TW201410243A - 用於治療大麻素受體型１（ｃｂ１）媒介之疾病之拉喹莫德（ｌａｑｕｉｎｉｍｏｄ） - Google Patents

用於治療大麻素受體型１（ｃｂ１）媒介之疾病之拉喹莫德（ｌａｑｕｉｎｉｍｏｄ） Download PDF

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Abstract

本發明提供治療患有CB1受體相關疾病之人類個體之方法，其包括以有效治療該個體之量向該個體週期性投與有效量之拉喹莫德(laquinimod)或其醫藥上可接受之鹽。

Description

用於治療大麻素受體型1(CB1)媒介之疾病之拉喹莫德(LAQUINIMOD)
在整個本申請案中參考多個公開案。為更充分地闡述與本發明相關之目前最佳技術，該等公開案之全部揭示內容特此以引用方式併入本申請案中。
大麻素受體型1(CB1受體)調變神經遞質釋放。CB2受體係由大麻素活化且與興奮性麩胺酸激導性傳遞及抑制性GABA激導性傳遞有關。發現海馬迴及大腦皮質中之GABA激導性神經元具有高CB1表現程度。內源性大麻素結合至任一突觸前GABA激導性神經元上之CB1受體，此導致GABA釋放有所降低。限制GABA釋放會阻抑抑制性傳遞。(Elphick及Egertová，2000)。如下文所闡述，CB1受體功能損失與若干疾病有關。
在注意力缺陷/多動性疾病之小鼠模型中已展示損失GABA媒介之突觸電流之CB1受體控制。具體而言，在藉由多巴胺(dopamine)轉運蛋白(DAT)基因之三重點突變獲得之ADHD之小鼠模型中，控制紋狀體中GABA媒介之突觸電流之CB1受體之敏感性已完全喪失。(Castelli等人，2011)。
另外，發現CB1受體基因敲除小鼠中之中風嚴重性有所增加。(Parmentier-Batteur,2002)。
缺陷CB1受體功能亦與亨庭頓氏病(Huntington’s Disease)(Dowie等人，2009)、精神分裂症(Leroy等人，2001；Koethe等人，2007)、雙相疾病及抑鬱(Koethe等人，2007)有關。
本文揭示拉喹莫德恢復GABAA受體功能之CB1調變。
拉喹莫德係具有高口服生物可用度之新穎合成化合物，已有人建議將其作為用於復發緩解型多發性硬化(RRMS)之口服調配物。
拉喹莫德與GABA激導性功能之間之關係尚未報導。美國專利第7,989,473號及第8,178,127號揭示N-乙基-N-苯基-1,2-二氫-4-羥基-5-氯-1-甲基-2-側氧基喹啉-3-甲醯胺(CAS編號為248281-84-7，亦稱為拉喹莫德)之穩定製劑。在美國專利第6,077,851號中展示拉喹莫德可有效用於急性實驗性自體免疫腦脊髓炎(aEAE)模型中。美國專利第6,077,851號揭示拉喹莫德之合成及其鈉鹽之製備。美國專利第6,875,869號揭示拉喹莫德之其他合成製程。
本發明提供治療患有CB1受體相關疾病之人類個體之方法，其包括以有效治療該個體之量向該個體週期性投與有效量之拉喹莫德或其醫藥上可接受之鹽。
本發明亦提供保留人類個體中之CB1受體敏感性之方法，其包括向該個體週期性投與有效量之拉喹莫德或其醫藥上可接受之鹽。
本發明亦提供拉喹莫德在製造醫藥中之用途，該醫藥用於治療患有CB1受體相關疾病之個體。
本發明亦提供拉喹莫德在製造醫藥中之用途，該醫藥用於保留人類個體中之CB1受體敏感性。
本發明亦提供一種醫藥組合物，其包括有效用於治療患有CB1受體相關疾病之人類個體之量之拉喹莫德。
本發明亦提供一種醫藥組合物，其包括有效用於保留人類個體 中之CB1受體敏感性之量之拉喹莫德。
圖1：每天經皮下投與LQ(1-25mg/kg)之預防性治療(0-26dpi)以劑量依賴性方式顯著阻抑EAE。觀察到病症發病率減小及延遲病症發作(15只小鼠/治療組)。使用非成對司徒登氏T測試實施統計學分析。*=p<0.05；**=p<0.0001。
圖2：使用LQ進行皮下治療會顯著減小髓磷脂損失、軸突損害及發炎。與未治療-EAE小鼠相比，在LQ-EAE小鼠中觀察到CD3+ T細胞及IB4+巨噬細胞顯著減少。平均使用10-15個脊髓切片/小鼠及總共4只小鼠/治療組。(A)軸突損害，以總切片區域中之百分比之形式量測。(B)脫髓鞘作用，以總切片區域中之百分比之形式量測。(C)血管周圍浸潤，以每個切片之浸潤數量之形式量測。(D)CD3+ T細胞，以每個切片之細胞數量之形式量測。(E)IB4+巨噬細胞，以每個切片之細胞數量之形式量測。X-I及X-II分別係未治療EAE小鼠及25mg/kg LQ-EAE小鼠之代表圖。使用非成對司徒登氏T測試實施統計學分析。*=p<0.05；**=p<0.002；***=p<0.0001。比例尺：100μm。
圖3：LQ治療對於紋狀體麩胺酸激導性傳遞之EAE誘導之突觸改變之效應。(A)因半寬及衰減時間有所增加，故麩胺酸鹽媒介之sEPSC之持續時間在未治療EAE小鼠之紋狀體神經元中有所增加。LQ治療不能防止sEPSC形狀之改變，但會將其顯著減小。(B)sEPSC幅值在未治療-EAE小鼠、LQ-EAE小鼠及野生型對照小鼠(HC)中相當。(C)麩胺酸激導性sEPSC之頻率在EAE小鼠中發生上調，且藉由LQ治療予以減小(但未正規化)。(D)電生理學跡線係自HC小鼠、未治療(假)EAE小鼠及25mg/kg LQ-EAE小鼠之紋狀體神經元記錄之sEPSC之實例。依次使用ANOVA以及Tukey HSD測試實施統計學分析。*與未治療-EAE組相比p<0.05；#意指與HC相比p<0.05。
圖4：預防性LQ治療(25mg/kg)對於紋狀體GABA激導性傳遞之EAE誘導之突觸改變之效應。(A、B)EAE誘導明顯影響GABA傳遞，從而抑制sIPSC之幅值(A)及頻率(B)。LQ治療會完全防止sIPSC之改變。(C)電生理學跡線係自HC小鼠、未治療-EAE小鼠及LQ-EAE小鼠之紋狀體神經元記錄之sEPSC之實例。(D)該圖形展示，LQ治療完全恢復了CB1受體激動劑HU210對於sIPSC之效應。(E)電生理學跡線係自在施加HU210之前及期間HC小鼠、未治療-EAE小鼠及LQ-EAE小鼠之紋狀體神經元記錄之sIPSC之實例。依次使用ANOVA以及Tukey HSD測試實施統計學分析。*與未治療-EAE組相比p<0.05；#意指與HC相比p<0.05。
圖5：LQ對於基礎突觸傳遞之效應。(A、B)該等圖形展示在浴溶液中施加之LQ對於GABA激導性傳遞之效應。1μM LQ不能改變自對照神經元記錄之sIPSC之頻率(A)及幅值(B)。相反，在較高濃度下，LQ能夠增加sIPSC之頻率。(C)該圖形展示sIPSC頻率之LQ誘導之增加之劑量-反應曲線。EC50=4.3μM。右側跡線係在對照神經元中施加30μM LQ之前及期間之電壓箝制記錄之實例。(D、E)該等圖形展示在浴溶液中施加之LQ對於麩胺酸激導性傳遞之效應。1μM LQ不能改變自對照神經元記錄之sEPSC之頻率(D)及幅值(E)。相反，在較高濃度下，LQ誘導兩個參數發生顯著減小。F.該圖形展示sEPSC幅值之LQ誘導之降低之劑量-反應曲線。EC50=4.5μM。右側跡線係在對照神經元中施加30μM LQ之前及期間之電壓箝制記錄之實例。
本發明提供治療患有CB1受體相關疾病之人類個體之方法，其包括以有效治療該個體之量向該個體週期性投與有效量之拉喹莫德或其醫藥上可接受之鹽。
在一實施例中，個體係人類。在另一實施例中，CB1受體相關疾 病係ADHD。
本發明亦提供保留人類個體中之CB1受體敏感性之方法，其包括向該個體週期性投與有效量之拉喹莫德或其醫藥上可接受之鹽。
在一實施例中，經由經口投與來投與拉喹莫德。在另一實施例中，每天投與拉喹莫德。在另一實施例中，以超過每天一次之頻率投與拉喹莫德。在另一實施例中，以小於每天一次之頻率投與拉喹莫德。
在一實施例中，組合物中之拉喹莫德之量小於0.6mg。在另一實施例中，組合物中之拉喹莫德之量為0.1-40.0mg。在另一實施例中，組合物中之拉喹莫德之量為0.1-2.5mg。在另一實施例中，組合物中之拉喹莫德之量為0.25-2.0mg。在另一實施例中，組合物中之拉喹莫德之量為0.5-1.2mg。在另一實施例中，組合物中之拉喹莫德之量為0.25mg。在另一實施例中，組合物中之拉喹莫德之量為0.3mg。在另一實施例中，組合物中之拉喹莫德之量為0.5mg。在另一實施例中，組合物中之拉喹莫德之量為0.6mg。在另一實施例中，組合物中之拉喹莫德之量為1.0mg。在另一實施例中，組合物中之拉喹莫德之量為1.2mg。在另一實施例中，組合物中之拉喹莫德之量為1.5mg。在另一實施例中，組合物中之拉喹莫德之量為2.0mg。
在一實施例中，拉喹莫德之醫藥上可接受之鹽係拉喹莫德鈉。
本發明亦提供拉喹莫德在製造醫藥中之用途，該醫藥用於治療患有CB1受體相關疾病之個體。
本發明亦提供拉喹莫德在製造醫藥中之用途，該醫藥用於保留人類個體中之CB1受體敏感性。
本發明亦提供一種醫藥組合物，其包括有效用於治療患有CB1受體相關疾病之人類個體之量之拉喹莫德。
本發明亦提供一種醫藥組合物，其包括有效用於保留人類個體 中之CB1受體敏感性之量之拉喹莫德。
對於上述實施例而言，預計本文所揭示之每一實施例適用於其他所揭示實施例中之每一者。
術語
如本文所使用且除非另有說明，否則下列術語中之每一者將具有下文所闡述定義。
如本文所使用，「拉喹莫德」意指拉喹莫德酸或其醫藥上可接受之鹽。
如本文所使用，「投與個體」意指向個體給予、分配或施加醫藥、藥物或治療劑以減輕或治癒病理學病狀。經口投與係向個體投與本發明化合物之一種方式。
如本文中所使用，「CB1受體相關疾病」係患有疾病之患者具有缺陷CB1受體功能之疾病。該等病症包含但不限於注意力缺陷/過動疾病(ADHD)、亨庭頓氏病、心境疾病、精神分裂症、雙相疾病及中風。
如本文中所使用，如以毫克量測之拉喹莫德之「量」或「劑量」係指存於製劑中之拉喹莫德酸之毫克數(不論該製劑之形式如何)。舉例而言，0.6mg拉喹莫德意指製劑中拉喹莫德酸之量為0.6mg(不論該製劑之形式如何)。因此，在呈鹽形式(例如拉喹莫德鈉鹽)時，因存在額外鹽離子，故提供0.6mg拉喹莫德劑量所需之鹽形式重量將超過0.6mg，但係莫耳等效量。
如本文中所使用，有效達成一定結果之「有效」量係指在以揭示內容方式使用時足以產生指示治療反應而無過度不良副效應(例如毒性、刺激或過敏反應)且與適當益處/風險比相稱之組份量。舉例而言，有效治療疾病或病症之症狀而不會引起過度不良副效應之量。具體有效量將端視諸如以下因素而有所變化：所治療特定病狀、患者之 身體狀況、所治療哺乳動物之類型、治療持續時間、並行療法(若存在)之性質及具體調配物採用及化合物或其衍生物之結構。
「鹽」係藉由製備化合物之酸式鹽或鹼式鹽加以改質之本發明化合物之鹽。就此而言，術語「醫藥上可接受之鹽」係指本發明化合物之相對無毒之無機及有機酸式或鹼式加成鹽。
可使用拉喹莫德之醫藥上可接受之鹽。本申請案中所使用之醫藥上可接受之拉喹莫德之鹽包含鋰鹽、鈉鹽、鉀鹽、鎂鹽、鈣鹽、錳鹽、銅鹽、鋅鹽、鋁鹽及鐵鹽。拉喹莫德之鹽調配物及其製備方法闡述於(例如)美國專利申請公開案第2005-0192315號及PCT國際申請公開案第WO 2005/074899號中，其以引用方式併入本申請案中。
如本文中所使用，「治療(treat或treating)」涵蓋(例如)誘導疾病及/或病症之抑制、消退或停滯。如本文中所使用，「抑制」個體之病症進展或病症併發症意指阻止或減少個體之病症進展及/或病症併發症。
如本文中所使用，「醫藥上可接受之載劑」係指適於人類及/或動物使用而無過度不良副效應(例如毒性、刺激及過敏反應)且符合適當益處/風險比之載劑或賦形劑。其可為用於將本發明化合物遞送至個體之醫藥上可接受之溶劑、懸浮劑或媒劑。
本文所用之劑量單位可包括單一化合物或該等化合物之混合物。劑量單位可製成口服劑型，例如錠劑、膠囊、丸劑、粉劑及顆粒。
拉喹莫德可與適宜醫藥稀釋劑、補充劑、賦形劑或載劑(在本文中統稱為醫藥上可接受之載劑)混合投與，該等醫藥上可接受之載劑係針對預期投與形式且配合習用醫藥操作法適當選擇。該單位可呈適於經口投與之形式。拉喹莫德可單獨投與，但通常與醫藥上可接受之載劑混合並呈錠劑或膠囊、脂質體形式共同投與，或呈聚結粉劑投 與。適宜固體載劑之實例包含乳糖、蔗糖、明膠及瓊脂。膠囊或錠劑容易調配且易於吞服或咀嚼；其他固體形式包括顆粒及散裝粉劑。錠劑可含有適宜黏合劑、潤滑劑、稀釋劑、崩解劑、著色劑、矯味劑、流動誘導劑及熔化劑。
可用於調配本發明之口服劑型之技術、醫藥上可接受之載劑及賦形劑之具體實例闡述於(例如)美國專利申請公開案第2005/0192315號、PCT國際申請公開案第WO 2005/074899號、第WO 2007/047863號及第WO/2007/146248號中，其每一者以引用方式併入本申請案中。
製備可用於本發明中之劑型之一般技術及組合物闡述於下列參考文獻中：7 Modern Pharmaceutics，第9章及第10章(Banker及Rhodes編輯，1979)；Pharmaceutical Dosage Forms：Tablets(Lieberman等人，1981)；Ansel,Introduction to Pharmaceutical Dosage Forms第2版(1976)；Remington之Pharmaceutical Sciences，第17版(Mack出版公司，Easton,Pa.,1985)；Advances in Pharmaceutical Sciences(David Ganderton、Trevor Jones編輯，1992)；Advances in Pharmaceutical Sciences第7卷(David Ganderton,Trevor Jones,James McGinity編輯，1995)；Aqueous Polymeric Coatings for Pharmaceutical Dosage Forms(Drugs and the Pharmaceutical Sciences，第36輯(James McGinity編輯，1989)；Pharmaceutical Particulate Carriers：Therapeutic Applications：Drugs and the Pharmaceutical Sciences，第61卷(Alain Rolland編輯，1993)；Drug Delivery to the Gastrointestinal Tract(Ellis Horwood Books in the Biological Sciences。Series in Pharmaceutical Technology；J.G.Hardy,S.S.Davis,Clive G.Wilson編輯)；Modern Pharmaceutics Drugs and the Pharmaceutical Sciences，第40卷(Gilbert S.Banker,Christopher T.Rhodes編輯)。該等參考文獻之全部內容以 引用方式併入本申請案中。
錠劑可含有適宜黏合劑、潤滑劑、崩解劑、著色劑、矯味劑、流動誘導劑及熔化劑。舉例而言，對於以劑量單位形式經口投與錠劑或膠囊而言，活性藥物組份可與諸如以下等醫藥上可接受之口服無毒惰性載劑組合：乳糖、明膠、瓊脂、澱粉、蔗糖、葡萄糖、甲基纖維素、磷酸氫鈣、硫酸鈣、甘露醇、山梨醇、微晶纖維素及諸如此類。適宜黏合劑包含澱粉、明膠、天然糖(例如葡萄糖或β-乳糖)、玉米澱粉、天然及合成膠(例如阿拉伯膠、黃蓍膠或海藻酸鈉)、聚維酮(povidone)、羧甲基纖維素、聚乙二醇、蠟及諸如此類。用於該等劑型中之潤滑劑包含油酸鈉、硬脂酸鈉、苯甲酸鈉、乙酸鈉、氯化鈉、硬脂酸、硬脂基富馬酸鈉、滑石粉及諸如此類。崩解劑包含但不限於澱粉、甲基纖維素、瓊脂、膨潤土、黃原膠、交聯羧甲基纖維素鈉、羥乙酸澱粉鈉及諸如此類。
應理解，若提供參數範圍，則本發明亦提供該範圍內之所有整數及其百分位。舉例而言，「0.25-2.0mg/天」包含0.25mg/天、0.26mg/天、0.27mg/天等直至2.0mg/天。藉由參照以下實驗細節將更佳地理解本發明，但彼等熟習此項技術者將易知，所詳述之具體實驗僅為闡釋本發明，如在隨後申請專利範圍中更充分地闡述。
實驗細節 導言
藉助來自單一神經元之神經生理學記錄，最近發現，在患有實驗性自體免疫腦脊髓炎(EAE)之小鼠中，中樞神經元之麩胺酸鹽-及GABA媒介之傳遞發生複雜之動態改變，此改變始於病症之症狀前階段且獨立於脫髓鞘作用或軸突損傷而進化，但對由浸潤T細胞及活化小神經膠質細胞釋放之特定促發炎細胞因子具有反應。因此，能夠防止該等突觸改變之治療很可能對病症進展施加顯著之明確神經保護效 應。
在此，探究拉喹莫德(LQ)對於EAE小鼠之臨床及突觸異常之效應以提供此藥物之神經保護作用的可能相關性。亦研究LQ對於基礎突觸傳遞之效應以理解LQ之假定神經保護效應是否源於其能夠經由調變神經元興奮性且限制興奮毒性損害來調控突觸傳遞。
材料及方法 EAE誘導及病症評估
自Charles River(Calco,Milan,Italy)購買6-8週齡之雌性C57BL/6小鼠並圈養於無病原體條件下。根據San Raffaele Scientific Institute Institutional Animal Care and Use Committee之導則實施涉及動物之所有程序。
藉由使用3次100μl之皮下注射(各含有總共200μg存於不完全弗羅因德氏佐劑(incomplete Freund’s adjuvant)中之髓磷脂少突膠質細胞糖蛋白(MOG)肽35-55(Multiple Peptide System)及8mg/ml結核分枝桿菌(Mycobacterium tuberculosis)(菌株H37Ra；Difco))實施免疫來誘導EAE。在免疫當天注射百日咳毒素(Pertussis toxin)(Sigma)(500ng)且在兩天後再次注射。每天記錄體重及臨床評分(0=健康；1=尾巴不舉；2=後肢共濟失調及/或輕癱；3=後肢癱瘓及/或前肢輕癱；4=四肢癱瘓；5=垂死或死亡)。
每天一次藉由經皮下(s.c.)注射LQ(由Teva Pharmaceutical Industries,Netanya,Israel供應)來治療EAE小鼠(在下文中稱為LQ-EAE)。自免疫當天開始直至免疫後26天(d.p.i.)以不同劑量(1mg/kg至25mg/kg)投與LQ。使用假治療EAE小鼠(在下文中稱為未治療-EAE)及健康對照小鼠(在下文中稱為HC)作為對照。使用非成對司徒登氏T測試實施統計學分析。將顯著水準設定為p<0.05。
組織學評估
使用鹽水及0.5M EDTA經由左側心室經心灌注至少5只小鼠/組5-10min，隨後使用存於0.1M磷酸鹽緩衝液(pH 7.4)中之冷4%低聚甲醛(PFA)(Sigma,St Louis,MO)進行固定。隨後，小心解剖出脊髓及腦且後固定於4% PFA中3-4h並加以處理以用於石蠟包埋。
在自HC、LQ-EAE小鼠及未治療-EAE小鼠獲得之5μm石蠟CNS切片上量化神經學損害。使用三種不同染色來檢測發炎性浸潤(H&E)、脫髓鞘作用(羅克沙爾堅牢藍(Luxol fast blue))及軸突損害(Bielshowsky)。實施CD3(全T細胞標記物，Serotec有限公司，Oxford,UK)及BS-I同工凝集素B4(生物素化同工凝集素，來自Sigma,St Louis,MO)之免疫組織化學分析以分別探究發炎性細胞浸潤內之T細胞及巨噬細胞。使用適當生物素標記之二級抗體(Amersham,UK)揭示抗體且依次使用ABC套組(Vector實驗室，CA)以及液體DAB Substrate Chromogen系統(DAKO,CA)進行研發。
在以8種不同脊髓濃度獲取之平均18-20個完整脊髓橫截面/小鼠中量化神經病理學發現。計算血管周圍發炎性浸潤之數量且表示為發炎性浸潤數量/mm2，將脫髓鞘區域及軸突損失表示為損害區域百分比/mm2。計算位於蛛網膜下腔內或浸潤CNS薄壁組織之T細胞及巨噬細胞之數量且表示為細胞數量/mm2。使用Olympus顯微鏡來獲取圖像。
使用非成對司徒登氏T測試實施統計學分析。將顯著水準設定為p<0.05。
電生理學
對LQ-EAE小鼠(使用25mg/kg LQ治療)、未治療-EAE小鼠及HC小鼠進行來自單一紋狀體神經元之全細胞膜片箝制電生理學記錄。在25dpi與35dpi期間進行記錄。在氟烷(halothane)麻醉下以頸椎脫臼法將小鼠殺死，且使用振動切片機自腦之新鮮組織塊製備皮質紋狀體冠 狀切片(200μm)(Centonze等人，2007,2009；Rossi等人，2010a,b)。然後將單一切片轉移至記錄室中且浸沒於供應95% O2-5% CO2氣體之連續流動之人工CSF(ACSF)(34℃，2-3ml/min)中。對照ACSF之組成為(以mM表示)：126 NaCl、2.5 KCl、1.2 MgCl2、1.2 NaH2PO4、2.4 CaCl2、11葡萄糖、25 NaHCO3。在正壓及目測控制下將記錄移液器推進至切片中之個別紋狀體細胞中(WinVision 2000,Delta Sistemi,Italy)且在接觸後藉由施加負壓來達成GΩ氣密密封。然後藉由抽吸使膜片破裂且使用Axopatch 1D膜片箝制放大器監測膜電流及電勢(Axon Instruments,Foster City,CA,USA)。以電壓箝制量測之全細胞通路電阻在5-20MΩ之範圍內。使用硼矽酸鹽玻璃移液器(1.8mm o.d.；2-3MΩ)，以電壓箝制模式在-80mV之保持電勢(HP)下進行全細胞膜片箝制記錄。為研究麩胺酸鹽媒介之自發性興奮性突觸後電流(sEPSC)，使用具有下列組成(mM)且使用KOH調節至pH 7.3之內部溶液填充記錄移液器：K+-葡萄糖酸鹽(125)、NaCl(10)、CaCl2(1.0)、MgCl2(2.0)、1,2-雙(2-胺基苯氧基)乙烷-N,N,N,N-四乙酸(BAPTA；0.5)、N-(2-羥乙基)-六氫吡嗪-N-乙烷磺酸(HEPES；19)、鳥苷三磷酸(GTP；0.3)、Mg-腺苷三磷酸(Mg-ATP；1.0)。向灌注溶液中添加比枯枯靈鹼(Bicuculline)(10μM)以阻斷GABAA媒介之傳遞。相反，為檢測GABAA媒介之自發性抑制性突觸後電流(sIPSC)，電極內溶液具有下列組成(mM)：CsCl(110)、K+-葡萄糖酸鹽(30)、乙二醇-雙(β-胺基乙基醚)-N,N,N’,N’-四乙酸(EGTA；1.1)、HEPES(10)、CaCl2(0.1)、Mg-ATP(4)、Na-GTP(0.3)。向外部溶液中添加MK-801(30μM)及CNQX(10μM)以分別阻斷NMDA及非NMDA麩胺酸鹽受體。藉由使用P-CLAMP(Axon Instruments)儲存突觸事件且在個人電腦上使用Mini Analysis 5.1(Synaptosoft,Leonia,NJ,USA)軟體進行離線分析。將自發性IPSC及EPSC之檢測臨限值設定為基線雜訊之兩 倍。藉由目測檢查證實在每一實驗中實際上並未鑑別出假事件。對在固定時間段期間(3-5min，3-6次取樣)記錄之自發性及微小突觸事件實施離線分析，每5分鐘或10分鐘進行取樣。僅考慮對照中展現穩定頻率(在對照取樣期間之變化小於20%)之細胞。對於動力學分析而言，峰幅值介於10pA與50pA之間之事件分組，藉由半上升時間排列，藉由峰幅值正規化。在每一細胞中，將事件平均化以獲得上升時間、衰減時間及半寬(Centonze等人，2009；Rossi等人，2010a,b)。
藉由以期望最終濃度溶於浴ACSF中來施加藥物。藥物為：CNQX(10μM)、HU210(1μM)、MK-801(30μM)、HU210(1μM)(來自Tocris Cookson,Bristol,UK)、比枯枯靈鹼(10μM)(例如Sigma-RBI,St.Louis,USA)、LQ(0.3μM、1μM、10μM、30μM)。
對於呈現為平均值±SE之數據而言，n指示細胞數量。記錄每只動物之1至6種細胞。對於每一類型之實驗及時間點而言，自每一實驗組採用至少4只不同動物。依次使用單向ANOVA以及Tukey’s HSD測試分析多個對比。藉由成對或非成對司徒登氏T測試分析兩個組之間之對比。將顯著水準設定為p<0.05。
實例1：LQ治療在EAE小鼠中之效應
如先前所顯示，已證實藉由每天經皮下投與LQ進行預防性治療(0-26d.p.i.)能夠以劑量依賴性方式改善EAE(圖1)。所有15只未治療-EAE小鼠皆發生病症，13/15(86,6%)之1mg/kg LQ-EAE小鼠、12/15(80%)之5mg/kg LQ-EAE小鼠及6/15(40%)之25mg/kg LQ-EAE小鼠發生病症。發作亦端視LQ劑量漸進地延遲；未治療-EAE組之平均病症發作日期為11.9(±2.33)，1mg/kg LQ-EAE小鼠之平均病症發作日期為11.9(±2.47)，5mg/kg LQ-EAE小鼠之平均病症發作日期為14.6(±4.29)，且25mg/kg LQ-EAE小鼠之平均病症發作日期為13.5(±2.43)。假治療小鼠及1mg/kg LQ-EAE小鼠中之最大病症評分為3.5， 而在5mg/kg LQ-EAE小鼠中為3且在25mg/kg LQ-EAE小鼠中為1.5。未治療EAE小鼠中之累積評分(0-26dpi)為27.5且在1mg/kg LQ-EAE小鼠中為27.3，在5mg/kg LQ-EAE小鼠中為21.5，且在25mg/kg LQ-EAE小鼠中為21.3。
脊髓之病理學檢驗藉由展示脊髓切片內之浸潤數量有所減少來證實臨床讀出值(圖2)。LQ-EAE小鼠中之細胞浸潤顯示其組成變化且T淋巴球(CD3+)及小神經膠質細胞/巨噬細胞(同工凝集素B4+)之數量有所減少(圖2)。與對照相比，LQ-EAE小鼠中之脫髓鞘作用及軸突損失亦以劑量依賴性方式有所減小(圖2)。
實例2：LQ對EAE中之麩胺酸鹽傳遞之效應
如先前所顯示(Centonze等人，2009)，在未治療-EAE小鼠之紋狀體神經元中，麩胺酸鹽媒介之sEPSC之持續時間有所增加。較緩慢衰減時間可解釋增加之sEPSC持續時間(衰減時間：未治療-EAE：5.4±0.4ms，HC 3.4±0.2ms；半寬：未治療-EAE：6.4±0.4ms，HC 4.0±0.3ms；在兩個組中n=18，p<0.01)。LQ治療不能防止sEPSC形狀之改變但會將其顯著減小(LQ-EAE：衰減時間為4.2±0.3ms，半寬為5.0±0.3ms，n=20；關於未治療-EAE p<0.05，關於HC p<0.05)(圖3A)。EAE誘導及LQ治療皆不影響sEPSC之上升時間及幅值(上升時間：未治療-EAE為1.05±0.1ms，LQ-EAE為0.98±0.1ms，HC為1.03±0.1ms；幅值：未治療-EAE為11.1±0.8pA，LQ-EAE為12.2±1.1pA，HC為12.0±1.0pA；n=至少18，p>0.05)(圖3A、B、D)。
在EAE小鼠中，不僅sEPSC之持續時間且亦其頻率皆有所增加(Centonze等人，2009；Rossi等人，2010a)，如針對麩胺酸激導性傳遞之突觸前及突觸後異常所預計(未治療EAE小鼠：4.0±0.2Hz，HC：2.7±0.2Hz，在兩個組中n=至少18，p<0.01)。根據關於sEPSC之動力學性質之數據，sEPSC之頻率有所減小，但並未藉由LQ治療達成正規 化(LQ-EAE：3.4±0.4Hz；n=20，關於未治療EAE及HC p>0.05)(圖3C、圖3D)。
實例3：LQ對於EAE中之GABA傳遞之效應
在EAE中突觸抑制變化同時出現異常麩胺酸鹽傳遞(Rossi等人，2010b)。根據先前報告，sIPSC之頻率及幅值由EAE誘導明顯抑制(頻率：未治療-EAE為0.8±0.1Hz，HC為1.7±0.1ms；幅值：未治療-EAE為20±1.5pA，HC為32±1.3pA；在兩個組中n=20，p<0.01)。LQ治療完全防止sIPSC變化(LQ-EAE：頻率為2.0±0.2Hz，幅值為29±1.1pA；n=20，關於未治療-EAE p<0.05，關於HC p>0.05)(圖4A-C)。另外，亦探究GABA突觸對於大麻素受體(CB)1刺激之敏感性，此乃因先前已顯示在EAE小鼠中GABA傳遞CB1媒介之控制有所損失(Centonze等人，2007)。施加大麻素CB1受體激動劑HU210(10min,n=8)會顯著減小對照切片中之sIPSC頻率(相對於給藥前之值為76±3%，p<0.05)。在來自未治療EAE小鼠之紋狀體神經元中，HU210效應完全廢止(n=10，相對於給藥前之值為101±3%，p>0.05)。應注意，在LQ-EAE小鼠中，HU210之效應較為正常(n=10，相對於給藥前之值為75±3%，p<0.05)，從而指示LQ投與之有益效應與保留於紋狀體GABA激導性突觸處之大麻素CB1受體敏感性有關(圖4D、4E)。
實例4：LQ對於基礎突觸傳遞之效應
上述數據指示，LQ直接改變EAE小鼠中之sEPSC及sIPSC，此乃因其調變中樞突觸處之基礎麩胺酸鹽及GABA傳遞。然而，必需排除間接免疫調節機制，以評估藥物對於神經元功能性之直接效應。因此，測試LQ(施加於野生型小鼠之皮質紋狀體切片之浴溶液中)對於自發性突觸傳遞之效應。
已報導，在EAE小鼠中，全身性投與之LQ之CNS濃度高達周邊血液中暴露量之13%(Bruck等人，2011)。因此，皮下投與25mg/kg LQ應等於0.3-1μM之CNS濃度。因此，為模擬活體內情形，將1μM LQ施加於腦切片上保持12分鐘。此試驗不能改變自對照神經元(每一參數之n=至少10個神經元，每一參數與給藥前之值相比p>0.05)記錄之sEPSC及sIPSC頻率(圖5A、5C)、幅值(圖5B、50D)及動力學性質(sIPSC上升時間：101±2%，sIPSC衰減時間：98±3%；sEPSC上升時間：99±1%，sEPSC衰減時間：101±2%，未出示)，從而表示LQ能夠防止由EAE誘導之突觸改變，但並不干擾基礎突觸傳遞。
令人吃驚的是，在較高濃度下，LQ藉由增強抑制性傳遞且減小興奮性傳遞，而直接影響神經元突觸活性。在所測試之所有對照神經元(兩種濃度之n=8)中，浴溶液中施加之LQ(10-30μM)顯著增加sIPSC頻率(p<0.01)但並不增加幅值(每一參數之p>0.05)(圖5A、5B)，從而表示此藥物對於調變GABA激導性傳遞具有突觸前效應。劑量-反應曲線報告於圖5C中。
比枯枯靈鹼對於GABAA受體之藥理學阻斷作用在LQ之存在下(n=5，未展示)(例如在對照條件下(n=3，未展示))記錄到完全阻斷之sIPSC。另外，在所測試之所有對照神經元中(對於兩種濃度而言n=10，p<0.01)，在浴溶液中施加之LQ(10-30μM)顯示藉由減小sEPSC幅值對於興奮性突觸傳遞具有顯著突觸後效應。在存在最高濃度之LQ下，亦記錄sEPSC之頻率顯著減小(n=7，相對於給藥前之值83±2.7%，p<0.05)(圖5D、5E)。劑量-反應曲線報告於圖5F中。CNQX對於AMPA受體之藥理學阻斷完全阻斷在存在LQ下(n=5，未展示)(例如在對照條件下(n=4，未展示))記錄之sEPSC。
論述
已逐漸認識到，早期軸突損害係MS之最重要神經病理學特徵之一(Trapp等人，1998)，由此表明此可能代表在原發性及繼發性進展性MS患者中觀察到之可逆神經學損害之最終病因。若干人類及實驗證 據可證實此假設。MS之早期階段之特徵在於局灶性皮層萎縮及丘腦神經退化(Chard等人，2002)且在患有臨床孤立性症候群之患者中已發現脊髓萎縮(Brex PE等人，2001)。在EAE小鼠中，即使在病症發作之前，亦發生突觸紊亂，此乃因大量釋放原發性發炎細胞因子(Centonze等人，2009)。來自EAE小鼠之Th17細胞可經由可能涉及IL-17釋放之機制直接損害軸突(Siffrin等人，2010)。在EAE之早期階段，軸突內線粒體之前軸突形態變化發生深度改變，此可能係經由反應性氧及氮物質(ROS/RNS)之貢獻作用來達成(Nikic等人，2011)。
本研究顯示，EAE小鼠之臨床、突觸及神經病理學缺陷可由LQ顯著減弱，從而指示使用此藥理學藥劑之治療可提供神經保護效應。已展示，實際上，在治療性投與EAE小鼠時，免疫調節藥LQ能夠減小紋狀體中之麩胺酸激導性突觸電流同時增加GABA激導性突觸電流。因此，與未治療EAE小鼠相比，在LQ治療小鼠中麩胺酸激導性興奮毒性受限且軸突損害顯著減小。迄今尚未已知LQ經由釋放第三配偶分子直接抑或間接調變突觸傳遞，但所收集之電生理學證據指示，LQ能夠藉由作用於突觸前層面及突觸後層面來誘導之使得阻斷麩胺酸激導性電流且增加GABA激導性電流之級聯事件。LQ治療亦保留大麻素受體(CB)1對於GABA激導性突觸之敏感性。應注意，內生性大麻(其係已知改善EAE且向MS患者提供一些治療益處之分子(Baker等人，2007))能夠經由利用CB1受體觸發增加突觸前及突觸後層面之細胞內鈣來減小麩胺酸激導性電流(Centonze等人，2007)。
存在證據指示LQ在EAE及MS患者中之免疫調節作用。LQ展示能夠藉由誘導Th1-Th2移位來干擾EAE之發炎階段(Yang等人，2004)，從而阻抑與抗原呈遞相關之基因(Gurevich M等人，2010)，且影響樹突狀細胞(DC)之抗原呈遞能力(Schulze-Topphoff U等人，2012)。因此，主要倡導免疫調節作用模式來部分闡釋LQ在EAE中之神經保護 效應。然而，在全身性投與時，LQ能夠穿過血腦障壁(Brück等人，2011)，從而到達CNS且原位產生直接神經保護效應。配合該作用模式，吾等在急性腦切片上測試LQ是否可直接調變突觸活性時，發現與彼等活體內所得結果類似之結果。應注意，在較低劑量下，LQ能夠防止EAE所誘導之突觸變化，且並不干擾生理學突觸傳遞，從而表示具有直接神經保護活性。在較高濃度下，LQ對於興奮性及抑制性突觸活性具有直接效應。需要進一步研究來驗證該等結果。
吾等不能排除在MS患者及EAE齧齒類動物二者之活體內觀察到之一部分神經保護效應可歸因於LQ能夠顯著且持續增加循環BDNF含量之能力(Thöne等人，2012)。然而，吾等之數據可至少部分闡釋在MS患者及患有EAE之小鼠中獲得之一些活體內證據，且特定而言顯示LQ能夠干擾確立之慢性復發性EAE(Brunmark等人，2002；Wegner C.等人，2010)且減小人類中「黑洞」之出現(Comi等人，2008)。甚至更重要的是，數據亦可證實階段III試驗中顯示LQ不僅減小復發率且亦減緩RR-MS患者中之失能進展數據(Comi等人，2012)。總而言之，數據可證實以下觀點：LQ可用作神經保護藥物，此乃因其能夠經由調變神經元興奮性且限制藉由改變突觸傳遞誘導之興奮毒性損害來限制軸突損害。
拉喹莫德能夠調變CB1及GABA功能表明，拉喹莫德可用於治療CB1受體及GABA相關疾病。
實例5：ADHD之大鼠模型
在ADHD之大鼠模型中測試拉喹莫德。接受一定量拉喹莫德之大鼠與對照大鼠相比顯示陽性結果。
實例6：ADHD之小鼠模型
DAT可卡因(cocaine)不敏感(DAT-CI)小鼠在多巴胺遞質(DAT)基因之可卡因結合位點中具有三重點突變。DAT-CI小鼠之行為模擬人 類ADHD行為。如先前所闡述，CB1受體控制DAT-CI小鼠之紋狀體中之GABA媒介之突觸電流的敏感性完全喪失。(Castelli等人，2011)。
接受拉喹莫德之DAT-CI小鼠與對照小鼠相比顯示降低之自主活動。接受一定量拉喹莫德之DAT-CI小鼠亦顯示可恢復CB1受體對於CB1受體激動劑HU210之敏感性。
實例7：人類ADHD試驗
向診斷有ADHD之人類個體投與拉喹莫德。接受一定量拉喹莫德之人類個體與對照組相比顯示陽性結果。具體而言，人類個體之漫不經心性、過動性或搏動性得以減弱。
參考文獻
Baker D, Jackson SJ, Pryce G. Cannabinoid control of neuroinflammation related to multiple sclerosis. Br J Pharmacol. 2007; 152: 649-54。
Brex PA, Leary SM, O'Riordan JI, Miszkiel KA, Plant GT, Thompson AJ, Miller DH. Measurement of spinal cord area in clinically isolated syndromes suggestive of multiple sclerosis. J Neurol Neurosurg Psychiatry. 2001; 70: 544-7。
Brück W, Wegner C. Insight into the mechanism of laquinimod action. J Neurol Sci. 2011; 306: 173-9。
Brunmark C, Runström A, Ohlsson L, Sparre B, Brodin T, Aström M, Hedlund G. The new orally active immunoregulator laquinimod (ABR-215062) effectively inhibits development and relapses of experimental autoimmune encephalomyelitis. J Neuroimmunol. 2002; 130: 163-72。
Castelli M, Federici M, Rossi S, De Chiara V, Napolitano F, Studer V, Motta C, Sacchetti L, Romano R, Musella A, Bernardi G, Siracusano A, Gu H, Mercuri N, Usiello A, Centonze D. Loss of striatal cannabinoid CB1 receptor function in attention-deficit/hyperactivity disorder mice with point-mutation of the dopamine transporter. European Journal of Neuroscience 2011; 34: 1369-1377。
Centonze D, Bari M, Rossi S, Prosperetti C, Furlan R, Fezza F, De Chiara V, Battistini L, Bernardi G, Bernardini S, Martino G, Maccarrone M The endocannabinoid system is dysregulated in multiple sclerosis and in experimental autoimmune encephalomyelitis. Brain. 2007; 130: 2543-53。
Centonze D, Muzio L, Rossi S, Furlan R, Bernardi G, Martino G. The link between inflammation, synaptic transmission and neurodegeneration in multiple sclerosis. Cell Death Differ. 2010; 17: 1083-91。。
Chard DT, Griffin CM, Parker GJ, Kapoor R, Thompson AJ, Miller DH. Brain atrophy in clinically early relapsing-remitting multiple sclerosis. Brain. 2002; 125: 327-37。
Comi G, Pulizzi A, Rovaris M, Abramsky O, Arbizu T, Boiko A, Gold R, Havrdova E, Komoly S, Selmaj K, Sharrack B, Filippi M; LAQ/5062 Study Group Effect of laquinimod on MRImonitored disease activity in patients with relapsing-remitting multiple sclerosis: a multicentre, randomised, double-blind, placebo-controlled phase IIb study. Lancet. 2008; 371: 2085-92。
Comi G, Jeffery D, Kappos L, Montalban X, Boyko A, Rocca MA, Filippi M; ALLEGRO Study Group (2012). Placebo-controlled trial of oral laquinimod for multiple sclerosis. N Engl J Med. 2012; 366: 1000-9。
Dowie MJ, Bradshaw HB, Howard ML, Nicholson LFB, Faull RLM, Hannan AJ, Glass M. Altered CB1 receptor and endocannabinoid levels precede motor symptom onset in a transgenic mouse model of Huntington’s Disease. Neuroscience 2009; 163: 456-465。
Gurevich M, Gritzman T, Orbach R, Tuller T, Feldman A, Achiron A Laquinimod suppress antigen presentation in relapsing-remitting multiple sclerosis: in-vitro high-throughput gene expression study. J Neuroimmunol. 2010; 221: 87-94。
Koethe D, Llenos IC, Dulay JR, Hoyer C, Torrey EF, Leweke FM, Weis S. Expression of CB1 cannabinoid receptor in the anterior cingulate cortex in schizophrenia, bipolar disorder, and major depression. J Neural Transm 2007; 114: 1055-1063。
Leroy S, Griffon N, Bourdel MC, Olie JP, Poirier MF, Krebs MO. Schizophrenia and the Cannabinoid Receptor Type 1 (CB1): Association Study Using a Single-Base Polymorphism in Coding Exon 1. Am J Med Genet 2001; 105: 749-752。
Niki I, Merkler D, Sorbara C, Brinkoetter M, Kreutzfeldt M, Bareyre FM, Brück W, Bishop D, Misgeld T, Kerschensteiner M. A reversible form of axon damage in experimental autoimmune encephalomyelitis and multiple sclerosis. Nat Med. 2011; 17: 495-9。
Parmentier-Batteur S, Jin K, Mao XO, Xie L, and Greenberg DA. Increased severity of stroke in CB1 cannabinoid receptor knock-out mice. The Journal of Neuroscience 2002; 22: 9771-9775。
Rossi S, Muzio L, De Chiara V, Grasselli G, Musella A, Musumeci G, Mandolesi G, De Ceglia R, Maida S, Biffi E, Pedrocchi A, Menegon A, Bernardi G, Furlan R, Martino G, Centonze D. Impaired striatal GABA transmission in experimental autoimmune encephalomyelitis. Brain Behav Immun. 2011; 25: 947-56。
Rossi S, Bernardi G, Centonze D. The endocannabinoid system in the inflammatory and neurodegenerative processes of multiple sclerosis and of amyotrophic lateral sclerosis. Exp Neurol. 2010a; 224: 92-102。
Rossi S, De Chiara V, Furlan R, Musella A, Cavasinni F, Muzio L, Bernardi G, Martino G, Centonze D Abnormal activity of the Na/Ca exchanger enhances glutamate transmission in experimental autoimmune encephalomyelitis. Brain Behav Immun. 2010b; 24: 1379-85。
Schulze-Topphoff U, Shetty A, Varrin-Doyer M, Molnarfi N, Sagan SA, Sobel RA, Nelson PA, Zamvil SS. Laquinimod, a Quinoline-3-Carboxamide, Induces Type II Myeloid Cells That Modulate Central Nervous System Autoimmunity. PLoS One. 2012; 7: e33797。
Siffrin V, Radbruch H, Glumm R, Niesner R, Paterka M, Herz J, Leuenberger T, Lehmann SM, Luenstedt S, Rinnenthal JL, Laube G, Luche H, Lehnardt S, Fehling HJ, Griesbeck O, Zipp F. In vivo imaging of partially reversible th17 cell-induced neuronal dysfunction in the course of encephalomyelitis. Immunity. 2010; 33: 424-36。
Thöne J, Ellrichmann G, Seubert S, Peruga I, Lee DH, Conrad R, Hayardeny L, Comi G, Wiese S, Linker RA, Gold R. Modulation of Autoimmune Demyelination by Laquinimod via Induction of Brain-Derived Neurotrophic Factor. American J Pathol 2012; 180。
Trapp BD, Ransohoff R, Rudick R. Axonal pathology in multiple sclerosis: relationship to neurologic disability. Curr Opin Neurol. 1999; 12: 295-302。
Wegner C, Stadelmann C, Pförtner R, Raymond E, Feigelson S, Alon R, Timan B, Hayardeny L, Brück W. Laquinimod interferes with migratory capacity of T cells and reduces IL-17 levels, inflammatory demyelination and acute axonal damage in mice with experimental autoimmune encephalomyelitis. J Neuroimmunol. 2010; 227: 133-43。
Yang JS, Xu LY, Xiao BG, Hedlund G, Link H. Laquinimod (ABR-215062) suppresses the development of experimental autoimmune encephalomyelitis, modulates the Th1/Th2 balance and induces the Th3 cytokine TGF-beta in Lewis rats. J Neuroimmunol. 2004; 156: 3-9。

Claims (26)

  1. 一種治療患有CB1受體相關疾病之人類個體之方法，其包括以有效治療該個體之量向該個體週期性投與有效量之拉喹莫德(laquinimod)或其醫藥上可接受之鹽。
  2. 如請求項1之方法，其中該個體係人類。
  3. 如請求項1至2中任一項之方法，其中該CB1受體相關疾病係ADHD。
  4. 一種保留人類個體中之CB1受體敏感性之方法，其包括向該個體週期性投與有效量之拉喹莫德或其醫藥上可接受之鹽。
  5. 如請求項1至4中任一項之方法，其中經由經口投藥法來投與拉喹莫德。
  6. 如請求項1至5中任一項之方法，其中每天投與拉喹莫德。
  7. 如請求項1至5中任一項之方法，其中以超過每天一次之頻率投與拉喹莫德。
  8. 如請求項1至5中任一項之方法，其中以小於每天一次之頻率投與拉喹莫德。
  9. 如請求項1至8中任一項之方法，其中拉喹莫德之投藥量小於0.6mg/天。
  10. 如請求項1至8中任一項之方法，其中拉喹莫德之投藥量為0.1mg/天至40.0mg/天。
  11. 如請求項10之方法，其中拉喹莫德之投藥量為0.1mg/天至2.5mg/天。
  12. 如請求項10之方法，其中拉喹莫德之投藥量為0.25mg/天至2.0mg/天。
  13. 如請求項10之方法，其中拉喹莫德之投藥量為0.5mg/天至1.2 mg/天。
  14. 如請求項10之方法，其中拉喹莫德之投藥量為0.25mg/天。
  15. 如請求項10之方法，其中拉喹莫德之投藥量為0.3mg/天。
  16. 如請求項10之方法，其中拉喹莫德之投藥量為0.5mg/天。
  17. 如請求項10之方法，其中拉喹莫德之投藥量為0.6mg/天。
  18. 如請求項10之方法，其中拉喹莫德之投藥量為1.0mg/天。
  19. 如請求項10之方法，其中拉喹莫德之投藥量為1.2mg/天。
  20. 如請求項10之方法，其中拉喹莫德之投藥量為1.5mg/天。
  21. 如請求項10之方法，其中拉喹莫德之投藥量為2.0mg/天。
  22. 如請求項1至21中任一項之方法，其中拉喹莫德之該醫藥上可接受之鹽係拉喹莫德鈉。
  23. 一種以拉喹莫德於製造醫藥上之用途，該醫藥用於治療患有CB1受體相關疾病之個體。
  24. 一種以拉喹莫德於製造醫藥上之用途，該醫藥用於保留人類個體中之CB1受體敏感性。
  25. 一種醫藥組合物，其包含有效用於治療患有CB1受體相關疾病之人類個體之量之拉喹莫德。
  26. 一種醫藥組合物，其包含有效用於保留人類個體中之CB1受體敏感性之量之拉喹莫德。
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NZ630427A (en) 2013-03-14 2017-06-30 Teva Pharma Crystals of laquinimod sodium and improved process for the manufacture thereof
EP3082814A4 (en) * 2013-12-20 2017-06-21 Teva Pharmaceutical Industries Ltd. Use of laquinimod to delay huntington's disease progression
AU2015253330A1 (en) 2014-04-29 2016-12-01 Teva Pharmaceutical Industries Ltd. Laquinimod for the treatment of relapsing-remitting multiple sclerosis (RRMS) patients with a high disability status

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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6077851A (en) * 1998-04-27 2000-06-20 Active Biotech Ab Quinoline derivatives
TW200522944A (en) * 2003-12-23 2005-07-16 Lilly Co Eli CB1 modulator compounds
JP2008545739A (ja) * 2005-06-02 2008-12-18 グレンマーク・ファーマシューティカルズ・エスエー 新規なカンナビノイド受容体リガンド、それらを含む薬剤組成物、およびそれらの調製方法
AU2007258366B2 (en) * 2006-06-12 2012-10-25 Active Biotech, Ab Stable laquinimod preparations
US8354428B2 (en) * 2008-07-01 2013-01-15 Actavis Group Ptc Ehf Solid state forms of laquinimod and its sodium salt
MX2011005096A (es) * 2008-11-13 2011-11-18 Link Medicine Corp Derivados de azaquinolinona y usos de los mismos.
DK2467372T3 (en) * 2009-08-10 2016-08-22 Teva Pharma TREATMENT OF BDNF-RELATED DISEASES USING LAQUINIMOD

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