TW202203778A - 水黃皮蛋白質產品及其製造與使用方法 - Google Patents

水黃皮蛋白質產品及其製造與使用方法 Download PDF

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雷斯凱 賀邁 傑森
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Abstract

本發明提供適合於動物攝取,尤其人類攝取之富含蛋白質之水黃皮組合物,包括水黃皮蛋白質濃縮物及分離物。本文亦提供可用該等富含蛋白質之水黃皮組合物強化的各種食品及飲品。本文亦提供製造該等富含蛋白質之水黃皮組合物之方法,以及由水黃皮豆或各種形式之水黃皮粉製造該等富含蛋白質之水黃皮組合物之方法。

Description

水黃皮蛋白質產品及其製造與使用方法
本發明大體上係關於水黃皮蛋白質產品。更特定言之,本發明係關於具有較高蛋白質含量之水黃皮組合物,諸如水黃皮蛋白質濃縮物或分離物,以及其製造方法,及其在食品及飲品中之使用方法。
由於全球人口預計至2050年將增長超過90億,因此對可食用蛋白質之需求持續上升。生產動物蛋白質需要大量資源,包括陸地及水,且對環境具有顯著影響。植物提供替代且可行的蛋白質來源,因為其每英畝提供更多產量且對環境具有積極影響。消費者對可持續性及基於植物之膳食的興趣正在全球範圍內擴大。在美國,2019年基於植物之食品市場經估計為約45億美元。在美國,大約有5500萬人被視為素食主義者或彈性素食者,且正尋找更多基於植物之富含蛋白質之食物選擇方案。
水黃皮(Pongamia/Millettia pinnata (L.)),為生長在熱帶之多用途樹種,其產生富含油及蛋白質之豆類。水黃皮具有若干有利特徵:其易於生長,具有較短生成時間,且產生大量富含油及蛋白質之豆類。水黃皮豆,亦稱作水黃皮油籽,含有大約35-40%油及20%蛋白質。水黃皮豆餅,為來自水黃皮豆之油萃取之副產物,提供潛在的可再生植物蛋白質來源,用於動物飼料及供人類攝取之食物中。然而,由於許多固有活性化學組分,諸如水黃皮次素及水黃皮籽素,水黃皮豆及豆餅之味道極其苦澀且被視為不可食用。必須移除或顯著減少此等固有活性化合物,以便製造可食用水黃皮蛋白質產品。
目前,尚無可供使用的商業上可行的處理方法,用以由水黃皮豆萃取及製造可食用的味道純淨的濃縮水黃皮蛋白質產品。因此,需要商業上可行的方法以由水黃皮豆萃取且移除固有活性化學組分,諸如水黃皮次素及水黃皮籽素,且製造增值的可食用蛋白質組合物。
在一些態樣中,本文提供具有較高蛋白質含量之水黃皮組合物,諸如水黃皮蛋白質濃縮物或分離物,其可充當動物,尤其人類之可食用蛋白質來源。在一些變化形式中,本文所描述之水黃皮蛋白質產品具有功能性特性,包括例如與其他市售植物蛋白質成分(諸如大豆、豌豆、羽扇豆及向日葵)相比相當的或改善的溶解度、黏度及乳化特性。此等水黃皮蛋白質產品可充當多種食品及飲品中之適用成分,且解決行業中大量未滿足的對新興植物蛋白質之需求,該等新興植物蛋白質在蛋白質品質上優異,具有較好的味道及較佳的質地。
在一些態樣中,提供包含以乾重計至少50%水黃皮蛋白質的富含蛋白質之水黃皮組合物。在一些態樣中,提供包含以乾重計至少70%水黃皮蛋白質的富含蛋白質之水黃皮組合物。在一些實施例中,組合物為水黃皮蛋白質濃縮物。在其他實施例中,組合物為水黃皮蛋白質分離物。
在某些態樣中,提供製造富含蛋白質之水黃皮組合物之方法,其包含:製備水黃皮粉之含水漿料;將該含水漿料之pH調整至8與10之間的pH;將該漿料分離成蛋白質液體部分及不可溶濕餅部分;中和、濃縮該蛋白質液體部分及/或對其進行巴氏殺菌;及乾燥該蛋白質液體部分以提供富含蛋白質之水黃皮組合物。
在某些態樣中,提供一種製造富含蛋白質之水黃皮組合物之方法,其包含:製備水黃皮粉之含水漿料;將該含水漿料之pH調整至8與10之間的pH,將該漿料分離成蛋白質液體部分及不可溶濕餅部分;藉由將pH值調整至3.5至4.5之間使水黃皮蛋白質部分自液體部分沈澱以獲得經純化之水黃皮蛋白質;洗滌、中和經純化之水黃皮蛋白質及/或對其進行巴氏殺菌;及乾燥經純化之水黃皮蛋白質以提供富含蛋白質之水黃皮組合物。
在某些態樣中,提供一種製造富含蛋白質之水黃皮組合物之方法,其包含:製備水黃皮粉之含水漿料;將該含水漿料之pH調整至6與10之間的pH,將該漿料分離成蛋白質液體部分及不可溶濕餅部分;使該蛋白質液體部分通過膜系統以獲得包含水黃皮蛋白質之滲餘物;洗滌、中和滲餘物及/或對其進行巴氏殺菌;且乾燥滲餘物以提供富含蛋白質之水黃皮組合物。
在一個態樣中,提供根據本文所描述之方法製造的富含蛋白質之水黃皮組合物。
在某些態樣中,亦提供併入有本文所述之富含蛋白質之水黃皮組合物中之任一者的各種產品。在一些實施例中,產品為食品、飲品或膳食補充劑產品。在一些變化形式中,產品為烘烤食品、蛋白質補充品、蛋白棒或非乳飲料。在又其他變化形式中,產品為醫療食品、嬰兒配方食品、化妝品或藥品。
在一個態樣中,提供富含蛋白質之水黃皮成分,其包含以乾重計至少40%之水黃皮蛋白質,其中該成分具有:(i)小於500 ppm水黃皮次素;或(ii)小於500 ppm水黃皮籽素;或(iii)小於500 ppm合併之水黃皮次素及水黃皮籽素;且其中該成分具有以乾重計小於或等於40%之碳水化合物。在本發明態樣之一些實施例中,富含蛋白質之水黃皮成分包含以乾重計至少70%之水黃皮蛋白質,其中該成分具有:(i)小於500 ppm水黃皮次素;或(ii)小於500 ppm水黃皮籽素;或(iii)小於500 ppm合併之水黃皮次素及水黃皮籽素;且其中該成分具有以乾重計小於或等於15%之碳水化合物。
在一些實施例中,該成分具有(i)在100 s- 1 之剪切速率下約2 mPa*s與約100 mPa*s之間的黏度;(ii) 0.1%蛋白質溶液之體積的約100%與約200%之間的發泡量;(iii)至少約0.2 g/cm3 之容積密度;(iv)在pH 7下至少約35%之蛋白質溶解度;(v)小於或等於約5 µm之中值乳液液滴尺寸;(vi)貯藏7天之後小於或等於約5 µm之中值乳液液滴尺寸;(vi)每公克富含蛋白質之水黃皮成分至少約1.5 g水之保水量;(vii)每公克富含蛋白質之水黃皮成分至少約1.5 g油之保油量;(viii)每100公克至少約10 g富含蛋白質之水黃皮成分的最低膠凝濃度;(ix)至少約10%之粉末分散度;或(x)中性、無苦味;或其(i)-(x)之任何組合。
在其他實施例中,該成分具有(i)在100 s- 1 之剪切速率下約2 mPa*s與約100 mPa*s之間的黏度;(ii) 0.1% w/v水黃皮蛋白質溶液之體積的約100%與約200%之間的發泡量;(iii)至少約0.2 g/cm3 之容積密度;(iv)在pH 7下至少約35%之蛋白質溶解度;(v)小於或等於約5 µm之中值乳液液滴尺寸;(vi)貯藏7天之後小於或等於約5 µm之中值乳液液滴尺寸;(vii)中性、無苦味;或其(i)-(vii)之任何組合。
在又其他實施例中,該成分具有(i)在100 s- 1 之剪切速率下約2 mPa*s與約100 mPa*s之間的黏度;(ii) 0.1% w/v蛋白質溶液之體積的約100%與約200%之間的發泡量;(iii)至少約0.2 g/cm3 之容積密度;(iv)在pH 7下至少約35%之蛋白質溶解度;(v)小於或等於約5 µm之中值乳液液滴尺寸;(vi)貯藏7天之後小於或等於約5 µm之中值乳液液滴尺寸;(vii)每公克富含蛋白質之水黃皮成分至少約1.5 g水之保水量;(viii)每100公克至少約10 g富含蛋白質之水黃皮成分的最低膠凝濃度;或(ix)中性、無苦味或其(i)-(ix)之任何組合。
在又其他實施例中,該成分具有(i)  至少約0.2 g/cm3 之容積密度;(ii)在pH 7下至少約35%之蛋白質溶解度;(iii)每公克富含蛋白質之水黃皮成分至少約1.5 g水之保水量;(iv)每公克富含蛋白質之水黃皮成分至少約1.5 g油之保油量;(v)每100公克至少約10 g富含蛋白質之水黃皮成分的最低膠凝濃度;或(vi)中性、無苦味;或其(i)-(vi)之任何組合。
在一些實施例中,該成分具有:(i) 0.1% w/v蛋白質溶液之體積的約100%與約200%之間的發泡量;(ii)每100公克至少約7 g富含蛋白質之水黃皮成分的最低膠凝濃度;或(iii)中性、無苦味;或其(i)-(iii)之任何組合。
在一個態樣中,本文提供一種製造富含蛋白質之水黃皮組合物之方法,其包含:製備水黃皮粉之含水漿料,其中使該水黃皮粉脫脂及去苦且具有(i)小於500 ppm水黃皮次素;或(ii)小於500 ppm水黃皮籽素;或(iii)小於500 ppm合併之水黃皮次素及水黃皮籽素;將該含水漿料之pH調整至6與10之間的pH;將該漿料分離成蛋白質液體部分及不可溶濕餅部分;中和、濃縮該蛋白質液體部分及/或對其進行巴氏殺菌;及乾燥該蛋白質液體部分以提供富含蛋白質之水黃皮組合物。
在另一態樣中,本文提供一種製造富含蛋白質之水黃皮成分之方法,其包含:製備水黃皮粉之含水漿料,其中使該水黃皮粉脫脂及去苦且具有(i)小於500 ppm水黃皮次素;或(ii)小於500 ppm水黃皮籽素;或(iii)小於500 ppm合併之水黃皮次素及水黃皮籽素;將該含水漿料之pH調整至6與10之間的pH,將該漿料分離成蛋白質液體部分及不可溶濕餅部分;自該蛋白質液體部分沈澱至少一部分水黃皮蛋白質以獲得經純化之水黃皮蛋白質固體;中和該等經純化之水黃皮蛋白質固體且對其進行巴氏殺菌;及乾燥該等經純化之水黃皮蛋白質固體以提供富含蛋白質之水黃皮成分。
在另一態樣中,本文提供一種製造富含蛋白質之水黃皮成分之方法,其包含:製備水黃皮粉之含水漿料;將該含水漿料之pH調整至6與10之間的pH,將該漿料分離成蛋白質液體部分及不可溶濕餅部分;使該蛋白質液體部分通過膜系統以獲得包含水黃皮蛋白質之滲餘物;視情況洗滌、中和該滲餘物及/或對其進行巴氏殺菌;及乾燥該滲餘物以提供富含蛋白質之水黃皮成分。
相關申請案的交叉參考
本申請案主張2020年4月3日申請之美國臨時申請案63/004,780;2020年4月3日申請之美國臨時申請案63/004,785;及2020年4月3日申請之美國臨時申請案63/004,792之優先權及權益,其揭示內容以全文引用之方式併入本文中。
以下描述內容闡述例示性方法、參數及其類似者。然而,應認識到此描述並不意欲限制本發明之範疇,而是替代地經提供作為例示性實施例之描述。
在一些態樣中,本文提供具有較高蛋白質含量之水黃皮組合物,包括例如水黃皮蛋白質濃縮物或分離物,其可用作替代的基於植物之蛋白質來源以供動物,尤其包括人類攝取。在某些態樣中,本文提供用於製造該等富含蛋白質之水黃皮組合物之方法,以及將該等組合物用於各種食品及飲品中之方法。
在一些態樣中,本文提供之富含蛋白質之水黃皮組合物為富含蛋白質之水黃皮成分。如本文所用,「富含蛋白質之水黃皮組合物」可互換地稱為「富含蛋白質之水黃皮成分」。本發明之富含蛋白質之水黃皮成分區別於水黃皮豆餅、水黃皮粉或水黃皮麵粉,因為本文提供之水黃皮成分之蛋白質含量經富集,而就水黃皮豆、豆餅、粉或麵粉中天然存在之量而言,諸如碳水化合物及脂肪之其他組分減少。水黃皮豆餅、粉及麵粉通常用使來源水黃皮豆解毒(或去苦)及脫脂之方法來製備,但實質上不使其蛋白質含量富集,亦不使其碳水化合物含量減少。舉例而言,典型的水黃皮豆含有以乾重計大約25重量%蛋白質含量。使水黃皮豆解毒及/或脫脂之典型方法製造具有30-35%之蛋白質含量的水黃皮餅、粉或麵粉。
另外,富含蛋白質之水黃皮成分呈現多種物理特性,反映脂肪及碳水化合物之蛋白質富集及減少,使得其能夠用於比水黃皮豆餅、粉或麵粉更廣泛多種食品應用中。富含蛋白質之水黃皮組合物
富含蛋白質之水黃皮組合物之組分及特性進一步詳細描述於下文中。出乎意料地發現本文中所描述之富含蛋白質之水黃皮組合物之功能特性,諸如溶解度、黏度及乳化特性,與市售植物蛋白質成分(諸如大豆、豌豆、羽扇豆及向日葵)之功能特性相當(若不更佳)。本文中所描述之富含蛋白質之水黃皮組合物之此等特性表明該等產品可應用於廣泛多種食品及飲品中。水黃皮蛋白質含量
本文提供之富含蛋白質之水黃皮組合物具有較高水黃皮蛋白質含量,包括相對於自其獲得該富集組合物之水黃皮粉的水黃皮蛋白質含量。
在一些變化形式中,富含蛋白質之水黃皮組合物具有以乾重計至少40%、至少45%、至少50%、至少55%、至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%或至少95%之水黃皮蛋白質。在某些變化形式中,富含蛋白質之水黃皮組合物具有以乾重計50%與99%之間、50%與95%之間、50%與90%之間、50%與85%之間、50%與80%之間、50%與75%之間、45%與70%之間、45%與60%之間、40%與70%之間、40%與95%之間、45%與90%之間之水黃皮蛋白質。
在某些變化形式中,富含蛋白質之水黃皮組合物為水黃皮蛋白質濃縮物,其具有以乾重計至少40%、至少45%、至少50%、至少55%、至少60%或至少65%;或45%與70%之間、45%與60%之間、50%與70%之間、55%與70%之間、55%與65%之間、55%與60%之間、60%與70%或65%與70%之間之水黃皮蛋白質。
在其他變化形式中,富含蛋白質之水黃皮組合物為水黃皮蛋白質分離物,具有以乾重計至少70%、至少75%、至少80%、至少85%或至少95%;或70%與95%之間、75%與95%之間、80%與95%之間、85%與95%之間、90%與95%之間、70%與90%之間、75%與90%之間、80%與90%之間、85%與90%之間、70%與85%之間、75%與85%之間、80%與85%之間、70%與80%或75%與80%之間之水黃皮蛋白質。
在前述內容之某些變化形式中,富含蛋白質之水黃皮組合物具有比自其獲得該富集組合物之水黃皮粉大至少1.1倍、至少1.25倍、至少1.5倍、至少2倍、至少2.5倍、至少3倍、至少3.5倍或至少4倍的水黃皮蛋白質。在某些變化形式中,富含蛋白質之水黃皮組合物具有比自其獲得該富集組合物之水黃皮粉高1.25倍與5倍之間的水黃皮蛋白質。蛋白質溶解度
蛋白質溶解度可使用此項技術中已知之任何適合技術量測。舉例而言,在一種變化形式中,根據以下實例4中所闡述之方案量測溶解度。
在一些實施例中,至少35%、至少40%、至少50%、至少60%、至少70%、至少75%、至少80%或至少85%存在於富含蛋白質之水黃皮組合物中的蛋白質可溶於pH大於或等於pH 6的水中。在某些變化形式中,至少35%、至少40%、至少50%、至少60%、或至少70%、至少75%、至少80%、或至少85%存在於富含蛋白質之水黃皮組合物中的蛋白質可溶於pH 7的水中。在其他實施例中,小於或等於50%、小於或等於45%、小於或等於40%、或小於或等於30%存在於富含蛋白質之水黃皮組合物中的蛋白質可溶於pH在3與5之間的水中。在某些變化形式中,小於或等於50%、小於或等於45%、小於或等於40%或小於或等於30%存在於富含蛋白質之水黃皮組合物中的蛋白質可溶於pH 4.5的水中。碳水化合物含量
與本文提供之富含蛋白質之水黃皮組合物中蛋白質之富集相結合,富含蛋白質之水黃皮組合物具有減少之碳水化合物含量,包括相對於自其獲得該富集組合物之水黃皮粉的碳水化合物含量。
在一些實施例中,富含蛋白質之水黃皮組合物具有以乾重計小於或等於約50%、小於或等於約40%、小於或等於約35%、小於或等於約30%、小於或等於約25%、小於或等於約20%、小於或等於約15%或小於或等於約10%之碳水化合物。
在一些實施例中,富含蛋白質之水黃皮組合物具有以乾重計至少40%之水黃皮蛋白質且以乾重計小於或等於約50%之碳水化合物。在某些實施例中,富含蛋白質之水黃皮組合物具有以乾重計至少40%之水黃皮蛋白質且以乾重計小於或等於約40%之碳水化合物。在其他實施例中,富含蛋白質之水黃皮組合物具有以乾重計至少70%之水黃皮蛋白質且以乾重計小於或等於約20%之碳水化合物。在某些其他實施例中,富含蛋白質之水黃皮組合物具有以乾重計至少70%之水黃皮蛋白質且以乾重計小於或等於約15%之碳水化合物。脂肪含量
在一些實施例中,富含蛋白質之水黃皮組合物具有以乾重計小於或等於0.5%、小於或等於0.75%或小於或等於1%之脂肪。在其他實施例中,富含蛋白質之水黃皮組合物具有以乾重計小於或等於4%、小於或等於3%、小於或等於2%或小於或等於1%之脂肪。在某些實施例中,富含蛋白質之水黃皮組合物具有以乾重計0.5%與4%之間、0.5%與3%之間、0.5%與2%之間、0.5%與1%之間、0.75%與4%之間、0.75%與3%之間、0.75%與2%之間、0.75%與1%之間、1%與4%之間、1%與3%之間、1%與2%之間、0%與1%之間的脂肪。
在前述富含蛋白質之水黃皮組合物的其他實施例中,視所用水黃皮粉之組成而定,富含蛋白質之水黃皮組合物可具有: (i)以乾重計小於4%、小於3%、小於2%或小於1%之脂肪;或 (ii)小於500 ppm、小於200 ppm、小於150 ppm、小於100 ppm、小於50 ppm、小於25 ppm、小於20 ppm、小於15 ppm、小於10 ppm、小於5 ppm或小於1 ppm之苦味化合物; 或(i)及(ii)兩者。呋喃類黃酮
苦味化合物係指具有天然存在於水黃皮豆中之苦味的化合物。在一些實施例中,苦味可歸因於呋喃類黃酮,諸如水黃皮次素及水黃皮籽素。
在前述內容之一些變化形式中,存在於富含蛋白質之水黃皮組合物中之苦味化合物可包括水黃皮次素及/或水黃皮籽素。因此,在前述之某些實施例中,富含蛋白質之水黃皮組合物具有:(i)小於500 ppm、小於200 ppm、小於150 ppm、小於100 ppm、小於50 ppm、小於25 ppm、小於20 ppm、小於15 ppm、小於10 ppm、小於5 ppm或小於1 ppm水黃皮次素;或(ii)小於500 ppm、小於200 ppm、小於150 ppm、小於100 ppm、小於50 ppm、小於25 ppm、小於20 ppm、小於15 ppm、小於10 ppm、小於5 ppm或小於1 ppm水黃皮籽素;或(iii)小於500 ppm、小於200 ppm、小於150 ppm、小於100 ppm、小於50 ppm、小於25 ppm、小於20 ppm、小於15 ppm、小於10 ppm、小於5 ppm或小於1 ppm合併之水黃皮次素及水黃皮籽素。
在一些變化形式中,本文提供之富含蛋白質之水黃皮組合物的水黃皮次素及/或水黃皮籽素含量藉由液相層析測定。測定水黃皮次素及/或水黃皮籽素含量之分析方法可包括水黃皮樣品之溶劑萃取,接著進行液相層析分析。在一些變化形式中,萃取溶劑包含烷酸烷基酯。在一種變化形式中,萃取溶劑包含乙酸乙酯。在某些實施例中,液相層析分析可包括高效液相層析及質譜(例如MS或MS/MS)或紫外線偵測(例如UV、UV/Vis或DAD)。
在某些變化形式中,溶劑萃取可涉及微波輔助溶劑萃取。舉例而言,一個例示性分析方法可包括使用乙酸乙酯進行水黃皮次素及水黃皮籽素之微波輔助萃取,以收集萃取物用於後續高效液相層析及質譜分析或UV分光光度法。將水黃皮樣品添加至微波萃取管中。接著,將萃取溶劑添加至樣品試管中且渦旋以混合。接著,使用微波萃取器萃取樣品。一旦冷卻,即真空過濾上清液以移除顆粒。替代地,可將上清液離心以移除顆粒。所萃取之樣品接著可藉由HPLC分析(且藉由質譜或UV分光光度法偵測)以測定樣品中存在之水黃皮次素及水黃皮籽素之含量。
在某些實施例中,富含蛋白質之水黃皮組合物包含以乾重計至少40%水黃皮蛋白質,其中該成分具有:(i)小於500 ppm水黃皮次素;或(ii)小於500 ppm水黃皮籽素;或(iii)小於500 ppm合併之水黃皮次素及水黃皮籽素;且其中該成分具有以乾重計小於或等於40%之碳水化合物。
在某些其他實施例中,富含蛋白質之水黃皮組合物包含以乾重計至少70%之水黃皮蛋白質,其中該成分具有:(i)小於500 ppm水黃皮次素;或(ii)小於500 ppm水黃皮籽素;或(iii)小於500 ppm合併之水黃皮次素及水黃皮籽素;且其中該成分具有以乾重計小於或等於15%之碳水化合物。相對胺基酸概況
在前述內容之某些實施例中,富含蛋白質之水黃皮組合物中存在之水黃皮蛋白質具有基於蛋白質的包括以下之相對胺基酸概況: (i)至少約0.5%甲硫胺酸, (ii)至少約1%色胺酸, (iii)至少約1%半胱胺酸, (iv)至少約2%組胺酸, (v)至少約3%蘇胺酸, (vi)至少約3%異白胺酸, (vii)至少約3%酪胺酸, (viii)至少約3%丙胺酸, (ix)至少約3%甘胺酸, (x)至少約4%纈胺酸, (xi)至少約5%脯胺酸, (xii)至少約5%絲胺酸, (xiii)至少約5%精胺酸, (xiv)至少約6%苯丙胺酸, (xv)至少約8%離胺酸, (xvi)至少約9%白胺酸, (xvii)至少約12%天冬胺酸, (xviii)至少約15%麩胺酸, 或(i)-(xviii)之任何組合。
在一些實施例中,富含蛋白質之水黃皮組合物具有包括至少15%麩胺酸、至少12%天冬胺酸、至少9%白胺酸、至少8%離胺酸、至少6%苯丙胺酸或其任何組合之相對胺基酸概況。在一些變化形式中,富含蛋白質之水黃皮組合物具有包括至少15%麩胺酸之相對胺基酸概況。在其他變化形式中,富含蛋白質之水黃皮組合物具有包括至少12%天冬胺酸之相對胺基酸概況。在又其他變化形式中,富含蛋白質之水黃皮組合物具有包括至少9%白胺酸之相對胺基酸概況。在其他變化形式中,富含蛋白質之水黃皮組合物具有包括至少8%離胺酸之相對胺基酸概況。在再又其他變化形式中,富含蛋白質之水黃皮組合物具有包括至少6%苯丙胺酸之相對胺基酸概況。在某些變化形式中,富含蛋白質之水黃皮組合物具有包括至少15%麩胺酸、至少12%天冬胺酸、至少9%白胺酸、至少8%離胺酸及至少6%苯丙胺酸之相對胺基酸概況。胺基酸評分
在另外其他實施例中,富含蛋白質之水黃皮組合物藉由存在於組合物中之胺基酸之量相比於存在於參考組合物中之相同胺基酸之量的胺基酸評分表徵。胺基酸(amino acid,AA)評分如下計算: 胺基酸(AA)評分=(1 g測試蛋白質中限制必需胺基酸之mg)/(1 g參考蛋白質中相同必需胺基酸之mg)×100。
在一些實施例中,富含蛋白質之水黃皮組合物具有針對以下中之至少一者而言大於或等於70、大於或等於80、大於或等於90、大於或等於100、大於或等於125、或大於或等於150之AA評分:半胱胺酸與甲硫胺酸之組合;組胺酸、異白胺酸;白胺酸;離胺酸;蘇胺酸;色胺酸;酪胺酸與苯丙胺酸之組合;或纈胺酸。在一些實施例中,富含蛋白質之水黃皮組合物具有針對以下中之每一者而言大於或等於70、大於或等於80、大於或等於90、大於或等於100、大於或等於125、或大於或等於150之AA評分:半胱胺酸與甲硫胺酸之組合;組胺酸、異白胺酸;白胺酸;離胺酸;蘇胺酸;色胺酸;酪胺酸與苯丙胺酸之組合;及纈胺酸。
蛋白質消化率校正胺基酸評分(protein digestibility-corrected amino acid score,PDCAAS)為此項技術中已知用於基於人類之胺基酸需求及其消化蛋白質之能力兩者評估蛋白質品質之方法。值「1」最高,而值「0」最低。用於計算由FAO/WHO/UNU專家諮詢規定之PDCAAS之公式如下: PDCAAS=最低必需胺基酸比率×糞便真消化率(%) 其中最低必需胺基酸比率藉由下式獲得: (1 g測試蛋白質中限制必需胺基酸之mg)/(1 g參考蛋白質中相同必需胺基酸之mg)
在一些實施例中,本文中所描述之富含蛋白質之水黃皮組合物具有相對較高PDCAAS值。在一些變化形式中,富含蛋白質之水黃皮組合物具有至少0.7、至少0.75、至少0.8、至少0.85、至少0.9或至少0.95之PDCAAS。在某些變化形式中,富含蛋白質之水黃皮組合物具有在0.7與0.95之間、在0.75與0.95之間、在0.8與0.95之間、在0.85與0.95之間、在0.9與0.95之間、在0.75與0.9之間、在0.8與0.9之間、在0.85與0.9或在0.8與0.85之間的PDCAAS。分子量
存在於富含蛋白質之水黃皮組合物中的蛋白質之分子量分佈可使用此項技術中已知之任何適合技術測定。舉例而言,在一種變化形式中,根據下文實例3中所闡述之方案測定分子量。
本發明之富含蛋白質之水黃皮組合物係自來源於水黃皮豆之水黃皮粉獲得。藉助於其來自水黃皮油籽,本文提供之富含蛋白質之水黃皮組合物含有種子貯藏蛋白,且特徵可在於與例如由水黃皮葉獲得之組合物相比,存在種子貯藏蛋白。在一些實施例中,本發明之富含蛋白質之水黃皮組合物可區別於來源於其他植物來源,諸如豌豆或大豆之蛋白質組合物,其藉由富含蛋白質之水黃皮組合物內存在之蛋白質的分子量分佈表徵。
在一些實施例中,本文中所描述之富含蛋白質之水黃皮組合物包含具有不同分子量之蛋白質。在一些變化形式中,水黃皮蛋白質濃縮物或分離物之平均分子量大於或等於10,000;15,000;20,000;25,000;30,000;35,000;40,000;45,000;50,000;或55,000道爾頓。在其他變化形式中,富含蛋白質之水黃皮組合物之平均分子量小於或等於250,000;200,000;175,000;150,000;130,000;120,000;110,000;100,000;90,000;80,000;70,000;60,000;或55,000道爾頓。在某些變化形式中,富含蛋白質之水黃皮組合物之平均分子量落入一範圍內,其中前述重量中之任一者可充當該範圍之上限或下限。舉例而言,在一種變化形式中,富含蛋白質之水黃皮組合物之平均分子量在55,000道爾頓與72,000道爾頓之間。在又其他變化形式中,富含蛋白質之水黃皮組合物之平均分子量在5,000道爾頓與250,000道爾頓之間。
在一些實施例中,富含蛋白質之水黃皮組合物包含種子貯藏蛋白。在某些實施例中,富含蛋白質之水黃皮組合物包含種子貯藏蛋白,其中所存在之約30-40%之蛋白質為分子量在約45 kDa與約70 kDa之間的蛋白質,如藉由SDS-PAGE所測定。在其他實施例中,富含蛋白質之水黃皮組合物包含分子量為約170-250 kDa、約115-160 kDa、約45-70 kDa、約19-25 kDa、約14-17 kDa或約10-13 kDa之重要的種子貯藏蛋白或其任何組合。
在某些變化形式中,根據如實例3中所描述之方案,本文提供之富含蛋白質之水黃皮組合物、成分、濃縮物及分離物之分子量由SDS-PAGE偵測。黏度
本文提供之富含蛋白質之水黃皮組合物亦可藉由其在於溶液中製備時之黏度表徵。該等富含水黃皮蛋白質之溶液的黏度可適合於某些食品應用,諸如飲料,其黏度可影響對食品之厚度或薄度的總體感覺。高黏度可有利於某些食品,諸如優格,而低黏度可更適合於高蛋白質飲料。
黏度可使用此項技術中已知之任何適合技術量測。舉例而言,在一種變化形式中,蛋白質溶液之黏度使用流變儀根據下文實例4中所闡述之方案來量測。
在一些實施例中,富含蛋白質之水黃皮組合物具有不同黏度。在一些變化形式中,富含蛋白質之水黃皮組合物的黏度為至少2毫帕斯卡-秒(mPa*s)、至少3 mPa*s或至少4 mPa*s,如在100 s- 1 之剪切速率下所量測。在一些變化形式中,富含蛋白質之水黃皮組合物之黏度小於或等於100 mPa*s、小於或等於75 mPa*s、小於或等於50 mPa*s、或小於或等於25 mPa*s,如在100 s- 1 之剪切速率下所量測。在其他變化形式中,富含蛋白質之水黃皮組合物之黏度小於或等於約10 mPa*s、小於或等於8 mPa*s、小於或等於7 mPa*s、小於或等於6 mPa*s、或小於或等於5 mPa*s,如在100 s- 1 之剪切速率下所量測。在其他變化形式中,富含蛋白質之水黃皮組合物之黏度在100 s- 1 之剪切速率下在約2 mPa*s與約100 mPa*s之間、在約2 mPa*s與約75 mPa*s之間、在約2 mPa*s與約50 mPa*s之間、在約2 mPa*s與約25 mPa*s之間、在約2 mPa*s與約10 mPa*s之間、在約5 mPa*s與約10 mPa*s之間或在約7 mPa*s與約10 mPa*s之間。
在又其他變化形式中,富含蛋白質之水黃皮組合物之黏度為至少2 mPa*s、至少4 mPa*s、至少6 mPa*s或至少8 mPa*s,如在50 s- 1 之剪切速率下所量測。在一些變化形式中,富含蛋白質之水黃皮組合物之黏度小於或等於15 mPa*s、小於或等於12 mPa*s或小於或等於10 mPa*s,如在50 s- 1 之剪切速率下所量測。在又其他變化形式中,富含蛋白質之水黃皮組合物之黏度為至少2 mPa*s、至少4 mPa*s、至少6 mPa*s或至少8 mPa*s,如在10 s- 1 之剪切速率下所量測。在再又其他變化形式中,富含蛋白質之水黃皮組合物之黏度小於或等於15 mPa*s、小於或等於12 mPa*s、或小於或等於10 mPa*s,如在10 s- 1 之剪切速率下所量測。乳化
本文提供之富含蛋白質之水黃皮組合物可關於其乳化特性經進一步描述。富含蛋白質之水黃皮組合物之乳化特性可適合於含有不可混溶液體成分之食品,諸如非乳奶或蛋白質飲料。舉例而言,飲品之口感可受飲料內液滴尺寸分佈影響,具有較窄分佈(不論單峰或雙峰)及較小尺寸液滴的飲品提供光滑質地及均勻口感。
乳化可使用此項技術中已知之任何適合之技術量測。舉例而言,在一種變化形式中,根據以下實例4中所闡述之方案藉由雷射繞射分析乳液之液滴尺寸。
在一些實施例中,包含富含蛋白質之水黃皮組合物之乳液可具有不同液滴尺寸分佈。在一些實施例中,包含富含蛋白質之水黃皮組合物的乳液具有單峰液滴尺寸分佈。在其他實施例中,包含富含蛋白質之水黃皮組合物之乳液具有雙峰液滴尺寸分佈。
在一些變化形式中,包含富含蛋白質之水黃皮組合物之乳液的平均液滴尺寸為至少1 µm、至少2.5 µm、至少5 µm、至少10 µm、至少25 µm、至少50或至少75 µm。在其他變化形式中,包含富含蛋白質之水黃皮組合物之乳液的平均液滴尺寸小於或等於150 µm、小於或等於100 µm、小於或等於75 µm、或小於或等於50 µm。在某些變化形式中,包含富含蛋白質之水黃皮組合物之乳液具有雙峰液滴尺寸分佈,其中雙峰式分佈具有約1 µm之第一平均液滴尺寸及約10 µm與約100 µm之間的第二平均液滴尺寸。
在一些實施例中,當乳化時,富含蛋白質之水黃皮組合物(呈乳液形式)之平均液滴尺寸為至少1 µm、至少2.5 µm、至少5 µm、至少10 µm、至少25 µm、至少50 µm或至少75 µm。在其他實施例中,當乳化時,富含蛋白質之水黃皮組合物之平均液滴尺寸小於或等於150 µm、小於或等於100 µm、小於或等於75 µm、或小於或等於50 µm。在某些變化形式中,當乳化時,富含蛋白質之水黃皮組合物具有雙峰液滴尺寸分佈,其中雙峰式分佈具有約1 µm之第一平均液滴尺寸及約10 µm與約100 µm之間的第二平均液滴尺寸。
在一些實施例中,其中包含富含蛋白質之水黃皮組合物之乳液具有單峰液滴尺寸分佈,富含蛋白質之水黃皮組合物(呈乳液形式)可表徵為具有中值液滴尺寸。在其他實施例中,當乳化時,富含蛋白質之水黃皮組合物(呈乳液形式)具有小於或等於約5 µm、小於或等於約4 µm、小於或等於約35 µm、小於或等於約2 µm或小於或等於約1 µm之中值液滴尺寸。在某些實施例中,當乳化時,富含蛋白質之水黃皮組合物(呈乳液形式)具有小於或等於約5 µm之中值液滴尺寸。
在一些實施例中,包含本文提供之富含蛋白質之水黃皮組合物之乳液可進一步藉由其隨時間推移之穩定性表徵,諸如初始製備若干天後之穩定性。舉例而言,在其他實施例中,當乳化時,富含蛋白質之水黃皮組合物(呈乳液形式)具有在1天、2天、3天、4天、5天、6天或7天貯藏之後小於或等於約5 µm、小於或等於約4 µm、小於或等於約35 µm、小於或等於約2 µm、或小於或等於約1 µm之中值乳液液滴尺寸。在某些實施例中,當乳化時,富含蛋白質之水黃皮組合物(呈乳液形式)在貯藏7天之後具有小於或等於約5 µm之中值液滴尺寸。發泡特性
本文提供之富含蛋白質之水黃皮組合物亦可關於其發泡特性進行描述,該等特性包括其每單位重量之水黃皮組合物的最大泡沫產生量(或發泡性)及其泡沫穩定性(例如在指定時間段之後泡沫體積改變)。富含蛋白質之水黃皮組合物之發泡特性在某些食物應用中,例如作為蛋代用品,可為合乎需要的。發泡特性可根據下文實例5中所闡述之方案來確定。
在一些實施例中,富含蛋白質之水黃皮組合物具有每60 mL 0.1% w/v之水黃皮蛋白質溶液至少約70 mL、至少約80 mL、至少約90 mL、或至少約100 mL之發泡性。在某些實施例中,富含蛋白質之水黃皮組合物具有每60 mL 0.1% w/v之水黃皮蛋白質溶液至少約70 mL之發泡性。在其他實施例中,富含蛋白質之水黃皮組合物具有每60 mL 0.1% w/v之水黃皮蛋白質溶液小於或等於約150 mL、小於或等於約140 mL、小於或等於約130 mL、小於或等於約120 mL、或小於或等於約110 mL之發泡性。在某些實施例中,富含蛋白質之水黃皮組合物具有每60 mL 0.1 w/v之水黃皮蛋白質溶液小於或等於約150 mL之發泡性。在其他實施例中,富含蛋白質之水黃皮組合物具有每60 mL 0.1% w/v水黃皮蛋白質溶液約70 mL與約150 mL之間、每60 mL 0.1% w/v水黃皮蛋白質溶液約70 mL與約120 mL之間、或每60 mL 0.1% w/v水黃皮蛋白質溶液約70 mL與約100 mL之間的發泡性。在某些實施例中,富含蛋白質之水黃皮組合物具有每60 mL 0.1% w/v之水黃皮蛋白質溶液約70 mL與約150 mL之間之發泡性。
可根據發泡量替代地描述發泡性。在一些實施例中,富含蛋白質之水黃皮組合物之發泡量為0.1% w/v水黃皮蛋白質溶液之體積的至少約100%、至少約110%、至少約120%、至少約130%、至少約140%、或至少約150%。在某些實施例中,富含蛋白質之水黃皮組合物之發泡量為0.1% w/v水黃皮蛋白質溶液之體積的至少約100%。在其他實施例中,富含蛋白質之水黃皮組合物之發泡量小於或等於0.1% w/v水黃皮蛋白質溶液之體積的約200%、小於或等於約190%、小於或等於約180%、小於或等於約170%、小於或等於約160%、或小於或等於約150%。在某些實施例中,富含蛋白質之水黃皮組合物之發泡量小於或等於0.1% w/v水黃皮蛋白質溶液之體積的約200%。在其他實施例中,富含蛋白質之水黃皮組合物之發泡量在0.1% w/v水黃皮蛋白質溶液之體積的約100%與約200%之間、約100%與約150%之間或約150%與約200%之間。在某些實施例中,富含蛋白質之水黃皮組合物之發泡量在0.1% w/v水黃皮蛋白質溶液之體積的約100%與約200%之間。
在其他實施例中,富含蛋白質之水黃皮組合物可藉由其泡沫穩定性表徵,例如,如經量測為在5秒之後、在5分鐘之後、在10分鐘之後、在15分鐘之後或在1小時之後的泡沫體積相對於初始製備後之最大泡沫體積的百分比。在一些實施例中,富含蛋白質之水黃皮組合物具有至少約5%、至少約6%、至少約7%、至少約8%、至少約9%或至少約10%之泡沫穩定性。容積密度
富含蛋白質之水黃皮蛋白質可進一步關於其容積密度進行描述。本文提供之富含蛋白質之水黃皮組合物的容積密度或體積密度可指示用於大規模食物處理及消費者應用,諸如用於蛋白粉混合物之使用、貯藏及/或填充的相對容易性。
在一些實施例中,富含蛋白質之水黃皮組合物之容積密度為至少約0.2 g/cm3 、至少約0.25 g/cm3 、至少約0.3 g/cm3 、至少約0.4 g/cm3 、至少約0.5 g/cm3 、至少約0.6 g/cm3 、至少約0.7 g/cm3 、至少約0.8 g/cm3 、至少約0.9 g/cm3 或至少約1 g/cm3 。在某些實施例中,富含蛋白質之水黃皮組合物之容積密度為至少約0.2 g/cm3保水量及保油量
在其他實施例中,本文提供之富含蛋白質之水黃皮組合物可藉由其保水量及/或保油量表徵。保水量,亦稱為與水結合量或吸水量,為每單位重量之物質(諸如本發明之蛋白粉或富含蛋白質之水黃皮組合物)可吸收水之總量的量度。在一種變化形式中,根據以下實例5中所闡述之方案測定保水量。類似地,保油量為每單位重量之物質可吸收油之總量的量度。在一種變化形式中,根據下文實例5中所闡述之方案測定保油量。
本文提供之富含蛋白質之水黃皮組合物之保水量及保油量表明在需要水及油保持性之食物產品中具有潛在效用且適合併入。舉例而言,在非乳優格及優格中,高保水量可有利於避免貯藏時液體(乳清)自蛋白質(乳固形物)分離。在另一實例中,富含蛋白質之水黃皮組合物可用於肉類模擬物,其中較高保水量及保油量可促成複製動物肉之感官特性的某些感官態樣(諸如多汁性)。本文所提供之富含蛋白質之水黃皮組合物的保水量及保油量可反映用以獲得組合物之方法,因為此等特性受蛋白質溶解度、蛋白質變性程度及暴露於蛋白質上之疏水性基團影響。
在一些實施例中,富含蛋白質之水黃皮組合物具有每公克富含蛋白質之水黃皮成分至少約0.5 g水、至少約0.7 g水、至少約1 g水、至少約1.2 g水、至少約1.5 g水、至少約2 g水、至少約2.5 g水、至少約3 g水或至少約3.5 g水之保水量。在某些實施例中,富含蛋白質之水黃皮組合物具有每公克富含蛋白質之水黃皮成分至少約1.5 g水之保水量。
在一些實施例中,富含蛋白質之水黃皮組合物具有每公克富含蛋白質之水黃皮成分至少約0.5 g油、至少約0.7 g油、至少約1 g油、至少約1.2 g油、至少約1.5 g油、至少約2.5 g水、至少約3 g水或至少約3.5 g油之保油量。在某些實施例中,富含蛋白質之水黃皮組合物具有每公克富含蛋白質之水黃皮成分至少約1.2 g油或至少約1.5 g油之保油量。膠凝特性
在其他實施例中,本發明之富含蛋白質之水黃皮組合物可藉由其膠凝特性表徵。富含蛋白質之水黃皮組合物形成凝膠之能力表明具有併入至食品中之可能性,其中半固體凝膠狀結構諸如在甜點、(非乳)優格、非乳乳酪、布丁、調味醬、蘸醬及塗抹食品中合乎需要。在一種變化形式中,根據下文實例5中所闡述之方案測定最低膠凝濃度。
在一些實施例中,本發明之富含蛋白質之水黃皮組合物的最小凝膠濃度為每100公克總溶液至少約5 g富含蛋白質之水黃皮組合物、每100公克總溶液至少約6 g富含蛋白質之水黃皮組合物、每100公克總溶液至少約7 g富含蛋白質之水黃皮組合物、每100公克總溶液至少約8 g富含蛋白質之水黃皮組合物、每100公克總溶液至少約9 g富含蛋白質之水黃皮組合物、每100公克總溶液至少約10 g富含蛋白質之水黃皮組合物、每100公克總溶液至少約11 g富含蛋白質之水黃皮組合物或每100公克總溶液至少約12 g富含蛋白質之水黃皮組合物。在某些實施例中,本發明之富含蛋白質之水黃皮組合物的最低凝膠濃度為每100公克總溶液至少約7 g富含蛋白質之水黃皮組合物。在某些其他實施例中,富含蛋白質之水黃皮組合物的最低膠凝濃度每100公克總溶液至少約10 g富含蛋白質之水黃皮組合物。粉末分散性
在一些實施例中,富含蛋白質之水黃皮組合物可根據其粉末分散性進行描述。粉末分散性或粉末分解成水中粒子之能力可指示用於在水中復原之乾粉之適合性,諸如某些飲品(例如奶粉或蛋白質奶昔粉(protein shake powder))之情況。舉例而言,在一種變化形式中,根據下文實例5中所闡述之方案測定粉末分散度。在一些實施例中,富含蛋白質之水黃皮組合物具有至少約10%、至少約12%、至少約15%或至少約17%之粉末分散度。在某些實施例中,富含蛋白質之水黃皮組合物具有至少約10%之粉末分散度。味道及顏色
在一些實施例中,本文中所描述之富含蛋白質之水黃皮組合物具有不含苦味之純淨味道概況。在某些實施例中,富含蛋白質之水黃皮組合物具有中性及/或非苦味味道。在一些實施例中,存在於富含蛋白質之水黃皮組合物中之苦味化合物,諸如水黃皮次素及/或水黃皮籽素濃度小於500 ppm。在某些實施例中,存在於富含蛋白質之水黃皮組合物中之苦味化合物,諸如水黃皮次素及/或水黃皮籽素濃度小於200 ppm。在某些變化形式中,富含蛋白質之水黃皮組合物中存在之水黃皮次素及/或水黃皮籽素的濃度不可藉由此項技術中已知量測水黃皮次素及/或水黃皮籽素之方法及技術偵測。
在其他實施例中,本文中所描述之富含蛋白質之水黃皮組合物具有白色或淺棕色。在某些實施例中,本文中所描述之富含蛋白質之水黃皮組合物具有白色。在某些其他實施例中,富含蛋白質之水黃皮組合物具有淺棕色。
在一些實施例中,富含蛋白質之水黃皮組合物具有: (i)    100 s- 1 之剪切速率下在約2 mPa*s與約100 mPa*s之間的黏度; (ii)   0.1% w/v蛋白質溶液之體積的約100%與約200%之間的發泡量; (iii)  至少約0.2 g/cm3 之容積密度; (iv)   在pH 7下至少約35%之蛋白質溶解度; (v)    小於或等於約5 µm之中值乳液液滴尺寸; (vi)   貯藏7天之後小於或等於約5 µm之中值乳液液滴尺寸; (vi)   每公克富含蛋白質之水黃皮成分至少約1.5 g水之保水量; (vii)  每公克富含蛋白質之水黃皮成分至少約1.5 g油之保油量; (viii) 每100公克至少約10 g富含蛋白質之水黃皮成分的最低膠凝濃度; (ix)   至少約10%之粉末分散度; (x)    中性、無苦味;或 (xi)   白色; 或其(i)-(xi)之任何組合。
在其他實施例中,富含蛋白質之水黃皮組合物具有: (i)    100 s- 1 之剪切速率下在約2 mPa*s與約100 mPa*s之間的黏度; (ii)   0.1% w/v蛋白質溶液之體積的約100%與約200%之間的發泡量; (iii)  至少約0.2 g/cm3 之容積密度; (iv)   在pH 7下至少約35%之蛋白質溶解度; (v)    小於或等於約5 µm之中值乳液液滴尺寸; (vi)   貯藏7天之後小於或等於約5 µm之中值乳液液滴尺寸; (vi)   每公克富含蛋白質之水黃皮成分至少約1.5 g水之保水量; (vii)  每公克富含蛋白質之水黃皮成分至少約1.5 g油之保油量; (viii) 每100公克至少約10 g富含蛋白質之水黃皮成分的最低膠凝濃度; (ix)   至少約10%之粉末分散度;或 (x)    中性、無苦味; 或其(i)-(x)之任何組合。
在又他實施例中,富含蛋白質之水黃皮組合物具有: (i)    100 s- 1 之剪切速率下在約2 mPa*s與約100 mPa*s之間的黏度; (ii)   0.1% w/v水黃皮蛋白質溶液之體積的約100%與約200%之間的發泡量; (iii)  至少約0.2 g/cm3 之容積密度; (iv)   在pH 7下至少約35%之蛋白質溶解度; (v)    小於或等於約5 µm之中值乳液液滴尺寸; (vi)   貯藏7天之後小於或等於約5 µm之中值乳液液滴尺寸; (vii)  中性、無苦味; 或其(i)-(vii)之任何組合。
在再又其他實施例中,富含蛋白質之水黃皮組合物具有: (i)    100 s- 1 之剪切速率下在約2 mPa*s與約100 mPa*s之間的黏度; (ii)   0.1% w/v蛋白質溶液之體積的約100%與約200%之間的發泡量; (iii)  至少約0.2 g/cm3 之容積密度; (iv)   在pH 7下至少約35%之蛋白質溶解度; (v)    小於或等於約5 µm之中值乳液液滴尺寸; (vi)   貯藏7天之後小於或等於約5 µm之中值乳液液滴尺寸; (vii)  每公克富含蛋白質之水黃皮成分至少約1.5 g水之保水量; (viii) 每100公克至少約10 g富含蛋白質之水黃皮成分的最低膠凝濃度;或 (ix)   中性、無苦味 或其(i)-(x)之任何組合。
在一些實施例中,富含蛋白質之水黃皮組合物具有: (i)    至少約0.2 g/cm3 之容積密度; (ii)   在pH 7下至少約35%之蛋白質溶解度; (iii)  每公克富含蛋白質之水黃皮成分至少約1.5 g水之保水量; (iv)   每公克富含蛋白質之水黃皮成分至少約1.5 g油之保油量; (v)    每100公克至少約10 g富含蛋白質之水黃皮成分的最低膠凝濃度;或 (vi)   中性、無苦味; 或其(i)-(vi)之任何組合。
在其他實施例中,富含蛋白質之水黃皮組合物具有: (i)    0.1% w/v蛋白質溶液之體積的約100%與約200%之間的發泡量; (ii)   每100公克至少7 g富含蛋白質之水黃皮成分的最低膠凝濃度;或 (iii)  中性、無苦味; 或其(i)-(iii)之任何組合。製造富含蛋白質之水黃皮組合物的方法
在一些態樣中,本文提供製造富含蛋白質之水黃皮組合物(包括例如水黃皮蛋白質濃縮物或分離物)之各種方法。本文所述之富含蛋白質之水黃皮組合物來源於水黃皮豆。在一些實施例中,該等富含蛋白質之水黃皮組合物自各種形式之經處理之水黃皮粉製造。水黃皮粉
在一些實施例中,水黃皮粉具有: (i)    以乾重計小於1%、小於2.5%或小於5%之脂肪;或 (ii)   小於1,000 ppm、小於900 ppm、小於800 ppm、小於700 ppm、小於600 ppm、小於500 ppm、小於400 ppm、小於300 ppm、小於200 ppm或小於100 ppm之苦味化合物; 或(i)及(ii)兩者。
在某些實施例中,水黃皮粉具有: (i)    以乾重計小於0.2%、小於0.5%或小於1%之脂肪;或 (ii)   小於500 ppm、小於200 ppm、小於150 ppm、小於100 ppm、小於50 ppm、小於25 ppm、小於20 ppm、小於15 ppm、小於10 ppm、小於5 ppm或小於1 ppm之苦味化合物; 或(i)及(ii)兩者。
如上文所指出,苦味化合物係指具有天然存在於水黃皮豆中之苦味的化合物。在前述內容之一些變化形式中,水黃皮粉中存在之苦味化合物可包括水黃皮次素及/或水黃皮籽素。因此,在前述之某些實施例中,水黃皮粉具有:(x)小於500 ppm、小於200 ppm、小於150 ppm、小於100 ppm、小於50 ppm、小於25 ppm、小於20 ppm、小於15 ppm、小於10 ppm、小於5 ppm或小於1 ppm水黃皮次素;或(y)小於500 ppm、小於200 ppm、小於150 ppm、小於100 ppm、小於50 ppm、小於25 ppm、小於20 ppm、小於15 ppm、小於10 ppm、小於5 ppm或小於1 ppm水黃皮籽素;或(z)小於500 ppm、小於200 ppm、小於150 ppm、小於100 ppm、小於50 ppm、小於25 ppm、小於20 ppm、小於15 ppm、小於10 ppm、小於5 ppm或小於1 ppm合併之水黃皮次素及水黃皮籽素。
在一些變化形式中,使水黃皮粉脫脂及去苦,且具有(i)小於500 ppm水黃皮次素;或(ii)小於500 ppm水黃皮籽素;或(iii)小於500 ppm合併之水黃皮次素及水黃皮籽素。在某些變化形式中,使水黃皮粉脫脂及去苦,且具有(i)小於200 ppm水黃皮次素;或(ii)小於200 ppm水黃皮籽素;或(iii)小於200 ppm合併之水黃皮次素及水黃皮籽素。
用於本文所描述之方法以製造富含蛋白質之水黃皮組合物的水黃皮粉可由此項技術中已知之各種方法及技術產生。參考圖1 ,製程100 描繪製造富含蛋白質之水黃皮組合物的例示性製程。製程100 描繪用以製造減脂水黃皮粉的脫殼102 、機械壓製104 及研磨106 水黃皮豆,其隨後可經歷溶劑萃取108 以製造脫脂去苦水黃皮粉。此脫脂去苦水黃皮粉隨後經歷蛋白質萃取110 ,隨後蛋白質分離(separation/isolation)112 、中和114 、巴氏殺菌116 及乾燥(例如藉由噴霧乾燥或凍乾)118 ,從而製造富含蛋白質之水黃皮組合物。
步驟102 中之脫殼通常涉及使水黃皮豆通過脫殼機來使豆殼鬆散,並分離兩種部分。此項技術中已知之任何適合之技術可用於實現脫殼及殼分離。舉例而言,在一些變化形式中,藉由使水黃皮豆通過衝擊型脫殼機且使豆殼鬆散來進行脫殼。諸如研磨/刷洗類型之其他類型的脫殼裝備可用於此目的。豆自殼之分離可藉由例如重力分選台或抽吸器進行。在一些變化形式中,可省略脫殼步驟。
隨後豆在步驟104 中經機械壓製(例如,冷壓),其通常可使用壓榨機進行,以移除游離油並製造減脂(例如,10-14%脂肪)水黃皮粉。可使用此項技術中已知之任何適合技術進行冷壓。舉例而言,冷壓可使用裝備之各種片件進行,諸如Farmet FL-200壓榨機。在一些變化形式中,壓製可包括使經脫殼的豆通過該裝置以製造游離油及減脂粉。機械壓製豆產生經部分脫脂豆粉,其在一些變化形式中保留初始水黃皮油含量之大約30-45%。
隨後,粉在步驟106 中進行研磨以分散聚集體且產生脂肪含量減少之略微較不粗糙的粉(例如,粒度在0.25 mm至5.0 mm範圍內)。研磨可以使用此項技術中已知之任何適合技術進行。舉例而言,可使用諸如錘式研磨機、FitzMill或Quadromill之裝備進行研磨。
在步驟108 中,可使用溶劑萃取經研磨的減脂粉以製造脫脂去苦粉。在一些變化形式中,所得脫脂去苦水黃皮蛋白質粉具有小於200 ppm水黃皮次素及水黃皮籽素。溶劑萃取通常移除油及固有類黃酮化合物,諸如水黃皮次素及水黃皮籽素。在一些變化形式中,溶劑萃取可包括將減脂粉暴露於溶劑,諸如乙酸乙酯、乙醇、己烷或其他有機溶劑或其任何組合之選擇群。溶劑萃取可以10:1;9:1;8:1;7:1;6:1;5:1;4:1;3:1;2:1;1:1之溶劑-固體比率或前述中之任一者之間的範圍內之比率進行。在某些變化形式中,萃取可保持1、2、3、5、6、8或10小時,或持續屬於前述中之任一者之間的範圍內之持續時間。在某些變化形式中,萃取在25℃、45℃、55℃、60℃或65℃之溫度下進行或在屬於前述中之任一者之間的範圍內之溫度下進行。在又其他變化形式中,可在兩個或更多個連續萃取中進行溶劑萃取,其中用於各萃取之溶劑可相同或不同。隨後,例如藉由蒸發移除溶劑,以製造富含蛋白質(例如30-39%)及碳水化合物(例如55-60%)之脫脂去苦水黃皮蛋白質粉。
在一些實施例中,在例示性製程100 中之步驟108110 之間,可將脫脂去苦水黃皮粉研磨至更小、更均勻的粒度。可採用任何適合之方法或技術來研磨粉。舉例而言,在一種變化形式中,可使用具有或不具有後續篩分之咖啡研磨機或碾穀機/麵粉研磨機。在某些實施例中,將脫脂去苦水黃皮粉研磨至直徑小於或等於0.5 mm之粒度。在一些實施例中,將脫脂去苦水黃皮粉均勻地研磨至直徑小於或等於0.5 mm、小於或等於0.2 mm、小於或等於0.15 mm或小於或等於0.05 mm之粒度。在一個實施例中,將脫脂去苦水黃皮粉均勻地研磨至直徑小於或等於0.5 mm之粒度。
再次參考圖1 ,儘管例示性製程100 描繪由水黃皮豆製造富含蛋白質之水黃皮組合物,但應理解,在其他例示性製程中,富含蛋白質之水黃皮組合物可由水黃皮粉製造,該製造可由此項技術中已知之任何方法或技術或任何市售來源獲得。換言之,在其他實施例中,富含蛋白質之水黃皮組合物可由各種形式之水黃皮粉製造。
類似地,參考圖2A - 2C 中之例示性程序200 300 400 ,應理解,儘管使用脫脂去苦水黃皮粉作為起始物質。在其他變化形式中,可使用其他形式之水黃皮粉。舉例而言,在某些實施例中,水黃皮粉可為經研磨之全脂水黃皮粉或減脂水黃皮粉。
在一些變化形式中,水黃皮粉係藉由脫殼及研磨水黃皮豆獲得。在一種變化形式中,經研磨水黃皮粉具有:(i)以乾重計小於或等於25%之水黃皮蛋白質;或(ii)以乾重計至少30%之脂肪;或(iii)小於或等於20,000 ppm之苦味化合物(諸如水黃皮次素及/或水黃皮籽素)或(i)-(iii)之任何組合。
在其他變化形式中,水黃皮粉為減脂水黃皮粉,其藉由脫殼、壓製(例如冷壓)及研磨水黃皮豆獲得。在一種變化形式中,減脂水黃皮粉具有:(i)以乾重計小於或等於30%之水黃皮蛋白質;或(ii)以乾重計小於或等於15%之脂肪;或(iii)小於或等於10,000 ppm之苦味化合物,或(i)-(iii)之任何組合。
在又其他變化形式中,水黃皮粉為藉由溶劑萃取上文所描述之減脂水黃皮粉獲得之脫脂去苦水黃皮粉。舉例而言,在某些變化形式中,適用於該溶劑萃取之溶劑可包括有機溶劑,諸如酯(例如乙酸乙酯)、醇(例如甲醇、乙醇等)及烷烴(例如己烷)。在一種變化形式中,脫脂去苦水黃皮粉具有:(i)以乾重計小於或等於40%之水黃皮蛋白質;或(ii)以乾重計小於或等於5%之脂肪;或(iii)小於或等於500 ppm之苦味化合物,或(i)-(iii)之任何組合。在另一變化形式中,脫脂去苦水黃皮粉具有:(i)以乾重計小於或等於40%之水黃皮蛋白質;或(ii)以乾重計小於或等於5%之脂肪;或(iii)小於或等於200 ppm之苦味化合物,或(i)-(iii)之任何組合。
在蛋白質萃取步驟110 中,將脫脂去苦水黃皮粉中之蛋白質溶解於液體萃取物中,如以下進一步詳細論述。蛋白質分離(separation/isolation)112 可採用各種固液分離技術。舉例而言,在一些變化形式中,可採用自濕潤水黃皮豆餅(殘餘固體)傾析上清液蛋白質液體萃取物以獲得富含蛋白質之水黃皮組合物。在一些變化形式中,可採用溶解以獲得富含蛋白質之水黃皮組合物。在一些變化形式中,可採用等電沈澱以獲得富含蛋白質之水黃皮組合物。在一些變化形式中,膜過濾可用於獲得富含蛋白質之水黃皮組合物。溶解
在一個態樣中,提供一種藉由溶解由水黃皮粉製造富含蛋白質之水黃皮組合物的方法。參考圖2A 中之例示性製程200 ,在步驟202 中,使用脫脂去苦水黃皮粉製備含水漿料,且例如用適合的鹼(諸如氫氧化鈉)將pH調整至鹼性pH (例如在8與10之間)。在步驟204 中,藉由將鹼性蛋白質液體部分與不可溶濕餅部分分離來實現水黃皮蛋白質之萃取。在步驟202 之其他變化形式中,使用脫脂去苦水黃皮粉製備含水漿料,且用適合之酸或鹼將pH調整至6與10之間的pH,且將蛋白質液體部分與不可溶濕餅部分分離。
此項技術中已知之任何適合技術可用於實現該分離。舉例而言,該分離可使用傾析器或離心機實現。獲得蛋白質液體,且在步驟206 中,藉由例如藉由添加適合的酸,諸如鹽酸或磷酸,調整至約pH 7.0來中和蛋白質液體之pH。在步驟208 中,濃縮經中和之蛋白質液體。在步驟210212 中,經濃縮蛋白質液體分別經歷巴氏殺菌及噴霧乾燥以獲得富含蛋白質之水黃皮組合物。中和、濃縮及巴氏殺菌步驟視情況包括於例示性製程中。
在一個態樣中,本文提供一種製造富含蛋白質之水黃皮組合物之方法,其包含: 製備水黃皮粉之含水漿料; 將該含水漿料之pH調整至8與10之間的pH; 將該漿料分離成蛋白質液體部分及不可溶濕餅部分; 視情況中和、濃縮該蛋白質液體部分及/或對其進行巴氏殺菌;及 乾燥蛋白質液體以提供富含蛋白質之水黃皮組合物。
在另一態樣中,本文提供一種製造富含蛋白質之水黃皮組合物之方法,其包含: 製備水黃皮粉之含水漿料; 將該含水漿料之pH調整至6與10之間的pH; 將該漿料分離成蛋白質液體部分及不可溶濕餅部分; 視情況中和、濃縮該蛋白質液體部分及/或對其進行巴氏殺菌;及 乾燥蛋白質液體以提供富含蛋白質之水黃皮組合物。
在一些實施例中,製備含水漿料之步驟可包含將水黃皮粉與水合併。在一些實施例中,該方法進一步包含攪動或混合(例如在高剪切下)水黃皮粉及水。
如本發明中所發現,發現水黃皮蛋白質高度可溶於鹼性液態培養基中。將包含水黃皮粉之含水漿料調整至鹼性pH有助於將水黃皮蛋白質萃取或溶解於溶液中。在一些實施例中,將含水漿料調整至8與10之間的pH。在其他實施例中,將含水漿料調整至6與10之間的pH。
隨後在步驟204 中將漿料分離成鹼性蛋白質液體部分及不可溶濕餅部分。分離可經由此項技術中已知之包括例如傾析及離心的固液分離技術實現。
在一些變化形式中,用於調整pH及分離出蛋白質液體部分之步驟202204 亦可在所獲得之濕餅部分上進行一或多次以提高蛋白質產率。換言之,可對水黃皮粉進行若干連續重複溶解,如在殘餘不可溶濕餅部分上進行。舉例而言,濕餅可在第二含水漿料中製備且經調整至鹼性pH,其後第二鹼性蛋白質液體部分與不可溶餅部分分離且合併兩個液體部分。對於重複萃取,可在含水漿料中製備水黃皮粉且將pH調整至酸性pH (例如pH 2)或鹼性pH (例如pH 8),將所得pH經調整之漿料分離成其蛋白質液體部分及不可溶濕餅部分,且在後續含水漿料中製備濕餅部分,其隨後調整至鹼性pH且分離成額外蛋白質液體部分。由連續溶解獲得之任何蛋白質液體部分在後續處理之前合併為單一蛋白質液體部分。在其他變化形式中,可將用於分解水黃皮粉中之碳水化合物之酶添加至含水漿料中以促進蛋白質溶解。
在一些實施例中,蛋白質液體部分經中和至約pH 7的pH。蛋白質液體可經由添加適合的食品級酸(諸如磷酸或鹽酸)中和。在某些實施例中,中和蛋白質液體部分包含添加磷酸或鹽酸至蛋白質液體部分中。
在其他實施例中,蛋白質液體部分在中和之後濃縮。濃縮蛋白質液體部分可涉及減少蛋白質液體部分中液體體積以更容易地進行操作或後續處理,諸如酸沈澱及/或膜過濾。
在再又其他實施例中,對蛋白質液體部分進行巴氏殺菌。巴氏殺菌為標準食品處理技術,其中人類攝取之產品經輕度熱處理,通常低於100℃ (212℉)以消除病原體且延長存放期。
在另外其他實施例中,蛋白質液體萃取物經乾燥以提供最終富含蛋白質之水黃皮組合物。蛋白質液體萃取物可藉由此項技術中已知之方法乾燥,包括例如噴霧乾燥及/或凍乾(例如凍乾)。
在一些變化形式中,藉由前述方法獲得之富含蛋白質之水黃皮組合物為水黃皮蛋白質濃縮物。在某些變化形式中,富含蛋白質之水黃皮組合物具有以乾重計至少40%、至少50%或50%與70%之間的水黃皮蛋白質。在其他變化形式中,富含蛋白質之水黃皮組合物具有以乾重計至少40%之水黃皮蛋白質;及以乾重計小於或等於40%之碳水化合物。立即沈澱
在另一態樣中,本文提供一種在不預先溶解水黃皮蛋白質之情況下藉由沈澱由水黃皮粉製造富含蛋白質之水黃皮組合物的方法。藉助於水黃皮蛋白質在不預先溶解之情況下自水黃皮粉之含水漿料立即沈澱,本發明態樣之方法可允許自包括不可溶蛋白質之水黃皮粉回收較寬範圍之蛋白質,總體需要較少製程步驟,增加蛋白質產量且減少水及能源使用。另外,較寬範圍之蛋白質以及藉由本發明方法獲得之組合物之碳水化合物含量的回收可為特定食品應用提供增強的功能性。
在本發明態樣之一些實施例中,使用脫脂去苦水黃皮粉製備含水漿料,且將pH調整至酸性pH (例如在3與5之間,在4與5之間,在pH 4與4.5之間)以誘導蛋白質固體沈澱。當將酸添加至漿料中時,在水黃皮粉中存在之蛋白質立即自溶液中沈澱出來。自含水漿料分離沈澱之蛋白質。此項技術中已知之任何適合技術可用於實現該分離。舉例而言,該分離可使用傾析器或離心機實現。
所沈澱之蛋白質用水洗滌且用鹼性中和。接著使經中和之蛋白質殺菌且乾燥。上述例示性製程中蛋白質的洗滌、中和、濃縮及巴氏殺菌為可選的。
在一個態樣中,本文提供一種製造富含蛋白質之水黃皮組合物之方法,其包含: 製備水黃皮粉之含水漿料; 將該含水漿料之pH調整至4與5之間的pH以獲得水黃皮蛋白質固體; 洗滌、中和經純化之蛋白質固體且對其進行巴氏殺菌;及 乾燥該等經純化之水黃皮蛋白質固體以提供富含蛋白質之水黃皮組合物。
在另一態樣中,本文提供一種製造富含蛋白質之水黃皮組合物之方法,其包含: 製備水黃皮粉之含水漿料; 將該含水漿料之pH值調整至酸性pH以獲得水黃皮蛋白質固體; 洗滌、中和經純化之蛋白質固體且對其進行巴氏殺菌;及 乾燥該等經純化之水黃皮蛋白質固體以提供富含蛋白質之水黃皮組合物。
如上文所描述,藉由將漿料pH值調整至酸性pH值,諸如介於3與5.5之間,自含有水黃皮粉之含水漿料沈澱水黃皮蛋白質。在一些實施例中,將蛋白質液體之pH調整至3與5.5之間、3與5之間、3與4.5之間、3與4之間、3與3.5之間、3.5與5.5之間、3.5與5之間、3.5與4.5之間、3.5與4之間、4與5.5之間、4與5之間、4與4.5之間、4.5與5.5之間或4.5與5之間的pH。在某些變化形式中,將pH調整至4與4.5之間的pH。
隨後將水黃皮蛋白質固體與含水漿料分離。分離可經由此項技術中已知之包括例如傾析及離心的固液分離技術實現。
在某些變化形式中,該方法進一步包含洗滌固體純化之水黃皮蛋白質。
在一些實施例中,水黃皮蛋白質固體經中和至約pH 7。經純化之水黃皮蛋白質固體可經由添加適合的食品級鹼(諸如氫氧化鈉)中和。在某些實施例中,中和水黃皮蛋白質固體包含添加氫氧化鈉至經純化之水黃皮蛋白質固體中。
在其他實施例中,經純化的水黃皮蛋白質固體在中和之後濃縮。應認識到,中和經純化之水黃皮蛋白質固體可使得其部分或完全溶解。濃縮經純化之水黃皮蛋白質固體可涉及藉由乾燥或傾析引入的經純化之水黃皮蛋白質固體,來減少由沈澱留下或在中和期間在水黃皮蛋白質固體中引入之液體的體積,以更易於處理或下游處理。
在又其他實施例中,水黃皮蛋白質固體經巴氏殺菌。
在另外其他實施例中,水黃皮蛋白質固體經乾燥以提供最終富含蛋白質之水黃皮組合物。水黃皮蛋白質固體可藉由此項技術中已知之方法乾燥,包括例如噴霧乾燥及/或凍乾(例如凍乾)。
在一些變化形式中,藉由前述方法獲得之富含蛋白質之水黃皮組合物為水黃皮蛋白質濃縮物。在某些變化形式中,富含蛋白質之水黃皮組合物具有以乾重計至少40%或至少50%;或40%與50%之間或40%與70%之間的水黃皮蛋白質。在其他變化形式中,富含蛋白質之水黃皮組合物具有以乾重計至少40%之水黃皮蛋白質;及以乾重計小於或等於50%之碳水化合物。等電沈澱
在一個態樣中,提供一種藉由等電沈澱由水黃皮粉製造富含蛋白質之水黃皮組合物的方法。參考圖2B 中之例示性製程300 ,在步驟302 中,使用脫脂去苦水黃皮粉製備含水漿料,且將pH值調整至8與10之間的pH值。在步驟304 中,藉由將鹼性蛋白質液體部分與不可溶濕餅部分分離來實現水黃皮蛋白質之萃取。此項技術中已知之任何適合技術可用於實現該分離。舉例而言,該分離可使用傾析器或離心機實現。
在步驟302 之其他變化形式中,使用脫脂去苦水黃皮粉製備含水漿料,且用適合之酸或鹼將pH調整至6與10之間的pH,且將蛋白質液體部分與不可溶濕餅部分分離。
在步驟302 之一些變化形式中,可將含水漿料調整至6與10之間的pH,且自含水漿料分離蛋白質液體部分。獲得蛋白質液體,且在步驟306 中,利用等電沈澱來沈澱大量鹼溶性水黃皮蛋白質。在一些變化形式中,在處於或低於水黃皮蛋白質之等電點之pH下進行等電沈澱(例如在4.0與4.5之間的pH下進行)。在步驟306 中,藉由添加諸如磷酸或鹽酸之酸將鹼性蛋白質液體部分之pH調整至4.0與4.5之間的pH。收集經沈澱之水黃皮蛋白質固體。在步驟308 中,洗滌經沈澱之蛋白質。在步驟310 中,藉由例如用鹼(諸如氫氧化鈉)調整至約pH 7.0來中和經洗滌之蛋白質。在步驟312 中,濃縮經中和之蛋白質。在步驟314316 中,經濃縮之蛋白質液體分別經歷巴氏殺菌及乾燥(例如藉由噴霧乾燥或凍乾/凍乾),以獲得富含蛋白質之水黃皮組合物。上述例示性製程中蛋白質的洗滌、中和、濃縮及巴氏殺菌為可選的。
在一個態樣中,本文提供一種製造富含蛋白質之水黃皮組合物之方法,其包含: 製備水黃皮粉之含水漿料; 將該含水漿料之pH調整至8與10之間的pH, 將該漿料分離成蛋白質液體部分及不可溶濕餅部分; 自該蛋白質液體部分沈澱至少一部分水黃皮蛋白質以獲得經純化之水黃皮蛋白質固體; 洗滌、中和經純化之蛋白質固體且對其進行巴氏殺菌;及 乾燥該等經純化之水黃皮蛋白質固體以提供富含蛋白質之水黃皮組合物。
在另一態樣中,本文提供一種製造富含蛋白質之水黃皮組合物之方法,其包含: 製備水黃皮粉之含水漿料; 將該含水漿料之pH調整至6與10之間的pH, 將該漿料分離成蛋白質液體部分及不可溶濕餅部分; 自該蛋白質液體部分沈澱至少一部分水黃皮蛋白質以獲得經純化之水黃皮蛋白質固體; 洗滌、中和經純化之蛋白質固體且對其進行巴氏殺菌;及 乾燥該等經純化之水黃皮蛋白質固體以提供富含蛋白質之水黃皮組合物。
如上文所描述,藉由將漿料之pH調整至諸如8與10之間的鹼性pH,自含有水黃皮粉之含水漿料溶解水黃皮蛋白質。在其他變化形式中,藉由將漿料pH調整至6與10之間的pH,自含有水黃皮粉之含水漿料溶解水黃皮蛋白質。
隨後在步驟304 中將漿料分離成鹼性蛋白質液體部分及不可溶濕餅部分。分離可經由此項技術中已知之包括例如傾析及離心的固液分離技術實現。
在一些變化形式中,用於調整pH及分離出蛋白質液體部分之步驟302304 亦可在所獲得之濕餅部分上進行一或多次以提高蛋白質產率。換言之,可對水黃皮粉進行若干連續重複溶解,如在殘餘不可溶濕餅部分上進行。舉例而言,濕餅可在第二含水漿料中製備且經調整至鹼性pH,其後第二鹼性蛋白質液體部分與不可溶餅部分分離且合併兩個液體部分。對於重複萃取,可在含水漿料中製備水黃皮粉且將pH調整至酸性pH (例如pH 2)或鹼性pH (例如pH 8),將所得pH經調整之漿料分離成其蛋白質液體部分及不可溶濕餅部分,且在後續含水漿料中製備濕餅部分,其隨後調整至鹼性pH且分離成額外蛋白質液體部分。在一些變化形式中,由連續溶解獲得之蛋白質液體部分可在後續處理之前合併成單一蛋白質液體部分。在一些變化形式中,溶解藉由逆流萃取進行。在其他變化形式中,可將水黃皮粉中分解碳水化合物之酶(諸如碳水合酶(carbohydratases),包括纖維素酶或澱粉酶)添加至含水漿料中以促進蛋白質溶解。在其中用於消化碳水化合物之酶被添加至含水漿料之一些變化形式中,可將含水漿料加熱至適合於實現酶活性之溫度,例如37℃。
步驟306 中之等電沈澱可在處於或接近水黃皮蛋白質之等電點之pH下進行,以自蛋白質液體部分提供水黃皮蛋白質固體。舉例而言,如圖3 中所示,在pH 3與pH 5.5之間,水黃皮蛋白質之溶解度實質上較低。向由步驟304 獲得的蛋白質液體中添加酸以產生3與5.5之間的酸性pH將自來自溶液沈澱出水黃皮蛋白質固體。在一些實施例中,將蛋白質液體之pH調整至3與5.5之間、3與5之間、3與4.5之間、3與4之間、3與3.5之間、3.5與5.5之間、3.5與5之間、3.5與4.5之間、3.5與4之間、4與5.5之間、4與5之間、4與4.5之間、4.5與5.5之間或4.5與5之間的pH。
在某些變化形式中,該方法進一步包含洗滌固體純化之水黃皮蛋白質。
在一些實施例中,水黃皮蛋白質固體經中和至約pH 7。經純化之水黃皮蛋白質固體可經由添加適合的食品級鹼(諸如氫氧化鈉)中和。在某些實施例中,中和水黃皮蛋白質固體包含添加氫氧化鈉至經純化之水黃皮蛋白質固體中。
在其他實施例中,經純化的水黃皮蛋白質固體在中和之後濃縮。應認識到中和經純化之水黃皮蛋白質固體可使得其部分或完全再溶解。濃縮經純化之水黃皮蛋白質固體可涉及藉由乾燥或傾析引入的經純化之水黃皮蛋白質固體,來減少由沈澱留下或在中和期間在水黃皮蛋白質固體中引入之液體的體積,以更易於處理或下游處理。
在又其他實施例中,水黃皮蛋白質固體經巴氏殺菌。
在另外其他實施例中,水黃皮蛋白質固體經乾燥以提供最終富含蛋白質之水黃皮組合物。水黃皮蛋白質固體可藉由此項技術中已知之方法乾燥,包括例如噴霧乾燥及/或凍乾(例如凍乾)。
在一些變化形式中,藉由前述方法獲得之富含蛋白質之水黃皮組合物為水黃皮蛋白質分離物。在某些變化形式中,富含蛋白質之水黃皮組合物具有以乾重計至少70%或70%與90%之間的水黃皮蛋白質。在其他變化形式中,富含蛋白質之水黃皮組合物具有以乾重計至少70%之水黃皮蛋白質;及以乾重計小於或等於20%之碳水化合物。膜過濾
在又一態樣中,提供一種藉由膜過濾由水黃皮粉製造富含蛋白質之水黃皮組合物之方法。參考圖2C 中之例示性製程400 ,在步驟402 中,使用脫脂去苦水黃皮粉製備含水漿料,且將pH調整至6與10之間的pH (例如pH 8及10)。在步驟404 中,藉由將鹼性蛋白質液體部分與不可溶濕餅部分分離來實現水黃皮蛋白質之萃取。此項技術中已知之任何適合技術可用於實現該分離。舉例而言,該分離可使用傾析器或離心機實現。獲得蛋白質液體,且在步驟406 中,蛋白質液體經歷膜過濾以獲得經純化的水黃皮蛋白質之滲餘物。再次參考圖2C ,在步驟408 410 412414 中,分別洗滌、中和、巴氏殺菌及乾燥滲餘物以製造富含蛋白質之水黃皮組合物。
在一個態樣中,本文提供一種製造富含蛋白質之水黃皮組合物之方法,其包含: 製備水黃皮粉之含水漿料; 將該含水漿料之pH調整至6與10之間的pH, 分離含水漿料之蛋白質液體部分, 使經分離之蛋白質液體部分通過膜系統以獲得包含水黃皮蛋白質之滲餘物; 視情況洗滌、中和該滲餘物及/或對其進行巴氏殺菌;及 乾燥滲餘物以提供富含蛋白質之水黃皮組合物。
在又一態樣中,本文提供一種製造富含蛋白質之水黃皮組合物之方法,其包含: 製備水黃皮粉之含水漿料; 將該含水漿料之pH調整至8與10之間的pH, 分離含水漿料之蛋白質液體部分, 使經分離之蛋白質液體部分通過膜系統以獲得包含水黃皮蛋白質之滲餘物; 視情況洗滌、中和該滲餘物及/或對其進行巴氏殺菌;及 乾燥滲餘物以提供富含蛋白質之水黃皮組合物。
如上文所描述,水黃皮蛋白質自含有水黃皮粉之含水漿料溶解。在一個態樣中,在6與10之間的pH下,由含有水黃皮粉之含水漿料溶解水黃皮蛋白質。在其他態樣中,藉由將漿料之pH調整至諸如8與10之間的鹼性pH,自含有水黃皮粉之含水漿料溶解水黃皮蛋白質。
隨後在步驟404 中將漿料分離成鹼性蛋白質液體部分及不可溶濕餅部分。分離可經由此項技術中已知之包括例如傾析及離心的固液分離技術實現。
在一些變化形式中,用於調整pH及分離出蛋白質液體部分之步驟402404 亦可在所獲得之濕餅部分上進行一或多次以提高蛋白質產率。換言之,可對水黃皮粉進行若干連續重複溶解,如在殘餘不可溶濕餅部分上進行。舉例而言,濕餅可在第二含水漿料中製備且經調整至鹼性pH,其後第二鹼性蛋白質液體部分與不可溶餅部分分離且合併兩個液體部分。對於重複萃取,可在含水漿料中製備水黃皮粉且將pH保持現狀或調整至酸性pH (例如pH 2)或鹼性pH (例如pH 8),將所得pH保持現狀的或經調整的漿料分離成其蛋白質液體部分及不可溶濕餅部分,且在後續含水漿料中製備濕餅部分,其隨後調整至鹼性pH且分離成額外蛋白質液體部分。由連續溶解獲得之任何蛋白質液體部分在後續處理之前合併為單一蛋白質液體部分。在其他變化形式中,可將用於分解水黃皮粉中之碳水化合物之酶添加至含水漿料中以促進蛋白質溶解。
參考圖2C ,在步驟406 中,使蛋白質液體部分通過用於過濾之膜系統。膜過濾可使用具有不同截斷尺寸(cut-off size)、可變跨膜壓力及濃縮因子及透濾因子之可變膜進行。在一些變化形式中,蛋白質液體通過5 kDa分子量截斷(molecular weight cut-off,MWCO)膜過濾器或10 kDa MWCO膜過濾器。在某些變化形式中,蛋白質液體通過5 kDa MWCO膜過濾器。在某些其他變化形式中,蛋白質液體通過10 kDa MWCO膜過濾器。在其他變化形式中,蛋白質液體以0-5、0-4、0-2、2-5、2-4或4-5之濃度因子(concentration factor,CF)及0-10、0-5、0-4、0-2、2-10、2-5、2-4、4-10或4-5之透濾因子(diafiltration factor,DF)通過5 kDa MWCO膜過濾器或10 kDa MWCO膜過濾器。
自膜過濾所得之富含蛋白質之滲餘物可進一步視情況經洗滌、中和及/或巴氏殺菌。在某些變化形式中,該方法進一步包含洗滌滲餘物。
在一些實施例中,將滲餘物中和至約pH 7之pH。滲餘物可經由添加適合之食品級酸或鹼(諸如磷酸或鹽酸及氫氧化鈉)中和。在某些實施例中,中和滲餘物包含將磷酸或鹽酸及/或氫氧化鈉添加至滲餘物中。
在其他實施例中,對滲餘物進行巴氏殺菌。
在其他實施例中,滲餘物經乾燥以提供最終富含蛋白質之水黃皮組合物。水黃皮蛋白質固體可藉由此項技術中已知之方法乾燥,包括例如噴霧乾燥及/或凍乾(例如凍乾)。
在一些變化形式中,藉由前述方法獲得之富含蛋白質之水黃皮組合物為水黃皮蛋白質分離物。在某些變化形式中,富含蛋白質之水黃皮組合物具有以乾重計至少70%或70%與95%之間的水黃皮蛋白質。在其他變化形式中,富含蛋白質之水黃皮組合物具有以乾重計至少70%之水黃皮蛋白質;及以乾重計小於或等於20%之碳水化合物。食品、飲料及其他產品
在某些態樣中,亦提供併入本文中富含蛋白質之水黃皮組合物或使用其製造之食品及飲品。該等富含蛋白質之水黃皮組合物可用於各種食品及飲品中之蛋白質強化,該等食品及飲品包括例如基於果汁之高酸飲料、無過敏原非乳低酸飲料、基於植物之優格、基於植物之冰淇淋、烘烤產品、烘烤點心、奶油稀湯(cream soup)、肉類似物及乳酪類似物。
在一些實施例中,適合的食品可包括例如湯、調味醬、沙拉醬、鷹嘴豆泥、麵包、甜餅乾、脆餅乾、營養棒、代餐產品及點心。在一些變化形式中,併入本文中之富含蛋白質之水黃皮組合物中或由其產生的食品為烘烤產品。
在一些實施例中,飲料可包括例如高酸飲料、中性飲料、碳酸飲料、非碳酸飲料、高蛋白質飲料及代餐飲料。
在一個態樣中,本文提供食品、飲品、膳食補充劑產品或其他產品,其包含如本文所提供之富含蛋白質之水黃皮成分,其中富含蛋白質之水黃皮成分具有 (i)    100 s- 1 之剪切速率下在約2 mPa*s與約100 mPa*s之間的黏度; (ii)   0.1% w/v蛋白質溶液之體積的約100%與約200%之間的發泡量; (iii)  至少約0.2 g/cm3 之容積密度; (iv)   在pH 7下至少約35%之蛋白質溶解度; (v)    小於或等於約5 µm之中值乳液液滴尺寸; (vi)   貯藏7天之後小於或等於約5 µm之中值乳液液滴尺寸; (vi)   每公克富含蛋白質之水黃皮成分至少約1.5 g水之保水量; (vii)  每公克富含蛋白質之水黃皮成分至少約1.5 g油之保油量; (viii) 每100公克至少約10 g富含蛋白質之水黃皮成分的最低膠凝濃度; (ix)   至少約10%之粉末分散度;或 (x)    中性、無苦味; 或其(i)-(x)之任何組合。
如本文中所描述,富含蛋白質之水黃皮組合物之特性可用作各種食品應用中之成分。如本文所提供之富含蛋白質之水黃皮組合物或成分擁有除其較高蛋白質含量以外的多種有利特性,使得其適用於各種食品及飲品。就某些應用而言,相比於市場中之其他基於植物之蛋白質成分(諸如豌豆及大豆),本文所提供之富含蛋白質之水黃皮成分展現優異特性,且因此相比於競爭蛋白質來源可有利地併入特定食品中。例示性產品可包括但不限於飲品,諸如即飲飲料或蛋白質奶昔粉;包括基於植物之優格、乳酪或牛奶的乳製品替代品;諸如基於植物之漢堡的肉類替代產品;及蛋代用品。
在又其他實施例中,本文提供飲品,其包含富含蛋白質之水黃皮成分,其中富含蛋白質之水黃皮成分具有: (i)    100 s- 1 之剪切速率下在約2 mPa*s與約100 mPa*s之間的黏度; (ii)   0.1% w/v水黃皮蛋白質溶液之體積的約100%與約200%之間的發泡量; (iii)  至少約0.2 g/cm3 之容積密度; (iv)   在pH 7下至少約35%之蛋白質溶解度; (v)    小於或等於約5 µm之中值乳液液滴尺寸; (vi)   貯藏7天之後小於或等於約5 µm之中值乳液液滴尺寸; (vii)  中性、無苦味; 或其(i)-(vii)之任何組合。
在再又其他實施例中,本文提供乳製品替代品,其包含富含蛋白質之水黃皮成分,其中富含蛋白質之水黃皮成分具有: (i)    100 s- 1 之剪切速率下在約2 mPa*s與約100 mPa*s之間的黏度; (ii)   0.1% w/v蛋白質溶液之體積的約100%與約200%之間的發泡量; (iii)  至少約0.2 g/cm3 之容積密度; (iv)   在pH 7下至少約35%之蛋白質溶解度; (v)    小於或等於約5 µm之中值乳液液滴尺寸; (vi)   貯藏7天之後小於或等於約5 µm之中值乳液液滴尺寸; (vii)  每公克富含蛋白質之水黃皮成分至少約1.5 g水之保水量; (viii) 每100公克至少約10 g富含蛋白質之水黃皮成分的最低膠凝濃度;或 (ix)   中性、無苦味 或其(i)-(x)之任何組合。
在一些實施例中,本文提供一種肉類替代產品,其包含富含蛋白質之水黃皮成分,其中富含蛋白質之水黃皮成分具有: (i)    至少約0.2 g/cm3 之容積密度; (ii)   在pH 7下至少約35%之蛋白質溶解度; (iii)  每公克富含蛋白質之水黃皮成分至少約1.5 g水之保水量; (iv)   每公克富含蛋白質之水黃皮成分至少約1.5 g油之保油量; (v)    每100公克至少約10 g富含蛋白質之水黃皮成分的最低膠凝濃度;或 (vi)   中性、無苦味; 或其(i)-(vi)之任何組合。
在其他態樣中,本文提供一種包含富含蛋白質之水黃皮成分的蛋代用品,其中富含蛋白質之水黃皮成分具有: (i)    0.1% w/v蛋白質溶液之體積的約100%與約200%之間的發泡量; (ii)   每100公克至少7 g富含蛋白質之水黃皮成分的最低膠凝濃度;或 (iii)  中性、無苦味; 或其(i)-(iii)之任何組合。
在前述內容之一些變化形式中,食品或飲品具有每份至少1、至少2、至少3、至少4、至少5、至少6、至少7、至少8、至少9、至少10公克、至少12 g、至少15 g或至少17 g水黃皮蛋白質。在一些變化形式中,食品或飲品每份具有1 g與20 g之間的水黃皮蛋白質。在某些變化形式中,食品或飲品中至少10重量%、至少20重量%、至少25重量%、至少30重量%、至少40重量%、至少50重量%、至少60重量%、至少70重量%、至少75重量%、至少80重量%、至少90重量%或至少95重量%之蛋白質係來自水黃皮蛋白質。在前述內容之一些變化形式中,水黃皮蛋白質具有至少0.7之PDCAAS。在前述內容之其他變化形式中,水黃皮蛋白質具有至少0.85之PDCAAS。
食品及飲品可包括除本文所述之富含蛋白質之水黃皮組合物以外的各種其他組分。舉例而言,食品及飲品可包括例如水、麵粉、脂肪及油、甜味劑(諸如糖)、鹽、膨鬆劑、水果及蔬菜汁、增稠劑(諸如果膠及其他水狀膠體)、消泡劑、天然及人造調味劑、防腐劑及著色劑。
在另一態樣中,提供一種製備食品及/或飲品之方法。該等方法可包括混合/摻合、巴氏殺菌及/或滅菌、烘烤、醱酵、碳酸化、膨鬆及封裝中之一或多者。
在其他態樣中,本文中富含蛋白質之水黃皮組合物可用作或併入至藥品中。在前述態樣之某些變化形式中,富含蛋白質之水黃皮組合物具有醫藥級純度。在其他變化形式中,富含蛋白質之水黃皮組合物之蛋白質純度大於或等於99%。
在其他態樣中,本文中富含蛋白質之水黃皮組合物可用作膳食補充劑產品或併入膳食補充劑產品中。在前述態樣之某些變化形式中,富含蛋白質之水黃皮組合物具有膳食補充劑級純度。在其他變化形式中,富含蛋白質之水黃皮組合物之蛋白質純度大於或等於99%。
在其他態樣中,本文中富含蛋白質之水黃皮組合物可用作化妝品或併入至化妝品中。在前述態樣之某些變化形式中,富含蛋白質之水黃皮組合物具有化妝品級純度。在其他變化形式中,富含蛋白質之水黃皮組合物之蛋白質純度大於或等於99%。
在其他態樣中,本文中富含蛋白質之水黃皮組合物可用作醫療食品或併入至醫療食品中。在前述態樣之某些變化形式中,富含蛋白質之水黃皮組合物具有醫療食品級純度。在其他變化形式中,富含蛋白質之水黃皮組合物之蛋白質純度大於或等於99%。
在其他態樣中,本文中富含蛋白質之水黃皮組合物可用作或併入至嬰兒配方產品中。在前述態樣之某些變化形式中,富含蛋白質之水黃皮組合物具有嬰兒配方級純度。在其他變化形式中,富含蛋白質之水黃皮組合物之蛋白質純度大於或等於99%。 所列舉的實施例
以下所列舉之實施例代表本發明之一些態樣。 1. 一種富含蛋白質之水黃皮組合物,其包含以乾重計至少45%之水黃皮蛋白質。 2. 如實施例1之組合物,其中該組合物具有以乾重計45%與70%之間的水黃皮蛋白質。 3. 如實施例1之組合物,其中該組合物為水黃皮蛋白質濃縮物。 4. 如實施例1至3中任一項之組合物,其中該組合物係來源於水黃皮粉,其中富含蛋白質之水黃皮組合物具有比水黃皮粉大至少1.25倍的水黃皮蛋白質含量。 5. 如實施例1至4中任一項之組合物,其中該組合物具有以乾重計小於5%之脂肪。 6. 如實施例1至5中任一項之組合物,其中該組合物具有以乾重計小於2%之脂肪。 7. 如實施例1至6中任一項之組合物,其中該組合物具有小於200 ppm之天然來源於水黃皮的苦味化合物。 8. 如實施例1至6中任一項之組合物,其中該組合物具有:(i)小於200 ppm水黃皮次素;或(ii)小於200 ppm水黃皮籽素;或(iii)組合小於200 ppm合併之水黃皮次素及水黃皮籽素。 9. 如實施例1至8中任一項之組合物,其中該組合物具有包括至少15%麩胺酸、至少12%天冬胺酸、至少9%白胺酸、至少8%離胺酸、至少6%苯丙胺酸或其任何組合之相對胺基酸概況。 10. 如實施例1至9中任一項之組合物,其中存在於該組合物中之至少50%蛋白質在至少pH 6之pH下可溶於水中。 11. 如實施例1至10中任一項之組合物,其中,該組合物在100 s- 1 之剪切速率下具有至少2 mPa*s之黏度。 12. 如實施例1至11中任一項之組合物,其中該組合物在乳化時產生平均液滴尺寸為至少1 µm之乳液。 13. 如實施例1至12中任一項之組合物,其中該組合物具有至少0.7之蛋白質消化率校正胺基酸評分。 14. 如實施例1至13中任一項之組合物,其中該組合物具有10,000道爾頓與250,000道爾頓之間的蛋白質平均分子量分佈。 15. 一種製造富含蛋白質之水黃皮組合物之方法,其包含: 製備水黃皮粉之含水漿料; 將該含水漿料之pH調整至8與10之間的pH; 將該漿料分離成蛋白質液體部分及不可溶濕餅部分; 中和、濃縮該蛋白質液體部分及/或對其進行巴氏殺菌;及 乾燥該蛋白質液體部分以提供富含蛋白質之水黃皮組合物。 16. 如實施例15之方法,其中該富含蛋白質之水黃皮組合物包含以乾重計至少50%之水黃皮蛋白質。 17. 如實施例15之方法,其中該富含蛋白質之水黃皮組合物為水黃皮蛋白質濃縮物。 18. 如實施例15至17中任一項之方法,其進一步包含脫殼及研磨水黃皮豆以製造水黃皮粉。 19. 如實施例15至17中任一項之方法,其進一步包含: 使水黃皮豆脫殼以產生經脫殼水黃皮豆;及 壓製該等經脫殼水黃皮豆,移除該等水黃皮豆中之至少一部分游離油,以製造該水黃皮粉,其中該水黃皮粉具有減少之脂肪含量。 20. 如實施例19之方法,其進一步包含研磨該水黃皮粉。 21.  如實施例15至17中任一項之方法,其進一步包含: 使水黃皮豆脫殼以產生經脫殼水黃皮豆; 壓製該等經脫殼水黃皮豆,移除該等水黃皮豆中之至少一部分游離油,以製造減脂水黃皮粉;及 將該減脂水黃皮粉與溶劑合併以製造該水黃皮粉,其中使該水黃皮粉脫脂及去苦。 22. 如實施例21之方法,其進一步包含在與溶劑組合之前研磨該減脂水黃皮粉。 23. 一種富含蛋白質之水黃皮組合物,其係根據實施例15至22中任一項之方法製造。 24. 一種食品、飲品、膳食補充劑產品或其他產品,其包含:如實施例1至14及23中任一項之富含蛋白質之水黃皮組合物。 25. 如實施例24之產品,其中該產品為烘烤食品、蛋白質補充品、蛋白棒或非乳飲料。 26. 如實施例24之產品,其中該產品為醫療食品、嬰兒配方食品、化妝品或藥品。 27. 一種富含蛋白質之水黃皮組合物,其包含以乾重計至少70%之水黃皮蛋白質。 28. 如實施例27之組合物,其中該組合物具有以乾重計70%與90%之間的水黃皮蛋白質。 29. 如實施例27之組合物,其中該組合物為水黃皮蛋白質分離物。 30. 如實施例27至29中任一項之組合物,其中該組合物來源於水黃皮粉,其中富含蛋白質之水黃皮組合物具有比水黃皮粉大至少1.25倍的水黃皮蛋白質含量。 31. 如實施例27至30中任一項之組合物,其中該組合物具有以乾重計小於5%之脂肪。 32. 如實施例27至31中任一項之組合物,其中該組合物具有以乾重計小於2%之脂肪。 33. 如實施例27至32中任一項之組合物,其中該組合物具有小於200 ppm之天然來源於水黃皮的苦味化合物。 34. 如實施例27至33中任一項之組合物,其中該組合物具有:(i)小於200 ppm水黃皮次素;或(ii)小於200 ppm水黃皮籽素;或(iii)組合小於200 ppm合併之水黃皮次素及水黃皮籽素。 35. 如實施例27至34中任一項之組合物,其中該組合物具有包括至少15%麩胺酸、至少12%天冬胺酸、至少9%白胺酸、至少8%離胺酸、至少6%苯丙胺酸或其任何組合之相對胺基酸概況。 36. 如實施例27至35中任一項之組合物,其中存在於該組合物中之至少50%蛋白質在至少pH 6之pH下可溶於水中。 37. 如實施例27至36中任一項之組合物,其中該組合物在100 s- 1 之剪切速率下具有至少2 mPa*s之黏度。 38. 如實施例27至37中任一項之組合物,其中該組合物在乳化時產生平均液滴尺寸為至少1 µm之乳液。 39. 如實施例27至38中任一項之組合物,其中該組合物具有至少0.7之蛋白質消化率校正胺基酸評分。 40. 如實施例27至39中任一項之組合物,其中該組合物具有10,000道爾頓與250,000道爾頓之間的蛋白質平均分子量分佈。 41. 一種製造富含蛋白質之水黃皮組合物之方法,其包含: 製備水黃皮粉之含水漿料; 將該含水漿料之pH調整至8與10之間的pH, 將該漿料分離成蛋白質液體部分及不可溶濕餅部分; 自該蛋白質液體部分沈澱至少一部分水黃皮蛋白質以獲得經純化之水黃皮蛋白質固體; 中和該等經純化之水黃皮蛋白質固體且對其進行巴氏殺菌;及 乾燥該等經純化之水黃皮蛋白質固體以提供富含蛋白質之水黃皮組合物。 42. 如實施例41之方法,其進一步包含在乾燥之前洗滌該等水黃皮蛋白質固體。 43. 如實施例41或42之方法,其中該沈澱步驟係藉由等電沈澱進行。 44. 如實施例41至43中任一項之方法,其中富含蛋白質之水黃皮組合物包含以乾重計至少70%之水黃皮蛋白質。 45. 如實施例41至43中任一項之方法,其中該富含蛋白質之水黃皮組合物為水黃皮蛋白質分離物。 46. 如實施例41至45中任一項之方法,其進一步包含脫殼及研磨水黃皮豆以製造水黃皮粉。 47. 如實施例41至45中任一項之方法,其進一步包含: 使水黃皮豆脫殼以產生經脫殼水黃皮豆;及 壓製該等經脫殼水黃皮豆,移除該等水黃皮豆中之至少一部分游離油,以製造該水黃皮粉,其中該水黃皮粉具有減少之脂肪含量。 48. 如實施例47之方法,其進一步包含研磨該水黃皮粉。 49.  如實施例41至45中任一項之方法,其進一步包含: 使水黃皮豆脫殼以產生經脫殼水黃皮豆; 壓製該等經脫殼水黃皮豆,移除該等水黃皮豆中之至少一部分游離油,以製造減脂水黃皮粉;及 將該減脂水黃皮粉與溶劑合併以製造該水黃皮粉,其中使該水黃皮粉脫脂及去苦。 50. 如實施例49之方法,其進一步包含在與溶劑組合之前研磨該減脂水黃皮粉。 51. 一種富含蛋白質之水黃皮組合物,其係根據實施例41至50中任一項之方法製造。 52. 一種食品、飲品、膳食補充劑產品或其他產品,其包含:如實施例27至40及51中任一項之富含蛋白質之水黃皮組合物。 53. 如實施例52之產品,其中該產品為烘烤食品、蛋白質補充品、蛋白棒或非乳飲料。 54. 如實施例52之產品,其中該產品為醫療食品、嬰兒配方食品或藥品。 55. 一種富含蛋白質之水黃皮組合物,其包含以乾重計至少70%之水黃皮蛋白質。 56. 如實施例55之組合物,其中該組合物具有以乾重計70%與90%之間的水黃皮蛋白質。 57. 如實施例55之組合物,其中該組合物為水黃皮蛋白質分離物。 58. 如實施例55至57中任一項之組合物,其中該組合物來源於水黃皮粉,其中富含蛋白質之水黃皮組合物具有比水黃皮粉大至少1.25倍的水黃皮蛋白質含量。 59. 如實施例55至58中之任一者的組合物,其中該組合物具有以乾重計小於5%之脂肪。 60. 如實施例55至59中之任一者的組合物,其中該組合物具有以乾重計小於2%之脂肪。 61. 如實施例55至60中之任一者的組合物,其中該組合物具有小於200 ppm之天然來源於水黃皮的苦味化合物。 62. 如實施例55至61中任一項之組合物,其中該組合物具有:(i)小於200 ppm水黃皮次素;或(ii)小於200 ppm水黃皮籽素;或(iii)組合小於200 ppm合併之水黃皮次素及水黃皮籽素。 63. 如實施例55至62中任一項之組合物,其中該組合物具有包括至少15%麩胺酸、至少12%天冬胺酸、至少9%白胺酸、至少8%離胺酸、至少6%苯丙胺酸或其任何組合之相對胺基酸概況。 64. 如實施例55至63中任一項之組合物,其中存在於該組合物中之至少50%蛋白質在至少pH 6之pH下可溶於水中。 65. 如實施例55至64中任一項之組合物,其中該組合物在100 s- 1 之剪切速率下具有至少2 mPa*s之黏度。 66. 如實施例55至65中任一項之組合物,其中該組合物在乳化時產生平均液滴尺寸為至少1 µm之乳液。 67. 如實施例55至66中任一項之組合物,其中該組合物具有至少0.7之蛋白質消化率校正胺基酸評分。 68. 如實施例55至67中任一項之組合物,其中該組合物具有10,000道爾頓與250,000道爾頓之間的蛋白質平均分子量分佈。 69. 一種製造富含蛋白質之水黃皮組合物之方法,其包含: 製備水黃皮粉之含水漿料; 將該含水漿料之pH調整至8與10之間的pH, 將該漿料分離成蛋白質液體部分及不可溶濕餅部分; 使該蛋白質液體部分通過膜系統以獲得包含水黃皮蛋白質之滲餘物; 視情況洗滌、中和該滲餘物及/或對其進行巴氏殺菌;及 乾燥滲餘物以提供富含蛋白質之水黃皮組合物。 70. 如實施例69之方法,其中該富含蛋白質之水黃皮組合物包含以乾重計至少70%之水黃皮蛋白質。 71. 如實施例69之方法,其中該富含蛋白質之水黃皮組合物為水黃皮蛋白質分離物。 72. 如實施例69至71中任一項之方法,其進一步包含脫殼及研磨水黃皮豆以製造水黃皮粉。 73. 如實施例69至71中任一項之方法,其進一步包含: 使水黃皮豆脫殼以產生經脫殼水黃皮豆;及 壓製該等經脫殼水黃皮豆,移除該等水黃皮豆中之至少一部分游離油,以製造該水黃皮粉,其中該水黃皮粉具有減少之脂肪含量。 74. 如實施例73之方法,其進一步包含研磨該水黃皮粉。 75.  如實施例69至71中任一項之方法,其進一步包含: 使水黃皮豆脫殼以產生經脫殼水黃皮豆; 壓製該等經脫殼水黃皮豆,移除該等水黃皮豆中之至少一部分游離油,以製造減脂水黃皮粉;及 將該減脂水黃皮粉與溶劑合併以製造該水黃皮粉,其中使該水黃皮粉脫脂及去苦。 76. 如實施例75之方法,其進一步包含在與溶劑組合之前研磨該減脂水黃皮粉。 77. 一種富含蛋白質之水黃皮組合物,其係根據實施例69至76中任一項之方法製造。 78. 一種食品、飲品、膳食補充劑產品或其他產品,其包含:如實施例55至68及77中任一項之富含蛋白質之水黃皮組合物。 79. 如實施例78之產品,其中該產品為烘烤食品、蛋白質補充品、蛋白棒或非乳飲料。 80. 如實施例78之產品,其中該產品為醫療食品、嬰兒配方食品、化妝品或藥品。 81. 一種富含蛋白質之水黃皮成分,其包含以乾重計至少40%之水黃皮蛋白質, 其中該成分具有:(i)小於500 ppm水黃皮次素;或(ii)小於500 ppm水黃皮籽素;或(iii)小於500 ppm合併之水黃皮次素及水黃皮籽素;及 其中該成分具有以乾重計小於40%之碳水化合物。 82. 如實施例81之成分,其中該成分具有以乾重計40%與70%之間的水黃皮蛋白質。 83. 如實施例81之成分,其中該成分係水黃皮蛋白質濃縮物。 84. 如實施例81之成分,其包含以乾重計至少70%之水黃皮蛋白質, 其中該成分具有:(i)小於500 ppm水黃皮次素;或(ii)小於500 ppm水黃皮籽素;或(iii)小於500 ppm合併之水黃皮次素及水黃皮籽素;及 其中該成分具有以乾重計小於或等於約20%之碳水化合物。 85. 如實施例84之成分,其中該成分具有以乾重計70%與90%之間的水黃皮蛋白質。 86. 如實施例85之成分,其中該成分係水黃皮蛋白質分離物。 87. 一種富含蛋白質之水黃皮成分,其包含以乾重計至少40%之水黃皮蛋白質, 其中該成分具有:(i)小於500 ppm水黃皮次素;或(ii)小於500 ppm水黃皮籽素;或(iii)小於500 ppm合併之水黃皮次素及水黃皮籽素;及 其中該成分具有以乾重計小於50%之碳水化合物。 88. 如實施例81至87中任一項之成分,其中該成分來源於水黃皮粉,其中該富含蛋白質之水黃皮成分具有比該水黃皮粉大至少1.25倍的水黃皮蛋白質含量。 89. 如實施例81至88中任一項之成分,其中該成分具有以乾重計小於5%之脂肪。 90. 如實施例81至89中任一項之成分,其中該成分具有以乾重計小於2%之脂肪。 91. 如實施例81至90中任一項之成分,其中該成分具有包括至少15%麩胺酸、至少12%天冬胺酸、至少9%白胺酸、至少8%離胺酸、至少6%苯丙胺酸或其任何組合之相對胺基酸概況。 92. 如實施例81至91中任一項之成分,其中存在於該成分中之蛋白質的至少35%在至少pH 6之pH下可溶於水中。 93. 如實施例81至92中任一項之成分,其中該成分在100 s- 1 之剪切速率下具有至少2 mPa*s之黏度。 94. 如實施例81至93中任一項之成分,其中該成分在乳化時產生平均液滴尺寸為至少1 µm之乳液。 95. 如實施例81至94中任一項之成分,其中該成分具有至少0.7之蛋白質消化率校正胺基酸評分。 96. 如實施例81至95中任一項之成分,其中該成分之蛋白質平均分子量為10,000道爾頓與250,000道爾頓之間。 97. 如實施例81至96中任一項之成分,其中該成分包含種子貯藏蛋白,且其中所存在之30-40%之蛋白質為分子量在45 kDa與約70 kDa之間的蛋白質,如藉由SDS-PAGE所測定。 98. 如實施例97之成分,其中該成分進一步包含分子量為170-250 kDa、115-160 kDa、45-70 kDa、19-25 kDa、14-17 kDa或10-13 kDa之種子貯藏蛋白或其任何組合。 99. 如實施例81至98中任一項之成分,其中該成分具有: (i)在100 s- 1 之剪切速率下2 mPa*s與100 mPa*s之間的黏度; (ii) 0.1%蛋白質溶液之體積的100%與200%之間的發泡量; (iii)至少0.2 g/cm3 之容積密度; (iv)在pH 7下至少35%之蛋白質溶解度; (v)中值乳液液滴尺寸小於或等於5 µm; (vi)貯藏7天之後小於或等於5 µm之中值乳液液滴尺寸; (vi)每公克富含蛋白質之水黃皮成分至少1.5 g水之保水量; (vii)每公克富含蛋白質之水黃皮成分至少1.5 g油之保油量; (viii)每100公克至少10 g富含蛋白質之水黃皮成分的最低膠凝濃度; (ix)至少10%之粉末分散度;或 (x)中性、無苦味; 或其(i)-(x)之任何組合。 100. 如實施例99之成分,其中該成分具有: (i)在100 s- 1 之剪切速率下2 mPa*s與100 mPa*s之間的黏度; (ii) 0.1% w/v水黃皮蛋白質溶液之體積的100%與200%之間的發泡量; (iii)至少0.2 g/cm3 之容積密度; (iv)在pH 7下至少35%之蛋白質溶解度; (v)小於或等於5 µm之中值乳液液滴尺寸; (vi)貯藏7天之後小於或等於5 µm之中值乳液液滴尺寸; (vii)中性、無苦味; 或其(i)-(vii)之任何組合。 101. 如實施例99之成分,其中該成分具有: (i)在100 s- 1 之剪切速率下2 mPa*s與100 mPa*s之間的黏度; (ii) 0.1% w/v蛋白質溶液之體積的100%與200%之間的發泡量; (iii)至少0.2 g/cm3 之容積密度; (iv)在pH 7下至少35%之蛋白質溶解度; (v)小於或等於5 µm之中值乳液液滴尺寸; (vi)貯藏7天之後小於或等於5 µm之中值乳液液滴尺寸; (vii)每公克富含蛋白質之水黃皮成分至少1.5 g水之保水量; (viii)每100公克至少10 g富含蛋白質之水黃皮成分的最低膠凝濃度;或 (ix)中性、無苦味 或其(i)-(x)之任何組合。 102. 如實施例99之成分,其中該成分具有: (i)至少0.2 g/cm3 之容積密度; (ii)在pH 7下至少35%之蛋白質溶解度; (iii) 每公克富含蛋白質之水黃皮成分至少1.5 g水之保水量; (iv)每公克富含蛋白質之水黃皮成分至少1.5 g油之保油量; (v)每100公克至少10 g富含蛋白質之水黃皮成分的最低膠凝濃度;或 (vi)中性、無苦味; 或其(i)-(vi)之任何組合。 103. 如實施例99之成分,其中該成分具有: (i) 0.1% w/v蛋白質溶液之體積的100%與200%之間的發泡量; (ii)每100公克至少7 g富含蛋白質之水黃皮成分的最低膠凝濃度;或 (iii) 中性、無苦味; 或其(i)-(iii)之任何組合。 104. 一種製造富含蛋白質之水黃皮組合物之方法,其包含: 製備水黃皮粉之含水漿料,其中使該水黃皮粉脫脂及去苦且具有(i)小於500 ppm水黃皮次素;或(ii)小於500 ppm水黃皮籽素;或(iii)小於500 ppm合併之水黃皮次素及水黃皮籽素; 將該含水漿料之pH調整至6與10之間的pH; 將該漿料分離成蛋白質液體部分及不可溶濕餅部分; 中和、濃縮該蛋白質液體部分及/或對其進行巴氏殺菌;及 乾燥該蛋白質液體部分以提供富含蛋白質之水黃皮組合物。 105.如實施例104之方法,其中該富含蛋白質之水黃皮組合物包含以乾重計至少50%之水黃皮蛋白質。 106. 一種製造富含蛋白質之水黃皮成分之方法,其包含: 製備水黃皮粉之含水漿料,其中使該水黃皮粉脫脂及去苦且具有(i)小於500 ppm水黃皮次素;或(ii)小於500 ppm水黃皮籽素;或(iii)小於500 ppm合併之水黃皮次素及水黃皮籽素; 將該含水漿料之pH調整至6與10之間的pH, 將該漿料分離成蛋白質液體部分及不可溶濕餅部分; 自該蛋白質液體部分沈澱至少一部分水黃皮蛋白質以獲得經純化之水黃皮蛋白質固體; 中和該等經純化之水黃皮蛋白質固體且對其進行巴氏殺菌;及 乾燥該等經純化之水黃皮蛋白質固體以提供富含蛋白質之水黃皮成分。 107. 如實施例106之方法,其進一步包含在乾燥之前洗滌該等水黃皮蛋白質固體。 108. 如實施例106或107之方法,其中該沈澱步驟係藉由等電沈澱進行。 109. 如實施例106至108中任一項之方法,其中富含蛋白質之水黃皮成分包含以乾重計至少70%之水黃皮蛋白質。 110. 如實施例106至109中任一項之方法,其進一步包含: 使水黃皮豆脫殼以產生經脫殼水黃皮豆;及 壓製該等經脫殼水黃皮豆,移除該等水黃皮豆中之至少一部分游離油,以製造該水黃皮粉,其中該水黃皮粉具有減少之脂肪含量。 111. 如實施例110之方法,其進一步包含研磨該水黃皮粉。 112.  如實施例106至111中任一項之方法,其進一步包含: 使水黃皮豆脫殼以產生經脫殼水黃皮豆; 壓製該等經脫殼水黃皮豆,移除該等水黃皮豆中之至少一部分游離油,以製造減脂水黃皮粉;及 將該減脂水黃皮粉與溶劑合併以製造該水黃皮粉,其中使該水黃皮粉脫脂及去苦。 113. 如實施例112之方法,其進一步包含在與溶劑組合之前研磨該減脂水黃皮粉。 114. 如實施例112或實施例113之方法,其中該溶劑包含乙酸乙酯、乙醇或其組合。 115. 一種製造富含蛋白質之水黃皮成分之方法,其包含: 製備水黃皮粉之含水漿料; 將該含水漿料之pH調整至6與10之間的pH, 將該漿料分離成蛋白質液體部分及不可溶濕餅部分; 使該蛋白質液體部分通過膜系統以獲得包含水黃皮蛋白質之滲餘物; 視情況洗滌、中和該滲餘物及/或對其進行巴氏殺菌;及 乾燥該滲餘物以提供富含蛋白質之水黃皮成分。 116. 如實施例115之方法,其中該富含蛋白質之水黃皮成分包含以乾重計至少70%之水黃皮蛋白質。 117. 如實施例115或實施例116之方法,其進一步包含: 使水黃皮豆脫殼以產生經脫殼水黃皮豆;及 壓製該等經脫殼水黃皮豆,移除該等水黃皮豆中之至少一部分游離油,以製造該水黃皮粉,其中該水黃皮粉具有減少之脂肪含量。 118. 如實施例117之方法,其進一步包含研磨該水黃皮粉。 119. 如實施例115至117中任一項之方法,其進一步包含: 使水黃皮豆脫殼以產生經脫殼水黃皮豆; 壓製該等經脫殼水黃皮豆,移除該等水黃皮豆中之至少一部分游離油,以製造減脂水黃皮粉;及 將該減脂水黃皮粉與溶劑合併以製造該水黃皮粉,其中使該水黃皮粉脫脂及去苦。 120. 如實施例119之方法,其進一步包含在與溶劑組合之前研磨該減脂水黃皮粉。 121. 一種製造富含蛋白質之水黃皮組合物之方法,其包含: 製備水黃皮粉之含水漿料; 將該含水漿料之pH調整至4與5之間的pH以獲得水黃皮蛋白質固體; 洗滌、中和經純化之蛋白質固體且對其進行巴氏殺菌;及 乾燥該等經純化之水黃皮蛋白質固體以提供富含蛋白質之水黃皮組合物。 122. 一種富含蛋白質之水黃皮成分,其係根據如實施例103至121中任一項之方法製造。 123. 一種食品、飲品、膳食補充劑產品或其他產品,其包含:如實施例81至103及122中任一項之富含蛋白質之水黃皮成分。 124. 如實施例123之產品,其中該產品為烘烤食品、蛋白質補充品、蛋白棒或非乳飲料。 125. 如實施例123之產品,其中該產品為醫療食品、嬰兒配方食品、化妝品或藥品。 126. 如實施例123之產品,其中該產品為飲品、乳製品替代品、肉類替代品或蛋代用品。 127. 如實施例126之產品,其中該飲品為水果冰沙、代餐飲料、蛋白質飲料、速溶飲品。 128. 如實施例123、126及127中任一項之產品,其中該產品為每份包含至少20 g富含蛋白質之水黃皮成分的飲品。 129. 如實施例126之產品,其中該乳製品替代品為非乳奶、非乳乳酪、非乳咖啡加白或奶精、非乳優格、非乳希臘優格、非乳可飲用優格。 實例
參考以下實例將更好地理解本發明之主題,該等實例係作為本發明之例示性而非作為限制性實例提供。實例 1 製備脫脂去苦水黃皮粉
此實例展現脫脂去苦水黃皮粉之製備,且一般遵循圖1 中所描述之製程。經由油壓機壓製水黃皮豆以移除游離油,由此製造具有約15-25%脂肪之減脂水黃皮粉。隨後使用油萃取器在50-65℃下用乙醇(5:1;溶劑:固體比率)萃取減脂水黃皮粉3小時。藉由乾燥移除殘餘溶劑。對經溶劑萃取的粉進行各種分析法,以分析水黃皮粉之各種組分(例如水分、粗脂肪、蛋白質、碳水化合物、灰分、纖維、胺基酸、糖等)。用於評估本發明中之水黃皮粉的分析法獲自AOAC國際分析方法。下表1中簡要地概述及展示該等分析法。 1 . 用於對水黃皮粉及富含蛋白質之水黃皮組合物進行近似分析及胺基酸分析的分析法
分析法 參考
水分-強制送風烘箱 AOCS Ba 2a-38
藉由石油醚萃取粗脂肪 AOCS Ba 3-38經修改
蛋白質-燃燒 AOAC 992.15; AOAC 990.03; AOCS Ba 4e-93
計算碳水化合物 CFR 21-計算
灰分 AOAC 942.05
纖維,粗物質 AOAC 962.09; AOCS Ba 6-84
色胺酸(AOAC,大多數基質) AOAC 988.15經修改
半胱胺酸及甲硫胺酸(AOAC,大多數基質) AOAC 994.12經修改
藉由AH獲得胺基酸(AOAC,大多數基質) AOAC 982.30經修改
糖概況(AOAC,大多數基質)-總糖、果糖、葡萄糖、蔗糖、麥芽糖、乳糖 AOAC 982.14,修改
如下進行近似分析:藉由將水黃皮粉樣品放入蛋白質分析儀之燃燒室中,量測藉由燃燒產生之氣體的總氮含量,及由所觀測到之氮含量(蛋白質含量=6.25×氮含量)計算蛋白質量,從而測定總蛋白質含量。藉由在回流下用石油醚進行溶劑萃取(AOCS BA3-38參考方法,經修改)來測定總脂含量。
總碳水化合物含量計算為水黃皮粉(100%)減去總灰分含量(%)、總蛋白質含量(%)、總水分含量(%)及總脂肪(%)之總和的剩餘百分率。藉由以下測定總灰含量:將水黃皮粉樣品(2 g)放入坩堝中,將烘箱中之樣品乾燥,在600℃下之馬弗爐(muffle furnace)中灰化樣品,且量測灰分之重量(AOAC 942.05參考方法)。總水分含量藉由以下方式測定:在強制送風烘箱中在130℃下預加熱經稱重樣品2小時,且測定樣品重量之差值,其中差值%計算為水分含量(AOCS BA 2A-38參考方法)。
藉由溶劑萃取樣品之水黃皮次素及水黃皮籽素,隨後如本文所述進行HPLC分析來,來確定水黃皮樣品之水黃皮次素及水黃皮籽素含量。
分析經溶劑萃取之粉之粗脂肪、蛋白質、水黃皮次素及水黃皮籽素含量。結果展示於表2中。觀測到脫脂去苦水黃皮粉具有小於0.5%脂肪及小於約10 ppm水黃皮次素及水黃皮籽素含量。觀測到所處理之粉不含異味且無苦味。 2 . 各種形式的水黃皮豆粉原料之近似組成.
原料 粗脂肪(%) 蛋白質(%) 水黃皮次素(ppm) 水黃皮籽素(ppm) 味道
經研磨脫殼水黃皮粉,全脂 41.1 19.7 11621 1741 極苦
經研磨脫殼水黃皮粉,減脂 25.7 27.0 6006 309 非常苦
脫脂去苦水黃皮蛋白質粉 0.1 38.8 <10 < 10 無苦味
實例 2A 藉由溶解來製備水黃皮蛋白質濃縮物
此實例展現蛋白質萃取及由脫脂去苦水黃皮粉製造水黃皮蛋白質濃縮物,且一般遵循圖2A 中所描述之例示性製程。
根據以上實例1中所闡述之方法使用乙酸乙酯作為溶劑獲得脫脂去苦水黃皮粉。在此實例中,將所得經乙酸乙酯萃取之水黃皮粉用作用於蛋白質萃取之起始物質。使用高剪切混合器,用水(1:6;15%固體)製備脫脂去苦水黃皮粉之含水漿料。用NaOH (10 M NaOH (水溶液),約40%水溶液)將漿料之pH調整至pH 8且在25℃下不斷攪拌2小時。藉由離心將漿料分離成含有蛋白質之液相及濕餅。將蛋白質溶液之pH調整至中性pH (7.0)且凍乾以製造水黃皮蛋白質濃縮物。此製程使得自該粉萃取及回收70-75重量%之總蛋白質。水黃皮蛋白質濃縮物含有50重量%蛋白質。
使用6.25之通用換算因數藉由總氮確定蛋白質含量。使用如以上實例1中所描述之燃燒分析方法來確定氮含量。
水黃皮蛋白質濃縮物之近似組成、相對胺基酸概況、蛋白質消化率校正胺基酸評分(PDCAAS)提供於下表3、表4及表5中。近似組成及胺基酸概況藉由以上實例1中所述之方案確定。使用人乳作為參考蛋白質的參考胺基酸模式計算PDCAAS。觀測到此實例中製造之水黃皮蛋白質濃縮物與大豆蛋白質具有類似且相當的胺基酸概況(美國農業部食品數據中心數據庫,藉由酸洗產生之大豆蛋白質濃縮物(條目16420))及豌豆蛋白(PURISTM 豌豆蛋白質870)。 3 . 水黃皮蛋白質濃縮物組成,呈乾重(除水分外)
參數 %
水分 4.35
粗脂肪 0.99
粗蛋白質(以乾重計) 51.42
總碳水化合物 39.16
粗纖維 0.30
總糖 24.58
蔗糖 22.15
果糖 2.43
葡萄糖 <0.16
乳糖 <0.16
麥芽糖 <0.16
灰分 8.42
4 . 相對胺基酸概況-水黃皮、大豆及豌豆蛋白質
胺基酸 水黃皮蛋白質濃縮物 大豆蛋白質濃縮物 黃色豌豆蛋白質分離物
麩胺酸 16.4% 19.1% 16.6%
天冬胺酸 12.7% 11.5% 11.7%
白胺酸* 9.2% 7.8% 8.5%
離胺酸(總計)* 8.3% 6.2% 7.6%
苯丙胺酸* 6.1% 5.2% 4.8%
精胺酸 5.8% 7.4% 8.5%
絲胺酸 5.7% 5.4% 4.8%
脯胺酸 5.4% 5.2% 4.4%
纈胺酸* 4.8% 4.9% 5.3%
甘胺酸 4.1% 4.3% 4.1%
丙胺酸 4.0% 4.3% 4.3%
酪胺酸* 3.6% 3.7% 4.8%
異白胺酸* 3.5% 4.7% 5.1%
蘇胺酸* 3.4% 3.9% 3.8%
組胺酸* 2.7% 2.5% 2.5%
半胱胺酸* 1.8% 1.4% 1.1%
色胺酸* 1.6% 1.3% 1.0%
甲硫胺酸* 0.9% 1.3% 1.1%
附註:*表示必需胺基酸 5 . 水黃皮蛋白質濃縮物胺基酸評分
胺基酸 水黃皮蛋白質 mg / g 參考 蛋白質 mg /g AA 評分
半胱胺酸+甲硫胺酸 27.4 25 110
組胺酸 26.5 19 140
異白胺酸 34.7 28 124
白胺酸 92.4 66 140
離胺酸(總計) 83.1 58 143
蘇胺酸 33.8 34 99
色胺酸 15.7 11 143
酪胺酸+苯丙胺酸 96.5 63 153
纈胺酸 48.1 35 137
限制胺基酸=蘇胺酸 限制胺基酸評分=99 消化率係數=0.87;PDCAAS=0.87實例 2B 藉由等電沈澱製備水黃皮蛋白質分離物
此實例展現蛋白質萃取及由脫脂去苦水黃皮粉製造富含蛋白質之水黃皮組合物(水黃皮蛋白質分離物),且一般遵循圖2B 中所描述之例示性製程。 製程回合 A
在此實例中,將去苦水黃皮粉用作用於蛋白質萃取之起始物質。除了使用乙酸乙酯作為溶劑以外,根據以上實例1中所闡述之方法獲得脫脂去苦水黃皮粉。
使用高剪切混合器,用水(1:6;15%固體)製備脫脂去苦水黃皮粉之含水漿料。用10 M NaOH將漿料之pH調整至pH 8且在25℃下不斷攪拌2小時。藉由離心將漿料分離成含有蛋白質之液相及濕餅。用磷酸(85%水溶液)將蛋白質溶液之pH調整至pH 4.5且攪拌30分鐘以形成蛋白質沈澱。藉由離心收集所沈澱之蛋白質,再懸浮於水至40%固體中,用1 M NaOH調整至pH 7.0,且凍乾成蛋白質分離物粉末。此製程使得自脫脂去苦水黃皮粉萃取約70-75重量%且回收約40-50重量%之總蛋白質。水黃皮蛋白質分離物含有約70重量%蛋白質。回收起始物質中總蛋白質之約38%。水黃皮蛋白質分離物之近似組成及胺基酸概況係根據以上實例1中所述之方案確定。水黃皮蛋白質分離物之水分、粗脂肪、蛋白質、碳水化合物及灰分含量展示於表6中。水黃皮蛋白質分離物之相對胺基酸概況提供於表7中。
表6 . 水黃皮蛋白質分離物組成,呈乾重(除水分外).
參數 %
水分-強制送風烘箱 5.96
藉由石油醚萃取粗脂肪 <0.11
蛋白質-燃燒 76.70
計算碳水化合物 14.08
灰分 9.22
藉由等電沈澱自經乙酸乙酯萃取之粉製備的水黃皮蛋白質分離物。
7 . 水黃皮蛋白質分離物之相對胺基酸概況
胺基酸 蛋白質g/100 g
麩胺酸 16.26
天冬胺酸 12.26
白胺酸* 9.93
離胺酸(總計)* 8.69
苯丙胺酸* 6.61
精胺酸 5.66
絲胺酸 6.03
脯胺酸 5.26
纈胺酸* 4.94
甘胺酸 3.70
丙胺酸 3.67
酪胺酸* 3.95
異白胺酸* 3.68
蘇胺酸* 3.22
組胺酸* 2.61
半胱胺酸* 1.31
色胺酸* 1.27
甲硫胺酸* 0.96
附註:*表示必需胺基酸 製程回合 B
在此實例中,將去苦水黃皮粉用作用於蛋白質萃取之起始物質。根據以上實例1中所闡述之方法,使用乙醇作為溶劑獲得脫脂去苦水黃皮粉。
使用高剪切混合器,用水(1:6;15%固體)製備脫脂去苦水黃皮粉之含水漿料。用10% NaOH將漿料之pH調整至pH 8且在25℃下不斷攪拌1小時。使用傾析式離心機將漿料分離成含蛋白質之液相及濕餅。將濕餅再次再懸浮於水中,調整至pH 8,且在25℃下再攪拌1小時。再次藉由傾析式離心機將漿料分離成含蛋白質之液相及濕餅。將兩種含蛋白質之液相合併在一起,且用磷酸(85%水溶液)調整至pH 4.5且攪拌30分鐘以形成蛋白質沈澱。藉由離心收集所沈澱之蛋白質,用水洗滌,再懸浮於水(約16%固體)中,用10% NaOH調整至pH 7.0,進行巴氏殺菌且最後噴霧乾燥成蛋白質分離物粉末。
在第一次萃取期間,萃取起始粉中存在之總蛋白質之約45%。藉由洗滌來自第一次萃取之不可溶物質(濕餅),回收額外10-14%之起始蛋白質,得到經合併之初始蛋白質總量的54-59%萃取。在酸沈澱步驟期間回收約35-47重量%之經萃取蛋白質,得到總產率為15-26重量%之來自脫脂去苦水黃皮粉的總蛋白質。
進行以上方法兩次以獲得兩種水黃皮蛋白質分離物樣品。兩種水黃皮蛋白質分離物含有約80重量%蛋白質。水黃皮蛋白質分離物之近似組成及胺基酸概況係根據以上實例1中所述之方案確定。水黃皮蛋白質分離物之水分、粗脂肪、蛋白質、碳水化合物及灰分含量展示於表8中。水黃皮蛋白質分離物之相對胺基酸概況提供於表9中。
8 . 水黃皮蛋白質分離物組成,呈乾重(除水分外).   
參數 水黃皮蛋白質分離物,回合 # B1 水黃皮蛋白質分離物,回合 # B2
水分-強制送風烘箱 4.8% 3.6%
藉由石油醚萃取粗脂肪 0.8% 0.8%
蛋白質-燃燒 83.9% 81.7%
計算碳水化合物 12.2 % 13.2%
灰分 3.1% 4.3%
呋喃類黃酮 115 ppm 80 ppm
9 . 以實驗性規模製造之水黃皮蛋白質分離物的相對胺基酸概況.
參數 水黃皮蛋白質,回合 # 1 相對 AA %
麩胺酸 16.9
天冬胺酸 12.7
白胺酸 * 10.4
離胺酸 ( 總計 ) * 8.2
苯丙胺酸 * 7.0
絲胺酸 6.1
精胺酸 5.6
脯胺酸 5.4
纈胺酸 * 5.0
酪胺酸 * 4.1
異白胺酸 * 3.7
甘胺酸 3.4
丙胺酸 3.3
胺酸 * 2.9
組胺酸 * 2.6
半胱胺酸 * 1.1
色胺酸 * 1.0
甲硫胺酸 * 0.8
胺基酸 100.0
*表示必需胺基酸。實例 2C 藉由膜過濾製備水黃皮蛋白質分離物
此實例展現蛋白質萃取及藉由膜過濾由脫脂去苦水黃皮粉製造富含蛋白質之水黃皮組合物(水黃皮蛋白質分離物),且一般遵循圖2C 中所描述之例示性製程。
在此實例中,將去苦水黃皮粉用作用於蛋白質萃取之起始物質。除了使用乙酸乙酯作為溶劑以外,根據以上實例1中所闡述之方法獲得脫脂去苦水黃皮粉。
使用高剪切混合器,用水(1:6;15%固體)製備脫脂去苦水黃皮粉之含水漿料。用2 M NaOH (約8%水溶液)將漿料之pH調整至pH 8且在25℃下不斷攪拌2小時。使用傾析器將漿料分離成含有蛋白質之液相及濕餅。使用10 kDa分子量截斷(MWCO)中空纖維膜模組(420 cm2 )或具有實驗室級膜過濾設備之5 kDa MWCO扁平薄片卡匣(1000 cm2 )過濾含有蛋白質之液相。選擇滲透物流及跨膜壓力(約2.8巴)以獲得合理的滲透物通量。膜過濾以4-5之濃度因子(CF)及2-4之透濾因子(DF)進行。將所獲得之滲餘物進一步洗滌且凍乾成蛋白質分離物粉末。
此製程使得自該粉萃取約70-75重量%且回收約30重量%之總蛋白質。藉由膜過濾製造之水黃皮蛋白質分離物含有約80重量%蛋白質。
在進行的一次實驗中,對含有蛋白質之液相(根據上文所描述之方案製造)進行涉及5 kDa或10 kDa膜之試驗。該等條件及結果提供於下表10中。 10 . 自膜過濾的蛋白質純度及產率之概述
MWCO CF DF 饋入(g) 饋入中蛋白質(%) 滲餘物(g) 滲餘物中蛋白質(%) 粉末中蛋白質(%) 產率(%) 總產率(%)
10 kDa 5 2 733 4.7 118 12.1 76 47.9 32
10 kDa 4.3 4.3 674 4.7 153 10.0 80 42.6 29
5 kDa 5 5 618 4.7 145 6.8 79 35.3 24
實例 3 水黃皮蛋白質之分子量表徵
此實例展現以下中存在之蛋白質的分子量表徵:(i)水黃皮豆,(ii)冷壓水黃皮粉,(iii)根據以上實例1中所闡述之方法獲得之脫脂去苦水黃皮粉,及(iv)根據以上實例2A-2C中所闡述之方法獲得之富含蛋白質之水黃皮組合物。展示在各處理階段之後獲得的水黃皮蛋白質之分子量與大豆蛋白質分離物及自部分脫脂大豆粉萃取之蛋白質的分子量表徵的比較。
參考圖5A - 5D ,藉由SDS-PAGE測定水黃皮豆及自其衍生之物質中存在的蛋白質的尺寸分佈及相對豐度。分子量一般根據以下方案測定。對於圖5A ,藉由機械中斷含有50 mM TRIS-HCl (pH 8.3)、100 mM NaCl、2 mM EDTA、1% SDS及1 mM PMSF之蛋白質萃取緩衝液中的指定物質來製備此等組中之蛋白質萃取物。使用布萊德福分析法(Bradford assay),以牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA)作為標準物測定各萃取物中之蛋白質濃度。萃取物經稀釋且與變性SDS-PAGE樣品緩衝液混合,隨後裝載至12% SDS-PAGE凝膠上(每色帶約30 µg)。來自市售原料之純BSA直接稀釋至SDS-PAGE樣品緩衝液中且作為未染色分子量標記物(約66 kDa)以及蛋白質量參考物(每色帶約6 µg)包括在內。大豆蛋白質分離物為來自Solae (10002061)之SUPRO XT40分離之大豆蛋白質產品。藉由冷壓市售大豆(黃豆)進行內部製成減脂大豆粉。預染色分子量標準物(未展示)為Thermo Scientific PageRuler Plus Prestained Protein Ladder (26619)。參考圖5B - 5D ,此等組中之蛋白質樣品取自製備富含水黃皮蛋白質之組合物中之不同階段。在20 mg/ml (2% w/v)下在水中復原水黃皮蛋白質濃縮物之凍乾(freeze-dried,FD)粉末、藉由等電沈澱之分離物或藉由膜過濾之分離物。各樣品中之蛋白質濃度藉由布萊德福或BCA分析法使用牛血清白蛋白(BSA)作為標準物測定。等分試樣在H2 O中稀釋且與變性SDS-PAGE樣品緩衝液混合,隨後將蛋白質樣品裝載至SDS-PAGE凝膠上。注意,對於將藉由膜過濾簡單pH 8萃取物產生的凍乾分離物中之蛋白質概況與對應的「親本」凍乾pH 8萃取物(濃縮物)進行比較的小組,每色帶裝載相對較少的蛋白質且使用不同凝膠系統。
發現水黃皮豆含有若干容易辨別的蛋白質,其尺寸在約10 kDa至250 kDa範圍內。單一最豐富的蛋白質物質(表示總蛋白質之30-40%)為約55 kDa之二重峰。另外,在250 kDa、130 kDa、25 kDa、15 kDa及10 kDa下存在五個其他顯著類別。已發現可能對應於水黃皮種子貯藏蛋白質之此等六種類別一起對水黃皮粉及麵粉之功能性以及自其製備之蛋白質濃縮物或分離物具有最大影響。觀測到在水黃皮豆中發現之顯著蛋白質(以及大部分其他蛋白質)在整個前述實施例中所述之處理步驟中保持大部分完整以製造可食用麵粉。重要地,觀測到此等蛋白質可容易地自脫脂及/或去苦水黃皮粉使用本文所描述之水萃取方案、等電沈澱方案或膜過濾方案萃取(實例2A-2C)。 實例 4 水黃皮蛋白質之功能特性
在此實例中,根據以上實例2中所闡述之方法製造之水黃皮蛋白質組合物的溶解度、黏度及乳化特性經表徵且與大豆、豌豆、羽扇豆及向日葵籽蛋白質比較。 蛋白質溶解度
為量測水黃皮蛋白質組合物之溶解度,在水中製備2% w/w蛋白質溶液(基於氮*5.7),使用酸或鹼將其調整至指定pH值且在室溫下攪拌2小時。樣品在20℃下以20,000 g離心10分鐘且收集上清液。藉由Kjeldahl方法測定上清液之氮含量。蛋白質溶解度(例如存在於20,000 g上清液中之蛋白質)表示為溶液中所添加之蛋白質之初始量的百分比。蛋白質溶解度亦可表示為每體積溶劑溶解溶質之質量(g/L)。
3 展示在各種pH值下存在於水黃皮蛋白質濃縮物中之水黃皮蛋白質的蛋白質溶解度曲線。藉由用HCl或NaOH將2% w/w蛋白質水溶液之pH (基於氮*5.7)調整至 3至pH期望值(pH 9)來製備溶解度曲線。在室溫下攪拌懸浮液2小時,隨後離心以移除不可溶物質。圖4A 及圖4D 比較在水黃皮蛋白質濃縮物或分離物中蛋白質在pH 7.0下之溶解度與市售植物蛋白質組合物之溶解度。 黏度
為量測富含蛋白質之水黃皮組合物之黏度,製備4% w/w蛋白質溶液(基於氮*5.7)且在室溫下攪拌30分鐘。接著將蛋白質溶液在90℃下加熱15分鐘且冷卻至室溫。使用流變儀在20℃下在0 s- 1 至1000 s- 1 之剪切速率下量測黏度。圖4B 及圖4E 比較在100 s- 1 之剪切速率下由水黃皮蛋白質濃縮物或分離物製備之溶液與用市售植物蛋白質組合物製備之溶液的黏度。 蛋白質乳化
使用1:10之蛋白質與脂肪比率製備乳液。在水溶液中1%使用蛋白質濃度與10%向日葵油。首先水合蛋白質,且緩慢添加脂肪,同時在高剪切(15,000 rpm)下混合2分鐘。將水-蛋白質-油混合物以300/30巴均質化以形成穩定乳液。藉由雷射繞射分析乳液之液滴尺寸。所觀測到之液滴尺寸展示於圖4C4E 中。
溶解度、黏度及乳化特性之功能特性結果展示於圖4A - 4F 中。發現與所測試之市售豆科植物蛋白質相比,水黃皮蛋白質濃縮物或分離物具有優異的溶解度(約80%)。發現水黃皮蛋白質(濃縮物或分離物)與豌豆及大豆蛋白質在黏度及乳化特性方面相當。實例 5 水黃皮蛋白質之額外功能性研究
本發明實例詳述一般根據如實例2B回合A及B (樣品B1)中所提供之方案製備的水黃皮蛋白質分離物之功能性評估。與市售大豆蛋白質分離物及豌豆蛋白質分離物觀測到的相同特性相比,評定所製造的水黃皮蛋白質分離物之乳化特性、黏度、保水量、保油量、膠凝特性、發泡特性、粉末分散性及在pH 7下的溶解度。 蛋白質溶解度
測定在pH 7下在2%蛋白質含量下製備之蛋白質懸浮液上的溶解度,且在15000 g下離心10分鐘之後藉由Kjedahl方法估計在上清液上之溶解度。
表11展示針對水黃皮蛋白質分離物所觀測到之溶解度。兩種水黃皮蛋白質分離物分別呈現38%及57%之較高蛋白質溶解度。所觀測到之溶解度顯著高於豌豆蛋白質溶解度,且與大豆蛋白質之溶解度相當(或對於來自回合B1之水黃皮蛋白質分離物,更高)。 黏度
為量測富含蛋白質之水黃皮組合物之黏度,製備且攪拌10% w/w蛋白質溶液(基於氮*5.7)。使用流變儀在25℃下在0 s- 1 至1000 s- 1 之剪切速率下量測黏度。
表11展示針對水黃皮蛋白質分離物所觀測之黏度。發現水黃皮蛋白質分離物在剪切速率(對應於牛頓特性)下呈現相對恆定的黏度。觀測到水黃皮蛋白質分離物之黏度相對較低,約為10- 2 Pa•s,其略微高於水且與豌豆蛋白質分離物的黏度相當。
6A 展示在不同剪切速率下且與豌豆蛋白質分離物或大豆蛋白質分離物製備之溶液相比,水黃皮蛋白質分離物(由回合B1獲得)之溶液所量測的黏度。在所有量測之剪切速率下,水黃皮蛋白質分離物呈現的黏度比豌豆蛋白質及大豆蛋白質分離物更低。 11 . 水黃皮蛋白質、豌豆蛋白質及大豆蛋白質分離物之蛋白質溶解度
樣品 溶解度(% ,在pH 7 時) 在100 s-1 下之黏度(10-3 Pa•s)
水黃皮蛋白質分離物,實例2B,回合A 38 9
水黃皮蛋白質分離物,實例2B,回合B1 57 7
豌豆蛋白質分離物 21 17
大豆蛋白質分離物 42 103
蛋白質乳化
藉由製造水包油乳液來量測蛋白質樣品之乳化特性。於水中製備含有1%蛋白質之溶液。藉由將蛋白質溶液與油以75/25之比例混合隨後音波處理來製造乳液。隨後在程序PR-14010之後用兩種分散劑(水及SDS)在粒度分析器(Mastersizer, Malvern)上量測小油滴之尺寸分佈。1.46之折射指數用於向日葵油且1.33用於水。0.01之吸收指數用於向日葵油。
對於乳化評定,緊接在製備之後(第0天)及7天貯藏之後(第7天)立即評定水黃皮蛋白質分離物、豌豆蛋白質分離物及大豆蛋白質分離物之乳化特性。表12展示在第0天及第7天水黃皮蛋白質分離物之所觀測粒度分佈D50值。如本文所提供,D50值指示樣品中50%粒子大於指定值時之液滴尺寸。
觀察到水黃皮蛋白質分離物在製備之後立即產生精細乳液(中值尺寸小於5 µm)且在貯藏7天之後穩定。水黃皮蛋白質樣品具有極佳乳化特性,類似於大豆蛋白質及牛奶酪蛋白。圖6B 展示與用酪蛋白鈉(作為參考)、豌豆蛋白質分離物或大豆蛋白質分離物製備之乳液相比,水黃皮蛋白質分離物(在實驗性規模下製備)乳液之液滴尺寸分佈。如圖6B 中所示,水黃皮乳液之液滴尺寸分佈為單峰的,且在中值液滴尺寸及液滴尺寸分佈上類似於酪蛋白鈉。 12 . 乳液穩定性及D50值
第0 第7
樣品 水中D50 (µm) SDS 中D50 (µm) 絮凝指數 (D50SDS 與D50 比率 ) 水中D50 (µm) SDS 中D50 (µm) 絮凝指數 (D50SDS 與D50 比率 )
酪蛋白鈉(參考) 2.15 2.00 0.93 2.00 1.80 0.90
水黃皮蛋白質分離物,實例2B,回合A 2.93 1.92 0.65 2.78 2.01 0.72
水黃皮蛋白質分離物,實例2B,回合B1 2.90 2.47 0.85 2.91 2.38 0.82
豌豆蛋白質分離物 31.1 2.28 0.07 68.8 2.49 0.12
大豆蛋白質分離物 3.04 1.75 0.58 3.18 1.82 0.57
保水量及保油量
藉由將各樣品以20 mg/ml乾物質之濃度添加至油或水中來量測水黃皮蛋白質分離物之保水量及保油量。在攪拌下摻合懸浮液1小時。在15000 g下離心10分鐘之後,量測糰粒中之水及油含量且與物質初始重量進行比較。結果表示為該樣品能夠在水或油中保持其重量之次數。如表13中所示,水黃皮蛋白質分離物具有中等保水量,但低於豌豆及大豆蛋白質分離物;水黃皮蛋白質分離物與大豆及豌豆蛋白質相比具有略微較高的油結合特性。 13 . 保水量及保油量
樣品 保水量 ( 水g/ 樣品g) 保油量 ( 油g/ 樣品g)
水黃皮蛋白質分離物,實例2B,回合A 3.9 1.2
水黃皮蛋白質分離物,實例2B,回合B1 1.7 2.1
豌豆蛋白質分離物 3.1 1.6
大豆蛋白質分離物 4.3 1.6
發泡特性
在pH 7 (60 mL)下使用0.1% w/v蛋白質溶液,藉由Foamscan (Teclis Scientific)評估發泡特性。藉由在200 ml/min之流動速率下在溶液中鼓泡空氣30秒來形成泡沫。接著在10分鐘期間記錄泡沫體積及其穩定性。使用蛋白作為此測試之參考。表14展示蛋白(作為參考)產生大量泡沫之結果,該泡沫隨時間推移很穩定。水黃皮蛋白質產生大量泡沫,但隨時間推移泡沫體積顯著減小。 14 . 發泡特性
樣品 最大泡沫體積(ml) 10 分鐘後 泡沫體積(ml) 泡沫穩定性(%)
蛋白 110 74 67
水黃皮蛋白質分離物,實例2B,回合A 100 8 8
水黃皮蛋白質分離物,實例2B,回合B1 96 6 6
豌豆蛋白質分離物 58 0 0
大豆蛋白質分離物 35 0 0
膠凝特性
藉由在試管中製備具有2%至20%蛋白質含量之溶液來量測最低膠凝濃度。溶解之後,溶液在水浴中在85℃下加熱1小時且隨後在4℃下冷卻2小時。若蛋白質溶液在加熱之前表現得類似於液體(亦即自由流動),但當試管在加熱之後倒置時不流動,則該蛋白質溶液被視為已形成凝膠。
水黃皮蛋白質分離物之最低膠凝濃度結果展示於表15中。發現水黃皮蛋白質分離物呈現與豌豆蛋白質及大豆蛋白質相當的凝膠。 粉末分散性
如下量測粉末分散度。在500 rpm (渦旋)下在混合下將五(5) g樣品添加至100 ml水中。混合分散液5分鐘,接著經由30 μm孔徑過濾器過濾。過濾且任何保留之內容物在105℃下乾燥4小時且稱重。計算每g樣品截留於過濾器上之物質(未分散產物)比例。
水黃皮蛋白質分離物之分散性結果展示於表15中。如表15中所示,觀測到與大豆及豌豆相比,水黃皮蛋白質具有優異的分散性。 15 . 分散性及膠凝特性
樣品 分散性(%) 最低膠凝濃度 ( 蛋白質g/ 溶液100g)
水黃皮蛋白質分離物,實例2B,回合A 12.3 10
水黃皮蛋白質分離物,實例2B,回合B1 17.7 12
豌豆蛋白質分離物 < 5 14
大豆蛋白質分離物 < 5 10
奶粉(參考) 99.6 --
麩質(參考) 21.2 --
「--」-指示未量測實例 6 富含蛋白質之水黃皮組合物的個別食物用途及水準
如本文中所描述之富含蛋白質之水黃皮組合物(例如水黃皮蛋白質濃縮物或分離物)可用作在跨越多個類別之多種習知食品及飲品中對動物或植物蛋白質之直接蛋白質替代。例示性食物類別及使用水準概述於下表16中。 16 . 例示性食物及使用水準
食物類別 所提議之食物用途 每份 水黃皮蛋白質(g)
烘烤產品 麵包、硬麵包圈、糕點 甜餅乾及脆餅乾 早餐禾榖棒 代餐營養棒 2-4 2 3 10-20
飲料 水果冰沙 代餐飲料 蛋白質飲料 速溶飲品 10-16 10-16 20 10
乳製品替代品 非乳乳酪 非乳奶 非乳咖啡加白 非乳優格、可飲用優格 非乳希臘優格 5 8 1 6 15
甜點 非乳冰淇淋 冷凍甜點/優格 布丁 3 3 4
蛋代用品 蛋產品類似物 5
穀物產品及通心麵 通心麵 麵條 10 10
肉類替代物 肉類似物 基於植物之肉碎粒、肉丸或漢堡 16    16
調味醬、蘸醬及調味料 豆蘸醬及塗抹食品 調味醬 3 2
點心食物 薯片、擠壓點心、糖果 2-8
實例 7 基於植物之奶質飲料
此實例描述使用如本文所描述之富含蛋白質之水黃皮組合物(例如,水黃皮蛋白質濃縮物或分離物),包括根據以上實例2A-2C中之方法獲得的蛋白質組合物,製備基於植物之奶質飲料。
藉由使用高剪切混合機在熱水(例如140-160℉)中在5.5-6重量%(每份10 g蛋白質)下使富含蛋白質之水黃皮組合物(例如水黃皮蛋白質分離物(70-80重量%蛋白質)水合約15-20分鐘來製備水黃皮蛋白質奶。向含水蛋白質中添加菜籽油/大豆油、糖、增稠劑及調味劑且再混合5-10分鐘。隨後將混合物均質化以形成均勻乳液,且進行巴氏殺菌。實例 8 基於植物之優格
此實例描述使用如本文所描述之富含蛋白質之水黃皮組合物(例如,水黃皮蛋白質濃縮物或分離物),包括根據以上實例2A-2C中之方法獲得的蛋白質組合物,製備基於植物之優格。
藉由使用高剪切混合機在熱水(例如140-160℉)中在9-10重量%下使富含蛋白質之水黃皮組合物,例如水黃皮蛋白質分離物(70重量%蛋白質)水合約15-20分鐘來製備水黃皮蛋白質奶。向含水蛋白質中添加其他視情況選用之成分,諸如菜籽油/大豆油、糖、增稠劑及調味劑,且再混合5-10分鐘。隨後將混合物均質化為均勻乳液,巴氏殺菌,且冷卻至約100℉。添加素食優格培養物且醱酵約6-10小時。在優格達到4.5之所需pH範圍之後,將其攪拌且填充至容器中且冷凍貯藏。實例 9 強化白麵包
此實例描述白麵包之製造,該白麵包用如本文所描述之富含蛋白質之水黃皮組合物(例如水黃皮蛋白質濃縮物或分離物),包括根據以上實例2A-2C中之方法獲得之蛋白質組合物來強化。
水黃皮蛋白質濃縮物 製備兩個麵包麵團:(1)無蛋白質強化之對照麵團(每份3 g蛋白質);及(2)具有富含蛋白質之水黃皮組合物的測試麵團(每份6 g蛋白質)。在測試麵團中,至少一部分(20重量%)小麥粉經富含蛋白質之水黃皮組合物(例如濃縮物)替代。調配物中之其他視情況選用之成分包括鹽、糖、酵母、油、黃油、脫脂奶粉及水。將麵團混合,稱重,成形,放於盤中,防潮且在約420℉下烘烤約25-30分鐘。接著評估麵包。評估對照及強化麵包之麵包體積、質地及味道。
水黃皮蛋白質分離物:製備兩個麵包麵團:(a)對照物-無蛋白質添加,(b)富含蛋白質-具有水黃皮蛋白質。在富含蛋白質之調配物中,用富含蛋白質之水黃皮組合物(水黃皮蛋白質分離物,約70-80重量%蛋白質)替代10重量%小麥粉。視情況選用之成分包括糖、鹽、黃油、酵母及水。將該等成分混合至麵團中,稱重,成形,並放於烘烤盤中,防潮,且在約420℃下烘烤約25-30分鐘。實施例 10 強化脆餅乾
此實例描述脆餅乾之製造,該等脆餅乾用如本文所描述之富含蛋白質之水黃皮組合物(例如水黃皮蛋白質濃縮物或分離物),包括根據以上實例2A-2C中之方法獲得之蛋白質組合物來強化。
製備兩個脆餅乾麵團:(1)無蛋白質強化之對照麵團(每份3 g蛋白質);及(2)具有富含蛋白質之水黃皮組合物的測試麵團(每份5 g蛋白質)。在測試麵團中,一部分(20%)小麥粉用富含蛋白質之水黃皮組合物(例如水黃皮蛋白質濃縮物,約50重量%蛋白質)替代。調配物中之其他視情況選用之成分包括鹽、糖、芝麻油、油、膨鬆劑(例如碳酸氫鈉)及水。製備麵團,將其片成所需厚度(約1.5 mm),切成所需形狀,且烘烤。評估對照及強化脆餅乾之質地及味道。 具有添加之水黃皮蛋白質或大豆蛋白質的小麥脆餅乾
製備三個脆餅乾麵團:(A)無蛋白質強化之對照麵團(每份2.1 g蛋白質);(B)具有富含蛋白質之水黃皮組合物之測試麵團(每份4.9 g蛋白質,其中2.9 g蛋白質來自水黃皮蛋白質分離物);及(C)富含大豆蛋白質之測試麵團(2.7 g蛋白質來自大豆蛋白質)。使用全麥及通用麵粉以50:50摻合來製備對照麵團。在使用水黃皮蛋白質分離物之測試麵團(B)中,全小麥/通用麵粉摻合物以8.7%經水黃皮蛋白質分離物替代;在使用大豆蛋白質富集之測試麵團(C)中,全麥麵粉/通用麵粉以7.4%經大豆蛋白質分離物替代。調配物中之其他成分包括鹽、糖、麥芽大麥、菜籽油、玉米澱粉、烘烤鈉及水。將額外的水添加至兩個測試麵團中以實現與對照麵團類似的質地;跨越對照及測試麵團,所有其他除麵粉之外的成分保持恆定。製備麵團,將其片成所需厚度(約1.5 mm),切成1.5吋方塊,且烘烤。評估對照及強化脆餅乾的質地及味道。下表17展示感官評估概述。
含有水黃皮蛋白質之強化脆餅乾比對照脆餅乾具有更暗顏色及更強全麥風味。 17 . 感官評估
   樣品
變數 A - 對照小麥脆餅乾 B- 水黃皮蛋白質強化之小麥脆餅乾 C- 大豆蛋白質強化之小麥脆餅乾
顏色 / 外觀 具有深棕色全麥顆粒遍及之淺褐色脆餅乾 深棕色,比對照更為單色,不展示遍及之全麥顆粒 較淺背景下稍微較多金棕色,且展示全麥顆粒遍及
香氣 輕微小麥烘烤的脆餅乾香氣 類似於全麥脆餅乾(graham cracker),全穀物香氣更顯著 與對照相比,小麥香氣稍微較強
風味 溫和中性小麥風味,且回味帶有甜味和鹹味 全穀物風味較重,且回味帶有甜味;類似於全麥脆餅乾之風味 溫和的中性小麥風味,且中間和回味較甜;與對照相當
質地 整體質地酥脆均勻。脆餅乾比蛋白質類食物口感更酥。 口感比對照更硬,更脆。該口感比豆製品稍硬、密度稍大。 口感比對照更硬,更脆。
總體可接受性 對照 有些可接受 可接受
實例 11 基於植物之即飲蛋白質飲料
此實例描述使用如本文所描述之富含蛋白質之水黃皮組合物(例如,水黃皮蛋白質分離物),包括根據以上實例2A-2C中之方法獲得之蛋白質組合物,來製備基於植物之即飲(RTD)巧克力蛋白質飲料。
製備三份即飲巧克力飲料-(A)每份16 g水黃皮蛋白質,(B)每份20 g水黃皮蛋白質;及(C)每份20 g豌豆蛋白質。首先,使可可分開地在熱水中水合。在溫水中水合水黃皮蛋白質以及磷酸二鉀15分鐘。向含水水性蛋白質中添加水合的可可、向日葵油、卵磷脂、糖、天然甜味劑、增稠劑及調味劑且再混合5分鐘。隨後將混合物均質化以形成均勻乳液,巴氏殺菌,且填充至瓶子中且在冷藏溫度下貯藏以用於進一步評估。
評估飲料之以下特徵:視覺外觀(包括顏色、物理外觀、穩定性)、氣味、質地及口感(包括奶油質地、絲滑、砂質、粉質、稠厚、稀薄)、風味及味道(包括甜味、鹹味、餘味、異常味道)及整體好感(可接受/不可接受)。下表18展示感官評估之概述。兩種水黃皮蛋白質飲料比豌豆蛋白質飲料更佳。 18 . 感官評估概述-即飲巧克力蛋白質飲料
變數
樣品 顏色 / 外觀 香氣 質地 味道 整體好感
A - 每份16 g 水黃皮蛋白質 深棕色 多泡, 可可沈降至底部 深色巧克力香氣 稀薄, 缺乏體量 甜味較低, 濃郁巧克力味,回味稍苦 可接受
B- 每份20 g 水黃皮蛋白質 深棕色多泡,可可沈降至底部 深色巧克力香氣 比16 g水黃皮樣品更具奶油質地。 質地稀薄 濃郁巧克力味, 甜味平衡, 苦味較少, 無異常味道 可接受
C- 每份20 g 豌豆蛋白質 淺棕色/牛奶巧克力類型 未觀測到可可沈降。 牛奶巧克力香氣 比16 g水黃皮樣品更具奶油質地 粉質 甜味及鹹味不平衡, 稍微酸敗, 豌豆及苦澀的異常味道 不可接受(太鹹/敗味)
實例 12 蛋白粉飲料混合物
此實例描述使用如本文所述之富含蛋白質之水黃皮組合物(例如水黃皮蛋白質分離物),包括根據以上實例2A-2C中之方法獲得之蛋白質組合物,來製備粉末巧克力蛋白質飲料混合物。
此實例描述使用如本文所述之富含蛋白質之水黃皮組合物(例如水黃皮蛋白質分離物),包括根據以上實例2A-2C中之方法獲得之蛋白質組合物,來製備粉末巧克力蛋白質飲料混合物。
製備兩種巧克力蛋白粉混合物-每份(1) 15 g水黃皮蛋白質及(2) 15 g豌豆蛋白質。其他成分包括可可、糖、天然甜味劑、鹽及調味劑。將所有成分添加至摻合器且混合10分鐘,直至所有成分均勻混合為止。將產品封裝於金屬化袋中以供進一步使用。將粉末狀產物與12盎司(fl. oz.)水混合且評估感官。針對以下特徵評估復原之水黃皮蛋白質及豌豆蛋白質飲料:視覺外觀(包括顏色、物理外觀及穩定性)、氣味、質感及口感(包括奶油質地、絲滑、砂質、粉質、稠厚及稀薄)、風味及味道(包括甜味、鹹味、餘味及異常味道)及整體好感(可接受/不可接受)。下表19展示感官評估之概述。水黃皮巧克力粉比巧克力豌豆蛋白粉更佳。 19 . 感官評估概述-巧克力蛋白質飲料混合物(復原)
變數
樣品 顏色 / 外觀 香氣 質地 味道 整體好感
水黃皮 蛋白質 (15 g 蛋白質/12 盎司 份) 深棕色 黑巧克力 混合後有顯著泡沫 黑巧克力香氣及淡淡香草味 比豌豆蛋白質樣品更具奶油質地, 稠厚且充氣 前期巧克力味較淡, 甜味較少, 稍苦, 回味無蛋白質口感 可接受
對照- 豌豆 (15 g 蛋白質/12 盎司 份) 淺棕色, 牛奶巧克力, 產品快速沈降, 混合後有少量泡沫 典型的牛奶巧克力香氣, 豌豆香氣 水感及稀薄,稍微粉質 較濃可可風味 豌豆味道 甜味較低, 稍苦    中度可接受
如本文所用,術語「約」係指此技術領域之技術人員易於知曉之相應值的常見誤差範圍。本文中對「約」一值或參數之提及包括(且描述)本身係關於彼值或參數之實施例。舉例而言,「約x」包括且描述「x」本身。在一些實施例中,術語「約」當與量測值結合使用,或用以修飾值、單元、常數或值範圍時,係指所述值或參數之+/-5%變化。
在本文中對兩個值或參數「之間」的提及包括(且描述)包括彼等兩個值或參數本身之實施例。舉例而言,提及「x與y之間」之描述包括對「x」及「y」本身之描述。
100:製程 102:步驟 104:步驟 106:步驟 108:步驟 110:步驟 112:步驟 114:步驟 116:步驟 118:步驟 200:製程 202:步驟 204:步驟 206:步驟 208:步驟 210:步驟 212:步驟 300:製程 302:步驟 304:步驟 306:步驟 308:步驟 310:步驟 312:步驟 314:步驟 316:步驟 400:製程 402:步驟 404:步驟 406:步驟 408:步驟 410:步驟 412:步驟 414:步驟
可參考結合隨附圖式進行之以下描述理解本申請。
1 提供用於由水黃皮豆製造具有較高蛋白質含量之水黃皮組合物的例示性製程之概述。
2A 描繪一種用於藉由溶解自脫脂去苦水黃皮粉製造水黃皮蛋白質濃縮物的例示性製程。
2B 描繪一種用於藉由等電沈澱自脫脂去苦水黃皮粉製造水黃皮蛋白質分離物的例示性製程。
2C 描繪一種用於藉由膜過濾自脫脂去苦水黃皮粉製造水黃皮蛋白質分離物的例示性製程。
3 描繪在不同pH值下凍乾水黃皮蛋白質濃縮物中存在之水黃皮蛋白質的溶解度曲線。
4A - 4C 描繪展示例示性水黃皮蛋白質濃縮物相對於市售蛋白質(大豆、豌豆及羽扇豆)在溶解度(圖4A )、100 s- 1 剪切速率下之黏度(圖4B )方面及相對於市售蛋白質(大豆、豌豆及向日葵)在乳液(圖4C )方面之功能特性比較的圖。
4D - 4F 描繪展示例示性水黃皮蛋白質分離物相對於市售蛋白質(大豆、豌豆及羽扇豆)在溶解度(圖4D )、100 s- 1 剪切速率下之黏度(圖4E )方面及相對於市售蛋白質(大豆、豌豆及向日葵)在乳液(圖4F )方面之功能特性比較的圖。
5A - 5D 描繪由SDS-PAGE解析之蛋白質組分,展示各種水黃皮豆蛋白質之分子量分佈以說明製程穩定性、完整性且區分水黃皮豆蛋白質與大豆蛋白質。
6A 及圖6B 描繪在實驗性規模下製造之水黃皮蛋白質分離物相比於豌豆及大豆蛋白質分離物的黏度特性及乳化特性。
100:製程
102:步驟
104:步驟
106:步驟
108:步驟
110:步驟
112:步驟
114:步驟
116:步驟
118:步驟

Claims (48)

  1. 一種富含蛋白質之水黃皮成分,其包含以乾重計至少40%之水黃皮蛋白質, 其中該成分具有:(i)小於500 ppm水黃皮次素(karanjin);或(ii)小於500 ppm水黃皮籽素(pongamol);或(iii)小於500 ppm合併之水黃皮次素及水黃皮籽素;及 其中該成分具有以乾重計小於或等於40%之碳水化合物。
  2. 如請求項1之成分,其中該成分具有以乾重計40%與70%之間的水黃皮蛋白質。
  3. 如請求項1之成分,其中該成分係水黃皮蛋白質濃縮物。
  4. 如請求項1之成分,其包含以乾重計至少70%之水黃皮蛋白質, 其中該成分具有:(i)小於500 ppm水黃皮次素;或(ii)小於500 ppm水黃皮籽素;或(iii)小於500 ppm合併之水黃皮次素及水黃皮籽素;及 其中該成分具有以乾重計小於或等於20%之碳水化合物。
  5. 如請求項4之成分,其中該成分具有以乾重計70%與90%之間的水黃皮蛋白質。
  6. 如請求項5之成分,其中該成分係水黃皮蛋白質分離物。
  7. 如請求項1至6中任一項之成分,其中該成分來源於水黃皮粉,其中該富含蛋白質之水黃皮成分具有比該水黃皮粉大至少1.25倍的水黃皮蛋白質含量。
  8. 如請求項1至7中任一項之成分,其中該成分具有以乾重計小於5%之脂肪。
  9. 如請求項1至8中任一項之成分,其中該成分具有以乾重計小於2%之脂肪。
  10. 如請求項1至9中任一項之成分,其中該成分具有包括至少15%麩胺酸、至少12%天冬胺酸、至少9%白胺酸、至少8%離胺酸、至少6%苯丙胺酸或其任何組合之相對胺基酸概況。
  11. 如請求項1至10中任一項之成分,其中該成分中所存在之該等蛋白質的至少35%可溶於pH至少為pH 6之水中。
  12. 如請求項1至11中任一項之成分,其中該成分在100 s- 1 之剪切速率下具有至少2 mPa*s之黏度。
  13. 如請求項1至12中任一項之成分,其中該成分在乳化時產生平均液滴尺寸為至少1 µm之乳液。
  14. 如請求項1至13中任一項之成分,其中該成分具有至少0.7之蛋白質消化率校正胺基酸評分。
  15. 如請求項1至14中任一項之成分,其中該成分之蛋白質平均分子量為10,000道爾頓與250,000道爾頓之間。
  16. 如請求項1至15中任一項之成分,其中該成分包含種子貯藏蛋白質,且其中所存在之30-40%之該等蛋白質為分子量在45 kDa與70 kDa之間的蛋白質,如藉由SDS-PAGE所測定。
  17. 如請求項16之成分,其中該成分進一步包含分子量為170-250 kDa、115-160 kDa、45-70 kDa、19-25 kDa、14-17 kDa或10-13 kDa的種子貯藏蛋白或其任何組合。
  18. 如請求項1至17中任一項之成分,其中該成分具有: (i)在100 s- 1 之剪切速率下2 mPa*s與100 mPa*s之間的黏度; (ii) 0.1%蛋白質溶液之體積的100%與200%之間的發泡量; (iii)至少0.2 g/cm3 之容積密度; (iv)在pH 7下至少35%之蛋白質溶解度; (v)小於或等於5 µm之中值乳液液滴尺寸; (vi)貯藏7天之後小於或等於5 µm之中值乳液液滴尺寸; (vi)每公克富含蛋白質之水黃皮成分至少1.5 g水之保水量; (vii)每公克富含蛋白質之水黃皮成分至少1.5 g油之保油量; (viii)每100公克至少10 g富含蛋白質之水黃皮成分的最低膠凝濃度; (ix)至少10%之粉末分散度;或 (x)中性、無苦味; 或其(i)-(x)之任何組合。
  19. 如請求項18之成分,其中該成分具有: (i)在100 s- 1 之剪切速率下2 mPa*s與100 mPa*s之間的黏度; (ii) 0.1% w/v水黃皮蛋白質溶液之體積的100%與200%之間的發泡量; (iii)至少0.2 g/cm3 之容積密度; (iv)在pH 7下至少35%之蛋白質溶解度; (v)小於或等於5 µm之中值乳液液滴尺寸; (vi)貯藏7天之後小於或等於5 µm之中值乳液液滴尺寸; (vii)中性、無苦味; 或其(i)-(vii)之任何組合。
  20. 如請求項18之成分,其中該成分具有: (i)在100 s- 1 之剪切速率下2 mPa*s與100 mPa*s之間的黏度; (ii) 0.1% w/v蛋白質溶液之體積的100%與200%之間的發泡量; (iii)至少0.2 g/cm3 之容積密度; (iv)在pH 7下至少35%之蛋白質溶解度; (v)小於或等於5 µm之中值乳液液滴尺寸; (vi)貯藏7天之後小於或等於5 µm之中值乳液液滴尺寸; (vii)每公克富含蛋白質之水黃皮成分至少1.5 g水之保水量; (viii)每100公克至少10 g富含蛋白質之水黃皮成分的最低膠凝濃度;或 (ix)中性、無苦味 或其(i)-(x)之任何組合。
  21. 如請求項18之成分,其中該成分具有: (i)至少0.2 g/cm3 之容積密度; (ii)在pH 7下至少35%之蛋白質溶解度; (iii)每公克富含蛋白質之水黃皮成分至少1.5 g水之保水量; (iv)每公克富含蛋白質之水黃皮成分至少1.5 g油之保油量; (v)每100公克至少10 g富含蛋白質之水黃皮成分的最低膠凝濃度;或 (vi)中性、無苦味; 或其(i)-(vi)之任何組合。
  22. 如請求項18之成分,其中該成分具有: (i) 0.1% w/v蛋白質溶液之體積的100%與200%之間的發泡量; (ii)每100公克至少7 g富含蛋白質之水黃皮成分的最低膠凝濃度;或 (iii)中性、無苦味; 或其(i)-(iii)之任何組合。
  23. 一種製造富含蛋白質之水黃皮組合物之方法,其包含: 製備水黃皮粉之含水漿料,其中使該水黃皮粉脫脂及去苦且具有(i)小於500 ppm水黃皮次素;或(ii)小於500 ppm水黃皮籽素;或(iii)小於500 ppm合併之水黃皮次素及水黃皮籽素; 將該含水漿料之pH調整至6與10之間的pH; 將該漿料分離成蛋白質液體部分及不可溶濕餅部分; 中和、濃縮該蛋白質液體部分及/或對其進行巴氏殺菌;及 乾燥該蛋白質液體部分以提供富含蛋白質之水黃皮組合物。
  24. 如請求項23之方法,其中該富含蛋白質之水黃皮組合物包含以乾重計至少50%之水黃皮蛋白質。
  25. 一種製造富含蛋白質之水黃皮成分之方法,其包含: 製備水黃皮粉之含水漿料,其中使該水黃皮粉脫脂及去苦且具有(i)小於500 ppm水黃皮次素;或(ii)小於500 ppm水黃皮籽素;或(iii)小於500 ppm合併之水黃皮次素及水黃皮籽素; 將該含水漿料之pH調整至6與10之間的pH, 將該漿料分離成蛋白質液體部分及不可溶濕餅部分; 自該蛋白質液體部分沈澱至少一部分水黃皮蛋白質以獲得經純化之水黃皮蛋白質固體; 中和該等經純化之水黃皮蛋白質固體且對其進行巴氏殺菌;及 乾燥該等經純化之水黃皮蛋白質固體以提供富含蛋白質之水黃皮成分。
  26. 如請求項25之方法,其進一步包含在乾燥之前洗滌該等水黃皮蛋白質固體。
  27. 如請求項25或26之方法,其中該沈澱步驟係藉由等電沈澱進行。
  28. 如請求項25至27中任一項之方法,其中該富含蛋白質之水黃皮成分包含以乾重計至少70%之水黃皮蛋白質。
  29. 如請求項25至28中任一項之方法,其進一步包含: 使水黃皮豆脫殼以產生經脫殼水黃皮豆;及 壓製該等經脫殼水黃皮豆,移除該等水黃皮豆中之至少一部分游離油,以製造該水黃皮粉,其中該水黃皮粉具有減少之脂肪含量。
  30. 如請求項29之方法,其進一步包含研磨該水黃皮粉。
  31. 如請求項25至30中任一項之方法,其進一步包含: 使水黃皮豆脫殼以產生經脫殼水黃皮豆; 壓製該等經脫殼水黃皮豆,移除該等水黃皮豆中之至少一部分游離油,以製造減脂水黃皮粉;及 將該減脂水黃皮粉與溶劑合併以製造該水黃皮粉,其中使該水黃皮粉脫脂及去苦。
  32. 如請求項31之方法,其進一步包含在與溶劑合併之前,研磨該減脂水黃皮粉。
  33. 如請求項31或32之方法,其中該溶劑包含乙酸乙酯、乙醇或其組合。
  34. 一種製造富含蛋白質之水黃皮成分之方法,其包含: 製備水黃皮粉之含水漿料; 將該含水漿料之pH調整至6與10之間的pH, 將該漿料分離成蛋白質液體部分及不可溶濕餅部分; 使該蛋白質液體部分通過膜系統以獲得包含水黃皮蛋白質之滲餘物; 視情況洗滌、中和該滲餘物及/或對其進行巴氏殺菌;及 乾燥該滲餘物以提供富含蛋白質之水黃皮成分。
  35. 如請求項34之方法,其中該富含蛋白質之水黃皮成分包含以乾重計至少70%之水黃皮蛋白質。
  36. 如請求項34或請求項35之方法,其進一步包含: 使水黃皮豆脫殼以產生經脫殼水黃皮豆;及 壓製該等經脫殼水黃皮豆,移除該等水黃皮豆中之至少一部分游離油,以製造該水黃皮粉,其中該水黃皮粉具有減少之脂肪含量。
  37. 如請求項36之方法,其進一步包含研磨該水黃皮粉。
  38. 如請求項34至36中任一項之方法,其進一步包含: 使水黃皮豆脫殼以產生經脫殼水黃皮豆; 壓製該等經脫殼水黃皮豆,移除該等水黃皮豆中之至少一部分游離油,以製造減脂水黃皮粉;及 將該減脂水黃皮粉與溶劑合併以製造該水黃皮粉,其中使該水黃皮粉脫脂及去苦。
  39. 如請求項38之方法,其進一步包含在與溶劑合併之前研磨該減脂水黃皮粉。
  40. 一種製造富含蛋白質之水黃皮組合物之方法,其包含: 製備水黃皮粉之含水漿料; 將該含水漿料之pH調整至4與5之間的pH以獲得水黃皮蛋白質固體; 洗滌、中和經純化之蛋白質固體且對其進行巴氏殺菌;及 乾燥該等經純化之水黃皮蛋白質固體以提供富含蛋白質之水黃皮組合物。
  41. 一種富含蛋白質之水黃皮成分,其根據如請求項23至40中任一項之方法製造。
  42. 飲品、膳食補充劑產品或其他產品,其包含:如請求項1至22及41中任一項之富含蛋白質之水黃皮成分。
  43. 如請求項42之產品,其中該產品為烘烤食品、蛋白質補充品、蛋白棒或非乳飲料。
  44. 如請求項42之產品,其中該產品為醫療食品、嬰兒配方食品、化妝品或藥品。
  45. 如請求項42之產品,其中該產品為飲品、乳製品替代品、肉類替代品或蛋代用品。
  46. 如請求項45之產品,其中該飲品為水果冰沙、代餐飲料、蛋白質飲料、速溶飲品(instant shake)。
  47. 如請求項42、45及46中任一項之產品,其中該產品為每份包含至少20 g富含蛋白質之水黃皮成分的飲品。
  48. 如請求項45之產品,其中該乳製品替代品為非乳奶、非乳乳酪、非乳咖啡加白或奶精、非乳優格、非乳希臘優格、非乳可飲用優格。
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