201008501 六、發明說明： 【明戶斤屬·^支冬餘々貝】 發明領域 本發明關於一種改善晚期肥育豬之屠體特性的藥劑。 更特別地’本發明關於蝦紅素（astaxamhin)結合培林 (Paylean )(萊克多巴胺(ractopamine)或萊克多巴胺鹽酸鹽 (ractopamine hydrochloride))作為飼料添加物添加人肥育豬 的飲食中，以減少例如背脂肪堆積、減少背脂肪深度，並 改善標準化無脂肪瘦肉的百分比以及改善肥育豬屠體的腰 眼面積。 發明背景 在美國生產豬隻（也稱作豬或食用豬）供食用係重要的 產業’每年生產超過100百萬的豬。因為利潤很低，所以 生產者之間需要一種可以增加產率（一般稱作性狀）的藥 劑’諸如藉由增加每個屠體的肉比例、增加腰眼面積、減 少背脂的量，或是提供其他有益的特性，諸如改善色澤的 程度。 萊克多巴胺或萊克多巴胺鹽酸鹽以商標名培林®被用 作豬肉生產的餵食添加劑。它是一種用作改變生長速率及 身體組成的β_腎上腺髓素受體(bar)促效劑。據此，其對 於肥育豬的影響係從脂肪生長取走能量並將能量重新到導 向促進肌肉纖維直徑增加及瘦肉蛋白質生長的方向。培林^ 顯示可以增加熱屠體重量、署宰率及腰眼面積（Trapp等 3 201008501 人，J. Anim. Sci，80 (Suppl l)l〇4，2002)。當以速率 9 或 1〇 百分比之一（ppm)加入飼料中時，此化合物會達到最大的 效用。 蝦紅素（3,3’_二羥_β，β·胡蘿蔔素_4,4,二酮)係一種類胡 蘿蔔素，其可以將粉紅色素給予蛋、生肉、里脊肉、蝦類 外殼、鮭魚與鱒魚。蝦紅素屬於一種稱作類胡蘿蔔素的色 素群，此色素群可展現抗氧化的特性。極少動物可合成蝦 紅素，所以絕大部分仰賴食物攝取作為蝦紅素的來源。不 管是養殖的或是天然捕獲的，甲殼類動物(諸如蟹、龍蝦、 小龍蝦與蝦)經由食物中的蝦紅素獲得其等的色澤。雖然蝦 紅素已經知道可以著色鮭魚及鱒魚的魚肉（因為此化合物 係這些魚類食物的一部分），然而依然不知道瑕紅素對於哺 乳類肉類的色澤特性是否會產生任何影響。 蝦紅素可以被合成或來自天然來源，諸如酵母菌，諸 如红色發失酵母菌（Phaffia rhodozyma (Xanthophyllomyces 办，或來自某些藻類，諸如雨生紅球藻 (价则阶⑽^p/MWa叫，或來自某些細菌，諸如某些擬球 菌 CPizracoccM·? spp)。
Johnson等人報導來自以破碎紅色發夫酵母菌蝦紅素 餵養超過16天的雞隻，蝦紅素會沉積在雞蛋的蛋黃中 (1980，Poultry Sci· 59 : 1777-1782)。研究也顯示雞隻飼料 中含有蝦紅素會增加受精率、重量與飼料利用率(Yang等 人，2006，Asian-Aust. J. Anim. Sci. 19⑺：1-7)。此外，紅 色發夫酵母菌可以於市場上購得並通常用作人工飼養之類 201008501 缝魚之色素形成的瑕紅素來源(Johnson & An，1991，Crit. Rev. Biotechnology 11(4) : 297-326) ° 某些發夫酵母菌（P/m万？a)菌株已經被改造以含有並生 產更大量的蝦紅素，參見，例如美國專利第5，182,208及 5,356,809號。因此，某些發夫酵母菌菌株含有每公克乾重 酵母菌超過500百萬分之一(ppm)的蝦紅素，每公克乾酵母 菌中超過600 ppm、超過700 ppm、超過800 ppm、超過900
Ppm、超過 1000 ppm、超過 1100 ppm、超過 1200 ppm、超 霸 過 1300 ppm、超過 1400 ppm、超過 1500 ppm、超過 1600 ppm、超過 1700 ppm、超過 1800 ppm、超過 1900 ppm、超 過2000 ppm、超過5000 ppm或更多的瑕紅素。提供更大 量蝦紅素的來源可提供更經濟的效益。 包括蝦紅素的食用類胡蘿蔔素可以用作營養補充品。 食用類胡蘿蔔素被認定可預防感染。在增強動物及人類的 免疫反應中，蝦紅素(一種非維生素原的a-類胡蘿蔔素)與β· φ 胡蘿蔔素一樣具有活性，甚至常常較β-胡蘿蔔素更具有活 性（Chew & Park，2004，J. Nutr. 134 : 257S-261S)。於包含 長鏈多元不飽和脂肪酸來源及類胡蘿蔔素的組成物中已經 描述含有蝦紅素，該種組成物可用於預防及/或治療創傷與 壓力引發之發炎狀況的癒合（PCT Pub. No. WO2004/112776)。 就動物用途而言，蝦紅素被用作飼料成分並結合L-抗 壞血酸衍生物作為動物用的抗壓力組成物（美國專利第 5,937,790號）。在另一種用途中，基於對餵食作為高脂肪飲 5 201008501 食-部分之高劑量瑕紅素之老鼠所做的研究，瑕紅素宣稱 可以抑制哺乳類身體脂肪的獲取，其中該哺乳類係人類 (美國公開案第2007129436號）。 於生產豬隻的產業中，當來自富含蝦紅素藻類的瑕紅 素被當作-般食物成分而加人食物中時，於產仔前、哺乳 期間與斷奶錢食，宣财㈣善母錢㈣的性狀 (Ιηΐ5〇ΓΓ等人’緒隻消化生理學7化國際研討會會議手冊， 1997年5月26 28曰）。此種改善的機制被認為是顧食瑕 紅素的動物改善免疫反應的結果。美國專利第6肌491號 教不在痛巾添加5 ppm H素，縣減少仔豬死產的 數目及改善類似性得以改善母豬_狀。Yang等人於前述 文獻中顯示添加0、1.5及3 η • PPm瑕紅素入肥育豬的飲食 中對於生隸狀錢著料，但是隨著日常蝦紅素飲食數 量的增加，蝦紅素對於屠宰率、背脂肪厚度以及腰肉面積 線性具有線性的影響。 當使用富含蝦紅素的飼料時，對於改善屠體性狀與肉 質的理由並不清楚。 【^明内】 發明概要 本發明提供一種由粮紅素組成的組成物 ，該蝦紅素較 佳地，自天,、、、來源’諸如紅色發夫酵母菌。當該瑕紅素與 培林結合使㈣’知紅素或是培林，獨❹相較，在 速率上或數量上都更加改善肥育豬的畢體特性。 【實施方式】 201008501 本發明之描述 隻般提家供庭:3 :=肥育豬(或食用豬或諸 組成物。-提:::;r二=”的 菌產生。依據本發明之锻紅素可以得自二夫:母 合成蝦紅素與魏天然 、他來源’包括 類。瑕红辛处人拉心 的瑕、工素’诸如來自細菌或薄 =質&培林使用以加強料豬的某些屠趙特= 在農業技藝巾，此種肥育豬或食㈣ 宰而傲食的成長中母豬（小母豬）與 i括為了暑 豬）。典型上’豬依重量及/或年齡而分類閹割公豬（間 從出生到斷奶，通常從14天至35 :’仔豬係指 奶到約7〇天大；成長豬係指從約7〇天育豬係至從斷 其等通常重約160碎；及肥育豬係指從約125天大， 天大’通常食用_市場重量約27 ^約19〇 約達到性《的階段。 _ _該等豬隻大 為本發明之故，感興趣的營養組成物通常通 加至飼料的方式提供給屠宰用諸、肥育食用豬。由添 =的營養組成物可用於任何年齡、任何發育階二感 重量的豬隻’而且可祕何已知的方式給予。 7 用於本發明之天然蝦紅素來源係紅色發夫 離的锻紅素得以商標^Aquasta®由市場上購得。此: 的生產描述於美國專利第5,356，_及5，m期號。母菌 培林®購自依藍科(Elanco)動物健康公司並且依製生者 7 201008501 的建議使用。 本發明更提供一種讓豬隻同時減少背脂肪、增加無脂 肪痩肉百分比及改善肉色的方法。於依據本發明之方法的 一較佳實施例中，得自紅色發夫酵母菌的蝦紅素以理想上 每kg飼料中含有約3.5至約1〇 mg範圍之藥劑的型式被 加入豬的飲食中。 蝦紅素可以使用各種方式來被豬隻食用。因此，蝦紅 素可以為混合物中的成分、可以為飼料的一部分、加入飼 料中、補充品的組份、可為食物的一部分、加入食物中等 等。合適的組成物可含有至少一份的蛋白質、醣類、纖維 源、礦物質、維他命或其他營養素。組成物可以為液體或 乾燥物。合適的蛋白質源可以為任何適於豬隻食用的食 物，因此，其可為植物、酵母菌或動物。 因此，於一實施例中，感興趣的組成物與肥育食用豬 的食料或飼料混合。因此，感興趣的組成物可以混合以形 成飼料，或是可以與飼料混合。於—些事例中，感興趣的 組成物可以加入食物，諸如植物、酵母菌或動物食料中， 動物食料諸如廚餘、殘骸、無法銷售的食物部分、食物製 備工業中通常棄置的部分料。因為感興趣的組成物相當 的鈍性’所以感興趣的喊物可以與任何適於豬隻食用的 各式各樣食物來源混合。 猪隻的另外食物或飼料係製備好的食物，諸如製備好 的乾燥粒狀產品。此種產品為習於此藝者熟知有時稱作 曰常食物或動物飼料，而且每個產品的植成係經過設計選 201008501 擇的。感興_組成物於製造及加工過財可被加入飼料 中。或者，感興趣的組成物可被加入動物飼料中。例如， 此可藉由將乾蝦紅素粉與飼料製備品相混合而完成。或 者，蝦紅素可以懸浮於液體(諸如含有維他命、礦物質或兩 者的補充品）中，並且給予食用豬，或是與食物或飼料相混 合。 於本發明-較佳實施例中’瑕紅素被用作飼料添加 • 物。然而’可以使用其他的給予方式。瑕紅素可被添加成 為兩活性_(料-者係培林、成物的—部分，或是該 ㈣性成可以分職加人，料是同時或㈣地加入。 本發明包括-種含有蝦紅素及培林⑧的組成物。於另一 中’本發明包含製造物件，諸如含有分料元的套 - 組，第一單元含蝦紅素且第二單元含培林⑯。藉由各個單 7C ’本發明包括任何含有活性劑的方式，諸如小瓶、瓶子、 ▲ k子等等’或者任何含有—定量之活性劑的其他包 • I或封袋方式。套組也可包括使用說明。 現在本發明將於下述非限制性實例中例示。 實例1 餵食增加數量之瑕紅素與培林®之猪的生長性狀及屠體特 性 實驗中使用之步驟係經由堪薩斯州立大學(KSU)動物 及利用委員會核准。本計畫執行於KSU豬隻教育及研 九農麥冑隻谷置於環境經規劃的肥育大樓其中於全板 條式地板上方具有關以提供每隻豬大約 8 ft2的空間。每 9 201008501 :设有乾式自我供料器及吸吹式供水 糞 總共有來自單—群聚的144肥育豬⑺小公豬 母豬）被用於實驗。豬隻依重量與性別分批，並且 被分配於9種餵食處理中之—者達平均27天^ 母固圍攔作為_個實驗單元，其中每圍攔2隻豬且 複組以提供每種處理具有16隻豬。
實驗飲食以每餐的型式提供 ，蝦紅素（0、5、7.5及1〇 :)被加人控制飲食中以取代玉㈣粉來達成银食處理 1表）。被加入飲食中的培林®顯示為10ppm。 豬又於第0、7、14、21及〜27天秤重以計算平均每 曰獲重、平均每日飼料獲取及飼料效能。-當完成生長性 狀數據的㈣，則所有的緒隻被安樂死並加工以收集標準 暑體測量數據(屠宰率、1〇th肋骨背脂肪深度、腰肉面積等）。
於農業技術領域中，為了經濟上的利益而監控某些屠 體及畜肉參數或特性，不僅從飼料轉換效率的觀點而且為 了消費者的喜好及吸彳丨消費者。對於食用豬生產者而言感 興趣的-些特性包括平均每日重量獲取（ADG)、平均每曰 飼料攝取（ADFI)、脂肪含量、肉色等等。此等屠體及畜肉 特性可造成淨利/豬的改善結果。美國農業部提供豬肉屠體 分級標準。而且，也可參見Buhr & Dipietre 〇97乃「加值 網路的最新終極指引」，國家豬肉生產者協會，Des M〇lnes’ ΙΑ;以及國家豬肉委員會(2〇〇〇)「豬肉組成及品質 10 201008501 評估步驟」，Berg編輯，Des Moines，ΙΑ。 以圍欄作為實驗單元使用SAS的PROCMIXED步驟 進行數據的隨機完全區集設計分析。使用線性及二次多項 式對比來決定，於添加及未添加培林@下，增加蝦紅素的效 果。 此實例使用之天然蝦紅素來源係紅色發夫酵母菌，其 可購自商品名為Aquasta®的產品，且内含10000 ppm重 量的蝦紅素。 • ......... 第1表實驗飲食的組成 添加的飲食蝦紅素，ppm 成分，〇/〇 0 5 7.5 10 玉米 85.40 85.40 85.40 85.40 大豆餐，46.5% CP 12.44 12.44 12.44 12.44 單鈣P，21% P 0.45 0.45 0.45 0.45 石灰 0.85 0.85 0.85 0.85 鹽類 0.35 0.35 0.35 0.35 L-離胺酸HC1 0.15 0.15 0.15 0.15 維他命預混合物 0.08 0.08 0.08 0.08 微量礦物質預混合物 0.08 0.08 0.08 0.08 玉米澱粉 0.20 0.15 0.125 • 10 蝦紅素（10,000 ppm) - 0.05 0.075 0.10 總計 100.00 100.00 100.00 100.00 飲食價格，$/100磅b 7.25 7.70 7.93 8.15 計算分析 總離胺酸，％ 0.72 0.72 0.72 0.72 真正可消化胺基酸 離胺酸，％ 0.63 0.63 0.63 0.63 異白胺酸：離胺酸比 例，％ 71 71 71 71 白胺酸：離胺酸比 例，％ 188 188 188 188 曱硫胺酸：離胺酸比 33 33 33 33 11 201008501 例，％ Met & Cys :離胺酸比 例，％ 68 68 68 68 蘇胺酸：離胺酸比 例，％ 64 64 64 64 色胺酸：離胺酸比 例，％ 18 18 18 18 纈胺酸：離胺酸比 例，％ 85 85 85 85 蛋白質，％ 13.2 13.2 13.2 13.2 ME，kcal/lb 1,522 1,522 1,522 1,522 TID離胺酸：ME比例， g/Mcal 1.88 1.88 1.88 1.88 Ca，％ 0.47 0.47 0.47 0.47 P，％ 0.42 0.42 0.42 0.42 可取得P，％ 0.15 0.15 0.15 0.15
第2表數據摘要 添加蝦紅素且無培林® 添加Aquasta®瑕紅 素及10 ppm培林® SE M p < Aquasta® 0 ppm 5 ppm 7.5 ppm 10 ppm 0 ppm 2.5 ppm 5 ppm 7.5 ppm 培 林® Aquasta® 蝦紅 素 4 -培 林® 1ι +培林® 線 性 次 線 性 次 生長性 狀，26 天 ADG，lb 2.49 2.34 2.45 2.41 2.83 2.88 2.88 2.83 0.08 0.01 ADFI’lb 8.06 8.06 8.03 8.01 8.05 8.19 8.27 7.79 0.23 — ' ' ' F/G 3.24 3.44 3.28 3.35 2.86 2.85 2.88 2.76 0.08 0.01 - - - - G/F 0.31 0.29 0.31 0.30 0.35 0.35 0.35 0.36 0.01 0.01 - - - - 身體重 量，lb 開始 225.6 225.7 225.3 225.7 225.6 225.4 225.5 225.3 4.90 - - - - - 12 201008501 最後 288.9 287.6 287.4 286.2 297.1 298.6 298.8 299.1 ^4.55 0.01 - - - 屠體特 性 HCW，lb 204.4 202.6 203.4 202.5 213.9 216.1 215.3 218.0 3.53 0.01 - _ 產率，％ 70.7 70.4 71.5 70.8 72.0 72.4 72.1 72.9 0.36 0.01 - - - BF- avg.，in. 1.02 1.12 1.02 1.04 1.06 1.06 1.05 1.03 彳 0.03 - - - 論 BF- 10tn rib > in. 0.78 0.84 0.81 0.77 0.81 0.78 0.82 0.70 0.05 - - - LEA- 10th rib > in.2 7.26 7.55 7.36 7.53 8.29 8.25 8.19 8.92 0.25 0.01 H 0.10 0.12 SFFL，lb 108.4 107.1 107.6 108.6 115.2 116.8 115.4 121.5— 2.43 0.01 - - 0.05 - PFFL，％ 53.0 52.8 52.9 53.7 53.8 54.1 53.6 55.7 0.75 - - - _ - ADG =平均每日重量獲取 ADFI ==平均每日飼料攝取 F/G =飼料獲重(獲取一磅重量所需的飼料磅數） G/F =獲取飼料(上述的倒數） HCW=熱屠體重量（去除腸子、内臟、頭部及除毛之後的豬 屠體重量） BF =背脂肪(脂肪厚度（吋）的測定） LEA =腰眼面積(去骨豬排的平方吋測定） SFFL =標準無脂肪瘦肉（全部可食用肉的磅重） PFFL =無脂肪瘦肉百分比(SFFL/ HCW) 如第2表中數據所示，相較於餵以不含蝦紅素飲食之 控制組的豬隻的LEA (腰眼面積）（7.26平方吋），單獨餵以 7.5 ppm瑕紅素的豬隻具有平均7.36平方对的LEA (腰眼 面積）’增加了 0.10平方吋。豬飼料中僅含有PPm培林 13 201008501 的豬隻具有平均8.29平方吋的LEA值，比起餵以不含蝦 紅素或培林®之控制飲食的豬隻增加了 1.03平方吋。 令人驚訝地’當豬隻餵以7.5 ppm蝦紅素並餵以10 ppm 培林時’ LEA值平均為8.92平方吋，比餵以控制飲食的 豬隻增加了 1.66平方吋，而且比僅有餵以10 ppm培林® 的豬隻增加了 0.63平方吋。由此顯示，相較於單獨使用 各活性成分，結合使用活性成分獲得原未預期的改善效果。 就SFFL (標準無脂肪瘦肉）而言，餵以蝦紅素之豬隻的 SFFL與餵以無蝦紅素飲食之豬隻的SFFL相較並無統計上 ® 的差異。但是，餵以10 ppm培林®的豬隻顯示SFFL具有 統計上的顯著增加（從108.4磅增加至115 2磅）。 然而，當豬隻被餵以結合有10 ppm培林®以及7 5 ppm來自Aquasta®之蝦紅素（當其單獨使用時未有任何影響） . 的飲食時，平均SFFL增加至121.5磅，比起單獨以1〇卯爪 培林®處理增加了 6.3磅。再度證明比起各活性成分單獨使 用，結合使用活性成分顯示對於肉品的有用品質具有統呀 參 上的顯著增加。 所有此處所引用的文獻，其全部内容併入本文作為參 考。 【圖式簡單說明】 (無） 【主要元件符號說明】 (無） 14