TW201828934A - 含有鞣酸的組合物及其用途 - Google Patents

Abstract

本發明提供含鞣酸(特別是具有多於三個沒食子醯基團之鞣酸)之組合物(例如：藥學組合物、營養組合物或醫療食品組合物)、製備該組合物之方法、以及其用於治療肥胖、高血脂症、糖尿病或中樞神經系統疾病之用途。

Description

含有鞣酸的組合物及其用途

本發明是關於一種含有鞣酸的組合物及其用途。

鞣質(tannins)是一群存在於多種植物(例如鹽膚木(Rhus chinensis )、鹽骨木(Rhus javanica )、鹽麩子(Rhus semialata )、西西里漆樹(Rhus coriaria )、青麩楊(Rhus potaninii )、紅麩楊(Rhus punjabensis var. sinica (Diels) Rehder & E.H. Wilson)、茶樹(Camellia sinensis )、漿果、胭脂樹(Bixa orellana )、葡萄(Vitis vinifera )、石榴(Punica granatum )、沒食子櫟(Quercus infectoria )、土耳其櫟(Quercus cerris )、黑荊(Acacia mearnsii )、花旗松(Pseudotsuga menziesii )、刺雲實(Caesalpinia spinosa )、臺灣水青岡(Fagus hayata Palib. ex Hayata)、或豬腳楠(Machilus thunbergii Sieb. & Zucc.)等)中的天然化合物。現今鞣質有三種主要的類別，分別為含有沒食子酸作為基本單位的水解型鞣質(也稱為鞣酸)、含有黃酮作為基本單位的縮合鞣質以及含有間苯三酚(phloroglucinol)作為基本單位的褐藻多酚(phlorotannins)。鞣質可作為一種工業塑合板黏著劑且廣泛地用來生產防蝕底漆或樹脂。同時，也有報導指出鞣質可對人類健康具有各種影響。

D-胺基酸氧化酶(D-amino acid oxidase, DAAO)是一種可將D-胺基酸氧化成相應之亞胺酸的過氧化小體酶(peroxisomal enzyme)。已知DAAO與大腦D-胺基酸(包含D-絲胺酸)的新陳代謝以及麩胺酸神經傳導的調節有關。因此，DAAO是治療與D-絲胺酸及/或麩胺酸神經傳導有關的中樞神經系統(CNS)疾病之標的。

本揭示內容是基於鞣酸(特別是具有多於三個沒食子醯基團(galloyl moiety)的鞣酸)可有效地抑制DAAO的活性而發展出來的。承上所述，含有這類鞣酸的組合物對治療與DAAO及/或麩胺酸神經傳導相關的疾病與病症(例如肥胖、糖尿病、高血脂症以及CNS疾病)有益。

據此，本揭示內容一態樣是提供一種組合物(例如：一藥學組合物、一保健食品或醫療食品)，其包括(i)多種鞣酸之混合物或其藥學上可接受的鹽，以及(ii)一載體，其中所述組合物實質上不含具有少於四個沒食子醯基團的鞣酸。在一些實施方式中，在組合物中的鞣酸混合物包含具有4至10個沒食子醯基團(例如5-10個沒食子醯基團、5-12個沒食子醯基團、或8-12個沒食子醯基團)的鞣酸。在一些實施方式中，鞣酸混合物在組合物中至少占總鞣酸含量之重量百分比95%。在一些實施方式中，本揭示內容的鞣酸是組合物中唯一的鞣酸成分。

在一些實施方式中，本揭示內容的組合物可包含不超過20%(例如：＜15%，＜10%或＜5%)的鞣酸，該些鞣酸具有1至5個沒食子醯基團。組合物或者可包含、或另外可包含至少50%(例如：＞60%、＞70%、或＞80%)的鞣酸，該些鞣酸具有6至12個沒食子醯基團(例如8至12個沒食子醯基團)。

在一些實施方式中，本文揭示的鞣酸至少源自於一植物來源，該植物來源包括但不限於：鹽膚木(Rhus chinensis )、鹽骨木(Rhus javanica )、鹽麩子(Rhus semialata )、西西里漆樹(Rhus coriaria )、青麩楊(Rhus potaninii )、紅麩楊(Rhus punjabensis var. sinica (Diels) Rehder & E.H. Wilson)、茶樹(Camellia sinensis )、漿果、胭脂樹(Bixa orellana )、葡萄(Vitis vinifera )、石榴(Punica granatum )、沒食子櫟(Quercus infectoria )、土耳其櫟(Quercus cerris )、黑荊(Acacia mearnsii )、花旗松(Pseudotsuga menziesii )、刺雲實(Caesalpinia spinosa )、臺灣水青岡(Fagus hayata Palib. ex Hayata)、或豬腳楠(Machilus thunbergii Sieb. & Zucc.)。

在一些實施方式中，本文揭示的鞣酸至少源自於一植物來源，該植物來源可為：鹽膚木(Rhus chinensis )、鹽骨木(Rhus javanica )、鹽麩子(Rhus semialata )、西西里漆樹(Rhus coriaria )、青麩楊(Rhus potaninii )、紅麩楊(Rhus punjabensis var. sinica (Diels) Rehder & E.H. Wilson)所組成之群組。

在一些實施方式中，本揭示內容的鞣酸是從需要有昆蟲於其上築巢的植物中取得，該築巢昆蟲包括但不限於：雲石紋癭蜂(Andricus kollari )、洋薊癭蜂(Andricus fecundatrix )、癭櫟癭蜂(Andricus quercuscalicis )、癭櫟癭蜂(Andricus quercuscalicis )、櫟蘋果癭蜂(Biorhiza pallida )、亮片癭蜂(Neuroterus quercusbaccarum )、平滑亮片癭蜂(Neuroterus albipes )、絲鈕扣癭蜂(Neuroterus numismalis )、櫻桃癭蜂(Cynips quercusfolii )、角倍蚜(Melaphis chinensis (Bell))、倍蛋蚜(Melaphis peitan Tsai et Tang)、圓角倍蚜(Nurudea sinica Tsai et Tang)、倍花蚜(Nurudea shiraii Matsumura)、紅倍花蚜(Nurudea rosea Matsumura)、紅小鐵棗蚜(Meitanaphis elongallis Tsai et Tang)、棗鐵倍蚜(Macrorhinarium ensigallis Tsai et Tang)、蛋鐵倍蚜(Macrorhinarium ovagallis Tsai et Tang))、鐵倍花蚜(Floraphis meitanensis Tsai et Tang)、黃毛小鐵棗蚜(Meitanaphis flavogallis Tang)、肚倍蚜(Kaburagia rhusicola Takagi)、蛋肚倍蚜(Kaburagia ovatihuicola Xiang)、棗鐵倍蚜(Kaburagia ensigallis Tsai et Tang)、蛋鐵倍蚜(Kaburagia ovogallis )、肚倍蚜(Kaburagia thusicola Takagi)、米倍蚜(Meitanaphis microgallis Xiang)、或周氏倍花蚜(Floraphis choui Xiang)。

在一些實施方式中，本揭示內容的鞣酸是從需要有昆蟲於其上築巢的植物中取得，該築巢昆蟲包括但不限於：角倍蚜(Melaphis chinensis (Bell))、倍蛋蚜(Melaphis peitan Tsai et Tang)、圓角倍蚜(Nurudea sinica Tsai et Tang)、倍花蚜(Nurudea shiraii matsumura)、紅倍花蚜(Nurudea rosea Matsumura)、紅小鐵棗蚜(Meitanaphis elongallis Tsai et Tang)、棗鐵倍蚜(Macrorhinarium ensigallis Tsai et Tang)、蛋鐵倍蚜(Macrorhinarium ovagallis Tsai et Tang)、鐵倍花蚜(Floraphis meitanensis Tsai et Tang)、黃毛小鐵棗蚜(Meitanaphis flavogallis Tang)、肚倍蚜(Kaburagia rhusicola Takagi)、蛋肚倍蚜(Kaburagia ovatihuicola Xiang)、棗鐵倍蚜(Kaburagia ensigallis Tsai et Tang)、蛋鐵倍蚜(Kaburagia ovogallis )、肚倍蚜(Kaburagia thusicola Takagi)、米倍蚜(Meitanaphis microgallis Xiang)、或周氏倍花蚜(Floraphis choui Xiang)。

在某些實施方式中，本文描述的鞣酸來自五倍子，其選自於至少一種需要有昆蟲於其上築巢的植物，包括中國肚倍(Chinese belly-shaped gallnut)、角倍(horned gallnut)、硬劍倍(hard ensiform gallnut)、蛋硬劍倍(egg-hard ensiform gallnut)、以及倍花(inflorescence gallnut)。

在另一態樣中，本揭示內容提供的組合物包含(i)一鞣酸或其之一種可接受的鹽、以及(ii)一載體，其中該鞣酸含有4、5、6、7、8、9、10、11、或12個沒食子醯基團。鞣酸在組合物總鞣酸含量中占至少90% (w/w)。在一些實例中，鞣酸在組合物的總鞣酸含量中占至少95%(重量百分比)。

本揭示內容還提供用於製備鞣酸組合物之方法。所述方法包含(i)提供一植物 (例如：本文所描述的任何植物來源) 的五倍子；(ii)研磨該五倍子以形成五倍子粉；(iii)使用第一溶劑萃取五倍子粉以產生一第一鞣酸萃取物；以及(iv) 使該第一鞣酸萃取物接觸活性碳、CaSO₄ 、MgSO₄ 、或其組合，以移除可吸附在活性碳或被CaSO₄ 或MgSO₄ 沉澱的物質，藉此產生第一鞣酸組合物。亦或是，所述方法更包括步驟(v)在第二溶劑中溶解該第一鞣酸組合物以形成一溶液；步驟(vi)添加二氯甲烷(CH₂ Cl₂ ) 或二氯乙烷至該溶液中；以及步驟(vii)收集所形成的固體物質，藉此產生一第二鞣酸組合物。在步驟(iii)所使用的第一溶劑的實例包含，但不限於，丙酮、甲乙酮、乙酸乙酯、乙醇、異丙醇、四氫呋喃、1,4-二㗁烷、己烷或其組合。在步驟(v)所使用的第二溶劑之實例包括，但不限於，丙酮、乙腈、乙酸乙酯、甲乙酮或其組合。

在某些實施方式中，本發明的任何製備方法可進一步包含移除具有2至5個沒食子醯基團之鞣酸的步驟，以得到精製純化後的鞣酸萃取物。移除步驟是藉由混合第一鞣酸萃取物與一溶劑來進行，其中該溶劑為自以下(i)與(ii)兩群溶劑中各取其中之一組合而成(其中(i)為丙酮、乙腈、甲乙酮或乙酸乙酯，以及(ii)為戊烷、己烷、或庚烷)；以形成兩有機層並收集該油層(oiler layer)以產生精製純化後的鞣酸萃取物。在某些情況下，溶劑包含甲乙酮/己烷或乙酸乙酯/己烷。在某些實例中，移除步驟可在步驟(iii)後及步驟(iv)前執行。

在某些實施方式中，本揭示內容的任何製造方法可在步驟(iii)之前以及步驟(ii)之後進一步包含令五倍子粉通過20至60網目之篩網的步驟。

在某些實施方式中，本發明揭示之任何組合物是一藥學組合物，其包含一藥學上可接受的載體。這類的藥學組合物更包含一第二治療劑。

在某些實例中，第二治療劑是抗肥胖劑，其包含但不限於：奧利司他(orlistat)、氯卡色林(lorcaserin)、西布曲明(sibutramine)、利莫那班(rimonabant)、每福敏(metformin)、艾賽那肽(exenatide)、普蘭林肽(pramlintide)、苯丁胺(phentermine)、氟苯丙胺(fenfluramine)、右芬氟拉明(dexfenfluramine)、托比拉邁(topiramate)、二硝基苯酚(dinitrophenol)、安非他酮(bupropion)以及唑尼沙胺(zonisamide)。

在其他實例中，第二治療劑是用於治療一中樞神經系統(CNS)疾病之藥劑。這類的藥劑可以是抗憂鬱劑、抗精神病藥、精神振奮劑、情緒穩定劑、抗焦慮藥、用於治療注意力缺失過動疾患(ADHD)之藥劑或是用於治療阿茲海默症(AD)之藥劑。

抗精神病藥之實例包含但不限於：丁醯苯(butyrophenone)、啡噻𠯤(phenothiazine)、氟奮乃靜(fluphenazine)、奮乃靜(perphenazine)、普氯拉嗪(prochlorperazine)、硫利達嗪(thioridazine)、三氟拉嗪(trifluoperazine)、美索達嗪(mesoridazine)、普馬嗪(promazine)、三氟丙嗪(triflupromazine)、左美丙嗪(levomepromazine)、異丙嗪(promethazine)、硫雜蒽(thioxanthene)、氯丙硫蒽(chlorprothixene)、氟哌噻噸(flupenthixol)、替沃噻噸(thiothixene)、氯哌噻噸(zuclopenthixol)、氯氮平(clozapine)、奥氮平(olanzapine)、利培酮(risperidone)、喹硫平(quetiapine)、齊拉西酮(ziprasidone)、氨磺必利(amisulpride)、阿塞那平(asenapine)、帕潘立酮(paliperidone)、阿立哌唑(aripiprazole)、拉莫三嗪(lamotrigine)、美金胺(memantine)、大麻二酚(cannabidiol)、LY2140023、達羅哌丁醇(droperidol)、呱咪清(pimozide)、布他哌嗪(butaperazine)、丙烯奮乃靜(carphenazine)、瑞莫必利(remoxipride)、哌西他嗪(piperacetazine)、舒必利(sulpiride)、阿坎酸鹽(acamprosate)以及丁苯那嗪(tetrabenazine)。

抗憂鬱劑可以是單胺氧化酶抑制劑(monoamine oxidase inhibitor, MAOI)、三環抗鬱劑(tricyclic antidepressant, TCA)、四環抗憂鬱劑(tetracyclin antidepressant, TeCA)、選擇性血清素再攝取抑制劑(selective serotonin reuptake inhibitor, SSRI)、正腎上腺素及專一性血清素抗憂鬱劑 (noradrendegic and specific serotonergic antidepressant, NASSA)、正腎上腺素(去甲腎上腺素)再吸收抑制劑、正腎上腺素-多巴胺再吸收抑制劑、或血清素-正腎上腺素再吸收抑制劑(serotonin-norepinephrine reuptake inhibitor, SNRI)。實例包含但不限於：氟西汀(fluoxetine)、帕羅西汀(paroxetine)、依地普侖(escitalopram)、西酞普蘭(citalopram)、舍曲林(sertraline)、氟伏沙明(fluvoxamine)、萬拉法辛(venlafaxine)、米那普侖(milnacipram)、杜洛西汀(duloxetine)、米達紗賓(mirtazapine)、米塞林(mianserin)、瑞波西汀(reboxetine)、安非他酮(bupropion)、阿米替林(amitriptyline)、去甲替林(nortriptiline)、普羅替林(protriptyline)、地昔帕明(desipramine)、曲米帕明(trimipramine)、安莫散平(amoxapine)、安非他酮(bupropion)、可洛米普明(clomipramine)、地昔帕明(desipramine)、多慮平(doxepin)、異噁唑醯肼(isocarboxazid)、反苯環丙胺(tranylcypromine)、曲唑酮(trazodone)、萘法唑酮(nefazodone)、苯乙肼(phenelzine)、拉莫三嗪(lamatrogine)、鋰、托比拉邁(topiramate)、加巴噴丁(gabapentin)、卡巴馬平(carbamazepine)、奧卡西平(oxacarbazepine)、丙戊酸鹽(valporate)、馬普替林(maprotiline)、溴法羅明(brofaromine)、吉哌隆(gepirone)、嗎氯苯甲醯胺(moclobemide)、異菸肼(isoniazid)、以及異丙菸肼(iproniazid)。

本揭示內容的任何藥學組合物可用於口服給藥或用於非口服給藥途徑。

在其他實施方式中，組合物可以是健康食品產品(例如營養組合物)或一醫療級食品產品，其可包含可食用載體。這類的組合物可製備為錠劑、膠囊、軟咀嚼片、或膠體。

在另一態樣中，本揭示內容提供的方法可用於治療與DAAO相關之疾病或病症，該方法包含對一亟需治療之個體投予一有效量之組合物(例如：藥學組合物、保健食品產品、或醫療食品產品)，所述組合物包含(i)一或多個鞣酸或其藥學上可接受的鹽，以及(ii)藥學上可接受的載體；其中該藥學組合物是實質上不含縮合鞣質及/或褐藻多酚。在某些實施方式中，可藉由本揭示內容提供之方法治療的標的疾病是中樞神經系統(CNS)疾病，其可以為疼痛、精神疾病、焦慮症、憂鬱症、自殺意念及/或行為、自閉症、OCD、躁症(mania)、妥瑞氏症、失智症以及失智症的精神行為症狀(behavior and psychological symptoms of dementia，BPSD)。

在某些實施方式中，在本揭示內容之治療方法中使用的組合物可以是本文的藥學組合物、保健食品產物及/或醫療食品產物之任一種。這類的組合物也可用於治療肥胖。在某些實例中，亟需治療之個體是患有或疑似患有肥胖的人類病患。在其他實例中，個體是曾接受過或正在進行肥胖治療的人類患者。

在某些實施方案中，本文描述的組合物是用於治療中樞神經系統(CNS)疾病。示例性的中樞神經系統(CNS)疾病包含但不限於，ADHD、精神分裂症(schizophrenia)、疼痛(pain)、憂鬱症(depression)、自殺意念及/或行為(suicidal ideation and/or behavior)、躁鬱症(bipolar disorder)、抽搐症(tic disorder)、創傷後精神壓力障礙(post-traumatic stress disorder)、焦慮症(anxiety)、社交焦慮症(social anxiety disorder)、恐慌症(panic disorder)、自閉症(autism)、亞斯伯格症(Asperger’s disorder)、強迫症(obsessive-compulsive disorder，OCD)、學習障礙(learning disorder)、妥瑞氏症(Tourette’s syndrome)、輕度知能障礙(mild cognitive impairment)、失智症(dementia)、血管型失智症(vascular dementia)、多發性梗塞失智症(multi-infarct dementia)、阿茲海默症(Alzheimer’s disorder)、額顳葉失智症(frontotemporal dementia)、雷維體失智症(dementia with Lewy bodies)、帕金森氏症(Parkinson’s disorder)、亨丁頓氏症(Huntington’s disease)、肌肉萎縮性脊髓側索硬化症(amyotrophic lateral sclerosis)、夜間遺尿症(nocturnal enuresis)、眼瞼痙攣(blepharospasm)以及非癲癇發作(non-epileptic seizure)。在某些實例中，亟需治療之個體是患有或疑似患有中樞神經系統疾病的人類病患。在其他實例中，個體是受過或正在接受中樞神經系統疾病之治療的人類病患。

本發明之範疇也包含(i)任何本文描述用以治療與DAAO及/或麩胺酸神經傳導相關之疾病/病症(諸如本文揭示的該些疾病)、或是用於治療肥胖、高血脂症、糖尿病、或中樞神經系統(CNS)疾病的含鞣酸之組合物(例如：藥學組合物、保健食品產物、醫療食品產物)，以及(ii)該些組合物用於製備以治療任何標的疾病/病症(諸如本文揭示的該些疾病)的藥劑的用途。

以下說明將詳細闡明本發明的一或多個實施方式。在參閱下文圖式、實施方式以及後附的申請專利範圍之後，本發明所屬技術領域中具有通常知識者當可輕易瞭解本發明之基本精神及其他發明目的，以及本發明所採用之技術手段與實施態樣。

鞣酸(tannic acids)是存在於多種植物中的鞣質亞群的總稱。從植物萃取的鞣酸多半是含有2至12個沒食子醯基團的聚沒食子醯基葡萄糖(polygalloyl glucose)或聚沒食子醯基醯奎尼酸酯(polygalloyl quinic acid ester)之混合物。以下提供含有10個沒食子醯基團(該些沒食子醯基團連接至葡萄糖基團)的示例性鞣酸之結構：歷史上曾有將鞣酸作為吸收毒物的解毒劑，以及用於治療短期症狀例如出血、皮疹以及其他疼痛之症狀。

本揭示內容是基於鞣酸(特別是那些具有四個以上沒食子醯基團的鞣酸)展現出強烈抑制DAAO活性而發展出來的， 而已知DAAO涉及多種疾病與病症，像是肥胖、高血脂症、糖尿病以及CNS疾病。目前的研究也顯示在小鼠模型上，鞣酸成功地減少小鼠的體重並改善其基礎行為功能、過動、焦慮、憂鬱、感覺運動門控、疼痛閾值、記憶與認知行為。此外，在經MK801(一種N-甲基-D-天門冬胺酸鹽受體(NMDA 受體)的拮抗物)處理的小鼠上，鞣酸展現防護(rescue)及保護的效應。NMDA受體是一種表現在神經細胞上的麩胺酸鹽受體及離子通道蛋白，同時， NMDA受體在控制突觸可塑性、修復、神經發育、學習以及記憶功能中扮演重要的角色。

藉此，本揭示內容提供含有鞣酸的組合物、套組以及其使用方法，其用於改善一亟需治療之個體的基礎行為功能、過動、焦慮、憂鬱、自殺意念及/或行為、感覺運動門控、疼痛閾值、記憶與認知行為，以及/或是用於治療與DAAO相關的疾病及病症，像是肥胖及CNS疾病。

I. 含有鞣酸的組合物以及含有該組合物的套組

本揭示內容的一態樣相是關於組合物，舉例來說，藥學組合物、保健食品產物(例如營養組合物)以及醫療食品，其中該醫療食品包含一或多種鞣酸及一載體(例如一藥學上可接受的載體及/或一可食用載體)。這類載體，不論是天然或非天然(合成)，均可賦予組合物中的鞣酸各種效益，舉例來說，改善活體外及/或活體內的鞣酸穩定度、提高鞣酸的生體可用率、增加鞣酸的生物活性、及/或降低副作用。合適的載體包括，但不限於，稀釋劑、填充劑、鹽類、緩衝液、安定劑、助溶劑、緩衝劑、防腐劑或其組合。在某些實例中，載體可包含苯甲酸鹽例如苯甲酸鈉。

(A)鞣酸含量

本揭示內容的組合物包含一或多種鞣酸或是其藥學上可接受的鹽。「藥學上可接受的鹽(pharmaceutically- acceptable salts)」一詞是指相對無毒的鞣酸之無機或有機鹼加成鹽。這些鹽類可於製造給藥載體或劑型過程中被同步製造，或是令一或多種鞣酸分別與合適的有機或無機鹼反應，再於後續純化過程中將該鹽類單離後而製得。合適的無機鹼包含，但不限於，氫氧化鈉、氫氧化鋇、氫氧化鐵(II)、氫氧化鐵(III)、氫氧化鎂、氫氧化鈣、氫氧化鋁、氫氧化銨、氫氧化鉀、氫氧化銫或氫氧化鋰。合適的有機鹼包含但不限於：吡啶、甲胺、咪唑、苯并咪唑、組胺酸、膦氮烯鹼(phosphazene base)、或有機陽離子的氫氧化物(例如四級氫氧化銨及氫氧化鏻)。可參閱Berge等人，(1977) J. Pharm. Sci. 66:1-19)的文章說明。

在某些實施方式中，本揭示內容之組合物所含的鞣酸是具有各種數量(例如2至12個、4至12個、4至10個、5至10個、5至12個、6至12個、或8至12個)的沒食子醯基團的鞣酸之混合物，或其藥學上可接受的鹽。在某些實施方式中，鞣酸混合物包含具至少四個沒食子醯基團(例如：4至12個、4至10個、4至9個或4至7個沒食子醯基團)的鞣酸或是其藥學上可接受的鹽。抑或是，在組合物中的鞣酸可實質上不含3個或3個以下的沒食子醯基團之鞣酸。本揭示內容使用的「實質上不含、實質上沒有、實質上缺乏(substantially free)」3個或3個以下的沒食子醯基團之鞣酸的意思是指這類鞣酸在組合物中的量不超過10%(重量百分比)。在某些實例中，本揭示內容的組合物中的具有3個或3個以下的沒食子醯基團的鞣酸之總量可小於8%、5%、2%、1%或更少。在某些實例中，組合物完全不含任何具有3個或3個以下之沒食子醯基團的鞣酸。

本揭示內容中的任何組合物可包含具有1至5個沒食子醯基團之鞣酸，其不超過20%(例如，不超過18%、15%、12%、10%、5%或更少)。組合物或者可包含、或另外可包含不少於50%(例如：60%、70%、75%、80%、85%、90%、或更多)的鞣酸，該些鞣酸具有6至12個沒食子醯基團或8至12個沒食子醯基團。在一特定實例中，組合物含有不超過18%的具1至5個沒食子醯基團之鞣酸，以及不少於60%的具6至12個沒食子醯基團之鞣酸。在另一實例中，組合物含有不超過15%的具1至5個沒食子醯基團之鞣酸，以及不少於70%的具6至12個沒食子醯基團之鞣酸。在又另一實例中，組合物含有不超過12%的具1至5個沒食子醯基團之鞣酸，以及不少於80%的具6至12個沒食子醯基團之鞣酸。亦或是，組合物包含不超過10%的具1-5個沒食子醯基團以及不少於90%的具6至12個沒食子醯基團的鞣酸。

可透過常規方法製備用於製造本文所述組合物的鞣酸或鞣酸混合物。舉例來說，鞣酸的混合物可從至少一合適的植物來源中萃取或是分離，植物可包含但不限於：鹽膚木(Rhus chinensis )、鹽骨木(Rhus javanica )、鹽麩子(Rhus semialata )、西西里漆樹(Rhus coriaria )、青麩楊(Rhus potaninii )、紅麩楊(Rhus punjabensis var. sinica (Diels) Rehder & E.H. Wilson)、茶樹(Camellia sinensis )、漿果、胭脂樹(Bixa orellana )、葡萄(Vitis vinifera )、石榴(Punica granatum )、沒食子櫟(Quercus infectoria )、土耳其櫟(Quercus cerris )、黑荊(Acacia mearnsii )、花旗松(Pseudotsuga menziesii )、刺雲實(Caesalpinia spinosa )、臺灣水青岡(Fagus hayata Palib. ex Hayata)、或豬腳楠(Machilus thunbergii Sieb. & Zucc.)。在一些實施方式中，本揭示內容的組合物中的鞣酸或鞣混合物是從鹽膚木(Rhus chinensis )、鹽骨木(Rhus javanica )、鹽麩子(Rhus semialata )、西西西里漆樹(Rhus coriaria )、青麩楊(Rhus potaninii )、或是紅麩楊(Rhus punjabensis var. sinica (Diels) Rehder & E.H. Wilson)所組成之群組萃取出來的。

本揭示內容的鞣酸是從需要有築巢昆蟲於其上築巢的植物來源中取得，該築巢昆蟲包括但不限於：雲石紋癭蜂(Andricus kollari )、洋薊癭蜂(Andricus fecundatrix )、癭櫟癭蜂(Andricus quercuscalicis )、癭櫟癭蜂(Andricus quercuscalicis )、櫟蘋果癭蜂(Biorhiza pallida )、亮片癭蜂(Neuroterus quercusbaccarum )、平滑亮片癭蜂(Neuroterus albipes )、絲鈕扣癭蜂(Neuroterus numismalis )、櫻桃癭蜂(Cynips quercusfolii )、角倍蚜(Melaphis chinensis (Bell))、倍蛋蚜(Melaphis peitan Tsai et Tang)、圓角倍蚜(Nurudea sinica Tsai et Tang)、倍花蚜(Nurudea shiraii Matsumura)、紅倍花蚜(Nurudea rosea Matsumura)、紅小鐵棗(Meitanaphis elongallis Tsai et Tang)、蛋鐵倍蚜(Macrorhinarium ovagallis Tsai et Tang)、鐵倍花蚜(Floraphis meitanensis Tsai et Tang)、黃毛小鐵棗蚜(Meitanaphis flavogallis Tang)、肚倍蚜(Kaburagia rhusicola Takagi)、蛋肚倍蚜(Kaburagia ovatihuicola Xiang)、棗鐵倍蚜(Kaburagia ensigallis Tsai et Tang)、蛋鐵倍蚜(Kaburagia ovogallis )、肚倍蚜(Kaburagia thusicola Takagi)、米倍蚜(Meitanaphis microgallis Xiang)、以及周氏倍花蚜(Floraphis choui Xiang)。

在一些實施方式中，鞣酸或鞣酸混合物是從本文提及的需要有築巢昆蟲於其上築巢的植物之五倍子中取得，五倍子包括但不限於：中國肚倍(Chinese belly-shaped gallnut)、角倍(horned gallnut)、硬劍倍(hard ensiform gallnut)、蛋硬劍倍(egg-hard ensiform gallnut)、以及倍花(inflorescence gallnut)。

在其他實施方式中，本揭示內容的組合物所含的鞣酸是實質上同質的族群(substantially homogeneous population)。這樣的鞣酸族群可含有具有一定數目(舉例來說，在3個及12個之間的數目(包含3及12))的沒食子醯基團之鞣酸，或是其藥學上可接受的鹽。本文使用的「實質上同質的(substantially homogenous)」表示具有已界定數目的沒食子醯基團的鞣酸構成本發明組合物中總鞣酸含量之至少 85% (例如：90%、95%、97%、98%、99%、或以上)(重量百分比)。在一些實例中，實質上同質的鞣酸族群含有具4個、5個、6個、7個、8個、9個、10個、11個或12個沒食子醯基團的鞣酸。這種實質上同質的鞣酸族群可透過常規方法(舉例來說：色層分析法)從具有各種數目的沒食子醯基團(例如本文描述的那些)之鞣酸混合物分離出。

可透過一或多道純化程序(舉例來說，凝膠過濾法、分餾法、分配法(partition)、再結晶以及色層分析法(例如：HPLC)或其組合)來處理鞣酸萃取物(可參考以下的實施例)。亦或是，可根據常規方法以化學合成來製備鞣酸或鞣酸混合物。

在一些實施方式中，本文描述的鞣酸組合物可以以下方式製備。透過常規方法取得來自合適植物來源的五倍子(例如本文前述的那些)。將五倍子研磨成五倍子粉。在一些實例中，令五倍子粉通過具有合適尺寸的篩網(例如20網目、 30網目、40網目、50網目或60網目)，以形成細五倍子粉。

可使用合適的溶劑從本文描述的任何五倍子粉中萃取鞣酸。本文使用的「溶劑」一詞是指能夠溶解一或多種溶質的液體。溶劑可包含溶解目標溶質的單一成分物質。亦或是，本發明使用的溶劑可以是多種可溶解溶質的物質之混合物。適於萃取鞣酸的溶劑包含丙酮、乙腈、甲乙酮、乙酸乙酯、乙醇、異丙醇、四氫呋喃、1,4-二㗁烷、戊烷、己烷、庚烷或其組合。為了萃取鞣酸，可將五倍子粉放置在適當體積的溶劑中。接著在合適的溫度下(例如室溫)攪拌所形成的混合物一段合適時間(例如6至18小時、6至12小時、12至18小時以及18至24小時)。接著，過濾產物溶液並透過常規技術(例如透過真空蒸發)進行濃縮。

濃縮的組合物(其中含有鞣酸)可再與活性碳、CaSO₄ 、MgSO₄ 、或其組合混合，以移除多餘的物質(例如：可被活性碳吸收或被CaSO₄ 及/或MgSO₄ 沉澱析出的物質)。在一些實例中，從前述步驟獲得的任何含有鞣酸的組合物，可先與活性碳混合一預定時間(例如：在室溫下攪拌1至24小時)。可將CaSO₄ 及/或MgSO₄ 加入混合物中，在適合的溫度下(例如室溫)攪拌一段時間(例如從30分鐘到6小時)。混合物可透過例如矽藻土床(商品名Celite)過濾並以合適的溶劑(例如丙酮、乙腈、甲乙酮、乙酸乙酯、乙醇或其組合物)潤洗，並透過常規方法濃縮以生產鞣酸組合物。在其他實例中，從前述步驟獲得的任何含有鞣酸的組合物，可先與活性碳混合一預定時間(例如：在室溫下攪拌1至24小時，舉例來說：6至12小時或12至18小時)。接著移除混合物中的活性碳，以形成溶液。再將CaSO₄ 及/或MgSO₄ 加入溶液中，在合適的溫度(例如室溫)下攪拌該溶液一段合適時間(例如：30分鐘至6小時，舉例來說30分鐘至2小時或至1小時)。混合物可透過例如矽藻土床(商品名Celite)過濾，並以合適的溶劑(例如丙酮、乙腈、甲乙酮、乙酸乙酯、乙醇或其組合物)潤洗，並透過常規方法濃縮以生產鞣酸組合物。

當需要的時候，製備本發明的鞣酸組合物的方法更可包含減少或移除具有2至5個沒食子醯基團(2-5G)之鞣酸的步驟、增加具有6至12個沒食子醯基團(6-12G)之鞣酸的步驟，或兩個步驟均有。

為了移除具有2-5G的鞣酸，粗製的鞣酸組合物可與合適的溶劑混合以形成混合物。該混合物可存放(例如攪拌)於適合溫度(如室溫)下一段合適時間(例如6至18小時)，以形成兩層有機層。具有少於5G的鞣酸會溶解在上層。具有大於5G的鞣酸則會像固體物質一樣留在油層(下層)。如此可收集富有鞣酸(具有大數目的沒食子醯基團的鞣酸)的油層。若有需要的話，可再對油層進行濃縮，且可將濃縮之後所獲得的固體溶於合適的溶劑中。適合用來移除具有小於5G的鞣酸的溶劑實例包含，但不限於，由(i)第一組溶劑之任一者與(ii)第二組溶劑之任一者所組成的混合物。溶劑如下列： (i) 第一組：丙酮、乙腈、甲乙酮或乙酸乙酯；以及 (ii) 第二組 ：戊烷、己烷、或庚烷。

如本文描述的，可透過活性碳、CaSO₄ 及/或MgSO₄ 處理移除產物溶液中多餘的物質。

為了增加具有較大數目之沒食子醯基團(例如6至12G)的鞣酸含量，首先可先將含有鞣酸之組合物溶解在合適的溶劑中，像是丙酮、乙腈、甲乙酮或乙酸乙酯。接著攪拌所形成的溶液，且以緩慢滴定的方式在該溶液中添加CH₂ Cl₂ 或二氯乙烷，以使目標鞣酸沉澱。接著透過常規方式收集固體(例如過濾及/或乾燥)以產生精製純化後的鞣酸組合物。

以下的實例僅是說明本發明，不應將該些實例視為對本發明的限制。

一種方法，其包含：(i)研磨合適植物來源的五倍子以形成粗五倍子粉；(ii)將該粗五倍子粉通過40網目的篩網以形成細五倍子粉；(iii)以合適的溶劑(例如丙酮、乙腈、甲乙酮(MEK)、乙酸乙酯(EtOAc)、乙醇(EtOH)、異丙醇(IPA)、四氫呋喃(THF)、1,4-二㗁烷、或其組合) 溶解該些細五倍子粉並在20至45℃攪拌該混合物3至24小時；(iv)過濾並濃縮該產物溶液以形成固體殘留物；(v)在20至45℃下混合該固體殘留物與溶劑(例如20%-60%的甲乙酮/己烷、或30-50%的甲乙酮/己烷)3至24小時，以形成兩層有機層；(vi)收取並濃縮來自步驟(v)的油層；(vii)以合適的溶劑(例如：丙酮、乙腈、甲乙酮、乙酸乙酯、乙醇、或其組合)溶解該殘餘物以形成一溶液；(viii)加入活性碳於步驟(vii)之溶液並且攪拌1至24小時；(ix)加入CaSO₄ 或MgSO₄ 於步驟(viii)的混合物中並攪拌之；(x)透過常規技術移除步驟(ix)混合物中的活性碳及CaSO₄ 或 MgSO₄ ；(xi)濃縮來自步驟(x)的濾液；(xii)以合適的溶劑(例如：丙酮、乙腈、甲乙酮、乙酸乙酯或其組合)溶解步驟(xi)的殘餘物；(xiii)在步驟(xii)的溶液中添加二氯甲烷或二氯乙烷；以及(xiv)收集並乾燥在步驟(xiii)中形成的固體。

一種方法，其包含：(i)研磨合適植物來源的五倍子以形成粗五倍子粉；(ii)將步驟(i)的粗五倍子粉通過40網目的篩網以形成細五倍子粉；(iii)以合適的溶劑(例如丙酮、乙腈、甲乙酮、乙酸乙酯、乙醇、異丙醇、四氫呋喃、1,4-二㗁烷、或其組合)溶解該些細五倍子粉並在20至45℃攪拌所得溶液3至24小時；(iv)過濾該溶液；(v)在來自步驟(iv)的溶液中添加合適的溶劑(例如戊烷、己烷、庚烷或其組合)，並攪拌3至24小時，以形成兩層有機層；(vi)收取並濃縮步驟(v)的油層；(vii)以合適的溶劑(例如：丙酮、乙腈、甲乙酮、乙酸乙酯、乙醇、或其組合)溶解該殘餘物；(viii)將活性碳加入至來自步驟(vii)之溶液中並且攪拌1至24小時(例如6-12小時或12-18小時)；(ix)加入CaSO₄ 或MgSO₄ 於(viii)的混合物中，並攪拌該混合物；(x)透過常規技術移除從步驟(ix)所獲得的混合物中的活性碳及CaSO₄ 或MgSO₄ ；(xi)濃縮步驟(x)的濾液；(xii)以合適的溶劑(例如：丙酮、乙腈、甲乙酮、乙酸乙酯、乙醇或其組合)溶解步驟(xi)的殘餘物；(xiii)將二氯甲烷或二氯乙烷加入步驟(xii)的溶液中；以及(xiv)收集並乾燥在步驟(xiii)中形成的固體。

一種方法，其包含：(i)研磨合適植物來源的五倍子以形成粗五倍子粉；(ii)將步驟(i)的粗五倍子粉通過40網目的篩網以形成細五倍子粉；(iii)以合適的溶劑(例如丙酮、乙腈、甲乙酮、乙酸乙酯、乙醇、異丙醇、四氫呋喃、1,4-二㗁烷、或其組合)溶解該些細五倍子粉並在20至45℃攪拌該混合物3至24小時；(iv)過濾步驟(iii)所得之溶液；(v)在步驟(iv)的溶液中添加合適的溶劑(例如戊烷、己烷、庚烷或其組合)，並攪拌3至24小時以形成兩層有機層；(vi)收取步驟(v)的油層；(vii)以合適的溶劑(例如：丙酮、乙腈、甲乙酮、乙酸乙酯、乙醇、或其組合)稀釋步驟(vi)的油層；(viii)加入活性碳於步驟(vii)之溶液並且攪拌1至24小時(例如6-12小時或12-18小時)；(ix)加入CaSO₄ 或MgSO₄ 於(viii)的混合物中，並攪拌該混合物；(x)透過常規技術從步驟(ix)所獲得的混合物中移除活性碳及CaSO₄ 或MgSO₄ ；(xi)濃縮步驟(x)的濾液；(xii)以合適的溶劑(例如：丙酮、乙腈、甲乙酮、乙酸乙酯、乙醇或其組合)溶解步驟(xi)的殘餘物；(xiii)在步驟(xii)的溶液中添加二氯甲烷或二氯乙烷；以及(xiv)收集並乾燥在步驟(xiii)中形成的固體。

一種方法，其包含：(i)研磨合適植物來源的五倍子以形成粗五倍子粉；(ii)將步驟(i)的粗五倍子粉通過40網目的篩網以形成細五倍子粉；(iii)以合適的溶劑(例如丙酮、乙腈、甲乙酮、乙酸乙酯、乙醇、異丙醇、四氫呋喃、1,4-二㗁烷、或其組合)溶解該些細五倍子粉並在20至45℃攪拌該混合物3至24小時；(iv)將活性碳加入來自步驟(iii)之溶液中，並且攪拌1至24小時(例如6-12小時或12-18小時)；(v)將CaSO₄ 或MgSO₄ 加入於(iv)的混合物中，並攪拌該混合物；(vi)透過常規技術從步驟(v)所獲得的混合物中移除活性碳及CaSO₄ 或 MgSO₄ ；(vii)濃縮步驟(vi)的濾液；(viii)以合適的溶劑(例如：丙酮、乙腈、甲乙酮、乙酸乙酯、乙醇或其組合)溶解步驟(vii)的殘餘物；(ix)在來自步驟(viii)的溶液中添加二氯甲烷或二氯乙烷；以及(x)收集並乾燥在步驟(ix)中形成的固體。

一種方法，其包含：(i)研磨合適植物來源的五倍子以形成粗五倍子粉；(ii)將來自步驟(i)的粗五倍子粉通過40網目的篩網以形成細五倍子粉；(iii)以合適的溶劑(例如丙酮、乙腈、甲乙酮、乙酸乙酯、乙醇、異丙醇、四氫呋喃、1,4-二㗁烷、或其組合)溶解該些細五倍子粉，並在20至45℃攪拌該混合物3至24小時；(iv)將活性碳加入步驟(iii)之溶液，並且攪拌該溶液1至24小時(例如6-12小時或12-18小時)；(v)將CaSO₄ 或MgSO₄ 加至於(iv)的混合物中，並攪拌該混合物；(vi)透過常規技術從步驟(v)所獲得的混合物中移除活性碳及CaSO₄ 或 MgSO₄ ；(vii)將步驟(vi)的濾液之體積降至原始體積的約1/10至1/100；(ix)在步驟(vii)的溶液中添加二氯甲烷或二氯乙烷；以及(x)收集並乾燥在步驟(ix)中形成的固體。

一種方法，其包含：(i)研磨合適植物來源的五倍子以形成粗五倍子粉；(ii)將步驟(i)的粗五倍子粉通過40網目的篩網以形成細五倍子粉；(iii)以合適的溶劑(例如丙酮、乙腈、甲乙酮、乙酸乙酯、乙醇、異丙醇、四氫呋喃、1,4-二㗁烷、或其組合)溶解該些細五倍子粉，並在20至45℃攪拌該混合物3至24小時；(iv)過濾步驟(iii)的溶液；(v)於步驟(iv)之溶液中加入活性碳並且攪拌1至24小時(例如6-12小時或12-18小時)；(vi)加入CaSO₄ 或MgSO₄ 於步驟(v)的混合物中，並攪拌該混合物；(vii)移除從步驟(vi)所獲得的混合物中的活性碳及CaSO₄ 或 MgSO₄ ；(viii)透過常規技術濃縮步驟(vii)的濾液；(ix)以合適的溶劑(例如：丙酮、乙腈、甲乙酮、乙酸乙酯、乙醇或其組合)溶解步驟(viii)的殘餘物；(x)在步驟(ix)的溶液中添加二氯甲烷或二氯乙烷；以及(xi)收集並乾燥在步驟(x)中形成的固體。

一種方法，其包含：(i)研磨合適植物來源的五倍子以形成粗五倍子粉；(ii)將來自步驟(i)的粗五倍子粉通過40網目的篩網以形成細五倍子粉；(iii)在一溶劑(例如：50-30%的甲乙酮/己烷)放入步驟(ii)之五倍子粉，並於室溫下攪拌3至24小時；(iv)過濾步驟(iii)之溶液；(v)以合適的溶劑(例如丙酮、乙腈、甲乙酮、乙酸乙酯、乙醇、異丙醇、四氫呋喃、1,4-二㗁烷、或其組合)溶解自步驟(iv)收集來的固體，並於20至45℃攪拌該混合物3至24小時；(vi)過濾步驟(v)的濾液；(vii)於步驟(vi)之濾液中加入活性碳，並且攪拌1至24小時；(viii)於(vii)的混合物中加入CaSO₄ 或MgSO₄ ，並攪拌該混合物；(ix)透過常規技術從步驟(viii)所獲得的混合物中移除活性碳及CaSO₄ 或 MgSO₄ ；(x)濃縮步驟(ix)的濾液；(xi)以合適的溶劑(例如：丙酮、乙腈、甲乙酮、乙酸乙酯、乙醇或其組合)溶解步驟(x)的殘餘物；(xii)在步驟(xi)的溶液中添加二氯甲烷或二氯乙烷；以及(xiii)收集並乾燥在步驟(xii)中形成的固體。

一種方法，其包含：(i)研磨合適植物來源的五倍子以形成粗五倍子粉；(ii)將來自步驟(i)的粗五倍子粉通過40網目的篩網以形成細五倍子粉；(iii)在一溶劑(例如：20-60%，舉例來說，30-50%的甲乙酮/己烷)中放入步驟(ii)之五倍子粉，並於室溫下攪拌該溶液3至24小時；(iv)過濾來自步驟(iii)之溶液；(v)以合適的溶劑(例如丙酮、乙腈、甲乙酮、乙酸乙酯、乙醇、異丙醇、四氫呋喃、1,4-二㗁烷、或其組合)溶解步驟(iv)收集來的固體，並於20至45℃攪拌該混合物3至24小時；(vi)在來自步驟(v)的濾液中加入活性碳，並攪拌1至24小時(例如6至12小時或12至18小時)；(vii)在步驟(vi)的混合物中加入CaSO₄ 或MgSO₄ ，並攪拌該混合物；(viii)從步驟(vii)所獲得的混合物中移除活性碳及CaSO₄ 或 MgSO₄ ；(ix)將來自步驟(viii)的濾液之體積降至原始體積的約1/10至1/100；(x)以合適的溶劑(例如：丙酮、乙腈、甲乙酮、乙酸乙酯、乙醇或其組合)溶解步驟(ix)的殘餘物；(xi)在來自步驟(x)的溶液中添加二氯甲烷或二氯乙烷；以及(xii)收集並乾燥在步驟(xi)中形成的固體。

(B)藥學組合物

在某些實施方式中，本發明的一或多種鞣酸(例如鞣酸之混合物或是具有如前述一定數目的沒食子醯基團之實質上同質族群的鞣酸)可以與藥學上可接受的載體(賦形劑)混合以形成藥學組合物。該藥學組合物可用於治療如本文描述之任何標的疾病。在某些實施方式中，在組合物裡的鞣酸實質上不含縮合鞣質及/或褐藻多酚。「可接受的(Acceptable)」表示載體應可與組合物的活性成分相容(較佳是能夠穩定該活性成分)且不會對接受治療的個體造成危害。藥學上可接受的賦形劑(載體)(包括緩衝劑)是所屬技術領域的通常知識。請參閱Remington： The Science and Practice of Pharmacy 20th Ed. (2000) Lippincott Williams and Wilkins, Ed. K. E. Hoover的說明。

藥學上可接受的載體包含稀釋劑、填充劑、鹽類、緩衝劑、安定劑、助溶劑以及其他本技術領域已知的材料。具體來說，美國專利號5,211,657已記載鞣酸或其鹽類之示例性藥學上可接受的載體。這類製劑一般均含有鹽類、緩衝劑、防腐劑、相容載體以及其他視需要而添加的治療劑。當用於醫藥品時，鹽類應該是藥學上可接受的鹽類。但也可利用非藥學上可接受的鹽來簡便地製備其藥學上可接受的鹽，因此這類非藥學上可接受的鹽不應被排除在本發明範疇外。這樣的藥理學上以及藥學上可接受的鹽類包括，但不限於，從合適的無機鹼(例如：氫氧化鈉、氫氧化鋇、氫氧化鐵(II)、氫氧化鐵(III)、氫氧化鎂、氫氧化鈣、氫氧化鋁、氫氧化銨、氫氧化鉀、氫氧化銫或氫氧化鋰)或從合適的有機鹼(例如：吡啶、甲胺、咪唑、苯并咪唑、組胺酸、膦氮烯鹼、或有機陽離子的氫氧化物例如四級氫氧化銨及氫氧化鏻)所製備的鹽類。藥學上可接受的鹽也可製備成鹼金屬鹽或鹼土鹽，例如鋰、鈉、鉀或鈣鹽。

本揭示內容所述含有鞣酸的藥學組合物可包含藥學上可接受的載體、賦形劑或安定劑，並以凍乾製劑或水性溶液形式存在。參閱Remington: The Science and Practice of Pharmacy 20th Ed. (2000) Lippincott Williams and Wilkins, Ed. K. E. Hoover。所使用的劑量及濃度的可接受的載體、賦形劑或安定劑必須對使用者是無毒的，且可包含緩衝劑，像是 磷酸鹽、檸檬酸鹽、以及其他有機酸；抗氧化劑(包括抗壞血酸以及甲硫胺酸)；防腐劑(例如：十八烷二甲基苄基氯化銨(octadecyldimethylbenzyl ammonium chloride)、氯化六甲雙銨(hexamethonium chloride)、氯化苯甲烷銨(benzalkonium chloride)、氯化本索寧(benzethonium chloride)、酚、丁基或苄基醇類)；烷基對羥基苯甲酸酯例如：甲基或丙基對羥基苯甲酸酯；兒茶酚；間苯二酚(resorcinol)；環己醇(cyclohexanol)；3-戊醇(3-pentanol)；苯甲酸鹽、山梨酸鹽及間甲酚(m-cresol)；低分子量(小於約10個殘基)的多肽；蛋白質，像是血清白蛋白、明膠、或免疫球蛋白；親水性聚合物例如聚乙烯氫吡咯酮；胺基酸例如甘胺酸、麩醯胺酸、天冬醯胺酸、組胺酸、精胺酸、絲胺酸、丙胺酸或離胺酸；單醣、雙醣以及其他碳水化合物例如：葡萄糖、甘露糖或聚葡糖；螯合劑例如EDTA；糖類例如蔗糖、甘露醇、海藻糖或山梨醇；成鹽相對離子，例如鈉；金屬複合物(例如：鋅-蛋白質(Zn-protein)複合物)；以及/或非離子型界面活性劑，例如TWEEN^TM 、PLURONICS^TM 或聚乙二醇(PEG)。

在其他實例中，可將本發明的藥學組合物配製成緩釋劑型(sustained-release)。適當的緩釋劑型實例包括含有鞣酸之固態疏水性聚合物的半通透性基質，其中該基質是以有形物件形式(例如膜、或微粒膠囊)存在。緩釋基質的實例包含聚酯、水膠(舉例來說：聚(2-羥乙基-甲基丙烯酸酯(poly(2-hydroxyethyl-methacrylate))、或聚(乙烯醇)(poly(vinylalcohol))、聚乳酸酯(polylactides)(美國專利號：3,773,919))、L-麩胺酸與7乙基-L-麩胺酸鹽的共聚物(copolymers of L-glutamic acid and 7 ethyl-L-glutamate)、非降解型乙烯-乙酸乙烯酯(ethylene-vinyl acetate)、降解型乳酸-羥乙酸共聚物例如 LUPRON DEPOT^TM (含有乳酸-羥乙酸共聚物以及利普安醋酸鹽(leuprolide acetate)的可注射微球體)、蔗糖乙酸異丁酯(sucrose acetate isobutyrate)、以及聚-D-(-)-3-羥丁酸(poly-D-(-)-3-hydroxybutyric acid)。

用於活體內投藥的藥學組合物必須為無菌。舉例來說，可透過無菌過濾膜過濾來完成滅菌。治療組合物通常放置於具有一無菌入口的容器中，舉例來說，一靜脈注射溶液袋或具有可被皮下注射針刺穿的瓶塞之藥劑瓶。

本揭示內容的藥學組合物可以是以單位劑量劑型存在的錠劑、丸劑、膠囊、粉末、顆粒、溶液或懸浮液或塞劑，並可透過口服、非口服或經直腸的給藥途徑投藥、或是藉由吸入或吹藥法(insufflation)、或脊椎內或大腦內之給藥途徑投藥。

為了製備固體的組合物(例如錠劑)，可混合主要活性成分與藥學載體以及其他藥學稀釋劑，以形成含有本發明化合物的同質混合物或是其無毒性的藥學上可接受鹽之固體預配方組合物。藥學載體可以是習用的錠劑型的成分，像是玉米澱粉、乳糖、蔗糖、山梨醇、滑石、硬脂酸、硬脂酸鎂、磷酸二鈣、或膠類。其他藥學稀釋劑則可以是水。當指這些預配方組合物為同質物時，是表示活性成分是平均地分散在組合物中，藉此可容易地將組合物平分成相等的有效單位劑型，像是錠劑、丸劑以及膠囊。固體預配方組合物接著可被平分成前述單位劑量形式，其含有約0.1 mg至約500 mg的本發明活性成分。該新穎組合物的錠劑或丸劑可另以包衣包覆或是或以其他方式化合(compounded)，以提供可給予延長活性之優勢的劑型。舉例來說，錠劑或丸劑可包含內劑量以及外劑量組成，後者是覆蓋前者的套膜形式。可以利用腸衣層將兩個組成隔開，腸衣層可在胃中作為抵抗解體且允許內成分完整地穿過進入十二指腸或可延緩釋放。各種材料可用於前述的腸溶層或腸溶包衣，這類的材料通常包含一些聚合酸以及聚合酸與蟲膠、十六烷醇以及乙酸纖維素等材料的混合物。

合適的表面活性劑包含非離子型試劑，例如聚氧乙烯山梨醇酐(例如： Tween^TM 20、40、60、80或85)以及其他山梨醇酐(例如：Span^TM 20、40、60、80或85)。具有表面活性劑的組合物包含介於0.05％與5% 之間的表面活性劑，其可介於0.1％與2.5%之間。顯然地，必要時，也可添加其他成分，舉例來說，可加入甘露醇或其他藥學上可接受的載體。

可從市售的脂肪乳化劑來製備合適的乳化液，該脂肪乳化劑像是Intralipid^TM 、Liposyn^TM 、Infonutrol^TM 、Lipofundin^TM 以及Lipiphysan^TM 。可將活性成分溶解在預先混合的乳化組合物中或溶解於油(例如：大豆油、紅花油、棉花籽油、芝麻油、玉米油或杏仁油)中，當其再與磷脂(例如卵磷脂、大豆磷脂或大豆卵磷脂)以及水混合時，即可形成乳化液。應當被理解的是，也可以加入其他成分，例如甘油或葡萄糖以調整乳化液的張力。合適的乳化液通常含有高達20%的油，例如介於5%至20%之間的油。

用於吸入或吹藥法的藥學組合物包括溶解或懸浮在藥學上可接受的水溶液或有機溶劑或其組合中的溶液以及懸浮液，以及粉末。液體或固體組合物可含有前述之合適的藥學上可接受的賦形劑。在一些實施方式中，可透過口服或經鼻呼吸路徑投藥以達成局部或全身性效果。

可使用氣體將溶在無菌、藥學上可接受的溶劑中的組合物霧化。透過呼吸從霧化裝置直接吸入霧化溶液，或是霧化裝置可與面罩(face mask)、氣罩(tent)或是間歇性正壓呼吸器連接。可從能以合適方式遞送製劑的裝置優先經口或經鼻投予本發明之溶液、懸浮液或粉末組合物。

在某些實施方式中，任何含有鞣酸的藥學組合物，可基於該組合物意欲達成的治療用途而更包含一第二治療劑。

在某些實例中，第二治療劑是抗肥胖劑，其包含但不限於：奧利司他(orlistat)、氯卡色林(lorcaserin)、西布曲明(sibutramine)、利莫那班(rimonabant)、每福敏(metformin)、艾賽那肽(exenatide)、普蘭林肽(pramlintide)、苯丁胺(phentermine)、氟苯丙胺(fenfluramine)、右芬氟拉明(dexfenfluramine)、托比拉邁(topiramate)、二硝基苯酚(dinitrophenol)、安非他酮(bupropion)以及唑尼沙胺(zonisamide)。

在其他實例中，第二治療劑是可治療一中樞神經系統(CNS)疾病/病症之藥劑。這樣的治療劑可以是一抗精神病藥。抗精神病藥的實例包含(但不限於)：丁醯苯(例如：氟哌啶醇(haloperidol)(商品名：哈泊度(HALDOL^TM ))、啡噻𠯤 (例如：氯苯噻𠯤 (chlorpromazine)(商品名：THORAZINE^TM ))、氟奮乃靜(商品名：PROLIXIN^TM )、奮乃靜(商品名：TRILAFON^TM )、普氯拉嗪(商品名：COMPAZINE^TM )、硫利達嗪(商品名：MELLARIL^TM )、三氟拉嗪(商品名：STELAZINE^TM )、美索達嗪、普馬嗪、三氟丙嗪(商品名：VESPRIN^TM )、左美丙嗪(商品名：NOZINAN^TM )、異丙嗪(商品名：PHENERGAN^TM )、硫雜蒽(例如：氯丙硫蒽、氟哌噻噸(商品名：DEPIXOL^TM 、 FLUANXOL^TM )、替沃噻噸(商品名：NAVANE^TM )、氯哌噻噸(商品名：CLOPIXOL^TM 、ACUPHASE^TM )、氯氮平(商品名：CLOZARIL^TM )、奥氮平(商品名：ZYPREXA^TM )、利培酮(商品名：RISPERDAL^TM 、RISPERDAL CONSTA^TM )、喹硫平(商品名：SEROQUEL^TM )、齊拉西酮(商品名：GEODON^TM )、氨磺必利(商品名：SOLIAN^TM )、阿塞那平、帕潘立酮(商品名：INVEGA^® )、阿立哌唑(商品名：ABILIFY^TM )、多巴胺局部拮抗劑(商品名：BIFEPRUNOX^TM 、NORCLOZAPINE^TM (ACP-104))、拉莫三嗪(商品名：LAMICTAL^TM )、丁苯那嗪(商品名：NITOMAN^TM 、XENAZINE^TM )、大麻二酚、LY2140023等)。

或是，第二治療劑可以是抗憂鬱劑及/或情緒穩定劑。在特定實施方式中，抗憂鬱劑包含單胺氧化酶抑制劑(MAOI)、三環抗鬱劑(TCA)、四環抗憂鬱劑(TeCA)、選擇性血清素再攝取抑制劑(SSRI)、正腎上腺素及專一性血清素抗憂鬱劑 (NASSA)、正腎上腺素(去甲腎上腺素)再吸收抑制劑、正腎上腺素-多巴胺再吸收抑制劑、及/或血清素-正腎上腺素再吸收抑制劑(SNRI)。示例性SSRI包含氟西汀(商品名：PROZAC^TM )、帕羅西汀(商品名：PAXIL^TM 、SEROXAT^TM )、依地普侖(商品名：LEXAPRO^TM 、ESIPRAM^TM )、西酞普蘭(商品名：CELEXA^TM )、舍曲林(商品名：樂復得(ZOLOFT^TM ))、氟伏沙明(商品名：無鬱寧(LUVOX^TM ))。示例性的SNRI包含萬拉法辛(商品名：EFFEXOR^TM )、米那普侖以及杜洛西汀(商品名：千憂解(CYMBALTA^TM ))。其他額外的抗憂鬱劑包含正腎上腺素及專一性血清素抗憂鬱劑(NASSA)(例如：米達紗賓(商品名：AVANZA^TM 、ZISPIN^TM 、REMERON^TM )、或米塞林、 正腎上腺素(去甲腎上腺素)再吸收抑制劑(NRI)(例如：瑞波西汀(商品名：EDRONAX^TM ))、正腎上腺素-多巴胺再吸收抑制劑(例如：安非他酮(商品名：WELLBUTRIN^TM 、 ZYBAN^TM ))、阿米替林、去甲替林、普羅替林、地昔帕明、丙咪嗪(imipramine)、曲米帕明、安莫散平、安非他酮、安非他酮 SR、可洛米普明、多慮平、異噁唑醯肼、萬拉法辛XR、反苯環丙胺、曲唑酮、萘法唑酮、苯乙肼、拉莫三嗪、鋰、托比拉邁、加巴噴丁、卡巴馬平、奧卡西平、丙戊酸鹽、馬普替林、米達紗賓、溴法羅明、吉哌隆(gepirone)、嗎氯苯甲醯胺(moclobemide)、 異菸肼、異丙菸肼等。

在其他實例中，第二治療劑可以是用於治療ADD及/或ADHD的藥劑。合適的ADHD藥品包含，但不限於安非他命(amphetamine)、莫達非尼(modafinil)、右旋甲基苯丙胺(desoxyn)、甲基安非他命(methamphetamine)、古柯鹼(cocaine)、檳榔鹼(arecoline)、右哌甲酯(dexmethylphenidate)(商品名：focalin、focalin XR)、右旋安非他命(dextroamphetamine)(商品名：迪西卷(dexedrine)、迪西卷膠囊(dexedrine spansule)、右旋安非他命ER、dextrostat)、甲基芬尼特(methylphenidate)(商品名：專思達(concerta)、daytrana、metadate CD、metadate ER、methylin、methylin ER、利他能(ritalin)、持續型利他能(ritalin-LA)、緩釋利他能(ritalin-SR))、二甲磺酸賴右苯丙胺(lisdexamfetamine dimesylate)(商品名：Vyvanse)、安非他命混合鹽類(商品名：Adderall、Adderall XR)、阿托西汀(atomoxetine)(商品名：思銳(Strattera))、鹽酸克氯尼定(clonidine hydrochloride)(商品名：降保適(Catapres))、鹽酸胍法辛(guanfacine hydrochloride)(商品名：Tenex)、檳榔鹼以及匹莫林(pemoline)。

此外，第二治療劑可以是能治療認知異常及/或具有神經退化性疾病病徵的狀態(例如阿茲海默症或帕金森氏症)。這類的治療劑包括但不限於：他克林(tacrine)、卡巴拉汀(rivastigmine)、美金胺(memantine)(商品名：AXURA^TM 、AKATINOL^TM 、NAMENDA^TM 、EBIXA^TM 、ABIXA^TM )、多奈哌齊(donepezil)(商品名：愛憶欣(Aricept^TM ))、毒扁豆鹼(physostigmine)、菸鹼(nicotine)、檳榔鹼、石杉鹼甲(huperzine alpha)、希利治林(selegiline)、利鲁唑(riluzole)(商品名：銳力得(rilutek^TM )、維生素C、維生素E、類胡蘿蔔素、銀杏(ginkgo biloba)等類似物。

(C) 保健食品產物

在某些實施方式中，本發明含有鞣酸的組合物可為保健食品產物(health food product)。保健食品產物是任何可滋補人類及動物的的液體及固體/半固體材料，藉以改善基礎行為功能、過動、焦慮、憂鬱、自殺意念及/或自殺行為、感覺運動門控、疼痛閾值、記憶及/或認知功能、或用於改善本說明書所述任何標的疾病(例如：包括本文揭露的肥胖或中樞神經系統(CNS)疾病)之治療。保健食品產物可為食品產物(例如：茶基底的飲料、果汁、軟性飲料、咖啡、奶類、果凍、餅乾、穀物、巧克力、營養棒、草藥萃取物、乳製品(例如冰淇淋和優格))、食品/飲食補充品、或營養製劑。

本揭示內容的保健食品產物含有一或多種鞣酸(例如：本揭示內容的鞣酸混合物、或具有如前述特定數目的沒食子醯基團的實質上同質族群的鞣酸)。本揭示內容的保健食品產物可包含一或多個可食用載體，其授予本揭示內容的產物中的鞣酸一或多種益處。可食用載體包括澱粉、環糊精(cyclodextrin)、麥芽糊精(maltodextrin)、甲基纖維素(methylcellulose)、羧甲基纖維素(carbonmethoxy cellulose)、黃原膠(xanthan gum)以及其水性溶液。其他實施例包含溶劑、分散介質、塗料、界面活性劑、抗氧化劑、防腐劑(例如抗菌劑及抗真菌劑)、等張劑、吸收延遲劑、安定劑、凝膠、結合劑、賦形劑、崩解劑、潤滑劑、甜味劑、調味劑、染劑等相關材料及其組合，均為本發明所屬技術領域中具有通常知識者所熟知的。在某些實施例中，本揭示內容所述之保健食品產物可更包含神經保護食品，例如魚油、亞麻仁油及/或苯甲酸鹽。

在某些實施例中，保健食品產物是營養組成物，其指包含源自食物來源的成分且提供食物內基本營養價值外的額外健康效益的組成物。本揭示內容所述之營養組合物包含本發明的鞣酸(例如鞣酸混合物或如本文描述的實質上同質的鞣酸族群)以及其他可促進健康及/或增加該鞣酸的穩定度及生物活性的成分及補充劑。

本揭示內容的營養組合物可具有快速/短期性的作用，亦可以輔助罹患或具有DAAO相關的疾病(像是中樞神經系統(CNS)疾病)之風險的人類個體、或是罹患或具有肥胖風險之人類個體以達成長期健康之目的，如改善基礎行為功能、過動、焦慮、憂鬱、感覺運動門控、疼痛閾值、記憶及/或認知功能。營養組合物可包含於可食用載體中，舉例來說，膳食補充劑或藥物製劑。膳食補充劑可包含其他營養物質，例如維生素、礦物質或胺基酸。組合物亦可是飲品或食物產品，例如茶、汽水、果汁、牛奶、咖啡、餅乾、穀物、巧克力及營養棒。若有需要，可於組合物中加入諸如山梨醇(sorbitol)、麥芽糖醇(maltitol)、氫化葡萄糖漿(hydrogenated glucose syrup)、氫化澱粉水解物(hydrogenated starch hydrolysate)、高果糖玉米糖漿(high fructose corn syrup)、蔗糖(cane sugar)、甜菜糖(beet sugar)、果膠(pectin)或蔗糖素(sucralose)等甜味劑。

可將本揭示內容所述之營養組合物製備為溶液形式。舉例來說，可將營養組成物配製於介質中，例如緩衝液、溶劑、稀釋劑、惰性載體、油或霜劑。在某些實施例中，是將製劑配製於水性溶液中，其可非必要性地包含一非水性共溶劑，例如酒精。亦可將營養組成物製備為粉末、糊劑、膠凍、膠囊或錠劑等形式。乳糖及玉米澱粉為製備膠囊時常見的稀釋劑，亦為製備錠劑時常見的載體。通常會添加潤滑劑(像是硬脂酸鎂)來形成錠劑。

可依適當的投予路徑(舉例來說，口服給藥)來配製保健食品產物。若為口服給藥，可以習知方法及可接受的賦形劑，將組合物配製為錠劑或膠囊；其中該可接受的賦形劑可以是結合劑(舉例來說，預膠化之玉米澱粉、聚乙烯吡咯烷酮或羥丙基甲基纖維素)、填充劑(舉例來說，乳糖、微晶質纖維素或磷酸氫鈣)、潤滑劑(舉例來說，硬脂酸鎂、滑石或二氧化矽)、崩解劑(舉例來說，馬鈴薯澱粉或澱粉羥乙酸鈉)或潤溼劑(舉例來說，月桂基硫酸鈉)。可以習知方法來包覆錠劑。本揭示內容亦包含條棒及其他可咀嚼的製劑。

在某些實施例中，可將保健食品產物配製為液體形式，且一或多種可食用之載體可以是溶劑或分散介質，其包含，但不限於，乙醇、多元醇(例如甘油、丙二醇、液體聚乙二醇)、脂質(例如三酸甘油酯、植物油或微脂體)或其組合。可維持適當的流動性，舉例來說，藉由使用卵磷脂等包衣、藉由分散於液體多元醇或脂質等載體來維持特定的顆粒大小、藉由使用羥丙基纖維素等界面活性劑，或是其組合。在許多例子中，較佳是包含等張劑，舉例來說，糖、氯化鈉或其組合。

用以口服給藥的液體劑型可以是，舉例來說，溶液、糖漿或懸浮液，或是可將其配製為使用前以水或其他適合之載體重組的乾燥產物。在一實施方式中，可將液體製劑配製為以果汁給藥的劑型。可以習知方法及藥學上可接受之添加物來配製液體製劑，其中該添加物可以是懸浮劑(舉例來說，山梨醇糖漿、纖維素衍生物或氫化食用脂肪)、乳化劑(舉例來說，卵磷脂或阿拉伯膠)、非水性載體(舉例來說，杏仁油、油酯(oily esters)、乙醇或經分餾之植物油)，以及防腐劑(舉例來說，對羥苯甲酸甲酯或對羥苯甲酸丙酯、苯甲酸酯或山梨酸酯)。

本揭示內容的保健食品產品可更包含一或多個第二治療劑(包含先前提過的治療劑)。

(D) 醫療食品產物

本揭示內容也提供醫療食品產物的組合物，藉以改善基礎行為功能、過動、焦慮、憂鬱、感覺運動門控、疼痛閾值、記憶及/或認知行為、及/或用於治療如本文所載之目標疾病(例如肥胖或CNS疾病)。醫療食品是一種配製為可經腸內消耗或給藥的食物產品。該種食物產品通常可在醫護人員監控下針對標的疾病(例如本揭示內容所述之疾病)進行特定的飲食管理時使用。在某些情況下，該醫療食物組合物是針對極需治療之病患(例如罹患疾病之人類病患，或需要產品作為主要活性劑、藉由特定飲食管理來減緩疾病或病狀之人類個體)所特別配製及加工(相對於天然狀態下使用的天然食物)的組合物。在某些實例中，本揭示內容所述之醫療食品組合物不是醫護人員簡單推薦而作為管理症狀或減少罹患疾病或病症之整體飲食的組合物之一部分。

可將本揭示內容中任一種包含一或多種鞣酸分子或其鹽類及至少一載體(例如本揭示內容所述之該些載體)的醫療食品組合物，配製為液體溶液、粉末、條棒、薄片(wafer)或是懸浮於適當液體或適當乳化劑中的懸浮液。該至少一載體可以是天然或合成(非天然)的載體，可賦予組合物中的鞣酸一或多種效益，舉例來說，穩定度、生體可用率及/或生物活性。可利用本揭示內容所述之任一種載體來製備本發明醫療食品組合物。在某些實施方式中，醫療食品組合物更包含一或多種額外添加的成分，其係選自包含，但不限於，天然香料、人造香料、主要微量及超微量礦物質、礦物質、維生素、燕麥、堅果、香料、牛奶、蛋、鹽、麵粉、卵磷脂、黃原膠及/或甜味劑所組成的群組。可將醫療食品組成物置於適當的容器中，其可更包含至少一種額外的治療劑(例如本揭示內容所述之治療劑)。

(E) 套組

本揭示內容也提供套組，藉以改善基礎行為功能、過動、焦慮、憂鬱、感覺運動門控、疼痛閾值、記憶及/或認知行為、及/或用於治療如本文所載之目標疾病(例如肥胖或CNS疾病)。這類的套組包含一或多個含有本發明之鞣酸組成物的容器，且可選擇性地包含如前述的一或多個第二治療劑。

在某些實施方式中，本發明套組包含根據前述任何方法的使用操作說明。該些使用操作說明可包含，舉例來說，含有鞣酸的組合物之投藥方法的描述，以及視需要而納入的第二治療劑的投藥方法的說明，藉此改善基礎行為功能、過動、焦慮、憂鬱、感覺運動門控、疼痛閾值、記憶及/或認知行為、及/或用於治療如本文所載之目標疾病。套組可更包含如何挑選合適個體以進行治療的說明性文字，其係根據該個體是否罹患該疾病或是具有罹患該疾病之風險來進行挑選。在其他實施方式中，使用操作說明包含對有罹患該疾病風險的個體或急需改善基礎行為功能、過動、焦慮、憂鬱、感覺運動門控、疼痛閾值、記憶及/或認知行為之個體投予一或多個本發明的藥劑的給藥說明。

關於使用含有鞣酸之組合物來達成目標治療效果的操作說明，通常會包含針對目標疾病的劑量、給藥順序以及給藥途徑的資訊。容器可以是單位劑量、定量包裝(例如多劑量包裝)或子單位劑量。本發明套組提供的使用操作說明，通常是將使用操作說明書寫在標籤或仿單(例如，套組內的文件)上，但也可接受可藉由機器讀取的使用操作說明(例如：利用磁碟或光碟儲存的使用操作說明檔案)。

標籤或仿單上可載明所述組合物意欲達成的治療用途。使用操作說明可提供任何本文所述之方法的執行方式。

本發明套組是放在合適的包裝內。合適的包裝包括但不限於，小管、瓶、罐、軟質包裝(例如：密封聚酯薄膜(sealed Mylar)或塑膠袋)等等。本發明範疇也涵蓋可與特定裝置，像是跟吸入器、鼻腔給藥裝置(例如噴霧器)或輸液裝置(例如微量泵)等裝置一起使用的包裝。套組可具有無菌入口(舉例來說，容器可以是靜脈注射溶液袋或具有可被皮下注射針刺穿的瓶塞之藥劑瓶)。容器也可具有無菌入口(舉例來說，容器可以是靜脈注射溶液袋或具有可被皮下注射針刺穿的瓶塞之藥劑瓶)。

套組還可視需要提供額外的成分，諸如，緩衝劑以及說明性資訊。正常來說，套組包含容器以及在該容器上或與容器相連的標籤或是仿單。在某些實施方式中，本發明提供含有前述套組之內容物的製品。 II. 含有鞣酸之組合物的應用

任何含有本揭示內容鞣酸之組合物可用於改善一亟需治療之個體的基礎行為功能、過動、焦慮、憂鬱、自殺意念及/或行為、感覺運動門控、疼痛閾值、記憶與認知功能。此類組合物也可用於治療與DAAO相關的疾病或病症 (例如本文前述的那些)。所述組合物也可用於治療肥胖。

本文所使用的「治療(treating)」一詞是指，以治療、治癒、緩和、舒緩、改變、補救、改善、改進或影響病症、疾病的症狀或該疾病或病症之體質為目的，將包含一或多種活性劑之組合物應用於一亟需治療的個體、或對一亟需治療之個體投予包含一或多種活性劑之組合物。所謂亟需治療之個體，舉例來說，該個體罹患目標疾病或病症、具有該疾病/病症之症狀、或有該疾病/病症之體質。

緩和(alleviating)目標疾病/病症包括延遲該疾病的進程或發展、或降低疾病嚴重性。緩和疾病不一定要有具有療效的結果。本文使用的「延遲(delaying)」目標疾病或病症的發展是表示延緩、阻止、減緩、推遲、穩定、及/或延長疾病的進程。延遲的時間長度可取決於被治療之個體及/或該疾病的病史。「延遲」或緩和疾病之發展的方法、或延遲該疾病發作的方法，是指在一給定時間框架內，減低疾病一或多種症狀發展的機率及/或減低症狀之程度的方法(相較於非使用該方法的狀況而言)。通常是基於透過能提供統計學上顯著之結果的數目的受試者所進行的臨床研究來達成前述的比較。

疾病的「發展(development)」或「進程(progression)」表示疾病的初始表現及/或該疾病隨後的發展。疾病的發展可透過本領域技術人員所嫻熟習知標準臨床技術來偵測及評估。然而，疾病的發展也可以是無法覺察的疾病進程。針對本發明的目的，疾病發展或是疾病進程是指症狀的生物演進。「發展」包括發生(occurrence)、復發(recurrence)、以及發作(onset)。在本文中，一目標疾病或病症的「發作」或是「發生」包含初始的發作及/或復發。

為了達到本發明預期的任何治療效果，可透過合適的路徑將一有效量的含鞣酸之組合物投予至需要治療的個體。

在本文中，「受試者(subject)」、「個體(individual)」以及「患者(patient) 」可互換地使用，且可指稱正接受評估是否要治療及/或正進行治療的哺乳類。個體可以是人類，但也可包括其他哺乳類動物，特別是那些可當作人類疾病的實驗模式的哺乳類動物(例如小鼠、大鼠、兔子、狗等等)。

需要治療的人類個體可以是罹患目標疾病/病症、具有罹患目標疾病/病症風險、或是疑似患有目標疾病/病症(例如中樞神經系統CNS疾病、肥胖、糖尿病或高血脂症)的人類病患。可藉由常規醫學檢測(例如實驗室測試、器官功能檢測、及/或行為測試)來找出罹患目標疾病或病症的個體。疑似患有任何這類目標疾病/病症的個體會表現出一或多個該疾病/病症的症狀。具有罹患該疾病/病症風險的個體可以是具有一或多個該疾病/病症之風險因素的個體，舉例來說，遺傳因素。在一些情況中，人類個體是指患有與孩童相關的中樞神經系統(CNS)疾病的孩童、疑似患有該些疾病、或是具有罹患該些疾病風險的孩童。該些疾病例如是注意力缺失過動疾患(ADHD)、自閉症、亞斯伯格症、強迫症、憂鬱症、精神病、慢性疼痛以及學習障礙。

本揭示內容的方法及組合物可用於治療中樞神經系統(CNS)疾病。可透過本揭示內容的方法及組合物進行治療的中樞神經系統(CNS)疾病實例可包括注意力缺失/過動疾患(ADHD)、精神分裂症、疼痛、 憂鬱症、自殺意念及/或行為、躁鬱症、抽搐症、創傷後精神壓力障礙、焦慮症、社交焦慮症、恐慌症、自閉症、亞斯伯格症、強迫症、學習障礙、妥瑞氏症、輕度知能障礙、失智症、血管型失智症、神經退化性疾病(例如：阿茲海默症或帕金森氏症、額顳葉失智症、亨丁頓氏症)、夜間遺尿症、眼瞼痙攣、非癲癇發作、精神病、躁症、腦型瘧疾、以及失智症的精神行為症狀(BPSD)。

本文使用的「一有效量(an effective amount)」是指可確保對個體具治療效果的每一種活性成分的量(例如本揭示內容的鞣酸混合物或是實質上同質的鞣酸族群)，不論是單獨施用或是與一或多種其他活性成分(像是本揭示內容的一或多個第二治療劑)合併施用。在一些實施方式中，治療效果是抑制個體中的DAAO活性(例如：至少抑制20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、95%或更高)。在一些實施方式中，治療效果是指改善基礎行為功能、過動、焦慮、憂鬱、感覺運動門控、疼痛閾值、記憶、及/或認知功能的改善。在一些實施方式中，治療效果是緩和與本揭示內容之任何中樞神經系統疾病相關的一或多個症狀。治療效果也可以是、或是附加地是維持個體的體重、或減少個體的體重。

本揭示內容中組合物的量是否有達到治療效果的判定方法是本技術領域中的通常知識。所屬技術領域中具有通常知識者理解的有效量，會根據治療的特定病症、病症的嚴重程度、病患個體的身體狀況(包括年齡、物理狀況、體型、性別和體重、治療的期間、合併治療的疾病種類(如果有的話)、給藥的特定途徑、遺傳因素、以及健康從業人員的通常知識及專業知識中的其他類似因素而有所不同。該些因素對所屬技術領域中具有通常知識者而言是習知技術，且不需過度實驗就可以實施。在較佳的實施方式中，係使用個別成分或合併使用該等成分的最大劑量，也就是根據合理醫學判斷所示的最高安全劑量。

可根據經驗法則(例如半衰期)決定前述劑量。通常，可視需要基於治療及/或抑制及/或緩和及/或延遲目標疾病/病症的目的，在治療過程中測定及調整給藥的頻率。抑或是，也可給予本揭示內容之組合物的緩釋配方。用於達成緩釋目的之各種配方以及裝置是本發明所屬技術領域的通常知識。

通常來說，本發明任一組合物的每日劑量可為從約0.1 µg/kg起，至3 µg/kg、至30 µg/kg、至300 µg/kg、至3 mg/kg、至30 mg/kg、至100 mg/kg 或更高範圍中的任一劑量，此劑量會因前述因素而改變。為了在數天內或更長期間內重複給藥，基於特定狀況，可持續治療直到出現想要抑制的症狀為止，或持續直到達成足夠緩和目標疾病或病症、或其症狀的治療程度為止。示例性劑量方案包含在一合適期間內，以合適間隔，投予一或多個初始劑量。必要的話，也可在合適期間以合適間隔對個體投予多個維持劑量。然而，也可以依據醫療從業人員預期完成的藥物動力學衰退模式，提供其他給藥方案。舉例來說，可預期的劑量是從一天一至四次至一周一至四次。在一些實施方式中，可採用的劑量範圍是從3 µg/mg至約2 mg/kg (例如約 3 µg/mg、約 10 µg/mg、約 30 µg/mg、約 100 µg/mg、約 300 µg/mg、約 1 mg/kg以及約 2 mg/kg)。在某些實施方式中，給藥頻率為一日三次、一日兩次、一日一次、每兩日一次、每週一次、每二週一次、每四週一次、每兩個月一次或每三個月一次。劑量方案可隨著時間改變。

在某些實施方式中，特別針對正常體重的成人患者，給藥的劑量是從約每日每公斤體重0.3 mg至50.00 mg(例如：每日每公斤0.5 mg至40 mg、每日每公斤1mg 至30 mg、每日每公斤5 mg至30 mg、或每日每公斤10mg至20 mg)。特定的劑量方案(亦即，劑量、時間以及重複次數)是取決於特定個體以及該特定個體的用藥史，還有該個別藥劑的特性(例如藥劑的半衰期、以及本發明所屬技術領域中通知的考量)。

為了本發明目的，本揭示內容之鞣酸組合物的合適劑量將取決於所用的特定鞣酸或鞣酸混合物，及/或其他活性成分、病症/疾病的種類與嚴重程度、是否為了預防或治療之目的投予組合物、先前的治療、病患的臨床病史與對該DAAO抑制物的反應、以及主治醫師的判斷。通常來說，臨床人員會投予一組合物，直到可達到期望結果的劑量為止。

可藉由醫學領域中具有通常知識者已知的常規方法對一個體投予該組合物(例如藥學組合物、保健食品組合物、營養組合物或醫療食品組合物)，其取決於被治療的疾病種類或該疾病的位置。可透過其他常規路徑投予本發明之組合物，例如：口服給藥、非口服給藥、噴霧吸入給藥、局部給藥、直腸內給藥、鼻腔內給藥、頰內給藥、陰道內給藥或透過植入型藥盒( implanted reservoir)給藥。本揭示內容所使用的「非口服(parenteral)」包括皮下、皮內、靜脈內、肌內、關節內、動脈內、滑膜內、胸骨內、脊髓內、病灶內、以及顱內注射或輸液技術。此外，可經由可注射的儲存器投藥路徑投予個體，例如使用一週、半個月(或兩週)、1個月、3個月、或6個月的可注射儲存器或生物可降解材料及方法。在一些實例中，藥學組合物是經眼內或玻璃體內投予。

可注射的組合物可包含各種載體，例如蔬菜油、二甲基乙醯胺、二甲基甲醯胺、乳酸乙酯、碳酸乙酯、肉豆蔻酸異丙酯(isopropyl myristate)、乙醇、以及多元醇(甘油、丙二醇、液體聚乙二醇以及其類似物)。針對靜脈內注射、可藉由滴注法投予水溶性抗體，藉此輸注含有鞣酸及生理上可接受的賦形劑的藥物配方。生理上可接受的賦形劑可包含，舉例來說，5%的右旋糖、0.9%的食鹽水、林格氏液或其他合適的賦形劑。肌內製劑(例如：鞣酸的合適可溶性鹽類形式的無菌製品)可溶解於藥學賦形劑，諸如注射用水(Water-for-Injection)、0.9%食鹽水或5%葡萄糖，並在其中被投予。

在一實施方式中，含有鞣酸的組合物是透過部位特異性或標的性局部遞藥技術投予。部位特異性或標的性局部遞送技術的實例包含，含有鞣酸組合物的各種可植入儲存器來源或各種局部遞送導管，諸如輸液導管、留置導管、針導管、合成植入物、外膜包裝、分流器與支架或其他可植入裝置、部位專一性載體、直接注射或直接施予。請參閱例如PCT公開號WO 00/53211以及美國專利號：5,981,568。

針對目標疾病/病症的治療效能可透過本發明所屬技術領域中已知的方法進行評估。 III. 合併治療

本揭示內容的合併治療是指使用本發明任何含有鞣酸之組合物，以及如本文前述的第二治療劑。本文使用的合併治療一詞包含依序地投予該些治療劑(例如：含有鞣酸之組合物以及抗CNS疾病治療劑或抗肥胖治療劑)，也就是說，每個治療劑是在不同時間點被投予，或是實質上同時投予這些治療劑、或實質上同時投予至少兩種治療劑。依序地投予藥劑或實質上同時投予藥劑可受到任何適當的給藥途徑所影響，給藥途徑包括但不限於：口服途徑、靜脈內途徑、肌內、皮下途徑以及透過黏膜組織的直接吸收。可透過相同途徑或不同途徑投予該些藥劑。舉例來說，第一藥劑(例如含鞣酸的組合物)可經口服給藥，而第二藥劑(例如抗中樞神經系統疾病的藥劑或抗肥胖藥劑)可經靜脈內給藥。

除非本文另有說明，否則本文所使用的「依序(sequential)」一詞表示正常的順序或次序。舉例說明，如果一劑量方案是包括含有鞣酸組合物及抗中樞神經系統疾病藥劑或抗肥胖藥劑的給藥，依序劑量方案可包括在投予抗中樞神經系統疾病藥劑或抗肥胖藥劑之前投予含鞣酸之組合物、同時投予含鞣酸之組合物、實質上同時投予含鞣酸之組合物、或之後投予含鞣酸之組合物，但兩種藥劑均以正常順序或次序投予。除非另有說明，「分開、分離、隔開(separate)」一詞指保持一個與另一個分離的狀態。除非另有說明，「同時(simultaneously)」一詞的意思是指在相同的時間發生或完成，亦即，本發明的藥劑是在同時間給予。「實質上同時(substantially simultaneously)」是指投予的藥劑與彼此之間的差距在幾分鐘之內(例如在10分鐘之內)且意圖包含聯合給藥(joint administeraton)以及連貫給藥(consecutive administeration)，但若給藥是連貫的話，是指在時間上間隔很短(例如醫藥從業人員分別給予兩個化合物所花的時間)的分離給藥。如本文所使用的，同時給藥(concurrent administration)以及實質上同時給藥可交替使用。依序給藥(sequential administeration)是指在不同時間投予本發明藥劑。

合併治療也可包含將本揭露內容的藥劑(例如：含鞣酸組合物以及抗中樞神經系統疾病或抗肥胖之藥劑)進一步與其他生物活性成分(例如另一個不同的抗中樞神經系統疾病之藥劑)以及非藥物療法(例如：手術)合併投予。

應當理解的是，可以任意順序使用含鞣酸的組合物以及第二治療劑(例如抗中樞神經系統疾病或抗肥胖之藥劑)的任意組合來治療目標疾病。可根據一些因素挑選本揭示內容的組合，該些因素包括但不限於：抑制DAAO的有效性、改善基礎行為功能、過動、焦慮、憂鬱、感覺運動門控、疼痛閾值、記憶或增強認知功能、及/或緩和至少一種標的疾病的症狀、或減輕組合中另一藥劑的副作用。舉例來說，本發明的合併治療可減低與組合中每一個別成分相關的任何副作用，例如，與第二治療劑相關的副作用。 IV. 通用技術

除非另有說明，實施本發明所採用的神經科學、分子生物學(包含重組技術)、微生物學、細胞生物學、生物化學以及免疫學之常規技術是本發明所屬技術領域所習知的。該些技術已被完整地在公開文獻中解釋，諸如Current protocol in Neuroscience (Developmental Editor: Eric Prager, Online ISBN: 9780471142300, DOI: 10.1002/0471142301). Molecular Cloning: A Laboratory Manual, second edition (Sambrook, et al., 1989) Cold Spring Harbor Press; Oligonucleotide Synthesis (M. J. Gait, ed., 1984); Methods in Molecular Biology, Humana Press; Cell Biology: A Laboratory Notebook (J. E. Cellis, ed., 1998) Academic Press; Animal Cell Culture (R. I. Freshney, ed., 1987); Introduction to Cell and Tissue Culture (J. P. Mather and P. E. Roberts, 1998) Plenum Press; Cell and Tissue Culture: Laboratory Procedures (A. Doyle, J. B. Griffiths, and D. G. Newell, eds., 1993-8) J. Wiley and Sons; Methods in Enzymology (Academic Press, Inc.); Handbook of Experimental Immunology (D. M. Weir and C. C. Blackwell, eds.); Gene Transfer Vectors for Mammalian Cells (J. M. Miller and M. P. Calos, eds., 1987); Current Protocols in Molecular Biology (F. M. Ausubel, et al., eds., 1987); PCR: The Polymerase Chain Reaction, (Mullis, et al., eds., 1994); Current Protocols in Immunology (J. E. Coligan et al., eds., 1991); Short Protocols in Molecular Biology (Wiley and Sons, 1999); Immunobiology (C. A. Janeway and P. Travers, 1997); Antibodies (P. Finch, 1997); Antibodies: a practical approach (D. Catty., ed., IRL Press, 1988-1989); Monoclonal antibodies: a practical approach (P. Shepherd and C. Dean, eds., Oxford University Press, 2000); Using antibodies: a laboratory manual (E. Harlow and D. Lane (Cold Spring Harbor Laboratory Press, 1999); The Antibodies (M. Zanetti and J. D. Capra, eds., Harwood Academic Publishers, 1995)。

無須進一步說明，據信所屬技術領域中具有通常知識者可根據上述描述，最大限度地利用本發明。據此本文提出多個實驗例來說明本發明的某些態樣，以利本發明所屬技術領域中具有通常知識者實作本發明，且不應將這些實驗例視為對本發明範圍的限制。此處所引用的所有公開文獻，其全文皆視為本說明書的一部分。實施例 1 ：鑑別鞣酸之有效基團並測定其用於治療中樞神經系統 (CNS) 疾病之效果

以下述方式測定鞣酸抑制D-胺基酸氧化酶(DAAO)活性。

在活體外藉由測量已知受質(D-脯胺酸)之分解代謝的抑制作用來測定DAAO的活性。首先將輔因子FAD(40 mM)加入DAAO儲備溶液中。針對測定所需，將鞣酸的潛在抑制物與含有磷酸鹽緩衝食鹽水(137 mM NaCl、3 mM KCl、10 mM Na₂ HPO₄ 、2 mM NaH₂ PO₄ ，酸鹼值pH 7.4)、辣根過氧化酶(5 U/ml)、鄰苯二胺(o-phenylendiamine (OPD)，0.03%)、以及0.6 mg/mL 人類-(或豬的) DAAO之反應混合物混合，並共同靜置5分鐘。在前培養之後，加入 40 mM的D-輔胺酸做為受質並持續反應10分鐘。OPD被辣根過氧化酶氧化形成2,3-吩嗪二胺(2,3-diaminophenazine，DAP)。以分光光度法測定DAP於波長 453 nm的吸光值。以經過序列稀釋的抑制劑來分別進行測試，直到獲得IC₅₀ 為止，並以生物統計及科學繪圖軟體Prism(公司名：Graphpad Software)分析。在分析中，分光光度法的讀數可套用標準公式以測定50%抑制作用的濃度(IC₅₀ )。所有的酵素測定都是在室溫下於96孔盤中執行。

如第1圖所示，其顯示鞣酸族群具有很強的抑制D-胺基酸氧化酶(DAAO)活性的能力，其IC₅₀ 約為5.47 mM。

以下則測試鞣酸子群組(具有特定數目之沒食子醯基團) 抑制DAAO活性的效果。透過逆相管柱(LiChroprep^® RP-18)以乙腈及蒸餾水之梯度溶析的流動相將具有不同數目的沒食子醯基團的鞣酸餾分加以分離。藉由前述方法分析每個鞣酸餾分於80 mM (表1)及300 nM (第2圖，表2)下抑制DAAO活性的結果，其中蒸餾水及10%的DMSO 水性溶液作為空白控制組，而苯甲酸鈉作為陽性控制組。

表1：個別鞣酸之DAAO抑制活性

表1顯示不同沒食子醯基團數目的鞣酸抑制DAAO活性的結果。相較於具有四個以下沒食子醯基團的鞣酸而言，具有四個或更多沒食子醯基團的鞣酸其抑制DAAO活性的能力較高。所有的DAAO測定是以80 μM的鞣酸來進行。

表2：個別鞣酸之DAAO抑制活性

表2顯示300 nM之不同沒食子醯基團數目的鞣酸之抗DAAO活性的情況。具有三個沒食子醯基團者，活性較弱，然而具有較多沒食子醯基團的鞣酸，便顯示出較佳的DAAO抑制活性。(G=沒食子醯基團的數目)

下表3則顯示具有不同沒食子醯基團數目的鞣酸抑制DAAO活性的IC₅₀ (μM)。每個具有不同數目的沒食子醯基團之鞣酸均測定IC₅₀ ，其中有效的鞣酸具有多於三個沒食子醯基團。相較於具有四個以下之沒食子醯基團的鞣酸而言，具有四個或更多沒食子醯基團的鞣酸的IC_50­­­ 較小且更可有效地抑制DAAO (G=沒食子醯基團的數目)。

表3：個別鞣酸的活性強度

因此，純化具有三個以上沒食子醯基團之鞣酸可提高其強度(此係相較於鞣酸混合物而言)，此一效果展現在較小的IC₅₀ 上(表4)。結果顯示，具有三個以上沒食子醯基團(例如4-10個)的鞣酸比具有三個或更少沒食子醯基團的鞣酸展現更佳的抑制DAAO效果。

表4：含有4-9個沒食子醯基團之純化鞣酸(4-9G)比鞣酸混合物具有更強的活性 實施例 2 ：鞣酸在基礎行為功能及認知行為上的效果

本研究目的在驗證各種劑量的鞣酸在基礎新陳代謝、行為功能以及認知行為上的效應。在本實驗中，在接受重複注射鞣酸或口服給藥之後，測量每隻小鼠的體重、自發運動活動力、類焦慮行為、空間學習和記憶、類憂鬱行為以及感覺運動門控功能。已知這些活性是藉由NMDA受體所媒介的。(Wu et al., PNAS; 110(36):14765-70 (2013); Furuya et al., Eur J Pharmacol, 364(2-3):133-140 [1999]; Lai et al., Curr Pharm Des, 20(32):5139-5150 [2014]; McLamb et al., Pharmacol Biochem Behav, 37(1):41-45 [1990]; Vardigan et al., Pharmacol Biochem Behav, 95(2):223-229 [2010]; Wiley et al, Eur J Pharmacol, 294(1):101-107 [1995]; Wu et al., Psychopharmacology (Berl), 177(3):256-263 [2005]). 本研究的示例性說明顯示於第3圖。

材料與方法

動物以及飼養條件

將C57BL/6J雄性小鼠分群圈養(每籠3-5隻小鼠)於動物房內由聚碸製成的通風鼠籠(購自Alternative Design, AR，美國)中，並可任意取用食物與飲水。室內溫度維持在 22 ± 2 °C，且飼養環境維持在12/12小時的光/暗循環，而所有行為實驗均在暗循環期間進行。本實驗使用的動物均為成鼠(至少2.5個月大)。

重複注射鞣酸

從西格瑪公司(Sigma-Aldrich，美國)購得鞣酸。將成鼠隨機地區分成三組：(1)控制組；(2)鞣酸(10 mg/kg)組；以及(3)鞣酸(30 mg/kg)組，其分別以載體控制物(PBS)、10 mg/kg的鞣酸以及30 mg/kg的鞣酸處理。於行為測試的兩週前，所有的小鼠每隔一日接受腹腔注射(i.p.)載體控制物或鞣酸。進行注射的每日，紀錄每隻小鼠的體重，該體重可做為其生理發育及新陳代謝之指標。

重複注射鞣酸對小鼠基礎行為功能及認知行為的影響之測定

不論經載體控制物處理或經鞣酸處理的所有前述小鼠，均依序地進行以下五種行為實驗：(1)開放空間試驗，針對自發運動測試、(2)藉由高架十字迷宮(elevated plus maze)進行類焦慮行為試驗、(3)透過巴恩斯迷宮(Barnes maze)進行空間學習及記憶測試、(4)透過尾部懸吊測試類憂鬱行為測試、以及(5)透過前脈衝抑制進行感覺運動門控功能試驗。在進行不同試驗之間至少間隔1週。為了盡可能消除傳遞效應(carryover effect)、該些試驗進行順序的排列原則是以確保較有壓力的試驗不會排在壓力較少的試驗之前。該些流程已被完整地闡明於Current protocol in Neuroscience (Developmental Editor: Eric Prager, Online ISBN: 9780471142300, DOI: 10.1002/0471142301)，其相關的揭示內容為了特定目的透過引用併入本文。

結果

生理發育及體重減低

在重複注射期間，接受10 mg/kg鞣酸注射的小鼠體重有輕微增加，雖然增加的幅度仍比控制組的小鼠所增加的體重要少；然而接受 30 mg/kg鞣酸注射的小鼠體重，則比控制組小鼠的體重輕得多。如第4圖所示。

自發性運動活動力

開放空間試驗是用於檢測小鼠及大鼠對於新奇誘導的探索行為與綜合活動的常用試驗方法。本實驗是將小鼠放置在壓克力製作的鼠籠(商品名：PLEXIGLAS^® ，尺寸：37.5 公分 × 21.5 公分 × 18 公分)中，並放置於光強度50-65流明(lux)照明下。使用 EthoVision影像追蹤系統(購自Noldus Information Technology, the Netherlands)測試小鼠的自發運動活動力60分鐘。測量每隻小鼠的移動距離做為運動活動力之指標。如第5圖所示，鞣酸會降低經鞣酸處理的小鼠的移動距離，且此降低量與所使用的鞣酸劑量成正相關。

另外執行類似的實驗，其中小鼠是經口服投予10 mg/kg、30 mg/kg、100 mg/kg、300 mg/kg、以及600 mg/kg的單一劑量鞣酸，且測試該些小鼠30分鐘、60分鐘、90分鐘以及 120分鐘的運動活動力。不論以哪種劑量的鞣酸處理，經鞣酸處理的小鼠活動力均較載體控制組的小鼠活動力低。該結果顯示於第6圖。

類焦慮行為

利用由兩個開臂與兩個閉臂構成的高架十字迷宮來評定本能焦慮行為。具有兩開臂(每個長×寬為50 公分× 10 公分)、沒有屋頂且包含45 公分高的牆的兩閉臂(每個長×寬為 50 公分 ×10 公分)、以及一正方形的中心平台(10公分 ×10 公分)的迷宮係抬升距離地板50 公分高。每隻小鼠放置在中心平台中且面對其中一個閉臂，並在50-65流明光強度下觀察5分鐘。藉由EthoVision影像追蹤系統(購自Noldus Information Technology, the Netherlands)記錄小鼠在迷宮的每一部分所逗留的時間及移動距離。

第7圖的A小圖顯示每組小鼠的嫌惡持續時間比(aversive duration ratio)。與控制組相比，以30 mg/kg的鞣酸處理的小鼠組展現較高的嫌惡持續時間比，然而10 mg/kg的鞣酸處理的小鼠組則不然。第7圖B小圖顯示每一組的嫌惡距離比(aversive distance ratio)。相對於控制組而言，以30 mg/kg的鞣酸處理的組顯著地展現較高的嫌惡距離比。第7圖C小圖顯示每組小鼠的風險評估的數字。相較於控制組，兩個經鞣酸處理的組均展現顯著較低的風險評估(所有的 p ＜ 0.05)。

空間學習及記憶

在巴恩斯迷宮(Barnes maze)中測試小鼠對空間學習及記憶能力(方法如先前文獻所述)(Barnes, J Comp Physiol Psychol, 93(1):74-104 [1979])。實驗裝置是一台離地面50 公分高的圓形壓克力板(商品名：PLEXIGLAS®)，該板直徑為100 公分，同時在壓克力板上沿著其周長平均分配有20個洞(直徑7 公分，洞與洞之間間隔7 公分)。訓練小鼠在板上找出藏在目標洞口後的脫逃箱(25 公分× 8公分 × 6 公分)，其類似於在莫氏水迷宮(Morris water maze)測試中的隱藏平台。為每隻小鼠選定目標洞口的位置，但不同小鼠之間則隨機的挑選目標洞口的位置。一開始，將小鼠放置在圓形板的中心並以不透明圓筒蓋住，接著，在開啟嫌惡音頻(aversive tone)(440 Hz，85 dB)以及光源(100流明) 開始試驗之後10秒鐘，移開該不透明圓筒。經過練續三天每日三重複的訓練，小鼠學會避開嫌惡音頻且根據周圍視覺線索找到目標洞口的位置。接著透過「探測試驗(probe test)」測試空間記憶力。用影像記錄所有訓練試驗以及探測試驗3分鐘。接著，分析在訓練試驗中的逃脫逗留時間(escape latency)以及在探測試驗期間在不同象限(目標、左、右以及相反)中的時間百分比。如第8圖顯示的，在探測試驗中，以30 mg/kg的鞣酸處理的組別展現對目標區域有顯著偏好，其他組別不然。

在實施例2所描述的實驗中，檢測多次注射不同劑量鞣酸的小鼠之基礎新陳代謝、行為功能、以及認知行為特徵。總結來說，有三個主要的成果。

首先，以30 mg/kg鞣酸處理之小鼠的體重減輕。這組小鼠同樣也在開放空間試驗中展現較低的自發運動活動力。開放空間試驗是用來檢測新奇誘導的運動活動力以及綜合活動功能(Powell et al., Biol Psychiatry, 59(12):1198-1207 [2006]; van den Buuse, Schizophr Bull, 36(2):246-270 [2010])。不受理論的約束，重複注射鞣酸的小鼠所減少的運動活動力可能肇因於其能快速適應新環境。

第二，在高架十字迷宮測試中，經鞣酸處理的小鼠類焦慮行為減少。高架十字迷宮是用於篩選潛在抗焦慮藥或抗焦慮化合物的一種小鼠模型(Rodgers et al., Braz J Med Biol Res, 30(3):289-304 [1997]; Steimer, Dialogues Clin Neurosci, 13(4):495-506 [2011])。在開臂中停留的時間比例增加表示在迷宮中的焦慮減低。在本實驗中，重複注射鞣酸的小鼠不只展現較高的開臂停留時間，也展現較高的開臂移動距離以及較低的風險評估。這些結果支持重複注射鞣酸可減少在高架十字迷宮中的類焦慮行為。

第三，重複注射鞣酸的小鼠在巴恩斯迷宮中展現增強的空間記憶恢復能力。巴恩斯迷宮是一種用來評估小鼠認知功能的檢測方式，特別是對空間學習及記憶能力的檢測(Rosenfeld et al., J Vis Exp, (84):e51194 [2014])。基於對特定認知功能領域的知識發展一日千里，聚焦於認知缺損在許多精神疾病(包括精神分裂症、失智症、阿茲海默症、憂鬱症以及強迫症(OCD)等)中產生之影響的臨床研究日益增加(Kirova et al., Biomed Res Int, 748212 [2015]; Lai et al., Curr Pharm Des, 20(32):5139-5150 [2014]; Okasha et al., Acta Psychiatr Scand, 101(4):281-285 [2000]; Rosenblat et al., Int J Neuropsychopharmacol, pii: pyv082 [2015]; Terry et al., Ann Neurol, 30(4):572-580 [1991])。在探測測試(記憶提取階段(memory retrieval phase))中，以30 mg/kg處理的鞣酸之組展現對目標區域的偏好。此證據指出重複注射高劑量鞣酸能夠增進正常小鼠的認知功能。此外，NMDA受體訊息傳遞被認為在學習過程以及記憶穩固(memory consolidation)中扮演重要角色(Newcomer et al., Hippocampus, 11(5):529-542 [2001]; Rezvani, Animal Models of Cognitive Impairment, 1(4) [2006])。因此，重複注射鞣酸可透過NMDA訊息傳遞增進認知功能。

如此，本研究之結果表示鞣酸可有效地減輕體重且改善基礎行為功能、過動、焦慮、記憶及/或認知行為。舉例來說，大部分患有 ADHD之孩童同樣也合併患有學習障礙，可透過鞣酸對學習及記憶的效果來改善。實施例 3 ：注射鞣酸對 MK801 處理小鼠的防護及保護效果

本實驗目的是藉由已知的NMDA受體拮抗劑：MK801來評估鞣酸在治療中樞神經系統(CNS)疾病中的潛在作用機制。在行為測試(亦即，開放空間試驗以及前脈衝抑制)之前透過腹腔注射(i.p.)分別對小鼠投予鞣酸及MK801。

實驗設計

本實驗設計是用來分析鞣酸的作用機制。MK801也被稱為地佐環平(dizocilpine)，是一種NDMA受體的拮抗劑 (Kovacic et al., Oxid Med Cell Longev, 3(1):13-22 [2010])。在NMDA功能不足誘導的中樞神經系統疾病之症狀(其包括刻板化行為、失樂症(anhedonia)、學習及記憶缺損、工作記憶以及感覺運動功能異常)的許多、學習及記憶缺損、工作記憶以及感覺運動功能異常)的許多方面都有應用到它(Furuya et al., Eur J Pharmacol, 364(2-3):133-140 [1999]; McLamb et al., Pharmacol Biochem Behav, 37(1):41-45 [1990]; Vardigan et al., Pharmacol Biochem Behav, 95(2):223-229 [2010]; White et al., Pharmacol Biochem Behav, 59(3):613-617 [1998]; Wu et al., Psychopharmacology (Berl), 177(3):256-263 [2005])。這些實驗的目的是用於評估鞣酸在NMDA受體功能低下之小鼠身上的效果。第9圖示例性的說明本實驗設計。

材料與方法

動物以及飼養條件

將C57BL/6J雄性小鼠分群圈養(每籠3-5隻小鼠)於動物房內以聚碸製成的通風鼠籠(購自Alternative Design, AR，美國)中，使其可自由取用食物與飲水。室內溫度維持在 22 ± 2 °C，且飼養環境維持在12/12小時的光/暗循環，而所有的行為實驗均在暗循環期間進行。本實驗使用的動物均為成鼠(至少2.5個月大)。

藥物投予

將小鼠隨機地分成六組： 第1組：PBS + 食鹽水(控制組)； 第2組：PBS + MK801； 第3組：鞣酸 (10 mg/kg) + MK801； 第4組：鞣酸 (15 mg/kg) + MK801； 第5組：鞣酸 (20 mg/kg) + MK801； 第6組：鞣酸 (30 mg/kg) + MK801。

在行為測試之前20分鐘，第2組至第6組的每隻小鼠接受溶解於普通食鹽水的MK-801(購自Sigma-Aldrich，美國)的急性給藥處理(0.1 mg/kg，i.p.)。在投予MK801之前20分鐘，第3組至第6組的每隻小鼠接受溶於PBS的鞣酸(購自Sigma-Aldrich，美國)的急性給藥處理(10、15、20或30 mg/kg，i.p.)。

檢測鞣酸對MK801處理小鼠之效應

本實驗的小鼠均以開放空間試驗以及前脈衝抑制試驗來進行檢測，兩實驗之間至少間隔一週。另一額外的小鼠分群則用來測試不同來源的鞣酸在前脈衝抑制中的效應。

結果

鞣酸對MK801處理小鼠之運動能力的影響

相比於控制組(第1組)，MK801組(第2組)展現高度運動活動力(hyper-locomotion activity)。10mg的鞣酸組、20mg的鞣酸組以及30mg的鞣酸組(第3、5及6組)則展現比控制組還低的運動活動力(如第10圖所示)。相比於MK801組(第2組)，所有鞣酸組別均展現較低的運動活動力，如第10圖所示。

鞣酸對MK801處理小鼠之前脈衝抑制效果──感覺運動功能

前注意處理程序(pre-attentive process)通常是自動且快速、同時不是在清醒意識下運作，反之，需要意識參與的注意程序(deliberate attention process)的資源有限，需要花更多力氣、且是以更慢的速度在運作。一種普遍用於檢測前注意處理程序的方法是前脈衝抑制。此實驗被普遍用於一些精神疾病(例如：精神分裂症、阿茲海默症)之小鼠模型進行檢測，這是因為這些小鼠的缺損表現方式與人類症狀類似的緣故(Arguello et al., Neuron, 52(1):179-196 [2006]; Lai et al., Curr Pharm Des, 20(32):5139-5150 [2014]; McCool et al., Brain Res, 994(1):99-106 [2003])。

藉由SR-LAB驚嚇反應測試裝置(購自San Diego Instruments, San Diego, CA，美國)檢測前脈衝抑制，以作為感覺運動門控功能之指標。在音量為72 dB(分貝)的背景噪音之下，每一節實驗(session)的組成是先有5分鐘的累計期間(accumulation period)，緊接著在四個區段(block)進行64次試驗(trail)。單脈衝(PA)試驗是40 ms、120 dB的白噪音爆發(white noise burst)。在前脈衝(pp)+脈衝試驗中，先給 78 dB (pp6)、82 dB (pp10)及90 dB (pp18)的20 ms白噪音刺激，100 ms後，再給予一40 ms的120 dB脈衝。無刺激(NS)試驗則是僅存有背景噪音。初始及最後區段分別由六個PA試驗組成。中間兩個區段是由PA、pp + 脈衝以及NS試驗所組成。這些試驗是以偽隨機方式(pseudo- randomly)進行，且各試驗之間的間隔平均為15秒(從10秒至20秒不等)。前脈衝抑制的百分比是以下列公式計算：% PPI = 100 × [(PA分數) - (pp-P分數)] / (PA分數)，其中PA分數是中間區段的平均PA值。如第11圖及第12圖所示，鞣酸會改善前脈衝抑制，第11圖顯示鞣酸的改善效應會隨著劑量而變化。

在78 dB的前脈衝強度測試中，六個組別均沒有顯著差異。在82 dB的前脈衝強度中，MK801及鞣酸(10 mg/kg)組相對於控制組沒有顯著差異。另一方面，相對於控制組，鞣酸(15 mg/kg)組展現稍微高一點的前脈衝抑制百分比，且鞣酸(20 mg/kg)組以及鞣酸(30 mg/kg)組明顯具有較高百分比的前脈衝抑制。在90 dB前脈衝強度中，相較於控制組，鞣酸(15 mg/kg)組、鞣酸(20 mg/kg)組以及鞣酸(30 mg/kg)組顯著地展現較高的前脈衝抑制百分比，然而在MK801組以及鞣酸(10 mg/kg)組的小鼠上，沒有觀察到類似結果，如第11圖所示。

不同來源的鞣酸對MK801處理小鼠之前脈衝抑制之效應

本實驗目的在於評估不同來源之鞣酸對前脈衝抑制的效果。在本實驗中分別使用15 mg/kg從美商Sigma-Aldrich購買的鞣酸(來源A)以及從美商Spectrum購買的鞣酸(來源B)。

關於78 dB及82 dB的前脈衝強度，在經兩個來源的鞣酸處理的小鼠以及控制組或MK801組之間沒有觀察到明顯的差異。在90 dB的前脈衝強度中，相比於控制組，兩個鞣酸組均展現出較高的前脈衝抑制百分比，而在MK801組別中並沒有觀察到這樣的結果。如第12圖顯示，經來源A的鞣酸以及來源B的鞣酸處理的小鼠所得的結果相似。

雖然在動物模型中要觀察及測量其精神病症狀具有相當挑戰性，但可測試的精神病相關的行為包括心理動作性激躁(psychomotor agitation)、興奮症狀、感覺門控、以及對擬精神病藥物(psychotomimetic drugs)(諸如MK801)之敏感性(Arguello et al., Neuron, 52(1): 179-196 [2006]; Lai et al., Curr Pharm Des, 20(32):5139-5150 [2014])。在小鼠中，可分別使用在開放空間試驗中與高度運動活動力有關、及與新奇誘導的運動活動力(novelty-induced locomotion activity)的變化(對於習慣新事物或是增加探索方面的損害)有關的參數，分別測量心理動作性激躁以及興奮症狀( Lai et al., Curr Pharm Des, 20(32):5139-5150 [2014]; Powell et al., Biol Psychiatry, 59(12):1198-1207 [2006]; Vardigan et al., Pharmacol Biochem Behav, 95(2):223-229 [2010])。在本研究中的開放空間試驗中，鞣酸是透過i.p.路徑或是經口(p.o.)路徑給予，可逆轉/保護被MK801誘導產生的高度運動活動力。本研究指出鞣酸是可用以治療精神病症狀(例如妄想及幻覺)的潛在治療劑。

在前脈衝抑制試驗中，15 mg/kg的鞣酸就足夠增進被MK-801處理的小鼠之感覺運動門控功能。此外，鞣酸的不同來源也不影響在前脈衝抑制試驗中感覺運動功能的增強效果。前脈衝抑制的缺損已經普遍被認為是小鼠模型中的精神分裂內在表現型(schizophrenic endophenotype)，特別是該缺損表現與人類的相似(Arguello et al., Neuron, 52(1):179-196 [2006]; Geyer et al., Schizophr Bull, 13(4):643-668 [1987]; Lai et al., Curr Pharm Des, 20(32):5139-5150 [2014])。前脈衝抑制的缺損也發生在其他中樞神經系統疾病中，例如自閉譜系疾患(McAlonan et al., Brain, 125(Pt 7):1594-1606 [2002])、強迫症、亨丁頓氏症、夜間遺尿症、注意力缺失(attention deficit disorder)、妥瑞氏症、眼瞼痙攣、非癲癇發作、創傷後精神壓力障礙(Braff et al., Psychopharmacology (Berl), 156(2-3): 234-258 [2001])、恐慌症、躁鬱症、阿茲海默症之輕微失智症、雷維體失智症、以及注意力缺失過動及抽搐症的合併症 (combined attention deficit hyperactivity disorder and tic disorder) (Giakoumaki et al., Biol Psychiatry, 62(12):1418- 1422 [2007]; Ludewig et al., Depress Anxiety, 15(2):55-60 [2002]; Perriol et al., J Neurol Neurosurg Psychiatry, 76(1):106-108 [2005]; Ueki et al., Psychiatry Clin Neurosci, 60(1):55-62 [2006])。

藉此，鞣酸有望可成為適用於多種CNS疾病的治療劑。更甚者，鞣酸同時可降低自發及MK-801誘導的高度運動活動力，這暗示鞣酸可做治療劑，以改善ADHD且其相關疾病的徵狀。

同時，鞣酸可減輕受其治療之小鼠體重，其表明鞣酸可有效地控制體重及/或治療肥胖以及其相關疾病。實施例 4 ：口服給予鞣酸對 MK801 處理小鼠的防護及保護效應

本實驗目的是藉由使用已知的NMDA受體拮抗劑MK801來評估鞣酸在治療中樞神經系統(CNS)疾病中的潛在作用機制。在行為測試之前(亦即，開放空間試驗、前脈衝抑制、巴恩斯迷宮以及蔗糖偏好測試)，分別以口服餵食管灌食(p.o.)以及腹腔 (i.p.)注射的方式對小鼠投予鞣酸及MK801。

實驗設計

本實驗設計來分析鞣酸作用的機制。MK801也被稱為地佐環平(dizocilpine)，是一種NDMA受體拮抗劑 (Kovacic et al., Oxid Med Cell Longev, 3(1):13-22 [2010])。在NMDA功能不足誘導的中樞神經系統疾病之症狀(其包括刻板化行為、失樂症、學習及記憶缺損、工作記憶以及感覺運動功能異常)的許多方面都有應用到它(Furuya et al., Eur J Pharmacol, 364(2-3):133-140 [1999]; McLamb et al., Pharmacol Biochem Behav, 37(1):41-45 [1990]; Vardigan et al., Pharmacol Biochem Behav, 95(2):223-229 [2010]; White et al., Pharmacol Biochem Behav, 59(3):613-617 [1998]; Wu et al., Psychopharmacology (Berl), 177(3):256-263 [2005])。這些實驗的目的是用於評估鞣酸在NMDA受體功能低下之小鼠的效果。第13圖示例性的說明本實驗設計。

材料與方法

動物以及飼養條件

將C57BL/6J雄性小鼠分群圈養(每籠3-5隻小鼠)於動物房內由聚碸製成的通風鼠籠(購自Alternative Design, AR，美國)中，使其可任意採食食物與水。室內溫度維持在 22 ± 2 °C，且飼養環境維持在12/12小時的光/暗循環，而所有的行為實驗均在暗循環期間進行。本實驗使用的動物均為成鼠(至少2.5個月大)。

藥物投予

將小鼠隨機地分成五組： 第1組：PBS + 食鹽水(控制組)； 第2組：PBS + MK801； 第3組：鞣酸 (10 mg/kg) + MK801； 第4組：鞣酸 (30 mg/kg) + MK801；以及 第5組：鞣酸 (100 mg/kg) + MK801。

在行為測試前20分鐘，藉由i.p.注射對第2組至第5組的每一隻小鼠急性投予溶於普通食鹽水的MK-801(購自Sigma-Aldrich，美國)，用於開放空間試驗與巴恩斯迷宮試驗的小鼠劑量為0.1 mg/kg、用於前脈衝抑制以及蔗糖偏好測試的小鼠劑量則是0.2 mg/kg。在投予MK801之前20分鐘，第3組至第5組的每隻小鼠則是急性口服給予溶於PBS的鞣酸(購自Merck Millipore，德國) (10、30或100 mg/kg，p.o.)。

結果

檢測鞣酸對MK801處理小鼠之效應

本實驗的小鼠均以開放空間試驗、前脈衝抑制試驗、巴恩斯迷宮以及蔗糖偏好測試來進行檢測，兩實驗之間至少間隔一週。

口服投予鞣酸對MK801處理小鼠運動能力之影響

在本測試中，在注射MK801 (0.1 mg/kg)前20分鐘，先口服投予鞣酸。如第14圖所示， MK801會誘發過動，而鞣酸可減少MK801所誘發的過動，且其效果與鞣酸的劑量成正相關。

鞣酸對MK801處理小鼠之前脈衝抑制的效應

相比於控制組，MK801 (0.2 mg/kg)會誘發強烈的前脈衝抑制缺損。在78 dB及82 dB的前脈衝強度下，鞣酸(10、30以及100 mg/kg)無法防護/保護被MK801誘導的前脈衝抑制缺損。至於在90 dB的前脈衝強度下，相比於MK801組，鞣酸(30 mg/kg)組以及鞣酸(100 mg/kg)組則可顯著地防護/保護MK801誘導之前脈衝抑制缺損。然而在MK801及鞣酸(10 mg/kg)組中，則沒有觀察到這樣的結果，參見第15圖所示。

鞣酸對MK801處理小鼠之空間學習及記憶的效果

如第16圖所示，鞣酸可改善經MK-801處理小鼠在巴恩斯迷宮試驗中的記憶提取(memory retrival)的能力，且此改善程度與鞣酸的劑量呈現正相關。

鞣酸對MK-801處理小鼠之類憂鬱行為(失樂症)的效果

相較於控制組，MK-801組的小鼠並沒有展現對蔗糖溶液(2%)的偏好。相比於MK801群組，以30 mg/kg及100 mg/kg之鞣酸處理的小鼠分別對被MK801誘導的類憂鬱行為(失樂症)展現防護/保護效應，參見第17圖。實施例 5 ：鞣酸在小鼠中的鎮痛效果

本實驗目的在於評估鞣酸在小鼠中的鎮痛效果。在行為測試(亦即腳底觸覺敏感度測試(von Frey test))之前，透過腹腔(i.p.)注射對小鼠投予鞣酸。

實驗設計

在腳底觸覺敏感度測試(其係痛覺的典型試驗)中使用了另一群小鼠。在藥物注射之前，以及藥物注射之後30分鐘、60分鐘、90分鐘以及120分鐘分別量取每隻小鼠的腳掌退縮閾值(如第22圖顯示)。

材料與方法

動物以及飼養條件

將C57BL/6J雄性小鼠分群圈養(每籠5隻小鼠)於動物房內由聚碸製成的通風鼠籠(購自Alternative Design, AR，美國)中，其可任意取用食物與飲水。室內溫度維持在 22 ± 2 °C，且飼養環境維持在12/12小時的光/暗循環，而所有的行為實驗均在暗循環期間進行。本實驗使用的動物均為成鼠(至少8週大)。

藥物投予

將小鼠隨機地分成兩組： 第1組：PBS控制組；以及 第2組：鞣酸 (15 mg/kg)組

透過i.p.注射急性給予第1組中的每隻小鼠作為載體控制物的PBS。第2組中的每一隻小鼠則接受鞣酸(購自Merck Millipore，德國；溶於PBS中，並透過i.p.給予15 mg/kg)的急性給藥。

結果

對小鼠注射鞣酸的鎮痛效果

在基線中，不同組別之間沒有差異。相比於PBS控制組，第2組在注射藥物後30分鐘、60分鐘以及90分鐘的閾值，明顯高於控制組的閾值(如第19圖所示)。實施例 6 ：不同鞣酸組合物之比較

在本試驗中，比較由三種不同供應商提供之市售鞣酸的組成分以及其抑制D-胺基酸氧化酶(DAAO)之活性。

實驗設計

透過HPLC測定三種市售鞣酸之組成分，且藉由實施例1所描述的方法測定該鞣酸抑制DAAO活性的能力。

材料與方法

HPLC條件

儀器：Agilent 1260；管柱：Atlantis T3 150*4.6mm，30 μm

流動相A：水 + 0.1% 的三氟乙酸

流動相B：甲醇：乙腈為2:8 (v/v)

管柱溫度：25℃

偵測器：DAD 280 nm

流速：1.5 mL/分鐘

樣本製品：10 mg/mL

注射體積：10 mL

稀釋劑：水

梯度：

結果

組成分：

來自不同植物來源的三種鞣酸之HPLC層析圖示於第20至22圖。

抑制DAAO活性：

三種市售鞣酸抑制DAAO活性的效果以及其組成分列於表5。

表5：來自不同植物來源的三種市售鞣酸之抑制活性

相較於從沒食子櫟(Quercus infectoria )萃取的鞣酸，從鹽膚木(Rhus chinensis )萃取的鞣酸具有較高比例的6-12G及較少比例的2-5G。實施例 7 ：從不同植物來源的五倍子之鞣酸萃取物的比較

本試驗探查了前述自不同植物來源之五倍子萃取的鞣酸以及其抑制D-胺基酸氧化酶(DAAO)活性的能力。

方法

五倍子研磨方法

以機械研磨器研磨一適當植物來源之可產生鞣酸的五倍子(列於下表6)，再令其通過40網目篩網，以產生細五倍子粉末。

細五倍子粉末之萃取方法

將細五倍子粉末(20.0 g)置於200.0 mL的合適溶劑(例如：丙酮、乙腈、甲乙酮(MEK)、乙酸乙酯(EtOAc)、乙醇 (EtOH)、異丙醇、四氫呋喃、或1,4-二㗁烷)中。在室溫下或是在 40℃下，將所形成的混合物攪拌隔夜。接著過濾該產物溶液，且在真空下濃縮該濾液以產生含有鞣酸的組合物。

結果

抑制DAAO活性的能力：

遵照前述方法，自不同植物來源的五倍子萃取鞣酸，其抑制DAAO活性的效果總結於表6。不同大小(直徑)的五倍子及其抑制DAAO 之IC₅₀ 的比較結果圖示於第23圖。

表6：從不同植物來源之五倍子所萃取之鞣酸的抑制活性

如表6及第23圖所示，相較於自沒食子櫟(Quercus infectoria )的五倍子所獲得的鞣酸，自鹽膚木(Rhus chinensis )或青麩楊(Rhus potaninii )之五倍子萃取而得的鞣酸，其抑制DAAO活性的IC₅₀ 數值較低(代表其具有較強的抑制效果)。此外，相較於相同植物來源之較大尺寸五倍子(直徑 6-7 公分)而言，來自鹽膚木(Rhus chinensis )的較小尺寸的五倍子(直徑3-4 公分)及來自青麩楊(Rhus potaninii )的較小尺寸的五倍子(直徑4-5 公分)，其分別具有較小的IC₅₀ 值。實施例 8 ：從不同植物來源之五倍子萃取的鞣酸之精製純化方法

可藉由以下方法將本文揭示的每種植物來源之五倍子所萃取的鞣酸進行精製純化。並評估其抑制DAAO活性的效果。

精製純化方法1

將細五倍子粉末(20.0 g)置於200.0 毫升的合適溶劑(丙酮、甲乙酮、乙酸乙酯或乙醇)並在室溫或40℃下 攪拌該混合物12小時。接著，過濾該產物溶液，且在真空下濃縮該濾液以形成含有鞣酸的組合物。將組合物與50.0 毫升的50%或30% 的甲乙酮/己烷溶液(在己烷中有50%或30% 的甲乙酮)混合。接著，將前述步驟形成的混合物在室溫下攪拌12小時，如此將產生兩分隔的有機層。在真空中濃縮油層(下層)以產生一粗固體。將該固體溶於50.0 毫升 的合適溶劑(丙酮、甲乙酮、乙酸乙酯或乙醇)中且所產生的溶液與活性碳(1.6 克)進行混合。將所產生的混合物在室溫下攪拌12小時且將CaSO₄ 或MgSO₄ (2.5 克)加入混合物中。接著將前述步驟形成的混合物進一步於室溫下攪拌30分鐘，並通過矽藻土床(商品名Celite)過濾，並以合適溶劑(丙酮、甲乙酮、乙酸乙酯或乙醇)(100毫升，2次)洗滌，並在真空下濃縮。將產物固體(含有鞣酸)溶解於丙酮或乙酸乙酯(12.0 毫升)中 ，接著攪拌所形成的溶液並以與CH₂ Cl₂ (72.0 毫升)滴式混合。藉由過濾收集前述所形成的固體，以及在40℃下真空乾燥2小時，以產生精製純化後鞣酸固體。

精製純化方法2

將細五倍子粉末(20.0 克)置於200.0 毫升的合適溶劑(丙酮、甲乙酮、乙酸乙酯、乙醇)中並於室溫下攪拌12小時。所形成的溶液進行過濾，且經過濾所收集的濾液以200.0 毫升 的己烷混合。接著將前述步驟形成的混合物在室溫攪拌12小時，如此將產生兩分隔的有機層。在真空中濃縮油層(下層)，且將所得的固體溶於50.0 毫升的合適溶劑 (丙酮、甲乙酮、乙酸乙酯、乙醇等)中。將所得之產物溶液與活性碳(1.6 克)進一步混合並在室溫下攪拌12小時。接著將所獲得的混合物進一步與CaSO₄ 或MgSO₄ (2.5 克)混合，並於室溫下攪拌30分鐘。混合物透過矽藻土床(商品名Celite)進行過濾，並以(丙酮、甲乙酮、乙酸乙酯、乙醇等)溶液洗滌(100 毫升，2次)，並在真空中濃縮。所得的粗產物溶於丙酮或乙酸乙酯(12.0 毫升)中，所形成的溶液則與CH₂ Cl₂ (72.0 毫升)緩慢攪拌混合。藉由過濾收集前述所形成的固體，以及在40℃下真空乾燥2小時，以產生精製純化後鞣酸組合物。

精製純化方法3

將細五倍子粉末(20.0 克)置於200.0 毫升的合適溶劑(丙酮、甲乙酮、乙酸乙酯或乙醇)中並於室溫下攪拌12小時。過濾產物溶液，且收集濾液。接著加入200.0 毫升 的己烷於濾液中。接著將前述步驟形成的混合物在室溫下攪拌12小時，如此將產生兩分隔的有機層。收集油層(下層)，並與40.0 毫升的溶劑 (丙酮、甲乙酮、乙酸乙酯或乙醇)以及活性碳 (1.6 克)進行混合，並於室溫下攪拌結果混合物12小時。混合物進一步與CaSO₄ 或MgSO₄ (2.5 克)混合，並在室溫下攪拌30分鐘，透過矽藻土床(商品名Celite)進行過濾，並以溶劑(丙酮、甲乙酮、乙酸乙酯、乙醇) (100 毫升，2次)洗滌。接著在真空中濃縮所收集的濾液，並將產物固體物質溶於丙酮或乙酸乙酯(12.0 毫升)。將前述形成的溶液攪拌並與CH₂ Cl₂ (72.0 毫升)滴式混合。藉由過濾收集前述所形成的固體，以及在40℃下真空乾燥2小時，以產生精製純化後鞣酸組合物。

精製純化方法4

將細五倍子粉末(20.0 克)置於200.0 毫升的合適溶劑(丙酮、甲乙酮、乙酸乙酯或乙醇)中並於室溫下攪拌12小時。將混合物與活性碳 (1.6 克)混合並於室溫下攪拌12小時。混合物進一步與CaSO₄ 或MgSO₄ (2.5 克)混合，並在室溫下攪拌30分鐘，透過矽藻土床(商品名Celite)進行過濾，並以溶劑(丙酮、甲乙酮、乙酸乙酯、乙醇) (100 毫升，2次)洗滌。接著在真空中濃縮濾液，產出的殘餘物溶於丙酮或乙酸乙酯(12.0 毫升)，且所形成的溶液與CH₂ Cl₂ (72.0 毫升)緩慢攪拌混合。藉由過濾收集前述所形成的固體，以及在40℃下真空乾燥2小時，以產生精製純化後鞣酸組合物。

精製純化方法5

將細五倍子粉末(20.0 克)置於200.0 毫升的合適溶劑(丙酮、甲乙酮、乙酸乙酯或乙醇)中並在室溫下攪拌該混合物12小時。將混合物與活性碳 (1.6 克)混合並於室溫下攪拌12小時。將混合物進一步與CaSO₄ 或MgSO₄ (2.5 克)混合，並在室溫下攪拌30分鐘。該混合物透過矽藻土床(商品名Celite)進行過濾，並以溶劑(丙酮、甲乙酮、乙酸乙酯或乙醇) (100 毫升，2次)洗滌。將濾液濃縮至約10~15 毫升，且將產物溶液與CH₂ Cl₂ (60~90 毫升) 滴式混合。藉由過濾收集前述所形成的固體，以及在40℃下真空乾燥2小時，以產生精製純化後鞣酸組合物。

精製純化方法6

將細五倍子粉末(20.0 克)置於200.0 毫升的合適溶劑(丙酮、甲乙酮、乙酸乙酯或乙醇)中並在室溫下攪拌該混合物12小時，之後過濾。收集濾液，將濾液與活性碳 (1.6 克)混合並於室溫下攪拌12小時。將混合物進一步與CaSO₄ 或MgSO₄ (2.5 克)混合，並在室溫下攪拌30分鐘。該混合物透過矽藻土床(商品名Celite)進行過濾，並以溶劑(丙酮、甲乙酮、乙酸乙酯或乙醇) (100 毫升，2次)洗滌，且混合的濾液可藉由真空蒸發進行濃縮。所得的粗固體溶於丙酮或乙酸乙酯(12.0 毫升)中，所形成的溶液則與CH₂ Cl₂ (72.0 毫升)緩慢攪拌混合。藉由過濾收集前述方法形成的固體，以及在40℃下真空乾燥2小時，以產生精製純化後鞣酸組合物。

精製純化方法7

將細五倍子粉末(20.0 克)放置於50.0 毫升 的50% 或30%的甲乙酮/己烷中，並於室溫下攪拌12小時。過濾產物混合物且收集固體。接著將固體與200.0 毫升的溶劑(丙酮、甲乙酮、乙酸乙酯或乙醇)混合。所形成的混合物在室溫下攪拌12小時，接著過濾並收集濾液。將濾液與活性碳(1.6 克)混合並於室溫下攪拌12小時。將所得的混合物進一步與CaSO₄ 或MgSO₄ (2.5 克)混合，並在室溫下攪拌30分鐘。該混合物透過矽藻土床(商品名Celite)進行過濾，並以溶劑(丙酮、甲乙酮、乙酸乙酯或乙醇) (100 毫升，2次)洗滌，且濾液藉由真空蒸發進行濃縮。所獲得的殘餘物溶於丙酮或乙酸乙酯(12 毫升)中，且接著將該溶液與CH₂ Cl₂ (72.0 毫升)滴式攪拌混合。藉由過濾收集前述所形成的固體，以及在40℃下真空乾燥2小時，以產生精製純化後鞣酸組合物。

精製純化方法8

將細五倍子粉末(20.0 克)放置於50.0 毫升 的50% 或30% 甲乙酮/己烷中，並於室溫下攪拌12小時。接著將溶液過濾並將所收集得之固體與200.0 毫升的溶劑(丙酮、甲乙酮、乙酸乙酯或乙醇)混合。混合物在室溫下攪拌12小時並過濾，接著收集濾液並與活性碳 (1.6 克)混合，並在室溫下攪拌12小時。將所得的混合物進一步與CaSO₄ 或MgSO₄ (2.5 克)混合，並在室溫下攪拌30分鐘。該混合物透過矽藻土床(商品名Celite)進行過濾，並以溶劑(丙酮、甲乙酮、乙酸乙酯或乙醇) (100 毫升，2次)洗滌，且濾液濃縮成約10~15 毫升之體積。將殘餘溶液與CH₂ Cl₂ (60~90 毫升)緩慢地混合並過濾以收集所形成的固體，並在 40℃下真空乾燥2小時以產生精製純化後鞣酸組合物。

精製純化方法 9

將細五倍子粉末(20.0 克)置於200.0 毫升的合適溶劑(丙酮、甲乙酮、乙酸乙酯或乙醇)中並於40至45℃下攪拌12小時。過濾溶液並將收集的濾液置於200.0 毫升的己烷中。接著將前述步驟形成的混合物在室溫攪拌12小時，如此將產生兩分隔的有機層。所收集的油層(下層)與40.0 毫升的溶劑(丙酮、甲乙酮、乙酸乙酯或乙醇)混合，且所形成的溶液與活性碳 (1.6 克)混合並於室溫下攪拌12小時。將所得的混合物進一步與CaSO₄ 或MgSO₄ (2.5 克)混合，並在室溫下攪拌30分鐘。該混合物透過矽藻土床(商品名Celite)進行過濾，並以溶劑(丙酮、甲乙酮、乙酸乙酯或乙醇) (100 毫升，2次)洗滌，且濾液在真空下濃縮。將所獲得的殘餘物溶於丙酮或乙酸乙酯(12 毫升)中，且接著將該溶液與CH₂ Cl₂ (72.0 毫升)滴式攪拌混合。藉由過濾收集前述所形成的固體，以及在40~45℃下真空乾燥2小時，以產生精製純化後鞣酸組合物。

結果

抑制DAAO活性的效果：

表7及表8總結了從不同植物來源之五倍子萃取的不同方式精製純化的鞣酸抑制DAAO活性的效果。

表7： 從不同植物來源之五倍子所萃取之精製純化後鞣酸的抑制活性-1 ＃

如表7，相較於未經精製純化(僅直接萃取、沒有移除具2至5個沒食子醯基團的鞣酸、不經與活性碳、CaSO₄ 或MgSO₄ 處理、及/或不與第二溶劑以及二氯甲烷處理)的鞣酸而言，以本文描述的任一方法所獲得的精製純化後鞣酸，均具有較低的IC₅₀ 值(代表其具有較強的抑制活性)。更甚者，與前述精製純化方法1及7所提供的精製純化後鞣酸相比，前述精製純化方法2及3所提供的精製純化後鞣酸具有最低的IC₅₀ 之抗DAAO的活性，且精製純化方法3所提供的精製純化後鞣酸的IC₅₀ 值比精製純化方法2提供的精製純化後鞣酸要更低。如本文所示，遵照精製純化方法1以EtOH萃取的鞣酸，比起以相同方法但以MEK萃取的鞣酸而言，其抑制DAAO的能力稍微較弱。

表8：從不同植物來源之五倍子所萃取之精製純化後鞣酸的抑制活性-2

如表8所列，比起分別在室溫下以MEK萃取、在40℃下以MEK萃取，以及根據精製純化方法3在40℃的溫度下以MEK萃取所得的精製純化後鞣酸，根據精製純化方法3在40℃的萃取溫度下，以乙酸乙酯(EtOAc)所萃取的精製純化後鞣酸具有較低的抗DAAO之IC₅₀ 值。更甚者，如表6及表8所示，從鹽膚木(Rhus chinensis )之直徑不超過6 公分的五倍子取得的精製純化後鞣酸的IC₅₀ 值低於從直徑超過6 公分的五倍子取得之精製純化後鞣酸的IC₅₀ 值。 其他實施例

本說明書揭示內容的所有特徵可以以任何組合方式進行組合。本說明書揭示的每一個特徵可以被出自於相同、等同或相似目的的可替換特徵取代。因此，除非另有說明，本發明所公開的各個特徵只是一系列等同或相似特徵中的一個實例。

本發明所屬技術領域中具有通常知識者可從以上敘述輕易地確定本揭示內容的必要技術特徵，在不偏離本發明精神和範圍的基礎上，可以對本揭示內容做出各種改變以及使其適應多種用途和情況，因此，其他實施方式也包含於申請專利範圍中。 均等範圍

雖然本文已經描述和圖示了若干發明實施方式，但是本發明所屬技術領域中具有通常知識者可容易預想到用於執行本文所描述的功能及/或獲得本文所描述的結果及/或一或多個優點的各種裝置及/或結構，且且每一個這樣的變化及/或修飾仍被視為在本揭示內容描述的發明實施方式之範疇內。更普遍地情況是，本發明所屬技術領域中具有通常知識者將容易理解本文描述的所有參數、尺寸、材料以及配置旨在示例性地說明，而實際的參數、尺寸、材料及/或配置將取決於發明教示中所使用的具體應用。本發明所屬技術領域中具有通常知識者將會認識到或是能夠僅使用例行常規的實驗就可確定本揭示內容描述的具體實施例的許多同等方案。因此，要理解的是，前述實施方式僅透過示例的方式呈現，並且在附錄的申請專利範圍及其同等方案的範圍內，也可在除了如具體描述和要求保護的範圍之外，以其他方式來實踐本發明的實施方式。本揭示內容之發明實施方式涉及本文所描述的每個獨特特徵、系統、製品、材料、套組及/或方法。此外，如果這樣的特徵、系統、製品、材料、套組及/或方法不相互矛盾的話，任意兩個或更多這樣的特徵、系統、製品、材料、套組及/或方法的組合都包括在本揭示內容中的發明範疇內。

本揭示內容界定及使用的所有定義應當被理解是支配字典定義、透過引用併入本文的定義、及/或被限定的字詞的普通涵義。

本文揭示的所有參考文獻、專利案以及專利申請案中被引用的請求標的在此一併納入本文，在某些情況下可以包含文件的整體。

除非明顯地相反，否則本文在說明書及申請專利範圍中使用的不定冠詞「一("a"及"an")」應當理解成意指「至少一」。

如本文在說明書中和申請專利範圍中使用的詞語「及/或(and/or)」應當理解成意指藉此連結在一起的元件中的「任一個或兩者」，亦即，在一些情况下結合存在並且在其它情况下分開存在的元件。透過「及/或」列出的多個元件應當以相同方式來解讀，亦即，藉此連結在一起的元件中的「一個或多個」。除了藉由「及/或」子句具體界定的元件之外，仍可選擇性地存在其它元件，無論與具體界定的那些元件相關或無關均可。藉此，作為非限制性實例，當與諸如「包含、包括(comprising)」之類的開放式語言結合使用時，對「A及/或B」的引用可以在一個實施方式中僅指A(可選擇性地包含除了B之外的元件)；在另一實施方式中是僅指B(可選擇性地包含除了 A之外的元件)；在又一實施方式中是指A和B二者(可選擇性地包括其它元件)等。

如本文在說明書中和申請專利範圍中所使用的「或」應當理解成具有與以上「及/或」的定義相同的含義。舉例來說，當在列表中羅列項目時，「或」或者「及/或」應當解釋為包括性的，亦即，包括至少一個，但是也包括數個元件或元件列表中一個以上的，以及可選擇性地包括額外未列出的項目。除非有明顯指示相反的詞語，否則像是「僅一個」或「就其中一個」、 或在申請專利範圍中使用時的「由……組成」，將是指包括在數個元件或元件列表中的就那一個元件的情況。一般而言，當前面有諸如「任一個(either)」、「之一(one of)」、「唯一(only one of)」、或「就那一(exactly one of)」之類的排他性詞語時，本文所使用的詞語「或」應當僅被解釋為指示排他性的可替換方案(亦即：「某一個或另一個但非二者」)。當在申請專利範圍中使用時，「由……構成」應當具有如其在專利法領域中使用的普通含義。

如本文在說明書中和申請專利範圍中使用的，在參照一個或多個元件的列表時，詞語「至少一」應當理解成意指從元件列表中的任何一個或多個元件選出的至少一個元件， 但是不一定包括在元件列表內具體列出的每一個元件中的至少一個，並且不排除元件列表 中的多個元件的任何組合。該定義還允許可以可選擇性地存在除了詞語「至少一個」所指的元件列表 內具體界定之元件之外的元件，無論該元件與具體界定的那些元件相關還是無關均可。因此，作為非限制性的實施例，「A和B中的至少一」(或等同語「A或B中的至少一」、或等同語「A及/或B中的至少一」)在一個實施例中可以是指至少一個，可選擇性地包括多於一個A，且沒有B存在(並且可選擇性地包括除了B之外的元件)；在另一實施例中是指至少一個，可選擇性地包括多於一個B，且沒有A存在(並且可選擇性地包括除了A之外的元件)；在又一實施例中是指至少一個，可選擇性地包括多於一個 A，以及至少一個，可選擇性地包括多於一個B (並且可選擇性地包括其它元件)等。

應當理解的是，除非明顯相反地指明，否則在本揭示內容之申請專利範圍保護的任何包括多於一個步驟或動作的方法中，方法的步驟或動作的次序不必限於其敘述該方法的步驟或動作的順序。

無

以下的圖式形成本說明書的一部分，且被包含進本說明書中以進一步說明本揭示內容的某些態樣。一或多個這些圖式可與本文所提出的具體實施方式之詳細說明相互結合，且參考這些圖式可更加地理解本發明。

第1圖顯示鞣酸族群抑制D-胺基酸氧化酶(D-amino acid oxidase, DAAO)之結果。

第2圖顯示在 300 nM下具有不同沒食子醯基團數量的鞣酸之抗-DAAO活性結果。具有3個沒食子醯基團者幾乎沒有活性。相較於具有三個沒食子醯基團的鞣酸而言，具有四個或更多沒食子醯基團的鞣酸具有較高的抑制DAAO的活性。沒食子醯基團的數目越多，抑制DAAO的效能越強。

第3圖繪示出用於評估鞣酸在改善基礎行為功能、焦慮、憂鬱、記憶、感覺運動門控及認知行為功能上的活性的實驗設計流程。小鼠每隔一日注射10 mg/kg或30 mg/kg的載體或是鞣酸。每隔一日測量經處理的小鼠之體重。在不進行注射給藥的日子執行行為測試。

第4圖顯示在給藥處理期間，載體控制組及以不同劑量鞣酸處理的小鼠之體重變化。投予10 mg/kg的鞣酸會阻礙小鼠體重增加，投予30 mg/kg的鞣酸則使小鼠體重下降。

第5圖繪示小鼠在經過重複注射鞣酸或是載體之後，其自發運動活動力下降之結果。

第6圖繪示以單一餵食管灌食各種劑量的鞣酸(購自Merck Millipore，德國)後，小鼠運動活動力隨著劑量降低之結果。

第7圖包括相對於載體的小鼠而言，重複注射鞣酸，可改善小鼠之類焦慮行為的結果圖。A小圖：每一組的嫌惡持續時間。B小圖：每一組的嫌惡持續時間比。C小圖：每一組的風險評估數目。

第8圖繪示出相對於載體的小鼠而言，重複注射鞣酸改善小鼠空間記憶恢復能力之結果。

第9圖繪示出用以評估鞣酸對MK801處理小鼠的效應(如實施例3所描述)之示例性實驗設計。透過開放空間試驗以及前脈衝抑制試驗，分別檢測經鞣酸或是載體處理的小鼠之自發運動活動力以及感覺運動功能，每個試驗之間至少間隔一週。在投予MK801(或載體)前20分鐘，對每隻小鼠投予鞣酸(或載體)。此外，在行為測試前20分鐘，對每隻小鼠投予MK801(或載體)。

第10圖顯示透過單一口服投予鞣酸，其減少MK801-誘導之過動效應隨著劑量變化的結果。

第11圖顯示鞣酸改善前脈衝抑制效應隨劑量變化的結果。

第12圖顯示來自不同來源之鞣酸改善前脈衝抑制之效果。

第13圖顯示用以評估鞣酸對MK801處理小鼠的效應(如實施例3所描述)之示例性實驗設計。透過開放空間試驗、前脈衝抑制、巴恩斯迷宮、蔗糖偏好測試，分別試驗經鞣酸或載體與MK-801處理小鼠之自發運動活動力以及感覺運動功能的效果。每個試驗之間至少間隔一週。在注射MK801(或載體)前20分鐘，透過i.p.注射對每隻小鼠投予鞣酸(或載體)。此外，在行為測試前20分鐘，透過i.p.注射對每隻小鼠投予MK801(或載體)。

第14圖顯示鞣酸改善MK-801誘導的過動性隨劑量變化之效應。

第15圖為顯示鞣酸改善MK-801中斷的前脈衝抑制之效應隨劑量變化的結果。

第16圖顯示在巴恩斯迷宮試驗中，鞣酸改善MK-801中斷的工作記憶隨劑量變化的效果。

第17圖為鞣酸改善MK-801中斷的蔗糖偏好測試之效應隨劑量變化的結果。

第18圖顯示用以在腳底觸覺敏感度測試中評估鞣酸對小鼠之效應的示例性實驗設計。透過i.p.注射對每隻小鼠投予鞣酸(或載體)。

第19圖顯示在注射鞣酸或載體 (PBS)後，改善腳掌退縮疼痛閾值隨時間變化的之的結果。

第20圖為含有源自沒食子櫟(Quercus infectoria )之鞣酸的組合物的HPLC層析圖。

第21圖為含有來自鹽膚木(Rhus chinensis )之鞣酸的組合物的HPLC層析圖。

第22圖為含有來自鹽膚木(Rhus chinensis )之鞣酸的組合物的HPLC層析圖。

第23圖顯示從各種記載的植物來源取得之五倍子萃取而得的鞣酸抑制DAAO活性的結果。

Claims (66)

1. 一種組合物，其包含(i)一鞣酸混合物或一其可接受的鹽、以及(ii)一載體，其中該組合物實質上不含具有四個以下之沒食子醯基團的鞣酸。
2. 如請求項1所述之組合物，其中該鞣酸混合物包含具有4至10個沒食子醯基團之鞣酸。
3. 如請求項1所述之組合物，其中該鞣酸混合物包含具有5至12個沒食子醯基團之鞣酸。
4. 如請求項2所述之組合物，其中該鞣酸混合物包含具有5至10個沒食子醯基團之鞣酸。
5. 如請求項3所述之組合物，其中該鞣酸混合物包含具有8至12個沒食子醯基團之鞣酸。
6. 如請求項1-5任一項所述之組合物，其中該鞣酸混合物中具有1-5個沒食子醯基團的鞣酸總量不超過總鞣酸含量的20%。
7. 如請求項1-6任一項所述之組合物，其中該鞣酸混合物中至少50%的鞣酸具有6-12個沒食子醯基團。
8. 如請求項7所述之組合物，其中該鞣酸混合物中至少50%的鞣酸具有8-12個沒食子醯基團。
9. 如請求項1-8任一項所述之組合物，其中該鞣酸混合物包含源自於由鹽膚木(Rhus chinensis )、鹽骨木(Rhus javanica )、鹽麩子(Rhus semialata )、西西里漆樹(Rhus coriaria )、青麩楊(Rhus potaninii )、紅麩楊(Rhus punjabensis var. sinica (Diels) Rehder & E.H. Wilson)、茶樹(Camellia sinensis )、漿果、胭脂樹(Bixa orellana )、葡萄(Vitis vinifera )、石榴(Punica granatum )、沒食子櫟(Quercus infectoria )、土耳其櫟(Quercus cerris )、黑荊(Acacia mearnsii )、花旗松(Pseudotsuga menziesii )、刺雲實(Caesalpinia spinosa )、臺灣水青岡(Fagus hayata Palib. ex Hayata)以及豬腳楠(Machilus thunbergii Sieb. & Zucc.) 所組成之群組的至少一植物來源之鞣酸。
10. 如請求項1-8任一項所述之組合物，其中該鞣酸混合物包含源自於由鹽膚木(Rhus chinensis )、鹽骨木(Rhus javanica )、鹽麩子(Rhus semialata )、西西里漆樹(Rhus coriaria )、青麩楊(Rhus potaninii )、紅麩楊(Rhus punjabensis var. sinica (Diels) Rehder & E.H. Wilson)所組成之群組的至少一植物來源之鞣酸。
11. 如請求項10所述之組合物，其中該鞣酸混合物包含源自於由鹽膚木(Rhus chinensis )、青麩楊(Rhus potaninii )、以及紅麩楊(Rhus punjabensis var. sinica (Diels) Rehder & E.H. Wilson)所組成之群組的至少一植物來源之鞣酸。
12. 如請求項1-8任一項所述之組合物，其中該鞣酸混合物包含從至少一種需要一昆蟲於其上築巢之植物來源中取得的鞣酸，該昆蟲係選自於由雲石紋癭蜂(Andricus kollari )、洋薊癭蜂(Andricus fecundatrix )、癭櫟癭蜂(Andricus quercuscalicis )、癭櫟癭蜂(Andricus quercuscalicis )、櫟蘋果癭蜂(Biorhiza pallida )、亮片癭蜂(Neuroterus quercusbaccarum )、平滑亮片癭蜂(Neuroterus albipes )、絲鈕扣癭蜂(Neuroterus numismalis )、櫻桃癭蜂(Cynips quercusfolii )、角倍蚜(Melaphis chinensis (Bell))、倍蛋蚜(Melaphis peitan Tsai et Tang)、圓角倍蚜(Nurudea sinica Tsai et Tang)、倍花蚜(Nurudea shiraii Matsumura)、紅倍花蚜(Nurudea rosea Matsumura)、紅小鐵棗蚜(Meitanaphis elongallis Tsai et Tang)、棗鐵倍蚜(Macrorhinarium ensigallis Tsai et Tang)、蛋鐵倍蚜(Macrorhinarium ovagallis Tsai et Tang)、鐵倍花蚜(Floraphis meitanensis Tsai et Tang)、黃毛小鐵棗蚜(Meitanaphis flavogallis Tang)、肚倍蚜(Kaburagia rhusicola Takagi)、蛋肚倍蚜(Kaburagia ovatihuicola Xiang)、棗鐵倍蚜(Kaburagia ensigallis Tsai et Tang)、蛋鐵倍蚜(Kaburagia ovogallis )、肚倍蚜(Kaburagia thusicola Takagi)、米倍蚜(Meitanaphis microgallis Xiang)、以及周氏倍花蚜(Floraphis choui Xiang)所組成之群組。
13. 如請求項1-8任一項所述之組合物，其中該鞣酸混合物包含從至少一種需要一昆蟲於其上築巢之植物來源中取得的鞣酸，該昆蟲係選自於由角倍蚜(Melaphis chinensis (Bell))、倍蛋蚜(Melaphis peitan Tsai et Tang)、圓角倍蚜(Nurudea sinica Tsai et Tang)、倍花蚜(Nurudea shiraii Matsumura)、紅倍花蚜(Nurudea rosea Matsumura)、紅小鐵棗蚜(Meitanaphis elongallis Tsai et Tang)、棗鐵倍蚜(Macrorhinarium ensigallis Tsai et Tang)、蛋鐵倍蚜(Macrorhinarium ovagallis Tsai et Tang)、鐵倍花蚜(Floraphis meitanensis Tsai et Tang)、黃毛小鐵棗蚜(Meitanaphis flavogallis Tang)、肚倍蚜(Kaburagia rhusicola Takagi)、蛋肚倍蚜(Kaburagia ovatihuicola Xiang)、棗鐵倍蚜(Kaburagia ensigallis Tsai et Tang)、蛋鐵倍蚜(Kaburagia ovogallis )、肚倍蚜(Kaburagia thusicola Takagi)、米倍蚜(Meitanaphis microgallis Xiang)、以及周氏倍花蚜(Floraphis choui Xiang)所組成之群組。
14. 如請求項1-8任一項所述之組合物，其中該鞣酸混合物包含從至少一種需要一昆蟲於其上築巢之植物來源之五倍子中取得的鞣酸，該五倍子係選自中國肚倍(Chinese belly-shaped gallnut)、角倍(horned gallnut)、硬劍倍(hard ensiform gallnut)、蛋硬劍倍(egg-hard ensiform gallnut)、以及倍花(inflorescence gallnut)所組成之群組。
15. 如請求項1-8任一項所述之組合物，其中該鞣酸混合物包含從至少一種需要一昆蟲於其上築巢之植物來源之五倍子中取得的鞣酸，該五倍子係選自由中國肚倍(Chinese belly-shaped gallnut)所組成之群組。
16. 如請求項15所述之組合物，其中該五倍子的直徑介於1至8公分間。
17. 如請求項16所述之組合物，其中該五倍子的直徑介於2至6公分間。
18. 如請求項第1-17項任一項所述之組合物，其中在該組合物之總鞣酸含量的總重量百分比中，該鞣酸混合物至少占95%。
19. 如請求項1-18任一項所述之組合物，其中該組合物更包含一第二治療劑。
20. 如請求項19所述之組合物，其中該第二治療劑是一抗肥胖藥劑。
21. 如請求項20所述之組合物，其中該抗肥胖藥劑是選自由奧利司他(orlistat)、氯卡色林(lorcaserin)、西布曲明(sibutramine)、利莫那班(rimonabant)、每福敏(metformin)、艾賽那肽(exenatide)、普蘭林肽(pralintide)、苯丁胺(phentermine)、氟苯丙胺(fenfluramine)、右芬氟拉明(dexfenfluramine)、托比拉邁(topiramate)、二硝基苯酚(dinitrophenol)、安非他酮(bupropion)以及唑尼沙胺(zonisamide)所組成之群組。
22. 如請求項19所述之組合物，其中該第二治療劑係用於治療一中樞神經系統(CNS)疾病之藥劑。
23. 如請求項22所述之組合物，其中該用於治療一中樞神經系統疾病之藥劑係選自由一抗憂鬱劑、一抗精神病藥、一精神興奮劑、一情緒穩定劑、一抗焦慮藥、一用於治療注意力缺失過動疾患(ADHD)之藥劑、以及一用於治療阿茲海默症(AD)之藥劑所組成的群組。
24. 如請求項23所述之組合物，其中該用於治療一中樞神經系統疾病之藥劑是選自由丁醯苯(butyrophenone)、啡噻𠯤(phenothiazine)、氟奮乃靜(fluphenazine)、奮乃靜(perphenazine)、普氯拉嗪(prochlorperazine)、硫利達嗪(thioridazine)、三氟拉嗪(trifluoperazine)、美索達嗪(mesoridazine)、普馬嗪(promazine)、三氟丙嗪(triflupromazine)、左美丙嗪(levomepromazine)、異丙嗪(promethazine)、硫雜蒽(thioxanthene)、氯丙硫蒽(chlorprothixene)、氟哌噻噸(flupenthixol)、替沃噻噸(thiothixene)、氯哌噻噸(zuclopenthixol)、氯氮平(clozapine)、奥氮平(olanzapine)、利培酮(risperidone)、喹硫平(quetiapine)、齊拉西酮(ziprasidone)、氨磺必利(amisulpride)、阿塞那平(asenapine)、帕潘立酮(paliperidone)、阿立哌唑(aripiprazole)、拉莫三嗪(lamotrigine)、美金胺(memantine)、丁苯那嗪(tetrabenazine)、大麻二酚(cannabidiol)、LY2140023、達羅哌丁醇(droperidol)、呱咪清(pimozide)、布他哌嗪(butaperazine)、丙烯奮乃靜(carphenazine)、瑞莫必利(remoxipride)、哌西他嗪(piperacetazine)、舒必利(sulpiride)、阿坎酸鹽(acamprosate)以及丁苯那嗪(tetrabenazine)所組成之群組的一抗精神病藥。
25. 如請求項24所述之組合物，其中該用於治療一中樞神經系統疾病之藥劑是選自由一單胺氧化酶抑制劑(MAOI)、一三環抗鬱劑 (TCA)、一四環抗憂鬱劑(TeCA)、一選擇性血清素再攝取抑制劑(SSRI)、一去甲腎上腺素及特異性血清素再吸收抗憂鬱劑(NASSA)、一正腎上腺素(去甲腎上腺素)再吸收抑制抑制劑、一正腎上腺素-多巴胺再吸收抑制劑以及血清素-正腎上腺素再吸收抑制劑(SNRI)所組成之群組的一抗憂鬱劑。
26. 如請求項25所述之組合物，其中該抗憂鬱劑是選自於由氟西汀(fluoxetine)、帕羅西汀(paroxetine)、西酞普蘭(citalopram)、依地普侖(escitalopram)、舍曲林(sertraline)、氟伏沙明(fluvoxamine)、萬拉法辛(venlafaxine)、萬拉法辛XR(velafaxine XR)、米那普侖(milnacipram)、杜洛西汀(duloxetine)、米達紗賓(mirtazapine)、米塞林(mianserin)、瑞波西汀(reboxetine)、安非他酮(bupropion)、阿米替林(amitriptyline)、去甲替林(nortriptiline)、普羅替林(protriptyline)、地昔帕明(desipramine)、丙咪嗪(imipramine)、曲米帕明(trimipramine)、安莫散平(amoxapine)、安非他酮(bupropion)、安非他酮 SR(bupropion SR)、 可洛米普明(clomipramine)、多慮平(doxepin)、異噁唑醯肼(isocarboxazid)、反苯環丙胺(tranylcypromine)、曲唑酮(trazodone)、萘法唑酮(nefazodone)、苯乙肼(phenelzine)、拉莫三嗪(lamatrogine)、鋰、托比拉邁(topiramate)、加巴噴丁(gabapentin)、卡巴馬平(carbamazepine)、奧卡西平(oxacarbazepine)、丙戊酸鹽(valporate)、馬普替林(maprotiline)、溴法羅明(brofaromine)、吉哌隆(gepirone)、嗎氯苯甲醯胺(moclobemide)、異菸肼(isoniazid)、以及異丙菸肼(iproniazid)所組成之群組。
27. 如請求項1-26任一項所述之組合物，其中該組合物是口服給藥製劑。
28. 如請求項1-27任一項所述之組合物，其中該組合物是一保健食品產物或是一醫療食品產物。
29. 如請求項1-28任一項所述之組合物，其中該組合物是一錠劑、一膠囊、一軟咀嚼片或一膠體。
30. 如請求項1-27任一項所述之組合物，其中該組合物是一藥學組合物，其進一步包含一藥學上可接受的載體。
31. 如請求項30所述之組合物，其中該藥學組合物是口服給藥製劑或非口服給藥製劑。
32. 一種組合物，其包含(i)一鞣酸或一其可接受的鹽、以及(ii)一載體，其中該鞣酸含有多個沒食子醯基團，且係選自由4至12個沒食子醯基團所組成的群組，且其中該鞣酸構成該組合物中總鞣酸含量的至少90% (w/w)。
33. 如請求項32所述之組合物，其中該鞣酸具有4、5、6、7、8、9、10、11、或12個沒食子醯基團。
34. 如請求項33所述之組合物，其中該鞣酸具有6、7、8、9、 10、11、或12個沒食子醯基團。
35. 如請求項34所述之組合物，其中該鞣酸具有8、9、10、11、或12個沒食子醯基團。
36. 如請求項32-35任一項所述之組合物，其中該鞣酸構成該組合物之總鞣酸含量的至少95%(重量百分比)。
37. 如請求項28-36任一項所述之組合物，其中該組合物更包含一第二治療劑。
38. 如請求項37所述之組合物，其中該第二治療劑是一抗肥胖藥劑。
39. 如請求項38所述之組合物，其中該抗肥胖藥劑是選自由奧利司他(orlistat)、氯卡色林(lorcaserin)、西布曲明(sibutramine)、利莫那班(rimonabant)、每福敏(metformin)、艾賽那肽(exenatide)、普蘭林肽(pralintide)、苯丁胺(phentermine)、氟苯丙胺(fenfluramine)、右芬氟拉明(dexfenfluramine)、托比拉邁(topiramate)、二硝基苯酚(dinitrophenol)、安非他酮(bupropion)以及唑尼沙胺(zonisamide)所組成之群組。
40. 如請求項37所述之組合物，其中該第二治療劑係用於治療一中樞神經系統(CNS)疾病之藥劑。
41. 如請求項40所述之組合物，其中該用於治療一中樞神經系統(CNS)疾病之藥劑係選自由一抗憂鬱劑、一抗精神病藥、一精神興奮劑、一情緒穩定劑、一抗焦慮藥、一用於治療注意力缺失過動疾患(ADHD)之藥劑以及一用於治療阿茲海默症(AD)之藥劑所組成的群組。
42. 如請求項41所述之組合物，其中該用於治療一中樞神經系統疾病之藥劑是選自由丁醯苯、啡噻𠯤、氟奮乃靜、奮乃靜、普氯拉嗪、硫利達嗪、三氟拉嗪、美索達嗪、普馬嗪、三氟丙嗪、左美丙嗪、異丙嗪、硫雜蒽、氯丙硫蒽、氟哌噻噸、替沃噻噸、氯哌噻噸、氯氮平、奥氮平、利培酮、喹硫平、齊拉西酮、氨磺必利、阿塞那平、帕潘立酮、阿立哌唑、多巴胺局部拮抗劑、拉莫三嗪、丁苯那嗪、大麻二酚、LY2140023、達羅哌丁醇、呱咪清、布他哌嗪、丙烯奮乃靜、瑞莫必利、哌西他嗪、舒必利、阿坎酸鹽、以及丁苯那嗪所組成之群組的一抗精神病藥。
43. 如請求項41所述之組合物，其中該用於治療一中樞神經系統疾病之藥劑是選自由一單胺氧化酶抑制劑(MAOI)、一三環抗鬱劑 (TCA)、一四環抗憂鬱劑(TeCA)、一選擇性血清素再攝取抑制劑(SSRI)、一去甲腎上腺素及特異性血清素再吸收抗憂鬱劑(NASSA)、一正腎上腺素(去甲腎上腺素)再吸收抑制抑制劑、一正腎上腺素-多巴胺再吸收抑制劑以及血清素-正腎上腺素再吸收抑制劑(SNRI)所組成之群組的一抗憂鬱劑。
44. 如請求項43所述之組合物，其中該抗憂鬱劑是選自由氟西汀、帕羅西汀、西酞普蘭、依地普侖、舍曲林、氟伏沙明、萬拉法辛、萬拉法辛XR、米那普侖、杜洛西汀、米達紗賓、米塞林、瑞波西汀、安非他酮、阿米替林、去甲替林、普羅替林、地昔帕明、丙咪嗪、曲米帕明、安莫散平、安非他酮、安非他酮 SR、 可洛米普明、多慮平、異噁唑醯肼、反苯環丙胺、曲唑酮、萘法唑酮、苯乙肼、拉莫三嗪、鋰、托比拉邁、加巴噴丁、卡巴馬平、奧卡西平、丙戊酸鹽、馬普替林、溴法羅明、吉哌隆、嗎氯苯甲醯胺、異菸肼、以及異丙菸肼所組成之群組。
45. 如請求項32-44任一項所述之組合物，其中該組合物是口服給藥製劑。
46. 如請求項32-45任一項所述之組合物，其中該組合物是一保健食品產物或是一醫療食品產物。
47. 如請求項32-46任一項所述之組合物，其中該組合物是一錠劑、一膠囊、一軟咀嚼片或一膠體。
48. 如請求項32-44任一項所述之組合物，其中該組合物是一藥學組合物，其進一步包含一藥學上可接受的載體。
49. 如請求項48所述之組合物，其中該藥學組合物是口服給藥製劑或非口服給藥製劑。
50. 一種治療肥胖、高血脂症、糖尿病或中樞神經系統(CNS)疾病之方法，其包含對一有需要之個體投予一有效量之如請求項1-49任一項所述之組合物。
51. 如請求項50所述之方法，其中該中樞神經系統(CNS)疾病係選自由 ADHD、學習障礙、精神分裂症、疼痛、憂鬱症、自殺意念及/或行為、躁鬱症、抽搐症、創傷後精神壓力障礙、焦慮症、社交焦慮症、恐慌症、自閉症、亞斯伯格症、強迫症(OCD)、學習障礙、妥瑞氏症、輕度知能障礙、失智症、自殺意念、行為、血管型失智症、阿茲海默症、額顳葉失智症、帕金森氏症、亨丁頓氏症、夜間遺尿症、眼瞼痙攣、腦型瘧疾以及非癲癇發作。
52. 如請求項50所述之方法，其中該個體是患有或疑似患有肥胖的一人類病患。
53. 如請求項52所述之方法，其中該人類病患接受過或正在進行肥胖的治療。
54. 如請求項50或51所述之方法，其中該個體是患有或疑似患有該中樞神經系統疾病之一人類病患。
55. 如請求項54所述之方法，其中該人類病患接受過或正在進行該中樞神經系統疾病的治療。
56. 一種用於治療一中樞神經系統(CNS)疾病的方法，其包含對一有需要之個體投予一有效量之一藥學組合物，其包含(i)一或多個鞣酸或一其藥學上可接受的鹽以及(ii)一藥學上可接受的載體；其中該藥學組合物實質上不含縮合鞣質及/或褐藻多酚；以及其中該中樞神經系統(CNS)疾病係選自由精神病、焦慮症、憂鬱症、自殺意念及/或行為、自閉症、OCD、躁症、妥瑞氏症以及失智症的精神行為症狀(BPSD)所組成之群組。
57. 一種製備一鞣酸組合物之方法，該方法包含： (i) 提供一植物的五倍子； (ii) 研磨該五倍子以形成五倍子粉； (iii) 以一第一溶劑萃取該五倍子粉以產生一第一鞣酸萃取物；以及 (iv) 使該第一鞣酸萃取物與活性碳、CaSO₄ 、MgSO₄ 、或其組合接觸以移除吸附在活性碳或被CaSO₄ 或MgSO₄ 沉澱的物質，藉此產生一第一鞣酸組合物。
58. 如請求項57所述之方法，更包含下列步驟：(v)將該第一鞣酸組合物溶解在一第二溶劑中以形成一溶液；(vi)添加二氯甲烷(CH₂ Cl₂ )或二氯乙烷至該溶液中；以及(vii)收集所形成的固體物質，藉此產生一第二鞣酸組合物。
59. 如請求項57或58所述之方法，更包含：在步驟(iii)之後且步驟(iv)之前，將該第一鞣酸萃取物中具有2-5個沒食子醯基團的鞣酸移除，以形成一第二鞣酸萃取物。
60. 如請求項57-59任一項所述之方法，其中該植物是選自由鹽膚木(Rhus chinensis )、鹽骨木(Rhus javanica )、鹽麩子(Rhus semialata )、西西里漆樹(Rhus coriaria )、青麩楊(Rhus potaninii )、紅麩楊(Rhus punjabensis var. sinica (Diels) Rehder & E.H. Wilson)、茶樹(Camellia sinensis )、漿果、胭脂樹(Bixa orellana )、葡萄(Vitis vinifera )、石榴(Punica granatum )、沒食子櫟(Quercus infectoria )、土耳其櫟(Quercus cerris )、黑荊(Acacia mearnsii )、花旗松(Pseudotsuga menziesii )、刺雲實(Caesalpinia spinosa )、臺灣水青岡(Fagus hayata Palib. ex Hayata)以及豬腳楠(Machilus thunbergii Sieb. & Zucc.)組成之群組中。
61. 如請求項60所述之方法，其中該植物是選自由鹽膚木(Rhus chinensis )、鹽骨木(Rhus javanica )、鹽麩子(Rhus semialata )、西西里漆樹(Rhus coriaria )、青麩楊(Rhus potaninii )、紅麩楊(Rhus punjabensis var. sinica (Diels) Rehder & E.H. Wilson)所組成之群組。
62. 如請求項57-61任一項所述之方法，更包含：在步驟(ii)之後及步驟(iii)之前，將該五倍子粉通過一具有20至60網目的篩網。
63. 如請求項57-63任一項所述之方法，其中該第一溶劑為丙酮、乙腈、甲乙酮、乙酸乙酯、乙醇、異丙醇、四氫呋喃、1,4-二㗁烷、己烷、或其組合。
64. 如請求項59所述之方法，其中該移除步驟是將該第一鞣酸萃取物與一溶劑混合以形成兩有機層，其中該溶劑為分別選自(i)及(ii)之群組的溶劑的組合，其中(i)是丙酮、乙腈、甲乙酮或乙酸乙酯、以及(ii)是戊烷、己烷、或庚烷；以及收集該油層以產生該第二鞣酸萃取物。
65. 如請求項64所述之方法，其中該溶劑為甲乙酮及己烷之組合、或乙酸乙酯與己烷之組合。
66. 如請求項58所述之方法，其中該第二溶劑為丙酮、乙腈、乙酸乙酯、甲乙酮、或其組合。