TW200848090A - Use of an aqueous micro-emulsion for the preparation of a formulation for the treatment of adipose diseases - Google Patents

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200848090 九、發明說明 【發明所屬之技術領域】 本發明係關於一種包含至少一種具有介於5與1 5之 間的HLB値之界面活性劑，至少一種親脂性物質，和水 的微乳液之用途，其用於供製備治療脂肪性疾病及/或狀 況用之藥物。 【先前技術】 一般而言，包括界面活性劑，親脂性物質和水的微乳 液係於藥學調配領域中熟知用於顯示不良水溶性的藥物之 安定載劑。在此等熟知的微乳液中，總是有特別的活性成 分支配其他組份的選擇。彼等應針對活性成分係最有效的 身體部位之合宜途徑而定製且彼等不應與藥物交互作用。 因此，微乳液調合物的組份所具除了載劑功能以外的 任何作用都是不宜者。 另一方面，磷脂和膽酸或其衍生物的水性系統係熟知 用於化妝品和藥學調合物的製備者。EP 0 6 1 5 746 A1和 WO 2005/1 1 2942 A1述及此等調合物，其可載運藥學活性 物質或可不含此等活性成分之下使用。在後述情況中，其 述及此等脂質體可用於治療動脈粥樣硬化，升高的血脂質 ，和任何類型的肝病。所述系統顯示清楚的脂質體結構， 亦即一封裝水相的雙層脂質膜。在近來的文獻中進一步述 及此等脂質體系統在局部皮下注射時可減少脂肪組織 (Patricia Guedes Rittes，The use of phosphatidylcholine 200848090 for correction of lower lid bulging due to prominent pads，Dermatol Surg 2001, 27，391-392)。另外，也已知 一用於脂肪栓塞的預防和治療之特別脂質體系統，其包 磷脂，膽酸，DL-α-生育酚，乙醇和水（Lipostabil® i.V.)。 不過，該用於減少脂肪組織的治療之已知的磷脂和 酸或其衍生物之水性脂質體系統具有明顯的缺點：彼等 組織內部的分布不良且因此其作用係相當局部地被約束 直接注射點。因此，至今對於較廣面積的組織之治療仍 要施用許多彼此靠近的注射。 【發明內容】 因此，本發明一項目的爲提供一種供治療脂肪疾病 /或狀況用的調合物，其顯示良好的生物相容性和提高 生物利用率使得可影響到較廣面積的脂肪組織。 出人意外地，頃發現一種包含至少一種具有5與 之間的HLB値之界面活性劑，至少一種親脂性物質和 的微乳液於供治療脂肪疾病及/或狀況用的調合物之製 上的用途可滿足本發明目的。 本發明進一步關於包含至少一種具有5與15之間 HLB値之界面活性劑，至少一種親脂性物質和水的微乳 於治療脂肪疾病及/或狀況之用途。 本發明進一步關於一種方法包括：對人投予一有效 療脂肪疾病及/或狀況的量之包含至少一種具有5與1 5 fat 有 含 N 膽 於 在 需 及 的 15 水 備 的 液 治 之 -6- 200848090 間的HLB値之界面活性劑，至少一種親脂性物質和水的 微乳液。 本發明微乳液之新用途顯示在脂肪組織中的較佳生物 利用率和較佳分布。因此，當欲治療較廣面積的組織時， 其容許較少的注射且一般而言，較佳的脂肪分解作用 (lipolysis)。咸信該有利的效用係因爲相較於現有技藝脂 質體系統而言，該三元微乳液系統結構中的差異，伴隨著 其顯著的性質如熱力學穩定性和分布以及不同相液滴的尺 寸所導出。此外，可以看到該三元微乳液系統的特殊依數 性 （colligative property)對於改良係有關者。不過，牽涉 到的運輸機制並未被充分了解使得對於該機制的科學合理 證據尙未被發現。 微乳液爲水，油和界面活性劑的透明，各向同性液態 混合物。水相可包含鹽及/或其他成分。微乳液可從大量 組份製備。與普通乳液相比，微乳液係由各組分的簡單混 合所形成且不需要高剪切條件。在三元系統例如微乳液中 ，有兩個不混溶的相（水和“油”）係接著界面活性劑相而存 在，界面活性劑分子於油與水之間的介面形成單層。界面 活性劑分子的疏水性部分係溶解於油相中而界面活性劑分 子的親水性部分係於水相中。微乳液係由界面活性劑以一 特殊的方式所熱動力學地穩定化，因爲彼等不是單純地油 液滴在水中的分散液，或反之亦然，而是溶質、溶液、反 和正微胞（micelles)、和微乳液液滴的更複雜混合物。 本發明微乳液的液滴尺寸較佳地爲介於1 0奈米與2 0 0 -7- 200848090 奈米之間，更佳地介於3 0奈米與1 0 0奈米之間。 本發明微乳液系統的親脂性物質可選自天然油類（例 如大豆油）、中鏈烷基酸與二醇的酯類、辛基-十二烷醇 (octyl-dodecanol)、矽油、鏈烷烴（paraffins)、脂肪酸及 / 或彼等的酯類、及維生素如核黃素、菸鹼醯胺、及/或L-肉鹼所組成的群組。 根據本發明的微乳液較佳地爲透明或不透光者。微乳 液在一給定的壓力，溫度，和組成範圍內爲單一相。相異 於乳液者，由於彼等的小粒子尺寸使得彼等係熱力學穩定 系統且彼等具有下述優點：彼等可自然地建立且即使貯存 一段長時間也仍然安定。 由所用界面活性劑的類型而定，微乳液可區分爲離子 性和非離子性微乳液。 在術語“HLB値”中，HLB代表親水-親油平衡。具有 低HLB値的界面活性劑係較親脂性者且因而傾向於使水 進入油乳液中，而具有高HLB値者係更親水性者且傾向 於使油進入水乳液中。每一種界面活性劑的HLB値係由 對界面活性劑的特性之分析所決定。各種界面活性劑的 HLB 値表單可方令例如 The Handbook of Pharmaceutical Excipients, 3fd Edition等許多參考資料中取得。HLB値可 用來預測一分子的界面活性性質，典型地從3至6的値代 表W/0乳化劑，從7至9的値代表濕潤劑，8至12的値 代表 0/W乳化劑，從1 2至15的値典型地爲清潔劑 (detergent)，且 15 至 20 的値代表一種溶解化劑 -8- 200848090 (solubiliser)或水增溶劑（hydrotrope)。 較佳地’本發明界面活性劑可選自3-Sn-磷脂醯膽鹼 ’ soy(phospholipone 90)，還原 soy(phospholipon 90H)， 3-(3 311)-磷脂醯甘油、5〇7(1)11031311〇1丨1)〇11〇)，二肉豆蔻醯基 磷脂醯甘油，溶血-磷脂醯膽鹼，二棕櫚醯基磷脂醯甘油 ’及/或彼等的生理可接受之鹽類，脫氧膽酸，膽酸，石 膽酸’鵝脫氧膽酸，豬脫氧膽酸，三羥基糞酸，熊脫氧膽 酸’牛膽酸，或甘胺膽酸及/或彼等的生理可接受之鹽類 ’及乙氧基化醇與烷基-醇（C6-C16)的醚類，具有乙氧基化 醇的C8-C20烷基一酯，C8-C20飽和與不飽和酸與糖類的 酯，烷基醚硫酸酯類如蓖麻油和環氧乙烷的聚醚 (cremephor EL)，聚氧乙烯脂肪醇醚，聚山梨酸單酯，普 羅沙姆（ρ 〇 1 ο X a m e r )，泊洛沙胺（ρ ο 1 ο X a m i n e )所組成的 群組。 較佳地，本發明微乳液可由至少一種界面活性劑，其 係選自乙氧化醇與烷基醇（C6-C16)的醚類、具有C8-C20 與乙氧化醇類的烷基一酯、C8-C20飽和與不飽和酸與糖 類的酯、烷基醚硫酸酯類如蓖麻油和環氧乙烷的聚醚 (cremephor EL)、聚氧乙烯脂肪醇醚、聚山梨酸單酯、普 羅沙姆、和泊洛沙胺所組成的群組；至少一種親脂性物質 ，其係選自天然油類（例如大豆油）、中鏈烷基酸與二醇的 酯、辛基-十二烷醇、矽油類、鏈烷烴類、脂肪酸及/或彼 等的酯類、核黃素、菸鹼醯胺、和L -肉鹼、生理可接受鹽 類所組成的群組；和水所構成。 -9- 200848090 甚至更佳地，本發明微乳液系統可由至少一種界面活 性劑，其係選擇自聚山梨酸酯、聚乙氧基化蓖麻油、和山 梨糖醇酐一油酸酯；至少一種親脂性物質，其係選自天然 油類（例如大豆油）、中鏈烷基酸與二醇的酯、辛基-十二烷 醇、矽油類、鏈烷烴類、脂肪酸及/或彼等的酯類、核黃 素、菸鹼醯胺、和L -肉鹼、生理可接受鹽類；和水所構成 〇 令人訝異地發現界面活性劑的選擇在微乳液系統的效 用性上扮演最重要的角色。因此，乃進行硏究而顯示出高 度有效的系統係建基於上述聚合物界面活性劑。 更佳地，該界面活性劑具有7與1 3之間，更佳者9 與1 1之間的HLB値。 由於在微乳液中加上親脂性物質，可達到活性物質的 甚至更佳分布。因此，單次注射即可影響到較廣面積的組 織。 於本發明一較佳具體實例中，該系統進一步包含共-界面活性劑（co-surfactant)。 一般而言，共界面活性劑比具有9至1 7的HLB値之 界面活性劑爲較低親脂性。 如此，本發明微乳液系統可達到進一步的安定化而導 致較長的擱置壽命。 共-界面活性劑可特別地選自3 _ s η -磷脂醯膽鹼， soy (phospholipone 90)，還原 s o y (p h o s p h ο 1 i ρ ο η 90H)，3 -(3sn)-碟脂醯甘油、soy(phospholip〇n G)，二肉豆蔻醯基 -10- 200848090 磷脂醯甘油，溶血-磷脂醯膽鹼，二棕櫚醯基磷脂醯甘油 ，及/或彼等的生理可接受之鹽類’脫氧膽酸，膽酸，石 膽酸，鵝脫氧膽酸，豬脫氧膽酸，三羥基糞酸，熊脫氧膽 酸，牛膽酸，或甘胺膽酸及/或彼等的生理可接受之鹽類 ，及乙氧基化醇與烷基-醇（C6-C 16)的醚類，具有乙氧基化 醇的C8-C20烷基酯，C8-C20飽和與不飽和酸與糖類的酯 ，烷基醚硫酸酯類如蓖麻油和環氧乙烷的聚醚（cremephor EL)，聚氧乙烯脂肪醇醚，聚山梨酸單酯，普羅沙姆，泊 洛沙胺所組成的群組。 根據本發明另一較佳具體實例，該系統額外地包含一 醇。特別較佳的醇爲C2-C8醇類，且特別是乙醇，丙二醇 ，和甘油。 於本發明一較佳具體實例中，親脂性物質對界面活性 劑的質量比較佳地爲介於1 〇 : 1與1 : 1 〇重量％之間，更 佳地介於1 : 0 · 2與1 : 1 · 5重量％之間。 微乳液系統中的界面活性劑濃度較佳地係介於〇 . 5與 50重量％之間，特別者介於5與25重量％之間。 本發明系統的pH値爲中性且範圍較佳地係介於5 .〇 與9.0之間，更佳地介於6.0與8.0之間。 在術語“脂肪組織疾病及/或狀況”下係理解爲特別是 任何不要的局部脂肪沉積及/或下列疾病例子：包括單純 的無美感外觀如橘皮組織（c e 11 u 1 i t e): 脂肪瘤（lipomae)爲良性緩慢生長的脂肪細胞腫瘤，較 佳地位於皮下脂肪組織而可以各種形式和特性發生。彼等 -11 - 200848090 可發展黏液，白堊及/或變得鈣化。此外，可能發生增加 結締組織和被膜的建立加上新建的血管，此等皆分類爲不 正常者，因爲對血管以及神經細胞上的壓縮都是會痛者。 脂肪瘤以各種徵候群發生例如G a r d n e r徵候群，1^11〇丨5_ B e n s a u d e徵候群，和P r o t e u s徵候群。 痛性脂肪過多症 （lipomatosis dolorosa)和橘皮組織 爲脂肪組織過度增生的特別形式，其位於真皮脂肪帶和真 皮下側之間。由於激素的影響，觀察到於此等脂肪細胞中 提高的結合水之能力，其本身會引發壓力並隨後造成在淋 巴管中的充血。此外，也會對周圍敏感性神經施加壓迫和 刺激使得病人對於接觸具有極度的敏感性。逐年後，會在 薄真皮下構建出不規則散發性局部化的脂肪結（fatty node) ，其會引發疼痛並顯示不美感的特質。 在本文中也要提及如脂肪水腫（lipoedema)或脂肪失養 徵候群等狀況。 前面提及的脂肪組織疾病展現出相異於消化相關的脂 肪疾病病理生理組織狀況之處在於可由組織學的傷疤和發 炎參數以及組織學的脂肪組織形態學之修改而鑑定。 在術語“退化（regression)”下特別的要理解者爲其中係 發生脂肪組織的脂肪分解或多生性脂肪組織的變性。 用本發明調合物治療較佳地係針對橘皮組織及/或不 美感的脂肪組織之局部沉積。相異於已知的治療者，特別 是主要不美感特質的部位爲非常易於接受來自良好生物相 容性和提高的生物利用率的有利效用使得較廣的面積可用 -12- 200848090 單次施加即達到。 一般而言，所有不要的及/或不美感的脂肪組織都可 用本發明調合物治療。此包括眼睛周圍，臉頰，頸部和下 顎區，背，手臂下部和周圍，大腿，胃上方和下方區內， 膝部，及/或所謂的男性腰間贅肉（1 〇 v e h a n d 1 e s b y)，女性的 gluteal bananas，和鞍背（saddleback)等的脂肪組織。 特別者，使用本發明微乳液時，可較佳地治療於眼睛 周圍，手臂下部，頸和下巴區內及/或於大腿之不美感脂 肪組織的局部沉積。彼等身體區域常會顯示出高敏感性使 得注射點和注射頻率的可能減少係最有益者，特別是對於 所提區域內的組織。 本發明微乳液系統的製備可爲例如使得至少一種界面 活性劑和至少一種親脂性物質以上面所揭露的比率混合於 水中。該製備可由任何已知微乳液製備的形式進行。 本發明微乳液系統的應用可由任何形式的注射或局部 應用，特別者由皮下注射，動脈內注射，肌肉內注射或靜 脈內注射而進行。 經皮應用也可於各種載劑介質內進行。於此，可應用 各種輔助技術例如離子電滲療法。該應用可例如經由靜液 壓力來進行。如此，可達成均勻的分布。 較佳地，每一調合物單位具有一獨特劑量的微乳液系 統作爲活性成分。此劑量可達到從約1 〇毫克至約3 000毫 克，較佳者從約1 0 0毫克至約1⑽〇毫克每界面活性劑總 重量。 -13 - 200848090 對於經由施加注射溶液的成人病患治療而言’取決於 要治療的脂肪組織之尺寸，係投予每次注射5毫克至5 0 0 0 毫克，較佳者2 5 0毫克至2 5 0 0毫克每界面活性劑總重量 之每日劑量。 該劑量也取決於脂肪積存的尺寸及/或脂肪細胞的失 序分布及/或脂肪疾病的類型。其應針對單一病患的需要 來製定。在小脂肪瘤的情況中，可使用甚至是1 〇毫克至 5 0毫克的量。 【實施方式】 實施例： 使用4種液體化合物的LDH釋放和Calcein-AM釋放 檢定試驗對脂肪細胞中的細胞毒性之效應，彼等的參考編 號如下： 1 TWEEN 80 (爲一種聚山梨酸酯80); 2 CREMOPHOR EL (爲一聚乙氧基化蓖麻油）； 3 SPAN 80V (爲山梨糖醇酐單油酸酯），及 作爲先前技藝系統的參考例的4 LIPOSTABIL TM (爲一種 含磷脂醯膽鹼和膽酸的脂肪分解注射溶液）。 實驗係於9 6洞/板中實施且1 : 5 1 2的稀釋率建議將 〇 . 3 7微升的液體化合物物介質直接地添加到2 〇 〇微升 D Μ E Μ -培養基中的細胞。 稀釋係於室溫進行且在4小時後觀察到完全的無色或 黃色微乳液。 -14- 200848090 實驗程序 細胞培養： 初代人類前脂肪細胞（p r e a d i ρ 〇 c y t e s )係得自P r 〇 m 〇 c e 11 (Heidelberg，Germany)。Order No 爲 C- 1 273 1 且 Lot-NO 5 1 1 220 1 (腹部，44歲的白人女性）。 培養記錄： 將人類前脂肪細胞維持於前脂肪細胞生長培養基 (Preadipocyte Growth Medium)中（DMEM; Biowhitaker Cat : BE 1 2-604F/U1; Lot N° 6MB0130 包含 10% 熱鈍化的 FCS和1%青黴素-鏈黴素）置於37 °C 5% C02的增濕氣體 環境中。細胞係於數個T75燒瓶中擴增達60-80%匯合率 。爲了分化，將脂肪細胞（1〇4細胞/洞）生長於96-洞板中 來達到匯合率。於此點（第〇天），將細胞轉換到分化培養 基（DMEM，1 0 % F B S，0.25 μΜ 地塞米松（dexamethasone) ，0.2 5 mM IBMX，和1微克/毫升胰島素）3天，其間有一 次培養基變換。於第3天，移除地塞米松和IB MX，將胰 島素繼續留在細胞上4天，每2天換一次培養基。之後， 將細胞保持於原來的增殖DMEM中，每2-3天換一次培養 基直到使用爲止。在使用細胞經>75%分化的板於實驗（後 誘導第1 〇天）。在7天的培養之後’脂肪細胞爲圓形且充 滿可輕易辨識的脂肪球體。

胞毒性分析： 使用得自 Promega的 CytoTox-ONETM -15- 200848090

Homogeneous Membrane Integrity Assay 來硏究 LDH 釋放 (Order No G7892 和 Lot-No 234242/27/09/08)。將經分化 的脂肪細胞以試驗化合物處理24或4 8小時並根據製造者 的指導使用螢光計檢定CytoTox-ONE(參閱上文）偵測LDH 的釋放。最大LDH釋放係由使用0.1% Triton X-100使細 胞完全分解而測定。使用單獨以水處理的對照細胞來決定 LDH釋放的基線水平（〇 %細胞死亡率）。螢光係使用特定的 螢光用 96微洞板於Genius Pro裝置內偵測。吾人使用 530-570奈米範圍內的激發濾光器及於580-620奈米範圍 內的發光濾光器。 結果的計算 由LDH釋放的胞毒性百分比係根據製造商的指導計 算（http : //www.promega.com/tbs/tb3 06/tb306.pdf) 胞毒性百分比= l〇〇x (實驗値-培養基背景値） (最大LD/禪放値-培養基背景値） 根據此計算，於未處理細胞中的自發性釋放可指示出 在未處理細胞中的某種胞毒性。此係可解釋者，因爲在前 脂肪細胞上的匯合下，某些細胞不會分化爲脂肪細胞且應 預期到由細胞過度生長所致某些胞毒性。吾人總是發現到 ，於未處理的匯合前脂肪細胞中，LDH釋放値可達到由 Triton X-100所誘導的總LDH釋放値（100%釋放）之高達 15-20%的値且於分化的脂肪細胞中，自發性LDH釋放可 -16 - 200848090 達到高達3 5 %的値（取決於培養時間）。此類型的計算可能 誘發誤解且因此乃根據下面公式計算比胞毒性（specific cytotoxicity) (S.C·): %比胞毒性= (%自發性仙聯放値(測試化合物)-％自發性W耀放値(未經處理的細胞)) X (%7>— -誘發LD纖嫌- ％自發性LD職嫌) S.C.値低於0%時係視爲0%物質-誘發胞毒性。 使用 Calcein-AM法分析於黏著細胞（3T3-L1)中的胞毒性 將細胞接種於96-洞板中（每洞104活細胞）並讓其貼 附於板2 4小時。2 4小時之後’如指示刺激細胞另外2 4小 時。在此等培養條件之下，3T3-L1細胞並未分化爲脂肪 細胞。接著，清洗該等洞且讓細胞與Calcein_AM (1 μΜ) (Molecular Probes)溫浸30分鐘。然後，在微滴板讀取器 (TEC AN Genius Pro)中偵測活細胞的螢光。使用此方法， 測量出活細胞的Calcein-AM的攝取率。Calcein-AM會被 細胞酯酶水解並隨後於板讀取器中偵測由Calcein所發射 出的螢光（激發：490奈米，發射：515奈米）。 試驗物質的自發螢光分析：製備含培養基與單獨的試驗 物質之無細胞對照組以測定試驗化合物對背景螢光的影響 。吾人使用於5 3 0 - 5 7 0奈米範圍內的激發濾光器和於5 8 0 -62 0奈米範圍內的發射濾光器。吾人發現於此硏究中所包 括的試驗物質沒有顯示自發螢光。 -17- 200848090 試驗物質對前脂肪細胞和分化脂肪細胞兩者的影響（LDH 釋放）： 爲了確認試驗物質於某些濃度下的胞毒活性，乃對未 分化（24小時處理）和分化的人類初代脂肪細胞的培養物以 所示稀釋液處理24小時和48小時期間且測量上澄液中的 LDH釋放。 表1 :試驗物質對前脂肪細胞和經分化脂肪細胞兩者的影響(LDH釋放) 試驗物質 編號 稀釋 前脂肪細胞 (LDH) 分化的脂肪細胞(LDH) 24小時 24小時 48小時 1 1 ： 512 毒(38.1%) 毒(42.8%) 毒（100%) 2 1 ： 512 #(32.6%) 毒(56.1%) 毒（100%) 1 : 10000 並羞 yfrrr 挑母 微毒(20.3%) 3 1 ： 512 A\ I r. ·~4^£. 無母 4τττ. 撒母 雛母 1 ： 10000 4ττγ. 無母 4τγγ 半. 母 ^fnr 無母 4(先前技藝） 1 ： 512 4nr 無母 並羞 >、、、 1 ： 10000 /frrr 母 ^frnr. 撒母 >fnr -=^==1 撒母 試驗物質對脂肪細胞的胞毒性作用：

Calcein-AM攝取：將細胞與不同濃度的試驗物質溫浸 24小時，且以螢光Calcein-AM法分析細胞存活率。於此 類型的檢定中，較高的RFU(相對螢光單位）對應於活細胞 -18- 200848090 表2 :仍存在對脂肪細胞的胞毒性時之稀釋率 試驗物質 編號 稀釋率 脂肪細胞 (Calcein-AM) 脂肪細胞 (LDH) 1 1 : 50 毒 毒 1 ：100 毒 毒 1 ：200 毒 毒 1 ：400 毒 毒 1 ：800 毒 毒 1 ·· 1600 毒（4 9 · 3 %) fiE >tvN 1 ： 3 200 並毒 姐羞 >νν\ ΤζΡ 1 ： 6400 irrr 無母 ^Fff ：m /tvs 1 ： 12800 ^frrr.丰- 無母 雛母 2 1:50 毒 毒 1 ：100 毒 毒 1 ：200 毒 毒 1 ：400 毒 毒（4 3 · 6 % ) 1 ：800 毒（4 8 · 4 % ) 4nt 無母 1 ： 1600 微毒（26.2%) >frrr. 丰- 無母 1 ： 3 200 微毒（22.2%) -fnr- 媒母 1 ： 6400 4nr. 無母 4m. -zfe. 撒母 1 ： 12800 4τττ. 媒母 4nr. -·=#?: 撒母 3 1 ： 12,5 毒 毒 1 ： 25 毒 毒 1 ： 50 毒 毒 1 100 毒 毒 1 200 毒 毒（34.9%) 1 400 毒 -fi-rr. .-=^ 母 1 800 微毒（34.9) 姐羞 1 ： 1600 猴母 4nr 髁母 1 ： 3 200 4πΐ..中· 母 4mi ·=Φλ： 母 4 (先前技藝） 1 ： 12,5 毒 毒 1 ： 25 毒 毒 1 ： 50 毒 毒 1 100 毒 毒 1 200 毒 毒（2 5 · 9 % ) 1 400 毒（50%) 4]ΤΓ. 黑母 1 800 4γτΤ- 母 4τττ. -=^ 無母 1 ： 1600 A\ ip 貢母 4nr. JEfec 無母 1 ·· 3 200 A\ I r >frrr 半· 通母 -19- 200848090 $口從表2可看出者’可以推導出使用本發明微乳液於 脂肪細胞的脂肪分解中之效用’即使在比磷脂醯膽驗和膽 酸系統（L i p o s t a b i 1 Τ Μ)的參考實施例遠較爲局的稀釋率下 亦然。 基於上面諸實施例，計算於Calcein檢定情況中有 5〇%仍存活時或於LDH檢定的情況中產生50%細胞死亡率 時的稀釋度。 結果顯示於下面表3中： C a 1 c e i η 檢定 LDH檢定 試驗物質 編號 於50%細胞存活 時的稀釋率 產生50%細胞死 亡率時的稀釋率 1 1 ： 1631 1 ： 328 2 1 : 793 1 ： 184 3 1 ： 724 ND1 4 (先前技藝） 1 ： 438 1 : 3 2 -20- 1 ND :對LDH檢定不能建立曲線。在濃度範圍從1 : 12.5 至1 : 2 0 0時約3 0 %的細胞死亡。

Claims (1)

1. 200848090 十、申請專利範圍 1 · 一種包含至少一種具有介於5與1 5之間的H L B値 之界面活性劑，至少一種親脂性物質和水的微乳液之用途 ，係用於製備供治療脂肪性組織疾病及/或狀況用之調合物 〇 2 ·根據申請專利範圍第1項之用途，其中該微乳液具 有介於5奈米與200奈米之間，較佳地介於30奈米和100 奈米之間的粒子尺寸。 3 .根據申請專利範圍第1或2項之用途，其中該微乳 液額外地包含醇。 4.根據申請專利範圍第1或2項之用途，其中該至少 一種界面活性劑具有介於6與1 2之間的HLB値。 5 .根據申請專利範圍第1或2項之用途，其中該至少 一種界面活性劑係選自 3 - s η _磷脂醯膽驗、 soy(phospholipone 90)、還原 soy (phospholipon 90H)、3 -(3sn) -憐脂醯甘油、soy(phospholipon G)、二肉豆蔻醯基 磷脂醯甘油、溶血-磷脂醯膽鹼、二棕櫚醯基磷脂醯甘油 、及/或彼等的生理可接受之鹽類、脫氧膽酸、膽酸、石 膽酸、鵝脫氧膽酸、豬脫氧膽酸、三羥基糞酸、熊脫氧膽 酸、牛膽酸、或甘胺膽酸及/或彼等的生理可接受之鹽類 、及乙氧基化醇與烷基·醇（C 6-C 16)的醚類、具有乙氧基化 醇的C8-C20烷基一酯、C8-C20飽和與不飽和酸與糖類的 酯、烷基醚硫酸酯類如蓖麻油和環氧乙烷的聚醚 (cremephor EL)、聚氧乙烯脂肪醇醚、聚山梨酸單酯、普 -21 - 200848090 羅沙姆（poloxamer)、泊洛沙胺（P〇l〇xamine)所組成的 群組。 6 ·根據申請專利範圍第1或2項之用途’其中該微乳 液係由至少一種界面活性劑，其係選自乙氧化醇與院基醇 (C6-C16)的醚類、具有乙氧化醇類的C8-C20烷基一酯、 C 8 - C 2 0飽和與不飽和酸與糖類的酯、烷基醚硫酸酯類如 蓖麻油和環氧乙烷的聚醚（cremephor EL)、聚氧乙烯脂肪 醇醚、聚山梨酸單酯、普羅沙姆、和泊洛沙胺所組成的群 組；至少一種親脂性物質，其係選自天然油類（例如大豆 油）、中鏈烷基酸與二醇的酯、辛基-十二烷醇、矽油類、 鏈烷烴類、脂肪酸及/或彼等的酯類、核黃素、菸鹼醯胺 、和L -肉鹼、生理可接受鹽類所組成的群組；和水所組成 〇 7 ·根據申請專利範圍第1或2項之用途，其中該微乳 液係由選自聚山梨酸酯、聚乙氧基化蓖麻油、和山梨糖醇 酐一油酸酯所組成的群組中之一種界面活性劑；至少一種 選自天然油類（例如大豆油）、中鏈烷基酸與二醇的酯、辛 基-十二烷醇、矽油類、鏈烷烴類、脂肪酸及/或彼等的酯 類、核黃素、菸鹼醯胺、和L-肉鹼、生理可接受鹽類所組 成的群組中之親脂性物質；和水所組成。 8 .根據申請專利範圍第1或2項之用途，其中該至少 一種親脂性物質係選自天然油類（例如大豆油）、中鏈烷基 酸與二醇的酯、辛基-十二烷醇、矽油類、鏈烷烴類、和 維生素所組成的群組。 -22- 200848090 9 ·根據申請專利範圍第1或2項之用途，其中該微乳 液額外地包含至少一種共-界面活性劑。 1〇·根據申請專利範圍第1或2項之用途，其中該治 療係針對橘皮組織及/或不美感的脂肪組織之局部沉積。 1 1 ·根據申請專利範圍第1 0項之用途，其中所治療者 爲於眼睛周圍、手臂下、頸部和下巴區中及/或於大腿的 不美感的脂肪組織之局部沉積。 12.根據申請專利範圍第1項之用途，其係用於脂肪 組織疾病及/或狀況之治療。 -23- 200848090 七、指定代表圖 (一） 、本案指定代表圖為··無 (二） 、本代表圖之元件代表符號簡單說明：無 八、本案若有化學式時，請揭示最能顯示發明特徵的化學 式：無