TW201008926A - Pyrazinone modulator of corticotropin-releasing factor receptor activity - Google Patents

Description

201008926 六、發明說明： 【發明所屬之技術領域】 本發明係關於化合物環丙基-2-曱氧基乙基）-6-(6-(二氟甲氧基）-2,5-二曱基吼啶-3-基胺基）-5-側氧基-4,5-二氫吡嗪-2-甲腈、該化合物之醫藥組合物，及使用該化合 物治療精神病症及神經疾病的方法，該等病症包括抑鬱 症、焦慮相關病症、大腸急躁症、成瘾及藥物及酒精戒斷 之消極方面，及與CRF相關之其他病狀。 β 相關申請案之交叉參考 本申請案主張2008年7月3 1曰申請之美國臨時專利申請 案第61/085,230號之權利。 【先前技術】 促腎上腺皮質激素釋放因子（CRF)(41個胺基酸肽）為腦 下垂體前葉所分泌之原嗎啡黑色素皮質素（POMC)衍生肽 之主要生理調節因子[Rivier, J.等人，/Voc. 5W. (USA) 80: 4851 (1983) ； Vale, W. # A » Science 213: 1394 (1981)]。除了 CRF在腦下垂體之内分泌作用之外，CRF之 免疫組織化學定位已展現該激素在中樞神經系統中具有廣 * 泛的下丘腦外分布，且在腦中產生與神經傳遞或神經調節 -作用一致的廣泛自主性、電生理及行為效應[Vale，W.等 人，Prog. Horm. Res. 39: 245 (1983) ; Koob, G. F.

Med. 2: 39 (1985) ; De Souza, E. B.等人，·/· 5: 3189 (1985)]。有證據證明CRF在整合免疫系 統對生理、心理及免疫應激子之反應上具有顯著作用 141617.doc 201008926 [Blalock, J. E. Physiological Reviews 69: 1 (1989) i

Morley, J. E. Life Sci. 41: 527 (1987)] ° 已提出CRF之過度表現或表現不足為多種醫學病症之潛 在原因。此等可治療病症包括情感性精神障礙、焦慮症、 抑鬱症、頭痛、大腸急躁症、創傷後壓力症、核上麻痹、 免疫抑制、阿茲海默氏病（Alzheimer's disease)、腸胃病、 神經性厭食症或其他餵食障礙、藥物成癮、藥物或酒精戒 斷症、發炎疾病、心血管疾病或心臟病、生育問題、人類 免疫缺乏病毒感染、應激性出血症、肥胖、不孕症、頭部 及脊髓損傷、癲癇症、中風、潰瘍、肌肉萎縮性側索硬 化、低血糖症、高血壓、心跳過速及充血性心臟衰竭、中 風、骨質疏鬆症、早產、心理社會性侏儒症、應激性發 熱、潰瘍、腹瀉、術後腸阻塞及與精神病理性障礙及應激 相關聯之結腸超敏[欲回顧，請參見McCarthy, J. R.; Heinrichs, S. C.; Grigoriadis, D. E. Cur. Pharm. Res. 5: 289-315 (1999) ； Gilligan, P. J.; Robertson, D. W.; Zaczek, R. J. Med. Chem. 43: 1641-1660 (2000), Chrousos, G. P. Int. J. 24，增刊 2, S50-S55 (2000) ; Webster, E·;

Torpy, D. J.; Elenkov, I. J.; Chrousos, G. P. Ann. N.Y. Acad. Sci. 840: 21-32 (1998) i Newport, D. J.; Nemeroff, C. B. Curr. Opin. Neurobiology, 10: 211-218 (2000) Mastorakos, G.; Ilias, I. Ann. N.Y. Acad. Sci. 900: 95-106 (2000)；

Owens, M. J.; Nemeroff, C. B. Expert Opin. Invest. Drugs 8: 1849-1858 (1999) ； Koob, G. F. Ann. N.Y. Acad. Sci., 141617.doc 201008926 909: 170-185 (2000)]。 有證據證明CRF在包括抑鬱症（例如重度抑鬱症、單次發 作抑鬱症、復發性抑鬱症、幼兒受虐誘發性抑鬱症及產後 抑發症）、煩躁、雙極性病症及情感迴環之情感性精神障 礙中起作用。在罹患重度抑鬱症之個體中，不用藥個體之 腦脊髓液（CSF)中CRF之濃度顯著增加[Nemeroff，C· B.等 A > Science 226: 1342 (1984) ; Banki, C. Μ·等人，d w. 乂 144: 873 (1987) ; France, R. D.等人，价〇/· 28: 86 (1988) ; Arato, M.等人，价〇/ Piyc/n.airy 25: 3 55 (1989)]。此外，與CRF之分泌過多一致，自殺者 之額葉皮質中之CRF受體密度顯著減少[Nemeroff, C. B.等 人，drc/z. PsycWair少 45: 577 (1988)]。另外，對在 抑鬱患者中所觀測到之CRF(靜脈内投與）存在弱化之促 腎上腺皮質激素（ACTH)反應[Gold, P. W.等人，«/. Pi少141: 619 (1984) ; Holsboer，F.等人， Psychoneuroendocrinology 9: 147 (1984) ; Gold, P. "W.等 人，JVew 五《g· X Med. 314: 1129 (1986)]。對大鼠及非人靈 長類之臨床前研究進一步證明CRF之分泌過多可與人類抑 鬱症中所見之症狀有關的假設[Sapolsky，R. M. Jrc/i. Gen. 46: 1047 (1989)]。有初步證據證明三環抗抑鬱 劑可改變CRF含量且因此調節腦中CRF受體之數目 [Grigoriadis等人，2: 53 (1989)]。 有證據證明CRF在焦慮症及相關病症（包括焦慮症伴併發 抑鬱症）、恐慌症、恐懼症、社交焦慮症、強迫症、創傷 141617.doc 201008926 後壓力症及非典型焦慮症之病因中起作用[The Merck

Manual of Diagnosis and Therapy, 16th edition (1992)]。緊 張情緒通常為焦慮症之誘發因素，且此等病症一般對降低 緊張反應的藥物有反應。已知CRF之過多含量可在動物模 型中產生促生焦慮效應[參見Britton, D. R.等人，h/e 5Ά 31: 363 (1982) , Berridge, C. W., Dunn, A. J. Regul. Peptides 16: 83 (1986) » Berridge, C. W.; Dunn, A. J. Horm. Behav. 21: 393 (1987)]。CRF在動物中產生促生焦慮效應，且已 在各種行為焦慮症模型中證明苯并二氮呼 (benzodiazepine)/非苯并二氮呼抗焦慮劑與CRF之間的相互 作用[Britton，D. R.等人，[如心，·· 31: 363 (1982); Berridge, C. W., Dunn, A. J. Regul. Peptides 16: 83 (1986)]。在各種行為範例中使用推定CRF受體拮抗劑a-螺 旋綿羊CRF(9-41)的臨床研究證明拮抗劑產生在性質上類 似於苯并二氮呼之「類似抗焦慮劑」效應[Berridge, C. W.; Dunn, A. J. Horm. Behav. 21: 393 (1987), Dunn, A. J.; Berridge, C. W. Review·? 15: 71 (1990)]。 神經化學、内分泌及受體結合研究皆已證明CRF與苯并 二氮呼抗焦慮劑之間的相互作用，從而進一步證明CRF與 此等病症之相關性。在大鼠之衝突測試[Britton, K. T.等 A » Psychopharmacology 86: 170 (1985) ; Britton, K. T.等 人，h少幻；94: 306 (1988)]與聽覺驚嚇測試 [Swerdlow，N. R.等人，PacAop/mrwaco/ogy 88: 147 (1986)] 中，氣二氮環氧化物減弱CRF之促生焦慮效應。苯并二氮 141617.doc 201008926 呼受體拮抗劑（R〇 15-1788)(其在操作性衝突測試中無單獨 行為活性）以劑量依賴性方式抵消CRF之效應，而苯并二氮 呼逆向促效劑（FG7142)增強CRF之作用[Britton，Κ· T·等 人，Psyc/zop/zarmaco/ogy 94: 306 (1988)] 〇 尤其關注的 為，檢驗CRF受體拮抗劑（α-螺旋CRF9-41)在各種行為範例 中之效應的臨床研究已證明CRF拮抗劑產生在性質上類似 於苯并二氮呼之「類似抗焦慮劑」效應[欲回顧’請參見 G.F. Koob 及 K.T. Britton，於：Corticotropin-Releasing

Factor: Basic and Clinical Studies of a Neuropeptide, E.B. De Souza 及 C.B. Nemeroff 編，CRC Press，第 221 頁（1990) 中]。 除了調節ΗΡΑ轴之外，CRF視為腸-腦轴之關鍵調節劑。 有證據表明CRF可在介導應激相關腸胃障礙中起作用 [Gabry, K. E.等人，Mo/ecw/ar Psyc/n'airy 7(5): 474-483 (2002)]，應激相關腸胃障礙諸如大腸急躁症（IBS)、術後 腸阻塞及與精神病理性障礙及應激相關聯之結腸超敏[欲 回顧，請參見 E.D. DeSouza，C.B. Nemeroff 編； Corticotropin-Releasing Factor: Basic and Clinical Studies of E.B. De Souza及 C.B. Nemeroff編，CRC Press， 第 221 頁（1990)，及 Maillot，C.等人，Gasiroewiero/og;；， 119: 1569-1579 (2000); Fukudo, S. J. Gastroenterol. 42 (Suppl XVII): 48 (2007); Tache, Y.; Bonaz, B. J. Clin. /πναί. 117: 33 (2007)]。在大鼠中，已證明腹膜内投與 CRFi拮抗劑JTC-017阻斷因經受慢性結腸擴張所誘發的排 141617.doc 201008926 便增加[Saito，K.等人，Gwiroewiero/·，129: 1533 (2005)]。 另外，JTC-017減弱在經受急性結腸擴張之後可見之焦慮 相關行為。亦藉由中樞投與CRF1/2肽拮抗劑阿斯曲辛 (astressin)減弱大鼠中CRF刺激之結腸活動力[Tsukamoto, K.^A » Am. J. Physiol. Regul. Integr. Comp. Physiol. 290: R1 537 (2006)]。在健康人類中，靜脈内投與CRF展示可影 響直腸超敏性且呈現IBS患者所特有之應激誘發内臟反應 [Nozu, T.; Kudaira, M. J. Gastroenterol. 41: 740 (2006)] ° 此等資料表明CRF拮抗劑可用於治療IBS。 拮抗劑已檢驗可用於治療成瘾及藥物戒斷之消極

Drwg Jlargeii 5: 147 (2006)]。對終驗、可卡因、鸦片劑及 酒精之戒斷常引起消極情緒狀態及高度焦慮。增加藥物自 投與（引起成瘾狀態之復發）有時可抵消此等不良反應。外 部應激子亦常會導致濫用復發。 CRF受體拮抗劑可用於治療戒菸之消極情感方面。用 CRF1/2肽拮抗劑D-Phe CRF(I2_41)預治療菸鹼依賴性大鼠展 示可防止與戒菸相關聯之腦酬賞臨限的提高[Bruijnzeel，A. W.等人，Λ^Μ"ο/?·5>Άο/7/7α7"/ηαί；ο/· 32: 955 (2007)]。D-Phe CRF(12.41)亦使得應激誘發大鼠恢復覓菸行為減少[Zislis, G. 等人，厂 53: 958 (2007)]。另外，在大氣中藉 由CRF!拮抗劑MPZP預治療可阻斷禁戒期後常見於菸鹼依賴 之於驗攝取增加[Specio，S. E.等人，196: 473 (2008) ; George, 0·等人， 141617.doc 201008926 104: 17198 (2007)] ° 動物研究證據亦表明可藉由CRF受體之拮抗作用減弱可 卡因及嗎啡鹼戒斷及復發之影響。CRF!拮抗劑CP-154,526 展示可使螺朵林（spiradoline)誘發松鼠狼恢復尋見可卡因 . 行為減弱[Valdez, G. R.等人，/. P/mr所·心;?· ΓΑπ 323: 525 (2007)]，且可使暗示誘發大鼠恢復尋覓甲基安非他 明（methamphetamine)行為減弱[Moffett，M. C.等人， Psyc/zop/iarmaco/· 190: 171 (2007)]。在防衛性戒斷模型 ® 中，在催促戒斷之前用CRF!拮抗劑R121919[Skelton，K. Η. 等人，192: 385 (2007)]預處理氣經安定 (Lorazepam)依賴性大鼠展示ΗΡΑ軸活化減少及焦慮行為減 少[Holsboer，F_ 等人，«/· 583: 350 (2008)]。R121919類似地能夠減弱催促性嗎啡鹼戒斷及戒 斷誘發之ΗΡΑ轴活化的嚴重程度[Skelton, K. H.等人，五μλ J. P/mrmaco/. 571: 17 (2007)]。在自投與期間之鴉片劑曝 φ 露量以及禁戒期長度可影響復發。允許長期自投與（每天6 h)可卡因之大鼠與允許短期自投與（每天2h)之大鼠相比更 易受到可卡因之複吸、足底電擊或所投CRF的影響。在另 一項研究中’ CRFi括抗劑MPZP及安他納明（antalarmin)展 • 示可在每日延長之可卡因接取之情況下減少大鼠之可卡因 自投與[Specio，S. E· 196: 473 (2008)]。 有證據表明CRF丨拮抗劑可有助於阻斷乙醇依賴中所見之 消極情緒方面、過度飲酒及應激誘發性復發[Heilig，M.等 人，30: 399 (2007)]。乙醇依賴性野生型 141617.doc 201008926 小鼠在戒斷期間、但僅在禁戒期之後展示乙醇自投與之增 加[Chu，K. G_ F. .心86: 813 (2007)]。此影響藉由投與CRFi拮抗劑安他納明來抵消。 CRF!基因剔除(KO)小鼠不展示自投與增加之此趨勢。當 用CRF!拮抗劑R121919或安他納明治療時，乙醇依賴性大 鼠在急性戒斷期間展示過度乙醇自我投與之減少[Funk, C. Κ·等人，扪〇/·户紗以⑻";；61: 78 (2007)]。然而，經此等 CRF!拮抗劑治療之非依賴性大鼠未展示乙醇自投與之影 響。類似地，在依賴性大鼠急性戒斷期間，CRF1拮抗劑 MPZP選擇性地減少過度乙醇自投與[Richardson, Η. N.等 人，P/mrwaco/·价加5e/iav. 88: 497 (2008)]。在另一 項研究中，新穎CRF!拮抗劑選擇性地減少依賴性大鼠中由 應激所誘發之過度乙醇自投與[Gehlert，D. R_等人，丄 iVewrom·. 27: 2718 (2007)]。此等研究證明 CRFA 體之拮 抗作用可選擇性地阻斷過度乙醇自投與而不影響基本自投 與水準。此表明CRF!拮抗劑可用於治療乙醇依賴性。 已進一步假定CRF在由應激引起之心血管疾病或心臟病 (諸如高血壓、心跳過速及充血性心臟衰竭、中風）上具有 作用（使用CRF〗拮抗劑治療充血性心臟衰竭之方法描述於 1999年2月10日申請之美國專利申請案第09/248,073號中， 現為美國專利第6,043,260號（2000年3月28曰））。 亦已提出CRF!拮抗劑適用於治療關節炎及炎症[Webster, E. L.#A * */. Rheumatol. 29(6): 1252-61 (2002) ； Murphy, E. P.等人，44(4): 782-93 (2001)]。 141617.doc • 10· 201008926 亦已提出CRF〗拮抗劑適用於治療皮膚病[z〇ub〇uHs，c C.等人，•勤"99: 7148 7153 (2⑽2)]。在 動物模型中藉由選擇性CRFl拮抗劑阻斷應激誘發之慢性接 觸性皮炎惡化，表明CRF!與應激誘發之慢性接觸性皮炎惡 化有關且CRF!拮抗劑可適用於治療此病症[Kanek〇, κ等 人，五xp. DerwWo/, 12(1): 47-52 (2003)]。 研究已證明CRF!拮抗劑可用作毛髮成長刺激劑 (W〇2〇〇2/19975揭示使用CRF拮抗劑刺激KBM_2細胞產生 的細胞培養檢定）6因此，CRF拮抗劑可用於治療脫髮。 【發明内容】 本發明涵蓋（5>4-(1-環丙基-2-曱氧基乙基）_6_(6·(二氟曱 氧基）-2,5-二曱基吡啶_3_基胺基）_5_側氧基·4,5_二氫吡嗪· 2-甲腈（化合物I)及醫藥組合物，及調節患有與CRF之異常 含量相關聯之醫學病狀之患者中之Crf的方法。

ochf2

I 本發明包括該等化合物之所有醫藥學上可接受之鹽形 式。醫藥學上可接受之鹽為平衡離子不明顯導致化合物之 生理活性或毒性且本身充當藥理性等效物的鹽。此等鹽可 根據一般有機技術、利用市售試劑製造。一些陰離子鹽形 141617.doc .η 201008926 式包括乙酸鹽、醋硬脂酸鹽、苯確酸鹽、溴化物、氣化 物、檸檬酸鹽、反丁烯二酸鹽、葡萄糖醛酸鹽、氫溴酸 鹽、氫氣酸鹽、氫碘酸鹽、碘化物、乳酸鹽、順丁烯二酸 鹽'甲績酸鹽、頌酸鹽、雙經萘酸鹽、鱗酸鹽、丁二酸 鹽、硫酸鹽、酒石酸鹽、甲苯續酸鹽及經蔡甲酸鹽。一些 陽離子鹽形式包括敍、紹、节星青黴素（benzathine)、絲、 鈣、膽鹼、二乙胺、二乙醇胺、鋰、鎂、葡甲胺、4_苯基 環己胺、哌嗪、鉀、鈉、緩血酸胺及辞。 因為化合物1具有不對稱碳原子，故本發明包括化合⑽ 之外消旋體以及個別對映異構形式及如本文中描述之對掌 性及外消旋中間體。使用諸如⑻或⑺之單—符號意欲主 要包括-種立趙異構體。異構體之混合物可根據此項技術 中已知之方法分離成個別異構體。

J 如此項技術中之行醫者所理解使甩「治療」、「療法 「治療方案」及相關術語。 治療有效量」意謂如此項技術中之行醫者所理解、為 患者提供有意義之益處所需的藥劑量。當應用於單獨投與 之個別活性成份時，該術語係指單獨的彼成份。當組合應 用時’該術語係指引起治療效果之活性成份組合投與:依 序或同時投與之組合量。 「患者」意謂如此項技術中之行醫者所理解、適於治 的人。 ” 合成方法 化合物I可藉由此項技術中已知 之包括流程1至8中描 述 141617.doc 201008926 之方法的方法製備。所述程序之合理變化形式以及熟習此 項技術者顯而易見之合成方法意欲在本發明之範疇内。 該等/爪程中使用之縮寫—般遵循此項技術中使用之約 定。本說明書及實例中使用之化學術語定義如下： 「NaHMDS」為雙（三曱基矽烷基）胺基鈉；「DMF」為ν，ν_ -曱基曱醯胺；「MeOH」為甲酵；「NBS」為溴代丁二醯 亞胺；「Ar」為芳基；「TFAj為三氟乙酸；「LAH」為氫化 鐘銘；「BOC」、「DMSO」為二甲基亞砜；「h」為小時； 「rt」為室溫或滯留時間（上下文中將會指定）；「爪比」為 分鐘；「EtOAc」為乙酸乙酯；「THF」為四氫呋喃； 「EDTA」為乙二胺四乙酸；rEt2〇」為二乙醚；「DMAp」 為4-二甲基胺基吡啶；「DCE」為1，2_二氯乙烷；「acn」 為乙猜；「DME」為1，2-二甲氧基乙烷；「HOBt」為丨_羥基 苯并三唑水合物；「DIEA」為二異丙基乙胺；「Nf」為 CF3(CF2)3S〇2-;及「TM〇F」為原甲酸三甲酯。 ($)-胺（9)之兩種合成路線展示於流程1及2中。在路線 A(流程1)中，可藉由史特克（strecker)合成法（包括使氰化 物非對映立體選擇性加成於對掌性亞胺4)建立胺中之（幻_ 對掌性中心（Boston，D.J.; Griffin，J.L.W.; Gruman，a.;

Polywka，M.E.C.; Scott，R.M. US patent No. 6191306)。亞 胺4又可衍生於市售對掌性胺3。在路線b中，可藉由對掌 性層析分離、自外消旋中間體13獲得對掌性胺。 路線A開始為使市售環丙烷羧醛2與苯乙基胺3濃縮 且可得到對掌性亞胺4。用氰化鉀當場處理，接著在酸性 141617.doc -13- 201008926 條件下使中間體α-胺基腈5水解，可產生酸6。硼烷還原6 可得到醇7，藉由氫化鈉及碘代曱烷處理而曱基化，以得 到醚8(76%產率）。使苯曱基還原性裂解可產生關鍵對掌性 胺9。 流程1.

生成（*S)-胺9之路線Β開始為使市售α-甲氧基酸10轉化為 醯胺11，接著添加環丙基格林納（cyclopropyl Grignard)， 得到酮12。還原性胺化，接著將胺作為（苯曱氧基）胺基甲 酸酯保護，可得到外消旋中間體13。藉由層析分離對映異 構體可產生單一對映異構體14。在酸性條件下去保護可得 到（S)-胺9。 141617.doc -14- 201008926 流程2.

MeNH(OMe)HCi EDC, E^N, CH2Ci2 MeOx 0 1• N、

THF 〇 11

MeO‘

1) NaBH(OAc)3 NH4Q2CCF3, THF 2) CbzCI, Na2C03 ch2ci2/h2o (2個步驟）

MeO·

對掌性層析

MeO〆’、

NHCbz 14

MeO〆'、

NHHCI 9

H2, Pd/C 二噁烧中之 4NHC1

EtOH 流程3中列出二溴吡嗪16及二氣吡嗪17之合成。用氣乙 腈使胺9烷基化可得到α-胺基腈15。可藉由過量乙二醯溴 處理腈來形成二溴吼嗪酮環，得到16。或者，使用乙二醯 氯處理腈15可得到二氣°比唤酮17[Vekemans，J.; Pollers-

Wieers, C.; Hoornaert, G. J, HeterocycL Chem. 20: 919-923 (1983)]。 流程3.

MeO 乃

NHHCI 9

氯乙腈 K2C〇3, Kl, MeCN 2) HCI

•15· 141617.doc 201008926 流程4及5中展示吡啶基胺片段26之合成。可使用修改之 Hawkins及 Roe之兩步一銷式程序[Hawkins, G· F·; Roe, Αχ Org. 14: 328-332 (1949)]、藉由硝酸及硫酸處理 來使市售2-胺基-3-曱基吡啶18硝酸化，以得到吡啶酮19。 首先用P0C13處理19、接著藉由曱醇分解作用、以兩步程 序、以高產率實現成為曱氧基°比啶20之轉化。6-曱基取代 基之安置可經由兩個不同程序達成，該兩個程序均包括在 硝基吡啶20之6-位置進行替代親核芳香族取代。方法A包 括產生氣乙酸第三丁酯之陰離子，接著使所得酯21水解， 以獲得酸22。藉由在鹼性條件下、在DMF中加熱來可實現 脫羧基作用，以得到6-曱基吡啶23。或者在方法B中，可 藉由碘化三曱基氧硫鏽處理20而直接安置6-曱基。 流程4.

1) hno3, h2so4 2) ΗΝ〇3, ΗζΟ

1) POCI3，回流 2) NaOMe, MeOH

OMe 20 20 方法A 1) 氣乙酸第三丁酯 KOf-Bu, THF 2) TFA,回流 3) K2C03) DMF _ NOo _ Ϊ NOo _ Γ 2 fj^V^COsf-Bu OMe I OMe 21 22 20

方法B NaH, Me3SO+|-~~DMSO

OMe 141617.doc •16· 23 201008926 吡啶基胺26之完整合成可始於在酸性條件下將23加熱1 至2小時以得到吡啶酮24。二氟甲醚25可使用例如2-氟磺 醯基二氟乙酸石夕烧酯（Dolbier，W. R·; Tian, F.; Duan, J. X·; Chen, Q. Y. Org. Synth. 2003, 80, 172-176; Dolbier, W. R.; Tian, F.; Duan, J. X.; Li, A.; Ait-Mohand, S.; Bautista, 0.; Buathong, S.; Baker, J. M.; Crawford, J.; Anselme, P.; Cai, X. H.; Modzelewska, A.; Koroniak, H.; Battiste, M. A.; Chen, Q. Y. J. Fluorine Chem. 2004, 125, 459-469; Cai, X.; Zhai, Y.; Ghiviriga, I.; Abboud, K. A.; Dolbier, W. R. J. Org. 2004，仰，4210-4215)或 2-氟磺醯基二氟乙酸 (Chen, Q. Y.; Wu, S. W. J. Fluorine Chem. 1989, 44, 433-440)、藉由二氟碳烯將24選擇性O-烷基化來製備。藉由氫 化可完成成為吡啶基胺26之最終轉化。 流程5.

NO〇 FS〇2CF2〇〇2SiMe3

NaH, CsF, MeCN (92%) 或

fso2cf2co2h NaH, MeCN

ochf2 26

OCHF2 25

H2, Pd/C, EtOH 或

Fe，HOAc, EtOH 141617.doc 201008926 1之完整合成展示於流程6中。可使二溴吡嗪16與吡啶基 胺26在NaHMDS存在下偶合，以得到化合物26。使27與氰 化辞於DMF中進行鈀催化偶合可得到氰基吡嗪酮1 [Maligres, P. E.; Waters, M. S.; Fleitz, F.; Askin, D. Tetrahedron Lett. 40: 8193-8195 (1999)] 0 流程6.

DMF, H20, 120 °C

Zn(CN)2, Pd2(dba)3l dppf

亦可使用氰化鋅及鈀催化自氯吼嗪酮28合成氰基吼嗪酮 141617.doc 18- 201008926

流程7.

Zn(CN)2, Zn, Pd2(dppf)2CI2, CH2CI2 NMP, H20, 120 °C

或者，氣。比嗪酮29可在鈀催化下使用氰化鋅得到5-氰基 吡嗪酮30來轉化成氰基吡嗪酮1。曱氧基吡啶部分之去曱 基化可於乙酸中、藉由碘化鉀處理來實現。隨後使用2-氟 磺醯基二氟乙酸之三甲基矽烷酯將吡啶酮選擇性0-烷基化 可得到氰基D比嗪酮1。 141617.doc 19- 201008926 流程8.

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生物方法 .铉含獪定。將凍存大鼠額葉皮質在含有50 mM Hepes (pH 7_0，23〇C)、10 mM MgCl2、2 mM EGTA、1 pg/ml抗蛋白酶、1 pg/ml亮抑蛋白酶肽、1 gg/ml抑胃酶肽 A、0.005%曲拉通X-100(Triton X-100)、10 U/ml枯草菌素 (bacitracin)及0.1%卵白蛋白之檢定緩衝液中快速解束且均 質化。將該懸浮液以32000xg離心30分鐘。捨棄所得上清 液，且藉由均質化將糰粒再次懸浮於檢定緩衝液中且再次 離心。捨棄上清液，且藉由均質化將糰粒再次懸浮於檢定 緩衝液中且在-70°C下凍存。在實驗當日，使均質物之等 分試樣快速解凍，且以每孔25 pg添加至總體積100 μΐ檢定 緩衝液中之150 ρΜ 125Ι-綿羊CRF(125I-o-CRF)及藥物中。在 141617.doc -20- 201008926 21°C下培育檢定混合物2小時。接著在Brandel細胞收集器 上、使用玻璃纖維過濾器（Whatman GF/B，經0.3% PEI(聚 伸乙基亞胺）預處理）、藉由快速過濾將所結合之放射性配 體與游離放射性配體分離。接著使用冰冷洗滌緩衝液（PBS w/o Ca2+及 Mg2+，0.01%曲拉通X-100 ; 23°C，pH 7.0)洗滌 過濾器多次。使用1 μΜ DMP696(—種CRFi選擇性拮抗 劑）[Li, Y-W.等人，CWSDrwgiieWews 11: 21-52, (2005)]限 定非特異性結合。接著以Wallac Wizard γ計數器對過濾器 計數。藉由Microsoft Excel擬合、使用非線性回歸、在五 點（五種藥物濃度）或十點（十種藥物濃度）競爭檢定中測定 IC50 值。 結合檢定。使柬存豬脈絡叢（choroid plexus)在含有 50 mM Hepes(23°C，pH 7.0)、10 mM MgCl2、2 mM EGTA、1 pg/ml抗蛋白酶、1 pg/ml亮抑蛋白酶肽、1 pg/ml 抑胃酶肽A、0.005%曲拉通X-100、10 U/ml枯草菌素及 0.1%卵白蛋白之檢定緩衝液中快速解凍且均質化。將該懸 浮液以32000xg離心30分鐘。捨棄所得上清液，且藉由均 質化使糰粒再次懸浮於檢定緩衝液中且再次離心。捨棄上 清液，且藉由均質化使糰粒再次懸浮於檢定緩衝液中且 在-70°C下凍存。在實驗當日，使均質物之等分試樣快速 解凍，且以每孔10 gg添加至總體積100 μΐ檢定緩衝液中之 100 ρΜ 125Ι-蛙皮降壓肽（125I-sauvagine)及藥物中。在21°C 下培育檢定混合物2小時。接著在Brandel細胞收集器上、 使用玻璃纖維過濾器（Whatman GF/B，經0.3% PEI預處 141617.doc -21 - 201008926 理）、藉由快速過濾將所結合之放射性配體與游離放射性 配體分離。接著使用冰冷洗滌緩衝液（PBS w/o Ca2+及 Mg2+，0.01% 曲拉通 X-100(23°C，pH 7.0))洗滌過濾器多 次。使用1 μΜ α-螺旋CRF(9-41)限定非特異性結合。接著 以Wallac Wizard γ計數器對過濾、器計數。藉由Microsoft Excel擬合、使用非線性回歸、在五點（五種藥物濃度）競爭 檢定中測定IC5〇值。 /zCRR結合檢定。使用Y79細胞（一種天然表現人類CRF! 受體的人類視網膜胚細胞瘤細胞株）[Hauger, R.等人， 68: 2308-2316，（1997)]製備用於 結合的膜。簡而言之，使細胞成長且收集，接著使糰粒在 含有 50 mM Hepes(23°C，pH 7.0)、10 mM MgCl2、2 mM EGTA、1 pg/ml抗蛋白酶、1 pg/ml亮抑蛋白酶肽、1 pg/ml 抑胃酶肽A、0.005%曲拉通X-100、10 U/ml枯草菌素及 0.1%卵白蛋白之檢定緩衝液中均質化。以32000xg將懸浮 液離心30分鐘。捨棄所得上清液，且藉由均質化使糰粒再 次懸浮於檢定緩衝液中且再次離心。捨棄上清液，且藉由 均質化使糰粒再次懸浮於檢定緩衝液中且將等分試樣 在-70°C下凍存。在實驗當日，使等分試樣快速解凍，且 以每孔25 pg添加至總體積100 μΐ檢定緩衝液中之150 pM 125I-綿羊CRF及藥物中。在21°C下培育檢定混合物2小時。接 著在Brandel細胞收集器上、使用玻璃纖維過濾器（Whatman GF/B，經0.3% PEI預處理）、藉由快速過濾將所結合之放 射性配體與游離放射性配體分離。接著使用冰冷洗滌緩衝 141617.doc •22- 201008926 液（PBS w/o Ca2+及 Mg2+，〇.〇1% 曲拉通 x_1〇〇(2yc， 7.0))洗滌過濾器多次。使用i μΜ DMp696限定非特異性結 合。接著以Wallac Wizard γ計數器對過濾器計數。藉由 Microsoft Excel擬合、使用非線性回歸、在五點（五種藥物 濃度）競爭檢定中測定IC50值。 潜合.结耒。測定（*S)-4-(l-環丙基_2_甲氧基乙基）_6_(6_(二 氟甲氧基）-2,5-二曱基吡啶_3_基胺基）_5_側氧基_4,5_二氫 吡嗪_2_甲腈對CRFi受體之結合效能（ICso值）的初級篩檢為 利用125I-o-CRF作為標記肽配體且利用大鼠額葉皮質膜作 為受體源的競爭結合實驗。（$)-4-(1-環丙基_2_甲氧基乙 基）-6-(6-(二氟甲氧基）-2,5-二甲基"比咬-3-基胺基）·5_側氧 基_4,5_二氫。比嗓-2-甲腈有效且完全抑制125i_〇_crf結合至 大鼠額葉皮質膜，顯示0.86±0·04 nM(n=10)之IC50及 0.94±0.03(n=10)之希爾斜率（Hill Slope)。此等結果包括5 點及10點競爭結合檢定。比較時，亦檢驗DMP696(經充分 ❷ 表徵之小分子選擇性CRFi拮抗劑）且顯示〖.39^.09 nM(n=10)之 1(：50及1.00±0.02(11=10)之希爾斜率。（$)-4-(1- 環丙基-2-甲氧基乙基）-6-(6-(二氟甲氧基）-2,5-二曱基13比咬_ 3-基胺基）-5-側氧基-4,5-二氫吡嗪-2-甲腈亦以高親和力結 合至存在於人視網膜胚細胞瘤細胞株Y79上之天然CRF!受 體。（5>4-(1-環丙基-2-曱氧基乙基）-6-(6-(二氟甲氧基）_ 2,5-二曱基吡啶-3-基胺基）-5-側氧基-4,5-二氫吡嗪-2-甲腈 有效且完全抑制125I-o-CRF結合至Y79膜，顯示1.81±〇.46 nM(n=3)之IC5〇。比較時，亦檢驗DMP696且顯示1.71±0.53 141617.doc • 23· 201008926 ’ 〇SM-

、、>〇 β至内生性表現於豬脈絡叢膜上之受體 nM(n=3)之ICw。與其對CRFl受體之高親和力相反 (1-環丙基·2-甲氧基乙基）_6_(6_(二氟曱氧基）2 5_二 咬-3-基胺基）-5_側氧基_4,5_二氫吡嗪_2_甲腈對豬脈 中所表現之CRF2受體展示極小或無親和力。雖 (IC5〇=25.7±2.9 nM，n=3)，但（5>4-(1-環丙基 _2_甲氧基乙 基）-6-(6-(二氟曱氧基）_2,5_二甲基吼啶_3_基胺基）_5_側氧 基 _4,5_二氫吡嗪-2-甲腈顯示 IC50>10,〇〇〇 nM(n=3)。 犛乂腐之摩裙姪肩肩疗為母茗。已在情境性焦慮模型中 評估（JS)_4-(1-環丙基_2_甲氧基乙基）_6(6_(二氟甲氧基）_ 2,5-二曱基吡啶-3·基胺基）-5-側氧基-4,5-二氫吡嗪-2-甲腈 以評估其抗焦慮潛能。在此模型中，將大鼠置於位於陌生 開放％地之黑暗小室中。經媒劑處理之大鼠大多數時間在 小室内度過’此符合焦慮升高狀態[Takahashi L κ等人， A/mv· 103: 648-654,（1989)]。此模型敏感於抗 焦慮劑’包括諸如氣二氮環氧化物之苯并二氮呼[Yang χ_ Μ·等人，*/· 五以〜255· 1〇641〇7〇, (1990)]。另外’諸如DMP696 及 DMP904[McElroy J· F.等 人，165: 86-92，（2002); Lelas S.等 人，《/. P/zarwaco/· £χρ· 309: 293-302,（2004)]之先前 CRFi拮抗劑在此模型中為有效的。比較（幻_4_(1_環丙基_2_ 曱氧基乙基）-6-(6-(二氟曱氧基）_2,5_二甲基'•比啶-3-基胺 基）-5-側氧基_4,5-二氫吡嗪_2_曱腈與標準抗焦慮劑氣二氮 142617.doc -24· 201008926 環氧化物（Librium®)及安定（diazepam)(Valium®)在此模型 中之效應。自 Charles River Laboratories(Wilmington, Mass.)購買體重180至300 g之雄性史泊格多利（Sprague-Dawley)大鼠。將大鼠個別安置於維持在恆定溫度（21±2°C ) 及濕度（50± 10%)下之飼育室中之懸掛式鋼絲籠中。每天將 飼育室照明12個小時。在整個研究中讓大鼠任意接取食物 及水。行為研究在0600 h與1300 h之間進行。根據Bristol-Myers Squibb Company之動物管理及使用委員會（Animal Care and Use Committee)之準則（「實驗室動物管理及使用 準則（Guide for Care and Use of Laboratory Animals)」 (Institute of Animal Laboratory Resources, 1996))及美國國 家衛生研究院實驗室動物管理及使用指南（National Institutes of Health Guide for the Care and Use of Laboratory Animals)中所公布之準則供養動物。研究方案 獲Bristol-Myers Squibb Company動物管理及使用委員會批 准。所有化合物均在0.25%甲基纖維素中製備且經口（PO) 投予。自Sigma Chemical Company賭買氯二氮環氧化物、 安定及地昔帕明（desipramine)。以2 ml/kg之體積給與（51)-4-(1-環丙基-2-曱氧基乙基）-6-(6-(二氟曱氧基）-2,5-二曱基 吼啶-3-基胺基）-5-侧氧基-4,5-二氫"比嗪-2-甲腈。所有標準 物均以2 ml/kg之體積給藥。對於所有測試，藉由變異數分 析法、接著杜納氏t檢驗法（Dunnett's t-test)分析個別比較 之數據。有效值設定為〇·〇5。數據作為平均值土平均值標 準誤差（SEM)呈現於本文及圖式中。測試前日使雄性史泊 141617.doc -25- 201008926 格-多利大鼠適應於處理及給藥。在測試當曰，藉由管飼 法經口投與所有化合物60分鐘後再進行行為測試。為起動 測試’將各動物置於鍍鋅銅小圓筒（長度為〗4 crn，直徑為 10 cm)中’鍍鋅銅圓筒縱向抵靠經照明之開放場地（丨〇6 cm 長x92 cm寬χ50 cm高）之一牆壁置放。藉由6〇 w白熾電燈 泡將開放場地照明’且藉由調壓變壓器將照明度調節為3 〇 lux，在圓筒之入口處讀數。由不知處理分配方案之受訓 觀測者評估行為15分鐘。記錄動物離開圓筒（依所有四個 爪置放於開放場地中界定）及探察開放場地之潛伏期（以秒_ 汁）°若動物在15分鐘後未離開圓筒，則終止試驗且評分 記錄為900秒。使用1.0%冰醋酸清洗動物之間的譜萊玻璃 (Plexiglas)室及圓筒，以防止嗅覺暗示影響隨後測試之動 物之打為。在行為測試之後，處死動物，且獲取血漿樣本 及腦以分析血漿曝露量及中樞受體佔有率。 摩禮羥肩j疗為哥贫.结果。經媒劑處理之動物展示離開 暗室且探察開放場地之長潛伏期。在氣二氮環氧化物及安 疋研究中，平均離開潛伏期分別為792土 108及794± 106秒❹ (對於兩個研究’為總測試持續時間900秒之88%)。笨并二 氮乎抗焦慮劑氯二氮環氧化物與安定均以劑量依賴方式減 v離開潛伏期[氣二氮環氧化物F(5,47)=7 62 謝； 女疋F(4,38)=i5.17，；?<〇._〗]。相對於經媒劑處理之對照 動物’氣二氮環氧化物之最低有效劑量（3 0 mg/kg，經口） 離開潛伏期減少58〇/〇。相對於經媒劑處理之動物，所測 °式之氣—氮環氧化物之較高劑量（10 mg/kg、30 mg/kg及 141617.doc -26 - 201008926 g kg、’座口)使離開潛伏期分別顯著減少π%、π%及 _。氯二氮環氧化物之此等效應之υ形曲線可能歸因於 =樂物之鎮靜性f。相對於對照動物，技之最低有效劑 里（1 .〇 mg/kg ’經口）使離開潛伏期減少㈣，且相對於經 媒劑處理之對照動物’所測試之較高劑量（3』球呂及⑺ mg/kg，經口）使離開潛伏期分別進一步減少㈣及9丨％。

在三個獨立研究及隨後之完整劑量·反應（0.56-3.0 mg/kg，經口）研究中，測試單一劑量a〇 mg/kg、U mg/kg 及3.0 mg/kg’經口）之〇4_(1_環丙基_2_甲氧基乙基）冬 (6仁氟甲氧基）_2,5_二甲基。比咬_3_基胺基側氧基乂卜 氫比秦-2-甲腈。在所有單一劑量研究中，經媒劑處理之 動物展不離開暗室且探察開放場地之長潛伏期。三個研究 之平均離開潛伏期分別為78〇±81秒、748±77秒及824±76秒 (分別為總測試持續時間9〇〇秒之87%、幻％及92%)。在三 個研究之每一者中，陽性對照物DMP696(l〇 mg/kg)(另一 種CRF!受體拮抗劑）顯著減少離開潛伏期（分別減少π%、 74/〇^81%) 〇 1.8 mg/kg^3.0 mg/kg#J t rfn # 1 .〇 mg/kg#J 量之斯4♦環丙基_2_甲氧基乙基）冬(6-(二氟曱氧基）· 2,5-二甲基吡啶_3_基胺基）_5_側氧基_4,5_二氫吡嗪·2_甲腈 顯著減少離開潛伏期。1.8 mg/kg劑量使離開潛伏期減少 53%[F(2’23)=7·52 K〇〇3]，且 3.0 mg/kg劑量使離開潛 伏期減少 51% [FU，23) = 14.05，γΟ.ΟΟΟΙ]。 在劑量-反應研究中，經媒劑處理之動物展示747土Μ秒 (為總測試持續時間900秒之83%)之離開潛伏期。10 mg/kg 141617.doc •27· 201008926 之陽性對照物DMP696顯著減少離開潛伏期（減少62%)。與 單一劑量研究中所展示之效應一致，（5)-4-(1-環丙基_2_甲 氧基乙基）-6-(6-(—氟甲氧基）-2,5-二甲基n比咬_3_基胺基）· 5-側氧基_4,5-二氫吡嗪-2-甲腈在情境性焦慮模型中當經口 投與時以劑量依賴方式減少離開潛伏期[p(5 47)=3 69， π〇·〇〇7)。（5>4-(l-環丙基-2-甲氧基乙基）_6_(6_(二氣甲氧 基）-2,5-二曱基吡啶-3-基胺基）-5-側氧基_4,5_二氫吡嗪_2_ 甲腈之最低有效劑量為1.8 mg/kg，相對於經媒劑處理之對 照動物，此最低有效劑量使離開潛伏期減少6〇%。 (1-環丙基-2-甲氧基乙基）-6-(6-(二氟甲氧基）_2,5_二曱基吡 咬-3-基胺基）-5-側氧基-4,5-二氫〇比嗪_2_甲腈之較高劑量 (3.0 mg/kg)亦使離開潛伏期顯著減少56%。環丙 基-2-曱氧基乙基）-6-(6-(二氟曱氧基）-2,5-二甲基》比啶_3_基 胺基）-5·側氧基-4,5-二氫吡嗪-2-甲腈之較低劑量（〇 56 mg/kg及1.0 mg/kg)未使離開潛伏期顯著改變.總之，在大 鼠情境性焦慮模型中’在產生類似抗焦慮效應方面，（力_ 4-(1-環丙基-2-甲氧基乙基）_6_(6_(二氟甲氧基）_2,5•二甲基 吡啶-3-基胺基）-5-側氧基-4,5-二氫吡嗪-2-甲腈展示與笨并 二氮呼安定及氣二氮環氧化物相當的效能。 醫藥組合物及使用方法 化合物I證明可抑制CRF。CRF之抑制與精神病症及神經 疾病（包括抑鬱症、焦慮相關病症、大腸急躁症、成癩及 藥物及酒精戒斷之消極方面，及與CRF相關之其他病狀）之 療效相關。化合物I本身可用於治療此等病症，且本發明 141617.doc -28- 201008926 之其他態樣為組合物及使用化合物ϊ治療此等病狀及與 之異常含量相關聯之其他病狀的方法。 本發明之另一態樣為治療與CRF相關聯之精神或神經病 狀之方法，其包含向患者投與治療有效量之環丙 基-2-曱氧基乙基）_6_(6_(二氟曱氧基）_2,5_二曱基响啶-基 胺基）-5-側氧基_4,5_二氫吡嗪_2-甲腈。 本發明之另一態樣為治療抑鬱症之方法。 本發明之另一態樣為治療焦慮症或焦慮相關病症之方 ® 法。 本發明之另一態樣為治療大腸急躁症之方法。 本發明之另一態樣為治療成癮或藥物及酒精戒斷之消極 方面之方法。 化合物I一般以包含治療有效量之化合物I或醫藥學上可 接受之鹽及醫藥學上可接受之載劑且可含有習知賦形劑之 醫藥組合物給與。治療有效量為提供有意義之患者益處所 0 需之量，如熟習此項技術者所判定。醫藥學上可接受之栽 劑為具有可接受之安全分布之彼等習知載劑。組合物涵蓋 所有一般固體及液體形式，包括膠囊、錠劑、口含錠及散 劑，以及懸浮液、糖漿、酿劑及溶液。組合物可使用—般 調配技術及習知賦形劑（諸如黏合劑及濕潤劑）及媒劑（諸如 水及醇）製造。 固體組合物通常以每劑量提供1 mg至約1〇〇〇 mg之活性 成份的劑量單位調配。固體劑量單位之一些實例為1 、 10 mg、1〇〇 mg、250 mg、500 mg及 1000 mg。液體組合物 141617.doc ·29· 201008926 一般在1-100 mg/mL之單位劑量範圍内。液體劑量單位之 一些實例為 1 mg/mL、10 mg/mL、25 mg/mL、50 mg/mL及 1 00 mg/mL。 本發明涵蓋所有習知投藥模式；經口及非經腸方法為較 佳的。通常，日劑量將為每日每公斤體重0.01-100 mg。一 般而言，經口需要較多化合物及非經腸需要較少化合物。 然而，特定給藥方案應由醫師使用合理醫學判斷判定。 【實施方式】 在以下實例中，所有溫度均以攝氏度給定。熔點係用 Meltemp 3.0 (Laboratory Devices, Inc.)或 Thomas Scientific Unimelt毛細管炫點裝置記錄且不進行校正。質磁共振"Η NMR)光譜係用Bruker 400或Bruker 500 MHz光譜儀記錄。 所有光譜係於指定溶劑中測定，且化學位移係以内標物四 甲基矽烷（TMS)低場之δ單位報導，且質子間耦合常數以赫 茲（Hz)報導。峰裂數圖案如下命名：s，單峰；d，二重 峰；t，三重峰；q，四重峰；m，多重峰；br，寬峰； dd，雙二重峰；brd，寬二重峰；dt，雙三重峰；brs，寬 單峰；dq，雙四重峰。旋光度[a]D係用Rudolph Scientific Autopol IV旋光計、在指定溶劑中測定，濃度以mg/mL給 定。低解析度質譜（MS)及表觀分子（M+H+)或（M-H)+係用 Finnegan SSQ7000測定。高解析度質譜係用Finnegan MAT900測定。液相層析（LC)/質譜係用與Water Micromass ZQ耗合之ShimadzuLC運作。 縮寫一般依循此項技術中使用之習知術語：「1 x」為一 141617.doc -30· 201008926 倍，「2><」為兩倍，「3χ」為三倍，「。 .^ θ r U」為攝氏度，「eq」 為當！，「g」為公克，「 「τ从 ^马毫克，「1^」為公升， ^為毫升，「叫」為微升，％為標準，％為莫 !濃度，「脑。1」為毫莫耳，「偷」為分鐘，「h」為小 …」為室溫，「RT」為滯留時間，「_」為氛圍， —平方忖〜.」為漠縮〜」5戈 tr’「MW」為分子量，「mp」^點〜」為對映 異構體過量，「MS I哎「λ/ία 〇 癱“ ⑼“」為質講，「ESI」為電 ❻嘴㈣Μ質譜’「HR」為高解析度’「取⑽」為高解析 度質谱，「LCMS」為液相層析質譜，「HpLc」為高壓液相 層析，「RP HPLC」為逆相hplc，「TLCj或「 層層析，「NMR」為核磁共振光譜，「1H」為「質子」， 「δ」為delta，「s」為單峰，「d」為二重峰，「t」為三重 峰’「q」為四重峰’「m」為多重峰，「br」為寬峰，「Hz」 為赫炫，且「（Χΐ、「βι、「Ρ 、「C Γτ~» 「 且》」P」R」、「S」、「Ε」及「ζ」為熟習 Φ 此項技術者所熟悉之立體化學符號。 ΗΟ人/ ^ .ΝΗ 0-2-赛丙羞茗差乙嚴差J乙躞。在3頸5 L圓底 燒瓶中，在75。(：下，將環丙烷甲醛（200.0 g，1.42 mol)及 $ (-)-1-本基乙胺（172.9 g，1.42 mol)於甲醇（2.0 L)中的經 授拌溶液加熱2 h。接著使反應混合物冷卻至室溫且逐份 141617.doc • 31 - 201008926 添加氰化鉀（185.0 g ’ 1.42 mol)。在室溫下攪拌反應混合 物隔夜。添加水（600 mL) ’接著逐滴添加濃鹽酸（250 mL)， 直至反應混合物達到pH 9-10。接著用乙酸乙酯（4χΐ l)萃取 該混合物，且在減壓下濃縮合併之有機層以得到黃色油狀 物。將濃鹽酸（3.5 L)添加至此殘餘物中，且在95。〇下加熱 該混合物隔夜。冷卻至室溫之後，在冷卻且攪拌下逐滴添 加10%氫氧化鉀溶液’直至pH幾乎呈中性（pH 7_8)。在 下再繼續攪拌45分鐘。將内含物過濾且用冷曱醇（5 L)充分 洗滌。觀測到此階段之水分含量為約1 〇%。使固體再懸 浮於無水丙酮（7 L)中且過濾，以獲得水分低於1%的固體 狀（5)-2-環丙基-2-[(5·)-1-苯基乙胺基]乙酸（33〇呂，52〇/〇產 率）：NMR (400 MHz，DMSO-d6) δ 7.44-7.26 (m，5H)， 3.91-3.86 (m, 1H), 2.28-2.22 (m, 1H), 1.34 (d, J=4.〇 Hz, 3H), 0.93-0.89 (m, 1H), 0.41-0.37 (m, 2H), 0.31-0.27 (m; 1H), 0.11-0.07 (m，1H)。

(^>-2-環兩差茗差乙脣差7乙孽。在用力攪拌 下’在（TC下向環丙基·2_[(卟丨·笨基乙胺基]乙酸 _ g，⑶m〇1)於無水THF(5.2 L)中之溶液中添加硼烷二 甲基硫喊（純淨物）（485 g，6.39 m〇1)。在室溫下授拌反應 混合物隔夜。藉由HPLC監控反應進程。繼續授掉，直至 141617.doc -32· 201008926 酸完全耗盡為止（18-20 h)。完成之後，使反應混合物冷卻 至〇°C且逐滴添加曱醇（6 L)。在真空下濃縮該混合物且使殘 餘物溶解於氯仿中（5 L)。用10% NaHC03水溶液（2x1 L)、接 著鹽水洗滌有機層，經Na2S04乾燥，過濾且濃縮以得到茶 黃色油狀物。在減壓下蒸餾該油狀物以得到無色油狀（力-2-環丙基苯基乙胺基]乙醇（166 g，44%產率）：bp 175-184〇C, 0.1 mm Hg; [a]25D-52.1 (c 1.0, CHC13) ； >H NMR (400 MHz, CDC13) δ *H NMR (400 MHz, CDC13) δ 7.33-7.20 (m, 5H), 3.91-3.86 (m, 1H), 3.67 (dd, JAb = 1〇.6, Jax=3.8 Hz, 1H), 3.39 (dd, JBa=1〇.6, JBx=4.3 Hz, 1H), 2.40 (s br, 2H), 1.70-1.65 (m, 1H), 1.35 (d, /=6.6 Hz, 3H), 0.88-0.82 (m, 1H), 0.47-0.37 (m, 2H), 0.05-0.06 (m, 2H); 13C NMR (100 MHz, DMSO-d6) δ 146.8, 127.6, 126.2, 125.9, 63.0, 60.5, 54.4, 24.4, 13.3, 3.0, 1.5; LRMS (ESI) m/e 206.3 [(M+H)+，Ci3H2〇NO之計算值為 206.2]。

(S)-l-環丙基-2-甲氧基苯乙基]乙胺。在qy飞 向（>5)-2-裱丙基-2-[(15)-1-苯基乙胺基]乙醇（29;2§，〇143 mol)於 THF(700 mL)中之溶液中添加 NaH(6 29 ^，〇 157 mol，於礦物油中之60%分散液）。移除冷卻浴，且使反應 混合物溫熱至室溫，且在室溫下攪拌3〇分鐘。接著經由注 141617.doc 03- 201008926 射器逐滴添加碘代甲烷（20.30 g，0.143 mol)。添加完成不 久便發生一些升溫。使用含有少量冰之水浴將反應混合物 之溫度控制在約25。(：。在室溫下攪拌反應混合物4 h。接 著用飽和NaHC03水溶液緩慢地中止反應混合物之反應， 且轉移至含有飽和NaHC03水溶液（400 mL)之分液漏斗 中。用乙酸乙酯（3x300 mL)萃取水層。用鹽水洗滌合併之 有機層’經MgS04乾燥，過濾且濃縮。藉由矽膠管柱層析 法（5% MeOH於1:1乙酸乙酯/己烷中）純化粗產物，以得到 淺棕色油狀環丙基-2-甲氧基-N-[(<S)-1-苯乙基]-乙胺 (26.52 g，85%產率）：[a]25D_61.5 (c 0.72，CHC13) ; NMR (400 MHz, CDC13) δ 7.30-7.25 (m, 4H), 7.20-7.16 (m, 1H)S 3.98-3.93 (q, J=6.8 Hz, 1H), 3.50 (dd, JAb=9.5, Jax=3.5 Hz, 1H), 3.35 (s, 3H), 3.34 (dd, JBA=9.5, Λχ=5.8 Hz, 1H), 1.79-1.74 (m, 2H), 1.33 (d, /=6.5 Hz, 3H), 0.73-0.67 (m, 1H), 0.36-0.34 (m, 2H), 0.03-0.06 (m, 2H); GC/MS (ESI) m/e 220.2 [(M+H)+，C14H22NO之計算值為 220.2]。

環兩差-2- f輿差乙蜃I鑀蘑。將（幻-卜環丙基_2_ 甲氧基苯乙基]乙胺（1〇〇 g，458 mmol)與 Pd(OH)2/C (50 g ’ 20%，披於碳上）及乙醇（ι·2 L)合併於帕 耳瓶（Parr bottle)中。將反應混合物置於η2氛圍（15 psi)下 且震盪18 h。接著在攪拌下，經由矽藻土（Celite)墊將反應 混合物過濾至含有2 N HC1於Et2O(3 60 mL)中之燒瓶中。將 141617.doc -34· 201008926 所得濾液濃縮成黃色固體’接著使其與Et2〇(5〇〇 mL)共蒸 發。在真空中乾燥所得固體隔夜，以得到白色固體狀（5)_ 卜環丙基-2-甲氧基乙胺鹽酸鹽（69§，99〇/〇產率）：1111)190-192 C ； [a]25D+l6.3 (c 0.446, MeOH) ； !H NMR (400 MHz, CDC13) δ 8.41 (S br, 3H), 3.68 (d5 J=5.6 Hz, 2H), 3.39 (s, 3H), 2.64-2.60 (m, 1H), 1.20-1.13 (m, 1H), 0.71-0.58 (m, 3H), 0.32-0.28 (m, 1H); 13C NMR (100 MHz, CDC13) δ 72.1, 59.2, 57.5, 10.7, 4.2, 4.1; LRMS (ESI) m/e 231.2 [(2M+H)+ > ® C〗2H27N202之計算值為231.2]。 ο /〇^ΛΝ 刀、

I Μ 二尹歲基严省乙磁展。在室溫下將三乙胺（115 mL)添加至甲氧基乙酸（35.0 g，389 mmol)於CH2C12 (1200 mL)中之溶液中。添加N，0-二曱基羥胺鹽酸鹽（45.5 g，467 mmol)，且在攪拌5分鐘之後，將懸浮液冷卻至ye。接著 φ 添加重氮基曱酸乙酯（EDC)(81.7 g，428 mmol)，且攪拌反 應混合物隔夜’同時使其溫熱至室溫。將混合物傾注於分 液漏斗中且用CH2C12 (500 mL)稀釋。用1 N HCl(2x300 mL)、飽和NaHC03水溶液（2x300 mL)及鹽水（300 mL)洗滌 有機層。所得溶液經MgS04乾燥，過濾且在真空中濃縮。 藉由石夕膠短管柱層析法（5%甲醇於CH2C12中）純化產物，以 得到無色油狀N，2-二甲氧基-N-曱基乙醯胺（33.2 g，64%產 率）：]H NMR (400 MHz，CDC13) δ 4.20 (s，2H)，3.67 (s, 3Η), 3.45 (s, 3Η), 3.17 (s, 3H); 13C NMR (100 MHz, CDC13) 141617.doc .35· 201008926 δ 173.0, 69.7, 69.4, 61.4, 59.4; LRMS (ESI) m/e 134.1 [(M+H)+ ’ C5Hi2N03 之計算值為 !汚基2产爲基乙解。將錢屑（15.2 g，632 mmol)添 加至裝備有加料漏斗之5L 3頸燒瓶中。火焰乾燥燒瓶、漏 斗及鎂屑，且接著將回流冷凝器置於燒瓶上。在燒瓶及内 含物冷卻至室溫之後，將乙醚（100 mL)添加至燒瓶中，接 著添加一份環丙溴（5.〇 mL ’ 7 55 g，62 4 mm〇1)及若干碘 晶體。反應開始之後，將乙醚（4〇〇 mL)添加至反應燒瓶 中。接著在用冰水浴間歇冷卻反應混合物下，經3〇分鐘緩 慢地添加剩餘環丙溴（87.3 g，721 mm〇1p在添加完成且 鎮耗盡之後，再添加乙醚（700 mL)且使反應混合物冷卻至 〇 C。用機械授拌器置換磁授摔器，且經由加料漏斗、經 30分鐘緩慢地添加N, 2-二甲氧基-N-曱基乙醯胺（42.07 g ’ 316 mmol)溶解於乙醚（500 mL)中之溶液。在此期間形成 白色固體。添加完成之後，移除冷卻浴，且在室溫下攪拌 混合物1 h。接著使混合物冷卻至〇°c，且藉由添加1 N HC1(700 mL，首先緩慢地添加）中止反應。在另外攪拌J 5 分鐘之後’將混合物轉移至分液漏斗中，且以乙_ (3x500 mL)萃取水層。用飽和NaHC03水溶液（400 mL)、鹽水（4〇〇 mL)洗滌合併之有機層，經MgSCh乾燥，過濾且在最小真 空（500毫巴）下濃縮。在減壓下藉由蒸餾純化產物，同時將 收集燒瓶浸沒於乾冰/異丙醇浴中，以得到無色油狀1_環丙 141617.doc -36· 201008926 基-2-甲氧基乙酮（29·2 g，81%產率）：bp 35-38°C, 5 mm Hg ； lH NMR (400 MHz, CDC13) δ 4.13 (s, 2H), 3.43 (s, 3H), 2.11-2.07 (m, 1H), 1.10-1.06 (m, 2H), 0.94-0.89 (m, 2H); GC/MS (Cl) w/e 115.1 [(M+H)+，C6Hn02之計算值為 115.1] 〇

O 1-環丙基-2-甲氧基乙基胺基甲酸苯甲酯。甩三l乙氟锻 (115 g，880 mmol)處理 THF(1000 mL)中之 1-環丙基-2-甲 氧基乙酮（10.0 g，88.0 mmol)，且使混合物冷卻至〇°c。添 加三乙酿氧基棚氫化鈉（27.9 g，133 mmol)，移除冷卻 浴，且用溫水浴在40°C下輕緩加熱反應混合物2 h。使混 合物冷卻至室溫且濃縮，以獲得1-環丙基-2-曱氧基乙胺， 其直接用於下一步。 將來自前一步之粗1-環丙基-2-甲氧基乙胺溶解於 零 CH2C12/H20(300 mL/300 mL)中，且添加 Na2C03 (111.9 g， 1.06 mol)。將反應混合物置於冰浴中，且經由注射器添加 CbzCl( 16.46 g，96.78 mmol)。在添加期間’使内部反應混 合物溫度保持在15-20°C。在添加完成之後，在室溫下擾 拌反應混合物2 h。將混合物傾注於分液漏斗中，用 H20(300 mL)稀釋’且用CH2C12 (3x300 mL)萃取。用鹽水 (3 00 mL)洗滌合併之有機層，經MgS04乾燥，過濾且濃 縮。藉由矽膠管柱層析法（30〇/〇乙酸乙酯於己烷中）純化產 141617.doc -37- 201008926 物，以得到油狀1 -環丙基_2_曱氧基乙基胺基甲酸苯曱酯

(17.2 g ’兩步產率78°/。）’其在靜置之後結晶：mp 190.5-192〇C ； JH NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.39-7.29 (m, 5H), 7.17 (d, J=8.5 Hz, 1H), 5.〇〇 (s, 2H), 3.36-3.34 (m, 2H), 3.23 (s, 3H), 3.19-3.14 (m, 1H), 0.85-0.79 (m, 1H), 0.43-0.37 (m, 1H), 0.35-0.22 (m, 2H), 0.20-0.16 (m, 1H); LRMS (ESI) m/e 250.3 [(M+H)+，C14H20NO3之計算值為 250.1]。

(S) -1 -環丙基-2-甲氧基乙基胺基甲酸苯甲酯。洛外灌爽 1-環丙基-2-曱氧基乙基胺基曱酸酯藉由HpLC(Chiralpak AD 管柱（10 cmx50 cm)，94% 庚烷/6〇/〇乙醇，300 mL/min， λ=21 0 nm，每次注射1公克，3 0分鐘方法，峰1 (51)，峰2 (i?))分離成其對映異構體’且藉由分析HPLC(Chiralpak AD 管柱，4.6x250 mm，95% 庚烷/5〇/0 乙酵，〇·8 mL/min， λ=212 nm，tR=15.79 min)測定具有大於99% 66之光學純 度：mp 190.5-192。(： ； [a]25D-18.2 (c 0.500, CHC13); NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.39-7.29 (m, 5H), 7.17 (d, J=8.5 Hz, 1H), 5.00 (s, 2H), 3.36-3.34 (m, 2H), 3.23 (s, 3H), 3.19-3.14 (m, 1H), 0.85-0.79 (m, 1H), 0.43-0.37 (m, 1H), 0.35-0.22 (m, 2H), 0.20-0.16 (m, 1H); 13C NMR (100 MHz, CDC13) δ 155.6, 136.9, 128.0, 127.38, 127.34, 74.0, 64.8, 57.8, 53.5, 12.6, 2.2, 1.5; LRMS (ES+) m/e 272.3 141617-doc •38· 201008926 [(M+Na)+ ’ C14H19N03Na 之計算值為 272.1]。

MeO〆、!^

NH-HCI ❺

6S7-7-環丙差-2-严真基乙蜃盪鑀廣。在帕耳瓶中，向 (S)-l-環丙基-2-曱氧基乙基胺基曱酸酯（4 36 g，17 5 mmol)於EtOH(80 mL)及CHC13(3 mL)中之溶液中添加二噁 烧（5 mL)中之 4 N HC1 及 Pd/C(476 mg，10%，濕满，德固 赛（Degussa)型）。在H2氛圍（45 psi)下將混合物在帕耳震蘯 器上置放16 h。經由矽藻土墊過濾反應混合物，且濃縮濾 液’接著自己烷（2χ)中再濃縮’以得到白色固體狀環 丙基-2-甲氧基乙胺鹽酸鹽（2.65 g，100〇/〇產率）：！^19〇_ 192 C > [a] d+14.3 (c 0.446, MeOH); ^ NMR (400 MHz, CDC13) δ 8.41 (s br, 3H)，3.68 (d, J=5.6 Hz, 2H)，3.39 (s， 3H), 2.64-2.60 (m, 1H), 1.20-1.13 (m, 1H), 0.71-0.58 (m} 3H), 0.32-0.28 (m, 1H); 13C NMR (100 MHz, CDC13) δ 72.1, 59.2, 57.5, 10.7, 4.2, 4.1; LRMS (ESI) m/e 231.2 [(2M+H)+ « C12H27N202 之計算值為 231.2]。

MeO八^^ ^NHCI

CN (S)-2-(l-環丙基-2-甲氧基乙胺基> 乙腈鹽酸鹽。in 下將氯乙腈（8.40 mL，133 mmol)添加至（5)-1-環丙基-2-甲 氧基乙胺鹽酸鹽（20.0 g，133 mmol)、K2C〇3 (52.0 g，376 mmol)及 ΚΙ(24·2 g，145 mmol)於乙腈（300 mL)中之經授拌 141617-doc -39- 201008926 懸浮液中。在48°C下攪拌該混合物17個小時。接著使反應 混合物冷卻至室溫’且接著經由矽藻土墊過濾。將所得遽 液濃縮成深棵色半固體。使固體懸浮於ch2ci2中，且藉由 矽膠管柱層析法（CH^2 —CH^2中之3%甲醇）純化，以產 生棕色油狀物（18.8 將該油狀物溶解於Et2〇(15〇 mL) 中’且用Et2〇(100 mL)中之2 N HC1酸化溶液，以獲得灰白 色固體狀（S)-2-(l-環丙基_2_甲氧基乙胺基）乙腈鹽酸鹽 (23.6 g，93。/〇產率）：[a]25D+22.9 (c 0.714，CHC13); 4 NMR (400 MHz, CDC13) δ 10.51 (s br, 2H), 4.39 (ABq, Λβ=16.75 Δν=24.4 Hz, 2H), 3.94 (dd, /Αβ=1〇·6, /αχ=7.8 Hz, 1H), 3.79 (dd, 7Ba=10.8, JBx=2.2 Hz, 1H), 3.42 (s, 3H), 2.79-2.75 (m, 1H), 1.25-1.17 (m, 1H), 0.90-0.83 (m, 1H), 0.78-0.70 (m, 2H), 0.39-0.34 (m, 1H); LRMS (ES+) m/e 155.2 [(M+H)+，C8H丨5N20之計算值為 155.1]。

(S)-3’5-二溴-環丙基_2_甲氧基乙基）吼嗪 辨。在裝備有加料漏斗之1 L 3頸圓底燒瓶中，將（$)-2-(1-環丙基-2-甲氧基乙胺基）乙腈鹽酸鹽（15 〇 g，78 7 mm〇1) 懸浮於無水二氣甲烧（300 mL)中。使混合物冷卻至_6〇。匸， 且經15分鐘逐滴添加乙二醯溴（41 3 mL，44〇 mm〇1)。添加 完成之後’移除冷卻浴，且使反應混合物溫熱至室溫，且 接著在40°C下加熱3小時。使混合物冷卻至室溫且在真空 141617.doc -40- 201008926 下壓縮。固體如下純化：直接添加至矽膠管柱之頂部且在 殘餘乙二醯 >臭已停止與矽膠反應之後溶離（5%—20。/〇乙酸 乙酯於己烷中）’以獲得灰白色固體狀（幻-3,5-二溴-1-(1-環 丙基-2-曱氧基乙基）°比。秦·2(1//)-酮（15.5 g，56%產率）：mp - 98.5-100.5°C ； [a]25D-71.8 (c 1.19, CHC13)； *H NMR (400 MHz, CDC13) δ 7.61 (s, 1H), 4.08-4.04 (m, 1H), 3.72 (dd, /ab=1〇 55 /Ax=4.5 Hz, 1H), 3.61 (dd, JBa=1〇.3, JBx=3.〇 Hz, 1H), 3.32 (s, 3H), 1.41-1.36 (m, 1H), 0.82-0.76 (m, 1H), ® 0.65-0.59 (m, 1H), 0.54-0.48 (m, 1H), 0.32-0.27 (m, 1H); LRMS (APCI) m/e 351.1 [(M+H)+，C10H13N2O2Br2之計算值 為 350.9] »

(S)-3,5-二氯-1-(1-環丙基-2-甲氧基乙基）吼嗪-2(lH)-W。將乙二醯氣（54.5 mL ’ 624 mmol)逐滴添加至（5>2-(1-環丙基-2-甲氧基乙胺基）乙腈鹽酸鹽（23.6 g，124 mmol)於 1，4二噁烷（300 mL)及二氣甲烷（200 mL)中之冷（<8。〇溶液 中。接著在53°C下加熱反應混合物19 h。使反應混合物冷 卻至室溫，且濃縮成半固體’接著與CH2C12 (50 mL)共蒸 發三次。藉由矽膠管柱層析法（0— 1 〇%—*20%乙酸乙酯於己 烷中）純化所得棕色固體，以得到白色固體狀（5)-3,5-二氣-1-(1-環丙基-2-甲氧基乙基）吡嗪-2(1//)-酮（22.4 g，69%產 率）：mp 109.8-110.8°C ; [a]25D-88.8 (c 0.513, CHC13); 4 141617.doc •41 - 201008926 NMR (400 MHz, CDC13) δ 7.54 (s, 1H), 4.12-4.08 (m, 1H), 3.73 (dd, yAB=10.3, JAX=4.5 Hz, 1H), 3.62 (dd, JBa=10 3 c/Bx=3.0 Hz, 1H), 3.32 (s, 3H), 1.43-1.37 (m, 1H), 0.82-0 76 (m, 1H)，0.65-0.61 (m，1H), 0.55-0.50 (m, 1H)，〇·33_〇 27 (m，1H); LRMS (ESI) m/e 206.3 [(M+H)+，C10H13N2〇2C12 之計算值為263.0]。C10H12N2O2Cl2之分析計算值：c， 45.64, Η，4·59, N，10.64。實驗值：C，45.74, H，4.62, N， 10.61。 藉由Thar SFC處理不同批次之（习-3,5-二氣•環丙基_ 2 -甲氧基乙基）D比"秦-2 (7//)-酮[160 g ’ 90-95%之（51)-對映異 構體]以分離出對映異構體純度大於99%之（幻-對映異構 體。3批次分離出總共133 gi()S)-3,5-二氣環丙基·2_ 曱氧基乙基）吡嗪-2(7/f)-酮。亦獲得11.8 g之非所要異構 體。所釋出之化合物之對映異構體過量（ee)為>99%。Thar 3 50 SFC之製備條件如下：外消旋體量（g) : 65、58、37 ; 管柱：Chiralpak AD-H，5x25 cm ;移動相：C02 中之 10% EtOH ;壓力（巴）：100 ;流動速率（ml/min) : 200 ;溶液濃 度（mg/ml) : 50 ;注射量（mi) ·· 6 ;循環時間（分鐘/注射）： 3.5，溫度：35 ;產量（g/hr) ; 5.1 :镇測 λ : 220。

f基-5-磺羞％啶_2·摩。將裝備有機械攪拌器、加料 漏斗及溫度計之3頸2 L圓底燒瓶置於冰水浴中。將濃 141617.doc -42- 201008926 H2S04 (150 mL)添加至燒瓶中。在125 mL錐形瓶中稱取2_ 胺基-3-甲基 〇比咬（5〇·〇 g，0.463 mol，Lancaster，CAS 1603-40-3，mp. 29°C，於溫水浴預熱以使其熔融），且隨 後經由具有折斷窄尖端的預熱巴斯德（pasteur)吸管、以數 ' 小份添加。在添加期間使錐形瓶保持於溫水浴中，以防止 起始物質固化。在添加期間溫度上升至約45。(：，且在燒瓶 内形成白煙/霧。將濃ΗβΟ4 (1〇〇 mL)添加至殘餘起始物質 ❺ 中，且將混合物添加至反應燒瓶中。所得混合物為乳白色 懸浮液。在冰水浴冷卻下將濃HJO4 (35 mL)與70%硝酸 (35 mL)之溶液預混合，且轉移至加料漏斗中。在反應混 合物之内部溫度已冷卻至1〇-15。〇 (但不低於1〇〇c )之後，以 使得内部反應溫度上升至2〇_25。(：（5-10分鐘添加時間）的速 率逐滴添加經預混合之I^SOVHNO3酸混合物。在添加完 成之後，用自來水浴置換冰水浴。反應溫度緩慢增加至約 30 C範圍，且接著冷卻至室溫。在此期間應監控反應以確 φ 保溫度不上升得過高。接著攪拌反應混合物隔夜，且接著 經由加料漏斗、以使得溫度不超過35eC之添加速率將7〇% 罐酸（35 mL)逐滴添加至深紅棕色混合物中。此時，反應 . 燒瓶係擱置於室溫下含有水之水浴中。接著經由加料漏斗 - 將水（500 mL)逐份添加至反應燒瓶中。先逐滴添加約15〇 mL水，同時使内部溫度緩慢上升至50-60。(：。增加攪拌速 率以便搜散所出現之任何發泡體。在最初約丨5 〇 mL水添加 期間，棕色氣體逸出。在氣體停止逸出之後以較快速率添 加剩餘約3 5 0 mL水，且不再觀測到溫度升高。反應物自混 141617.doc -43- 201008926 濁深棕色變成透明撥色溶液。當反應物冷卻至低於5〇ΐ 時’可形成一些黃色沈殺物 接著移除水浴，且置換為加 熱套，且用冷凝器置換加料漏斗。接著在US-iifc下將 反應混合物（淺橙色溶液或嫩黃色溶液）加熱丨75_21^在此 期間’在約11 5°c下再發生氣體逸出。接著藉助於冰水浴 使反應混合物冷卻至室溫’且接著藉由將冰直接添加至反 應混合物中來進一步冷卻至〇°C。將所形成之固體收集於 布赫鈉（Buchner)漏斗上，且使用冷水、繼而最小量之冷乙 醇、繼而最小量之冷乙醚洗滌。接著在真空下乾燥固體， 以得到淺黃色固體狀3-甲基-5-硝基吡啶·2-醇（53.5 g，75% 產率）：mp 228-229°C ; NMR (400 MHz，DMSO_d6) δ 12.55 (s, br, 1H), 8.54 (d, 7=3.0 Hz, 1H), 8.04 (d, J=2.0 Hz, 1H)，2.04 (s，3H); 13C NMR (loo MHz，CDC13) δ 162.2, 135.4, 130.0, 129.5, 128.1, 15.8; LRMS, (ESI) m/e 152.96 [(M-H)’’ C6H5N203之計算值為 153.03；|。c6H6N203之分析 計算值：C，46.75, H，3.92, N，18.17。實驗值：C，46.80, H， 3.79, N， 18.14 。

f真差-3- f差-5-廣差呦啶。將3-曱基-5-硝基吡啶-2- 醇（134 g ’ 0.872 mol)(«/·(>尽· C；7ew· 1949，74，328-332)分 成3份，且置於三個1 l圓底燒瓶中。將P〇Cl3 (200 mL)添 加至各燒瓶中，且將混合物加熱至回流歷時2 h »冷卻溶 141617.doc -44 - 201008926

液’且在真空中移除過量p〇ci3。在攪拌下將殘餘物傾注 於冰水（1 L)中，且藉由過濾收集沈澱物，且風乾2〇分鐘。 使〇併之產物自己燒（3〇〇 mL)中之10%乙酸乙酯中再結 晶，且風乾以獲得白色固體狀2氯_3_甲基_5硝基吡啶（139 g ’ 92°/。產率），其無需進一步純化即用於下一步中：〗H >JMR (300 MHz，CDC13) δ 9.04 (d，·7=2.5 Hz，1H)，8.33 (d, •7=2.2 Hz, 1H)，2.50 (s，3H)。 將來自以上程序之2_氯_3-曱基-5_硝基吡啶（139 g， 0.806 mol)分成兩份’且置於具有曱醇（5〇〇 mL)之兩個2 L 圓底燒瓶中。在乾冰/異丙醇浴中冷卻溶液，同時將固體 甲酵納（26.5 g ’ 0.467 mol)逐份添加至各燒瓶中，以使得 溫度保持低於201。當添加完成時，將所得混合物加熱至 回流歷時1 h。用冰水（500 mL)冷卻且稀釋混合物以獲得白 色沈澱物，藉由過濾收集。用水洗滌合併之濾液且風乾， 以獲得白色固體狀2-曱氧基-3-曱基-5-硝基吡啶（127 g， 97%產率）：NMR (400 MHz，CDC13) δ 8.91 (d，J=2.0 Hz, 1H), 8.16 (s, 1H), 4.06 (s, 3H), 2.25 (s, 3H); 13C NMR (100 MHz, CDCI3) δ 165.83，141.91, 139.37, 132.92, 121.77, 54.83，15.84。使分析樣本自己烷中再結晶以獲得 白色針狀物，mp 95-96,5。(：。C7H8N203之分析計算值：C， 50.00, H，4.79, N，16.66。實驗值：C，49.73, H，5.02, N, 16.48。 141617.doc -45- 201008926

2-(6-甲氧基-5-甲基硝基吡啶、2•基）乙酸第三丁酯。ι 拌2-曱氧基-3-曱基_5_硝基吡啶（68 8 g，4〇9 氣 乙酸第二丁酯（77.0 g，511 mm〇1)於THF(1 L)中之黃色溶 液，且在乾冰/異丙醇浴中冷卻至_2〇0(：。則吏得反應物溫 度小於-io°c之速率添加第三丁醇鉀（115 g，丨〇2 m〇i)。反 應混合物變成暗紫色。當添加完成時，移除冷卻浴，且攪 拌反應物30分鐘。用Hcl(5〇〇 mL，24 N)中止經攪拌之反 應混合物反應。紫色溶液變成淺黃色，且混合物分成兩 層。分離有機層，用鹽水洗滌三次，且在真空中濃縮。將 己烷添加至琥珀色殘餘物中。在真空中濃縮混合物且接著 在高真空下乾燥1小時，以獲得棕褐色固體狀2_(6_甲氧基_ 5-甲基-3-硝基吡啶_2_基）乙酸第三丁酯（83 4 g，72%產 率）：4 NMR (400 MHz，CDC13) δ 8.16 (s，1H), 4 〇9 (s， 2H)，4.02 (s，2H)，2.21 (s，3H)，1.44 (s，9H); 13C >iMR (100 MHz, CDC13) δ 168.81, 163.63，147.88，139.41，135.19, 120.82，81.66，54.69，44.48，28.03，15.27。將分析樣本自 己烧中再結晶以獲得白色針狀物，mp 7^72.51 。 C13H18N2O5之分析 δ十异值.C，55.31，H，6.42，N, 9.92。實 驗值：C，55.52, Η，6.40, Ν, 9.84。

141617.doc -46 - 201008926 2-(6-甲氧基-5-甲基-3-碗基°比咬-2-基）乙酸。在勢 將2-(6-曱氧基-5 -曱基-3 -硝基°比咬-2-基）乙酸第三丁醋 (83.0 g，294 mmol)於TFA(200 mL)中之溶液加熱 J h。在 真空中濃縮溶液以獲得棕色油狀物。以己燒稀釋油狀物且 攪拌。藉由過濾收集所得固體且風乾，以獲得檫褐色固體 狀2-(6-甲氧基-5-甲基-3-石肖基°比°定-2-基）乙酸（62.8 g，940/。 產率）：4 NMR (400 MHz，CDCI3) δ 8.70 (s br，1H), 8.20 (s, 1H), 4.25 (s, 2H), 4.03 (s, 3H), 2.24 (s, 3H); 13C NMR ❹ (100 MHz, CDC13) δ 175.59, 163.80, 146.52, 139.16, 135.30，121.53，54.86，42.88，15.32。將分析樣本自己燒中 再結晶：mp 135-137°C。C9H1()N205之分析計算值：c, 47.79，H，4.46，N，12.39。實驗值：C，47.65，H，4.14，N， 12.30。 K\r\

2-曱氧基-3,6- 一严邊-5-减基％咬。在熱水浴中、在授拌 下將2-(6-甲氧基-5-甲基-3-硝基吡啶-2-基）乙酸第三丁酯 (62.5 g ’ 276 mmol)、K2C03 (20.0 g，145 mmol)與

DMF(l〇〇 mL)之混合物加熱至90°c歷時1 h。在加熱期期間 注意到氣體逸出’且在1小時後停止。將混合物傾注於攪 拌冰水（600 mL)中，同時以少量丙酮洗滌反應燒瓶。藉由 過遽收集所得沈澱物且風乾，以獲得棕褐色固體狀2_曱氧 基-3,6·二曱基-5-硝基吡啶（48.5 g，96%產率）：4 NMR 141617.doc -47- 201008926 (400 MHz, CDC13) δ 8.08 (s, lH)j 4.02 (s, 3H), 2.76 (d, 3H), 2.19 (s, 3H); 13C NMR (l〇〇 ΜΗζ, CDC13) δ 163.37, 151.63’ U9.44, 135.02, 119.39, 54 45, 24 18, 15 16。將分 析樣本自己烷中再結晶以獲得棕褐色針狀物：mp 85 9_ 90.5C。C8H丨qN203之分析計算值：c，52.74，H，5 53，N 15.37。實驗值：C，52.82, H，5 28, N，15 45。

OMe 严虞He-二严un呦啶。將二甲亞硬（35机) 添加至含有NaH(l_82 g，45.5 mmo卜60%，於礦物油中） 之乾燥圓底燒瓶中。在7(TC下將所得懸浮液加熱35分鐘， 此期間懸浮液變成溶液。使反應混合物冷卻至室溫，添加 峨化_甲基氧硫鏑（10，〇 g，45.5 mmol)，且在室溫下授拌 混合物30分鐘。添加2_曱氧基_3_甲基_5_硝基吡啶（4 5〇 g，26.80 mmol)，且在室溫下攪拌所得深紅色溶液”分 鐘，此時TLC展示起始物質完全耗盡。將反應混合物轉移 至含有水（30 mL)之分液漏斗中，且用Et〇Ac(3xl〇〇 mL)萃 取水層。用鹽水洗滌合併之有機層，經MgS〇4乾燥，過濾 且辰縮。藉由MPLC(矽膠，20。/。乙酸乙酯於己烷中）純化殘 餘物，以得到無色固體狀2_曱氧基_3,6_二曱基_5_硝基〇比啶 (2.00 g，41%產率）’其與藉由上述方法所製備之彼物相 同.mp 85.5-86.2。(： ；NMR (400 MHz, CDC13) δ 8.08 (s, 1H), 4.02 (s, 3H), 2.77 (s, 3H), 2.20 (s, 3H) 〇 141617.doc 201008926 N〇2

OH 3,6-二严差-5-磺差呦啶-2-摩。在100°(：下將2-甲氧基- 3.6- 二甲基-5-硝基。比啶（32.3 g，182 mmol)於 12 N鹽酸（300 mL)中之溶液加熱1 h。TLC分析指示剩餘一些起始物質， 因此在11 0°C下再加熱反應物45分鐘。使反應混合物冷卻 至室溫，且傾注於冰（400 g)上。當冰融化且所得棕色濃稠 ❹ 懸浮液之溫度仍小於〇°C時，過濾混合物。用水（1〇〇 mL) 洗滌固體濾餅，且在過濾器上乾燥30分鐘。接著使固體再 懸浮於冷（-10°C )乙醇（150 mL)中，過濾、且用冷乙醇（50 mL)洗滌’且在過濾器上風乾1 h，以得到棕褐色粉末狀 3.6- 二甲基-5-硝基〇比咬-2-醇（28.0 g，94%產率）：mp 263〇C ； !H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 12.42 (s br, 1H), 8.03 (s, 1H), 2.61 (s, 3H), 2.01 (s, 3H); LRMS (ESI) m/e 169.3 [(M+H)+，C7H9N203之計算值為 169.1]。c7H8N203之 ❹ 分析計算值：C，50.00，Η, 4·79, N，16.66。實驗值：C, 50.01，Η, 4.59, N，16.75。

2-(二氟甲氧基）-3,6-二甲基-5_磺基0比咬。两己说〇⑽ mL)洗滌氫化納（6.63 g，166 mmo卜60%，於礦物油中）以 移除礦物油，且接著在室溫下懸浮於無水乙腈（15〇〇 mL) 141617.doc •49· 201008926 中。經30分鐘逐份添加3,6-二甲基-5-硝基吡啶_2_醇（279 g，166 mmol)以獲得黃色懸浮液。添加期間存在一些鼓泡 現象，但溫度改變可忽略不計。接著添加氟化绝（25〇 g， 16·6 mmol)’繼而經30分鐘緩慢添加2_(氟磺醯基）二氟乙 酸二甲基碎烧酯（36.0 mL，1 82 mmol)。添加期間存在一些 鼓泡現象，溫度自23τ上升至3(TC，且懸浮液混濁變得不 太明顯。攪拌15分鐘之後’ TLC指示起始物質仍有剩餘， 因此經10分鐘再添加2-(氟磺醯基）二氟乙酸三曱基矽烷酯 (6.5 mL ’ 33 mmol)。再過15分鐘之後，TLC指示起始物質 耗盡。藉由以使得鼓泡變得不太劇烈之速率逐滴添加水 (20 mL)來中止反應。鼓泡停止之後’再添加水（2〇〇 mL)。 在真空中移除大部分溶劑，且用乙酸乙酯（3x2〇〇mL)萃取 水性殘餘物。經NaJO4乾燥合併之有機層且蒸發成棕色糊 漿’其在靜置之後固化。將此殘餘物溶解於乙醇（4〇〇 mL) 中’且添加脫色炭（1 5 g)。在70 °C下加熱懸浮液2 0分鐘， 且接著經由矽藻土墊及砂過濾。收集濾液，且蒸發溶劑。 將殘餘物溶解於二氣曱烷中且蒸發溶液，以獲得淺黃色固 體狀2-(一氟曱氧基）-3,6-二曱基-5-硝基<»比咬（33.4 g，92% 產率）：mp 5 卜52°C ; 4 NMR (400 MHz, CDC13) δ 8.21 (s， 1Η)，7.55 (t，《7=72.0 Hz, 1Η)，2.76 (s, 3Η)，2.30 (s，3Η)。 C8H8N203F2之分析計算值：c，44.04，H, 3.69, N, 12.84。 實驗值：C, 43.78, H，3.55, N，12.58。 替代路線。向3,6-曱基-5-硝基吡啶-2-醇（700 mg，4.17 mmol)於乙腈（70 mL)中之溶液中添加NaH(450 mg，11.3 141617.doc -50- 201008926 mmol ’ 60% ’於礦物油中）。在室溫下攪拌丨5分鐘之後， 經數分鐘逐滴添加2,2-二氟-2-(氟磺醯基）乙酸（0.73 mL， 7.09 mmol)。在添加期間發生一些鼓泡。在室溫下搜拌反 應混合物15分鐘之後’藉由緩慢添加水（1〇 mL)中止反 應。在真空_移除乙腈，且將殘餘物轉移至含有水（5〇 mL)之分液漏斗中。用EtOAc(3x50 mL)萃取水層。用鹽水 洗滌合併之有機層，經MgS〇4乾燥’過濾且濃縮。藉由矽 膠MPLC( 10%乙酸乙酯於己烷中）純化殘餘物，以得到無色 ® 固體狀2·(二氟曱氧基）-3,6-二甲基-5-硝基吡啶（870 mg， 96%產率），其與藉由方法A所製備之彼物相同·· mp 48_ 49〇C ； NMR (400 MHz, CDC13) δ 8.21 (s, 1H), 7.54 (t, /=72.4 Hz, 1H), 2.76 (s, 3H), 2.30 (s, 3H); ]3C NMR (l〇〇 MHz，CDC13) δ 158.1，151.0, 142.0, 137.0, 120.0’ 113.9 (t， «7=25 5.8 Hz)，23.5, 14.7 °

〇chf2 〈二廣f農差入2,5-二f差呦啶嚴。向2_(二氟曱氧 基）-3,6-一甲基石肖基〇比咬（33.4 g, 153 mmol)於二氣曱烧 (100 mL)及乙醇（600 mL)中之溶液中添加1〇%鈀/木炭（33 g)。在40 psi H2下、在帕耳裝置上將所得懸浮液氫化i h。 使用TLC監控反應。每小時再添加3.3 §鈀/木炭，直至起始 物質無剩餘。共添加13.2 g Pd/C。在最後添加催化劑之 後，將反應混合物在Ha氣氛下保持2 h。經由矽藻土及砂 141617.doc 201008926 過濾反應混合物，且用乙酸乙酯（2x 100 mL)洗滌所收集之 固體。在真空中濃縮滤液以獲得灰色油狀物，藉由矽膠管 柱層析法（35% —50%乙酸乙酯於己烷中）純化，以得到淺黃 色油狀6-(二氟甲氧基）-2,5-二曱基吡啶-3-胺（25.7 g，89% 產率），其在冰箱中冷卻之後固化。在低於〇°C下將產物自 己烷中再結晶以得到白色針狀物：mp 40-42。(：，NMR (400 MHz, CDC13) δ 7.35 (t, J=74.0 Hz, 1H), 6.84 (s, 1H), 2.27 (s, 3H), 2.15 (s, 3H); LRMS (ESI) m/e 189.2 [(M+H)+，C8HnN2OF2之計算值為 189.1]。C8H丨。N2OF2之分 析計算值：C，51·12, Η, 5.38, N，14.86。實驗值：C，51.17, Η, 5.29, N，14.87 〇 替代路線。向2-(二氟曱氧基）-3，6-二曱基-5-硝基〇比啶 (1.00 g ’ 4.5 8 mmol)於 EtOH(40 mL)及乙酸（4 mL)中之溶液 中添加鐵粉（1.26 g’ 22.9 mmol)。藉助於加熱套、在無授 拌棒之燒瓶中、在劇烈回流下加熱反應混合物。丨.75 h之 後，使反應混合物冷卻至室溫’且藉由矽藻土墊過濾來移 除鐵粉。濃縮濾液，且將殘餘物轉移至含有飽和NaHC03 水溶液（50 mL)之分液漏斗中。用EtOAc(3xlOO mL)萃取水 層。用鹽水洗滌合併之有機層，經MgS04乾燥，過濾且濃 縮。藉由矽膠MPLC(20%->50%乙酸乙酯於己烷中）純化殘 餘物，以得到淺黃色固體狀6-(二氟曱氧基）_2,5_二甲基〇比 咬-3-胺（774 mg，90°/。產率）’其與藉由方法a所製備之彼 物相同：mp 38.4-39.4t： ; NMR (400 MHz，CDC13) δ 7.35 (t, /=74.5 Hz, 1H), 6.82 (s, 1H), 2.26 (s, 3H), 2.14 (s, 141617.doc •52- 201008926 3H); 13C NMR (100 MHz，CDC13) δ 149.6, 137.4，137.1， 127.4, 119.0, 115.0 (*/=251.3 Hz)，19.3, 14·8; LRMS (ESI) m/e 189.0 [(M+H)+，C8HnN2OF2之計算值為 1891]。

(S)-5-溴-1-(環丙基-2-甲氧基乙基））-3-[6-(二氟甲氧基）-2,5 - 一曱基-°比咬-3-基胺基]a比唤明。將（<S)-3,5 -二 漠-1-(1-環丙基-2-甲氧基乙基）"比嘻_2(1丑)·酮（in g, 51.7 mmol)與6-(二氟曱氧基）-2,5-二曱基吡啶·3·胺（9.70 mg， 51·7 mmol)合併於裝備有溫度計及加料漏斗之2 l 3頸圓底 燒瓶中且置於N2下。添加THF(360 mL)，且使混合物冷卻 至〇°C。經15分鐘、經由加料漏斗逐滴添加NaHMDS(109 mL，109 mmol，1 Μ，於THF中）（使内部溫度保持低於 5°C)。添加完成之後’ 〇°c下再攪拌反應混合物30分鐘。 藉由添加飽和ΝΗ4〇Π水溶液（120 mL)中止反應。將混合物 轉移至含有水（100 mL)之分液漏斗中，且用乙酸乙酯（3 χ 250 mL)萃取水層。用鹽水洗滌合併之有機層，經Mgs〇4 乾燥’過濾且濃縮’以得到棕色固體狀⑻-5-溴-1-(環丙 基-2-甲氧基乙基）)_3-[6-(二氟t曱氧基）-2,5-二f基°比咬-3-基胺基]«比嗪-2(1H)-酮（22.4 g，95%產率），其無需進一步 純化即用於下一步中：’H NMR (400 MHz, CDC13) δ 8.40 141617.doc -53- 201008926 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.53 (Sj 1H), 7.46 (t, /=73.7 Hz, 1H), 4.16-4.12 (m, 1H), 3.74 (dd, JAb=1〇.5s Jax=5.2 Hz, 1H), 3.66 (dd, JBa=1〇.3, JBx=3.3 Hz, 1H), 3.35 (s, 3H), 2.44 (s, 3H), 2.27 (s, 3H), 1.39-1.34 (m, 1H), 0.85-0.79 (m, 1H), 0.66-0.62 (m, 1H), 0.56-0.(m, 1H)，〇 34_〇 29 (m，1H); HRMS (ESI) m/e 459.0864 [(M+H)+，C18H22N403BrF2之計 算值為 459.0843]。

(S)-4-(l-環丙基-2-甲氧基乙基）_6_[6_(二氟甲氧基μ2,5-二甲基°比咬-3-基胺基]-5-侧氧基·4,5-二氫祉嗓-2-甲腈。在 室溫下’在機械攪拌下’將印_5_溴環丙基_2_甲氧基 乙基）)-3-[6-(二氟曱氧基）_2,5_二曱基比啶_3-基胺基]吡 嗪-2(1//)-酮（22.4 g ’ 48.8 mmol)溶解於無水二曱基甲醯胺礬 (480 mL)及水（24 mL)中。使氮氣鼓泡通過反應混合物丨5分 鐘。添加氰化鋅（6.00 g，51.0 mmol)、Pd2(dba)3 (2.23 g， 2·40 mmol)及 dppf(3.24 g，5.85 mmol)，且在 12〇。(：下加熱 反應混合物3 h。使反應物冷卻，且經由矽藻土墊過濾。在 真空中蒸發DMF濾液（浴溫度<4〇。〇，且將殘餘物轉移至 含有飽和ΝΗπΐ水溶液（200 mL)之分液漏斗中。用Et〇Ac(3x 400 mL)萃取水層。用鹽水（300 mL)洗滌合併之有機層， 141617.doc -54- 201008926

經MgSCU乾燥，過濾且濃縮。藉由矽膠管柱層析法 (70/〇—100% CHAl2於己烷中，接著2% —5%乙酸乙酯於 CHzCl2中）純化得到淺黃色固體狀（5ΐ)_4 (ι_環丙基_2_甲氧 基乙基）-6·[6-(二氟曱氧基）_2,5_二甲基吼啶_3_基胺基]_5_ 侧氡基-4,5-二氩吡嗪_2_甲腈（142§，72%產率）。自 EtOH:2-BU〇H(10:l)之混合物中再結晶得到淺黃色針狀 物：mp 146.8-U7.7X： ; [α]'_63 7 (c 〇 概，CHCl3); lH NMR (400 MHz, CDC13) δ 8.40 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.53 (s, 1H), 7.46 (t5 /=73.5 Hz, 1H), 4.16-4.12 (m, 1H), 3.74 (dd, Jab=10.3, /ax=5.0 Hz, 1H), 3>67 (dd? jba=i〇.4,

Jbx-3.0 Hz, 1H), 3.35 (s, 3H), 2.44 (s, 3H), 2.27 (s, 3H), 1.39-1.33 (m’ 1H), 0.85-0.79 (m，1H)，〇 67_〇 61 (m，1H)， 0.56-0.50 (m, 1H), 0.34-0.29 (m, 1H); HRMS (ESI) m/e 406.17〇4 [(M+H)+，Cl9H22N5〇3F2之計算值為 4〇61691]。 C19H2丨N503F2之分析計算值：c，56.29; H，5.22; N，17.27。 實驗值：C，56.38; H，5.31; N, 17,34。 將以第一溶離異構體（約97%對映異構體純度）增加之 4·(1-環丙基-2-曱氡基乙基二氟曱氧基）_2,5_二甲基 吡啶_3·基胺基]_5-側氧基-4,5-二氫吡嗪_2_曱腈（97 g，多 次操作所得）合併，以便在對掌性支撐物（Chiralpak 〇Dh 管柱（5x25 cm) ’移動相=15%異丙醇/乙腈（1:1)於c〇2中； 流動速率=200 mL/min，壓力=1〇〇巴；溫度=35°c，λ=254 nm ’每6分鐘注射一次，每次注射5 mL，91 mg/mL，於異 丙醇/乙腈（1:1)中）上藉由超臨界流體層析法（SFC)移除非所 141617.doc -55- 201008926 要之第一溶離異構體。經純化之物質具有大於99% ee之光 學純度，如藉由分析型SFC測定：chiralcel OD-H管柱（4.6x 250 mm，5 μπι);移動相=8%乙醇於c〇2中；流動速率=2 mL/min，150 巴；λ=215 nm ; 分離得到85 g對映異構體純化合物（ee>99%)。將此物質 为成3伤，母份約28公克。使每份物質自無水2 丁醇（28〇 mL)中再結晶。在高真空下將合併產物乾燥72小時，得到 81_7克環丙基曱氡基乙基）_6_[6_(二氟甲氧基）_ 2,5-二甲基吡啶-3-基胺基]_5_側氧基_4,5_二氫吡嗪_2_曱 腈0

(S)-5-氣-1-(環丙基-2-甲氧基乙基(二氟甲氧基）_ 2.5- 二甲基-。比咬-3-基胺基]。比嗓_2(111)-酮^飞铬{S')- 3.5- 二氣-1-(1-環丙基-2-甲氧基乙基）11比嗪_2(1丑)_酮（15〇 g，57.0 mmol)與6-(二氟甲氧基）_2,5_二甲基吡啶_3_胺 (10.7 g，57.0 mmol)合併於裝備有溫度計及加料漏斗之2 3頸圓底燒瓶中。添加THF(570 mL) ’且使混合物冷卻至 0 C。以使付内部溫度保持低於5 °c之速率、經2 0分鐘經由 加料漏斗逐滴添加 NaHMDS(119.7 mL，119.7 mmol，1 Μ，於THF中）^在添加完成之後，在下再攪拌反應混 141617.doc -56· 201008926 合物1 5分鐘。藉由添加飽和nh4C1水溶液（60 mL)中止反 應。將混合物轉移至含有水（400 mL)之分液漏斗中，且用 乙醚（3x300 mL)萃取水層。用鹽水洗滌合併之有機層，經 MgSCU乾燥，過濾且濃縮。藉由矽膠管柱層析法（3〇0/〇乙酸 乙醋於己烧中）純化產物，以得到淺黃色固體狀（幻_5_氣 (環丙基-2-甲氧基乙基）)_3_[6_(二氟甲氧基）_2,5·二甲基吡 啶-3-基胺基]吡嗪_2(1//)_酮（22.1 g，94%產率），隨後使其 自庚烷中再結晶以得到無色針狀物：mp 103.4-l〇4.4°C， [a]25D-41.9 (c 0.807, CHC13) ； ]H NMR (400 MHz, CDC13) δ 8.42 (s, 1H), 8.02 (s, 1H), 7.46 (t, J=74.0 Hz, 1H), 6.96 (s, 1H), 4.19-4.14 (m, 1H), 3.75 (dd, JAB=l〇.3, JAx=6.3 Hz, 1H), 3.67 (dd, JBa=1〇.3, Jbx=3.5 Hz, 1H), 3.34 (s, 3H), 2.44 (s, 3H), 2.26 (s, 3H), 1.32-1.26 (m, 1H), 0.81-0.74 (m, 1H), 0.63-0.54 (m, 1H), 0.52-0.47 (m, 1H), 0.36-0.29 (m, 1H); HRMS (ESI) w/e 415.1360 [(m+H)+，C18H22N403C1F2 之計算值為415.1349]。（：18只211^403(：1?2之分析計算值：（：, 52.11; H, 5.10; N，13.50。實驗值：c，52.〇5; H，4.99; N， 13.48 。

OCHF； 141617.doc 201008926 (S)-4-(l-環丙基-2-甲氧基乙基）-6-[6-(二氟甲氧基）-2,5-二甲基吡啶-3-基胺基]-5-側氧基-4, 5-二氫吡嗪-2-甲腈。洛 6S7-5-氯-1-(環丙基-2-甲氧基乙基））-3-[6-(二氟曱氧基）-2,5-二曱基-吡啶-3-基胺基]吡嗪-2(1//)-酮（99.3 mg，0.24 mmol)溶解於無水NMP(3 mL)中。向此溶液中添加 Pd(dppf)Cl2.CH2Cl2 (78.4 mg，0.096 mmol)、Zn(CN)2 (60 mg，0.51 mmol)及 Zn 粉（24 mg，0.37 mmol)。使 N2 鼓泡通 過反應混合物15分鐘以逐出所溶解之02，且使反應混合物在 氬氣下、在120°(：下保持111。1^-；\18分析指示92.5%轉化為 所需產物。LRMS (ESI) m/e 406.3 [(M+H)+，C19H22N503F2之 計算值為406.2]。

(S)-4-(l -壞丙基-2-甲乳基乙基）-6-(6-甲乳基-2，5-二甲基 °比咬-3-基胺基）-5-侧乳基-4，5-二風σ比嘻-2-甲猜。犧'(S)-5>-氣-1-(環丙基-2-甲氧基乙基））-3-[6-(甲氧基）-2,5-二曱基-0比 啶-3-基胺基]吡嗪-2(1//)-酮（3.00 g，7.93 mmol)溶解於63 mL N-甲基吡咯啶酮中。將Pd(dppf)Cl2.CH2Cl2 (648 mg， 0.793 mmol)、Zn(CN)2 (1·86 g，15.9 mmol)及 Zn 粉（619 mg，9.52 mmol)添加於溶液中。在使N2鼓泡通過溶液1 5分 鐘之後，使深色混合物在氬氣下、在120°C下保持23 h。 141617.doc • 58 - 201008926 對反應混合物之LC-MS分析顯示98.6%轉化。使反應混合 物冷卻至環境溫度’經由短矽藻土床過濾，且以NMP洗滌 矽藻土餅《在真空中蒸發濾液（浴溫度為約6〇〇c 使深色 殘餘物在EtOAc(350 mL)與H2O(60 mL)之間分溶。用水（2x . 50 mL)及鹽水（50 mL)洗滌有機層，經Na2S04乾燥，且接 ， 著在真空中蒸發。接著藉由矽膠管柱層析法（30% CH2C12 乙酸乙酯於己烷中，Rf=0.3)純化深棕色殘餘物，以獲得淺 黃色固體狀純6S>4-(1·環丙基-2-甲氧基乙基）-6-(6-甲氧基-

A W 2,5-二曱基吡啶-3-基胺基）-5-侧氡基-4,5-二氫吡嗪-2-甲腈 (2.83 g，96.5%)。A NMR (CDC13) 6 7.86 (s，1H), 7.49 (s, 1Η), 4.16-4.13 (m, 1H), 3.94 (s, 1H), 3.74 (dd, 1H, JAb=1〇.4 Hz, JAx=5.2 Hz), 3.66 (dd, JBX=3.2 Hz), 3.35 (s, 3H), 2.43 (s, 3H), 2.19 (s, 3H), 1.39-1.32 (m, 1H), 0.85-0.79 (m, 1H), 0.67-0.61 (m, 1H), 0.55-0.50 (m, 1H), 0.34-0.29 (m, 1H); 13C NMR (CDC13)：158.7, 151.4, 148.1, 144.1, ❹ 133.1， 125.7， 124.7， 118.4， 117.3， 107.8, 77.4, 77.1， 76.9, 72.7, 62.3, 59.5, 53.6, 20.0, 15.8, 11.2, 6.2, 4.1; LRMS (ESI) m/e 370 [(M+H)+，C19H24N503 之計算值為 370]; • h=2.0 min(溶劑 A : MeOH:H20:TFA=10:90:0.1 ;溶劑 b : . MeOH:H20:TFA=90:l〇:〇.i ;經3分鐘運作（最終！分鐘持留 時間），線性梯度為40% B於A中至100% B於A中，λ=280 nm)。 141617.doc -59- 201008926

OH (S)-4-(l-環丙基-2-甲氧基乙基）_6_(6_經基-2,5-二甲基吼 咬-3-基胺基）-5-側氧基-4,5_二氫吡嗪_2_^腈。屯 下’在授摔下’將冰乙酸（80 mL)中之⑺_4·(1_環丙基心 甲氧基乙基）-6-(6·甲氧基·2,5_二甲基Μ」·基胺基）_5_側 氧基-4,5-二氫吡嗪-2-甲腈（3·00 g，8 12 2 g，37.3 mmol)加熱1 h。LC_MS分析指示>98%轉化為所需 產物。使反應混合物冷卻至環境溫度，且在真空中蒸發乙 酸。使殘餘物在乙酸乙酯（3x150 mL)與ΗζΟ(約1〇〇 mL)之 間分溶。用鹽水（100 mL)洗滌有機層，且接著經Na2S〇4乾 燥。在真空中蒸發有機層，且藉由Biotage Si02管柱層析 法（5% MeOH/CH2Cl2 ’ Rf=〇.16)純化深棕色殘餘物，以獲 得淺黃色固體狀純6S>4-(1-環丙基-2-甲氧基乙基）-6-(6-羥 基-2,5-二甲基吡啶-3-基胺基）-5-側氧基-4,5-二氫吡嗪-2-甲 腈（2.33 g，81%)。4 NMR (CDC13) δ 7.85-7.55 (br. s, 1H), 7.48 (s, 1H), 4.16-4.12 (m, 1H), 3.73 (dd, 1H, JAB=10.3 Hz, */ax=4.9 Hz), 3.66 (dd，《/bx=2.2 Hz), 3.35 (s, 3H), 2.40-2.20 (br s, 6H), 1.39-1.32 (m, lH), 0.85-0.79 (m, 1H), 0.67-0.61 (m, 1H), 0.55-0.51 (m, 1H), 0.34-0.29 (m, 1H); LRMS (ESI) w/e 356 [(M+H)+，C18H21N5O3之計算值為 356];，r=1.8 141617.doc • 60· 201008926 min(溶劑 A : MeOH:H2〇:TFA=10:90:0.1，溶劑 B ·

MeOH:H2O:TFA=90:10:0.1 ;經3分鐘運作（最終1分鐘持留時 間），線性梯度為0% B於A中至100% B於A中’ λ=280 nm)。

(S)-4-(l-環丙基-2-甲氧基乙基）-6-(6-(二氟甲氧基）-2,5-二甲基吡啶-3-基胺基）-5-側氧基-4,5-二氫吡嗪-2·甲腈。洛 純〇4-(1-環丙基-2-甲氧基乙基）-6-(6-羥基-2,5-二甲基。比 啶-3-基胺基）-5-側氧基-4,5-二氫。比嗪-2-甲腈（2.3 g，6.5 mmol)與CsF (3 95 mg，2.6 mmol)之混合物添加至乙腈（65 mL)中。向所得懸浮液中緩慢添加2,2-二氟-2-(氟磺醯基） 乙酸三甲基矽烷酯（3.82 mL，19.4 mmol)(使用時須極其小 心！該試劑會導致皮膚受損且應始終在通風櫥中操作）。1 h 之後，LC-MS分析展示反應完成（89%轉化為所需產物）。 在真空中蒸發揮發物，且使殘餘物在EtOAc(3xl20 mL)與 H20(約100 mL)之間分溶。用水（2x50 mL)及鹽水（50 mL)洗 滌有機層，且經Na2S04乾燥。在真空中蒸發乙酸乙酯，且 將殘餘物溶解於DMF(10 mL)中。將溶液施加於經 MeCN:H20(l:2)平衡之C18矽膠管柱（14 cmx5 cm)上。用 33% MeCN/H20(500 mL) ' 45% MeCN/H2〇(500 mL) ' 60% MeCN/H20(1000 mL)、70% MeCN/H20(500 mL)溶離管 141617.doc -61 · 201008926 柱。藉由LC-MS分析個別溶離份（產物出現於60%-70°/〇 MeCN/H20之間）。將含有純產物之溶離份合併且在真空中 濃縮，以獲得淺黃色固體狀純（幻-4-(1-環丙基-2-甲氧基乙 基）-6-(6-(二氟曱氧基）-2,5-二甲基吡啶-3-基胺基）-5-側氧 基-4,5-二氫吡嗪-2-曱腈（2.28 g，87% 產率）：4 NMR (CDC13) δ 8.43 (s, 1H); 8.01 (s, 1H); 7.56 (s, 1H); 7.49 (t, Jh-f=73.8 Hz, 1H); 4.15-4.18 (m, 1H); 3.76 (dd, yAB = 10.4, Jax^S.2 Hz, 1H); 3.68 (dd, JBa=1〇.4, JBx = 3.1 Hz, 1H); 3.37 (s, 3H); 2.46 (s, 3H); 2.30 (s, 3H); 1.35-1.42 (m, 1H); 0.82- ® 0.88 (m, 1H); 0.64-0.69 (m, 1H); 0.53-0.58 (m, 1H); 0.31- 0.36 (m，1H); 13C NMR (126 MHz, CDC13) δ 153.0，151.5， 147.8，143.8，133.3, 129.4，125.6, 119-1，117.2’ 114.8 (t, •7-256.1 Hz, 1 C)，107.6，72.7，62.6, 59.6, 20.0, 15.5，11.4， 6.4，4.2; F NMR (CDC13) 5-88.73 (d); LRMS (ESI) m/e 406 [(M+H)+，C19H22N503F2之計算值為 406] ; iR=2 7分鐘（溶劑 A: Me〇H:H2〇:TFA=10:90:0.1，溶劑B : Me〇H:H2〇:TFA=9〇:1〇:〇」； 經3分鐘運作（最終i分鐘持留時間），線性梯度為4〇%8於八m 中至 100% B於 A 中，λ=280 nm)。 對於熟習此項技術者顯而易見的是，本揭示案不限於上 述說明性實例，且其可在不背離其基本屬性之情況下以其 他特定形式來實施。因此’希望該等實例就各個方面而言 皆應視為具說明性而非限制性（參考隨附申請專利範圍而 非上述實例），且因此本發明意欲涵蓋申請專利範園之均 等含義及範圍内之所有變化。 141617.doc -62-

Claims (1)

1. 201008926 ,七、申請專利範圍： 一種化合物環丙基-2-甲氧基乙基）-6-(6-(二氟甲 氧基）-2,5-二甲基吡啶_3_基胺基）_5_侧氧基_4,5_二氫吡 唤-2-甲腈’或其醫藥學上可接受之鹽。 一種醫藥組合物，其包含治療有效量之環丙基-2_甲氧基乙基）4-(6-(二氟甲氧基）-2,5-二曱基°比啶-3·基 胺基）-5-側氧基_4,5_二氫吡嗪_2_甲腈及醫藥學上可接受 之佐劑、裁劑或稀釋劑。 一種⑺_4_(1_環丙基·2·甲氧基乙基）-6-(6•(二氣甲氧基 2’5 -甲基基胺基）·5_側氧基•二氫吼嗓_ 猜之用途，择田从也丨/4+ 銻戚壯夕雄」 備供治療與CRF相關聯之精神或神 ❹ 1. 2. 3. 經病狀之藥物 如請求項3之用途 如請求項3之用途 症。 如請求項3之用途 7.如請求項3之用途 斷之消極方面。 4. 5. 6. 其中該病狀為抑鬱症。 ，其中該病狀為焦慮症或焦慮相關病 其中該病症為大腸急躁症。 其中該病狀為成瘾或 藥物及酒精戒 141617.doc 201008926 四、指定代表圖： (一) 本案指定代表圖為：（無） (二) 本代表圖之元件符號簡單說明：

   五、本案若有化學式時，請揭示最能顯示發明特徵的化學式：

   141617.doc -2·