，並且應用「一個位點-總計」曲線擬合方程。AB200抗體顯示為參考，並作為細胞結合的陽性對照包括在內。
對於每種測試的細胞系，中值螢光強度（MFI）值隨著抗體濃度的增加而增加，並且每種細胞系的最大MFI值與BCMA表現水平相關。藉由非線性曲線擬合計算所有抗體的平衡解離常數（Kd ）並匯總在表22-24中。對於所有三種細胞系，抗BCMA抗體的結合親和力的排序係相似的，AB212和AB218分別顯示出最弱和最強的結合。[ 表 22]. 抗 BCMA 抗體結合親和力 - NCI-H929
抗體殖株 ID 表觀結合親和力（ Kd ， nM ） 95% CI （輪廓似然）
AB200 50.54 40.09至64.53
AB212 9.682 8.855至10.59
AB213 4.258 3.573至5.070
AB214 2.84 2.331至3.455
AB215 8.065 5.960至10.91
AB216 3.048 2.686至3.458
AB217 3.384 2.933至3.902
AB218 0.9872 0.7403至1.312
[ 表 23]. 抗 BCMA 抗體結合親和力 - OPM2
抗體殖株 ID 表觀結合親和力（ Kd ， nM ） 95% CI （輪廓似然）
AB200 10.04 6.915至14.51
AB212 4.326 3.530至5.298
AB213 1.955 1.391至2.732
AB214 2.118 1.791至2.502
AB215 3.627 2.943至4.464
AB216 2.267 1.863至2.757
AB217 2.332 2.007至2.708
AB218 0.6874 0.4578至1.031
[ 表 24]. 抗 BCMA 抗體結合親和力 - Raji
抗體殖株 ID 表觀結合親和力（ Kd ， nM ） 95% CI （輪廓似然）
AB200 13.97 12.06至16.21
AB212 15.99 13.17至19.46
AB213 8.828 8.107至9.613
AB214 5.658 4.637至6.903
AB215 11.22 10.37至12.14
AB216 6.435 5.077至8.155
AB217 7.307 6.194至8.619
AB218 2.147 1.648至2.797
ADC
方法：使NCI-H929（BCMA高 ）細胞在ATCC建議的培養條件下生長，收集在無菌層流罩中，以1200 rpm沈澱5 min並傾析出上清液。將沈澱物重懸浮在流動式細胞測量術緩衝液（含2%（v/v）FBS的1X PBS）中，使其密度達到約5.56 x 104 個細胞/mL，並將90 µL細胞懸浮液添加至96孔板的每個孔中。將ADC或同種型對照抗體添加至適當的孔中至終體積為10 µL，並在4°C在黑暗中孵育1-2小時。初次孵育後，將細胞以1200 rpm離心5 min，並除去上清液。將細胞沈澱物藉由重懸浮在150 µL流動式細胞測量術緩衝液中而洗滌三次，以1200 rpm離心5 min，並傾析出上清液。最後一次洗滌後，將細胞重懸浮在流動式細胞測量術緩衝液中，並與螢光標記的抗人IgG1第二抗體在冰上在黑暗中一起孵育40-60 min。然後，將細胞以1200 rpm離心5 min，並完全像以前一樣洗滌沈澱物。在傾析出最終洗滌溶液後，將細胞重懸浮在流動式細胞測量術緩衝液中至最終密度為2 x 104 至5 x 104 個細胞/mL，並在BD LSRFortessa儀（BD公司（Becton-Dickinson））上進行分析。
結果：為了評估連接子-有效載荷軛合是否改變了抗BCMA抗體結合表現BCMA的細胞的能力，生產了針對之前論述過的七個示例性抗體殖株（AB212-AB218）中的每個的、具有ADL1-D2連接子-有效載荷的ADC（平均DAR約為4），並且對每個ADC都進行流動式細胞測量術以量化與NCI-H929人骨髓瘤細胞系的結合。包括基於AB200參考抗體的四種額外軛合物，以探索各種連接子-有效載荷組合對細胞結合的影響。所有四種AB200軛合物（三種剪接調節劑ADC和一種具有mcMMAF連接子-有效載荷的ADC）均以6-10 nM的平衡解離常數與NCI-H929細胞結合（圖 4 ；表25）。摻有ADL1-D2連接子-有效載荷的AB200 ADC的以約9.7 nM的Kd 進行結合（參見下表25）。ADC包含與七個抗體殖株中的每一個軛合的相同連接子-有效載荷（ADL1-D2），其親和力比AB200 ADC更高，其中親和力最弱和最強的ADC的Kd 值分別為約1.3 nM和約0.33 nM。[ 表 25]. 抗 BCMA ADC 結合親和力 - NCI-H929
測試物品 藥物與抗體比率（ DAR ） 平衡解離常數（ Kd ）， nM 95% CI （輪廓似然）
AB200-ADL5-D4-05 4.39 9.8 7.862至12.20
AB200-ADL1-D12-05 4.24 9.704 8.515至11.06
AB200-ADL1-D2-02 3.92 9.659 8.296至11.24
AB212-ADL1-D2-02 5.17 1.297 1.091至1.540
AB213-ADL1-D2-02 4.18 0.5004 0.3587至0.6952
AB214-ADL1-D2-02 4.12 1.025 0.7624至1.375
AB215-ADL1-D2-02 3.96 1.297 1.008至1.667
AB216-ADL1-D2-02 3.8 0.8364 0.7186至0.9730
AB217-ADL1-D2-02 3.7 0.3663 0.2964至0.4520
AB218-ADL1-D2-02 3.77 0.3325 0.2651至0.4167
AB200-mcMMAF-05 4.0 6.504 5.478至7.717
4.6 細胞活力
在幾種表現BCMA的細胞系中測試抗BCMA ADC抑制細胞生長的能力。使用NCI-H929（ATCC，5,000個細胞/孔）、OPM2（ATCC，5,000個細胞/孔）、MOLP8（ATCC，5,000個細胞/孔）和MM1.S（ATCC，5,000個細胞/孔）細胞系。
簡言之，在無菌條件下在層流罩中製備所有細胞和ADC溶液。對於每種待檢測的細胞系，將細胞重懸浮在補充有FBS的適當培養基中，使其密度為5.56 x 104 個細胞/mL。將90 µL細胞懸浮液添加至透明底、黑壁、96孔板的所有孔中。對於所有測試物品（抗BCMA ADC和參考ADC），在96孔板中製備待測的最高濃度的10X原液，並按1:3連續稀釋九次以生成10點曲線。將10 µL的每種10X測試物品溶液添加至含有90 µL細胞的96孔板適當孔中，並將板置於37°C和5% CO2 下的加濕孵育箱中持續6天。將檢測板放入孵育箱後，立即用CellTiter-Glo®試劑（普洛麥格公司）處理單個96孔細胞板，在室溫下孵育10 min，並在EnVision酶標儀上對發光進行定量。該板用作「零時間」參考並用於解釋孵育6天後獲得的數據。第6天的發光值小於零時間板的發光值表示細胞死亡，而大於零時間信號但小於第6天媒介物處理的細胞的信號表示細胞生長抑制活性。進行非線性曲線擬合併獲得GI50 和LD50 值。
所有測試的ADC均在NCI-H929和OPM2細胞中具有活性。與相同的有效載荷軛合至參考抗體（例如，AB200軛合至D1或D2）時相比，當D1和D2軛合至AB212、AB213、AB214、AB215、AB216、AB217和AB218時，活性普遍提高。示例性抗體與D1或D2的某些組合特別具有活性（例如，AB214與D2的組合比D2與其他抗體的組合更具有活性）。另外，將某些連接子與某些有效載荷（例如，ADL6與D2）組合導致在OPM2細胞中的效力出人意料地增加（表26）。
為了評估抗BCMA ADC的活性是否係抗原依賴性的，對BCMA陰性Jurkat細胞進行了處理。在BCMA陰性細胞中，當使用與強力靶向BCMA陽性細胞相同的濃度時，所測試的ADC都沒有活性（表26）。該等數據表明，所測試的抗BCMA ADC的活性係抗原依賴性的。[ 表 26]. 示例性抗 BCMA ADC 的細胞活力分析
SMLA 批次 ID HIC DAR GI50 （ nM ） OPM2.1 LD50 （ nM ） OPM2.1 GI50 （ nM ） MOLP8.1 LD50 （ nM ） MOLP8.1 GI50 （ nM ） MM1S.1 LD50 （ nM ） MM1S.1 GI50 （ nM ） NCIH929 LD50 （ nM ） NCIH929 GI50 （ nM ） Jurkat LD50 （ nM ） Jurkat
AB200-ADL1-D2-04 4.25 5.63 67.2 ND ND ND ND ND ND 400 400
AB200-ADL1-D1-02 7.9 0.587 2.39 ND ND ND ND ND ND 400 400
AB200-ADL1-D1-03 3.98 3.477 15.258 ND ND ND ND ND ND 400 400
AB216-ADL1-D1-02 7.69 0.166 0.68 ND ND ND ND ND ND 400 400
AB216-ADL1-D1-01 4.87 0.287 1.252 ND ND ND ND ND ND 400 400
AB216-ADL1-D1-04 4.01 0.62 2.921 ND ND ND ND ND ND ND ND
AB215-ADL1-D2-03 7.91 0.261 3.69 ND ND ND ND ND ND 277.3 400
AB216-ADL1-D2-02 3.8 1.562 14.009 ND ND ND ND ND ND 400 400
AB214-ADL21-D2-01 ND 1.008 14.353 3.286 33.504 0.316 25.443 ND ND ND ND
AB217-ADL1-D2-02 3.7 2.175 16.346 ND ND ND ND ND ND ND ND
AB218-ADL1-D2-02 3.77 0.985 19.826 ND ND ND ND ND ND ND ND
AB214-ADL1-D2-02 4.12 1.541 25.132 5.024 78.966 0.265 373.387 ND ND ND ND
AB212-ADL1-D1-02 ND 9.138 26.02 ND ND ND ND ND ND ND ND
AB215-ADL21-D2-03 ND 5.163 30.544 ND ND ND ND ND ND 139.4 400
AB216-ADL1-D2-03 ND 1.988 31.626 ND ND ND ND ND ND ND ND
AB213-ADL1-D2-02 ND 1.16 32.461 6.064 79.032 0.43 236.418 ND ND ND ND
AB213-ADL1-D2-01 ND 1.574 38.261 4.155 37.029 0.425 93.288 ND ND ND ND
AB217-ADL1-D2-01 ND 1.986 48.199 6.302 151.404 0.439 88.607 0.042 0.155 ND ND
AB212-ADL1-D2-01 ND 10.031 55.723 6.245 23.701 4.067 106.483 0.033 0.199 ND ND
AB215-ADL1-D2-02 ND 4.041 73.687 13.642 111.791 0.843 272.647 ND ND ND ND
AB212-ADL1-D2-02 ND 17.66 90.732 26.25 73.65 3.687 136.061 ND ND ND ND
AB218-ADL1-D2-01 ND 7.802 126.803 14.292 173.097 0.89 ＞200.000 ＜0.030 0.057 ND ND
AB214-ADL22-D2-01 ND 6.118 135.619 ND ND ND ND ND ND ND ND
AB212-ADL1-D1-04 ND 26.904 138.435 ND ND ND ND ND ND ND ND
AB212-ADL1-D2-03 ND 51.701 235.107 ND ND ND ND ND ND 400 400
AB212-ADL1-D2-05 ND 62.925 242.007 ND ND ND ND ND ND ND ND
AB215-ADL1-D2-01 ND 21.852 250.175 30.469 287.678 3.54 ＞400.000 ＜0.061 0.148 ND ND
AB212-ADL1-D1-05 ND 57.496 251.667 ND ND ND ND ND ND 400 400
AB216-ADL1-D2-01 ND 9.976 279.076 32.112 ＞400.000 2.576 ＞400.000 0.13 0.311 ND ND
AB216-ADL21-D1-01 ND 2.136 9.463 ND ND ND ND ND ND ND ND
AB216-ADL21-D2-01 ND 4.722 37.44 ND ND ND ND ND ND 119.3894 400
AB214-ADL1-D1-02 ND 0.718 5.032 ND ND ND ND ND ND 400 400
AB214-ADL1-D2-06 ND 3.102 29.262 ND ND ND ND ND ND ND ND
AB212-ADL1-D1-01 ND 29.091 136.084 ND ND ND ND ND ND 292 400
AB212-ADL1-D2-04 ND 85.835 ＞400.000 ND ND ND ND ND ND 400 400
ND = 無數據。4.7 凍融測試
將示例性ADC樣本（每個80 μL，組胺酸/pH 6.0緩衝液）在-80°C冷凍2小時。然後，將樣本在22°C放置30 min以除去可見的冰。這完成了一個循環。在起始點以及1、4和10個凍融循環後進行取樣。每次取樣15 μL的每種ADC，其中7.5 μL用於分析DAR、聚集和濃度。在分析之前，所有樣本都儲存在-80°C。凍融數據示於表27中。[ 表 27]. 示例性抗 BCMA ADC 的凍融測試
ADC HIC DAR 濃度（ mg/mL ） 聚集（ % ）
凍融前 6次凍融後 凍融前 6次凍融後 凍融前 6次凍融後
AB214-ADL1-D2-06 3.91 3.90 4.42 4.35 1.10 1.13
AB212-ADL1-D1-02 3.92 3.90 4.80 4.97 0.84 1.10
AB216-ADL1-D2-03 3.93 3.91 4.17 4.12 0.90 0.87
AB216-ADL1-D2-04- 7.83 7.88 4.66 4.65 1.91 1.61
AB216-ADL1-D2-02 3.80 3.81 4.91 4.92 0.89 0.65
AB217-ADL1-D2-02 3.70 3.78 4.25 4.24 2.12 1.91
AB218-ADL1-D2-02 3.77 3.75 4.68 4.86 0.10 0.39
AB215-ADL1-D2-03 7.91 7.90 4.05 3.95 0.93 0.93
AB215-ADL21-D2-03 4.04 4.01 4.31 4.27 0.68 0.74
AB216-ADL21-D2-01 4.54 4.60 4.62 5.74 0.67 0.23
AB216-ADL1-D1-01 4.87 4.88 4.67 4.93 0.80 1.09
AB216-ADL1-D1-02 7.69 7.75 5.65 5.53 2.72 2.12
AB214-ADL1-D1-02 3.91 3.89 4.90 4.87 2.01 1.32
AB212-ADL1-D2-03 4.03 4.05 3.90 3.92 0.42 1.06
AB212-ADL1-D1-02 3.92 3.90 4.80 4.97 0.84 1.10
AB216-ADL1-D2-03 3.93 3.91 4.17 4.12 0.90 0.87
AB216-ADL1-D2-04 7.83 7.88 4.66 4.65 1.91 1.61
AB212-ADL1-D1-03 7.86 7.81 3.89 3.87 2.29 4.58
AB216-ADL1-D1-04 4.01 3.91 5.22 5.25 2.94 3.87
AB212-ADL1-D1-05 3.99 3.96 4.99 4.81 1.76 1.55
實例 5
為了評估由抗BCMA ADC處理而誘導的pre-mRNA剪接相關基因的表現變化，在多發性骨髓瘤的異種移植模型中進行了三項體內研究。5.1 方法
將兩種人骨髓瘤細胞系OPM2和MOLP8皮下接種到雌性CB17-Scid小鼠（5 x 106 個細胞/小鼠）中，並在隨機分配到治療組之前使腫瘤體積達到約300-500 mm3 。然後，將小鼠隨機分配以接受單次靜脈內劑量的未軛合參考抗體（AB200）或抗BCMA ADC。在給藥後的預定時間點，根據機構批准的方案對小鼠實施安樂死並收集腫瘤組織。然後，將腫瘤碎片在液氮中速凍或在RNAlater保存溶液中孵育後冷凍。
根據製造商的說明，使用針對微陣列總RNA分離套組和MagMax儀的MagMAX™-96從腫瘤樣本中分離總腫瘤RNA。藉由NanoDrop分光光度計的UV吸光度對RNA進行定量。在NanoString nCounter基因表現平臺（NanoString科技公司（NanoString Technologies））上進行基因表現分析。使用由具有61個基因的70個基因組組成的定製代碼集來測量由ADC和九個管家基因誘導的剪接變化（圖 5 ）。對於每個樣本，將終體積為6.5 µL的約250 ng至350 ng總RNA與定製基因表現融合物標籤集（包括靶標特異性寡核苷酸探針對A和B、保護探針、螢光條碼特定性報告基因標籤和生物素化通用捕獲標籤）混合。使探針和目標轉錄物在67°C雜交過夜18小時。使用高靈敏度方案在nCounter製備站上運行雜交樣本，其中去除多餘的融合標籤集，並將轉錄物特異性三元複合物固定在鏈黴抗生物素蛋白塗覆的柱上。根據製造商的方案，在nCounter數字分析儀上以最大掃描解析度掃描樣本。對每個個體樣本的基因表現數據藉由使用陰性對照的平均值 + 2個標準差的背景扣除進行歸一化，使用陽性對照的幾何平均值進行陽性對照歸一化，以及使用管家基因的幾何平均值進行代碼集內容歸一化。
對於統計分析，使用針對Windows的GraphPad Prism v7.0軟體（美國加利福尼亞州GraphPad軟體公司（Software, Inc., CA, USA））。使用單向方差分析和Tukey-Kramer多重比較檢驗來評估用抗體或ADC治療的腫瘤之間的剪接變化，顯著性水平設置為p ＜ 0.05。P 值顯示為*表示 ＜0.05，**表示 ＜0.01，***表示 ＜0.001，****表示 ＜0.0001。5.2 結果
進行了三項體內研究以評估抗BCMA ADC治療後OPM2和MOLP8腫瘤中的基因表現剪接的變化。
在第一項研究中，將攜帶OPM2腫瘤的小鼠用10 mg/kg劑量的未軛合的AB200抗體或包含軛合至ADL5-D4這一連接子-有效載荷的AB200的ADC（AB200-ADL5-D4）（平均DAR為約4.0）治療。在給藥後24小時或48小時收集腫瘤，並使用NanoString nCounter平臺上的定製剪接基因組分析總腫瘤RNA。在這兩個時間點，相對於僅用AB200抗體治療的腫瘤，在ADC（AB200-ADL5-D4）治療的腫瘤中觀察到統計學顯著的剪接調節，如成熟mRNA（FBXW5-mat、PLEKHJ1-mat和DYNLT1-mat）的表現降低、pre-mRNA種類（PLEKHJ1-pre_2和DYNLT1-pre）的豐度增加、規範剪接位點（UBA2_CJ_1）的使用減少、以及異常剪接位點（UBA2_AJ_4）使用增加（圖 6A-6D ）。
在第二項研究中，在MOLP8異種移植模型中評估了抗BCMA ADC的剪接調節，該模型相對於OPM2具有BCMA的較少的細胞表面表現。當歸一化為僅20 mg/kg劑量的AB200時，用10 mg/kg AB200-ADL1-D2 ADC治療的腫瘤針對使用定製NanoString組評估的所有連接均未顯示出統計學顯著的剪接變化。相比之下，20 mg/kg劑量的相同ADC對評估的幾個基因誘導了在內含子滯留和異常連接使用方面明顯的、統計學顯著的變化（圖 7A-7D ）。
在第三項研究中，評估了兩種示例性抗BCMA ADC（包含軛合至ADL1-D1或ADL1-D2這一連接子-有效載荷的抗BCMA抗體（AB212）的ADC）的剪接調節。將OPM2腫瘤用20 mg/kg劑量的每種ADC或用未軛合的AB200抗體作為陰性對照進行治療，並在給藥後24小時和48小時評估剪接變化。在24小時處，相對於僅用AB200抗體治療，來自這兩個ADC治療組的腫瘤都顯示出明顯的、強效的剪接變化。在用AB212-ADL1-D1治療的腫瘤中，在24小時處觀察到的剪接調節程度維持不變或適度增加48小時，而在同一時間點在用AB212-ADL1-D2治療的腫瘤中的剪接調節似乎正在恢復到某些連接處的基線（圖 8A-8D ）。實例 6
為了評估抗BCMA抗體和ADC的抗腫瘤活性，在多發性骨髓瘤的異種移植模型中進行了體內研究。6.1    OPM2 異種移植模型中的抗 BCMA 抗體 研究 1 和 2
方法：在OPM2多發性骨髓瘤異種移植模型中評估了裸露（未軛合）形式的示例性抗BCMA抗體亞組的抗腫瘤活性。測試了四種抗體（AB212、AB214、AB217和AB218）和一種參考抗體（AB200），分為兩項研究。根據ATCC的建議，培養和擴增OPM2細胞以進行接種。使細胞沈澱並以5.0 x 107 個細胞/mL的密度重懸浮在無血清RPMI-1640培養基（50% v/v）和基質膠（50% v/v）的溶液中。在雌性CB17-Scid小鼠的右側腹皮下接種100 µL細胞懸浮液，並監測腫瘤生長。當平均腫瘤體積達到約150 mm3 時，將小鼠隨機分成治療組並給予10 mL/kg單次靜脈內劑量（經由尾靜脈）的2.0 mg/mL給藥溶液，總劑量為20 mg/kg（給藥日由圖 9 和圖 10 中的箭頭表示）。給小鼠稱重，每週測量其腫瘤三次以監測任何變化。具有超過2000 mm3 或任何維度超過20 mm的腫瘤的動物被取消研究並根據IACUC方案適當地使其安樂死。安樂死後，收集腫瘤樣本和血清並儲存起來用於後續分析。
AB200參考抗體在給藥後十一天誘導了約50%的腫瘤生長抑制（TGI），但這種影響不是統計學上顯著的。同樣地，抗體殖株AB214使腫瘤生長減少了約33%，但這種影響不是統計學上顯著的（圖 9 ；表28）。在第二項研究中，AB212、AB217和AB218均顯示出對腫瘤生長的適度影響，但該等影響未達到統計學顯著性（圖 10 ；表29）。綜上所述，該等數據表明，當在所述實驗條件下評估時，所測試的殖株未表現出作為未結合抗體的顯著抗腫瘤活性。[ 表 28]. 體內活性（ OPM2 ） - 研究 1
治療組 腫瘤生長抑制（ % ，第 28 天） 第 28 天的 p 值（與鹽水媒介物相比） **
鹽水媒介物 0.0 NA
AB200-02 50.45 0.2455
AB214-02 33.11 0.5336
** 帶有 Tukey 校正的混合效應模型
[ 表 29]. 體內活性（ OPM2 ） - 研究 2
治療組 腫瘤生長抑制（ % ，第 28 天） 第 28 天的 p 值（與鹽水媒介物相比） **
鹽水媒介物 0.0 NA
AB212-01 -14.50 0.8730
AB217-01 16.14 0.9899
AB218-01 4.93 0.9903
** 帶有 Tukey 校正的雙向方差分析
6.2    OPM2 異種移植模型中的抗 BCMA ADC 研究 1 和 2
方法：在OPM2多發性骨髓瘤異種移植物模型中評估了示例性抗BCMA ADC的抗腫瘤活性。根據ATCC的建議，培養和擴增OPM2細胞以進行接種。使細胞沈澱並以5.0 x 107 個細胞/mL的密度重懸浮在無血清RPMI-1640培養基（50% v/v）和基質膠（50% v/v）的溶液中。在雌性CB17-Scid小鼠的右側腹皮下接種100 µL細胞懸浮液，並監測腫瘤生長。當平均腫瘤體積達到約150 mm3 時，將小鼠隨機分成治療組並給予10 mL/kg單次靜脈內劑量（經由尾靜脈）的2.0 mg/mL給藥溶液，總劑量為20 mg/kg。給小鼠稱重並每週測量其腫瘤二至三次。具有超過2000 mm3 或任何維度超過20 mm的腫瘤的動物被取消研究並根據IACUC方案適當地使其安樂死。安樂死後，收集腫瘤樣本和血清並儲存起來用於後續分析。
結果：七個殖株均藉由隨機連接至鉸鏈半胱胺酸而以約4.0的平均藥物與抗體比率（DAR）軛合至ADL1-D2這一連接子-有效載荷。以平均DAR為4軛合至mcMMAF這一連接子-有效載荷的AB200參考抗體作為抗腫瘤活性的陽性對照；作為參考ADC的、以更高DAR（平均DAR為7）軛合至ADL1-D2這一連接子-有效載荷的AB200也包括在內。在第一個實驗中評估了AB213、AB214和AB215的軛合物（圖 11 ；表30）；在第二個實驗中評估了AB212、AB216、AB217和AB218的軛合物（圖 12 ；表31）。
在第二個實驗中，為了評估摻有示例性抗BCMA抗體的ADC的抗體特異性活性，藉由將ADL1-D2這一連接子-有效載荷以平均DAR為約4.0與抗HER2抗體曲妥珠單抗（AB185）軛合，產生了「非靶向性」ADC。由於OPM2細胞系不表現HER2，所以預計AB185-ADL1-D2 ADC不會顯著抑制OPM2腫瘤生長。暴露於非靶向性ADC的OPM2腫瘤顯示出與媒介物治療的腫瘤無法區分的生長，這表明所測試的ADC顯示的抗腫瘤活性取決於所使用的抗BCMA抗體。[ 表 30]. 體內活性（ OPM2 ） - 研究 1
治療組 藥物與抗體比率（ DAR ） 腫瘤生長抑制 （ %±SEM ，第 30 天） 第 30 天的 p 值 （與鹽水媒介物相比） **
鹽水媒介物 NA 0.0 NA
AB200-ADL1-D2-03 6.87（RP） 82.95 ± 7.92 0.0042
AB213-ADL1-D2-02 4.18（HIC） 67.78 ± 5.08 0.0155
AB214-ADL1-D2-02 4.12（HIC） 82.91 ± 4.07 0.0073
AB215-ADL1-D2-02 3.96（HIC） 87.96 ± 3.18 0.0067
AB200-mcMMAF-06 4.0（HIC） 99.83 ± 0.169 0.0058
** 帶有 Tukey 校正的混合效應模型； NA ，不適用
[ 表 31]. 體內活性（ OPM2 ） - 研究 2
治療組 藥物與抗體比率（ DAR ） 腫瘤生長抑制 （ %±SEM ，第 28 天） 第 28 天的 p 值 （與鹽水媒介物相比） **
鹽水媒介物 NA 0.0 NA
AB185-ADL1-D2-05 4.33（HIC） -7.3 ± 24.99 ＞0.9999
AB200-ADL1-D2-04 4.25（HIC） 95.48 ± 2.63 0.0375
AB212-ADL1-D2-02 5.17（HIC） 94.53 ± 4.34 0.0373
AB216-ADL1-D2-02 3.8（HIC） 96.99 ± 1.90 0.0357
AB217-ADL1-D2-02 3.7（HIC） 61.69 ± 10.68 0.2186
AB218-ADL1-D2-02 3.77（HIC） 83.00 ± 8.44 0.0618
AB200-mcMMAF-05 4.0（HIC） 100 ± 0 0.0322
** 帶有 Tukey 校正的雙向方差分析； NA ，不適用
研究 3
方法：為了評估示例性連接子-有效載荷在抗BCMA ADC中的體內功效，將AB212抗體軛合至ADL1-D1或ADL1-D2這一連接子-有效載荷，目標平均DAR為4.0（這兩種AB212 ADC均實現了3.84的DAR）。將具有OPM2異種移植物的雌性CB17-Scid小鼠隨機分成十組（平均腫瘤體積為約125 mm3 /組）並單次尾靜脈靜脈內注射測試物品。每種ADC的劑量為5或10 mg/kg。AB200-mcMMAF作為抗腫瘤活性的陽性對照，以10 mg/kg藉由尾靜脈靜脈內注射給藥一次。
結果：當以5 mg/kg給藥時，沒有觀察到具有ADL1-D1和ADL1-D2這兩個連接子-有效載荷的ADC的抗腫瘤活性之間的統計學顯著差異（圖 13 ；表32）。相比之下，當以10 mg/kg給藥時，與具有ADL1-D2這一連接子-有效載荷的ADC相比，具有ADL1-D1這一連接子-有效載荷的ADC表現出增加的功效（p 值 = 0.0308）。[ 表 32]. 體內活性（ OPM2 ） - 研究 3
治療組 藥物與抗體比率（ DAR ） 腫瘤生長抑制 （ %±SEM ，第 34 天） 第 34 天的 p 值 （與鹽水媒介物相比） **
鹽水媒介物 NA 0.0 NA
AB212-ADL1-D2-05 ， 10 mg/kg 3.84（HIC） 42.63 ± 9.12 0.0554
AB212-ADL1-D2-05 ， 5 mg/kg 3.84（HIC） 47.01 ± 8.32 0.0227
AB212-ADL1-D1-04 ， 10 mg/kg 3.84（HIC） 80.92 ± 5.60 0.0002
AB212-ADL1-D1-04 ， 5 mg/kg 3.84（HIC） 45.64 ± 8.78 0.0317
AB200-mcMMAF-07 ， 10 mg/kg 4.03（HIC） 100 ± 0 0.0002
第 34 天的 p 值（ 10 mg/kg ADL1-D2 ADC 相比於 10 mg/kg ADL1-D1 ADC ） ** = 0.0308
** 帶有 Tukey 校正的混合效應模型； NA ，不適用
研究 4
方法：為了評估示例性抗體在抗BCMA ADC中的體內功效，將AB212和AB216抗體軛合至ADL1-D1這一連接子-有效載荷，目標平均DAR為4.0（AB212和AB216 ADC的DAR分別為3.92和4.01）。將具有OPM2異種移植物的雌性CB17-Scid小鼠隨機分成十組（平均腫瘤體積為約125 mm3 /組）並單次尾靜脈靜脈內注射測試物品。每種ADC的劑量為5或10 mg/kg。AB200-mcMMAF作為抗腫瘤活性的陽性對照，以10 mg/kg藉由尾靜脈靜脈內注射給藥一次。根據批准的機構方案對接種後第108天剩餘的所有小鼠實施安樂死。收集血清並冷凍以進行後續分析。
結果：在投與後大約兩週內，所有四個ADC組和AB200-mcMMAF對照都顯示出無法區分的活性，在所有腫瘤中都誘導深度消退（圖 14 ；表33）。然而，持續監測顯示5 mg/kg AB212 ADC組中的幾個腫瘤重新生長。隨後，10 mg/kg AB212 ADC組和5 mg/kg AB216 ADC組中的腫瘤開始重新生長，而10 mg/kg AB216 ADC組中的所有小鼠在研究期間（給藥後100天）保持無腫瘤，AB200-mcMMAF對照組中的所有小鼠也是如此（參見圖 14 ）。[ 表 33]. 體內活性（ OPM2 ） - 研究 4
治療組 藥物與抗體比率（ DAR ） 腫瘤生長抑制 （ %±SEM ，第 27 天） 第 27 天的 p 值 （與鹽水媒介物相比） **
鹽水媒介物 NA 0.0 NA
AB212-ADL1-D1-02 ， 10 mg/kg 3.92（HIC） 100 ± 0 0.0016
AB212-ADL1-D1-02 ， 5 mg/kg 3.92（HIC） 90.95 ± 3.15 0.0027
AB216-ADL1-D1-04 ， 10 mg/kg 4.01（HIC） 100 ± 0 0.0016
AB216-ADL1-D1-04 ， 5 mg/kg 4.01（HIC） 99.78 ± 0.22 0.0017
AB200-mcMMAF-07 ， 10 mg/kg 4.03（HIC） 100 ± 0 0.0016
** 帶有 Tukey 校正的混合效應模型； NA ，不適用
6.3    MOLP8 異種移植模型中的抗 BCMA ADC 研究 1
方法：為了進一步評估示例性抗BCMA ADC在體內的抗腫瘤活性，在第二個多發性骨髓瘤異種移植模型MOLP8中進行了相同ADC的篩選。選擇MOLP8模型係因為其相對於OPM2具有較低的細胞表面BCMA表現水平。此研究中的所有實驗條件與用於OPM2模型的那些條件相同，除了模型本身和從腫瘤接種到劑量投與的天數（給藥日由圖 15 中的箭頭表示）。
結果：摻有抗BCMA抗體的所有六種測試ADC在MOLP8模型中都顯示出抗腫瘤活性（圖 15 ；表34），儘管反應程度相對於在OPM2異種移植物中獲得的結果有所降低（參見OPM2研究1和2（圖 11 和圖 12 ；表30和31））。所有治療，包括AB200-mcMMAF陽性對照，均未能達到由混合效應模型測試所確定的統計學顯著性。[ 表 34]. 體內活性（ MOLP8 ） - 研究 1
治療組 藥物與抗體比率（ DAR ） 腫瘤生長抑制 （ %±SEM ，第 21 天） 第 21 天的 p 值 （與鹽水媒介物相比） **
鹽水媒介物 NA 0.0 NA
AB200-ADL1-D2-05 4.07（HIC） 43.73 ± 5.22 0.6331
AB212-ADL1-D2-02 5.17（HIC） 68.23 ± 12.52 0.2886
AB214-ADL1-D2-02 4.12（HIC） 49.27 ± 20.79 0.7772
AB215-ADL1-D2-02 3.96（HIC） 52.06 ± 24.38 0.7981
AB216-ADL1-D2-02 3.8（HIC） 65.81 ± 11.49 0.3085
AB217-ADL1-D2-02 3.7（HIC） 62.95 ± 8.99 0.3226
AB218-ADL1-D2-02 3.77（HIC） 26.94 ± 25.37 0.9937
AB200-mcMMAF-05 4.0（HIC） 100 ± 0 0.0653
** 帶有 Tukey 校正的混合效應模型； NA ，不適用
研究 2
方法：為了進一步評估AB212-ADL1-D1 ADC和AB216-ADL1-D1 ADC在體內的抗腫瘤活性，藉由採用與OPM2異種移植模型中使用的研究設計相同的研究設計，在MOLP8異種移植模型中測試了每種ADC（參見第6.2節（研究4））。
結果：通常，每種ADC在MOLP8腫瘤中的抗腫瘤反應程度（圖 16 ；表35）不如在OPM2腫瘤中明顯（參見OPM2研究4（圖 14 ；表33））。然而，與在OPM2模型中獲得的數據一致，在MOLP8腫瘤中，單次10 mg/kg劑量的AB216-ADL1-D1比相同劑量的AB212-ADL1-D1誘導更大的腫瘤生長抑制，儘管這種差異不符合統計學顯著性。[ 表 35]. 體內活性（ MOLP8 ） - 研究 2
治療組 藥物與抗體比率（ DAR ） 腫瘤生長抑制 （ %±SEM ，第 23 天） 第 23 天的 p 值 （與鹽水媒介物相比） **
鹽水媒介物 NA 0.0 NA
AB212-ADL1-D1-02 ， 10 mg/kg 3.92（HIC） 42.72 ± 9.46 0.0154
AB212-ADL1-D1-02 ， 5 mg/kg 3.92（HIC） 50.95 ± 5.97 ＜0.0001
AB216-ADL1-D1-04 ， 10 mg/kg 4.01（HIC） 69.24 ± 5.70 ＜0.0001
AB216-ADL1-D1-04 ， 5 mg/kg 4.01（HIC） 57.65 ± 9.53 0.0013
AB200-mcMMAF ， 10 mg/kg 4（HIC） 99.05 ± 0.51 ＜0.0001
** 帶有 Tukey 校正的雙向方差分析； NA ，不適用
實例 7
為了評估AB216-ADL1-D1在體外的抗增殖活性和細胞毒性，對一組11個人骨髓瘤細胞系進行了細胞活力測定。AB200-ADL10-MMAF係一種靶向BCMA的、具有單甲基奧瑞他汀F（MMAF）有效載荷的ADC，將其用作參考ADC。7.1 方法
在無菌條件下在層流罩中製備所有細胞和ADC溶液。對於每種待檢測的細胞系，將細胞重懸浮在補充有FBS的適當培養基中，使其密度為5.56 x 104 個細胞/mL。將90 µL細胞懸浮液添加至透明底、黑壁、96孔板的所有孔中。對於AB216-ADL1-D1和AB200-ADL10-MMAF，在96孔板中製備待測的最高濃度的10X原液，並按1:3連續稀釋八次以生成9點曲線。將10 µL的每種10X測試物品溶液添加至含有90 µL細胞的96孔板適當孔中，並將板置於37°C和5% CO2 下的加濕孵育箱中持續6天。將檢測板放入孵育箱後，立即用CellTiter-Glo®試劑（普洛麥格公司）處理單個96孔細胞板，在室溫下孵育10 min，並在EnVision酶標儀上對發光進行定量。該板用作「零時間」（T0 ）參考並用於解釋孵育6天後獲得的數據。第6天的發光值小於T0 板的發光值表示細胞死亡，而大於T0 信號但小於第6天媒介物處理的細胞的信號表示生長抑制。T0 和第6天之間的發光沒有變化表示細胞生長抑制活性。進行非線性曲線擬合，並計算GI50 、LD50 、曲線下面積（AUC）和活細胞減少最大百分比（Rmin Ave）的值（圖 17A-17D ，表36）。[ 表 36]. 示例性抗 BCMA ADC 和有效載荷的細胞活力分析
細胞系 樣本 * GI50 （ nM ） LD50 （ nM ） AUC （ nM * % 相對活力） Rmin Ave （ % ）
AMO1 AB200-ADL10-MMAF-08 5.1401 18.6701 410.4424 -96.2963
EJM AB200-ADL10-MMAF-08 5.1252 18.526 433.4958 -86.948
KMS11 AB200-ADL10-MMAF-08 2.0667 5.0785 316.1224 -96.004
LP1 AB200-ADL10-MMAF-08 6.8874 200 631.2728 -32.433
MM1R AB200-ADL10-MMAF-08 0.5176 1.0927 187.1393 -98.0211
MM1S AB200-ADL10-MMAF-08 1.0687 3.5767 272.846 -94.5485
MOLP8 AB200-ADL10-MMAF-08 2.1787 200 642.4165 0.7358
NCIH929 AB200-ADL10-MMAF-08 9.1772 19.9301 447.4034 -87.0168
OPM2 AB200-ADL10-MMAF-08 4.3286 15.0413 419.0575 -85.1705
RPMI8226 AB200-ADL10-MMAF-08 5.1339 200 527.8214 -60.3736
U266B1 AB200-ADL10-MMAF-08 0.5138 1.3559 263.0274 -81.3228
AMO1 AB216-ADL1-D1-11 200 200 891.1862 55.6686
EJM AB216-ADL1-D1-11 15.2131 200 677.1885 -29.9836
KMS11 AB216-ADL1-D1-11 3.7797 19.8482 446.1838 -79.5891
LP1 AB216-ADL1-D1-11 5.5985 126.5987 526.6666 -63.2038
MM1R AB216-ADL1-D1-11 0.595 2.2385 222.669 -97.8614
MM1S AB216-ADL1-D1-11 0.4871 3.161 278.454 -84.5103
MOLP8 AB216-ADL1-D1-11 2.2557 20.7312 386.2652 -88.9237
NCIH929 AB216-ADL1-D1-11 8.1696 16.9934 414.2477 -96.3333
OPM2 AB216-ADL1-D1-11 0.8209 4.9075 262.267 -99.9575
RPMI8226 AB216-ADL1-D1-11 18.5183 200 744.1032 8.7909
U266B1 AB216-ADL1-D1-11 2.1865 61.9232 472.5868 -61.6649
AMO1 E7107 (D11) 14.9441 50.4287 487.7156 -96.8372
EJM E7107 (D11) 9.4501 22.175 434.2294 -99.071
KMS11 E7107 (D11) 5.0303 13.1801 382.1527 -99.2702
LP1 E7107 (D11) 2.1964 6.2485 313.7701 -99.6676
MM1R E7107 (D11) 3.3314 16.5876 374.4113 -99.831
MM1S E7107 (D11) 3.5083 18.155 380.5913 -99.7761
MOLP8 E7107 (D11) 2.4266 16.8329 361.7797 -99.6765
NCIH929 E7107 (D11) 2.8056 5.836 321.415 -99.8426
OPM2 E7107 (D11) 1.6687 4.7541 289.9829 -99.6884
RPMI8226 E7107 (D11) 3.5859 10.8782 359.1272 -99.7762
U266B1 E7107 (D11) 8.7602 18.2733 422.0108 -95.1886
AMO1 順鉑 8591.135 24857.88 984.2118 -99.8648
EJM 順鉑 30078.06 176520.2 994.2974 -99.8757
KMS11 順鉑 14356.14 91414.66 985.6271 -99.8489
LP1 順鉑 50066.58 624274.7 992.1409 -97.8184
MM1R 順鉑 7301.375 17616.3 980.905 -99.9355
MM1S 順鉑 10235 28357.22 988.9676 -99.8687
MOLP8 順鉑 5074.514 71048.43 951.8638 -99.8824
NCIH929 順鉑 21405.47 68415.23 996.5057 -99.945
OPM2 順鉑 17006.21 74249.5 991.8044 -99.784
RPMI8226 順鉑 16265.8 61944.01 992.6182 -99.2206
U266B1 順鉑 39856.15 230392.8 996.024 -99.4122
AMO1 MMAF 100.7715 243.7059 640.894 -99.5356
EJM MMAF 51.4921 194.3761 600.0131 -98.8551
KMS11 MMAF 235.3249 490.3828 706.6578 -98.8009
LP1 MMAF 222.777 761.0403 724.5606 -97.9742
MM1R MMAF 281.0547 584.6173 721.5643 -99.7818
MM1S MMAF 296.01 615.7256 726.0671 -99.8301
MOLP8 MMAF 254.4448 4689.579 788.7538 -58.9492
NCIH929 MMAF 321.1 676.4428 734.8893 -99.782
OPM2 MMAF 348.0548 723.9832 740.134 -99.7203
RPMI8226 MMAF 224.3193 557.1533 714.2788 -95.3537
U266B1 MMAF 67.7634 192.3371 661.824 -89.2656
AMO1 D1 566.6682 1689.735 797.7136 -99.4709
EJM D1 140.2317 303.5191 664.163 -99.0579
KMS11 D1 232.4131 485.9409 706.5255 -99.3474
LP1 D1 112.0278 234.5168 643.9226 -99.7195
MM1R D1 89.2849 283.0093 640.2408 -99.9109
MM1S D1 88.3658 302.924 644.3501 -99.8996
MOLP8 D1 149.5918 533.6503 690.1106 -99.755
NCIH929 D1 118.567 246.6292 646.6007 -99.8009
OPM2 D1 116.9262 256.8053 649.8734 -99.7805
RPMI8226 D1 121.7242 253.1965 648.8833 -99.6002
U266B1 D1 237.59 504.8119 712.6903 -94.2191
* AB200-ADL10-MMAF-08 = AB200-ADL10-MMAF的第08批；AB216-ADL1-D1-11 = AB216-ADL1-D1的第11批。7.2 結果
AB216-ADL1-D1的經計算的效力度量與靶向BCMA的參考ADC（AB200-ADL10-MMAF）的成對比較表明，基於對每種ADC的相對敏感性，人骨髓瘤細胞系可以分為三個一般類別：對AB216-ADL1-D1比對AB200-ADL10-MMAF更敏感（AB216-ADL1-D1 ＞ AB200-ADL10-MMAF）；對AB216-ADL1-D1和AB200-ADL10-MMAF具有相似的敏感性（例如，2倍範圍內的效力值）（AB216-ADL1-D1 ≈ AB200-ADL10-MMAF）；以及對AB200-ADL10-MMAF比對AB216-ADL1-D1更敏感（AB200-ADL10-MMAF ＞ AB216-ADL1-D1）。LP-1、NCI-H929、MOLP8和OPM2細胞對AB216-ADL1-D1比對AB200-ADL10-MMAF更敏感，其中LP-1和MOLP8細胞表現出在ADC之間的反應差異最大。相反，AMO-1、EJM、RPMI-8226、U266B1和KMS-11細胞對AB200-ADL10-MMAF比對AB216-ADL1-D1更敏感，其中AMO-1、EJM和RPMI-8226細胞表現出在ADC之間的反應差異最大。無論用於比較的效力度量如何，MM1S和MM1R細胞對這兩種ADC的反應相似。實例 8
無論增殖狀態如何，所有有核真核細胞類型的生存都需要經由mRNA剪接藉由共轉錄和轉錄後從預成熟mRNA中去除內含子。為了進一步評估AB216-ADL1-D1的抗增殖活性，並評估細胞增殖狀態是否會影響該活性，在活躍分裂的骨髓瘤細胞以及在減緩或阻止細胞生長的低血清條件下生長的相同細胞中進行了體外效力測定。
AB200-ADL10-MMAF係一種靶向BCMA的、具有MMAF有效載荷的ADC，將其用作參考ADC。已經表明，諸如MMAF等的奧瑞他汀藉由阻斷微管蛋白聚合和微管形成來發揮其抗增殖作用（Waight等人 (2016) PLoS One.[公共科學圖書館期刊]11(8):e0160890），微管蛋白聚合和微管形成係幾個細胞過程（包括有絲分裂期間正確的染色體分離）所必需的（Petry (2016) Annu Rev Biochem.[生物化學年鑒] 85:659-683）。與這種作用機制一致，MMAF和其他微管破壞劑的活性在未活躍進行細胞分裂的細胞中減弱（Collins等人 (2019) Cancers.[癌症]11(3):394）。8.1 方法
根據ATCC建議的培養條件（RPMI-1640培養基，對於H929和OPM2細胞，分別補充有10%胎牛血清或20%熱滅活胎牛血清），使人骨髓瘤細胞系NCI-H929（H929）和OPM2在保持在37°C和5% CO2 下的孵育箱中生長。為了減緩或阻止細胞生長並產生不分裂/緩慢分裂細胞的培養物，使正常血清條件下生長的細胞以1200 rpm沈澱5 min，並抽吸出上清液。將細胞沈澱物藉由每次在室溫PBS中輕輕重懸，然後以1200 rpm離心5 min而洗滌三次。將洗滌後的H929和OPM2細胞重懸浮在分別含有0.1%或0.5% v/v胎牛血清（低血清條件）的RPMI-1640培養基中，使其細胞密度為5x105 個細胞/mL。每天進行細胞計數以監測細胞生長。當培養物停止生長時（如藉由細胞計數所確定的），收穫細胞並鋪板在96孔板（5,000個細胞/孔）中，並進行如上所述之ADC處理（參見，例如，第2.3節）。8.2 結果
AB216-ADL1-D1和AB200-ADL10-MMAF的抗增殖活性在正常血清條件下培養的指數生長的NCI-H929細胞中相似，其中GI50 值和LD50 值均在低nM範圍內（圖 18 ）。然而，在減緩或停止增殖的低血清培養基中培養的NCI-H929細胞中，AB216-ADL1-D1顯示出比AB200-ADL10-MMAF顯著更高的活性。在低於這兩種ADC的GI50 值的濃度範圍內，AB216-ADL1-D1顯示出比AB200-ADL10-MMAF增加的抗增殖活性（圖 19A-19B ）。在顯示的最低ADC濃度（180 pM）下，AB216-ADL1-D1治療在第一個實驗中導致細胞完全殺死，在重複實驗中導致細胞數量減少了大約90%。相比之下，在第一個實驗和重複實驗中，180 pM AB200-ADL10-MMAF治療分別導致細胞數量減少40%和45%。
測試了第二種人骨髓瘤細胞系OPM2，當將其在正常血清條件下培養時，也顯示其對AB216-ADL-D1和AB200-ADL10-MMAF具有相似的敏感性（圖 20 ）。與NCI-H929細胞一樣，低血清條件用於產生不分裂/緩慢分裂的OPM2培養物，並且使OPM2細胞對AB216-ADL1-D1和AB200-ADL10-MMAF進行相同的9點劑量反應曲線。如在NCI-H929細胞中所觀察到的，AB216-ADL1-D1的活性與AB200-ADL10-MMAF在非增殖細胞中的活性不同（圖 21A-21B ）。然而，與在NCI-H929細胞中所觀察到的趨勢相反，在這兩種ADC的≥ GI50 的濃度範圍內，AB216-ADL1-D1的抗增殖活性相對於AB200-ADL10-MMAF增加。AB200-ADL10-MMAF的活性通常在高於其近似GI50 值（約1.0 nM）的濃度下趨於穩定，而在相同濃度範圍內的AB216-ADL1-D1的治療主要導致活細胞的完全消除。該等數據表明，在緩慢分裂或生長停滯的骨髓瘤細胞中，AB216-ADL1-D1可能比AB200-ADL10-MMAF保留更大的抗增殖活性。實例 9
為了評估MCL1-長同種型的過表現如何影響AB216-ADL1-D1的活性以及AB216-ADL1-D1的治療如何影響內源性MCL1 RNA和蛋白質的表現，在用AB216-ADL1-D1治療後的NCI-H929人骨髓瘤細胞中評估了MCL1在RNA和蛋白質水平的體外調節。將AB200-ADL10-MMAF用作參考ADC。9.1 方法
過表現MCL1的骨髓瘤細胞系的產生：為了研究MCL1-長的過表現對AB216-ADL1-D1和AB200-ADL10-MMAF的抗增殖活性的影響，用含有人MCL1-長cDNA（RPMI-8226_MCL1）或無插入物（RPMI-8226_EV）的pLVX表現盒慢病毒轉導RPMI-8226人骨髓瘤細胞系。在RPMI-8226 MCL1細胞中證實了組成型MCL1過表現（數據未顯示）。兩個細胞系都進行了如上所述之標準6天CTG測定（參見，例如，第2.3節）。
MCL1 RNA和蛋白質的體外調節：為了確定AB216-ADL1-D1和AB200-ADL10-MMAF負調節促存活MCL1-長蛋白的表現的能力，選擇人骨髓瘤細胞系NCI-H929（其表現高水平的MCL1並對這兩種ADC都敏感）進行評估。將大約10x106 個NCI-H929細胞以1.0x106 個細胞/mL的密度接種到T25燒瓶中的ATCC建議的生長培養基（RPMI-1640，補充有10% v/v FBS和50 µM 2-巰基乙醇）中，並且添加AB216-ADL1-D1或AB200-ADL10-MMAF至終濃度為5.0、50.0或500.0 nM。準備一式兩份的燒瓶以允許在處理的24和96小時進行收集。與上述相同地準備另外兩個燒瓶，並用生理鹽水溶液（終濃度為0.1%）處理以作為這兩個時間點的陰性對照。在處理後24和96小時，將細胞轉移到15 mL錐形管中，並用3 mL新鮮細胞培養基沖洗燒瓶以收集燒瓶中的任何殘留細胞。將該溶液添加到15 mL錐形管中，並將管以2,000 rpm離心3 min以沈澱細胞。抽吸出上清液，並藉由將沈澱物輕輕重懸浮在1.0 mL冰冷的1X PBS中來沖洗細胞。將每種重懸細胞沈澱物的大約三分之一轉移到乾淨的1.7 mL微量離心管中，其餘三分之二轉移到第二個1.7 mL微量離心管中。將微量離心管在預冷至4°C的臺式微量離心機中以14,000 rpm離心10 min。抽吸出PBS洗滌液（上清液），並將每個管再次短暫離心以將所有液體吸到底部。抽吸出所有剩餘的上清液，並將每個沈澱物在乾冰上速凍並儲存在-80°C直至分離出RNA或蛋白質。
根據製造商的說明，使用RNeasy套組（凱傑公司（Qiagen））製備總RNA。將RNA在30 µL洗脫緩衝液中洗脫，並使用Nanodrop儀藉由UV光譜法進行定量。將所有RNA歸一化為25 ng/µL，並根據製造商的說明，使用SuperScript IV VILO逆轉錄套組（賽默飛世爾科學公司）將1.0 µg（40 µL）的每種RNA轉化為cDNA。使用靶向人MCL1-長同種型的定製Taqman型探針組（擴增子跨越外顯子2-3連接點）和市售18S rRNA探針組（內部標準化對照），藉由雙重定量即時PCR測定來評估基因表現變化。使用ΔΔCt方法分析原始數據，並將其相對於24小時未處理樣本的信號歸一化。
藉由在RIPA緩衝液中裂解細胞沈澱物來製備蛋白質裂解物，然後將其在低功率下進行短暫超音波處理以剪切基因組DNA。在預冷至4°C的臺式微量離心機中，將裂解物以14,000 rpm離心10 min，並將可溶性蛋白質級分轉移到新的1.7 mL微量離心管中。將裂解物藉由BCA測定定量，並將其用RIPA緩衝液和4X SDS上樣染料（補充有1.0% 2-巰基乙醇）歸一化。將歸一化的裂解物短暫渦旋並加熱至95°C持續10 min，以使樣本完全變性。將大約10 µg的總蛋白質/泳道載入到4%-12% Bis-Tris丙烯醯胺梯度凝膠（生命技術公司（LifeTech））上，並藉由電泳分離蛋白質。將蛋白質轉移到硝酸纖維素膜上，將該等硝酸纖維素膜用5% BSA或5%脫脂奶粉在室溫封閉至少30 min，然後在4°C與識別人MCL1或黏著斑蛋白（上樣對照）的第一抗體一起孵育過夜。第二天，將該等膜用TBST洗滌三次以除去未結合的抗體，並與軛合至辣根過氧化物酶（HRP）的抗小鼠或抗兔第二抗體在室溫一起孵育至少1小時。第二抗體孵育後，將該等膜用TBST洗滌三次以除去未結合的抗體。然後，將該等膜用HRP基材塗覆以產生發光信號，該發光信號由CCD相機（ImageQuant，通用電氣醫療集團（GE Healthcare））捕獲。[ 表 37]. 匯總 - 體外分析
RPMI-8226 細胞系 治療組 平均GI50 （nM） 平均LD50 （nM） 平均Rmin （%）
實驗＃ 1 2 1 2 1 2
空運載體 AB216-ADL1-D1 13.1558 28.3342 107.2855 196.6309 -98.6102 -96.3514
空運載體 AB200-ADL10-MMAF 2.2178 9.3246 52.6849 134.8997 -90.7776 -91.8757
MCL1-L OE AB216-ADL1-D1 69.3989 216.2403 266.6769 ＞ 400 -81.2685 31.5475
MCL1-L OE AB200-ADL10-MMAF 15.398 81.6136 ＞ 400 ＞ 400 -24.9337 -34.6547
OE = 過度表現。9.2 結果
使用RPMI-8226細胞系的同基因對進行的兩個獨立實驗的結果表明，組成型MCL1L的過表現在6天細胞活力測定中部分挽救了AB216-ADL1-D1和參考ADC AB200-ADL10-MMAF的抗增殖作用。這與MCL1L的抗細胞凋亡作用一致，MCL1L的表現可以消除具有廣泛不同作用機制的一系列療法的作用並促進對該等療法的抗性（Song等人 (2005) Cancer Biol Ther.[癌症生物學與治療]4(3):267-276；Pei等人 (2014) PLoS One.[公共科學圖書館期刊]9(3): e89064；Wuillème-Toumi等人 (2005) Leukemia.[白血病]19(7):1248-1252）。計算的GI50 、LD50 和最大效應水平（Rmin %）值匯總在表37中。
鑒於MCL1L在促進漿細胞存活和對幾種骨髓瘤標準護理療法的抗性方面的作用，評估了AB216-ADL1-D1和AB200-ADL10-MMAF抑制RNA和蛋白質水平的MCL1L表現的能力。使用NCI-H929細胞系，在用5、50或500 nM的AB216-ADL1-D1或AB200-ADL10-MMAF處理24或96小時的細胞中量化MCL1L mRNA水平。處理24小時後，觀察到在用AB216-ADL1-D1處理的細胞中MCL1L RNA的濃度依賴性降低，在最高濃度（500 nM）時最大抑制率大約為85%。相比之下，AB200-ADL10-MMAF處理的細胞中的MCL1 RNA水平在24小時後在任何濃度下都沒有顯著改變（圖 22 ）。處理96小時後，AB216-ADL1-D1進一步降低了MCL1L RNA水平，即使在5 nM的最低濃度下最大抑制率也＞95%。最後，與處理24小時後的觀察結果一致，AB200-ADL10-MMAF在96小時時在任何濃度下均不影響MCL1L RNA表現。圖 22 中的術語「媒介物」係指將用0.1% v/v生理鹽水溶液處理的細胞作為MCL1L調節的陰性對照，其用作這兩個時間點的MCL1L mRNA水平的基準。顯示的數據係相對於24小時媒介物樣本計算的。
還使用識別白胺酸210附近表位的抗體對MCL1進行了免疫墨點分析，該抗體產生了大小與MCL1L（約42 kDa）和MCL1S（約32 kDa）一致的條帶、以及不同大小和強度的其他條帶（圖 23 ）。將黏著斑蛋白用作上樣對照。圖 23 中的術語「媒介物」（或「veh」）係指將用0.1% v/v生理鹽水溶液處理的細胞作為MCL1L調節的陰性對照，其用作這兩個時間點的MCL1L蛋白質水平的基準。
與RNA水平的數據一致，AB216-ADL1-D1處理在24小時後強烈下調MCL1L蛋白質水平，並且在96小時後在AB216-ADL1-D1處理的裂解物中幾乎檢測不到MCL1L。相反，MCL1L蛋白在24小時時被AB200-ADL10-MMAF適度抑制，並在96小時時進一步被抑制但仍可檢測到（圖 23 ）。AB200-ADL10-MMAF誘導的RNA和蛋白質水平上的MCL1調節之間的明顯差異可能是由翻譯後機制（如半胱天冬酶介導的裂解）引起的，這已針對MCL1L進行了描述（Michels等人 (2004) Oncogene.[癌基因]23(28):4818-4827）。綜上所述，該等數據表明，AB216-ADL1-D1具有可有效下調MCL1L RNA和蛋白質表現的獨特能力。這與AB200-ADL10-MMAF參考ADC形成對比，後者不調節MCL1L RNA水平，僅適度影響NCI-H929細胞中的MCL1L蛋白質水平。[ 表 38]. 輕鏈篩選（第 1 輪）： Fab 片段序列
與所列輕鏈殖株配對的重鏈（Fab）胺基酸序列 （AB200_D99H） QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSNYWMHWVRQAPGQGLEWMGATYRGHSDTYYNQKFKGRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGAIYHGYDVLDNWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSC（SEQ ID NO: 134）
殖株 ID 輕鏈（ Fab ）胺基酸序列 Kd hsBCMA （ nM ） Kd RhBCMA （ nM ） Tm （ °C ）
AB200-R1a-Fab_Vk1 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQDISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYYTSNIHSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYRKLPWTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 135） 1.751 6.369 82.67
AB200-R1a-Fab_Vk2 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCSASQEVSNYLNWYQQKPGKAPKLLIYYTSNLHSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQEYRKLPWTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 136） 4.267 14.891 75.43
AB200-R1a-Fab_Vk3 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCSASQDISNYINWYQQKPGKAPKLLIYYTSNMHSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYRKLPWSFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 137） 1.844 6.211 80.00
AB200-R1a-Fab_Vk4 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCTATQDITNYLNWYQQKPGKAPKLLIYYTSNLHSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYRKLPWTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 138） 2.199 7.902 82.26
AB200-R1a-Fab_Vk5 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCSASQDISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYYTSNLHSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYRSTPWTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 139） 7.832 27.521 81.10
AB200-R1a-Fab_Vk6 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCSATQDISNYLNWYQQKPGKAPKLLIYFTSNLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYRKLPWTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 140） 1.110 4.261 81.31
AB200-R1a-Fab_Vk7 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCSASQDISNFLNWYQQKPGKAPKLLIYYTSNLHSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQFRKMPWTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 141） 14.659 25.080 84.48
AB200-R1a-Fab_Vk8 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCSASQDISNYLNWYQQKPGKAPKLLIYYTSNLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCHQSRKLPWTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 142） 24.070 42.092 83.90
AB200-R1a-Fab_Vk9 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCSASQEISNYLNWYQQKPGKAPKLLIYATSNLHSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYRKLPWSFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 143） 2.044 8.034 84.44
AB200-R1a-Fab_Vk10 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCSASQSISNYLNWYQQKPGKAPKLLIYYTSNLHSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQSRKMPWTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 144） 109.981 194.645 86.11
AB200-R1a-Fab_Vk11 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQDVSNYLNWYQQKPGKAPKLLIYYTTNLHSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYRKLPWTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 145） 1.530 5.740 83.58
AB200-R1a-Fab_Vk12 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCSASQDISNYLNWYQQKPGKAPKLLIYYATNLHSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYRRLPWTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 146） 4.894 16.819 83.23
AB200-R1a-Fab_Vk13 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCSASNDISNYLNWYQQKPGKAPKLLIYYSSDLHSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYRKLPWTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 147） 7.144 24.571 79.40
AB200-R1a-Fab_Vk14 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCSASQDISNYLNWYQQKPGKAPKLLIYYSSNMHSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQFRKLPWTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 148） 4.029 11.504 82.31
AB200-R1a-Fab_Vk15 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCSASHEISNYLNWYQQKPGKAPKLLIYYTSSLHSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYRKLPWTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 149） 2.926 9.710 81.31
AB200-R1a-Fab_Vk16 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCSASQDITNYLNWYQQKPGKAPKLLIYATSNLHSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQEYRKLPWTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 150） 3.179 12.899 80.67
AB200-R1a-Fab_Vk17 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCSATQDISNYLNWYQQKPGKAPKLLIYYTTNLHSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYYKLPWTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 151） 4.450 7.714 83.11
AB200-R1a-Fab_Vk18 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCTASQDISNYLNWYQQKPGKAPKLLIYYTSDLHIGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYRKLPWTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 152） 2.934 10.971 81.44
AB200-R1a-Fab_Vk19 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCSASNDISNYINWYQQKPGKAPKLLIYYTSNLHSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQFRKLPWTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 153） 2.068 5.740 83.86
AB200-R1a-Fab_Vk20 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCSASQDISNFLNWYQQKPGKAPKLLIYYTSDLHSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYYKLPWTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 154） 12.837 13.521 82.03
AB200-R1a-Fab_Vk21 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCSASQDISNYLNWYQQKPGKAPKLLIYYTSNLHSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCHQYKKTPWTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 155） 32.682 61.435 80.80
AB200-R1a-Fab_Vk22 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQDISNYLNWYQQKPGKAPKLLIYYTSNLHSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYRSIPWTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 156） 2.481 9.914 84.15
AB200-R1a-Fab_Vk23 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCSASQDISNYLNWYQQKPGKAPKLLIYYTSNIHSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYKKMPWTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 157） 16.764 29.693 83.32
AB200-R1a-Fab_Vk24 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCSASNSISNYLNWYQQKPGKAPKLLIYYASNLHSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYRKLPWTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 158） 5.113 14.180 81.41
AB200-R1a-Fab_Vk25 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCSASQDISNYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASNLHSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYRKIPWTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 159） 3.437 13.635 85.93
AB200-R1a-Fab_Vk26 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCSASQDISNYLNWYQQKPGKAPKLLIYYSSSLHIGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYRKLPWTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 160） 5.557 17.858 82.42
AB200-R1a-Fab_Vk27 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCSASQDITNYLNWYQQKPGKAPKLLIYFTSNLHSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYYKLPWTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 161） 6.388 10.655 82.86
AB200-R1a-Fab_Vk28 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCSASQDISNFLNWYQQKPGKAPKLLIYYTSNMHSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYRSLPWTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 162） 4.870 7.573 81.80
AB200-R1a-Fab_Vk29 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCSASHDVSNYLNWYQQKPGKAPKLLIYYTSNLHSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYRRLPWTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 163） 1.547 4.963 82.79
AB200-R1a-Fab_Vk30 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCTASQSISNYINWYQQKPGKAPKLLIYYTSNLHSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYRKLPWTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 164） 1.562 4.777 82.50
AB200-R1a-Fab_Vk31 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCSASQDISNYLNWYQQKPGKAPKLLIYYTSNIHIGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYRKLPWSFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 165） 2.361 8.960 81.68
AB200-R1a-Fab_Vk32 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCSASQDLSNYLNWYQQKPGKAPKLLIYYTSSLHSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYRKTPWTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 166） 11.730 44.701 79.68
AB200-R1a-Fab_Vk33 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCSASQDISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYFTSNLHSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQSRKLPWTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 167） 19.479 37.407 85.36
AB200-R1a-Fab_Vk34 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCSASHDISNYLNWYQQKPGKAPKLLIYYTSNLHSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCHEYRKLPWTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 168） 26.490 74.744 76.90
AB200-R1a-Fab_Vk35 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCSASQDLSNYLNWYQQKPGKAPKLLIYYTSNLHSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYKKIPWTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 169） 7.297 18.913 82.69
AB200-R1a-Fab_Vk36 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCSASQDLSNYLNWYQQKPGKAPKLLIYYTSNLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYRRLPWTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 170） 1.431 5.056 81.26
AB200-R1a-Fab(hCDR1) DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYYTSNLHSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYRKLPWTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 171） 1.580 5.305 82.81
AB200-R1a-Fab(hCDR2) DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCSASQDISNYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYRKLPWTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 172） 2.143 7.143 84.86
AB200-R1a-Fab(hCDR3) DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCSASQDISNYLNWYQQKPGKAPKLLIYYTSNLHSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQSYSTPWTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 173） 82.755 112.654 84.76
**Kd 在200 nM抗原濃度下測定，hsBCMA（人BCMA），RhBCMA（恒河猴BCMA）
[ 表 39]. 重鏈篩選（第 1 輪）： Fab 片段序列
與所列重鏈殖株配對的輕鏈（Fab）胺基酸序列 （AB200_VK6） DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCSATQDISNYLNWYQQKPGKAPKLLIYFTSNLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYRKLPWTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 174）
殖株 ID 重鏈（ Fab ）胺基酸序列 Kd hsBCMA （ nM ） Kd RhBCMA （ nM ） Tm （ °C ）
AB200-R1a-Fab_VH1 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSNYWMHWVRQAPGQGLEWMGATYRGHSETYYNEKFKGRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGAIYHGYDVLDDWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSC（SEQ ID NO: 175） 21.012 32.151 82.955
AB200-R1a-Fab_VH2 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSNYWMHWVRQAPGQGLEWMGATYRGHSDTYYNQKFQGRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGAVFHGYDVLDNWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSC（SEQ ID NO: 176） 2.845 11.102 80.784
AB200-R1a-Fab_VH3 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSNYWMSWVRQAPGQGLEWMGATYRGHSQTYYNQKFKGRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGAVYHGYDVLDNWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSC（SEQ ID NO: 177） 53.078    78.657
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AB200-R1a-Fab_VH53 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSNYWMQWVRQAPGQGLEWMGATYRGHTETYYNQKFKGRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGAIYHGYDVLDNWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSC（SEQ ID NO: 227）       78.416
AB200-R1a-Fab_VH54 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSNYWMHWVRQAPGQGLEWMGATYRGHGDTFYNQKFKGRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGAIYHGYDVLNNWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSC（SEQ ID NO: 228） 12.013 20.810 79.432
AB200-R1a-Fab_VH55 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSTYWMHWVRQAPGQGLEWMGATYRGQSDTYYNQKFKGRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGAIYHGYEVLDNWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSC（SEQ ID NO: 229）       82.925
AB200-R1a-Fab_VH56 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSNYWIHWVRQAPGQGLEWMGATYRGHSDTYYNQKFRGRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGTIYHGYDVLDNWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSC（SEQ ID NO: 230） 20.680 17.994 84.368
AB200-R1a-Fab_VH57 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTYSNYYMHWVRQAPGQGLEWMGATYRGHSETYYNQKFKGRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGAIYHGYDVLDNWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSC（SEQ ID NO: 231） 11.087 11.964 80.273
AB200-R1a-Fab_VH58 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSNYWMSWVRQAPGQGLEWMGATYRGHSNAYYNQKFKGRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGAIYHGYDVLDNWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSC（SEQ ID NO: 232）       78.151
AB200-R1a-Fab_VH59 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKATGGTFSNYAMHWVRQAPGQGLEWMGASYRGHSDTYYNQKFKGRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGAIYHGYDVLDNWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSC（SEQ ID NO: 233） 26.159 28.312 84.514
AB200-R1a-Fab_VH60 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSSYWMHWVRQAPGQGLEWMGATYRIHSDSYYNQKFKGRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGAIYHGYDVLDNWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSC（SEQ ID NO: 234） 13.568 17.766 79.241
**Kd 在200 nM抗原濃度下測定，hsBCMA（人BCMA），RhBCMA（恒河猴BCMA）
[ 表 40]. 輕鏈篩選（第 2 輪）： Fab 片段序列
與所列輕鏈殖株配對的重鏈（Fab）胺基酸序列 （AB200_R1_VH26） QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGSFSNYWMHWVRQAPGQGLEWMGATYRIHSDTFYNQKFKGRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGAIYHGYDVLDNWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSC（SEQ ID NO: 235）
殖株 ID 輕鏈（ Fab ）胺基酸序列 Kd hsBCMA （ nM ） Kd RhBCMA （ nM ） Tm （ °C ）
AB200-R1H26-R2Vk1 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQFRKLPWSFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 236） 2.043    82.409
AB200-R1H26-R2Vk2 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYINWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQFRKLPWSFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 237） 2.369    82.119
AB200-R1H26-R2Vk3 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYATSNLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQFRKLPWSFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 238） 1.623    82.928
AB200-R1H26-R2Vk4 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYATSNIQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQFRKLPWSFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 239） 1.703    81.832
AB200-R1H26-R2Vk5 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYATSNLQIGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQFRKLPWSFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 240） 1.286    82.925
AB200-R1H26-R2Vk6 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYINWYQQKPGKAPKLLIYATSNLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQFRKLPWSFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 241） 2.077    82.640
AB200-R1H26-R2Vk7 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYINWYQQKPGKAPKLLIYATSNIQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQFRKLPWSFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 242） 2.167    81.764
AB200-R1H26-R2Vk8 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYINWYQQKPGKAPKLLIYATSNLQIGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQFRKLPWSFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 243） 1.687    82.921
AB200-R1H26-R2Vk9 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYRRLPWSFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 244） 2.347    79.850
AB200-R1H26-R2Vk10 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYRRIPWTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 245） 3.228    80.527
AB200-R1H26-R2Vk11 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQFRRLPWTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 246） 1.553    82.940
AB200-R1H26-R2Vk12 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYRKIPWSFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 247） 3.724    79.775
AB200-R1H26-R2Vk13 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQFRKIPWTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 248） 3.020    83.187
AB200-R1H26-R2Vk14 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYINWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYRRLPWSFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 249） 2.522    79.433
AB200-R1H26-R2Vk15 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYINWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYRRIPWTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 250） 3.273    80.321
AB200-R1H26-R2Vk16 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYINWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQFRRLPWTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 251） 2.090    83.455
AB200-R1H26-R2Vk17 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYINWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYRKIPWSFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 252） 3.594    78.993
AB200-R1H26-R2Vk18 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYINWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQFRKIPWTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 253） 3.435    82.729
AB200-R1H26-R2Vk19 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYATSNLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYRRLPWSFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 254） 1.623    79.896
AB200-R1H26-R2Vk20 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYATSNLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYRRIPWTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 255） 2.104    81.004
AB200-R1H26-R2Vk21 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYATSNLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQFRRLPWTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 256） 1.275    84.095
AB200-R1H26-R2Vk22 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYATSNLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYRKIPWSFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 257） 2.244    79.661
AB200-R1H26-R2Vk23 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYATSNLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQFRKIPWTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 258） 2.280    83.321
AB200-R1H26-R2Vk24 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYATSNIQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYRRLPWSFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 259） 1.625    79.357
AB200-R1H26-R2Vk25 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYATSNIQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYRRIPWTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 260） 2.044    80.300
AB200-R1H26-R2Vk26 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYATSNIQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQFRRLPWTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 261） 1.456    83.451
AB200-R1H26-R2Vk27 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYATSNIQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYRKIPWSFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 262） 2.332    79.104
AB200-R1H26-R2Vk28 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYATSNIQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQFRKIPWTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 263） 2.680    82.966
AB200-R1H26-R2Vk29 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYATSNLQIGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYRRLPWSFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 264） 1.179    80.138
AB200-R1H26-R2Vk30 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYATSNLQIGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYRRIPWTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 265） 1.741    81.085
AB200-R1H26-R2Vk31 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYATSNLQIGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQFRRLPWTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 266） 1.099    83.337
AB200-R1H26-R2Vk32 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYATSNLQIGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYRKIPWSFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 267） 1.931    80.094
AB200-R1H26-R2Vk33 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYATSNLQIGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQFRKIPWTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 268） 1.737    83.936
AB200-R1H26-R2Vk34 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYINWYQQKPGKAPKLLIYATSNLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYRRLPWSFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 269） 1.548    79.150
AB200-R1H26-R2Vk35 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYINWYQQKPGKAPKLLIYATSNLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYRRIPWTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 270） 1.759    79.657
AB200-R1H26-R2Vk36 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYINWYQQKPGKAPKLLIYATSNLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQFRRLPWTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 271） 1.665    84.360
AB200-R1H26-R2Vk37 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYINWYQQKPGKAPKLLIYATSNLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYRKIPWSFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 272） 2.302    79.374
AB200-R1H26-R2Vk38 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYINWYQQKPGKAPKLLIYATSNLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQFRKIPWTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 273） 2.855    83.791
AB200-R1H26-R2Vk39 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYINWYQQKPGKAPKLLIYATSNIQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYRRLPWSFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 274） 1.835    78.907
AB200-R1H26-R2Vk40 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYINWYQQKPGKAPKLLIYATSNIQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYRRIPWTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 275） 2.337    79.308
AB200-R1H26-R2Vk41 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYINWYQQKPGKAPKLLIYATSNIQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQFRRLPWTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 276） 1.867    83.256
AB200-R1H26-R2Vk42 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYINWYQQKPGKAPKLLIYATSNIQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYRKIPWSFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 277） 2.423    78.411
AB200-R1H26-R2Vk43 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYINWYQQKPGKAPKLLIYATSNIQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQFRKIPWTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 278） 3.228    82.001
AB200-R1H26-R2Vk44 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYINWYQQKPGKAPKLLIYATSNLQIGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYRRLPWSFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 279） 1.282    79.402
AB200-R1H26-R2Vk45 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYINWYQQKPGKAPKLLIYATSNLQIGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYRRIPWTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 280） 1.569    80.255
AB200-R1H26-R2Vk46 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYINWYQQKPGKAPKLLIYATSNLQIGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQFRRLPWTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 281） 1.354    83.993
AB200-R1H26-R2Vk47 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYINWYQQKPGKAPKLLIYATSNLQIGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYRKIPWSFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 282） 1.726    78.634
AB200-R1H26-R2Vk48 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYINWYQQKPGKAPKLLIYATSNLQIGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQFRKIPWTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 283） 2.307    83.862
[ 表 41]. 輕鏈篩選（第 2 輪）： Fab 片段序列
與所列輕鏈殖株配對的重鏈（Fab）胺基酸序列 （AB200_R1_VH32） QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSNYWMHWVRQAPGQGLEWMGATYRSHSDTYYNQKFKSRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGAIYHGYDVIDNWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSC（SEQ ID NO: 284）
殖株 ID 輕鏈（ Fab ）胺基酸序列 Kd hsBCMA （ nM ） Kd RhBCMA （ nM ） Tm （ °C ）
AB200-R1H32-R2Vk1 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQFRKLPWSFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 285） 1.267 5.418 79.956
AB200-R1H32-R2Vk2 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYINWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQFRKLPWSFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 286） 1.476 5.498 79.715
AB200-R1H32-R2Vk3 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYATSNLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQFRKLPWSFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 287） 1.007 4.375 80.665
AB200-R1H32-R2Vk4 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYATSNIQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQFRKLPWSFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 288） 1.144 5.599 79.449
AB200-R1H32-R2Vk5 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYATSNLQIGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQFRKLPWSFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 289） 0.882 5.661 80.573
AB200-R1H32-R2Vk6 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYINWYQQKPGKAPKLLIYATSNLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQFRKLPWSFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 290） 1.226 4.631 79.773
AB200-R1H32-R2Vk7 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYINWYQQKPGKAPKLLIYATSNIQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQFRKLPWSFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 291） 1.266 4.995 79.001
AB200-R1H32-R2Vk8 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYINWYQQKPGKAPKLLIYATSNLQIGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQFRKLPWSFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 292） 0.920 3.589 80.002
AB200-R1H32-R2Vk9 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYRRLPWSFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 293） 1.428 7.379 78.040
AB200-R1H32-R2Vk10 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYRRIPWTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 294） 2.104 7.858 78.238
AB200-R1H32-R2Vk11 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQFRRLPWTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 295） 0.936 4.104 80.494
AB200-R1H32-R2Vk12 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYRKIPWSFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 296） 1.530 9.118 77.686
AB200-R1H32-R2Vk13 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQFRKIPWTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 297） 2.197 6.590 80.777
AB200-R1H32-R2Vk14 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYINWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYRRLPWSFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 298） 1.323 6.049 77.375
AB200-R1H32-R2Vk15 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYINWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYRRIPWTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 299） 1.287 6.413 77.827
AB200-R1H32-R2Vk16 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYINWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQFRRLPWTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 300） 1.172 4.536 80.595
AB200-R1H32-R2Vk17 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYINWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYRKIPWSFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 301） 1.430 7.492 76.415
AB200-R1H32-R2Vk18 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYINWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQFRKIPWTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 302） 1.519 6.300 79.872
AB200-R1H32-R2Vk19 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYATSNLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYRRLPWSFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 303） 0.946 4.565 77.794
AB200-R1H32-R2Vk20 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYATSNLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYRRIPWTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 304） 0.867 4.815 78.369
AB200-R1H32-R2Vk21 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYATSNLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQFRRLPWTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 305） 0.800 3.314 81.462
AB200-R1H32-R2Vk22 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYATSNLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYRKIPWSFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 306） 1.058 5.639 77.373
AB200-R1H32-R2Vk23 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYATSNLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQFRKIPWTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 307） 1.130 5.084 80.935
AB200-R1H32-R2Vk24 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYATSNIQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYRRLPWSFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 308） 1.054 4.895 77.417
AB200-R1H32-R2Vk25 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYATSNIQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYRRIPWTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 309） 1.037 5.623 77.737
AB200-R1H32-R2Vk26 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYATSNIQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQFRRLPWTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 310） 1.064 3.846 80.637
AB200-R1H32-R2Vk27 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYATSNIQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYRKIPWSFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 311） 1.205 6.901 76.729
AB200-R1H32-R2Vk28 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYATSNIQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQFRKIPWTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 312） 1.185 5.993 79.945
AB200-R1H32-R2Vk29 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYATSNLQIGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYRRLPWSFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 313） 1.141 3.690 77.447
AB200-R1H32-R2Vk30 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYATSNLQIGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYRRIPWTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 314） 0.816 3.915 78.131
AB200-R1H32-R2Vk31 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYATSNLQIGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQFRRLPWTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 315） 0.665 2.821 81.248
AB200-R1H32-R2Vk32 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYATSNLQIGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYRKIPWSFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 316） 0.873 4.825 77.189
AB200-R1H32-R2Vk33 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYATSNLQIGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQFRKIPWTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 317） 0.996 4.289 81.061
AB200-R1H32-R2Vk34 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYINWYQQKPGKAPKLLIYATSNLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYRRLPWSFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 318） 1.123 4.531 76.682
AB200-R1H32-R2Vk35 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYINWYQQKPGKAPKLLIYATSNLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYRRIPWTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 319） 0.843 4.130 77.177
AB200-R1H32-R2Vk36 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYINWYQQKPGKAPKLLIYATSNLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQFRRLPWTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 320） 0.830 3.451 81.115
AB200-R1H32-R2Vk37 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYINWYQQKPGKAPKLLIYATSNLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYRKIPWSFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 321） 0.850 4.405 76.708
AB200-R1H32-R2Vk38 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYINWYQQKPGKAPKLLIYATSNLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQFRKIPWTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 322） 1.153 5.351 80.727
AB200-R1H32-R2Vk39 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYINWYQQKPGKAPKLLIYATSNIQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYRRLPWSFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 323） 1.063 4.758 76.077
AB200-R1H32-R2Vk40 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYINWYQQKPGKAPKLLIYATSNIQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYRRIPWTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 324） 1.032 5.079 76.379
AB200-R1H32-R2Vk41 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYINWYQQKPGKAPKLLIYATSNIQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQFRRLPWTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 325） 1.185 4.261 79.593
AB200-R1H32-R2Vk42 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYINWYQQKPGKAPKLLIYATSNIQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYRKIPWSFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 326） 1.045 5.930 75.027
AB200-R1H32-R2Vk43 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYINWYQQKPGKAPKLLIYATSNIQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQFRKIPWTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 327） 1.295 9.196 78.820
AB200-R1H32-R2Vk44 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYINWYQQKPGKAPKLLIYATSNLQIGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYRRLPWSFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 328） 0.710 3.322 76.359
AB200-R1H32-R2Vk45 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYINWYQQKPGKAPKLLIYATSNLQIGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYRRIPWTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 329） 0.714 3.335 77.096
AB200-R1H32-R2Vk46 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYINWYQQKPGKAPKLLIYATSNLQIGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQFRRLPWTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 330） 0.778 2.977 80.803
AB200-R1H32-R2Vk47 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYINWYQQKPGKAPKLLIYATSNLQIGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYRKIPWSFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 331） 0.766 3.914 75.976
[ 表 42]. 重鏈篩選（第 2 輪）： Fab 片段序列
與所列重鏈殖株配對的輕鏈（Fab）胺基酸序列 （AB200-(2Vk30)） DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYATSNLQIGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYRRIPWTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 332）
殖株 ID 重鏈（ Fab ）胺基酸序列 Kd hsBCMA （ nM ） Kd RhBCMA （ nM ） Tm （ °C ）
AB200-(2Vk30)_R2-VH-v10 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTYSNYWIHWVRQAPGQGLEWMGATYRSHSDTNYNQKYKSRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGAIYHGYDVIENWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSC（SEQ ID NO: 333） 85.81 329.65 77.313
AB200-(2Vk30)_R2-VH-v13 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGSFSNYWIHWVRQAPGQGLEWMGGTYRSHSDTYYAQKFKSRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGAIYHGYDVIENWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSC（SEQ ID NO: 334） 44.69 144.02 78.570
AB200-(2Vk30)_R2-VH-v16 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGSFSNYWIHWVRQAPGQGLEWMGGTYRSHSDTNYNQKFKSRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGAIFHGYDVIDNWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSC（SEQ ID NO: 335） 74.60 177.60 78.165
AB200-(2Vk30)_R2-VH-v19 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSNYWIHWVRQAPGQGLEWMGGTYRSHSTTYYNQKFKSRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGAIYHGFDVIDNWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSC（SEQ ID NO: 336） 14.58 25.36 82.102
AB200-(2Vk30)_R2-VH-v23 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSNYWIHWVRQAPGQGLEWMGGTYRSHSDTYYNQKYKSRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGAIFHGYDVIDNWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSC（SEQ ID NO: 337） 6.89 25.91 79.432
AB200-(2Vk30)_R2-VH-v30 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSNYWIHWVRQAPGQGLEWMGATYRSHSDTNYAQKFKSRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGAIYHGYDVIENWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSC（SEQ ID NO: 338） 50.40 140.75 77.090
AB200-(2Vk30)_R2-VH-v31 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSNYWIHWVRQAPGQGLEWMGATYRSQSDTNYNQKFKSRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGAVYHGYDVIDNWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSC（SEQ ID NO: 339） 12.95 38.35 79.955
AB200-(2Vk30)_R2-VH-v37 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSNYWIHWVRQAPGQGLEWMGATYRSQSDTYYNQKYKSRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGAVYHGYDVIDNWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSC（SEQ ID NO: 340） 0.81 6.05 81.855
AB200-(2Vk30)_R2-VH-v39 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFTNYWIHWVRQAPGQGLEWMGATYRIHSDTYYAEKFKSRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGAIFHGYDVIDNWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSC（SEQ ID NO: 341） 3.00 15.36 78.621
AB200-(2Vk30)_R2-VH-v4 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFTNYWIHWVRQAPGQGLEWMGATYRSHSDTNYAQKFKSRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGAIYHGYDVIENWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSC（SEQ ID NO: 342） 46.42 125.39 77.268
AB200-(2Vk30)_R2-VH-v40 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFTNYWIHWVRQAPGQGLEWMGATYRIHSTTYYAQKFKSRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGAIYHGFDVIDNWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSC（SEQ ID NO: 343） 15.52 32.53 79.807
AB200-(2Vk30)_R2-VH-v43 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFTNYWIHWVRQAPGQGLEWMGGTYRIHSDTYYAQKFKSRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGAIYHGFDVIDNWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSC（SEQ ID NO: 344） 6.82 25.79 77.757
AB200-(2Vk30)_R2-VH-v45 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTYSNYWIHWVRQAPGQGLEWMGATYRIHSTTNYNQKFKSRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGAIFHGYDVIDNWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSC（SEQ ID NO: 345） 720.35 3076.46 78.131
AB200-(2Vk30)_R2-VH-v51 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGSFSNYWIHWVRQAPGQGLEWMGGTYRIQSDTYYNQKFKSRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGAIYHGYDVIENWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSC（SEQ ID NO: 346） 20.27 68.94 79.046
AB200-(2Vk30)_R2-VH-v59 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSNYWIHWVRQAPGQGLEWMGGTYRIHSDTYYAQKFKSRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGAIYHGYDVIENWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSC（SEQ ID NO: 347） 37.81 121.28 77.316
AB200-(2Vk30)_R2-VH-v65 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSNYWIHWVRQAPGQGLEWMGATYRIQSTTYYNQKFKSRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGAIYHGFDVIDNWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSC（SEQ ID NO: 348） 27.32 46.80 81.557
AB200-(2Vk30)_R2-VH-v67 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSNYWIHWVRQAPGQGLEWMGATYRIHSTTYYNEKFKSRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGAVYHGYDVIDNWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSC（SEQ ID NO: 349） 16.82 35.67 82.324
AB200-(2Vk30)_R2-VH-v71 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSNYWIHWVRQAPGQGLEWMGATYRIHSDTNYNEKFKSRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGAIFHGYDVIDNWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSC（SEQ ID NO: 350） 29.66 64.08 77.820
AB200-(2Vk30)_R2-VH-v74 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSNYWIHWVRQAPGQGLEWMGATYRIHSDTYYAEKFKSRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGAIYHGFDVIDNWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSC（SEQ ID NO: 351） 2.17 9.83 78.953
hsBCMA = 人BCMA；RhBCMA = 恒河猴BCMA
[ 表 43]. 重鏈篩選（第 2 輪）： Fab 片段序列
與所列重鏈殖株配對的輕鏈（Fab）胺基酸序列 （AB200-(2Vk31)） DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYATSNLQIGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQFRRLPWTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 352）
殖株 ID 重鏈（ Fab ）胺基酸序列 Kd hsBCMA （ nM ） Kd RhBCMA （ nM ） Tm （ °C ）
AB200-(2Vk31)_R2-VH-v12 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTYSNYWIHWVRQAPGQGLEWMGATYRSHSTTYYNQKYKSRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGAIYHGFDVIDNWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSC（SEQ ID NO: 353） 12.99 18.36 83.892
AB200-(2Vk31)_R2-VH-v17 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGSFSNYWIHWVRQAPGQGLEWMGATYRSQSDTYYAQKFKSRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGAIFHGYDVIDNWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSC（SEQ ID NO: 354） 5.77 16.94 81.682
AB200-(2Vk31)_R2-VH-v18 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGSFSNYWIHWVRQAPGQGLEWMGATYRSHSDTYYAEKFKSRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGAVYHGYDVIDNWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSC（SEQ ID NO: 355） 3.55 14.88 83.629
AB200-(2Vk31)_R2-VH-v2 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFTNYWIHWVRQAPGQGLEWMGATYRSHSTTNYNQKFKSRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGAVYHGYDVIDNWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSC（SEQ ID NO: 356） 25.01 55.61 84.104
AB200-(2Vk31)_R2-VH-v20 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSNYWIHWVRQAPGQGLEWMGGTYRSHSDTNYNQKFKSRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGAIYHGYDVIENWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSC（SEQ ID NO: 357） 42.04 93.83 81.245
AB200-(2Vk31)_R2-VH-v21 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSNYWIHWVRQAPGQGLEWMGGTYRSHSDTYYAQKFKSRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGAIFHGYDVIDNWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSC（SEQ ID NO: 358） 10.74 29.66 81.367
AB200-(2Vk31)_R2-VH-v25 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSNYWIHWVRQAPGQGLEWMGATYRSHSTTNYNQKFKSRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGAIYHGFDVIDNWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSC（SEQ ID NO: 359） 32.80 57.27 83.328
AB200-(2Vk31)_R2-VH-v27 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSNYWIHWVRQAPGQGLEWMGATYRSQSTTYYNQKFKSRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGAVYHGYDVIDNWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSC（SEQ ID NO: 360） 7.13 15.28 86.016
AB200-(2Vk31)_R2-VH-v29 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSNYWIHWVRQAPGQGLEWMGATYRSHSTTYYNEKFKSRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGAIYHGFDVIDNWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSC（SEQ ID NO: 361） 6.02 9.34 85.764
AB200-(2Vk31)_R2-VH-v3 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFTNYWIHWVRQAPGQGLEWMGGTYRSHSTTYYNQKFKSRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGAVYHGYDVIDNWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSC（SEQ ID NO: 362） 2.55 5.73 85.949
AB200-(2Vk31)_R2-VH-v33 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSNYWIHWVRQAPGQGLEWMGATYRSHSDTNYNEKFKSRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGAIYHGYDVIENWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSC（SEQ ID NO: 363） 46.02 50.37 81.852
AB200-(2Vk31)_R2-VH-v34 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSNYWIHWVRQAPGQGLEWMGATYRSQSDTYYAQKFKSRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGAIYHGYDVIENWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSC（SEQ ID NO: 364） 5.13 18.00 81.638
AB200-(2Vk31)_R2-VH-v42 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFTNYWIHWVRQAPGQGLEWMGGTYRIHSDTYYNQKYKSRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGAIFHGYDVIDNWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSC（SEQ ID NO: 365） 4.33 23.48 81.487
AB200-(2Vk31)_R2-VH-v47 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTYSNYWIHWVRQAPGQGLEWMGATYRIHSTTYYNEKFKSRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGAIFHGYDVIDNWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSC（SEQ ID NO: 366） 17.70 15.91 82.826
AB200-(2Vk31)_R2-VH-v5 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFTNYWIHWVRQAPGQGLEWMGGTYRSHSDTYYNEKFKSRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGAIFHGYDVIDNWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSC（SEQ ID NO: 367） 3.65 10.42 83.838
AB200-(2Vk31)_R2-VH-v50 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTYSNYWIHWVRQAPGQGLEWMGGTYRIHSDTNYNQKFKSRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGAIYHGYDVIENWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSC（SEQ ID NO: 368） 90.02 195.63 79.146
AB200-(2Vk31)_R2-VH-v57 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSNYWIHWVRQAPGQGLEWMGGTYRIHSTTYYNQKFKSRVTITADESTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGAVYHGYDVIDNWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSC（SEQ ID NO: 369） 11.87 20.82 85.597
AB200-(2Vk31)_R2-VH-v66 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSNYWIHWVRQAPGQGLEWMGATYRIHSTTYYNQKYKSRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGAIFHGYDVIDNWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSC（SEQ ID NO: 370） 13.74 20.80 82.876
AB200-(2Vk31)_R2-VH-v73 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSNYWIHWVRQAPGQGLEWMGATYRIHSDTYYAQKYKSRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGAVYHGYDVIDNWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSC（SEQ ID NO: 371） 1.32 7.72 81.181
AB200-(2Vk31)_R2-CDR1-hs-v3 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSSYAISWVRQAPGQGLEWMGATYRSQSDTYYNQKYKSRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGAVYHGYDVIDNWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSC（SEQ ID NO: 372） 319.28 540.37 78.565
AB200-(2Vk31)_R2-CDR2-hs-v1 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFTNYWIHWVRQAPGQGLEWMGGIIPIFGTANYAQKFQGRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGAIFHGYDVIDNWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSC（SEQ ID NO: 373） 240.90 448.44 85.076
AB200-(2Vk31)_R2-CDR2-hs-v3 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFTNYWIHWVRQAPGQGLEWMGGIIPIFGTANYAQKFQGRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGAVYHGYDVIDNWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSC（SEQ ID NO: 374） 126.44 215.56 85.503
AB200-(2Vk31)_R2-CDR3-hs-v1 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSSYAISWVRQAPGQGLEWMGGIIPIFGTANYAQKFQGRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGAIFHGYDVIDNWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSC（SEQ ID NO: 375） ND ND 80.084
AB200-(2Vk31)_R2-CDR3-hs-v2 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSSYAISWVRQAPGQGLEWMGGIIPIFGTANYAQKFQGRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGAVYHGYDVIDNWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSC（SEQ ID NO: 376） ND ND 80.752
AB200-(2Vk31)_R2-CDR3-hs-v4 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSSYAISWVRQAPGQGLEWMGGIIPIFGTANYAQKFQGRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGAIYHGFDVIDNWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSC（SEQ ID NO: 377） ND ND 80.378
ND = 無數據；hsBCMA = 人BCMA；RhBCMA = 恒河猴BCMA
[ 表 44]. 重鏈篩選（第 2 輪）： Fab 片段序列
與所列重鏈殖株配對的輕鏈（Fab）胺基酸序列 （AB200-(2Vk8)） DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYINWYQQKPGKAPKLLIYATSNLQIGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQFRKLPWSFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 378）
殖株 ID 重鏈（ Fab ）胺基酸序列 Kd hsBCMA （ nM ） Kd RhBCMA （ nM ） Tm （ °C ）
AB200-(2Vk8)_R2-CDR1-hs-v1 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSSYAISWVRQAPGQGLEWMGATYRSQSDTYYNQKYKSRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGAIFHGYDVIDNWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSC（SEQ ID NO: 379） ND ND 75.408
AB200-(2Vk8)_R2-CDR1-hs-v2 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSSYAISWVRQAPGQGLEWMGATYRSQSDTFYNQKFKSRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGAIFHGYDVIDNWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSC（SEQ ID NO: 380） ND ND 75.669
AB200-(2Vk8)_R2-CDR1-hs-v4 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSSYAISWVRQAPGQGLEWMGATYRSQSDTFYNQKFKSRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGAVYHGYDVIDNWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSC（SEQ ID NO: 381） 591.47 773.13 76.495
AB200-(2Vk8)_R2-CDR2-hs-v2 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGSFSNYWIHWVRQAPGQGLEWMGGIIPIFGTANYAQKFQGRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGAIFHGYDVIDNWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSC（SEQ ID NO: 382） 151.14 ND 85.175
AB200-(2Vk8)_R2-CDR2-hs-v4 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGSFSNYWIHWVRQAPGQGLEWMGGIIPIFGTANYAQKFQGRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGAVYHGYDVIDNWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSC（SEQ ID NO: 383） ND ND 84.950
AB200-(2Vk8)_R2-CDR3-hs-v3 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSSYAISWVRQAPGQGLEWMGGIIPIFGTANYAQKFQGRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGAIYHGYDVIENWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSC（SEQ ID NO: 384） ND ND 78.450
ND = 無數據；hsBCMA = 人BCMA；RhBCMA = 恒河猴BCMA
[ 表 45]. 重鏈篩選（第 2 輪）： Fab 片段序列
與所列重鏈殖株配對的輕鏈（Fab）胺基酸序列 （AB200-(2Vk35)） DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYINWYQQKPGKAPKLLIYATSNLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYRRIPWTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 385）
殖株 ID 重鏈（ Fab ）胺基酸序列 Kd hsBCMA （ nM ） Kd RhBCMA （ nM ） Tm （ °C ）
AB200-(2Vk35)_R2-VH-v11 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTYSNYWIHWVRQAPGQGLEWMGATYRSHSDTNYNEKFKSRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGAVYHGYDVIDNWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSC（SEQ ID NO: 386） 46.99 129.98 77.406
AB200-(2Vk35)_R2-VH-v15 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGSFSNYWIHWVRQAPGQGLEWMGATYRSQSTTYYNQKFKSRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGAIFHGYDVIDNWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSC（SEQ ID NO: 387） 25.52 48.60 80.901
AB200-(2Vk35)_R2-VH-v26 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSNYWIHWVRQAPGQGLEWMGATYRSHSTTYYAQKFKSRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGAIFHGYDVIDNWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSC（SEQ ID NO: 388） 20.95 40.69 78.816
AB200-(2Vk35)_R2-VH-v32 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSNYWIHWVRQAPGQGLEWMGATYRSHSDTNYNQKYKSRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGAIFHGYDVIDNWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSC（SEQ ID NO: 389） 29.06 67.26 77.066
AB200-(2Vk35)_R2-VH-v36 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSNYWIHWVRQAPGQGLEWMGATYRSHSDTYYAEKFKSRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGAIFHGYDVIDNWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSC（SEQ ID NO: 390） 3.15 14.82 78.599
AB200-(2Vk35)_R2-VH-v38 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSNYWIHWVRQAPGQGLEWMGATYRSQSDTYYNEKFKSRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGAIYHGFDVIDNWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSC（SEQ ID NO: 391） 1.89 9.59 81.457
AB200-(2Vk35)_R2-VH-v46 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTYSNYWIHWVRQAPGQGLEWMGATYRIQSDTNYNQKFKSRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGAIYHGYDVIENWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSC（SEQ ID NO: 392） 102.71 287.03 76.222
AB200-(2Vk35)_R2-VH-v48 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTYSNYWIHWVRQAPGQGLEWMGGTYRIHSTTYYNQKFKSRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGAIYHGFDVIDNWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSC（SEQ ID NO: 393） 36.62 51.98 78.848
AB200-(2Vk35)_R2-VH-v49 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTYSNYWIHWVRQAPGQGLEWMGATYRIQSTTYYNQKFKSRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGAIYHGYDVIENWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSC（SEQ ID NO: 394） 63.22 126.40 79.187
AB200-(2Vk35)_R2-VH-v52 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGSFSNYWIHWVRQAPGQGLEWMGATYRIQSDTYYAQKFKSRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGAIFHGYDVIDNWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSC（SEQ ID NO: 395） 6.24 25.69 76.770
AB200-(2Vk35)_R2-VH-v55 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGSFSNYWIHWVRQAPGQGLEWMGATYRIHSTTYYNQKYKSRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGAVYHGYDVIDNWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSC（SEQ ID NO: 396） 19.74 43.13 80.450
AB200-(2Vk35)_R2-VH-v56 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGSFSNYWIHWVRQAPGQGLEWMGATYRIHSDTYYAQKYKSRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGAIFHGYDVIDNWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSC（SEQ ID NO: 397） 11.35 44.71 77.030
AB200-(2Vk35)_R2-VH-v6 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFTNYWIHWVRQAPGQGLEWMGATYRSHSDTYYAQKYKSRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGAVYHGYDVIDNWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSC（SEQ ID NO: 398） 1.29 9.36 77.987
AB200-(2Vk35)_R2-VH-v62 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSNYWIHWVRQAPGQGLEWMGGTYRIHSDTYYNEKFKSRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGAIYHGYDVIENWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSC（SEQ ID NO: 399） 14.54 48.96 78.430
AB200-(2Vk35)_R2-VH-v63 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSNYWIHWVRQAPGQGLEWMGATYRIHSTTNYNQKFKSRVTITADESTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGAVYHGYDVIDNWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSC（SEQ ID NO: 400） 27.08 9.56 80.226
AB200-(2Vk35)_R2-VH-v69 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSNYWIHWVRQAPGQGLEWMGATYRIQSDTNYNQKFKSRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGAVYHGYDVIDNWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSC（SEQ ID NO: 401） 16.22 46.58 77.807
AB200-(2Vk35)_R2-VH-v76 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSNYWIHWVRQAPGQGLEWMGATYRIQSDTYYNEKFKSRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGAIYHGFDVIDNWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSC（SEQ ID NO: 402） 1.93 8.46 79.284
AB200-(2Vk35)_R2-VH-v8 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTYSNYWIHWVRQAPGQGLEWMGGTYRSQSDTYYNQKFKSRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGAIYHGFDVIDNWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSC（SEQ ID NO: 403） 12.07 37.98 78.223
AB200-(2Vk35)_R2-VH-v9 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTYSNYWIHWVRQAPGQGLEWMGATYRSQSDTNYNQKFKSRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGAIYHGFDVIDNWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSC（SEQ ID NO: 404） 49.32 102.63 76.997
hsBCMA = 人BCMA；RhBCMA = 恒河猴BCMA
[ 表 46]. 重鏈篩選（第 2 輪）： Fab 片段序列
與所列重鏈殖株配對的輕鏈（Fab）胺基酸序列 （AB200-(2Vk44)） DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYINWYQQKPGKAPKLLIYATSNLQIGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYRRLPWSFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（SEQ ID NO: 405）
殖株 ID 重鏈（ Fab ）胺基酸序列 Kd hsBCMA （ nM ） Kd RhBCMA （ nM ） Tm （ °C ）
AB200-(2Vk44)_R2-VH-v1 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFTNYWIHWVRQAPGQGLEWMGGTYRSHSDTYYNQKYKSRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGAIYHGYDVIENWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSC（SEQ ID NO: 406） 11.79 40.05 78.407
AB200-(2Vk44)_R2-VH-v14 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGSFSNYWIHWVRQAPGQGLEWMGATYRSHSTTYYNEKFKSRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGAVYHGYDVIDNWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSC（SEQ ID NO: 407） 7.55 16.86 81.915
AB200-(2Vk44)_R2-VH-v22 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSNYWIHWVRQAPGQGLEWMGGTYRSQSDTYYNQKFKSRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGAVYHGYDVIDNWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSC（SEQ ID NO: 408） 2.31 11.09 79.696
AB200-(2Vk44)_R2-VH-v24 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSNYWIHWVRQAPGQGLEWMGGTYRSHSDTYYNEKFKSRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGAIFHGYDVIDNWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSC（SEQ ID NO: 409） 6.44 20.82 79.156
AB200-(2Vk44)_R2-VH-v28 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSNYWIHWVRQAPGQGLEWMGATYRSHSTTYYNQKYKSRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGAIYHGFDVIDNWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSC（SEQ ID NO: 410） 10.93 20.88 80.311
AB200-(2Vk44)_R2-VH-v35 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSNYWIHWVRQAPGQGLEWMGATYRSHSDTYYAQKYKSRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGAIYHGYDVIENWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSC（SEQ ID NO: 411） 16.23 52.82 76.189
AB200-(2Vk44)_R2-VH-v41 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFTNYWIHWVRQAPGQGLEWMGGTYRIHSDTYYNEKFKSRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGAIYHGFDVIDNWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSC（SEQ ID NO: 412） 3.73 12.59 78.286
AB200-(2Vk44)_R2-VH-v44 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFTNYWIHWVRQAPGQGLEWMGATYRIHSDTNYAQKFKSRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGAIYHGYDVIENWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSC（SEQ ID NO: 413） 86.40 289.55 74.070
AB200-(2Vk44)_R2-VH-v53 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGSFSNYWIHWVRQAPGQGLEWMGATYRIHSDTNYNQKYKSRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGAIFHGYDVIDNWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSC（SEQ ID NO: 414） 52.45 103.16 75.218
AB200-(2Vk44)_R2-VH-v54 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGSFSNYWIHWVRQAPGQGLEWMGATYRIHSDTNYNEKFKSRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGAIYHGYDVIENWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSC（SEQ ID NO: 415） 68.85 150.52 75.912
AB200-(2Vk44)_R2-VH-v58 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSNYWIHWVRQAPGQGLEWMGGTYRIHSDTNYNQKFKSRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGAIYHGFDVIDNWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSC（SEQ ID NO: 416） 27.20 52.61 75.513
AB200-(2Vk44)_R2-VH-v60 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSNYWIHWVRQAPGQGLEWMGGTYRIQSDTYYNQKFKSRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGAIYHGYDVIENWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSC（SEQ ID NO: 417） 11.09 38.57 77.692
AB200-(2Vk44)_R2-VH-v61 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSNYWIHWVRQAPGQGLEWMGGTYRIHSDTYYNQKYKSRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGAIYHGYDVIENWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSC（SEQ ID NO: 418） 19.20 59.60 76.850
AB200-(2Vk44)_R2-VH-v64 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSNYWIHWVRQAPGQGLEWMGATYRIHSTTYYAQKFKSRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGAIYHGFDVIDNWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSC（SEQ ID NO: 419） 22.07 36.52 77.787
AB200-(2Vk44)_R2-VH-v68 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSNYWIHWVRQAPGQGLEWMGATYRIHSDTNYAQKFKSRVTITADESTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGAIYHGFDVIDNWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSC（SEQ ID NO: 420） 60.30 109.51 75.716
AB200-(2Vk44)_R2-VH-v7 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTYSNYWIHWVRQAPGQGLEWMGATYRSHSTTYYAQKFKSRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGAIYHGFDVIDNWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSC（SEQ ID NO: 421） 40.65 71.65 77.428
AB200-(2Vk44)_R2-VH-v70 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSNYWIHWVRQAPGQGLEWMGATYRIHSDTNYNQKYKSRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGAVYHGYDVIDNWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSC（SEQ ID NO: 422） 12.37 35.80 76.335
AB200-(2Vk44)_R2-VH-v72 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSNYWIHWVRQAPGQGLEWMGATYRIQSDTYYAQKFKSRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGAVYHGYDVIDNWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSC（SEQ ID NO: 423） 2.16 12.43 77.278
AB200-(2Vk44)_R2-VH-v75 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSNYWIHWVRQAPGQGLEWMGATYRIQSDTYYNQKYKSRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGAVYHGYDVIDNWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSC（SEQ ID NO: 424） 0.80 5.22 78.398
hsBCMA = 人BCMA；RhBCMA = 恒河猴BCMA
本揭露要求2020年6月5日提交的美國臨時專利申請案號62/704,997之優先權權益，將其藉由引用以其全文併入本文。
本申請含有已以ASCII格式以電子方式提交且藉由引用以其整體併入本文之序列表。創建於2021年5月28日的所述ASCII副本名稱為15647_0012-00304_SL.txt並且大小為698,277位元組。
[ 圖 1] 顯示流動式細胞測量術評估抗BCMA抗體對NCI-H929人骨髓瘤細胞系（高BCMA表現）之結合親和力。
[ 圖 2] 顯示流動式細胞測量術評估抗BCMA抗體對OPM2人骨髓瘤細胞系（中等BCMA表現）之結合親和力。
[ 圖 3] 顯示流動式細胞測量術評估抗BCMA ADC對Raji人柏基特氏淋巴瘤細胞系（低BCMA表現）之結合親和力。
[ 圖 4] 顯示流動式細胞測量術評估抗BCMA ADC對NCI-H929人骨髓瘤細胞系之結合親和力。
[ 圖 5] 顯示受ADC處理影響的基因中可能的mRNA剪接變化。不希望受理論束縛，該等可能的mRNA剪接變化可能包括增加的預成熟mRNA（內含子滯留）積累、外顯子跳讀事件和/或異常連接（AJ）的表現，伴隨著正確剪接（成熟）的mRNA和具有規範連接（CJ）的mRNA的表現降低。
[ 圖 6A-6D] 顯示對用AB200抗體或AB200-ADL5-D4治療的OPM2腫瘤中的四種示例性基因（FBXW5 （圖 6A ）、PLEKHJ1 （圖 6B ）、DYNLT1 （圖 6C ）和UBA2 （圖 6D ））的mRNA剪接調節。示出了成熟mRNA（FBXW5-mat、PLEKHJ1-mat和DYNLT1-mat）、pre-mRNA種類（FBXW5-pre、PLEKHJ1-pre_2和DYNLT1-pre）、具有規範剪接位點的mRNA（UBA2_CJ_1）和具有異常剪接位點（UBA2_AJ_4）的mRNA。
[ 圖 7A-7D] 顯示對用AB200抗體或AB200-ADL1-D2治療的MOLP8腫瘤中的四種示例性基因（FBXW5 （圖 7A ）、PLEKHJ1 （圖 7B ）、DYNLT1 （圖 7C ）和UBA2 （圖 7D ））的mRNA剪接調節。示出了成熟mRNA（FBXW5-mat、PLEKHJ1-mat和DYNLT1-mat）、pre-mRNA種類（FBXW5-pre、PLEKHJ1-pre_2和DYNLT1-pre）、具有規範剪接位點的mRNA（UBA2_CJ_1）和具有異常剪接位點（UBA2_AJ_4）的mRNA。
[ 圖 8A-8D] 顯示對用AB200抗體、AB212-ADL1-D1或AB212-ADL1-D2治療的OPM2腫瘤中的四種示例性基因（FBXW5 （圖 8A ）、PLEKHJ1 （圖 8B ）、DYNLT1 （圖 8C ）和UBA2 （圖 8D ））的mRNA剪接調節。示出了成熟mRNA（FBXW5-mat、PLEKHJ1-mat和DYNLT1-mat）、pre-mRNA種類（FBXW5-pre、PLEKHJ1-pre_2和DYNLT1-pre）、具有規範剪接位點的mRNA（UBA2_CJ_1）和具有異常剪接位點（UBA2_AJ_4）的mRNA。
[ 圖 9] 顯示示例性抗BCMA抗體（AB214）在OPM2異種移植模型中之體內抗癌活性（研究1）。
[ 圖 10] 顯示示例性抗BCMA抗體（AB212、AB217和AB218）在OPM2異種移植模型中之體內抗癌活性（研究2）。
[ 圖 11] 顯示示例性抗BCMA ADC在OPM2異種移植模型中之體內抗癌活性（研究1）。
[ 圖 12] 顯示示例性抗BCMA ADC在OPM2異種移植模型中之體內抗癌活性（研究2）。
[ 圖 13] 顯示示例性抗BCMA ADC在OPM2異種移植模型中之體內抗癌活性（研究3）。
[ 圖 14] 顯示示例性抗BCMA ADC在OPM2異種移植模型中之體內抗癌活性（研究4）。
[ 圖 15] 顯示示例性抗BCMA ADC在MOLP8異種移植模型中之體內抗癌活性（研究1）。
[ 圖 16] 顯示示例性抗BCMA ADC在MOLP8異種移植模型中之體內抗癌活性（研究2）。
[ 圖 17A-17D] 顯示AB216-ADL1-D1（y軸）和AB200-ADL10-MMAF（x軸）對一組11種人骨髓瘤細胞系的體外細胞毒性。GI50 、LD50 、曲線下面積（AUC）和活細胞減少最大百分比（Rmin Ave）的值分別顯示在圖 17A-17D 中。
[ 圖 18] 顯示在正常血清條件下，在NCI-H929人骨髓瘤細胞中，在6天的CellTiter-Glo®細胞活力測定中，對AB216-ADL1-D1和AB200-ADL10-MMAF活性的評估。
[ 圖 19A-19B] 顯示在低血清條件下，在NCI-H929人骨髓瘤細胞中，AB216-ADL1-D1和AB200-ADL10-MMAF的6天CellTiter-Glo®細胞活力評估的生物學重複。圖 19A （實驗重複#1）和圖 19B （實驗重複#2）各自顯示在低血清條件下，用AB216-ADL1-D1或AB200-ADL10-MMAF處理的NCI-H929人骨髓瘤細胞在第6天的相對增殖，作為時間匹配的未處理對照的百分比（%）。
[ 圖 20] 顯示在正常血清條件下，在OPM2人骨髓瘤細胞中，在6天的CellTiter-Glo®細胞活力測定中，對AB216-ADL1-D1和AB200-ADL10-MMAF活性的評估。
[ 圖 21A-21B] 顯示在低血清條件下，在OPM2人骨髓瘤細胞中，AB216-ADL1-D1和AB200-ADL10-MMAF的6天CellTiter-Glo®細胞活力評估的生物學重複。圖 21A （實驗重複#1）和圖 21B （實驗重複#2）各自顯示在低血清條件下，用AB216-ADL1-D1或AB200-ADL10-MMAF處理的OPM2人骨髓瘤細胞在第6天的相對增殖，作為時間匹配的未處理對照的百分比（%）。
[ 圖 22] 顯示在用5、50或500 nM的AB216-ADL1-D1或AB200-ADL10-MMAF處理24或96小時的NCI-H929人骨髓瘤細胞中MCL1的促存活、長同種型（MCL1L）之mRNA水平。
[ 圖 23] 顯示在用5、50或500 nM的AB216-ADL1-D1或AB200-ADL10-MMAF處理24或96小時的NCI-H929人骨髓瘤細胞中MCL1表現之免疫墨點分析。
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Claims (254)

  1. 一種分離的抗體或抗原結合片段，其中該抗體或抗原結合片段能夠結合B細胞成熟抗原（BCMA）並且包含： (i) 三個重鏈互補決定區（HCDR）和三個輕鏈互補決定區（LCDR），如由Kabat編號系統所定義的，包含： HCDR1，其包含以下胺基酸序列：NYWIH（SEQ ID NO: 1）； HCDR2，其包含以下胺基酸序列： X1 TYRX5 X6 SX8 TX10 YX12 QKX15 K S（SEQ ID NO: 67），其中： X1 係A或G； X5 係S或I； X6 係H或Q； X8 係D或T； X10 係Y或N； X12 係N或A；並且 X15 係F或Y； HCDR3，其包含以下胺基酸序列： GAX3 YHGYDVIX11 N（SEQ ID NO: 68），其中： X3 係I或V；並且 X11 係E或D； LCDR1，其包含以下胺基酸序列： RASQSISSYX10 N（SEQ ID NO: 69），其中： X10 係L或I； LCDR2，其包含以下胺基酸序列： ATSNLQX7 （SEQ ID NO: 70），其中： X7 係S或I；並且 LCDR3，其包含以下胺基酸序列： QQX3 RRX6 PWX9 （SEQ ID NO: 71），其中： X3 係F或Y； X6 係L或I；並且 X9 係T或S；或 (ii) 三個重鏈互補決定區（HCDR）和三個輕鏈互補決定區（LCDR），如由IMGT編號系統所定義的，包含： HCDR1，其包含以下胺基酸序列： GGTFX5 NYW（SEQ ID NO: 72），其中： X5 係S或T； HCDR2，其包含以下胺基酸序列： TYRX4 X5 SX7 T（SEQ ID NO: 73），其中： X4 係S或I； X5 係H或Q；並且 X7 係D或T； HCDR3，其包含以下胺基酸序列： ARGAX5 YHGYDVIX13 N（SEQ ID NO: 74），其中： X5 係I或V；並且 X13 係D或E； LCDR1，其包含以下胺基酸序列：QSISSY（SEQ ID NO: 40）； LCDR2，其包含以下胺基酸序列：ATS（SEQ ID NO: 41）；並且 LCDR3，其包含以下胺基酸序列： QQX3 RRX6 PWX9 （SEQ ID NO: 75），其中： X3 係Y或F； X6 係L或I；並且 X9 係T或S。
  2. 一種分離的抗體或抗原結合片段，其中該抗體或抗原結合片段能夠結合BCMA並且包含： (a) 三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 1（HCDR1）、SEQ ID NO: 2（HCDR2）和SEQ ID NO: 3（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 4（LCDR1）、SEQ ID NO: 5（LCDR2）和SEQ ID NO: 6（LCDR3），如由Kabat編號系統所定義的；或者三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 37（HCDR1）、SEQ ID NO: 38（HCDR2）和SEQ ID NO: 39（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 40（LCDR1）、SEQ ID NO: 41（LCDR2）和SEQ ID NO: 42（LCDR3），如由IMGT編號系統所定義的； (b) 三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 1（HCDR1）、SEQ ID NO: 7（HCDR2）和SEQ ID NO: 8（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 9（LCDR1）、SEQ ID NO: 10（LCDR2）和SEQ ID NO: 11（LCDR3），如由Kabat編號系統所定義的；或者三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 43（HCDR1）、SEQ ID NO: 44（HCDR2）和SEQ ID NO: 45（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 40（LCDR1）、SEQ ID NO: 41（LCDR2）和SEQ ID NO: 46（LCDR3），如由IMGT編號系統所定義的； (c) 三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 1（HCDR1）、SEQ ID NO: 12（HCDR2）和SEQ ID NO: 13（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 14（LCDR1）、SEQ ID NO: 15（LCDR2）和SEQ ID NO: 16（LCDR3），如由Kabat編號系統所定義的；或者三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 47（HCDR1）、SEQ ID NO: 48（HCDR2）和SEQ ID NO: 49（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 40（LCDR1）、SEQ ID NO: 41（LCDR2）和SEQ ID NO: 50（LCDR3），如由IMGT編號系統所定義的； (d) 三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 1（HCDR1）、SEQ ID NO: 17（HCDR2）和SEQ ID NO: 18（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 19（LCDR1）、SEQ ID NO: 20（LCDR2）和SEQ ID NO: 21（LCDR3），如由Kabat編號系統所定義的；或者三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 51（HCDR1）、SEQ ID NO: 52（HCDR2）和SEQ ID NO: 53（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 40（LCDR1）、SEQ ID NO: 41（LCDR2）和SEQ ID NO: 54（LCDR3），如由IMGT編號系統所定義的； (e) 三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 1（HCDR1）、SEQ ID NO: 22（HCDR2）和SEQ ID NO: 23（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 24（LCDR1）、SEQ ID NO: 25（LCDR2）和SEQ ID NO: 26（LCDR3），如由Kabat編號系統所定義的；或者三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 55（HCDR1）、SEQ ID NO: 56（HCDR2）和SEQ ID NO: 57（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 40（LCDR1）、SEQ ID NO: 41（LCDR2）和SEQ ID NO: 58（LCDR3），如由IMGT編號系統所定義的； (f) 三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 1（HCDR1）、SEQ ID NO: 27（HCDR2）和SEQ ID NO: 28（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 29（LCDR1）、SEQ ID NO: 30（LCDR2）和SEQ ID NO: 31（LCDR3），如由Kabat編號系統所定義的；或者三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 59（HCDR1）、SEQ ID NO: 60（HCDR2）和SEQ ID NO: 61（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 40（LCDR1）、SEQ ID NO: 41（LCDR2）和SEQ ID NO: 62（LCDR3），如由IMGT編號系統所定義的；或 (g) 三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 1（HCDR1）、SEQ ID NO: 32（HCDR2）和SEQ ID NO: 33（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 34（LCDR1）、SEQ ID NO: 35（LCDR2）和SEQ ID NO: 36（LCDR3），如由Kabat編號系統所定義的；或者三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 63（HCDR1）、SEQ ID NO: 64（HCDR2）和SEQ ID NO: 65（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 40（LCDR1）、SEQ ID NO: 41（LCDR2）和SEQ ID NO: 66（LCDR3），如由IMGT編號系統所定義的。
  3. 一種分離的抗體或抗原結合片段，其中該抗體或抗原結合片段能夠結合BCMA並且包含： (a) 來自包含SEQ ID NO: 76的胺基酸序列的重鏈可變區的三個HCDR，以及來自包含SEQ ID NO: 77的胺基酸序列的輕鏈可變區的三個LCDR； (b) 來自包含SEQ ID NO: 78的胺基酸序列的重鏈可變區的三個HCDR，以及來自包含SEQ ID NO: 79的胺基酸序列的輕鏈可變區的三個LCDR； (c) 來自包含SEQ ID NO: 80的胺基酸序列的重鏈可變區的三個HCDR，以及來自包含SEQ ID NO: 81的胺基酸序列的輕鏈可變區的三個LCDR； (d) 來自包含SEQ ID NO: 82的胺基酸序列的重鏈可變區的三個HCDR，以及來自包含SEQ ID NO: 83的胺基酸序列的輕鏈可變區的三個LCDR； (e) 來自包含SEQ ID NO: 84的胺基酸序列的重鏈可變區的三個HCDR，以及來自包含SEQ ID NO: 85的胺基酸序列的輕鏈可變區的三個LCDR； (f) 來自包含SEQ ID NO: 86的胺基酸序列的重鏈可變區的三個HCDR，以及來自包含SEQ ID NO: 87的胺基酸序列的輕鏈可變區的三個LCDR；或 (g) 來自包含SEQ ID NO: 88的胺基酸序列的重鏈可變區的三個HCDR，以及來自包含SEQ ID NO: 89的胺基酸序列的輕鏈可變區的三個LCDR。
  4. 如請求項1至3中任一項之抗體或抗原結合片段，其中該抗體或抗原結合片段包含人重鏈和輕鏈可變區框架，或具有一個或多個回復突變的人重鏈和輕鏈可變區框架。
  5. 如請求項1至4中任一項之抗體或抗原結合片段，其中該抗體或抗原結合片段包含： (a) 與SEQ ID NO: 76的胺基酸序列具有至少90%同一性的重鏈可變區，以及與SEQ ID NO: 77的胺基酸序列具有至少90%同一性的輕鏈可變區； (b) 與SEQ ID NO: 78的胺基酸序列具有至少90%同一性的重鏈可變區，以及與SEQ ID NO: 79的胺基酸序列具有至少90%同一性的輕鏈可變區； (c) 與SEQ ID NO: 80的胺基酸序列具有至少90%同一性的重鏈可變區，以及與SEQ ID NO: 81的胺基酸序列具有至少90%同一性的輕鏈可變區； (d) 與SEQ ID NO: 82的胺基酸序列具有至少90%同一性的重鏈可變區，以及與SEQ ID NO: 83的胺基酸序列具有至少90%同一性的輕鏈可變區； (e) 與SEQ ID NO: 84的胺基酸序列具有至少90%同一性的重鏈可變區，以及與SEQ ID NO: 85的胺基酸序列具有至少90%同一性的輕鏈可變區； (f) 與SEQ ID NO: 86的胺基酸序列具有至少90%同一性的重鏈可變區，以及與SEQ ID NO: 87的胺基酸序列具有至少90%同一性的輕鏈可變區；或 (g) 與SEQ ID NO: 88的胺基酸序列具有至少90%同一性的重鏈可變區，以及與SEQ ID NO: 89的胺基酸序列具有至少90%同一性的輕鏈可變區。
  6. 如請求項1至5中任一項之抗體或抗原結合片段，其中該抗體或抗原結合片段包含： (a) 含有SEQ ID NO: 76的胺基酸序列的重鏈可變區，以及含有SEQ ID NO: 77的胺基酸序列的輕鏈可變區； (b) 含有SEQ ID NO: 78的胺基酸序列的重鏈可變區，以及含有SEQ ID NO: 79的胺基酸序列的輕鏈可變區； (c) 含有SEQ ID NO: 80的胺基酸序列的重鏈可變區，以及含有SEQ ID NO: 81的胺基酸序列的輕鏈可變區； (d) 含有SEQ ID NO: 82的胺基酸序列的重鏈可變區，以及含有SEQ ID NO: 83的胺基酸序列的輕鏈可變區； (e) 含有SEQ ID NO: 84的胺基酸序列的重鏈可變區，以及含有SEQ ID NO: 85的胺基酸序列的輕鏈可變區； (f) 含有SEQ ID NO: 86的胺基酸序列的重鏈可變區，以及含有SEQ ID NO: 87的胺基酸序列的輕鏈可變區；或 (g) 含有SEQ ID NO: 88的胺基酸序列的重鏈可變區，以及含有SEQ ID NO: 89的胺基酸序列的輕鏈可變區。
  7. 如請求項1至5中任一項之抗體或抗原結合片段，其中該抗體或抗原結合片段包含： (a) 三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 1（HCDR1）、SEQ ID NO: 2（HCDR2）和SEQ ID NO: 3（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 4（LCDR1）、SEQ ID NO: 5（LCDR2）和SEQ ID NO: 6（LCDR3），如由Kabat編號系統所定義的；或者三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 37（HCDR1）、SEQ ID NO: 38（HCDR2）和SEQ ID NO: 39（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 40（LCDR1）、SEQ ID NO: 41（LCDR2）和SEQ ID NO: 42（LCDR3），如由IMGT編號系統所定義的；或 (b) 三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 1（HCDR1）、SEQ ID NO: 22（HCDR2）和SEQ ID NO: 23（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 24（LCDR1）、SEQ ID NO: 25（LCDR2）和SEQ ID NO: 26（LCDR3），如由Kabat編號系統所定義的；或者三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 55（HCDR1）、SEQ ID NO: 56（HCDR2）和SEQ ID NO: 57（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 40（LCDR1）、SEQ ID NO: 41（LCDR2）和SEQ ID NO: 58（LCDR3），如由IMGT編號系統所定義的。
  8. 如請求項7之抗體或抗原結合片段，其中該抗體或抗原結合片段包含： (a) 含有SEQ ID NO: 76的胺基酸序列的重鏈可變區，以及含有SEQ ID NO: 77的胺基酸序列的輕鏈可變區；或 (b) 含有SEQ ID NO: 84的胺基酸序列的重鏈可變區，以及含有SEQ ID NO: 85的胺基酸序列的輕鏈可變區。
  9. 如請求項1至5中任一項之抗體或抗原結合片段，其中該抗體或抗原結合片段包含三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 1（HCDR1）、SEQ ID NO: 22（HCDR2）和SEQ ID NO: 23（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 24（LCDR1）、SEQ ID NO: 25（LCDR2）和SEQ ID NO: 26（LCDR3），如由Kabat編號系統所定義的；或者三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 55（HCDR1）、SEQ ID NO: 56（HCDR2）和SEQ ID NO: 57（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 40（LCDR1）、SEQ ID NO: 41（LCDR2）和SEQ ID NO: 58（LCDR3），如由IMGT編號系統所定義的。
  10. 如請求項9之抗體或抗原結合片段，其中該抗體或抗原結合片段包含含有SEQ ID NO: 84的胺基酸序列的重鏈可變區以及含有SEQ ID NO: 85的胺基酸序列的輕鏈可變區。
  11. 一種分離的抗體或抗原結合片段，其中該抗體或抗原結合片段能夠結合BCMA並且包含： (a) 含有SEQ ID NO: 119的胺基酸序列的重鏈可變區，該胺基酸序列被修飾以包括在位置30、34、50、54、55、57、59、61、64、66、101、103、108和109中的一個或多個處的胺基酸取代；和 (b) 含有SEQ ID NO: 120的胺基酸序列的輕鏈可變區，該胺基酸序列被修飾以包括在位置24、28、31、33、50、55、56、91、93、94和97中的一個或多個處的胺基酸取代。
  12. 如請求項11之抗體或抗原結合片段，其中： SEQ ID NO: 119的位置30處的胺基酸被T取代； SEQ ID NO: 119的位置34處的胺基酸被I取代； SEQ ID NO: 119的位置50處的胺基酸被G取代； SEQ ID NO: 119的位置54處的胺基酸被S或I取代； SEQ ID NO: 119的位置55處的胺基酸被Q取代； SEQ ID NO: 119的位置57處的胺基酸被T取代； SEQ ID NO: 119的位置59處的胺基酸被N取代； SEQ ID NO: 119的位置61處的胺基酸被A取代； SEQ ID NO: 119的位置64處的胺基酸被Y取代； SEQ ID NO: 119的位置66處的胺基酸被S取代； SEQ ID NO: 119的位置101處的胺基酸被V取代； SEQ ID NO: 119的位置103處的胺基酸被H取代； SEQ ID NO: 119的位置108處的胺基酸被I取代；和/或 SEQ ID NO: 119的位置109處的胺基酸被E取代。
  13. 如請求項11或請求項12之抗體或抗原結合片段，其中該抗體或抗原結合片段包含含有SEQ ID NO: 119的胺基酸序列的重鏈可變區，該胺基酸序列被修飾以包括在位置103處的至少一個胺基酸取代。
  14. 如請求項11至13中任一項之抗體或抗原結合片段，其中SEQ ID NO: 119的位置103處的胺基酸被H取代。
  15. 如請求項11至14中任一項之抗體或抗原結合片段，其中該抗體或抗原結合片段包含含有SEQ ID NO: 119的胺基酸序列的重鏈可變區，該胺基酸序列被修飾以包括至少四個胺基酸取代。
  16. 如請求項11至15中任一項之抗體或抗原結合片段，其中該抗體或抗原結合片段包含含有SEQ ID NO: 119的胺基酸序列的重鏈可變區，該胺基酸序列被修飾以在位置34、66、103和108處至少包括胺基酸取代。
  17. 如請求項11至16中任一項之抗體或抗原結合片段，其中： SEQ ID NO: 119的位置34處的胺基酸被I取代； SEQ ID NO: 119的位置66處的胺基酸被S取代； SEQ ID NO: 119的位置103處的胺基酸被H取代；並且 SEQ ID NO: 119的位置108處的胺基酸被I取代。
  18. 如請求項11至17中任一項之抗體或抗原結合片段，其中： SEQ ID NO: 120的位置24處的胺基酸被R取代； SEQ ID NO: 120的位置28處的胺基酸被S取代； SEQ ID NO: 120的位置31處的胺基酸被S取代； SEQ ID NO: 120的位置33處的胺基酸被I取代； SEQ ID NO: 120的位置50處的胺基酸被A取代； SEQ ID NO: 120的位置55處的胺基酸被Q取代； SEQ ID NO: 120的位置56處的胺基酸被I取代； SEQ ID NO: 120的位置91處的胺基酸被F取代； SEQ ID NO: 120的位置93處的胺基酸被R取代； SEQ ID NO: 120的位置94處的胺基酸被I取代；和/或 SEQ ID NO: 120的位置97處的胺基酸被S取代。
  19. 如請求項11至18中任一項之抗體或抗原結合片段，其中該抗體或抗原結合片段包含含有SEQ ID NO: 120的胺基酸序列的輕鏈可變區，該胺基酸序列被修飾以包括至少六個胺基酸取代。
  20. 如請求項11至19中任一項之抗體或抗原結合片段，其中該抗體或抗原結合片段包含含有SEQ ID NO: 120的胺基酸序列的輕鏈可變區，該胺基酸序列被修飾以在位置24、28、31、50、55和93處至少包括胺基酸取代。
  21. 如請求項11至20中任一項之抗體或抗原結合片段，其中： SEQ ID NO: 120的位置24處的胺基酸被R取代； SEQ ID NO: 120的位置28處的胺基酸被S取代； SEQ ID NO: 120的位置31處的胺基酸被S取代； SEQ ID NO: 120的位置50處的胺基酸被A取代； SEQ ID NO: 120的位置55處的胺基酸被Q取代；並且 SEQ ID NO: 120的位置93處的胺基酸被R取代。
  22. 如請求項11至21中任一項之抗體或抗原結合片段，其中該抗體或抗原結合片段包含： (a) 與SEQ ID NO: 76的胺基酸序列具有至少90%同一性的重鏈可變區，以及與SEQ ID NO: 77的胺基酸序列具有至少90%同一性的輕鏈可變區； (b) 與SEQ ID NO: 78的胺基酸序列具有至少90%同一性的重鏈可變區，以及與SEQ ID NO: 79的胺基酸序列具有至少90%同一性的輕鏈可變區； (c) 與SEQ ID NO: 80的胺基酸序列具有至少90%同一性的重鏈可變區，以及與SEQ ID NO: 81的胺基酸序列具有至少90%同一性的輕鏈可變區； (d) 與SEQ ID NO: 82的胺基酸序列具有至少90%同一性的重鏈可變區，以及與SEQ ID NO: 83的胺基酸序列具有至少90%同一性的輕鏈可變區； (e) 與SEQ ID NO: 84的胺基酸序列具有至少90%同一性的重鏈可變區，以及與SEQ ID NO: 85的胺基酸序列具有至少90%同一性的輕鏈可變區； (f) 與SEQ ID NO: 86的胺基酸序列具有至少90%同一性的重鏈可變區，以及與SEQ ID NO: 87的胺基酸序列具有至少90%同一性的輕鏈可變區；或 (g) 與SEQ ID NO: 88的胺基酸序列具有至少90%同一性的重鏈可變區，以及與SEQ ID NO: 89的胺基酸序列具有至少90%同一性的輕鏈可變區。
  23. 如請求項11至22中任一項之抗體或抗原結合片段，其中該抗體或抗原結合片段包含： (a) 含有SEQ ID NO: 76的胺基酸序列的重鏈可變區，以及含有SEQ ID NO: 77的胺基酸序列的輕鏈可變區； (b) 含有SEQ ID NO: 78的胺基酸序列的重鏈可變區，以及含有SEQ ID NO: 79的胺基酸序列的輕鏈可變區； (c) 含有SEQ ID NO: 80的胺基酸序列的重鏈可變區，以及含有SEQ ID NO: 81的胺基酸序列的輕鏈可變區； (d) 含有SEQ ID NO: 82的胺基酸序列的重鏈可變區，以及含有SEQ ID NO: 83的胺基酸序列的輕鏈可變區； (e) 含有SEQ ID NO: 84的胺基酸序列的重鏈可變區，以及含有SEQ ID NO: 85的胺基酸序列的輕鏈可變區； (f) 含有SEQ ID NO: 86的胺基酸序列的重鏈可變區，以及含有SEQ ID NO: 87的胺基酸序列的輕鏈可變區；或 (g) 含有SEQ ID NO: 88的胺基酸序列的重鏈可變區，以及含有SEQ ID NO: 89的胺基酸序列的輕鏈可變區。
  24. 如請求項1至23中任一項之抗體或抗原結合片段，其中該抗體或抗原結合片段包含人IgG1重鏈恒定區。
  25. 如請求項1至24中任一項之抗體或抗原結合片段，其中該抗體或抗原結合片段包含含有SEQ ID NO: 90的胺基酸序列的重鏈恒定區。
  26. 如請求項25之抗體或抗原結合片段，其中該重鏈恒定區進一步包含C-末端離胺酸（K）。
  27. 如請求項1至26中任一項之抗體或抗原結合片段，其中該抗體或抗原結合片段包含人Igκ輕鏈恒定區。
  28. 如請求項1至27中任一項之抗體或抗原結合片段，其中該抗體或抗原結合片段包含含有SEQ ID NO: 91的胺基酸序列的輕鏈恒定區。
  29. 如請求項1至28中任一項之抗體或抗原結合片段，其中該抗體或抗原結合片段包含含有SEQ ID NO: 90的胺基酸序列的重鏈恒定區以及含有SEQ ID NO: 91的胺基酸序列的輕鏈恒定區。
  30. 如請求項1至29中任一項之抗體或抗原結合片段，其中該抗體或抗原結合片段包含： (a) 含有SEQ ID NO: 92的胺基酸序列的重鏈，以及含有SEQ ID NO: 93的胺基酸序列的輕鏈； (b) 含有SEQ ID NO: 94的胺基酸序列的重鏈，以及含有SEQ ID NO: 95的胺基酸序列的輕鏈； (c) 含有SEQ ID NO: 96的胺基酸序列的重鏈，以及含有SEQ ID NO: 97的胺基酸序列的輕鏈； (d) 含有SEQ ID NO: 98的胺基酸序列的重鏈，以及含有SEQ ID NO: 99的胺基酸序列的輕鏈； (e) 含有SEQ ID NO: 100的胺基酸序列的重鏈，以及含有SEQ ID NO: 101的胺基酸序列的輕鏈； (f) 含有SEQ ID NO: 102的胺基酸序列的重鏈，以及含有SEQ ID NO: 103的胺基酸序列的輕鏈；或 (g) 含有SEQ ID NO: 104的胺基酸序列的重鏈，以及含有SEQ ID NO: 105的胺基酸序列的輕鏈。
  31. 如請求項30之抗體或抗原結合片段，其中該重鏈進一步包含C-末端離胺酸（K）。
  32. 如請求項1至29中任一項之抗體或抗原結合片段，其中該抗體或抗原結合片段包含： (a) 含有SEQ ID NO: 76的胺基酸序列的重鏈可變區，以及含有SEQ ID NO: 77的胺基酸序列的輕鏈可變區；或 (b) 含有SEQ ID NO: 84的胺基酸序列的重鏈可變區，以及含有SEQ ID NO: 85的胺基酸序列的輕鏈可變區。
  33. 如請求項32之抗體或抗原結合片段，其中該抗體或抗原結合片段包含： (a) 含有SEQ ID NO: 92的胺基酸序列的重鏈，以及含有SEQ ID NO: 93的胺基酸序列的輕鏈；或 (b) 含有SEQ ID NO: 100的胺基酸序列的重鏈，以及含有SEQ ID NO: 101的胺基酸序列的輕鏈。
  34. 如請求項1至29中任一項之抗體或抗原結合片段，其中該抗體或抗原結合片段包含含有SEQ ID NO: 84的胺基酸序列的重鏈可變區以及含有SEQ ID NO: 85的胺基酸序列的輕鏈可變區。
  35. 如請求項34之抗體或抗原結合片段，其中該抗體或抗原結合片段包含含有SEQ ID NO: 100的胺基酸序列的重鏈以及含有SEQ ID NO: 101的胺基酸序列的輕鏈。
  36. 如請求項33或請求項35之抗體或抗原結合片段，其中該重鏈進一步包含C-末端離胺酸（K）。
  37. 如請求項1至36中任一項之抗體或抗原結合片段，其中該抗體或抗原結合片段軛合至治療劑。
  38. 如請求項37之抗體或抗原結合片段，其中該治療劑係剪接調節劑。
  39. 如請求項37或請求項38之抗體或抗原結合片段，其中該治療劑係普拉二烯內酯或普拉二烯內酯衍生物。
  40. 如請求項37至39中任一項之抗體或抗原結合片段，其中該治療劑係普拉二烯內酯D或普拉二烯內酯D衍生物。
  41. 如請求項37至40中任一項之抗體或抗原結合片段，其中該治療劑係D1：
    Figure 03_image196
    (D1)。
  42. 如請求項37至40中任一項之抗體或抗原結合片段，其中該治療劑係D2：
    Figure 03_image002
    (D2)。
  43. 一種具有式 (I) 的抗體-藥物軛合物： Ab-(L-D) p (I) 其中 Ab係如請求項1至42中任一項之抗體或抗原結合片段，其中 D係剪接調節劑； L係將Ab共價連接至D的連接子；並且p 為1至15的整數。
  44. 如請求項43之抗體-藥物軛合物，其中該連接子係可裂解連接子。
  45. 如請求項44之抗體-藥物軛合物，其中該連接子包含可裂解肽部分。
  46. 如請求項45之抗體-藥物軛合物，其中該可裂解肽部分可被酶裂解。
  47. 如請求項44至46中任一項之抗體-藥物軛合物，其中該可裂解肽部分或連接子包含胺基酸單元。
  48. 如請求項47之抗體-藥物軛合物，其中該胺基酸單元包含纈胺酸-瓜胺酸（Val-Cit）。
  49. 如請求項47之抗體-藥物軛合物，其中該胺基酸單元包含纈胺酸-丙胺酸（Val-Ala）。
  50. 如請求項47之抗體-藥物軛合物，其中該胺基酸單元包含丙胺酸-丙胺酸-天冬胺酸（Ala-Ala-Asp）。
  51. 如請求項47之抗體-藥物軛合物，其中該胺基酸單元包含麩醯胺酸-纈胺酸-瓜胺酸（Glu-Val-Cit）。
  52. 如請求項44之抗體-藥物軛合物，其中該連接子包含可裂解葡糖苷酸部分。
  53. 如請求項52之抗體-藥物軛合物，其中該可裂解葡糖苷酸部分可被酶裂解。
  54. 如請求項52或請求項53之抗體-藥物軛合物，其中該可裂解葡糖苷酸部分可被葡糖苷酸酶裂解。
  55. 如請求項52至54中任一項之抗體-藥物軛合物，其中該可裂解葡糖苷酸部分可被β-葡糖苷酸酶裂解。
  56. 如請求項52至55中任一項之抗體-藥物軛合物，其中該可裂解葡糖苷酸部分或連接子包含β-葡糖苷酸。
  57. 如請求項44至56中任一項之抗體-藥物軛合物，其中該連接子包含馬來醯亞胺部分。
  58. 如請求項57之抗體-藥物軛合物，其中該連接子包含馬來醯亞胺部分和可裂解肽部分。
  59. 如請求項58之抗體-藥物軛合物，其中該可裂解肽部分包含胺基酸單元。
  60. 如請求項58或請求項59之抗體-藥物軛合物，其中該可裂解肽部分或胺基酸單元包含Val-Cit。
  61. 如請求項58或請求項59之抗體-藥物軛合物，其中該可裂解肽部分或胺基酸單元包含Val-Ala。
  62. 如請求項58或請求項59之抗體-藥物軛合物，其中該可裂解肽部分或胺基酸單元包含Ala-Ala-Asp。
  63. 如請求項58或請求項59之抗體-藥物軛合物，其中該可裂解肽部分或胺基酸單元包含Glu-Val-Cit。
  64. 如請求項57之抗體-藥物軛合物，其中該連接子包含馬來醯亞胺部分和可裂解葡糖苷酸部分。
  65. 如請求項64之抗體-藥物軛合物，其中該可裂解葡糖苷酸部分包含β-葡糖苷酸。
  66. 如請求項57至65中任一項之抗體-藥物軛合物，其中該馬來醯亞胺部分包含馬來醯亞胺基己醯基（MC）。
  67. 如請求項57至66中任一項之抗體-藥物軛合物，其中該馬來醯亞胺部分與該抗體或抗原結合片段上的半胱胺酸殘基反應。
  68. 如請求項57至67中任一項之抗體-藥物軛合物，其中該馬來醯亞胺部分經由該抗體或抗原結合片段上的半胱胺酸殘基連接至該抗體或抗原結合片段。
  69. 如請求項44至68中任一項之抗體-藥物軛合物，其中該連接子包含至少一個間隔子單元。
  70. 如請求項69之抗體-藥物軛合物，其中該連接子中的間隔子單元包含聚乙二醇（PEG）部分。
  71. 如請求項70之抗體-藥物軛合物，其中該PEG部分包含-(PEG) m -且m 係1至10的整數。
  72. 如請求項71之抗體-藥物軛合物，其中m 為2。
  73. 如請求項69至72中任一項之抗體-藥物軛合物，其中該連接子中的間隔子單元經由馬來醯亞胺部分（「Mal-間隔子單元」）連接至該抗體或抗原結合片段。
  74. 如請求項73之抗體-藥物軛合物，其中該連接子包含該Mal-間隔子單元和可裂解肽部分。
  75. 如請求項74之抗體-藥物軛合物，其中該可裂解肽部分包含胺基酸單元。
  76. 如請求項74或請求項75之抗體-藥物軛合物，其中該可裂解肽部分或胺基酸單元包含Val-Cit、Val-Ala、Ala-Ala-Asp或Glu-Val-Cit。
  77. 如請求項73之抗體-藥物軛合物，其中該連接子包含該Mal-間隔子單元和可裂解葡糖苷酸部分。
  78. 如請求項77之抗體-藥物軛合物，其中該可裂解葡糖苷酸部分包含β-葡糖苷酸。
  79. 如請求項73至78中任一項之抗體-藥物軛合物，其中該Mal-間隔子單元包含PEG部分。
  80. 如請求項73至79中任一項之抗體-藥物軛合物，其中該Mal-間隔子單元包含馬來醯亞胺基己醯基（MC）。
  81. 如請求項73至80中任一項之抗體-藥物軛合物，其中該馬來醯亞胺部分或Mal-間隔子單元將該抗體或抗原結合片段連接至該連接子中的可裂解部分。
  82. 如請求項81之抗體-藥物軛合物，其中該連接子中的可裂解部分包含可裂解肽部分。
  83. 如請求項82之抗體-藥物軛合物，其中該可裂解肽部分包含胺基酸單元。
  84. 如請求項82或請求項83之抗體-藥物軛合物，其中該可裂解肽部分或胺基酸單元包含Val-Cit、Val-Ala、Ala-Ala-Asp或Glu-Val-Cit。
  85. 如請求項82至84中任一項之抗體-藥物軛合物，其中該連接子包含MC-Val-Cit。
  86. 如請求項82至84中任一項之抗體-藥物軛合物，其中該連接子包含MC-Val-Ala。
  87. 如請求項82至84中任一項之抗體-藥物軛合物，其中該連接子包含MC-Ala-Ala-Asp。
  88. 如請求項82至84中任一項之抗體-藥物軛合物，其中該連接子包含MC-Glu-Val-Cit。
  89. 如請求項82至84中任一項之抗體-藥物軛合物，其中該連接子包含MC-(PEG)2 -Val-Cit。
  90. 如請求項81之抗體-藥物軛合物，其中該連接子中的可裂解部分包含可裂解葡糖苷酸部分。
  91. 如請求項90之抗體-藥物軛合物，其中該可裂解葡糖苷酸部分包含β-葡糖苷酸。
  92. 如請求項90或請求項91之抗體-藥物軛合物，其中該連接子包含MC-β-葡糖苷酸。
  93. 如請求項44至92中任一項之抗體-藥物軛合物，其中該連接子中的可裂解部分直接地連接至該剪接調節劑，或其中間隔子單元將該連接子中的可裂解部分連接至該剪接調節劑。
  94. 如請求項93之抗體-藥物軛合物，其中該軛合物的裂解使該剪接調節劑自該抗體或抗原結合片段和連接子釋放。
  95. 如請求項93或請求項94之抗體-藥物軛合物，其中將該連接子中的可裂解部分連接至該剪接調節劑的間隔子單元係自消融型的。
  96. 如請求項93至95中任一項之抗體-藥物軛合物，其中將該連接子中的可裂解部分連接至該剪接調節劑的間隔子單元包含對胺基苄氧基羰基（pABC）。
  97. 如請求項96之抗體-藥物軛合物，其中該pABC將該連接子中的可裂解部分連接至該剪接調節劑。
  98. 如請求項96或請求項97之抗體-藥物軛合物，其中該連接子中的可裂解部分包含可裂解肽部分。
  99. 如請求項98之抗體-藥物軛合物，其中該可裂解肽部分包含胺基酸單元。
  100. 如請求項98或請求項99之抗體-藥物軛合物，其中該可裂解肽部分或胺基酸單元包含Val-Cit、Val-Ala、Ala-Ala-Asp或Glu-Val-Cit。
  101. 如請求項98至100中任一項之抗體-藥物軛合物，其中該連接子包含Val-Cit-pABC。
  102. 如請求項98至100中任一項之抗體-藥物軛合物，其中該連接子包含Val-Ala-pABC。
  103. 如請求項98至100中任一項之抗體-藥物軛合物，其中該連接子包含Ala-Ala-Asp-pABC。
  104. 如請求項98至100中任一項之抗體-藥物軛合物，其中該連接子包含Glu-Val-Cit-pABC。
  105. 如請求項96或請求項97之抗體-藥物軛合物，其中該連接子中的可裂解部分包含可裂解葡糖苷酸部分。
  106. 如請求項105之抗體-藥物軛合物，其中該可裂解葡糖苷酸部分包含β-葡糖苷酸。
  107. 如請求項105或請求項106之抗體-藥物軛合物，其中該連接子包含β-葡糖苷酸-pABC。
  108. 如請求項44至107中任一項之抗體-藥物軛合物，其中該可裂解連接子包含MC-Val-Cit-pABC、MC-Val-Ala-pABC、MC-Ala-Ala-Asp-pABC、MC-Glu-Val-Cit-pABC、MC-(PEG)2 -Val-Cit-pABC或MC-β-葡糖苷酸。
  109. 如請求項108之抗體-藥物軛合物，其中該可裂解連接子包含MC-Val-Cit-pABC。
  110. 如請求項108之抗體-藥物軛合物，其中該可裂解連接子包含MC-Val-Ala-pABC。
  111. 如請求項108之抗體-藥物軛合物，其中該可裂解連接子包含MC-Ala-Ala-Asp-pABC。
  112. 如請求項108之抗體-藥物軛合物，其中該可裂解連接子包含MC-Glu-Val-Cit-pABC。
  113. 如請求項108之抗體-藥物軛合物，其中該可裂解連接子包含MC-(PEG)2 -Val-Cit-pABC。
  114. 如請求項108之抗體-藥物軛合物，其中該可裂解連接子包含MC-β-葡糖苷酸。
  115. 如請求項43之抗體-藥物軛合物，其中該連接子係不可裂解連接子。
  116. 如請求項43至115中任一項之抗體-藥物軛合物，其中該剪接調節劑包含SF3b複合體的調節劑。
  117. 如請求項43至116中任一項之抗體-藥物軛合物，其中該剪接調節劑包含普拉二烯內酯或普拉二烯內酯衍生物。
  118. 如請求項43至117中任一項之抗體-藥物軛合物，其中該剪接調節劑包含普拉二烯內酯D或普拉二烯內酯D衍生物。
  119. 如請求項43至118中任一項之抗體-藥物軛合物，其中該剪接調節劑包含D1或D2。
  120. 如請求項43至119中任一項之抗體-藥物軛合物，其中該剪接調節劑包含D1。
  121. 如請求項43至119中任一項之抗體-藥物軛合物，其中該剪接調節劑包含D2。
  122. 如請求項43至121中任一項之抗體-藥物軛合物，其中p 為1至12。
  123. 如請求項43至122中任一項之抗體-藥物軛合物，其中p 為2至8。
  124. 如請求項43至123中任一項之抗體-藥物軛合物，其中p 為4至8。
  125. 如請求項43至124中任一項之抗體-藥物軛合物，其中p 為4。
  126. 如請求項43至124中任一項之抗體-藥物軛合物，其中p 為8。
  127. 一種具有式 (I) 的抗體-藥物軛合物： Ab-(L-D) p (I) 其中 Ab係如請求項1至42中任一項之抗體或抗原結合片段，其中 D係D1； L係將Ab共價連接至D的連接子；並且p 為1至15的整數。
  128. 一種具有式 (I) 的抗體-藥物軛合物： Ab-(L-D) p (I) 其中 Ab係如請求項1至42中任一項之抗體或抗原結合片段，其中 D係D2； L係將Ab共價連接至D的連接子；並且p 為1至15的整數。
  129. 如請求項127或請求項128之抗體-藥物軛合物，其中該抗體或抗原結合片段包含： (a) 三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 1（HCDR1）、SEQ ID NO: 2（HCDR2）和SEQ ID NO: 3（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 4（LCDR1）、SEQ ID NO: 5（LCDR2）和SEQ ID NO: 6（LCDR3），如由Kabat編號系統所定義的；或者三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 37（HCDR1）、SEQ ID NO: 38（HCDR2）和SEQ ID NO: 39（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 40（LCDR1）、SEQ ID NO: 41（LCDR2）和SEQ ID NO: 42（LCDR3），如由IMGT編號系統所定義的； (b) 三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 1（HCDR1）、SEQ ID NO: 7（HCDR2）和SEQ ID NO: 8（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 9（LCDR1）、SEQ ID NO: 10（LCDR2）和SEQ ID NO: 11（LCDR3），如由Kabat編號系統所定義的；或者三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 43（HCDR1）、SEQ ID NO: 44（HCDR2）和SEQ ID NO: 45（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 40（LCDR1）、SEQ ID NO: 41（LCDR2）和SEQ ID NO: 46（LCDR3），如由IMGT編號系統所定義的； (c) 三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 1（HCDR1）、SEQ ID NO: 12（HCDR2）和SEQ ID NO: 13（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 14（LCDR1）、SEQ ID NO: 15（LCDR2）和SEQ ID NO: 16（LCDR3），如由Kabat編號系統所定義的；或者三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 47（HCDR1）、SEQ ID NO: 48（HCDR2）和SEQ ID NO: 49（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 40（LCDR1）、SEQ ID NO: 41（LCDR2）和SEQ ID NO: 50（LCDR3），如由IMGT編號系統所定義的； (d) 三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 1（HCDR1）、SEQ ID NO: 17（HCDR2）和SEQ ID NO: 18（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 19（LCDR1）、SEQ ID NO: 20（LCDR2）和SEQ ID NO: 21（LCDR3），如由Kabat編號系統所定義的；或者三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 51（HCDR1）、SEQ ID NO: 52（HCDR2）和SEQ ID NO: 53（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 40（LCDR1）、SEQ ID NO: 41（LCDR2）和SEQ ID NO: 54（LCDR3），如由IMGT編號系統所定義的； (e) 三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 1（HCDR1）、SEQ ID NO: 22（HCDR2）和SEQ ID NO: 23（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 24（LCDR1）、SEQ ID NO: 25（LCDR2）和SEQ ID NO: 26（LCDR3），如由Kabat編號系統所定義的；或者三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 55（HCDR1）、SEQ ID NO: 56（HCDR2）和SEQ ID NO: 57（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 40（LCDR1）、SEQ ID NO: 41（LCDR2）和SEQ ID NO: 58（LCDR3），如由IMGT編號系統所定義的； (f) 三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 1（HCDR1）、SEQ ID NO: 27（HCDR2）和SEQ ID NO: 28（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 29（LCDR1）、SEQ ID NO: 30（LCDR2）和SEQ ID NO: 31（LCDR3），如由Kabat編號系統所定義的；或者三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 59（HCDR1）、SEQ ID NO: 60（HCDR2）和SEQ ID NO: 61（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 40（LCDR1）、SEQ ID NO: 41（LCDR2）和SEQ ID NO: 62（LCDR3），如由IMGT編號系統所定義的；或 (g) 三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 1（HCDR1）、SEQ ID NO: 32（HCDR2）和SEQ ID NO: 33（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 34（LCDR1）、SEQ ID NO: 35（LCDR2）和SEQ ID NO: 36（LCDR3），如由Kabat編號系統所定義的；或者三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 63（HCDR1）、SEQ ID NO: 64（HCDR2）和SEQ ID NO: 65（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 40（LCDR1）、SEQ ID NO: 41（LCDR2）和SEQ ID NO: 66（LCDR3），如由IMGT編號系統所定義的。
  130. 如請求項127至129中任一項之抗體-藥物軛合物，其中該抗體或抗原結合片段包含人重鏈和輕鏈可變區框架，或具有一個或多個回復突變的人重鏈和輕鏈可變區框架。
  131. 如請求項127至130中任一項之抗體-藥物軛合物，其中該抗體或抗原結合片段包含： (a) 與SEQ ID NO: 76的胺基酸序列具有至少90%同一性的重鏈可變區，以及與SEQ ID NO: 77的胺基酸序列具有至少90%同一性的輕鏈可變區； (b) 與SEQ ID NO: 78的胺基酸序列具有至少90%同一性的重鏈可變區，以及與SEQ ID NO: 79的胺基酸序列具有至少90%同一性的輕鏈可變區； (c) 與SEQ ID NO: 80的胺基酸序列具有至少90%同一性的重鏈可變區，以及與SEQ ID NO: 81的胺基酸序列具有至少90%同一性的輕鏈可變區； (d) 與SEQ ID NO: 82的胺基酸序列具有至少90%同一性的重鏈可變區，以及與SEQ ID NO: 83的胺基酸序列具有至少90%同一性的輕鏈可變區； (e) 與SEQ ID NO: 84的胺基酸序列具有至少90%同一性的重鏈可變區，以及與SEQ ID NO: 85的胺基酸序列具有至少90%同一性的輕鏈可變區； (f) 與SEQ ID NO: 86的胺基酸序列具有至少90%同一性的重鏈可變區，以及與SEQ ID NO: 87的胺基酸序列具有至少90%同一性的輕鏈可變區；或 (g) 與SEQ ID NO: 88的胺基酸序列具有至少90%同一性的重鏈可變區，以及與SEQ ID NO: 89的胺基酸序列具有至少90%同一性的輕鏈可變區。
  132. 如請求項127至131中任一項之抗體-藥物軛合物，其中該抗體或抗原結合片段包含： (a) 含有SEQ ID NO: 76的胺基酸序列的重鏈可變區，以及含有SEQ ID NO: 77的胺基酸序列的輕鏈可變區； (b) 含有SEQ ID NO: 78的胺基酸序列的重鏈可變區，以及含有SEQ ID NO: 79的胺基酸序列的輕鏈可變區； (c) 含有SEQ ID NO: 80的胺基酸序列的重鏈可變區，以及含有SEQ ID NO: 81的胺基酸序列的輕鏈可變區； (d) 含有SEQ ID NO: 82的胺基酸序列的重鏈可變區，以及含有SEQ ID NO: 83的胺基酸序列的輕鏈可變區； (e) 含有SEQ ID NO: 84的胺基酸序列的重鏈可變區，以及含有SEQ ID NO: 85的胺基酸序列的輕鏈可變區； (f) 含有SEQ ID NO: 86的胺基酸序列的重鏈可變區，以及含有SEQ ID NO: 87的胺基酸序列的輕鏈可變區；或 (g) 含有SEQ ID NO: 88的胺基酸序列的重鏈可變區，以及含有SEQ ID NO: 89的胺基酸序列的輕鏈可變區。
  133. 如請求項127至131中任一項之抗體-藥物軛合物，其中該抗體或抗原結合片段包含： (a) 三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 1（HCDR1）、SEQ ID NO: 2（HCDR2）和SEQ ID NO: 3（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 4（LCDR1）、SEQ ID NO: 5（LCDR2）和SEQ ID NO: 6（LCDR3），如由Kabat編號系統所定義的；或者三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 37（HCDR1）、SEQ ID NO: 38（HCDR2）和SEQ ID NO: 39（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 40（LCDR1）、SEQ ID NO: 41（LCDR2）和SEQ ID NO: 42（LCDR3），如由IMGT編號系統所定義的；或 (b) 三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 1（HCDR1）、SEQ ID NO: 22（HCDR2）和SEQ ID NO: 23（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 24（LCDR1）、SEQ ID NO: 25（LCDR2）和SEQ ID NO: 26（LCDR3），如由Kabat編號系統所定義的；或者三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 55（HCDR1）、SEQ ID NO: 56（HCDR2）和SEQ ID NO: 57（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 40（LCDR1）、SEQ ID NO: 41（LCDR2）和SEQ ID NO: 58（LCDR3），如由IMGT編號系統所定義的。
  134. 如請求項133之抗體-藥物軛合物，其中該抗體或抗原結合片段包含： (a) 含有SEQ ID NO: 76的胺基酸序列的重鏈可變區，以及含有SEQ ID NO: 77的胺基酸序列的輕鏈可變區；或 (b) 含有SEQ ID NO: 84的胺基酸序列的重鏈可變區，以及含有SEQ ID NO: 85的胺基酸序列的輕鏈可變區。
  135. 如請求項127至131中任一項之抗體-藥物軛合物，其中該抗體或抗原結合片段包含三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 1（HCDR1）、SEQ ID NO: 22（HCDR2）和SEQ ID NO: 23（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 24（LCDR1）、SEQ ID NO: 25（LCDR2）和SEQ ID NO: 26（LCDR3），如由Kabat編號系統所定義的；或者三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 55（HCDR1）、SEQ ID NO: 56（HCDR2）和SEQ ID NO: 57（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 40（LCDR1）、SEQ ID NO: 41（LCDR2）和SEQ ID NO: 58（LCDR3），如由IMGT編號系統所定義的。
  136. 如請求項135之抗體-藥物軛合物，其中該抗體或抗原結合片段包含含有SEQ ID NO: 84的胺基酸序列的重鏈可變區以及含有SEQ ID NO: 85的胺基酸序列的輕鏈可變區。
  137. 一種具有式 (I) 的抗體-藥物軛合物： Ab-(L-D) p (I) 其中 Ab係抗體或抗原結合片段，其中該抗體或抗原結合片段能夠結合BCMA，並且包含三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 1（HCDR1）、SEQ ID NO: 22（HCDR2）和SEQ ID NO: 23（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 24（LCDR1）、SEQ ID NO: 25（LCDR2）和SEQ ID NO: 26（LCDR3），如由Kabat編號系統所定義的；或者三個HCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 55（HCDR1）、SEQ ID NO: 56（HCDR2）和SEQ ID NO: 57（HCDR3）；以及三個LCDR，其包含以下胺基酸序列：SEQ ID NO: 40（LCDR1）、SEQ ID NO: 41（LCDR2）和SEQ ID NO: 58（LCDR3），如由IMGT編號系統所定義的； D係D1； L係將Ab共價連接至D的連接子；並且p 為1至15的整數。
  138. 如請求項137之抗體-藥物軛合物，其中該抗體或抗原結合片段包含人重鏈和輕鏈可變區框架，或具有一個或多個回復突變的人重鏈和輕鏈可變區框架。
  139. 如請求項137或請求項138之抗體-藥物軛合物，其中該抗體或抗原結合片段包含與SEQ ID NO: 84的胺基酸序列具有至少90%同一性的重鏈可變區以及與SEQ ID NO: 85的胺基酸序列具有至少90%同一性的輕鏈可變區。
  140. 如請求項137至139中任一項之抗體-藥物軛合物，其中該抗體或抗原結合片段包含含有SEQ ID NO: 84的胺基酸序列的重鏈可變區以及含有SEQ ID NO: 85的胺基酸序列的輕鏈可變區。
  141. 如請求項127至140中任一項之抗體-藥物軛合物，其中該抗體或抗原結合片段包含人IgG1重鏈恒定區和人Igκ輕鏈恒定區。
  142. 如請求項127至141中任一項之抗體-藥物軛合物，其中該抗體或抗原結合片段包含含有SEQ ID NO: 90的胺基酸序列的重鏈恒定區以及含有SEQ ID NO: 91的胺基酸序列的輕鏈恒定區。
  143. 如請求項127至142中任一項之抗體-藥物軛合物，其中該抗體或抗原結合片段包含含有SEQ ID NO: 100的胺基酸序列的重鏈以及含有SEQ ID NO: 101的胺基酸序列的輕鏈。
  144. 如請求項142或請求項143之抗體-藥物軛合物，其中該重鏈恒定區或重鏈進一步包含C-末端離胺酸（K）。
  145. 如請求項127至144中任一項之抗體-藥物軛合物，其中該連接子係可裂解連接子。
  146. 如請求項145之抗體-藥物軛合物，其中該可裂解連接子包含MC-Val-Cit-pABC。
  147. 如請求項145之抗體-藥物軛合物，其中該可裂解連接子包含MC-Val-Ala-pABC。
  148. 如請求項145之抗體-藥物軛合物，其中該可裂解連接子包含MC-Ala-Ala-Asp-pABC。
  149. 如請求項145之抗體-藥物軛合物，其中該可裂解連接子包含MC-Glu-Val-Cit-pABC。
  150. 如請求項145之抗體-藥物軛合物，其中該可裂解連接子包含MC-(PEG)2 -Val-Cit-pABC。
  151. 如請求項145之抗體-藥物軛合物，其中該可裂解連接子包含MC-β-葡糖苷酸。
  152. 如請求項127至151中任一項之抗體-藥物軛合物，其中p 為1至12。
  153. 如請求項127至152中任一項之抗體-藥物軛合物，其中p 為2至8。
  154. 如請求項127至153中任一項之抗體-藥物軛合物，其中p 為4至8。
  155. 如請求項127至154中任一項之抗體-藥物軛合物，其中p 為4。
  156. 如請求項127至154中任一項之抗體-藥物軛合物，其中p 為8。
  157. 一種藥物組成物，該藥物組成物包含如請求項1至42中任一項之抗體或抗原結合片段、或如請求項43至156中任一項之抗體-藥物軛合物、以及藥學上可接受的載體。
  158. 如請求項157之藥物組成物，其中該藥物組成物包含該抗體、抗原結合片段或抗體-藥物軛合物的多個拷貝。
  159. 根據請求項157或請求項158之藥物組成物，其中該藥物組成物包含該抗體-藥物軛合物的多個拷貝，其中該組成物中抗體-藥物軛合物的平均p 為約2至約8。
  160. 如請求項159之藥物組成物，其中該組成物中抗體-藥物軛合物的平均p 為約4。
  161. 一種治療患有或疑似患有癌症的受試者之方法，該方法包括向該受試者投與治療有效量的如請求項1至42中任一項之抗體或抗原結合片段、如請求項43至156中任一項之抗體-藥物軛合物、或如請求項157至160中任一項之藥物組成物。
  162. 如請求項161之方法，其中該癌症表現BCMA。
  163. 如請求項161或請求項162之方法，其中該癌症係漿細胞惡性腫瘤。
  164. 如請求項161至163中任一項之方法，其中該漿細胞惡性腫瘤或癌症係白血病、淋巴瘤、漿細胞瘤或骨髓瘤。
  165. 如請求項161至164中任一項之方法，其中該漿細胞惡性腫瘤或癌症係多發性骨髓瘤、瀰漫性大B細胞淋巴瘤、外膜細胞淋巴瘤、漿母細胞性淋巴瘤、漿母細胞性骨髓瘤或柏基特氏淋巴瘤。
  166. 如請求項161至165中任一項之方法，其中該漿細胞惡性腫瘤或癌症係多發性骨髓瘤。
  167. 如請求項161至166中任一項之方法，其中該漿細胞惡性腫瘤或癌症係復發性/難治性多發性骨髓瘤。
  168. 如請求項161至167中任一項之方法，其中該抗體、抗原結合片段、抗體-藥物軛合物或藥物組成物與一種或多種另外的治療劑組合投與。
  169. 如請求項168之方法，其中該一種或多種另外的治療劑包括BCL2抑制劑、BCLxL抑制劑、BCL2/BCLxL抑制劑、和/或γ分泌酶抑制劑。
  170. 一種減少或減慢受試者中癌細胞群的生長之方法，該方法包括向該受試者投與治療有效量的如請求項1至42中任一項之抗體或抗原結合片段、如請求項43至156中任一項之抗體-藥物軛合物、或如請求項157至160中任一項之藥物組成物。
  171. 如請求項170之方法，其中該癌細胞群表現BCMA。
  172. 如請求項170或請求項171之方法，其中該癌細胞群係漿細胞惡性腫瘤。
  173. 如請求項170至172中任一項之方法，其中該漿細胞惡性腫瘤或癌細胞群係白血病、淋巴瘤、漿細胞瘤或骨髓瘤。
  174. 如請求項170至173中任一項之方法，其中該漿細胞惡性腫瘤或癌細胞群係多發性骨髓瘤、瀰漫性大B細胞淋巴瘤、外膜細胞淋巴瘤、漿母細胞性淋巴瘤、漿母細胞性骨髓瘤或柏基特氏淋巴瘤。
  175. 如請求項170至174中任一項之方法，其中該漿細胞惡性腫瘤或癌細胞群係多發性骨髓瘤。
  176. 如請求項170至175中任一項之方法，其中該漿細胞惡性腫瘤或癌細胞群係復發性/難治性多發性骨髓瘤。
  177. 如請求項170至176中任一項之方法，其中該抗體、抗原結合片段、抗體-藥物軛合物或藥物組成物的投與使該癌細胞群減少至少約10%、至少約20%、至少約50%、至少約70%、至少約80%、至少約90%、至少約95%、或至少約99%。
  178. 如請求項170至177中任一項之方法，其中該抗體、抗原結合片段、抗體-藥物軛合物或藥物組成物的投與使該癌細胞群的生長減慢至少約10%、至少約20%、至少約50%、至少約70%、至少約80%、至少約90%、至少約95%、或至少約99%。
  179. 如請求項170至178中任一項之方法，其中該抗體、抗原結合片段、抗體-藥物軛合物或藥物組成物與一種或多種另外的治療劑組合投與。
  180. 如請求項179之方法，其中該一種或多種另外的治療劑包括BCL2抑制劑、BCLxL抑制劑、BCL2/BCLxL抑制劑、和/或γ分泌酶抑制劑。
  181. 一種確定患有或疑似患有癌症的受試者是否會對用如請求項1至42中任一項之抗體或抗原結合片段、如請求項43至156中任一項之抗體-藥物軛合物、或如請求項157至160中任一項之藥物組成物進行的治療有應答之方法，該方法包括提供來自該受試者的生物樣本；使該樣本與該抗體或抗原結合片段接觸；以及檢測該抗體或抗原結合片段與該樣本中的一種或多種癌細胞的結合。
  182. 如請求項181之方法，其中該一種或多種癌細胞表現BCMA。
  183. 如請求項181或請求項182之方法，其中該癌症表現BCMA。
  184. 如請求項181至183中任一項之方法，其中該癌症係漿細胞惡性腫瘤。
  185. 如請求項181至184中任一項之方法，其中該漿細胞惡性腫瘤或癌症係白血病、淋巴瘤、漿細胞瘤或骨髓瘤。
  186. 如請求項181至185中任一項之方法，其中該漿細胞惡性腫瘤或癌症係多發性骨髓瘤、瀰漫性大B細胞淋巴瘤、外膜細胞淋巴瘤、漿母細胞性淋巴瘤、漿母細胞性骨髓瘤或柏基特氏淋巴瘤。
  187. 如請求項181至186中任一項之方法，其中該漿細胞惡性腫瘤或癌症係多發性骨髓瘤。
  188. 如請求項181至187中任一項之方法，其中該漿細胞惡性腫瘤或癌症係復發性/難治性多發性骨髓瘤。
  189. 如請求項181至188中任一項之方法，其中該生物樣本係血液樣本或骨髓穿刺樣本。
  190. 如請求項189之方法，其中該血液樣本係血液、血液成分、或從血液或血液成分中獲得的一種或多種細胞。
  191. 如請求項1至42中任一項之抗體或抗原結合片段、如請求項43至156中任一項之抗體-藥物軛合物、或如請求項157至160中任一項之藥物組成物，其用於治療患有或疑似患有癌症的受試者。
  192. 如請求項191之抗體、抗原結合片段、抗體-藥物軛合物或藥物組成物，其中該癌症表現BCMA。
  193. 如請求項191或請求項192之抗體、抗原結合片段、抗體-藥物軛合物或藥物組成物，其中該癌症係漿細胞惡性腫瘤。
  194. 如請求項191至193中任一項之抗體、抗原結合片段、抗體-藥物軛合物或藥物組成物，其中該漿細胞惡性腫瘤或癌症係白血病、淋巴瘤、漿細胞瘤或骨髓瘤。
  195. 如請求項191至194中任一項之抗體、抗原結合片段、抗體-藥物軛合物或藥物組成物，其中該漿細胞惡性腫瘤或癌症係多發性骨髓瘤、瀰漫性大B細胞淋巴瘤、外膜細胞淋巴瘤、漿母細胞性淋巴瘤、漿母細胞性骨髓瘤或柏基特氏淋巴瘤。
  196. 如請求項191至195中任一項之抗體、抗原結合片段、抗體-藥物軛合物或藥物組成物，其中該漿細胞惡性腫瘤或癌症係多發性骨髓瘤。
  197. 如請求項191至196中任一項之抗體、抗原結合片段、抗體-藥物軛合物或藥物組成物，其中該漿細胞惡性腫瘤或癌症係復發性/難治性多發性骨髓瘤。
  198. 如請求項191至197中任一項之抗體、抗原結合片段、抗體-藥物軛合物或藥物組成物，其中該抗體、抗原結合片段、抗體-藥物軛合物或藥物組成物用於與一種或多種另外的治療劑組合使用。
  199. 如請求項198之抗體、抗原結合片段、抗體-藥物軛合物或藥物組成物，其中該一種或多種另外的治療劑包括BCL2抑制劑、BCLxL抑制劑、BCL2/BCLxL抑制劑、和/或γ分泌酶抑制劑。
  200. 一種如請求項1至42中任一項之抗體或抗原結合片段、如請求項43至156中任一項之抗體-藥物軛合物、或如請求項157至160中任一項之藥物組成物在治療患有或疑似患有癌症的受試者中之用途。
  201. 如請求項200之用途，其中該癌症表現BCMA。
  202. 如請求項200或請求項201之用途，其中該癌症係漿細胞惡性腫瘤。
  203. 如請求項200至202中任一項之用途，其中該漿細胞惡性腫瘤或癌症係白血病、淋巴瘤、漿細胞瘤或骨髓瘤。
  204. 如請求項200至203中任一項之用途，其中該漿細胞惡性腫瘤或癌症係多發性骨髓瘤、瀰漫性大B細胞淋巴瘤、外膜細胞淋巴瘤、漿母細胞性淋巴瘤、漿母細胞性骨髓瘤或柏基特氏淋巴瘤。
  205. 如請求項200至204中任一項之用途，其中該漿細胞惡性腫瘤或癌症係多發性骨髓瘤。
  206. 如請求項200至205中任一項之用途，其中該漿細胞惡性腫瘤或癌症係復發性/難治性多發性骨髓瘤。
  207. 如請求項200至206中任一項之用途，其中該抗體、抗原結合片段、抗體-藥物軛合物或藥物組成物用於與一種或多種另外的治療劑組合使用。
  208. 如請求項207之用途，其中該一種或多種另外的治療劑包括BCL2抑制劑、BCLxL抑制劑、BCL2/BCLxL抑制劑、和/或γ分泌酶抑制劑。
  209. 一種如請求項1至42中任一項之抗體或抗原結合片段、如請求項43至156中任一項之抗體-藥物軛合物、或如請求項157至160中任一項之藥物組成物在製造用於治療患有或疑似患有癌症的受試者的藥物之方法中之用途。
  210. 如請求項209之用途，其中該癌症表現BCMA。
  211. 如請求項209或請求項210之用途，其中該癌症係漿細胞惡性腫瘤。
  212. 如請求項209至211中任一項之用途，其中該漿細胞惡性腫瘤或癌症係白血病、淋巴瘤、漿細胞瘤或骨髓瘤。
  213. 如請求項209至212中任一項之用途，其中該漿細胞惡性腫瘤或癌症係多發性骨髓瘤、瀰漫性大B細胞淋巴瘤、外膜細胞淋巴瘤、漿母細胞性淋巴瘤、漿母細胞性骨髓瘤或柏基特氏淋巴瘤。
  214. 如請求項209至213中任一項之用途，其中該漿細胞惡性腫瘤或癌症係多發性骨髓瘤。
  215. 如請求項209至214中任一項之用途，其中該漿細胞惡性腫瘤或癌症係復發性/難治性多發性骨髓瘤。
  216. 如請求項209至215中任一項之用途，其中該抗體、抗原結合片段、抗體-藥物軛合物或藥物組成物用於與一種或多種另外的治療劑組合使用。
  217. 如請求項216之用途，其中該一種或多種另外的治療劑包括BCL2抑制劑、BCLxL抑制劑、BCL2/BCLxL抑制劑、和/或γ分泌酶抑制劑。
  218. 一種分離的核酸，該分離的核酸編碼如請求項1至42中任一項之抗體或抗原結合片段。
  219. 一種分離的運載體，該分離的運載體包含如請求項218之核酸。
  220. 一種分離的細胞或細胞群，該分離的細胞或細胞群包含如請求項218之核酸或如請求項219之運載體。
  221. 一種產生抗體或抗原結合片段之方法，該方法包括在適合產生該抗體或抗原結合片段的條件下培養如請求項220之細胞或細胞群。
  222. 一種產生抗體-藥物軛合物之方法，該方法包括在允許軛合的條件下使如請求項1至42中任一項之抗體或抗原結合片段與連接至剪接調節劑的連接子反應。
  223. 一種產生抗體-藥物軛合物之方法，該方法包括在允許軛合的條件下使如請求項1至42中任一項之抗體或抗原結合片段與連接子和剪接調節劑反應。
  224. 如請求項223之方法，該方法包括使該抗體或抗原結合片段與該連接子和該剪接調節劑順序地反應，其中首先使該抗體或抗原結合片段與該連接子反應形成抗體-連接子中間體，然後使該抗體-連接子中間體與該剪接調節劑反應。
  225. 如請求項223之方法，該方法包括使該抗體或抗原結合片段與該連接子和該剪接調節劑同時反應。
  226. 如請求項222至225中任一項之方法，其中該連接子係可裂解連接子。
  227. 如請求項226之方法，其中該可裂解連接子包含MC-Val-Cit-pABC。
  228. 如請求項226之方法，其中該可裂解連接子包含MC-Val-Ala-pABC。
  229. 如請求項226之方法，其中該可裂解連接子包含MC-Ala-Ala-Asp-pABC。
  230. 如請求項226之方法，其中該可裂解連接子包含MC-Glu-Val-Cit-pABC。
  231. 如請求項226之方法，其中該可裂解連接子包含MC-(PEG)2 -Val-Cit-pABC。
  232. 如請求項226之方法，其中該可裂解連接子包含MC-β-葡糖苷酸。
  233. 如請求項222至232中任一項之方法，其中該剪接調節劑包含D1。
  234. 如請求項222至232中任一項之方法，其中該剪接調節劑包含D2。
  235. 如請求項161至167中任一項之方法，其中該漿細胞惡性腫瘤或癌症包括活躍分裂的細胞、休眠細胞或兩者。
  236. 如請求項161至167或請求項235中任一項之方法，其中該漿細胞惡性腫瘤或癌症包含休眠細胞。
  237. 如請求項161至167、請求項235或請求項236中任一項之方法，其中該漿細胞惡性腫瘤或癌症表現MCL1。
  238. 如請求項237之方法，其中該漿細胞惡性腫瘤或癌症具有高或中等水平的MCL1表現。
  239. 如請求項181至188中任一項之方法，其中該漿細胞惡性腫瘤或癌症包括活躍分裂的細胞、休眠細胞或兩者。
  240. 如請求項181至188或請求項239中任一項之方法，其中該漿細胞惡性腫瘤或癌症包含休眠細胞。
  241. 如請求項181至188、請求項239或請求項240中任一項之方法，其中該漿細胞惡性腫瘤或癌症表現MCL1。
  242. 如請求項241之方法，其中該漿細胞惡性腫瘤或癌症具有高或中等水平的MCL1表現。
  243. 如請求項191至197中任一項之抗體、抗原結合片段、抗體-藥物軛合物或藥物組成物，其中該漿細胞惡性腫瘤或癌症包括活躍分裂的細胞、休眠細胞或兩者。
  244. 如請求項191至197或請求項243中任一項之抗體、抗原結合片段、抗體-藥物軛合物或藥物組成物，其中該漿細胞惡性腫瘤或癌症包含休眠細胞。
  245. 如請求項191至197、請求項243或請求項244中任一項之抗體、抗原結合片段、抗體-藥物軛合物或藥物組成物，其中該漿細胞惡性腫瘤或癌症表現MCL1。
  246. 如請求項245之抗體、抗原結合片段、抗體-藥物軛合物或藥物組成物，其中該漿細胞惡性腫瘤或癌症具有高或中等水平的MCL1表現。
  247. 如請求項200至206中任一項之用途，其中該漿細胞惡性腫瘤或癌症包括活躍分裂的細胞、休眠細胞或兩者。
  248. 如請求項200至206或請求項247中任一項之用途，其中該漿細胞惡性腫瘤或癌症包含休眠細胞。
  249. 如請求項200至206、請求項247或請求項248中任一項之用途，其中該漿細胞惡性腫瘤或癌症表現MCL1。
  250. 如請求項249之用途，其中該漿細胞惡性腫瘤或癌症具有高或中等水平的MCL1表現。
  251. 如請求項209至215中任一項之用途，其中該漿細胞惡性腫瘤或癌症包括活躍分裂的細胞、休眠細胞或兩者。
  252. 如請求項209至215或請求項251中任一項之用途，其中該漿細胞惡性腫瘤或癌症包含休眠細胞。
  253. 如請求項209至215、請求項251或請求項252中任一項之用途，其中該漿細胞惡性腫瘤或癌症表現MCL1。
  254. 如請求項253之用途，其中該漿細胞惡性腫瘤或癌症具有高或中等水平的MCL1表現。
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Families Citing this family (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
AU2019279012A1 (en) 2018-06-01 2020-12-24 Eisai R&D Management Co., Ltd. Methods of using splicing modulators
US11572414B2 (en) 2019-11-07 2023-02-07 Eisai R&D Management Co., Ltd. Eribulin antibody-drug conjugates and methods of use
CN117794954A (zh) * 2021-08-03 2024-03-29 葛兰素史密斯克莱知识产权发展有限公司 生物药物组合物和稳定同位素标记肽图谱方法
WO2023239266A1 (en) * 2022-06-09 2023-12-14 Joint Stock Company "Biocad" Monoclonal antibody or antigen-binding fragment thereof that specifically binds to bcma, and use thereof
WO2024083161A1 (en) * 2022-10-19 2024-04-25 Multitude Therapeutics Inc. Antibody-drug conjugate, preparation method and use thereof
CN117069853B (zh) * 2023-10-11 2024-01-05 军科正源（北京）药物研究有限责任公司 一种靶向曲妥珠单抗的抗体及其用途

Family Cites Families (28)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4816567A (en) 1983-04-08 1989-03-28 Genentech, Inc. Recombinant immunoglobin preparations
US4880935A (en) 1986-07-11 1989-11-14 Icrf (Patents) Limited Heterobifunctional linking agents derived from N-succinimido-dithio-alpha methyl-methylene-benzoates
US4880078A (en) 1987-06-29 1989-11-14 Honda Giken Kogyo Kabushiki Kaisha Exhaust muffler
IL89220A (en) 1988-02-11 1994-02-27 Bristol Myers Squibb Co Immunoconjugates of anthracycline, their production and pharmaceutical preparations containing them
WO1990005144A1 (en) 1988-11-11 1990-05-17 Medical Research Council Single domain ligands, receptors comprising said ligands, methods for their production, and use of said ligands and receptors
KR100272077B1 (ko) 1990-08-29 2000-11-15 젠팜인터내셔날,인코포레이티드 이종 항체를 생산할 수 있는 전이유전자를 가진 인간이외의 동물
AU666852B2 (en) 1991-05-01 1996-02-29 Henry M. Jackson Foundation For The Advancement Of Military Medicine A method for treating infectious respiratory diseases
US5622929A (en) 1992-01-23 1997-04-22 Bristol-Myers Squibb Company Thioether conjugates
US5934272A (en) 1993-01-29 1999-08-10 Aradigm Corporation Device and method of creating aerosolized mist of respiratory drug
US6214345B1 (en) 1993-05-14 2001-04-10 Bristol-Myers Squibb Co. Lysosomal enzyme-cleavable antitumor drug conjugates
US6019968A (en) 1995-04-14 2000-02-01 Inhale Therapeutic Systems, Inc. Dispersible antibody compositions and methods for their preparation and use
EP0871490B1 (en) 1995-12-22 2003-03-19 Bristol-Myers Squibb Company Branched hydrazone linkers
PT885002E (pt) 1996-03-04 2011-07-14 Massachusetts Inst Technology Materiais e métodos para aumento da internalização celular
US5855913A (en) 1997-01-16 1999-01-05 Massachusetts Instite Of Technology Particles incorporating surfactants for pulmonary drug delivery
US5985309A (en) 1996-05-24 1999-11-16 Massachusetts Institute Of Technology Preparation of particles for inhalation
US5874064A (en) 1996-05-24 1999-02-23 Massachusetts Institute Of Technology Aerodynamically light particles for pulmonary drug delivery
ATE287257T1 (de) 1997-01-16 2005-02-15 Massachusetts Inst Technology Zubereitung von partikelhaltigen arzneimitteln zur inhalation
WO1999066903A2 (en) 1998-06-24 1999-12-29 Advanced Inhalation Research, Inc. Large porous particles emitted from an inhaler
TWI334866B (en) 2002-05-29 2010-12-21 Mercian Corp Novel physiologically active substances
PL1791565T3 (pl) 2004-09-23 2016-10-31 Modyfikowane cysteiną przeciwciała i koniugaty
WO2007043621A1 (ja) 2005-10-13 2007-04-19 Eisai R & D Management Co., Ltd. プラジエノライド ｂ及びプラジエノライド ｄの全合成方法
UA112434C2 (uk) 2011-05-27 2016-09-12 Ґлаксо Ґруп Лімітед Антигензв'язувальний білок, який специфічно зв'язується з всма
WO2013173393A1 (en) 2012-05-15 2013-11-21 Concortis Biosystems, Corp Drug-conjugates, conjugation methods, and uses thereof
US20140069822A1 (en) 2012-09-10 2014-03-13 Antec Leyden B.V. Electrochemical reduction of disulfide bonds in proteinaceous substances and electrochemical cell for carrying out such reduction
US9243058B2 (en) * 2012-12-07 2016-01-26 Amgen, Inc. BCMA antigen binding proteins
ES2829251T3 (es) 2015-06-19 2021-05-31 Eisai R&D Man Co Ltd Inmunoglobulinas conjugadas por la cys80
BR112018012388A2 (pt) 2015-12-18 2018-12-04 Eisai R&D Management Co., Ltd. imunoglobulinas conjugadas de lisina terminal-c
WO2019232449A1 (en) 2018-06-01 2019-12-05 Eisai R&D Management Co., Ltd. Splicing modulator antibody-drug conjugates and methods of use

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