本發明可藉由參考下列本發明之較佳具體實施例及本文中所包括的實施例之詳細描述而更容易理解。亦應理解的是，本文中所使用的術語係僅用於描述特定具體實施例之目的，且不意欲為限制性。進一步理解的是，除非本文中具體定義，否則本文中所使用的術語應給予其在相關技術領域中已知的傳統意義。
如本文中所使用，在描述本發明之上下文中(尤其是在以下申請專利範圍之上下文中)之單數形式「一(a/an)」及「該(the)」及類似的參考字應被解讀為涵蓋單數及複數，除非本文中另有指明或上下文明顯地矛盾。例如，「一(an)」賦形劑包括一或多個賦形劑。其中複數形式係用於化合物、鹽類、及類似者，此亦被認為意指單一化合物、鹽、或類似者。
如本文中所使用，術語「約(about)」當用於修飾數值定義的參數(例如，ALK抑制劑或CDK抑制劑之劑量)時意指參數可在該參數所述的數值之下或之上變化多達10%(±10%)。例如，約5 mg之劑量可在4.5 mg與5.5 mg之間變化。
術語「包含(comprising)」及「包括(including)」在本文中係以彼等的開放式及非限制性意義使用，除非另有指示。
本文中所述的發明可在沒有任何本文中未具體揭示的(多種)要素之情況下實施。因此，例如，在本文中之各情況下，術語「包含(comprising)」、「基本上由...組成(consisting essentially of)」及「由...組成(consisting of)]中之任一者可用其他兩個術語中之任一者代替。
本文中所使用的縮寫如下：DMSO(二甲亞碸)；FBS (胎牛血清)；RPMI(洛斯維派克紀念研究所(Roswell Park Memorial Institute))；TRGD(腫瘤再生長延遲(tumor re-growth delay))；RECIST(實體腫瘤反應評估準則(response evaluation criteria in solid tumors))；ALKi(ALK抑制劑)；mpk(mg/kg或每公斤個體體重之mg藥物)；w/w(重量/重量)；wk(週)；x(次)；po(口服)；q.d.或QD(每日一次)；b.i.d.或BID(每日兩次)；t.i.d.或TID(每日三次)；q.i.d.或QID(每日四次)；qdx5(每日一次，持續五天)；q(每週)；lx/wk(每週一次)；Q2W(每兩週一個劑量)；Q3W(每三週一個劑量)；Q4W(每四週一個劑量)；BWL(體重減輕)；SD(標準偏差)；CR(完全反應)；CRc，複合性完全緩解(composite complete remission)；CRi(伴有血液恢復不完全的完全緩解(complete remission with incomplete hematologic recovery))；CRp(伴有血小板恢復不完全的完全緩解(complete remission with incomplete platelet recovery))；PR(部分反應(partial response))；OR(總反應(overall response)，例如完全及部分反應之總和)；DOR(反應持續性(durability of response))；OS(總存活期(overall survival))；PD(進展性疾病(progressive disease))；DFS(無病存活期(disease free survival))；TGI(腫瘤生長抑制(tumor growth inhibition))；PFS(無進展存活期(progression
-
free survival))；QOL(生活品質(quality of life))；TTP(進展時間(time-to-progression))；及SD(穩定疾病(stable disease))。
如本文中所使用，術語(包括，但不限於)「藥物(drug)」、「劑(agent)」、「組分(component)」、「化合物(compound)」、「物質(substance)」、「靶向劑(targeted agent)」、「靶向治療劑(targeted therapeutic agent)」、「治療劑(therapeutic agent)」、及「藥劑(medicament)」可互換使用以指本發明之化合物，具體而言ALK抑制劑及CDK抑制劑。
術語「投予(administer/administering/administration)」當應用於動物、人類、實驗個體、細胞、組織、器官或生物流體時係指外源性藥品、治療劑或診斷劑、化合物、顆粒、及/或組成物與動物、人類、實驗個體、細胞、組織、器官或生物流體之接觸、植入、吸收、攝食、注射、吸入、或引入。細胞之治療涵蓋試劑與細胞之接觸，以及試劑與流體之接觸，其中該流體與該細胞接觸。「投予」或「治療」亦意指例如藉由試劑、診斷、結合化合物、或藉由另一細胞的細胞之
試管內
及
擬體內
治療。
術語「異常細胞生長(abnormal cell growth)」及「過度增殖性病症(hyperproliferative disorder)」在此申請案中可互換使用。如本文中所使用之「異常細胞生長」，除非另有指示，否則係指與正常調控機制(例如接觸抑制損失)無關的細胞生長。異常細胞生長可為良性(非癌性)、或惡性(癌性)。
「病症(disorder)」係任何來自用本發明之化合物治療而受益的病況。此包括慢性及急性病症或疾病，包括那些使個體易患所討論病症的病理狀況。
術語「癌症(cancer)」、「癌性cancerous)」、「惡性(malignant)」係指或描述在哺乳動物中一般由細胞生長失調來表徵之任何生理病況。如本文中所使用，「癌症」係指由異常細胞生長所引起的任何惡性及/或侵襲性生長或腫瘤。如本文中所使用，「癌症」係指以形成其的細胞類型命名之實體腫瘤、血液癌、骨髓癌、或淋巴系統癌。實體腫瘤之實施例包括，但不限於肉瘤及癌。血液癌症之實施例包括，但不限於白血病、淋巴瘤及骨髓瘤。
術語「癌症(cancer)」包括，但不限於起源於身體內之特定部位的原發性癌、自開始之地方向身體之其他部分擴散的轉移性癌、在緩解之後自原始原發性癌再發生(recurrence)、及第二原發性癌，此係在既往癌症病史與後面一種癌症不同類型的患者內之新型原發性癌。
術語「非小細胞肺癌(non-small cell lung cancer)」或「NSCLC」係其中惡性細胞形成於肺組織中的癌症。
非小細胞肺癌有幾種類型。非小細胞肺癌之各類型具有不同種類的癌細胞。各類型之癌細胞以不同方式生長及擴散。
非小細胞肺癌之類型以在癌症中所發現的細胞種類及該細胞在顯微鏡下之外觀命名。
鱗狀細胞癌：形成於肺內層之薄、扁平細胞中之癌症。此亦稱為表皮樣癌。
大細胞癌：可始於幾種類型的大細胞中之癌症。
腺癌：始於沿肺泡排列並製造諸如黏液的細胞中之癌症。
其他較少見的非小細胞肺癌類型係：多形性，類癌瘤、唾液腺癌、及未分類癌。「ALK陽性」、「間變性淋巴瘤激酶陽性」、或「ALK
+
」肺癌係一種非小細胞肺癌(NSCLC)類型，其中癌細胞在間變性淋巴瘤激酶(ALK)基因中具有突變。該突變係基因重排—ALK與另一基因(棘皮動物微小管相關的類蛋白4 (EML4))之異常融合。
術語「復發(relapse)」應理解為癌症之恢復或在一段時期的改善之後有癌症之徵象及症狀。
術語「患者(patient)」或「個體(subject)」係指需要治療或參予臨床試驗、流行病學研究、或用作對照的任何個體，包括人類及非人類，包括家畜個體(veterinary subject)諸如牛、馬、狗、及貓。在較佳具體實施例中，該個體係人類且可稱為患者。在所屬醫學技術領域中具有通常知識者能夠容易地識別出罹患癌症，特別是NSCLC晚期或轉移性肺癌並有需要治療的個體患者。
如本文中所使用之術語「治療(treat/treating)」，除非另有指示，否則意指反轉、減輕、抑制該術語適用的病症或病況或該病症或病況之一或多種症狀之進展、或預防該術語適用的病症或病況或該病症或病況之一或多種症狀。特定而言，如本文中所使用之術語「治療(treat/treating)」癌症意指將根據本發明之組合療法投予至患有癌症、或經診斷患有癌症之個體，以達成至少一種正向治療效果，諸如例如癌細胞數目降低；腫瘤大小降低；癌細胞浸潤入周邊器官速率降低；或腫瘤轉移或腫瘤生長速率降低；逆轉、減輕、抑制該術語適用的病症或病況或該病症或病況之一或多種症狀之進展；或預防該術語適用的病症或病況或該病症或病況之一或多種症狀。如本文所使用之術語「治療(treatment/treat/treating)」除非另有指示，否則係指如剛才上文所定義之「治療(treating)」的治療行為。術語「治療(treating)」亦包括個體之輔助性及新輔助性(neo-adjuvant)治療。
出於本發明之目的，有益或所欲的臨床結果包括，但不限於下列中之一或多者：降低(或破壞)贅生細胞或癌性細胞之增殖、抑制轉移或贅生細胞、縮小或減少腫瘤大小、癌症之緩解、減少源於癌症的症狀、增加患有癌症者之生活品質、減少治療癌症所需的其他用藥之劑量、延遲癌症之進展、治癒癌症、克服一或多種癌症之抗性機制、及/或延長患者癌症之存活期。癌症之正向治療效果可以許多方式測量(參見例如W. A. Weber, Assessing tumor response to therapy, J. Nucl.Med., 2009, 50 Suppl. 1:1S-10S。例如，關於腫瘤生長抑制(tumor growth inhibition (T/C))，根據國家癌症研究院(NCI)標準，T/C小於或等於42%係抗腫瘤活性之最小水平。T/C ＜10%被認為係高抗腫瘤活性水平，且T/C (%) =經治療之中位數腫瘤體積/對照之中位數腫瘤體積x 100。
本發明之治療功效可藉由在評估癌症中常用的各種終點來測量。在一些具體實施例中，藉由本發明之組合所達成的治療係參考下列中之任一者來定義：部分反應(PR)、完全反應(CR)、總反應(OR)、無進展存活期(PFS)、無病存活期(DFS)、總存活期(OS)、進展時間(TTP)、反應持續性(DOR)、客觀反應率(objective response rate, ORR)、腫瘤生長抑制(TGI)、血漿及/或尿液標記、酶抑制及/或受體狀態、基因表現之變化及/或生活品質(QOL)。PR係指一或多種腫瘤或病灶大小之減少、或體內癌症程度之減少、對治療反應之減少。例如，在一些具體實施例中，PR係指目標病灶之最長直徑總和(the sum of the longest diameter, SLD)之至少30%減少，此係以基線SLD作為參考。
評定係基於患者之各種檢查(CT掃描、MRI、超音波、PET掃描、骨掃描、身體檢查)。CR意指疾病之所有已知部位之消失，而在針對治療中的腫瘤類型的一段適當時間內無任何新的疾病之發展。評定係基於諸如上述者之各種檢查。OR經定義為完全反應及部分反應之總和。PFS，亦稱為「腫瘤進展時間(time to tumor progression)」，指示在治療期間及治療之後癌症不會生長的時間長度，且包括患者已經歷的CR或PR的時間量，以及患者已經歷的穩定疾病(SD)的時間量。PFS可表示為持續時間或表示為在診斷之後的給定時間下存活且無進展的患者比例。PFS可包括患者已經歷的完全反應或部分反應的時間量，以及患者已經歷的穩定疾病的時間量。DFS係指在治療期間及治療之後患者保持無疾病的時間長度。OS係指相對於初始或未經治療的患者、或相對於對照治療程序的預期壽命之延長。在治療啟動之後或在初始診斷之後，監測存活至少約六個月、或至少約1年、或至少約2年、或至少約3年、或至少約4年、或至少約5年、或至少約10年等。TTP或DOR係指自治療起至腫瘤生長的持續時間，以原有腫瘤塊體大小之增加或新的腫瘤塊體之出現來測量。在某些具體實施例中，DOR意指自記錄由於藥物治療所致的腫瘤模型生長抑制之時間起至取得與治療前生長速率類似的恢復生長速率之時間。在一些具體實施例中，ORR係指CR及PR率之總和。在一些具體實施例中，對本發明之組合的反應為PR、CR、OR、PFS、DFS、OS、及/或TTP中之任一者，其係藉由使用所屬技術領域中已知的各種方法，諸如例如實體腫瘤之反應評估準則(Response Evaluation Criteria in Solid Tumors, RECIST) 1.1之反應準則來評定。
如本文中所使用，「進展性疾病」或「PD」係指目標病灶之SLD之至少20%增加，此係取自治療開始或存在一或多個新的病灶以來所記錄的最小SLD作為參考。
「持續反應(sustained response)」係指在停止治療之後在降低腫瘤生長上之持續效果。例如，腫瘤大小如相較於在藥劑投予階段開始時之大小可為相同或更小。在一些具體實施例中，該持續反應具有至少與該治療持續期相同、治療持續期之至少1.5x、2x、2.5x、或3x長度，或更久之持續期。
出於本發明之目的，「反應持續期(duration of response)」意指自記錄由於藥物治療所致的腫瘤模型生長抑制之時間起至取得與治療前生長速率類似的恢復生長速率之時間。
在一些具體實施例中，治療癌症之方法的抗癌效果，包括如本文中所使用之「客觀反應(objective response)」、「完全反應」、「部分反應」、「進展性疾病」、「穩定疾病」、「無進展存活期」、「反應持續期」，其係如由研究者使用RECIST v1.1(Eisenhauer等人之New response evaluation criteria in solid tumours: revised RECIST guideline, Eur J of Cancer 2009; 45(2):228-47)對除轉移性CRPC外之患有局部晚期或轉移性實體腫瘤的患者及使用RECIST v1.1及PCWG3(Scher 等人之Trial Design and Objectives for Castration-Resistant Prostate Cancer: Updated Recommendations from the Prostate Cancer Clinical Trials Working Group 3., J Clin Oncol 2016 Apr 20; 34(12): 1402-18)對患有轉移性CRPC的患者進行定義及評定。Eisenhauer等人之New response evaluation criteria in solid tumours: revised RECIST guideline, Eur J of Cancer 2009; 45(2): 228-47及Scher等人之Trial Design and Objectives for Castration-Resistant Prostate Cancer: Updated Recommendations From the Prostate Cancer Clinical Trials Working Group 3., J Clin Oncol 2016 Apr 20; 34(12): 1402-18之揭露係以引用方式全文併入本文中。
在一些具體實施例中，在藥物敏感H3122細胞中評定組合療法(例如勞拉替尼與帕博西尼的組合)對細胞生長及反應持續性(DOR)之效果。在存在藥物治療之情況下，生長的細胞之此再次出現代表獲得抗性或選擇預先存在的抗性細胞。其已在用EGFR抑制劑進行類似研究的文獻中有詳細記載(Engelman, J.等人之Allele dilution obscures detection of a biologically significant resistance mutation in EGFR-amplified lung cancer, Journal of Clinical Investigation, 2006, 2695-2706, vol. 10；Chmielecki, J.等人之Optimization of dosing for EGFR-mutant non-small cell lung cancer with evolutionary cancer modeling, Science Translational Medicine, 2011, 90ra59, vol. 3, no. 90)。對於出現指定細胞數量所需的時間代表在藥物治療下之DOR。
對治療癌症患者有效的本發明之組合之治療方案可根據諸如患者之疾病狀態、年齡、及體重的因素，及該療法在個體中誘發抗癌反應之能力而變化。雖然本發明之態樣中任一者之具體實施例可能無法有效地在每位個體中達成正向治療效果，但其應在統計學上顯著數量的個體中達成，如藉由所屬技術領域中已知的任何統計檢定諸如司徒頓t-檢定(Student’s t-test)、chi2-檢定根據曼及懷特尼(Mann and Whitney)之U-檢定、克拉斯卡-瓦立斯檢定(Kruskal-Wallis test)(H-檢定)、瓊克希爾-特普斯推特-檢定(Jonckheere-Terpstrat-test)及威爾康-檢定(Wilcon on-test)所測定。
術語「治療方案(treatment regimen)」、「給藥程序(dosing protocol)」、及「給藥方案(dosing regimen)」可互換使用，其係指投予本發明之組合中各劑之劑量及時序。
術語「改善(ameliorating)」意指在用本文中所述之組合治療後，如相較於未投予該組合，減輕或改善一或多種症狀。改善」亦包括縮短或降低症狀之持續期。
「醫藥組成物(pharmaceutical composition)」係指本文中所述的化合物中之一或多者、或其生理上/醫藥上可接受之鹽類、溶劑合物、水合物、或前藥與其他化學化合物(諸如生理上/醫藥上可接受之賦形劑)之混合物。該醫藥組成物之目的係促進化合物對至生物體之投予。
如本文中所使用，藥物、劑、化合物或醫藥組成物之「有效劑量(effective dosage)」、「有效量(effective amount)」、或「治療有效量(therapeutically effective amount)」係足以影響疾病、其併發症、及在疾病發展期間所呈現的中間病理表型的任何一或多種有益或期望(包括)的生化學、組織學及/或行為學症狀之量。就治療用途而言，「治療有效量」係指將在一定程度上減輕所治療的病症中之一或多種症狀的所要投予的化合物的量。關於癌症之治療，治療有效量係指具有以下效果之量(1)降低腫瘤大小、(2)抑制(亦即，在一定程度上減緩，較佳地停止)腫瘤轉移、(3)在一定程度上抑制(亦即，在一定程度上減緩，較佳地停止)腫瘤生長或腫瘤侵襲力、(4)在一定程度上減輕(或較佳地，消除)與癌症相關的一或多種徵象或症狀、(5)減少治療疾病所需的其他用藥之劑量、及/或(6)增強另一用藥之效果、及/或(7)延遲患者之疾病進展。
劑之有效量包括「預防有效量(prophylactically effective amount)」，其係將劑當單獨或呈與其他抗癌劑組合投予至處於發展癌症風險中之個體(例如患有潛在惡性病況(pre-malignant condition)之個體)中或苦於癌症之再發生之個體中時，抑制癌症之發展或再發生之任何量。在較佳具體實施例中，預防有效量完全預防癌症之發展或再發生。「抑制」癌症之發展或再發生意指達成至少一種正向治療效果，諸如例如，減輕癌症的發展或再發生之可能性、或完全預防癌症之發展或再發生。
有效劑量可以一或多次投予來投予。出於本發明之目的，劑、藥物、化合物、或醫藥組成物之有效劑量係足以直接或間接地完成預防性或治療性治療之量。如臨床背景所理解，劑、藥物、化合物、或醫藥組成物之有效劑量可與或可不與另一藥物、化合物或醫藥組合物聯合來達成。
如本文中所使用之「低劑量(low-dose amount)」，係指劑之劑量或量低於臨床設置中一般所使用的劑量或量。
術語「腫瘤(tumor)」在其應用於經診斷患有、或懷疑患有癌症的個體時係指任何大小之惡性或潛在惡性贅瘤(neoplasm)或組織塊體且包括原發性腫瘤及繼發性贅瘤。實體腫瘤係組織之異常生長或塊體，通常不含囊腫或液體區域。實體腫瘤之實施例係肉瘤、癌、及淋巴瘤。白血病(血液癌)大致上不會形成實體腫瘤(國家癌症學會，癌症術語詞典(National Cancer Institute, Dictionary of Cancer Terms))。
「腫瘤負載(tumor burden)」或「腫瘤負荷(tumor load)」係指分佈在全身的腫瘤物質之總量。腫瘤負載係指全身(包括淋巴結及骨髓)的癌細胞之總數或腫瘤(群)之總大小。腫瘤負載可藉由所屬技術領域中已知的各種方法測定(諸如例如使用測徑器)、或在體內的同時使用造影技術，例如超音波、骨掃描、電腦斷層攝影(CT)、或磁共振造影(MRI)掃描測定。
術語「腫瘤大小(tumor size)」係指腫瘤之總大小，其可以腫瘤之長度及寬度來測量。腫瘤大小可藉由所屬技術領域中已知的各種方法測定，諸如例如，自個體取出後測量(多個)腫瘤之尺寸(例如使用測徑器)、或在體內的同時使用造影技術，例如骨掃描、超音波、CR或MRI掃描測定。
如本文中所使用，術語「組合(combination)」或「組合療法(combination therapy)』係指將本發明之組合療法之各治療劑單獨或呈醫藥組成物或藥劑之形式，依序、同時或並行投予。例如，藉由混合或組合根據本發明之ALK抑制劑及CDK抑制劑(包括固定及非固定組合)投予本發明之組合療法之各治療劑。如本文中所使用之術語組合包括本文中所述的任何二或更多種劑，例如本文中所述的任何ALK抑制劑與本文中所述的任何CDK抑制劑之組合。
如本文中所使用，術語「依序(sequential/ sequentially)」係指將本發明之組合療法之各治療劑單獨或於藥劑中一個接一個投予，其中各治療劑可以任何順序投予。當組合療法中之治療劑係呈不同劑型時，例如一個劑係錠劑而另一劑係無菌液體，且/或該等劑係根據不同給藥時程投予，例如一個劑係每天投予，而第二劑較不常投予(諸如每週)時，依序投予可為特別有用的。
如本文中所使用，術語「同時(simultaneous/ simultaneously)」係指將本發明之組合療法之各治療劑在相同藥劑中投予。
如本文中所使用，術語「並行(concurrently)」係指將本發明之組合療法中之各治療劑單獨或呈分開的藥劑投予，其中第二治療劑係在第一治療劑之後立即投予，但治療劑可以任何順序投予。在較佳具體實施例中，治療劑係並行投予。
如所屬技術領域中具有通常知識者將理解，在個體治療之不同階段可將組合療法有用地投予至個體。
「固定劑量組合(fixed dose combination)」或「固定組合(fixed combination)」意指本發明之ALK抑制劑及CDK抑制劑(例如CDK4/6抑制劑或CDK2/4/6抑制劑及ALK抑制劑)二者呈單一醫藥組成物同時投予至患者。
「非固定劑量組合(non-fixed dose combination)」或「非固定組合(non-fixed combination)」意指根據本所屬技術領域中具有通常知識者已知的標準醫藥規範(standard pharmaceutical practice)將本發明之ALK抑制劑及CDK抑制劑(例如CDK4/6抑制劑或CDK2/4/6抑制劑及ALK抑制劑)調配成分開的醫藥組成物，使得其可經由相同或不同的投予途徑並在相同或不同投予排程下依序、同時或並行投予。在一個具體實施例中，此種投予係在允許治療劑顯示協作(例如協同)作用的時間間隔內進行。
本發明之劑可完全分開或呈一或多種分開的組成物之形式投予。例如，該等劑可在療程期間之不同時間(以按時間錯開之方式，尤其是特定順序(sequence-specific)之方式)以組合療法有效治療癌症的此類時間間隔分開給予。
如本文中所使用之術語「晚期(advanced)」，在其與癌症相關時，包括局部晚期(非轉移性)疾病及轉移性疾病。
本文中所定義之術語「間變性淋巴瘤激酶抑制劑(anaplastic lymphoma kinase inhibitor)」或「ALK抑制劑(ALK inhibitor)」係指靶向、減少或抑制間變性淋巴瘤激酶(ALK)之合成或生物活性的化合物或生物劑。
在具體實施例中，本發明之ALK抑制劑係選自由下列所組成之群組：勞拉替尼、克唑替尼、色瑞替尼、艾樂替尼、布加替尼、百利替尼、恩沙替尼、恩曲替尼、CEP-37440、及NVP-TAE684、或其醫藥上可接受之鹽。
周期蛋白-依賴型激酶(CDK)及相關的絲胺酸/蘇胺酸蛋白激酶係重要的細胞酶，其在調控細胞分裂及增殖中執行基本功能。可用於本發明中之CDK抑制劑包括CDK4/6抑制劑及CDK2/4/6抑制劑。此類化合物可為泛CDK抑制劑，其抑制多種CDK，或可選擇性地抑制CDK2、CDK4及/或CDK6。CDK抑制劑可能具有針對除了CDK之外的目標之活性。此類化合物可使用常規用於測量CDK或其他蛋白激酶之抑制的標準分析來鑑定。參見例如，Fry等人之Cell cycle and biochemical effects of PD 0183812. A potent inhibitor of the cyclin D-dependent kinases CDK4 and CDK6, J. Biol. Chem. (2001), 276: 16617-16623。一般CDK抑制劑在此類分析中具有小於1 μM、較佳地小於100 nM、且更佳地20 nM之IC
50
值。
CDK抑制劑之發展已在文獻中回顧。例如，參見Sánchez-Martínez等人之Cyclin dependent kinase (CDK) inhibitors as anticancer drugs, Bioorg. Med. Chem. Lett. (2015) 25: 3420-3435(及其中引用的參考資料)。
許多CDK4/6抑制劑已被批准或正在臨床發展中，包括：帕博西尼(亦稱為PD-0332991)、利博西尼(亦稱為LEE-011)、艾貝馬西尼(亦稱為LY2835219)、G1T38、提拉西尼(trilaciclib)(亦稱為GTI128)及SHR6390。具有CDK4活性之泛CDK抑制劑包括，但不限於AT7519、JNJ-7706621、P276-00、R547(亦稱為RO-4584820)、羅尼西尼(roniciclib)(亦稱為BAY1000394)、RGB-286638、及夫拉平度(flavopiridol)(阿伏昔地(alvocidib))。此類化合物、或彼等醫藥上可接受之鹽類可用於本發明中。
在一些具體實施例中，該CDK抑制劑係選自由下列所組成之群組的CDK4/6抑制劑：帕博西尼、利博西尼、艾貝馬西尼、G1T38、提拉西尼、及SHR6390、或其醫藥上可接受之鹽。在其他具體實施例中，該CDK抑制劑係選自由下列所組成之群組的CDK4/6抑制劑：帕博西尼、利博西尼、艾貝馬西尼、或其醫藥上可接受之鹽。在特定具體實施例中，其中該CDK抑制劑係CDK4/6抑制劑，且其中該CDK4/6抑制劑係帕博西尼、或其醫藥上可接受之鹽。
在其他具體實施例中，該CDK4/6抑制劑係利博西尼、或其醫藥上可接受之鹽。 在其他具體實施例中，該CDK4/6抑制劑係艾貝馬西尼、或其醫藥上可接受之鹽。在進一步具體實施例中，該CDK4/6抑制劑係G1T38、或其醫藥上可接受之鹽。
在特定具體實施例中，本發明之CDK4/6抑制劑係帕博西尼。除非另有指示，否則帕博西尼(本文中亦稱為「palbo/Palbo」)係指6-乙醯基-8-環戊基-5-甲基-2-(5-哌
-1-基-吡啶-2-基胺基)-8
H
-吡啶并[2,3-
d
]嘧啶-7-酮、或其醫藥上可接受之鹽。
在另一具體實施例中，本發明之CDK抑制劑係CDK2/4/6抑制劑。在一個此種具體實施例中，該CDK2/4/6抑制劑係6-(二氟甲基)-8-((1R,2R)-2-羥基-2-甲基環戊基)-2-(1-(甲基磺醯基)哌啶-4-基胺基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(PF-06873600)、或其醫藥上可接受之鹽。
除非另有指示，否則本文中所有對CDK抑制劑及ALK抑制劑的引用包括對其鹽、溶劑合物、水合物、及複合物的引用，並包括其非晶形及多晶形形式、立體異構物、及經同位素標記之型式。
進一步，可用於本發明之CDK抑制劑及ALK抑制劑可以未溶劑合形式及溶劑合形式二者存在。當溶劑或水緊密結合時，複合物將具有與濕度無關之良好界定的化學計量。然而，當溶劑或水弱結合時(如通道溶劑合物及吸濕性化合物)，水/溶劑含量將視濕度及乾燥條件而定。在此類情況下，非化學計量將成常態。本文中所使用之術語「溶劑合物(solvate)」用於描述包含本發明之化合物及一或多個醫藥上可接受之溶劑分子(例如乙醇)之分子複合物。當溶劑係水時，採用術語「水合物(hydrate)」。根據本發明之醫藥上可接受之溶劑合物包括水合物及溶劑合物，其中結晶之溶劑可為經同位素取代，例如D
2
O、d
6
-丙酮及d
6
-DMSO。
可用於本發明之CDK抑制劑及ALK抑制劑可作為結晶或非晶形產品、或其混合物使用。其可例如藉由諸如沉澱、結晶、冷凍乾燥、噴霧乾燥、或蒸發乾燥之方法，作為固體置入物(solid plug)、粉末、或膜來獲得。微波或射頻乾燥可供此目的使用。
可用於本發明中之CDK抑制劑及ALK抑制劑可呈醫藥上可接受之鹽類之形式存在，諸如例如酸加成鹽或鹼加成鹽。
「醫藥上可接受(pharmaceutically acceptable)」係指在合理的醫學判斷範疇內，適合用於與個體(例如哺乳動物或人類)之組織接觸而無過度毒性、刺激過敏反應、及與合理的效益/風險比相稱之其他問題併發症的化合物、材料、生物劑、組成物、及/或劑型者。
如本文中所使用，術語「醫藥上可接受之鹽(pharmaceutically acceptable salt)係指保留親體化合物之生物有效性及性質的鹽類者。如本文中所使用之術語「醫藥上可接受之鹽(pharmaceutically acceptable salt)」，除非另有指示，否則包括可能存在於本文中所揭示的式之化合物中之酸性或鹼性基團之鹽類。例如，本質上鹼性的本發明之化合物可能能夠與各種無機及有機酸形成各式各樣的鹽類。可用於製備此類鹼性化合物之醫藥上可接受之酸加成鹽的酸為形成無毒酸加成鹽類(亦即包含藥理上可接受之陰離子之鹽類)者，該等無毒酸加成鹽類諸如鹽酸鹽、氫溴酸鹽、氫碘酸鹽、硝酸鹽、硫酸鹽、硫酸氫鹽、亞硫酸氫鹽、磷酸鹽、酸式磷酸鹽、異菸鹼酸鹽、乙酸鹽、乳酸鹽、水楊酸鹽、檸檬酸鹽、酒石酸鹽、泛酸鹽、酒石酸氫鹽、抗壞血酸鹽、丁二酸鹽、順丁烯二酸鹽、龍膽酸鹽(gentisinate)、反丁烯二酸鹽、葡萄糖酸鹽、葡萄糖醛酸鹽(glucuronate)、蔗糖酸鹽、甲酸鹽、苯甲酸鹽、麩胺酸鹽、甲磺酸鹽、乙磺酸鹽、苯磺酸鹽、對甲苯磺酸鹽、及雙羥萘酸鹽(pamoate)[亦即、1,1’-亞甲基-雙-(2-羥基-3-萘甲酸鹽)]鹽類。鹽類之實施例包括，但不限於乙酸鹽、丙烯酸鹽、苯磺酸鹽、苯甲酸鹽(諸如氯苯甲酸鹽、甲基苯甲酸鹽、二硝基苯甲酸鹽、羥基苯甲酸鹽、及甲氧基苯甲酸鹽)、碳酸氫鹽、酒石酸氫鹽、硼酸鹽、氫溴酸鹽、丁炔-1,4-二酸鹽(butyne-1,4-dioate)、依地酸鈣(calcium edetate)、樟腦磺酸鹽(camsylate)、碳酸鹽、氯化物、己酸鹽、辛酸鹽、棒酸鹽(clavulanate)、檸檬酸鹽、癸酸鹽(decanoate)、二鹽酸鹽、磷酸二氫鹽、依地酸鹽、乙二磺酸鹽(edislyate)、丙酸酯十二烷硫酸鹽(estolate)、乙磺酸鹽(esylate)、丁二酸乙鹽、甲酸鹽、反丁烯二酸鹽、葡萄庚酸鹽(gluceptate)、葡萄糖酸鹽、麩胺酸鹽、乙醇酸鹽、對羥乙醯胺基苯砷酸鹽(glycollylarsanilate)、庚酸鹽、己炔-1,6-二酸鹽、己基間苯二酚酸鹽(hexylresorcinate)、海巴明鹽(hydrabamine)、氫溴酸鹽、鹽酸鹽、γ-羥基丁酸鹽、碘化物、異丁酸鹽、異硫磺酸鹽(isothionate)、乳酸鹽、乳糖酸鹽、月桂酸鹽、蘋果酸鹽、順丁烯二酸鹽、丙二酸鹽、杏仁酸鹽、甲磺酸鹽、偏磷酸鹽、甲基硫酸鹽、單氫磷酸鹽(monohydrogenphosphate)、黏酸鹽(mucate)、萘-1-磺酸鹽(naphthalene-1-sulfonate)、萘-2-磺酸鹽(naphthalene-2-sulfonate)、硝酸鹽、油酸鹽、草酸鹽、雙羥萘酸鹽(恩波酸鹽(embonate))、棕櫚酸鹽、泛酸鹽、苯乙酸鹽、苯丁酸鹽、苯丙酸鹽、苯二甲酸鹽、磷酸鹽/二磷酸鹽、聚半乳糖醛酸鹽(polygalacturonate)、丙磺酸鹽(propanesulfonate)、丙酸鹽、丙炔酸鹽(propiolate)、焦磷酸鹽、焦硫酸鹽、水楊酸鹽、硬脂酸鹽、次乙酸鹽(subacetate)、辛二酸鹽(suberate)、丁二酸鹽、硫酸鹽、磺酸鹽、亞硫酸鹽、單寧酸鹽、酒石酸鹽、茶氯酸鹽(teoclate)、甲苯磺酸鹽、三乙基碘化物、及戊酸鹽(valerate salt)。替代地，本質上酸性的有用化合物可能能夠與各種藥理上可接受之陽離子形成鹼鹽。此類鹽類之實施例包括鹼金屬及鹼土金屬鹽，且特別是鈉鹽及鉀鹽。此等鹽類可藉由習知技術製備。可用作試劑以製備本發明之醫藥上可接受之鹼鹽的化學鹼包括與本文中之酸性化合物形成無毒性鹼鹽者。可用作試劑以製備本質上為酸性的本發明之化合物之醫藥上可接受之鹼鹽的化學鹼為與此類化合物形成無毒性鹼鹽者。此類無毒性鹼鹽包括，但不限於衍生自此類藥理上可接受之陽離子諸如鹼金屬陽離子(例如，鉀及鈉)及鹼土金屬陽離子(例如，鈣及鎂)、銨或水溶性胺加成鹽諸如N-甲基葡萄糖胺-(葡甲胺(meglumine))、及低烷醇銨(lower alkanolammonium)、及其他醫藥上可接受之有機胺之鹼鹽。亦可形成酸及鹼之半鹽(hemisalt)，例如，半硫酸鹽(hemisulphate)及半鈣鹽(hemicalcium)。適當鹽類之回顧，參見Handbook of Pharmaceutical Salts：Properties, Selection, and Use by Stahl and Wermuth (Wiley-VCH, 2002)。用於製造醫藥上可接受之鹽類之方法係所屬技術領域中具有通常知識者已知的。本文中所述的化合物之醫藥上可接受之鹽類包括其酸加成鹽及鹼加成鹽。適當鹽類之回顧，參見Handbook of Pharmaceutical Salts：Properties, Selection, and Use by Stahl and Wermuth (Wiley-VCH, 2002)。用於製造本文中所述的化合物之醫藥上可接受之鹽類之方法係所屬技術領域中具有通常知識者已知的。
包含一或多個不對稱碳原子之本文中所述的化合物可作為二或更多種立體異構物存在。當本文中所述的化合物包含烯基或伸烯基時，幾何順式/反式(或Z/E)異構物係可能的。當結構異構物經由低能量障壁而可互相轉換(interconvertible)時，可發生互變異構的異構性(tautomeric isomerism)(「互變異構性(tautomerism)」。此在包含例如亞胺基、酮基、或肟基之本文中所述的化合物中可採取質子互變異構性(proton tautomerism)之形式，或在包含芳族部份的化合物中可採取所謂價互變異構性(valence tautomerism)之形式。 單一化合物可展現多於一種類型的異構性。
本文中所述的具體實施例之化合物包括本文中所述的化合物之所有立體異構物(例如，x
順式
及
反式
異構物)及所有光學異構物(例如，
R
及
S
鏡像異構物)，以及此類異構物之外消旋、非鏡像異構、及其他混合物。雖然所有立體異構物被涵蓋在吾等申請專利範圍之範圍內，但所屬技術領域中具有通常知識者將認可，特定立體異構物可為較佳的。
在一些具體實施例中，本文中所述的化合物可以數種互變異構形式存在，包括烯醇及亞胺形式、及酮及烯胺形式、及幾何異構物及其混合物。所有此類互變異構形式均包括在本發明具體實施例之範圍內。互變異構物作為溶液中之互變異構集合之混合物存在。在固體形式中，通常以一種互變異構物為主。儘管可描述一種互變異構物，但本發明具體實施例包括本發明化合物之所有互變異構物。
在本發明具體實施例之範圍內包括本文中所述的化合物之所有立體異構物、幾何異構物、及互變異構形式、包括展現多於一種異構性類型之化合物、及其一或多種之混合物。亦包括酸加成鹽或鹼鹽，其中相對離子係光學活性的(例如d-乳酸鹽或l-離胺酸)，或外消旋的(例如dl-酒石酸鹽或dl-精胺酸)。
本發明具體實施例亦包括本文中所述的化合物之阻轉異構物(atropisomer)。阻轉異構物係指可經分離成旋轉受限異構物(rotationally restricted isomer)的化合物。
順式/反式異構物可藉由所屬技術領域中具有通常知識者熟知的習知技術來分離，例如，層析法及分段結晶法。
用於製備/單離個別鏡像異構物之習知技術包括自合適的光學純前體之掌性合成或使用例如掌性高壓液相層析法(HPLC)拆分外消旋物(或鹽或衍生物之外消旋物)。
替代地，外消旋物(或外消旋前體)可與合適的光學活性化合物(例如，乙醇)反應，或在當本文中所述的化合物包含酸性或鹼性部份時之情況下，與酸或鹼(諸如1-苯乙胺或酒石酸)反應。所得非鏡像異構物混合物可藉由層析法及/或分段結晶法分離，並藉由熟習此技術者所熟知的方式將該等非鏡像異構物中之一或兩種轉化成相應純的(一或兩種)鏡像異構物。
如本文中所使用之術語「結晶(crystalline)」意指分子或外表面具有有規則地重複排列。晶形就熱力學穩定性、物理參數、x射線結構、及製備製程而言可有所不同。
術語「多晶形(polymorphs)」係指以特定晶體堆積排列之化合物(或其鹽、水合物、或溶劑合物)之晶形。所有多晶形具有相同的元素醫藥組成(elemental pharmaceutical composition)。不同晶形通常具有不同X射線繞射圖形、紅外線光譜、熔點、密度、硬度、晶體形狀、光學及電學性質、穩定度、及溶解度。再結晶溶劑、結晶之速率、儲存溫度、及其他因素可能引起一種晶種形式佔優勢。化合物之各種多晶形可藉由在不同條件下之結晶來製備。
術語「加和(additive)」用於意指兩種化合物、組分、或劑之組合之結果不大於各自的化合物、組分、或劑個別之總和。術語「加和(additive)」意指相對於個別使用各自的化合物、組分、或劑，所治療的疾病病況或病症沒有改善。
術語「協同(synergy/synergistic)」用於意指兩種化合物、組分、或劑之組合之結果大於各自的劑合起來之總和。術語「協同(synergy)/(synergistic)」意指相對於個別使用各自的化合物、組分、或劑，所治療的疾病病況或病症有改善。所治療的疾病病況或病症之此改善係「協同效果(synergistic effect)」。「協同量(synergistic amount)」係兩種化合物、組分、或劑之組合導致協同效果，如本文中所定義的「協同」之量。
在一或兩種組分之間測定協同交互作用，效果之最佳範圍及該效果之各組分之絕對劑量範圍可藉由在不同w/w比率範圍及不同劑量下將該等組分投予至有需要治療之患者來確定地測量。然而，觀察
試管內
模型或
體內
模型中之協同可預測在人類及其他物種中之效果，且本文中所述存在
試管內
模型或
體內
模型用以測量協同效果，且亦可使用此類研究之結果藉由應用藥物動力學/藥效動力學方法來預測在人類及其他物種中所需的有效劑量及血漿濃度比率範圍以及絕對劑量及血漿濃度。
根據本發明，將一定量的ALK抑制劑與一定量的CDK抑制劑組合，且該等量合起來有效治療癌症，特別是肺癌(例如，NSCLC)晚期或轉移性肺癌。該等合起來有效的量將在一定程度上減輕所治療的病症中之一或多種症狀。關於癌症之治療，「有效量」係指具有以下效果之量(1)降低腫瘤大小、(2)抑制(亦即，在一定程度上減緩，較佳地停止)腫瘤轉移出現、(3)在一定程度上抑制(亦即，在一定程度上減緩，較佳地停止)腫瘤生長或腫瘤侵襲力及/或(4)在一定程度上減輕(或較佳地，消除)與癌症相關的一或多種徵象或症狀。劑量及投予方案之治療或藥理有效性亦可表徵為誘導、增強、維持、或延長患有此等特定腫瘤的患者之疾病控制及/或總體存活期之能力，其可以疾病進展之前時間之延長來測量。本文中之有效量可根據諸如患者之疾病狀態、年齡、性別、及體重的因素以及抗體在個體中引發所欲反應之能力而變化。有效量亦係治療有益效果勝過治療之任何毒性或有害效果的量。
測定罹癌人之治療活性之方法包括測量存活終點及替代終點(surrogate endpoint)。存活時間可視所討論的腫瘤而定來合理評估。舉例而言，對於患有低度淋巴瘤的患者之存活率可在診斷後5或10年檢測，而存活或患有侵襲性疾病(諸如晚期之NSCLC)的患者則可能最好在診斷後6或12個月評估。
如本文中所使用之術語「第一線療法(first line therapy)」係指人經診斷具有癌症之後接受的第一種治療。
如本文中所使用之術語「抗性(resistant)」、「藥物抗性(drug resistant)」、「療法抗性(therapy-resistant)」係指包含不能夠藉由一或多種癌症治療進行治療的一或多種癌細胞之癌症。例如，在細胞經受治療之後，該(等)癌細胞可能仍能夠增殖。在特定具體實施例中，對一或多種細胞具有抗性的癌症治療係化學療法。在其他態樣中，抗性可為對一或多種癌症療法。在進一步具體實施例中，抗性細胞發展出對療法之抗性，而在替代的實施例中，抗性細胞始終對療法具有抗性或包含致使其不能夠對一或多種癌症治療敏感的生物或生理的表型或基因型。
抗藥性(drug resistance)可係固有的，意指疾病從未對該(等)藥物反應，或其可係後天性的，意指該疾病停止對該疾病先前已有反應的該(等)藥物反應。多重抗藥性(multidrug resistance, MDR)係特定類型的抗藥性，其由疾病對多於一種在功能上及/或結構上不相關的藥物具有交叉抗性來表徵。癌症領域中之多重抗藥性在下列文獻中有較詳細討論「Detoxification Mechanisms and Tumor Cell Resistance to Anticancer Drugs」 by Kuzmich and Tew, particularly section VII, The Multidrug-Resistant Phenotype (MDR), Medical Research Reviews, Vol. 11, No. 2, 185-217, (Section VII is at pp. 208-213) (1991)；及「Multidrug Resistance and Chemosensitization: Therapeutic Implications for Cancer Chemotherapy」by Georges, Sharom and Ling, Advances in Pharmacology, 1990, Vol. 21, 185-220 (1990)。
如本文中所使用之術語「第二線療法(second line therapy)」係指第一線療法之額外及隨後的療法，且在特定態樣中係不同於第一線療法。在其中人類腫瘤對第一線療法反應(亦即，完全或部分反應)之情況下，腫瘤被稱作「敏感(sensitive)」，且若腫瘤復發，則第二線治療可能涉及再次投予相同第一線活性療法。在其中腫瘤經第一線化學療法治療但腫瘤沒有反應(亦即，沒有消退)或繼續生長之情況下，若完成化學療法方案之90天內發生腫瘤生長，則此等腫瘤被視為「抗性(resistant)」。
如本文中所使用之術語「敏感(sensitive)」係指包含能夠經特定癌症治療治療的一或多種癌細胞之癌症。例如，在細胞經受治療之後該(等)細胞不能夠增殖。在特定具體實施例中，對某些癌症治療敏感的細胞被該治療殺滅。
治療方法、用途、組合及組成物
本發明之方法、用途、組合及組成物可用於治療癌症。
在一個態樣中，ALK抑制劑及CDK抑制劑之組合可用於治療患有對現行可用療法沒有反應或具有抗性的癌症的個體。本文中所提供的一些具體實施例導致下列效果中之一或多者：(1)改善功效；(2)抑制癌細胞增殖；(3)誘發癌細胞之凋亡；(4)抑制癌細胞侵襲力；(5)抑制癌細胞轉移；(6)抑制血管生成；(7)克服一或多種與癌症治療相關的抗性機制；及/或(8)降低現行可用癌症療法對此類療法有反應的個體之副作用。
在一個態樣中，本發明提供藉由在ALK陽性NSCLC患者中使用該等ALK抑制劑與CDK抑制劑的組合來改善ALK抑制劑之治療益處的潛在策略。
在另一態樣中，本發明提供治療個體之癌症之方法，其包含對個體投予ALK抑制劑及周期蛋白依賴型激酶(CDK)抑制劑，其中該CDK抑制劑係CDK4及CDK6之抑制劑(CDK4/6抑制劑)；或CDK2、CDK4、及CDK6之抑制劑(CDK2/4/6抑制劑)，且其中該等量合起來有效治療癌症。
在另一態樣中，本發明提供治療個體之癌症之方法，其包含對個體投予一定量的ALK抑制劑及一定量的周期蛋白依賴型激酶(CDK)抑制劑，其中該CDK抑制劑係CDK4及CDK6之抑制劑(CDK4/6抑制劑)；或CDK2、CDK4、及CDK6之抑制劑(CDK2/4/6抑制劑)，且其中ALK抑制劑及CDK抑制劑之量對於治療癌症有效。
在另一態樣中，本發明提供治療個體之癌症之方法，其包含對個體投予有效量的ALK抑制劑及有效量的周期蛋白依賴型激酶(CDK)抑制劑，其中該CDK抑制劑係CDK4及CDK6之抑制劑(CDK4/6抑制劑)；或CDK2、CDK4、及CDK6之抑制劑(CDK2/4/6抑制劑)。
在另一態樣中，本發明提供治療個體之癌症之方法，其包含對個體投予包含ALK抑制劑及周期蛋白依賴型激酶(CDK)抑制劑之組合療法，其中該CDK抑制劑係CDK4及CDK6之抑制劑(CDK4/6抑制劑)；或CDK2、CDK4、及CDK6之抑制劑(CDK2/4/6抑制劑)。
在另一態樣中，本發明提供治療個體之癌症之方法，其包含對個體投予包含一定量的ALK抑制劑及一定量的周期蛋白依賴型激酶(CDK)抑制劑之組合療法，其中CDK抑制劑係CDK4及CDK6之抑制劑(CDK4/6抑制劑)；或CDK2、CDK4、及CDK6之抑制劑(CDK2/4/6抑制劑)，且其中ALK抑制劑及CDK抑制劑之量合起來對於治療癌症有效。在另一態樣中，本發明提供治療個體之癌症之方法，其包含對個體投予包含有效量的ALK抑制劑及有效量的周期蛋白依賴型激酶(CDK)抑制劑，其中該CDK抑制劑係CDK4及CDK6之抑制劑(CDK4/6抑制劑)；或CDK2、CDK4、及CDK6之抑制劑(CDK2/4/6抑制劑)，且其中該等量合起來有效治療癌症。
在另一態樣中，本發明提供治療個體之癌症之方法，其包含對該個體投予有效量的ALK抑制劑、或其醫藥上可接受之鹽及有效量的CDK抑制劑、或其醫藥上可接受之鹽。在一些此態樣之具體實施例中，該ALK抑制劑係選自由下列所組成之群組：勞拉替尼、克唑替尼、色瑞替尼、艾樂替尼、布加替尼、百利替尼、恩沙替尼、恩曲替尼、CEP-37440、及NVP-TAE684、或其醫藥上可接受之鹽。 在特定具體實施例中，該ALK抑制劑係勞拉替尼、或其醫藥上可接受之鹽。
在另一態樣中，本發明提供治療個體之癌症之方法，其包含對個體投予有效量的勞拉替尼、或其醫藥上可接受之鹽及有效量的CDK4/6、或其醫藥上可接受之鹽。 在特定具體實施例中，該CDK4/6抑制劑係帕博西尼、或其醫藥上可接受之鹽。
在另一態樣中，本發明提供治療個體之癌症之方法，其包含對該個體投予有效量的勞拉替尼、或其醫藥上可接受之鹽及有效量的CDK2/4/6、或其醫藥上可接受之鹽。在特定具體實施例中，該CDK2/4/6抑制劑係6-(二氟甲基)-8-((1R,2R)-2-羥基-2-甲基環戊基)-2-(1-(甲基磺醯基)哌啶-4-基胺基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(PF-06873600)、或其醫藥上可接受之鹽。
在一個態樣中，本發明提供用於治療癌症之方法，其包含對個體投予一定量的勞拉替尼或其醫藥上可接受之鹽、及一定量的帕博西尼或其醫藥上可接受之鹽，其中該等量合起來有效治療癌症。
在一個態樣中，本發明提供用於治療癌症之方法，其包含對個體投予一定量的勞拉替尼或其醫藥上可接受之鹽、及一定量的6-(二氟甲基)-8-((1R,2R)-2-羥基-2-甲基環戊基)-2-(1-(甲基磺醯基)哌啶-4-基胺基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(PF-06873600)或其醫藥上可接受之鹽，其中該等量合起來有效治療癌症。
在另一態樣中，本發明提供包含ALK抑制劑及CDK抑制劑之組合，其中該CDK抑制劑係CDK4/6抑制劑、或CDK2/4/6抑制劑。
在另一態樣中，本發明提供包含ALK抑制劑及CDK抑制劑之組合供使用於治療個體之癌症，其中該CDK抑制劑係CDK4/6抑制劑、或CDK2/4/6抑制劑。在一些此類具體實施例中，該ALK抑制劑係勞拉替尼。
在另一態樣中，本發明提供以分開或合起來包含ALK抑制劑及CDK抑制劑之組合供使用於治療個體之癌症，其中CDK抑制劑係CDK4/6抑制劑、或CDK2/4/6抑制劑，且其中該ALK抑制劑及該CDK抑制劑之該使用係經由相同或不同的投予途徑並在相同或不同投予排程下依序、同時或並行來進行。
在更佳態樣中，本發明提供以分開或合起來包含第一劑及第二劑之組合供使用於治療個體之癌症，該第一劑係勞拉替尼或其醫藥上可接受之鹽，該第二劑係帕博西尼或醫藥上可接受之鹽、或6-(二氟甲基)-8-((1R,2R)-2-羥基-2-甲基環戊基)-2-(1-(甲基磺醯基)哌啶-4-基胺基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(PF-06873600)或其醫藥上可接受之鹽，其中兩種劑之使用係經由相同或不同的投予途徑並在相同或不同投予排程下依序、同時或並行來進行。
在另一態樣中，本發明提供包含ALK抑制劑及CDK抑制劑之組合供使用作為藥劑，其中該CDK抑制劑係CDK4/6抑制劑、或CDK2/4/6抑制劑。在一些此類具體實施例中，該ALK抑制劑係勞拉替尼。
在另一態樣中，本發明提供包含ALK抑制劑及CDK抑制劑之協同組合，其中該CDK抑制劑係CDK4/6抑制劑、或CDK2/4/6抑制劑。在一些此類具體實施例中，該ALK抑制劑係勞拉替尼。
在另一態樣中，本發明提供包含ALK抑制劑及CDK抑制劑之組合供使用於治療個體之癌症，其中該CDK抑制劑係CDK4/6抑制劑、或CDK2/4/6抑制劑。在一些此類具體實施例中，該ALK抑制劑係勞拉替尼。
在另一態樣中，本發明提供包含ALK抑制劑及CDK抑制劑之協同組合供使用作為藥劑，其中該CDK抑制劑係CDK4/6抑制劑、或CDK2/4/6抑制劑。
在另一態樣中，本發明提供包含勞拉替尼或其醫藥上可接受之鹽及CDK抑制劑之組合。在此態樣之一些具體實施例中，其中該CDK抑制劑係CDK4/6抑制劑，且其中該CDK4/6抑制劑係帕博西尼、或其醫藥上可接受之鹽。
在一些其他具體實施例中，其中該CDK抑制劑係CDK2/4/6抑制劑，且其中該CDK2/4/6抑制劑係6-(二氟甲基)-8-((1R,2R)-2-羥基-2-甲基環戊基)-2-(1-(甲基磺醯基)哌啶-4-基胺基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮、或其醫藥上可接受之鹽。
在另一態樣中，本發明提供以分開或合起來包含第一劑及第二劑之組合，該第一劑係勞拉替尼或其醫藥上可接受之鹽，該第二劑係帕博西尼或其醫藥上可接受之鹽、或6-(二氟甲基)-8-((1R,2R)-2-羥基-2-甲基環戊基)-2-(1-(甲基磺醯基)哌啶-4-基胺基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(PF-06873600)或其醫藥上可接受之鹽。
在另一態樣中，本發明提供包含勞拉替尼或其醫藥上可接受之鹽及CDK抑制劑之協同組合。在此態樣之一些具體實施例中，其中該CDK抑制劑係CDK4/6抑制劑，且其中該CDK4/6抑制劑係帕博西尼、或其醫藥上可接受之鹽。
在一些其他具體實施例中，其中該CDK抑制劑係CDK2/4/6抑制劑，且其中該CDK2/4/6抑制劑係6-(二氟甲基)-8-((1R,2R)-2-羥基-2-甲基環戊基)-2-(1-(甲基磺醯基)哌啶-4-基胺基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮、或其醫藥上可接受之鹽。
在另一態樣中，本發明提供ALK抑制劑及CDK抑制劑用於治療個體之癌症之用途，其中該CDK抑制劑係CDK4/6抑制劑、或CDK2/4/6抑制劑。在一些此類具體實施例中，該ALK抑制劑係勞拉替尼。
在另一態樣中，本發明提供一定量的ALK抑制劑及一定量的CDK抑制劑用於治療個體之癌症之用途，其中該CDK抑制劑係CDK4/6抑制劑、或CDK2/4/6抑制劑，且其中該ALK抑制劑及該CDK抑制劑之量合起來對於治療癌症有效。
在另一態樣中，本發明提供有效量的ALK抑制劑及有效量的CDK抑制劑用於治療個體之癌症之用途，其中該CDK抑制劑係CDK4/6抑制劑、或CDK2/4/6抑制劑。
在另一態樣中，本發明提供包含ALK抑制劑及CDK抑制劑之組合用於治療個體之癌症之用途，其中該CDK抑制劑係CDK4/6抑制劑、或CDK2/4/6抑制劑。
在另一態樣中，本發明提供勞拉替尼、或其醫藥上可接受之鹽及CDK抑制劑用於治療個體之癌症之用途。在一些此類具體實施例中，該CDK抑制劑係CDK4/6抑制劑、或CDK2/4/6抑制劑。
在另一態樣中，本發明提供一定量的ALK抑制劑、或其醫藥上可接受之鹽及一定量的CDK抑制劑用於治療個體之癌症之用途，其中該ALK抑制劑及CDK抑制劑之量合起來對治療癌症有效。在一個此種具體實施例中，該ALK抑制劑係勞拉替尼。在一些此類具體實施例中，該CDK抑制劑係CDK4/6抑制劑、或CDK2/4/6抑制劑。在一個此種具體實施例中，該CDK4/6係帕博西尼、或其醫藥上可接受之鹽。在另一此種具體實施例中，該CDK2/4/6係6-(二氟甲基)-8-((1R,2R)-2-羥基-2-甲基環戊基)-2-(1-(甲基磺醯基)哌啶-4-基胺基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(PF-06873600)、或其醫藥上可接受之鹽。
在另一態樣中，本發明提供有效量的勞拉替尼、或其醫藥上可接受之鹽及有效量的CDK抑制劑用於治療個體之癌症之用途。在一些此類具體實施例中，該CDK抑制劑係CDK4/6抑制劑、或CDK2/4/6抑制劑。在一個此種具體實施例中，該CDK4/6係帕博西尼、或其醫藥上可接受之鹽。在另一此種具體實施例中，該CDK2/4/6係6-(二氟甲基)-8-((1R,2R)-2-羥基-2-甲基環戊基)-2-(1-(甲基磺醯基)哌啶-4-基胺基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(PF-06873600)、或其醫藥上可接受之鹽。
在另一態樣中，本發明提供包含ALK抑制劑及CDK抑制劑之組合用於治療個體之癌症之用途。在一個此種具體實施例中，該ALK抑制劑係勞拉替尼。在一些此類具體實施例中，該CDK抑制劑係CDK4/6抑制劑、或CDK2/4/6抑制劑。在一個此種具體實施例中，該CDK4/6係帕博西尼、或其醫藥上可接受之鹽。在另一此種具體實施例中，該CDK2/4/6係6-(二氟甲基)-8-((1R,2R)-2-羥基-2-甲基環戊基)-2-(1-(甲基磺醯基)哌啶-4-基胺基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(PF-06873600)、或其醫藥上可接受之鹽。
在另一態樣中，本發明提供以分開或合起來包含第一劑及第二劑之組合用於治療個體之癌症，該第一劑係勞拉替尼或其醫藥上可接受之鹽，該第二劑係帕博西尼或其醫藥上可接受之鹽、或6-(二氟甲基)-8-((1R,2R)-2-羥基-2-甲基環戊基)-2-(1-(甲基磺醯基)哌啶-4-基胺基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(PF-06873600)或其醫藥上可接受之鹽。
在另一態樣中，本發明提供醫藥組成物，其包含ALK抑制劑、CDK抑制劑、及至少一種醫藥上可接受之賦形劑，其中CDK抑制劑係CDK4/6抑制劑、或CDK2/4/6抑制劑。在一個此種具體實施例中，該ALK抑制劑係勞拉替尼。在一些此類具體實施例中，該CDK抑制劑係CDK4/6抑制劑。在一個此種具體實施例中，該CDK4/6係帕博西尼、或其醫藥上可接受之鹽。在一個此種具體實施例中，該CDK抑制劑係CDK2/4/6抑制劑。在另一此種具體實施例中，該CDK2/4/6係6-(二氟甲基)-8-((1R,2R)-2-羥基-2-甲基環戊基)-2-(1-(甲基磺醯基)哌啶-4-基胺基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(PF-06873600)、或其醫藥上可接受之鹽。較佳地，本發明提供醫藥組成物，其包含勞拉替尼或其醫藥上可接受之鹽、及帕博西尼或其醫藥上可接受之鹽、或6-(二氟甲基)-8-((1R,2R)-2-羥基-2-甲基環戊基)-2-(1-(甲基磺醯基)哌啶-4-基胺基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(PF-06873600)或其醫藥上可接受之鹽、及至少一種賦形劑。
在另一態樣中，本發明提供供使用於治療癌症之組成物，其包含ALK抑制劑、CDK抑制劑，其中該CDK抑制劑係CDK4/6抑制劑、或CDK2/4/6抑制劑。在一個此種具體實施例中，該ALK抑制劑係勞拉替尼。在一些此類具體實施例中，該CDK抑制劑係CDK4/6抑制劑。在一個此種具體實施例中，該CDK4/6係帕博西尼、或其醫藥上可接受之鹽。在一個此種具體實施例中，該CDK抑制劑係CDK2/4/6抑制劑。在另一此種具體實施例中，該CDK2/4/6係6-(二氟甲基)-8-((1R,2R)-2-羥基-2-甲基環戊基)-2-(1-(甲基磺醯基)哌啶-4-基胺基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(PF-06873600)、或其醫藥上可接受之鹽。
在另一態樣中，本發明提供供使用於治療癌症之組成物，其包含ALK抑制劑、CDK抑制劑、及至少一種醫藥上可接受之賦形劑之醫藥組成物，其中該CDK抑制劑係CDK4/6抑制劑、或CDK2/4/6抑制劑。在一個此種具體實施例中，該ALK抑制劑係勞拉替尼。在一些此類具體實施例中，該CDK抑制劑係CDK4/6抑制劑。在一個此種具體實施例中，該CDK4/6係帕博西尼、或其醫藥上可接受之鹽。在一個此種具體實施例中，該CDK抑制劑係CDK2/4/6抑制劑。在另一此種具體實施例中，該CDK2/4/6係6-(二氟甲基)-8-((1R,2R)-2-羥基-2-甲基環戊基)-2-(1-(甲基磺醯基)哌啶-4-基胺基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(PF-06873600)、或其醫藥上可接受之鹽。
在另一態樣中，本發明提供醫藥組成物，其包含勞拉替尼或其醫藥上可接受之鹽、CDK抑制劑、及至少一種醫藥上可接受之賦形劑。在一些具體實施例中，該CDK抑制劑係CDK4/6抑制劑、或CDK2/4/6抑制劑。在一些此類具體實施例中，該CDK抑制劑係CDK4/6抑制劑。在一個此種具體實施例中，該CDK4/6係帕博西尼、或其醫藥上可接受之鹽。在一個此種具體實施例中，該CDK抑制劑係CDK2/4/6抑制劑。在另一此種具體實施例中，該CDK2/4/6係6-(二氟甲基)-8-((1R,2R)-2-羥基-2-甲基環戊基)-2-(1-(甲基磺醯基)哌啶-4-基胺基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(PF-06873600)、或其醫藥上可接受之鹽。
在另一態樣中，本發明提供包含第一容器、第二容器、及藥品仿單(package insert)之套組，其中該第一容器包含至少一個劑量的ALK抑制劑；該第二容器包含至少一個劑量的CDK抑制劑，其中該CDK抑制劑係CDK4/6抑制劑、或CDK2/4/6抑制劑；且該藥品仿單包含使用該藥劑用於治療個體之癌症的說明書。在一個此種具體實施例中，該ALK抑制劑係勞拉替尼。在一些此類具體實施例中，該CDK抑制劑係CDK4/6抑制劑。在一個此種具體實施例中，該CDK4/6係帕博西尼、或其醫藥上可接受之鹽。 在一個此種具體實施例中，該CDK抑制劑係CDK2/4/6抑制劑。在另一此種具體實施例中，該CDK2/4/6係6-(二氟甲基)-8-((1R,2R)-2-羥基-2-甲基環戊基)-2-(1-(甲基磺醯基)哌啶-4-基胺基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(PF-06873600)、或其醫藥上可接受之鹽。在較佳具體實施例中，本發明提供包含第一容器、第二容器、及藥品仿單之套組，該第一容器包含至少一個劑量的勞拉替尼或其醫藥上可接受之鹽，該第二容器包含至少一個劑量的帕博西尼或其醫藥上可接受之鹽、或6-(二氟甲基)-8-((1R,2R)-2-羥基-2-甲基環戊基)-2-(1-(甲基磺醯基)哌啶-4-基胺基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(PF-06873600)或其醫藥上可接受之鹽，該藥品仿單包含用於治療個體之癌症的說明書。
在另一態樣中，本發明關於供使用於治療個體之癌症之ALK抑制劑，其中該ALK抑制劑係與CDK抑制劑組合使用，其中該CDK抑制劑係CDK4/6抑制劑、或CDK2/4/6抑制劑。在一個此種具體實施例中，該ALK抑制劑係勞拉替尼。在一些此類具體實施例中，該CDK抑制劑係CDK4/6抑制劑。在一個此種具體實施例中，該CDK4/6係帕博西尼、或其醫藥上可接受之鹽。在一個此種具體實施例中，該CDK抑制劑係CDK2/4/6抑制劑。在另一此種具體實施例中，該CDK2/4/6係6-(二氟甲基)-8-((1R,2R)-2-羥基-2-甲基環戊基)-2-(1-(甲基磺醯基)哌啶-4-基胺基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(PF-06873600)、或其醫藥上可接受之鹽。
在另一態樣中，本發明提供ALK抑制劑及CDK抑制劑用於製造用於治療個體之癌症的藥劑之用途，其中該CDK抑制劑係CDK4/6抑制劑、或CDK2/4/6抑制劑。 在一個此種具體實施例中，該ALK抑制劑係勞拉替尼。在一些此類具體實施例中，該CDK抑制劑係CDK4/6抑制劑。在一個此種具體實施例中，該CDK4/6係帕博西尼、或其醫藥上可接受之鹽。在一個此種具體實施例中，該CDK抑制劑係CDK2/4/6抑制劑。在另一此種具體實施例中，該CDK2/4/6係6-(二氟甲基)-8-((1R,2R)-2-羥基-2-甲基環戊基)-2-(1-(甲基磺醯基)哌啶-4-基胺基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(PF-06873600)、或其醫藥上可接受之鹽。
在另一態樣中，本發明提供ALK抑制劑用於製造用於治療癌症的藥劑之用途，且該藥劑適用於與CDK抑制劑組合使用，其中該CDK抑制劑係CDK4/6抑制劑、或CDK2/4/6抑制劑。在一個此種具體實施例中，該ALK抑制劑係勞拉替尼。在一些此類具體實施例中，該CDK抑制劑係CDK4/6抑制劑。在一個此種具體實施例中，該CDK4/6係帕博西尼、或其醫藥上可接受之鹽。在一個此種具體實施例中，該CDK抑制劑係CDK2/4/6抑制劑。在另一此種具體實施例中，該CDK2/4/6係6-(二氟甲基)-8-((1R,2R)-2-羥基-2-甲基環戊基)-2-(1-(甲基磺醯基)哌啶-4-基胺基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(PF-06873600)、或其醫藥上可接受之鹽。
在另一態樣中，本發明關於包含ALK抑制劑、及至少一種醫藥上可接受之賦形劑之醫藥組成物供使用於治療個體之癌症，其中包含該ALK抑制劑之醫藥組成物係與包含該CDK抑制劑(其中CDK抑制劑係CDK4/6抑制劑、或CDK2/4/6抑制劑)及至少一種醫藥上可接受之賦形劑之醫藥組成物組合使用。在此態樣中，兩種醫藥組成物之使用係經由相同或不同的投予途徑並在相同或不同投予排程下依序、同時或並行來進行。在一個此種具體實施例中，該ALK抑制劑係勞拉替尼。在一些此類具體實施例中，該CDK抑制劑係CDK4/6抑制劑。在一個此種具體實施例中，該CDK4/6係帕博西尼、或其醫藥上可接受之鹽。在一個此種具體實施例中，該CDK抑制劑係CDK2/4/6抑制劑。在另一此種具體實施例中，該CDK2/4/6係6-(二氟甲基)-8-((1R,2R)-2-羥基-2-甲基環戊基)-2-(1-(甲基磺醯基)哌啶-4-基胺基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(PF-06873600)、或其醫藥上可接受之鹽。
在本文中態樣之各者之一些具體實施例中，該CDK抑制劑係CDK4/6抑制劑。在其他此類具體實施例中，該CDK4/6抑制劑係選自由下列所組成之群組：帕博西尼、利博西尼、艾貝馬西尼、G1T38、提拉西尼、及SHR6390、或其醫藥上可接受之鹽。在特定具體實施例中，該CDK4/6抑制劑係帕博西尼、或其醫藥上可接受之鹽。在進一步具體實施例中，該CDK4/6抑制劑係利博西尼或艾貝馬西尼、或其醫藥上可接受之鹽。
在本文中所述的態樣之各者之一些具體實施例中，該ALK抑制劑係勞拉替尼、克唑替尼、色瑞替尼、艾樂替尼、布加替尼、百利替尼、恩沙替尼、恩曲替尼、CEP-37440、及NVP-TAE684、或其醫藥上可接受之鹽及該CDK4/6抑制劑係帕博西尼或醫藥上可接受之鹽。在本文中所述的態樣之各者之特定具體實施例中，該ALK抑制劑係勞拉替尼或其醫藥上可接受之鹽及CDK4/6抑制劑係帕博西尼或其醫藥上可接受之鹽。
在本文中所述的態樣之各者之一些具體實施例中，該ALK抑制劑係勞拉替尼、克唑替尼、色瑞替尼、艾樂替尼、布加替尼、百利替尼、恩沙替尼、恩曲替尼、CEP-37440、及NVP-TAE684、或其醫藥上可接受之鹽及該CDK2/4/6抑制劑係6-(二氟甲基)-8-((1R,2R)-2-羥基-2-甲基環戊基)-2-(1-(甲基磺醯基)哌啶-4-基胺基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(PF-06873600)或其醫藥上可接受之鹽。在本文中所述的態樣之各者之特定具體實施例中，該ALK抑制劑係勞拉替尼、或其醫藥上可接受之鹽及該CDK2/4/6抑制劑係6-(二氟甲基)-8-((1R,2R)-2-羥基-2-甲基環戊基)-2-(1-(甲基磺醯基)哌啶-4-基胺基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮、或其醫藥上可接受之鹽。
在特定態樣中，在幾種代表各種線的ALKi療法後難治型患者群體之患者衍生之ALKi抗性NSCLC模型中，勞拉替尼及帕博西尼或6-(二氟甲基)-8-((1R,2R)-2-羥基-2-甲基環戊基)-2-(1-(甲基磺醯基)哌啶-4-基胺基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(PF-06873600)之組合之
試管內
及
體內
評定證明相對於單獨勞拉替尼增強之抗腫瘤活性(增加之DOR、增強之TGI、或延遲之腫瘤生長)。
在本發明之態樣之各者之常見具體實施例中，該個體係人類。
癌症之實施例包括，但不限於癌、淋巴瘤、白血病、胚細胞瘤、及肉瘤。在一些具體實施例中，本發明之方法、用途、及組合可用於治療一或多種包括，但不限於下列之癌症：循環系統，例如心臟(肉瘤[血管肉瘤、纖維肉瘤、橫紋肌肉瘤、脂肪肉瘤]、黏液瘤、橫紋肌瘤、纖維瘤、脂瘤及畸胎瘤)、縱膈腔及胸膜、及其他胸腔器官、血管腫瘤及腫瘤相關血管組織；呼吸道，例如鼻腔及中耳、副鼻竇(accessory sinus)、喉、氣管、支氣管及肺諸如小細胞肺癌(SCLC)、非小細胞肺癌(NSCLC)、支氣管癌(鱗狀細胞、未分化小細胞、未分化大細胞、腺癌)、肺泡(小支氣管)癌、支氣管腺瘤、肉瘤、淋巴瘤、軟骨瘤性錯構瘤(chondromatous hamartoma)、間皮瘤；胃腸系統，例如食道(鱗狀細胞癌、腺癌、平滑肌肉瘤、淋巴瘤)、胃(癌、淋巴瘤、平滑肌肉瘤)、胃的、胰腺(導管腺癌、胰島素瘤、胰高血糖素瘤、胃泌素瘤、類癌瘤、舒血管腸肽瘤)、小腸(腺癌、淋巴瘤、類癌瘤、卡波西肉瘤(Karposi’s sarcoma)、平滑肌瘤、血管瘤、脂瘤、神經纖維瘤、纖維瘤)、大腸(腺癌、管狀腺瘤、絨毛腺瘤、錯構瘤、平滑肌瘤)；生殖泌尿道，例如腎臟(腺癌、威爾姆斯瘤(Wilm’s tumor)[腎胚細胞瘤(nephroblastoma)]、淋巴瘤、白血病)、膀胱及/或尿道(鱗狀細胞癌、移行細胞癌、腺癌)、前列腺(腺癌、肉瘤)、睪丸(精原細胞瘤、畸胎瘤、胚胎性癌、畸胎上皮癌、絨毛膜癌、肉瘤、間質細胞癌、纖維瘤、纖維腺瘤、腺瘤樣瘤、脂瘤)；肝臟，例如肝腫瘤(肝細胞癌)、膽管癌、肝母細胞瘤(hepatoblastoma)、血管肉瘤、肝細胞腺瘤、血管瘤、胰腺內分泌腫瘤(pancreatic endocrine tumor)(諸如嗜鉻細胞瘤、胰島素瘤、血管活性腸肽腫瘤(vasoactive intestinal peptide tumor)、胰島細胞腫瘤及升糖素瘤)；骨，例如骨原性肉瘤(骨肉瘤)、纖維肉瘤、惡性纖維組織細胞瘤、軟骨肉瘤、Ewing氏肉瘤(Ewing’s sarcoma)、惡性淋巴瘤(網狀細胞肉瘤)、多發性骨髓瘤、惡性巨細胞瘤(malignant giant cell tumor chordoma)、成軟骨細胞瘤(osteochronfroma)(骨軟骨外生骨疣(osteocartilaginous exostoses))、良性軟骨瘤、軟骨胚細胞瘤、軟骨黏液樣纖維瘤(chondromyxofibroma)、骨樣骨瘤及巨細胞瘤；神經系統，例如中樞神經系統(CNS)腫瘤、原發性CNS淋巴瘤、顱骨癌(skull cancer)(骨瘤、血管瘤、肉芽腫、黃色瘤、畸形性骨炎)、腦膜(腦膜瘤、腦膜肉瘤、神經膠瘤病)、腦癌(星狀細胞瘤、髓母細胞瘤、神經膠瘤、室管膜瘤、胚細胞瘤[松果體瘤]、多形性膠質母細胞瘤(glioblastoma multiform)、寡樹突細胞瘤、神經鞘瘤、先天瘤)、脊髓神經纖維瘤(spinal cord neurofibroma)、腦脊髓膜瘤、神經膠瘤、肉瘤)；生殖系統，例如婦科、子宮(子宮內膜癌)、子宮頸(子宮頸癌、腫瘤前子宮頸上皮分化不良(pre-tumor cervical dysplasia))、卵巢(卵巢癌[漿液性囊腺癌(serous cystadenocarcinoma)、黏液性囊腺癌(mucinous cystadenocarcinoma)、未分類癌]、顆粒層-卵囊泡膜細胞瘤(granulosa-thecal cell tumor))、塞氏-萊氏細胞瘤(Sertoli-Leydig cell tumor)、惡性胚細胞瘤、惡性畸胎瘤)、陰門(鱗狀細胞癌、上皮內癌、腺癌、纖維肉瘤、黑色素瘤)、陰道(透明細胞癌、鱗狀細胞癌、葡萄形肉瘤(胚胎橫紋肌肉瘤)、輸卵管(癌)及其他與女性生殖器相關的部位；胎盤、陰莖、前列腺、睪丸、及其他與男性生殖器相關的部位；血液系統，例如血液(骨髓性白血病[急性及慢性]、急性淋巴母細胞白血病、慢性淋巴球性白血病、骨髓增殖性疾病、多發性骨髓瘤、骨髓發育不良症候群)、何杰金氏病(Hodgkin’s disease)、非何杰金氏淋巴瘤(non-Hodgkin’s lymphoma)[惡性淋巴瘤]；口腔，例如嘴唇、舌頭、牙齦、口腔底、上顎、及嘴之其他部分、腮腺、及唾液腺之其他部分、扁桃腺、口咽、鼻咽、梨狀竇(pyriform sinus)、下咽、及嘴唇之其他部位、口腔及咽喉；皮膚，例如惡性黑色素瘤、皮膚黑色素瘤(cutaneous melanoma)、基底細胞癌(BCC)、鱗狀細胞癌(SCC)、卡波西肉瘤(Karposi’s sarcoma)、發育不良痣(moles dysplastic nevi)、脂瘤、血管瘤(angioma)、皮纖維瘤、及瘢瘤；腎上腺：神經胚細胞瘤；及包括結締組織及軟組織之其他組織、腹膜後腔(retroperitoneum)及腹膜、眼部、眼球內黑色素瘤、及附屬癌症、乳房、頭部或/及頸部、肛門區域、甲狀腺、副甲狀腺、腎上腺及其他內分泌腺及相關結構、繼發性及非特異性淋巴結惡性腫瘤、呼吸系統及消化系統之繼發性惡性腫瘤及其他部位之繼發性惡性腫瘤之癌症、包括以上癌症中之任一者之難治型式、或前述癌症中之一或多種之組合。在一些具體實施例中，該癌症係轉移性。在一些具體實施例中，該癌症晚期的。
當本文中與本發明相關聯使用時，癌症之更特定實施例包括乳癌、卵巢癌、肺癌(包括小細胞肺癌及/或非小細胞肺癌，例如肺之鱗狀細胞癌、大細胞肺癌、肺腺癌)、皮膚癌、結腸癌、膀胱癌、肝癌、胃癌、前列腺癌、腎臟癌、食道癌、鼻咽癌、甲狀腺癌、子宮頸癌、胰臟癌、頭頸癌、或肉瘤、或前述癌症中之一或多種的組合。 在本文中所述的態樣之各者之特定具體實施例中，該癌症係肺癌。 在一些此類具體實施例中，該癌症係NSCLC、晚期或轉移性肺癌。
在本文中所述的態樣之各者之一些具體實施例中，該癌症係局部晚期。在本文中所述的態樣之各者之一些具體實施例中，該癌症係轉移性。在本文中所述的態樣之各者之其他具體實施例中，該癌症係難治型。
在一個具體實施例中，本發明為患有ALK突變陽性(ALK+)晚期NSCLC的患者提供作為一線療法的癌症治療。
在本文中所述的態樣之各者之一些具體實施例中，該個體或癌症對用ALK抑制劑治療具有抗性。 在其他此類具體實施例中，該個體或癌症對用CDK抑制劑治療具有抗性，例如個體或癌症對用CDK4/6抑制劑、或CDK2/4/6抑制劑治療具有抗性。
在另一具體實施例中，該個體或癌症(例如肺癌(例如，非小細胞肺癌))正在用、或已經用一或多種ALK酪胺酸激酶抑制劑(TKI)及/或ROS1抑制劑(例如，克唑替尼)治療。
在其他具體實施例中，該個體或癌症對酪胺酸激酶抑制劑(TKI)具有抗性或不耐受、或處於發展抗性或耐受性之風險中。在一些具體實施例中，該癌症已對克唑替尼(Xalkori
®
)、色瑞替尼(Zykadia
®
)、艾樂替尼(Alecensa
®
)及/或布加替尼(Alunbrig
®
)有進展、或具有抗性或不耐受。在一些此類具體實施例中，本發明為先前用克唑替尼、色瑞替尼、艾樂替尼及/或布加替尼治療的個體提供治療。在特定具體實施例中，本發明為癌症係ALK陽性晚期NSCLC、及對或克唑替尼及至少一種其他ALK抑制劑；艾樂替尼作為第一ALK抑制劑療法；或色瑞替尼作為第一ALK抑制劑療法之疾病有進展的患者提供治療。
在本文中所述的態樣之各者之一些具體實施例中，該個體或癌症對用勞拉替尼、帕博西尼、及/或6-(二氟甲基)-8-((1R,2R)-2-羥基-2-甲基環戊基)-2-(1-(甲基磺醯基)哌啶-4-基胺基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(PF-06873600)治療具有抗性。
在一個具體實施例中，該個體係患者(例如人類患者)，其未曾接受ALKi之患者(ALKi-naïve patient)，亦即患者先前未曾用ALK抑制劑治療。在另一具體實施例中，該個體係已經用ALK抑制劑預治療的患者(例如人類患者)。
在其他實施例中，該個體或癌症對用化學療法治療具有抗性。
在另一態樣中，本發明提供抑制個體之癌細胞增殖之方法，其包含對個體投予根據本發明之組合療法，其量有效抑制細胞增殖。
在另一態樣中，本發明提供抑制個體之癌細胞侵襲力之方法，其包含對個體投予根據本發明之組合療法，其量有效抑制細胞侵襲力。
在另一態樣中，本發明提供誘導個體之癌細胞凋亡之方法，其包含對個體投予根據本發明之組合療法，其量有效誘導細胞凋亡。
在前述之各者之特定具體實施例中，勞拉替尼係勞拉替尼之結晶形式。在一些具體實施例中，勞拉替尼係如國際專利公開案第WO 2014/207606A1號中及於美國專利案第US9637500號中所述呈結晶形式。在一些具體實施例中，勞拉替尼係如國際專利公開案第WO2017/0175091號中所述呈結晶形式。在一些具體實施例中，勞拉替尼係如國際專利公開案第WO 2019/073347號中所述呈結晶形式。在較佳具體實施例中，勞拉替尼係如國際專利公開案第WO 2017/021823 A1號及於美國專利案第US10420749號中所述呈結晶形式。
「接觸(contacting)」係指將本發明之化合物或醫藥上可接受之鹽與表現CDK4/6或CDK2/4/6之細胞以可使化合物直接或間接影響CDK4/6或CDK2/4/6之活性的此種方式在一起。接觸可於
試管內
(亦即，在人為環境內，諸如但不限於，例如在試管或培養基中)或於
體內
(亦即，在活生物體內，諸如但不限於小鼠、大鼠或兔子)完成。
在一些具體實施例中，該等細胞係於細胞株中，諸如癌細胞株。在其他具體實施例中，該等細胞係於組織或腫瘤中，且該組織或腫瘤可於個體中，包括人類。
劑型及方案
所屬技術領域中具有通常知識者將能夠根據已知方法測定，將如本發明之組合中所使用的各化合物之適當量、劑量(dose/dosage)投予至患者，其考量因素諸如年齡、體重、一般健康狀況、所投予的化合物、投予途徑、癌症之性質及進展(特別的是肺癌、更具體的是NSCLC、晚期或轉移性肺癌)、需要的治療、及存在的其他用藥。
在本發明之一些具體實施例中，該ALK抑制劑及該CDK抑制劑係依序、同時或並行投予。
在一些具體實施例中，根據發明所屬技術領域中具有通常知識者已知的標準醫藥規範，各治療劑(例如，ALK抑制劑、CDK4/6抑制劑、或CDK2/4/6抑制劑)可呈單一醫藥組成物同時投予至個體，或可將其調配成分開的醫藥組成物，使得其可經由相同或不同的投予途徑並在相同或不同投予排程下依序、同時或並行來投予，其中此種投予係在允許治療劑顯示協作(例如協同)作用的時間間隔內進行。
如發明所屬技術領域中具有通常知識者將理解，在個體治療之不同階段可將組合療法有用地投予至個體。
在一些具體實施例中，該組合療法係投予至先前未經治療(亦即，未曾接受治療(treatment naïve))的個體。例如，該個體係未曾接受ALKi之患者。
在一些具體實施例中。該組合療法係投予至在先前用生物治療劑或化學治療劑之療法(亦即經歷過治療)之後無法達到持續反應的個體。
組合療法可在手術前後投予以移除腫瘤及/或可在放射療法之前、期間或之後使用、及/或可在化學療法之前、期間或之後使用。
本發明關於二或更多種劑之組合，其可用於同時、分開或依序投予至有其需要之個體，特別是用於癌症之治療或預防。替代來說，本發明特別是關於用於治療或預防癌症之分開、同時或依序使用的組合。較佳地，此等劑係在當組合時，提供有益效果的治療有效劑量下投予。
在一個具體實施例中，本發明之組合之個別劑可在療程期間以任何順序在不同時間分開投予，或以分次或單獨組合形式並行投予。
增殖性疾病(諸如癌症)之性質係多重因素的。在某些情形下，可將具有不同作用機制的藥物組合。然而，僅考慮具有不同作用模式之治療劑之任何組合不必然產生具有有利效果的組合。
意外發現此等特異性間變性淋巴瘤激酶(ALK)抑制劑當與CDK抑制劑組合使用時具有極有益的協同交互作用並改善抗增殖活性，且可能對於治療增殖性疾病，特別是肺癌有效。在本發明中，例如就延遲癌症進展或就腫瘤體積變化而言，預期投予本發明之組合如相較於任一單一療法導致更有益的治療(例如協同抗增殖性效果)。
進一步，本文中所揭示的本發明之組合係指二或更多種劑，特定而言，係ALK抑制劑與CDK抑制劑的組合。在一些具體實施例中，根據本發明之組合係呈單一劑量投予。在一些具體實施例中，根據本發明之組合係呈多劑量投予。在一些實施例中，根據本發明之組合之治療有效量可口服且以規律的間隔(例如，每1、2、3、4、5、或6天，或每1、2、3、4、5、6、7、8、或9週，或每1、2、3、4、5、6、7、8、9個月或更久1、2、3、4、5、6、7、8、9、10或更多次)定期投予。
在一些實施例中，根據本發明之組合係以預定間隔(例如，每1、2、3、4、5、或6天，或每1、2、3、4、5、6、7、8、或9週，或每1、2、3、4、5、6、7、8、9個月或更久1、2、3、4、5、6、7、8、9、10或更多次)投予。
在一些具體實施例中，本發明之方法、組合、醫藥組成物、及用途亦適於治療不良預後的患者，尤其是此類不良預後的患者患有對採用ALK抑制劑作為唯一治療劑的治療具有抗性之癌症，例如此類患者之癌症最初對用ALK抑制劑治療有反應但接著復發。此癌症可能在先前用一或多種ALK抑制劑(例如，上文所列並以引用方式併入本文中者之一，例如勞拉替尼)治療期間獲得抗性。因此，在一個具體實施例中，該增殖性疾病係對採用ALK抑制劑作為唯一治療劑的治療具有抗性之癌症。在一個此種具體實施例中，該癌症係肺癌。在特定具體實施例中，該肺癌係NSCLC。
本發明之組合之投予可藉由任何能夠將化合物遞送至作用部位的方法來實現。此等方法包括口服途徑、十二指腸內途徑、腸胃外注射(包括靜脈內、皮下、肌內、血管內或輸注)、局部、及直腸投予。
可調節劑量方案以提供最佳的所欲反應。例如，本發明之組合療法之劑可作為單一大劑量(single bolus)投予、作為數個分次劑量隨時間投予、或可依治療狀況之緊急程度所指示來按比例降低或增加劑量。特別有利的是以易於投予及劑量一致的劑量單位形式來調配劑。劑量單位形式，如本文中所使用，係指適合作為一體式劑量(unitary dosage)用於所治療的哺乳動物個體的物理上分離單位，各單位包含經計算以與所需的藥物載劑聯合產生所欲治療效果之活性化合物之預定數量。本發明之劑量單位形式之規格受下列所支配並直接取決於其：(a)化學治療劑之獨特特性及欲達成的特定治療或預防效果；(b)混配此種活性化合物對治療個體之敏感性之所屬技術領域中固有的局限性。
因此，熟習此項技術領域者應理解，基於本文中所提供的揭露，劑量及給藥方案係根據在所屬治療領域中眾所週知的方法調整。亦即，可輕易建立最大耐受劑量，且亦可測定對個體提供可偵測的治療效益的有效量，也可測定投予各劑以對個體提供可偵測的治療效益的時間需求。因此，雖然本文中例示某些劑量及投予方案，但此等實施例決不限制在實踐本發明時可對個體提供的劑量及投予方案。
應注意，劑量值可隨所緩解的病況之類型及嚴重程度而變化，且可包括單一或多劑量。應進一步理解，對於任何特定個體，具體劑量方案應根據個體需求及執行或監督投予組成物的人之專業判斷而隨時間調整，考慮因素諸如病症或病況之嚴重程度、投予速率、化合物之處置及處方醫師之斟酌。本文中所闡述的劑量範圍僅為例示性且不意欲限制所請求的組成物之範圍或實踐。例如，劑量可基於藥物動力學或藥效動力學參數調整，該等參數包括臨床效果，諸如毒性效果及/或實驗室值。因此，本發明涵蓋如藉由熟習本領域技藝者所測定的患者內劑量遞增(intra-patient dose-escalation)。測定用於投予化學治療劑之適當劑量及方案係相關技術領域中眾所週知的，且一旦提供本文中所揭示之教示，則熟習此項技術領域者將理解所涵蓋之測定。
在一些具體實施例中，在組合療法中之治療劑之至少一者係使用當將該劑用作治療相同癌症的單一療法時一般所採用的相同劑量方案(治療之劑量、頻率、持續期)投予。在其他具體實施例中，個體接受組合療法中之治療劑之至少一者的總量比當將該相同劑用作單一療法時低，例如較低的治療劑之劑量、降低之給藥頻率及/或較短的給藥持續期。
小分子抑制劑之有效劑量一般係在每天每公斤體重約0.001至約100 mg、較佳地約1至約35 mg/kg/天之範圍內的單次或分次劑量。用於70 kg人類，此量將達約0.01至約7 g/天、較佳地約0.02至約2.5 g/天、且更佳地約0.02至約1.0 g/天。在一些例子中，在前述範圍下限之劑量水平可為相當足夠的，而在其他情況下仍可採用較大劑量而不引起任何有害副作用，前提是將此類較大劑量先分成數個小劑量用於全天投予。
在一些具體實施例中，該ALK抑制劑、或其醫藥上可接受之鹽或溶劑合物係以下列之每日劑量投予：約25 mg、50 mg、約75 mg、約100 mg、約125 mg、約150 mg、約200 mg、約250 mg、約300 mg、約350 mg、約400 mg、約450 mg、約500 mg、約550 mg、約600 mg、約650 mg、約700 mg、約750 mg、約800 mg、約850 mg、約900 mg、約950 mg、約1000 mg、約1100 mg、約1200 mg、約1300 mg、約1400 mg、或約1500 mg。此劑量可作為單一劑量投予(q.d.)，或可視需要地細分成適用於b.i.d.、t.i.d.或q.i.d.投予的較小劑量。
在具體實施例中，該ALK抑制劑、或其醫藥上可接受之鹽係每日投予一次以包含28天之完整週期。在用本發明之組合治療期間連續重複28天週期。
在具體實施例中，ALK抑制劑、或其醫藥上可接受之鹽係每日投予一次以包含21天之完整週期。在用本發明之組合治療期間連續重複21天週期。在某些具體實施例中，該ALK抑制劑係勞拉替尼、或其醫藥上可接受之鹽或溶劑合物。例如，勞拉替尼係以20 mg每日兩次(BID)投予，視需要地在28天週期中採用7天給藥/ 7天停藥方案。
在一個具體實施例中，勞拉替尼係以40 mg每日兩次(BID)投予，視需要地在28天週期中採用7天給藥/ 7天停藥方案。
在一個具體實施例中，勞拉替尼係以80 mg每日兩次(BID)投予，視需要地在28天週期中採用7天給藥/ 7天停藥方案。
在一個具體實施例中，勞拉替尼係以150 mg每日兩次(BID)投予，視需要地在28天週期中採用7天給藥/ 7天停藥方案。
在一個具體實施例中，勞拉替尼係以250 mg每日兩次(BID)投予，視需要地在28天週期中採用7天給藥/ 7天停藥方案。
在一個具體實施例中，勞拉替尼係以375mg每日兩次(BID)投予，視需要地在28天週期中採用7天給藥/ 7天停藥方案。
在一個具體實施例中，勞拉替尼係以500 mg每日兩次(BID)投予，視需要地在28天週期中採用7天給藥/ 7天停藥方案。
在一個具體實施例中，勞拉替尼係以625 mg每日兩次(BID)投予，視需要地在28天週期中採用7天給藥/ 7天停藥方案。
在一些具體實施例中，該CDK抑制劑、或其醫藥上可接受之鹽或溶劑合物係以每天約50 mg至約1000 mg、較佳地每天約50 mg至約600 mg、且更佳地每天約75 mg至約200 mg之每日劑量投予。在某些具體實施例中，該CDK抑制劑係帕博西尼、或其醫藥上可接受之鹽或溶劑合物，其係以每天約50 mg、約75 mg、約100 mg、或約125 mg之每日劑量投予。
在一些具體實施例中，該CDK抑制劑、或其醫藥上可接受之鹽或溶劑合物係以下列之每日劑量投予：約50 mg、約75 mg、約100 mg、約125 mg、約150 mg、約200 mg、約250 mg、約300 mg、約350 mg、約400 mg、約450 mg、約500 mg、約550 mg、約600 mg、約650 mg、約700 mg、約750 mg、約800 mg、約850 mg、約900 mg、約950 mg、約1000 mg、約1100 mg、約1200 mg、約1300 mg、約1400 mg、或約1500 mg。此劑量可作為單一劑量投予(q.d.)，或可視需要地細分成適用於b.i.d.、t.i.d.或q.i.d.投予的較小劑量。在前述之各者之一些具體實施例中，該CDK抑制劑係CDK4及CDK6 (CDK4/6)之抑制劑；或CDK2、CDK4及CDK6 (CDK2/4/6)之抑制劑。 在前述之各者之特定具體實施例中，該CDK4/6抑制劑係抑制劑係帕博西尼、或其醫藥上可接受之鹽。在在前述之各者之進一步具體實施例中，該CDK2/4/6抑制劑係6-(二氟甲基)-8-((1R,2R)-2-羥基-2-甲基環戊基)-2-(1-(甲基磺醯基)哌啶-4-基胺基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(PF-06873600)、或其醫藥上可接受之鹽。
如本文中所使用之「連續給藥排程(continuous dosing schedule)」係無劑量中斷的投予或給藥方案，例如，無治療休息日。重複21天或28天治療週期而在治療週期之間無劑量中斷為連續給藥排程之實施例。
在仍其他實施例中，該ALK抑制劑及CDK抑制劑中之一者係以間歇給藥排程(例如，2次/1週或3次/1週之排程)投予而另一者係以連續給藥排程投予。在一些具體實施例中，該ALK抑制劑係以間歇給藥排程投予而該CDK抑制劑係以連續給藥排程投予。在其他此類具體實施例中，該ALK抑制劑係以連續給藥排程投予而該CDK抑制劑係以間歇給藥排程投予。
在本發明之一些具體實施例中，該ALK抑制劑及該CDK抑制劑係以合起來有效治療癌症的量給藥。
在本發明之一些具體實施例中，該ALK抑制劑及該CDK抑制劑係以合起來協同的量給藥。
在本發明之一些具體實施例中，該ALK抑制劑及該CDK抑制劑係以合起來加和的量給藥。
在前述具體實施例之各者中，應理解該CDK抑制劑係CDK4/6抑制劑或CDK2/4/6抑制劑。
在一些前述具體實施例中，該ALK抑制劑較佳地係勞拉替尼，該CDK4/6抑制劑較佳地係帕博西尼、或其醫藥上可接受之鹽，及該CDK2/4/6抑制劑較佳地係6-(二氟甲基)-8-((1R,2R)-2-羥基-2-甲基環戊基)-2-(1-(甲基磺醯基)哌啶-4-基胺基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮、或其醫藥上可接受之鹽。
醫藥組成物及投予途徑
本發明之醫藥組成物可包含ALK抑制劑及CDK抑制劑及至少一種賦形劑。如本文中所使用，術語「賦形劑(excipient)」係指在醫藥技術中用於製備固體口服劑量調配物常使用的醫藥上可接受之成分。賦形劑之預期功能係作用為載劑(媒劑或基底)或為(多種)活性物質之載劑組分，且這樣做時有助於產品的屬性，諸如穩定性、生物醫藥特性、外觀及患者可接受性及/或產品可製造之容易程度。
賦形劑類別之實施例包括，但不限於黏合劑、崩散劑、潤滑劑、助滑劑、穩定劑、填料、及稀釋劑。各賦形劑使用量可在所屬技術領域中習知的範圍內變化。下列參考文獻中揭示用於調配口服劑型之技術及賦形劑，該等文獻均以引用方式併入本文中。參見The Handbook of Pharmaceutical Excipients, 4th edition, Rowe等人，Eds., American Pharmaceuticals Association (2003)；及Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 20th edition, Gennaro, Ed., Lippincott Williams & Wilkins (2000)。
合適的賦形劑包括碳酸鎂、硬脂酸鎂、滑石、乳糖、乳糖單水合物、糖、果膠、糊精、澱粉、黃蓍膠、微晶纖維素、甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉、玉米澱粉、膠態無水二氧化矽(colloidal anhydrous Silica)、二氧化鈦、低熔點蠟(low-melting wax)、可可脂、及類似者。
在一些具體實施例中，該醫藥組成物包含至少一種賦形劑。
本發明之醫藥組成物可呈適用於口服投予之形式，如錠劑、膠囊、丸劑、粉劑、持續釋放調配物、溶液或懸浮液；呈適用於腸胃外注射之形式，如無菌溶液、懸浮液或乳劑；呈適用於局部投予之形式，如軟膏或乳霜；或呈適用於直腸投予之形式，如栓劑。
例示性腸胃外投予形式包括活性化合物在無菌水溶液(例如，丙二醇或右旋糖水溶液)中之溶液或懸浮液。 若有需要，此類劑型可經適當緩衝。
醫藥組成物可呈適用於單次投予精確量之單位劑型。
適用於遞送本發明之組合療法的治療劑之醫藥組成物、及用於彼等製備之方法對所屬技術領域中具有通常知識者將顯而易見。此類組成物及用於彼等製備之方法可見於例如「Remington’s Pharmaceutical Sciences」, 19th Edition (Mack Publishing Company, 1995)中，其揭露係以引用方式全文併入本文中。
本發明之組合療法之劑可為口服投予。口服投予可涉及吞嚥，致使該劑進入腸胃道；或可採用頰或舌下投予，藉此該劑自口直接進入血流中。
適用於口服投予之調配物、劑量單位形式或醫藥組成物包括固體調配物(諸如錠劑)、包含微粒、液體、粉劑、顆粒之膠囊、水性或非水性之口服液及懸浮液、口含錠(包括經填充液體)、喉錠、硬糖果、噴液、乳霜、油膏、栓劑、膠凍、凝膠、糊劑、洗劑、軟膏、注射用溶液、咀嚼劑、多微粒及奈米微粒、固溶體、脂質體、膜(包括黏膜黏附(muco-adhesive))、胚珠、噴液、液體調配物及包裝在適合細分成個別劑量的容器中之腸胃外用溶液(parenteral solution)。
液體調配物包括懸浮液、溶液、糖漿及酏劑。此類調配物可用作在軟式或硬式膠囊中之填料且一般包括載劑，例如水、乙醇、聚乙二醇、丙二醇、甲基纖維素、或合適的油、及一或多種乳化劑及/或懸浮劑。液體調配物亦可藉由將例如來自小袋(sachet)之固體回溶。
腸胃外調配物包括醫藥上可接受之水溶液或非水溶液、分散液、懸浮液、乳劑、及用於其製劑之無菌粉劑。載劑之實施例包括水、乙醇、多元醇(丙二醇、聚乙基二醇)、蔬菜油、及注射用有機酯(諸如油酸乙酯)。流動性可藉由使用包衣(coating)(諸如卵磷脂)、界面活性劑、或維持適當粒子大小來維持。例示性腸胃外投予形式包括本發明之化合物於無菌水溶液(例如，丙二醇或右旋糖水溶液)中之溶液或懸浮液。若有需要，此類劑型可經適當緩衝。
此外，潤滑劑(諸如硬脂酸鎂、月桂基硫酸鈉及滑石)經常有用於壓錠目的。亦可在軟式及硬式填充明膠膠囊中採用類似類型之固體組成物。因此，較佳材料包括乳糖或牛奶糖及高分子量聚乙二醇。當需要口服投予水性懸浮液或酏劑時，其中之活性化合物可與各種甜味劑或調味劑、著色劑或染料及(若有需要)乳化劑或懸浮劑，以及稀釋劑(諸如水、乙醇、丙二醇、甘油，或其組合)一起組合。
本發明之組合療法之治療劑亦可用於快速溶解(fast-dissolving)、快速崩散(fast-disintegrating)劑型，諸如於Expert Opinion in Therapeutic Patents, 11 (6), 981-986 by Liang and Chen (2001)中所述者，其揭露係以引用方式全文併入本文中。
製備各種具有特定量之活性化合物的醫藥組成物之方法對所屬技術領域中具有通常知識者係已知的、或將顯而易見。例如，參見Remington’s Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Company, Easter, Pa., 15th Edition (1975)。
對於錠劑劑型，該劑可構成劑型之1 wt%至80 wt%、更典型地為劑型之5 wt%至60 wt%。除了該活性劑之外，錠劑通常包含崩散劑。崩散劑之實施例包括羥基乙酸澱粉鈉、羧甲基纖維素鈉、羧甲基纖維素鈣、交聯羧甲基纖維素鈉(croscarmellose sodium)、交聯聚維酮(crospovidone)、聚乙烯吡咯啶酮、甲基纖維素、微晶纖維素、經低級烷基取代之羥丙基纖維素、澱粉、預糊化澱粉及藻酸鈉。通常，崩散劑可包含劑型之1 wt%至25 wt%、較佳地5 wt%至20 wt%。
黏合劑通常用於賦予錠劑調配物內聚性質。合適的黏合劑包括微晶纖維素、明膠、糖、聚乙二醇、天然及合成膠、聚乙烯吡咯啶酮、預糊化澱粉、羥丙基纖維素及羥丙基甲基纖維素。錠劑亦可包含稀釋劑，諸如乳糖(單水合物、噴霧-乾燥(spray-dried)單水合物、無水物及類似者)、甘露醇、木糖醇、右旋糖、蔗糖、山梨醇、微晶纖維素、澱粉及磷酸氫鈣二水合物。
錠劑亦可視需要地包括表面活性劑(諸如月桂基硫酸鈉及聚山梨醇酯80)、及助流劑(諸如二氧化矽及滑石)。當存在時，表面活性劑的量一般為錠劑之0.2 wt%至5 wt%，而助滑劑一般為錠劑之0.2 wt%至1 wt%。
錠劑亦通常包含潤滑劑，諸如硬脂酸鎂、硬脂酸鈣、硬脂酸鋅、硬脂醯反丁烯二酸鈉(sodium stearyl fumarate)、及硬脂酸鎂與月桂基硫酸鈉之混合物。通常，潤滑劑係以錠劑之0.25 wt%至10 wt%、較佳地0.5 wt%至3 wt%的量存在。
其他習知成分包括抗氧化劑、著色劑、調味劑、保存劑及掩味劑(taste-masking agent)。
例示性錠劑可包含至多約80 wt%表面活性劑、約10 wt%至約90 wt%黏合劑、約0 wt%至約85 wt%稀釋劑、約2 wt%至約10 wt% 崩散劑、及約0.25 wt%至約10 wt%潤滑劑。
可將錠劑摻合物直接或藉由滾筒壓製以形成錠劑。替代地，在製錠之前可將錠劑摻合物或摻合物之一部分經濕式、乾式、或熔融造粒、熔融凍凝(melt congealed)、或擠壓。最終的劑型可包括一或多層且可經包覆或未經包覆；或經膠囊化。
錠劑之調配物詳細地討論於“Pharmaceutical Dosage Forms: Tablets, Vol. 1,” by H. Lieberman and L. Lachman, Marcel Dekker, N.Y., N.Y., 1980 (ISBN 0-8247-6918-X)中，其揭露係以引用方式全文併入本文中。
用於口服投予之固體調配物可調配成立即釋放及/或調整釋放(modified release)。調整釋放調配物包括延遲釋放、持續釋放、脈衝釋放、控制釋放、靶向釋放、程序釋放。
合適的調整釋放調配物描述於美國專利6,106,864號中。其他適合的釋放技術之細節(諸如高能量分散、及滲透、及包膜粒子)可見於Verma等人之Current Status of Drug Delivery Technologies and Future Directions, Pharmaceutical Technology On-line, 2001, 25(2), 1-14中。使用咀嚼膠以達到控制釋放係描述於WO 2000/035298中。此等參考之揭露係以引用方式全文併入本文中。
在一個具體實施例中，可用於本發明之組合療法之醫藥組成物僅包含單一治療劑(例如ALK抑制劑或CDK抑制劑)並與包含第二治療劑之另一醫藥組成物組合使用。
在另一具體實施例中，可用於本發明之組合療法之醫藥組成物包含ALK抑制劑及CDK抑制劑二者。
在另一具體實施例中，該醫藥組成物包含以分開或合起來包含間變性淋巴瘤激酶(ALK)抑制劑或其醫藥上可接受之鹽及周期蛋白依賴型激酶(CDK)抑制劑或其醫藥上可接受之鹽、及至少一種賦形劑之組合。
在一個具體實施例中，本發明之此種醫藥組成物供使用於治療癌症。根據本發明，ALK抑制劑及CDK抑制劑可呈單一醫藥組成物(亦即，作為固定劑量組合)、呈一個組合單位劑量形式或呈兩個分開單位劑量形式(亦即，作為非固定劑量組合)合起來、或依序投予。單位劑量形式亦可為固定組合。
根據本發明用於分開投予兩種劑或用於將彼等以固定劑量組合投予之醫藥組成物可以本身已知的方式製備，且為適用於腸內(諸如口服或直腸)、局部、及腸胃外投予至包括諸如人之哺乳動物(溫血動物)之個體，該醫藥組成物包含治療有效量的至少一種單獨的藥理上活性組合搭配物(例如，如上所示)、或與一或多種醫藥上可接受之載劑或稀釋劑(尤其是適用於腸內或腸胃外應用)的組合。合適的醫藥組成物包含例如約0.1%至約99.9%、較佳地約1%至約60%的(多種)活性成分。
用於腸內或腸胃外投予之組合療法之醫藥組成物係例如呈單位劑量形式者，諸如糖衣錠、錠劑、膠囊或栓劑、安瓿、注射用溶液或注射用懸浮液。局部投予係例如對皮膚或眼睛(例如呈洗劑、凝膠、軟膏、乳霜之形式)，或呈鼻用或栓劑形式。若無另外指示，則此等係以本身已知的方式製備，例如藉由習知混合、造粒、糖衣包覆、溶解或凍乾製程之手段。應理解在各劑型之個別劑量中所包含的各劑之單位含量本身不需要構成有效量，因為必需的有效量可藉由投予多個劑量單位來達到。
醫藥組成物可包含一或多種醫藥上可接受之載劑或稀釋劑且可以習知方式藉由將組合搭配物之一或二者與醫藥上可接受之載劑或稀釋劑混合來製造。醫藥上可接受之稀釋劑包括，但不限於乳糖、右旋糖、甘露醇、及/或甘油、及/或潤滑劑及/或聚乙二醇。醫藥上可接受之黏合劑之實施例包括，但不限於矽酸鎂鋁、澱粉(諸如玉米、小麥、米澱粉)、明膠、甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉及/或聚乙烯吡咯啶酮，且若有需要，醫藥上可接受之崩散劑包括、但不限於澱粉、瓊脂、藻酸或其鹽(諸如藻酸鈉)、及/或發泡混合物、或吸附劑、染料、調味劑及甜味劑。亦可能呈可腸胃外投予組成物之形式或呈輸注液之形式使用本發明之化合物。醫藥組成物可為無菌及/或包含賦形劑，例如防腐劑、穩定劑、潤濕化合物及/或乳化劑、助溶劑(solubiliser)、調控滲透壓及/或緩衝液之鹽類。
本發明之組合中所採用的各劑之有效劑量可視所採用的特定化合物或醫藥組成物、投予模式、所治療的病況、所治療的病況之嚴重程度而變化。因此，本發明之組成物之劑量方案係根據包括下列之各種因素來選擇：患者之類型、物種、年齡、體重、性別及醫療病況；所治療的病況之嚴重程度；投予之途徑；患者之腎及肝功能；及所採用之特定化合物。掌握普通技術之醫生、臨床醫生或獸醫可容易判定及開立預防、對抗或阻止病況進展所需的有效量的藥物。在產生功效的範圍內達到藥物濃度之最佳精度需要基於藥物對目標部位可用性之動力學的方案。此涉及考量藥物之分佈、平衡、及消除。
出於本發明之目的，治療有效量通常會以單次或分次劑量將總每日劑量投予至宿主。式(I)之化合物可以例如約0.05至約50 mg/ kg接受者體重、較佳地約0.1至25 mg/kg接受者體重、更佳地約0.5至10 mg/kg接受者體重之每日劑量範圍投予至宿主。劑(b)可以例如約0.001至1000 mg/kg接受者體重、較佳地1.0至100 mg/kg接受者體重、及更佳地1.0至50 mg/kg接受者體重之每日劑量範圍投予至宿主。劑量單位組成物可包含其此等分次量以構成每日劑量。
套組
本發明亦涉及用於製劑及使用如本文中所揭示的劑之套組，其包含一或多種ALK抑制劑及一或多種CDK抑制劑。在一個態樣中，本發明之組合療法之劑可合宜地呈適用於共投予該等劑之套組之形式組合。套組可為特別適用於投予不同劑型(例如，口服及腸胃外)、在不同劑量間隔下投予分開的治療劑，或相互滴定分開的治療劑。
接著，套組之劑可例如作為混合或個別劑量依序、同時或並行投予。例如，套組之劑可按時間錯開，亦即在不同時間點且在相等或不同套組之治療劑的時間間隔之情況下投予。
在組合製劑或組合療法中所投予的該等劑之總量之比率可變化，例如以滿足所治療的患者亞群的需求或單一患者的需求。
在一個具體實施例中，本發明之套組可包含下列組分：ALK抑制劑、或其醫藥上可接受之鹽類、及醫藥上可接受之載劑；及CDK抑制劑、或其醫藥上可接受之鹽類、及醫藥上可接受之載劑；其中該CDK抑制劑係CDK4/6抑制劑、或CDK2/4/6抑制劑。
在一個具體實施例中，本發明之套組可包含下列組分；ALK抑制劑、或其醫藥上可接受之鹽類、及醫藥上可接受之載劑；及CDK抑制劑、或其醫藥上可接受之鹽類、及醫藥上可接受之載劑；其中該CDK抑制劑係CDK4/6抑制劑、或CDK2/4/6抑制劑；其中該等組分係呈適用於同時、分開及/或依序投予之形式提供。
在一個具體實施例中，本發明之套組可包含呈醫藥組成物之形式的一或兩種的藥劑，該醫藥組成物包含ALK抑制劑、或其醫藥上可接受之鹽類、及醫藥上可接受之載劑及CDK抑制劑、或其醫藥上可接受之鹽類、及醫藥上可接受之載劑。套組包含用於分開保持該等組成物之構件，諸容器、分隔瓶(divided bottle)、或分隔鋁箔包(divided foil packet)。
在一個具體實施例中，本發明之套組可包含第一容器、第二容器、及「藥品仿單」或「使用說明」，其中該第一容器包含至少一個劑量的ALK抑制劑、或其醫藥上可接受之鹽、及醫藥上可接受之載劑；該第二容器包含至少一個劑量的CDK抑制劑、或其醫藥上可接受之鹽、及醫藥上可接受之載劑；其中CDK抑制劑係CDK4/6抑制劑、或CDK2/4/6抑制劑；且該藥品仿單包含使用該套組用於治療個體之癌症的說明書。
「使用說明書」一般包括諸如劑量、投予說明之資訊，例如描述在使用套組以實現所欲結果(諸如減少或殺滅腫瘤)中所採用的技術之具體表達。此種劑量及投予藥說明書可係提供給醫師的種類(例如藉由藥品標籤)、或其可係由醫師所提供的種類(諸如對患者之說明書)。視需要地，該套組亦包含其他可用的組分，諸如稀釋劑、緩衝劑、注射器、靜脈輸液袋及管材、針頭導管、塗佈器、移液或測量工具、繃帶材料或由所屬技術領域中具有通常知識者將輕易瞭解之其他可用的器具。
更多治療劑
本文中所述的組合在某些腫瘤中之功效可藉由與其他批准或實驗性癌症療法的組合來增強，例如放射線、手術、化學治療劑、標把療法、抑制在腫瘤中失調的其他訊息傳導途徑的劑、及其他免疫增強劑。
本發明之方法、組合、醫藥組成物、及用途可額外地包含一或多種額外抗癌劑，諸如抗腫瘤劑、抗血管生成劑、訊息轉導抑制劑及抗增殖劑，其等量合起來有效治療該癌症。在一些具體實施例中，抗腫瘤劑係選自由下列所組成之群組：核分裂抑制劑(mitotic inhibitor)、烷化劑、抗代謝藥物、插入型抗生素、生長因子抑制劑、放射線、細胞週期抑制劑、酶、拓撲異構酶抑制劑、生物反應調節劑、抗體、細胞毒性劑、抗激素、及類似者。
在另一具體實施例中，該抗癌劑係抗血管生成劑。抗血管生成劑之實施例包括例如VEGF抑制劑、VEGFR抑制劑、TIE-2抑制劑、PDGFR抑制劑、促血管生成素(angiopoetin)抑制劑、PKCβ抑制劑、COX-2(環氧酶II)抑制劑、整合素(α-v/β-3)、MMP-2(基質金屬蛋白酶2 (matrix-metalloproteinase 2))抑制劑、及MMP-9 (基質金屬蛋白酶9)抑制劑。較佳抗血管生成劑包括舒尼替尼(sunitinib) (Sutent™)、貝伐單抗(bevacizumab) (Avastin™)、阿西替尼(axitinib) (AG 13736)、SU 14813 (Pfizer)、及AG 13958 (Pfizer)。其他抗血管生成劑包括瓦他拉尼(vatalanib) (CGP 79787)、索拉非尼(Sorafenib) (Nexavar™)、哌加他尼鈉(pegaptanib octasodium) (Macugen™)、凡德他尼(vandetanib) (Zactima™)、PF-0337210 (Pfizer)、SU 14843 (Pfizer)、AZD 2171 (AstraZeneca)、蘭尼單抗(ranibizumab) (Lucentis™)、Neovastat™ (AE 941)、四硫鉬酸銨(tetrathiomolybdata) (Coprexa™)、AMG 706 (Amgen)、VEGF Trap (AVE 0005)、CEP 7055 (Sanofi-Aventis)、XL 880 (Exelixis)、替拉替尼(telatinib) (BAY 57-9352)、及CP-868,596 (Pfizer)。其他抗血管生成劑包括艾尚道靈(enzastaurin) (LY 317615)、米多道靈(midostaurin) (CGP 41251)、派瑞弗辛(perifosine) (KRX 0401)、替普瑞酮(teprenone) (Selbex™)及UCN 01 (Kyowa Hakko)。抗血管生成劑之其他實施例包括塞來昔布(celecoxib) (Celebrex™)、帕瑞昔布(parecoxib) (Dynastat™)、德拉昔布(deracoxib) (SC 59046)、蘆美昔布(lumiracoxib) (Preige™)、凡第昔布(valdecoxib) (Bextra™)、羅菲昔(rofecoxib) (Vioxx™)、艾拉莫德(iguratimod) (Careram™)、IP 751 (Invedus)、SC-58125 (Pharmacia)及依托昔布(etoricoxib) (Arcoxia™)。又進一步抗血管生成劑包括依昔舒林(exisulind) (Aptosyn™)、雙水楊酸酯(salsalate) (Amigesic™)、二氟尼(diflunisal) (Dolobid™)、異布洛芬(ibuprofen) (Motrin™)、凱妥普洛芬(ketoprofen) (Orudis™)、萘布敉(nabumetone) (Relafen™)、匹洛西卡(piroxicam) (Feldene™)、鈉普洛辛(naproxen) (Aleve™、Naprosyn™)、二克氯吩(diclofenac) (Voltaren™)、引朵美沙辛(indomethacin) (Indocin™)、舒林達酸(sulindac) (Clinoril™)、妥美丁(tolmetin) (Tolectin™)、艾特多雷(etodolac) (Lodine™)、克妥洛(ketorolac) (Toradol™)、及奧沙普嗪(oxaprozin) (Daypro™)。又進一步抗血管生成劑包括ABT 510 (Abbott)、艾拉斯它(apratastat) (TMI 005)、AZD 8955 (AstraZeneca)、英西利德(incyclinide) (Metastat™)、及PCK 3145 (Procyon)。又進一步抗血管生成劑包括阿希翠廷(acitretin (Neotigason™)、普利德辛(plitidepsin) (aplidine™)、斯冷替(cilengtide) (EMD 121974)、考布他汀(combretastatin) A4 (CA4P)、芬瑞尼得(fenretinide) (4 HPR)、哈洛夫酮(halofuginone) (Tempostatin™)、Panzem™ (2-甲氧基雌二醇)、PF-03446962 (Pfizer)、瑞比斯它(rebimastat) (BMS 275291)、卡妥索單抗(catumaxomab) (Removab™)、來那度胺(lenalidomide) (Revlimid™)、角鯊胺(squalamine) (EVIZON™)、沙利度胺(thalidomide) (Thalomid™)、Ukrain™ (NSC 631570)、Vitaxin™ (MEDI 522)、及唑來膦酸(zoledronic acid) (Zometa™)。
在另一具體實施例中，該抗癌劑係信號轉導抑制劑(例如，抑制意指控制在細胞內通信細胞生長、分化、及存活之基本過程的調控分子)。信號轉導抑制劑包括小分子、抗體、及反義分子。信號轉導抑制劑包括例如激酶抑制劑(例如，酪胺酸激酶抑制劑或絲胺酸/蘇胺酸激酶抑制劑)及細胞週期抑制劑。更具體而言，信號轉導抑制劑包括例如法呢基蛋白轉移酶抑制劑(farnesyl protein transferase inhibitor)、EGF抑制劑、ErbB-1 (EGFR)、ErbB-2、pan erb、IGF1R抑制劑、MEK、c-Kit抑制劑、FLT-3抑制劑、K-Ras抑制劑、PI3激酶抑制劑、JAK抑制劑、STAT抑制劑、Raf激酶抑制劑、Akt抑制劑、mTOR抑制劑、P70S6激酶抑制劑、WNT路徑抑制劑及所謂的多靶向激酶抑制劑。較佳信號轉導抑制劑包括吉非替尼(gefitinib) (Iressa™)、西妥昔單抗(cetuximab) (Erbitux™)、埃羅替尼(erlotinib) (Tarceva™)、曲妥珠單抗(trastuzumab) (Herceptin™)、舒尼替尼(sunitinib) (Sutent™)、伊馬替尼(imatinib) (Gleevec™)、及PD325901 (Pfizer)。可與本發明之化合物及本文中所述的醫藥組成物結合使用的信號轉導抑制劑之額外實施例包括BMS 214662 (Bristol-Myers Squibb)、洛那法尼(lonafarnib) (Sarasar™)、吡利曲索(pelitrexol) (AG 2037)、馬妥珠單抗(matuzumab) (EMD 7200)、尼妥珠單抗(nimotuzumab) (TheraCIM h-R3™)、帕尼單抗(panitumumab) (Vectibix™)、凡德他尼(Vandetanib) (Zactima™)、帕唑帕尼(pazopanib) (SB 786034)、ALT 110 (Alteris Therapeutics)、BIBW 2992 (Boehringer Ingelheim)、及Cervene™ (TP 38)。信號轉導抑制劑之其他實施例包括PF-2341066 (Pfizer)、PF-299804 (Pfizer)、卡奈替尼(canertinib) (CI 1033)、帕妥株單抗(pertuzumab) (Omnitarg™)、拉帕替尼(Lapatinib) (Tycerb™)、培利替尼(pelitinib) (EKB 569)、米替福新(miltefosine) (Miltefosin™)、BMS 599626 (Bristol-Myers Squibb)、Lapuleucel-T (Neuvenge™)、NeuVax™
(E75癌症疫苗)、Osidem™ (IDM 1)、木利替尼(mubritinib) (TAK-165)、CP-724,714 (Pfizer)、帕尼單抗(panitumumab) (Vectibix™)、拉帕替尼(lapatinib) (Tycerb™)、PF-299804 (Pfizer)、培利替尼(pelitinib )(EKB 569)、及帕妥株單抗(pertuzumab) (Omnitarg™)。信號轉導抑制劑之其他實例包括ARRY 142886 (Array Biopharm)、依維莫司(everolimus) (Certican™)、佐他莫司(zotarolimus) (Endeavor™)、坦西莫司(temsirolimus) (Torisel™)、AP 23573 (ARIAD)、及VX 680 (Vertex)。此外，其他信號轉導抑制劑包括XL 647 (Exelixis)、索拉非尼(sorafenib) (Nexavar™)、LE-AON (Georgetown University)、及GI-4000 (Globelmmune)。 其他信號轉導抑制劑包括ABT 751 (Abbott)、阿維西地(alvocidib)(夫拉平度(flavopiridol))、BMS 387032 (Bristol Myers)、EM 1421 (Erimos)、英地蘇蘭(indisulam) (E 7070)、賽利西布(seliciclib) (CYC 200)、BIO 112 (Onc Bio)、BMS 387032 (Bristol-Myers Squibb)、PD 0332991 (Pfizer)、及AG 024322 (Pfizer)。
在另一具體實施例中，該抗癌劑係抗腫瘤劑，亦稱為化學治療劑。經典抗腫瘤劑包括，但不限於激素調節劑(諸如激素、抗激素、雄性激素促效劑、雄性激拮抗劑素及抗雌激素治療劑)、組蛋白脫乙醯基酶(HDAC)抑制劑、基因沉默劑或基因活性劑、核糖核酸酶、蛋白模擬物(proteosomic)、拓撲異構酶I抑制劑、喜樹鹼衍生物(Camptothecin derivative)、拓撲異構酶II抑制劑、烷化劑、抗代謝物、聚(ADP-核糖)聚合酶-1 (PARP-1)抑制劑微管抑制劑、抗生素、植物來源紡錘體抑制劑、鉑配位化合物、基因治療劑、反義寡核苷酸、血管靶向劑(VTA)、及史他汀(statin)。與本發明之化合物，視需要地與一或多種其他劑組合治療使用的經典抗腫瘤劑之實施例包括，但不限於糖皮質激素(諸如地塞米松(dexamethasone)、潑尼松(prednisone)、潑尼龍(prednisolone)、甲潑尼龍(methylprednisolone)、氫皮質酮(hydrocortisone))；及黃體素(諸如甲羥助孕酮(medroxyprogesterone)、甲地孕酮乙酸酯(megestrol acetate) (Megace)、美服培酮(mifepristone) (RU-486))、選擇性雌激素受體調節劑(SERM；諸如他莫昔芬(tamoxifen)、雷諾昔芬(raloxifene)、拉索昔芬(lasofoxifene)、阿非昔芬(afimoxifene)、阿佐昔芬(arzoxifene)、巴多昔芬(bazedoxifene)、非培米芬(fispemifene)、奧美昔芬(ormeloxifene)、奧培米芬(ospemifene)、替米利芬(tesmilifene)、托瑞米芬(toremifene)、曲洛司坦(trilostane)及CHF 4227 (Cheisi))、選擇性雌激素-受體下調劑(SERD；諸如氟維司群(fulvestrant))、依西美坦(exemestane) (Aromasin)、阿那曲唑(anastrozole) (Arimidex)、阿他美坦(atamestane)、法屈唑(fadrozole)、來曲唑((letrozole) (Femara)、促性腺激素釋放激素(GnRH；通常亦稱為促黃體激素-釋放激素(luteinizing hormone-releasing hormone) [LHRH])促效劑，諸如布舍瑞林(buserelin) (Suprefact)、戈舍瑞林(goserelin) (Zoladex)、亮丙瑞林(leuprorelin) (Lupron)、及曲普瑞林(triptorelin) (Trelstar)、阿巴瑞克(abarelix) (Plenaxis)、比卡魯胺(bicalutamide) (Casodex)、環丙孕酮(cyproterone)、氟他胺(flutamide) (Eulexin)、甲地孕酮(megestrol)、尼魯胺(nilutamide) (Nilandron))、及奧沙特隆(osaterone)、度他雄胺(dutasteride)、愛普列特(epristeride)、非那雄安(finasteride)、鋸棕櫚(Serenoa repens)、PHL 00801、阿巴瑞克(abarelix)、戈舍瑞林(goserelin)、亮丙瑞林(leuprorelin)、曲普瑞林(triptorelin)、比卡魯胺(bicalutamide)、他莫昔芬(tamoxifen)、依西美坦(exemestane)、阿那曲唑(anastrozole)、法屈唑(fadrozole)、福美司坦(formestane)、來曲唑(letrozole)、及其組合。與本發明之化合物組合使用的其它經典抗腫瘤劑之實施例包括，但不限於二醯苯胺異羥肟酸(suberolanilide hydroxamic acid) (SAHA, Merck Inc./Aton Pharmaceuticals)、酯肽(depsipeptide) (FR901228或FK228)、G2M-777、MS-275、新戊醯氧基甲基丁酸酯(pivaloyloxymethyl butyrate) 及PXD-101；Onconase(豹蛙酶(ranpirnase))、PS-341 (MLN-341)、Velcade(硼替佐米(bortezomib))、9-胺基喜樹鹼、貝洛替康(belotecan)、BN-80915 (Roche)、喜樹鹼(camptothecin)、二氟替康(diflomotecan)、艾特咔林(edotecarin)、依喜替康(exatecan) (Daiichi)、吉馬替康(gimatecan)、10-羥基喜樹鹼、伊立替康鹽酸鹽(irinotecan HCl (Camptosar)、勒托替康(lurtotecan)、奧拉熱星(Orathecin)(盧比替康(rubitecan)，Supergen)、SN-38、拓樸替康(topotecan)、喜樹鹼(camptothecin)、10-羥基喜樹鹼、9-胺基喜樹鹼、伊立替康(irinotecan)、SN-38、伊多替卡林(edotecarin)、拓樸替康(topotecan)、阿柔比星(aclarubicin)、阿德力黴素(adriamycin)、胺萘非特(amonafide)、胺柔比星(amrubicin)、安納黴素(annamycin)、道諾黴(daunorubicin)、多柔比星(doxorubicin)、依沙蘆星(elsamitrucin)、表柔比星(epirubicin)、依託泊苷(etoposide)、伊達比星(idarubicin)、加柔比星(galarubicin)、羥基脲(hydroxycarbamide)、奈莫柔比星(nemorubicin)、諾消靈(novantrone)(米托蒽醌(mitoxantrone))、吡柔比星(pirarubicin)、匹衫瓊(pixantrone)、甲基苄肼(procarbazine)、蝴蝶黴素(rebeccamycin)、索布佐生(sobuzoxane)、塔福坡塞德(tafluposide)、戊柔比星(valrubicin)、Zinecard(右雷佐生(dexrazoxane))、氮芥N-氧化物(nitrogen mustard N-oxide)、環磷醯胺(cyclophosphamide)、AMD-473)、六甲蜜胺(altretamine)、AP-5280)、阿呱喹酮(apaziquone)、溴他利星(brostallicin)、苯達莫司汀(bendamustine)、白消安(busulfan)、卡波醌(carboquone)、卡莫司汀(carmustine)、苯丁酸氮芥(chlorambucil)、達卡巴嗪(dacarbazine)、雌莫司汀(estramustine)、福莫司汀(fotemustine)、葡磷醯胺(glufosfamide)、異環磷醯胺(ifosfamide)、KW-2170、洛莫司汀(lomustine)、馬磷醯胺(mafosfamide)、甲基二(氯乙基)胺(mechlorethamine)、美法侖(melphalan)、二溴甘露醇(mitobronitol)、二溴衛矛醇(mitolactol)、絲裂黴素C (mitomycin C)、米托蒽醌(mitoxatrone)、尼莫司汀(nimustine)、雷莫司汀(ranimustine)、替莫唑胺(temozolomide)、噻替呱(thiotepa)、及鉑配位烷化化合物諸如順鉑、Paraplatin(卡鉑(carboplatin))、依鉑(eptaplatin)、洛鉑(lobaplatin)、奈達鉑(nedaplatin)、Eloxatin(奧沙利鉑(oxaliplatin)，Sanofi)、鏈脲菌素(streptozocin)、薩特鉑(satrplatin)、及其組合。
在另一具體實施例中，該抗癌劑係所謂的二氫葉酸還原酶抑制劑(諸如甲胺喋呤(methotrexate)及NeuTrexin(三甲曲沙葡糖醛酸脂(trimetresate glucuronate)))、嘌呤拮抗劑(諸如6-巰基嘌呤核糖苷、巰嘌呤、6-硫鳥嘌呤、克拉屈濱(cladribine)、氯伐拉濱(clofarabine (Clolar)、氟達拉濱(fludarabine)、奈拉(nelarabine)、及雷替曲塞(raltitrexed))、嘧啶拮抗劑(諸如5-氟尿嘧啶(5-FU))、Alimta(培美曲塞二鈉(premetrexed disodium，LY231514，MTA)、卡培他濱(capecitabine) (Xeloda™)、阿糖胞苷、Gemzar™(吉西他濱(gemcitabine)，Eli Lilly)、Tegafur(UFT Orzel或Uforal且包括替加氟(tegafur)、吉美斯塔(gimestat)及歐特斯塔(otostat)之TS-1組合)、脫氧氟尿苷、卡莫氟(carmofur)、阿拉伯糖基胞嘧啶(包括十八烷基磷酸鹽(ocfosfate)、硬脂酸磷酸鹽(phosphate stearate)、緩釋及脂質體形式)、依諾他濱(enocitabine)、5-阿紮胞苷(5-azacitidine) (Vidaza)、地西他濱(decitabine)、及乙炔基胞嘧啶核苷(ethynylcytidine))及其他抗代謝物諸如依氟鳥胺酸(eflornithine)、羥基脲、甲醯四氫葉酸(leucovorin)、諾拉曲特(nolatrexed)(Thymitaq)、三安平(triapine)、曲美沙特(trimetrexate)、(N-(5-[N-(3,4-二氫-2-甲基-4-側氧基喹唑啉-6-基甲基)-N-甲基胺基]-2-噻吩甲醯基)-L-麩胺酸)、(AG-014699 (Pfizer Inc.)、ABT-472 (Abbott Laboratories)、(INO-1001 (Inotek Pharmaceuticals)、(KU-0687) (KuDOS Pharmaceuticals)及GPI 18180 (Guilford Pharm Inc)及其組合。
經典抗腫瘤劑之其他實施例包括，但不限於Abraxane (Abraxis BioScience, Inc.)、Batabulin (Amgen)、EPO 906 (Novartis)、長春氟寧(Vinflunine) (Bristol- Myers Squibb Company)、放線菌黴素D、博來黴素、絲裂黴素C、新抑癌素(Zinostatin)、長春花鹼、長春花新鹼、長春地辛(vindesine)、長春瑞賓(vinorelbine) (Navelbine)、多烯紫杉醇(Taxotere)、Ortataxel、太平洋紫杉醇(包括Taxoprexin，DHA/太平洋紫杉醇共軛物)、順鉑、卡鉑、奈達鉑(Nedaplatin)、奧沙利鉑(Eloxatin)、賽特鉑(Satraplatin)、Camptosar、卡培他濱(capecitabine) (Xeloda)、奧沙利鉑(oxaliplatin) (Eloxatin)、泰索帝阿利維A酸(Taxotere alitretinoin)、卡福醯胺(Canfosfamide) (Telcyta™)、DMXAA (Antisoma)、伊班膦酸(ibandronic acid)、L-天冬醯胺酶、培加帕酶(pegaspargase) (Oncaspar™)、乙丙昔羅(Efaproxiral)(Efaproxyn™ -放射療法)、貝沙羅汀(bexarotene) (Targretin™)、替米利芬(Tesmilifene)(DPPE -增強細胞毒素之功效)、Theratope™ (Biomira)、視黃酸(Tretinoin) (Vesanoid™)、替拉紮明(tirapazamine) (Trizaone™)、莫特沙芬釓(motexafin gadolinium) (Xcytrin™) Cotara™ (mAb)、及NBI-3001 (Protox Therapeutics)、聚麩胺酸太平洋紫杉醇(polyglutamate-paclitaxel) (Xyotax™)及其組合。經典抗腫瘤劑之進一步實施例包括、但不限於如Advexin (ING 201)、TNFerade (GeneVec、回應於放射線療法之表現TNFα的化合物)、RB94 (Baylor College of Medicine)、Genasense (Oblimersen, Genta)、考布他汀A4P (Combretastatin A4P) (CA4P)、Oxi-4503、AVE-8062、ZD-6126、TZT-1027、阿托伐他汀(Atorvastatin) (Lipitor, Pfizer Inc.)、普伐他汀(Provastatin) (Pravachol, Bristol-Myers Squibb)、洛伐他汀(Lovastatin) (Mevacor, Merck Inc.)、辛伐他汀(Simvastatin) (Zocor, Merck Inc.)、氟伐他汀(Fluvastatin) (Lescol, Novartis)、西立伐他汀(Cerivastatin) (Baycol, Bayer)、羅素他汀(Rosuvastatin) (Crestor, AstraZeneca)、洛伐他汀(Lovostatin)、菸酸(Advicor, Kos Pharmaceuticals)、Caduet、Lipitor、托徹普(torcetrapib)、及其組合。
在一些具體實施例中，本發明之方法、組合、醫藥組成物、及用途包含進一步活性劑，其中該進一步活性劑係內分泌劑，諸如芳香酶抑制劑、SERD或SERM。
本發明之此等及其他態樣，包括下面所列出的例示性特定具體實施例，將自本文中所包含的教示而顯而易見。
實施例
實施例 1 ： 在初始 ALK 陽性非小細胞肺癌 (NSCLC) 細胞株中針對單獨或呈組合之勞拉替尼及帕博西尼之反應持續性研究
概述
在藥物敏感H3122細胞中評定勞拉替尼與帕博西尼的組合對細胞生長及反應持續性(DOR)之效果。
材料及方法
H3122 (EML4-ALK E13; A20)人類NSCLC細胞株得到了美國國家衛生研究院(NIH)許可。使用標準細胞培養技術來培養細胞。對於DOR研究，將H3122細胞(5 x 10
5
)平板接種於T75燒瓶中並用勞拉替尼、帕博西尼、或以對應圖中所示的指定濃度下的組合治療。為增加臨床前發現進入臨床之可轉換性(translatability)，在所有研究中均使用各藥物臨床上可達到的劑量。當細胞達到~70%滿盤時，將其胰蛋白酶化(trypsinized)並計數。接著，將5 x 10
5
細胞平板接種於新的燒瓶中並在存在相同藥物治療之情況下培養。儘管在整個研究過程中僅拿一小部分的細胞，但每次分離之所有細胞均被考慮用於計算總細胞數。接著將其繪製為在該時間點時之總活細胞。將該程序重複數週至數月。每週更換藥物並持續地維持直到達到指定細胞數所需的時間為止。
為表示1L ALK+ NSCLC治療，在初始H3122細胞中進行兩項研究。在研究1A中，將H3122細胞用2x IC
50
的勞拉替尼(總共5 nM或4 nM游離)作為起始濃度處理。將勞拉替尼濃度在~10天的間隔內加倍3次，且最終劑量設定在250 nM(總共，205 nM游離)。最終濃度接近人類之臨床上可達到的勞拉替尼濃度(~187 nM，游離)。在不存在或存在帕博西尼(100 nM)下，進行勞拉替尼治療排程。帕博西尼之濃度亦為在批准劑量下之臨床游離藥物暴露之近似值。監視細胞生長數週或數月直至達到DOR評定的指定細胞數為止。
在研究1B中，在有或沒有帕博西尼(100 nM)之下，將H3122細胞用勞拉替尼臨床相關濃度(總共250 nM)之單一劑量的勞拉替尼處理。依循類似程序以允許在如上所述的數週內記錄在治療下之細胞數並評定DOR。
結果
H3122細胞株之DOR結果顯示於圖1A及圖1B中。經DMSO處理之細胞達到特定總細胞數所需的時間最少，該等細胞係作為此研究之對照並代表非藥物阻礙之生長速率(non-drug-impeded growth rate)。相較於對照，單一劑帕博西尼處理顯示適度的延遲，而單一劑勞拉替尼由於其對初始細胞具有較高效力所以顯示較大的延遲，如相較於對照，需要更多時間以達到相同細胞數，代表勞拉替尼抗性生長出現所需的時間。勞拉替尼及帕博西尼之組合顯示最顯著的延遲，代表在添加帕博西尼之情況下對抗性時間之進一步阻礙。
表1顯示在ALKi敏感NSCLC細胞中之兩個獨立實驗結果，其測定在不同處理條件下細胞自5 X 10
5
個生長至指定數(5 X 10
12
個)所需的天數。
結論
在H3122細胞株(其係代表1L ALK+ NSCLC患者群體之NSCLC細胞株模型)中，如相較於單一劑處理，勞拉替尼及帕博西尼之組合顯著地增加反應持續性。
實施例 2 ： 用於 DOR 研究之 ALK 抑制劑 (ALKi) 抗性 NSCLC 細胞株之生育及特徵
概述
ALKi抗性細胞株係使用試管內實驗方法所發展。所選的細胞殖株係以ALK依賴型抗性機制為特徵並對克唑替尼及勞拉替尼敏感。
材料及方法
將H3122細胞暴露於克唑替尼(100至1000 nM，逐漸增加)、勞拉替尼(100 nM，單一劑量)或艾樂替尼(1000 nM，單一劑量)超過2個月。選擇個別的殖株並擴展以用於後續ALK依賴型抗性機制的分析(亦即，繼發性ALK激酶結構域突變或ALK擴增)。
突變分析係藉由靶向定序進行。根據製造商之程序用Qiagen DNeasy Kit (Qiagen)自細胞團塊中單離基因體DNA。將對應於ALK酪胺酸激酶結構域之外顯子21至27經PCR擴增。在Agilent Bioanalyzer上使用DNA 1000晶片(Agilent Technologies)對各擴增子之DNA濃度進行定量。將條碼化PCR擴增子模板(Barcoded PCR amplicon template)以等莫耳濃度合併並在Ion Torrent PGM (Life Technologies)上進行雙向定序。建構具有總共2 × 10
8
DNA分子的基因庫。藉由Life Technologies Torrent Suite 2.2版分析條碼專一性(barcode-specific)樣本數據。使用Broad Institute之Integrative Genomics Viewer (IGV) 2.1版覽閱輸出之BAM文件。在IGV中，「覆蓋等位基因頻率閥值(Coverage allele-freq threshold)」係設定至0.01，而「按質量遮蔽錯配鹼基(Shade mismatched bases by quality)」係設定至0至20(Huang D等人之Multiplexed deep sequencing analysis of ALK kinase domain identifies resistance mutations in relapsed patients following crizotinib treatment. Genomics. 2013, 102:157-62.)。根據製造商之程序，使用Genome-Wide Human SNP Array 6.0進行複本數變體(copy number variant)之偵測。
在基於細胞之存活率分析中，將四種細胞株於補充有10% FBS的生長培養基中以2,000至4,000細胞/孔接種在96孔板中。在DMSO中進行測試化合物之連續稀釋，並將對照及指定濃度的測試化合物添加至各孔中。將細胞在37°C下培育3至7天(最終DMSO含量為0.1%)。接著進行Cell Titer-Glo
®
Luminescent Cell Viability Assay (Promega)以測定細胞存活率。IC
50
值係在GraphPad Prism (GraphPad Software)中使用S型劑量反應(sigmoidal dose-response)(可變斜率)來計算。
結果
分析約30個克唑替尼抗性殖株，鑑定出H3122 CrizoR 1-07 (G1269A)含有繼發性ALK突變(G1269A)。此突變先前在克唑替尼復發的患者中已有報導(Doebele RC等人之Mechanisms of resistance to crizotinib in patients with ALK gene rearranged non-small cell lung cancer. Clinical cancer research. 2012, 18:1472-82；Gainor JF等人之Molecular Mechanisms of Resistance to First- and Second-Generation ALK Inhibitors in ALK-Rearranged Lung Cancer. Cancer discovery. 2016, 6:1118-33)。相較於親代細胞H3122，當用增加濃度的克唑替尼及勞拉替尼處理時，克唑替尼抗性H3122 CrizoR 1-07 (G1269A)細胞之IC
50
顯示增加＞15倍(圖2A)。勞拉替尼抗性H3122 LorlaR 1-09細胞不含繼發性ALK激酶突變。此等細胞對勞拉替尼處理完全不敏感(圖2B)，說明存在ALK非依賴型抗性機制。勞拉替尼抗性H3122 LorlaR 1-06細胞含有ALK擴增，其在臨床上亦暗指ALK抑制劑抗性。此等細胞展示雙相生長曲線(biphasic growth curve)，其中低劑量勞拉替尼(＜100 nM)刺激細胞生長而高劑量(＞100 nM)抑制它(圖2C)。
結論
在試管內實驗系統中所發展的幾個ALKi抗性殖株展示在臨床上所觀察到的代表性抗性機制(亦即繼發性ALK激酶結構域突變或ALK擴增)。該等細胞對ALKi抑制劑(諸如克唑替尼及勞拉替尼)具有抗性。
實施例 3 ： 在幾個衍生自 H3122 之勞拉替尼、克唑替尼或艾樂替尼抗性模型中針對單獨或呈組合之勞拉替尼及帕博西尼之反應持續性研究
概述
在研究中採用代表2L後勞拉替尼、克唑替尼或艾樂替尼之經選擇之ALKi抗性細胞株以評定勞拉替尼加上帕博西尼的組合的反應持續性。
材料及方法
勞拉替尼抗性H3122 LorlaR 1-06 (ALK
amp
)、H3122 LorlaR 1-09(ALK非依賴型)、及H3122 LorlaR池(未特徵化的抗性機制)代表2L後勞拉替尼設置。克唑替尼抗性H3122 CrizoR 1-07 (G1269A)代表2L後克唑替尼設置。具有未特徵化的抗性機制之艾樂替尼抗性H3122 AlecR池細胞代表2L後艾樂替尼設置。
在不存在或存在帕博西尼(總共100 nM)之情況下將細胞用勞拉替尼以250 nM(總共)處理。如前述，在數週內評定細胞生長及DOR。
結果
H3122 LorlaR 1-06細胞含有ALK之擴增且彼等生長對勞拉替尼上癮。因此，DOR評定僅在兩個群組(組合
vs.
單獨勞拉替尼)中獲得。藉由組合
vs.
勞拉替尼觀察到對生長延遲之中等效果(圖3A及圖3B)。在由ALK非依賴型機制所驅使的勞拉替尼抗性細胞(亦即，H3122 LorlaR 1-09細胞)中，相較於勞拉替尼，單獨帕博西尼展示中等的生長抑制效果。與單一劑治療相比，組合治療導致更大的生長延遲(圖3C及圖3D)。在具有混合及未知抗性機制之H3122 LorlaR池中觀察到單獨帕博西尼及組合、可相比的生長延遲，指示細胞僅對帕博西尼處理反應，但對勞拉替尼處理沒有反應(圖3E及圖3F)。
先前，勞拉替尼證實對BaF3細胞中之G1269A(經工程化表現此突變)具有強大效力(IC
50
為36 nM)(Zhou等人之PF-06463922, an ALK/ROS1 Inhibitor, Overcomes Resistance to First and Second Generation ALK Inhibitors in Preclinical Models.Cancer Cell, 2015, 28, 70-81)。勞拉替尼對H3122 CrizoR 1-07 (G1269A)有效，具有116 nM之IC
50
與60%最大抑制(圖2A)。在DOR分析中，單一劑勞拉替尼及帕博西尼對延遲H3122 CrizoR 1-07 (G1269A)之生長均有效。兩種藥物之組合實質上增加反應持續性(圖4A及圖4B)。
使用H3122 AlecR池細胞之DOR研究顯露細胞對勞拉替尼治療具有抗性但對帕博西尼治療敏感。觀察到帕博西尼中度延遲細胞生長，該延遲細胞生長藉由組合處理而略微增加(圖5A及圖5B)。
表2顯示在ALKi抗性NSCLC細胞中在不同處理條件下測定細胞自5 X 10
5
個生長至指定數所需的天數之實驗結果。
結論
雖然抗性細胞生長之出現時間在此等含有各種抗性機制且代表來自不同療法線的患者之細胞株之間變化，但藉由單獨帕博西尼或與勞拉替尼的組合於DOR之增加在各細胞株之獨立實驗中係可再現且一致。
實施例 4 ：在克唑替尼抗性 NSCLC 異種移植物模型中針對單獨及呈組合之勞拉替尼及帕博西尼之抗腫瘤功效研究
概述
在H3122 CrizoR 1-07 (G1269A)異種移植物模型中評定勞拉替尼加上帕博西尼組合相較於各單一劑之體內抗腫瘤功效。
材料及方法
在體內研究中使用雌性無胸腺小鼠(Nu/Nu，6至8週，Charles River Laboratories)。所有程序均根據實驗室動物研究所實驗動物照護與使用指南進行。
腫瘤細胞補充有50% Matrigel (BD Biosciences)以促進作為異種移植物之腫瘤攝取及生長。在針對各實驗投予測試劑前，先將細胞(~5 x 10
6
個於200 μL中)皮下(s.c.)植入小鼠之後側腹區域並允許生長至指定大小。當腫瘤體積達到150至200 mm
3
時，將小鼠隨機分組至研究組，每組10隻小鼠。將動物用媒劑、勞拉替尼(1.5 mpk、PO、BID)、帕博西尼(70 mpk、PO、QD)或組合處理。各藥物以產生等同於人類之暴露(勞拉替尼)、或達到等同於人類之藥效動力學標記調節之暴露(帕博西尼)的劑量或方案投予。每週兩次藉由卡尺測量來監測腫瘤生長，而腫瘤生長抑制(TGI)百分比計算為100*[1- (處理
最後一天
-處理
第一天
) / (對照
最後一天
-對照
第一天
)]。將共變數(ANCOVA)分析方法用於經對數轉換之腫瘤體積以評定在調整基線值之後治療效果之統計顯著性。
結果
H3122 CrizoR 1-07 (G1269A)腫瘤對勞拉替尼或帕博西尼單一劑處理反應類似，在腫瘤接種後第42天分別具有77%或62%之腫瘤生長抑制(TGI)。勞拉替尼加上帕博西尼之組合產生108%之TGI，其顯著地優於勞拉替尼或帕博西尼單獨處理(P ＜ 0.05)(圖6)。TGI結果歸納在表3中。
表3顯示在H3122 CrizoR 1-07 (G1269A)異種移植物模型中勞拉替尼+帕博西尼之腫瘤生長抑制百分比(%TGI)。
結論
在代表含有繼發性ALK激酶結構域突變之克唑替尼抗性患者群體之腫瘤模型中，該組合顯示增強之抗腫瘤功效。
實施例 5 ：
患者衍生之ALKi抗性NSCLC細胞對ALK抑制劑及PF-06873600之敏感性
概述
在三種患者衍生之ALKi抗性NSCLC細胞株中特徵化對ALKi及PF-06873600單一劑之敏感性，該等細胞株包括MGH048-4F (Crizo/Alec/LorlaR)、MGH902-1C (Crizo/ CeriR)及MGH979-6.7R8 (AlecR, G1202R)。
材料及方法
MGH048-4F (Crizo/Alec/LorlaR)、MGH902-1C (Crizo/ CeriR)及MGH979-6.7R8 (AlecR, G1202R)係通過研究合約自MGH獲得。使用來自接受不同線ALK抑制劑療法復發的患者之檢體來衍生細胞株。使用標準細胞培養技術來培養細胞。將細胞針對增加濃度之幾種ALK抑制劑及PF-06873600進行測試。在標準CyQUANT細胞增殖分析中測量細胞存活率及IC
50
。
結果
兩個株(MGH048-4F (Crizo/Alec/LorlaR)及MGH902-1C (Crizo/CeriR))不含有繼發性ALK突變。因此，細胞之抗性可能由ALK非依賴型機制所驅使。當針對多種ALK抑制劑進行測試時，此等細胞對克唑替尼、色瑞替尼及艾樂替尼具有抗性(圖7A &圖7B)。其等對勞拉替尼部分敏感，且在10 μM下不完全抑制。
G1202R突變已知對幾種ALK抑制劑，包括克唑替尼、色瑞替尼及艾樂替尼具有抗性，但對勞拉替尼敏感。經工程化表現G1202R突變之BaF3細胞證明對勞拉替尼的高度敏感性，具有80 nM之IC
50
且完全抑制(Zhou等人之PF-06463922, an ALK/ROS1 Inhibitor, Overcomes Resistance to First and Second Generation ALK Inhibitors in Preclinical Models.Cancer Cell, 2015, 28, 70-81)。MGH979-6.7R8 (AlecR, G1202R)細胞如預期對克唑替尼、色瑞替尼及艾樂替尼具有抗性(圖7C)。然而，不像經工程化之BaF3細胞，其展示勞拉替尼之不完全抑制，說明除了G1202R之外，於此細胞株中亦可能存在ALK非依賴型抗性機制。
當針對PF-06873600進行測試，該等細胞證明對PF-06873600具有敏感性，具有IC
50
值範圍為23至239 nM(圖7D、圖7E及圖7F)。
結論
患者衍生之ALKi抗性細胞株對幾種ALK抑制劑展示抗性，但對PF-06873600顯示具有不同程度的敏感性。
實施例 6 ：在 MGH048-4F (Crizo/Alec/LorlaR) 細胞中針對單獨及與 PF-06873600 組合之勞拉替尼及 PF-06873600 之細胞生長抑制研究
概述
通過即時監測細胞生長來評定勞拉替尼與PF-06873600組合對MGH048-4F (Crizo/Alec/LorlaR)細胞之生長抑制效果。
材料及方法
簡而言之，將MGH048-4F (Crizo/Alec/LorlaR)細胞(10000個細胞/孔)平板接種於12孔盤中並用勞拉替尼、PF-06873600、或組合在指定濃度下處理。為增加臨床前發現進入臨床之可轉換性，在所有研究中使用勞拉替尼之近似臨床上可達成濃度(proximate clinically achievable concentration)(300 nM)及PF-06873600之預計有效濃度(50至100 nM)。使用IncuCyte Zoom監測細胞密度。
結果
圖8顯示在12天藥物處理之過程內之即時細胞生長。單一劑勞拉替尼及PF-06873600引起中等細胞生長抑制(分別為47%及44%)，而組合導致更強的抑制活性(~80%)(表4)。
結論
在MGH048-4F (Crizo/Alec/LorlaR)細胞中針對勞拉替尼加上PF-06873600偵測到更強的細胞生長抑制。
實施例 7 ：在 MGH902-1C (Crizo/CeriR) 及 MGH979-6.7R8 (AlecR, G1202R) 細胞中針對單獨及與 PF-06873600 組合之勞拉替尼及 PF-06873600 之反應持續性研究
概述
在MGH902-1C (Crizo/CeriR)及MGH979-6.7R8 (AlecR, G1202R)細胞中測試勞拉替尼、PF-06873600、及組合對細胞生長抑制及反應持續性之效果。
材料及方法
DOR研究如前述進行。
結果
DOR結果顯示於圖9及圖10中。經DMSO處理之細胞達到特定總細胞數所需的時間最少，該等細胞係作為此研究之對照並代表非藥物阻礙之生長速率。相較於對照，在MGH902-1C (Crizo/CeriR)細胞中，單一劑勞拉替尼(300 nM)或PF-06873600 (100 nM)處理顯示細胞生長適度的延遲，如相較於對照需要更多時間以達到相同細胞數。勞拉替尼及PF-06873600之組合顯示更久許多的延遲，說明在該組合之情況下對抗性時間之進一步阻礙(圖9)。在MGH979-6.7R8 (AlecR, G1202R)細胞中，勞拉替尼(300 nM)證明沒活性，而PF-06873600 (50 nM)誘發部分抑制。相比之下，組合處理大幅延遲細胞生長，且細胞在研究時期內未達到指定數(圖10)。
表5顯示在不同處理條件下測定細胞自5 X 10
5
個生長至指定數(1 X 10
9
個)所需的天數之結果。
結論
在此等兩種患者衍生之ALK抑制劑抗性NSCLC細胞株中，如相較於單一劑處理，勞拉替尼及PF-06873600之組合顯著地增加細胞生長抑制及反應持續性。
實施例 8 ：在 MGH902-1C (Crizo/CeriR) 及 MGH979-6.7R8 (AlecR ， G1202R) 異種移植物模型中針對單獨及與 PF-06873600 組合之勞拉替尼及 PF-06873600 之抗腫瘤功效研究
概述
在MGH902-1C (Crizo/CeriR)及MGH979-6.7R8 (AlecR, G1202R)異種移植物模型中評定勞拉替尼加上PF-06873600的組合相較於各單一劑之體內抗腫瘤功效。
材料及方法
在體內研究中使用NSG小鼠(6至8週，The Jackson Laboratory)。所有程序均根據實驗室動物研究所實驗動物照護與使用指南進行。
腫瘤細胞補充有50% Matrigel (BD Biosciences)以促進作為異種移植物之腫瘤攝取及生長。在針對各實驗投予測試劑前，先將細胞(~5 x 10
6
個於200 μL中)皮下(s.c.)植入小鼠之後側腹區域並允許生長至指定大小。當腫瘤體積達到150至200 mm
3
時，將小鼠隨機分組至研究組，每組10隻小鼠。將動物用媒劑、勞拉替尼(3 mpk、PO、BID)、PF-06873600(30 mpk、PO、BID)或組合處理。各藥物以產生等同於人類之暴露(勞拉替尼)、或預計有效(PF-06873600)之劑量或方案投予。藉由卡尺測量每週兩次來監測腫瘤生長，而腫瘤生長抑制百分比(%TGI)計算為100*[1- (處理
最後一天
-處理
第一天
) / (對照
最後一天
-對照
第一天
)]。
結果
單獨用勞拉替尼觀察到腫瘤消退，由於在藥物下小的腫瘤體積所以排除組合腫瘤生長抑制(combinatorial tumor growth inhibition)之偵測。接著藉由在終止藥物處理後之腫瘤之再生長延遲(tumor re-growth delay，TRGD)來評定在此等模型中之組合效果。TRGD測量給藥後腫瘤再生長，其速率係藉由在處理終止時殘餘腫瘤細胞之數目或增殖能力判定，反映前期處理效果。在二個模型中均看到PF-06873600加上勞拉替尼之顯著TRGD(圖11)。
結論
在有或沒有繼發性ALK激酶結構域突變下，代表ALKi抗性患者群體之患者衍生之腫瘤模型中，勞拉替尼及PF-06873600之組合顯示增強之抗腫瘤功效(由TRGD反映)。
勞拉替尼係描述於WHO Drug Information,
Vol. 29, No. 4, page 541 (2015)中。勞拉替尼係間變性淋巴瘤激酶(ALK)及c-ros致癌基因1(ROS1)受體酪胺酸激酶之野生型及抗性突變體形式二者之有效巨環抑制劑。勞拉替尼可在ALK-
及ROS1
-過度表現之腫瘤細胞中抑制腫瘤細胞生長。勞拉替尼(Lorbrena®
; Pfizer)已於2018年11月2日經美國食品及藥物管理局(FDA)批准用於治療患有ALK-陽性轉移性非小細胞肺癌(NSCLC)的患者，該等患者在接受1或多種先前的ALK靶向之ALK酪胺酸激酶抑制劑(TKI)之後進展。
勞拉替尼亦可通過血腦障壁，對患有腦轉移的患者具有良好的效果。作為非晶形固體之勞拉替尼游離鹼之製備係揭示於國際專利公開案第WO 2013/132376號及於美國專利第8,680,111號中。勞拉替尼之結晶游離鹼形式係揭示於國際專利公開案第WO 2017/021823號中。勞拉替尼之水合及乙酸溶劑合物形式之製備係揭示於國際專利公開案號WO 2014/207606中。前述文件之各者之內容係以引用方式全文併入本文中。
周期蛋白-依賴型激酶(cyclin-dependent kinase, CDK)及相關的絲胺酸/蘇胺酸蛋白激酶係重要的細胞酶，其在調控細胞分裂及增殖中執行基本功能。CDK1至4、6、10、11已有報導在細胞週期進展中扮演直接角色，而CDK3、5、及7至9可扮演間接角色(例如通過其他CDK之活化，轉錄或神經元功能之調控)。CDK催化單元係藉由與稱為周期蛋白之調控次單元結合，隨後磷酸化而活化。周期蛋白可分成四大類別(G1
、G1
/S、S及M周期蛋白)，其表現水平在細胞週期之不同點變化。周期蛋白B/CDK1、周期蛋白A/CDK2、周期蛋白E/CDK2、周期蛋白D/CDK4、周期蛋白D/CDK6、及可能的其他異二聚體係細胞週期進展之重要調控子(regulator)。
CDK抑制劑已被證明可用於治療癌症。周期蛋白依賴型激酶之活性增加或暫時性異常活化已顯示導致人類腫瘤之發展，且人類腫瘤發展通常係與CDK蛋白本身或其調控子之改變相關(Cordon-Cardo C. Mutations of cell cycle regulators: biological and clinical implications for human neoplasia. Am. J. Pathol. (1995) 147:545-560; Karp JE, Broder S. Molecular foundations of cancer: new targets for intervention. Nat. Med. (1995) 1:309-320; Hall M, Peters G. Genetic alterations of cyclins, cyclin-dependent kinases, and Cdk inhibitors in human cancer. Adv. Cancer Res.
(1996) 68:67-108)。
CDK4/6抑制劑帕博西尼(palbociclib)、利博西尼(ribociclib)、及艾貝馬西尼(abemaciclib)正以單一劑或與其他治療劑組合針對乳癌及其他癌症進行臨床試驗。帕博西尼、利博西尼、及艾貝馬西尼已被批准用於治療激素受體(HR)-陽性、人類表皮生長因子受體2 (HER2)-陰性的晚期或轉移性乳癌，在第一線處置中與芳香酶抑制劑(諸如來曲唑(letrozole))組合且在某些患者之第二線或更後線的治療中與氟維司群(fulvestrant)組合(O’Leary等人之Treating cancer with selective CDK4/6 inhibitorsNature Reviews
(2016) 13:417-430)。雖然CDK4/6抑制劑已於ER-陽性轉移性乳癌中顯示顯著的臨床功效，但是如同其他激酶，彼等效果可能隨著時間受到原發性或後天抗性之發展的限制。
化合物6-乙醯基-8-環戊基-5-甲基-2-(5-哌
-1-基-吡啶-2-基胺基)-8H
-吡啶并[2,3-d
]嘧啶-7-酮(亦稱為「帕博西尼(palbociclib」、「palbo」或「PD-0332991」)係CDK4及CDK6之有效及選擇性抑制劑，由式(II)所表示：
，
帕博西尼係描述於WHO Drug Information
, Vol. 27, No. 2, page 172 (2013)中。帕博西尼及其醫藥上可接受之鹽類係揭示於國際公開案第WO 2003/062236號及美國專利第6,936,612號、第7,208,489號、及第7,456,168號；國際公開案第WO 2005/005426號及美國專利第7,345,171號、及第7,863,278號；國際公開案第WO 2008/032157號及美國專利第7,781,583號；及國際公開案第WO 2014/128588號中。前述提及之各者之內容係以引用方式全文併入本文中。
化合物6-(二氟甲基)-8-((1R,2R)-2-羥基-2-甲基環戊基)-2-(1-(甲基磺醯基)哌啶-4-基胺基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(亦稱為「PF-06873600」或「PF3600」)係CDK2、CDK4、及CDK6之有效及選擇性抑制劑，由式(III)所表示：
。
PF-06873600係揭示於在2018年2月22日出版之國際公開案第WO 2018/033815號中。此參考之內容係以引用方式全文併入本文中。
儘管對癌症患者有許多治療選項，但仍需要有效且安全的治療劑並需要將彼等用於治療癌症之組合療法中。咸信本發明之方法、組合、醫藥組成物、及用途具有一或多種優點，諸如比用單獨劑治療更大的功效；降低藥物-藥物交互作用的潛力；能夠改善給藥排程的潛力；降低副作用的潛力；克服抗性機制及類似者的潛力。本發明之此等及其他優點係自以下說明而顯而易見。
結論
在H3122細胞株(其係代表1L ALK+ NSCLC患者群體之NSCLC細胞株模型)中，如相較於單一劑處理，勞拉替尼及帕博西尼之組合顯著地增加反應持續性。實施例 2 ： 用於 DOR 研究之 ALK 抑制劑 (ALKi) 抗性 NSCLC 細胞株之生育及特徵
概述
ALKi抗性細胞株係使用試管內實驗方法所發展。所選的細胞殖株係以ALK依賴型抗性機制為特徵並對克唑替尼及勞拉替尼敏感。
材料及方法
將H3122細胞暴露於克唑替尼(100至1000 nM，逐漸增加)、勞拉替尼(100 nM，單一劑量)或艾樂替尼(1000 nM，單一劑量)超過2個月。選擇個別的殖株並擴展以用於後續ALK依賴型抗性機制的分析(亦即，繼發性ALK激酶結構域突變或ALK擴增)。
突變分析係藉由靶向定序進行。根據製造商之程序用Qiagen DNeasy Kit (Qiagen)自細胞團塊中單離基因體DNA。將對應於ALK酪胺酸激酶結構域之外顯子21至27經PCR擴增。在Agilent Bioanalyzer上使用DNA 1000晶片(Agilent Technologies)對各擴增子之DNA濃度進行定量。將條碼化PCR擴增子模板(Barcoded PCR amplicon template)以等莫耳濃度合併並在Ion Torrent PGM (Life Technologies)上進行雙向定序。建構具有總共2 × 108
DNA分子的基因庫。藉由Life Technologies Torrent Suite 2.2版分析條碼專一性(barcode-specific)樣本數據。使用Broad Institute之Integrative Genomics Viewer (IGV) 2.1版覽閱輸出之BAM文件。在IGV中，「覆蓋等位基因頻率閥值(Coverage allele-freq threshold)」係設定至0.01，而「按質量遮蔽錯配鹼基(Shade mismatched bases by quality)」係設定至0至20(Huang D等人之Multiplexed deep sequencing analysis of ALK kinase domain identifies resistance mutations in relapsed patients following crizotinib treatment. Genomics. 2013, 102:157-62.)。根據製造商之程序，使用Genome-Wide Human SNP Array 6.0進行複本數變體(copy number variant)之偵測。
在基於細胞之存活率分析中，將四種細胞株於補充有10% FBS的生長培養基中以2,000至4,000細胞/孔接種在96孔板中。在DMSO中進行測試化合物之連續稀釋，並將對照及指定濃度的測試化合物添加至各孔中。將細胞在37°C下培育3至7天(最終DMSO含量為0.1%)。接著進行Cell Titer-Glo®
Luminescent Cell Viability Assay (Promega)以測定細胞存活率。IC50
值係在GraphPad Prism (GraphPad Software)中使用S型劑量反應(sigmoidal dose-response)(可變斜率)來計算。
結果
分析約30個克唑替尼抗性殖株，鑑定出H3122 CrizoR 1-07 (G1269A)含有繼發性ALK突變(G1269A)。此突變先前在克唑替尼復發的患者中已有報導(Doebele RC等人之Mechanisms of resistance to crizotinib in patients with ALK gene rearranged non-small cell lung cancer. Clinical cancer research. 2012, 18:1472-82；Gainor JF等人之Molecular Mechanisms of Resistance to First- and Second-Generation ALK Inhibitors in ALK-Rearranged Lung Cancer. Cancer discovery. 2016, 6:1118-33)。相較於親代細胞H3122，當用增加濃度的克唑替尼及勞拉替尼處理時，克唑替尼抗性H3122 CrizoR 1-07 (G1269A)細胞之IC50
顯示增加＞15倍(圖2A)。勞拉替尼抗性H3122 LorlaR 1-09細胞不含繼發性ALK激酶突變。此等細胞對勞拉替尼處理完全不敏感(圖2B)，說明存在ALK非依賴型抗性機制。勞拉替尼抗性H3122 LorlaR 1-06細胞含有ALK擴增，其在臨床上亦暗指ALK抑制劑抗性。此等細胞展示雙相生長曲線(biphasic growth curve)，其中低劑量勞拉替尼(＜100 nM)刺激細胞生長而高劑量(＞100 nM)抑制它(圖2C)。
結論
在試管內實驗系統中所發展的幾個ALKi抗性殖株展示在臨床上所觀察到的代表性抗性機制(亦即繼發性ALK激酶結構域突變或ALK擴增)。該等細胞對ALKi抑制劑(諸如克唑替尼及勞拉替尼)具有抗性。實施例 3 ： 在幾個衍生自 H3122 之勞拉替尼、克唑替尼或艾樂替尼抗性模型中針對單獨或呈組合之勞拉替尼及帕博西尼之反應持續性研究
概述
在研究中採用代表2L後勞拉替尼、克唑替尼或艾樂替尼之經選擇之ALKi抗性細胞株以評定勞拉替尼加上帕博西尼的組合的反應持續性。
材料及方法
勞拉替尼抗性H3122 LorlaR 1-06 (ALKamp
)、H3122 LorlaR 1-09(ALK非依賴型)、及H3122 LorlaR池(未特徵化的抗性機制)代表2L後勞拉替尼設置。克唑替尼抗性H3122 CrizoR 1-07 (G1269A)代表2L後克唑替尼設置。具有未特徵化的抗性機制之艾樂替尼抗性H3122 AlecR池細胞代表2L後艾樂替尼設置。
在不存在或存在帕博西尼(總共100 nM)之情況下將細胞用勞拉替尼以250 nM(總共)處理。如前述，在數週內評定細胞生長及DOR。
結果
H3122 LorlaR 1-06細胞含有ALK之擴增且彼等生長對勞拉替尼上癮。因此，DOR評定僅在兩個群組(組合vs.
單獨勞拉替尼)中獲得。藉由組合vs.
勞拉替尼觀察到對生長延遲之中等效果(圖3A及圖3B)。在由ALK非依賴型機制所驅使的勞拉替尼抗性細胞(亦即，H3122 LorlaR 1-09細胞)中，相較於勞拉替尼，單獨帕博西尼展示中等的生長抑制效果。與單一劑治療相比，組合治療導致更大的生長延遲(圖3C及圖3D)。在具有混合及未知抗性機制之H3122 LorlaR池中觀察到單獨帕博西尼及組合、可相比的生長延遲，指示細胞僅對帕博西尼處理反應，但對勞拉替尼處理沒有反應(圖3E及圖3F)。
先前，勞拉替尼證實對BaF3細胞中之G1269A(經工程化表現此突變)具有強大效力(IC50
為36 nM)(Zhou等人之PF-06463922, an ALK/ROS1 Inhibitor, Overcomes Resistance to First and Second Generation ALK Inhibitors in Preclinical Models.Cancer Cell, 2015, 28, 70-81)。勞拉替尼對H3122 CrizoR 1-07 (G1269A)有效，具有116 nM之IC50
與60%最大抑制(圖2A)。在DOR分析中，單一劑勞拉替尼及帕博西尼對延遲H3122 CrizoR 1-07 (G1269A)之生長均有效。兩種藥物之組合實質上增加反應持續性(圖4A及圖4B)。
使用H3122 AlecR池細胞之DOR研究顯露細胞對勞拉替尼治療具有抗性但對帕博西尼治療敏感。觀察到帕博西尼中度延遲細胞生長，該延遲細胞生長藉由組合處理而略微增加(圖5A及圖5B)。
表2顯示在ALKi抗性NSCLC細胞中在不同處理條件下測定細胞自5 X 105
個生長至指定數所需的天數之實驗結果。
結論
雖然抗性細胞生長之出現時間在此等含有各種抗性機制且代表來自不同療法線的患者之細胞株之間變化，但藉由單獨帕博西尼或與勞拉替尼的組合於DOR之增加在各細胞株之獨立實驗中係可再現且一致。實施例 4 ：在克唑替尼抗性 NSCLC 異種移植物模型中針對單獨及呈組合之勞拉替尼及帕博西尼之抗腫瘤功效研究
概述
在H3122 CrizoR 1-07 (G1269A)異種移植物模型中評定勞拉替尼加上帕博西尼組合相較於各單一劑之體內抗腫瘤功效。
材料及方法
在體內研究中使用雌性無胸腺小鼠(Nu/Nu，6至8週，Charles River Laboratories)。所有程序均根據實驗室動物研究所實驗動物照護與使用指南進行。
腫瘤細胞補充有50% Matrigel (BD Biosciences)以促進作為異種移植物之腫瘤攝取及生長。在針對各實驗投予測試劑前，先將細胞(~5 x 106
個於200 μL中)皮下(s.c.)植入小鼠之後側腹區域並允許生長至指定大小。當腫瘤體積達到150至200 mm3
時，將小鼠隨機分組至研究組，每組10隻小鼠。將動物用媒劑、勞拉替尼(1.5 mpk、PO、BID)、帕博西尼(70 mpk、PO、QD)或組合處理。各藥物以產生等同於人類之暴露(勞拉替尼)、或達到等同於人類之藥效動力學標記調節之暴露(帕博西尼)的劑量或方案投予。每週兩次藉由卡尺測量來監測腫瘤生長，而腫瘤生長抑制(TGI)百分比計算為100*[1- (處理最後一天
-處理第一天
) / (對照最後一天
-對照第一天
)]。將共變數(ANCOVA)分析方法用於經對數轉換之腫瘤體積以評定在調整基線值之後治療效果之統計顯著性。
結果
H3122 CrizoR 1-07 (G1269A)腫瘤對勞拉替尼或帕博西尼單一劑處理反應類似，在腫瘤接種後第42天分別具有77%或62%之腫瘤生長抑制(TGI)。勞拉替尼加上帕博西尼之組合產生108%之TGI，其顯著地優於勞拉替尼或帕博西尼單獨處理(P ＜ 0.05)(圖6)。TGI結果歸納在表3中。
表3顯示在H3122 CrizoR 1-07 (G1269A)異種移植物模型中勞拉替尼+帕博西尼之腫瘤生長抑制百分比(%TGI)。
結論
在代表含有繼發性ALK激酶結構域突變之克唑替尼抗性患者群體之腫瘤模型中，該組合顯示增強之抗腫瘤功效。實施例 5 ：
患者衍生之ALKi抗性NSCLC細胞對ALK抑制劑及PF-06873600之敏感性
概述
在三種患者衍生之ALKi抗性NSCLC細胞株中特徵化對ALKi及PF-06873600單一劑之敏感性，該等細胞株包括MGH048-4F (Crizo/Alec/LorlaR)、MGH902-1C (Crizo/ CeriR)及MGH979-6.7R8 (AlecR, G1202R)。
材料及方法
MGH048-4F (Crizo/Alec/LorlaR)、MGH902-1C (Crizo/ CeriR)及MGH979-6.7R8 (AlecR, G1202R)係通過研究合約自MGH獲得。使用來自接受不同線ALK抑制劑療法復發的患者之檢體來衍生細胞株。使用標準細胞培養技術來培養細胞。將細胞針對增加濃度之幾種ALK抑制劑及PF-06873600進行測試。在標準CyQUANT細胞增殖分析中測量細胞存活率及IC50
。
結果
兩個株(MGH048-4F (Crizo/Alec/LorlaR)及MGH902-1C (Crizo/CeriR))不含有繼發性ALK突變。因此，細胞之抗性可能由ALK非依賴型機制所驅使。當針對多種ALK抑制劑進行測試時，此等細胞對克唑替尼、色瑞替尼及艾樂替尼具有抗性(圖7A &圖7B)。其等對勞拉替尼部分敏感，且在10 μM下不完全抑制。
G1202R突變已知對幾種ALK抑制劑，包括克唑替尼、色瑞替尼及艾樂替尼具有抗性，但對勞拉替尼敏感。經工程化表現G1202R突變之BaF3細胞證明對勞拉替尼的高度敏感性，具有80 nM之IC50
且完全抑制(Zhou等人之PF-06463922, an ALK/ROS1 Inhibitor, Overcomes Resistance to First and Second Generation ALK Inhibitors in Preclinical Models.Cancer Cell, 2015, 28, 70-81)。MGH979-6.7R8 (AlecR, G1202R)細胞如預期對克唑替尼、色瑞替尼及艾樂替尼具有抗性(圖7C)。然而，不像經工程化之BaF3細胞，其展示勞拉替尼之不完全抑制，說明除了G1202R之外，於此細胞株中亦可能存在ALK非依賴型抗性機制。
當針對PF-06873600進行測試，該等細胞證明對PF-06873600具有敏感性，具有IC50
值範圍為23至239 nM(圖7D、圖7E及圖7F)。
結論
患者衍生之ALKi抗性細胞株對幾種ALK抑制劑展示抗性，但對PF-06873600顯示具有不同程度的敏感性。實施例 6 ：在 MGH048-4F (Crizo/Alec/LorlaR) 細胞中針對單獨及與 PF-06873600 組合之勞拉替尼及 PF-06873600 之細胞生長抑制研究
概述
通過即時監測細胞生長來評定勞拉替尼與PF-06873600組合對MGH048-4F (Crizo/Alec/LorlaR)細胞之生長抑制效果。
材料及方法
簡而言之，將MGH048-4F (Crizo/Alec/LorlaR)細胞(10000個細胞/孔)平板接種於12孔盤中並用勞拉替尼、PF-06873600、或組合在指定濃度下處理。為增加臨床前發現進入臨床之可轉換性，在所有研究中使用勞拉替尼之近似臨床上可達成濃度(proximate clinically achievable concentration)(300 nM)及PF-06873600之預計有效濃度(50至100 nM)。使用IncuCyte Zoom監測細胞密度。
結果
圖8顯示在12天藥物處理之過程內之即時細胞生長。單一劑勞拉替尼及PF-06873600引起中等細胞生長抑制(分別為47%及44%)，而組合導致更強的抑制活性(~80%)(表4)。
結論
在MGH048-4F (Crizo/Alec/LorlaR)細胞中針對勞拉替尼加上PF-06873600偵測到更強的細胞生長抑制。實施例 7 ：在 MGH902-1C (Crizo/CeriR) 及 MGH979-6.7R8 (AlecR, G1202R) 細胞中針對單獨及與 PF-06873600 組合之勞拉替尼及 PF-06873600 之反應持續性研究
概述
在MGH902-1C (Crizo/CeriR)及MGH979-6.7R8 (AlecR, G1202R)細胞中測試勞拉替尼、PF-06873600、及組合對細胞生長抑制及反應持續性之效果。
材料及方法
DOR研究如前述進行。
結果
DOR結果顯示於圖9及圖10中。經DMSO處理之細胞達到特定總細胞數所需的時間最少，該等細胞係作為此研究之對照並代表非藥物阻礙之生長速率。相較於對照，在MGH902-1C (Crizo/CeriR)細胞中，單一劑勞拉替尼(300 nM)或PF-06873600 (100 nM)處理顯示細胞生長適度的延遲，如相較於對照需要更多時間以達到相同細胞數。勞拉替尼及PF-06873600之組合顯示更久許多的延遲，說明在該組合之情況下對抗性時間之進一步阻礙(圖9)。在MGH979-6.7R8 (AlecR, G1202R)細胞中，勞拉替尼(300 nM)證明沒活性，而PF-06873600 (50 nM)誘發部分抑制。相比之下，組合處理大幅延遲細胞生長，且細胞在研究時期內未達到指定數(圖10)。
表5顯示在不同處理條件下測定細胞自5 X 105
個生長至指定數(1 X 109
個)所需的天數之結果。
結論
在此等兩種患者衍生之ALK抑制劑抗性NSCLC細胞株中，如相較於單一劑處理，勞拉替尼及PF-06873600之組合顯著地增加細胞生長抑制及反應持續性。實施例 8 ：在 MGH902-1C (Crizo/CeriR) 及 MGH979-6.7R8 (AlecR ， G1202R) 異種移植物模型中針對單獨及與 PF-06873600 組合之勞拉替尼及 PF-06873600 之抗腫瘤功效研究
概述
在MGH902-1C (Crizo/CeriR)及MGH979-6.7R8 (AlecR, G1202R)異種移植物模型中評定勞拉替尼加上PF-06873600的組合相較於各單一劑之體內抗腫瘤功效。
材料及方法
在體內研究中使用NSG小鼠(6至8週，The Jackson Laboratory)。所有程序均根據實驗室動物研究所實驗動物照護與使用指南進行。
腫瘤細胞補充有50% Matrigel (BD Biosciences)以促進作為異種移植物之腫瘤攝取及生長。在針對各實驗投予測試劑前，先將細胞(~5 x 106
個於200 μL中)皮下(s.c.)植入小鼠之後側腹區域並允許生長至指定大小。當腫瘤體積達到150至200 mm3
時，將小鼠隨機分組至研究組，每組10隻小鼠。將動物用媒劑、勞拉替尼(3 mpk、PO、BID)、PF-06873600(30 mpk、PO、BID)或組合處理。各藥物以產生等同於人類之暴露(勞拉替尼)、或預計有效(PF-06873600)之劑量或方案投予。藉由卡尺測量每週兩次來監測腫瘤生長，而腫瘤生長抑制百分比(%TGI)計算為100*[1- (處理最後一天
-處理第一天
) / (對照最後一天
-對照第一天
)]。
結果
單獨用勞拉替尼觀察到腫瘤消退，由於在藥物下小的腫瘤體積所以排除組合腫瘤生長抑制(combinatorial tumor growth inhibition)之偵測。接著藉由在終止藥物處理後之腫瘤之再生長延遲(tumor re-growth delay，TRGD)來評定在此等模型中之組合效果。TRGD測量給藥後腫瘤再生長，其速率係藉由在處理終止時殘餘腫瘤細胞之數目或增殖能力判定，反映前期處理效果。在二個模型中均看到PF-06873600加上勞拉替尼之顯著TRGD(圖11)。
結論
在有或沒有繼發性ALK激酶結構域突變下，代表ALKi抗性患者群體之患者衍生之腫瘤模型中，勞拉替尼及PF-06873600之組合顯示增強之抗腫瘤功效(由TRGD反映)。