TW201245182A - 1-(3-cyano-1-isopropyl-indol-5-yl)pyrazole-4-carboxylic acid crystalline form and the producing method thereof - Google Patents

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201245182 7、發明說明： 發::屬之拽術領域】 曰細/ &月係有關一種如下式（1)代表之新穎化合物之結 曰日坦（化學名溢μ , va 再’1 一（3~氰基-1-異丙基-。引〇朵-5-基）tf比〇坐-4- 殘酸），其、田、 ^ 、 用為對抗黃嗓吟氧化酶之抑制劑，及其製備方

【先前技術】 (1) ,、下7氧化酶係一種轉化6-經基嘌吟（hypozanthine) 形成《嗓吟’且再進一步將所形成之黃嘌呤轉化成尿酸之 酵素°當身體出現太多尿酸時，即可能引起各種不同疾病， &…痛風^痛風係指尿酸結晶堆積在軟骨、韌帶與周圍組 織’而誘發嚴重發炎與疼痛之疾病。過去4〇年來，痛風之 發病率持續上升（N. l. Edwards, Arthritis & Rheumatism, 2008，58，2587至2590)。此外，許多研究者已證實尿酸 與心臟哀竭、而血壓、糖尿病、腎臟病及心血管疾病之間 之緊密相關性’並已注意到控制尿酸之重要性（D. I. Feig etal·，N. Eng. j. Med, 2008，23，1811 至 1821)。因 此’抑制黃嘌呤氧化酶活性之物質即可有效用於治療與黃 嗓吟乳化酶相關之疾病，如.南尿酸血症、痛風、心臟衰 竭、心血管疾病、高血壓、糖尿病、腎臟病、發炎與關節 3 95564 201245182 疾病、發炎性腸病，等等。 另一方面，在要求高品質及長期保存之醫學領域中， 使用具有物理及化學穩定性之醫藥作為活性成份相當重 要。因此，這種活性成份之優異藥劑性質及其優越之藥理 效力極有價值成為本發明之效應。 【發明内容】 本發明之目的在於提供一種新穎式（1)化合物之結晶 型[下文稱為化合物（1)]，藉以提供優異之藥劑性質（如： 穩定性、不吸水性、容易操作，等等），及藉由選擇性與黃 °票。令氧化酶結合而達到之藥理活性。 下文更詳細說明本發明。 本發明提供一種新穎化合物（1)之結晶型（化學名稱： 1-(3-氰基-1-異丙基-吲哚-5-基）吡唑-4-羧酸），其適用為 對抗黃嗓呤氧化酶之抑制劑。

化合物（1)結晶型（亦即1-(3-氰基-1-異丙基-吲哚-5 -基）°比唾-4-羧酸之結晶型）顯示對抗黃嘌呤氧化酶之抑制 活性，且其製造方法將更詳細說明於下文之製法中。 黃嘌呤氧化酶為一種轉化6-羥基嘌呤形成黃嘌呤，且 再進一步將所形成之黃嘌呤轉化成尿酸之酵素。當身體出 現太多尿酸時，即可能引起各種不同疾病，如：痛風。化 95564 4 201245182 合物（1)結晶型可選擇性抑制黃嘌呤氧化酶。 當採用X-射線粉末繞射法（XRD)分析時，化合物（1)結 晶型顯示特徵峰值（2 0)為 12. 1。、13.2。、15.7。、18.3。、 24·8°、25. 8°與26.6。更明確言之’當採用XRD分析時， 化合物（1)結晶型顯示之特徵峰值（2 (9 )為12. 1。、13. 2。、 15. 7。、16. 6°、18. 3。、19. 6。、20. 9。、23.1。、24. 8。、25. 8。 與 26. 6°。 此外’當採用示差掃描量熱法分析化合物〇)結晶型 時，其出現自263至268。(：之熔點所引起之初始吸熱峰， 由此可見根據本發明新穎化合物（1)結晶型具有263至268 °C之高溶點’極適合抗熱（第2圖）。此點可由在4〇土2。(：， 75±5% RH或60±2°C，5±5% RH之高溫條件下存放12周後 之熱穩定性數據證實《甚至在化合物存放12週後，其原始 之内容物完全沒有減少。在熱解重量分析法中，由示差掃 描量熱法顯示之吸熱段（263至268。〇(第3圖），可證實沒 有重量損失。 此外’本發明化合物（1)結晶型極適合對抗濕氣。如 第4圖所示，已證實本發明結晶型在濕氣吸附等溫線中顯 示其受濕氣影響造成之重量變化僅約〇·3%或更低。因此認 為本發明結晶型極適合對抗濕氣。 如上述’根據本發明化合物（1)結晶型在寬廣之相對 濕度範圍内，其重量很少或不會隨濕度變化，此表示該結 晶型不會隨濕度變化而改變，且極適合抗熱。因此，特別 適用於穩定存放、研磨加工，等等。 95564 5 201245182 本發明亦提供-種製備化合物⑴結晶型之方 係使化合物⑴自合適溶劑或溶親合物巾結晶 溶劑混合物較佳係選自已用於化合物⑴製法中 。該溶劑或 之溶剞。所 採用之該溶劑或溶劑混合物係選自 益7匕产田结· 下列各物所組成拜中：

使化合物⑴自合適溶劑中結晶之方法可為如：冷卻 溶液、.蒸發溶劑、添加反溶劑（不會溶解化合物⑴之溶劑， 例如·水）至達到超飽和為止、轉換成浆液態，等等。 本文所採用化合物⑴結晶型可呈化合物本身或呈包 含該化合物與其㈣讀合療法之活性絲或與其他合適 載劑或賦形劑之醫藥組合物投與人類患者。 本發明醫藥組合物可依已知方法製備，如：習知之混 合、溶解、製粒、壓鍵、磨粉、乳化、囊封、包埋或冷束 乾燥，等等。 因此本發明醫藥組合物可依傳統方法，使用一或多種 醫藥上可接受之載劑製備。該等载劑包括容易將活性化合 物轉換成醫藥上可接受之調配物之賦形劑或輔劑。合適調 配物可隨所選用之投藥途徑變化。可在相關技藝上已知（例 95564 6 201245182 如："雷氏醫藥學（Remington’ s Pharmaceutical Sciences) ")之技術、載劑與賦形劑、及方法中適當選擇。 例如：化合物（1)結晶型可調配成注射製劑、口服製 劑’等等’端賴本發明之計畫目的而定。 製備注射製劑時，本發明活性化合物可使用醫藥上合 適之緩衝液（較佳為漢克氏溶液（Hank s〇iuti〇n)、林格氏 溶液（Ringer solution)、生理食鹽水，等等）調配成液態 製劑。為了通過黏膜投藥，可在調配物中使用適合滲透障 壁之滲透加強劑。此等滲透加強劑係相關技藝上習知者。 本發明活性化合物很容易藉由組合化合物與相關技 藝上已知醫藥上可接受之載劑，而調配成口服投藥用之固 體劑型。藉由使用此等載劑，本發明化合物可調配成錠劑、 柘劑、粒劑、糖衣錠、膠囊、液體、凝膠、糖漿、漿液、 懸浮液，等等。以膠囊、錠劑、丸劑、粉劑與粒劑較有利， 且以膠囊與錠劑特別有利。例如：可依下列方法得到口服 投藥用劑型。 人=根據本發明化合物⑴結晶型與一或多種賦形劑混 ί二適^可研磨混合物。若必要時可添加合適輔劑， 合物得到錠劑或糖衣錠核心。合適之賦形劑可 魏^料’如：乳糖、蔗糖、甘露糖醇或山梨糖醇；纖維 ’、，如.玉米澱粉、小麥澱粉、米澱粉、气於薯澱粉、 输雄去：基纖維素、羥丙基甲基纖維素、羧甲基 …素鈉及/或聚乙稀㈣咬酮（ρνρ);等等。若必要時， 可添加崩解劑作為载劑，如：交聯聚乙㈣、洋菜、 95564 7 201245182 藻酸或其鹽（如：藻酸鈉）、潤滑劑（如：硬脂酸鎂）與結合 劑。 口服製劑可包括密封之軟膠囊（其係由明膠與增塑劑 如：甘醇或山梨糖醇製成）及硬明膠囊（其係由明膠製成）。 硬明膠囊可包含活性化合物與填料（如：乳糖）、結合劑 (如：澱粉）及/或潤滑劑（如：滑石或硬脂酸鎂）之混合物。 軟膠囊中，活性化合物可溶解或勻散於合適介質中，如： 脂肪酸、液態石蠟或液態聚乙二醇。此外，可包括安定劑。 所有口服投藥用調配物均可包含適量活性化合物。 活性化合物（亦即化合物（1)結晶型）亦可調配成注射 製劑，如，例如：大丸型注射劑或連續型注射劑，供非經 腸式投藥。該注射製劑可呈包含防腐劑之安瓿型式或填裝 在多劑量容器中之單位劑型。該組合物可呈含於油或液態 媒劑中之懸浮液、溶液或乳液，且可包含調配用組份，如： 懸浮劑、安定劑及/或崩解劑。活性成份可呈粉末型式，其 計晝在臨用前才溶解於無菌無熱原水中重新組成。該活性 化合物亦可調配成供直腸投藥用組合物，如：包含習知栓 劑基質（例如：可可脂或其他甘油酯）之栓劑或灌腸劑。 根據本發明醫藥組合物中之化合物（1)結晶型包含可 有效達到其計畫目的之用量。明確言之，該醫療有效量意 指活性化合物之用量可有效延長所治療患者之存活，或可 預防、減輕或緩解疾病之症狀。熟悉此相關技術者特別依 據本文所提供之詳細說明，應可以決定醫療有效量。 當化合物調配成單位劑型時，每單位劑量中基於化合 95564 8 201245182 物（1)計，化合物（1)之結晶型較佳含量為約0. 1至1，000 mg。該劑量依醫師之處方，考量諸如患者體重或年齡、疾 病之明確性質、疾病之嚴重性，等等而定。然而，治療成 人所需之劑量通常為每天約1至1，〇〇〇 mg，依投藥強度與 頻率而定。當經由肌内或靜脈内途徑投與成人時，以單一 劑量分開投與時，每天總劑量約1至500 mg應已足夠，但 有些患者可能需要更高曰劑量。 本發明進一步提供一種使用醫療有效量化合物（1)結 晶型來預防或治療與人類黃嘌呤氧化酶有關之疾病之方 法。”與人類黃嘌呤氧化酶有關之疾病π—詞係指該疾病可 藉由抑制人類黃嘌呤氧化酶來預防或治療，其包括（但不限 於）：高尿酸血症、痛風、心臟衰竭、心血管疾病、高jk壓、 糖尿病、糖尿病併發症、腎臟病、發炎與關節疾病、發炎 性腸病，等等。該糖尿病併發症之某些實例為高血脂症、 動脈粥樣硬化、肥胖、高血壓、視網膜變性、腎衰竭，等 等（Circulation Research, 2006， 98， 169 至 171 ;

Hypertension 2003, 41，1183 至 1190)。此外，如動物毒 性試驗數據所證實，本發明化合物（1)結晶型沒有遺傳毒 性、重覆毒性，等等，且極為安全。 如本文所採用”治療"一詞係指當施用於開始出現疾 病症狀之個體時，可干，擾或延緩疾病進展，且"預防”一詞 意指當施用於尚未出現疾病症狀但處於疾病症狀發作風險 之個體時，可干擾或延缓疾病癥狀發作。 本發明將利用下列實例與試驗實例更詳細說明。然 95564 9 201245182 而，其僅供協助了解本發明，但無意以任何方式藉由此等 實例與試驗實例來限制本發明之範圍。 [發明之效果] 本發明新提供之化合物（1)之結晶型係藉由選擇性抑 制黃嘌呤氧化酶而具有藥理活性，同時具有優異之醫藥穩 定性，如：熱穩定性、儲存穩定性，等等。作為新穎物質 之化合物（1)結晶型適用之原因在於其在寬廣之相對濕度 範圍下，其重量很少或不會隨濕度變化，且其結晶型不會 隨濕度變化而改變。此外，根據本發明所提供之各種不同 方法，可能控制此結晶型之製法。 【實施方式】 製法：化合物（1)製法 製法1-1 : 1-(3-氰基-1H-吲哚-5-基）吡唑-4-羧酸乙酯 標題化合物係依據下列製程（1)、（2)與（3)製得。 (1) 1-(3-曱醯基-1H-吲哚-5-基）吡唑-4-羧酸乙酯製法

於0°C下，在無水二氣曱烷（50 mL)中依序添加草醯氯 (0.56 111[，6.6 111111〇1)與11^二甲基甲醯胺（0.511^，6.6 mmol)。混合物於0°C下授拌30分鐘。在此反應溶液中添 加含卜（111-0引°朵-5-基）°比°坐-4-幾_酸乙酯（1.40 g，5. 47 mmol)與二氯曱烧（50 mL)之混合物，然後於室溫回流下攪 拌1小時。排除溶劑。添加四氫呋喃（100 mL)與20%乙酸 95564 10 201245182 銨水溶液（100 mL)至殘質中，加熱30分鐘，並於回流下攪 拌。反應完成後，冷卻反應溶液，添加乙酸乙酯。混合物 經碳酸氫鈉水溶液洗滌，有機層經無水硫酸鎂脫水，及減 壓濃縮，產生標題化合物。 質量（El) 284(M++1) (2)1-[3-[(Ε，Z)-羥基亞胺基曱基]-1H-吲哚-5-基]«比唑 -4-羧酸乙酯製法

將得自上述步驟（1)之1-(3-曱醯基-1H-吲哚-5-基） 吡唑-4-羧酸乙酯溶於吡啶（150 mL)，添加羥基氯化銨（499 mg, 7. 18 mmol)。加熱混合物，於回流下授拌5小時。反 應完成後，減壓濃縮溶劑。殘質通過矽膠，使用丙酮作為 溶劑進行過濾，產生標題化合物。 質量（El) 2990T+1) (3) 1-(3-氰基-1H-吲哚-5-基）吡唑-4-羧酸乙酯製法

將得自上述步驟（2)之1-[3-[(Ε，Ζ)-羥基亞胺基甲基] -1H-吲°朵-5-基]σ比嗤-4-叛酸乙酯溶於無水四氫吱喃（94 mL)。於其中加入二（咪唑-1-基）曱硫酮（90%，2.79 g，14.1 mmol)，於室溫下攪拌混合物2小時。反應完成後，反應溶 95564 11 201245182 液減壓濃縮。所得固體化合物採用管柱層析法分離，產生 標題化合物（1.32 g，4.71 mmol，產率86%)。 NMRi W-NMlUDMSO-de) δ 12.40(1H，bf), 9·20(1Η，s)，8·37(1Η，s)， 8.2Κ1Η, d), 8.14C1H, s) , 7.89(1H, dd), 7.68(1H, d), 4.29(2H, q), 1.32C3H, t) 質量：El.) 281(^+1) 製法1-2: 1-(3-氰基-1-異丙基-吲哚-5-基）吡唑-4-羧酸 乙酯

將得自製法1_1之1-(3-氰基基）°比嗤_4-竣酸乙酯（13. 84 g, 49. 38 mmol)溶於乙腈（200 mL)。添加 碳酸铯（32.17 g, 98. 74 mmol)與 2-碘丙烷（19.7 mL, 198 腿ο 1 )，加熱混合物後，於回流下擾拌5小時。反應完成後， 反應溶液減壓濃縮。所得固體化合物採用管柱層析法分 離，產生標題化合物（13.87 g，43.03 mmol,產率87°/。）。 NMR： ^-NMRCCDCls) δ 8.48(1H, s), 8.16(1Η, s), 8.06(1Η, d), 7.82(ltt, s), 7,78(1H, dd), 7.57(1H, d), 4.80-4,73(111, m), 4.38C2H, q), 1.64(6H, d), 1.42(3H, t) 質量（El) 323(^+1) 製法1-3: 1-(3-氰基-1-異丙基-吲哚-5-基）吡唑-4-羧酸 (化合物（1)) 95564 12 201245182

N

將得自製法卜2之1-(3-氰基-1-異丙基-吲哚-5-基） 口比唾-4-叛酸乙酯（13.87 g，43.03 mmol)加至含四氫吱0南 (140mL)、甲醇（140mL)與6N氫氧化鈉（70mL)之溶液中， 然後於室溫下反應1小時。反應後，減壓排除有機溶劑， 殘留之水溶液層經乙酸乙酯洗滌。添加濃鹽酸酸化水溶液 至pH 1。遽出沉殿之固體化合物，以蒸顧水洗滌，及乾燥， 產生標題化合物（12.09 g, 41.08 mmol,產率95%)。 NMR： ^-NMRCDMSO-de) δ 12.55(1Η, br), 9.10C1H, s), 8.53(1H, s), 8.16(1H, d), 8.06C1H, s), 7.90(1H, dd), 7.86(1H, d)， 4.92-4.86(1H, m), 1.48(6H., d) 質量（El) 295(.Μ"+1) 實施例1 :化合物（1)結晶型製法 將所製得之1-(3-氰基-1-異丙基-吲哚-5-基）吡唑 -4-羧酸（3. 82 kg)溶於丙酮（382 L)，然後在攪拌下慢慢滴 加至90°C溫度之水（40 L)中。滴加完畢後，再攪拌混合物 約12小時，冷卻與過濾，產生本發明化合物（1)結晶型 (3.40 kg)。所得化合物（1)結晶型以1Η-NMR與IR分析特 徵。結果示於下列。 ^-NMR (DMSO-De, ppm) 1.5 (6H, d), 4.9 (1H, q), 8.6 (1H, s), 8.2 (1H, d), 7.9 (1H, dd), 7.9 (1H, d), 8.1 (1H, s), 9. 1 (1H, s), 12. 6 (1H, br) 95564 13 201245182 IRCcnT1) 2500 至 3150，2215, 1669，1558, 1502，1263 此外’如得自XRD之第1圖光譜所示，化合物（i)結 晶型顯示特徵峰值（20 )為 12. 1。、13. 2。、15. 7。、18. 3。、 24· 8、25. 8°與26. 6°。XRD之明確數值示於下表1。 【表1】 2Θ 相對強度（1/1〇) 12. 1 0. 71 13.2 0. 15 15. 7 0. 17 18. 3 0. 21 24.8 1. 00 25.8 0.37 26. 6 0. 16 實施例2 將所製得之1-(3-氰基-1-異丙基-吲哚_5_基）吡唑 -4-叛酸（40 mg)溶於四氫咬南（1〇 mi) ’於室溫下慢慢蒸發 溶劑，產生化合物（1)結晶型（35 g)。 XRD之明確數值示於下表2。 95564 14 201245182 【表2】 2Θ 相對強度（1/1〇) 12. 1 1. 00 13. 2 0. 16 15. 6 0. 07 16. 6 0. 38 18. 2 0. 13 19. 6 0.26 20. 9 0. 18 24. 7 0.44 25. 6 0. 17 26. 6 0. 16 實施例3 將所製得之1-(3-氰基-1-異丙基-吲哚-5-基）吡唑 -4-羧酸（200 mg)加至第三丁醇（120 ml)中，於室溫下蒸發 溶劑，產生化合物（1)結晶型（190 g)。 XRD之明確數值示於下表3。 【表3】 2Θ 相對強度（1/1〇) 12.2 1. 00 13. 3 0. 09 15. 9 0. 11 16. 7 0.35 18.4 0. 09 19.7 0.18 21. 1 0. 18 24.7 0.37 25.9 0.14 26. 7 0. 13 95564 15 201245182 實施例4 將所製付之1 _ ( 3 _氛基-1 -異丙基~ ®引π朵-5 -基）叶匕σ坐 -4-羧酸（200 mg)加至乙醇（60 ml)中’然後於呈漿狀物狀 態下攪拌24小時’並過濾，產生化合物（1)結晶型（184 g)。 XRD之明確數值示於下表4。 【表4】 2Θ 相對強度（1/1〇) 12. 1 1. 00 13.2 0. 13 15.7 0. 11 16.6 0. 32 18.3 0. 15 19. 6 0.26 20.9 0. 18 24. 9 0.88 25. 8 0. 30 26. 6 0. 22 實施例5 將所製付之1 - ( 3 -氰基-1 -異丙基-α弓丨π朵-5 -基）α比吐 -4-羧酸（200 mg)加至乙腈（7〇 ml)中，然後於呈漿狀物狀 態下攪拌24小時，並過濾，產生化合物（1)結晶型（179 g)。 XRD之明確數值示於下表5。 95564 16 201245182 【表5】 2Θ 相對強度（1/1〇) 12. 1 1. 00 13. 2 0. 13 15. 7 0. 11 16. 6 0. 39 18. 3 0. 16 19. 6 0. 28 21. 0 0. 22 23. 3 0. 12 24. 9 0. 89 25. 8 0. 30 26. 6 0. 22 實施例6 將所製得之1-(3-氰基-1-異丙基-吲哚-5-基）吡唑 -4-羧酸（200 mg)加至氯仿（120 ml)中，然後於呈漿狀物狀 態下攪拌24小時，並過濾，產生化合物（1)結晶型（196 g)。 XRD之明確數值示於下表6。 95564 17 201245182 【表6】

實施例7 將所製得之1-(3-氰基-1-異丙基-吲哚-5-基）吡唑 一4-羧酸鈉鹽（7·3 kg)溶於1〇N Na〇H溶液（116 L)。於攪 拌下，在此溶液中慢慢滴加鹽酸（12. 1 kg)。化合物（1)結 晶型開始沉澱。當pH達到約1至2時，停止滴加鹽酸。攪 拌混合物直到呈均勻為止，然後過濾，產生化合物（1)結晶 型（15.96 kg)。 95564 18 201245182 【表7】

試驗例1 粉末X-射線繞射分析法 、將得自實例1之約40 mg化合物（1)結晶型加至樣本 —定器中条在X Pert PRO(來自Panalytical)上，測 疋4至4GV2 0範圍内之繞射圖型。其結果示於第。 刀析法之明確條件如下。 積分時間（Time per step) : 99.45 s 解析度：0. 0394。 掃瞄模式：連續

電壓/電流·· 45 kV/40 mA

Cu-鈀（Ni-濾器） 固定發散狹縫 平行板狹縫：平行板〇. 〇4 rad 95564 19 201245182 檢測器狹縫0.04 rad平行板狹縫，反散射狹縫P7. 5 由第1圖可證實，所分析之本發明化合物（1)結晶型 在CuKa，45Kv，40m A下測定XRD光譜所出現之特徵峰 值（20 )為 12. 1°、13. 2°、15. 7°、18. 3°、24. 8°、25. 8° 與 26.6° 。 試驗例2 差示性掃瞄熱量儀（DSC) DSC係採用Mettler Toledo公司之DSC821e進行。取 3 mg得自實施例1之化合物（1)結晶型置於鋁盤，精確記 錄其重量。在Is盤上加蓋。在蓋上打孔並成型。紹盤架在 儀器上。在氮氣吹掃下，依10°C/分鐘之速率自25°C加熱 至300°C。使用銦金屬作為校正標準物。所得結果示於第2 圖。如第2圖所證實，本發明化合物（1)結晶型因為其熔點 從263至268°C而出現初始吸熱峰，由此可見本發明結晶 型具有高熔點，而且可以穩定抗熱。 試驗例3 熱重量分析法（TGA) TGA係於Mettler Toledo公司之TGA850進行。將得 自實施例1之化合物（1)結晶型5 mg置於鋁盤。鋁盤架在 儀器上，然後在氮氣吹掃下，依10°C/分鐘之速率，自25 °C加熱至 300°C。使用鎳與紹（Nickel and Aluminum™ )作 為校正標準物。所得結果示於第3圖。由第3圖所證實， 本發明化合物（1)結晶型在DSC之吸熱階段並未顯示重量 損失，由此可見本發明結晶型可以穩定抗熱。 95564 20 201245182 試驗例4 等溫濕氣吸附/解吸分析法 將付自實施例1之化合物（1)結晶型，於VTI-SA蒸汽 吸收刀析儀（Vap()r sorpticm Analyzer)上收集濕氣吸附/ 解吸數據。樣本未在分析前先乾燥。在維持机溫度下， 在相對濕度（RH)為5至95%之範圍内，依5% RH之間隔分 析濕氣之吸附與解吸。其結果示於第4圖。由第4圖可見， 根據5至95% RH範圍内之外部濕度變化，本發明化合物⑴ 結晶型所出現之重量變化僅〇·3%或更小。亦即，本發明結 曰曰型可極穩定對抗相對濕度之任何變化，且隨著濕度變 化’該結晶型仍無變化。 試驗例5 熱穩定性 將得自實施例1之本發明結晶型約50 mg置入Duma

瓶中’然後保存在 4〇±2。(：，75±5% RH 或 60±2。(：，5±5% RH 下。經過2週、8週與12週後，自Duma瓶中取出各樣本。 樣本溶於乙腈/水/〇· 1N氫氧化鈉溶液do/Go/i^v/v/v%) 溶劑混合物中，然後進行HPLC分析。HPLC分析之條件如 下： HPLC分析之條件 管柱：dC18(4. 6 mm I.Dx450 mm L，粒度 S.Oem，

Agilent) 管柱溫度：20¾ 移動相：MeCN/H2〇/TFA = 35/65/0.1 95564 21 201245182 流速：1. 0 mL/min. 4貞測：250 nm, UV 注射體積：10/z 1 總分析時間：40 min. 結晶型之熱穩定性結果示於下表8中。 【表8】 時間（週） 40°C/75°/〇 RH 60°C/5°/〇 RH 0 95. 1 95. 1 2 95. 3 95. 3 8 95. 2 95. 3 12 95.4 95.4 表8中數據顯示，本發明化合物（1)結晶型在40±2°C， 75±5%RH或60±2°C，5±5%RH之條件下12週後，仍具有優 異之穩定性。 試驗例6 對黃β票呤氧化酶選擇性之估測法 將本發明化合物（1)結晶型投與雄性小鼠（BALB/c)， 劑量為100或300 mg/kg。24小時後，收集血液，分離企 漿。採用LC-MS/MS定量分析血漿中乳清酸（0A)與乳清苷 (0D)濃度。結果示於下表9。本試驗試圖證實化合物（1)結 晶型對嘧啶代謝作用中之主要酵素（亦即乳清酸磷酸核糖 基轉移酶（OPRT)與乳清苷單磷酸脫羧基酶（OMPDC))是否具 有選擇性。本活體試驗中，血中0A與0D並未增加（見下表 9)。由此結果可預測，化合物（1)結晶型可與黃嗓β令氧化酶 95564 22 201245182 選擇性結合。 【表9】 動物編號 化合物 濃度（"g/ml) 乳清酸 乳清苷 化合物（1) 1 0. 26 無波峰 - 2 0. 21 無波峰 一 3 對照組 0. 19 無波峰 — 4 0. 23 無波峰 — 5 0. 20 無波峰 — 26 0. 18 無波峰 0. 022 27 化合物（1) 0. 19 無波峰 0. 022 28 100 mpk 0. 26 0. 70 0. 059 29 (G6) 0. 20 無波峰 0. 037 30 0. 18 無波峰 0. 546 31 0. 17 無波峰 2. 561 32 化合物 0. 17 無波峰 4. 282 33 (1)300 mpk 0. 16 無波峰 3. 585 34 (G7) 0. 21 無波峰 6. 663 35 0. 22 0. 52 2. 554 試驗例7 評估對動物之生體可用率 為了評估本發明化合物（1)結晶型之生體可用率，對 大鼠、猴子與狗經靜脈内及經口投與單劑量之化合物（1) 結晶型。收集血液，採用LC-MS/MS定量分析血漿中化合 物（1)結晶型濃度。取得各投藥途徑之藥物動力學參數 95564 23 201245182 (Cmax、AUCinf、CL、Vdss、t 丨 _2)，由經口 投藥之 AUC 相對於 靜脈内投藥之AUC之百分比計算生體可用率。分析大鼠、 猴子與狗之生體可用率分別為37至61%、23至39%與75°/〇。 【圖式簡單說明】 第1圖代表化合物（1)結晶型之X-射線粉末繞射法 (XRD)圖型。 第2圖代表化合物（1)結晶型之示差掃描量熱法（DSC) 結果。 第3圖代表化合物（1)結晶型之熱解重量分析法（TGA) 結果。 第4圖代表化合物（1)結晶型之濕氣吸附/解吸等溫 線。 【主要元件符號說明】 無 95564 24

Claims (1)

1. 201245182 七、申請專利範圍： 1. 一種如下式（1)代表之化合物之結晶型：

   如申請專利範圍第1項所述之結晶型，其在χ_射線繞 射圖型光譜中出現之特徵峰值（2<9 )為12. Γ、13.2。、 15.7。、18.3。、24.8。、25.8。與 26.6。。 如申睛專利範圍第1項所述之結晶型，其在χ_射線繞 射圖型光譜中出現之特徵峰值（20 )為12. Γ、13. 2。、 15.7°、16.6°、18.3。、19.6。、20.9。、23. Γ、24.8。、 25. 8°與 26. 6°。 •如申請專利範圍第1項所述之結晶型，其由Dsc之起始 溫度顯示示差掃描熱量分析曲線之熔點為263至268〇C。 5· 一種製備式（1)化合物結晶型之方法，其係使如申請專 矛J範圍第1項所定義之式（1)化合物溶於選自下列各物 所組成群之溶劑申：無水乙醇、2-甲氧基乙醇、異丁醇、 正丁醇、正辛醇、正丙醇、異丙醇、第三丁醇、乙酸、 丙酮、乙酸丁酯、乙酸甲酯、乙酸乙酯、乙酸丙酯、乙 酸第三丁酯、乙酸異丁酯、甲基乙基酮、2_戊酮、四氫 呋喃、乙腈、氯仿、曱苯與該等之混合物，並自其中結 晶。 5·如申請專利範圍第5項所述之製備式（1)化合物結晶型 95564 1 201245182 之方法，其中’該結晶化係藉由選自下列之方法而進 行：冷卻溶液、蒸發溶劑、添加反溶劑直到達到超飽和、 及轉化成漿液態。 7. 如申請專利範圍第5項所述之製備式⑴化合物結晶型 之方法’其中’使如巾請專利範圍第1項所定義之式⑴ 化合物溶於丙酮中，然後蒸發。 8. 如申請專利範圍第5項所述之製備式⑴化合物結晶型 其中使如中請專利範圍第1項所域之式⑴ 擾拌與過濾、。01 6猜或⑽，形成毁液，然後 9·;=Γ第5項所述之製備式⑴化合物結晶型 化人中請專利範圍第1項所定義之式⑴ 劑 氣。夫喃或第三丁醇，並於室溫下蒸發溶 10.如申請專利範圍第 之方法，发中，估製備式⑴化合物結晶型 化合物之鈉4:::專利範圍第1項所定義之式⑴ 晶種並_合物'直=:二滴：鹽酸以產生結 相關疾病，該相關疾病'#選°自由翻防與黃嗓吟氧化酶 臟衰蝎、心血答 選自由高尿酸域、痛風、心 與關節疾病、及高血壓、糖尿病、腎臟病、發炎 及發炎性腸道疾病所組成群者。 95564 2