TW202019461A

TW202019461A - 重組人類副甲狀腺素之改良穩定性調配物

Info

Publication number: TW202019461A
Application number: TW108126918A
Authority: TW
Inventors: 尼廷迪西特; 榮阮; 皮埃爾蘇雅克; 蘇吉特巴蘇
Original assignee: 美商沙爾Ｎｐｓ製藥有限公司
Priority date: 2018-07-30
Filing date: 2019-07-30
Publication date: 2020-06-01
Also published as: JP7399382B2; KR20210038618A; EP3829625A1; JP2024003211A; CN112638407A; AU2019315807A1; EP3829625A4; TWI831813B; JP2021532110A; US20210315978A1; CA3107105A1; WO2020028011A1

Abstract

本發明係關於包含全長重組人類副甲狀腺素(rhPTH(1-84))之醫藥組合物及劑型。本發明進一步關於新穎及/或經改良之PTH組合物，其具有經改良之使用中穩定性，該PTH組合物因應物理及化學應力對蛋白質降解具有抗性。

Description

重組人類副甲狀腺素之改良穩定性調配物

本發明係關於包含重組人類副甲狀腺素(rhPTH(1-84))之新穎且經改良之醫藥組合物及劑型，其具有經改良之使用中穩定性。

副甲狀腺素(PTH)係哺乳動物副甲狀腺之分泌型84個胺基酸產物，其透過其對各種組織(包括骨骼)之作用來控制血清鈣濃度。於具有某些形式之PTH之人類中之研究已證實對骨骼之合成代謝作用，並引起對其用於治療骨質疏鬆症及相關骨骼病症之顯著興趣。

與已成功調配的其他蛋白質不同，PTH對各種形式之降解特別敏感。與已成功調配的其他蛋白質不同，PTH對氧化特別敏感，並進一步需要其N端序列保持完整以便於保持生物活性。例如，氧化可發生於位置8及18之甲硫胺酸殘基，產生氧化PTH物質ox-M(8)-PTH及ox-M(18)-PTH，而脫醯胺化可發生於位置16之天冬醯胺酸，產生d16-PTH。多肽鏈藉由在N端及C端斷開肽鍵而截短。此外，PTH亦可吸附至表面，形成非特異性聚集物及/或沉澱，從而降低藥物之可用濃度。所有此等降解反應及其組合導致PTH生物活性之部分或完全喪失。

副甲狀腺素之商業開發需要在儲存及使用中穩定性及易於製備及復水方面係可接受之調配物。因為其係一種蛋白質及因此比傳統小分子量藥物遠更不穩定，副甲狀腺素之調配物提出醫藥工業不常遇到的挑戰。

全長rhPTH(1-84)最近被批准作為副甲狀腺機能減退症之安全且有效之治療(由Shire Pharmaceuticals以商標名NATPARA^® /NATPAR^® 出售)。其係副甲狀腺機能減退症之第一特定激素替代品，且係每日一次皮下注射的，可作為鈣及維生素D之輔助劑攝取。NATPARA^® 目前係呈含有各種劑量強度之無菌凍乾粉末及稀釋劑之多劑量、雙腔玻璃藥筒提供。無菌凍乾粉末包含0.40 mg、或0.80 mg、或1.21 mg或1.61 mg副甲狀腺素(取決於劑量強度)及4.5 mg氯化鈉、30 mg甘露醇及1.26 mg單水合檸檬酸。無菌稀釋劑之重量為1.13 g且該稀釋劑包含3.2 mg/mL間甲酚水溶液。復水後，每個劑量由pH在5與6之間的rhPTH(1-84)溶液組成。

丟棄式NATPARA^® 藥筒經設計併與可再使用之混合裝置使用以進行產品復水及併與可再使用之Q-Cliq筆使用以進行藥物遞送。Q-Cliq筆遞送71.4 µL之固定體積劑量。使用Q-Cliq筆，各NATPARA^® 雙腔藥筒遞送14劑NATPARA^® 。

據觀測，在某些情況下，復水的NATPARA^® 溶液可在使用中期間形成蛋白質顆粒。因此，期望NATPARA^® 調配物抵抗在正常加工條件、產品存放期及使用中壽命遇到的物理及化學應力之穩健性更高。

因此，需要包含全長rhPTH(1-84)之經改良PTH調配物，特別係防止PTH之物理及化學降解，具有經改良之使用中穩定性，及易於製備、復水及使用之調配物。

以下描述本發明之各種非限制性態樣及實施例。

在一個態樣中，提供包含重組人類副甲狀腺素(rhPTH(1-84))之穩定液體醫藥調配物。該調配物經設計直接用作注射用液體，無需復水粉末之步驟。在一個實施例中，該醫藥調配物包含： (a) 治療有效量之重組人類副甲狀腺素(rhPTH(1-84))； (b) 表面活性劑； (c) 張力劑； (d) 抗氧化劑； (e) 防腐劑； (f) 醫藥上可接受之緩衝液，及 (g) 水，其中該醫藥調配物係經調配成注射用液體，且其中該調配物係物理上及化學上穩定的並保持透明、無色、及無可見顆粒至少48小時。

在一個實施例中，該醫藥調配物保持透明、無色、及無可見顆粒至少72小時。在一個實施例中，該醫藥調配物保持透明、無色、及無可見顆粒至少96小時。在一個實施例中，該醫藥調配物保持透明、無色、及無可見顆粒至少7天。在一個實施例中，該醫藥調配物保持透明、無色、及無可見顆粒至少14天。在一個實施例中，該醫藥調配物保持透明、無色、及無可見顆粒至少21天。

在一個實施例中，表面活性劑係泊洛沙姆(poloxamer)。在一個實施例中，表面活性劑係泊洛沙姆-188。在一個實施例中，表面活性劑係泊洛沙姆-188，其以調配物之約0.03至約3% w/v存在。

在一個實施例中，張力劑係選自氯化鈉、蔗糖及甘油、或其組合。在一個實施例中，張力劑係氯化鈉，其以調配物之約0.2至約20% w/v存在。在一個實施例中，張力劑係蔗糖，其以調配物之約0.2至約20% w/v存在。在一個實施例中，張力劑係甘油，其以調配物之約0.2至約20% w/v存在。

在一個實施例中，防腐劑係間甲酚，其以調配物之約0.03至約3% w/v存在。在一個實施例中，防腐劑係間甲酚，其以調配物之約0.3% w/v存在。

在一個實施例中，醫藥上可接受之緩衝液係乙酸鹽緩衝液、磷酸鹽緩衝液、1-組胺酸緩衝液或琥珀酸鹽緩衝液。在一個實施例中，醫藥上可接受之緩衝液係以約5 mM至約50 mM、或約20 mM之濃度存在。

在一個實施例中，抗氧化劑係甲硫胺酸且其以調配物之約0.015%至約1.50% w/v之濃度存在。在一個實施例中，抗氧化劑係甲硫胺酸，其以約0.15% w/v或10 mM存在。

在一個實施例中，醫藥調配物具有約3.8至約6.2、或約5.5之pH。

如技術方案1之醫藥調配物，其中該調配物係呈單位劑量小瓶、多劑量小瓶、藥筒、預填充注射器、自動注射器或注射筆。

在一個實施例中，該醫藥調配物包含： (a) 約0.2至約2.0 mg/mL重組人類副甲狀腺素(rhPTH(1-84))； (b) 約0.03%至約3.0% w/v表面活性劑； (c) 約0.2%至約20% w/v張力劑； (d) 約0.015%至約1.50% w/v抗氧化劑； (e) 約0.03%至約3%防腐劑； (f) 約5 mM至約50 mM醫藥上可接受之緩衝液，及 (g) 水，其中該醫藥調配物係經調配成注射用液體，且其中該調配物係物理上及化學上穩定的並保持透明、無色、及無可見顆粒至少48小時。

在另一個態樣中，包含重組人類副甲狀腺素(rhPTH(1-84))之醫藥調配物係呈在注射前進行復水之凍乾粉末提供。在一個實施例中，該醫藥調配物包含： (a) 治療有效量之重組人類副甲狀腺素(rhPTH(1-84))； (b) 增積劑； (c) 冷凍保護劑，及 (d) 醫藥上可接受之緩衝液，其中該醫藥調配物係經調配成在注射前進行復水之凍乾粉末，且其中該調配物係物理上及化學上穩定的並保持透明、無色、及在復水後無可見顆粒至少48小時。

在一個實施例中，增積劑係甘露醇。在一個實施例中，增積劑係甘露醇，其以調配物之約0.3%至約30% w/v存在。

在一個實施例中，冷凍保護劑係蔗糖。在一個實施例中，冷凍保護劑係蔗糖，其以調配物之約0.2至約20% w/v存在。

在一個實施例中，醫藥上可接受之緩衝液係磷酸鹽緩衝液、L-組胺酸緩衝液或琥珀酸鹽緩衝液。在一個實施例中，醫藥上可接受之緩衝液係以約5 mM至約50 mM、或約20 mM之濃度存在。在一個實施例中，醫藥上可接受之緩衝液係L-組胺酸緩衝液。在一個實施例中，醫藥上可接受之緩衝液係琥珀酸鹽緩衝液。

在一個實施例中，醫藥調配物進一步包含抗氧化劑。在一個實施例中，抗氧化劑係甲硫胺酸。在一個實施例中，抗氧化劑係甲硫胺酸且其以調配物之約0.015%至約1.50% w/v之濃度存在。在一個實施例中，抗氧化劑係甲硫胺酸，其以約0.15% w/v或10 mM存在。

在一個實施例中，醫藥調配物進一步包含表面活性劑。在一個實施例中，表面活性劑係泊洛沙姆(poloxamer)。在一個實施例中，表面活性劑係泊洛沙姆-188。在一個實施例中，表面活性劑係泊洛沙姆-188，其以調配物之約0.03至約3% w/v存在。

在一個實施例中，醫藥調配物具有約3.8至約6.2、或約4.3、或約5.5之pH。

在一個實施例中，該醫藥調配物包含： (a) 約0.02至約2.0 mg/mL重組人類副甲狀腺素(rhPTH(1-84))； (b) 約0.3%至約30% w/v增積劑； (c) 約0.2%至約20% w/v冷凍保護劑，及 (d) 約5 mM至約50 mM醫藥上可接受之緩衝液，其中該醫藥調配物係經調配成在注射前進行復水之凍乾粉末，且其中該調配物係物理上及化學上穩定的並保持透明、無色、及在復水後無可見顆粒至少48小時。

在閱讀以下[實施方式](包括隨附申請專利範圍)後，熟習此項技術者將明瞭本發明之此等及其他態樣。

本文揭示本發明之詳細實施例；然而，應明瞭所揭示的實施例僅說明可以各種形式體現的發明。另外，結合本發明之各種實施例給出的每個實例意欲係說明性的而非限制性的。因此，本文所揭示的特定結構及功能性細節不應被解釋為具限制性，而僅僅解釋為教示熟習此項技術者以各種方式使用本發明之代表性基礎。

除非另外定義，否則本文使用的所有技術及科學術語具有與本發明所屬技術的一般人員通常所瞭解的含義相同的含義。

如在本說明書及隨附申請專利範圍中所用，單數形式「一」、「一個」及「該」包括複數個指示物，除非本文清楚地另作指明。因此，例如，提及「方法」時包括一或多種方法、及/或本文所述類型及/或熟習此項技術者在閱讀本發明後當明瞭之步驟。

如在本申請案中所用，術語「約(about)」及「近似(approximately)」係用作等效物。本申請案中與或不與約/近似一起使用的任何數字意指涵蓋相關技術中之一般人員所明瞭的任何正常波動。如本文所用，當應用於一或多個所述值時，術語「近似」或「約」係指與所述參考值類似的值。在某些實施例中，術語「近似」或「約」係指以所述參考值的任一方向(大於或小於)落在25%、20%、19%、18%、17%、16%、15%、14%、13%、12%、11%、10%、9%、8%、7%、6%、5%、4%、3%、2%、1%或更小範圍內之一系列值，除非另作說明或以其他方式從上下文顯而易見(除非此類數字超過可能值的100%)。

如本文所用，術語「載劑」及「稀釋劑」係指可用於製備醫藥調配物之醫藥上可接受(例如，投與人類係安全且無毒的)之載劑或稀釋物質。示例性稀釋劑包括無菌水、抑菌性注射用水(BWFI)、pH緩衝溶液(例如磷酸鹽緩衝鹽水)、無菌鹽水溶液、林格氏溶液(Ringer's solution)或右旋糖溶液。

術語「治療(treat/treatment)」狀態、病症或病情包括：(1)預防、延遲或降低在可能罹患或易患該狀態、病症或病情但尚未經歷或展現該狀態、病症或病情之臨床或亞臨床症狀的個體之該狀態、病症或病情之至少一種臨床或亞臨床症狀之出現之發生率及/或可能性；或(2)抑制該狀態、病症或病情，亦即，阻止、減少或延遲疾病或其復發或其至少一種臨床或亞臨床症狀之發展；或(3)緩解疾病，亦即，導致該狀態、病症或病情或其臨床或亞臨床症狀中之至少一者之消退。對待治療的個體之益處係統計學上顯著的或至少對患者或醫生可察覺。

如本文所用，「個體(subject)」或「患者」或「個體(individual)」或「動物」係指人類、獸醫動物(例如，貓、狗、牛、馬、羊、豬等)及疾病之實驗動物模型(例如，小鼠，大鼠)。在一個較佳實施例中，個體係人類。

如本文所用，應用於劑量或量之術語「有效」係指化合物或醫藥組合物的量足以在投與有此需要的個體時產生所需活性。應注意，當投與活性成分之組合時，該組合之有效量可包括或不包括若單獨投與將係有效的每種成分的量。所需的精確量將因個體而異，取決於個體之物種、年齡及一般病情、所治療病情之嚴重度、所用的特定藥物、投藥模式及類似者。

如與本發明之組合物結合使用，片語「醫藥上可接受」係指此等組合物之分子實體及其他成分，其在生理上係可耐受的並當投與哺乳動物(例如人類)時通常不產生不良反應。較佳地，如本文所用，術語「醫藥上可接受」意指由聯邦或州政府管理機構批准或在美國藥典或其他公認藥典中列出用於哺乳動物中，且更特別用於人類中。

與市售的rhPTH(1-84)調配物相比，根據本發明之組合物具有經改良的rhPTH(1-84)的使用中穩定性。如本文所用，術語「使用中」係指在多劑量容器打開後可使用多劑量調配物同時保持量在可接受的規格內的時間段。因此，「使用中穩定性」係指在使用中時間多劑量調配物之穩定性。在本發明之一些實施例中，使用中時間係7天。在本發明之一些實施例中，使用中時間係14天。在本發明之一些實施例中，使用中時間係21天。在本發明之一些實施例中，使用中時間係一個月。

rhPTH(1-84)

本文所揭示的組合物併有作為活性成分的人類副甲狀腺素之全長、84個胺基酸的形式，其係以重組方式，藉由肽合成或藉由從人類流體提取而獲得。在本說明書中，PTH之重組人類形式縮寫為rhPTH(1-84)，其具有由Kimura等人，Biochem Biophys Res Comm，114 (2):493報導的胺基酸序列。

作為PTH之全長人類形式之替代，本發明之組合物可併有人類PTH之彼等同源物、片段或變體，該等同源物、片段或變體具有PTH活性，如在Kimmel等人，Endocrinology，1993，32(4):1577中報導的卵巢切除大鼠骨質疏鬆症模型中測定並以引用的方式併入本文中。

在一個態樣中，本發明之副甲狀腺素組合物以單一單位或多單位液體劑型提供，呈用於注射之激素水溶液，其不需要任何復水、稀釋或混合。

在一個態樣中，本發明之副甲狀腺素組合物以含有不超過3%水(以重量計)之凍乾粉末劑型提供，該凍乾粉末劑型係由冷凍乾燥藉由混合所選的副甲狀腺素、非揮發性緩衝液及賦形劑製得的無菌激素水溶液得到的。

本發明之PTH組合物併有治療有效量之PTH，治療有效量係與治療上有用或可用於醫學診斷中之參考量使用的術語。併入製劑中之副甲狀腺素之特定量可基於所選PTH之類型及基於製劑之所欲最終用途預先確定。在一個態樣中，該等組合物被用於治療目的，及特別用於治療骨質疏鬆症及相關骨骼疾病、以及副甲狀腺機能減退症。在一個態樣中，此種療法需要藉由注射(例如，皮下注射)以反映規定治療方案之單位劑量投與液體及/或復水凍乾組合物。在一個實施例中，治療方案可包括投與重組人類PTH(1-84)，其範圍為每個患者約0.01 mg PTH/mL注射溶液至5 mg PTH/mL注射溶液，注射體積為(例如)約0.3 mL至約2.3 mL、或約0.5 mL至約2 mL、或約1 mL至約1.75 mL、或約1.2 mL、或約1.3 mL、或約1.4 mL、或約1.5 mL、或約1.6 mL、或約1.7 mL。因此，在一個實施例中，將純化並無菌過濾之PTH與緩衝液及賦形劑一起併入以形成含有PTH之水溶液，濃度範圍為0.01 mg/mL至5 mg/mL、或約0.02 mg/mL至約2.5 mg/mL、或約0.025 mg/mL至約1 mg/mL、或約0.025 mg/mL至約0.5 mg/mL、或約0.025 mg/mL至約0.25 mg/mL。在一個實施例中，將PTH與緩衝液及賦形劑一起併入以形成含有PTH之水溶液，以一濃度範圍，或約0.025 mg/mL、或約0.05 mg/mL、或約0.075 mg/mL、或約0.1 mg/mL。

若需要，可類似地併入莫耳當量之實質上等效PTH形式(諸如PTH(1-84)變體及片段)替代人類PTH(1-84)。

在一些實施例中，本發明之組合物進一步包含醫藥上可接受之賦形劑及/或載劑。適宜賦形劑之實例提供於Pramanick, S.等人，Excipient Selection in Parenteral Formulation Development ，Pharma Times，2013，45，3，65-77中，其內容係以其全文引用的方式併入本文中。適宜賦形劑之非限制性實例如下所示。

表面活性劑

在一些實施例中，本文所揭示的調配物進一步包含表面活性劑。在一些實施例中，表面活性劑可選自泊洛沙姆(例如，泊洛沙姆-188)、聚乙二醇、十六烷基羥乙基纖維素、疏水改性之羥乙基纖維素、聚氧乙二醇烷基醚、聚氧丙二醇烷基醚、葡糖苷烷基醚、聚氧乙二醇烷基酚醚、甘油烷基酯、聚山梨醇酯(例如，聚山梨醇酯20及聚山梨醇酯80)、椰油醯胺單乙醇胺(MEA)、椰油醯胺二乙醇胺(DEA)、十二烷基二甲基胺氧化物、或其任何組合。在一個實施例中，表面活性劑係選自泊洛沙姆-188、聚山梨醇酯20、聚山梨醇酯80及聚乙二醇、及其組合。

在一個實施例中，表面活性劑係泊洛沙姆。在一個實施例中，表面活性劑係泊洛沙姆-188。

表面活性劑可以約0.01%至約20%(以重量計)、約0.01%至約15%、約0.01%至約10%、約0.01%至約5%、約0.02%至約4%、約0.03%至約3%、約0.03%至約1%、約0.05%至約0.5%、約0.1%至約0.5%、約0.1%至約20%、約0.1%至約10%、約0.1%至約5%、約0.1%至約2.5%、0.1%至約1%、或約0.1%至約0.7%、或約0.1%、或約0.2%、或約0.3%、或約0.4%、或約0.5%之濃度存在。在一個實施例中，表面活性劑係泊洛沙姆-188，且其以組合物之約0.3% w/v存在。

張力劑

在一些實施例中，本發明之組合物進一步包含張力劑。張力係由半透膜隔開的兩種溶液之有效滲透壓梯度(由兩種溶液之水勢定義)之量度。在描述浸入外部溶液中之細胞之反應時，通常使用張力。換言之，張力係決定擴散之方向及程度之溶液相對濃度。體液通常具有對應於0.9%氯化鈉溶液之滲透壓之滲透壓。當組合物之張力約等於0.9%氯化鈉溶液之張力(亦即，290 mOsm/kg)時，組合物(例如溶液或凝膠)被認為係等滲的。當組合物與生理溶液之間鹽大小相等時，組合物與體液溶液等滲。藉由水移動跨過膜在生理溶液中達到張力平衡，但鹽停留在其原始溶液中。若在細胞與溶液接觸時沒有由該細胞引起之淨增益或水損失、或該細胞中的其他變化，則該溶液與活細胞等滲。

在某些實施例中，用於本文所揭示的組合物中之張力劑係電解質、單醣或二醣、無機鹽(例如，氯化鈉、氯化鈣、硫酸鈉、氯化鎂)、多元醇或其組合。在一些實施例中，張力劑係葡萄糖、蔗糖、氯化鈉、氯化鉀、氯化鈣、硫酸鈉、氯化鎂、右旋糖、甘露醇、甘油或其任何組合。在一個實施例中，張力劑係選自氯化鈉、蔗糖及甘油、或其組合。在一個實施例中，張力劑係蔗糖。在一個實施例中，張力劑係氯化鈉。在一個實施例中，張力劑係甘油。

張力劑可以達成等滲條件所需的任何濃度存在。在一些實施例中，張力劑可以組合物之約0.01%至約50%、約0.01%至約40%、約0.01%至約30%、約0.01%至約20%、約0.02%至約20%、約0.03%至約20%、約0.05%至約15%、約0.1%至約10%、約0.1%至約20%、約0.1%至約15%、約0.1%至約9%、約0.2%至約10%、0.5%至約10%、或約1%至約10%、或約1%、或約2%、或約3%、或約4%、或約5%、或約6%、或約7%、或約8%、或約9% w/v之濃度存在。在一個實施例中，張力劑係蔗糖，且其以組合物之約0.2%至約20%、或組合物之約8.5% w/v存在。在一個實施例中，張力劑係甘油，且其以組合物之約0.2%至約20%、或組合物之約2.3% w/v存在。在一個實施例中，張力劑係氯化鈉，且其以組合物之約0.2%至約20%、或組合物之約0.8% w/v存在。

防腐劑

在一些實施例中，本發明之組合物係無菌且無防腐劑的。在其他實施例中，本發明之組合物視需要包含防腐劑。在特定實施例中，防腐劑係無對羥基苯甲酸酯防腐劑。對羥基苯甲酸酯係一系列對羥基苯甲酸酯或對羥基苯甲酸之酯且已知會引起細胞激素釋放及刺激並與幾種類型之癌症相關聯。對羥基苯甲酸酯之實例包括對羥基苯甲酸甲酯、對羥基苯甲酸乙酯、對羥基苯甲酸丙酯、對羥基苯甲酸丁酯、對羥基苯甲酸庚酯、對羥基苯甲酸異丁酯、對羥基苯甲酸異丙酯、對羥基苯甲酸苄酯及其鈉鹽。

示例性無對羥基苯甲酸酯防腐劑包括甲基苯酚(甲酚)，包括3-甲基苯酚(間甲酚(meta-cresol/m-cresol))、苯酚、苯乙醇、辛二醇、苯氧基乙醇、山梨酸鹽、山梨酸鉀、山梨酸鈉、山梨酸、苯甲酸鈉、苯甲酸、乙醯嗎喃(acemannan)、橄欖苦苷、香芹酚、蔓越莓提取物、葡萄糖酸內酯、綠茶提取物、向日葵籽油(Helianthus annuus seed oil)、乳酸桿菌發酵劑、須鬆蘿提取物(Usnea barbata extract)、聚胺基丙基雙胍、聚甘油基-3棕櫚酸酯、聚甘油基-6辛酸酯、石榴提取物、山楊(Populus tremuloides)樹皮提取物、白藜蘆醇、迷迭香(Rosmarinus officinalis)葉提取物、苄醇或其任何組合。

在一個實施例中，防腐劑係選自間甲酚、苯酚、苄醇、苯甲酸鈉及對羥基苯甲酸丙酯、及其組合。在一個實施例中，防腐劑包含間甲酚。

在一些實施例中，本發明之組合物可包含防腐劑，其濃度為組合物之約0.005%至約10%(以重量計)、約0.005%至約5%、約0.01%至約5%、約0.02%至約4%、約0.03%至約3%、約0.05%至約2%、約0.1%至約1%、約0.2%至約0.5%、約0.01%至約10%、約0.01%至約5%、約0.01%至約2.5%、約0.01%至約1%、約0.01%至約0.5%、約0.1%至約10%、約0.1%至約5%、約0.1%至約2.5%、約0.1%至約1%、約0.1%至約0.5%、或約0.1%、或約0.2%、或約0.3%、或約0.4%、或約0.5% w/v。在一個實施例中，防腐劑係間甲酚，其以組合物之約0.03%至約3%存在。在一個實施例中，間甲酚係以組合物之0.3%存在。

醫藥上可接受之緩衝液

在一些實施例中，本發明之組合物可藉由併入緩衝液而包含醫藥上可接受之緩衝液。在一個實施例中，併入本發明組合物中之緩衝液係選自彼等能夠將製劑緩衝至生理上可接受範圍內的pH之緩衝液。生理上可接受之pH係在投與調配物時不會導致患者不適或使患者不適最小化之pH，且因此可視投藥模式而加以改變。對於在投與前稀釋的製劑，諸如藉由溶解在儲備輸注溶液中，製劑本身之pH可廣泛地改變，例如，從約pH 3至約pH 9。在復水後可直接投與製劑之情況下，將PTH製劑緩衝至3.5至7.5之pH範圍內。因此，適宜之緩衝液係可將製劑之pH緩衝至標的pH範圍內之其等醫藥上可接受之藥劑，並包括乙酸鹽緩衝液、磷酸鹽緩衝液、L-組胺酸緩衝液、琥珀酸鹽緩衝液。

儘管任何醫藥上可接受之緩衝液可適用於根據本發明之調配物，但已令人驚訝地發現，緩衝液之性質對rhPTH溶液之穩定性具有很大影響。

例如，目前以NATPARA^® 使用的檸檬酸鹽緩衝液在環境條件下，在短至24小時的攪動下會導致rhPTH蛋白質微粒形成。然而，攪動24小時，用乙酸鹽、磷酸鹽及L-組胺酸緩衝液製備的rhPTH溶液則保持澄清、無色及無可見顆粒。

為提供根據本發明之副甲狀腺素之使用中穩定之調配物，併入所選的緩衝劑以產生在3.5至6.5的範圍內之最終pH，且緩衝液係以約5 mM至約50 mM之濃度存在。在本發明之一些實施例中，緩衝液產生的pH係在3.8至6.2的範圍內，及緩衝液濃度為約10 mM至約30 mM。在一個實施例中，調配物之pH為5.5。在一個實施例中，調配物之pH為4.3。在一個實施例中，緩衝液係乙酸鹽緩衝液，其以約20 mM之濃度存在。在一個實施例中，緩衝液係L-組胺酸緩衝液，其以約20 mM之濃度存在。在一個實施例中，緩衝液係琥珀酸鹽緩衝液，其以約20 mM之濃度存在。

抗氧化劑

在一些實施例中，本發明之調配物可進一步包含一或多種抗氧化劑，以便在使用中時間為rhPTH蛋白提供氧化穩定性。可能適宜之抗氧化劑可包括(但不限於)丙酮亞硫酸氫鈉、氬、抗壞血酸棕櫚酸酯、抗壞血酸鹽(鹽/酸)、亞硫酸氫鈉、丁基化羥基苯甲醚(BHA)、丁基化羥基甲苯(BHT)、半胱胺酸/半胱胺酸鹽HCl、二硫亞磺酸鈉(亞硫酸氫鈉、次硫酸鈉)、龍膽酸、龍膽酸乙醇胺、麩胺酸單鈉、麩胱甘肽、甲醛次硫酸鈉、偏亞硫酸氫鉀、甲硫胺酸、單硫基甘油(硫基甘油)、氮、沒食子酸丙酯、亞硫酸鈉、生育酚α、琥珀酸氫α生育酚、硫基乙醇酸鈉、或其兩者或更多者之組合。在一個實施例中，抗氧化劑可係甲硫胺酸。

抗氧化劑可以達成調配物之氧化穩定性所需的任何濃度存在。在一些實施例中，抗氧化劑可以約0.0001%至約20%(以重量計)、約0.001%至約10%、約0.01%至約5%、約0.01%至約2%、約0.02%至約2%、約0.03%至約2%、約0.05%至約1.5%、約0.1%至約1% w/v之濃度存在。在一個實施例中，抗氧化劑係甲硫胺酸，其以組合物之約0.015%至約1.5%的量存在。在一個實施例中，抗氧化劑係甲硫胺酸，其以組合物之約0.15% w/v的量存在。

新穎凍乾調配物

在一個態樣中，本發明之副甲狀腺素組合物以含有不超過3%水(以重量計)之凍乾粉末形式提供，該凍乾粉末劑型係由冷凍乾燥藉由混合所選的副甲狀腺素、非揮發性緩衝液及賦形劑製得的無菌激素水溶液得到的。

在本發明之一個實施例中，凍乾組合物係以在復水於約1至1.5 mL(0.7-1.8 mL)復水媒劑中時產生約0.05 mg/mL至約0.15 mg/mL單位劑量之重組人類PTH(1-84)之形式提供，並相應地將約1至1.5 mL之PTH製劑水溶液加入至小瓶，以用於隨後的冷凍乾燥。

在本發明之一個實施例中，進行冷凍乾燥之PTH製劑包含25至250 µg/mL人類PTH(1-84)、約0.3%至約30% w/v增積劑、約0.2%至約20% w/v張力劑、及生理上可接受之緩衝液，其量能夠在無菌水中復水時將製劑緩衝至3.5至6.5的範圍內。在本發明之特定實施例中，緩衝液係以足以將pH緩衝至5.5±0.3、或4.3±0.3的量併入。

增積劑

在一些實施例中，新穎凍乾調配物可進一步包含一或多種增積劑以獲得最佳的餅狀結構及外觀。可能適宜之增積劑包括可相容之碳水化合物、多肽、胺基酸或其組合。適宜之碳水化合物可包括單醣，諸如半乳糖、D-甘露糖、山梨糖及類似者；二醣，諸如乳糖、海藻糖及類似者；環糊精，諸如2-羥基丙基-β-環糊精；多醣，諸如棉子糖、麥芽糊精、葡聚醣及類似者；及醛糖醇，諸如甘露醇、木糖醇及類似者。適宜之多肽包括阿斯巴甜(aspartame)。胺基酸包括丙胺酸及甘胺酸。在一個實施例中，新穎凍乾調配物可包含選自甘露醇、甘胺酸、聚(乙二醇)、硫酸銨、蔗糖、海藻糖及其組合之一或多種增積劑。在一個實施例中，新穎凍乾調配物可包含甘露醇。

增積劑可以達成凍乾粉末之最佳結構及外觀所需的任何濃度存在。在一些實施例中，增積劑可以組合物之約0.01%至約50%(以重量計)、約0.01%至約40%、約0.01%至約30%、約0.01%至約20%、約0.02%至約20%、約0.03%至約20%、約0.05%至約15%、約0.1%至約10%、約0.1%至約20%、約0.1%至約15%、約0.1%至約9%、約0.2%至約10%、0.5%至約10%、或約1%至約10%、或約1%、或約2%、或約3%、或約4%、或約5%、或約6%、或約7%、或約8%、或約9% w/v之濃度存在。在一個實施例中，增積劑係甘露醇，且其以組合物之約0.2%至約20%、或以組合物之約2%至約8%、或以組合物之約3% w/v、或組合物之約4%存在。

冷凍保護劑

在一些實施例中，新穎凍乾調配物可進一步包含一或多種冷凍保護劑，以在冷凍乾燥製程及產品儲存期間為rhPTH蛋白提供穩定性。可能適宜之冷凍保護劑包括可相容之碳水化合物，諸如糖及多元醇。適宜之碳水化合物可包括葡萄糖、蔗糖、海藻糖、乙二醇、丙二醇、2-甲基-2,4-戊二醇及甘油。在一個實施例中，新穎凍乾調配物可包含選自蔗糖、甘胺酸、甘露醇、二醣、聚(乙二醇)及其組合之一或多種冷凍保護劑。在一個實施例中，新穎凍乾調配物可包含蔗糖。

冷凍保護劑可以達成凍乾粉末穩定性所需的任何濃度存在。在一些實施例中，冷凍保護劑可以組合物之約0.01%至約50%(以重量計)、約0.01%至約40%、約0.01%至約30%、約0.01%至約20%、約0.02%至約20%、約0.03%至約20%、約0.05%至約15%、約0.1%至約10%、約0.1%至約20%、約0.1%至約15%、約0.1%至約9%、約0.2%至約10%、0.5%至約10%、或約1%至約10%、或約1%、或約2%、或約3%、或約4%、或約5%、或約6%、或約7%、或約8%、或約9% w/v之濃度存在。在一個實施例中，冷凍保護劑係蔗糖，且其以組合物之約0.2%至約20%、或以組合物之約1%至約8%、或以組合物之約2% w/v、或組合物之約3%存在。

劑型

組合物可以單劑量或多劑量可注射形式提供，例如以筆形式提供。如已經提及，組合物可藉由任何適宜醫藥方法來製備，該方法包括使活性成分及載劑(其可由一或多種另外成分組成)接觸之步驟。

在某些實施例中，醫藥組合物可與用於施用之裝置一起提供，例如與注射器、注射筆或自動注射器(例如Q-cliq筆)一起提供。此等裝置可與醫藥組合物分開提供或預先填充醫藥組合物。

實例

以下實例說明本描述之特定方面。該等實例不應被解釋為具限制性，因為該等實例僅提供實施例及其各種態樣之特定理解及實踐。

以下列方式製備調配物：使用熟習此項技術者通常已知的透析方法將rhPTH(1-84)藥物物質(活性藥物成分)與各基礎調配緩衝液交換。若需要，進一步用酸或鹼儲液溶液進行溶液pH值調整。在基礎緩衝液中分別製備賦形劑之儲備溶液，並與透析的肽溶液混合，以獲得具有所需肽及賦形劑濃度之最終調配物。將調配物無菌過濾並裝入玻璃小瓶或玻璃藥筒中。塞住液體調配物並捲封，然後儲存。將用於凍乾之調配物暴露於預程式化凍乾循環，該循環由冷凍、退火、初級乾燥及二級乾燥步驟組成，然後進行塞住並捲封。

實例1：rhPTH之新穎液體調配物之組成

下表 1 概述根據本發明之rhPTH之新穎液體調配物之示例性實施例。如表 1 中所示，液體調配物#1至#3具有以下組成：

液體調配物＃ 1

0.35至1.40 mg/mL rhPTH；

20 mM乙酸鹽緩衝液；

10 mM甲硫胺酸；

130 mM氯化鈉；

0.3% w/v泊洛沙姆-188，及

0.3% w/v含在水中之間甲酚。

液體調配物＃ 2

0.35至1.40 mg/mL rhPTH；

20 mM乙酸鹽緩衝液；

10 mM甲硫胺酸；

8.5% w/v蔗糖；

0.3% w/v泊洛沙姆-188，及

0.3% w/v含在水中之間甲酚。

液體調配物＃ 3

0.35至1.40 mg/mL rhPTH；

20 mM乙酸鹽緩衝液；

10 mM甲硫胺酸；

2.3% v/v甘油；

0.3% w/v泊洛沙姆-188，及

0.3% w/v含在水中之間甲酚。

液體調配物#1至#3之pH為5.5。

表 1 ：新穎液體調配物或 rhPTH 之組成

實例2：rhPTH之新穎凍乾粉末調配物之組成

下表 2 概述根據本發明之rhPTH之新穎凍乾粉末調配物之示例性實施例。如表 2 中所示，凍乾調配物#1至#3具有以下組成：

凍乾調配物＃ 1

0.35至1.40 mg/mL rhPTH；

20 mM L-組胺酸緩衝液；

4% w/v甘露醇，及

2%含在水中之蔗糖。

凍乾調配物＃ 2

0.35至1.40 mg/mL rhPTH；

20 mM L-組胺酸緩衝液；

10 mM甲硫胺酸；

4% w/v甘露醇；

2% w/v蔗糖，及

0.3% w/v含在水中之泊洛沙姆-188。

凍乾調配物＃ 3

0.35至1.40 mg/mL rhPTH；

20 mM琥珀酸鹽緩衝液；

10 mM甲硫胺酸；

3% w/v甘露醇，及

3% w/v含在水中之蔗糖。

凍乾調配物#1及#2之pH為5.5。凍乾調配物#3之pH為4.3

表 2 ：新穎凍乾調配物或 rhPTH 之組成

實例3：調配於不同緩衝液中之rhPTH之攪動研究

實際藥品儲存容器/封閉物中或小規模代表性初級容器中之攪動(振盪)通常應用於蛋白質藥品之開發，用作在真實製程中亦發生的物理應力條件下的穩定性之測試。此等「應力測試」之總體目的係欲加速蛋白質降解/聚集，否則蛋白質降解/聚集可以慢得多的速率發生，從而提高實驗產量以加速確定穩定性之關鍵製程參數。結果可用於確定調配物開發之關鍵參數。

下表 3 及圖 2 顯示攪動研究之外觀數據，其中rhPTH係用不同緩衝液調配。在2R玻璃小瓶中將rhPTH與氯化鈉(140 mM)一起調配於不同緩衝液(10 mM)中。使用迴轉式振盪器以220 rpm進行攪動研究，其中小瓶處於水平位置，在環境條件下保持至少48小時。基於定期攪動時間間隔，根據概述於(例如)歐洲藥典5.0、2.2.1之標準程式，將攪動的樣品之視覺外觀與參考懸浮液(RSI-IV)及標準乳白色(SOP)進行比較。液體中之清晰度及乳白色程度。圖 1 顯示參考懸浮液RSI-IV及SOP之乳白色。提供水用於比較。圖 2 顯示調配於不同緩衝液中之rhPTH之懸浮液的外觀。

表 3 ：攪動研究之 rhPTH( 調配於不同緩衝 液中 ) 在 T0 時及在攪動 4h 、 8h 、 24h 及 48h 後之外觀數據

*用10 mM緩衝物質及140 mM氯化鈉調配rhPTH (1 mg/mL)；RS：參考懸浮液；SOP：標準乳白色

如表 3 及圖 2 中所示，乙酸鹽緩衝液顯示抵抗rhPTH中攪動誘導之顆粒形成之最佳穩定性，接著係磷酸鹽緩衝液，然後係L-組胺酸緩衝液。所有三種緩衝液均顯示比檸檬酸鹽緩衝液更佳的穩定性，檸檬酸鹽緩衝液目前係用於NATPARA^® 調配物中。

實例4：新穎液體調配物中rhPTH之攪動研究

下表 4 顯示根據本發明之rhPTH之各種液體調配物之攪動研究之外觀數據。液體調配物#1至#3係在雙腔藥筒中進行調配，並在環境條件下進行攪動研究(220 rpm，迴轉式振盪)。基於定期攪動時間間隔，根據標準程序，將攪動的樣品之視覺外觀與參考懸浮液(RSI-IV)及標準乳白色(SOP)進行比較。亦提供商業NATPARA^® 調配物之數據以用於比較。在不同時間點之乳白色概述於表4中。

表 4 ：攪動研究之 rhPTH( 調配於不同緩衝 液中 ) 在 T0 時及在攪動 5h 、 24h 、 48h 及 72h 後之外觀數據

W：水；RS：參考懸浮液；SOP：標準乳白色；#用於此等研究中之甲硫胺酸濃度為25 mM，而用於新穎液體調配物中之甲硫胺酸濃度為10 mM(當在2R小瓶中攪動後，觀測到甲硫胺酸濃度對rhPTH微粒形成無任何影響)。

如表 4 中所示，所有三種新穎液體調配物#1至#3保持透明且無可見顆粒至少72小時。相反地，目前的商業調配物顯示在早5小時的攪動期中存在顯著顆粒及更高程度之乳白色。

實例5：新穎凍乾調配物中rhPTH之攪動研究

下表 5 顯示根據本發明之rhPTH之各種復水凍乾調配物之攪動研究之外觀數據。凍乾調配物#1至#3係在雙腔藥筒中進行調配，並在環境條件下進行攪動研究(220 rpm，迴轉式振盪)。基於定期攪動時間間隔，然後，根據標準程序，將攪動的樣品之視覺外觀與參考懸浮液(RSI-IV)及標準乳白色(SOP)進行比較。亦提供商業NATPARA^® 調配物之數據以用於比較。在不同時間點之乳白色概述於表5中。

表 5 ：攪動研究之 rhPTH( 調配於不同緩衝 液中 ) 在 T0 時及在攪動 5h 、 24h 、 32h 、 48h 及 90h 後之外觀數據

*在攪動之前，用0.3% w/v間甲酚復水調配物；RS：參考懸浮液；SOP：標準乳白色；#在振盪研究期間未將甲硫胺酸(10 mM)併入該調配物中(觀測到在含有新穎液體調配物之2R小瓶中攪動後甲硫胺酸濃度對rhPTH微粒形成無任何影響)。

如以上實例所示，可觀測到新穎凍乾調配物具有顯著經改良rhPTH之物理穩定性。如以上所示，rhPTH之新穎調配物保持透明、無色及無可見顆粒至少24小時、及/或至少48小時、及/或至少72小時、及/或至少90小時。

實例6：液體及凍乾調配物之使用中穩定性研究

下表 6 顯示根據本發明之一個實施例之液體調配物之使用中研究之外觀數據(如以液體調配物#2為例)及根據本發明之一個實施例之rhPTH之復水凍乾調配物(如以凍乾調配物#2為例)。表 6 ：在使用中時間的第 1 天、第 7 天、第 14 天、第 21 天之液體調配物 #2 及凍乾調配物 #2 之使用中外觀數據

*在開始使用之前用含有0.3% w/v間甲酚之注射用水將樣品復水

如上表 6 所示，rhPTH之新穎液體及凍乾調配物(如以液體調配物#2及凍乾調配物#2為例)保持透明、無色及無可見顆粒長達至少1天、或至少7天、或至少14天、或至少21天之使用中時間。

實例7：溶液pH篩選rhPTH之最佳物理化學穩定性

將重組人類副甲狀腺素調配在含有140 mM氯化鈉之10 mM檸檬酸緩衝液(溶液pH範圍為3.5至7.5，pH間隔為0.5個單位)中。將樣品等分於2 mL I型硼矽酸鹽玻璃小瓶中並在5±3℃(5℃)、25±2℃(25℃)及40±2℃(40℃)之溫度條件下基於穩定性進行放置。在預定時間間隔，取出樣品，觀測外觀，並使用適當的層析檢定(尺寸排除層析(SEC)及反相層析(RP-HPLC))分析rhPTH穩定性，且進行一些修改。

將所供應的藥物物質材料解凍並在2 kDa截止分子量(MWCO)透析盒中用各自的pH緩衝溶液透析。在5±3℃下進行透析並在~24小時的時間內包括至少3個循環之緩衝液交換。透析後，檢定樣品之pH及若需要用0.2 N氫氧化鈉調整。進行A280測量並使用0.584 (mL.mg)^-1 cm^-1 之消光係數計算rhPTH濃度。在層流罩中無菌完成最終溶液製備。對於各溶液pH，藉由使用各自的緩衝液作為稀釋介質，製備1.0 mg/mL濃度之rhPTH。將所製得的樣品透過0.22 µm PVDF過濾膜過濾，以1.5 mL體積填充於2 mL I型硼矽酸鹽玻璃小瓶中，接著塞住/捲封。

在燈箱中觀測每個小瓶之溶液外觀。分離基線樣品，等分於聚丙烯管中，並儲存在-80℃下。將剩餘的小瓶在5、25及40℃下培養。在預定的時間間隔，從各培養條件取出樣品小瓶，觀測外觀，等分於聚丙烯管中，並儲存在-80℃下直至分析。使用驗證Natpara^® 之檢定(包括SEC及RP-HPLC，其中注射體積及注射順序有一些修改)測試樣品之物理及化學變化。

為證實物理穩定性，表 7 及8 分別顯示儲存在40及25℃下6個月之rhPTH穩定性樣品之外觀結果。在測量時記錄對比參考懸浮液之乳白色。在40℃下儲存2週內在pH 7.0及7.5樣品中可見白色絮凝劑樣顆粒。此種顆粒形成似乎隨著時間從溶液pH之鹼性側至酸性側進行。到3個月時，儲存在40°C下的大多數樣品均具有顆粒。儲存在25℃下的樣品顯示與在40℃下所觀測到的相同的顆粒形成傾向，但具有較慢的動力學。亦注意到顆粒之大小根據溶液pH而不同。經調配在6.5-7.5之pH範圍內之樣品具有絮凝劑，而彼等經調配在較低pH下之樣品具有細顆粒。儲存在5℃下之樣品具有透明、無色、無可見顆粒之初始外觀，其在6個月過程中無變化。

表 7 ：儲存在 40 ℃ 溫度條件下之 rhPTH pH 篩選樣品之外觀結果

CCFVP：透明、無色、無可見顆粒；RS：參考懸浮液

表 8 ：儲存在 25 ℃ 溫度條件下之 rhPTH pH 篩選樣品之外觀結果

CCFVP：透明、無色、無可見顆粒；RS：參考懸浮液

為證實化學穩定性，表 9 提供分別儲存在40及25℃下之穩定性樣品之蛋白質濃度數據。將樣品徹底離心(17,000 g，5分鐘)並將上清液用於A280測量。進行適當的光散射校正(A320減法)。在40℃下，蛋白質濃度之降低與樣品在儲存期間形成顆粒之傾向大致相關。對於儲存在25℃(表9)及5℃下之樣品，未觀測到蛋白質濃度隨時間的變化。

表 9 ：在不同溫度條件下儲存之 rhPTH pH 篩選樣品之蛋白質濃度結果 (mg/mL)

為進一步證實化學穩定性，圖 3 至 8 顯示儲存在40、25及5℃下長達6個月之pH篩選樣品之rhPTH及相關雜質之RP-HPLC數據。對於40°C儲存條件，僅呈現長達1個月的數據，因為之後樣品過於降解而不能進行峰值整合。

主峰：對於所有儲存溫度觀測到主峰之鐘形傾向，在pH~5.0-6.0附近具有最大峰值恢復，如圖 3A 至 3C 中所示。

氧化Met8：亦觀測到Met8之氧化遵循鐘形傾向(與主峰一樣)，其中於儲存在40及25℃下時在~4.0-5.5之pH範圍內觀測到最大Met8氧化。在5℃下，在長達6個月的儲存中未觀測到傾向，如圖 4A 至 4C 中所示。

氧化Met18：發現Met18氧化速率朝著鹼性溶液pH範圍係最大的並隨著溶液pH逐漸減小變成酸性。此種傾向主要在40及25℃儲存條件下可見，如圖 5A 至 5C 中所示。

Iso Asp33 ：觀測到自天冬醯胺酸33形成異天冬胺酸朝著調配的pH之酸性側係最小的並觀測到隨著溶液pH增加而顯著增加超過~5.5。此種傾向在所有儲存溫度下係顯著的，如圖 6A 至 6C 中所示。

rhPTH((1-30)+(1-33)) ：此等rhPTH雜質在以經調配低於pH 5.0及高於pH 6.0之樣品儲存時顯著增加。然而，高於pH 6.0之雜質之增加之程度明顯低於在較低pH值下所觀測到的程度。觀測到雜質之此種增加在5.0-6.0之pH範圍內係最小的，如圖 7A 至 7C 中所示。

rhPTH(1-45) ：觀測到在經調配低於pH 5.0之樣品中該片段相關雜質顯著增加但在介於pH 5.0與7.5之間的樣品中無顯著變化。在所有儲存溫度下均觀測到此種傾向，如圖 8A 至 8C 中所示。

本實例證實當經調配在3.5至7.5之pH範圍中並暴露於熱應力時，溶液pH對rhPTH之物理化學穩定性之影響。物理穩定性屬性(如使用外觀(可見顆粒形成)及SEC(聚集物及片段形成)監測)及化學穩定性屬性(如使用RP-HPLC(氧化、脫醯胺化及片段化)監測)表明5.0至6.0之溶液pH範圍對於rhPTH之物理及化學穩定性係最佳的。

實例8：賦形劑篩選rhPTH之最佳物理化學穩定性

將重組人類副甲狀腺素(rhPTH)在含有20 mM乙酸鈉緩衝液及50 mM氯化鈉(NaCl)之pH 5.5的溶液中進行調配。將該基礎調配物外加於賦形劑儲液以達成給定賦形劑之所需標靶濃度。在5±3℃(5℃)、25±2℃(25℃)及40±2℃(40℃)之溫度條件下基於穩定性放置樣品。在預定時間間隔，取出樣品，觀測外觀，並使用反相層析(RP-HPLC)分析rhPTH穩定性。基線(時間0)樣品亦分別暴露於多個冷凍-解凍循環及迴轉式攪動並觀測溶液外觀。

靜態儲存熱應力、冷凍-解凍應力及攪動應力之外觀數據顯示，與其他賦形劑相比，存在精胺酸及更高濃度(≥150 mM)之NaCl導致顯著程度之可見顆粒形成。RP-HPLC穩定性數據顯示在所有培養溫度下含有甘胺酸、離胺酸或精胺酸之樣品中氧化Met8及Met18之顯著更高濃度。另一方面，具有甲硫胺酸之樣品顯示顯著降低之rhPTH氧化速率。攪動研究之結果顯示，表面活性劑泊洛沙姆-188之存在阻止振盪時可見顆粒之形成。

將所供應的藥物物質材料解凍並在2 kDa MWCO透析盒中用基礎緩衝溶液透析。在5±3℃下進行透析並在~30小時的時間內包括至少3個循環之緩衝液交換。透析後，測試樣品之pH及若需要用0.2 N氫氧化鈉調整。進行A280測量並基於0.584 (mL.mg)^-1 cm^-1 之消光係數計算rhPTH濃度。在層流櫃中以無菌方式完成最終溶液製備。對於每種賦形劑，藉由使用基礎緩衝液作為稀釋介質並外加賦形劑儲液以達成所需賦形劑濃度，製備1.0 mg/mL濃度之rhPTH。另外，間甲酚係在每種調配物中以0.3% (v/v)之濃度添加。

表 10 提供用於賦形劑篩選研究之不同調配物之描述。將所製得的樣品透過0.22 µm PVDF過濾膜過濾，以1.5 mL體積填充於2R I型玻璃小瓶中，接著塞住/捲封。在燈箱中觀測每個小瓶之溶液外觀。將基線樣品等分於聚丙烯管中並儲存在-80℃下。將剩餘的小瓶在5、25及40℃下培養。在預定的時間間隔，從各培養條件取出樣品小瓶，觀測外觀，等分於聚丙烯管中，並儲存在-80℃下直至進一步分析。使用驗證Natpara之檢定(包括SEC及RP-HPLC，其中注射體積及注射順序有一些修改)測試樣品之物理及化學變化。

將基線樣品暴露於重複的冷凍/解凍循環(在-80℃下冷凍5-12小時並在室溫下解凍)並在燈箱中觀測溶液外觀。在環境溫度條件下使用迴轉式振盪器以220 rpm水平攪動小瓶中的一組不同的基線樣品並在燈箱中基於定期時間間隔觀測溶液外觀。攪動研究之初步結果用於選擇另外調配物，其在2R小瓶及雙腔藥筒中進一步暴露於迴轉式攪動。

表 10 ：用於 rhPTH 賦形劑篩選研究中之賦形劑 ( 及濃度 )

下表 11 至13 顯示分別儲存在40、25及5℃下長達6個月之rhPTH穩定性樣品之外觀結果。在測量時記錄對比參考懸浮液之乳白色。在40℃下儲存時，含有精胺酸(150 mM)之樣品顯示顯著存在之蛋白質顆粒，其在2週時出現並隨時間保持增加。當儲存在40℃下時，具有其他賦形劑之樣品具有與基線相當的外觀，持續長達3個月。在40℃下儲存6個月結束時，大多數樣品具有可見顆粒，其具有不同的顏色及乳白色。類似地，對於在25℃下儲存之樣品，含有精胺酸(150 mM)之溶液係第一個顯示顆粒形成之溶液，其直到儲存6個月才出現，而所有其他樣品保持其基線外觀。在5°C下儲存之樣品在儲存3個月結束時具有類似基線的外觀，然而，到6個月結束時，許多樣品(特別係NaCl、甘油、甘胺酸、離胺酸及精胺酸)具有可見顆粒，與25°C下之結果不同。

表 11 ：在 40 ℃ 下儲存之 rhPTH 緩衝液篩選樣品隨時間之外觀結果

RS：參考懸浮液；W：水樣外觀；CCFVP：透明、無色、無可見顆粒

表 12 ：在 25 ℃ 下儲存之 rhPTH 緩衝液篩選樣品隨時間之外觀結果

表 13 ：在 5 ℃ 下儲存之 rhPTH 緩衝液篩選樣品隨時間之外觀結果

為證實化學穩定性，圖 9 至12 顯示調配於含有50 mM NaCl及不同賦形劑之pH 5.5乙酸鹽緩衝液中並儲存在40、25及5°C下之樣品之rhPTH及相關雜質之RP-HPLC數據。呈現樣品之結果，其中可進行合理的峰值整合而無報告的相對保留時間的變化。

主峰：在兩種40及25℃儲存下，與其它賦形劑相比，含有甘胺酸、離胺酸及精胺酸之樣品顯示主峰顯著更快地降低。在5℃儲存下觀測到類似的傾向，參見圖 9A 至 9C 。

氧化 Met8 及 Met18 ：與其他賦形劑相比，甘胺酸、離胺酸及精胺酸樣品在所有儲存溫度下顯示顯著更高氧化程度之氧化Met8及Met18。含有甲硫胺酸之樣品在所有儲存溫度下顯示Met8及Met18氧化隨時間之最小變化，參見圖 10A 至 10C (Met8)及11A 至 11C (Met18)。

Iso Asp33 ：在25及40^o C儲存時，儘管顯示含有150及300 mM NaCl之樣品之IsoAsp33形成速率略低，但賦形劑之間無顯著差異係值得注意的(觀測到甘胺酸、離胺酸及精胺酸樣品之IsoAsp33濃度顯著降低並不一致，可歸因於在此等樣品之層析圖中整合缺失的峰/峰及略微偏移之保留時間之問題)，參見圖 12A 至 12C 。

冷凍 - 解凍 (F/T) 研究

表 14 顯示在2R小瓶中進行重複冷凍-解凍後不同調配物之溶液外觀。若觀測到可見顆粒，則與乳白色一起報告。含有150 mM NaCl或更高NaCl之樣品受到重複F/T的顯著影響並發現含有白色纖維狀蛋白質樣顆粒。含有0.02% PS20之樣品由於從一開始就是沙粒狀(非蛋白質)顆粒而顯示顆粒狀外觀。含有8%甘油之溶液在每個F/T循環後顯示惡化的乳白色，無任何可見微粒形成。

表 14 ：用 pH 5.5 之不同賦形劑與 20 mM 乙酸鹽緩衝液、 50 mM NaCl 及 0.3% 間甲酚調配之 rhPTH 樣品在重複冷凍 - 解凍循環 (n=3) 後之外觀研究結果

*將賦形劑外加至含有1 mg/mL rhPTH、20 mM乙酸鹽緩衝液、50 mM氯化鈉及0.3%間甲酚之基礎調配物中。CCFVP：透明、無色及無可見顆粒；RS：參考懸浮液；SOP：標準乳白色；W：水樣外觀。離胺酸及精胺酸樣品由於材料限制而未作研究。

攪動研究

表 15 顯示在環境條件下以220 rpm在水平位置基於一式三份2R小瓶進行的攪動研究之外觀結果。除PS20(其存在沙粒狀顆粒)外，所有樣品均在基線下係透明、無色且無可見顆粒。含有NaCl之樣品顯示最早的顆粒形成征兆，其速率隨著NaCl含量之增加而增加。到24小時，含有150 mM NaCl及PS20之樣品具有混濁外觀。除含有泊洛沙姆-188(P-188)之樣品之外的所有樣品在48小時結束時均發展出混濁外觀。含有P-188之樣品保持其基線外觀直至研究結束(72小時)。

表 15 ：用 pH 5.5 之不同賦予劑與 20 mM 乙酸鹽緩衝液、 50 mM NaCl 及 0.3% 間甲酚調配之 rhPTH 樣品在環境條件下在 2R 小瓶中以 220 rpm 進行迴轉式攪動後之外觀研究結果 (n=3)

*將賦形劑外加至含有1 mg/mL rhPTH、20 mM乙酸鹽緩衝液、50 mM氯化鈉及0.3%間甲酚之基礎調配物中。CCFVP：透明、無色並無可見顆粒；RS：參考懸浮液；SOP：標準乳白色；W：水樣外觀。離胺酸及精胺酸樣品由於材料限制而未作研究。

基於以上儲存穩定性、冷凍-解凍及攪動研究之初步結果，調配物變窄，其中NaCl、甘露醇、蔗糖及甘油被鑑定為其穩定化/等滲性潛力之賦形劑，以及甲硫胺酸及間甲酚分別被鑑定為可減輕氧化及支持多劑量調配物。

表 16 呈現在2R小瓶中在環境條件下以220 rpm進行的水平攪動研究之結果，其中從基礎調配物除去NaCl。間甲酚之存在導致乳白色形成明顯早於無間甲酚調配物。儘管從基礎調配物除去50 mM NaCl，但除了含有泊洛沙姆-188之溶液外，所有溶液在48小時振盪結束時仍然產生混濁外觀。亦將此等調配物暴露於目前用於商業Natpara^® 之容器/封閉物中的振盪(1 mL矽化藥筒，其具有矽化中間及末端橡膠塞及使用1.1 mL調配物填料之鋁密封件)。觀測到類似於在2R小瓶中振盪獲得的外觀結果之外觀結果(表 15 )，其中泊洛沙姆-188顯著地防止/延遲顆粒形成。

表 16 ：經變窄的 pH 5.5 賦予劑與 20 mM 乙酸鹽緩衝液 ( 含有及不含甲硫胺酸及間甲酚 ) 調配之 rhPTH 樣品在環境條件下在 2R 小瓶中以 220 rpm 進行迴轉式攪動後之外觀研究結果 (n=3)

當在2至8℃下進行振盪時，在表 16 中研究的所有調配物在72小時時間(2R小瓶)或48小時時間(1 mL藥筒)結束時保持其基線(透明)外觀。

如實例證實，氯化鈉、蔗糖、甘露醇及甘油係使rhPTH穩定化之適宜賦形劑。甲硫胺酸顯示顯著抑制肽氧化之高潛力。已發現泊洛沙姆-188在攪動後對於防止可見微粒形成係至關重要的。

實例9：針對液體劑型之rhPTH之調配物最佳化研究

將重組人類副甲狀腺素用20 mM乙酸鹽緩衝液及0.3% w/v間甲酚調配為pH5.5。該基礎調配物用不同濃度之甲硫胺酸(抗氧化劑)及泊洛沙姆-188(表面活性劑)進行製備，賦形劑在早期調配物篩選(參見實例7)期間被鑑定為對於rhPTH穩定性係至關重要的。為使調配物等滲並進一步改良藥品之穩定性，評估氯化鈉、蔗糖、甘油及甘露醇。為篩選賦形劑並最佳化其濃度，將樣品暴露於熱及攪動應力。對於熱應力，在2R I型玻璃小瓶中於5±3℃(5℃)、25±2℃(25℃)及40±2℃(40℃)下基於穩定性放置樣品，並在預定時間間隔，取出樣品，觀測外觀，並使用反相層析(RP-HPLC)分析rhPTH穩定性。對於攪動應力，將2R I型玻璃小瓶及1 mL矽化雙腔藥筒中之基線樣品分別暴露於迴轉式攪動並隨時間觀測溶液外觀。

在熱應力下，在含有50 mM、25 mM及10 mM甲硫胺酸之調配物之間觀測到rhPTH之氧化曲線之間並無差異。在攪動後，未觀測到rhPTH溶液中可見顆粒形成，取決於泊洛沙姆-188之濃度。呈NaCl、蔗糖及甘油形式之穩定劑/張力劑係選自在初步賦形劑篩選(參見實例7)期間進行的熱及攪動壓力下觀測到的分子之化學及物理變化之組合。選擇穩定劑/張力劑之濃度以獲得等滲溶液。總體而言，鑑定針對液體劑型之三種調配物基質：

a) pH 5.5，20 mM乙酸鹽緩衝液、10 mM甲硫胺酸、0.3% w/v泊洛沙姆-188、130 mM氯化鈉、0.3% w/v間甲酚

b) pH 5.5，20 mM乙酸鹽緩衝液、10 mM甲硫胺酸、0.3% w/v泊洛沙姆-188、8.5% w/v蔗糖、0.3% w/v間甲酚

c) pH 5.5，20 mM乙酸鹽緩衝液、10 mM甲硫胺酸、0.3% w/v泊洛沙姆-188、2.3% v/v甘油、0.3% w/v間甲酚

將所供應的藥物物質材料解凍並在2 kDa MWCO透析盒中用緩衝溶液透析。在5±3℃下進行透析並在~24-48小時的時間內包括至少3個循環之緩衝液交換。透析後，測試樣品之pH並若需要用0.2 N氫氧化鈉調整pH。進行A280測量並基於0.584 (mL.mg)^-1 cm^-1 之消光係數計算rhPTH濃度。在層流罩中無菌完成最終溶液製備。藉由使用基礎緩衝液作為稀釋培養基並外加賦形劑儲液以達成所需賦形劑濃度來製備濃度為1.0 mg/mL之rhPTH溶液。另外，在每種調配物中添加0.3% w/v濃度之間甲酚。

甲硫胺酸及泊洛沙姆 -188 濃度最佳化 ：表 17 提供用於甲硫胺酸及P-188濃度最佳化研究之不同調配物之描述。

表 17 ：用於甲硫胺酸及泊洛沙姆 -188(P-188) 濃度最佳化中之調配物

穩定劑 / 張力劑之最佳化 ：表 18 提供用於評估穩定劑/張力劑對rhPTH穩定性之影響之不同調配物之描述。

表 18 ：用於最佳化穩定劑 / 張力劑中之調配物

使樣品透過0.22 µm PVDF過濾膜過濾，以1.5 mL體積填充在2R I型玻璃小瓶中(對於攪動)或以1 mL體積填充在2R I型玻璃小瓶中(對於儲存穩定性)，然後塞住/捲封。在燈箱中觀測每個小瓶之溶液外觀。將表 17 及表 18 中之所有基線樣品在環境溫度條件下使用220 rpm之迴轉式振盪器暴露於水平攪動並在燈箱中基於定期時間間隔觀測溶液外觀。

表 17 之樣品(含有0.3%泊洛沙姆-188與0 mM、10 mM、25 mM及50 mM甲硫胺酸)及表 18 之樣品亦基於儲存穩定性進行放置。分離基線樣品，等分於聚丙烯管中，並儲存在-80℃下。將剩餘的小瓶在5、25及40℃下培養。在預定的時間間隔，從各培養條件取出樣品小瓶，觀測外觀，等分於聚丙烯管中，並儲存在-80℃下直至分析。使用驗證Natpara之檢定(包括SEC及RP-HPLC，其中注射體積及注射順序有一些修改)測試樣品之物理及化學變化。

外觀：表 19 顯示當在40、25及5℃下儲存長達6個月時具有不同程度甲硫胺濃度之rhPTH穩定性樣品之外觀結果。在研究持續時間內，所有樣品均保持透明、無色並無可見顆粒。

表 19 ：具有不同甲硫胺酸濃度之 rhPTH 穩定性樣品在不同溫度條件下之外觀結果

在儲存穩定期期間以不同甲硫胺酸濃度調配之rhPTH之RP-HPLC數據顯示當包含甲硫胺酸作為調配物之一部分時肽氧化顯著減少。然而，在檢定變異性內，在所研究的不同甲硫胺酸濃度中，未觀測到Met8及Met18峰之氧化或主峰百分比之顯著差異。

泊洛沙姆 -188 濃度之最佳化

使用攪動研究以最佳化泊洛沙姆-188濃度。表 20 至 22 顯示2R小瓶(其在環境條件下進行220 rpm之水平迴轉式攪動)中具有不同濃度之泊洛沙姆-188(以不同甲硫胺酸含量調配-表 17 )之樣品之視覺外觀結果。

表 20 ：以不同濃度之泊洛沙姆 -188(P-188) 及 pH 5.5 之 10 mM 甲硫胺酸與 20 mM 乙酸鹽緩衝液及 0.3% 間甲酚調配之 rhPTH 樣品在環境條件下以 220 rpm 進行迴轉式攪動後之視覺外觀結果 (n=3)

表 21 ：以不同濃度之泊洛沙姆 -188(P-188) 及 pH 5.5 之 25 mM 甲硫胺酸與 20 mM 乙酸鹽緩衝液及 0.3% 間甲酚調配之 rhPTH 樣品在環境條件下以 220 rpm 進行迴轉式攪動後之視覺外觀結果 (n=3)

Table 22: 以不同濃度之泊洛沙姆 -188(P-188) 及 pH 5.5 之 50 mM 甲硫胺酸與 20 mM 乙酸鹽緩衝液及 0.3% 間甲酚調配之 rhPTH 樣品在環境條件下以 220 rpm 進行迴轉式攪動後之視覺外觀結果 (n=3)

穩定劑 / 張力劑之選擇

在rhPTH賦形劑篩選研究(實例8)期間，選擇氯化鈉(NaCl)、蔗糖、甘油及甘露醇作為適宜賦形劑。基於250至350 mOsm/kg之滲透壓標靶來選擇用於未來調配物中之濃度。

在所研究的持續時間內所有樣品均具有透明至最小程度之乳白色，而無任何可見顆粒存在(表 23 )。

表 23 ：以 pH 5.5 之不同穩定劑 / 張力劑、 20 mM 乙酸鹽緩衝液與 25 mM 甲硫胺酸、 0.3% 泊洛沙姆 -188 及 0.3% 間甲酚調配之 rhPTH 穩定性樣品在不同溫度條件下儲存時之視覺外觀結果

CCFVP：透明、無色、無可見顆粒；RS：參考懸浮液；W：水樣外觀；SOP：標準乳白色

在20 mM乙酸鹽緩衝液中以25 mM甲硫胺酸、0.3% P-188及0.3%間甲酚與不同穩定劑/張力劑調配之rhPTH在40、25及5℃下儲存時之RP-HPLC數據指示在任何培養溫度下使用的不同賦形劑之間之氧化Met8及Met18濃度無顯著變化。在5℃儲存下觀測到相同傾向。對於所有所研究的賦形劑，除了NaCl(其含有顯著較少量之IsoAsp33)外，IsoAsp33之形成速率係相似的。當與其他賦形劑相比時，利用NaCl，較低濃度之IsoAsp33以及在NaCl調配物中顯著減少的未鑑定的拖尾峰之形成亦導致最高主峰峰值恢復。

攪動研究：將具有不同穩定劑之調配物(表 18 )暴露於2R小瓶及矽化藥筒中以220 rpm在環境條件下之迴轉式攪動。表 24 列出在2R小瓶中具有多個重複之一個示例性研究日之視覺外觀結果。在一些情況下，個別小瓶之三個重複在攪動期間未顯示相同外觀輪廓；報告最差的視覺外觀觀測結果。

當在矽化藥筒中以220 rpm在環境條件下水平攪動後，所有此等調配物在72小時結束時保持透明並無可見顆粒。

表 24 ：經 pH 5.5 不同穩定劑 / 張力劑及 20 毫升乙酸鹽緩衝液、 25 毫克甲硫胺、 0.3% 泊洛沙姆 -188 及 0.3% 間甲酚調配之 rhpth 樣品在 2R 小瓶中在環境條件下以 220 rpm 進行迴轉式攪動後之視覺外觀結果

CCFVP：透明、無色、無可見顆粒；W：水樣外觀；RS：參考懸浮液；SOP：標準乳白色

在所測試的調配物中，對照樣品及含有蔗糖及甘油之樣品在攪動後顯示最佳視覺外觀輪廓。

總言之，在熱應力下，在含有50 mM、25 mM及10 mM甲硫胺酸之調配物之間觀測到rhPTH之氧化曲線之間並無差異。在攪動後，未觀測到rhPTH溶液中可見顆粒形成，取決於泊洛沙姆-188之濃度。呈NaCl、蔗糖及甘油形式之穩定劑/張力劑係選自在初步賦形劑篩選(參見實例7)期間進行的熱及攪動壓力下觀測到的分子之化學及物理變化之組合。選擇穩定劑/張力劑之濃度以獲得等滲溶液。基於熱及攪動應力之總體數據，鑑定針對液體劑型之三種調配物基質：

此等調配物中rhPTH之靶濃度範圍為0.35 mg/mL至1.4 mg/mL。

實例10：用於皮下遞送之多劑量凍乾rhPTH藥品之開發

進行再調配研究以明瞭pH、緩衝液、表面活性劑、穩定劑/增積劑對凍乾rhPTH(1-84)之化學及物理穩定性之影響。rhPTH(1-84)之化學穩定性受溶液pH的影響很大，在5.0至6.5之pH範圍內觀測到最佳穩定性。較低的pH(4.0-4.5)顯著增加rhPTH(1-84)之片段化，同時改良抵抗振盪引起之微粒形成之穩定性。在較高的pH(高於6.5)下，rhPTH(1-84)之復水凍乾調配物越來越容易形成微粒。

在5.5之最佳溶液pH下，當與含有檸檬酸鹽緩衝液之調配物相比時，含有L-組胺酸及磷酸鹽緩衝液之調配物在2R小瓶及矽化藥筒中振盪時顯示抵抗可見微粒形成之顯著改善。將泊洛沙姆-188添加至pH 5.5之L-組胺酸調配物進一步改良抵抗振盪引起之微粒形成之rhPTH(1-84)穩定性。

pH 4.0至4.3之琥珀酸鹽緩衝液亦被鑑定為另一候選緩衝劑，因為其看起來提供抵抗振盪引起之微粒形成之完全保護，儘管當與pH 5.5之其他緩衝液相比時提供較差的化學穩定性。

總體而言，此等篩選研究之結果有助於鑑定三種主要凍乾rhPTH(1-84)候選調配物以用於利用目前的商業雙腔藥筒之進一步的評估。此等調配物之選擇主要係基於實時、加速及應力儲存穩定性研究之結果以及在用0.3%(v/v)間甲酚溶液(含在水中)復水後之振盪引起之應力之研究之結果。三種凍乾候選調配物(其等均需要在使用之前用含有0.3% (w/v)間甲酚之WFI復水)由下列組成：

1.含在pH 5.5之20 mM L-組胺酸及4%(w/v)甘露醇及2%(w/v)蔗糖中之1 mg/mL rhPTH (1-84)

2.含在pH 5.5之20 mM L-組胺酸及4%(w/v)甘露醇、2%(w/v)蔗糖及0.3%(w/v)泊洛沙姆-188中之1 mg/mL rhPTH (1-84)

3.含在pH 4.3之20 mM琥珀酸鹽及3%(w/v)甘露醇及3%(w/v)蔗糖中之1 mg/mL rhPTH (1-84)

為監測rhPTH(1-84)之化學穩定性，使用反相高效液相層析(RP-HPLC)來定量與氧化、脫醯胺化、片段化及其他降解途徑相關之雜質。除主要rhPTH(1-84)分子外，使用尺寸排除層析(SEC)定量任何高分子及低分子物質。

為評估對rhPTH(1-84)之物理壓力，採用迴轉式振盪之攪動並使用視覺外觀評估結果。所有調配物用0.3% (v/v)間甲酚溶液(含在水中)復水並使用設定在220 rpm下之迴轉式振盪器在室溫下在水平位置進行振盪。

使用Karl Fisher測量的含水量概述於表 25 中。除含有100 mM氯化鈉及5%蔗糖之調配物外，所有調配物均具有均低於2%之含水量。小於2%之含水量應該不會引起rhPTH(1-84)之穩定性問題，因為其明顯低於商業藥品含水量規格。

表 25 ：卡爾費歇爾 (Karl Fisher) 含水量之概述

基於集體結果，選擇具有約-39℃之Tg之由30 mM氯化鈉及5%(w/v)蔗糖組成之調配物用於初始凍乾工作，因為其產生具有低水分含量之適宜蛋糕外觀。

凍乾的rhPTH(1-84)之再調配研究證實最佳pH範圍為5.0-6.0，此使得hPTH(1-84)之化學降解最小。儘管rhPTH(1-84)在較低pH條件下在25°C及40°C之高溫下降解得相當快，但研究亦鑑定pH為4.0-4.3之rhPTH(1-84)調配物在5°C之儲存條件下保持化學穩定性長達6個月並顯著降低振盪引起之微粒形成仍可能。作為廣泛凍乾調配物篩選研究的結果，加上rhPTH(1-84)之同時進行的液體調配物之開發，選擇rhPTH(1-84)之三種主要凍乾調配物用於用目前的商業矽化雙腔藥筒評價。所選的調配物分別基於在25℃及40℃之加速及應力條件下3個月之穩定性、及其在用含在水中之0.3%(v/v)間甲酚復水後對rhPTH(1-84)抵抗振盪引起之微粒形成之穩定性之影響。此三種所選調配物係下列：

另外最佳化研究指示添加10 mM甲硫胺酸顯著提高rhPTH(1-84)抵抗調配物2中Met8及Met18殘餘物氧化及抵抗上述調配物3中之聚集之穩定性。 * * *

由於可在不脫離本發明之範圍及精神下對上述標的進行各種改變，因此希望將包含於以上描述中或定義於隨附申請專利範圍中之所有標的解釋為描述並說明本發明。鑑於上述教示，本發明之許多修改及變動係可能的。因此，本發明意欲包括所有此等替代、修改及變動，該等替代、修改及變動落在隨附申請專利範圍之範圍內。

本文引述的所有專利、申請案、公開案、測試方法、文獻及其他材料之全文係以引用的方式併入本文中，如同實際上存在於本說明書中一樣。

該專利或申請案文件包含至少一個彩色圖式。具有彩色圖式之該專利或專利申請公開案之複本將在請求及支付必要費用後由政府機關提供。

圖 1 顯示參考懸浮液(RS)之乳白色比較。

圖 2 顯示經調配於不同緩衝液中之rhPTH在環境條件(220轉/分鐘(rpm)，迴轉式振盪)下在2R玻璃小瓶中攪動後之外觀。

圖 3A 至 3C 顯示分別儲存在40、25及5℃下長達6個月的pH篩選樣品之rhPTH主峰之RP-HPLC數據。

圖 4A 至 4C 顯示分別儲存在40、25及5℃下長達6個月的pH篩選樣品之氧化Met8 rhPTH雜質之RP-HPLC數據。

圖 5A 至 5C 顯示分別儲存在40、25及5℃下長達6個月的pH篩選樣品之氧化Met18 rhPTH雜質之RP-HPLC數據。

圖 6A 至 6C 顯示分別儲存在40、25及5℃下長達6個月的pH篩選樣品之IsoAsp33 rhPTH之RP-HPLC數據。

圖 7A 至 7C 顯示分別儲存在40、25及5℃下長達6個月的pH篩選樣品之rhPTH((1-30)+(1-33))雜質之RP-HPLC數據。

圖 8A 至 8C 顯示分別儲存在40、25及5℃下長達6個月的pH篩選樣品之rhPTH(1-45)片段雜質之RP-HPLC數據。

圖 9A 至 9C 顯示調配於含有50 mM NaCl及不同賦形劑之pH 5.5乙酸鹽緩衝液中且分別儲存在40、25及5℃下之樣品之rhPTH主峰之RP-HPLC數據。

圖 10A 至 10C 顯示調配於含有50 mM NaCl及不同賦形劑之pH 5.5乙酸鹽緩衝液中且分別儲存在40、25及5℃下之樣品之氧化Met8 rhPTH雜質之RP-HPLC數據。

圖 11A 至 11C 顯示調配於含有50 mM NaCl及不同賦形劑之pH 5.5乙酸鹽緩衝液中且分別儲存在40、25及5℃下之樣品之氧化Met18 rhPTH雜質之RP-HPLC數據。

圖 12A 至 12C 顯示調配於含有50 mM NaCl及不同賦形劑之pH 5.5乙酸鹽緩衝液中且分別儲存在40、25及5℃下之樣品之IsoAsp33 rhPTH雜質之RP-HPLC數據。

圖 13 顯示根據本發明各種實施例之rhPTH調配物之凍乾餅之外觀。

Claims

一種醫藥調配物，其包含： (a) 治療有效量之重組人類副甲狀腺素(rhPTH(1-84))； (b) 表面活性劑； (c) 張力劑； (d) 抗氧化劑； (e) 防腐劑； (f) 生理上可接受之緩衝液，及 (g) 水，其中該醫藥調配物係經調配成注射用液體，且其中該調配物係物理上穩定的並保持透明、無色、及無可見顆粒至少48小時。
如請求項1之醫藥調配物，其中該調配物物理上穩定至少72小時。
如請求項1之醫藥調配物，其中該調配物物理上穩定至少96小時。
如請求項1之醫藥調配物，其中該調配物物理上穩定至少7天。
如請求項1之醫藥調配物，其中該調配物物理上穩定至少14天。
如請求項1之醫藥調配物，其中該調配物物理上穩定至少21天。
如請求項1之醫藥調配物，其中該表面活性劑係選自泊洛沙姆-188及聚乙二醇及其組合。
如請求項1之醫藥調配物，其中該張力劑係選自氯化鈉、蔗糖及甘油及其組合。
如請求項1之醫藥調配物，其中該防腐劑係間甲酚、苯酚、苄醇、苯甲酸鈉、對羥基苯甲酸丙酯或其組合。
如請求項1之醫藥調配物，其中該生理上可接受之緩衝液係乙酸鹽緩衝液、磷酸鹽緩衝液、L-組胺酸緩衝液或琥珀酸鹽緩衝液。
如請求項1之醫藥調配物，其進一步包含抗氧化劑。
如請求項11之醫藥調配物，其中該抗氧化劑係甲硫胺酸、N-乙醯基-甲硫胺酸、硫基硫酸鹽、N-乙醯基色胺酸或其組合。
如請求項1之醫藥調配物，其具有約4至約6之pH。
如請求項1之醫藥調配物，其具有約5.5之pH。
如請求項1之醫藥調配物，其中該調配物係呈單位劑量小瓶、多劑量小瓶、藥筒、預填充注射器或注射筆。
一種醫藥調配物，其包含： (a) 約0.2至約2.0 mg/mL重組人類副甲狀腺素(rhPTH(1-84))； (b) 約0.03%至約3.0% w/v表面活性劑； (c) 約0.2%至約20% w/v張力劑； (d) 約0.015%至約1.50% w/v抗氧化劑； (e) 約0.03%至約3%防腐劑； (f) 約5 mM至約50 mM生理上可接受之緩衝液，及 (g) 水，其中該醫藥調配物係經調配成注射用液體，且其中該調配物係物理上穩定的並保持透明、無色、及無可見顆粒至少48小時。
如請求項16之醫藥調配物，其中該調配物物理上穩定至少72小時。
如請求項16之醫藥調配物，其中該調配物物理上穩定至少96小時。
如請求項16之醫藥調配物，其中該調配物物理上穩定至少7天。
如請求項16之醫藥調配物，其中該調配物物理上穩定至少14天。
如請求項16之醫藥調配物，其中該調配物物理上穩定至少21天。
一種醫藥調配物，其包含： (e) 治療有效量之重組人類副甲狀腺素(rhPTH(1-84))； (f) 增積劑； (g) 冷凍保護劑，及 (h) 醫藥上可接受之緩衝液，其中該醫藥調配物係經調配成在注射前進行復水之凍乾粉末，且其中該調配物係物理上穩定的並保持透明、無色、及在復水後無可見顆粒至少48小時。
如請求項22之醫藥調配物，其中該調配物物理上穩定至少72小時。
如請求項22之醫藥調配物，其中該調配物物理上穩定至少96小時。
如請求項22之醫藥調配物，其中該調配物物理上穩定至少7天。
如請求項22之醫藥調配物，其中該調配物物理上穩定至少14天。
如請求項22之醫藥調配物，其中該調配物物理上穩定至少21天。
如請求項22之醫藥調配物，其中該增積劑係甘露醇。
如請求項22之醫藥調配物，其中該冷凍保護劑係蔗糖。
如請求項22之醫藥調配物，其中該醫藥上可接受之緩衝液係乙酸鹽緩衝液、磷酸鹽緩衝液、L-組胺酸緩衝液或琥珀酸鹽緩衝液。
如請求項22之醫藥調配物，其中該醫藥上可接受之緩衝液係L-組胺酸緩衝液。
如請求項31之醫藥調配物，其pH為約5.5。
如請求項22之醫藥調配物，其中該醫藥上可接受之緩衝液係琥珀酸鹽緩衝液。
如請求項33之醫藥調配物，其具有約4至約4.5之pH。
如請求項22之醫藥調配物，其進一步包含抗氧化劑及/或表面活性劑。
如請求項35之醫藥調配物，其中該抗氧化劑係甲硫胺酸及該表面活性劑係泊洛沙姆-188。
一種醫藥調配物，其包含： (e) 約0.02至約2.0 mg/mL重組人類副甲狀腺素(rhPTH(1-84))； (f) 約0.3%至約30% w/v增積劑； (g) 約0.2%至約20% w/v冷凍保護劑，及 (h) 約5 mM至約50 mM醫藥上可接受之緩衝液，其中該醫藥調配物係經調配成在注射前進行復水之凍乾粉末，且其中該調配物係物理上穩定的並保持透明、無色、及在復水後無可見顆粒至少48小時。
如請求項37之醫藥調配物，其中該調配物物理上穩定至少72小時。
如請求項37之醫藥調配物，其中該調配物物理上穩定至少96小時。
如請求項37之醫藥調配物，其中該調配物物理上穩定至少7天。
如請求項37之醫藥調配物，其中該調配物物理上穩定至少14天。
如請求項37之醫藥調配物，其中該調配物物理上穩定至少21天。
一種用於調配rhPTH(1-84)之可注射溶液之套組，其包括包含如請求項22至42中任一項之醫藥調配物之第一容器、包含用於復水該醫藥調配物之無菌水之第二容器、及說明由此製備復水調配物之印裝品。
如請求項43之套組，其進一步包括用於注射復水的rhPTH(1-84)溶液之裝置。
一種對有此需要的個體投與治療有效量之rhPTH(1-84)之方法，該方法包括皮下、靜脈內或肌肉內注射如請求項1至21中任一項之醫藥調配物至個體中。
如請求項45之方法，其中該注射係用注射器、自動注射器、注射筆或其組合進行。
一種對有此需要的個體投與治療有效量之rhPTH(1-84)之方法，該方法包括 (i) 用無菌水復水如請求項22至42中任一項之醫藥調配物，及 (ii) 皮下、靜脈內或肌內注射該復水調配物至個體中。
如請求項47之方法，其中該注射係用注射器、自動注射器、注射筆或其組合進行。