TW202207958A - 用於子宮內膜異位症患者之組成物及其組合 - Google Patents

Abstract

本發明係關於一種釀酒酵母、白藜蘆醇和薑黃萃取物的組合用於治療患有子宮內膜異位症或易患子宮內膜異位症患者的用途。本發明的組合可用於治療或預防患有子宮內膜異位症或易患子宮內膜異位症患者的子宮內膜異位病灶，例如減緩進展或減少子宮內膜異位病灶。該組合還可用於治療或預防與子宮內膜異位症相關的一種或多種症狀或疾病。本發明還關於一種基於該組合的藥物或營養品組成物和套組。

Description

用於子宮內膜異位症患者之組成物及其組合

相關申請案的交互參照

本申請主張2020年5月19日提交的法國申請案號FR20 05097的優先權之利益。藉由引用將上述申請案的全部內容併入本文中。

本發明係關於健康領域，更具體地係關於子宮內膜異位症以及與子宮內膜異位症相關的症狀和疾病的治療及管理。

子宮內膜異位症的定義是子宮腔外存在子宮內膜組織，該組織尤其可以存在於子宮壁、輸卵管、卵巢、子宮骶韌帶的水平，但也存在於膀胱和結腸的水平；因此，同一名患者的多個器官可能受到影響。在極少數情況下，子宮內膜異位病灶也可能出現在遠離子宮的器官水平，例如肺。這種子宮外組織具有與子宮內膜相同的特徵，並且在卵巢激素的影響下以相同的方式運行；在這種情況下，月經出血沒有途徑排出體外，這種滯留的血液會導致鄰近組織發炎而造成多種問題：病灶、囊腫、器官之間的粘連。

因此，在患有子宮內膜異位症的患者中，我們可能會觀察到卵巢或腹膜表面的淺表結節性病灶、卵巢囊腫(子宮內膜異位症)，以及侵入直腸陰道區、膀胱和子宮骶韌帶等區域的深部結節，以及影響骨盆的粘連，這可能導致凍結樣骨盆。

子宮內膜異位症是多態性的：受影響的器官以及相關的症狀和疾病因患者而異。存在一個分類，其允許根據病灶數量和受影響的器官將子宮內膜異位症分為4個階段；然而，子宮內膜異位症的階段(I-IV)及其對生育能力和相關疼痛的影響之間沒有明確的相關性。

實際上，與子宮內膜異位症相關的主要症狀和障礙是疼痛和不孕症；主要症狀是複發性骨盆疼痛，有時非常劇烈，特別是在月經期(痛經)，這種循環特點是其疾病的特徵，這些病灶實際上對女性荷爾蒙很敏感，表現得像子宮組織；因此，病灶會在每個月經週期增殖、流血並留下纖維疤痕。在一些患者中，病灶的大量神經支配可能會導致有時感到極度疼痛，在月經期之外，患者也可能在排卵期、性交期間(性交疼痛)甚至排尿或排便時受到影響。

第二個症狀是生育障礙。實際上，很大比例的子宮內膜異位症患者患有生育力低下或不孕症。

此外，子宮內膜異位症是一種常見的病理，具有相當大的社會經濟影響，這種病理影響至少10~15%的女性。在法國，根據INSEE(2014年)的一項研究，有2.1至420萬名之間的婦女受到子宮內膜異位症的影響，與之相對300萬名患有癌症，270萬名患有2型糖尿病。

子宮內膜異位症可能對患者的生活產生非常顯著的影響，特別是因為其引起非常劇烈的疼痛，可能導致停工和曠工，以及由於不孕和性交疼痛，對親密生活和家庭生活產生不利影響。法國子宮內膜異位症的成本估計每年約為95億歐元，這個數字既包括直接成本(患者護理)，也包括影響生產力的間接成本(病假)。2010年至2013年間，與子宮內膜異位症相關的住院人數也增加了7.5%(Petit，2016 年)。

子宮內膜異位症的病因尚不清楚，且無法治癒該疾病。

子宮內膜異位症的治療涉及疼痛和不孕症的處理，以及病灶的穩定。除了治療疼痛(主要基於在需要時服用非類固醇抗炎藥(NSAID))，一線治療通常係旨在抑制月經的激素治療，並基於服用孕激素(去氧孕烯型)或雌激素-孕激素口服避孕藥連續服用，或使用孕激素植入物或線圈。這種類型的治療可以減輕與子宮內膜異位病灶的激素反應相關的疼痛，且可使病灶穩定，甚至可稍微減小其體積；然而，並不會完全消除其病灶。其他治療方法可用於建立人工更年期，但由於其副作用，這些治療方法通常只在短時間內開處方；這種類型的治療包括GnRH類似物(亮丙瑞林(leuprolide)、曲普瑞林(triptorelin))和抗雄激素藥，例如達那唑(danazol)，其通常使用最多3~6個月的時間，例如在手術前或手術後。

在法國，不孕症的一線治療主要基於醫學輔助生殖技術，尤其是體外受精。

如果疼痛或不孕症的藥物治療失敗，或者結節侵入性太大，二線治療為手術。然而，切除與子宮內膜異位症相關的病灶可能很困難，且非常具有侵入性，尤其是在直腸乙狀結腸等區域；手術後的複發也很常見，特別是因為不可能全部或完全去除其病灶。

因此，目前需要用於治療患有子宮內膜異位症患者的新策略。

本發明係關於一種來自釀酒酵母 (Saccharomyces cerevisiae) 菌種的酵母、白藜蘆醇和薑黃萃取物的組合，特別係用於治療患有子宮內膜異位症或易患子宮內膜異位症的患者。本發明的組合可用於治療或預防患有子宮內膜異位症或易患子宮內膜異位症的患者的子宮內膜異位病灶，例如減緩進展或減少子宮內膜異位病灶。本發明的組合還可用於治療或預防與子宮內膜異位症相關的一種或多種症狀或病症，該等症狀或病症選自以下組成之群組：生育力低下、不孕症、骨盆腔疼痛特別是痛經和性交疼痛、經期疼痛特別是泌尿或腸道水平、泌尿和腸道疾病、子宮出血(metrorrhagia)、直腸出血(proctorrhagia)、慢性腹膜炎症、腸道通透性過高、慢性疲勞及其組合。本發明的組合還可用於使患有子宮內膜異位症或易患子宮內膜異位症的患者的腸道通透性正常化、調節免疫狀態、維持生育能力及/或降低氧化壓力。

來自釀酒酵母菌種的酵母、白藜蘆醇和薑黃萃取物可包含在單一藥物、營養品或營養組成物中，或者分佈於旨在同時或依序給藥的幾種單獨藥物、營養品或營養組成物中。

在一些實施例中，患者患有子宮內膜異位症且已經或將要進行子宮內膜異位病灶切除的手術治療、醫學輔助生殖的醫學方案，特別是體外受精及/或正在接受避孕治療。

在其他實施例中，本發明的組合包括在食品補充劑中，任選地具有一種或多種具有生理或營養目的的成分，較佳地選自維生素、微量元素、礦物質、益生元、益生菌、抗氧化劑、胺基酸及其組合；更佳地選自葉酸和5-甲基四氫葉酸、維生素B6、維生素B12、鋅、鎂、鈣、硒、錳、菊粉、果寡醣/半乳寡醣、阿拉伯樹膠、瓜爾膠、肌醇及其組合。

另一態樣，本發明關於一種藥物、營養品或營養組成物，較佳地以食品補充劑的形式，其包含以下所述比例的釀酒酵母、白藜蘆醇和薑黃萃取物的組合：

1~50wt%的釀酒酵母；

10~50wt%的白藜蘆醇；以及

1~50wt%，例如1~20wt%或10~50wt%的薑黃萃取物。

釀酒酵母、白藜蘆醇和薑黃萃取物的總重為100wt%或佔該組成物總重量的100wt%，該組成物較佳地適用於治療患有子宮內膜異位症或易患子宮內膜異位症的患者。

該組成物可進一步包含一種或多種益生元及/或維生素、礦物質及/或微量元素及/或植物、水果、蔬菜、藻類或真菌的粉末或萃取物及/或一種或多種益生菌；較佳地，該益生菌不為乳桿菌屬的細菌。

本發明的組成物，其可為劑量單位的形式，例如片劑或膠囊的形式，每個劑量單位包含：

10~300mg，較佳地為25~250mg的白藜蘆醇；

1~300mg或10~300mg，較佳地為5~25mg或25~250mg的薑黃萃取物；以及

1x10⁷ ~1x10¹¹ CFU，較佳地為1x10⁸ ~1x10⁹ CFU的釀酒酵母。

該組成物可進一步包含菊粉和鋅，例如，本發明的組成物，其特徵可在於為劑量單位的形式，包含：

30~70mg的白藜蘆醇，較佳地為反式白藜蘆醇；

5~25mg與環糊精相關的薑黃萃取物形式的類薑黃素；

1x10⁸ ~1x10¹⁰ CFU，較佳地為2x10⁸ ~6x10⁸ CFU，例如3x10⁸ ~5x10⁸ CFU布拉氏(boulardii)釀酒酵母菌種的釀酒酵母；

任選地10~100mg，較佳地為25~50mg的菊粉；以及

任選地1~15mg的鋅(Zn²⁺ )，較佳地為2~8mg的鋅，例如以雙甘胺酸鋅(zinc bisglycinate)的形式引入。

本發明還關於一種包含兩種組成物組合的藥物、營養品或營養套組：

第一組成物包含較佳地為1x10⁷ ~1x10¹¹ CFU的量的釀酒酵母；以及

第二組成物包含較佳為10~300mg的量的白藜蘆醇，以及1~300mg，例如10~300mg的量的薑黃萃取物；該套組較佳地適用於治療患有或易患有子宮內膜異位症的患者。

本發明的組合、組成物或套組，其特徵可在於：

釀酒酵母為布拉氏釀酒酵母菌種的釀酒酵母；及/或

白藜蘆醇萃取物以富含反式白藜蘆醇的植物萃取物的形式提供，例如滴定至至少95wt%的反式白藜蘆醇的日本虎杖(Japanese knotweed)萃取物；及/或

包含至少15wt%類薑黃素的薑黃萃取物；及/或

薑黃萃取物包含薑黃素、去甲氧基薑黃素及雙去甲氧基薑黃素；及/或

薑黃萃取物包含相較於其萃取物中存在的類薑黃素的總重量計至少55wt%，較佳地為至少60wt%的薑黃素；及/或

薑黃萃取物封裝在環糊精中，較佳地為γ-環糊精；及/或

薑黃素萃取物與封裝或載體系統，較佳地為環糊精組合。

本發明還關於一種白藜蘆醇、薑黃萃取物和釀酒酵母的組合用於製備治療患有子宮內膜異位症或易患子宮內膜異位症的患者的營養品或藥物組成物的用途，更精確地係用於治療或預防子宮內膜異位症或其症狀。

本發明進一步關於一種治療患有子宮內膜異位症或易患子宮內膜異位症的患者的方法，包含向該患者給藥有效劑量的白藜蘆醇、薑黃萃取物和釀酒酵母。

子宮內膜異位症是一種以異位子宮內膜存在為特徵的疾病，其在卵巢和腹腔內形成囊性病灶，關於這種疾病的病理生理學知之甚少。最近的研究表明，子宮內膜異位症是一種免疫性、雌激素依賴性炎症甚至自身免疫性疾病(Ahn, 2016; Khan, 2010; Lin, 2016; Malutan, 2015)。也有人提到生態失調及/或腸道和陰道的高通透性以及氧化壓力會對疾病的進展產生影響(Baker, 2017; Laschke, 2015; Puca, 2017; Ito, 2017; Scutiero, 2017)。

令人驚訝的是，發明人已經表明，相較於對照組動物以及用白藜蘆醇和薑黃萃取物組合治療的動物，在子宮內膜異位症的動物模型中，於治療12週後，酵母菌、白藜蘆醇和薑黃萃取物(Curcuma longa)的組合給藥能夠顯著減緩子宮內膜異位病灶的進展。

發明人也表明，這種活性成分的組合可以藉由增加1型巨噬細胞相對於2型巨噬細胞的比例來調節免疫狀態，在對照組動物中或用白藜蘆醇和薑黃萃取物組合治療的動物中未觀察到這種作用。

因此，發明人已經表明，本發明的三種活性成分，即釀酒酵母、白藜蘆醇和薑黃萃取物，發揮協同作用，可以阻止子宮內膜異位病灶甚至使其消退，並調節患者的免疫狀態。

發明人也表明，白藜蘆醇、薑黃萃取物和釀酒酵母的組合給藥可減少促炎細胞因子如TNFα和白介素6的產生，以及細胞氧化壓力；值得注意的是，這種活性成分的組合還可以降低連蛋白的血漿水平，連蛋白是一種與腸道高通透性有關的蛋白質，是一種低度炎症反應的生物標誌物。

總結，白藜蘆醇、薑黃萃取物和釀酒酵母的組合給藥可預防或治療子宮內膜異位病灶的進展，這種活性成分的組合還可以調節免疫系統，特別是調節巨噬細胞M1/M2的比例，並使子宮內膜異位症患者的腹膜水平的炎症狀態正常化，特別是藉由降低氧化壓力和腸道通透性。

因此，本發明係關於白藜蘆醇、薑黃萃取物和釀酒酵母的組合用於治療患有子宮內膜異位症或易患子宮內膜異位症患者的用途；更精確地說，本發明係關於白藜蘆醇、薑黃萃取物和釀酒酵母的組合在治療或預防子宮內膜異位症或其症狀或相關疾病中的用途。

本發明進一步關於白藜蘆醇、薑黃萃取物和釀酒酵母的組合用於製備治療患有子宮內膜異位症或易患子宮內膜異位症的患者，更精確地說係用於治療或預防子宮內膜異位症或其症狀。

本發明還關於治療患有子宮內膜異位症或易患子宮內膜異位症的患者的方法，包含向該患者給藥有效劑量的白藜蘆醇、薑黃萃取物和釀酒酵母。本發明還關於一種包含白藜蘆醇、薑黃萃取物和釀酒酵母的組合的套組或組成物，較佳地為藥物、營養品或食品組成物，該組成物或該套組適用於患有子宮內膜異位症或易患子宮內膜異位症的患者。一般定義

如本文所用，術語「疾病(disorder)」、「異常(anomaly)」或「病變(affection)」是可互換的，並且指的是身體功能不正常的器官、部分、結構或系統；較佳地，術語「病變(affection)」表示健康病變，例如干擾正常的生理或心理功能。

如本文所用，「藥物組成物」表示一種或多種活性劑與其他任選的化學成分例如生理上合適的載體及/或賦形劑的製劑；藥物組成物的目的係促進活性劑給藥於生物體。本發明的組成物可以是適合任何給藥途徑或常規使用的形式。藥物組成物通常包含藥學上可接受的載體。

如本文所用，術語「藥學上可接受的載體」或「藥學上可接受的賦形劑」是可互換的，且包含本領域技術人員已知可用於配製藥物或獸用組成物的製劑的所有化合物或化合物的組合。在本發明的上下文中，「生理學上可接受的」或「藥學上可接受的」係指不干擾活性藥物成分(此處指白藜蘆醇、薑黃萃取物和釀酒酵母的組合)的生物活性功效的任何介質或添加劑，且在給藥濃度下對患者沒有過度毒性及/或給藥時不會產生不良反應。生理學上可接受的媒介物、載體或賦形劑可適合施用於人及/或動物(特別是哺乳動物)。

如本文所用，術語「醫藥產品」包括供人類在人類醫學中使用的醫藥產品，係指提供治療及/或有益效果的任何藥理學上可接受的物質，本文所用術語「醫藥產品」不一定限於需要上市許可的物質，而是可包含可用於化妝品和營養組成物，例如食品補充劑的物質。

術語「營養食品」係指由食品物質製成的組成物或產品，但以片劑、粉末、藥水或其他通常與食品無關的格林製劑形式提供，且對人類的病變或疾病具有有益的生理作用或保護作用，特別是其定義包括食品補充劑、特定群體的某些食品或膳食替代品。

「營養組成物」係指包含食物成分如常量營養素、微量營養素、植物或植物萃取物或具有營養或生理作用的物質的任何組成物，目的是補充人類的飲食以改善後者的營養狀態並從而促進良好的健康狀態；正如本文所設想，營養保健品是分離的營養素、食品補充劑或包含在特定人群的某些食品中。因此，營養組成物包括例如本發明的組合和任選的食品級組分，特別是加工添加劑或助劑。

本文中，「食品補充劑」係指與其他食品分開配製和給藥的任何組成物，其目的是補充患者的營養攝入，具有藥理學上可接受的形式，特別是硬膠囊、片劑、軟膠囊、小袋、棒狀包裝、糖漿劑、包裝在安瓿中的口服溶液、滴管或本領域技術人員熟悉的任何其他合適的形式。

術語「食品(food)」、「食物產品(food product)」和「糧食(foodstuff)」在此可互換使用，除人類通常食用的食品外，還包含功能性食品和特定群體的食品，其本身包含用於特殊醫療目的的食品。

「食物組成物」係指包含食物成分例如常量營養素、微量營養素、維生素、礦物質、微量元素或具有營養或生理作用的物質的任何組成物；正如本文所設想，食品是常規食品、功能性食品或轉化食品。因此，根據定義，食品組成物可以是本領域技術人員已知的各種食品。

食物組成物可以特別是用於人類營養的食物，其可以是液體、糊狀物或固體。舉例而言，食品可以是乳製品，例如奶酪、黃油、奶油、酸奶、冰淇淋、奶酪；烘焙產品，例如麵包、餅乾和蛋糕；基於水果的產品，例如果汁、水果沙拉或水果醬、基於大豆的食品、基於澱粉的食品、糖果產品、食用油組成物、可塗抹的糊狀物、早餐穀物、食品棒；餅乾、零食、口香糖；飲料、能量飲料，濃縮飲料；飲料補充劑(添加到飲料中的粉末)等，但不限於此。

一特定態樣，食物組成物不是基於乳；較佳地，食品組成物不包含人乳或動物乳的蛋白質或寡醣。舉例而言，本發明的食品組成物包含本發明的活性物質和至少一種上述食品或飲料的組分的組合。

本文中，術語「功能性食品」係指形成正常飲食的一部分並除了其包含的常規營養素外提供生理益處及/或降低疾病或紊亂的風險及/或減輕與其相關的症狀的常規食品。

如本文所用，術語「食品添加劑」係指在給藥於患者之前旨在與一種或多種其他食品混合的化合物或組成物；更具體地，「食品添加劑」係指食品法典食品添加劑通用標準Codex Stan 192-1995中所定義的任何添加劑，即不單獨作為食品消費，也不單獨用作一種食品的典型成分的任何物質，無論其是否具有營養價值，且在製造、加工、製備、處理、包裝(packaging)、包裝(wrapping)、運輸或儲存該食品的任何步驟中出於技術(包括感官)目的有意添加到食品中涉及或很可能直接或間接涉及，將其或其衍生物摻入該食品中或可能以其他方式影響其特性。

如本文所用，「益生元」係指一種成分或基質，其被宿主的微生物選擇性使用，賦予健康益處，其可允許在益生菌的組成及/或活性方面引起有益的變化。益生元可以是可食用的食物或飲料或其成分，益生元可包括複合碳水化合物、多酚和多不飽和脂肪酸；益生元通常是一種難以消化的碳水化合物，例如寡醣或多醣，或糖醇，在沒有腸道微生物的情況下，不會在上消化道中降解或吸收；較佳地，本發明的益生元如2016年9月26日的法令中所定義，該法令建立了食品補充劑中允許的具有營養或生理目的的物質及其使用條件的清單。

如本文所用，術語「益生菌」係指活細菌或滅活細菌，當以合適的量施用時，對宿主生物體具有有益作用，這些組成物的優點在於其適合施用於人和其他哺乳動物患者；益生菌物質含有足夠多的益生菌微生物，可對腸道微生物群產生直接或間接的作用。應當注意是，為了本說明書的目的，「益生菌」係指益生菌的任何生物活性形式，較佳但不完全是酵母、乳酸桿菌、雙歧桿菌、桿菌、鏈球菌、腸球菌、丙酸桿菌或釀酒酵母，但也包含構成「正常腸道菌群」的其他微生物，或者細菌壁的碎片或這些微生物的DNA的碎片；較佳地，本發明的益生菌，如聯合國糧食及農業組織(FAO)和世界衛生組織(WHO) 2001年進行的在食品(含有活乳酸菌的奶粉)中評估益生菌的健康和營養特性的FAO/WHO專家的混合磋商中所定義包含。

下文中使用的術語「微生物群(microbiota)」或「微生物區系(microflora)」可互換，表示環境中(永久或暫時)存在的所有微生物物種，包含真核生物、古細菌、原核生物和病毒。術語「微生物組(microbiome)」是指微生物群的「遺傳內容(genetic contents)」，包含基因體DNA、核醣體RNA、表觀基因體、質體和微生物群的所有其他類型的遺傳信息；較佳地，這些術語在此係指人類腸道微生物群的細菌。

如本文所用，術語「酵母(yeast)」表示微小真菌，具有寬度為千分之幾毫米的卵形細胞，易於彼此分離並因此非常適合在液體中繁殖。術語「酵母」包括酵母屬的所有物種。

如本文所用，術語「細菌(bacterium)」表示以單個細胞、群體或個體細胞聚集體的形式存在的任何原核微生物。術語「細菌」包含細菌的所有變體(例如，內源性細菌或環境細菌)，更特別是人類或動物微生物群的細菌，尤其是腸道微生物群。

如本文所用，術語「包含(comprising)」或「包含(comprises)」用於指對本發明必不可少的物質、化合物或方法，但其對包含非特定元素開放，無論是否必需。「包含」的使用表示包含而非限制。

此處使用的術語「及/或」應被視為對指定的兩個特徵或組件中的每一個的具體描述，有或沒有另一個；舉例而言，「A及/或B」將被視為對以下每個要素的具體披露：(i)A、(ii)B和(iii)A和B，就好像它們中的每一個都是單獨表示的。

本文使用的與所有數值(包括數值範圍的下限和上限)相關的術語「約」表示具有高達±10%(例如，±0.5%、±1%、±1.5%、±2%、±2.5%、±3%、±3.5%、±4%、±4.5%、±5%、±5.5%、±6%、±6.5%、±7%、±7.5 %、±8%、±8.5%、±9%、±9.5%)。在數值列表的開頭使用術語「約」來修飾其中的每一個(即「約1、2和3」係指約1、約2和約3)。此外，當描述數值列表時(例如大約50%、60%、70%、80%、85%或86%)，其列表包括其所有中間值和分數值(例如54%或85.4%)。

本文所用的術語「基本上由……組成」定義了一種組成物，其中除提及的那些元素之外的元素不佔組成物的5wt%以上，較佳地不超過3wt%，更佳地不超過1wt%。本發明之用途

第一態樣，本發明係關於白藜蘆醇、薑黃萃取物和釀酒酵母的組合用於治療患有子宮內膜異位症或易患子宮內膜異位症的患者的用途。

本發明的組合可用於治療患有子宮內膜異位症的患者，更精確地說，本發明係關於白藜蘆醇、薑黃萃取物和釀酒酵母的組合在治療或預防子宮內膜異位症或其症狀或相關疾病中的用途。

本發明特別係關於白藜蘆醇、薑黃萃取物和釀酒酵母的組合用於治療或預防子宮內膜異位病灶的用途；更具體地，本發明的組合可用於預防或減緩子宮內膜異位病灶的進展，或用於減少患有子宮內膜異位症或易患子宮內膜異位症的患者的子宮內膜異位病灶的體積或重量。

某一態樣，本發明的白藜蘆醇、薑黃萃取物和釀酒酵母的組合用於預防或治療例如減輕患有子宮內膜異位症或易患子宮內膜異位症的患者的慢性腹膜炎。

另一態樣，本發明的白藜蘆醇、薑黃萃取物和釀酒酵母的組合用於預防或治療例如降低腸道通透性過高或用於使患有子宮內膜異位症或易患子宮內膜異位症的患者的腸道通透性正常化。

另一態樣，本發明的白藜蘆醇、薑黃萃取物和釀酒酵母的組合用於在患有子宮內膜異位症或易患子宮內膜異位症的患者中使免疫狀態正常化或調節，例如促進免疫系統的正常功能。

另一態樣，本發明的白藜蘆醇、薑黃萃取物和釀酒酵母的組合用於預防或降低患有子宮內膜異位症或易患子宮內膜異位症的患者的腹膜水平的氧化壓力。

另一態樣，本發明的白藜蘆醇、薑黃萃取物和釀酒酵母的組合用於預防或治療一種或多種與子宮內膜異位症相關的症狀或疾病。

本發明的組合可用於例如預防或降低患有以下疾病的患者的疼痛頻率及/或強度，例如盆腔疼痛如痛經和性交疼痛和月經疼痛，例如在患有子宮內膜異位症或易患子宮內膜異位症的患者的腸道或泌尿水平。

本發明的組合還可用於治療或預防患有子宮內膜異位症或可能患有子宮內膜異位症的患者的生育力低下或不孕症。本發明的組合還可用於改善患有子宮內膜異位症或易患子宮內膜異位症的患者的生育能力或維持正常生育能力。

本發明的組合可用於維持患有子宮內膜異位症或易患子宮內膜異位症的患者的生育能力。本發明的組合可特別用於使患有子宮內膜異位症或易患子宮內膜異位症的患者的激素狀態正常化或改善，例如使AMH(抗苗勒管激素，antimüllerian hormone)及/或雌二醇(estradiol)的血漿水平正常化或改善。

另一態樣，本發明的組合可用於改善患有子宮內膜異位症或易患子宮內膜異位症的患者的一般狀況。

「改善一般狀況」係指改善患者的生理及/或心理狀態，尤其是可使其生活品質的改善；本發明的組合可使疾病和相關症狀更容易忍受，其可為本發明的組合的非治療用途。

因此，另一態樣，本發明係關於白藜蘆醇、薑黃萃取物和釀酒酵母的組合作為改善患有或易患子宮內膜異位症的患者的健康狀況及/或生活品質。特別地，本發明係關於白藜蘆醇、薑黃萃取物和釀酒酵母的組合作為食品補充劑在管理患有或易患子宮內膜異位症的患者中的非治療用途。1. 本發明的子宮內膜異位症和相關症狀和疾病

如先前技術部分所述，子宮內膜異位症是一種病理，其特徵在於子宮腔外存在子宮內膜組織，其組織尤其可以存在於子宮壁、輸卵管、卵巢、子宮骶韌帶的水平，但也存在於膀胱和結腸的水平。

在本發明的意義上，術語「子宮內膜異位症」包含子宮內膜異位症的所有已知形式，包括子宮腺肌病、子宮內膜異位症、深部子宮內膜異位症或根據美國生育學會分類的I~IV期的子宮內膜異位症。

包含但不限於疼痛、異常或過度出血，例如直腸出血、尿血和子宮出血，消化或泌尿系統疾病，例如腹瀉、便秘、頻尿和/或排尿疼痛，尤其是在月經期間，慢性疲勞、生育力低下和不孕症；與子宮內膜異位症相關的症狀和障礙還包含慢性腹膜炎、腸道通透性過高和陰道及/或腸道菌群失調。

與子宮內膜異位症相關的疼痛是各式各樣的，尤其包括痛經(月經期間的骨盆疼痛)、腰痛、性交疼痛以及尤其是在泌尿或腸道水平的月經疼痛。

在本發明的上下文中，「生育力低下(hypofertility)」係指女性在沒有避孕的情況下進行至少6個月的正常性關係後仍未懷孕。「不孕症」係指女性在未採取避孕措施的情況下進行正常性關係24個月後仍未懷孕。

「定期性關係」對應於至少每48小時進行一次性交。在一具體實施例中，本發明的活性物質的組合用於治療或預防與子宮內膜異位症相關的症狀或疾病，該症狀或疾病選自痛經、性交疼痛、慢性疲勞、生育力低下、不孕症及其組合。

在本發明的上下文中，術語「治療(treat)、治療(treatment)」係指獲得所需的藥理學及/或生理學效果；就完全或部分預防病理學或相關疾病或其症狀而言，其作用可以是預防性的及/或在部分或完全治癒該疾病方面可以是治療性的。本文所用的術語「治療」涵蓋對感興趣對象的疾病的任何治療，用於：在沒有症狀的一段時間內降低疾病或病症的發生率及/或複發風險；緩解或減輕與疾病相關的症狀或病症；預防疾病或相關症狀或病症或在患有或易患其疾病的患者中進展的病症；停止、減緩或延遲疾病或相關症狀或病症的進展；減少疾病發作的頻率及/或強度，例如症狀；以及減輕疾病或相關症狀或病症，即使該疾病、相關症狀或病症的完全或部分消退。

例如，本發明的組合可用於預防(例如預防、減緩或延遲)子宮內膜異位病灶的出現和進展及/或減少或甚至治療子宮內膜異位病灶。

作為另外的實例，本發明的組合可用於治療，例如降低患有子宮內膜異位症的女性盆腔疼痛的頻率及/或強度。

本發明的患者是任何年齡的經期婦女，特別是在12歲和50歲之間，較佳地在14歲和45歲之間。

「患有子宮內膜異位症的患者」係指已被診斷出存在至少一個子宮內膜異位病灶的女性，例如在臨床檢查期間，藉由成像技術(超音波檢查、MRI)或藉由腹腔鏡檢查。「患有子宮內膜異位症的女性」尤其包括處於緩解期的女性，例如為了消除或減少子宮內膜異位症的病灶而進行了醫學或手術治療的女性。

患有子宮內膜異位症的患者可能正在接受用於控制子宮內膜異位症或其症狀的治療，包括服用避孕藥，特別是口服避孕藥、NSAID，以及用於醫學輔助生殖的治療，特別是卵巢刺激治療，甚至水療；其也可能是替代醫學的治療(整骨療法、針灸、運動療法、自我催眠、心理療法…等)。

患有子宮內膜異位症的女性可能具有上述一種或多種疾病或症狀。在一個較佳實施例中，患有子宮內膜異位症的婦女具有至少一種選自痛經、性交疼痛、慢性疲勞、不孕症及其組合的症狀或疾病。

「易患子宮內膜異位症的患者」或「易患子宮內膜異位症的患者」係指具有表明存在子宮內膜異位症的臨床表現的女性，例如在月經期間表現出強烈或劇烈的疼痛及/或生育力低下或不孕症及/或有家族疾病史(例如患有子宮內膜異位症的母親、阿姨、祖母及/或姐妹)。2. 本發明的活性成分的組合

本發明的活性成分的組合包含白藜蘆醇、薑黃萃取物和釀酒酵母。

根據本發明，「活性成分的組合」或「活性成分的結合」係指一組活性物質，其可相互作用或協同作用以獲得一種或多種藥理學及/或生理學及/或營養學效果，目的是改善患者的一般狀況及/或治療或預防病理學或其相關症狀或疾病。如上所述，本發明的活性成分的組合可用於治療患有子宮內膜異位症或易患子宮內膜異位症的患者。白藜蘆醇

白藜蘆醇是一種存在於許多植物物種中的芪類多酚，在本發明的意義上，術語白藜蘆醇包含反式異構體和順式異構體。在某些實施例中，白藜蘆醇是反式和順式異構體的混合物形式；在其他實施例中，白藜蘆醇是反式異構體的形式，因此其為CAS No.501-36-0的反式白藜蘆醇。

較佳地，白藜蘆醇以反式白藜蘆醇的形式存在。

白藜蘆醇可藉由化學合成製備或可從已知包含白藜蘆醇的任何植物或植物部分開始純化，例如葡萄、日本虎杖、可可、蔓越莓、桑椹或堅果的漿果、果核、葉和芽。

白藜蘆醇可以純形式提供，即純度至少為99%。

如果適用，白藜蘆醇可以富含白藜蘆醇的植物萃取物的形式提供，即相對於萃取物的乾物質重量計，具有至少50wt%(例如至少60wt%、70wt%、80wt%、85wt%、90wt%或95wt%)的白藜蘆醇。

在一具體實施例中，白藜蘆醇以滴定至至少95wt%的日本虎杖(Fallopia japonica (Houtt.) Ronse Dec., Polygonaceae)的萃取物形式存在，例如相對於組成物的總重量，按重量計至少98wt%的反式白藜蘆醇。

根據本發明，白藜蘆醇的單日劑量可以在10~300mg的範圍內，例如25~250mg、25~100mg，較佳地為30~70mg或40~60mg。釀酒酵母

在本發明的意義上，「酵母菌釀酒酵母(yeast Saccharomyces cerevisiae)」或「釀酒酵母酵母菌(Saccharomyces cerevisiae yeast)」係指屬於釀酒酵母菌種的任何酵母。釀酒酵母菌種特別包括布拉氏(boulardii)釀酒酵母菌種以及釀酒酵母(cerevisiae)菌種。

較佳地，本發明是用屬於布拉氏(boulardii)釀酒酵母菌種的釀酒酵母進行的。

在一具體實施例中，酵母菌釀酒酵母選自布拉氏(boulardii)釀酒酵母菌種的菌株、釀酒酵母(cerevisiae)菌種的菌株及其組合。

在一個較佳的實施例中，酵母菌釀酒酵母選自屬於布拉氏(boulardii)釀酒酵母菌種的菌株。

幾種釀酒酵母菌株，特別是布拉氏釀酒酵母菌種，其可商購獲得。

我們可以特別提及由Lesaffre Human Care以Lynside^® Pro SCB商標銷售並在CNCM(國家微生物培養物保藏中心)註冊其編號為I-3799的菌株。

作為另外的實例，我們還可以提及由Biocodex Laboratories於1988年3月28日在CNCM-巴斯德研究所保藏的CNCM編號為I-745的菌株，該菌株可在商購獲得，例如在Ultra-levure^® 的產品中。我們還可以提及由Lallemand公司銷售的CNCM編號為I-1079的菌株或以ATCC(美國典型培養物保藏中心)編號為MYA-796或MYA-797保藏的菌株。

應當理解，本發明還關於釀酒酵母菌種，較佳為布拉氏釀酒酵母菌種的任何酵母的用途，以及從其細菌物種獲得的任何菌株或同源物的用途。術語「同源物(homolog)」、「變體(variant)」或「突變體(mutant)」是可互換的，係指與親本菌株(parent bacterial strain)的核苷酸序列(參考序列)具有同源性或序列同一性的細菌菌株，其包括與釀酒酵母菌種基因體的核苷酸序列具有至少95%、96%、97%、98%或99%同一性的菌株，較佳地具有以CNCM編號I-745註冊或以CNCM編號I-3799註冊的布拉氏釀酒酵母菌株基因體的核苷酸序列。突變體可以藉由基因工程技術獲得，該等技術能夠改變本發明菌株的遺傳物質或推斷本發明菌株的遺傳物質與其他分子的重組；通常，為了獲得這種突變株，本領域技術人員可以使用標準誘變技術，例如紫外線輻射或暴露於誘變化學品。

存在於本發明的組合中的酵母菌釀酒酵母可為活的或滅活的；較佳地，其酵母菌為活的形式。酵母菌釀酒酵母可以特別是水合的、凍乾的、冷凍的、噴霧形式的或允許其活體給藥於患者的任何其他形式。酵母菌可以原樣或在被吸收在合適的生理學上可接受的載體之後給藥。

例如，酵母菌以培養的活細菌的形式、營養形式或孢子形式給藥；或者，酵母菌以從微生物材料如糞便材料獲得的純化群體的形式提供。「活的(live)/存活(alive)」應理解為保持細胞的完整性，且如果酵母菌在合適的培養基和合適的條件下培養，細胞過程會發生或可能發生。任何活酵母菌都可以在合適的培養基上重新接種，並能夠在合適的條件下繁殖。

在某些實施例中，釀酒酵母以10⁷ ~10¹¹ ，特別是10⁷ ~10¹⁰ ，較佳地為10⁸ ~10¹⁰ 或10⁸ ~10⁹ 菌落形成單位(colony-forming units，CFU)的劑量給藥。

例如，酵母菌釀酒酵母以5~100mg重量的劑量給藥。

較佳地，該釀酒酵母屬於布拉氏釀酒酵母菌種的菌株，例如以CNCM No.I-3799或I-745保藏的菌株。

較佳地，本發明的組合包含每日施用2x10⁸ ~6x10⁸ CFU，更佳地為3x10⁸ ~5x10⁸ CFU的布拉氏釀酒酵母。薑黃萃取物

根據本發明，薑黃(Curcuma longa L.)又稱為薑黃素(curcumin)、薑黃(curcuma)或薑黃(turmeric)，是一種原產於亞洲的多年生植物，屬於薑科(Zingiberaceae family)；薑黃的根莖由黏液、多醣、精油、多酚和薑黃素組成，尤其是賦予根莖黃色/橙色。

「類薑黃素(Curcuminoids)」是二芳基庚烷類化合物，特別包含薑黃素及其衍生物，例如去甲氧基薑黃素或雙去甲氧基薑黃素。

薑黃素(1,7-雙(4-羥基-3-甲氧基苯基)-1,6-庚二烯-3,5-二酮)，也稱為二阿魏醯甲烷(diferuloylmethane，CAS No.:458-37-7)，是亞洲薑黃的主要類薑黃素。

組合中存在的薑黃萃取物通常是根莖萃取物，乾燥的或新鮮的薑黃，它可以是類薑黃素的標準化萃取物。

在本發明的意義上，術語「標準化(standardized)」或「標準化(standardize)」係指控制萃取物、油或任何其他成分以使其符合標準或某些分子的限定最低含量的概念，例如薑黃萃取物的類薑黃素。因此，針對類薑黃素標準化的薑黃萃取物是具有限定的最小薑黃素含量，較佳最小含量為15%的薑黃素的薑黃萃取物。

因此，本發明的薑黃萃取物包含相對於萃取物的總重量按重量計至少15wt%的類薑黃素，較佳地相對於萃取物的乾物質的總重量。

存在於本發明的組合中的薑黃萃取物可以藉由任何已知的萃取方法獲得，例如藉由使用有機溶劑萃取、藉由浸漬或煎煮或者藉由超臨界流體萃取；較佳地，薑黃根莖萃取物藉由包含使用可用於製備食品補充劑的溶劑例如醇或酯類如乙酸乙酯萃取的步驟的方法獲得。

有利地，本發明的薑黃萃取物為粉末形式，其水含量較佳地為低於萃取物總重量的15wt%(例如低於10wt%或5wt%)。本發明的較佳實施例，薑黃萃取物包含至少10、15、20、25、30、35、40或45wt%的類薑黃素。

在一具體實施例中，薑黃萃取物包含薑黃素、去甲氧基薑黃素及/或雙去甲氧基薑黃素；較佳地，薑黃素是萃取物中的主要類薑黃素。薑黃素可佔萃取物中存在的類薑黃素總重量的至少55wt%，較佳地為至少60wt%。

例如，薑黃萃取物包含以下比例的薑黃素、去甲氧基薑黃素和雙去甲氧基薑黃素：65~82wt%的薑黃素、15~25wt%的去甲氧基薑黃素和2~7wt%的雙去甲氧基薑黃素，百分比以相對於萃取物中存在的類薑黃素總重量的重量表示。

薑黃素

去甲氧基薑黃素

雙去甲氧基薑黃素

為了提高類薑黃素的生物利用度，薑黃萃取物可以使用載體或封裝系統如脂質體或籠形分子進行配製。在一具體實施例中，薑黃萃取物與環糊精，較佳地與γ-環糊精結合，其可特別是由Wacker銷售的產品CAVACURMIN^® 。

一特定態樣，本發明的組合包含藉由添加薑黃萃取物或以純化形式引入組成物中的薑黃素。

另一態樣，本發明的組合包含每日施用1~100mg的類薑黃素，較佳地為5~50mg的類薑黃素，例如10~30mg或10~20mg的類薑黃素，該等類薑黃素至少包含薑黃素，且較佳地包含薑黃素、去甲氧基薑黃素和雙去甲氧基薑黃素，且該等類薑黃素以薑黃萃取物的形式給藥。

較佳地，薑黃萃取物如上所述。較佳地，薑黃萃取物與γ-環糊精組合，且薑黃素與γ-環糊精的重量比在1~10，較佳地為2~8，更佳地為3~7，例如4~5的範圍內。3. 本發明的組合的給藥方案

本發明的組合或聯合，其可藉由任何合適的途徑對感興趣的患者進行給藥，例如藉由頰、口腔、鼻腔、經黏膜例如陰道、子宮內、直腸內或經皮途徑。

較佳地，本發明的組合藉由口服途徑給藥。

本發明的組合的成分，即白藜蘆醇、薑黃萃取物和釀酒酵母，其可同時給藥於患者；舉例而言，白藜蘆醇、薑黃萃取物和釀酒酵母可存在於相同的藥物、營養品或營養組成物中。或者，白藜蘆醇、薑黃萃取物和釀酒酵母可隨著時間的推移分開、相繼或分開給藥；舉例而言，白藜蘆醇、薑黃萃取物和釀酒酵母可以套組的形式給藥，即以幾種單獨的藥物、營養品或營養組成物的形式，例如以至少兩個用於口服給藥的劑量單位的形式，例如含有釀酒酵母和片劑的第一膠囊或含有白藜蘆醇和薑黃萃取物的第二膠囊；用於給藥組合的套組可替代地包含三個單獨的膠囊，含有釀酒酵母的膠囊、含有白藜蘆醇的片劑或膠囊，以及含有薑黃萃取物的片劑或膠囊。

劑量、給藥頻率和治療持續時間取決於患者的特徵，特別是她的年齡、體重、病史、子宮內膜異位症或相關症狀或病症的階段和嚴重程度、接受的醫學治療…等。

通常，本發明的組合可以每月、每週或每天至少給藥一次；較佳地，本發明的組合每天給藥至少一週，通常至少兩週、至少三週、至少四週、至少30天或甚至至少2、3、4、6、12個月或甚至更長時間。

例如，本發明的組合可每天給藥1~3個月，且如果需要，可以重複這種治療。

本發明的組合通常以有效或足夠的劑量給藥以獲得預期效果之一；如上所述，特別是能夠減少、減緩或治療與子宮內膜異位症相關的疾病或症狀的效果，特別是與子宮內膜異位症病灶的進展相關的疾病或症狀及/或能夠改善患有子宮內膜異位症的患者的一般狀況。

例如，在治療子宮內膜異位症的方法中，組成物的「治療有效量」可以對應於降低症狀的嚴重性及/或降低與病理相關的可測量參數至少約5%、10%、至少約20%、至少約30%、至少約40%、至少約50%、至少約60%或更多，與在沒有對患者進行治療的情況下的症狀(例如症狀的嚴重程度)，或可測量參數相比。舉例而言，它可能是減緩或減少子宮內膜異位病灶的效果，例如可以藉由成像(超音波檢查、MRI和其他斷層掃描技術)可視化，提高生育能力或減少可測量的炎症的效果，例如藉由某些血液標誌物或使用模擬疼痛評分量表可測量的疼痛強度的降低。

通常，給藥的每日劑量範圍可為：

10~300mg，較佳地為25~250mg的白藜蘆醇；

1~300mg，例如10~300mg、25~250mg的薑黃萃取物，或較佳地為5~25mg的薑黃萃取物；以及

1x10⁷ CFU~1x10¹¹ CFU，較佳地為1x10⁸ CFU~1x10¹⁰ CFU或1x10⁸ CFU~1x10⁹ CFU或5~10mg，或者甚至5~50mg的釀酒酵母，較佳地為布拉氏菌種。

作為一另外的實例，給藥的每日劑量範圍可為：

30~70mg，較佳地為40~60mg的白藜蘆醇；

5~100mg，較佳地為5~25mg的薑黃萃取物形式的類薑黃素；以及

2x10⁸ CFU~6x10⁸ CFU，較佳地為3x10⁸ CFU~5x10⁸ CFU的釀酒酵母，較佳地為布拉氏菌種。

這些日劑量可以每天一、二、三或四次單獨的劑量給藥；較佳地，本發明的組合以每天一次或兩次單獨的劑量給藥，較佳地為每天一次。

本發明的組成物可以在飯前藉由口服途徑給藥。

在另一實施例中，本發明的組合與一種或多種用於治療子宮內膜異位症和相關症狀的常規醫藥產品組合給藥；這些醫藥產品包含但不限於避孕藥，特別是孕激素藥丸或複合藥丸類型的口服避孕藥，鎮痛藥，特別是對乙醯胺酚和阿司匹林，非類固醇抗炎藥(NSAIDs)，特別是布洛芬(ibuprofen)和氟比洛芬(flurbiprofen)，或者在醫學輔助生殖(medically assisted reproduction, MAR)中使用的卵巢刺激治療，特別是在體外受精方案的背景下。

本發明的組合還可以與切除子宮內膜異位病灶的手術相結合用於治療子宮內膜異位症。作為另外的實例，本發明的組合還可以與水療法組合用於治療子宮內膜異位症。在本文中，「水療」係指使用來自溫泉的天然礦泉水及其衍生產品(例如熱氣和泥漿)；舉例而言，以減輕與子宮內膜異位症相關的疼痛為目的，且特別包含應用諸如陰道沖洗、母液壓縮、變壓熱水淋浴以及在熱水游泳池中進行動員的應用。

更一般地，本發明的組合可以與替代藥物治療組合使用，例如與針灸、整骨療法、瑜伽、運動療法、心理療法、自然療法、自我催眠、冥想及/或放鬆的組合。

在一具體實施例中，將本發明的組合給藥於患有子宮內膜異位症且將接受選自切除子宮內膜異位病灶的手術及/或ART治療的女性。通常，本發明的組合可在治療前每天給藥至少一週(例如至少2、3、4、5、6、7或8週)。這種給藥可與口服避孕藥結合給藥，通常是雌激素-孕激素(estrogen-progestagen)藥丸，例如基於左炔諾孕酮(levonorgestrel)和炔雌醇(ethinylestradiol)，或者是GnRH促效劑。

在另一實施例中，將本發明的組合給藥於患有子宮內膜異位症且已經接受了切除子宮內膜異位病灶的手術治療的女性。

此外，本發明的組合可與具有生理或營養作用的其他活性物質一起給藥，例如益生元、維生素、微量元素礦物質；植物、水果、蔬菜、藻類或真菌的粉末或萃取物；以及益生菌，以及更一般地與任何具有營養或健康目的的生理物質，較佳地為2016年9月26日法令中所定義的，該法令規定了法國食品補充劑中允許的具有營養或生理目的的物質清單及其使用條件。此類物質的實例在下文的組成物部分詳述。

在一具體實施例中，本發明的組合與一活性成分選自維生素，特別是維生素C、維生素D、維生素B6、維生素B12、葉酸及/或5-甲基四氫葉酸(均屬於維生素B9群)；礦物質，例如鋅、銅、鎂、鈣；微量元素，例如硒或錳；益生菌，例如嗜酸乳桿菌、鼠李糖乳桿菌、植物乳桿菌、乾酪乳桿菌、副乾酪乳桿菌或雙歧桿菌；益生元，例如菊粉、肌醇或果寡醣/半乳寡醣、樹膠(瓜爾膠、阿拉伯膠等)；避孕藥及其組合一起施用。

舉例而言，本發明的組合可與一種或多種以下物質一起給藥：維生素B6、維生素B9、鋅、鎂、硒、菊粉、果寡醣或半乳寡醣及其組合。

作為說明，本發明的組合與鋅(Zn²⁺ )，例如以雙甘胺酸鹽的形式和益生元例如菊粉組合給藥。4. 本發明的組成物和套組

本發明還關於一種包含本發明的活性成分即白藜蘆醇、薑黃萃取物和釀酒酵母的組合的組成物；不言而喻，該組成物尤其旨在給予患有子宮內膜異位症或易患子宮內膜異位症的患者，該組成物特別適用於實施本申請中描述的任何一種用途和方法，特別是用於管理患有子宮內膜異位症或易患子宮內膜異位症的患者。

白藜蘆醇、薑黃萃取物和釀酒酵母如上述所定義。

較佳地，本發明的組成物係用於口服給藥的組成物。特別地，其可較佳地為給藥於人類的藥物、營養食品或營養食品組成物，其可特別為醫藥產品、食品補充劑、功能性食品、保健品、針對特定群體的營養製劑等。

較佳地，本發明的組成物是醫藥產品或食物補充劑，更佳地為食物補充劑。

本發明的組成物可以是各種形式，其可為固體、液體或凝膠組成物；較佳地，本發明的組成物是適合於藉由口服途徑給藥形式的組成物，其可特別為丸劑、片劑、膠囊劑、任選地溶解或重新懸浮在合適載體中的粉末、糊劑或口香糖、吸吮或咀嚼的糖果、溶液，例如包裝在安瓿、凝膠等中的口服溶液。

在某些實施例中，本發明的組成物包含或基本上由以下比例的白藜蘆醇、薑黃萃取物和釀酒酵母組成：

10~50wt%的白藜蘆醇；

10~60wt%的薑黃萃取物；以及

1~50wt%的釀酒酵母。

百分比表示為佔該組成物中存在的白藜蘆醇、薑黃萃取物和釀酒酵母的總和的100wt%或佔組成物的100wt%。

在另一實施例中，本發明的組成物包含或基本上由以下比例的白藜蘆醇、薑黃萃取物和釀酒酵母組成：

20~70wt%的白藜蘆醇；

1~20wt%的薑黃萃取物；以及

10~60wt%的釀酒酵母。

百分比表示為佔該組成物中存在的白藜蘆醇、薑黃萃取物和釀酒酵母的總和的100wt%或佔組成物的100wt%；較佳地，百分比表示為存在於該組成物中的白藜蘆醇、薑黃萃取物和釀酒酵母的總和的100wt%。

在另一實施例中，本發明的組成物包含或基本上由以下比例的白藜蘆醇、薑黃萃取物和釀酒酵母組成：

20~40wt%的白藜蘆醇；

40~60wt%的薑黃萃取物；以及

5~30wt%的釀酒酵母。

百分比表示為佔該組成物中存在的白藜蘆醇、薑黃萃取物和釀酒酵母的總和的100wt%或佔組成物的100wt%；較佳地，百分比表示為存在於該組成物中的白藜蘆醇、薑黃萃取物和釀酒酵母的總和的100wt%。

在另一實施例中，本發明的組成物包含或基本上由以下比例的白藜蘆醇、薑黃萃取物和釀酒酵母組成：

50~70wt%的白藜蘆醇；

5~20wt%的薑黃萃取物；以及

15~40wt%的釀酒酵母。

百分比表示為佔該組成物中存在的白藜蘆醇、薑黃萃取物和釀酒酵母的總和的100wt%或佔組成物的100wt%；較佳地，百分比表示為存在於該組成物中的白藜蘆醇、薑黃萃取物和釀酒酵母的總和的100wt%。

在另一實施例中，本發明的組成物包含或基本上由以下比例的白藜蘆醇、薑黃萃取物和釀酒酵母組成：

25~35wt%，例如30~34wt%的白藜蘆醇；

45~55wt%，例如46~50wt%的薑黃萃取物；以及

15~25wt%，例如18~22wt%的釀酒酵母。

百分比表示為佔該組成物中存在的白藜蘆醇、薑黃萃取物和釀酒酵母的總和的100wt%或佔組成物的100wt%。

在某些另外的或替代的實施例中，本發明的組成物的特徵在於以下特徵中的一個或多個：

薑黃萃取物包含至少15wt%類薑黃素的萃取物，及/或

薑黃萃取物包含薑黃素、去甲氧基薑黃素及/或雙去甲氧基薑黃素，及/或

薑黃萃取物包含相對於萃取物中存在的類薑黃素的總重量按重量計至少55wt%，較佳的為按重量計至少60wt%的薑黃素，及/或

薑黃萃取物封裝在環糊精中，較佳地為γ-環糊精，及/或

對於白藜蘆醇、薑黃萃取物和釀酒酵母的總和100wt%或對於組成物的100wt%，該組成物包含1~20wt%，較佳地為1~10wt%的類薑黃素，及/或

對於白藜蘆醇、薑黃萃取物和釀酒酵母的總和100wt%或對於組成物的100wt%，該組成物包含0.5~10wt%的類薑黃素，及/或

釀酒酵母是布拉氏菌種，及/或

白藜蘆醇係以富含白藜蘆醇的植物萃取物的形式提供，較佳地為日本虎杖萃取物，及/或

白藜蘆醇以反式白藜蘆醇的形式提供。

不言而喻，本發明的組成物可包含一種或多種附加成分，例如一種或多種添加劑、賦形劑或如下所定義的附加活性物質；這種或這些附加成分較佳地選自藥學上、營養上及/或營養學上可接受的成分，其可佔本發明組成物總重量的1~95wt%，較佳地為1~79wt%，例如10~50wt%，或者20~60wt%。

因此，本發明的組成物可以包含：

5~99wt%，較佳地為21~99wt%的白藜蘆醇、釀酒酵母和薑黃萃取物，較佳地為上述的比例，以及

1~95wt%，較佳地為1~79wt%的一種或多種選自添加劑、賦形劑和另外的藥學上、營養上及/或營養學上可接受活性成分的成分。

作為另外的實例，本發明的組成物可以包含：

10~50wt%的白藜蘆醇；

10~60wt%的薑黃萃取物；

1~50wt%的釀酒酵母；以及

1~79wt%的一種或多種選自添加劑、賦形劑和額外的藥學上、營養上及/或營養學上可接受活性成分的附加成分。

作為另一個的實例，本發明的組成物可以包含：

10~50wt%的白藜蘆醇；

1~20wt%的薑黃萃取物形式的類薑黃素；

1~50wt%的釀酒酵母；以及

1~88wt%的一種或多種選自添加劑、賦形劑和額外的藥學上、營養上及/或營養學上可接受活性成分的附加成分。

附加成分可為任何類型，且取決於本發明組成物的形式和所尋求的治療、營養學或生理學效果。

在一具體實施例中，該組成物包含一種或多種額外的藥物或營養活性成分，包括一種或多種用於營養或健康目的的生理成分，較佳地如2016年9月26日頒布的法令中所定義的，該法令規定法國食品補充劑中允許的具有營養或生理目的的成分清單及其使用條件。相對於組成物的總重量，一種或多種額外的藥物或營養活性成分較佳地佔至多50wt%，特別是至多45、40、30、20、15或10%；通常，其以組成物最終重量的0.5~30wt%的量存在。

活性藥物成分特別包括NSAID、避孕藥特別是孕激素例如去氧孕烯和左炔諾孕酮，以及地諾孕酮雌激素例如炔雌醇、GnRH促效劑及其組合。

特別用於營養或生理目的的營養活性成分包含但不限於維生素、礦物質、微量元素、植物萃取物和粉末、藻類或真菌、益生元、益生菌、胺基酸、抗氧化劑及其組合。

作為維生素、礦物質和微量元素的例子，我們可提到維生素硫胺素(B1)、核黃素(B2)、菸鹼酸(B3)、泛酸(B5)、吡哆醇(B6)、葉酸(B9)和氰鈷胺(B12)，以及維生素C、A、D、E、K1和K2，礦物質如鎂、鈣或鐵，微量元素如碘、鐵、銅、鋅、硒、鉻、鉬、硼、錳或其混合物。

舉例而言，植物、藻類或真菌的粉末或萃取物(乾燥或液體)可特別地選自本領域技術人員已知的各種歐洲監管清單，包含例如：魔芋粉/萃取物、山藥粉/萃取物、豆粉/萃取物、咖啡粉/萃取物、茶粉/萃取物、松樹皮粉/萃取物、葡萄粉/萃取物、大蒜粉/萃取物、藏紅花粉/萃取物、蘋果粉/萃取物、靈芝粉/萃取物、螺旋藻粉/萃取物、小球藻粉/萃取物、褐藻粉/萃取物及其任何混合物。

舉例而言，益生元可以是糖、糖醇、寡醣或具有可變聚合度的或多或少支鏈的多醣；益生元可例如選自菊粉、肌醇、塔格糖、乳果糖、α-葡聚寡醣、反式半乳寡醣(TOS)、果寡醣(FOS)、半乳寡醣(GOS)、木寡醣(XOS)及其混合物。

舉例而言，胺基酸包含但不限於白胺酸、瓜胺酸、麩醯胺酸、麩胺酸、半胱胺酸及其衍生物、甲硫胺酸及其衍生物、色胺酸及其衍生物。

舉例而言，抗氧化劑包含但不限於超氧化物歧化酶(SOD)、泛醇/泛醌(輔酶Q10)、白藜蘆醇、兒茶素(兒茶素、表兒茶素和沒食子酸酯衍生物)、黃烷醇、黃烷酮或花青素。

益生菌包含但不限於選自芽孢桿菌屬、擬桿菌屬、雙歧桿菌屬、腸桿菌科、腸球菌屬、糞桿菌屬、梭桿菌屬、克魯維酵母屬、乳桿菌屬、臭桿菌屬、副桿菌屬、片球菌屬、瘤胃球菌屬或其他酵母菌。

在一具體實施例中，本發明的組成物包含少於20種不同微生物菌株，較佳地少於10、9、8、7、6、5、4或3種不同微生物菌株。

此外或附加地，藥物、營養品或營養組成物還可包含一種或多種益生元。

根據一實施例，本發明的藥物、營養品或食品組成物包含活形式的益生菌以及一種或多種可被益生菌或腸道微生物群降解的益生元；益生元和益生菌的這種結合構成了合生元(synbiotic)。

在一具體實施例中，本發明的組成物包含乳桿菌菌株，特別是鼠李糖乳桿菌或嗜酸乳桿菌作為額外的益生菌。

舉例而言，本發明的組成物包含釀酒酵母菌株，較佳地為布拉氏菌種，以及乳桿菌菌株，較佳地為嗜酸乳桿菌。

在另一實施例中，組成物不含任何屬於乳桿菌屬，特別是嗜酸乳桿菌及/或雙歧桿菌屬的益生菌。

在另一實施例中，釀酒酵母是本發明組成物中存在的唯一益生菌。

在一具體實施例中，本發明的組成物包含附加的營養藥物或藥物活性成分，其選自維生素特別是維生素C、維生素B6、維生素B12、葉酸及/或5-甲基四氫葉酸(維生素B9)、微量元素或礦物質例如鋅、鎂、鈣、硒、錳、益生菌(如乳酸桿菌屬)、具有營養或生理目的的成分例如菊粉、果寡醣/半乳寡醣、樹膠(瓜爾膠、阿拉伯樹膠...)或肌醇及其組合。

在另一具體實施例中，本發明的組成物包含選自維生素特別是維生素C、維生素D、維生素B6、維生素B12、葉酸及/或5-甲基四氫葉酸的另外的營養藥物或藥物活性成分，以及微量元素或礦物質例如鋅、鎂、鈣、硒或錳。

舉例而言，除了本發明的組合之外，組成物還包含一種或多種選自維生素B6、維生素B9、鋅、鎂、硒、菊粉、果寡醣/半乳寡醣及其組合的成分。

例如，本發明的組成物包含鋅和維生素B6。

根據另一實例，本發明的組成物可包含鋅和菊粉。

在一具體實施例中，本發明的組成物是劑量單位的形式，包含：

10~300mg，較佳地為25~250mg的白藜蘆醇；

10~300mg，較佳地為25~250mg的薑黃萃取物；以及

1x10⁷ ~1x10¹¹ CFU，較佳地為1x10⁸ ~1x10⁹ CFU的釀酒酵母，較佳地為布拉氏菌種。

在另一具體實施例中，本發明的組成物是劑量單位的形式，包含：

25~100mg，較佳地為30~70mg的白藜蘆醇；

10~300mg，較佳地為5~25mg的薑黃萃取物；以及

1x10⁸ ~1x10⁹ CFU，較佳地為2x10⁸ ~6x10⁸ CFU的釀酒酵母，較佳地為布拉氏菌種。

該等劑量單位可例如為片劑和膠囊。

本發明的藥物、營養品或食品組成物的製劑可根據給藥途徑和打算使用組成物的劑量而變化。本發明的藥物、營養品或食品組成物可以特別是固體、半固體或液體形式；在使用至少一種生理上可接受的載體或賦形劑配製後，本發明的組成物可以是適合於給予哺乳動物，特別是人類的任何形式，例如片劑、錠劑、糖衣丸劑、軟膠囊、硬膠囊、丸劑、顆粒劑、粉劑、混懸劑、乳劑、糖漿、軟膏、液體安瓿、帶有滴管的瓶子和其他類似形式的液體製劑或粉劑，或栓劑。

本領域技術人員能夠選擇最適合製備給定類型製劑的載體和賦形劑。

在一具體實施例中，生理學上可接受的載體可以是固體，且本發明的組成物可以是粉末或片劑的形式；生理學上可接受的載體也可以是液體，且本發明的組成物可以是溶液形式。液體載體用於製備溶液、溶劑、分散介質、懸浮液、乳液、糖漿、酏劑和加壓組成物；合適的液體或凝膠基載體包含但不限於：水和生理鹽水溶液；乳液或懸浮液，包括鹽水溶液和緩衝介質；尿素；非水溶劑，例如醇類(例如乙醇)或植物油或種子油，例如橄欖油。液體組成物，包括例如乳液、微乳液、溶液、懸浮液、糖漿或酏劑，尤其可在溶劑、增溶劑、乳化劑、油、脂肪酸及/或其他添加劑，例如懸浮劑、防腐劑、甜味劑、天然或合成調味劑、穩定劑及/或增稠劑及/或食品級著色劑存在下配製；乳液可能含有乳化劑，例如卵磷脂、去水山梨糖醇單油酸酯或阿拉伯膠，還可將眾所周知的增稠劑加至組成物中，例如玉米澱粉、天然或合成樹膠、樹脂、甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉、瓜爾膠、黃原膠等。

選擇載體和賦形劑以不顯著影響釀酒酵母和任選地存在於本發明的組成物中的其他益生菌的活力。

特別地，本發明的組成物可進一步包含：

抗結塊劑，例如碳酸鎂、碳酸鈣、二氧化矽、硬脂酸、脂肪酸鹽例如硬脂酸鎂、棕櫚酸鎂、油酸鎂或肉荳蔻酸鎂；及/或

一種或多種增黏劑或表面活性劑，特別是澱粉、纖維素醚例如羥丙基甲基纖維素或阿拉伯樹膠；及/或

一種或多種黏合劑，特別是魚油或任何植物油，例如向日葵油、大豆油、橄欖油或奇亞籽油；及/或

包衣劑，例如蜂蠟、巴西棕櫚蠟或食品脂肪酸的單酸甘油酯；及/或

乳化劑，例如卵磷脂、環糊精或酯膠；及/或

一種或多種稀釋劑，如纖維素或麥芽糊精；及/或

一種或多種非營養性甜味劑，特別是山梨糖醇、三氯蔗糖、阿斯巴甜、紐甜、麥芽糖醇、木糖醇、乙醯磺胺酸鉀、糖精、甘草酸或甜菊萃取物；及/或

粉狀或液體形式的一種或多種天然或人造調味劑；及/或

一種或多種酸度校正劑，特別是鹽、檸檬酸、蘋果酸或酒石酸；及/或

一種或多種著色劑，特別是花青素、β-胡蘿蔔素、甜菜萃取物、番茄紅素或焦糖萃取物。

在某些實施例中，本發明的藥物、營養品或食品組成物被配製用於立即釋放一種或多種活性成分；或者，可以配製藥物組成物以延長或靶向釋放活性成分或保護活性成分，例如抵抗酸度和胃酶。因此，可以使用對pH值及/或胃酶作用有抵抗力的包衣，對pH值及/或酶促作用敏感的包衣，或黏附在胃或腸壁上的生物黏附包衣，或封裝系統。

較佳地，該組成物為胃耐受口服形式，允許包含在本發明的組成物中的酵母耐受胃的胃液並在腸中釋放；腸溶衣可耐受酸性pH(如在胃中)且可在鹼性pH下溶解(例如在腸中)。可用於腸溶衣的材料包含例如藻酸、鄰苯二甲酸醋酸纖維素、蠟、蟲膠、脂肪酸(例如硬脂酸或棕櫚酸)或殼聚醣，但不限於此。

在一實施例中，胃耐受和腸溶衣被設計用於維持活性成分在胃中的穩定性，腸溶衣設計用於在胃的酸性條件下維持並在非酸性條件下降解，從而在腸中釋放藥物、營養品或食品組成物。

腸溶衣可用於i)防止胃液與活性成分反應或破壞活性成分；ii)防止活性成分在到達腸道之前被稀釋；iii) 確保活性成分僅在製劑通過胃後釋放；以及iv)防止包含在本發明的組成物中的活酵母被胃的酸性pH改變或殺死。

根據一實施例，該組成物還可包含麥芽糊精及/或硬脂酸鎂。

本發明的組成物可以藉由本領域技術人員已知的任何方法製備，例如藉由將白藜蘆醇、薑黃翠取物和釀酒酵母與一種或多種營養上、營養學上或藥學上可接受的賦形劑或添加劑混合。

在一具體實施例中，本發明的組成物是劑量單位的形式，包含：

25~100mg，較佳地為30~70mg的白藜蘆醇；

1~300mg，較佳地為5~25mg的薑黃萃取物；以及

1x10⁸ ~1x10⁹ CFU，較佳地為2x10⁸ ~6x10⁸ CFU的釀酒酵母，較佳地為布拉氏菌種；

益生元，較佳地為菊粉；以及

鋅，較佳地以雙甘胺酸鋅的形式。

本發明的組成物還可包含一種或多種選自稀釋劑、抗結塊劑、乳化劑、增黏劑及其組合的賦形劑。

較佳地，本發明的組成物可包含γ-環糊精、麥芽糊精和脂肪酸鹽，例如硬脂酸鎂或硬脂酸、油酸、棕櫚酸和肉荳蔻酸的鎂鹽的混合物。

較佳地，本發明的劑量單位為粉末形式，該粉末通常包含在膠囊中，較佳地基於羥丙甲纖維素(HPMC)和碳酸鈣的膠囊。

作為說明，本發明的組成物是劑量單位的形式，包含：

25~100mg，較佳地為30~70mg的白藜蘆醇，較佳地為反式白藜蘆醇；

5~25mg的薑黃萃取物形式的類薑黃素；

1x10⁸ ~1x10¹⁰ CFU，較佳地為2x10⁸ ~6x10⁸ CFU，更佳地為3x10⁸ ~5x10⁸ CFU的布拉氏菌種的釀酒酵母，例如菌株CNCM I-3799或菌株CNCM I-745；

10~100mg，較佳地為25~50mg的菊粉，例如以菊苣根萃取物的形式提供；以及

1~15mg的鋅(Zn²⁺ )，較佳地為2~8mg的鋅，例如以雙甘胺酸鋅的形式。

劑量單位可以包含在膠囊中，較佳地為基於HPMC或普魯蘭多糖的植物性膠囊。

劑量單位可包含作為賦形劑的γ-環糊精、麥芽糊精和脂肪酸鎂鹽，例如硬脂酸、油酸、棕櫚酸、肉荳蔻酸的鎂鹽及其混合物。

γ-環糊精通常用於提高薑黃萃取物的生物利用度。γ-環糊精可以每劑量單位20~120mg的量存在；麥芽糊精可以每劑量單位5~50mg的量存在；脂肪酸鎂鹽可以每劑量單位0.1~10mg的量存在。

本發明還關於一種營養品或藥物套組，例如包含幾種組成物的食品補充劑套組，較佳地為用於口服給藥，並結合本發明的組合。

在一具體實施例中，該套組包含：

包含釀酒酵母的組成物；

包含白藜蘆醇的組成物；以及

包含薑黃萃取物的組成物。

在一具體實施例中，該套組包含：

第一組成物，其包含釀酒酵母，例如與膠囊中的一種或多種賦形劑聯合；以及

第二組成物，其包含白藜蘆醇和薑黃萃取物，例如以片劑或膠囊的形式。

該套組通常包含每種組成物的幾個劑量單位，其還可包含套組的給藥說明。

在一具體實施例中，第一組成物可以是包含10~300mg，較佳地為25~250mg的白藜蘆醇；以及1~300mg，較佳地為10~300mg、5~25mg或25~250mg的薑黃萃取物，且第二組成物可以是包含1x10⁷ ~1x10¹¹ CFU，較佳地為1x10⁸ ~1x10⁹ CFU的釀酒酵母的劑量單位形式，較佳地為布拉氏菌種，其劑量單位可以是例如片劑和膠囊。

該套組中存在的組成物的特徵類似於本發明的組成物的特徵，特別是在酵母、白藜蘆醇和薑黃萃取物之間的相對重量比以及劑量方面。

套組中存在的每種組成物可包含如上所述的一種或多種選自添加劑、賦形劑和另外的藥學上、營養上及/或營養學上可接受的活性成分的額外成分。

本發明還關於一種治療患有子宮內膜異位症或易患子宮內膜異位症的患者的方法，包含向該患者給藥有效劑量的白藜蘆醇、薑黃萃取物和釀酒酵母；這種方法的實施和預期效果是針對本發明的用途所描述的那些。

藉由閱讀下文中給出的實例將能更好地理解本發明，這些實例僅是說明性的而非限制性的。實例

實例 1 ：本發明的組合對子宮內膜異位症小鼠模型的效果的評價

此研究的目的是在體內測試包含薑黃萃取物、白藜蘆醇和布拉氏釀酒酵母的組合對子宮內膜異位症小鼠模型中子宮內膜異位病灶的生長以及免疫和炎症狀態的效果。材料及方法

6週齡的雌性Balb/CJrj小鼠購自供應商Janvier Labs(Route du Genest, 53940 Le Genest-Saint-Isle)。將小鼠飼養在常規動物房中，具有12小時的自動晝/夜循環，隨意飲水(自來水)和進食(Teklad, Envigo, Gannat, France, #T.2016MI.12)。同基因腹膜內子宮角植入(縫合)的子宮內膜異位小鼠模型是經過驗證的模型，已多次使用並發表[Jones et al., 2018; Ruiz et al., 2016]。在異氟醚麻醉(3.5%，氧氣2.5l/min下)及術後止痛(Buprécare，10μg/kg，sc)下進行腹膜內子宮角植入。進行剖腹術，且藉由兩個用可吸收縫線5/0製成的縫合點將片段固定在腹膜內壁上開口的每一側。

用於治療的分子和產品是：雙甘胺酸鋅螯合物(LBION Laboratories, Clearfield, USA, #03506)、Seygal阿拉伯樹膠(Nexira Food, Rouen, France, #FibergumB)、反式白藜蘆醇(Active Inside, Beychac et Caillau, France, #PR-0018)、薑黃萃取物(Wacker, Eddyville, IA, USA, #60072151)、布拉氏釀酒酵母(LHC Lesaffre Bio Springer, Maison Alfort, France, #VI1700368)、嗜酸乳桿菌(Danisco US, Madison, WI, USA, #MSAMPHRUDOPH)。

小鼠的組別如下：

對照組(假手術，Sham)(n=10)：進行假手術但沒有植入物和未經治療的小鼠(假手術)；

M組(對照組)(n=10)：小鼠手術，其使用包含載體(雙甘胺酸鋅、Seygal阿拉伯樹膠、反式白藜蘆醇和薑黃翠取物)的組成物進行治療，且因此不含益生菌；

M1組(本發明)(n=20)：小鼠手術，其使用包含載體以及0.36mg/day的布拉氏釀酒酵母的組成物進行治療；

M2組(本發明)(n=20)：小鼠手術，其使用包含載體、0.36mg/day的布拉氏釀酒酵母以及0.18mg/day的嗜酸乳桿菌的組成物進行治療。

將組成物懸浮於水相中並藉由胃管經口給藥至小鼠(每天灌胃1次)，該溶液為臨時製備並於早上進行給藥。對於每個組別，在連續12週內給藥各種溶液，在S3(三週)及S12(12週)時，將動物犧牲(在S3及S12，對照組及M組各5隻，M1組及M2組各10隻)；收集血液、脾臟和病灶，將評估病灶的大小和重量，並進行以下分析。

下表列出了測試的特徵：

表1：動物分布(每組n=10)

組別	治療
假手術	/
誘導模型+M	白藜蘆醇+薑黃萃取物
誘導模型+M1	白藜蘆醇+薑黃萃取物+布拉氏釀酒酵母
誘導模型+M2	白藜蘆醇+薑黃萃取物+布拉氏釀酒酵母+ 嗜酸乳桿菌

表2：胃管給藥至小鼠的原料量

成分	供應量 /d ay (mg)	胃管供 應 量 (mg)
布拉氏釀酒酵母-LYNSIDE PRO® -CNCM No. I-3799(M1及M2組)	0.36	0.36
嗜酸乳桿菌NCFM(M2組)	0.18	0.18
含有98wt%白藜蘆醇的何首烏萃取物	0.6	0.6
薑黃萃取物	0.9	0.9

病灶體積的變化藉由超音波檢查進行監測

使用高分辨率超音波(40m)可精確無創地監測子宮角植入物大小的變化，且可快速評估子宮內膜異位症的進展。此過程是在PIPA(Small Animal Imaging Platform of Cochin Institute)在角片段植入後S1、S3、S8、S11進行的。

安樂死後，取樣(在S3及S12)以測量各種參數。

病灶的組織學藉由Hemalaun/Eosin(HE)染色

使用常規HE技術對石蠟中固定的5μm病灶切片進行染色。

藉由FACS(LT、NK、巨噬細胞)檢測脾臟中的免疫狀態

使用特異性抗體來確定T淋巴細胞CD4和CD8、自然殺手細胞和脾巨噬細胞的比例：

混合物1：B220 APC、CD69 PE、CD8 BV605、CD40 PerCP/Cy5.5、MHCII FITC、CD4 BV510；混合物2：CD206 AF647、CD86 BV510、Ly6C PE VIOL.770、CD11b APC-Cy7和F4/86 BV711。使用的FACS為LSR Fortessa BD以及分析軟體BD FACS Diva 6.2軟體。

血清中的試驗

根據已發表的技術，在酶標儀上96孔盤中藉由分光光度法測量AOPP(Kidney Int. 1996 May; 49(5): 1304-13. Advanced oxidation protein products as a novel marker of oxidative stress in uremia. Witko-Sarsat V et al.)。

IL6和TNFα使用ELISA套組測量(Thermofisher Scientific, Waltham, MA USA #KMC0061 and BMS607-3 respectively) as Zonulin (Clinisciences, Nanterre, France, #MBS748504-96)。

藉由組織學和qRT-PCR研究病灶

根據製造商的說明，使用試劑Trizol(Invitrogen, Carlsbad, USA)從小鼠組織(子宮內膜異位症類型的病灶)中提取總RNA。使用合成套組Maxima H Minus cDNA Synthesis Master Mix kit(Thermo Fisher Scientific)合成cDNA。qPCR使用套組SensiFAST SYBR No-ROX(Bioline)進行。所選基因的轉錄水平在Light Cycler 480(Roche, San Francisco, CA)中量化，並針對參考基因(Actinb和Tbp)進行正規化，並使用LightCycler專用軟體進行分析。

各種結果的統計分析

各組別小鼠的比較統計分析藉由單因子變異量分析(1-factor ANOVA)以及Kruskal-Wallis檢定進行。結果

1)子宮內膜異位病灶的重量和體積

對於三個組別小鼠M、M1和M2(M，n=10；M1，n=20；M2，n=20)，植入時病灶的重量和體積是一致的。

治療12週後，注意到使用本發明的組成物(M1或M2)治療的小鼠的病灶體積和重量顯著低於使用對照組成物M治療的小鼠(p＜000.1)。

因此，本發明的組合白藜蘆醇、薑黃萃取物和布拉氏釀酒酵母的組合協同作用於子宮內膜異位病灶的進展(第1圖)。

2)犧牲時取樣的病灶組織學

在組織學上，在治療3週和12週後，M1組和M2組相對於對照組M觀察到病灶活動性降低(第2圖)；實際上，腺體外觀是子宮內膜異位病灶的標誌，相對於M組，M1組和M2組的腺體外觀明顯減弱。

3)各組別在S12的脾免疫狀態

與沒有病灶植入的假手術組別(SHAM)相比，所有組別的免疫狀態都發生了改變(第3圖及第4圖)。

假手術(SHAM)組別、M組別、M1組別和M2組別之間脾臟活化TCD4和TCD8的百分比呈下降趨勢，無顯著性意義(SHAM，n=3；M，n=6；M1，n=5；M2，n=5)。M、M1和M2製劑傾向於降低脾臟活化B細胞的百分比(SHAM，n=3；M，n=6；M1，n=5；M2，n=5)。

值得注意的是，相對於對照組(M和SHAM)，在本發明的組別(M1和M2)的小鼠中，M1/M2(1型和2型巨噬細胞)的比率顯著增加。對人類和小鼠的研究證明了M2巨噬細胞在子宮內膜異位病灶的建立和生長的發病機制中起了關鍵作用。實際上，與對照組相比，子宮內膜異位症女性腹腔液體中M2巨噬細胞的比例有所增加。此外，其還表明M2巨噬細胞的腹膜內轉移導致小鼠子宮內膜異位症的生長和新生血管形成(Bacci et al., 2009)。因此，本研究的結果表明，本發明的組合對巨噬細胞的極化具有免疫調節作用，這可能允許患有子宮內膜異位症的患者的免疫反應正常化。

4)炎症參數

與假手術對照組(SHAM)相比，本發明的組別(分別為M1和M2)中，腸屏障通透性標誌物連蛋白和炎症標誌物白介素6非常顯著地降低。TNF-α也顯著地降低，因為它在M1和M2組別的血清中檢測不到(第5圖)。

5)氧化壓力

與假手術組(SHAM)相比，三個補充組別(M、M1和M2)在12週時，血清蛋白氧化水平和氧化壓力水平的標誌物，即晚期氧化蛋白產物(AOPP)顯著地降低(第4圖)。

6)qPCR結果

初步結果顯示，M1和M2組別在S12的血管生成標誌物(Cd31)有降低的趨勢。藉由ANOVA分析和Bonferroni檢定進行的S12-S3比較顯示，僅M1組別的標記物Igf1(疼痛標記物)顯著降低。

關於疼痛敏感性，需要注意的是，根據「熱板」試驗，在治療第4週，M1組別相對於M0和M2組別，對熱的敏感性顯著降低。

結論

以上結果表明，本發明的組合在臨床和免疫和生理方面均具有良好的效果；本發明的組合顯著減緩小鼠模型中子宮內膜異位病灶的生長。此外，子宮內膜異位症的特徵是免疫功能紊亂。現在，本發明的組合產生允許減少炎症的免疫調節效果，如促炎細胞因子TNF-α和IL-6的血清水平降低、巨噬細胞M1/M2比例的調節和B細胞活化的減少。最後，本發明的組合可降低腸通透性標誌物連蛋白的循環水平。

實例 2 ：用於評估包含本發明的組合的食品補充劑對患有疼痛性子宮內膜異位症的婦女生活品質影響的前瞻性、隨機、雙盲研究

研究中心：

COCHIN醫院(Port Royal, France)。

方法：

其試點研究是一項單中心、隨機、平行組、雙盲、安慰劑對照研究。

產品：

實驗產品(以下稱Qolendo)是一種食品補充劑，包含本發明的組合(劑量單位：白藜蘆醇50mg、布拉氏釀酒酵母：4億CFU和薑黃素12.7mg)、菊粉(34mg)、雙甘胺酸鋅(20mg當量)、γ-環糊精(58.5mg)、硬脂酸鎂(1.5mg)和麥芽糊精(19.5mg)，為膠囊形式(HPMC、碳酸鈣)。

對照組產品是一種安慰劑膠囊，具有相同的包裝和外觀特徵，其中的活性成分已被麥芽糊精、β-胡蘿蔔素(呈橙色)和硬脂酸鎂代替。

研究人數：

80名患有疼痛性子宮內膜異位症並符合納入和排除標準的女性將隨機參與本研究。

研究計畫：

招募：10個月；服用產品的持續時間：4個月；每個患者參與的總持續時間：5個月；研究的總持續時間：15個月。

干預：

在就診V1隨機化後，患者將消耗：

實驗產品：Qolendo組別

從第1次就診到第3次就診(服用產品4個月)，每天早上或晚上搭配一杯水服用1粒Qolendo產品膠囊；或者

對照組：安慰劑

從第1次就診到第3次就診(服用產品4個月)，每天早上或晚上搭配一杯水服用1粒安慰劑。

研究目的：

研究假設：研究的假設是測試產品Qolendo可以改善患有疼痛性子宮內膜異位症的女性的生活品質。

主要目標： 主要目標是在服用產品4個月後使用EHP-5問卷評估Qolendo組別患有子宮內膜異位症的女性相對於安慰劑組女性的生活品質。

次要目標： 研究的次要目標是評估以下參數，兩組別之間和組內差異： 1)服用產品2個月後使用EHP-5問卷調查的生活品質； 2)服用產品4個月後的臨床總體印象量表(CGI)問卷； 3)整個研究過程中感受到的疼痛； 4)在整個研究過程中鎮痛劑的消耗； 5)服用產品4個月後的炎症、免疫和荷爾蒙狀態； 6)服用產品4個月後腸上皮通透性； 7)服用Qolendo組別產品2個月及4個月後，對產品的接受度。

探索目標： 為深度子宮內膜異位症及/或存在子宮腺肌症的女性亞組進行骨盆腔超音波檢查，使用EHP-30問卷評估生活品質，自願完成：問卷將在隨機就診(V1)，並在服用產品4個月後就診V3時完成。

安全目標： 研究的安全目標是藉由生命體徵、體重和生物參數(在4個月時測量)以評估不良反應(AE)的發生率和總體健康狀況。

判斷標準 ：

主要判斷標準： 本研究的主要標準是生活品質的變化，4個月時相對於初次就診(V1)，藉由EHP-5問卷評估，總分以任意單位表示(a.u.,評分)，比較Qolendo組別與安慰劑組。

次要判斷標準： 本研究的次要標準(如下所述)使Qolendo組別和安慰劑組可比較： 1)在2個月時生活品質相對於初次就診的變化，藉由EHP-5問卷評估，以a.u.表示； 2)相對於初次就診，4個月時臨床總體印象量表問卷的變化，本問卷由3個子量表組成： a.疾病的嚴重程度(評分範圍從正常的1分至最嚴重的7分)； b.整體改善或變化(評分範圍從1分強烈改善至7分強烈惡化)； c.治療反應(評分範圍從0分無不良反應的顯著改善至4分無變化或惡化以及效益/風險平衡不令人滿意)。 3)疼痛的變化，在整個研究中相對於初始值，在視覺模擬量表(VAS)上定義，從0至10評估： 疼痛(綜合評價)、痛經、性交疼痛、非週期性慢性骨盆腔疼痛、消化疼痛、消化不良、小便疼痛；將收集月經日期以區分月經痛。 4)整個研究中鎮痛劑相對於初始值的定量消耗(以克/天為單位)； 5)在4個月時的炎症狀態與由以下參數評估的初始值相比：TNF-α、IL1、IL6、CRP-us、AOPP； 6)在4個月時的免疫狀態與由以下參數評估的初始值相比：IL4、IL10、IL12、INFγ、NK細胞； 7)在4個月時的荷爾蒙狀態與由雌二醇(E2)、孕酮和抗苗勒管激素(AMH)評估的初始值相比； 8)在4個月時腸上皮的通透性與血液連蛋白測定評估的初始值相比； 9)服用Qolendo組別的產品2個月及4個月後，對產品的接受度。

安全標準

本研究的安全標準，在初次就診以及4個月時測量為： 1)體重(kg)； 2)血液動力學參數：心率(HR, bpm)、收縮壓(SBP, mmHg)和舒張壓(DBP, mmHg)； 3)以下生物學參數： 全血細胞計數； 藉由確定以下參數來確定肝功能：ASAT、ALAT和GGT； 藉由肌酐測定腎功能。 4)在整個研究中出現的每個患者的不良反應數量； 5)在整個研究中出現至少一種不良反應的患者比例。

探索標準：

研究的探索標準涉及初始值與4個月時測量的值之間的變化：

深度子宮內膜異位症及/或存在子宮內膜異位症的患者藉由骨盆腔超音波獲得的參數；

EHP-30問卷。

無。

第1圖顯示小鼠子宮內膜異位病灶隨時間的增長、重量及體積。M(對照組)：以白藜蘆醇和薑黃萃取物的混合物處理之組別；M1(本發明)：以白藜蘆醇、薑黃萃取物和布拉氏釀酒酵母的混合物處理之組別；M2(本發明)：以白藜蘆醇、薑黃萃取物、布拉氏釀酒酵母和嗜酸乳桿菌的混合物處理之組別； 第2圖顯示不同組別M、M1和M2犧牲(HE染色)時取樣的病灶的組織學； 第3圖顯示治療12週後(S12)不同組別的脾免疫狀態-T淋巴細胞。SHAM(對照組)對應於接受假手術的動物；M(對照組)：以白藜蘆醇和薑黃萃取物的混合物處理之組別；M1(本發明)：以白藜蘆醇、薑黃萃取物和布拉氏釀酒酵母的混合物處理之組別；M2(本發明)：以白藜蘆醇、薑黃萃取物、布拉氏釀酒酵母和嗜酸乳桿菌的混合物處理之組別； 第4圖顯示治療12週後(S12)不同組別的脾免疫狀態-B淋巴細胞及巨噬細胞。SHAM(對照組)對應於接受假手術的動物；M(對照組)：以白藜蘆醇和薑黃萃取物的混合物處理之組別；M1(本發明)：以白藜蘆醇、薑黃萃取物和布拉氏釀酒酵母的混合物處理之組別；M2(本發明)：以白藜蘆醇、薑黃萃取物、布拉氏釀酒酵母和嗜酸乳桿菌的混合物處理之組別； 第5圖顯示對連蛋白、白介素6(IL6)、TNFα及晚期氧化蛋白產物(AOPP)的影響。SHAM(對照組)對應於接受假手術的動物；M(對照組)：以白藜蘆醇和薑黃萃取物的混合物處理之組別；M1(本發明)：以白藜蘆醇、薑黃萃取物和布拉氏釀酒酵母的混合物處理之組別；M2(本發明)：以白藜蘆醇、薑黃萃取物、布拉氏釀酒酵母和嗜酸乳桿菌的混合物處理之組別。

Claims (17)

1. 一種來自釀酒酵母菌種的酵母、白藜蘆醇和薑黃萃取物的組合，其係用於治療患有子宮內膜異位症或易患子宮內膜異位症的患者。
2. 一種來自釀酒酵母菌種的酵母、白藜蘆醇和薑黃萃取物的組合，其係用於治療或預防患有子宮內膜異位症或易患子宮內膜異位症的患者的子宮內膜異位病灶，例如減緩進展或減少子宮內膜異位病灶。
3. 一種釀酒酵母菌種的酵母、白藜蘆醇和薑黃萃取物的組合，其係用於治療或預防與子宮內膜異位症相關的一種或多種症狀或疾病，其選自以下組成之群組：生育力低下、不孕症、骨盆腔疼痛特別是痛經和性交疼痛、經期疼痛特別是在泌尿或腸道水平、泌尿和腸道疾病、子宮出血、直腸出血、慢性腹膜炎、腸道通透性過高、慢性疲勞及其組合。
4. 如請求項1之來自釀酒酵母菌種的酵母、白藜蘆醇和薑黃萃取物的組合，其中該組合用於在患有子宮內膜異位症或易患子宮內膜異位症的患者中使腸道通透性正常化、調節免疫狀態、維持或改善生育力及/或降低氧化壓力。
5. 如請求項1至請求項4中任一項之來自釀酒酵母菌種的酵母、白藜蘆醇和薑黃萃取物的組合，其中該釀酒酵母為布拉氏(boulardii)菌種的釀酒酵母。
6. 如請求項1至請求項5中任一項之來自釀酒酵母菌種的酵母、白藜蘆醇和薑黃萃取物的組合，其中該來自釀酒酵母菌種的酵母、該白藜蘆醇和該薑黃萃取物包含在單一藥物、營養品或食品組成物中，或者分佈於旨在同時或依序給藥的幾種單獨藥物、營養品或營養組成物中。
7. 如請求項1至請求項6中任一項之來自釀酒酵母菌種的酵母、白藜蘆醇和薑黃萃取物的組合，其中該患有子宮內膜異位症的患者已經或將要進行子宮內膜異位病灶切除的手術治療、醫學輔助生殖的醫學方案特別是體外受精及/或正在接受避孕治療。
8. 如請求項1至請求項7中任一項之來自釀酒酵母菌種的酵母、白藜蘆醇和薑黃萃取物的組合，其中該釀酒酵母菌種的酵母、該白藜蘆醇和該薑黃萃取物包括在食品補充劑中，任選地與一種或多種具有生理或營養目的的成分，較佳地選自維生素、微量元素、礦物質、益生元、益生菌、抗氧化劑、胺基酸及其組合，更佳地選自葉酸、5-甲基四氫葉酸、維生素B6、維生素B12、鋅、鎂、鈣、硒、錳、菊粉、果寡醣/半乳寡醣、阿拉伯樹膠、瓜爾膠、肌醇及其組合。
9. 營養品或食品組成物，較佳地以食品補充劑的形式，包含來自釀酒酵母菌種的酵母、白藜蘆醇和薑黃萃取物的組合，該組合的比例如下： 1~50wt%的該釀酒酵母，較佳地為布拉氏菌種； 10~50wt%的該白藜蘆醇；以及 1~50wt%的薑黃萃取物，其中 該釀酒酵母、該白藜蘆醇和該薑黃萃取物的總重為100wt%或佔該組成物總重量的100wt%，該組成物較佳地適用於治療患有子宮內膜異位症或易患子宮內膜異位症的患者。
10. 如請求項9之組成物，其進一步包含： 一種或多種益生元；及/或 維生素、礦物質及/或微量元素；及/或 植物、水果、蔬菜、藻類或真菌的粉末或萃取物；及/或 一種或多種益生菌，較佳地該益生菌不為乳桿菌屬的細菌。
11. 如請求項9或請求項10之組成物，其中該組成物為劑量單位形式，例如片劑或膠囊的形式，每個劑量單位包含： 10~300mg，較佳地為25~250mg的該白藜蘆醇； 1~300mg，較佳地為5~25mg的該薑黃萃取物；以及 1x10⁷ ~1x10¹¹ CFU，較佳地為1x10⁸ ~1x10¹⁰ CFU或1x10⁸ ~1x10⁹ CFU的布拉氏菌種的釀酒酵母。
12. 如請求項11之組成物，其進一步包含菊粉和鋅。
13. 如請求項11或請求項12之組成物，其中該組成物為劑量單位形式，包含： 30~70mg的該白藜蘆醇，較佳地為反式白藜蘆醇； 5~25mg與環糊精相關的該薑黃萃取物形式的類薑黃素； 1x10⁸ ~1x10¹⁰ CFU，較佳地為2x10⁸ ~6x10⁸ CFU，例如3x10⁸ ~5x10⁸ CFU的布拉氏菌種的釀酒酵母； 任選地10~100mg，較佳地為25~50mg的菊粉；以及 任選地1~15mg的鋅(Zn²⁺ )，較佳地為2~8mg的鋅，例如以雙甘胺酸鋅的形式引入。
14. 一種包含兩種組成物組合的藥物、營養品或營養套組，其包含： 一第一組成物，其包含較佳地為布拉氏菌種的釀酒酵母，較佳地為1x10⁷ ~1x10¹¹ CFU的量的該釀酒酵母；以及 一第二組成物，其包含較佳為10~300mg的量的白藜蘆醇，以及1~300mg的量的薑黃萃取物，其中 該套組較佳地適用於治療患有或易患子宮內膜異位症的患者。
15. 如請求項1~8中任一項之組合、如請求項9~13中任一項之組成物或如請求項14之套組，其中： 該釀酒酵母係為布拉氏菌種的釀酒酵母；及/或 該白藜蘆醇萃取物以富含反式白藜蘆醇的植物萃取物的形式提供，例如滴定至至少95wt%的反式白藜蘆醇的日本虎杖萃取物；及/或 該薑黃萃取物包含至少15wt%的類薑黃素；及/或 該薑黃萃取物包含薑黃素、去甲氧基薑黃素及雙去甲氧基薑黃素；及/或 該薑黃萃取物包含相較於該萃取物中存在的類薑黃素的總重量計至少55wt%，較佳地為至少60wt%的薑黃素；及/或 該薑黃萃取物封裝在環糊精中，較佳地為γ-環糊精；及/或 該薑黃素萃取物與封裝或載體系統，較佳地為環糊精相關；及/或 菊粉以菊苣根萃取物的形式提供。
16. 一種白藜蘆醇、薑黃萃取物和較佳地為布拉氏菌種的釀酒酵母的組合的用途，其用於製備治療患有子宮內膜異位症或易患子宮內膜異位症的患者的營養品或藥物組成物，更精確地係用於治療或預防子宮內膜異位症或其症狀。
17. 一種用於治療患有子宮內膜異位症或易患子宮內膜異位症的患者的方法，更精確地係用於治療或預防子宮內膜異位症或其症狀，包含向該患者給藥有效劑量的白藜蘆醇、薑黃萃取物和較佳地為布拉氏菌種的釀酒酵母。

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