TW201837046A - 伊克薩姆畢（Ｉｘａｚｏｍｉｂ）檸檬酸中間體之製造方法以及使用其製造之伊克薩姆畢檸檬酸 - Google Patents

Abstract

本發明為一種伊克薩姆畢(Ixazomib)檸檬酸中間體之製造方法，可減少伊克薩姆畢檸檬酸中間體之雜質化合物，提高純度，而使用本發明之伊克薩姆畢檸檬酸中間體所製備之伊克薩姆畢檸檬酸亦具有高純度，可作為醫藥組成物之活性成分，係為一種蛋白酶抑制劑，以治療疾病。

Description

伊克薩姆畢(Ixazomib)檸檬酸中間體之製造方法以及使用其製造之伊克 薩姆畢檸檬酸

本發明係關於一種作為蛋白酶抑制劑之硼酸酯化合物，特別係提供一種高純度之硼酸酯化合物中間體的製備方法，並經由硼酸酯化合物中間體製備該硼酸酯化合物，作為醫藥組成物之活性成分。

蛋白酶抑制劑具有治療腫瘤的效果，其中硼酸酯化合物被發現為一種有效的蛋白酶抑制劑，能夠降低細胞中的活化轉錄因子NF-κB的活性；由於NF-κB在體內過度反應時，會引起多種疾病產生，因此當NF-κB受到抑制時，即能抑制腫瘤細胞的生長。

近年，Ninlaro藥廠所製造的伊克薩姆畢(Ixazomib)係美國食品藥物管理局唯一認可的口服蛋白酶抑制劑，其係一種硼酸酯化合物。由於伊克薩姆畢為口服用藥，能使病患在出院時治療使用，無須回醫院注射蛋白酶抑制劑，因此深受病患所青睞。伊克薩姆畢能夠阻斷多發性骨髓瘤細胞的酶，而近期也陸續有其他臨床試驗研究其治療他類腫瘤的治療效果，係為一種有效的蛋白酶抑制劑。

然而，本發明者認為雖然伊克薩姆畢(Ixazomib)能有效治療腫瘤，作為醫藥組成物之活性成分，但由於硼酸酯化合物的結構本身會對光敏感，易受光照後而分解，產生脫水反應，而保存上需要加入穩定劑或螯合劑以維持穩定，且活性成份中最好不應存有雜質，這些雜質可能造成病患者在服用時有安全上的隱憂，更可能降低治療的效果。並且，在歐洲藥典ICH Q3A中明確規定，藥品中雜質含量容許範圍為小於0.10%；若介於0.10%至0.15%時，則須鑑定該雜質；若高於0.15%時，需做毒理測試且合格，才可允許該雜質存在。

鑒於上述之問題，本發明者認為若能在製造伊克薩姆畢的過程中先將雜質降低，即可間接地減少加入保存劑等以及最終製備成醫藥組成物之雜質，雖然要完全降低這些雜質是不現實的，但降低雜質的限度為首要目標。因此，本發明提供一種增加伊克薩姆畢檸檬酸中間體(本發明之式(I)化合物)的純度之製造方法，藉由先降低伊克薩姆畢檸檬酸中間體之雜質，而後使用該伊克薩姆畢檸檬酸中間體製備伊克薩姆畢檸檬酸(本發明之式(II)化合物)，即可得到高純度及低雜質之伊克薩姆畢檸檬酸，使其作為原料藥及製劑的生產時可具有保障，減少患者服用時因存有雜質之安全上疑慮。

是以，本發明提供一種經純化式(I)化合物，其係包括將式(I)化合物粗品在良性及不良溶劑中使用吸附劑進行層析所獲得，且在HPLC量測結果中，相對保留時間為0.79之雜質化合物的波峰面積係0.10%以下

於較佳實施例中，該經純化式(I)化合物之純度係98.0%以上。

於較佳實施例中，該吸附劑係至少一種選自係矽粉、礬土、氫氧化鈣、聚醯胺、矽藻土、磷酸鈣、氧化鋁及活性碳所構成之群組。

於較佳實施例中，該式(I)化合物粗品及吸附劑的比例係1：20~1：100。

於較佳實施例中，該良性溶劑係至少一種選自甲醇、乙醇及二氯甲烷所構成之群組，該不良溶劑係至少一種選自乙酸乙酯、正戊烷及丙酮所構成之群組。

本發明另提供一種上述之經純化式(I)化合物之製備方法，其包含將式(I)化合物粗品在良性溶劑及不良溶劑中使用吸附劑進行層析，且經純化式(I)化合物在HPLC量測結果中，相對保留時間為0.79之雜質化合物的波峰面積係0.10%以下。

本發明另提供一種式(II)化合物，其係將包括上述之經純化式(I)化合物及檸檬酸在溶劑中反應析晶後所獲得，且在HPLC量測結果下，相對保留時間為0.79之雜質化合物的波峰面積係0.10%以下

於較佳實施例中，該式(II)化合物之純度為99.0%以上。

於較佳實施例中，該溶劑係至少一種選自乙酸乙酯、丙酮、四氫呋喃及乙腈所構成之群組。

本發明之再一方面係提供一種式(II)化合物之製備方法，其包含將式(I)化合物粗品在良性溶劑及不良溶劑中使用吸附劑進行層析，並將該經純化式(I)化合物及檸檬酸在溶劑中反應析晶後獲得式(II)化合物。

圖1為本發明實施例1中式(I)化合物之HPLC圖譜。

圖2為本發明比較例1中式(I)化合物之HPLC圖譜。

圖3為本發明實施例2中式(II)化合物之HPLC圖譜。

圖4為本發明比較例2中式(II)化合物之HPLC圖譜。

本發明中「相對保留時間(RRT)」係指在HPLC量測結果中，某峰相對於主峰的保留時間之比，例如主峰的保留時間為1分鐘，另一峰的保留時間是兩分鐘，則後者的相對保留時間(RRT)為是2；而本發明中「相對保留時間為0.79之雜質化合物的波峰面積」係指在相對保留時間為0.79時，所出現雜質化合物之波峰下面積。

本發明中「相對保留時間為0.79之雜質化合物」係伊克薩姆畢(ixazomib)檸檬酸中間體之式(I)化合物在製造時所產生的雜質化合物。

本發明中「式(I)化合物粗品」係指式(I)化合物未經過任何純化(例如層析或萃取)過程，仍帶有大量雜質化合物之式(I)化合物，純度一般低於90%以下。

本發明中「純度」係指利用HPLC方法量測結果中，該式(I)化合物或式(II)化合物之主峰的該波鋒下面積百分比。

本發明提供一種經純化式(I)化合物，其係包括將式(I)化合物粗品在良性及不良溶劑中使用吸附劑進行層析所獲得，且在HPLC量測結果中，相對保留時間為0.79之雜質化合物的波峰面積係0.10%以下。

本發明另提供一種上述之式(I)化合物之製備方法，其包含將式(I)化合物粗品在溶劑中使用吸附劑進行層析，且式(I)化合物在HPLC量測結果中，相對保留時間為0.79之雜質化合物的波峰面積係0.10%以下。

上述之式(I)化合物之純度係98.0%以上，較佳為99.0%以上，更佳為99.5%以上，最佳為99.8%以上。

上述吸附劑係至少一種選自係矽粉、礬土、氫氧化鈣、聚醯胺、矽藻土、磷酸鈣、氧化鋁及活性碳所構成之群組，且以矽粉為優選。

上述之該式(I)化合物粗品及吸附劑的比例係1：20~1：100，較佳為1：30，更佳為1：40，最佳為1：50。

上述之溶劑包含良性溶劑及不良溶劑的比例係係約2：8~4：6，例如2.5：7.5、3：7、3.5：6.5或4：6，且以3：7為優選；其中該良性溶劑係至少一種選自甲醇、乙醇及二氯甲烷所構成之群組，且以甲醇為優選；該不良溶劑係至少一種選自乙酸乙酯、正戊烷及丙酮所構成之群組，且以丙酮為優選。

本發明另提供一種式(II)化合物，其係將上述之式(I)化合物及檸檬酸，其比例係1：0.90~1：1.2，較佳為1：1，更佳為1：0.95，在溶劑中反應析晶後所獲得，且在HPLC量測結果下，相對保留時間為0.79之雜質化合 物的波峰面積係0.10%以下

上述之溶劑係至少一種選自乙酸乙酯、丙酮、四氫呋喃及乙腈所構成之群組，且以乙酸乙酯、四氫呋喃為優選。

上述之析晶過程中，溫度為20~75℃，例如20℃、25℃、30℃、35℃、40℃、45℃、50℃、55℃、60℃、65℃、70℃、74℃、75℃，且以70℃及74℃為優選。

本發明另提供一種作為蛋白質抑制劑之醫藥組合物，其包含上述之式(II)化合物或其醫藥上可接受鹽類。

上述之醫藥組成物可添加通用之載劑、賦形劑、稀釋劑、分散液、懸浮助劑、表面活性劑、pH調節劑、等張劑、增稠劑、乳化劑、防腐劑、固體黏合劑、潤滑劑或其他醫藥用添加劑；另外，其可由通用之方法所製造，例如粒化法、混合法、溶解法、囊封法、凍乾法或乳化法等。該醫藥組成物；另外，其可以為通用之藥物形式，包括顆粒、沈澱物或微粒、粉末(包含冷凍乾燥、旋轉乾燥或噴霧乾燥粉末、非晶形粉末)、糖漿、栓劑、注射液、乳液、片劑、錠劑、膠囊、懸浮液或溶液等，且優選為口服投予之藥物形式。

[具體實施例]

以下將利用具體實施例特別描寫本發明所揭示之內容。然而，本發明所揭示之內容不限制於下列範例；本發明所屬技術領域中具有 通常知識者可在不背離本發明之精神或範疇的情況下對本文所示之實施例進行修改及變化，仍屬於本發明之範圍。

以下各實驗中之HPLC量測條件：

■高效液相層析儀：waters 2695

■管柱：XSelect HSS C18 3.5um-4.6*150mm

■柱溫：25℃

■流量為：0.7mL/min，主峰保留時間約為4.4min。

■檢測波長：230nm

■流動相：A：0.1%的磷酸；B：乙腈

■梯度條件如下表所示：

製備例. 式(I)化合物粗品(伊克薩姆畢檸檬酸中間體粗品)

取12g氫氧化鈉及18g甘胺酸於120mL試劑水中後，滴入15mL 2,5-二氯苯甲醯氯，靜置於25℃下1小時。使用125mL 2.0M鹽酸溶液酸化該混合物後產生沉澱物，並於5℃下真空過濾收集沉澱物。

在5℃下，取6.10g該沉澱物及8.34g TBTU偶合劑(O-苯并三氮唑-N,N,N',N'-四甲基脲四氟硼酸酯)溶解於40mL二甲基甲醯胺中後，添加9.35g(1R)-3-甲基-1-[(3aS,4S,6S,7aR)-3a,5,5-三甲基六氫-4,6-亞甲基-1,3,2-苯並二氧雜硼烷-2-基]丁-1-胺．三氟乙酸於該混合物中，靜置2小時後添加13mL N,N'-二異丙基乙胺，維持55℃下靜置40分鐘後，使用90mL乙酸乙酯稀釋該混合物，依序使用不同鹽類洗滌該有機層使其濃縮；不同鹽類溶液依序為150mL 5%氯化鈉溶液洗滌1次，40mL 10%氯化鈉溶液洗滌2次，40mL 2%碳酸鉀溶液洗滌1次，4mL 1%磷酸溶液洗滌1次，最後40mL 10%氯化鈉溶液洗滌1次。隨後，加入40mL庚烷稀釋該溶液，產生白色固體。

取12.2g該白色固體溶解於250mL甲醇及己烷(1：1)溶液中，添加30mL 1N鹽酸溶液及6.5g(2-甲基丙基)硼酸，隔夜攪拌該混合物。使用55mL庚烷洗滌該混合物2次，以濃縮該混合物之甲醇層。隨後，加入85mL二氯甲烷，使該混合物進入二氯甲烷之有機層，並使用25g硫酸鎂乾燥及蒸發，使水層形成厚的油狀層後，使用50mL庚烷沉澱並收集沉澱物，該沉澱物即為式(I)化合物粗品；經HPLC量測，該式(I)化合物粗品純度為85.5%，相對保留時間為0.79之雜質化合物的波峰面積係0.19%。

實施例1. 本發明之式(I)化合物(伊克薩姆畢檸檬酸中間體)之製造方法

將製備例的3.1g式(I)化合物粗品在450mL甲醇及1050mL丙酮(3：7)中，利用120mL矽粉進行層析，得到式(I)化合物。經HPLC量測，結果如表1及圖1所示，該式(I)化合物純度約98.53%，相對保留時間為0.79之雜質化合物的波峰面積係0.03%。

比較例1. 一般式(I)化合物(伊克薩姆畢檸檬酸中間體)之製造方法

將製備例的3.1g式(I)化合物粗品溶於10mL二氯甲烷溶液，添加12mL 2N氫氧化鈉溶液，隨後添加18mL二氯甲烷洗滌該含有氫氧化鈉溶液2次後，添加26mL 1N鹽酸溶液酸化。使用20mL二氯甲烷稀釋該混合物使其分層後，使用10mL二氯甲烷洗滌3次分層後的水層，將混有二氯甲烷的水層萃取出，得到式(I)化合物；經HPLC量測，結果如表2及圖2所示，該式(I)化合物的純度約93.5%，相對保留時間為0.79之雜質化合物的波峰面積係0.18%。

實施例2.本發明之式(II)化合物(伊克薩姆畢檸檬酸)之製造方法

將1.0g實施例1之式(I)化合物及0.56g檸檬酸加入在36mL乙酸乙酯溶液進行反應後，得到式(II)化合物，並使用HPLC量測，結果如表3及圖3所示，相對保留時間為0.79之雜質化合物的波峰面積為0.03%，純度為99.9%。

比較例2. 一般式(II)化合物(伊克薩姆畢檸檬酸)之製造方法

將1.0g比較例1之式(I)化合物及0.56g檸檬酸加入在36mL乙酸乙酯溶液進行反應後，得到式(II)化合物，並使用HPLC量測，結果如表4及圖4所示，相對保留時間為0.79之雜質化合物的波峰面積為0.15%，純度為99.65%。

表4

結果顯示，相較於比較例1使用酸鹼溶液萃取，實施例1使用良性溶劑及不良溶劑及層析進行純化，能得到純度較高及相對保留時間為0.79之雜質化合物之波鋒下面積較低的式(I)化合物，進而在後續製備式(II)化合物時，亦能有高純度及相對保留時間為0.79之雜質化合物之波鋒下面積較低之特性。

由此可知，本發明之純化式(I)化合物及式(II)化合物具有較高之純度及低雜質，能作為蛋白酶抑制劑之藥物組成物的活性成分。

Claims (7)

1. 一種經純化式(I)化合物，其係包括將式(I)化合物粗品在良性溶劑及不良溶劑中使用吸附劑進行層析所獲得，且在HPLC量測結果中，相對保留時間為0.79之雜質化合物的波峰面積係0.10%以下
2. 如請求項1之經純化式(I)化合物，其中該經純化式(I)化合物之純度係98.0%以上。
3. 如請求項1之經純化式(I)化合物，其中該吸附劑係至少一種選自矽粉、礬土、氫氧化鈣、聚醯胺、矽藻土、磷酸鈣、氧化鋁及活性碳所構成之群組。
4. 如請求項3之經純化式(I)化合物，其中該式(I)化合物粗品及吸附劑之比例係1：20~1：100。
5. 如請求項4所請之經純化式(I)化合物，其中該良性溶劑係至少一種選自甲醇、乙醇及二氯甲烷所構成之群組，該不良溶劑係至少一種選自乙酸乙酯、正戊烷及丙酮所構成之群組。
6. 一種如請求項1至5任一項之經純化式(I)化合物之製備方法，其包含將式(I)化合物粗品在良性溶劑及不良溶劑中使用吸附劑進行層析，且該經純化式(I)化合物在HPLC量測結果中，相對保留時間為0.79之雜質化合物的波峰面積係0.10%以下。
7. 一種式(II)化合物，其係將包括如請求項1至5任一項之經純化式(I)化合物 與檸檬酸反應後獲得