TW202108137A - 用於治療肺部疾病之可吸入的支氣管擴張劑緩釋組成物 - Google Patents

用於治療肺部疾病之可吸入的支氣管擴張劑緩釋組成物 Download PDF

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Abstract

提供一種用於治療肺部疾病的支氣管擴張劑微脂體緩釋組成物。所述微脂體支氣管擴張劑具有一微脂體，該微脂體內包埋一支氣管擴張劑。該支氣管擴張劑被穩定地包覆於微脂體中，且已證明所得到的微脂體支氣管擴張劑可被穩定地氣溶膠化或霧化而經由吸入途徑投藥，以治療一有此需要的個體。

Description

用於治療肺部疾病之可吸入的支氣管擴張劑緩釋組成物
本發明涉及用於遞送緩釋微脂體組成物之可吸入的藥物遞送系統。本發明涉及製備該藥物遞送系統的方法。本發明亦涉及適用於肺部遞送系統的緩釋藥學組成物，其具有延長的藥效持續期間。
不良的肺部疾病由各種外部效應物引發並成為老齡化社會無法抵擋的議題。慢性阻塞性肺病(Chronic obstructive pulmonary disease，COPD)是一種極度嚴重、使人衰弱的肺部疾病，會造成早期死亡。COPD的特徵在於呼吸道的發炎與黏膜增厚、肺泡分解、以及肺功能惡化。COPD常見的症狀包括慢性咳嗽、呼吸困難與胸部緊迫感。
用於治療肺部疾病(特別是COPD)的潛在性藥物有4個不同的分類：皮質類固醇；支氣管擴張劑，特別是抗膽鹼劑(anticholinergic agents)(尤其是毒蕈鹼拮抗劑(muscarinic antagonists))與β2腎上腺素受體激動劑(β2 adrenergic receptor agonists)；抗生素；以及化痰劑(mucolytics)。目前，吸入式療法是COPD治療中較偏好的投藥途徑。全球慢性阻塞性肺病倡議組織(Global Initiative for Chronic Obstructive Lung Disease，GOLD)推薦支氣管擴張劑作為大部分COPD患者的第一線標準藥物治療。此外，GOLD針對諸如年長者及具有低吸入流速(inspiratory flow rates)的患者等特定病患族群建議採用霧化吸入式治療。
兩種已經且正在用於治療COPD的長效毒蕈鹼拮抗劑(long-acting muscarinic antagonists，LAMA)為噻托溴銨(tiotropium bromide)和格隆溴銨(glycopyrrolate)。可取得的噻托溴銨為乾粉狀，其推薦劑量為18 µg、每日兩次(Spiriva® HandiHaler® ，NDA號碼21395，Boehringer Ingelheim)；或為吸入式溶液，其劑量為2.5 µg、每日兩次(Spiriva® Respimat® ，NDA號碼207070，Boehringer Ingelheim)。可取得的格隆溴銨為乾粉狀，其推薦劑量為15.6 µg、每日兩次 (Seebri® Neohaler® ，NDA號碼207923， Novartis)。此外，經霧化的格隆溴銨吸入式溶液最近已被美國食品藥品監督管理局(FDA) 核可，其推薦劑量為25 µg、每日兩次(Lonhala® Magnair® ，NDA號碼208437，Sunovion)。
此外，許多藥物組合具有廣泛的用途而可用於治療COPD。其中一種雙重COPD藥品結合了格隆溴銨及茚達特羅(indacaterol，一種超長效β2腎上腺素受體激動劑(ultra-LABA))，其推薦劑量分別為15.6 µg 和 27.5 µg、每日兩次(Utibron® Neohaler® ，NDA號碼207930，Novartis)。另一種COPD藥物組合含有噻托溴銨及奧達特羅(olodaterol，另一種ultra-LABA)，其推薦劑量分別為3 µg 和 2.7 µg、每日兩次(Stiolto® Respimat® ，NDA號碼206756，Boehringer Ingelheim)。使用這些藥物治療COPD的副作用包括顫抖、心搏過速、暈眩、過敏反應、視覺模糊以及喉嚨痛。
微脂體已作為藥物載體用於持續的藥物傳遞數十年。藥物成分以微脂體包覆會改變游離態藥物成分的藥物動力學特性、提供全身性地或在局部身體環境中緩慢的藥物釋放、允許較高的給藥劑量和較低頻率的給藥，並且可能降低副作用和毒性。 微脂體內的高藥物成分包覆量可藉由遠端裝載方法(也稱為主動裝載)達成，這是仰賴跨膜酸鹼度和離子梯度，讓游離的、不帶電荷的藥物成分得以擴散進入微脂體內。在微脂體內，游離的藥物成分可與捕獲劑(在水性內部的相對離子)形成複合物，甚至沉澱成為留在微脂體內的藥物-相對離子鹽。微脂體藥物製劑(liposomal drug formulation)可以設計製備呈現在體內(in vivo )緩慢的藥物釋放，如此將延長藥物的治療效果。這可以藉由調整微脂體配方和優化特定微脂體性質來實現，諸如所使用的磷脂(不同的鏈長、相變溫度)、脂質相對於膽固醇的比例、微脂體上聚乙二醇(polyethylene glycol，PEG)的量(以避免被巨噬細胞清除)、用於包覆藥物成分的捕獲劑以及可能是微脂體的層狀性。
當藥物被穩定地包覆在微脂體內，仍不能確定所得到的微脂體藥物製劑是否肯定能夠被氣溶膠化或霧化，以用於吸入傳遞。目前並不清楚的是，利用微脂體技術重新配製支氣管擴張劑是否可以產生治療劑量的用於吸入的微脂體藥物製劑，以治療COPD及其他相關的肺部疾病。
目前，沒有能實際使用的吸入式微脂體藥物製劑可作為治療COPD及其他相關肺部疾病的藥品。關於現在用於吸入治療的微脂體藥物製劑，有兩種正在開發中的可吸入的微脂體藥品已達到臨床試驗階段：微脂體阿米卡星(liposomal amikacin)(Insmed Inc.)和微脂體塞普沙辛(liposomal ciprofloxacin)(Aradigm Corporation)。目前正在研究這兩種吸入式的微脂體抗生素，以治療多種呼吸系統疾病，諸如纖維性囊腫(cystic fibrosis，CF)、非纖維性囊腫支氣管擴張症(non-CF bronchiectasis)、非結核分枝桿菌肺病(nontuberculous mycobacterial lung disease)和其他的致命性感染。最近，Arikayce® (阿米卡星微脂體吸入式懸浮液) 已收到FDA的加速核可，可用於治療鳥型分枝桿菌複合體肺病(Mycobacterium avium complex lung disease)。這兩種用於吸入治療的微脂體藥物製劑設計成，藉由將脂質成分修改為電中性(US 8,226,975)，或藉由調整游離的塞普沙辛的顆粒尺寸及含量來減弱對巨噬細胞的吸引力(US 8,071,127)，而使抗生素容易接近微生物或受感染的組織。
不幸的是，現有的可吸入的微脂體組成物不能滿足治療其他肺部疾病(諸如COPD)的未滿足需求，這可能需要具不同目標產品特性的藥品，該產品特性諸如肺部深處沉積、增強的黏液滲透、肺部中延長的藥物保留、增加的微脂體藥物穩定性等等。迄今為止，還沒有相關研究報導過，對於治療COPD或其類似疾病有效的、且為脂質基底緩釋組成物形式的可吸入藥物。因此，對於具有一預定包覆率的緩釋製劑仍存在未滿足的需求，以在降低支氣管擴張劑(諸如抗膽鹼劑及/或β2腎上腺素受體激動劑)的投藥頻率與達到所欲的治療區間(therapeutic window)之間達成平衡。此外，適用於治療COPD及其他相關肺部疾病的製劑應具有以下性質：可吸入、對於由局部肺表面張力素(surfactant)造成的破壞具有改善的穩定性或抗性，並且進一步具有所欲的劑量強度以確保有潛力在肺部環境中達到所欲的藥效。本發明探討此需求與其他需求。
本發明提供一種可吸入的微脂體藥物製劑，其包含磷脂、選擇性地一固醇、及/或經聚乙二醇修飾的磷脂，以及一支氣管擴張劑，特別是一抗膽鹼劑，更特別是一四級銨毒蕈鹼拮抗劑(quaternary ammonium muscarinic antagonist)，諸如噻托溴銨，其係包覆在微脂體的水性內部中。
為了改良現存的肺部疾病(例如：COPD)治療模式，並善用緩慢、持續的藥物釋放的益處，我們開發了一種支氣管擴張劑的緩釋組成物，其包含微脂體支氣管擴張劑以及一預定量的游離於水性懸浮液中的支氣管擴張劑，其可被氣溶膠化並吸入，而用於肺部疾病的強化治療。特別是，需要一種用於治療COPD之可吸入的緩釋製劑。
本發明提供了用於治療肺部疾病(特別是COPD)的微脂體支氣管擴張劑，其具有以下優點：1)與吸入的游離態藥物成分相比，達到較長的治療效果，2)將藥物直接遞送到疾病部位，3)較快的作用起效，4)減少不良的藥物反應和全身性作用，5)繞過在口服給藥中觀察到的首渡代謝 (first-pass metabolism)，從而提高藥物成分的生物利用度(並且可能降低肝毒性)，6)藉由從微脂體藥物持續釋放而增加藥物成分在肺中的停留時間，7)減少藥物施用的頻率，8)非侵入性吸入遞送，以及9)改善患者的治療結果和依從性。
本發明的支氣管擴張劑經由使用捕獲劑的遠端裝載而包覆於微脂體中，該捕獲劑由一銨化合物及一陰離子性相對離子(anionic counterion)組成，以完成具有偏好的釋放特性與降低的毒性的緩釋組成物。
本發明的微脂體支氣管擴張劑選擇性地在囊泡表面包含大量的聚乙二醇部分，以達成較長的持續性藥物釋放，其安全、有效、且適合以每日一次或甚至更低的頻率投藥。
在一特定具體例中，該微脂體支氣管擴張劑包含莫耳比例為1：1至3：2的磷脂醯膽鹼(phosphocholine，PC)：膽固醇，其中該PC可為氫化大豆磷脂醯膽鹼(hydrogenated soy phosphatidylcholine，HSPC)、1,2-二硬脂醯-sn-甘油-3-磷酸膽鹼(1,2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphocholine，DSPC)、1,2-二棕櫚醯-sn-甘油-3-磷酸膽鹼(1,2-dipalmitoyl-sn-glycero-3-phosphocholine，DPPC)、或它們的混合物，諸如莫耳比例為1：1的DSPC和1,2-二棕櫚醯-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺(1,2-dipalmitoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamine，DPPE)。
在一特定具體例中，經聚乙二醇修飾的磷酸乙醇胺(phosphoethanolamine，PE)可為DSPE-PEG2000，並且範圍為微脂體的總脂質含量的0.0001 mol%至40 mol%。
在一些具體例中，該微脂體支氣管擴張劑的脂質濃度為自10 至25 mM，且藥物相對於脂質(D/L)比例為自0.01 mol/mol至5 mol/mol。
在一些具體例中，該微脂體支氣管擴張劑的平均粒徑為自50 nm至1,000 nm。
在一特定具體例中，該微脂體支氣管擴張劑包含一抗膽鹼劑或一β2腎上腺素受體激動劑。
在一些具體例中，該微脂體支氣管擴張劑包含支氣管擴張劑，其係選自於由噻托溴銨、格隆溴銨、蕪地溴銨(umeclidinium bromide)、阿地溴銨(aclidinium bromide)、異丙托溴銨(ipratropium bromide)、氧托溴銨(oxitropium bromide)、雷芬那辛(revefenacin)、茚達特羅、阿福特羅(arformoterol)、福莫特羅(formoterol) 、奧達特羅、沙丁胺醇(salbutamol) 、沙美特羅(salmeterol)、維蘭特羅(vilanterol)及它們的組合所組成之群組。
在一些具體例中，該微脂體支氣管擴張劑包含一四級銨毒蕈鹼拮抗劑(quaternary ammonium muscarinic antagonist)。
在另一方面，本發明亦提供一種氣溶膠化的含有微脂體支氣管擴張劑之顆粒組成物，以用於治療肺部疾病，其具有至少為0.1 mol/mol的藥物相對於脂質比例。
在另一方面，本發明亦提供一種氣溶膠化的顆粒組成物，含有微脂體支氣管擴張劑，以用於治療肺部疾病，其包含根據本發明使用的緩釋組組成物。
藉由以下詳細描述結合附圖，將使本揭露內容的其他發明目的、優勢、及新穎特徵更加清楚。
除非另有說明，如上文和整份揭露內容中使用的以下用語，應理解為具有以下含義。
本文所使用的單數形式「一」、「一種」、「該」和「此」，包括複數的指代物，除非上下文另有明確說明。
本文中的所有數字可以理解為由「約」修飾，當提及諸如量、持續時間及此類的可測量值時，意味著包括特定值的±10％、較佳為±5％、更佳為±1％、及甚至更佳為±0.1％之變量，這些變量適用於描述微脂體藥物的所欲量，如有例外除非另有說明。
如本文所使用之術語「治療(treating、treated或treatment)」包括預防性(preventative)(例如防治性(prophylactic))、緩和性(palliative)及治癒性(curative)的用途或結果。術語「個體(subject) 」包含具有癌症或其他疾病的脊椎動物。較佳地，所述個體為一溫血動物，包括哺乳動物，較佳為人類。
如本文所使用的術語「藥物相對於脂質比例(drug to lipid ratio)」(「D/L」)指的是支氣管擴張劑相對於總磷脂含量的比例。游離型式或微脂體型式支氣管擴張劑的含量係經由紫外光-可見光(UV-Vis)吸光度測定。藉由使用磷測定法(改編自G. Rouseret al. , Lipids 1970, 5, 494-496)，測定微脂體和微脂體藥物樣品的磷含量，來確定微脂體和微脂體藥物的磷脂含量或濃度。 肺部疾病
根據本發明的肺部疾病包括，但不限於：慢性阻塞性肺病(Chronic obstructive pulmonary disease，COPD)、COPD相關疾病(諸如慢性支氣管炎與肺氣腫) 、氣喘、運動誘發的支氣管痙攣(exercise induced bronchospasm) 、囊腫纖維化、及肺膨脹不全(atelectasis)。症狀通常包括慢性咳嗽、呼吸困難、胸部緊迫感、與逐漸發生的呼吸短促。併發症包括肺部高血壓、心臟衰竭、肺炎、或肺栓塞。 微脂體
本文所使用的術語「微脂體(liposome或liposomal)」指的是一種顆粒，其特徵在於具有一水性的內部空間，其藉由一或多個雙層膜形成的囊泡與外部介質隔離。微脂體的雙層膜通常由一或多種脂質形成，亦即合成或天然來源的兩親性分子，其包含在空間上分離的疏水端和親水端。在本發明的某些具體例中，術語「微脂體」指的是小的單層囊泡 (small unilamellar vesicle，SUV)，其由一個脂質雙層(lipid bilayer)形成膜。
一般而言，微脂體包含一脂質混合物，其通常包括一或多種脂質，其選自於由：雙鏈脂肪脂質，諸如磷脂、二酸甘油酯(diglycerides)、二脂肪醣脂(dialiphatic glycolipid)；單鏈脂肪脂質，諸如鞘磷脂(sphingomyelin)和醣神經鞘脂(lycosphingolipid) ；固醇，諸如膽固醇及其衍生物；及它們的組合所組成的群組。
根據本發明的磷脂實例包括，但不限於：1,2-二月桂醯基-sn-甘油-3-磷酸膽鹼(1,2-dilauroyl-sn-glycero-3-phosphocholine，DLPC)、1,2-二肉荳蔻醯基-sn-甘油-3-磷酸膽鹼(1,2-dimyristoyl-sn-glycero-3-phosphocholine，DMPC)、1,2-二棕櫚醯-sn-甘油-3-磷酸膽鹼(1,2-dipalmitoyl-sn-glycero-3-phosphocholine，DPPC)、1-棕櫚醯-2-硬脂醯-sn-甘油-3-磷酸膽鹼(1-palmitoyl-2-stearoyl-sn-glycero-3-phosphocholine，PSPC)、1-棕櫚醯-2-油醯-sn-甘油-3-磷脂醯膽鹼(1-palmitoyl-2-oleoyl-sn-glycero-3-phosphatidylcholine，POPC)、1,2-二硬脂醯-sn-甘油-3-磷酸膽鹼(1,2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphocholine，DSPC)、1,2-二烯醯-1-sn-甘油-3-磷酸膽鹼(1,2-dioleoy1-sn-glycero-3-phosphocholine，DOPC)、氫化大豆磷脂醯膽鹼(hydrogenated soy phosphatidylcholine，HSPC)、1,2-二肉荳蔻醯基-sn-甘油-3-磷酸-(1’-rac-甘油)(鈉鹽)(1,2-dimyristoyl-sn-glycero-3-phospho-(1’-rac-glycerol)(sodium salt)，DMPG)、1,2-二棕櫚醯-sn-甘油-3-磷酸-(1’-rac-甘油)(鈉鹽)(1,2-dipalmitoyl-sn-glycero-3-phospho-(1’-rac-glycerol)(sodium salt)，DPPG)、1-棕櫚醯-2-硬脂醯基-sn-甘油-3-磷酸-(1’-rac-甘油)(鈉鹽)(1-palmitoyl-2-stearoyl-sn-glycero-3-phospho-(1’-rac-glycerol)(sodium salt)，PSPG)、1,2-二硬脂醯-sn-甘油-3-磷酸-(1’-rac-甘油)(鈉鹽)(1,2-distearoyl-sn-glycero-3-phospho-(1’-rac-glycerol)(sodium salt)，DSPG)、1,2-二油醯基-sn-甘油-3-磷酸-(1’-rac-甘油)(1,2-dioleoyl-sn-glycero-3-phospho-(1’-rac-glycerol)，DOPG)、1,2-二肉荳蔻醯基-sn-甘油-3-磷酸-L-絲氨酸(鈉鹽)(1,2-dimyristoyl-sn-glycero-3-phospho-L-serine (sodium salt)，DMPS)、1,2-二棕櫚醯-sn-甘油-3-磷酸-L-絲氨酸(鈉鹽)(1,2-dipalmitoyl-sn-glycero-3-phospho-L-serine (sodium salt)，DPPS)、1,2-二硬脂醯-sn-甘油-3-磷酸-L-絲氨酸(鈉鹽)(1,2-distearoyl-sn-glycero-3-phospho-L-serine (sodium salt)，DSPS)、1,2-二油醯基-sn-甘油-3-磷酸-L-絲氨酸(1,2-dioleoyl-sn-glycero-3-phospho-L-serine，DOPS)，1,2-二肉荳蔻醯基-sn-甘油-3-磷酸(鈉鹽)(1,2-dimyristoyl-sn-glycero-3-phosphate (sodium salt)，DMPA)、1,2-二棕櫚醯基-sn-甘油-3-磷酸(鈉鹽)(1,2-dipalmitoyl-sn-glycero-3-phosphate (sodium salt)，DPPA)、1,2-二硬脂醯-sn-甘油-3-磷酸(鈉鹽)(1,2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphate(sodium salt)，DSPA)、1,2-二油醯-sn-甘油-3-磷酸(鈉鹽)(1,2-dioleoyl-sn-glycero-3-phosphate(sodium salt)，DOPA)、1,2-二棕櫚醯-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺(1,2-dipalmitoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamine，DPPE)、1-棕櫚醯-2-油醯-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺(1-palmitoyl-2-oleoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamine，POPE)、1,2-二硬脂醯-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺(1,2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamine，DSPE)、1,2-二油醯-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺(1,2-dioleoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamine，DOPE)、1,2-二棕櫚醯-sn-甘油-3-磷酸-(1’-肌醇)(銨鹽)(1,2-dipalmitoyl-sn-glycero-3-phospho-(1’-myo-inositol)(ammonium salt)，DPPI)、1,2-二硬脂醯-sn-甘油-3-磷酸肌醇(銨鹽)(1,2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphoinositol (ammonium salt)，DSPI)、1,2-二油醯-sn-甘油-3-磷酸-(1’-肌醇)(銨鹽)(1,2-dioleoyl-sn-glycero-3-phospho-(1’-myo-inositol)(ammonium salt)，DOPI)、心磷脂(cardiolipin)、L-α-磷脂醯膽鹼(L-α-phosphatidylcholine)(EPC)、和L-α-磷脂醯乙醇胺(L-α-phosphatidylethanolamine)(EPE)。 經聚乙二醇(PEG)修飾的脂質
經聚乙二醇修飾的脂質包含與脂質綴合的聚乙二醇部分。在一些具體例中，聚乙二醇部分具有自約1,000至約20,000 道耳吞的分子量。在一特定具體例中，經聚乙二醇修飾的脂質與磷脂混合，以形成具有一或多個雙層膜的微脂體。在一些具體例中，以總磷脂和固醇為基礎，經聚乙二醇修飾的脂質的量介於自0.0001 mol%至 40 mol%，選擇性地自0.001 mol % 至 30 mol%，選擇性地自0.01 mol% 至20 mol%，以及特別是不超過6 mol%、選擇性地5 mol%、3 mol%、或2 mol%。在一些具體例中，經聚乙二醇修飾的脂質具有聚乙二醇部分，其平均分子量介於自1,000 g/mol至 5,000 g/mol。在一特定具體例中，經聚乙二醇修飾的脂質是與聚乙二醇基團連接的磷脂醯乙醇胺(phosphatidylethanolamine)(PEG-PE)。在進一步的具體例中，經聚乙二醇修飾的磷脂醯乙醇胺為1,2-二硬脂醯-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-N-[甲氧基(聚乙二醇)](DSPE-PEG)。 微脂體支氣管擴張劑
術語「微脂體支氣管擴張劑」或「微脂體藥物」在本揭示內容中可交替地使用。根據本發明的微脂體支氣管擴張劑包含包埋有支氣管擴張劑的微脂體，其係透過由跨膜酸鹼度梯度驅動的遠端裝載方法，將支氣管擴張劑包覆在微脂體的水性內部中製備而得。在一些具體例中，藉由使用捕獲劑來產生跨膜酸鹼度梯度，以將支氣管擴張劑以遠端裝載方式裝載至微脂體中，且所述捕獲劑由一銨化合物與一陰離子性相對離子組成。
術語「銨化合物」包括未經取代或經取代的銨(ammonium)，其係一表示為NR4 + 之陽離子，其中每一個R獨立地為氫或一有機殘基，且該有機殘基獨立地為烷基、亞烷基、雜環烷基、環烷基、芳香基、烯基、環烯基或它們經羥基取代的衍生物，選擇性地於其碳氫鏈內包括一硫、氧或氮原子，而形成一醚、酯、硫醚、胺或醯胺鍵。在一具體例中，該銨化合物為銨。
術語「陰離子性相對離子(anionic counterion)」指的是一陰離子或一與陰離子官能基共價連接的實體。該陰離子或陰離子官能基在生理環境中帶有負電荷。
該陰離子或陰離子官能基可選自於以下之一或多者：硫酸根、檸檬酸根、磺酸根、磷酸根、焦磷酸根、酒石酸根、琥珀酸根、馬來酸根、硼酸根、羧酸根、重碳酸根、葡糖醛酸根、氯離子、氫氧根、硝酸根、氰酸根或溴離子。
在一具體例中，該陰離子或陰離子官能基係選自於以下之一或多者：檸檬酸根、硫酸根、磺酸根、磷酸根、焦磷酸根、或羧酸根。
在又另一具體例中，與陰離子官能基連接的實體可為一天然或合成、有機或無機的化合物。該實體的實例包括，但不限於一非聚合物的物質，其選自於烷基或芳基，諸如苯、核苷酸與醣類。該烷基指的是具有指定碳原子數的一飽和烴基。例如，烷基係選自於由以下組成之群組：1至4個碳的烷基(C1-4 烷基)、1至6個碳的烷基(C1-6 烷基)、1至8個碳的烷基(C1-8 烷基)、1至10個碳的烷基(C1-10 烷基)、1至12個碳的烷基(C1-12 烷基)、1至14個碳的烷基(C1-14 烷基)、1至16個碳的烷基(C1-16 烷基)、1至18個碳的烷基(C1-18 烷基) 以及1至20個碳的烷基(C1-20 烷基)。
在一些具體例中，該陰離子性相對離子係選自於由硫酸根、磷酸根、檸檬酸根及它們的組合所組成的群組。
在一些具體例中，捕獲劑係選自於由硫酸銨、磷酸銨、檸檬酸銨、二甲基硫酸銨、二甲基磷酸銨、二甲基檸檬酸銨、二乙基硫酸銨、二乙基磷酸銨、二乙基檸檬酸銨、三甲基硫酸銨、三甲基磷酸銨、三甲基檸檬酸銨、三乙基硫酸銨、三乙基磷酸銨、三乙基檸檬酸銨及它們的組合所組成的群組。
在一些具體例中，本發明的緩釋組成物中微脂體支氣管擴張劑的平均粒徑介於50 nm與1,000 nm之間。微脂體之非限制性實例的平均粒徑範圍為自50 nm至20 μm、50 nm至10 μm、50 nm至1000 nm、50 nm至500 nm、50 nm至400 nm、50 nm至300 nm、50 nm至250 nm、或50 nm至200 nm。
術語「支氣管擴張劑」指的是擴張支氣管或細支氣管的物質，其可增加進入肺的氣流。
在一些具體例中，支氣管擴張劑係指抗膽鹼劑與β2腎上腺素受體激動劑。在支氣管擴張劑中，包括噻托溴銨、格隆溴銨、蕪地溴銨(umeclidinium bromide)、阿地溴銨(aclidinium bromide)、異丙托溴銨(ipratropium bromide)、與氧托溴銨(oxitropium bromide)之四級銨毒蕈鹼拮抗劑皆為常用的抗膽鹼劑，其可與氣管平滑肌上的毒蕈鹼受體(muscarinic receptor(s))結合，並阻斷膽鹼性收縮作用(cholinergic contractile action)。由於四級銨毒蕈鹼拮抗劑已完全離子化，其不易被吸收而進入血流，且不能穿過血腦屏障(blood-brain barrier)，因此能將抗膽鹼效果侷限在遞送部位，避免造成全身性不良效果(systemic adverse effects)。
在一些具體例中，根據本發明的支氣管擴張劑為一β2腎上腺素受體激動劑，其選自於由茚達特羅、阿福特羅、福莫特羅、奧達特羅、沙丁胺醇、沙美特羅、及維蘭特羅(vilanterol)所組成的群組。
在一方面，該微脂體支氣管擴張劑包含： 一脂質雙層，其包含：一或多種磷脂、一固醇、及一選擇性的經聚乙二醇修飾的磷脂，尤其是經聚乙二醇修飾的磷脂醯乙醇胺(PEG-PE)；以及 一由該脂質雙層包覆的水性內部，其含有一或多種支氣管擴張劑。
在一具體例中，該一或多種磷脂為中性磷脂，且該經聚乙二醇修飾的磷脂為DSPE-PEG。以總磷脂和固醇為基礎，DSPE-PEG的量介於自0.001至5 mol%。 緩釋組成物的氣溶膠化顆粒
根據本發明的緩釋組成物可適用於製備氣溶膠化的顆粒組成物。在一具體例中，微脂體支氣管擴張劑包含：一脂質雙層，其包含：一磷脂、一固醇、及一經聚乙二醇修飾的磷脂醯乙醇胺；以及一由該脂質雙層包覆的水性內部，其含有支氣管擴張劑，且其中，氣溶膠化後微脂體支氣管擴張劑中自微脂體的藥物洩露少於10%。
在一具體例中，根據本發明使用之支氣管擴張劑的緩釋組成物具有介於自 1至25 mM的脂質濃度。在一具體例中，該緩釋組成物的支氣管擴張劑濃度介於自 0.1 mg/mL至30 mg/mL、0.5 mg/mL至20 mg/mL、1 mg/mL至15 mg/mL、及2 mg/mL至10 mg/mL。在一具體例中，根據本發明使用之支氣管擴張劑的緩釋組成物中，藥物相對於磷脂比例為至少0.1 mol/mol，且較佳為介於自0.05 mol/mol至1 mol/mol，選擇性地0.1 mol/mol至0.7 mol/mol，選擇性地0.15 mol/mol至0.6 mol/mol，以及選擇性地0.15 mol/mol至0.2 mol/mol。在一些具體例中，根據緩釋組成物中支氣管擴張劑的總量，該緩釋組成物中游離的支氣管擴張劑的量少於50%、45%、40%、35%、30%、25%、20%、15%、10% 或5%。
在一些具體例中，經由使用霧化器，自本揭露內容的緩釋組成物產生氣溶膠化的顆粒組成物，該霧化器係選自於由空氣噴射霧化器(air-jet nebulizer)、超聲霧化器、和振動網孔霧化器(vibrating mesh nebulizer)所組成的群組。
在一些具體例中，該氣溶膠化的顆粒組成物的質量中數氣動粒徑(mass median aerodynamic diameter)介於0.5 µm和5 µm之間，且選擇性地介於1 µm和3 µm之間。
在一特定具體例中，該氣溶膠化的顆粒組成物經由肺部遞送至有需要的個體，展現以投予的藥物劑量為基礎，每小時介於約0.5% 和25%之間的釋放率，且最短在約12至24小時之後完全釋放支氣管擴張劑。
以下參照具體的非限制性實施例進一步描述本揭露內容。 實施例
以下實施例說明本揭露內容某些實施方式的製備和性質。 實施例1 微脂體支氣管擴張劑的穩定性 A. 微脂體噻托溴銨的製備 I. 空微脂體的製備
以薄膜水合法或溶劑注射法製備微脂體。使用薄膜水合法製備空微脂體的製程具體化為包含以下步驟的方法： 1. 稱量包含DSPE-PEG2000在內之磷脂和膽固醇的脂質混合物達到預定的莫耳比例，並將它們加入圓底燒瓶內的10 mL氯仿內； 2. 在60°C下將燒瓶置於旋轉蒸發器中，旋轉燒瓶以溶解脂質混合物，接著在旋轉狀態下將燒瓶置於真空下以蒸發氯仿，而獲得乾燥的脂質膜； 3. 經由將捕獲劑加入蒸餾水中並渦旋此溶液以溶解粉末，製備捕獲劑溶液(例如硫酸銨(A.S.))； 4. 將捕獲劑溶液加至乾燥的脂質膜，在60°C下攪拌30分鐘，以形成前體微脂體(proliposome)溶液； 5. 用液態氮和60°C水浴將前體微脂體溶液凍融5次，以得到微脂體樣品； 6. 將得到的微脂體樣品在60°C下擠壓通過0.2 µm聚碳酸酯膜10次，然後再擠壓通過0.1µm聚碳酸酯膜10次； 7. 透析擠壓出的微脂體樣品，以除去游離的捕獲劑，接著將樣品加入透析袋(截留分子量(MWCO)：25 kDa)中，將袋密封，並在100倍體積的9.4%(w/v)蔗糖溶液中攪拌該透析袋；在1小時、4小時後進一步更換蔗糖溶液，並將透析袋攪拌過夜；以及 8. 將透析過的微脂體樣品經由通過0.45 μm聚四氟乙烯(PTFE)膜過濾而滅菌，以獲得空微脂體。 II. 將噻托溴銨裝載進微脂體內以獲得微脂體噻托溴銨
以下方法是經由遠端裝載將噻托溴銨包覆於微脂體內的示例性方案，其包含以下步驟： 1. 製備9.4%(w/v)蔗糖溶液以及pH 7.68、含有200 mM之L-組氨酸(L-His)的9.4% (w/v)蔗糖緩衝溶液，以維持裝載環境中的酸鹼值； 2. 在9.4% (w/v)蔗糖中製備10 mg/mL的噻托溴銨溶液，並在60°C下短暫加熱此溶液，以得到含有噻托溴銨的原液(stock solution)(以下稱為Tio原液)； 3. 在錐形管中混合經由實施例1、第I節 的製程製備的空微脂體(在一典型的具體例中，具有以下條件：HSPC：膽固醇：DSPE-PEG2000的莫耳比例為3：2：0.045、300 mM硫酸銨(A.S)和20 mM脂質濃度)、9.4% (w/v) 蔗糖溶液、pH 7.68的9.4% (w/v) 蔗糖緩衝溶液、乙醇(最終在混合物中的體積為10%)、以及Tio原液，以獲得D/L比例為100 g/mol的裝載溶液； 4. 在60°C下連續搖動裝載溶液60分鐘，以形成微脂體藥物樣品，接著將微脂體藥物樣品置於冰上幾分鐘； 5. 以含有40 mM L-組胺酸的9.4%蔗糖溶液將裝載溶液稀釋10倍，再將稀釋過的樣品裝至Amicon Ultra-15離心過濾裝置(截留分子量：100 kD)中，將該樣品於3,800g下離心80分鐘，以移除乙醇及游離的藥物，最後以含有40 mM L-組胺酸的9.4%蔗糖溶液調整噻托溴銨的濃度至1 mg/mL；以及 6. 使用粒徑篩析管柱層析(size-exclusion column chromatography)和高效能液相層析(HPLC)分析來測定最終樣品的藥物包覆(亦即裝載效率)(微脂體型式或全部型式等所有樣品的藥物濃度係經由在波長237 nm處的吸光度測量來確定)。 B. 不同捕獲劑對於藥物裝載特性的效果
使用不同的捕獲劑包覆支氣管擴張劑，其包括抗膽鹼劑與β2腎上腺素受體激動劑。根據上述第A節製備微脂體藥物製劑(相同的脂質雙層組成物，HSPC：膽固醇： DSPE-PEG2000的莫耳比例為3：2：0.045)，除了使用以下的捕獲劑：(1) 75 mM 的蔗糖八硫酸酯三乙基銨(triethylammonium sucrose octasulfate)以及(2) 300 mM的硫酸銨。藥物裝載實驗的結果顯示於表1。 表1 不同捕獲劑的藥物裝載特性
支氣管擴張劑 捕獲劑 純化的D/L (mole/mole) 包覆率 (%) 平均粒徑(nm)
噻托溴銨 1 0.16 76.1 118
噻托溴銨 1 0.19 88.5 141
噻托溴銨 2 0.19 91.6 110
格隆溴銨 1 0.3 54 200
馬來酸茚達特羅 1 0.67 80 n.d.
馬來酸茚達特羅 2 0.57 87.3 n.d.
半硫酸沙丁胺醇 1 0.46 64.1 201
半硫酸沙丁胺醇 2 0.49 73.2 203
n.d.：未測定
C. 微脂體藥物的儲存穩定性
監測微脂體噻托溴銨儲存於4°C的穩定性至少兩個月。使用75 mM的蔗糖八硫酸酯三乙基銨(TEA-SOS)作為捕獲劑1將噻托溴銨裝載進空微脂體中，以獲得微脂體藥物樣品。在將微脂體藥物樣品於4°C儲存超過兩個月後，沒有藥物自微脂體中漏出。由HSPC：膽固醇：DSPE-PEG2000莫耳比例為3：2：0.045組成的微脂體藥物(0.9 mol% PEG)，其平均粒徑隨著時間推移維持在大約140 nm。就包覆穩定性而言，微脂體藥物的D/L比例隨著時間推移維持在大約0.19 (mol/mol)。關於由3：2之HSPC：膽固醇組成的微脂體藥物的包覆穩定性，其D/L比例維持在大約0.14 (mol/mol)。 實施例2 微脂體支氣管擴張劑的釋放特性 A. 微脂體噻托溴銨的製備 I. 空微脂體的製備
以薄膜水合法或溶劑注射法製備微脂體。使用溶劑注射法製備空微脂體的製程具體化為包含以下步驟的方法： 1. 稱量磷脂、膽固醇和DSPE-PEG2000的脂質混合物達到預定的莫耳比例(組成物的細節顯示於表2)，將它們加入置於玻璃試管內的乙醇中，並將脂質混合物於60°C下溶解； 2. 將指定的捕獲劑溶液((1) 75 mM 的蔗糖八硫酸酯三乙基銨、(2) 300 mM的硫酸銨)於60°C下預熱至少30分鐘； 3. 在攪拌情況下，用注射器將溶解的脂質混合物加入已預熱的捕獲劑溶液中，以形成前體微脂體樣品，然後在60°C下持續攪拌前體微脂體樣品5分鐘； 4. 將前體微脂體樣品於60°C下擠壓通過0.2 µm聚碳酸酯膜，然後再於60°C下擠壓通過0.1 µm聚碳酸酯膜，以得到微脂體樣品； 5. 使用透析袋(截留分子量：25 kDa)與體積為微脂體樣品的100倍並作為透析溶液的9.4%(w/v)蔗糖，透析擠壓出的微脂體樣品，以從微脂體樣品除去微脂體外部的介質；在4小時與8小時的攪拌區間之間更換蔗糖溶液2次；以及 6.將透析過的微脂體樣品經由通過0.2μm聚四氟乙烯(PTFE)膜過濾而滅菌，以獲得空微脂體。 II. 將噻托溴銨裝載進微脂體內以獲得微脂體噻托溴銨
以下方法是經由遠端裝載將噻托溴銨包覆於微脂體內的示例性方案，其包含以下步驟： 1. 製備9.4%(w/v)蔗糖溶液以及pH 7.68、含有200 mM之L-組氨酸的9.4% (w/v)蔗糖緩衝溶液； 2. 在9.4% (w/v)蔗糖中製備10 mg/mL的噻托溴銨溶液； 3. 在錐形管中混合經由前述製程製備的空微脂體(在一典型的具體例中，具有以下條件：HSPC：膽固醇的莫耳比例為3：2、300 mM硫酸銨(A.S)和20 mM脂質濃度)、9.4% (w/v) 蔗糖溶液、pH 7.68且具40 mM之組胺酸最終濃度的9.4% (w/v) 蔗糖緩衝溶液、乙醇(最終在混合物中的體積為10%)、以及Tio原液，以獲得D/L比例為100 g/mol的裝載溶液；以及 4. 在60°C下連續搖動裝載溶液60分鐘，以形成微脂體藥物樣品，接著將微脂體藥物樣品置於冰上幾分鐘。 III. 選擇性地將DSPE-mPEG後插入(post-insertion)至微脂體噻托溴銨上 1. 在9.4% (w/v)蔗糖中製備11.25 mM的DSPE-mPEG原液； 2. 將DSPE-mPEG原液與微脂體噻托溴銨(自第II節獲得) 混合，達到3%的總脂質預定濃度；以及 3. 將含有DSPE-mPEG的微脂體溶液在60°C下連續搖動5分鐘，接著將微脂體藥物樣品置於冰上幾分鐘。 IV. 移除游離型式與乙醇 1. 在離心管內(Amicon Ultra-15離心過濾裝置(截留分子量：100 kD))以含有9.4%蔗糖與40 mM L-組胺酸的緩衝溶液將微脂體藥物樣品(含有或不含有DSPE-mPEG)稀釋10倍，並將該樣品於3,800g下離心80分鐘以移除乙醇及游離的藥物，最後以含有40 mM L-組胺酸的9.4%蔗糖溶液調整噻托溴銨的濃度至1 mg/mL；以及 2. 使用紫外光-可見光讀板儀(UV-Vis plate reader) (微脂體型式或全部型式等所有樣品的藥物濃度係經由在波長237 nm處的吸光度測量來確定)測定最終樣品的藥物包覆(亦即裝載效率)。結果顯示於如下之表2中。 表2 不同捕獲劑的藥物裝載特性
配方編號 磷脂：膽固醇： DSPE-mPEG 捕獲劑 DSPE-mPEG (%) 純化的D/L (mole/mole) 包覆率(%) 平均粒徑(nm)
A 3:2:0.045 1 0.9 0.20 91.2 141
B 3:2:0.15 1 3 0.22 85.9 141
C 3:2:0 2 0 0.20 93.2 118
D 3:2:0.15 2 3 0.13 79.3 118
B. 模擬肺液(simulated lung fluid)中的體外(in vitro )藥物釋放
在模擬肺液(SLF)中進行具有或不具有聚乙二醇之微脂體噻托溴銨的釋放特性實驗，以證明它們的緩釋性質。製備具有約等量之噻托溴銨(1 mg/mL藥物)的測試樣品(製備好的微脂體噻托溴銨樣品)，每一樣品中只有少量之游離的藥物(以總藥量為基礎的0.01至10%)。體外釋放(in vitro release，IVR)實驗的方案如下： 1. 經由將0.5 mL的每種微脂體噻托溴銨樣品與4.5 mL的模擬肺液(在37°C預熱)混合，而將測試樣品稀釋10倍，然後將稀釋過的樣品置於15 mL離心管中； 2. 將盛裝稀釋過的樣品之離心管置於Inteli-mixer 旋轉器的樣品槽上，以20 rpm(每分鐘轉數)旋轉，並在37°C培育；以及 3. 在預定的時間點(0、4和24小時)取樣1 mL 的稀釋過的樣品以分析包覆率。
測定噻托溴銨包覆率的分析方法如下： a. 用9.4%蔗糖溶液(小於5 mL)填充並洗滌 2 mL的G50管柱； b. 將0.2 mL的樣品加入管柱中，然後加入0.15 mL的9.4% 蔗糖溶液，分別加入3次，等待溶液從管柱中洗脫出來； c. 將0.7 mL的9.4％蔗糖溶液加入管柱中，並將洗脫液(此為微脂體型式)收集在1.5 mL微量離心管中；然後將0.24 mL的洗脫液轉移並與0.96 mL的甲醇混合； d. 在另一個1.5 mL微量離心管中放入0.2 mL未純化的樣品，再加入0.5 mL的9.4％蔗糖溶液，並充分混合，然後將0. 24 mL的此溶液轉移並與0.96 mL的甲醇混合(此為全部型式)； e. 將通過管柱前與通過管柱後的樣品(pre and post-column samples)(微脂體型式與全部型式)於20,600g下離心10分鐘；以及 f. 使用紫外光-可見光(UV-Vis)讀板儀測量樣品的最終上清液在波長237 nm處的吸光度，以確定每個樣品的藥物濃度。
微脂體內支氣管擴張劑的包覆率(encapsulation efficiency，EE)由以下公式計算而得：藥物的微脂體型式(LF)除以藥物的全部型式(TF)： EE(%) = LF/TF*100%。
釋放特性繪製如圖1，其繪示釋放速率(%)相對於時間的關係。釋放速率由以下公式計算：初始微脂體型式減每一時間點的微脂體型式，再除以初始微脂體型式： (LFt0 -TFt )/LFt0 *100%。
具捕獲劑1或2的微脂體噻托溴銨在模擬肺液中展現緩慢的釋放特性。具捕獲劑1及0.9%和3% PEG的微脂體噻托溴銨展現穩定且緩慢的釋放特性，且24時後，在模擬肺液中釋放至多50%的初始藥物含量。另一方面，相較於含有3% PEG-DSPE的微脂體噻托溴銨，含有捕獲劑2且不含有或僅含有少量(0.9%)PEG的微脂體噻托溴銨展現了較慢的釋放特性(緩慢藥物釋放，且24時後，在模擬肺液中僅釋放至多 30%的初始藥物含量)。為了達到改良的藥效以及以低投藥頻率進行治療，期望能有延長的藥物成分釋放特性。因此，我們從所有配方中選擇兩種具有緩慢釋放特性的微脂體噻托溴銨配方，並使用它們進行以下的毒性研究。所選擇的兩種配方－表2中的A與C分別具有低含量或零含量之DSPE-mPEG，且使用兩種不同的捕獲劑。 實施例3 在由脂多醣(LPS)引發的急性COPD動物模式中針對吸入的微脂體噻托溴銨之毒性評估
在由脂多醣引發急性COPD的小鼠中，研究兩種微脂體噻托溴銨配方的毒性。實驗設計描述如表3。簡單地說，12隻小鼠被分成3組(N=4)。未治療的控制組僅模擬症狀，控制組的小鼠並未接受任何治療。
每一組成物的描述如下： 第1組：實施例2的微脂體噻托溴銨配方：以300 mM硫酸銨作為捕獲劑裝載噻托溴銨的微脂體。此配方包含20 mM的脂質濃度、1 mg/mL的噻托溴銨濃度； 第2組：實施例2的微脂體噻托溴銨配方：以75 mM TEA-SOS作為捕獲劑裝載噻托溴銨的微脂體。此配方包含20 mM的脂質濃度、1 mg/mL的噻托溴銨濃度； 第3組：未治療的控制組，僅有脂多醣的誘導。
在第0天以1 mg/kg的劑量於氣管內(intratracheally ，IT)滴注脂多醣，以建立急性COPD動物模式。24小時後，氣管內滴注具有不同捕獲劑的微脂體噻托溴銨(第1組和第2組，N=4)25 µL至經過脂多醣處理的小鼠，以與未治療控制組(第3組，N=4)進行比較，而評估毒性。投藥方案顯示於表3。兩種配方以1 mg/kg之劑量投藥一次。記錄下研究期間的體重與生存狀態。 表3 急性COPD動物模式中，針對微脂體噻托溴銨之毒性的研究設計
組別編號 組成物 動物數目 投藥頻率 劑量
1 AS-Tio 1.06 mg/mL 4 單次給藥 1 mg/kg
2 TEA-Tio 1.07 mg/mL 4 單次給藥 1 mg/kg
3 未治療的控制組 4 N/A N/A
由實驗終點時動物的體重與生存狀態確定毒性。參考圖2所述，與第3組相比，在第1組和第2組皆觀察到超過20%的體重減少。如圖3所例示，第2組的生存率(25%)低於第1組的生存率(75%)，這表示當使用硫酸銨作為捕獲劑時，毒性較輕微且耐受性較高。因此，在COPD的治療中，雖然經由氣管內滴注投予了相等總量的噻托溴銨，相較於TEA-SOS配方組別，配方中含有硫酸銨的微脂體噻托溴銨組別展現了降低的副作用。
無
圖1繪示不同組成之微脂體噻托溴銨(liposomal tiotropium)緩釋配方的體外釋放(in vitro release)特性。 圖2為一線圖，顯示3組施用脂多醣(LPS)之小鼠的體重變化，所述小鼠係滴注以具有不同捕獲劑的微脂體噻托溴銨或未接受治療。 圖3為一線圖，顯示3組施用脂多醣(LPS)之小鼠的生存率，所述小鼠係滴注以具有不同捕獲劑的微脂體噻托溴銨或未接受治療。
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Claims (20)

  1. 一種用於治療肺部疾病之支氣管擴張劑的緩釋組成物，其包含微脂體支氣管擴張劑，其中該微脂體支氣管擴張劑包含： 一脂質雙層，其包含：一或多種磷脂及一固醇；以及 一由該脂質雙層包覆的水性內部，其含有經由使用一捕獲劑的遠端裝載而包覆於微脂體中的一支氣管擴張劑，其中該捕獲劑由一銨化合物及一陰離子性相對離子組成，且該陰離子性相對離子為一陰離子或一與陰離子官能基共價連接的實體。
  2. 如請求項1所述之支氣管擴張劑的緩釋組成物，其中該肺部疾病包括慢性阻塞性肺病(Chronic obstructive pulmonary disease，COPD)、COPD相關疾病、症狀或併發症。
  3. 如請求項1所述之支氣管擴張劑的緩釋組成物，其中總磷脂相對於固醇的莫耳比例介於自1：1至3：2。
  4. 如請求項3所述之支氣管擴張劑的緩釋組成物，其中該固醇為膽固醇。
  5. 如請求項3所述之支氣管擴張劑的緩釋組成物，其中該一或多種磷脂係選自於由氫化大豆磷脂醯膽鹼(hydrogenated soy phosphatidylcholine，HSPC)、1,2-二硬脂醯-sn-甘油-3-磷酸膽鹼(1,2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphocholine，DSPC)、1,2-二棕櫚醯-sn-甘油-3-磷酸膽鹼(1,2-dipalmitoyl-sn-glycero-3-phosphocholine，DPPC)、磷脂醯乙醇胺(phosphatidylethanolamine)脂質，諸如1,2-二棕櫚醯-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺(1,2-dipalmitoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamine，DPPE)、及它們的組合所組成的群組。
  6. 如請求項1所述之支氣管擴張劑的緩釋組成物，其中該脂質雙層包含一經聚乙二醇(polyethylene glycol ，PEG)修飾的脂質，以總磷脂和固醇為基礎，該經聚乙二醇修飾的脂質的量介於自0.0001 mol%至40 mol%，選擇性地低於6 mol%，選擇性地介於自0.001 mol%至30 mol%。
  7. 如請求項6所述之支氣管擴張劑的緩釋組成物，其中該經聚乙二醇修飾的脂質具有一聚乙二醇部分，其平均分子量介於自1,000 g/mol至 5,000 g/mol。
  8. 如請求項6所述之支氣管擴張劑的緩釋組成物，其中該經聚乙二醇修飾的脂質為1,2-二硬脂醯-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-N-[甲氧基(聚乙二醇)] (1,2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamine-N-[methoxy(polyethylene glycol)]，DSPE-PEG)。
  9. 如請求項8所述之支氣管擴張劑的緩釋組成物，其中該一或多種磷脂為中性磷脂，以總磷脂和固醇為基礎，微脂體中DSPE-PEG的量介於自0.001至5 mol%。
  10. 如請求項1所述之支氣管擴張劑的緩釋組成物，其中該微脂體支氣管擴張劑的平均粒徑介於50 nm與1,000 nm之間。
  11. 如請求項1所述之支氣管擴張劑的緩釋組成物，其中該支氣管擴張劑為一抗膽鹼劑或一β2腎上腺素受體激動劑。
  12. 如請求項1所述之支氣管擴張劑的緩釋組成物，其中該支氣管擴張劑係選自於由噻托溴銨(tiotropium bromide)、格隆溴銨(glycopyrrolate)、蕪地溴銨(umeclidinium bromide)、阿地溴銨(aclidinium bromide)、異丙托溴銨(ipratropium bromide)、氧托溴銨(oxitropium bromide)、雷芬那辛(revefenacin) 、茚達特羅(indacaterol)、阿福特羅(arformoterol)、福莫特羅(formoterol) 、奧達特羅(olodaterol)、沙丁胺醇(salbutamol) 、沙美特羅(salmeterol) 、維蘭特羅(vilanterol)及它們的組合所組成之群組。
  13. 如請求項1所述之支氣管擴張劑的緩釋組成物，其中該支氣管擴張劑為一四級銨毒蕈鹼拮抗劑(quaternary ammonium muscarinic antagonist)。
  14. 如請求項13所述之支氣管擴張劑的緩釋組成物，其中該四級銨毒蕈鹼拮抗劑係選自於由噻托溴銨、格隆溴銨、蕪地溴銨、阿地溴銨、異丙托溴銨、與氧托溴銨所組成的群組。
  15. 如請求項1至14中任一項所述之支氣管擴張劑的緩釋組成物，其具有介於自 1至25 mM的脂質濃度。
  16. 如請求項1至14中任一項所述之支氣管擴張劑的緩釋組成物，其具有介於自 1至15 mg/mL的支氣管擴張劑濃度。
  17. 如請求項1至14中任一項所述之支氣管擴張劑的緩釋組成物，其藥物相對於磷脂比例介於自0.01 mol/mol至1 mol/mol，選擇性地0.1 mol/mol至0.7 mol/mol，選擇性地0.15 mol/mol至0.6 mol/mol，以及選擇性地0.15 mol/mol至0.2 mol/mol。
  18. 一種用於治療肺部疾病之支氣管擴張劑的緩釋組成物，其包含微脂體支氣管擴張劑，其中該微脂體支氣管擴張劑包含： 一脂質雙層，其包含：一或多種磷脂及膽固醇；以及 一由該脂質雙層包覆的水性內部，其含有經由使用一捕獲劑的遠端裝載而包覆於微脂體中的噻托溴銨，其中該捕獲劑由一銨化合物及一陰離子性相對離子組成，且該陰離子性相對離子係選自於由硫酸根、檸檬酸根、磺酸根、磷酸根、焦磷酸根、酒石酸根、琥珀酸根、馬來酸根、硼酸根、羧酸根、重碳酸根、葡糖醛酸根、氯離子、氫氧根、硝酸根、氰酸根、溴離子及它們的組合所組成的群組。
  19. 一種氣溶膠化的顆粒組成物，含有微脂體支氣管擴張劑，以用於治療肺部疾病，其包含如請求項1至18中任一項所述之用於治療肺部疾病之支氣管擴張劑的緩釋組成物的複數顆粒。
  20. 如請求項19所述之氣溶膠化的顆粒組成物，其中該複數顆粒的質量中數氣動粒徑(mass median aerodynamic diameter)介於自約0.5 µm至5 µm。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
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US20090047336A1 (en) * 2007-08-17 2009-02-19 Hong Kong Baptist University novel formulation of dehydrated lipid vesicles for controlled release of active pharmaceutical ingredient via inhalation
CN105163720B (zh) * 2013-02-01 2019-10-11 佐尼奥尼制药股份有限公司 远程装载略微水溶性药物至脂质体
CN106999419A (zh) * 2014-08-04 2017-08-01 佐尼奥尼制药股份有限公司 远程装载略微水溶性药物至脂质膜泡
KR101914181B1 (ko) * 2016-03-23 2019-01-14 한국화학연구원 피하주사용 항암제 함유 리포솜 조성물

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