TW201600601A - 多通道微流體光盤檢測方法 - Google Patents

Abstract

本發明之多通道微流體光盤檢測係以可拋棄式光盤所製作成之檢測裝置，其對檢驗反應的速度與靈敏度可與商業化商品之水準比擬，且僅需使用少量的測試劑便可檢測，因此可大幅降低操作所需耗能與繁雜程序。多通道微流體光盤的使用，有助於增加血液配對，進而以血液凝聚型態的影像辨識提升檢測成效。

Description

多通道微流體光盤檢測方法

本發明係關於一種流體檢測系統，特別係關於一種多通道微流體光盤檢測系統及其應用。

現今，醫療領域中，常需要針對特定的生物性流體進行檢測，以作為診斷的依據。目前一種習知的血液鑑定方法之一係為微盤方法(microplate method)，其已經被廣泛地被使用於各種醫療檢測行為上。該方法需要以人工方式在九十六孔盤上進行操作，因此相當耗時、耗費人力、檢體，以及測試劑。在各種醫療產物及其研究中，如血液的檢測、體液的檢測、醫療試劑的測試等，常在檢測期間使用生物性流體進行檢測當成試驗檢測方法，如血型的檢測、疾病的檢測、開發藥劑檢測等。一般而言，此些檢體及測試劑都有、量少、昂貴等取得不易的狀況。若此些檢體及測試劑的耗費過量、檢測錯誤將導致如檢測失敗，無法進行下一步正確醫療對策、以及實驗失敗，以致於延誤 醫療或藥物的開發等嚴重困境。因此，為了能保護人體與檢體，避免受到因為檢測需要，抽出大量的血液或檢體的危害，少量且準確地檢體的檢測與分析是極其重要的事項。

微盤方法(microplate method)檢測的研究其已經被廣泛地被使用於各種醫療檢測行為上。Jeong-gun等人所發表的專利「CENTRIFUG MAGENETIC POSITION CONTROL DEVICE,DISK-SHAPED MICRO FLUIDIC SYSTEM INCLUDING THE SAME,AND METHOD OF OPERATING THE COMPACT DISK-SHAPED MICRO FLUIDIC SYSTEM」中揭露一種可拋棄式的多通道微流體之平盤用以進行液體鑑定。Per Andersson等人所發表的專利「SEPARATION STRUCTURE」中揭露一種可拋棄式的多通道微流體之平盤用，以進行液體鑑定。常見的多通道微流體之平盤技術原理主要有下列幾種缺點：單次量測，使用大量的液體樣本與試劑，不易分析，檢測困難，以及複雜的試片製備等等，此些缺點導致成本增高、檢測時程漫長，尤其單次檢測僅能針對單一量測標的，十分繁瑣。因此，在醫療研究、生化分析以及臨床診斷等領域當中仍難以廣泛地採用目前的。

據此，發展一種可同時量測以簡化多重步驟，並降低大量的液體樣本與試劑的使用、容易分析、方便檢測，及簡單的試片製備，以降低成本、降低工時等優勢的一種 生物性流體檢測系統即為當前產業亟欲發展之重要標的。

鑒於上述發明背景中，為了符合產業上特別之需求，本發明提供一種多通道微流體光盤檢測系統及其應用可用以解決上述傳統技藝未能達成之標的。

本發明之一目的係提供一種多通道微流體光盤檢測系統用以檢測生物性流體中的待檢測成分物及其濃度，本發明之多通道微流體光盤檢測系統係藉由一拋棄式光盤模組與「多通道微流體光盤檢測影像辨識量測系統」所組合而成。多通道微流體光盤檢測影像辨識量測系統包含加藥模組、旋動模組、檢測模組、分析控制模組和能源模組所構成。本發明之多通道微流體光盤檢測系統特別設計拋棄式檢測光盤，在添加檢體與不同的測試試劑後進行離心混合動作形成反應物，其反應物的待檢測因子於不同測試劑作用下，會有不同凝聚型態而設計，利用不同凝聚型態差異，可標定所偵測的待檢測因子的凝聚型態的檢體。

本發明提供之多通道微流體光盤檢測系統係結合「拋棄式光盤模組」與「多通道微流體光盤檢測影像辨識量測系統」所組成，本發明之檢測系統的光盤 模組上附有檢測機構，檢測機構包含至少一個通氣孔、至少一個通氣腔、至少一個加料孔、至少一個供料腔、至少一個反應腔、至少一個反應檢測區、至少一個廢棄腔、至少一個微流道、以及至少一個毛細管閥所構成。本多通道微流體光盤檢測系統的設計，乃針對拋棄式檢測光盤，以液體產生表面張力的阻力之特性，在添加檢體與測試試劑停留在添加的容置空間內，依離心的慢快速度，逐一突破各溶液的表面張力阻力，然後將檢體與測試試劑逐一流入反應空間進行混和動作，以形成反應物。藉以隨檢測試劑改變，產生不同的反應物聚集的型態，確認檢體中待檢測因子的存在和濃度。

本發明的光盤模組製造，採用傳統的低成本成型技術，以至少一個透明基材，並且使用雕刻或射出成型等製程技術製備。經由本多通道微流體光盤檢測系統內置軟體做校準和計算，儀器將直接顯示待檢測因子的類型以及濃度。此外，本發明之多通道微流體光盤檢測系統的光盤模組為拋棄式，系統本身不易受到檢體與測試試劑的污染而損壞，可靠性將大幅被提升，且可大幅延長系統使用壽命。本多通道微流體光盤檢測系統，可安裝於有少量或貴重檢體的檢測需之醫療院所、實驗室中。本發明之多通道微流體光盤檢 測系統係由拋棄式光盤模組與多通道微流體光盤檢測影像辨識量測系統所構成，由於簡易的光盤模組製造程序，便利的檢測過程，以及低廉的成本，環境限制需求也較為低，使得本發明產品/技術優勢比常見的微盤方法(microplate method)更具優勢，同時更俱備有極少檢體、極少測試劑與快速檢測的優點。此外，相較於傳統的人工比對分析方式，本發明的使用人員無需俱備醫學或化學專業的知識即可自行操作，直接進行簡易的數據判讀。

本發明之另一目的係提供一種拋棄式光盤，拋棄式光盤係由至少一個透明基材包含至少一個檢測機構所構成，檢測機構包含至少一個添加口、至少一個通氣腔、至少一個供料腔、至少一個反應腔、至少一個反應檢測區、至少一個廢棄腔、至少一個微流道、以及至少一個毛細管閥，以雕刻或射出成型的方式來製備，本製程在一般環境下即可操作。並且可以依照待檢測因子產生反應凝聚型態的程序來設計檢測機構結構。本發明之拋棄式光盤模組屬拋棄式，製作價格便宜且操作方便。

目前微盤方法(microplate method)與傳統人工作業分析費用偏高且耗費較大量的檢體與檢測試劑，為了克服以往的生物性流體進行檢測方式的缺點，本 發明提供之多通道微流體光盤檢測系統具備低成本、便利的使用性和對生物性流體進行檢測的低檢體用量、檢測試劑用量與反應時間短等優點，將可取代傳統的多通道微流體光盤檢測系統。本發明之多通道微流體光盤檢測系統可達到降低檢體用量、檢測試劑用量與反應時間縮短的功能，對於醫療院所、實驗室來說，可達成快速與低用量的檢測，確認檢體中待檢測因子的存在與濃度，實為方便實用之檢測裝置。

根據本發明上述之目的，本發明提供一種多通道微流體機構，該多通道微流體機構包含至少一供料腔，該供料腔係為儲存自外部輸入之微流體的容置空間；與至少一反應腔，該反應腔係於離心狀態下接收自該供料腔釋放之微流體以進行微流體反應之空間，其中上述之供料腔於離心狀態下係與外部大氣相連通，並使該供料腔形成一通氣腔，以利微流體於離心狀態下的流動。上述之反應腔包含至少一反應檢測區，該反應檢測區用以存留微流體之反應物，以便於該反應檢測區擷取並分析反應物凝集狀態的影像。該多通道微流體機構更包含至少一微流道以連接該供料腔與該反應腔，並於離心狀態下運輸微流體。

上述之微流道具有一特定的曲角以藉由離心轉速的快慢控制微流體的釋放速率，且對流出的微流體 產生止逆的作用，其中，曲角愈小止逆作用的阻力越大。上述之反應腔更包含至少一廢棄腔以接收自該反應腔流出之廢液。上述之微流道連通該反應腔與該廢棄腔，且於連接兩端形成一水平傾斜角，其中，靠近該廢棄腔之該微流道的出口處需高於靠近該反應腔之該微流道的入口處以形成止逆作用。上述之微流道與該供料腔相連接處具有一特定的連接角以藉由離心轉速的快慢控制微流體的釋放速率，且對流出的微流體產生止逆的作用。上述之微流道與該供料腔相連接處具有一毛細管閥以藉由離心轉速的快慢控制微流體的釋放速率，且對流出的微流體產生止逆的作用。上述之毛細管閥係於該微流道上形成至少一凸狀渠道與至少一凹狀渠道的交互連結之組合，以形成鋸齒狀結構外觀。上述之凸狀渠道之管徑大於該凹狀渠道之管徑，且該凸狀渠道之管徑亦大於該微流道之管徑。

根據本發明上述之目的，本發明提供一種多通道微流體光盤，該多通道微流體光盤具有至少一檢測機構，該檢測機構包含至少一供料腔，該供料腔係為儲存自外部輸入之微流體的容置空間；至少一反應腔，該反應腔係於離心狀態下接收自該供料腔釋放之微流體以供微流體進行反應之容置空間；至少一廢棄腔，該廢棄腔係於離心狀態下用以接收自該反應腔溢流之 微流體；與複數個微流道，該微流道係分別連通該供料腔與該反應腔、連通該反應腔與該廢棄腔。上述檢測機構更包含至少一通氣腔，該通氣腔係為連通大氣的空間，以利微流體在離心狀態下能於該檢測機構中流動。上述反應腔包含至少一反應檢測區，該反應檢測區用以存留微流體之反應物，以便於該反應檢測區擷取並分析反應物凝集狀態的影像。上述之微流道具有一特定曲角以藉由離心轉速的快慢控制各微流體的釋放速率，且對流出的微流體產生止逆作用。上述之微流道連通該反應腔與該廢棄腔，且於連接兩端形成一水平傾斜角，其中靠近該廢棄腔之該微流道的出口處需高於靠近該反應腔之該微流道的入口處以形成止逆作用。上述微流道與該供料腔相連接處具有一特定的連接角以藉由離心轉速的快慢控制微流體的釋放速率，且對流出的微流體產生止逆的作用。上述之微流道與該供料腔相連接處具有一毛細管閥以藉由離心轉速的快慢控制微流體的釋放速率，且對流出的微流體產生止逆的作用。上述之毛細管閥於該微流道上形成至少一凸狀渠道與至少一凹狀渠道，該凸狀渠道與該凹狀渠道以交錯排列相互連結的方式形成鋸齒狀外觀。上述凸狀渠道之管徑大於該凹狀渠道之管徑，且該凸狀渠道之管徑亦大於該微流道之管徑。上述之凹 狀渠道之管徑寬度小於等於該微流道之管徑寬度。上述凸狀渠道的管徑範圍為60~800微米，且該凹狀渠道之管徑範圍為50~600微米。上述之凸狀渠道之管徑寬度與該凹狀渠道之管徑寬度的比例範圍為2：1~5：1。上述凸狀渠道的管徑寬度較佳為300微米，且該凹狀渠道之管徑寬度較佳為100微米。上述供料腔、該反應腔、該廢棄腔、該微流道與該毛細管閥之空間深度為50~1000微米。

根據本發明上述之目的，本發明提供一種多通道微流體光盤檢測系統，該多通道微流體光盤檢測系統包含一光盤模組，係用以接受複數種微流體試劑，藉由離心力作用於該光盤模組內混摻複數種微流體試劑以產生化學反應並形成反應物；一給藥模組，係位於該光盤模組之轉動方向之特定位置上，該給藥模組提供複數種微流體試劑與離心力作用予該光盤模組；與一顯像模組，係位於該光盤模組上方之指定位置上，藉以擷取該光盤模組之反應物的凝聚型態之影像，並產生一影像訊號。上述給藥模組更包含至少一加藥裝置，係用以控制容置、裝載、輸運、注入複數種該微流體至該光盤模組中；與至少一旋動裝置，係用以提供旋轉動能予該光盤模組以進行離心運動，並藉離心力作用使複數種該微流體試劑於該光盤模組中混和及 反應。上述光盤模組包含至少一檢測單元，該檢測單元更包含複數個供料腔，係用以分別接收並存儲該給藥模組所提供之複數種該微流體試劑；至少一反應腔，該反應腔係於離心狀態下分別接收複數個該供料腔所釋放之複數種該微流體試劑以進行反應並形成反應物，其中，該顯像模組係於該反應腔上方之特定位置上擷取反應物的凝聚型態之影像；與複數個微流道，該微流道係分別用以連通該供料腔與該反應腔。上述檢測單元之外觀係為一樹狀外觀，複數個該微流道為該樹狀外觀之枝幹，而複數個該供料腔則分別位於枝幹末端，且該反應腔位於樹狀外觀之根部。上述複數個該微流道之一第一微流道係當成該樹狀外觀之一主枝幹，並與該反應腔相互連接。複數個該微流道之複數個第二微流道係當成該樹狀外觀之枝幹，並連接該第一微流道與該供料腔。第二微流道具有一曲角以藉離心轉速的快慢控制該微流體試劑的釋放速率並產生止逆作用。第二微流道與該供料腔之連接角為一圓切角以藉由圓切線方式降低微流體之表面阻力而離心導出供料腔。上述反應腔的容置空間更包含至少一反應檢測區以提供複數該微流體試劑所需的反應空間並留存反應物以便顯像模組於該反應檢測區擷取反應物凝集型態的影像。檢測單元更包含複數個通氣腔， 該通氣腔於離心狀態時連通大氣以利該微流體試劑於離心狀態時的流動。檢測單元更包含至少一廢棄腔，以便於離心狀態下接收自該反應腔溢流的微流體。反應腔藉由該微流道連通該廢棄腔，該微流道於連接兩端形成一水平傾斜角，靠近該廢棄腔之該微流道出口處需高於靠近該反應腔之該微流道入口處以形成止逆作用。微流道與該該供料腔相連接處具有一毛細管閥以藉由離心轉速的快慢控制微流體的釋放速率，且對流出的微流體產生止逆作用，其中該毛細管閥於該微流道上形成至少一凸狀渠道與至少一凹狀渠道，該凸狀渠道與該凹狀渠道以交錯排列相互連結的方式形成鋸齒狀外觀。凸狀渠道之管徑大於該凹狀渠道之管徑，且該凸狀渠道之管徑亦大於該微流道之管徑，其中該凹狀渠道之管徑寬度小於等於該微流道之管徑寬度。複數種微流體試劑更包含紅血球(RBC)、抗體(Antibody)/血清(Plasma)、低離子張力溶液(LIM)、Polybrene/Polyethyleneimine、再懸浮溶液(Resuspending solution)等。該多通道微流體光盤檢測系統更包含一分析控制模組，係分別與該給藥模組及該顯像模組相互通訊以控制該給藥模組與該顯像模組的作動，且該分析控制模組接收顯像模組所產生之影像訊號，並據以分析比對且對外顯示結果。

根據本發明上述之目的，本發明提供一種多通道微流體光盤檢測方法，該多通道微流體光盤檢測方法包含進行一給藥程序以分別導入複數種檢體與檢驗試劑之微流體至一光盤之複數個供料腔中；藉由控制一旋動裝置的轉動速率產生不同的離心力，以便於對該光盤進行一離心程序，並藉此控制不同之該供料腔的該微流體之釋放速率，其中複數種該微流體係於離心狀態下分別經由複數條微流道導入至該光盤之一反應腔中以進行混和動作，以形成一反應物於該反應腔之一檢測區中；與藉由一顯像擷取裝置進行一檢測程序，以觀測該反應物的凝聚型態。離心程序更包含進行一第一離心步驟以便從複數個該供料腔分別導出其內存之一第一微流體、一第二微流體與一第三微流體至該反應腔；藉由旋動元件往復式旋動光盤以便於反應腔中進行一第一混摻程序以混摻第一微流體、第二微流體與第三微流體並形成一第一反應物；進行一第二離心步驟以便從複數個該供料腔之一導出其內存之一第四微流體至該反應腔；藉由該旋動元件往復式旋動該光盤以便於該反應腔中進行一第二混摻程序以混摻該第四微流體與該第一反應物並形成一第二反應物，且增加其凝集反應；進行一第三離心步驟以分離第二反應物中之凝聚物，其中大部分檢體與其它試劑 的凝聚物會留置於該檢測區中並混成一第三反應物；進行一第四離心步驟以便從複數個該供料腔之一導出其內存之一第五微流體至該反應腔並與該第三反應物混成一第四反應物；與進行一第三混摻程序以凝集該第四反應物。第一微流體為RBC、第二微流體為Antibody、第三微流體為LIM、第四微流體為Polybrene/Polyethyleneimine、第五微流體為Resuspending solution。第一離心步驟的離心速度為600~800rpm，操作時間為1~10sec；第二離心步驟的離心速度為600~1000rpm，操作時間為1~10sec；第三離心步驟的離心速度為600~1500rpm，操作時間為1~10sec；第四離心步驟的離心速度為600~2000rpm，操作時間為1~10sec。第一混摻程序、第二混摻程序與第三混摻程序的往復旋動角度範圍為10度~360度，往復次數為1~10次。檢測程序藉由該顯像擷取裝置根據該反應物的凝聚型態產生一影像訊號以進行一比對分析程序。比對分析程序係藉由一比對分析裝置根據其內預設資料庫中之資料比對並分析該影像訊號，藉此確認該第四反應物之凝聚型態。

100‧‧‧多通道微流體光盤檢測系統

110‧‧‧給藥模組

112‧‧‧輸送裝置

114‧‧‧加藥裝置

116‧‧‧旋動裝置

120‧‧‧光盤模組

126‧‧‧固定機構

130‧‧‧檢測機構

131‧‧‧供料腔

132‧‧‧進料孔

133‧‧‧通氣腔

134‧‧‧氣孔

135‧‧‧反應腔

135A‧‧‧反應檢測區

137‧‧‧廢棄腔

138‧‧‧微流道

139‧‧‧毛細管閥

139A‧‧‧凸狀渠道

139B‧‧‧凹狀渠道

140‧‧‧顯像模組

145‧‧‧影像擷取裝置

150‧‧‧分析控制模組

152‧‧‧分析單元

154‧‧‧控制單元

156‧‧‧顯示單元

160‧‧‧能源模組

200‧‧‧多通道微流體光盤檢測方法

210‧‧‧給藥程序

220‧‧‧離心程序

240‧‧‧檢測程序

250‧‧‧分析程序

300‧‧‧多通道微流體光盤的檢測裝置

310‧‧‧承載機構

311‧‧‧支撐機構

312‧‧‧移動元件

314‧‧‧給藥元件

316‧‧‧旋動元件

320‧‧‧光盤

326‧‧‧固定結構

330‧‧‧檢測單元

331a、331b、331c、331d、331e‧‧‧供料腔

332a、332b、332c、332d、332e‧‧‧進料孔

333a、333b、333c、333d‧‧‧通氣腔

334a、334b、334c、334d‧‧‧氣孔

335‧‧‧反應腔

335A‧‧‧反應檢測區

337‧‧‧廢棄腔

338a、338b、338c、338d、338e‧‧‧微流道

338f、338g、338h、338j、338k‧‧‧微流道

339d、339e‧‧‧毛細管閥

345‧‧‧影像感測元件

352‧‧‧分析元件

354‧‧‧控制元件

356‧‧‧顯示元件

360‧‧‧電源

371a、371b‧‧‧凸狀渠道

372a‧‧‧凹狀渠道

第一圖係根據本發明之第一實施例之多通道微流體光盤檢測系統的示意圖；第二A圖係根據本發明之第一實施例之多通道微流體光盤檢測系統之檢測機構的示意圖；第二B圖係根據本發明之第一實施例之檢測機構之毛細管閥的示意圖；第三圖係根據本發明之第一實施例之多通道微流體光盤檢測系統的檢測流程示意圖；第四圖係根據本發明之第二實施例之多通道微流體光盤檢測裝置的示意圖；第五圖係根據本發明之第二實施例之光盤示意圖；第六A圖係根據本發明第二實施例之檢測機構示意圖；第六B圖係根據本發明第二實施例之檢測機構之毛細管閥示意圖；第七A圖係為根據本發明第二實施例之光盤之檢測O型血受試者RBC及血清結果的示意圖；與第七B圖係為根據本發明第二實施例之光盤之檢 測A型血受試者RBC及血清結果的示意圖。

本發明在此所探討的方向為微流體的檢測技術，為了能徹底地瞭解本發明，將在下列的描述中提出詳盡的結構及其元件與方法步驟。顯然地，本發明的施行並未限定於微流體檢測技術之技藝者所熟習的特殊細節。另一方面，眾所周知的結構及其元件並未描述於細節中，以避免造成本發明不必要之限制。此外，為提供更清楚之描述及使熟悉該項技藝者能理解本發明之發明內容，圖示內各部分並沒有依照其相對之尺寸而繪圖，某些尺寸與其他相關尺度之比例會被突顯而顯得誇張，且不相關之細節部分亦未完全繪出，以求圖示簡潔。本發明的較佳實施例會詳細描述如下，然而除了這些詳細描述之外，本發明還可以廣泛地施行在其他的實施例中，且本發明範圍不受限定，其以之後的專利範圍為準。

參考第一圖所示，根據本發明之一第一實施例，本發明提供一種多通道微流體光盤檢測系統100，多通道微流體光盤檢測系統100包含：一給藥模組110、一光盤模組120、一顯像模組140、一分析控制模組150與一能源模組160。上述之給藥模組110更包含至少一輸送裝置112、至少一加藥裝置114、至少一旋動裝置116，其中，給藥模組110 係位於光盤模組120之轉動方向上之特定位置上，並藉由輸送裝置112運動加藥裝置114以提供試劑予光盤模組120，且藉由旋動裝置116提供旋轉動能予光盤模組120進行離心運動，使試劑在光盤模組120中混和反應。上述之光盤模組120更包含至少一固定機構126與一檢測機構130，其中，光盤模組120藉由固定機構126固定於旋動裝置116上以提供特定的容置空間容置加藥裝置114所供給之試劑，並於此生成至少一反應物，以便於顯像模組140擷取至少一個反應物之影像。此外，上述之顯像模組140係位於光盤模組120上方之任一指定位置上，藉以擷取光盤模組120之反應物的凝聚型態之影像。此外，光盤模組120係為拋棄式，以避免受到檢體及測試試劑的污染，並藉此大幅提升檢測的可靠性，且能防止直接接觸本發明的給藥模組110與顯像模組140，將大幅延長整體設備的使用壽命。上述之分析控制模組150係分別與給藥模組110及顯像模組140相互通訊，以便於分析控制模組150控制給藥模組110之移動、加藥、光盤轉動等作用，且分析控制模組150能接收顯像模組140所產生之影像訊號，並據以分析比對是否在檢體中存在著待測試因子，並對外顯示結果。上述之能源模組160則分別與各模組相互電性耦合以提供必要之能源予相關設備運作。

參考第二A圖所示，根據本發明之第一實施例，上述之光盤模組120之檢測機構130包含至少一供料腔131、至少 一進料孔132、至少一通氣腔133、至少一氣孔134、至少一反應腔135、至少一反應檢測區135A、至少一廢棄腔137、至少一微流道138、及至少一毛細管閥139，其中，光盤模組120之檢測機構130更包含至少一透明基材，經過雕刻、黃光製程、熱壓法或射出成型程序所形成，且檢測機構130係為可置換式機構。上述之通氣腔133係為連通大氣的腔室，以利試劑在離心狀態下能於檢測機構130中流動，其中，氣孔134係位於通氣腔133中以便與外部大氣相連通。此外，上述之供料腔133、反應腔135、廢棄腔137、微流道138與毛細管閥139之深度為50~1000微米。上述之供料腔133係為儲存加藥裝置114所添加之溶液/劑的容置空間，其中，供料腔133更包含至少一進料孔132以注入溶液/劑。上述之反應腔135係於離心狀態下接收來自供料腔133的試劑，以提供檢體與測試試劑之一反應容置空間，其中，反應腔135包含至少一反應檢測區135A，反應檢測區135A係設計於反應腔135之容置空間中，其用以存留檢體與其它試劑的反應物，以便於顯像模組140於該反應檢測區135A，擷取反應物凝集狀態的影像。上述廢棄腔137與反應腔135相互流通以接收自反應腔135流出之廢液。上述微流道138分別用於連接供料腔131與反應腔135、連接反應腔135與廢棄腔137、連接通氣腔133與廢棄腔137、以及直接連結通氣腔133，其中，微流道138與供料腔131及廢棄腔137相連結 之流體入口端處具有一特定的連接角，連接角的角度可隨試劑的特性設計，並藉由離心轉速的快慢控制檢體與測試試劑的釋放速率，且對流出的流體產生止逆的作用。上述之毛細管閥139係位於連接供料腔131的微流道138的入口端處，此毛細管閥139可於離心狀態下增加流體由供料腔131與反應腔135流出的阻力。

參考第二B圖所示，根據本發明之第一實施例，上述之毛細管閥139係於微流道138上形成至少一凸狀渠道139A與至少一凹狀渠道139B的交互連結之組合，毛細管閥139外觀係為鋸齒狀結構，且凸狀渠道139A之管徑大於凹狀渠道139B，且凸狀渠道139A亦大於微流道138之主管徑，其中，凸狀渠道139A之管徑範圍約為60~800微米，且凹狀渠道139B之管徑範圍為50~600微米。上述之反應檢測區135A之反應物的凝聚型態在混摻程序中會隨檢測試劑的變化而轉變，上述之顯像模組140係於光盤模組120處於檢驗程序時，用以擷取反應物的凝聚型態，並產生一影像訊號予分析控制模組150以比對反應檢測區135A所形成之凝聚型態，其中，反應物的濃度會影響凝聚型態之結果：若反應物的濃度極低則凝聚型態少；若是反應物的濃度漸漸提升，則凝聚型態將越來越多。上述之分析控制模組150用以控制給藥模組110、光盤模組120與顯像模組140之運作。分析控制模組150可控制給藥模組110藥劑的注射數 量、注射速率、注射位置、光盤模組120的轉速等。此外，分析控制模組150包含一分析單元152、一控制單元154與一顯示單元156，分析控制模組150接收顯像模組140所傳輸之電能訊號並經過分析單元152計算分析，同時藉由藉由控制單元154產生控制訊號以控制顯示單元156顯示分析結果，其中，分析單元152具有一預設資料庫，預設資料庫能提供特定的反應物的凝聚型態所對應的影像。

參考第三圖所示，根據本發明之第一實施例，本發明提供一種多通道微流體光盤檢測方法200，首先將光盤模組120置於給藥模組110之預設位置上，並藉由分析控制模組150之控制單元154控制後續的程序。接著進行一給藥程序210以便藉由給藥模組110分別導入檢體與檢驗試劑之微流體至光盤模組120之供料腔131中。接著藉由給藥模組110之旋動裝置116轉動光盤模組120進行一離心程序220，控制單元154控制旋動裝置116的轉動速率以產生不同的離心力，並進一步地藉由離心力的控制突破供料腔133中所注入的檢體與檢驗試劑之微流體的表面張力所形成的阻力，進而導入至微流道138中，再分別流入反應腔135進行混和動作，以形成反應物及其凝聚型態。之後藉由顯像模組140進行一檢測程序240以觀測反應檢測區135A之反應物的凝聚型態，並產生一相對應之影像訊號予分析控制模組150。之後藉由分析控制模組150之分析單元152根據相對應之影 像訊號進行一分析程序250，以比對分析單元152的預設資料庫中之反應物的凝聚型態，或所對應的反應物之凝聚型態所代表之數值，藉以確定檢體含有待檢測因子之種類並產生一資訊，同時將資訊傳輸至分析控制模組150之控制單元154，再藉由控制單元154進行一控制程序250以產生控制訊號，並將控制訊號分別傳輸至顯示單元156以顯示所檢測檢體含有待檢測因子之凝聚型態。

參考第四A圖、四B圖所示，根據本發明之一第二實施例，本發明提供一種多通道微流體光盤的檢測裝置300包含一個承載機構310、複數個支撐機構311、至少一移動元件312、至少一給藥元件314、至少一旋動元件316、一光盤320、一影像感測元件345、一分析元件352、一控制元件354、一顯示元件356與一電源360。複數個支撐機構311係用以支撐或夾持各部件，且複數個支撐機構311可直接成形於承載機構310之特定區域上或另行製作。上述之移動元件312係用以搬運及移動給藥元件314，以利給藥元件314對光盤320添加試劑。加藥元件314係是用來控制容置、裝載、輸運、注入各種微流體藥劑/試劑至光盤320中，以利藥劑/試劑於光盤320中混和及反應。上述之電源360則用以供應多通道微流體光盤的檢測裝置300所需之整體電源。

參考第五圖與第六A圖所示，根據本發明之第二實施例，上述之光盤320係用以混和及反應各種微流體藥劑/試 劑，藉以提供反應物的凝聚型態。上述之光盤320具有至少一固定結構326與至少一檢測單元330，固定結構326係用以固定光盤320於旋動裝置316上以便於產生離心作用，其中，光盤320係為可置換式。此外，光盤320係為拋棄式，以避免受到檢體及測試試劑的污染，並藉此大幅提升檢測的可靠性，且能防止直接接觸本發明的加藥模組310與檢測模組340，將大幅延長整體設備的使用壽命。再者，檢測單元330之外觀設計更包含一樹狀外觀，根據本發明之外觀設計，光盤320可容納更多的檢測單元330，每個檢測單元330皆可視為一次檢測程序，藉此達成同步執行複數次檢測程序之目的。

上述之檢測單元330係藉由至少一透明基材經過雷射、雕刻或射出成型所構成。檢測單元330包含複數個供料腔331a、331b、331c、331d、331e、複數個進料孔332a、332b、332c、332d、332e、複數個通氣腔333a、333b、333c、333d、複數個氣孔334a、334b、334c、334d、至少一反應腔335、至少一廢棄腔337、複數個微流道338a、338b、338c、338d、338e、338f、338g、338h、338j、338k、複數個毛細管閥339d、339e。上述通氣腔333a、333b、333c、333d係於離心狀態時，通過氣孔334a、334b、334c、334d連通大氣的腔室，以利為流體於離心狀態時可流動。上述之給藥元件314可分別藉由進料孔332a、332b、332c、332d、332e 注入微流體於相對應之供料腔331a、331b、331c、331d、331e中存儲，其中，給藥元件314所注入之微流體可為RBC、Antibody、LIM、Polybrene/Polyethyleneimine、Resuspending solution等。此外，上述反應腔335係分別接收來自供料腔331a、331b、331c、331d、331e的微流體試劑，且反應腔335之容置空間中更包含至少一反應檢測區335A以提供檢體與試劑所需的反應空間，其用以留存大部分檢體與其它試劑的反應物，以便影像感測元件345於反應檢測區335A擷取反應物凝集型態的影像。

再者，上述廢棄腔337係位於該反應腔335的相鄰位置上，以便離心狀態下接收自反應腔335溢流的微流體。上述微流道338a、338b、338c、338d、338e係分別用以連通供料腔331a、331b、331c、331d、331e與反應腔335，且微流道338g、338h係分別用以連通通氣腔333a、333b與反應腔335，而微流道338j、338k係分別用以連通通氣腔333c、333d與廢棄腔337，且微流道338f係用於連通反應腔335與廢棄腔337，其中，微流道338a、338b、338c、338d、338g、338h分別與微流道338e相互連通，再經由微流道338e通入反應腔335。此外，上述之微流道338a、338b、338c、338d、338f、338g、338h分別具有一特定的連接角，連接角的角度可隨試劑的特性設計，並藉由離心轉速的快慢控制檢體與測試試劑的釋放速率，且對流出的流體產生止逆的作 用，其中，微流道338a與供料腔331a之連接角係為一圓切角以藉由圓邊切線方式降低微流體之表面阻力而離心出供料腔331a，且微流道338b、338c、338d、338g、338h具有一曲角(bending angle)以控制微流體流入微流道338e的速率，而連通反應腔335與廢棄腔337之微流道338f則於連接兩端形成一水平傾斜角(inclination)，靠近廢棄腔337之微流道338f出口處需高於靠近反應腔335之微流道338f入口處以形成止逆作用。

參照第六A圖與第六B圖所示，上述之微流道338d、338e位於供料腔331d、331e的入口處分別具有毛細管閥339d、339e以延滯從供料腔331d、331e流出微流體的速率，進而控制藥劑的釋放作用。此外，上述之毛細管閥339d的結構包含複數個凸狀渠道371a、371b與至少一凹狀渠道372a，凸狀渠道371a或371b與凹狀渠道372a係以交錯排列相互連結以形成鋸齒狀結構之外觀，其中，凹狀渠道372a之管徑寬度小於等於微流道338d，凹狀渠道372a之管徑較佳者包含100微米，且凸狀渠道371a、371b之管徑寬度大於微流道338d，凸狀渠道371a、371b之管徑較佳者包含300微米，而凸狀渠道371a、371b之管徑寬度與凹狀渠道372a之管徑寬度的比例範圍約為2：1~5：1，較佳者為3：1。再者，凸狀渠道371a、371b之管徑長度373a、373b與凹狀渠道372a之管徑長度374a之比值較佳者包含1：1，且為100 微米。

參考第六A圖所示，根據本發明之第二實施例，本發明提供一範例，分別注入微流體藥劑/試劑至預定腔室，藉由旋動元件316帶動光盤320進行一第一離心程序(600~800rpm，1~10sec)將RBC由供料腔331a導入反應腔335，接著由供料腔331b、331c分別導入Antibody、LIM至反應腔335中，再藉由旋動元件316往復式旋動光盤320以進行一第一混摻程序(往復角度10度~360度，往復次數1~10次)，混摻RBC、Antibody、LIM；然後進行一第二離心程序(600~1000rpm，1~10sec)將Polybrene/Polyethyleneimine自供料腔331d導出至反應腔335中，再藉由旋動元件316往復式旋動光盤320以進行一第二混摻程序(往復角度10度~360度，往復次數1~10次)，並增加其凝集反應；然後進行一第三離心程序(600~1500rpm，1~10sec)以分離凝聚物，其中大部分檢體與其它試劑的凝聚物留置於反應檢測區335A，且此時過多的反應液將由微流道338f溢流至廢棄腔337中；之後進行一第四離心程序(600~2000rpm，1~10sec)自供料腔331e導入Resuspending solution至反應腔335內，最後再進行一第三混摻程序(往復角度10度~360度，往復次數1~10次)，以打散非抗原抗體反應的血球凝集反應。

參考第四A圖與第四B圖所示，根據本發明之第二實 施例，上述之影像感測元件345包含一影像擷取元件，影像感測元件345係用以擷取一位於反應檢測區335A之反應物凝集型態的影像，如第七A圖、第七B圖所示，並予以轉換成一影像訊號。第七A圖所示係檢測O型血受試者RBC及血清結果，此結果與臨床使用之試管檢測法結果一致，在RBC分型部分不與anti-A及anti-B抗血清產生凝集反應；血清分型部分會與A cells及B cells產生凝集反應；Rh分型部分會與anti-D抗血清產生凝集反應；不規則抗體篩檢部分不與Screen I、II、III cells產生反應。此外，第七B圖所示係檢測A型血受試者RBC及血清結果的示意圖，此結果與臨床使用之試管檢測法結果一致；在RBC分型部分會與anti-A抗血清產生凝集反應；血清分型部分會與B cells產生凝集反應；Rh分型部分會與anti-D抗血清產生凝集反應；不規則抗體篩檢部分不與Screen I、III cells產生反應，具有Mia抗體，因此會與Screen II cells產生弱反應。反應檢測區335A之反應物的凝聚型態會隨檢測試劑轉變，因而影像感測元件345所接收之影像亦會隨反應物的凝聚型態轉變變化。再者，上述之分析元件352更包含一預設資料庫以提供特定的反應物的凝聚型態所對應的影像，以便於接收來自於影像感測元件345之影像訊號並加以計算、分析、比對預設資料庫之影像資料，然後藉由控制元件354控制顯示元件356顯現相關資訊。

顯然地，依照上面實施例中的描述，本發明可能有許多的修正與差異。因此需在其附加的權利請求項之範圍內加以理解，除上述詳細描述外，本發明還可以廣泛地在其他的實施例中施行。上述僅為本發明之較佳實施例而已，並非用以限定本發明之申請專利範圍；凡其它未脫離本發明所揭示之精神下所完成的等效改變或修飾，均應包含在下述申請專利範圍內。

330‧‧‧檢測單元

331a、331b、331c、331d、331e‧‧‧供料腔

332a、332b、332c、332d、332e‧‧‧進料孔

333a、333b、333c、333d‧‧‧通氣腔

334a、334b、334c、334d‧‧‧氣孔

335‧‧‧反應腔

337‧‧‧廢棄腔

338a、338b、338c、338d、338e‧‧‧微流道

338f、338g、338h、338j、338k‧‧‧微流道

339d、339e‧‧‧毛細管閥

Claims (20)

1. 一種多通道微流體系統檢測方法，該多通道微流體系統檢測方法包含：進行一給藥程序以分別導入複數種檢體與檢驗試劑之微流體至一光盤之複數個供料腔中；藉由控制一旋動裝置的轉動速率產生不同的離心力，以便於對該光盤進行一離心程序，並藉此控制不同之該供料腔的該微流體之釋放速率，其中，複數種該微流體係於離心狀態下分別經由複數條微流道導入至該光盤之一反應腔中以進行混和動作，以藉此形成一反應物於該反應腔之一檢測區中；與藉由一顯像擷取裝置進行一檢測程序，以觀測該反應物的凝聚型態。
2. 如申請專利範圍第1項所述之多通道微流體系統檢測方法，其中上述之離心程序更包含：進行一第一離心步驟以便從複數個該供料腔分別導出其內存之一第一微流體、一第二微流體與一第三微流體至該反應腔；藉由該旋動元件往復式旋動該光盤以便該反應腔中進行一第一混摻程序以混摻該第一微流體、該第二微流體與該第三微流體並形成一第一反應物；進行一第二離心步驟以便從複數個該供料腔之一導出其內存 之一第四微流體至該反應腔；藉由該旋動元件往復式旋動該光盤以便該反應腔中進行一第二混摻程序以混摻該第四微流體與該第一反應物並形成一第二反應物，且增加凝集反應；進行一第三離心步驟以分離該第二反應物中之凝聚物，其中，大部分檢體與其它試劑的凝聚物會留置於該檢測區中並混成一第三反應物；進行一第四離心步驟以便從複數個該供料腔之一導出其內存之一第五微流體至該反應腔並與該第三反應物混成一第四反應物；與進行一第三混摻程序以便凝集該第四反應物。
3. 如申請專利範圍第2項所述之多通道微流體系統檢測方法，其中上述之第一微流體係為RBC、該第二微流體係為Antibody、該第三微流體係為LIM、該第四微流體係為Polybrene/Polyethyleneimine、該第五微流體係為Resuspending solution。
4. 如申請專利範圍第28項所述之多通道微流體系統檢測方法，其中上述之第一離心步驟的離心速度為600~800rpm，操作時間為1~10sec；該第二離心步驟的離心速度為600~1000rpm，操作時間為1~10sec；該第三離心步驟的離心速度為600~1500rpm，操 作時間為1~10sec；該第四離心步驟的離心速度為600~2000rpm，操作時間為1~10sec。
5. 如申請專利範圍第2項所述之多通道微流體系統檢測方法，其中上述之第一混摻程序、該第二混摻程序與該第三混摻程序的往復旋動角度範圍為10度~360度，往復次數為1~10次。
6. 如申請專利範圍第1項所述之多通道微流體系統檢測方法，其中上述之檢測程序藉該顯像擷取裝置根據該反應物的凝聚型態產生一影像訊號以進行一比對分析程序，其中該比對分析程序係藉由一比對分析裝置根據其內預設資料庫中之資料比對並分析該影像訊號，藉此確認該第四反應物之凝聚型態。
7. 如申請專利範圍第1項所述之多通道微流體系統檢測方法，其中上述之供料腔於離心狀態下係與外部大氣相連通，並使該供料腔形成一通氣腔，以利微流體於離心狀態下的流動。
8. 如申請專利範圍第1項所述之多通道微流體系統檢測方法，其中上述之反應腔包含至少一反應檢測區，該反應檢測區用以存留微流體之反應物，以便於該反應檢測區擷取並分析反應物凝集狀態的影像。
9. 如申請專利範圍第1項所述之多通道微流體系統檢測方法，其中上述之多通道微流體系統檢測方法包含至少一微流道以連接該 供料腔與該反應腔，並於離心狀態下運輸微流體，其中上述之微流道與該供料腔相連接處具有一特定的連接角以藉由離心轉速的快慢控制微流體的釋放速率，且對流出的微流體產生止逆的作用。
10. 如申請專利範圍第1項所述之多通道微流體系統檢測方法，其中上述之微流道具有一特定的曲角以藉由離心轉速的快慢控制微流體的釋放速率，且對流出的微流體產生止逆的作用。
11. 如申請專利範圍第1項所述之多通道微流體系統檢測方法，其中上述之反應腔更包含至少一廢棄腔以接收自該反應腔流出之廢液。
12. 如申請專利範圍第1項所述之多通道微流體系統檢測方法，其中上述之微流道與該供料腔相連接處具有一毛細管閥以藉由離心轉速的快慢控制微流體的釋放速率，且對流出的微流體產生止逆的作用。
13. 如申請專利範圍第1項所述之多通道微流體系統檢測方法，其中上述之毛細管閥係於該微流道上形成至少一凸狀渠道與至少一凹狀渠道的交互連結之組合，以形成鋸齒狀結構外觀，其中，該凸狀渠道之管徑大於該凹狀渠道之管徑，且該凸狀渠道之管徑亦大於該微流道之管徑。
14. 一種多通道微流體光盤檢測方法，該多通道微流體光盤檢測方法包含：藉由控制一旋動裝置的轉動速率產生不同的離心力，以便於對 該光盤進行一離心程序，並藉此控制不同之複數個供料腔的該微流體之釋放速率，其中，複數種該微流體係於離心狀態下分別經由複數條微流道導入至該光盤之一反應腔中以進行混和動作，以藉此形成一反應物於該反應腔之一檢測區中；進行一第一離心步驟以便從複數個該供料腔分別導出其內存之一第一微流體、一第二微流體與一第三微流體至該反應腔；藉由該旋動元件往復式旋動該光盤以便該反應腔中進行一第一混摻程序以混摻該第一微流體、該第二微流體與該第三微流體並形成一第一反應物；進行一第二離心步驟以便從複數個該供料腔之一導出其內存之一第四微流體至該反應腔；藉由該旋動元件往復式旋動該光盤以便該反應腔中進行一第二混摻程序以混摻該第四微流體與該第一反應物並形成一第二反應物，且增加凝集反應；進行一第三離心步驟以分離該第二反應物中之凝聚物，其中，大部分檢體與其它試劑的凝聚物會留置於該檢測區中並混成一第三反應物；進行一第四離心步驟以便從複數個該供料腔之一導出其內存之一第五微流體至該反應腔並與該第三反應物混成一第四反應物；與進行一第三混摻程序以便凝集該第四反應物。
15. 如申請專利範圍第14項所述之多通道微流體光盤檢測方法，其中上述之多通道微流體光盤檢測方法包含：進行一給藥程序以分別導入複數種檢體與檢驗試劑之微流體至一光盤之該供料腔中；與藉由一顯像擷取裝置進行一檢測程序，以觀測該反應物的凝聚型態。
16. 如申請專利範圍第14項所述之多通道微流體光盤檢測方法，其中上述之第一微流體係為RBC、該第二微流體係為Antibody、該第三微流體係為LIM、該第四微流體係為Polybrene/Polyethyleneimine、該第五微流體係為Resuspending solution。
17. 如申請專利範圍第214項所述之多通道微流體光盤檢測方法，其中上述之第一離心步驟的離心速度為600~800rpm，操作時間為1~10sec；該第二離心步驟的離心速度為600~1000rpm，操作時間為1~10sec；該第三離心步驟的離心速度為600~1500rpm，操作時間為1~10sec；該第四離心步驟的離心速度為600~2000rpm，操作時間為1~10sec，其中上述之第一混摻程序、該第二混摻程序與該第三混摻程序的往復旋動角度範圍為10度~360度，往復次數為1~10次，其中上述之檢測程序藉該顯像擷取裝置根據該反應物的凝聚型態產生 一影像訊號以進行一比對分析程序，其中該比對分析程序係藉由一比對分析裝置根據其內預設資料庫中之資料比對並分析該影像訊號，藉此確認該第四反應物之凝聚型態。
18. 如申請專利範圍第14項所述之多通道微流體光盤檢測方法，其中上述之供料腔於離心狀態下係與外部大氣相連通，並使該供料腔形成一通氣腔，以利微流體於離心狀態下的流動。
19. 如申請專利範圍第14項所述之多通道微流體光盤檢測方法，其中上述之反應腔包含至少一反應檢測區，該反應檢測區用以存留微流體之反應物，以便於該反應檢測區擷取並分析反應物凝集狀態的影像。
20. 如申請專利範圍第14項所述之多通道微流體光盤檢測方法，其中上述之多通道微流體光盤檢測方法更包含至少一微流道以連接該供料腔與該反應腔，並於離心狀態下運輸微流體，其中上述之微流道與該供料腔相連接處具有一特定的連接角以藉由離心轉速的快慢控制微流體的釋放速率，且對流出的微流體產生止逆的作用，其中上述之微流道具有一特定的曲角以藉由離心轉速的快慢控制微流體的釋放速率，且對流出的微流體產生止逆的作用，其中上述之反應腔更包含至少一廢棄腔以接收自該反應腔流出之廢液，其中上述之微流道與該供料腔相連接處具有一毛細管閥以藉由離心轉速的快慢控制微流體的釋放速率，且對流出的微流體產生止逆的作用，其中上述之毛細管閥係於該微流道上形成至少一 凸狀渠道與至少一凹狀渠道的交互連結之組合，以形成鋸齒狀結構外觀，其中，該凸狀渠道之管徑大於該凹狀渠道之管徑，且該凸狀渠道之管徑亦大於該微流道之管徑。