TW201347752A - 用於測定肝細胞腫瘤（ｈｃｃ）病患之治療有效反應之生物標記 - Google Patents

Abstract

本發明係關於定義為KRAS或NRAS基因之一或多種生物標記之用途，其用於預測待投與至肝細胞腫瘤(HCC)病患之MEK蛋白激酶抑制劑及/或索拉非尼(Sorafenib)或瑞戈非尼(Regorafenib)之醫藥功效或臨床反應。本發明進一步關於用於鑑別HCC病患中之突變型KRAS或NRAS基因之活體外方法及其套組。

Description

用於測定肝細胞腫瘤(HCC)病患之治療有效反應之生物標記

本發明係關於定義為KRAS或NRAS基因之一或多種生物標記之用途，其用於預測待投與至肝細胞腫瘤(HCC)病患之MEK蛋白激酶抑制劑及/或索拉非尼(Sorafenib)或瑞戈非尼(Regorafenib)之醫藥功效或臨床反應。本發明進一步關於用於鑑別HCC病患中之突變型KRAS或NRAS基因之活體外方法及其套組。

致癌基因(促成產生癌症之基因)一般為某些正常細胞基因(「原致癌基因」)之突變形式。致癌基因常常編碼諸如受體酪胺酸激酶、絲胺酸-蘇胺酸激酶或下游信號傳導分子之信號路徑組分之異常形式。主要的下游信號傳導分子為Ras蛋白，其經錨定於細胞質膜內表面上，且將結合三磷酸鳥苷(GTP)水解成二磷酸鳥苷(GDP)。當生長因子受體經生長因子活化時，其引發反應鏈，這引起Ras上之鳥嘌呤核苷酸交換活動之活化。Ras在具有結合GTP之活性「開啟」狀態(下文「Ras.GTP」與具有結合GDP之非活性「關閉」狀態之間交替。活性「開啟」狀態Ras.GTP結合並活化控制細胞生長及分化之蛋白質。

舉例而言，在「有絲分裂原活化之蛋白激酶(MAP激酶)級聯」中，Ras.GTP引起絲胺酸/蘇胺酸激酶之級聯活化。已知需要Ras.GTP 用於自身活化之若干激酶組之一為Raf家族。Raf蛋白活化「MEK1」及「MEK2」，「MEK1」及「MEK2」為有絲分裂原活化之活化ERK之激酶的縮寫(其中ERK為細胞外信號調控蛋白激酶，MAPK之另一名稱)。MEK1及MEK2為雙功能絲胺酸/蘇胺酸及酪胺酸蛋白激酶且亦稱為MAP激酶之激酶。因此，Ras.GTP活化Raf，Raf活化MEK1及MEK2，MEK1及MEK2活化MAP激酶(MAPK)。藉由有絲分裂原活化MAP激酶似乎為增殖所必需，且此激酶之組成性活化足以誘導細胞轉化。如藉由使用顯性負性Raf-1蛋白阻斷下游Ras信號傳導可完全抑制致有絲分裂，無論是自細胞表面受體抑或自致癌性Ras突變體誘導之致有絲分裂。

Raf與Ras之相互作用為控制細胞增殖之關鍵調控步驟。迄今為止，尚未鑑別除MAPK以外之MEK受質；然而，最近報導表明，MEK亦可藉由諸如MEK激酶或MEKK1及PKC之其他上游信號蛋白活化。活化MAPK在細胞核中易位且積聚，其中其可使諸如EIk-1及Sapla之轉錄因子磷酸化及活化，促使諸如用於c-fos之基因表現增強。

在MEK1之情況下，當活化時，Raf及其他激酶使兩個相鄰絲胺酸殘基S218及S222上之MEK磷酸化。此等磷酸化為活化MEK為激酶所需。MEK又使藉由單個胺基酸間隔開之兩個殘基酪胺酸Y185及蘇胺酸T183上之MAP激酶磷酸化。MEK在使MAP激酶磷酸化之前似乎與其強烈締合，表明用MEK使MAP激酶磷酸化可需要兩種蛋白質之間預先強烈的相互作用。MEK之不尋常的特異性及其在磷酸化之前需要與MAP激酶強烈相互作用這兩個因素表明，關於慮及MEK之選擇性抑制劑，MEK之作用機制可充分不同於其他蛋白激酶之機制。該等抑制劑也許將經由異位機制而非經由涉及阻斷ATP結合位點之較常見機制來操作。

因此，MEK1、MEK2及Raf為用於抗增殖性之已證實且接受之標靶。

RAS基因與人類腫瘤有關。致癌突變體RAS蛋白對藉由GAP介導之結合GPT之水解的下調具有抵抗性。RAS子族包括至少21名成員，如HRAS、KRAS、NRAS、RRAS。RAS基因突變對致癌起直接作用(Amy Young等人，Advances in Cancer Research,2009)。鑑別且定量了若干腫瘤中之大量RAS蛋白突變(Yuliya Pylayeva-Gupta等人，Nature Review-Cancers，第11卷，2011年11月，第761頁及Antoine E.Karmoud等人，Nature Review-Cancers，第9卷，2008年7月，第517頁)。

MEK蛋白激酶抑制劑：

已報導MEK之1-取代-2(對位取代苯胺基)-芳基抑制劑之若干實例。美國專利第6,440,966號及第6,750,217號及相應公開案WO 00/42003描述經磺醯胺取代之2(4-碘苯胺基)-苯甲酸酯及N上經取代之苯甲醯胺之羧酸酯及異羥肟酸酯及N上經取代之醯胺衍生物充當MEK抑制劑。該磺醯胺亦可在N上經取代。

美國專利6,545,030及相應公開案WO 00/42029描述MEK抑制劑1-雜環基-2(4-碘苯胺基)-苯，其中該雜環為五員含氮環，諸如吡唑、三唑、噁唑、異噁唑及異噁唑啉酮。較近之美國專利公開案2005/004186描述'030專利之4-碘基取代基經非常廣泛種類之部分置換的相關化合物，該等部分包括烷基、烷氧基、醯氧基、烯基、胺甲醯基、胺甲醯基烷基、羧基、羧基烷基、N-醯基磺醯胺基及其他部分。

美國專利6,469,004及相應公開案WO 00/42022描述一組雜環基縮合伸苯基化合物(亦即苯并咪唑、苯并噁唑、苯并噻唑、苯并噻二唑、喹唑啉等)之羧酸酯及異羥肟酸酯。該等雜環為7-F-6-(4-碘基-苯胺基)-5-羧酸酯、羧酸醯胺或異羥肟酸酯。較近之公開案U.S. 2005/0026970描述4-碘基取代基經非常廣泛種類之結構置換的類似化合物。相關化合物描述於專利公開案WO 03/077855、WO 03/77914及US 2005/0554701中。據報導適用作MEK抑制劑之2-(4-碘苯胺基)-苯基異羥肟酸酯之其他實例可見於WO 2005/028426中。

專利公開案WO 02/06213及相應美國申請案第10/333,399號(U.S.2004/0054172)描述1-草醯胺酸-2(4-鹵基苯胺基)-3,4-二氟苯之羥基經取代酸酯。美國專利第6,891,066號及相應公開案WO 03/62191描述4-鹵基取代基經非常廣泛種類之結構置換之類似化合物。4位之取代基包括甲基、乙基、乙炔基及2-羥乙基。特定的相關化合物描述於美國專利第6,770,778號中。

2004年9月30日(於日本)公開之專利公開案WO 04/083167揭示兩千多種(但僅400種提供NMR資料)1-(N上經取代之磺醯基脲)-2(2,4-二鹵基苯胺基)-3,4-二氟苯且聲明其可用作MEK抑制劑。僅十二種之子組呈現表明抑制MEK之資料。除二級或三級胺之外，此十二種化合物亦皆包含以下群組中之一者：N,N-二取代之磺醯基脲、N-哌嗪磺醯胺、N-哌啶磺醯胺或N-吡咯啶磺醯胺。

近來，N-(2-芳胺基)芳基磺醯胺在WO 2007/014011 A2中經描述為適合之MEK抑制劑。彼等N-(2-芳胺基)芳基磺醯胺為新型有絲分裂原活化之細胞外信號調控激酶(ERK)激酶(MEK)抑制劑，其已顯示作為單一藥劑之廣泛抗腫瘤活性及協同活性。

索拉非尼：

索拉非尼(Nexavar^®；Bayer AG,Leverkusen,Germany)為一種口服多重激酶抑制劑，其能夠抑制涉及血管生成及淋巴管生成之若干酪胺酸激酶受體，包括血管內皮生長因子受體(VEGFR)-1、VEGFR-2、VEGFR-3、血小板衍生生長因子受體(PDGFR)、Flt-3、c-Kit及RET(Wilhelm等人，2006；Wilhelm等人，2004)。另外，索拉非尼抑制 Ras/Raf/有絲分裂原活化之蛋白質(MAP)/細胞外信號調控激酶(ERK)激酶(MEK)[或有絲分裂原活化之蛋白激酶(MAPK)]路徑，其已涉及到多種實體腫瘤及白血病細胞株中之細胞增殖、分化及存活(Sebolt-Leopold及Herrera 2004；Roberts及Der 2007；Wilhelm等人，2004；Yu等人，2005)。索拉非尼之細胞死亡促進作用在細胞株之間可能有所不同，且其似乎涉及僅已部分闡明之細胞生長抑制機制及細胞毒性機制。在淋巴瘤細胞中，索拉非尼暴露使已涉及細胞存活之Bcl-2家族成員抗細胞凋亡蛋白骨髓細胞白血病-1(Mcl-1)下調。Mcl-1在若干淋巴瘤中過度表現且可賦予針對由大部分細胞毒性藥物施加之細胞凋亡刺激的抗性(Rahmani等人，2007；Cory等人，2003；Cho-Vega等人，2004；Yu等人，2005)。另外，索拉非尼誘導之ERK路徑抑制作用可導致Bcl-X_L下調，從而模擬利妥昔單抗(rituximab)介導之對CD20陽性NHL細胞株的作用(Jazirehi等人，2004)。近來，發現索拉非尼對肺癌有效(Edward S.Kim等人，American Association for Cancer Research,Cancer Discovery,2011；1(1)OF43)。

瑞戈非尼：

瑞戈非尼(US20050038080及WO2005009961)為一種口服多激酶抑制劑，其以血管生成、基質及致癌受體酪胺酸激酶(RTK)為標靶。瑞戈非尼由於其雙重靶向VEGFR2-TIE2酪胺酸激酶的抑制作用而顯示抗血管生成活性。其目前正在研究作為多種腫瘤類型之潛在治療選擇。

瑞戈非尼已顯示提高具有轉移性結腸直腸癌之病患的整體存活。

肝細胞腫瘤(HCC)在常見贅瘤中排名第六且在癌症相關死亡病因中排名第三。75%以上的病例發生在亞洲-太平洋地區，很大程度上與慢性B型肝炎病毒(HBV)感染有關。僅在中國就存在50%以上的 HCC病例，且據估計每年有360000名居住在東亞國家(包括中國、日本、韓國及臺灣)之病患死於此疾病。

具有HCC之病患的預後依然不容樂觀。HCC病患的整體5年存活率僅為9%，其僅略佳於30年前所診斷之彼等HCC病患所記錄的4%。甚至對於具有限於肝臟之HCC的彼等病患，5年存活率僅為19%，且對於具有局部擴散之彼等病患其下降至7%且對於具有遠端疾病之彼等病患其下降至3.4%。

儘管癌症治療存在上述進展，但癌症治療之主要挑戰為基於遺傳標記(亦即生物標記)為病患選擇特定治療方案，以便使治療結果達到最佳。

換言之，其將有助於知曉何種病患能夠對由向肝細胞腫瘤(HCC)病患投與MEK蛋白激酶抑制劑及/或索拉非尼或瑞戈非尼所組成之預期治療起陽性反應，其中MEK抑制劑為N-(2-芳胺基)芳基磺醯胺。

實際上，出人意料地發現，使用特定生物標記(亦即RAS基因)適於選擇關於投與MEK蛋白激酶抑制劑及/或索拉非尼或瑞戈非尼作出陽性反應的肝細胞腫瘤(HCC)病患。

因此，需要使用RAS基因作為適於提供關於病患之反應的預測資訊之生物標記的診斷測試、方法及工具。

在第一態樣中，本發明係關於定義為突變RAS之一或多種生物標記用於預測待投與至HCC病患之包含MEK蛋白激酶抑制劑及索拉非尼或瑞戈非尼之組合的醫藥功效或臨床反應的用途。

在第二態樣中，本發明係關於定義為突變RAS之一或多種生物標記用於預測待投與至HCC病患之至少一種MEK蛋白激酶抑制劑之醫藥功效或臨床反應的用途。

在第三態樣中，本發明係關於定義為突變RAS之一或多種生物標 記用於預測待投與至HCC病患之索拉非尼或瑞戈非尼之醫藥功效或臨床反應的用途。

在第四態樣中，本發明係關於一種活體外方法，其包含以下步驟：- 鑑別自HCC病患獲得之測試樣本中之突變型RAS基因及/或蛋白質，其特徵在於該方法係用於預測待投與至HCC病患之包含MEK蛋白激酶抑制劑及/或索拉非尼或瑞戈非尼之組合的醫藥功效或臨床反應。

在第五態樣中，本發明係關於套組。

在第六態樣中，本發明係關於如本文所定義之式A化合物用於製備供治療具有突變KRAS、NRAS或HRAS基因之病患中之肝細胞腫瘤用之藥劑的用途。

以引用之方式併入

本說明書中所提及之所有公開案及專利申請案皆以引用的方式併入本文中，其引用程度如同各個別公開案或專利申請案經特定且單獨指示以引用的方式併入一般。

出人意料地發現，突變RAS生物標記之存在與投與至HCC病患之MEK蛋白激酶抑制劑及/或索拉非尼或瑞戈非尼的治療功效相關。

在第一態樣中，本發明係關於定義為突變RAS之一或多種生物標記用於預測待投與至HCC病患之包含MEK蛋白激酶抑制劑及索拉非尼或瑞戈非尼之組合的醫藥功效或臨床反應的用途。

在一個實施例中，該用途係關於定義為RAS之一種或兩種生物標 記。較佳地，該用途係關於定義為RAS之一種生物標記。

在一個實施例中，RAS係指其基因或蛋白質，其中該RAS基因或RAS蛋白係選自KRAS、NRAS或HRAS。較佳地，RAS為KRAS或NRAS。更佳地，RAS為KRAS。

較佳地，該用途係關於KRAS、NRAS或HRAS基因。更佳地，該用途係關於KRAS或NRAS基因。

RAS蛋白為對應於一個RAS基因轉導之蛋白質。

在一個實施例中，該用途係關於定義為突變KRAS或NRAS基因或其蛋白質之一種生物標記用於預測待投與至HCC病患之MEK蛋白激酶抑制劑及索拉非尼或瑞戈非尼之組合的醫藥功效或臨床反應。

在一個實施例中，該用途係關於MEK蛋白激酶抑制劑及索拉非尼或瑞戈非尼之組合。

突變KRAS、NRAS及HRAS基因或蛋白質在腫瘤文獻中為熟知的(Yuliya Pylayeva-Gupta等人，Nature Review-Cancers，第11卷，2011年11月，第761頁；及Antoine E.Karmoud等人.Nature Review-Cancers,第9卷，2008年7月，第517頁)。

突變KRAS及NRAS基因較佳如表1中所定義。

預測醫藥功效或臨床反應意謂對治療作出陽性反應(腫瘤減少或使腫瘤生長穩定)之HCC病患可與未對治療作出反應之HCC病患進行區分。

HCC病患意謂罹患肝細胞腫瘤之病患。

在一個實施例中，MEK蛋白激酶抑制劑係選自以下之組：CI-1040(PD184352)、GSK1120212、PD-0325901、PD-98059、PD-184161、PD-0318088、PD-184386、PD-171984、PD-170611、PD-177168、PD-184352、ARRY-438162、AZD6244/ARRY-886、AZD8330、XL518、UO125、UO126、SL 327、槲皮素(quercetin)或其醫藥學上可接受之鹽、溶劑合物、多晶型物、酯及互變異構體。

在其他實施例中，MEK蛋白激酶抑制劑為式A化合物或其醫藥學上可接受之鹽、溶劑合物、多晶型物、酯、醯胺、互變異構體或前藥：

其中G為G₁、G₂、R_1a、R_1b、R_1c、R_1d、R_1e、Ar₁、Ar₂或Ar₃；R_a0、R₁及R₂獨立地選自H、鹵素、氰基、氰甲基、硝基、二氟甲氧基、三氟甲基、疊氮基、胺基、烷胺基、二烷胺基、CO₂R₅、OR₅、-O-(CO)-R₅、-O-C(O)-N(R₅)₂、-NR₅C(O)NR₆R₇、-SR₅、NHC(O)R₅、-NHSO₂R₅、SO₂N(R₅)₂、C1-C6烷基、C1-C4烷氧基、C3-C6環烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、芳基、烷基芳基、芳基烷基及雜環基； 各R₅係選自H、低碳烷基、經取代之低碳烷基、芳基或經取代之芳基及NR₇R₆；其中各R₆及R₇獨立地選自氫或低碳烷基；其中該等烷基、環烷基、烯基、芳基、烷基芳基、芳基烷基、雜環基及炔基視情況經1-3個獨立地選自以下之取代基取代：鹵素、OH、CN、氰甲基、硝基、苯基、二氟甲氧基及三氟甲基；該等C1-C6烷基及C1-C4烷氧基視情況經OCH₃或OCH₂CH₃取代；R_a1為H、C₁-C₆烷基、C₃-C₆環烷基、C₂-C₆烯基、C₅-C₆環烯基或C₂-C₆炔基；其中各烷基、環烷基、烯基、環烯基或炔基視情況經1-3個獨立地選自以下之取代基取代：鹵素、羥基、C₁-C₄烷基、C₁-C₄烷氧基、氰基、氰甲基、硝基、疊氮基、三氟甲基、二氟甲氧基及苯基，及該等C₃-C₆環烷基之一個或兩個環碳原子視情況獨立地經O、N或S置換；或R_a1為5或6原子雜環基團，該基團可為含有1-5個獨立地選自O、N及S之雜原子之飽和、不飽和或芳族基團，該雜環基團視情況經1-3個獨立地選自以下之取代基取代：鹵素、羥基、C₁-C₄烷基、C₁-C₄烷氧基、氰基、氰甲基、硝基、疊氮基、三氟甲基、二氟甲氧基及苯基；R_a2為H、鹵素、F或側氧基；或R_a1及R_a2結合在一起為-Q(R₂)-U(R₁)=D-；R_a3為H、鹵素、羥基、疊氮基、氰基、氰甲基、C₁-C₆烷基、C₃-C₆環烷基、C₂-C₆烯基、C₅-C₆環烯基或C₂-C₆炔基，其中各烷基、環烷基、烯基、環烯基或炔基視情況經1-3個獨立地選自以下之取代基取代：鹵素、羥基、C₁-C₄烷氧基、氰基、氰甲基、硝基、疊氮基、三氟甲基及苯基； 為單鍵或雙鍵；X及Y獨立地選自F、I、Br、Cl、CF₃、C1-C3烷基、C2-C3烯基、C2-C3炔基、環丙基、苯基、吡啶基、吡唑基、OMe、OEt或SMe或Het，其中Het為5至10員單環或雙環雜環基團，該基團為含有1-5個獨立地選自N、O及S之環雜原子之飽和、烯系或芳族基團；其中所有該等苯基或Het基團視情況經以下取代：F、Cl、Br、I、乙醯基、甲基、CN、NO₂、CO₂H、C₁-C₃烷基、C₁-C₃烷氧基、C₁-C₃烷基-C(=O)-、C₁-C₃烷基-C(=S)-、C₁-C₃烷氧基-C(=S)-、C₁-C₃烷基-C(=O)O-、C₁-C₃烷基-O-(C=O)-、C₁-C₃烷基-C(=O)NH-、C₁-C₃烷基-C(=NH)NH-、C₁-C₃烷基-NH-(C=O)-、二-C₁-C₃烷基-N-(C=O)-、C₁-C₃烷基-C(=O)N(C₁-C₃烷基)-、C₁-C₃烷基-S(=O)₂NH-或三氟甲基；X及Y之所有該等甲基、乙基、C1-C3烷基及環丙基視情況經OH取代；Y之所有該等苯基、吡啶基、吡唑基視情況經鹵素、乙醯基、甲基及三氟甲基取代；及X及Y之所有該等甲基視情況經一個、兩個或三個F原子取代；A、D、J、L、Q、U獨立地選自C、CH、-NH、N、O及-N(CH₃)-；G₁為視情況經一個胺基、C₁-C₃烷胺基或二烷胺基取代之C₁-C₆烷基，該二烷胺基包含可相同或不相同之兩個C₁-C₄烷基；或G₁為C₃-C₈二胺基烷基；G₂為含有1-3個獨立地選自N、O及S之環雜原子的視情況經1-3個獨立地選自以下之取代基取代的飽和、不飽和或芳族5或6員環：F、Cl、OH、O(C₁-C₃烷基)、OCH₃、OCH₂CH₃、CH₃C(=O)NH、CH₃C(=O)O、CN、CF₃；及含有1-4個獨立地選自N、O及S之環雜原子之5員芳族雜環基團；R_1a為甲基、環丙氧基或C1-C4烷氧基；其中 該甲基視情況經OH、1-3個氟原子或1-3個氯原子取代；該C1-C4烷氧基之C1-C4烷基部分視情況經一個羥基或甲氧基取代；及該C1-C4烷氧基內之所有C2-C4烷基視情況進一步經第二個OH基團取代；R_1b為CH(CH₃)-C1-3烷基或C3-C6環烷基，該等CH₃、烷基及環烷基視情況經1-3個獨立地選自以下之取代基取代：F、Cl、Br、I、OH、C1-C4烷氧基及CN；R_1c為(CH₂)_nO_mR'，其中m為0或1；n為0、1、2或3；R'為C1-C6烷基，視情況經1-3個獨立地選自以下之取代基取代：F、Cl、OH、OCH₃、OCH₂CH₃及C3-C6環烷基；R_1d為C(A')(A")(B)-，其中B、A'及A"獨立地為H、經取代或未經取代之C1-6烷基、經取代或未經取代之C2-6烯基，或A'及A"與其所連接之碳原子一起形成經取代或未經取代之3至6員飽和環；R_1e為苯甲基或2-苯基乙基，其中該苯基為視情況經取代之 ，其中q為1或2；R₈及R₉獨立地為H、F、Cl、Br、CH₃、CH₂F、CHF₂、CF₃、OCH₃、OCH₂F、OCHF₂、OCF₃、乙基、正丙基、異丙基、環丙基、異丁基、第二丁基、第三丁基及甲基磺醯基；R₁₀為H、F、Cl、Br、CH₃、CH₂F、CHF₂、CF₃、OCH₃、 OCH₂F、OCHF₂、OCF₃、乙基、正丙基、異丙基、環丙基、異丁基、第二丁基、第三丁基及甲基磺醯基、硝基、乙醯胺基、脒基、氰基、胺甲醯基、甲基胺甲醯基、二甲基胺甲醯基、1,3,4-噁二唑-2-基、5-甲基-1,3,4-噁二唑基、1,3,4-噻二唑基、5-甲基-1,3,4-噻二唑-1H-四唑基、N-嗎啉基羰胺基、N-嗎啉基磺醯基或N-吡咯啶基羰胺基；R₁₁及R₁₂獨立地為H、F、Cl或甲基；Ar₁為 ，其中W及V獨立地為N、CR₈或CR₉；R₈、R₉及R₁₀獨立地為H、F、Cl、Br、CH₃、CH₂F、CHF₂、CF₃、OCH₃、OCH₂F、OCHF₂、OCF₃、乙基、正丙基、異丙基、環丙基、異丁基、第二丁基、第三丁基及甲基磺醯基、硝基、乙醯胺基、脒基、氰基、胺甲醯基、甲基胺甲醯基、二甲基胺甲醯基、1,3,4-噁二唑-2-基、5-甲基-1,3,4-噁二唑、1,3,4-噻二唑、5-甲基-1,3,4-噻二唑、1H-四唑基、N-嗎啉基羰胺基、N-嗎啉基磺醯基及N-吡咯啶基羰胺基；R₁₁及R₁₂獨立地為H、F、Cl或甲基；Ar₂為 ，其中虛線表示可形式上定位在V與介於W與V之間的碳之間或在W與介於W與V之間的碳之間的雙鍵；W為-S-、-O-或-N=，其中當W為-O-或-S-時，V為-CH=、-CCl=或-N=；及當W為-N=時，V為CH、CCl、N或-NCH₃-；R₁₃及R₁₄獨立地為H、甲氧羰基、甲基胺甲醯基、乙醯胺基、乙 醯基、甲基、乙基、三氟甲基或鹵素；Ar₃為 ，其中W為-NH-、-NCH₃-或-O-；及R₁₃及R₁₄獨立地為H、F、Cl或甲基。

在一個實施例中，MEK蛋白激酶抑制劑係選自由以下組成之 群：式I化合物、式II化合物及式III化合物 ，或其醫藥學上可接受之鹽、溶劑合物、多晶型物、酯、醯胺或互變異構體。

在一個實施例中，MEK蛋白激酶抑制劑為 或。

在一個實施例中，MEK蛋白激酶抑制劑為 或，其中2-OH碳呈R組態。

在一個實施例中，MEK蛋白激酶抑制劑為 或，其中2-OH碳呈S組態。

在一個實施例中，MEK蛋白激酶抑制劑為

在一個實施例中，MEK蛋白激酶抑制劑為

索拉非尼具有化學名稱4-[4-[[4-氯-3-(三氟甲基)苯基]胺甲醯基胺基]苯氧基]-N-甲基-吡啶-2-甲醯胺及以下化學結構：

瑞戈非尼具有化學名稱4-[4-({[4-氯-3-(三氟甲基)苯基]胺甲醯基}胺基)-3-氟苯氧基]-N-甲基吡啶-2-甲醯胺及以下化學結構：

在一個實施例中，該用途係關於定義為突變KRAS或NRAS基因或其蛋白質之一種生物標記用於預測待投與至HCC病患之MEK蛋白激酶抑制劑及索拉非尼之組合的醫藥功效或臨床反應， 其中該MEK蛋白激酶抑制劑為，其中2-OH碳呈S組態。

在一個實施例中，該用途係關於定義為突變KRAS或NRAS基因或其蛋白質之一種生物標記用於預測待投與至HCC病患之MEK蛋白激 酶抑制劑及瑞戈非尼之組合的醫藥功效或臨床反應， 其中該MEK蛋白激酶抑制劑為，其中2-OH碳呈S組態。

在第二態樣中，本發明係關於定義為突變RAS之一或多種生物標記用於預測待投與至HCC病患之至少一種MEK蛋白激酶抑制劑之醫藥功效或臨床反應的用途。

在一個實施例中，該用途係關於定義為突變KRAS或NRAS基因或其蛋白質之一種生物標記用於預測待投與至HCC病患之一種MEK蛋白激酶抑制劑之醫藥功效或臨床反應。

較佳地，該MEK蛋白激酶抑制劑為，其中2-OH碳呈S組態。

第一態樣之實施例包括在此。

在第三態樣中，本發明係關於定義為突變RAS之一或多種生物標記用於預測待投與至HCC病患之索拉非尼或瑞戈非尼之醫藥功效或臨床反應的用途。

較佳地，該用途係關於索拉非尼。

第一態樣之實施例包括在此。

在第四態樣中，本發明係關於一種活體外方法，其包含以下步驟：- 鑑別自HCC病患獲得之測試樣本中之突變型RAS基因及/或蛋白質，其特徵在於該方法係用於預測待投與至HCC病患之包含蛋白激酶 抑制劑及/或索拉非尼或瑞戈非尼之組合的醫藥功效或臨床反應。

鑑別意謂偵測HCC病患中之突變型RAS基因或蛋白質。用於偵測突變型RAS基因或蛋白質之若干方法為已知的且在市場上可獲得，例如由Roche出售之cobas® KRAS突變測試。其他方法論述在以下公開案中：- Diehl F, Li M, He Y, Kinzler KW, Vogelstein B, Dressman D. (2006) BEAMing：single-molecule PCR on micoparticles in water-in-oil Emulsions. Nat Methods. 2006年7月；3(7)：551-9，及- Diehl F., Schmidt K., Choti M.A., Romans K., Goodman S., Li M., Thornton K., Agrawal N., Sokoll L., Szabo S.A., Kinzler K.W., Vogelstein B., Diaz L.A. Jr. (2008) Circulating mutant DNA to assess tumor dynamics. Nature Medicine 14, 985-90。

在一個實施例中，測試樣本意謂HCC病患之血液樣本或組織樣本。較佳地，測試樣本意謂HCC病患之血液樣本。

在一個實施例中，活體外方法另外包含突變RAS與野生型RAS參考物之比較步驟。

在一個實施例中，活體外方法包含以下步驟：- 鑑別自HCC病患獲得之測試樣本中之突變型RAS基因及/或蛋白質，其特徵在於該方法係用於預測待投與至HCC病患之MEK蛋白激酶抑制劑及索拉非尼之醫藥功效或臨床反應， 其中該MEK蛋白激酶抑制劑為，其中2-OH碳呈S組態。

較佳地，RAS係指其基因或蛋白質，其中該RAS基因或蛋白質係 選自KRAS、NRAS或HRAS。較佳地，RAS為KRAS或NRAS。更佳地，RAS為KRAS。

在一個實施例中，活體外方法包含以下步驟：- 鑑別自HCC病患獲得之測試樣本中之突變型RAS基因及/或蛋白質，其特徵在於該方法係用於預測待投與至HCC病患之MEK蛋白激酶抑制劑及瑞戈非尼之醫藥功效或臨床反應， 其中該MEK蛋白激酶抑制劑為，其中2-OH碳呈S組態。

較佳地，RAS係指其基因或蛋白質，其中該RAS基因或蛋白質係選自KRAS、NRAS或HRAS。較佳地，RAS為KRAS或NRAS。更佳地，RAS為KRAS。

第一態樣之實施例包括在此。

在第五態樣中，本發明係關於一種包含用於偵測突變型RAS基因或蛋白質之適合構件的套組，其用於鑑別定義為突變型RAS之生物標記，其特徵在於該套組係用於預測待投與至HCC病患之包含MEK蛋白激酶抑制劑及索拉非尼或瑞戈非尼之組合的醫藥功效或臨床反應。

第一態樣之實施例包括在此。

在第六態樣中，本發明係關於如本文所定義之式A化合物用於製備供治療具有突變KRAS、NRAS或HRAS基因之病患中之肝細胞腫瘤用之藥劑的用途。

本文所用之章節標題僅出於組織目的且不應解釋為限制所述標的物。本申請案中所引用之所有文獻或文獻部分(包括(但不限於)專 利、專利申請案、文章、書籍、手冊及論文)係出於任何目的以全文引用的方式明確地併入本文中。

某些化學術語

除非另外定義，否則本文所用之所有技術及科學術語具有與熟習所主張標的物所屬領域之技術者通常所瞭解相同的含義。除非另外指出，否則在此整個本發明中所提及之所有專利、專利申請案、公開材料係以全文引用的方式併入。在關於本文術語存在複數種定義之情況下，以此章節中之彼等定義為準。當參考URL或其他此類識別符或位址時，應瞭解，此類識別符可變化且網際網路上之特定資訊可變來變去，但可藉由搜索網際網路或其他適當參考源來尋找等效資訊。對其之參考證實此類資訊之可獲得性及公眾傳播。

應瞭解，以上一般描述及以下詳細描述僅具例示性及說明性且不限制所主張之任何標的物。在本申請案中，除非另外明確陳述，否則使用單數包括複數。必須注意，除非上下文另外明確地指示，否則如本說明書及隨附申請專利範圍中所用之單數形式「一」及「該」包括複數個指示物。亦應注意，除非另外陳述，否則「或」之使用意謂「及/或」。此外，術語「包括(including)」以及其他形式(諸如「包括(include)」、「包括(includes)」及「包括(included)」)之使用不具限制性。

標準化學術語之定義可見於參考著作中，包括Carey及Sundberg之「Advanced Organic Chemistry第4版」第A卷(2000)及第B卷(2001),Plenum Press,New York。除非另外指明，否則採用在此項技術技能範圍內之習知方法：質譜、NMR、HPLC、IR及紫外/可見光譜法及藥理學。除非提供特定定義，否則本文所述之聯合分析化學、合成有機化學及醫藥化學所採用之命名法及其實驗室程序與技術為此項技術中已知之彼等命名法及實驗室程序與技術。標準技術可用於化學合成、化 學分析、醫藥製備、調配及傳遞以及治療病患。反應及純化技術可例如使用製造商之說明書或如此項技術中通常所實現或如本文所述之套組來進行。以上技術及程序一般可藉由此項技術中熟知之習知方法及如本發明說明書通篇中所引用且論述之各個一般性及較特定之參考文獻中所述來進行。本說明書通篇中，基團及其取代基可經熟習此項技術者選擇以提供穩定部分及化合物。

當取代基由其自左至右書寫之習知化學式指定時，其同樣涵蓋將由自右至左書寫結構所產生之化學上相同之取代基。作為非限制性實例，-CH₂O-等效於-OCH₂-。

除非另外指出，否則一般性化學術語(諸如(但不限於)「烷基」、「胺」、「芳基」)之使用等效於其視情況經取代之形式。舉例而言，如本文所用之「烷基」包括視情況經取代之烷基。

本文所呈現之化合物可具有一或多個立構中心且各中心可以R或S組態或其組合形式存在。類似地，本文所呈現之化合物可具有一或多個雙鍵且各自可以E(反式)或Z(順式)組態或其組合形式存在。一個特定立體異構體、區位異構體、非對映異構體、對映異構體或差向異構體之陳述應理解為包括所有可能之立體異構體、區位異構體、非對映異構體、對映異構體或差向異構體及其混合物。因此，本文所呈現之化合物包括所有各別組態之立體異構、區位異構、非對映異構、對映異構及差向異構形式以及其相應混合物。含有一或多個對掌性中心但並未標明特定立體化學之化合物之一個特定化學結構或化學名稱的陳述應理解為包括所有可能之立體異構體，包括所有可能之立體異構體、一個特定立體異構體之純形式或實質上純形式及替代性立體異構體之純形式或實質上純形式的混合物。用於使特定立構中心倒轉或保持不變之技術及用於解析立體異構體混合物之彼等技術在此項技術中為熟知的且針對特定情況選擇適當方法完全在熟習此項技術者之能 力範圍內。參見例如Furniss等人(編),VOGEL'S ENCYCLOPEDIA OF PRACTICAL ORGANIC CHEMISTRY第5增補版，Longman Scientific and Technical Ltd.,Essex,1991,809-816；及Heller,Acc.Chem.Res.1990,23,128。

如本文所用之術語「部分」、「化學部分」、「基團」及「化學基團」係指分子之特定區段或官能基。化學部分通常為嵌入分子中或附接於分子上的已知化學實體。

術語「鍵」或「單鍵」係指當藉由鍵接合之原子視為較大子結構之一部分時，兩個原子或兩個部分之間的化學鍵。

術語「視情況」或「視情況地」意謂隨後描述之事件或情形可能發生或可能不發生，且本說明書包括該事件或情形發生之情況及不發生之情況。舉例而言，如下文所定義之「視情況經取代之烷基」意謂「烷基」或「經取代之烷基」。另外，視情況經取代之基團可為未經取代(例如-CH2CH3)、完全取代(例如-CF2CF3)、單取代(例如-CH2CH2F)或以介於完全取代與單取代之間之程度取代(例如-CH2CHF2、-CH2CF3、-CF2CH3、-CFHCHF2等)。關於含有一或多個取代基之任何基團，熟習此項技術者應瞭解，此類基團並不意欲引入空間上不切實際及/或合成上不可行之任何取代或取代型式(例如經取代之烷基包括視情況經取代之環烷基，視情況經取代之環烷基又定義為包括視情況經取代之烷基，可能為無窮的)。因此，所述任何取代基一般應理解為具有約1,000道爾頓之最大分子量，且更典型地，至多約500道爾頓(除了在明確需要大分子取代基之彼等情況下，該等大分子取代基例如多肽、多醣、聚乙二醇、DNA、RNA及其類似物)。

除非另外指出，否則一般性化學術語(諸如(但不限於)「烷基」、「胺」、「芳基」)之使用為未經取代的。

如本文所用，C1-Cx包括C1-C2、C1-C3……C1-Cx。僅舉例而 言，指示為「C1-C4」之基團表示在該部分中存在一個至四個碳原子，亦即含有1個碳原子、2個碳原子、3個碳原子或4個碳原子之基團，範圍C1-C2及C1-C3同樣如此。因此，僅舉例而言，「C1-C4烷基」表示在該烷基中存在一個至四個碳原子，亦即該烷基係選自甲基、乙基、丙基、異丙基、正丁基、異丁基、第二丁基及第三丁基。諸如「1至10」之數值範圍不論何時出現在本文中時均係指該指定範圍內之各個整數；例如「1至10個碳原子」意謂該基團可具有1個碳原子、2個碳原子、3個碳原子、4個碳原子、5個碳原子、6個碳原子、7個碳原子、8個碳原子、9個碳原子或10個碳原子。

如本文所用之術語「A及A'與其所連接之碳原子一起形成3至6員飽和環」係指式I化合物之以下結構：

如本文單獨或以組合形式使用之術語「雜原子」或「雜」係指除碳或氫以外之原子。雜原子可獨立地選自氧、氮、硫、磷、矽、硒及錫，但不限於此等原子。在存在兩個或兩個以上雜原子之實施例中，該兩個或兩個以上雜原子可彼此相同，或該兩個或兩個以上雜原子中之一些或所有可各自不同於其他。

如本文單獨或以組合形式使用之術語「烷基」係指具有一個至約十個碳原子或一個至六個碳原子之直鏈或分支鏈飽和烴單基。實例包括(但不限於)甲基、乙基、正丙基、異丙基、2-甲基-1-丙基、2-甲基-2-丙基、2-甲基-1-丁基、3-甲基-1-丁基、2-甲基-3-丁基、2,2-二甲基-1-丙基、2-甲基-1-戊基、3-甲基-1-戊基、4-甲基-1-戊基、2-甲基-2-戊基、3-甲基-2-戊基、4-甲基-2-戊基、2,2-二甲基-1-丁基、3,3-二甲基-1-丁基、2-乙基-1-丁基、正丁基、異丁基、第二丁基、第三丁基、正戊基、異戊基、新戊基、第三戊基及己基及較長烷基，諸如庚 基、辛基及其類似基團。諸如「C1-C6烷基」或「C1-6烷基」之數值範圍不論何時出現在本文中時均意謂該烷基可由1個碳原子、2個碳原子、3個碳原子、4個碳原子、5個碳原子或6個碳原子組成。在一個實施例中，「烷基」為經取代的。除非另有指示，否則「烷基」為未經取代的。

如本文單獨或以組合形式使用之術語「烯基」係指具有一或多個碳碳雙鍵且具有兩個至約十個碳原子或兩個至約六個碳原子之直鏈或分支鏈烴單基。該基團可關於雙鍵呈順式或反式構形，且應理解為包括兩種異構體。實例包括(但不限於)乙烯基(-CH=CH2)、1-丙烯基(-CH2CH=CH2)、異丙烯基[-C(CH3)=CH2]、丁烯基、1,3-丁二烯基及其類似基團。諸如「C2-C6烯基」或「C2-6烯基」之數值範圍不論何時出現在本文中時均意謂該烯基可由2個碳原子、3個碳原子、4個碳原子、5個碳原子或6個碳原子組成。在一個實施例中，「烯基」為經取代的。除非另有指示，否則「烯基」為未經取代的。

如本文單獨或以組合形式使用之術語「炔基」係指具有一或多個碳碳參鍵且具有兩個至約十個碳原子或兩個至約六個碳原子之直鏈或分支鏈烴單基。實例包括(但不限於)乙炔基、2-丙炔基、2-丁炔基、1,3-丁二炔基及其類似基團。諸如「C2-C6炔基」或「C2-6炔基」之數值範圍不論何時出現在本文中時均意謂該炔基可由2個碳原子、3個碳原子、4個碳原子、5個碳原子或6個碳原子組成。在一個實施例中，「炔基」為經取代的。除非另有指示，否則「炔基」為未經取代的。

如本文單獨或以組合形式使用之術語「雜烷基」、「雜烯基」及「雜炔基」分別係指骨架鏈碳原子中之一或多者(及適當時任何相關氫原子)各自獨立地經雜原子(亦即除碳以外之原子，諸如(但不限於)氧、氮、硫、矽、磷、錫或其組合)或雜原子基團(諸如(但不限於)-O- O-、-S-S-、-O-S-、-S-O-、=N-N=、-N=N-、-N=N-NH-、-P(O)₂-、-O-P(O)₂-、-P(O)₂-O-、-S(O)-、-S(O)₂-、-SnH₂-及其類似基團)置換的如上所述之烷基、烯基及炔基結構。

如本文單獨或以組合形式使用之術語「鹵烷基」、「鹵烯基」及「鹵炔基」分別係指一或多個氫原子經氟、氯、溴或碘原子或其組合置換的如上文所定義之烷基、烯基及炔基。在一些實施例中，兩個或兩個以上氫原子可經彼此相同之鹵素原子置換(例如二氟甲基)；在其他實施例中，兩個或兩個以上氫原子可經並非所有皆彼此相同之鹵素原子置換(例如1-氯-1-氟-1-碘乙基)。鹵烷基之非限制性實例為氟甲基、氯甲基及溴乙基。鹵烯基之非限制性實例為溴乙烯基。鹵炔基之非限制性實例為氯乙炔基。

如本文單獨或以組合形式使用之術語「碳鏈」係指為直鏈、環狀或其任何組合之任何烷基、烯基、炔基、雜烷基、雜烯基或雜炔基。若該鏈為連接基團之一部分且彼連接基團包含一或多個環作為核心主鏈之一部分，則出於計算鏈長之目的，該「鏈」僅包括構成指定環之上部或下部且並非兩者的彼等碳原子，且其中環之上部及下部長度不相等，應使用較短距離來測定鏈長。若該鏈含有雜原子作為主鏈之一部分，則彼等原子並不計算為碳鏈長度之一部分。

如本文單獨或以組合形式使用之術語「環(cycle)」、「環狀(cyclic)」、「環(ring)」及「員環(membered ring)」係指任何共價封閉結構，包括如本文所述之脂環族、雜環、芳族、雜芳族及多環稠合或非稠合環系統。環可為視情況經取代的。環可形成稠合環系統之一部分。術語「員」意欲表示構成環之骨架原子的數目。因此，僅舉例而言，環己烷、吡啶、哌喃及嘧啶為六員環且環戊烷、吡咯、四氫呋喃及噻吩為五員環。

如本文單獨或以組合形式使用之術語「稠合」係指兩個或兩個 以上的環共用一或多個鍵之環狀結構。

如本文單獨或以組合形式使用之術語「環烷基」係指含有三個至約十五個環碳原子或三個至約十個環碳原子之飽和烴單基環，但可以取代基形式包括其他非環碳原子(例如甲基環丙基)。諸如「C3-C6環烷基」或「C3-6環烷基」之數值範圍不論何時出現在本文中時均意謂該環烷基可由3個碳原子、4個碳原子、5個碳原子或6個碳原子組成，亦即為環丙基、環丁基、環戊基或環庚基，但本發明定義亦涵蓋未指定數值範圍之術語「環烷基」之出現。該術語包括稠合、非稠合、橋接及螺基團。稠合環烷基可含有兩個至四個稠合環，其中連接環為環烷基環，且其他單獨環可為脂環族、雜環、芳族、雜芳族或其任何組合。實例包括(但不限於)環丙基、環戊基、環己基、十氫萘基及雙環[2.2.1]庚基及金剛烷基環系統。說明性實例包括(但不限於)以下部分：

及其類似基團。

在一個實施例中，「環烷基」為經取代的。除非另有指示，否則「環烷基」為未經取代的。

如本文單獨或以組合形式使用之術語「非芳族雜環基」及「雜脂環基」係指含有三個至約二十個環原子之飽和、部分不飽和或完全不飽和非芳族環單基，其中一或多個環原子為除碳以外之原子，獨立地選自氧、氮、硫、磷、矽、硒及錫，但不限於此等原子。在環中存在兩個或兩個以上雜原子之實施例中，該兩個或兩個以上雜原子可彼此相同或該兩個或兩個以上雜原子中之一些或所有可各自不同於其 他。該等術語包括稠合、非稠合、橋接及螺基團。稠合非芳族雜環基可含有兩個至四個稠合環，其中連接環為非芳族雜環，且其他單獨環可為脂環族、雜環、芳族、雜芳族或其任何組合。稠合環系統可經單鍵或雙鍵以及經碳-碳鍵、碳-雜原子鍵或雜原子-雜原子鍵稠合。該等術語亦包括具有三個至約十二個骨架環原子之基團以及彼等具有三個至約十個骨架環原子之基團。非芳族雜環子單元可經由雜原子或碳原子連接至其母體分子。類似地，其他取代可經由雜原子或碳原子。作為非限制性實例，咪唑啶非芳族雜環可經由其N原子(咪唑啶-1-基或咪唑啶-3-基)或其任何碳原子(咪唑啶-2-基、咪唑啶-4-基或咪唑啶-5-基)連接至母體分子。在某些實施例中，非芳族雜環含有一或多個羰基或硫羰基，諸如含側氧基及硫基之基團。實例包括(但不限於)吡咯啶基、四氫呋喃基、二氫呋喃基、四氫噻吩基、四氫哌喃基、二氫哌喃基、四氫硫代哌喃基、哌啶基、嗎啉基、硫代嗎啉基、硫氧雜環己烷基、哌嗪基、氮雜環丁烷基、氧雜環丁烷基、硫雜環丁烷基、高哌啶基、氧雜環庚烷基、硫雜環庚烷基、噁氮呯基、二氮呯基、噻氮呯基、1,2,3,6-四氫吡啶基、2-吡咯啉基、3-吡咯啉基、吲哚啉基、2H-哌喃基、4H-哌喃基、二噁烷基、1,3-二氧戊環基、吡唑啉基、二噻烷基、二硫雜環戊烷基、二氫哌喃基、二氫噻吩基、二氫呋喃基、吡唑啶基、咪唑啉基、咪唑啶基、3-氮雜雙環[3.1.0]己基、3-氮雜雙環[4.1.0]庚基、3H-吲哚基及喹嗪基。亦稱為非芳族雜環之雜環烷基之說明性實例包括： 及其類似基團。

該等術語亦包括碳水化合物之所有環形式，包括(但不限於)單醣、雙醣及寡醣。在一個實施例中，「非芳族雜環基」或「雜脂環基」為經取代的。除非另有指示，否則「非芳族雜環基」或「雜脂環基」為未經取代的。

如本文單獨或以組合形式使用之術語「芳基」係指六個至約二十個環碳原子之芳族烴基，且包括稠合及非稠合芳環。稠合芳環基團含有兩個至四個稠合環，其中連接環為芳環，且其他單獨環可為脂環族、雜環、芳族、雜芳族或其任何組合。另外，術語芳基包括含有六個至約十二個環碳原子之稠合及非稠合環，以及彼等含有六個至約十個環碳原子之基團。單環芳基之非限制性實例包括苯基；稠合環芳基包括萘基、菲基、蒽基、薁基；且非稠合聯芳基包括聯苯。在一個實施例中，「芳基」為經取代的。除非另有指示，否則「芳基」為未經取代的。

如本文單獨或以組合形式使用之術語「雜芳基」係指含有約五個至約二十個骨架環原子之芳族單基，其中一或多個環原子為獨立地選自氧、氮、硫、磷、矽、硒及錫但不限於此等原子之雜原子，且其限制條件為該基團之環不含有兩個相鄰O或S原子。在環中存在兩個或兩個以上雜原子之實施例中，該兩個或兩個以上雜原子可彼此相同，或該兩個或兩個以上雜原子中之一些或所有可各自不同於其他。術語雜芳基包括具有至少一個雜原子之稠合及非稠合雜芳基。術語雜 芳基亦包括具有五個至約十二個骨架環原子之稠合及非稠合雜芳基，以及彼等具有五個至約十個骨架環原子之基團。鍵結至雜芳基可經由碳原子或雜原子。因此，作為非限制性實例，咪唑基可經由其任何碳原子(咪唑-2-基、咪唑-4-基或咪唑-5-基)或其氮原子(咪唑-1-基或咪唑-3-基)連接至母體分子。類似地，雜芳基可進一步經由其任何或所有碳原子及/或其任何或所有雜原子取代。稠合雜芳基可含有兩個至四個稠合環，其中連接環為雜芳環且其他單獨環可為脂環族、雜環、芳族、雜芳族或其任何組合。單環雜芳基之非限制性實例包括吡啶基；稠合環雜芳基包括苯并咪唑基、喹啉基、吖啶基；且非稠合聯雜芳基包括聯吡啶基。雜芳基之其他實例包括(但不限於)呋喃基、噻吩基、噁唑基、吖啶基、啡嗪基、苯并咪唑基、苯并呋喃基、苯并噁唑基、苯并噻唑基、苯并噻二唑基、苯并噻吩基、苯并噁二唑基、苯并三唑基、咪唑基、吲哚基、異噁唑基、異喹啉基、吲哚嗪基、異噻唑基、異吲哚基、噁二唑基、吲唑基、吡啶基、噠嗪基、嘧啶基、吡嗪基、吡咯基、吡唑基、嘌呤基、酞嗪基、喋啶基、喹啉基、喹唑啉基、喹喏啉基、三唑基、四唑基、噻唑基、三嗪基、噻二唑基及其類似基團及其氧化物，諸如吡啶基-N-氧化物。雜芳基之說明性實例包括以下部分：

及其類似基團。

在一個實施例中，「雜芳基」為經取代的。除非另有指示，否則「雜芳基」為未經取代的。

如本文單獨或以組合形式使用之術語「雜環基」統稱為雜脂環 基及雜芳基。在本文中，只要指定雜環中之碳原子數目(例如C1-C6雜環)，則該環中必須存在至少一個非碳原子(雜原子)。諸如「C1-C6雜環」之指定僅係指該環中之碳原子數目且並不係指該環中之原子總數。諸如「4-6員雜環」之指定係指該環(亦即四、五或六員環，其中至少一個原子為碳原子，至少一個原子為雜原子且其餘兩個至四個原子為碳原子或雜原子)中所包含之原子總數。對於具有兩個或兩個以上雜原子之雜環，該兩個或兩個以上雜原子可彼此相同或不同。非芳族雜環基包括環中僅具有三個原子的基團，而芳族雜環基之環中必須具有至少五個原子。鍵結(亦即連接至母體分子或其他取代)至雜環可經由雜原子或碳原子。在一個實施例中，「雜環基」為經取代的。除非另有指示，否則「雜環基」為未經取代的。

如本文單獨或以組合形式使用之術語「鹵素」、「鹵基」或「鹵化物」係指氟、氯、溴及/或碘。

如本文單獨或以組合形式使用之術語「胺基」係指單基-NH2。

如本文單獨或以組合形式使用之術語「烷胺基」係指單基-NH(烷基)，其中烷基如本文所定義。

如本文單獨或以組合形式使用之術語「二烷胺基」係指單基-N(烷基)(烷基)，其中各烷基可為相同或不相同的且如本文所定義。

如本文單獨或以組合形式使用之術語「二胺基烷基」係指含有兩個胺基之烷基，其中該等胺基可為烷基上之取代基，其可為胺基、烷胺基或二烷胺基；或其中該等胺基中之一個或兩個可形成烷基鏈之一部分以形成-伸烷基-N(H或烷基)-伸烷基-N(H或烷基或伸烷基-)(H或烷基或伸烷基-)。

如本文單獨或以組合形式使用之術語「羥基」係指單基-OH。

如本文單獨或以組合形式使用之術語「氰基」係指單基-CN。

如本文單獨或以組合形式使用之術語「氰甲基」係指單基- CH2CN。

如本文單獨或以組合形式使用之術語「硝基」係指單基-NO2。

如本文單獨或以組合形式使用之術語「氧基」係指雙基-O-。

如本文單獨或以組合形式使用之術語「側氧基」係指雙基=O。

如本文單獨或以組合形式使用之術語「羰基」係指雙基-C(=O)-，其亦可書寫為-C(O)-。

如本文單獨或以組合形式使用之術語「羧基(carboxy)」或「羧基(carboxyl)」係指部分-C(O)OH，其亦可書寫為-COOH。

如本文單獨或以組合形式使用之術語「烷氧基」係指烷基醚基(-O-烷基)，包括基團-O-脂族基及-O-碳環基，其中該烷基、脂族基及碳環基可視情況經取代，且其中術語烷基、脂族基及碳環基如本文所定義。烷氧基之非限制性實例包括甲氧基、乙氧基、正丙氧基、異丙氧基、正丁氧基、異丁氧基、第二丁氧基、第三丁氧基及其類似基團。

如本文單獨或以組合形式使用之「亞磺醯基」係指雙基-S(=O)-。

如本文單獨或以組合形式使用之術語「磺醯基」係指雙基-S(=O)2-。

如本文單獨或以組合形式使用之術語「磺醯胺」、「磺醯胺基(sulfonamido)」及「磺醯胺基(sulfonamidyl)」係指雙基-S(=O)₂-NH-及-NH-S(=O)₂-。

如本文單獨或以組合形式使用之術語「磺醯胺」、「磺醯胺基(sulfamido)」及「磺醯胺基(sulfamidyl)」係指雙基-NH-S(=O)₂-NH-。

如本文所用之術語「反應物」係指用於產生共價鍵聯之親核試劑或親電子試劑。

應瞭解，在兩個或兩個以上基團接連用於定義連接至結構之取代基的情況下，最先命名之基團視為末端且最後命名之基團視為連接 至所論述之結構。因此，舉例而言，基團芳基烷基藉由烷基連接至所論述之結構。

某些醫藥術語

如本文所用之術語「MEK抑制劑」係指如在本文一般性描述之Mekl激酶分析中所量測，展現關於MEK活性之IC50不大於約100μM或不大於約50μM的化合物。「IC50」為使酶(例如MEK)活性降低至最大水準之一半之抑制劑濃度。如在本文所述之Mekl激酶分析中所量測，適用於某些本文所述組合及方法之化合物較佳展現關於MEK之IC50不大於約10μM，更佳不大於約5μM，甚至更佳不大於約1μM，且最佳不大於約200nM。

如本文所用之術語「Raf抑制劑」或「Raf激酶抑制劑」係指如在本文一般性描述之Raf激酶分析中所量測，展現關於Raf活性之IC50不大於約100μM或不大於約50μM的化合物。「IC50」為使酶(例如Raf)活性降低至最大水準之一半之抑制劑濃度。如在本文一般性描述之Raf激酶分析中所量測，適用於某些本文所述組合及方法之化合物較佳展現關於Raf之IC50不大於約10μM，更佳不大於約5μM，甚至更佳不大於約1μM，且最佳不大於約200nM。

如本文中關於罹患病症及其類似疾病之個體所使用之術語「個體(subject)」、「病患」或「個體(individual)」涵蓋哺乳動物及非哺乳動物。哺乳動物之實例包括(但不限於)哺乳動物綱之任何成員：人類、非人類靈長類動物，諸如黑猩猩，及其他猿及猴物種；農畜，諸如牛、馬、綿羊、山羊、豬；家畜，諸如兔、犬及貓；實驗動物，包括齧齒動物，諸如大鼠、小鼠及天竺鼠，及其類似動物。非哺乳動物之實例包括(但不限於)鳥、魚及其類似動物。在本文所提供之方法及組合物之一個實施例中，哺乳動物為人類。

在一些實施例中，顯著性可以統計方式測定，在此情況下兩個 量測參數可稱為統計顯著。在一些實施例中，就所述信賴區間(CI)而言，可定量統計顯著性，例如大於90%、大於95%、大於98%等。在一些實施例中，就p值而言，可定量統計顯著性，例如小於0.5、小於0.1、小於0.05等。熟習此項技術者將識別顯著性之此等表述且將知曉如何將其恰當地應用於待比較之特定參數。

如本文所用之術語「治療(treat)」、「治療(treating)」或「治療(treatment)」及其他語法等效術語包括減輕、緩和或改善疾病或病狀症狀，預防其他症狀，改善或預防症狀之潛在代謝病因，抑制疾病或病狀，例如阻滯疾病或病狀之發展，緩解疾病或病狀，引起疾病或病狀消退，緩解由疾病或病狀造成之病狀或終止疾病或病狀之症狀，且意欲包括預防。該等術語進一步包括達成治療效益及/或預防效益。治療效益意謂根除或改善所治療之潛在病症。又，藉由根除或改善與潛在病症相關之一或多種生理症狀以使得在病患中觀測到改善來達成治療效益，但該病患仍可罹患潛在病症。對於預防效益，組合物可投與至處於發展特定疾病之風險的病患或報導疾病之一或多種生理症狀的病患，即使此疾病尚未得到診斷。

如本文所使用之術語「有效量」、「治療有效量」或「醫藥有效量」係指所投與之至少一種藥劑或化合物之量足以治療或預防特定疾病或病狀。結果可能為疾病之徵象、症狀或病因減少及/或減輕，或生物系統之任何其他理想變化。舉例而言，用於治療用途之「有效量」為提供疾病之臨床顯著減輕所需組合物之量，該組合物包含如本文所揭示之化合物。在任何個別情況下，可使用諸如劑量遞增研究之技術來確定適當「有效」量。

如本文所用之術語「投與(administer)」、「投與(administering)」、「投與(administration)」及其類似術語係指可用於實現將化合物或組合物傳遞至所需生物作用位點的方法。此等方法包括(但不限於)經口 途徑、十二指腸內途徑、非經腸注射(包括靜脈內、皮下、腹膜內、肌肉內、血管內或輸注)、局部投藥及經直腸投藥。熟習此項技術者熟悉可供本文所述之化合物及方法使用的投藥技術，例如以下文獻中所論述：Goodman及Gilman,The Pharmacological Basis of Therapeutics，現行版；Pergamon；及Remington,Pharmaceutical Sciences(現行版),Mack Publishing Co.,Easton,Pa。在較佳實施例中，本文所述之化合物及組合物係經口投與。

如本文所用之關於調配物、組合物或成分之術語「可接受」意謂對所治療之個體的整體健康不具有持續性有害作用。

如本文所用之術語「醫藥學上可接受」係指不會消除本文所述化合物之生物活性或性質且相對無毒之物質(諸如載劑或稀釋劑)，亦即，可向個體投與該物質而不會造成不良生物效應或與組合物中所含之任何組分以有害方式相互作用。

如本文所用之術語「醫藥組合物」係指生物活性化合物，其視情況與至少一種醫藥學上可接受之化學組分混合，該等化學組分諸如(但不限於)載劑、穩定劑、稀釋劑、分散劑、懸浮劑、增稠劑及/或賦形劑。

如本文所用之術語「載劑」係指有助於將化合物併入細胞或組織中之相對無毒化合物或試劑。

如本文所用之術語「促效劑」係指增強另一分子之活性或受體位點之活性的分子，諸如化合物、藥物、酶活化劑或激素調節劑。

如本文所用之術語「拮抗劑」係指減損或預防另一分子之作用或受體位點之活性的分子，諸如化合物、藥物、酶抑制劑或激素調節劑。

如本文所用之術語「調節」意謂與標靶直接或間接相互作用以致改變該標靶之活性，包括(僅舉例而言)增強該標靶之活性，抑制該 標靶之活性，限制該標靶之活性，或延伸該標靶之活性。

如本文所用之術語「調節劑」係指與標靶直接或間接相互作用的分子。相互作用包括(但不限於)促效劑及拮抗劑之相互作用。

如本文所用之術語「醫藥學上可接受之衍生物或前藥」係指式I化合物之任何醫藥學上可接受之鹽、酯、酯之鹽或其他衍生物，其一旦投與至接受者即能直接或間接提供本發明化合物其醫藥活性代謝物或殘餘物。尤其有利的衍生物或前藥為當向病患投與本發明化合物時增加該等化合物之生物可用性(例如藉由允許經口投與化合物以較易於吸收至血液中)或增強母體化合物傳遞至生物代謝區(例如腦或淋巴系統)的彼等衍生物或前藥。

如本文所用之術語「醫藥學上可接受之鹽」包括保持指定化合物之游離酸及鹼之生物有效性且非生物學上或在其他方面不合需要的鹽。所述化合物可具有酸性或鹼性基團且因此可與大量無機或有機鹼以及無機及有機酸中之任一者反應以形成醫藥學上可接受之鹽。醫藥學上可接受之鹽的實例包括藉由本文所述化合物與無機或有機酸或無機鹼反應製備之彼等鹽，該等鹽包括乙酸鹽、丙烯酸鹽、己二酸鹽、海藻酸鹽、天冬胺酸鹽、苯甲酸鹽、苯磺酸鹽、硫酸氫鹽、亞硫酸氫鹽、溴化物、丁酸鹽、丁炔-1,4-二酸鹽、樟腦酸鹽、樟腦磺酸鹽、己酸鹽、辛酸鹽、氯化物、氯苯甲酸鹽、氯化物、檸檬酸鹽、環戊烷丙酸鹽、癸酸鹽、二葡糖酸鹽、二氫磷酸鹽、二硝基苯甲酸鹽、十二烷基硫酸鹽、乙烷磺酸鹽、甲酸鹽、反丁烯二酸鹽、葡糖庚酸鹽、甘油磷酸鹽、羥乙酸鹽、半硫酸鹽、庚酸鹽、己酸鹽、己炔-1,6-二酸鹽、羥基苯甲酸鹽、γ-羥基丁酸鹽、鹽酸鹽、氫溴酸鹽、氫碘酸鹽、2-羥基乙烷磺酸鹽、碘化物、異丁酸鹽、乳酸鹽、順丁烯二酸鹽、丙二酸鹽、甲烷磺酸鹽、杏仁酸鹽、偏磷酸鹽、甲烷磺酸鹽、甲氧基苯甲酸鹽、甲基苯甲酸鹽、單氫磷酸鹽、1-萘磺酸鹽、2-萘磺酸鹽、菸鹼酸 鹽、硝酸鹽、草酸鹽、雙羥萘酸鹽、果膠酸鹽、過硫酸鹽、苯乙酸鹽、苯丙酸鹽、3-苯丙酸鹽、磷酸鹽、苦味酸鹽、特戊酸鹽、丙酸鹽、焦硫酸鹽、焦磷酸鹽、丙炔酸鹽、丙酸鹽、鄰苯二甲酸鹽、苯丁酸鹽、丙烷磺酸鹽、焦磷酸鹽、水楊酸鹽、丁二酸鹽、硫酸鹽、亞硫酸鹽、丁二酸鹽、辛二酸鹽、癸二酸鹽、磺酸鹽、酒石酸鹽、硫氰酸鹽、甲苯磺酸鹽、十一烷酸鹽及二甲苯磺酸鹽。諸如草酸之其他酸儘管其自身並非為醫藥學上可接受的，但其可用於製備在獲得本發明化合物及其醫藥學上可接受之酸加成鹽的過程中適用作中間物之鹽。(參見例如Berge等人，J.Pharm.Sci.1977,66,1-19)。另外，可包含游離酸基團之本文所述彼等化合物可與適合鹼(諸如醫藥學上可接受之金屬陽離子之氫氧化物、碳酸鹽或碳酸氫鹽)反應，與氨反應或與醫藥學上可接受之有機一級、二級或三級胺反應。代表性鹼金屬鹽或鹼土金屬鹽包括鋰、鈉、鉀、鈣、鎂及鋁鹽及其類似鹽。鹼之說明性實例包括氫氧化鈉、氫氧化鉀、膽鹼氫氧化物、碳酸鈉、N+(C1-4烷基)4及其類似鹼。適用於形成鹼加成鹽之代表性有機胺包括乙胺、二乙胺、乙二胺、乙醇胺、二乙醇胺、哌嗪及其類似物。應瞭解，本文所述化合物亦包括其可含有之任何鹼性含氮基團的四級銨化。水溶性或油溶性或可分散性產物可藉由該四級銨化獲得。參見例如上文Berge等人。此等鹽可在本發明化合物之最後分離及純化期間當場製備，或藉由分別使經純化之化合物以其游離鹼形式與適合有機或無機酸反應且分離由此形成之鹽來製備。

如本文所用之術語「醫藥組合」、「投與額外療法」、「投與額外治療劑」及其類似術語係指由一種以上活性成分之混合或組合所產生之醫藥療法，且包括活性成分之固定組合與非固定組合。術語「固定組合」意謂至少一種本文所述化合物及至少一種助劑以單一實體形式或單一劑型同時投與至病患。術語「非固定組合」意謂至少一種本文 所述化合物及至少一種助劑以各別實體形式同時、並行或以可變介入時限依序投與至病患，其中該投與在病患體內提供有效量之兩種或兩種以上化合物。此等亦適用於混合藥療法(cocktail therapy)，例如投與三種或三種以上活性成分。

如本文所用之術語「共同投與」、「組合投與」及其語法等效形式或其類似術語意謂涵蓋向單個病患投與所選治療劑，且意欲包括該等藥劑以相同或不同投藥途徑或在相同或不同時間投與之治療方案。在一些實施例中，本文所述化合物將與其他藥劑共同投與。該等術語涵蓋向動物投與兩種或兩種以上藥劑以使得兩種藥劑及/或其代謝物同時存在於動物中。其包括以各別組合物形式同時投與，以各別組合物形式在不同時間投與，及/或以存在兩種藥劑之組合物形式投與。因此，在一些實施例中，本發明化合物及其他藥劑係以單一組合物形式投與。在一些實施例中，本發明化合物及其他藥劑係以組合物形式混合。

MEK蛋白激酶抑制劑

在各個實施例中，提供包含協同及治療有效量之MEK蛋白激酶抑制劑及Raf蛋白激酶抑制劑之醫藥組合。在一些實施例中，提供治療癌症之方法，該方法包含投與協同及治療有效量之醫藥組合，該醫藥組合進一步包含MEK蛋白激酶抑制劑及Raf蛋白激酶抑制劑。

在其他或額外實施例中，提供治療癌症之醫藥組合及方法，其包含MEK蛋白激酶抑制劑。在一些實施例中，MEK蛋白激酶抑制劑為CI-1040(PD184352)(Calbiochem)，其具有化學名稱2-(2-氯-4-碘-苯胺基)-N-環丙基甲氧基-3,4-二氟-苯甲醯胺及以下結構： 。在其他實施例中，MEK蛋白激酶抑制劑為PD-98059 (Biaffin GmbH & Co.KG；Germany)，其具有化學名稱2'-胺基-3'-甲氧 基黃酮及以下化學結構：。在一些實施例中，MEK蛋白激酶抑制劑為UO126(Biaffin GmbH & Co.KG；Germany)，其具有化學名稱1,4-二胺基-2,3-二氰基-1,4-雙(2-胺基苯硫基)-丁二烯及以下化 學結構：。在其他實施例中，MEK蛋白激酶抑制劑為SL 327(Biaffin GmbH & Co.KG；Germany)，其具有化學名稱α-[胺基[(4-胺基苯基)硫基]亞甲基]-2-(三氟甲基)苯乙腈及以下化學結構： 。在其他實施例中，MEK蛋白激酶抑制劑為植物化學槲皮素，其具有化學名稱2-(3,4-二羥基苯基)-3,5,7-三羥基-4H-烯-4-酮 及以下化學結構：。在額外實施例中，MEK蛋白激酶抑制劑為PD-184161，其具有化學名稱2-(2-氯-4-碘苯胺基)-N-環丙基甲氧基-3,4-二氟-5-溴-苯甲醯胺。

在其他或額外實施例中，MEK蛋白激酶抑制劑為GSK1120212。在一些實施例中，MEK蛋白激酶抑制劑為PD-0325901。在其他實施例中，MEK蛋白激酶抑制劑為PD 0318088。在其他實施例中，MEK蛋白激酶抑制劑為PD-184386。在一些實施例中，MEK蛋白激酶抑制劑為PD-170611。在額外實施例中，MEK蛋白激酶抑制劑為PD-177168。在其他實施例中，MEK蛋白激酶抑制劑為PD-184352。在其他實施例中，MEK蛋白激酶抑制劑為PD-171984。在其他實施例中，MEK蛋白激酶抑制劑為ARRY-438162。在一些實施例中，MEK蛋白 激酶抑制劑為AZD6244/ARRY-886。在額外實施例中，MEK蛋白激酶抑制劑為AZD 8330。在其他實施例中，MEK蛋白激酶抑制劑為XL518。在一個實施例中，MEK蛋白激酶抑制劑為UO125(Calbiochem)，其具有化學名稱。

在其他或額外實施例中，其中該MEK蛋白激酶抑制劑為選自由以下組成之化合物群的化合物：

MEK抑制劑及索拉非尼或瑞戈非尼之醫藥組合的例示性作用 MEK抑制劑及索拉非尼或瑞戈非尼之醫藥組合物

在其他態樣中，本發明係關於一種包含MEK蛋白激酶抑制劑及索拉非尼或瑞戈非尼之醫藥組合物，其中該MEK蛋白激酶抑制劑為式A化合物。在一些實施例中，醫藥組合物進一步包含醫藥學上可接受之載劑。該等組合物可含有佐劑、賦形劑及防腐劑、延遲吸收劑、填充劑、黏合劑、吸附劑、緩衝劑、崩解劑、增溶劑、其他載劑及其他惰性成分。調配該等組合物之方法在此項技術中為熟知的。

在一些實施例中，醫藥組合物呈適合經口投藥之形式。在其他或額外實施例中，醫藥組合物呈錠劑、膠囊、丸劑、散劑、持續釋放調配物、溶液、懸浮液形式，用於以無菌溶液、懸浮液或乳液形式非經腸注射，用於以軟膏或乳膏形式局部投藥，或用於以栓劑形式經直腸投藥。在其他或額外實施例中，醫藥組合物呈適於單一投與精確劑量之單位劑型。

在其他或額外實施例中，MEK蛋白激酶抑制劑之量在約0.001至約1000毫克/公斤體重/天之範圍內。在其他或額外實施例中，MEK蛋白激酶抑制劑之量在約0.5至約50毫克/公斤/天之範圍內。在其他或額外實施例中，MEK蛋白激酶抑制劑之量為約0.001至約7公克/天。在其他或額外實施例中，MEK蛋白激酶抑制劑之量為約0.002至約6公克/天。在其他或額外實施例中，MEK蛋白激酶抑制劑之量為約0.005至約5公克/天。在其他或額外實施例中，MEK蛋白激酶抑制劑之量為約0.01至約5公克/天。在其他或額外實施例中，MEK蛋白激酶抑制劑之 量為約0.02至約5公克/天。在其他或額外實施例中，MEK蛋白激酶抑制劑之量為約0.05至約2.5公克/天。在其他或額外實施例中，MEK蛋白激酶抑制劑之量為約0.1至約1公克/天。在其他或額外實施例中，低於上述範圍之下限的劑量水準可能遠遠足夠。在其他或額外實施例中，高於上述範圍之上限的劑量水準可為需要的。在其他或額外實施例中，MEK蛋白激酶抑制劑及/或索拉非尼或瑞戈非尼每天一次以單一劑量組合投與。

在一些實施例中，MEK抑制劑及Raf抑制劑以不同的時序方案投與。

在一些實施例中，醫藥組合物係投與至哺乳動物。在其他或額外實施例中，哺乳動物為人類。在其他或額外實施例中，醫藥組合物進一步包含醫藥載劑、賦形劑及/或佐劑。

在其他或額外實施例中，醫藥組合物進一步包含至少一種額外治療劑。在其他或額外實施例中，該治療劑係選自由細胞毒性劑、抗血管生成劑及抗贅生劑組成之群。在其他或額外實施例中，抗贅生劑係選自由以下組成之群：烷基化劑、抗代謝物、表鬼臼毒素(epidophyllotoxin)、抗贅生性酶、拓撲異構酶抑制劑、丙卡巴肼(procarbazine)、米托蒽醌(mitoxantrone)、鉑配合錯合物、生物反應調節劑及生長抑制劑、激素/抗激素治療劑及造血生長因子。在其他或額外實施例中，治療劑為紫杉醇(taxol)、硼替佐米(bortezomib)或兩者。在其他或額外實施例中，醫藥組合物係與額外療法組合投與。在其他或額外實施例中，額外療法為放射線療法、化學療法、外科手術或其任何組合。

腫瘤尺寸/腫瘤負載/腫瘤負荷

在其他態樣中，本發明係關於一種在個體中減小腫瘤尺寸，抑制腫瘤尺寸增加，減少腫瘤增殖或預防腫瘤增殖之方法，該方法包含 向該個體投與有效量之MEK蛋白激酶抑制劑及/或索拉非尼或瑞戈非尼。在一些實施例中，組合係以組合物之組分形式投與，該組合物進一步包含醫藥學上可接受之載劑或媒劑。在一些實施例中，腫瘤尺寸減小。在其他或額外實施例中，腫瘤尺寸減小至少1%。在其他或額外實施例中，腫瘤尺寸減小至少2%。在其他或額外實施例中，腫瘤尺寸減小至少3%。在其他或額外實施例中，腫瘤尺寸減小至少4%。在其他或額外實施例中，腫瘤尺寸減小至少5%。在其他或額外實施例中，腫瘤尺寸減小至少10%。在其他或額外實施例中，腫瘤尺寸減小至少20%。在其他或額外實施例中，腫瘤尺寸減小至少25%。在其他或額外實施例中，腫瘤尺寸減小至少30%。在其他或額外實施例中，腫瘤尺寸減小至少40%。在其他或額外實施例中，腫瘤尺寸減小至少50%。在其他或額外實施例中，腫瘤尺寸減小至少60%。在其他或額外實施例中，腫瘤尺寸減小至少70%。在其他或額外實施例中，腫瘤尺寸減小至少75%。在其他或額外實施例中，腫瘤尺寸減小至少80%。在其他或額外實施例中，腫瘤尺寸減小至少85%。在其他或額外實施例中，腫瘤尺寸減小至少90%。在其他或額外實施例中，腫瘤尺寸減小至少95%。在其他或額外實施例中，腫瘤得到根除。在一些實施例中，腫瘤尺寸並未增加。

在一些實施例中，腫瘤增殖減少。在一些實施例中，腫瘤增殖減少至少1%。在一些實施例中，腫瘤增殖減少至少2%。在一些實施例中，腫瘤增殖減少至少3%。在一些實施例中，腫瘤增殖減少至少4%。在一些實施例中，腫瘤增殖減少至少5%。在一些實施例中，腫瘤增殖減少至少10%。在一些實施例中，腫瘤增殖減少至少20%。在一些實施例中，腫瘤增殖減少至少25%。在一些實施例中，腫瘤增殖減少至少30%。在一些實施例中，腫瘤增殖減少至少40%。在一些實施例中，腫瘤增殖減少至少50%。在一些實施例中，腫瘤增殖減少至 少60%。在一些實施例中，腫瘤增殖減少至少70%。在一些實施例中，腫瘤增殖減少至少75%。在一些實施例中，腫瘤增殖減少至少75%。在一些實施例中，腫瘤增殖減少至少80%。在一些實施例中，腫瘤增殖減少至少90%。在一些實施例中，腫瘤增殖減少至少95%。在一些實施例中，腫瘤增殖得到預防。

在一些實施例中，組合係與額外療法組合投與。在其他或額外實施例中，額外療法為放射線療法、化學療法、外科手術或其任何組合。在其他或額外實施例中，組合係與至少一種治療劑組合投與。在其他或額外實施例中，治療劑係選自下組：細胞毒性劑、抗血管生成劑及抗贅生劑。在其他或額外實施例中，抗贅生劑係選自由以下組成之組：烷基化劑、抗代謝物、表鬼臼毒素、抗贅生性酶、拓撲異構酶抑制劑丙卡巴肼、米托蒽醌、鉑配合錯合物、生物反應調節劑及生長抑制劑、激素/抗激素治療劑及造血生長因子。在其他或額外實施例中，治療劑係選自紫杉醇、硼替佐米或兩者。

在一些實施例中，包含MEK蛋白激酶抑制劑及索拉非尼或瑞戈非尼之組合物係經口、經十二指腸內、非經腸(包括靜脈內、皮下、肌肉內、血管內或藉由輸注)、經局部或經直腸投與。在其他或額外實施例中，式A化合物之量在約0.001至約1000毫克/公斤體重/天之範圍內。在其他或額外實施例中，式A化合物之量在約0.5至約50毫克/公斤/天之範圍內。在其他或額外實施例中，式A化合物之量為約0.001至約7公克/天。在其他或額外實施例中，式A化合物之量為約0.01至約7公克/天。在其他或額外實施例中，式A化合物之量為約0.02至約5公克/天。在其他或額外實施例中，式A化合物之量為約0.05至約2.5公克/天。在其他或額外實施例中，式A化合物之量為約0.1至約1公克/天。在其他或額外實施例中，低於上述範圍之下限的劑量水準可能遠遠足夠。在其他或額外實施例中，高於上述範圍之上限的劑量 水準可為需要的。

投藥方式

本文描述MEK蛋白激酶抑制劑及索拉非尼或瑞戈非尼組合。亦描述包含MEK蛋白激酶及索拉非尼或瑞戈非尼之醫藥組合物。如本文所用之「組合」與「組合物」之區別在於MEK抑制劑及Raf抑制劑在「組合」中可以不同劑型投與，但在「組合物」中以相同劑型投與。根據標準醫藥規範，本文所述之化合物及組合物可單獨投與或與醫藥學上可接受之載劑、賦形劑或稀釋劑以醫藥組合物形式組合投與。

本文所述之化合物及組合物之投與可藉由使得化合物能夠傳遞至作用位點之任何方法來實現。該等方法包括經口途徑、十二指腸內途徑、非經腸注射(包括靜脈內、皮下、腹膜內、肌肉內、血管內或輸注)、局部投藥及直腸投藥。舉例而言，本文所述之化合物可局部投與至需要治療之區域中。此可藉由例如(但不限於)在外科手術期間局部輸注、局部施用來達成，例如乳膏、軟膏、注射、導管或植入物，該植入物例如由多孔性、無孔性或凝膠狀材料製得，包括膜(諸如矽橡膠膜(sialastic membrane))或纖維。亦可藉由在腫瘤或贅生性或前贅生性組織之位點(或形成位點)處直接注射以進行投藥。一般技術者熟悉可供本發明化合物及方法使用之調配及投藥技術，例如以下文獻中所論述：Goodman及Gilman,The Pharmacological Basis of Therapeutics，現行版；Pergamon；及Remington,Pharmaceutical Sciences(現行版),Mack Publishing Co.,Easton,Pa。

調配物包括彼等適於經口、非經腸(包括皮下、皮內、肌肉內、靜脈內、關節內及髓內)、腹膜內、經黏膜、經皮、經直腸及局部(包括經皮、經頰、舌下及眼內)投與之調配物，但最適合之途徑可視例如接受者之病狀及病症而定。調配物宜以單位劑型呈現且可由製藥學 技術中所熟知之方法中之任一者來製備。所有方法包括使本發明化合物或其醫藥學上可接受之鹽、溶劑合物、多晶型物、酯、醯胺、互變異構體、前藥、水合物或衍生物(「活性成分」)與構成一或多種附屬成分之載劑締合的步驟。一般而言，藉由使活性成分與液體載劑或細粉狀固體載劑或兩者均一且緊密地締合且接著必要時將產物成形為所需調配物來製備該等調配物。

適於經口投與之調配物可呈現為以下形式：各別單元，諸如各自含有預定量活性成分之膠囊、扁囊劑或錠劑；散劑或顆粒；於水性液體或非水性液體中之溶液或懸浮液；或水包油型液體乳液或油包水型液體乳液。活性成分亦可以大丸劑、舐劑或糊劑形式呈現。

適於經口投與之醫藥製劑包括錠劑、由明膠製成之配合插入膠囊以及由明膠及塑化劑(諸如甘油或山梨糖醇)製成之密封軟膠囊。錠劑可藉由視情況與一或多種附屬成分一起壓縮或模製來製備。壓縮錠劑可藉由在適合機器中壓縮呈自由流動形式(諸如粉末或顆粒)之視情況與黏合劑、惰性稀釋劑或潤滑劑、表面活性劑或分散劑混合的活性成分來製備。模製錠劑可藉由在適合機器中模製經惰性液體稀釋劑濕潤之粉末狀化合物之混合物來製備。錠劑視情況可經塗覆或刻痕，且可經調配以提供其中活性成分之緩慢或控制釋放。經口投與之所有調配物應為適於該投藥之劑量。配合插入膠囊或錠劑可含有與以下物質混合之活性成分：填充劑，諸如微晶纖維素、矽化微晶纖維素、預膠凝化澱粉、乳糖、磷酸二鈣或可壓縮糖；黏合劑，諸如羥丙甲纖維素、聚維酮或澱粉糊劑；崩解劑，諸如交聯羧甲纖維素鈉、交聯聚維酮或羥基乙酸澱粉鈉；界面活性劑，諸如月桂基硫酸鈉及/或潤滑劑及加工助劑，諸如滑石、硬脂酸鎂、硬脂酸或膠態二氧化矽；及視情況選用之穩定劑。在軟膠囊中，該等活性化合物可溶解或懸浮於諸如脂肪油、液體石蠟或液體聚乙二醇之適合液體中。另外，可添加穩定 劑。糖衣藥丸核心具有適合包衣。為此，可使用經濃縮之糖溶液，其視情況含有阿拉伯膠、滑石、聚乙烯吡咯啶酮、卡波莫凝膠(carbopol gel)、聚乙二醇及/或二氧化鈦、漆溶液及適合之有機溶劑或溶劑混合物。染料或顏料可添加至錠劑或糖衣藥丸包衣中以便鑑別或表徵活性化合物劑量之不同組合。

調配物

可調配醫藥製劑用於藉由注射而非經腸投與，例如藉由快速注射或連續輸注。用於注射之調配物可呈單位劑型(例如以安瓿形式或以多劑量容器形式)與所添加之防腐劑一起呈現。組合物可採用諸如於油性或水性媒劑中之懸浮液、溶液或乳液形式且可含有諸如懸浮劑、穩定劑及/或分散劑之調配劑。調配物可呈現於例如密封之安瓿及小瓶之單位劑量或多劑量容器中，且在即將使用之前可以粉末形式或在僅需要添加無菌液體載劑(例如生理鹽水或無菌無熱原質之水)的冷凍乾燥(凍乾)條件下儲存。可自上述種類之無菌粉末、顆粒及錠劑製備臨時注射溶液及懸浮液。

用於非經腸投與之調配物包括活性化合物之水性及非水性(油性)無菌注射溶液，其可含有抗氧化劑、緩衝劑、抑菌劑及將致使調配物與預期接受者之血液等張的溶解物；以及水性及非水性無菌懸浮液，其可包括懸浮劑及增稠劑。適合之親脂性溶劑或媒劑包括脂肪油，諸如芝麻油；或合成脂肪酸酯，諸如油酸乙酯或三酸甘油酯；或脂質體。水性注射懸浮液可含有增加懸浮液黏度之物質，諸如羧甲基纖維素鈉、山梨糖醇或聚葡萄糖。視情況，懸浮液亦可含有適合穩定劑或增加化合物溶解性以允許製備高濃度溶液之試劑。

醫藥製劑亦可調配為儲槽式製劑。該等長效調配物可藉由植入(例如皮下或肌肉內)或藉由肌肉內注射投與。因此，例如，化合物可與適合之聚合性或疏水性材料(例如作為可接受之油中之乳液)或離子 交換樹脂一起調配，或調配為微溶性衍生物，例如調配為微溶鹽。

對於經頰或舌下投藥，組合物可採用以習知方式調配之錠劑、口含錠、片劑或凝膠形式。該等組合物可包含在可口基質(諸如蔗糖及阿拉伯膠或黃蓍膠)中之活性成分。

醫藥製劑亦可以諸如栓劑或保留灌腸劑之直腸組合物形式調配，例如含有習知栓劑基質，諸如可可脂、聚乙二醇或其他甘油酯。

醫藥製劑可局部投與，亦即藉由非全身性投與。此包括將本發明化合物外部施用至表皮或頰腔且將該種化合物滴入耳、眼及鼻中，以使得該化合物不顯著進入血流。相比之下，全身性投藥係指經口、靜脈內、腹膜內及肌肉內投藥。

適於局部投與之醫藥製劑包括適於穿透皮膚至發炎位點之液體或半液體製劑，諸如凝膠、搽劑、洗劑、乳膏、軟膏或糊劑及適於投與至眼、耳或鼻中之滴劑。對於局部投藥而言，按調配物之重量計，活性成分可佔0.001%至10% w/w，例如1%至2%。然而，其可佔多至調配物之10% w/w或可佔小於5% w/w，或0.1%至1% w/w。

用於藉由吸入投與之醫藥製劑宜藉由吹藥器、噴霧器加壓包裝或傳遞氣霧劑噴霧之其他適宜方法來傳遞。加壓包裝可包含適合之推進劑，諸如二氯二氟甲烷、三氯氟甲烷、二氯四氟乙烷、二氧化碳或其他適合之氣體。在加壓氣霧劑的情況下，劑量單位可由提供一閥門以傳遞經計量之量來測定。或者，對於藉由吸入或吹入投藥而言，醫藥製劑可採用乾粉組合物形式，例如化合物與適合之粉末基質(諸如乳糖或澱粉)之粉末混合物。粉末組合物可以例如膠囊、濾筒、明膠或泡殼包裝之單位劑型呈現，粉末可藉助於吸入器或吹藥器自其投與。

應瞭解，除以上特別提及之成分之外，本文所述之化合物及組合物還可包括考慮到所論述之調配物類型之此項技術中習知之其他試 劑，例如彼等適於經口投與之化合物及組合物可包括調味劑。

本文所述之化合物或組合物可以小泡(例如脂質體)形式傳遞(參見例如Langer,Science 1990,249,1527-1533；Treat等人，Liposomes in the Therapy of Infectious Disease and Cancer,Lopez-Bernstein及Fidler編，Liss,N.Y.，第353-365頁，1989)。本文所述之化合物及醫藥組合物亦可以控制釋放系統傳遞。在一個實施例中，可使用泵(參見Sefton,1987,CRC Crit.Ref.Biomed.Eng.14：201；Buchwald等人，Surgery,1980 88,507；Saudek等人.N.Engl.J.Med.1989,321,(574))。另外，可將控制釋放系統與治療標靶鄰近置放(參見Goodson,Medical Applications of Controlled Release,1984，第2卷，第115-138頁)。本文所述之醫藥組合物亦可含有呈適於經口使用之形式的活性成分，例如呈錠劑、糖衣錠、口含錠、水性或油性懸浮液、可分散粉末或顆粒、乳液、硬或軟膠囊、或糖漿或酏劑形式。意欲經口使用之組合物可根據此項技術已知之用於製造醫藥組合物之任何方法製備，且該等組合物可含有一或多種選自由甜味劑、調味劑、著色劑及防腐劑組成之群之試劑以便提供醫藥學上美觀且可口之製劑。錠劑含有與適於製造錠劑之醫藥學上可接受之無毒賦形劑混合之活性成分。此等賦形劑可為例如惰性稀釋劑，諸如碳酸鈣、碳酸鈉、乳糖、磷酸鈣或磷酸鈉；粒化劑及崩解劑；填充劑，諸如微晶纖維素、矽化微晶纖維素、預膠凝化澱粉、乳糖、磷酸二鈣或可壓縮糖；黏合劑，諸如羥丙甲纖維素、聚維酮或澱粉糊劑；崩解劑，諸如交聯羧甲纖維素鈉、交聯聚維酮或羥基乙酸澱粉鈉；界面活性劑，諸如月桂基硫酸鈉及/或潤滑劑及加工助劑，諸如滑石、交聯羧甲纖維素鈉、玉米澱粉或海藻酸；黏合劑，例如澱粉、明膠、聚乙烯基-吡咯啶酮或阿拉伯膠；及潤滑劑，例如硬脂酸鎂、硬脂酸或膠態二氧化矽及視情況選用之滑石。錠劑可未經塗覆或藉由已知技術塗覆以遮蔽藥物之味道或延遲在胃腸道中崩 解及吸收且從而提供較長時間之持續作用。舉例而言，適當時可使用水溶性掩味材料(諸如羥丙基甲基-纖維素或羥丙基纖維素)或延時材料(諸如乙基纖維素或乙酸丁酸纖維素)。用於經口使用之調配物亦可呈現為硬明膠膠囊形式，其中使活性成分與例如碳酸鈣、磷酸鈣或高嶺土之惰性固體稀釋劑混合；或軟明膠膠囊形式，其中使活性成分與諸如聚乙二醇之水溶性載劑或例如花生油、液體石蠟或橄欖油之油介質混合。膠囊及錠劑劑型可藉由包括乾式摻合及濕式造粒技術之各種加工技術來製備。在乾式摻合製造方法中，可藉由與賦形劑乾式摻合將原料藥併入劑型中，繼之以囊封於膠囊殼中或壓縮成錠劑形式。乾式摻合操作可以逐步方式來實現，且包括在摻合步驟之間的篩選步驟以促進形成均一摻合物。在濕式造粒製造方法中，可將原料藥添加至無水賦形劑中且混合，隨後添加黏合劑溶液或可使原料藥溶解且以溶液形式添加作為造粒之一部分。在濕式造粒技術中，若使用界面活性劑，則可將其添加至無水賦形劑中或添加至黏合劑溶液中且以溶液形式合併。膠囊劑型亦可藉由將原料藥溶解於可填充至明膠膠囊外殼中且與明膠膠囊外殼相容之物質中來製造，該等明膠膠囊外殼可隨後綁紮且密封。膠囊及錠劑劑型亦可藉由將原料藥溶解於諸如高分子量聚乙二醇之熔融形式的物質中且冷卻至固體形式，研磨且將此物質合併至習知膠囊及錠劑製造過程中來製備。

水性懸浮液含有與適於製造水性懸浮液之賦形劑混合的活性物質。該等賦形劑為：懸浮劑，例如羧甲基纖維素鈉、甲基纖維素、羥丙基甲基-纖維素、海藻酸鈉、聚乙烯基-吡咯啶酮、黃蓍膠及阿拉伯膠；分散劑或濕潤劑，其可為天然產生之磷脂，例如卵磷脂，或氧化烯與脂肪酸之縮合產物，例如聚氧乙烯硬脂酸酯，或氧化乙烯與長鏈脂族醇之縮合產物，例如十七伸乙基-氧基十六醇，或氧化乙烯與來源於脂肪酸之偏酯及己醣醇的縮合產物，諸如聚氧乙烯山梨糖醇單油 酸酯，或氧化乙烯與來源於脂肪酸之偏酯及己醣醇酐的縮合產物，例如聚氧乙烯脫水山梨糖醇單油酸酯。水性懸浮液亦可含有一或多種防腐劑(例如對羥基苯甲酸乙酯或對羥基苯甲酸正丙酯)、一或多種著色劑、一或多種調味劑及一或多種甜味劑(諸如蔗糖、糖精或阿斯巴甜糖(aspartame))。

油性懸浮液可藉由使活性成分懸浮於例如花生油、橄欖油、芝麻油或椰子油之植物油中或諸如液體石蠟之礦物油中來調配。油性懸浮液可含有增稠劑，例如蜂蠟、硬石蠟或十六醇。可添加甜味劑(諸如上述甜味劑)及調味劑以提供可口之口服製劑。此等組合物可藉由添加諸如丁基化羥基大茴香醚或α-生育酚之抗氧化劑來防腐。

適於藉由添加水來製備水性懸浮液之可分散性粉末及顆粒提供與分散劑或濕潤劑、懸浮劑及一或多種防腐劑混合之活性成分。適合之分散劑或濕潤劑及懸浮劑由以上已提及之彼等試劑例示。亦可存在例如甜味劑、調味劑及著色劑之額外賦形劑。此等組合物可藉由添加諸如抗壞血酸之抗氧化劑來防腐。

醫藥組合物亦可呈水包油型乳液形式。油相可為植物油，例如橄欖油或花生油；或礦物油，例如液體石蠟；或該等物質之混合物。適合之乳化劑可為天然產生之磷脂(例如大豆卵磷脂)及來源於脂肪酸及己醣醇酐之酯或偏酯(例如脫水山梨糖醇單油酸酯)及該等偏酯與氧化乙烯之縮合產物(例如聚氧乙烯脫水山梨糖醇單油酸酯)。乳液亦可含有甜味劑、調味劑、防腐劑及抗氧化劑。

糖漿及酏劑可與例如甘油、丙二醇、山梨糖醇或蔗糖之甜味劑一起調配。該等調配物亦可含有緩和劑、防腐劑、調味劑及著色劑以及抗氧化劑。

醫藥組合物可呈無菌可注射水溶液形式。可採用之可接受媒劑及溶劑為水、林格氏溶液(Ringer's solution)及等張氯化鈉溶液。無菌 可注射製劑亦可為活性成分溶解於油相中之無菌可注射水包油型微乳液。舉例而言，可首先將活性成分溶解於大豆油與卵磷脂之混合物中。接著將油溶液引入水與甘油之混合物中且經處理以形成微乳液。可注射溶液或微乳液可藉由局部快速注射引入病患血流內。或者，宜以該種方式投與溶液或微乳液，以便維持本發明化合物之恆定循環濃度。為了維持該種恆定濃度，可利用連續靜脈內傳遞裝置。該類裝置之實例為Deltec CADD-PLUS^TM型5400靜脈內泵。醫藥組合物可呈用於肌肉內及皮下投藥之無菌可注射水性或油性懸浮液形式。此懸浮液可根據已知技術使用上文已提及之彼等合適分散劑或濕潤劑及懸浮劑來調配。無菌可注射製劑亦可為於無毒非經腸可接受之稀釋劑或溶劑中之無菌可注射溶液或懸浮液，例如於1,3-丁二醇中之溶液。此外，無菌不揮發性油習用作溶劑或懸浮介質。出於此目的，可使用包括合成單甘油酯或二甘油酯之任何無刺激性不揮發性油。另外，諸如油酸之脂肪酸可用於製備可注射劑。

醫藥組合物亦可以用於經直腸投與藥物之栓劑形式投與。該等組合物可藉由將抑制劑與適合之非刺激性賦形劑混合來製備，該賦形劑在常溫下為固態但在直腸溫度下為液態且因此將在直腸中熔融以釋放藥物。該等物質包括可可脂、甘油化明膠、氫化植物油、具有不同分子量之聚乙二醇與聚乙二醇之脂肪酸酯的混合物。

關於局部使用，含有本發明化合物或組合物之乳膏、軟膏、凝膠劑、溶液或懸浮液等可用於局部投藥。如本文所用，局部施用可包括漱口水及漱口劑。

醫藥組合物可以鼻內形式經由局部使用適合之鼻內媒劑及傳遞裝置或經由經皮途徑，使用一般技術者熟知之經皮皮膚貼片之彼等形式來投與。

調配物宜以單位劑型呈現且可由製藥學技術中所熟知之方法中 之任一者來製備。所有方法包括使本發明化合物或其醫藥學上可接受之鹽、酯、前藥或溶劑合物(「活性成分」)與構成一或多種附屬成分之載劑締合的步驟。一般而言，藉由使活性成分與液體載劑或細粉狀固體載劑或兩者均一且緊密地締合且接著必要時將產物成形為所需調配物來製備該等調配物。含特定量活性化合物之各種醫藥組合物的製備方法為已知的，或對熟習此項技術者將為顯而易知的。為了以經皮傳遞形式投與，劑型在整個給藥方案中當然將為連續的而非間歇的。

劑量 MEK抑制劑之劑量

所投與之MEK蛋白激酶抑制劑及索拉非尼或瑞戈非尼之醫藥組合之量首先將取決於所治療之哺乳動物。在向人類個體投與醫藥組合物之情況下，日劑量通常將由處方醫師確定，其中該劑量一般根據個體病患之年齡、性別、飲食、體重、一般健康及反應、病患症狀之嚴重程度、所治療之確切適應症或病狀、所治療之適應症或病狀之嚴重程度、投藥時間、投藥途徑、組合物之處置、排泄率、藥物組合及處方醫師之判斷力而變化。又，投藥途徑可視病狀及其嚴重程度而變化。醫藥組合物可呈單位劑型。在該種形式中，製劑細分成含有適當量之活性組分的單位劑量，例如為達成所需目的之有效量。測定針對特定情況之適當劑量在此項技術之範圍內。一般而言，治療起始於比化合物之最佳劑量小之劑量。此後，以小增量增加劑量直至達到該等情況下之最佳效應。為方便起見，可將總日劑量進行劃分且在一天當中需要時逐份投與。考慮到如上所述之該等因素，本文所述之化合物及可能適用之其他治療劑及/或療法之投藥量及頻率將根據主治臨床醫生(醫師)之判斷來調整。因此，待投與之醫藥組合物之量可廣泛變化。可依每日約0.001mg/kg體重至約100mg/kg體重之間之量投藥(以單次劑量或分次劑量投藥)，或可依每日至少約0.1mg/kg體重之量投 藥。特定治療劑量可包括例如約0.01mg至約7000mg之化合物，或例如約0.05mg至約2500mg。根據特定應用，單位劑量製劑中活性化合物之量可在約0.1mg至1000mg、約1mg至300mg、或10mg至200mg之間變化或調整。在一些情況下，低於上述範圍之下限的劑量水準可能遠遠足夠，而在其他情況下仍可能採用較大劑量而不導致任何有害副作用，例如將該等較大劑量分成若干小劑量，以用於在一天內投藥。所投與之量將隨所用化合物之特定IC50值而變化。在該化合物並非唯一療法之組合應用中，可能投與較少量之化合物且仍具有治療或預防效應。

在另一態樣中，本文提供治療癌症之醫藥組合及方法，其包含治療有效量之MEK蛋白激酶抑制劑及索拉非尼或瑞戈非尼，其中該組合允許特定給藥。

在本文所提供之組合及方法之一些實施例中，向病患投與之MEK蛋白激酶抑制劑與索拉非尼或瑞戈非尼之莫耳比為約100：1至約2.5：1。在其他實施例中，向病患投與之MEK蛋白激酶抑制劑與索拉非尼或瑞戈非尼之莫耳比為約50：1至約5：1。在其他實施例中，向病患投與之MEK蛋白激酶抑制劑與索拉非尼或瑞戈非尼之莫耳比為約45：1至約10：1。在其他實施例中，向病患投與之MEK蛋白激酶抑制劑與索拉非尼或瑞戈非尼之莫耳比為約40：1至約20：1。在其他實施例中，向病患投與之MEK蛋白激酶抑制劑與索拉非尼或瑞戈非尼之莫耳比為約30：1。

索拉非尼之劑量

在另一態樣中，本文所述之組合及方法提供索拉非尼或瑞戈非尼。在一些實施例中，索拉非尼以約10mg至約1,000mg之量存在。在其他或額外實施例中，索拉非尼以約20mg至約900mg之量存在。在其他實施例中，索拉非尼以約20mg至約900mg之量存在。在其他 實施例中，索拉非尼以約30mg至約850mg之量存在。在某些實施例中，索拉非尼以約40mg至約800mg之量存在。在其他實施例中，索拉非尼以約50mg至約750mg之量存在。在其他實施例中，索拉非尼以約75mg至約700mg、約100mg至約650mg、約150mg至約600mg、約200mg至約500mg、約300mg至約400mg之量存在。

在本文所述之醫藥組合及方法之其他或額外實施例中，索拉非尼或瑞戈非尼為索拉非尼且以約10mg、約20mg、約30mg、約40mg、約50mg、約60mg、約70mg、約80mg、約90mg、約100mg、約125mg、約150mg、約200mg、約250mg、約300mg、約350mg、約400mg、約450mg、約500mg、約600mg、約700mg、約750mg、約800mg、約850mg、約900mg、約950mg或約1000mg之量存在。

劑型

醫藥組合物例如可呈適於經口投藥之形式，諸如錠劑、膠囊、丸劑、粉末、持續釋放調配物、溶液、懸浮液；適於非經腸注射之形式，諸如無菌溶液、懸浮液或乳液；適於局部投藥之形式，諸如軟膏或乳膏；或適於經直腸投藥之形式，諸如栓劑。醫藥組合物可呈適於單次投與精確劑量之單位劑型。醫藥組合物將包括習知醫藥載劑或賦形劑及作為活性成分之本發明化合物。另外，其可包括其他醫學或醫藥劑、載劑、佐劑等。

例示性非經腸投藥形式包括活性化合物於無菌水溶液(例如丙二醇或右旋糖水溶液)中之溶液或懸浮液。需要時，該等劑型可經適當緩衝。

適合之醫藥載劑包括惰性稀釋劑或填充劑、水及各種有機溶劑。若需要，醫藥組合物可含有額外成分，諸如調味劑、黏合劑、賦形劑及其類似物。因此，對於經口投藥而言，含有各種賦形劑(諸如 檸檬酸)之錠劑可連同各種崩解劑(諸如澱粉、海藻酸及某些錯合矽酸鹽)以及黏合劑(諸如蔗糖、明膠及阿拉伯膠)一起使用。另外，對於錠劑用途而言，經常可使用諸如硬脂酸鎂、月桂基硫酸鈉及滑石之潤滑劑。亦可以包括乳糖(lactose或milk sugar)及高分子量聚乙二醇之軟填充明膠膠囊及硬填充明膠膠囊形式採用類似類型之固體組合物。當希望將水性懸浮液或酏劑用於經口投藥時，其中活性化合物可與各種甜味劑或調味劑、著色物質或染料及可能需要之乳化劑或懸浮劑以及諸如水、乙醇、丙二醇、甘油或其組合之稀釋劑組合。

含特定量活性化合物之各種醫藥組合物的製備方法為已知的，或對熟習此項技術者將為顯而易知的。舉例而言，參見Remington's Pharmaceutical Sciences,Mack Publishing Company,Ester,Pa.，第18版(1990)。

套組

本申請案係關於與本文所述之化合物一起使用之套組。在一些實施例中，本發明提供一種包括呈某一劑型、尤其呈用於經口投藥之劑型之MEK蛋白激酶抑制劑及/或索拉非尼或瑞戈非尼的套組。在一些實施例中，該套組進一步包括呈某一劑型之MEK蛋白激酶抑制劑及/或索拉非尼或瑞戈非尼。在特定實施例中，MEK蛋白激酶抑制劑及/或索拉非尼或瑞戈非尼呈各別劑型。在其他實施例中，MEK蛋白激酶抑制劑及/或索拉非尼或瑞戈非尼呈相同劑型。在一些實施例中，該套組包括一或多種劑量之呈用於經口投藥之錠劑形式的MEK蛋白激酶抑制劑及/或索拉非尼或瑞戈非尼。然而，在其他實施例中，該一或多種劑量之MEK蛋白激酶抑制劑及/或索拉非尼或瑞戈非尼可存在於多種劑型中，諸如膠囊、囊片、囊形片、用於懸浮液之粉末等。在一些實施例中，該套組包括一或多種劑量之用於經口投藥之MEK蛋白激酶抑制劑及/或索拉非尼或瑞戈非尼。然而，在其他實施 例中，該一或多種劑量之MEK蛋白激酶抑制劑及/或索拉非尼或瑞戈非尼可存在於多種劑型中，諸如膠囊、囊片、囊形片、用於懸浮液之粉末等。

套組之容器構件一般將包括至少一個小瓶、試管、燒瓶、瓶子、注射器及/或其他容器構件，其中可置放至少一種多肽及/或較佳經適當等分。該等套組可包括用於容納至少一種融合蛋白、可偵測部分、報導分子之構件及/或呈密封狀態以供商業出售之任何其他試劑容器。該等容器可包括儲存所需小瓶之射出成形及/或吹塑成形之塑膠容器。套組亦可包括關於套組中之物質用途的印刷品。

包裝及套組在醫藥調配物中可另外包括緩衝劑、防腐劑及/或穩定劑。套組之各組分可封閉於個別容器中且所有各種容器均可在單一包裝中。本發明套組可針對冷儲存或室溫儲存進行設計。

另外，製劑可含有穩定劑(諸如牛血清白蛋白(BSA))以增加套組之存放期。若組合物經凍乾，則套組可進一步含有溶液製劑以復原凍乾製劑。可接受之復原溶液在此項技術中已熟知且包括例如醫藥學上可接受之磷酸鹽緩衝鹽水(PBS)。

另外，本文所提供之包裝或套組可進一步包括本文所提供之其他部分中之任一者，諸如一或多種報導分子及/或一或多種可偵測部分/試劑。

包裝及套組可進一步包括用於諸如ELISA分析法、細胞毒性分析法、ADP-核糖基轉移酶活性分析法等之分析法的一或多種組分。本申請案之待測試樣本包括例如血液、血漿及組織切片以及分泌物、尿液、淋巴及其產物。包裝及套組可進一步包括一或多種用於收集樣本之組件(例如注射器、杯子、藥簽等)。

包裝及套組可進一步包括詳細說明例如產品說明、投藥方式及/或治療適應症之標籤。本文所提供之包裝可包括如本文所述之用於治 療本文所述任何適應症之任何組合物。

術語「包裝材料」係指容納套組之組件的物理結構。該包裝材料可保持組件無菌，且可由常用於該等目的之材料製成(例如紙、波狀纖維、玻璃、塑膠、箔、安瓿等)。標籤或包裝插頁可包括適當書面說明書。因此，套組可另外包括用於使用任何本發明方法中之套組組件的標籤或說明書。套組可在包裝或分配器中包括化合物以及關於以本文所述之方法投與該化合物之說明書。

在一些實施例中，套組包括至少三種劑型，一種包含MEK蛋白激酶抑制劑，一種包含索拉非尼或瑞戈非尼且另一種至少包含除MEK蛋白激酶抑制劑或索拉非尼或瑞戈非尼以外之第三種活性醫藥成分。在一些實施例中，第三種活性醫藥成分為第二種MEK蛋白激酶抑制劑。在其他實施例中，第三種活性醫藥成分為第二種索拉非尼或瑞戈非尼。在一些實施例中，該套組包括持續一定時段之足夠劑量。在特定實施例中，該套組包括持續1天、1週、14天、28天、30天、90天、180天、1年等的足夠劑量之各活性醫藥成分。據認為，該等套組所設計之最適宜之時段將為1至13週，尤其1週、2週、1個月、3個月等。在一些特定實施例中，各劑量實體地隔開至區室中，其中各劑量彼此隔離。

在一些實施例中，該套組包括至少兩種劑型，一種包含MEK蛋白激酶抑制劑且一種包含索拉非尼或瑞戈非尼。在一些實施例中，該套組包括持續一定時段之足夠劑量。在特定實施例中，該套組包括持續1天、1週、14天、28天、30天、90天、180天、1年等的足夠劑量之各活性醫藥成分。在一些特定實施例中，各劑量實體地隔開至區室中，其中各劑量彼此隔離。

在特定實施例中，該套組宜為泡殼包裝。泡殼包裝在此項技術中已知，且一般包括具有區室(泡殼或氣泡)之透明側，其單獨地固持 各種劑量；及襯底，諸如紙、箔、紙-箔或其他襯底，其易於移除以使得各劑量可單獨地自泡殼包裝提取而不干擾其他劑量。在一些實施例中，該套組可為泡殼包裝，其中MEK蛋白激酶抑制劑、索拉非尼或瑞戈非尼及視情況選用之第三種活性醫藥成分之各劑量在各別泡殼或氣泡中與其他劑量隔離。在一些該等實施例中，泡殼包裝可具有穿孔，其允許各日劑量藉由將其拉離泡殼包裝之其餘部分而與其他劑量隔開。各別劑型可包含在各別泡殼內。將活性醫藥成分隔離至各別泡殼中可為有利的，原因在於這防止各別劑型(例如錠劑及膠囊)在裝運及處理期間彼此接觸與損壞。另外，可對各別劑型存取及/或標記以在不同時間向病患投藥。

在一些實施例中，該套組可為泡殼包裝，其中各各別劑量之MEK蛋白激酶抑制劑、索拉非尼或瑞戈非尼及視情況選用之第三種活性醫藥成分在各別泡殼或氣泡中與其他劑量隔離。在一些該等實施例中，泡殼包裝可具有穿孔，其允許各日劑量藉由將其拉離泡殼包裝之其餘部分而與其他劑量隔開。各別劑型可包含在各別泡殼內。

在一些實施例中，第三種活性醫藥成分可呈液體或可復原粉末形式，其可單獨地密封(例如在小瓶或安瓿中)，且隨後與含有各別劑量之MEK蛋白激酶抑制劑及索拉非尼或瑞戈非尼的泡殼包裝一起包裝。在一些實施例中，MEK蛋白激酶抑制劑呈液體或可復原粉末形式，其單獨地密封(例如在小瓶或安瓿中)，且隨後與含有各別劑量之MEK蛋白激酶抑制劑的泡殼包裝一起包裝。此等實施例將尤其適用於臨床配置中，其中MEK蛋白激酶抑制劑、索拉非尼或瑞戈非尼及視情況選用之第三種活性醫藥活性劑之處方劑量將依照給藥時程使用，其中在每週、每兩週(bi-weekly/2×weekly)或其他給藥時程內，MEK蛋白激酶抑制劑及索拉非尼或瑞戈非尼各自在某些天投與，索拉非尼或瑞戈非尼在相同或不同的那些天投與，且第三種活性醫藥成 分在與MEK蛋白激酶抑制劑及/或索拉非尼或瑞戈非尼中之任一個或兩者相同或不同的那些天投與。含有MEK蛋白激酶抑制劑、索拉非尼或瑞戈非尼及視情況選用之第三種活性醫藥劑之泡殼包裝的該種組合亦可包括說明書，其用於依照適於提供MEK蛋白激酶抑制劑及/或第三種活性醫藥劑之協同或後遺症治療作用的給藥時程投與MEK蛋白激酶抑制劑、索拉非尼或瑞戈非尼及視情況選用之第三種活性醫藥劑中之每一者。

在其他實施例中，該套組可為具有各別區室之容器，其中各別蓋子適於依照特定時程打開。舉例而言，套組可包含具有七個區室之盒子(或類似容器)，各區室用於一週之各別天，且標記各區室以指示其對應於一週的哪一天。在一些特定實施例中，進一步細分各區室以准許一種活性醫藥成分與另一種隔離。如上文所述，該隔離為有利的，原因在於其防止對劑型之損傷且准許在不同時間給藥且對彼作用進行標記。該種容器亦可包括說明書，其用於依照適於提供MEK蛋白激酶抑制劑及/或第三種活性醫藥成分之協同或後遺症治療作用的給藥時程投與MEK蛋白激酶抑制劑、索拉非尼或瑞戈非尼及視情況選用之第三種活性醫藥成分。

套組亦可包括教示根據本文所述之各種方法及途徑使用套組之說明書。該等套組視情況包括資訊，諸如科學參考文獻、藥品說明書材料、臨床試驗結果及/或此等之概述及其類似資訊，其表明或確定組合物之活性及/或優點，及/或其描述劑量、投藥、副作用、藥物相互作用、待投與該組合物之疾病病況或適用於健康照護提供者之其他資訊。此類資訊可基於各種研究之結果，例如，使用涉及活體內模型之實驗動物的研究及基於人類臨床試驗的研究。在各個實施例中，本文所述之套組可提供、出售及/或推銷給健康提供者，包括醫師、護士、藥劑師、處方集官員及其類似者。在一些實施例中，套組可直接 出售給消費者。在某些實施例中，包裝材料進一步包含用於容納組合物之容器及視情況選用之貼附至該容器之標籤。該套組視情況包含額外組件，諸如(但不限於)用於投與組合物之注射器。

說明書可包括關於實施本文所述之任何方法(包括治療方法)的說明書。說明書可另外包括可出現之令人滿意的臨床終點或任何不良症狀之指示，或諸如食品與藥品管理局(Food and Drug Administration)之管理機構所要求之關於用於人類個體的額外資訊。

說明書可在「印刷品」上，例如套組內或貼附於套組之紙或卡片上，或貼附於套組或包裝材料之標籤上，或連接至含有套組組分之小瓶或管上。說明書可另外包括於電腦可讀取媒體上，諸如磁碟(軟碟或硬碟)、光學CD(諸如CD-ROM/RAM或DVD-ROM/RAM)、磁帶、電儲存媒體(諸如RAM及ROM)、IC尖頭及此等形式之混合體(諸如磁/光儲存媒體)。

在一些實施例中，該套組包含明顯不同於索拉非尼或瑞戈非尼之MEK蛋白激酶抑制劑。在某些實施例中，MEK蛋白激酶抑制劑劑型及索拉非尼或瑞戈非尼劑型中之每一者明顯地不同於第三種醫藥劑劑型。明顯差異可為例如形狀、尺寸、顏色、狀態(例如液態/固態)、物理標記(例如字母、編號)及其類似者。在某些實施例中，套組包含呈第一種顏色之MEK蛋白激酶抑制劑(例如化合物A或化合物B)劑型、呈第二種顏色之索拉非尼或瑞戈非尼劑型及呈第三種顏色之視情況選用之第三種醫藥組合物。在第一種、第二種及第三種顏色不同之實施例中，使用第一種、第二種及第三種醫藥組合物之不同顏色例如以區分第一種、第二種及第三種醫藥組合物。

在一些實施例中，其中包裝材料進一步包含用於容納醫藥組合物之容器，該套組包含MEK蛋白激酶抑制劑組合物，其在該套組內處於與索拉非尼或瑞戈非尼組合物不同的實體位置。在其他實施例 中，套組包含第三種醫藥劑，其處於與MEK蛋白激酶抑制劑組合物或索拉非尼或瑞戈非尼組合物隔開之實體位置中。在一些實施例中，MEK蛋白激酶抑制劑組合物及索拉非尼或瑞戈非尼組合物之不同實體位置包含單獨密封之個別區室。在某些實施例中，套組包含在第一個單獨密封之個別區室中之MEK蛋白激酶抑制劑組合物及在第二個單獨密封之個別區室中之索拉非尼或瑞戈非尼組合物。在MEK蛋白激酶抑制劑及索拉非尼或瑞戈非尼組合物區室隔開之實施例中，使用不同位置例如以區分MEK蛋白激酶抑制劑組合物及索拉非尼或瑞戈非尼組合物。在其他實施例中，第三種醫藥組合物在該套組內之第三個實體位置中。

本文所述之化合物可用於診斷且作為研究試劑。舉例而言，本文所述之化合物單獨或與其他化合物組合可用作差示及/或組合分析之工具以闡明在細胞及組織內表現之基因的表現模式。作為一個非限制性實例，比較經一或多種化合物處理之細胞或組織內之表現模式與未經化合物處理之對照細胞或組織內之表現模式且分析所產生之模式的差示基因表現量，因為該等模式係關於例如所檢驗之基因的疾病關聯(disease association)、信號傳導路徑、細胞定位(cellular localization)、表現量、尺寸、結構或功能。可在影響表現模式之其他化合物存在或不存在下對受激或未受激細胞進行此等分析。

除可用於人類治療之外，本發明之化合物及調配物亦可用於伴侶動物(例如犬、貓)、外來動物及農畜(例如馬)(包括哺乳動物、齧齒動物及其類似動物)之獸醫治療。

因此，在第六態樣中，本發明係關於如本文所定義之式A化合物用於製備供治療具有突變KRAS、NRAS或HRAS基因之病患中之肝細胞腫瘤用之藥劑的用途。

以下所提供之實例及製備進一步闡明並例示本發明之化合物及 製備該等化合物之方法。應瞭解，本發明之範疇不以任何方式限於以下實例及製備之範疇。

實例 化合物之合成 實例1：N-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯胺基)苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺： 步驟A：環丙烷磺酸丁酯：

將環丙烷磺醯氯(5g，35mmol，1當量)溶解於過量BuOH(20ml)中，在-10℃下冷卻反應混合物且緩慢地逐滴添加吡啶(5.8mL，70mmol，2當量)。使混合物緩慢溫至室溫且攪拌隔夜。在減壓下移除溶劑且將所得白色固體溶解於CHCl₃中。有機相用水、鹽水洗滌且乾燥(MgSO4)並濃縮，得到油狀物(4.8g，24.9mmol，71%)。¹H NMR(300MHz,CDCl₃)：δ 4.25(t,2H),2.46(m,1H),1.74(m,2H),1.45(m,2H),1.25(dd,2H),1.09(dd,2H),0.93(t,3H)。

步驟B：1-烯丙基環丙烷-1-磺酸丁酯：

在-78℃下，在氮氣氛圍下，向環丙烷磺酸1-丁酯(4.8g，24.9mmol)於THF中之溶液中同時添加丁基鋰溶液(15.6ml，24.9mmol，1.6M，THF)及碘丙烯(24.9mmol)。反應混合物在-78℃下攪拌2小時且在室溫下攪拌3小時。在減壓下蒸發揮發物且用CH₂Cl₂(100ml)萃取殘餘物。萃取物用水洗滌，乾燥(MgSO₄)且蒸發。殘餘物經矽膠層析法(溶離劑：己烷/CH₂Cl₂)純化，得到呈無色油狀之標題產物(3.75g，69.0%)。¹H NMR(300MHz,CDCl₃)：δ 5.6(m,1H),5.13-5.08(t, 2H),4.21(t,2H),2.65(d,2H),1.7(m,2H),1.4(m,4H),0.93(m,5H)。

步驟C：1-烯丙基環丙烷-1-磺酸鉀：

使1-甲基-環丙烷磺酸1-丁酯(3.75g，17.2mmol)及硫氰酸鉀(1.7g，17.2mmol)於DME(20ml)及水(20ml)中之混合物回流16小時。蒸發揮發物以獲得粗磺酸酯(3.44g，定量)，其在50℃下於真空下乾燥16小時。粗產物未經進一步純化即用於下一反應中。¹H NMR(CDCl₃)：δ 5.6(m,1H),4.91-4.85(dd,2H),2.471-2.397(d,2H),0.756(m,2H),0.322(m,2H)。

步驟D：1-烯丙基環丙烷-1-磺醯氯：

使1-烯丙基環丙烷-1-磺酸鉀(3.44g，17.2mmol)、亞硫醯氯(10ml)及DMF(5滴)之溶液在60℃下回流16小時。在減壓下蒸發揮發物且用CH₂Cl₂(50ml)萃取殘餘物。萃取物用水洗滌，乾燥(MgSO₄)且蒸發，獲得呈黃色黏性油狀之粗產物，其用己烷洗滌且未經進一步純化即用於下一反應中(2.7g，15mmol，87%)。¹HNMR(300MHz,CDCl₃)：δ 5.728(m,1H),5.191(t,2H),2.9(d,2H),0.756(m,2H),0.322(m,2H)。

步驟E：1-烯丙基-N-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯胺基)苯基)環丙烷-1-磺醯胺：

根據一般程序B，使5,6-二氟-N1-(2-氟-4-碘苯基)苯-1,2-二胺與1- 烯丙基環丙烷-1-磺醯氯反應，獲得所需產物。m/z=507[M-1]^-。

步驟F：N-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯胺基)苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺：

將1-烯丙基-N-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯胺基)苯基)環丙烷-1-磺醯胺(0.77g，1.52mmol)及4-甲基嗎啉N-氧化物(0.18g，1.52mmol)溶解於THF(50mL)中。在室溫下添加四氧化鋨(0.152mmol，0.965mL，4% H₂O溶液)且反應混合物在室溫下攪拌16小時。添加EtOAc，有機相用水洗滌，乾燥(MgSO₄)且在減壓下濃縮。殘餘物經矽膠層析法(溶離劑：EtOAc/MeOH)純化，獲得標題產物(0.65g，79%)。¹H NMR(300MHz,CDCl₃+D₂O)：δ 7.38(dd,J=1.8及10.5Hz,1H),7.36(ddd,J=2.4,5.1及9.3Hz,1H),7.25(d,J=8.7Hz,1H),7.02(dd,J=9.0及17.7Hz,1H),6.27(dt,J=3.0,8.7及17.4Hz,1H),3.92(m,1H),3.54(dd,J=3.9及11.1Hz,1H),3.39(dd,J=6.6及11.1Hz,1H),2.16(dd,J=9.6及15.9Hz,1H),1.59(d,J=14.1Hz,1H),1.41(m,1H),1.26(m,1H),0.83(m,2H)；m/z=542[M-1]^-。

實例1A：(S)-N-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯胺基)苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺：

純S異構體藉由對掌性HPLC分離外消旋混合物(實例13)而獲得。¹H NMR(300MHz,CDCl₃+D₂O)：δ 7.38(dd,J=1.8及10.5Hz,1H),7.36(ddd,J=2.4,5.1及9.3Hz,1H),7.25(d,J=8.7Hz,1H),7.02(dd, J=9.0及17.7Hz,1H),6.27(dt,J=3.0,8.7及17.4Hz,1H),3.92(m,1H),3.54(dd,J=3.9及11.1Hz,1H),3.39(dd,J=6.6及11.1Hz,1H),2.16(dd,J=9.6及15.9Hz,1H),1.59(d,J=14.1Hz,1H),1.41(m,1H),1.26(m,1H),0.83(m,2H)；m/z=542[M-1]^-。

實例1B：實例1A：(R)-N-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯胺基)苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺：

純R異構體藉由對掌性HPLC分離外消旋混合物(實例13)而獲得。¹H NMR(300MHz,CDCl₃+D₂O)：δ 7.38(dd,J=1.8及10.5Hz,1H),7.36(ddd,J=2.4,5.1及9.3Hz,1H),7.25(d,J=8.7Hz,1H),7.02(dd,J=9.0及17.7Hz,1H),6.27(dt,J=3.0,8.7及17.4Hz,1H),3.92(m,1H),3.54(dd,J=3.9及11.1Hz,1H),3.39(dd,J=6.6及11.1Hz,1H),2.16(dd,J=9.6及15.9Hz,1H),1.59(d,J=14.1Hz,1H),1.41(m,1H),1.26(m,1H),0.83(m,2H)；m/z=542[M-1]^-。

實例2：1-(2,3-二羥基-丙基)-環丙烷磺酸[3,4,6-三氟-2-(4-氟-2-碘-苯 胺基)-苯基]-醯胺： 步驟A：1-烯丙基-環丙烷磺酸[3,4,6-三氟-2-(2-氟-4-碘-苯胺基)苯基]-醯胺：

向胺(亦即3,5,6-三氟-N¹-(2-氟-4-碘苯基)苯-1,2-二胺)(1當量)於無水吡啶(5ml/mmol)中之經攪拌溶液中添加磺醯氯(亦即1-烯丙基-環 丙烷磺醯氯)(1-5當量)。在40℃下攪拌反應混合物48小時。使反應混合物分配於水與EtOAc之間。有機層用鹽水洗滌，乾燥(MgSO₄)且在減壓下濃縮。殘餘物藉由矽膠急驟管柱層析法來純化。¹H NMR(CDCl₃,300MHz)：δ 7.41(dd,1H),7.38(dd,1H),7.09(s,1H),6.78(m,1H),6.49(m,1H),5.96(s,1H),5.86(m,1H),5.18(d,2H),2.76(d,2H),1.23(m,2H),0.872(m,2H)。

步驟B：1-(2,3-二羥基丙基)-N-(3,4,6-三氟-2-(2-氟-4-碘苯胺基)苯基)環丙烷-1-磺醯胺：

將1-烯丙基-環丙烷磺酸[3,4,6-三氟-2-(2-氟-4-碘-苯胺基)-苯基]-醯胺(110mg，0.21mmol)及4-甲基嗎啉N-氧化物(24.6mg，0.21mmol)溶解於THF(8mL)中。在室溫下添加四氧化鋨(0.021mmol，0.153mL，4% H₂O溶液)且在室溫下攪拌反應混合物16小時。添加EtOAc，有機相用水洗滌，乾燥(MgSO₄)且在減壓下濃縮。殘餘物經矽膠層析法(溶離劑：EtOAc/MeOH)純化，獲得標題產物(0.89g，75%)。¹H NMR(CDCl₃,300MHz)：δ 7.39(dd,J=1.5及10.6Hz,1H),7.29(d,J=8.8Hz,1H),7.28(s,1H),6.97(s,1H),6.76(m,1H),6.49(m,1H),4.13(m,1H),3.66(dd,J=3.7及11.4Hz,1H),3.53(dd.J=6.7及11.2Hz,1H),2.50(dd,J=10.0及16.1Hz,1H),1.6(m,1H),1.46(m,1H),1.28(m,1H),1.20(m,2H),0.92(m,2H)；m/z=559[M-1]^-。

實例2A：(S)-1-(2,3-二羥基丙基)-N-(3,4,6-三氟-2-(2-氟-4-碘苯胺基)苯基)環丙烷-1-磺醯胺

藉由對掌性HPLC分離外消旋混合物(實例52)來獲得純S異構體。¹H NMR(CDCl₃,300MHz)：δ 7.39(dd,J=1.5及10.6Hz₅ 1H),7.29(d,J=8.8Hz,1H),7.28(s,1H),6.97(s,1H),6.76(m,1H),6.49(m,1H),4.13(m,1H),3.66(dd,J=3.7及11.4Hz₅ 1H),3.53(dd,J=6.7及11.2Hz,1H),2.50(dd,J=10.0及16.1Hz,1H),1.6(m,1H),1.46(m,1H),1.28(m,1H),1.20(m,2H),0.92(m,2H)；m/z=559[M-1]^-。

實例2B：(R)-1-(2,3-二羥基丙基)-N-(3,4,6-三氟-2-(2-氟-4-碘苯胺基)苯基)環丙烷-1-磺醯胺

藉由對掌性HPLC分離外消旋混合物(實例52)來獲得純R異構體。¹H NMR(CDCl₃,300MHz)：δ 7.39(dd,J=1.5及10.6Hz,1H),7.29(d,J=8.8Hz,1H),7.28(s,1H),6.97(s,1H),6.76(m,1H),6.49(m,1H),4.13(m,1H),3.66(dd,J=3.7及11.4Hz,1H),3.53(dd,J=6.7及11.2Hz,1H),2.50(dd,J=10.0及16.1Hz,1H),1.6(m,1H),1.46(m,1H),1.28(m,1H),1.20(m,2H),0.92(m,2H)；m/z=559[M-1]^-。

實例3：合成N-(4-(2-氟-4-碘苯胺基)-1,5-二甲基-6-側氧基-1,6-二氫吡 啶-3-基)環丙烷磺醯胺： 步驟a：2-甲基-3-側氧基戊烷二酸二乙酯：

此化合物根據美國專利第6,833,471號來合成。向已用Ar(氣體) 吹掃之20mL無水THF中添加3-側氧基戊烷二酸二乙酯(5mL，27.54mmol)且使溶液冷卻至-15℃，隨後逐滴添加LDA(2M)(15mL，30mmol)。使反應維持在Ar(氣體)下於-15℃下，且緩慢添加MeI(3mL，48.2mmol)。使反應經3小時逐漸達到室溫，且繼續攪拌隔夜。18小時後，將反應混合物傾入140mL 0.5N HCl(水溶液)與Et₂O之1：1混合物中。分離有機層，且水層用Et₂O(15mL×2)萃取兩次。合併有機層，用鹽水洗滌，乾燥(MgSO₄)且濃縮，得到黃色油狀物，其經急驟層析純化(SiO₂，己烷：EtOAc=8：2(v：v))，得到無色/淺黃色油狀之標題化合物。(1.37g，23%產率)。MW m/z：215.3(MW-1，低強度)。¹H NMR(CDCl₃,300Hz)δ ppm 4.20(q,4H),3.68(q,1H),3.60(dd,2H),1.37(d,3H),1.26(t,6H)。

步驟b：4-羥基-1,5-二甲基-6-側氧基-1,6-二氫吡啶-3-甲酸乙酯：

將原甲酸三乙酯(1.25mL，7.51mmol)及Ac₂O(2mL)添加至2-甲基-3-側氧基戊烷二酸二乙酯(1.37g，6.34mmol)中且加熱至135℃。1.5小時後，將反應混合物冷卻至室溫且在減壓下濃縮。所得殘餘物在冰水浴下冷卻至0℃，且添加MeNH₂(40%水溶液)(3mL)。所得混合物在室溫下攪拌16小時。添加HCl水溶液(1N)直至pH值約為7。用EtOAc(30mL×2)萃取溶液。經合併之有機層用鹽水洗滌，乾燥(MgSO₄)且濃縮，得到固體，其藉由急驟層析(SiO₂，EtOAc：DCM=1：1(v：v)，Rf約0.4)純化，得到灰白色固體狀標題化合物。(314mg，23%產率)。MW m/z：212.2(MW+1)；234.2(MW+Na)；210.2(MW-1)。¹H NMR(DMSO-d6,300Hz)：δ ppm 10.71(s,br,1H),8.46(s,1H),4.32(q,J=7.2Hz,2H),3.45(s,3H),1.83(s,3H),1.30(t,J=7.2Hz,3H)。

步驟c：4-氯-1,5-二甲基-6-側氧基-1,6-二氫吡啶-3-甲酸酯：

向溶解於無水甲苯(13mL)中之4-羥基-1,5-二甲基-6-側氧基-1,6-二氫吡啶-3-甲酸乙酯(310mg，1.47mmol)之混合物中添加POCl₃(600μL，6.44mmol)。將所得混合物加熱至110℃，持續3小時。在冷卻至室溫之後，將混合物傾入冰冷之NaHCO₃飽和水溶液(50mL)中，使其呈鹼性。用EtOAc(50mL×2)萃取混合物。合併有機層，用鹽水洗滌，乾燥(MgSO₄)且濃縮，得到棕色固體，其藉由TLC(SiO₂，EtOAc：DCM=6：4 v：v；Rf約0.6)純化，得到灰白色固體狀標題化合物。(178mg，53%產率)。MW m/z：231.3(MW+1)；227.8(MW-1)。¹H NMR(DMSO-d6,300Hz)：δ ppm 8.04(s,1H),4.33(q,J=7.2Hz,2H),3.59(s,3H),2.27(s,3H),1.37(t,J=7.2Hz,3H)。

步驟d：4-氯-1,5-二甲基-6-側氧基-1,6-二氫吡啶-3-甲酸：

向溶解於THF：MeOH之4：1混合物(5mL)(v：v)中之4-氯-1,5-二甲基-6-側氧基-1,6-二氫吡啶-3-甲酸乙酯(172mg，0.75mmol)之溶液中添加LiOH水溶液(1.52mmol，1M)。在攪拌40分鐘後，用HCl(1N，水溶液)酸化反應混合物至pH值約1且用EtOAc(30mL×3)萃取。用鹽水(30mL)洗滌經合併之有機層，乾燥(MgSO₄)，過濾且在減壓下濃縮，得到灰白色固體狀標題化合物。(163mg，100%產率)。MW m/z：202.3(MW+1)，204.2(MW+1+Cl模式)；200.4(MW-1)，202.4(MW-1+Cl模式)。¹H NMR(DMSO-d6,300Hz)：δ ppm 12.97(s,1H),8.42(s,1H),3.48(s,3H),2.10(s,3H)。

步驟e：4-(2-氟-4-碘苯胺基)-1,5-二甲基-6-側氧基-1,6-二氫吡啶-3-甲 酸：

向冷卻至-78℃之2-氟-4-碘苯胺(470mg，1.94mmol)於無水THF(4mL)中之經攪拌溶液中添加LDA(2M，於THF中)(1.35mL，2.70mmol)。在此溫度下劇烈攪拌10分鐘後，經由注射器逐滴添加溶解於無水THF(8mL)中之4-氯-1,5-二甲基-6-側氧基-1,6-二氫吡啶-3-甲酸(160mg，0.792mmol)之溶液。1小時後移除乾冰浴，且在室溫下攪拌反應物16小時。此時，LC/MS表明反應混合物中有23%之標題產物及33%之未反應氯化物。在室溫下再繼續攪拌同一反應混合物24小時。隨後在乾冰/丙酮浴下使混合物再冷卻至-78℃。將額外的LDA(1.35mL，2.70mmol)(2M，於THF中)添加至反應混合物中且在16小時內緩慢溫至室溫直至LC/MS顯示氯化物物質被消耗完。將混合物冷卻至-5℃，且添加HCl水溶液(1N)(15mL)。用EtOAc(15mL×3)萃取溶液。乾燥(MgSO₄)且濃縮經合併之有機層，得到殘餘物，其用DCM濕磨得到固體。標題化合物未經進一步純化即用於下一反應。(165mg，52%產率)。MW m/z：403.13(MW+1),401.18(MW-1)。¹H NMR(DMSO-d6,300Hz)：δ ppm 13.26(s,br,1H),9.08(s,1H),8.48(s,1H),7.62(d,J=10.8Hz,1H),7.39(d,J=8.1Hz,1H),6.49(t,J=8.7Hz,1H),3.48(s,3H),1.58(s,3H)。

步驟f：1-(2-氟-4-碘苯基)-5,7-二甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶- 2,6(3H,5H)-二酮：

向4-(2-氟-4-碘苯胺基)-1,5-二甲基-6-側氧基-1,6-二氫吡啶-3-甲酸(148mg，0.368mmol)於無水甲苯(15mL)中之懸浮液中相繼添加 DPPA(95μL，0.439mmol)及TEA(56μL，0.40mmol)。溶液變成澄清粉紅色且在氬氣下加熱至100℃，持續4小時，此時LC/MS表明起始物質完全消失。添加HCl水溶液(1N)(25mL)，且用EtOAc(15mL×3)萃取溶液。用鹽水洗滌經合併之有機層，乾燥(MgSO₄)且濃縮，得到油狀殘餘物，其經由急驟層析法(SiO₂，EtOAc：MeOH=9：1，Rf約0.25)純化，得到灰白色固體狀標題化合物。(139mg，95%產率)。MW m/z：400.1(MW+1)，398.2(MW-1)。¹H NMR(DMSO-d6,300Hz)：δ ppm 10.95(s,1H),7.90(dd,J=9.6Hz,1H),7.73(d,J=8.4Hz,1H),7.36(t,J=8.4Hz,1H),7.35(s,1H),3.40(s,3H),1.47(s,3H)。

步驟g： N-(4-(2-氟-4-碘苯胺基)-1,5-二甲基-6-側氧基-1,6-二氫吡啶-3- 基)環丙烷磺醯胺：

向在冰浴中冷卻至0℃以下的溶解於中無水DMF(2mL)中之1-(2-氟-4-碘苯基)-5,7-二甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2,6(3H,5H)-二酮(23mg，0.0576)之溶液中添加NaH(60%，於礦物油中)(5.0mg，0.125mmol)。在添加之後移除冷卻浴且使溶液在室溫下攪拌1小時。使同一溶液在乾冰/丙酮浴中再冷卻至-5℃，且緩慢添加溶解於無水THF(0.5mL)中之環丙烷磺醯氯(28mg，0.20mmol)。使混合物溫至室溫且再攪拌16小時。使反應混合物冷卻至0℃，相繼添加另一NaH(60%，於油中)(5.0mg，0.125mmol)及環丙烷磺醯氯(15mg，0.11mmol)。在室溫下再攪拌溶液5小時。向同一反應混合物中添加NaOH水溶液(1N)(5mL)。將混合物加熱至65℃，持續40分鐘。冷卻至室溫後，添加HCl水溶液(1N)(25mL)以酸化溶液，用EtOAc(15mL×3)萃取該溶液。用鹽水洗滌經合併之有機層，乾燥(MgSO₄)且在減壓下濃縮，得到殘餘物，其用HPLC純化。(9.6mg，35%產率)。MW m/z：478.08(MW+1)，476.10(MW-1)。¹H NMR(DMSO-d6,300Hz)：δ ppm 8.89(s,1H),7.65(s,1H),7.56(dd,J=10.8,1.5Hz,1H),7.42(s,1H),7,0(d,J=8.7Hz,1H),6.34(t,J=8.7Hz,1H),3.43(s,3H),2.43(m,2H),1.65(s,3H),0.69-0.79(m,4H)。

實例4：合成N-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯胺基)苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺： 步驟A：1-烯丙基-N-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯胺基)-6-甲氧基苯基)環丙烷-1-磺醯胺

根據一般程序B，使1-烯丙基-環丙烷磺醯氯與5,6-二氟-N1-(2-氟-4-碘苯基)-3-甲氧基苯-1,2-二胺反應，獲得標題產物。¹H NMR(CDCl₃,300MHz)：δ 7.417(dd,1H),7.309(s,1H),7.25(m,1H),6.89(m,1H),6.52(m,1H),6.427(m,1H),6.03(s,1H),5.668(m,1H),5.11(t,1H),3.9(s,3H),2.75(d,2H),1.21(m,2H),0.767(m,2H)。

步驟B：N-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯胺基)苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺

使1-烯丙基-N-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯胺基)-6-甲氧基苯基)環丙烷-1-磺醯胺(97mg，0.18mmol)及4-甲基嗎啉N-氧化物(21mg，0.18mmol)溶解於THF(8mL)中。在室溫下添加四氧化鋨(0.018mmol，0.13mL，4% H₂O溶液)且在室溫下攪拌反應混合物16小時。添加 EtOAc，用水洗滌有機相，乾燥(MgSO₄)且在減壓下濃縮。殘餘物經矽膠層析法(溶離劑：EtOAc/MeOH)純化，獲得標題產物(0.80g，78%)。¹H NMR(CDCl₃,300MHz)：δ 7.38(dd,J=1.7及10.3Hz,1H),7.26(m,1H),7.14(s,1H),6.87(s,1H),6.53(dd,J=6.8及11.4Hz,1H),6.43(m,1H),4.06(m,1H),3.89(s,3H),3.63(dd,J=3.7及11.1Hz,1H),3.49(dd,J=6.4及11.1Hz,1H),2.3(dd,J=9.7及16.1Hz,1H),1.77(dd,J=1.9及16.0Hz,1H),1.37(m,1H),1.25(m,1H),1.21(m,2H),0.86(m,2H)；m/z=571[M-1]^-。

實例5：合成N-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2-羥乙基)環丙烷-1-磺醯胺： 步驟A：經TBS保護之N-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2-羥乙基)環丙烷-1-磺醯胺：

根據一般程序B，使磺醯氯與5,6-二氟-N1-(2-氟-4-碘苯基)-3-甲氧基-苯-1,2-二胺反應，獲得標題產物。產量：37%。¹H-NMR(300MHz,CDCl₃)：δ=7.40-7.34(dd,1H),7.23-7.21(m,1H),6.61(s,1H,br),6.57-6.49(dd,1H),6.48-6.39(m,1H),3.9-3.7(m,5H),2.15-2.05(t,2H),1.30-1.20(m,2H),0.95-0.80(m,11H),0.05(s,6H)；m/z=655[M-1]^-。

步驟B：N-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2-羥乙基)環丙烷-1-磺醯胺：

產率：100%。¹H-NMR(300MHz,CDCl₃)：δ=7.40-7.34(dd,1H),7.23-7.21(m,1H),6.61(s,1H,br),6.57-6.49(dd,1H),6.48-6.39(m,1H),3.9-3.7(m,5H),2.15-2.05(t,2H),1.30-1.20(m,2H),0.95-0.80(m,2H)；m/z=541[M-1]^-。

實例6：合成(S)-N-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺

藉由對掌性HPLC分離外消旋混合物(實例5)而獲得純S異構體。¹H NMR(CDCl₃，300MHz)：δ 7.38(dd,J=1.7及10.3Hz,1H),7.26(m,1H),7.14(s,1H),6.87(s,1H),6.53(dd,J=6.8及11.4Hz,1H),6.43(m,1H),4.06(m,1H),3.89(s,3H),3.63(dd,J=3.7及11.1Hz,1H),3.49(dd,J=6.4及11.1Hz,1H),2.3(dd,J=9.7及16.1Hz,1H),1.77(dd,J=1.9及16.0Hz,1H),1.37(m,1H),1.25(m,1H),1.21(m,2H),0.86(m,2H)；m/z=571[M-1]^-。

實例7：合成(R)-N-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺

藉由對掌性HPLC分離外消旋混合物(實例5)而獲得純R異構體。¹H NMR(CDCl₃,300MHz)：δ 7.38(dd,J=1.7及10.3Hz,1H),7.26(m,1H),7.14(s,1H),6.87(s,1H),6.53(dd,J=6.8及11.4Hz,1H),6.43(m,1H),4.06(m,1H),3.89(s,3H),3.63(dd,J=3.7及11.1Hz,1H),3.49(dd,J=6.4及11.1Hz,1H),2.3(dd,J=9.7及16.1Hz,1H),1.77(dd,J=1.9及16.0Hz,1H),1.37(m,1H),1.25(m,1H),1.21(m,2H),0.86(m,2H)；m/z=571[M-1]^-。

生物學 研究設計

該研究為單一組別、開放標籤、多中心II期研究。病患招收自南韓、臺灣、香港及新加坡之14個中心。

病患納入準則包括：

○診斷有不可切除之晚期或轉移性HCC；Child-Pugh A狀態；東部合作腫瘤小組機能狀態(ECOG PS)0或1；年齡18歲；1個未經治療之一維可量測病灶。

病患排除準則包括：

○在研究開始之前，先前用BAY 86-9766或索拉非尼治療；針對HCC之先前全身性抗癌療法；任何先前或並行癌症3年。

劑量及投藥

符合條件之病患每天兩次接受(S)-N-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯胺基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羥基丙基)環丙烷-1-磺醯胺[化合物1](50mg，經口)以及口服索拉非尼(在週期1中每天600mg：早晨200mg及 晚上400mg)。

○在週期2中，若未出現手-足皮膚反應、疲勞或2級之胃腸毒性，則索拉非尼劑量遞增至每天兩次400mg。

基於連續方式投與治療直至達到疾病進程(PD)、臨床進程或關於中斷治療之其他準則。若報導臨床上顯著血液學或其他藥物相關毒性，則進行劑量修改。

功效評估

主要功效變數為疾病控制率(DCR)，根據實體腫瘤反應評估準則(RECIST)1.1版，疾病控制率定義為在研究持續時間內具有完全反應、部分反應或穩定疾病之最佳反應評定的病患比例。次要功效變數包括達PD及OS之時間。在篩選時及在治療(在週期2之最後10天內開始)期間每6週進行腫瘤評估直至PD或研究治療結束。

KRAS及NRAS突變偵測

分析5種不同基因：BRAF、CSF-1R、KRAS、NRAS及PIK3CA。評估自26(23+3)名病患中之18名病患收集的血漿中之突變，參見表3。

用於偵測突變型RAS基因或蛋白質之若干方法為已知的且在市場上可獲得，例如由Roche出售之cobas® KRAS突變測試。其他方法論述在以下公開案中：- Diehl F, Li M, He Y, Kinzler KW, Vogelstein B, Dressman D. (2006) BEAMing：single-molecule PCR on micoparticles in water-in-oil Emulsions. Nat Methods. 2006年7月；3(7)：551-9，及- Diehl F., Schmidt K., Choti M.A., Romans K., Goodman S., Li M., Thornton K., Agrawal N., Sokoll L., Szabo S.A., Kinzler K.W., Vogelstein B., Diaz L.A. Jr. (2008) Circulating mutant DNA to assess tumor dynamics. Nature Medicine 14, 985-90。

結果 病患人口統計及在基線時之疾病特徵

●在該研究中所招收之95名病患中，指派70名用於研究治療；●所有病患皆為亞洲人種且大部分為男性(86%)(表2)；●登記平均年齡為55歲。幾乎75%病患之年齡65歲。

化合物1及索拉非尼療法之功效

在彼等病患中，23名(40%)具有穩定疾病(10週)且三名(5%)具有經證實之部分反應，導致總DCR為45%(表3)。

隨機測試26(23+3)名病患中之18名病患。在18份血漿樣本中之3份中偵測到RAs突變：KRAS G12A、KRAS G12R及NRAS Q61K。已接受包含化合物1及索拉非尼之組合的所有3名病患皆顯示長期且持久的部分反應。

關於BRAF、PIK3CA或CSF-1R基因未鑑別到突變。

Claims (12)

1. 一種定義為突變RAS之一或多種生物標記之用途，其用於預測待投與至HCC病患之包含MEK蛋白激酶抑制劑及索拉非尼(Sorafenib)或瑞戈非尼(Regorafenib)之組合的醫藥功效或臨床反應。
2. 一種如請求項1之定義為RAS基因或RAS蛋白之一種生物標記的用途。
3. 如請求項1或2之用途，其中RAS為KRAS、NRAS或HRAS。
4. 如請求項3之用途，其中RAS為KRAS或NRAS。
5. 如請求項1或2之用途，其中該MEK蛋白激酶抑制劑為式A化合物或其醫藥學上可接受之鹽、溶劑合物、多晶型物、酯、醯胺、互變異構體或前藥： 其中G為G₁、G₂、R_1a、R_1b、R_1c、R_1d、R_1e、Ar₁、Ar₂或Ar₃；R_a0、R₁及R₂獨立地選自H、鹵素、氰基、氰甲基、硝基、二氟甲氧基、三氟甲基、疊氮基、胺基、烷胺基、二烷胺基、CO₂R₅、OR₅、-O-(CO)-R₅、-O-C(O)-N(R₅)₂、-NR₅C(O)NR₆R₇、-SR₅、NHC(O)R₅、-NHSO₂R₅、SO₂N(R₅)₂、C1-C6烷基、C1-C4烷氧基、C3-C6環烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、芳基、烷基芳基、芳基烷基及雜環基；各R₅係選自H、低碳烷基、經取代之低碳烷基、芳基或經取 代之芳基及NR₇R₆；其中各R₆及R₇獨立地選自氫或低碳烷基；其中該等烷基、環烷基、烯基、芳基、烷基芳基、芳基烷基、雜環基及炔基視情況經1-3個獨立地選自以下之取代基取代：鹵素、OH、CN、氰甲基、硝基、苯基、二氟甲氧基及三氟甲基；該等C1-C6烷基及C1-C4烷氧基視情況經OCH₃或OCH₂CH₃取代；R_a1為H、C₁-C₆烷基、C₃-C₆環烷基、C₂-C₆烯基、C₅-C₆環烯基或C₂-C₆炔基；其中各烷基、環烷基、烯基、環烯基或炔基視情況經1-3個獨立地選自以下之取代基取代：鹵素、羥基、C₁-C₄烷基、C₁-C₄烷氧基、氰基、氰甲基、硝基、疊氮基、三氟甲基、二氟甲氧基及苯基，及該等C₃-C₆環烷基之一個或兩個環碳原子視情況獨立地經O、N或S置換；或R_a1為5或6原子雜環基團，該基團可為含有1-5個獨立地選自O、N及S之雜原子之飽和、不飽和或芳族基團，該雜環基團視情況經1-3個獨立地選自以下之取代基取代：鹵素、羥基、C₁-C₄烷基、C₁-C₄烷氧基、氰基、氰甲基、硝基、疊氮基、三氟甲基、二氟甲氧基及苯基；R_a2為H、鹵素、F或側氧基；或R_a1及R_a2結合在一起為-Q(R₂)-U(R₁)=D-；R_a3為H、鹵素、羥基、疊氮基、氰基、氰甲基、C₁-C₆烷基、C₃-C₆環烷基、C₂-C₆烯基、C₅-C₆環烯基或C₂-C₆炔基，其中各烷基、環烷基、烯基、環烯基或炔基視情況經1-3個獨立地選自以 下之取代基取代：鹵素、羥基、C₁-C₄烷氧基、氰基、氰甲基、硝基、疊氮基、三氟甲基及苯基；為單鍵或雙鍵；X及Y獨立地選自F、I、Br、Cl、CF₃、C1-C3烷基、C2-C3烯基、C2-C3炔基、環丙基、苯基、吡啶基、吡唑基、OMe、OEt或SMe或Het，其中Het為5至10員單環或雙環雜環基團，該基團為含有1-5個獨立地選自N、O及S之環雜原子之飽和、烯系或芳族基團；其中所有該等苯基或Het基團視情況經以下取代：F、Cl、Br、I、乙醯基、甲基、CN、NO₂、CO₂H、C₁-C₃烷基、C₁-C₃烷氧基、C₁-C₃烷基-C(=O)-、C₁-C₃烷基-C(=S)-、C₁-C₃烷氧基-C(=S)-、C₁-C₃烷基-C(=O)O-、C₁-C₃烷基-O-(C=O)-、C₁-C₃烷基-C(=O)NH-、C₁-C₃烷基-C(=NH)NH-、C₁-C₃烷基-NH-(C=O)-、二-C₁-C₃烷基-N-(C=O)-、C₁-C₃烷基-C(=O)N(C₁-C₃烷基)-、C₁-C₃烷基-S(=O)₂NH-或三氟甲基；X及Y之所有該等甲基、乙基、C1-C3烷基及環丙基視情況經OH取代；Y之所有該等苯基、吡啶基、吡唑基視情況經鹵素、乙醯基、甲基及三氟甲基取代；及X及Y之所有該等甲基視情況經一個、兩個或三個F原子取代；A、D、J、L、Q、U獨立地選自C、CH、-NH、N、O及-N(CH₃)-；G₁為視情況經一個胺基、C₁-C₃烷胺基或二烷胺基取代之C₁-C₆烷基，該二烷胺基包含可相同或不相同之兩個C₁-C₄烷基；或G₁為C₃-C₈二胺基烷基； G₂為含有1-3個獨立地選自N、O及S之環雜原子的視情況經1-3個獨立地選自以下之取代基取代的飽和、不飽和或芳族5或6員環：F、Cl、OH、O(C₁-C₃烷基)、OCH₃、OCH₂CH₃、CH₃C(=O)NH、CH₃C(=O)O、CN、CF₃；及含有1-4個獨立地選自N、O及S之環雜原子之5員芳族雜環基團；R_1a為甲基、環丙氧基或C1-C4烷氧基；其中該甲基視情況經OH、1-3個氟原子或1-3個氯原子取代；該C1-C4烷氧基之C1-C4烷基部分視情況經一個羥基或甲氧基取代；及該C1-C4烷氧基內之所有C2-C4烷基視情況進一步經第二個OH基團取代；R_1b為CH(CH₃)-C1-3烷基或C3-C6環烷基，該等CH₃、烷基及環烷基視情況經1-3個獨立地選自以下之取代基取代：F、Cl、Br、I、OH、C1-C4烷氧基及CN；R_1c為(CH₂)_nO_mR'，其中m為0或1；n為0、1、2或3；R'為C1-C6烷基，視情況經1-3個獨立地選自以下之取代基取代：F、Cl、OH、OCH₃、OCH₂CH₃及C3-C6環烷基；R_1d為C(A')(A")(B)-，其中B、A'及A"獨立地為H、經取代或未經取代之C1-6烷基、經取代或未經取代之C2-6烯基，或A'及A"與其所連接之碳原子一起形成經取代或未經取代之3至6員飽和環；R_1e為苯甲基或2-苯基乙基，其中該苯基為視情況經取代之 ，其中q為1或2；R₈及R₉獨立地為H、F、Cl、Br、CH₃、CH₂F、CHF₂、CF₃、OCH₃、OCH₂F、OCHF₂、OCF₃、乙基、正丙基、異丙基、環丙基、異丁基、第二丁基、第三丁基及甲基磺醯基；R₁₀為H、F、Cl、Br、CH₃、CH₂F、CHF₂、CF₃、OCH₃、OCH₂F、OCHF₂、OCF₃、乙基、正丙基、異丙基、環丙基、異丁基、第二丁基、第三丁基及甲基磺醯基、硝基、乙醯胺基、脒基、氰基、胺甲醯基、甲基胺甲醯基、二甲基胺甲醯基、1,3,4-噁二唑-2-基、5-甲基-1,3,4-噁二唑基、1,3,4-噻二唑基、5-甲基-1,3,4-噻二唑-1H-四唑基、N-嗎啉基羰胺基、N-嗎啉基磺醯基或N-吡咯啶基羰胺基；R₁₁及R₁₂獨立地為H、F、Cl或甲基；Ar₁為 ，其中W及V獨立地為N、CR₈或CR₉；R₈、R₉及R₁₀獨立地為H、F、Cl、Br、CH₃、CH₂F、CHF₂、CF₃、OCH₃、OCH₂F、OCHF₂、OCF₃、乙基、正丙基、異丙基、環丙基、異丁基、第二丁基、第三丁基及甲基磺醯基、硝基、乙醯胺基、脒基、氰基、胺甲醯基、甲基胺甲醯基、二甲基胺甲醯基、1,3,4-噁二唑-2-基、5-甲基-1,3,4-噁二唑、1,3,4-噻二唑、5-甲基-1,3,4-噻二唑、1H-四唑基、N-嗎啉基羰胺基、N-嗎啉基磺醯基及N-吡咯啶基羰胺基；R₁₁及R₁₂獨立地為H、F、Cl或甲基； Ar₂為，其中虛線表示可形式上定位在V與介於W與V之間的碳之間或在W與介於W與V之間的碳之間的雙鍵；W為-S-、-O-或-N=，其中當W為-O-或-S-時，V為-CH=、-CCl=或-N=；及當W為-N=時，V為CH、CCl、N或-NCH₃-；R₁₃及R₁₄獨立地為H、甲氧羰基、甲基胺甲醯基、乙醯胺基、乙醯基、甲基、乙基、三氟甲基或鹵素；Ar₃為 ，其中W為-NH-、-NCH₃-或-O-；及R₁₃及R₁₄獨立地為H、F、Cl或甲基。
6. 如請求項1或2之用途，其中該組合包含具有以下結構之該MEK蛋白激酶： 且其中2-OH碳呈S組態，以及索拉非尼。
7. 如請求項1或2之用途，其中該組合包含具有以下結構之該MEK蛋白激酶抑制劑： 且其中2-OH碳呈S組態，以及瑞戈非尼。
8. 一種定義為突變RAS之一或多種生物標記的用途，其用於預測待投與至HCC病患之至少一種MEK蛋白激酶抑制劑之醫藥功效或 臨床反應。
9. 一種定義為突變RAS之一或多種生物標記的用途，其用於預測待投與至HCC病患之索拉非尼或瑞戈非尼之醫藥功效或臨床反應。
10. 一種活體外方法，其包含以下步驟：鑑別自HCC病患獲得之測試樣本中之突變型RAS基因及/或蛋白質，其中該方法係用於預測待投與至HCC病患之包含MEK蛋白激酶抑制劑及/或索拉非尼或瑞戈非尼之組合的醫藥功效或臨床反應。
11. 一種包含適用於偵測突變型RAS基因或蛋白質之構件的套組，其用於鑑別定義為突變型RAS之生物標記，其中該套組係用於預測待投與至HCC病患之包含MEK蛋白激酶抑制劑及索拉非尼或瑞戈非尼之組合的醫藥功效或臨床反應。
12. 如請求項5、6或7中任一項之式A化合物之用途，其用於製備供治療具有突變KRAS、NRAS或HRAS基因之病患中之肝細胞腫瘤用的藥劑。