TW201345521A - 調控物及含有該調控物之醫藥組合物 - Google Patents

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Abstract

本發明係關於一種調控物及含有該調控物之醫藥組合物，該調控物可調控插入素(integrins)及/或上皮膜蛋白質-2(epithelial membrane protein 2,EMP2)表現，該醫藥組合物則用以治療與插入素及/或EMP2相關之疾病。

Description

調控物及含有該調控物之醫藥組合物
本案係關於一種調控物及含有該調控物之醫藥組合物。具體而言，該調控物可調控插入素(integrins)及/或上皮膜蛋白質-2(epithelial membrane protein 2,EMP2)表現，該醫藥組合物則用以治療與插入素及/或上皮膜蛋白質-2相關之疾病。
插入素是媒介細胞與其周圍組織附著的受器，該組織可能為其他細胞或是細胞外間質。插入素亦參與細胞信號傳遞的作用，從而調節細胞的形狀、運動、和細胞週期。一般而言，受體通知細胞其週遭環境的變化，細胞則因之做出反應。 但插入素不只執行此種由外而內之信號傳遞，同時也具有由內而外的模式。因此，插入素自細胞外間質傳遞訊息至細胞，亦反應細胞之狀態至外部環境，藉以使得細胞可以快速和靈活地反應其週遭環境的變化。
插入素是一群穿膜受體蛋白質，具有許多種形式，而許多細胞的細胞膜上含有多種形式之插入素。詳細而言，細胞膜的插入素為異二聚體(heterodimer)形式，係由α插入素次單元(α subunit)和β插入素次單元(β subunit)經由非共價鍵結合，例如αV插入素(次單元)與β3插入素(次單元)結合後，將 形成αVβ3插入素。
這些插入素會和表皮受體蛋白質(epidermal growth factor receptor,EGFR)交互作用，從而影響癌細胞生長及產生化療的抗藥性。目前關於利用插入素治療癌症的研究和臨床治療，是採用某些插入素的抗體來中和其受體蛋白的功能，使得癌細胞或其他高度表現插入素的細胞(如血管內皮細胞)之生長受到抑制。反過來說，為因應中樞神經系統的再生修復需要，可能需要可以活化插入素家族的物質。目前針對插入素的臨床治療應用研究主要包括癌症(cancer)、多發性硬化症(multiple sclerosis)、克隆氏症(Crohn's disease)、乾癬(psoriasis)、類風濕性關節炎(rheumatoid arthritis)、和急性冠狀動脈症候群(acute coronary syndromes)等病症。
在2008年，這些病症之治療在估計有超過十億美金的市場。而目前針對這些病症之治療的上市產品包括ReoPro(Abciximab)和Tysabri(Natalizumab)。ReoPro是人類化的阻斷β3插入素功能的單株抗體，應用在不穩定型心絞痛(unstable angina)的冠狀動脈氣球擴張術臨床治療。Tysabri是抑制α4插入素功能的單株抗體，應用在反覆發作型多發性硬化症的單一藥物治療。不過截至目前為止，針對單一插入素分子的抑制劑(如αV β3)，並無法提供樂觀的治療效果。而且上述抗體藥劑不但價格昂貴(如ReoPro的中華民國健保核定價格為 12,035圓，Tysabri則為75,000圓)，亦可能引起異種蛋白過敏，或是因宿主引發的免疫反應而失效。
此外，關於EMP2之臨床應用與研究，目前均限於與女性荷爾蒙調控途徑相關之疾病，如子宮頸內膜癌等。但在針對EMP2與其他疾病之關係的研究與應用，則尚付之闕如。
職是之故，申請人鑑於上述等習知技術中所產生之缺失，乃經悉心設計與研究，並一本鍥而不捨之精神，終構思出本案「含有可調控插入素蛋白質及/或上皮膜蛋白質-2表現之物質的醫藥組合物」，以下為本案之簡要說明。
本發明之目的係為提供一種調控物及含有該調控物之醫藥組合物。該調控物可調控插入素(integrin)及/或上皮膜蛋白質-2(epithelial membrane protein 2,EMP2)表現，該醫藥組合物則透過對於插入素及上皮膜蛋白質-2表現之調控，來治療與插入素及/或上皮膜蛋白質-2相關之疾病。
為達上述目的，本案提供一種用以治療與插入素相關之疾病的醫藥組合物。其包含一調控物，該調控物用以調控一上皮膜蛋白質-2之一表現；該調控物為一異黃酮類化合物、或可表現該EMP2之一載體、或其組合、或針對EMP2之一干擾性核醣核酸(RNA interference,RNAi)其中之一。
為達上述目的，本案提供一種用以治療與插入素相關之疾病的醫藥組合物。其包含一非拮抗劑調控物，該非拮抗劑調控物可用於非受女性荷爾蒙調控之途徑中，調控一上皮膜蛋白質-2之一表現。
為達上述目的，本案提供一種抑制插入素(integrin)之表現的抑制劑。其中該抑制劑用以於非受女性荷爾蒙調控之一途徑中，抑制一上皮膜蛋白質-2之一表現。
為達上述目的，本案提供一種抑制上皮膜蛋白質-2之表現的抑制劑。其中該抑制劑用以抑制一插入素(integrin)之一表現。
為達上述目的，本案提供一種用以治療與上皮膜蛋白質-2相關之疾病的醫藥組合物。其包含一調控物，該調控物用以抑制一插入素之一表現。
為達上述目的，本案提供一種用以治療膀胱癌之醫藥組合物。其包含一調控物，該調控物調控一插入素之表現，並調控一上皮膜蛋白質-2之表現。
為了易於說明，本發明可藉由下述實例以更加瞭解之。
本案的裝置與方法將可由以下的實例說明而得到充分瞭 解，並使得熟習本技藝之人士可以據以完成。然本案之實施型態並不以下列實例為限。
請參見第1A圖，其為一北方墨點法轉漬圖。其中顯示RT4膀胱癌細胞株以10 μg/mL之金雀異黃酮(genistein)之異黃酮類化合物處理24小時後，該RT4細胞株的EPM2之mRNA表現量及其對照組；β-actin則係做為一常務性基因(housekeeping gene)，透過其mRNA表現量來進行標準化。請續參見第1B圖，為將第1A圖中投以金雀異黃酮處理之實驗組及未經處理之對照組。兩者細胞株的EPM2之mRNA表現量化後之比較圖。其中未經金雀異黃酮處理之RT4細胞株，其EPM2之mRNA表現量定義為1。透過第1A及1B圖可以得知，經金雀異黃酮此種異黃酮類化合物處理過後之RT4細胞株，其EPM2之mRNA表現量相較於對照組大幅增加，且約為對照組之3.5倍。也就是說，金雀異黃酮此種異黃酮類化合物，的確可以促進RT4細胞株中EPM2的mRNA之表現。
請參閱第2圖。其為TSGH8301人類膀胱癌細胞株在分別含有2 μM、5 μM及10 μM濃度之金雀異黃酮的培養液中培養6天後，各該細胞株之EPM2與常務性基因的mRNA個別表現之相對量化比較圖(二因子的變異數分析(two way ANOVA)，P=0.03)。透過第2圖可以得知，隨著金雀異黃酮濃度的提高，TSGH8301細胞株中EPM2的mRNA表現有隨 之上升的趨勢。亦即，金雀異黃酮對於促進TSGH8301細胞株中EPM2的mRNA表現，具有一劑量依賴性(dose-dependent)的特性。
請參閱第3圖。其為TSGH8301膀胱癌細胞株在含有15 μM濃度之金雀異黃酮的培養液中，分別培養2、4及6天後，各該細胞株之EPM2與常務性基因的mRNA個別表現之相對量化比較圖(單因子的變異數分析(one way ANOVA)，P=0.03)。透過第3圖可以得知，隨著培養時間的增加，經金雀異黃酮處理之TSGH8301細胞株，其EPM2的mRNA表現有隨之上升的趨勢。亦即，金雀異黃酮對於促進TSGH8301細胞株中EPM2的mRNA表現，具有一時間依賴性(time-dependent)的特性。
透過第1A、1B、2及3圖可知，金雀異黃酮此種異黃酮類化合物，當可做為促進EPM2表現之調控物。
請參閱第4A及4B圖。第4A圖為TSGH8301細胞株、經轉殖空載體之TSGH8301細胞株(TSGH8301/V)以及經轉殖可過度表現(over-expressed)EMP2載體之TSGH8301細胞株2及3(TSGH8301/EMP2-2,-3)。在同一培養條件下，觀察從培養基上開始培養起，第14天後的群落(focus)生長狀況。其中該等培養基上之群落，係經吉姆薩染液(Gemisa stain)染色。而該過度表現EMP2之載體，係為該空載體經插入EMP2基因 後，再經適當藥物篩選，可以持續過度表現EMP2之載體。第4B圖則為上述四株細胞株的群落數量(foci number)數量圖(配對型學生t檢驗(paired Student’s t test)，＊＊ P<0.01)。透過第4A及4B圖可知，TSGH8301/EMP2-2或-3細胞株之群落數量均少於TSGH8301/V細胞株之群落數量，且具有顯著差異。亦即，在TSGH8301細胞株中，過度表現EMP2可顯著抑制TSGH8301人類膀胱癌細胞株的生長。
請參閱第5圖。第5圖為TSGH8301細胞株、TSGH8301/V細胞株以及TSGH8301/EMP2-2及TSGH8301/EMP2-3細胞株。在同一培養條件下，觀察從培養基上開始培養起，第14天後的群落(focus)生長狀況，以及相對應的單一群落外觀。其中該培養基為含有0.35%瓊脂(agar)之血清培養基，並藉以作為軟瓊脂分析法(soft agar assay)之材料。用以針對上述細胞株進行非貼附性生長(anchorage-independent growth)分析，來觀察該等具癌化傾向細胞株的生長情況。透過第5圖可知，TSGH8301/EMP2-2或-3細胞株之群落數量，均少於TSGH8301/V細胞株之群落數量，且具有顯著差異(配對型學生t檢驗，P<0.05)。此外，第5圖亦顯示了TSGH8301/EMP2-2或-3細胞株之單一群落大小，都比TSGH8301/V細胞株之單一群落來的小。
請參閱第6圖。為小鼠腫瘤大小與EMP2表現之關係圖。 詳細地說，首先隨機將約五至六週大小的雄性嚴重複合型免疫缺陷小鼠(severe combined immunodeficiency male(SCID)mice)分成四組。並分別將1＊107的TSGH8301、TSGH8301/V以及TSGH8301/EMP2-2及TSGH8301/EMP2-3等細胞株，以皮下注射方式接種至四組小鼠身上。從第0天開始飼養小鼠，並逐日紀錄身上腫瘤體積的大小，直至第23天為止。第6圖的橫座標即為小鼠的飼養天數(天)，縱座標則為腫瘤體積大小(mm3)。透過第6圖可以得知，接種TSGH8301/EMP2-2細胞株之小鼠，其腫瘤明顯小於接種TSGH8301/V細胞株之小鼠腫瘤(P=0.01)。顯示在活體(in vivo)狀況下，促進EMP2的表現，確實可以抑制癌細胞之生長。
請參閱第7圖。此為小鼠腫瘤重量與EMP2表現之關係圖。其中，上述四組小鼠繼續飼養至接種後第31天時，測量並估計各組小鼠個別之腫瘤重量，並將相關數據製成第7圖。 第7圖之橫座標為小鼠的飼養天數(天)，縱座標則為腫瘤重量大小(g)。透過第7圖可以得知，接種TSGH8301/EMP2-2或TSGH8301/EMP2-3細胞株之小鼠，其腫瘤之重量顯著低於接種TSGH8301/V細胞株之小鼠腫瘤(配對型學生t檢驗，＊＊ P<0.01、＊ P<0.05)。再次顯示在活體狀況下，促進EMP2的表現，確實可以抑制癌細胞的生長。
透過第4A、4B、5、6及7圖可知，EMP2基因為一抑癌 基因。亦即，藉由調控EMP2之表現，可以抑制癌細胞之生長或癌症的惡化進展。
請參閱第8圖。此為一反轉錄聚合酶鏈式反應(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)之結果圖。詳細地說，第8圖左顯示TSGH8301(即Stable 8301)、TSGH8301/V(即Stable GFP)以及TSGH8301/EMP2-2(即Stable EG2)等穩定型細胞株(stable cell line)表現的EMP2與αV、α6、β1及β3等插入素在mRNA層次表現上之關係。第8圖右則顯示含有GFP載體(即GFP)以及含有可過度表現EMP2之GFP-EMP2載體(即EMP2)等短暫轉殖細胞株(transient transfection cell line)，經過48小時後，其中的EMP2與αV、α6、β1及β3等插入素在mRNA層次表現上之關係。 而在第8圖中，β-actin係當做常務性基因以便進行標準化之用。
透過第8圖可以得知，無論在穩定型細胞株或是在短暫轉殖細胞株中，EMP2表現量的上升，將會促進αV、α6、β1及β3等插入素在mRNA層次上的表現。亦即，可以促進EMP2表現之調控物，亦將能夠促進包括αV、α6、β1及β3等插入素之表現。
請參閱第9圖。此為另一RT-PCR之結果圖。詳細地說，第9圖顯示TSGH8301(即8301)以及TSGH8301/EMP2-2(即 EMP2)等穩定型細胞株的EMP2表現，與α1及α5等插入素在mRNA表現層次上的關係。透過第9圖可以得知，在TSGH8301以及TSGH8301/EMP2-2等穩定型細胞株中，EMP2表現量的上升，將會抑制α1及α5等插入素在mRNA層次上的表現。亦即，可以促進EMP2表現的調控物，亦將能夠抑制包括α1及α5等插入素的表現。
請參閱第10A及10B圖。透過即時聚合酶連鎖反應(real-time PCR)分別針對TSGH8301以及TSGH8301/EMP2-2(即8301/EMP2)等穩定型細胞株，分析EMP2與αV及β3等插入素在mRNA層次表現上的關係。其中，第10A及10B圖之縱座標分別為αV及β3插入素mRNA表現量相較於TATA結合蛋白質(TATA-binding protein,TBP)mRNA的相對定量值(relative quantification)。第10A及10B圖之橫座標，則都代表TSGH8301以及TSGH8301/EMP2-2兩細胞株。透過第10A及10B圖再次証實，在TSGH8301以及TSGH8301/EMP2-2等細胞株中，EMP2表現量的上升，將會促進αV及β3等插入素在mRNA層次上的表現。亦即，可以促進EMP2表現的調控物，也將能夠促進包括αV及β3等插入素的表現。
整理以上第1A至10B圖所示，不管是異黃酮類化合物，或是可以表現EMP2之載體，均可以做為促進EMP2表現的調控物。而且此等調控物促進EMP2表現後，不但可以抑制 癌細胞的生長或癌症的惡化進展，也可以增加插入素之表現。也就是說，當某種疾病需要促進神經生長以作為治療時，可以透過上述通過促進EMP2表現，來增加插入素表現的調控物(即異黃酮類化合物、或可表現EMP2之載體)，提高插入素的表現，藉以促進神經系統的再生修復。
此外，承接上開論述，本案亦利用EMP2及插入素之干擾性核醣核酸(RNA interference,RNAi)做為工具，以針對上開已初步說明之EMP2及插入素兩種蛋白質表現的關係，做進一步探究。
請續參閱第11圖。此為另一real-time PCR之相對定量結果圖。詳細地說，第11圖之結果，係探討將針對αV及β3插入素之小髮夾RNA(small hairpin RAN,shRNA)，分別轉殖到TSGH8301以及TSGH8301/EMP2-2(即8301/EMP2)等穩定型細胞株後，透過調控插入素表現對於EMP2表現的影響。 第11圖之縱座標係指EMP2的mRNA相較於TBP的mRNA表現的相對定量值。橫座標則代表TSGH8301以及TSGH8301/EMP2-2兩細胞株，分別轉殖針對β3插入素之shRNA(即sh-integrin β3)或針對αV插入素之shRNA(即sh-integrin αV)後，以及未經轉殖(即Ctl組)之細胞株形態。其中，sh-integrin β3 A1、sh-integrin β3 C1、sh-integrin αV H1及sh-integrin αV G1之shRNA序列分別為 5’-CCGGCATTATGTTTACAGAGGACAACTCGAGTTGTCCTCTGTAAACATAATGTTTTT-3’、5’-CCGGCCCTGTTACAATATGAAGAATCTCGAGATTCTTCATATTGTAACAGGGTTTTT-3’、5’-CCGGGCCTTACAAATACAACAACAACTCGAGTTGTTGTTGTATTTGTAAGGCTTTTTG-3’及5’-CCGGCGAGGGAAGTTACTTGGGATTCTGGAGAATCCGAAGTAACTTCCCTCGTTTTTG-3’。而經上述兩類shRNA轉殖後，TSGH8301以及TSGH8301/EMP2-2細胞株中的β3插入素及αV插入素的表現，也相對應地受到抑制。
透過第11圖可知，無論是TSGH8301或TSGH8301/EMP2-2細胞株，經轉殖β3插入素之shRNA或αV插入素之shRNA後，其中EMP2的表現相較於未經轉殖者(8301/EMP2-Ctl組)，均顯著降低(配對型學生t檢驗，＊＊ P<0.001、＊ P<0.05)。顯示在細胞中抑制插入素的表現，也將會抑制EMP2的表現。也就是說，當一抑制劑得以抑制插入素的表現(如β3或αV插入素之shRNA等)時，此抑制劑亦可以同時用來抑制EMP2之表現。
請續參閱第12A及12B圖。此亦為real-time PCR之相對定量值結果圖。其中第12A及12B圖之結果，係探討將針對EMP2之小干擾RNA(small interfering RNA,siRNA)轉殖到 TSGH8301穩定型細胞株後，因之影響EMP2的表現，分別相對於αV及β3插入素表現的影響。第12A及12B圖之縱座標，分別係指αV及β3插入素的mRNA相較於TBP的mRNA的相對定量值。橫座標則表示TSGH8301細胞株分別轉殖針對EMP2之siRNA(即si-EMP2-2H、si-EMP2-4H、si-EMP2-2G及si-EMP2-2G)後，或未經轉殖(即Ctl組)之細胞株形態。而經上述EMP2之siRNA轉殖後，TSGH8301細胞株中的EMP2的表現，也相對應地受到抑制。
透過第12A及12B圖可知，TSGH8301細胞株經過EMP2之siRNA轉殖後，無論是αV插入素或β3插入素，相較於未經轉殖者，其表現均顯著降低(單因子的變異數分析，P分別小於0.05及0.001)。顯示在細胞中抑制EMP2的表現，將會同時也抑制了插入素的表現。亦即，當一抑制劑得以抑制EMP2的表現(如EMP2之siRNA)時，此抑制劑亦可以同時用來抑制插入素的表現。
進一步來說，第12A及12B圖顯示，當投以EMP2的RNAi(如siRNA)時，細胞中的EMP2不但因此被抑制，也同時抑制了插入素的表現。因此，當某些疾病需要抑制插入素表現以做為治療目的時，像EMP2 RNAi的調控物即可利用來治療這些疾病。舉例來說，需要抑制插入素之表現來治療的疾病，包括癌症、多發性硬化症、克隆氏症、乾癬、類風濕 性關節炎、急性冠狀動脈症候群等。
而從另一方面來看，由於TSGH8301細胞株係人類膀胱癌細胞株，且從上開顯示之結果來看，調控TSGH8301細胞株插入素的表現，當可藉由調控EMP2的表現來達成(如見第8、9、10A、10B、12A及12B圖等)。也就是說，相較於先前技術僅針對EMP2與女性荷爾蒙調控途徑相關之疾病做探討，本發明係藉由與女性荷爾蒙調控之生理途徑無關的人類膀胱癌細胞模式，證實了利用對於EMP2表現的調控，可以在此模式中也調控插入素的表現。
承上，本案所述之異黃酮類化合物、可表現EMP2之載體或是EMP2之si/shRNA，均非屬透過拮抗作用來達到調控目的的拮抗劑(antagonist)調控物。亦即，本發明揭露了一種非拮抗劑調控物，該非拮抗劑調控物可用於非受女性荷爾蒙調控之途徑中，調控EMP2的表現，並藉以調控插入素的表現。
綜上所述，本說明書揭露了異黃酮類化合物可以活化EMP2基因的表現。此外，本說明書也揭露了透過基因轉殖來活化EMP2基因的表現，以及透過核糖核酸干擾技術，分別抑制EMP2基因或插入素蛋白質家族的表現，證實這兩種膜蛋白質會彼此互相調控。再者，當EMP2表現變化時，插入素受體蛋白質家族的表現，也會有相同性質的上升或下降的變化。因此，透過調節EMP2的基因活性，可以成為控制插 入素家族受體蛋白質表現的另一種有效工具。
所以，我們可以透過異黃酮類化合物、基因轉殖或核糖核酸干擾技術等非傳統特殊抗體的模式，來調控EMP2基因表現，進而控制插入素蛋白質家族的表現，以達到臨床治療人類疾病的目的。
此外，本說明書揭露了異黃酮類化合物可以活化EMP2基因的表現，而高表現的EMP2將可以抑制膀胱癌的生長。在臨床上，帶有EMP2表現之上泌尿道癌症病患，相較於未有EMP2表現或EMP2表現較低者，其手術後存活率較高。而更進一步結合如上所述的各項實驗結果後，可以得知本說明書揭露了一種調控物，該調控物可以調控插入素及EMP2之表現，而用以治療膀胱癌。
透過如上所述的各項實驗結果，可知本說明書清楚揭露了EMP2與插入素蛋白質家族互相調控之關係。而基於此等關係，本說明書具體揭露了用以調控EMP2表現之調控物，可以做為用以治療與插入素相關之疾病的醫藥組合物。也具體揭露了用以調控插入素表現的調控物，可以做為治療與EMP2相關疾病的醫藥組合物等實用的獨特技術。
具體而言，以下所列之實例可以對本發明做更清楚的描述：
1.一種用以治療與插入素(integrin)相關疾病的醫藥組合物。其包含一調控物，該調控物用以調控一上皮膜蛋白質-2(epithelial membrane protein 2,EMP2)之一表現，該調控物為一異黃酮類化合物、或可表現該EMP2之一載體或其組合或針對EMP2之一干擾性核醣核酸(RNA interference,RNAi)其中之一。
2.如實例1所述之醫藥組合物。其中該插入素是選自由一αv插入素、一β3插入素、與一αvβ3插入素所組成之一群組的其中之一。
3.如實例1或2所述之醫藥組合物。其中該異黃酮類化合物為一金雀異黃酮(Genistein)，且當該調控物為：該金雀異黃酮、該載體或其組合時，該調控物用以促進插入素之表現，該相關之疾病為需促進神經生長以為治療之疾病；以及該干擾性核醣核酸時，該調控物用以抑制該插入素(integrin)之表現，該相關之疾病為癌症、多發性硬化症(multiple sclerosis)、克隆氏症(Crohn's disease)、乾癬(psoriasis)、類風濕性關節炎(rheumatoid arthritis)、急性冠狀動脈症候群(acute coronary syndromes)。
4.一種用以治療與插入素(integrin)相關之疾病的醫藥組合物。其包含一非拮抗劑調控物，該非拮抗劑調控物可用於非受女性荷爾蒙調控之途徑中，調控一上皮膜蛋白質-2 (epithelial membrane protein 2,EMP2)之一表現。
5.一種抑制插入素(integrin)之表現的抑制劑。其中該抑制劑用以於非受女性荷爾蒙調控之一途徑中，抑制一上皮膜蛋白質-2(epithelial membrane protein 2,EMP2)之一表現。
6.一種抑制上皮膜蛋白質-2(epithelial membrane protein 2,EMP2)之表現的抑制劑。其中該抑制劑用以抑制一插入素(integrin)之一表現。
一種用以治療與上皮膜蛋白質-2(epithelial membrane protein 2,EMP2)相關之疾病的醫藥組合物。其包含一調控物，該調控物用以抑制一插入素(integrin)之一表現。
8.如實例7所述之醫藥組合物。其中該插入素是選自由一αv插入素、一β3插入素、與一αvβ3插入素所組成之一群組的其中之一，該抑制劑係用以針對該等插入素之一干擾性核醣核酸(RNA interference,RNAi)。
9.一種用以治療膀胱癌之醫藥組合物。其包含一調控物，該調控物調控一插入素之表現，並調控一上皮膜蛋白質-2(epithelial membrane protein 2,EMP2)之表現。
10.如實例9所述之醫藥組合物。其中該插入素是選自由一α1插入素、一α5插入素、一αv插入素、一β3插入素、與一αvβ3插入素所組成之一群組的其中之一。
惟值得注意，縱使本案已由上述之實例所詳細敘述，而可由在此領域具通常知識者任施匠思而為諸般修飾，然該等修飾皆不脫離如附申請專利範圍所欲保護者。
第1A圖為一北方墨點法轉漬圖，第1B圖則為對應第1A圖之mRNA表現量化後之比較圖。
第2圖係顯示TSGH8301細胞株經不同濃度之金雀異黃酮處理後，對於其EPM2表現之影響。
第3圖係顯示TSGH8301細胞株經金雀異黃酮處理後，培養天數對於其EPM2表現的影響。
第4A及4B圖顯示，TSGH8301細胞株及經轉殖TSGH8301/V、TSGH8301/EMP2-2及TSGH8301/EMP2-3之TSGH8301細胞株的生長情況；第5圖則為上述細胞株在特定時間的生長狀況以及單一群落外觀。
第6圖為小鼠腫瘤大小與EMP2表現的關係圖；第7圖則為小鼠腫瘤重量與EMP2表現的關係圖。
第8及9圖均為RT-PCR的結果圖；第10A、10B、11、12A及12B圖則均為real-time PCR的相對定量值結果圖。

Claims (10)

  1. 一種用以治療與插入素(integrin)相關之疾病的醫藥組合物，其包含一調控物，該調控物用以調控一上皮膜蛋白質-2(epithelial membrane protein 2,EMP2)之一表現，該調控物為一異黃酮類化合物、或可表現該EMP2之一載體或其組合或針對EMP2之一干擾性核醣核酸(RNA interference,RNAi)其中之一。
  2. 如申請專利範圍第1項所述之醫藥組合物，其中該插入素是選自由一αV插入素、一β3插入素、與一αVβ3插入素所組成之一群組的其中之一。
  3. 如申請專利範圍第1或2項所述之醫藥組合物，其中該異黃酮類化合物為一金雀異黃酮(genistein)，且當該調控物為：該金雀異黃酮、該載體或其組合時，該調控物用以促進插入素的表現，該相關疾病為需促進神經生長以為治療之疾病；以及該干擾性核醣核酸時，該調控物用以抑制該插入素(integrin)之表現，該相關之疾病為癌症、多發性硬化症(multiple sclerosis)、克隆氏症(Crohn's disease)、乾癬(psoriasis)、類風濕性關節炎(rheumatoid arthritis)、急性冠狀動脈症候群(acute coronary syndromes)。
  4. 一種用以治療與插入素(integrin)相關之疾病的醫藥組合物，其包含一非拮抗劑調控物，該非拮抗劑調控物可用於非受女性荷爾蒙調控之途徑中，調控一上皮膜蛋白質-2(epithelial membrane protein 2,EMP2)之一表現。
  5. 一種抑制插入素(integrin)之表現的抑制劑，其中該抑制劑用 以於非受女性荷爾蒙調控之一途徑中，抑制一上皮膜蛋白質-2(epithelial membrane protein 2,EMP2)之一表現。
  6. 一種抑制上皮膜蛋白質-2(epithelial membrane protein 2,EMP2)之表現的抑制劑，其中該抑制劑用以抑制一插入素(integrin)之一表現。
  7. 一種用以治療與上皮膜蛋白質-2(epithelial membrane protein 2,EMP2)相關之疾病的醫藥組合物，其包含一調控物，該調控物用以抑制一插入素(integrin)之一表現。
  8. 如申請專利範圍第7項所述之醫藥組合物，其中該插入素是選自由一αV插入素、一β3插入素、與一αVβ3插入素所組成之一群組的其中之一，該抑制劑係用以針對該等插入素之一干擾性核醣核酸(RNA interference,RNAi)。
  9. 一種用以治療膀胱癌之醫藥組合物，其包含一調控物，該調控物調控一插入素之表現，並調控一上皮膜蛋白質-2(epithelial membrane protein 2,EMP2)之表現。
  10. 如申請專利範圍第9項所述之醫藥組合物，其中該插入素是選自由一α1插入素、一α5插入素、一αV插入素、一β3插入素、與一αVβ3插入素所組成之一群組的其中之一。
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