TW201336493A

TW201336493A - 卡巴利他索（ｃａｂａｚｉｔａｘｅｌ）之新穎小兒藥用途

Info

Publication number: TW201336493A
Application number: TW102105219A
Authority: TW
Inventors: S Sidhu Sukhvinder; Patricia Vrignaud
Original assignee: Aventis Pharma Sa
Priority date: 2012-02-10
Filing date: 2013-02-08
Publication date: 2013-09-16

Abstract

本發明係關於式(I)化合物：□其可呈無水鹼、水合物或溶劑合物之形式，用於治療小兒癌症之用途。

Description

卡巴利他索(CABAZITAXEL)之新穎小兒藥用途

本發明係關於卡巴利他索(cabazitaxel)之新穎小兒藥用途。其亦係關於用於治療兒童及青年之新穎方法。

在過去的20年裏，診斷患有所有形式之侵襲癌之兒童之發病率有所增加。最常見兒童癌症白血病及腦瘤之發病率之長期趨勢顯示與其他癌症稍有不同之模式。兒童白血病之發病率似乎在1980年代初有所增長。隨後多年中發病率未顯示持續上升或下降之趨勢。

儘管白血病係最常見小兒惡性腫瘤，但腦瘤係最常見實體腫瘤，其佔所有兒童癌症之21%，其次係神經胚細胞瘤(8.3%)、腎胚細胞瘤(5.9%)、骨瘤(4.6%)(例如骨肉瘤、尤文氏肉瘤(Ewing's sarcoma)及軟組織肉瘤(3.7%))[K. Pritchard-Jones等人，Eur.J. Cancer 42：2183-2190(2006)]。

儘管化學療法改良骨肉瘤患者之無病生存率，但仍未證明長期總生存率益處。化學療法對軟骨肉瘤無效且其作用當前對於軟組織肉瘤患者有較大限制。神經管胚細胞瘤係發生於兒童、青少年及青年中之最常見惡性腦瘤，其對替莫唑胺(temozolomide)之反應率為約40%。然而，對兒童腦瘤治療之改良在結果仍較差之腫瘤類型(例如高度惡性神經膠質瘤)中尤其關鍵。

因此，業內仍迫切需要找到對小兒適應症之新穎抗腫瘤治療。

在具有抗腫瘤活性之類紫杉醇衍生物中尤其可提及卡巴利他索。

具體而言，WO96/30355揭示可用作抗腫瘤劑之包含卡巴利他索之類紫杉醇衍生物。此文件亦揭示眾多種可用作該等類紫杉醇之共治療藥之其他藥物。

WO2010/128258揭示包括卡巴利他索及卡培他濱(capecitabine)之抗腫瘤組合，其用於治療在使用蒽環類抗生素(anthracycline)及紫衫烷之前期治療後進展之患者之轉移性乳癌。

WO2011/051894揭示使用卡巴利他索與潑尼松(prednisone)或潑尼松龍(prednisolone)之組合治療前列腺癌。

因此，本發明之目的係提供用於治療小兒癌症之新穎治療選擇。

本發明之目的係使用自小兒患者之新鮮腫瘤直接獲得之腫瘤模型來提供卡巴利他索在小兒肉瘤中之活性之證據(J.J. Tentler、A. Choon Tan、C.D. Weekes、A. Jimeno、S. Leong、T.M. Pitts、J.J. Arcaroli、W.A. Messersmith及S.G. Eckhardt. Patient-derived tumour xenografts as models for oncology drug development.Nature Reviews Clinical Oncology 2012,9：338-350)。

本發明係關於式(I)化合物：

其可係呈無水鹼、水合物或溶劑合物之形式，就其用途而言，其用於治療小兒癌症。

本發明係基於可呈無水鹼、水合物或溶劑合物形式之卡巴利他索與多西他賽(docetaxel)相比在臨床前小兒模型中經改良之抗腫瘤活性。

實際上，本發明者現已證實，在此小兒適應症中，卡巴利他索之功效優於多西他賽。

在本發明中，術語「小兒癌症」係指發生於兒童及青年中之癌症或腫瘤。

本發明亦係關於上述化合物之用途，其用於治療小兒實體腫瘤。

在本發明中，術語「小兒實體腫瘤」係指發生於兒童及青年中之實體腫瘤。

本發明亦係關於上述化合物之用途，其用於治療高度惡性神經膠質瘤(例如神經膠母細胞瘤)。

術語「高度惡性神經膠質瘤」(或惡性神經膠質瘤)係指歸類為第III級(退行性星細胞瘤、退行性寡樹突神經膠細胞瘤、退行性寡星細胞瘤、退行性室管膜瘤)或第IV級(神經膠母細胞瘤)之腫瘤。

根據實施例，小兒實體腫瘤係選自由以下組成之群：退行性星細胞瘤、神經膠母細胞瘤、退行性寡樹突神經膠細胞瘤、寡星細胞瘤、退行性室管膜瘤、腎胚細胞瘤、神經管胚細胞瘤、神經胚細胞瘤、威爾姆氏腫瘤(Wilm's tumor)、橫紋肌肉瘤、軟骨肉瘤、尤文氏肉瘤及骨肉瘤。

根據實施例，本發明係關於上述化合物之用途，其用於治療橫紋肌肉瘤(例如人類橫紋肌肉瘤RH-30)。

根據實施例，本發明係關於上述化合物之用途，其用於治療尤文氏腫瘤(例如人類尤文氏肉瘤TC71及人類尤文氏肉瘤SK-ES-1或人類尤文氏肉瘤DM101)。

根據實施例，本發明係關於上述化合物之用途，其用於治療骨肉瘤(例如人類骨肉瘤DM77或人類骨肉瘤DM113)。

本發明亦係關於用於治療小兒癌症之方法，其包括向有需要之患者投與治療有效量之上述化合物。

卡巴利他索係類紫杉醇家族之抗腫瘤劑且具有下式：

其可係呈無水鹼、水合物或溶劑合物之形式。

卡巴利他索之化學名稱係(2R,3S)-3-第三丁氧基羰基胺基-2-羥基-3-苯丙酸4α-乙醯氧基-2α-苯甲醯氧基-5β,20-環氧基-1β-羥基-7β,10β-二甲氧基-9-側氧基-11-紫杉烯-13α-基酯。卡巴利他索亦稱為苯甲酸(2α,5β,7β,10β,13α)-4-乙醯氧基-13-({(2R,3S)-3-[(第三丁氧基羰基)胺基]-2-羥基-3-苯基丙醯基}氧基)-1-羥基-7,10-二甲氧基-9-側氧基-5,20-環氧基紫杉-11-烯-2-基酯。

此化合物及其製備方法闡述於WO96/30355、EP0817779及US5847170中。

卡巴利他索可以鹼形式(參照上式)或以水合物形式投與。其亦可係溶劑合物，即分子複合物，其特徵在於將結晶溶劑納入有效成份分子之晶體中(在此方面參見J.Pharm.Sci. 1975,64(8),1269-1288中之第1276頁)。

在本發明中，上述化合物可係呈丙酮溶劑合物之形式。

根據實施例，丙酮溶劑合物包括5重量%至8重量%之丙酮。

具體而言，上述化合物可係WO2005/02846中所闡述之丙酮溶劑合物。

其可係含有5重量%至8重量%且較佳5重量%至7重量%丙酮之卡巴利他索之丙酮溶劑合物(%意指丙酮之含量/丙酮+卡巴利他索之含量×100)。丙酮含量之平均值係7%，其近似代表丙酮化學計量，含有1分子丙酮之溶劑合物之平均值係6.5%。

以下所闡述之程式允許製備卡巴利他索之丙酮溶劑合物：在20℃±5℃(室溫)下將940 ml純化水添加至207 g(2R,3S)-3-第三丁氧基羰基胺基-2-羥基-3-苯丙酸4α-乙醯氧基-2α-苯甲醯氧基-5β,20-環氧基-1β-羥基-7β,10β-二甲氧基-9-側氧基-11-紫杉烯-13α-基酯以約92重量%存於約2公升丙酮中之溶液中，然後用2 g自丙酮/水分離之丙酸4α-乙醯氧基-2α-苯甲醯氧基-5β,20-環氧基-1β-羥基-7β,10β-二甲氧基-9-側氧基-11-紫杉烯-13α-基(2R,3S)-3-第三丁氧基羰基胺基-2-羥基-3-苯基酯存於20 ml水與20 ml丙酮之混合物中之懸浮液加晶種。將所得混合物攪拌約10小時至22小時，且在4小時至5小時內添加1.5公升純化水。將此混合物攪拌60分鐘至90分鐘，且然後在減壓下過濾懸浮液。在過濾器上用自450 ml丙酮及550 ml純化水製備之溶液洗滌濾餅，且然後在減壓(0.7 kPa)下在55℃下烘箱乾燥4小時。獲得197 g含有0.1%水及7.2%丙酮(化學計量溶劑合物之理論量：6.5%)之(2R,3S)-3-第三丁氧基羰基胺基-2-羥基-3-苯丙酸4α-乙醯氧基-2α-苯甲醯氧基-5β,20-環氧基-1β-羥基-7β,10β-二甲氧基-9-側氧基-11-紫杉烯-13α-基酯丙酮。

在本發明中，上述化合物可係藉由非經腸途徑投與。

根據實施例，式(I)化合物係藉由靜脈內途徑投與。

卡巴利他索可非經腸投與，例如經由靜脈內投與。適合藉由靜脈內輸注投與之草本形式之卡巴利他索係將卡巴利他索在選自以下之賦形劑存在下溶解於水中者：表面活性劑、共溶劑、葡萄糖或氯化鈉等。例如，草本形式之卡巴利他索可藉由以下製備：用含有6 ml水及乙醇(13重量%之95%乙醇)之溶液之無菌瓶稀釋含於無菌瓶中之卡巴利他索之預混合物溶液(80 mg卡巴利他索+2 ml溶劑+聚山梨醇酯80)，以獲得8 ml備用於在灌注袋中再稀釋之溶液。此備用於再稀釋之溶液中卡巴利他索之濃度係約10 mg/ml。然後藉由將適當量之此備用於再稀釋之溶液注射至含有水及葡萄糖(約5%)或氯化鈉(約0.9%)之灌注袋中來製備灌注液。

抗腫瘤活性

根據本發明，卡巴利他索優於多西他賽之抗腫瘤活性係在低傳代患者源小兒癌症異種移植物或小兒癌症模型中藉由在相同劑量及/或等毒性劑量下逐個(head to head)評估來證實。

在支援本發明之所報告實例中，使用多瓶卡巴利他索及多西他賽之臨床調配物。將多西他賽稀釋於0.9%氯化鈉中。首先將每瓶卡巴利他索(60 mg/1.5 mL)與全部量之所供應稀釋劑[13%(w/w)乙醇水溶液]混合。所得溶液含有10 mg/mL之卡巴利他索。然後將卡巴利他索原液稀釋於0.9%氯化鈉中。

此功效可量化為(例如)每一治療組(T)及對照組(C)之腫瘤體積之變化，該變化係針對每一動物及每一天藉由用指定觀察日之腫瘤體積減去首次治療當日(開始日(staging day))之腫瘤體積來計算。此允許計算腫瘤生長抑制：△T/△C=(中值△T/中值△C)×100。其後藉由非參數二因數ANOVA型分析(具有因數：組及重複天數)及隨後之使用Bonferroni-Holm多重性調節之事後對比分析來分析個別腫瘤體積自基線之變化，從而比較所有治療組與對照組。此外，實施非參數二因數ANOVA型分析(具有因數：治療組及重複天數)且然後進行使用Bonferroni-Holm多重性調節之對比分析，從而比較在每一天當在相同劑量或等毒性劑量下投與時多西他賽及卡巴利他索之效應。小於5% (p<0.05)之機率視為有意義。

基於國家癌症研究所(National Cancer Institute(NCI))標準，△T/△C40%係宣告活性所需要之最低水準。

根據對照組腫瘤在指數生長(100 mm³至1000 mm³範圍)中之對數線性生長曲線來估計腫瘤倍增時間(天；Td)[T.H. Corbett等人，Cancer,40：2660-2680(1977)；F.M. Schabel等人，Cancer Drug Development,B部分，Methods in Cancer Research,17：3-51,New York,Academic Press公司(1979)]。

此功效亦可藉由治療後所觀察到之腫瘤消退數目來量化。將報告在7天時間段內連續兩次量測之腫瘤體積小於等於第0天量測之50%之個別小鼠視為部分反應者(PR)。將缺乏可觸知腫瘤(在7天時間段內連續兩次量測<4×4 mm²)之個別小鼠歸類為完全反應者(CR)；將持續直至研究結束之CR視為無腫瘤生存者(TFS)。

功效亦可在研究結束時使用腫瘤生長延遲(T-C，天)來測定，該腫瘤生長延遲係使用每一治療組(T)對對照(C)之達終點之中值時間(MTTE)值來計算。對個別TTE應用使用Bonferroni-Holm多重性調節之對數等級多重比較測試以比較治療組與對照組。

在實驗中以下列方式測定卡巴利他索與多西他賽相比之對小兒患者源腫瘤異種移植物之功效：

向經受實驗之動物皮下單側移植約30 mg來自低傳代小兒患者源腫瘤異種移植物之腫瘤碎片。在動物中植入在免疫受損小鼠(Harlan；nu/nu)中異種移植之人類患者源小兒腫瘤。腫瘤植入後若干天，根據小鼠腫瘤負荷將其隨機分成不同治療組及對照組。向開始治療時(第0天)腫瘤負荷介於125 mm³至250 mm³之間之小鼠每4天靜脈內投與5.8 mg/kg、9.3 mg/kg、15 mg/kg或24.2 mg/kg之藥劑，總共3次劑量(q4d×3)。

自第0天開始，每日觀察動物且每週兩次使用數位秤稱重；記錄每一組之數據，包含個別及平均克重量(平均We±SD)、對第0天之平均重量變化百分數。每日記錄動物死亡且基於重量損失及大體觀察指定為藥物相關(D)、技術(T)、腫瘤相關(B)、或未知(U)；將報告7天時間段之平均值>20%及/或死亡率>10%之單一藥劑或組合組視為超過基於所評估方案之該治療之最大耐受劑量(MTD)。

在實驗中以下列方式測定卡巴利他索與多西他賽相比之對小兒實體腫瘤之功效：在第0天向經受實驗之動物皮下單側移植約30 mg腫瘤碎片。在動物中植入在免疫受損小鼠中異種移植之人類腫瘤。腫瘤植入後若干天，根據小鼠體重將其隨機分成不同治療組及對照組。每天觀察動物。在治療期間對不同動物組每日稱重直至達到最大重量損失且隨後恢復全重。然後每週1次或2次對各組稱重直至試驗結束。

每週1至5次(此端視腫瘤倍增時間而定)量測腫瘤，直至腫瘤達到約1,000 mm³或直至動物死亡(若此在腫瘤達到1,000 mm³之前發生)。在動物安樂死或死亡後立即對其進行屍體剖檢。

根據所記錄之不同參數測定抗腫瘤活性。

圖1代表在評估卡巴利他索及多西他賽對帶有人類RH-30之SCID雌性小鼠之抗腫瘤活性期間之體重變化(實例1)。曲線代表每組每天之平均值。

其代表隨時間(植入後之天數)之體重變化(%)。

具有實線之曲線對應於對照；具有虛線(- -)之曲線對應於14.5 mg/kg之多西他賽；具有實線及白色三角形(△)之曲線對應於9 mg/kg之多西他賽；具有實線及白色圓形(o)之曲線對應於5.6 mg/kg之多西他賽；具有實線及白色方形(□)之曲線對應於3.5 mg/kg之多西他賽；具有虛線(---)之曲線對應於14.5 mg/kg之卡巴利他索；具有虛線及黑色三角形(▲)之曲線對應於9 mg/kg之卡巴利他索；具有虛線及黑色圓形(●)之曲線對應於5.6 mg/kg之卡巴利他索；具有虛線及黑色方形(■)之曲線對應於3.5 mg/kg之卡巴利他索；且黑色三角形指示靜脈內治療。

圖2代表卡巴利他索及多西他賽對帶有人類RH-30之SCID雌性小鼠之抗腫瘤活性(實例1)。曲線代表每組每天之中值。

其代表隨時間(植入後之天數)之腫瘤體積(mm³)。

圖3代表在評估卡巴利他索及多西他賽對帶有人類TC-71之SCID雌性小鼠之抗腫瘤活性期間之體重變化(實例2)。曲線代表每組每天之平均值。

其代表隨時間(植入後之天數)之體重變化(%)。

圖4代表卡巴利他索及多西他賽對帶有人類TC-71之SCID雌性小鼠之抗腫瘤活性(實例2)。曲線代表每組每天之中值。

其代表隨時間(植入後之天數)之腫瘤體積(mm³)。

圖5代表在評估卡巴利他索及多西他賽對帶有人類SK-ES-1之SCID雌性小鼠之抗腫瘤活性期間之體重變化(實例3)。曲線代表每組每天之平均值。

其代表隨時間(植入後之天數)之體重變化(%)。

圖6代表卡巴利他索及多西他賽對帶有人類SK-ES-1之SCID雌性小鼠之抗腫瘤活性(實例3)。曲線代表每組每天之中值。

其代表隨時間(植入後之天數)之腫瘤體積(mm³)。

圖7代表在裸雌性小鼠中卡巴利他索及多西他賽對人類DM77骨肉瘤之抗腫瘤活性(實例4)。曲線代表每組每天之中值。

其代表隨時間(首次治療後之天數)之腫瘤體積(mm³)。

具有實線之曲線對應於對照；具有虛線(- -)之曲線對應於24.2 mg/kg之多西他賽；具有實線及白色三角形(△)之曲線對應於15 mg/kg之多西他賽；具有實線及白色圓形(o)之曲線對應於9.3 mg/kg之多西他賽；具有實線及白色方形(□)之曲線對應於5.8 mg/kg之多西他賽；具有虛線(---)之曲線對應於24.2 mg/kg之卡巴利他索；具有虛線及黑色三角形(▲)之曲線對應於15 mg/kg之卡巴利他索；具有虛線及黑色圓形(●)之曲線對應於9.3 mg/kg之卡巴利他索；具有虛線及黑色方形(■)之曲線對應於5.8 mg/kg之卡巴利他索；且黑色三角形指示靜脈內治療。

圖8代表在裸雌性小鼠中卡巴利他索及多西他賽對人類DM113骨肉瘤之抗腫瘤活性(實例5)。曲線代表每組每天之中值。

其代表隨時間(首次治療後之天數)之腫瘤體積(mm³)。

圖9代表在裸雌性小鼠中卡巴利他索及多西他賽對人類DM101尤文氏肉瘤之抗腫瘤活性(實例6)。曲線代表每組每天之中值。

其代表隨時間(首次治療後之天數)之腫瘤體積(mm³)。

根據本發明，如以下6個實例中所闡釋來展示卡巴利他索優於多西他賽之抗腫瘤活性。

實例1：在SCID雌性小鼠中卡巴利他索及多西他賽對人類橫紋肌肉瘤RH-30之抗腫瘤活性.

在此實例中，就腫瘤生長抑制而言，卡巴利他索在活體內展示優於多西他賽之抗腫瘤活性。

所選腫瘤模型係在SCID小鼠中異種移植之人類橫紋肌肉瘤RH-30[Douglass EC等人，Cytogenet Cell Genet.1987；45(3-4)：148-55.]。

對用於每一治療之卡巴利他索及多西他賽稱重且將其溶解於乙醇中。藉由首先將1體積乙醇原液與1體積聚山梨醇酯80混合然後添加18體積存於水中之葡萄糖(5%)來製備治療溶液。

在腫瘤植入後第14天及第18天靜脈內投與卡巴利他索及多西他賽。

實驗結果報告於下表1、表2及表3及圖1及圖2中。

根據對照組腫瘤在指數生長(100 mm³至1,000 mm³範圍)中之對數線性生長曲線及治療後所觀察到之腫瘤消退數目來估計腫瘤倍增時間(天；Td)。腫瘤倍增時間係3.2天。

使用以下終點：-毒性，其係以引起20%體重損失或10%藥物死亡之劑量宣告；-相對腫瘤生長抑制，其係在腫瘤植入後第27天當對照組中之中值腫瘤大小為1148 mm³時測定；-抗腫瘤功效，其係根據上述公式藉由計算△T/△C值(%)來測定；-腫瘤消退(如上文所解釋)；-統計分析，其係如上文所解釋來實施。

中值腫瘤負荷在開始治療時係188 mm³至198 mm³。在腫瘤後第14天及第18天藉由尾靜脈靜脈內注射投與下列劑量之呈單一藥劑之卡巴利他索及多西他賽：14.5、9.0、5.6及3.5 mg/kg/注射(表1)。

卡巴利他索及多西他賽耐受良好，且卡巴利他索在第28天具有最大15.3% bwl且多西他賽在第27天具有17.6% bwl(表1及圖1)。

卡巴利他索及多西他賽皆具高活性，在第27天時，卡巴利他索在14.5及5.6 mg/kg/注射下且多西他賽在9.0及5.6 mg/kg/注射下△T/△C0%(p<0.0001)。

卡巴利他索在9.0 mg/kg/注射下具有極高活性(第27天時△T/△C=7%，p<0.0001)，且多西他賽在14.5 mg/kg/注射下亦具有極高活性(第27天時△T/△C=1%，p<0.0001)。

在3.5 mg/kg/注射下，卡巴利他索仍有活性(第27天時△T/△C=24%，p<0.0001)，而多西他賽無活性(第27天時△T/△C>40%，NS)(表1)。

在第19天、第22天、第25天及第27天在14.5 mg/kg/注射下，在第18天至第27天在9 mg/kg/注射下，在第18天、第19天、第22天、第25天及第27天在5.6 mg/kg/注射下，在第25天及第27天在3.5 mg/kg/注射下，卡巴利他索之效應與對照相比顯著。

每一劑量之總體p值分別係p<0.0001、p<0.0001、p<0.0001及p=0.0473(表2及圖2)。

在此研究中，在第19天、第22天、第25天及第27天在14.5及9 mg/kg/注射下，在第25天及第27天在5.6 mg/kg/注射下，多西他賽與對照相比具有顯著效應。每一劑量之總體p值分別係p<0.0001、p<0.0001及p=0.0005(表2及圖2)。

在等效劑量之卡巴利他索與多西他賽治療之間進行比較時，關於卡巴利他索之經改良抗腫瘤活性觀察到顯著差異。

‧在14.5 mg/kg/注射下，觀察到多西他賽與卡巴利他索之間在第33天至第50天具有顯著差異。

‧在9.0 mg/kg/注射下，觀察到在第19天、第20天及第33天至第43天具有顯著差異。

‧在5.6 mg/kg/注射下，觀察到在第18天、第19天及第33天至第43天具有顯著差異。

‧在3.5 mg/kg/注射下，觀察到在第27天及第29天具有顯著差異(表3；p<0.05)。

在以下3個卡巴利他索組中觀察到腫瘤消退：14.5 mg/kg/注射(6/6 CR)、9 mg/kg/注射(6/6 CR)及5.6 mg/kg/注射(2/6 CR,5/6 PR)，且僅在用14.5 mg/kg/注射(6/6)及9 mg/kg/注射(5/6)之卡巴利他索治療後在第120天獲得TFS(無腫瘤生存者)。

相比之下，在14.5 mg/kg/注射之多西他賽下，3/6小鼠顯示CR且5/6顯示PR但無TFS，在9 mg/kg/注射(2/6)及5.6 mg/kg/注射(4/6)下，多西他賽僅達成PR(表1及圖2)。

總之，對於人類小兒腫瘤橫紋肌肉瘤RH-30，卡巴利他索比多西他賽更有活性。

卡巴利他索在2個劑量水準下達成100% CR，從而產生TFS，在第3劑量水準下亦觀察到腫瘤消退。

相比之下，多西他賽僅在最高測試劑量下引起CR。

實例2：在SCID雌性小鼠中卡巴利他索及多西他賽對人類尤文氏肉瘤TC-71之抗腫瘤活性.

所選腫瘤模型係在SCID小鼠中異種移植之人類尤文氏肉瘤TC-71[Whang-Peng J.等人，Cancer Genet Cytogenet.1986年4月1日；21(3)：185208]。

在腫瘤植入後第12天及第16天靜脈內投與卡巴利他索及多西他賽。

實驗結果報告於表4、表5及表6及圖3及圖4中。

根據對照組腫瘤在指數生長(100 mm³至1,000 mm³範圍)中之對數線性生長曲線及治療後所觀察到之腫瘤消退數目來估計Td(天)。腫瘤倍增時間係2.5天。

使用以下終點：-毒性，其係以引起20%體重損失或10%藥物死亡之劑量宣告；-相對腫瘤生長抑制，其係在腫瘤植入後第21天當對照組中之中值腫瘤大小為1588.5 mm³時測定；-抗腫瘤功效，其係根據上述公式藉由計算△T/△C值(%)來測定；-腫瘤消退(如上文所解釋)；-統計分析，其係如上文所解釋來實施。

開始治療時之中值腫瘤負荷係172 mm³至198 mm³。

在腫瘤後第12天及第16天藉由尾靜脈靜脈內注射投與下列劑量之呈單一藥劑之卡巴利他索及多西他賽：14.5、9、5.6及3.5 mg/kg/注射(表4)。

卡巴利他索及多西他賽耐受良好，且卡巴利他索在第23天具有最大9% bwl，且多西他賽在第22天具有13.7% bwl(表4及圖3)。

卡巴利他索及多西他賽皆具高活性，在第21天時卡巴利他索在14.5、9.0及5.6 mg/kg/注射下及多西他賽在14.5及9.0 mg/kg/注射下之△T/△C<0%(p<0.0001)。

卡巴利他索在3.5 mg/kg/注射下視為活性(第21天時△T/△C=27%，p=0.0047)，而多西他賽在5.6 mg/kg/注射下視為活性(第21天時△T/△C=31%，p=0.0400)，但在3.5 mg/kg/注射下視為無活性(第21天時△T/△C>40%，NS)(表4)。

在第14天至第21天在14.5及9.0 mg/kg/注射下，在第16天、第19天及第21天在5.6 mg/kg/注射下及在第21天在3.5 mg/kg/注射下，卡巴利他索之效應與對照相比顯著(表5及圖4)。

在此研究中，在第16天、第19天及第21天在14.5及9 mg/kg/注射下，多西他賽與對照相比具有顯著效應(總體p值為p<0.0001；表5及圖4)。

在第21天，在5.6 mg/kg/注射下，多西他賽亦觀察到顯著效應(p=0.04)。在3.5 mg/kg/注射下，多西他賽與對照組相比對腫瘤體積變化無顯著效應(表5及圖4)。

在比較等效劑量下之卡巴利他索與多西他賽時，關於卡巴利他索之經改良抗腫瘤活性觀察到顯著差異。

‧在14.5 mg/kg/注射下，觀察到多西他賽與卡巴利他索之間在第16天及第30天至第40天具有顯著差異。

‧在9.0 mg/kg/注射下，觀察到在第16天至第34天具有顯著差異。

‧在5.6 mg/kg/注射下，觀察到在第16天至第26天具有顯著差異。

‧在3.5 mg/kg/注射下，觀察到在第16天至第21天具有顯著差異(表6；p<0.05)。

卡巴利他索在2個最高劑量14.5 mg/kg/注射(7/7 CR、6/7 TFS)及9 mg/kg/注射(6/7 CR、7/7 PR、6/7 TFS)下觀察到腫瘤消退及TFS，且在5.6 mg/kg/注射下達成6/7 PR。

相比之下，多西他賽僅在最高劑量14.5 mg/kg/注射(2/7 CR、6/7 PR、1/7 TFS)下獲得CR及TFS，在9 mg/kg/注射下觀察到5/7 PR(表4及圖4)。

總之，對於此第二人類小兒腫瘤尤文氏肉瘤TC-71，卡巴利他索亦比多西他賽更有活性。

卡巴利他索在2個劑量水準下達成6/7 TFS，在第三劑量水準下亦觀察到6/7 PR。相比之下，多西他賽僅在最高測試劑量下引起CR。

實例3：在SCID雌性小鼠中卡巴利他索及多西他賽對人類尤文氏肉瘤SK-ES-1之抗腫瘤活性.

所選腫瘤模型係在SCID小鼠中異種移植之人類尤文氏肉瘤SK-ES-1[Fogh J.New York：Plenum Press,1975]。

對用於每一治療之卡巴利他索及多西他賽稱重且將其溶解於乙醇中。藉由首先將1體積乙醇原液與1體積聚山梨醇酯80混合然後添加 18體積存於水中之葡萄糖(5%)來製備治療溶液。

在腫瘤植入後第15天及第19天靜脈內投與卡巴利他索及多西他賽。

實驗結果報告於表7、表8及表9及圖5及圖6中。

根據對照組腫瘤在指數生長(100 mm³至1,000 mm³範圍)中之對數線性生長曲線及治療後所觀察到之腫瘤消退數目來估計Td(天)。

腫瘤倍增時間係6.1天。

使用以下終點：-毒性，其係以引起20%體重損失或10%藥物死亡之劑量宣告；-相對腫瘤生長抑制，其係在腫瘤植入後第22天當對照組中之中值腫瘤大小為456 mm³時測定；-抗腫瘤功效，其係根據上述公式藉由計算△T/△C值(%)來測定；-腫瘤消退(如上文所解釋)；-統計分析，其係如上文所解釋來實施。

開始治療時之中值腫瘤負荷係221 mm³至245 mm³。

在腫瘤後第15天及第19天藉由尾靜脈靜脈內注射投與下列劑量之呈單一藥劑之卡巴利他索及多西他賽：14.5、9.0、5.6及3.5 mg/kg/注射(表7)。

卡巴利他索及多西他賽耐受良好，且卡巴利他索在第20天具有最大7.1% bwl，且多西他賽在第27天具有10.5% bwl(表7及圖5)。

卡巴利他索及多西他賽在14.5、9.0及5.6 mg/kg/注射下皆具高活性，第22天時△T/△C<0%(所有劑量之p<0.0001)。

卡巴利他索在3.5mg/kg/注射下視為活性(第22天時△T/△C=22%，p=0.0422)，而多西他賽在3.5 mg/kg/注射下無活性，第22天時△T/△C>40%，NS(表7)。

在第19天至第28天在14.5 mg/kg/注射下、在第22天至第28天在9.0及5.6 mg/kg/注射下，卡巴利他索之效應與對照相比顯著。每一劑量之總體p值係p<0.0001。

卡巴利他索在第22天僅在3.5 mg/kg/注射下亦觀察到顯著效應 (p=0.0422)(表8及圖6)。

在此研究中，在第22天至第28天在14.5及9 mg/kg/注射下，及在第22天及第25天在5.6 mg/kg/注射下，多西他賽與對照相比具有顯著效應。每一劑量之總體p值分別係p<0.0001、p<0.001及p=0.0194(表8及圖6)。

在3.5 mg/kg/注射下，多西他賽與對照組相比對腫瘤體積變化無顯著效應。

在比較等效劑量之卡巴利他索與多西他賽時，關於卡巴利他索之經改良抗腫瘤活性觀察到顯著差異。

‧在14.5 mg/kg/注射下，觀察到多西他賽與卡巴利他索之間在第39天至第45天具有顯著差異。

‧在9.0 mg/kg/注射下，觀察到在第25天至第35天具有顯著差異。

‧在5.6 mg/kg/注射下，觀察到在第22天至第35天具有顯著差異。

‧在3.5 mg/kg/注射下，觀察到僅在第25天具有顯著差異(表9；p<0.05)。

在卡巴利他索之最高劑量14.5 mg/kg/注射下觀察到CR及TFS(6/7 CR、7/7 PR、3/7 TFS)，在9及5.6 mg/kg/注射下達成100% PR。

相比之下，在14.5 mg/kg/注射之多西他賽下，僅3/7小鼠在第120天顯示CR、7/7 PR且無TFS。在9及5.6 mg/kg/注射下，多西他賽分別引起6/7及1/7 PR(表7及圖6)。

總之，對於此第三人類小兒腫瘤尤文氏肉瘤SK-ES-1，卡巴利他索亦比多西他賽更有活性。

卡巴利他索在3個劑量水準下達成100% PR，且在最高測試劑量下達成6/7 CR，從而產生3/7 TFS。相比之下，多西他賽在最高測試劑量下引起3/7 CR且無TFS。

實例4：在裸雌性小鼠中卡巴利他索及多西他賽對人類骨肉瘤DM77之抗腫瘤活性

在此實例中，對腫瘤生長抑制，在活體內卡巴利他索展示優於多西他賽之抗腫瘤活性。

所選腫瘤模型DM77係低傳代之患者源腫瘤異種移植物，該移植物源自取自19歲雄性患者之肺之骨肉瘤。

實驗結果報告於下表10、表11及表12及圖7中。

腫瘤倍增時間(天；Td)係6.6天。

使用以下終點：-毒性，其係以引起20%體重損失或10%藥物死亡之劑量宣告；-抗腫瘤功效，其係根據上述公式計算開始治療後第21天之△T/△C值(%)測定；-個別腫瘤體積自基線之變化，其係由非參數二因數ANOVA型分析(具有因數：組及3至21天之重複天數)，隨後使用Bonferroni-Holm多重性調節之事後對比分析，比較第21天所有治療組與對照組。此外，實施非參數二因數ANOVA型分析(具有因數：治療組及3至56天之重複天數)，及然後使用Bonferroni-Holm多重性調節之對比分析，比較每天以相同劑量或等毒性劑量投與時多西他賽與卡巴厘他索之效應。

-腫瘤生長延遲(T-C)天數，在研究完成時使用各治療組(T)相對於對照(C)達終點之中值時間(MTTE)值計算。用於T-C計算之體積終點經選擇為1400 mm³。對個別TTE實施使用Bonferroni-Holm多重性調節之對數等級多重比較測試以比較治療組與對照組。

-腫瘤消退(如上文解釋)。

結果：

卡巴利他索及多西他賽展示與對照相比之抗腫瘤效應(圖7及表11)。在第21天時，報告經5.8 mg/kg卡巴利他索或多西他賽治療之動物之△T/△C分別為14.1%或18.5%，且報告經9.3 mg/kg卡巴利他索或多西他賽治療之動物之△T/△C分別為0%或9.6%。就兩種測試藥劑而言，給予15 mg/kg或24.2 mg/kg之動物之△T/△C皆低於0%。

對腫瘤體積變化之比較展示，在第25天至第56天，在9.3 mg/kg下，卡巴利他索比多西他賽更有效(表12)。當在9.3 mg/kg下比較治療組之間之PR數目時觀察到類似結果(分別為2/9 PR對0/9 PR)(表11)。

使用重量損失作為大體毒性指標時，多西他賽似乎比卡巴利他索毒性更強(表10)。多西他賽在24.2 mg/kg下在第14天引起17%之過量體重損失。多西他賽在15 mg/kg下在第11天引起14%之體重損失，此與卡巴利他索在24.2 mg/kg下在第14天所觀察到之15%之體重損失相當。實施替代分析以針對較高毒性程度進行調節(表12)。將多西他賽在5.8 mg/kg、9.3 mg/kg或15 mg/kg下之腫瘤體積自基線之變化分別隨時間與9.3 mg/kg、15 mg/kg或24.2 mg/kg下之卡巴利他索進行比較。多西他賽與卡巴利他索顯著不同：5.8 mg/kg多西他賽與9.3 mg/kg卡巴利他索顯著不同(自第18天)，且9.3 mg/kg多西他賽與15 mg/kg卡巴利他索顯著不同(自第11天)。對腫瘤體積變化之比較在最高劑量下不顯示任何顯著差異，研究係在腫瘤再生長之前終止。

結論：卡巴利他索及多西他賽展示穩健劑量依賴性抗腫瘤活性。總體上，給予15 mg/kg及9.3 mg/kg之卡巴利他索引起高於等效劑量或毒性調節劑量之多西他賽之抗腫瘤活性。總體上，在兩個等效之中等劑量下，卡巴利他索比多西他賽更有效。

實例5：在裸雌性小鼠中卡巴利他索及多西他賽對人類骨肉瘤DM113之抗腫瘤活性

在此第二實例中，就腫瘤生長抑制而言，卡巴利他索在活體內展示優於多西他賽之抗腫瘤活性。

所選腫瘤模型DM113係源自骨肉瘤之低傳代患者源腫瘤異種移植物，該骨肉瘤係取自3歲雌性患者之肺。

實驗結果報告於下表13、表14及表15及圖8中。

腫瘤倍增時間(天；Td)係7.9天。

使用以下終點：-毒性，其係以引起20%體重損失或10%藥物死亡之劑量宣告；-抗腫瘤功效，其係根據上述公式藉由計算開始治療後第28天之△T/△C值(%)來測定；-個別腫瘤體積自基線之變化，其係藉由非參數二因數ANOVA型分析(具有因數：組及3至28天之重複天數)及隨後之使用Bonferroni-Holm多重性調節之事後對比分析來分析，從而比較第28天時所有治療組與對照組。此外，實施非參數二因數ANOVA型分析(具有因數：治療組及3至46天之重複天數)，且然後進行使用Bonferroni-Holm多重性調節之對比分析，從而比較在每一天當在相同劑量下投與時多西他賽與卡巴利他索之效應。

-研究結束時，使用每一治療組(T)對對照(C)之達終點之中值時間(MTTE)值來計算腫瘤生長延遲(T-C，天)。用於T-C計算之體積終點經選擇為1600 mm³。對個別TTE實施使用Bonferroni-Holm多重性調節之對數等級多重比較測試以比較治療組與對照組。

-腫瘤消退(如上文所解釋)。

結果：

卡巴利他索及多西他賽之治療對動物之健康狀態的影響較小，但在24.2 mg/kg(分別為11%對13%)及15 mg/kg(分別為9%及8%)之較高劑量下重量損失較顯著(表13)。

除5.8 mg/kg劑量水準之多西他賽(△T/△C=42.9%,p=0.3938；T-C=9天，p=0.1771)外，卡巴利他索及多西他賽經由腫瘤體積自基線之變化或T-C分析(兩個終點之p<0.05)皆展示與對照相比之抗腫瘤效應(圖8及表14)。

如表15中所顯示，在等效劑量水準下對腫瘤體積自基線之變化之比較展示，在9.3 mg/kg(第14天至第38天)、15 mg/kg(第11天至第46天)及24.2 mg/kg(第11天、第24天及第31天至第46天)下，卡巴利他索之活性顯著高於多西他賽。

此外，如表14中所報告，當比較治療組之間之PR數目時，已觀察到在15 mg/kg(分別為4/10 PR對0/10 PR)及24.2 mg/kg(分別為5/10 PR對1/10 PR)下卡巴利他索之活性高於多西他賽。

結論：該等結果展示，在此模型中卡巴利他索及多西他賽皆展示穩健抗腫瘤活性。此外，在9.3 mg/kg、15 mg/kg及24.2 mg/kg劑量水準下，卡巴利他索展示高於多西他賽之功效。

實例6：在裸雌性小鼠中卡巴利他索及多西他賽對人類尤文氏肉瘤DM101之抗腫瘤活性

在此第三實例中，就腫瘤生長抑制而言，卡巴利他索在活體內展示優於多西他賽之抗腫瘤活性。

所選腫瘤模型DM101係源自尤文氏肉瘤之低傳代患者源腫瘤異種移植物，該尤文氏肉瘤係取自17歲雄性患者之骨。

實驗結果報告於下表16、表17及表18及圖9中。

腫瘤倍增時間(天；Td)係4天。

使用以下終點：-毒性，其係以引起20%體重損失或10%藥物死亡之劑量宣告；-抗腫瘤功效，其係根據上述公式藉由計算開始治療後第11天之△T/△C值(%)來測定；-個別腫瘤體積自基線之變化，其係藉由非參數二因數ANOVA型分析(具有因數：組及4至14天之重複天數)及隨後之使用Bonferroni-Holm多重性調節之事後對比分析來分析，從而比較第11天時所有治療組與對照組。此外，實施非參數二因數ANOVA型分析(具有因數：治療組及4至32天之重複天數)，且然後進行使用Bonferroni-Holm多重性調節之對比分析，從而比較在每一天當在相同劑量或等毒性劑量下投與時多西他賽與卡巴利他索之效應。

-研究結束時，使用每一T組對C之達終點之中值時間(MTTE)值來計算腫瘤生長延遲(T-C，天)。用於T-C計算之體積終點經選擇為2000 mm³。對個別TTE實施使用Bonferroni-Holm多重性調節之對數等級多重比較測試以比較治療組與對照組。

-腫瘤消退(如上文所解釋)。

結果：

卡巴利他索及多西他賽經由第11天之△T/△C皆展示與對照相比之顯著抗腫瘤效應(圖6及表17)。

使用重量損失作為大體毒性指標時(表16)，多西他賽在24.2 mg/kg下比卡巴利他索毒性更強(17%對5%體重損失)。

在等效劑量水準下，在經5.8 mg/kg及9.3 mg/kg劑量之卡巴利他索或多西他賽治療之組之間，對腫瘤體積自基線之變化之比較顯示無顯著差異。然而，如表18中所顯示，自第7天開始，經15 mg/kg或24.2 mg/kg劑量之卡巴利他索治療之組與經相同劑量(分別為15 mg/kg或24.2 mg/kg)或等毒性劑量(分別為9.3 mg/kg或15 mg/kg)之多西他賽治療之組出現顯著不同。

此外，與多西他賽相比，經15 mg/kg或24.2 mg/kg之卡巴利他索治療之動物引起更多CR及TFS(在15 mg/kg下，卡巴利他索之9/9 CR及7/9 TFS對多西他賽之4/9 CR及1/9 TFS；在24.2 mg/kg下，卡巴利他索之9/9 CR及8/9 TFS對多西他賽之3/9 CR及2/9 TFS)。

結論：在此模型中卡巴利他索及多西他賽皆展示穩健抗腫瘤活性。在15 mg/kg或24.2 mg/kg劑量下，卡巴利他索比相同劑量(分別為15 mg/kg或24.2 mg/kg)或等毒性劑量(分別為9.3 mg/kg或15 mg/kg)之多西他賽顯著更有活性。

Claims

一種式(I)化合物：其可呈無水鹼、水合物或溶劑合物之形式，用於治療小兒癌症之用途。
如請求項1之化合物，其用於治療小兒實體腫瘤。
如請求項2之化合物，其中該等小兒實體腫瘤係選自由以下組成之群：退行性星細胞瘤、神經膠母細胞瘤、退行性寡樹突神經膠細胞瘤、寡星細胞瘤、退行性室管膜瘤、腎胚細胞瘤、神經管胚細胞瘤、神經胚細胞瘤、威爾姆氏腫瘤(Wilm's tumor)、橫紋肌肉瘤、軟骨肉瘤、尤文氏肉瘤(Ewing's sarcoma)及骨肉瘤。
如請求項1至3中任一項之化合物，其用於治療橫紋肌肉瘤。
如請求項1至3中任一項之化合物，其用於治療尤文氏腫瘤。
如請求項1至3中任一項之化合物，其用於治療骨肉瘤。
如請求項1之化合物，其用於治療高度惡性神經膠質瘤(high grade gliomas)。
如請求項1至3及7中任一項之化合物，其中該化合物係呈丙酮溶劑合物之形式。
如請求項8之化合物，其中該丙酮溶劑合物包括5重量%至8重量%之丙酮。
如請求項1至3及7中任一項之化合物，其中該化合物係藉由非經腸途徑投與。
如請求項10之化合物，其中該化合物係藉由靜脈內途徑投與。