KR20220160676A - 인간 부갑상선 호르몬(pth)의 제형 및 그 제조 방법 - Google Patents

인간 부갑상선 호르몬(pth)의 제형 및 그 제조 방법 Download PDF

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레이 스
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린훙 장
샹 궈
춘 양
톈셩 리
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쓰촨 루저우 부창 바이오-파마슈티컬 컴퍼니 리미티드
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Abstract

인간 부갑상선 호르몬을 포함하는 안정한 액체 약제학적 제형이 본 명세서에 제공된다. 다양한 구현예에서, 안정한 액체 약제학적 제형은 인간 부갑상선 호르몬(huPTH); 용액의 pH 범위를 3 내지 6으로 유지하기 위한 완충제; 당, 염, 계면활성제, 단백질, 카오트로픽제, 지질 및 아미노산으로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 안정화제; 삼투 조절제; 물; 및 선택적으로 비경구적으로 허용되는 보존제를 포함하고; 상기 용액은 멸균되고 인간 환자에게 비경구 투여할 준비가 되어 있다.

Description

인간 부갑상선 호르몬(PTH)의 제형 및 그 제조 방법
본 발명은 인간 부갑상선 호르몬(PTH)의 제형 및 그 제조 방법에 관한 것이다.
파라토르몬(parathormone) 또는 파라티린(parathyrin)이라고도 칭하는 부갑상선 호르몬(PTH)은, 뼈, 신장 및 장에 미치는 영향을 통해 혈청 칼슘을 조절하는 부갑상선(parathyroid glands)에서 분비되는 호르몬이다. PTH는, 뼈 조직이 시간이 지남에 따라 교대로 재흡수되고 재건되는 진행 중인 과정인 뼈 리모델링에 영향을 준다. PTH는 낮은 혈중 혈청 칼슘 수준에 반응하여 분비된다. 더 많은 이온성 칼슘을 혈액으로 방출하여 낮은 혈청 칼슘 수준을 높이기 위해 PTH는 골 기질 내의 파골세포 활성을 간접적으로 자극한다. 부갑상선 기능 저하증, 부갑상선 기능 항진증 및 방종양성 증후군(paraneoplastic syndromes)과 같이 PTH를 너무 적게 또는 너무 많이 생성하는 질환은 뼈 질환, 저칼슘혈증 및 고칼슘혈증을 유발할 수 있다.
PTH는, 프로호르몬인 84개의 아미노산을 포함하는 폴리펩타이드이다. 그것은 약 9500 Da의 분자량을 가지고 있다. 특정 형태의 PTH를 가진 인간에 대한 연구는, 뼈에 대한 동화작용 효과를 입증했으며 골다공증 및 관련 뼈 질환의 치료에 대한 사용에 상당한 관심을 불러일으켰다. 소 및 인간 호르몬의 N-말단 34개 아미노산을 사용하여, 부갑상선 호르몬이 특히 피하 경로에 의해 박동(pulsatile) 방식으로 투여될 때 뼈 성장을 향상시킨다는 것이 인간에서 입증되었다. 테리파라타이드(Teriparatide)(PTH 1-34)(FORTEO®)는 폐경 후 여성, 원발성 또는 성선기능저하증이 있는 남성, 글루코코르티코이드 관련 골다공증이 있는 남성 및 여성을 포함하여 골절 위험이 높은 사람들의 골다공증 치료에 대해 미국에서 승인되었다. PTH의 약간 다른 형태인 인간 PTH(1-38)는 유사한 결과를 나타냈다(Cusano NE et al., J Clin Endocrinol Metab., 98:137-144, 2013).
불행히도 다수의 소분자 치료제와 유사하게, PTH는 프로테아제에 의해 분해되기 쉽고 분해로 인해 불안정하다. 사실, 그것은 전통적인 소분자보다 더 불안정하다. PTH는 주로 N-말단 아미노산에서 탈아미드화, 클립(clip), 응집 및 산화에 매우 민감하다(예를 들어, 8번 및 18번 위치의 메티오닌 잔기에서 산화된 PTH 종을 생성). 또한, 16번 위치의 아스파라긴 잔기에서 탈아미드화될 수 있다. 펩티드 결합의 파손으로 인해 N-말단 및 C-말단에서 폴리펩티드 사슬이 절단될 가능성이 있다. 이러한 모든 반응은 이 단백질의 생체 활성을 상당히 방해할 수 있다.
이러한 부작용을 방지하는 역할을 하는 개선된 PTH 제형이 매우 필요하다.
원용에 의한 포함
본 명세서에 언급된 모든 간행물 및 특허 출원은, 각각의 개별 간행물 또는 특허 출원이 원용에 의해 포함되는 것으로 구체적이고 개별적으로 표시된 것과 동일한 정도로, 원용에 의해 본 명세서에 포함된다.
본 발명의 목적은 부갑상선 호르몬(PTH)을 치료학적 유효량으로 함유하는 안정화된 액체 용액 형태의 약제학적으로 유용한 PTH 제형을 제공하는 것이다. 상기 용액은 저장 안정성이 있고, 멸균 형태로 인간 환자에게 비경구 투여가 가능한 바이알 또는 카트리지에 보관할 수 있다.
발명의 요약
다양한 구현예에서, 안정한 액체 제형은 약 100-2000㎍/ml의 농도의 인간 부갑상선 호르몬(huPTH); 용액의 pH 범위를 3에서 7로 유지하기 위한 아세테이트 또는 시트레이트 완충제; 당, 염, 계면활성제, 단백질, 카오트로픽제, 지질 및 아미노산으로 이루어진 군으로부터 선택된 안정화제; 물; 및 선택적으로 비경구적으로 허용되는 보존제를 포함하며, 여기서 상기 용액은 멸균되고 인간 환자에게 비경구 투여할 준비가 되어 있다.
한 구현예에서, 안정한 액체 제형은 huPTH(1 mg/mL), 10 mM 시트르산나트륨, 50 mM L-Met, 10 mM EDTA, 100 mM NaCl, 0.01% 폴리소르베이트 20, pH 5.0을 포함한다.
상세한 설명
범위를 포함하는 모든 수치적 지시(numerical designation), 예를 들면, pH, 온도, 시간, 농도 및 분자량은 (+) 또는 (-) 0.1 만큼 변하는 근사값이다. 항상 명시적으로 기재되는 것은 아니나, 모든 수치적 지시에는 용어 "약(about)"이 선행될 수 있는 것으로 이해된다. 또한 용어 "약"은 "X+0.1" 또는 "X-0.1"과 같은 "X"의 약간의 증가 외에 정확한 값 "X"도 포함한다. 또한, 항상 명시적으로 기재되는 것은 아니나, 본 명세서에 기재된 시약은 단지 예시적이고, 그의 균등물이 당해 기술 분야에서 공지되어 있는 것으로 이해된다.
본 명세서에서 사용되는 특정 용어는 다음과 같이 정의된 의미를 갖는다.
본 명세서에서 사용된 용어 "포함하는(comprising)"은 제형 및 방법이 기재된 요소들을 포함하나, 다른것들을 배제하지 않는다는 것을 의미하도록 의도된다. 제형 및 방법을 정의하기 위해 사용되는 경우, "필수적으로 구성된(consisting essentially of)"은 의도된 목적으로 사용될 때 조합에 필수적 중요성의 다른 요소를 배제하는 것을 의미할 것이다. 따라서, 본 명세서에서 정의된 요소들로 필수적으로 구성된 조성물은 분리 및 정제 방법에서 유래된 미량의 오염 물질, 및 인산염 완충 식염수, 보존제 등과 같은 약제학적으로 허용되는 담체를 배제하지 않을 것이다. "구성된(consisting of)"은 본 발명의 제형을 투여하기 위한 실질적인 방법 단계 및 다른 성분의 미량 이상을 배제한다는 것을 의미한다. 이러한 전환 용어(transition term) 각각에 의해 정의된 구체예는 본 발명의 범위 내에 속한다.
본 명세서에서 사용된 용어 "수성 약제학적 제형" 또는 "액체 약제학적 제형"은 환자에게 투여하기에 적합한 치료학적 유효량의 수중 활성 성분의 제형을 의미한다.
다양한 구현예에서, 약제학적 제형의 활성 성분은, hPTH(1-34), hPTH(1-37), hPTH(1-38), hPTH(1-41) 및 hPTH(1-84)를 포함하는 군으로부터 선택되는 생물학적으로 활성인 hPTH이다. 다양한 구현예에서, 액체 제형은, 재조합적으로, 펩티드 합성에 의해, 또는 인간 체액으로부터의 추출(예를 들어, 본 명세서에 원용에 의해 포함된 미국 특허 제5,208,041호 참조)에 의해 얻어진, 전장 84개 아미노산 형태의 부갑상선 호르몬, 특히 인간 형태, hPTH(1-84)(서열번호 1)을 포함할 수 있다.
SVSEIQLMHNLGKHLNSMERVEWLRKKLQDVHNFVALGAPLAPRDAGSQRPRKKEDNVLVESHEKSLGEADKADVNVLTKAKSQ (서열번호 1)
다양한 구현예에서, PTH 단편은 PTH(1-37), PTH(1-38), PTH(1-41) 및 PTH(1-34)와 같은 적어도 처음 34개의 N-말단 잔기를 포함한다(서열번호 2).
SVSEIQLMHNLGKHLNSMERVEWLRKKLQDVHNF (서열번호 2)
PTH 변이체 형태의 대안은, PTH 안정성 및 반감기를 개선하는 1 내지 5개의 아미노산 치환체, 예를 들어 8번 및/또는 18번 위치의 메티오닌 잔기의, 산화에 대해 PTH 안정성을 개선하는 기타 소수성 아미노산 또는 류신으로 대체물 및 25-27번 영역의 아미노산의, 프로테아제에 대해 PTH 안정성을 개선하는 기타 아미노산 또는 히스티딘과 같은 트립신-비감수성(trypsin-insensitive) 아미노산으로 대체물을 포함한다. 이러한 형태의 PTH는 본 명세서에서 일반적으로 사용되는 "부갑상선 호르몬"이라는 용어에 포함된다. 상기 호르몬들은 본 명세서에 원용에 의해 포함되는 미국 특허 제4,086,196호에 기재된, 공지의 재조합 또는 합성 방법에 의해 얻어질 수 있다.
다양한 구현예에서, 약제학적 제형은 전형적으로 약 0.01 mg/mL 내지 약 5 mg/mL의 PTH, 약 0.1 mg/mL 내지 약 2.5 mg/mL의 PTH, 또는 약 0.5 mg/mL 내지 약 1 mg/mL의 PTH를 함유한다. 다양한 구현예에서, 약제학적 제형은 약 0.25 mg/mL의 PTH, 약 0.5 mg/mL의 PTH, 약 1 mg/mL의 PTH 또는 약 2 mg/mL의 PTH를 함유한다. 다양한 구현예에서, 약제학적 제형은 0.1 mg/mL 내지 1 mg/mL의 PTH를 함유한다. 일 구현예에서, 제형은 1 mg/mL의 PTH를 함유한다.
약제학적 제형은 일반적으로 즉각적인 사용을 위해 적절하게 제형화된다. 약제학적 제형이 즉시 투여되지 않는 다양한 구현예에서, PTH는 저장에 적합한 제형으로 제형화될 수 있다. 그러한 제형 중 하나는 적절한 안정화제와 함께 PTH의 동결건조 제형이다. 대안적으로, PTH는 하나 이상의 적합한 안정화제와 함께 용액에 저장하기 위해 제형화될 수 있다. 당업자에게 공지된 임의의 이러한 안정화제가 제한 없이 사용될 수 있다. 다양한 구현예에서, 동결건조 제제에 적합한 안정화제는 당, 염, 계면활성제, 단백질, 카오트로픽제(chaotropic agent), 지질 및 아미노산을 포함하지만 이에 제한되지는 않는다. 다양한 구현예에서, 액체 제제에 적합한 안정화제는 당, 염, 계면활성제, 단백질, 카오트로픽제, 지질 및 아미노산을 포함하지만 이에 제한되지는 않는다.
본 명세서에서 사용된 용어 "완충제(buffer)" 또는 "완충액(buffer solution)"은 일반적으로, 산(일반적으로 약산, 예를 들어, 아세트산나트륨산, 시트르산, 히스티딘의 이미다졸륨 형태) 및 그의 짝염기(예를 들어, 아세테이트 또는 시트레이트 염, 예컨대, 나트륨 아세테이트, 나트륨 시트레이트 또는 히스티딘)의 혼합물 또는 대안적으로 염기(일반적으로 약염기, 예를 들어 히스티딘) 및 그의 짝산(예를 들어, 양성자화된 히스티딘 염)의 혼합물을 포함하는 수용액을 의미한다. "완충액"의 pH는 "완충제"에 의해 부여되는 "완충 효과"로 인해 소량의 강산 또는 염기를 첨가할 때 매우 약간만 변경될 것이다. "완충 시스템"이라는 어구는 적어도 두 개의 완충제를 포함하는 혼합물을 의미한다. 본 발명의 다양한 구현예에서, 약제학적 제형에 포함된 완충제는 약제학적으로 허용되고 수용액을 3 내지 7의 pH 범위에서 유지할 수 있는 임의의 산 또는 염 조합을 포함한다. 다양한 구현예에서, 완충제는 약 3.0 내지 약 7.0의 pH를 유지한다. 다양한 구현예에서, 완충제는 약 3.0의 pH, 약 4.0의 pH, 약 5.0의 pH, 약 6.0의 pH, 또는 약 7.0의 pH를 유지한다.
제형의 pH를 임의의 pH에서 또는 상기 제공된 임의의 pH 범위 내에서 유지할 수 있는 임의의 완충제는, 제형의 다른 성분과 반응하지 않거나, 가시적인 침전물이 형성되도록 하지 않거나, 또는 활성 성분을 화학적으로 불안정하게 만들지 않는다면, 본 명세서에 개시된 약제학적 제형에 사용하기에 적합하다. 적합한 완충제의 예는 문헌에 잘 공지되어 있다 (예를 들어, Allen Jr, Loyd V, ed. (2012) Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 22nd ed., Pharmaceutical Press 참조). 다양한 구현예에서, 약제학적 제형에 사용되는 완충제는 숙시네이트, 시트레이트, 말레이트, 에덴테이트, 히스티딘, 아세테이트, 아디페이트, 아코니테이트, 아스코르베이트, 벤조에이트, 카르보네이트, 중탄산염, 말리에이트, 글루타메이트, 락테이트, 인산염, 및 타르타르산염, 또는 이들 완충제의 혼합물로 이루어진 군으로부터 선택되는 성분을 포함한다.
완충제의 농도는 pH 안정화 및 충분한 완충 능력이 제공되도록 선택된다. 다양한 구현예에서, 완충 시스템은 아세테이트 또는 시트레이트 공급원이다. 다양한 구현예에서, 완충 시스템은 시트레이트 공급원이다. 다양한 구현예에서, 완충제는 약 5mM, 약 10mM, 약 15mM 또는 약 20mM으로 존재한다. 다른 구현예에서, 완충제는 0.5 내지 100mM, 0.75 내지 50mM, 1 내지 20mM, 또는 10 내지 20mM의 농도로 제형에 존재한다. 일 구현예에서, 완충제는 약 10mM으로 존재한다. 일 구현예에서, 완충제는 10 mM로 존재하는 시트레이트이다.
본 발명의 다양한 구현예에서, 약제학적 제형에 포함된 안정화제는 당, 염, 계면활성제, 단백질, 카오트로픽제, 지질 및 아미노산으로 이루어진 군으로부터 선택된다. 다양한 구현예에서, 안정화제는 당류, 바람직하게는 단당류 또는 이당류, 예를 들어, 만니톨, 글리신, 글리세롤, 소르비톨 또는 이노시톨 및 글리세린 또는 프로필렌 글리콜과 같은 다가 알코올 또는 이들의 혼합물을 포함하는 폴리올; EDTA, DTPA 또는 EGTA의 군에서 선택되는 킬레이터; 프롤린, 알라닌, 아르기닌, 아스파라긴, 아스파르트산, 시스테인, 글루타민, 글루탐산, 글리신, 히스티딘, 이소류신, 류신, 라이신, 메티오닌, 페닐알라닌, 세린, 트레오닌, 트립토판, 및 발린으로 구성된 군에서 선택되는 아미노산으로 이루어진 군으로부터 선택된다. 적합한 안정화제의 예는 당업계에 광범위하게 기술되어 있다 (예를 들어, Allen Jr, Loyd V, ed. (2012) Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 22nd ed., Pharmaceutical Press 참조).
본 발명의 다양한 구현예에서, 약제학적 제형에 포함된 안정화제는 계면활성제이다. 본 명세서에 사용된 "계면활성제"는 양친매성 화합물(amphiphilic compound), 즉 두 액체 사이 또는 액체와 고체 사이의 표면 장력(또는 계면 장력)을 낮추는 소수성 기 및 친수성 기 모두를 함유하는 화합물을 의미한다. "비이온성 계면활성제"는 그것의 헤드에 하전된 그룹이 없다. "비이온성 계면활성제"의 예는, 예를 들어, 옥타에틸렌 글리콜 모노도데실 에테르, 펜타에틸렌 글리콜 모노도데실 에테르와 같은 폴리옥시에틸렌 글리콜알킬 에테르; 폴리옥시프로필렌 글리콜 알킬 에테르; 데실 글루코시드, 라우릴 글루코시드, 옥틸 글루코시드와 같은 글루코시드 알킬 에테르; 트리톤 X-100과 같은 폴리옥시에틸렌 글리콜 옥틸페놀 에테르; 노녹시놀-9와 같은 폴리옥시에틸렌 글리콜 알킬페놀 에테르; 글리세릴 라우레이트와 같은 글리세롤 알킬 에스테르; 폴리소르베이트와 같은 폴리옥시에틸렌 글리콜 소르비탄 알킬 에스테르; 스팬(span)과 같은 소르비탄 알킬 에스테르; 코카미드 MEA, 코카미드 DEA, 도데실디메틸아민 옥사이드; 폴록사머와 같은 폴리에틸렌 글리콜 및 폴리프로필렌 글리콜의 블록 공중합체; 및 폴리에톡실화 탈로우 아민(POEA)을 포함한다. 다양한 구현예에서, 본 발명의 약제학적 제형은 이들 계면활성제 중 하나 이상을 조합하여 함유할 수 있다. 다양한 구현예에서, 약제학적 제형에 사용하기 위한 비이온성 계면활성제는 폴리소르베이트 20, 40, 60 또는 80과 같은 폴리소르베이트로 이루어진 군으로부터 선택되고, 비이온성 계면활성제의 농도는 제형의 총 부피에 대해 0.01 내지 0.08%(w/v), 0.015 내지 0.06%(w/v), 또는 0.02 내지 0.04%(w/v)의 범위에 있다. 일 구현예에서, 비이온성 계면활성제는 제형의 총 부피에 대해 0.01%(w/v)의 농도를 갖는 폴리소르베이트 20(즉, 트윈 20)이다.
본 발명의 다양한 구현예에서, 안정한 액체 제형에 포함된 킬레이터는 EDTA, DTPA 또는 EGTA로 이루어진 군으로부터 선택된다. 다양한 구현예에서, 킬레이터는 10mM 농도의 EDTA이다.
본 발명의 다양한 구현예에서, 안정한 액체 제형에 포함된 아미노산은 프롤린, 알라닌, 아르기닌, 아스파라긴, 아스파르트산, 시스테인, 글루타민, 글루탐산, 글리신, 히스티딘, 이소류신, 류신, 라이신, 메티오닌, 페닐알라닌, 세린, 트레오닌, 트립토판, 티로신 및 발린으로 이루어진 군으로부터 선택된다. 다양한 구현예에서, 아미노산은 50mM 농도의 L-메티오닌이다.
본 발명의 다양한 구현예에서, 본 명세서에 개시된 제제는 생리학적으로 허용되는 삼투 조절제(tonicity modifier)를 함유한다. "삼투 조절제"라는 어구는 제형의 장성(tonicity)을 조정하기 위해 제형에 첨가될 수 있는 약제학적으로 허용되는 불활성 물질을 의미한다. 본 발명에 적합한 삼투 조절제는 염화나트륨, 염화칼륨, 만니톨, 수크로스, 덱스트로스, 소르비톨, 글리세린 및 기타 제약상 허용되는 삼투 조절제를 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 등장화제(tonicity agent)가 존재하는 경우, 이것은 바람직하게는 체액과 거의 등장성(즉, 약 270 내지 약 300 mOsm/L)이 되도록 하기에 충분하고, 인간 개체와 같은 포유동물에 진피, 피하 또는 근육내 조직 또는 IV으로 비경구 주사하기에 적합한 양으로 존재한다. 등장성은 예를 들어 증기압 또는 빙결식 삼투압계(osmometer)를 사용하여 측정할 수 있다.
본 발명의 다양한 구현예에서, 약제학적 제형은 염화칼륨, 염화칼슘, 염화나트륨, 인산나트륨, 인산칼륨 및 중탄산나트륨으로 이루어진 군으로부터 선택된 삼투 조절제를 함유할 것이고, 농도는 10 내지 200mM, 20 내지 150mM, 또는 30 내지 100mM의 범위일 것이다. 일 구현예에서, 삼투 조절제는 100mM 농도의 염화나트륨이다.
본 발명의 다양한 구현예에서, 안정한 액체 제형은 또한 크레졸, 벤질 알코올, 페놀, 벤잘코늄 클로라이드, 벤제토튬 클로라이드, 클로로부탄올, 페닐에틸 알코올, 메틸 파라벤, 프로필 파라벤, 티메로살 및 질산페닐수은 및 아세테이트로 이루어진 군으로부터 선택되는 비경구적으로 허용되는 보존제를 포함할 수 있다.
본 명세서에 사용된 용어 "멸균수" 또는 "주사용수"는 정균제, 항균제 또는 첨가된 완충제를 함유하지 않는 멸균된 비발열성 주사용수 제제를 의미한다. 일반적으로 첨가제의 삼투압 농도는 총 112 mOsmol/liter 이상이다(세포외액의 정상 삼투압 농도의 2/5 -280 mOsmol/liter).
본 발명의 약제학적 제형은 비경구 투여에 적합하다. 본 명세서에 사용된 약제학적 제형의 "비경구 투여"는 개체의 조직의 물리적 파열(breach) 및 조직의 파열(breach)을 통한 약제학적 제형의 투여를 특징으로 하는 임의의 투여 경로를 포함하며, 그로 인해 일반적으로 혈류, 근육 또는 내부 장기로의 직접 투여가 되도록 한다. 따라서 비경구 투여는 제형의 주사, 외과적 절개를 통한 제형의 적용, 조직 관통 비외과적 상처를 통한 제형의 적용 등에 의한 약제학적 제형의 투여를 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 특히, 비경구 투여는 피하 주사, 복강내 주사, 근육내 주사, 흉골내 주사, 정맥내 주사, 동맥내 주사, 척수강내 주사, 뇌실내 주사, 요도내 주사, 두개내 주사, 활막내 주사 또는 주입; 또는 신장 투석 주입 기술을 포함하나 이에 제한되지 않는 것으로 생각된다. 본 발명은 사전충전형(pre-filled) 주사기, 바이알, 카트리지 또는 펜에 사용하기 위한 안정한 수성 약제학적 제형에 관한 것이다.
약제학적 제형은 일반적으로 멸균되고 실질적으로 등장성이며 미국 식품의약국(FDA)의 모든 GMP(Good Manufacturing Practice) 규정을 완전히 준수하도록 제형화된다. 바람직하게는, 본 명세서에 기술된 폴리펩티드 제형의 치료학적 유효량은 실질적인 독성을 유발하지 않으면서 치료적 이점을 제공할 것이다.
일 구현예에서, 안정한 액체 제형은 huPTH(1 mg/mL), 10 mM 시트르산나트륨, 50 mM L-Met, 10 mM EDTA, 100 mM NaCl, 0.01% 폴리소르베이트 20, pH 5.0을 포함한다.
도 1은 표준 참조 huPTH 샘플(상단)을 강제 산화(forced oxidation)된 huPTH 샘플(하단)과 비교하는 SEC-HPLC 크로마토그램을 도시한다.
도 2는 표준 참조 huPTH 샘플(상부)을 강제 산화된 huPTH 샘플(하부)과 비교하는 RP-HPLC 크로마토그램을 도시한다.
도 3은 표준 참조 huPTH 샘플(상부)을 강제 산화된 huPTH 샘플(하부)과 비교하는 CEX-HPLC 크로마토그램을 도시한다.
도 4는 25℃(상부) 및 37℃(하부)에서 다양한 huPTH 제형을 비교하는 SEC-HPLC 크로마토그램을 도시한다.
도 5는 25℃(상부) 및 37℃(하부)에서 다양한 huPTH 제형을 비교하는 RP-HPLC 크로마토그램을 도시한다.
도 6은 25℃(상부) 및 37℃(하부)에서 다양한 huPTH 제형을 비교하는 CEX-HPLC 크로마토그램을 도시한다.
도 7은 4℃에서 다양한 huPTH 제형을 비교하는 SEC-HPLC 크로마토그램을 도시한다.
도 8은 4℃에서 다양한 huPTH 제형을 비교하는 RP-HPLC 크로마토그램을 도시한다.
도 9는 25℃(상부) 및 37℃(하부)에서 다양한 huPTH 제형을 비교하는 RP-HPLC 크로마토그램을 도시한다.
도 10은 4℃에서 다양한 huPTH 제형을 비교하는 RP-HPLC 크로마토그램을 도시한다.
도 11은 25℃(상부) 및 37℃(하부)에서 다양한 huPTH 제형을 비교하는 SEC-HPLC 크로마토그램을 도시한다.
도 12는 4℃에서 다양한 huPTH 제형을 비교하는 SEC-HPLC 크로마토그램을 도시한다.
도 13은 25℃(상부) 및 37℃(하부)에서 다양한 huPTH 제형을 비교하는 CEX-HPLC 크로마토그램을 도시한다.
도 14는 4℃에서 다양한 huPTH 제형을 비교하는 CEX-HPLC 크로마토그램을 도시한다.
도 15는 25℃(상부) 및 37℃(하부)에서 다양한 huPTH 제형을 비교하는 RP-HPLC 크로마토그램을 도시한다.
도 16은 4℃에서 다양한 huPTH 제형을 비교하는 RP-HPLC 크로마토그램을 도시한다.
도 17은 25℃(상부) 및 37℃(하부)에서 다양한 huPTH 제형을 비교하는 SEC-HPLC 크로마토그램을 도시한다.
도 18은 4℃에서 다양한 huPTH 제형을 비교하는 SEC-HPLC 크로마토그램을 도시한다.
도 19는 25℃(상부) 및 37℃(하부)에서 다양한 huPTH 제형을 비교하는 CEX-HPLC 크로마토그램을 도시한다.
도 20은 4℃에서 다양한 huPTH 제형을 비교하는 CEX-HPLC 크로마토그램을 도시한다.
도 21은 37℃에서 huPTH 제형에 대한 Tween 20 대 Tween 80의 효과를 평가하는 RP-HPLC 크로마토그램을 도시한다.
도 22는 5일 후 37℃에서 huPTH 제형에 대한 Tween 20 대 Tween 80의 효과를 나타내는 막대 그래프이다.
도 23-25는 1주일 후 4℃, 25℃ 및 37℃에서 다양한 제형의 안정성을 나타내는 막대 그래프이다.
도 26-28은 4℃, 25℃ 및 37℃에서 다양한 huPTH 제형의 RP-HPLC 평가를 나타내는 막대 그래프이다.
도 29-31은 4℃, 25℃ 및 37℃에서 다양한 huPTH 제형의 CEX-HPLC 평가를 나타내는 막대 그래프이다.
도 32-34는 4℃, 25℃ 및 37℃에서 다양한 huPTH 제형의 SEC-HPLC 평가를 나타내는 막대 그래프이다.
도 35-37은 4℃, 25℃ 및 37℃에서 다양한 huPTH 제형의 RP-HPLC 평가를 나타내는 막대 그래프이다.
도 38-40은 4℃, 25℃ 및 37℃에서 다양한 huPTH 제형의 CEX-HPLC 평가를 나타내는 막대 그래프이다.
도 41-43은 4℃, 25℃ 및 37℃에서 다양한 huPTH 제형의 SEC-HPLC 평가를 나타내는 막대 그래프이다.
하기 실시예는 본 발명을 예시하는 것일뿐, 본 발명을 제한하는 것으로 의도되지 않는다.
실시예 1
제형 안정화 방법 개발
안정성 평가 방법의 개발에서, huPTH(1 mg/mL PTH)의 시험 제제는 0.01% H2O2로 강제 산화시킨 후, 아래 추가 방법 항목에 기술된 것처럼 SEC-HPLC, RP-HPLC 및 CEX-HPLC에 적용되었다.
SEC-HPLC 분석 결과를 도 1에 도시하였다. 도 1에 도시된 바와 같이, SEC 주요 피크가 더 빠른 용출 시간으로 이동하며, 이는 강제 산화에 의한 응집을 나타낸다. RP-HPLC 분석 결과를 도 2에 도시하였다. 도 2에 도시된 바와 같이, RP 주요 피크는 4개의 용리 피크로 분할되며, 이는 강제 산화로 인한 PTH의 더욱 친수성인(more hydrophilic) 종을 나타낸다. CEX-HPLC 분석 결과를 도 3에 도시하였다. 도 3에 도시된 바와 같이, 주요 피크는 더 빠른 용출 시간으로 이동하며, 이는 강제 산화에 의한 탈아민화 종과 같이 양전하로 약하게 하전된(less positively charged) 종을 나타낸다.
실시예 2
pH 및 완충제의 스크리닝 연구
이 실시예는 액체 huPTH 제형의 안정성에 대한 pH 및 다양한 완충제 조건의 효과를 입증한다. 서열번호 2에 기재된 아미노산 서열을 갖는 재조합 huPTH(1 mg/mL)를 제형의 활성 성분으로 사용하였다. 표 1은 이 실시예에서 시험된 제형의 요약을 제공한다.
표 1
10 mM 아세트산나트륨, 140mM NaCl, pH 4.0
10 mM 아세트산나트륨, 140mM NaCl, pH 5.0
10 mM 시트레이트, 140mM NaCl, pH 5.
10 mM 인산나트륨, 140mM NaCl, pH 6.0
10 mM 히스티딘, 140mM NaCl, pH 6.0
10 mM 인산나트륨, 140mM NaCl, pH 7.0
10 mM Tris, 140mM NaCl, pH 7.0
10 mM Tris, 140mM NaCl, pH 8.0
10 mM 글리신, 140mM NaCl, pH 9.0
25℃ 및 37℃에서 수행된 SEC-HPLC, RP-HPLC 및 CEX-HPLC의 결과를 도 4 내지 6에 도시하였다. 4℃에서 수행된 SEC-HPLC 및 RP-HPLC의 결과는 도 7 내지 8에 도시하였다. 25℃ 및 37℃에서 이러한 가속 안정성 연구는 huPTH가 pH 5에서 최상의 안정성 프로파일을 가질 수 있음을 보여준다.
실시예 3
최적화된 pH 범위에서 부형제 및 계면활성제에 대한 스크리닝 연구
이 실시예는 pH 5.0에서 액체 huPTH 제형의 안정성에 대한 다양한 부형제 및 계면활성제의 효과를 입증한다. 서열번호 2에 기재된 아미노산 서열을 갖는 재조합 huPTH(1 mg/mL)를 제형의 활성 성분으로 사용하였다. 고정된 제형 파라미터는 pH 5.0 및 1.0 mg/mL huPTH였다.
다양한 부형제의 효과를 스크리닝하기 위해, 10가지 다른 제형을 제조하고 TFE 마개가 있는 타입 1 유리 바이알에 저장하였다. 안정성 분석(RP-HPLC, CEX-HPLC 및 SEC-HPLC, pH, 삼투압 농도(Osmolarity), UV-VIS)은 0, 1, 2, 4, 8, 12주에 4℃, 25℃, 37℃에서 수행하였다. 표 2는 이 실시예에서 시험된 제형의 요약을 제공한다.
표 2
10 mM 시트르산나트륨, 50 mM ZnCl2, pH 5.0
10 mM 시트르산나트륨, 10 mM L-Met, 50 mM ZnCl2, pH 5.0
10 mM 시트르산나트륨, 10 mM L-Met, 5% (w/v) 만니톨, pH 5.0
10 mM 시트르산나트륨, 10 mM L-Met, 5% (w/v) 소르비톨, pH 5.0
10 mM 시트르산나트륨, 10 mM L-Met, 9% (w/v) 수크로스, pH 5.0
10 mM 시트르산나트륨, 10 mM L-Met, 5% (w/v) 트레할로스, pH 5.0
10 mM 시트르산나트륨, 10 mM L-Met, 10% (v/v) 프로필렌 글리콜, pH 5.0
10 mM 시트르산나트륨, 10 mM L-Met, 10% (v/v) 글리세롤, pH 5.0
10 mM 시트르산나트륨, 10 mM L-Met, 10% (w/v) Kolliphor P188, pH 5.0
10 mM 시트르산나트륨, 10 mM L-Met, 100 mM NaCl, pH 5.0
4℃, 25℃ 및 37℃에서 수행된 SEC-HPLC, RP-HPLC 및 CEX-HPLC의 결과를 도 9 내지 14에 도시하였다. 25℃ 및 37℃에서 초기 가속화 안정성 연구는 pH 5에서 huPTH의 안정성이 특정 제형 부형제의 존재 하에 더욱 증가될 수 있음을 보여준다. ZnCl2를 벤치마크로 사용하면, 3가지 제형 부형제가 수용액에서 huPTH에 대해 개선된 안정성 프로파일을 제공하며, SEC-HPLC, RP-HPLC 및 CEX-HPLC 데이터는 제형 #1, #2, #3, #5, #6, #9 및 #10이 스트레스 가속 조건에서 가장 안정적임을 보여준다.
다양한 계면활성제의 효과를 스크리닝하기 위해, 12가지 다른 제형을 제조하고 TFE 마개가 있는 타입 1 유리 바이알에 저장하였다. 안정성 분석(RP-HPLC, CEX-HPLC 및 SEC-HPLC, pH, 삼투압 농도(Osmolarity), UV-VIS)은 0, 1, 2, 4, 8, 12주에 4℃, 25℃, 37℃에서 수행하였다. 표 3은 이 실시예에서 시험된 제형의 요약을 제공한다.
표 3
10 mM 시트르산나트륨, 10 mM L-Met, 50 mM ZnCl2, pH 5.0, 0.01% (v/v) 폴리소르베이트 20
10 mM 시트르산나트륨, 10 mM L-Met, 5% (w/v) 소르비톨, pH 5.0, 0.01% (v/v) 폴리소르베이트 20
10 mM 시트르산나트륨, 10 mM L-Met, 10% (v/v) 프로필렌 글리콜, pH 5.0, 0.01% (v/v) 폴리소르베이트 20
10 mM 시트르산나트륨, 10 mM L-Met, 100 mM NaCl, pH 5.0, 0.01% (v/v) 폴리소르베이트 20
10 mM 시트르산나트륨, 50 mM ZnCl2, pH 5.0, 0.01% (v/v) 폴리소르베이트 20
10 mM 시트르산나트륨, 10 mM L-Met, 50 mM ZnCl2, pH 5.0, 0.1% (v/v) 폴리소르베이트 20
10 mM 시트르산나트륨, 10 mM L-Met, 5% (w/v) 소르비톨, pH 5.0, 0.1% (v/v) 폴리소르베이트 20
10 mM 시트르산나트륨, 10 mM L-Met, 5% (w/v) 소르비톨, pH 5.0, 0.5% (v/v) 폴리소르베이트 20
10 mM 시트르산나트륨, 10 mM L-Met, 10% (v/v) 프로필렌 글리콜, pH 5.0, 0.1% (v/v) 폴리소르베이트 20
10 mM 시트르산나트륨, 10 mM L-Met, 100 mM NaCl, pH 5.0, 0.1% (v/v) 폴리소르베이트 20
10 mM 시트르산나트륨, 50 mM ZnCl2, pH 5.0, 0.1% (v/v) 폴리소르베이트 20
10 mM 시트르산나트륨, 10 mM L-Met, 100 mM NaCl, pH 5.0, 0.1% (v/v) Kolliphor P188
4℃, 25℃ 및 37℃에서 수행된 SEC-HPLC, RP-HPLC 및 CEX-HPLC의 결과를 도 15 내지 20에 도시하였다. RP-HPLC 데이터(25℃)는 제형 #1, #3, #4, #5, #6, #7, #9, #10 및 #11이 스트레스 가속 조건에서 최적인 반면, 제형 #2, #8과 #12는 안정적이지 않음을 보여준다. SEC-HPLC 데이터(25℃)는 #8 및 #12를 제외한 모든 제형이 안정적임을 보여준다. CEX-HPLC 데이터는 #2, #8 및 #12를 제외한 모든 제형이 안정적임을 보여준다.
따라서, L-Met, 프로필렌 글리콜, 및 폴리소르베이트-80의 조합이 pH 5.0에서 huPTH에 대해 양호한 안정성을 제공할 수 있음이 입증되었다. 그리고 제형 #2, #8, #12를 제외하고 모든 제형이 2주 동안 안정적이다. huPTH 안정성에 대한 이러한 L-Met 효과는 새로운 발견이다.
실시예 4
Tween 20 및 Tween 80이 huPTH의 안정성에 미치는 영향.
이 실시예에서는 실시예 1-3에서 시험된 다양한 제형의 안정성에 대한 Tween 20(T20) 또는 Tween 80(T80)의 효과를 평가하였다. 표 4는 이 실시예에서 초기에 시험된 제형의 요약을 제공한다.
표 4
0.01% T20, 150 mM NaCl, 10 mM NaOAC, pH 5.0
0.1% T20, 150 mM NaCl, 10 mM NaOAC, pH 5.0
0.01% T80, 150 mM NaCl, 10 mM NaOAC, pH 5.0
0.1% T80, 150 mM NaCl, 10 mM NaOAC, pH 5.0
37℃에서 RP-HPLC를 수행한 결과를 도 21에 도시하였다. 5일 후 37℃에서 제형의 안정성을 도 22에 도시하였다. 그 결과는 Tween 80이 Tween 20보다 PTH에서 더 많은 열화(degradation)를 유발함을 입증하였다. 사실, 0.01%(v/v) Tween 80은 0.1%(v/v) Tween 20보다 더 많은 열화를 유발하였다. 관찰된 열화는 주로 산화이다.
두번째 연구에서는 표 5에 나열된 제형을 평가했다.
표 5
150 mM NaCl, 10 mM 메티오닌, 10 mM NaOAc, 0.01% Tween 20
150 mM NaCl, 10 mM 메티오닌, 10 mM NaOAc, 0.01% Tween 80
100 mM NaCl, 50 mM 메티오닌, 10 mM NaOAc, 0.01% Tween 20
100 mM NaCl, 50 mM 메티오닌, 10 mM NaOAc, 0.01% Tween 80
50 mM NaCl, 100 mM 메티오닌, 10 mM NaOAc, 0.01% Tween 20
50 mM NaCl, 100 mM 메티오닌, 10 mM NaOAc, 0.01% Tween 80
1주에 4℃, 25℃ 및 37℃에서 제형의 안정성을 도 23 내지 25에 도시하였다. 4℃, 25℃ 및 37℃에서 수행된 RP-HPLC, CEX-HPLC 및 SEC-HPLC의 결과를 도 26 내지 34에 도시하였다. 이러한 결과는, Tween 80 유도 산화를 방지하기 위해 L-Met 농도를 10mM에서 50-100mM으로 증가시킬 필요가 있고, L-Met 농도의 증가는 huPTH 안정성의 보호 효과로 이어지며, 50mM 이상에서 L-Met의 보호 효과가 극대화된 것으로 보인다는 점을 입증한다.
실시예 5
huPTH의 안정성에 대한 L-Met 및 EDTA 조합의 평가
이 실시예는 huPTH의 안정성에 대한 L-Met 및 EDTA의 다양한 조합의 효과를 평가하였다. 표 6은 이 실시예에서 초기에 시험된 제형의 요약을 제공한다.
표 6
10 mM 시트르산나트륨, 50 mM L-Met, 5 mM EDTA, pH 5.0, 4% 소르비톨 0.01% 폴리소르베이트 20
10 mM 시트르산나트륨, 50 mM L-Met, 5 mM EDTA, pH 5.0, 100 mM NaCl, 0.01%폴리소르베이트 20
10 mM 시트르산나트륨, 50 mM L-Met, 10 mM EDTA, pH 5.0, 4% 소르비톨 0.01% 폴리소르베이트 20
10 mM 시트르산나트륨, 50 mM L-Met, 10 mM EDTA, pH 5.0, 100 mM NaCl, 0.01% 폴리소르베이트 20
10 mM 시트르산나트륨, 50 mM L-Met, 10 mM EDTA, pH 5.0, 100 mM NaCl, 0.01% 폴리소르베이트 80
10 mM 시트르산나트륨, 5 mM EDTA, pH 5.0, 4% 소르비톨, 0.01% 폴리소르베이트 20
10 mM 시트르산나트륨, 5 mM EDTA, pH 5.0, 100 mM NaCl, 0.01% 폴리소르베이트 20
10 mM 시트르산나트륨, 10 mM EDTA, pH 5.0, 4% 소르비톨, 0.01% 폴리소르베이트 20
10 mM 시트르산나트륨, 10 mM EDTA, pH 5.0, 100 mM NaCl, 0.01% 폴리소르베이트 20
10 mM 시트르산나트륨, 150 mM L-Met, pH 5.0, 0.01% 폴리소르베이트 20
10 mM 시트르산나트륨, 150 mM L-Met, 5 mM EDTA, pH 5.0, 0.01% 폴리소르베이트 20
4℃, 25℃ 및 37℃에서 수행된 RP-HPLC, CEX-HPLC 및 SEC-HPLC의 결과를 도 35 내지 43에 도시하였다. 이러한 결과는, 최적의 제형이 10mM 시트르산나트륨, 50mM L-Met, 10mM EDTA, pH 5.0, 100mM NaCl, 0.01% 폴리소르베이트 20을 포함한다는 것을 입증한다. 그리고 놀랍게도, 소르비톨과 EDTA의 조합이 25℃에서 huPTH를 안정화할 수 있는 것으로 보인다. 본 명세서에 기술된 발견에 기초하여, 잠재적인 공정 파라미터는 다음과 같을 수 있다: 제형 완충제로 폴리소르베이트 20을 희석하여 10%(v/v) 농도를 만들고; 제형 완충제에 대해 huPTH를 투석하여 원료의약품(DS)을 제조하고; 10%(v/v)의 폴리소르베이트 20를 원료의약품(DS)에 스파이크(spike)하여 완제의약품(DP)을 제조한다.
추가 방법
SEC-HPLC
SEC 컬럼: Phenomenex Yarra 3μm SECd200 LC 컬럼, 300x4.6 mm, s/no H15d152245
이동상: 0.3M NaCl, 50mM NaH2PO4 pH 7.0
유속: 0.3 ml/min
검출기: 220nm
컬럼 온도: 25 + 3℃
자동 샘플러: 5 + 2℃
주입: 1mg/ml 단백질 20μl
RP-HPLC
RP 컬럼: Phenomenex Jupiter 5μ C18 300A, 컬럼 250 x 4.6 mm, s/no 172611
이동상 A: 0.1% TFA, 99.9% ddH2O
이동상 B: 0.1% TFA, 99.9% ACN
유속: 0.5 ml/min
검출기: 220nm
컬럼 온도: 25 ± 3℃
자동 샘플러: 5 ± 2℃
주입: 1 mg/ml 단백질 20 μl
CEX-HPLC
CEX 컬럼: TOSOH Bioscience, LLC TSKgel SP-NPR 컬럼, 4.6 ID x 3.5cm, 2.5 μm, s/no K0054-81C
이동상 A: 38.75mM NaAc, 22.5% ACN pH 5.5
이동상 B: 46.25mM NaAc, 277.5mM NaCl, 7.5% ACN pH 5.1
유속: 0.3 ml/min
검출기: 220nm
컬럼 온도: 25 ± 3℃
자동 샘플러: 5 ± 2℃
주입: 1 mg/ml 단백질 20μl
서열 목록
본 출원은 "종이 사본"(PDF 파일) 형식의 서열 목록과 본 명세서에 제출된 컴퓨터 판독 가능 형식(ST25 형식 텍스트 파일)의 참조 서열(서열번호 1 - 서열번호 2)을 포함하는 파일을 포함한다. 서열 목록은 37 C.F.R. 1.822.에 정의된 아미노산에 대한 표준 3자리 코드를 사용하여 나타낸다.
SEQUENCE LISTING <110> Shandong Danhong Pharmaceutical Co., Ltd. <120> FORMULATIONS OF HUMAN PARATHYROID HORMONE (PTH) AND METHODS FOR PRODUCING SAME <130> CACHT1.0001WO <160> 2 <170> PatentIn version 3.5 <210> 1 <211> 84 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 1 Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn 1 5 10 15 Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp Val His 20 25 30 Asn Phe Val Ala Leu Gly Ala Pro Leu Ala Pro Arg Asp Ala Gly Ser 35 40 45 Gln Arg Pro Arg Lys Lys Glu Asp Asn Val Leu Val Glu Ser His Glu 50 55 60 Lys Ser Leu Gly Glu Ala Asp Lys Ala Asp Val Asn Val Leu Thr Lys 65 70 75 80 Ala Lys Ser Gln <210> 2 <211> 34 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 2 Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn 1 5 10 15 Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp Val His 20 25 30 Asn Phe

Claims (14)

  1. (a) 치료학적 유효량의 인간 부갑상선 호르몬(PTH); (b) 용액의 pH 범위를 3 내지 6으로 유지하기 위한 완충제; (c) 유효량의 하나 이상의 안정화제; (d) 삼투 조절제(tonicity modifier); 및 (e) 잔부로서 물을 포함하는 수성 약제학적 제형으로서, 상기 용액은 멸균되고 인간 환자에게 비경구 투여할 준비가 되어 있는, 수성 약제학적 제형.
  2. 제1항에 있어서,
    하나 이상의 안정화제가 당, 염, 계면활성제, 단백질, 카오트로픽제, 지질 및 아미노산으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인, 제형.
  3. 제2항에 있어서,
    하나 이상의 안정화제가 만니톨, 글리신, 글리세롤, 소르비톨, 이노시톨 및 다가 알코올, 및 프로필렌 글리콜 또는 이들의 혼합물로 이루어진 군으로부터 선택되는 폴리올인, 제형.
  4. 제2항에 있어서,
    하나 이상의 안정화제가 폴리소르베이트 20, 폴리소르베이트 40, 폴리소르베이트 60 및 폴리소르베이트 80으로 이루어진 군으로부터 선택되는 비이온성 계면활성제인, 제형.
  5. 제2항에 있어서,
    하나 이상의 안정화제가 글리신, 알라닌, 세린, 아스파르트산, 글루탐산, 트레오닌, 트립토판, 라이신, 히드록시 라이신, 히스티딘, 아르기닌, 시스틴, 시스테인, 메티오닌, 페닐알라닌, 류신, 이소류신 아미노산 및 이들의 유도체로 이루어진 군으로부터 선택되는 아미노산인, 제형.
  6. 제5항에 있어서,
    상기 아미노산이 L-메티오닌인, 제형.
  7. 제2항에 있어서,
    하나 이상의 안정화제가 EDTA, DTPA 및 EGTA로 이루어진 군으로부터 선택되는 킬레이터인, 제형.
  8. 제2항에 있어서,
    상기 삼투 조절제가 염화나트륨, 염화칼륨, 만니톨, 수크로스, 덱스트로스, 소르비톨 및 글리세린으로 이루어진 군으로부터 선택되는, 제형.
  9. 제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 있어서,
    인간 PTH가 서열번호 1에 기재된 아미노산 서열을 포함하는, 제형.
  10. 제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 있어서,
    인간 PTH가 서열번호 2에 기재된 아미노산 서열을 포함하는, 제형.
  11. 제1항 내지 제10항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 제형의 pH가 약 4.5 내지 5.5인, 제형.
  12. 제1항 내지 제11항 중 어느 한 항에 있어서,
    인간 PTH가 0.1 mg/mL 내지 10 mg/mL의 농도로 제형에 존재하는, 제형.
  13. 제1항 내지 제12항 중 어느 한 항에 있어서,
    비경구적으로 허용되는 보존제를 추가로 포함하는, 제형.
  14. 1 mg/mL 인간 PTH, 10 mM 시트르산나트륨, 50 mM L-Met, 10 mM EDTA, 100 mM NaCl, 0.01% 폴리소르베이트 20을 포함하는 안정한 수성 제형으로서, 상기 제형의 pH는 약 5.0인, 안정한 수성 제형.
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