TW200529863A - Powders comprising low molecular dextran and methods of producing those powders - Google Patents

Description

200529863 九、發明說明： 【發明所屬之技術領域】 本發明係關於使用低分子葡萄聚糖（Mw:m〇〇〇道爾 於製備及安定含醫藥活性物質之粉末之用途。此粉末較佳 地以喷霧乾燥製備。本發明亦關於含有低分子葡萄聚糖及 醫藥活性物質之粉末’較佳地為喷霧乾燥粉末。本 別關於含有蛋白質或肽之粉末及其製造方法。 【先前技術】 在某些例子活性物質/調配於水溶液中之活性物質製劑 容易不安i其可能致使降低生物性活性及增加不相容 性。提供安定的一個可能方法例如為噴霧乾燥，其以喷麓 於一股熱氣中以乾燥醫藥活性„。醫藥活性物質通常在 有賦形劑存在下噴m，其—方面保持活性物質安^，另一 方面改善喷霧乾燥粉末之性質。 曰以喷霧乾燥安定的-個重要因素是將活性物㈣定於非 晶形的基質上。此非晶形狀態具有低分子移動性及低反應 性的高黏度。噴霧乾燥粉末之玻璃轉換溫度是一個重要參 t因表不攸安定、非晶形狀態轉移至較不安定似橡膠 狀態發生時的溫度範圍。有利的賦形劑必須能夠在包埋活 處之最阿可此之玻璃轉換溫度形成非晶形基質。低玻 :轉換溫度之物質即使在低溫亦可流動致使粉末調配物不 安疋賦㈣丨之選擇因此特別取決於其安定品質。此外， 然而’如賦形劑之醫藥可接受性及其於顆粒形成、可分散 性及流動性質之影f之因子扮演決定性的角色。 97673.doc 200529863 喷霧乾燥是增加肽/蛋白質形式醫藥活性物質化學及物 理安定性的適合方法（參見Maa et al.，1998 ’ Pharmaceutical Research，15(5)，768-775)。特別是在肺部治療領域喷霧乾 燥用於製造含肽/蛋白質粉末藥劑（US 5,626,874 ; US 5,972,388 ； Broadhead et al. 5 1994 ’ J. Pharm Pharmacol. ’ 46(6)，45 8-467)。以吸入方式施用肽/蛋白質式系統疾病傳 統服藥方式的替代選擇，因為以吸入方式施用醫藥品可能 產生不僅是局部而且是系統活性（WO 99/07340)。此前提是 平均顆粒大小在1 -1 0 μηι之範圍，較佳地1 -7·5 μιη，以致顆 粒可以穿透至肺部深處且進入血管。例如，DE-A-179 22 07 描述製備符合之喷霧乾燥顆粒，其足夠分散以作為醫療應 用（吸入）。同時也描述了許多製造可吸入顆粒的方法（WO 95/3 1479 ; WO 96/09814 ； WO 96/32096 ； WO 96/32149 ； WO 97/41833 ； WO 97/44013 ； WO 98/16205 ； WO 98/3 1346 ； WO 99/66903 ; WO 00/10541 ; WO 01/13893 ; Maa et al·， 1998、supra ; Vidgr6n et al.，1987、Int. J. Pharmaceutics， 35，139-144 ; Niven et al·，1994，Pharmaceutical Research， 11(8) ， 1101-1109)。 其糖及醇，例如，海藻糖、乳糖、蔗糖或甘露醇及各種 聚合物已被證實適合作為賦形劑（“^&61&1.，1997，？1^1*111· Development and Technology，2(3)，213-223 ; Maa et al_， 1998，supra; Dissertation Adler 9 1998 5 University of Erlangen ; Costantino，et al·，1998 9 J. of Pharm. Science 5 87(11) ， 1406-1411)。 97673.doc 200529863 然而，主要使料賦形劑有許多缺點。例如，添加海藻 糖及甘露醇減低喷霧齡、原# Λ 4 務^各凋配物之流動性質（C· BoSquill〇n et aL ’ 2〇G1 wnal 〇f Contr()lled ，7〇(3)，329 3叫。 此外’甘露醇具有超過其重量百分之二十之數量重新结 晶之傾向（^^。^，⑽’卿外因此其安定效 果大巾田地降低。礼糖’常用之賦形劑’確實改善噴霧乾 調配物之流動特性（C.Bosquill〇netal，2〇〇i、supra)，^ 是特別是在含肽/蛋白質醫藥活性物質調配物有問題，因乳 糖可以因為其還原之特性與肽/蛋白f進人去安^之梅拉 德反應（Maillard reaction)。 主要使用分子量40至512 kDa的葡萄聚糖於含肤/蛋白質 活性物質之喷霧乾燥。他們同時具有非晶形之高玻璃轉換 溫度的性質。因為堅硬的架構’高分子葡萄聚糖僅能進入 肽/蛋白質足夠之氫連結鍵至—限定量，因此確保噴霧乾燥 時足夠的女疋性。為補償此缺點’有時會與雙畴併用 (Ams^etal.，2000, J Pharm Sci，89⑺、199 2叫。高 分子葡萄聚糖的另一個缺點為其存在高致敏性(葡萄聚Z 過敏性反應）。 本發明之-個目的係提供製備粉末醫藥製劑之新賦形 劑。符合的粉末製劑之特色，在其他項中，需為儲存安^ 性佳以及’可能的話，為吸入性。 本發明之另一個目的係提供製備噴霧乾燥醫藥製劑之新 賦形齊卜符合㈣末醫藥製劑之特色亦需具長時間安定性 以及，可能的話，可以吸入。 97673.doc 200529863 本發明之另一個目的係提供製備含肽/蛋白質醫藥調配 物之新賦形劑’特別是以喷霧乾燥製備者。符合的含肽/蛋 白貝酉某衣劑之特色亦需具長時間安定性以及，可能的 話，可以吸入。 本發明之另一個目的係提供以吸入施用之醫藥製劑，以 乾粉形式或含推進器定量氣霧劑或無推進器之吸入溶液。 本發明所根據的目的以下述具體實例及記載於請求項中 之對象/方法達成。 【發明内容】 發明摘要 本發明係關於粉末，較佳地是喷霧乾燥粉末，其包含醫 藥活性物質及分子量介於500及丨0,000道爾頓（Da)之間之低 分子葡萄聚糖，較佳地介於500及5,〇〇〇 Da之間，特佳地介 於500及1，500 Da之間。令人驚訝地發現符合之粉末在噴霧 乾燥後i)形成非晶形結構，Η)導致相對高產量（基於所使用 固體的至少75%)，出）具有很高的玻璃轉換溫度（高達65^ 以及IV)具有低重新結晶傾向。另一個優於例如 藻糖的優點係為符合之含有低分子葡萄聚糖之噴霧乾= 末具有改進之流動性質。另一個優於先前技藝描述之粉末 西藥製劑之優點，特別是優於已知喷霧乾燥之醫藥製劑， 在於根據本發明中描述之含有葡萄聚糖粉末之特別有利方 法及儲存安定性。 較佳的低分子葡萄聚糖量為相對於粉末乾燥量之5〇及 99.99%重量％比卜~)之間，根據另一較佳具體實施例為“ 97673.doc 200529863 及99.99/〇(w/w)之間，較佳地為6〇及之間。 、 片醫樂活性物質較佳地為生物性巨分子，其可為多肽或蛋 v 白例如生長因子、酵素或抗體。本發明因此特別關於 乾燥粕末其含有（&)5〇至99 99%，較佳為至99%(w/w) 心J之低刀子葡萄聚糖（相對於粉末乾燥量）及（匕）作為醫藥 ^生物貝之生物性巨分子，較佳地濃度在〇〇1及 1又相對於粉末乾燥量，低分子葡萄聚糖及生物性巨 分子重量百分比之總和最大為100%(w/w)。 φ 根據本發明之噴霧乾燥粉末可包含除低分子葡萄聚糖之 其他賦形劑，例如胺基酸、肽、蛋白質或糖。特別有利的 為含有除安定的低分子葡萄聚糖及醫藥活性物質外之少一 種胺基馱、雙肽、二肽及/或鹽之粉末。根據較佳具體實施 例，本發明係關於喷霧乾燥粉末，其含有相對於其乾燥量 之⑷60及98.99%(w/w)之間的低分子葡萄聚糖，⑻丨及 〇(w/w)之間的至少一種胺基酸及/或至少一種肽昨為進 一步之賦形劑及（c)至少〇·〇1%(〜/λν)之醫藥活性物質。較佳 籲 地進步之賦形劑為異白胺酸胺基酸或含有至少一個異白 胺酸群之雙或三肽。根據一個特別之具體實施例本發明係 關於噴霧乾燥粉末，其含有相對於其乾燥量之（a)大約60至 89.99%(w/w)之低分子葡萄聚糖，（b)大約…至⑼％…/〜）之 胺基Ssl較佳地為異白胺酸及（c)大約〇·〇1至3〇%(w/w)之醫 藥活性物質，較佳地為肽/蛋白質，例如抗體。根據另一個 特別之具體實施例本發明係關於喷霧乾燥粉末，其包含相 · 對於其乾燥量之⑷約60至98.99❹/〇(w/w)之低分子葡萄聚 97673.doc -10· 200529863 糖’（b)約1至20%(w/w)之含異白胺酸三肽，較佳地為三異 白胺酸及⑷約0.01至39%(咖)之醫藥活性物質，較佳地為 肽/蛋白質，例如抗體。 根據另d固具體實施例本發明係特別關㈣霧乾燥粉 末，其含有低分子葡萄聚糖及至少一種醫藥活性物質，噴霧 乾燥粉末具有超過4(TC之玻璃轉換溫度，較佳地超過45它’ 更佳地超過5(TC，甚至更佳地超過55t及特佳地超過6〇χ：。 所加的賦形劑量，特別是粉末中低分子葡萄聚糖的量，是 主要符合玻璃轉換溫度的原因。 根據另一個具體實施例本發明係關於以吸入施用之醫 藥組合物，其含有根據本發明所述粉末之一或由這些粉 末組成。為此目的的較佳醫藥組合物為含有根據本發明 粉末之含推進器定量氣霧劑或無推進器吸入溶液。用於 製備醫藥組合物之根據本發明之喷霧乾燥粉末其特徵為 根據另一個具體實施例，具有高比例之吸入顆粒，其平 均氣動粒徑（mean particle diameter，MMAD)小於 1〇 μιη， 較佳地從0.5-7.5 μηι，更佳地從ο.〗。」μιη，最佳地從 0.5-5.0 μηι 〇 本發明亦提供製備根據本發明符合的噴霧乾燥粉末的方 法，其特徵在於製備含有至少一種低分子葡萄聚糖及醫藥 活性物質之溶液或懸浮液及於適合條件下喷霧，噴霧方法 之溫度較佳地在50及200。(：之間（流入溫度）及3〇及15〇c>c之 間（流出溫度）。 發明詳細敛述 97673.doc 200529863 定義 本說明書範圍内使用之術語及命名具有以下定義之立 義。重量與重量百分比之細節為基於噴霧溶液/懸浮液之： 末或固體含量之乾燥量，除非另有陳明。 «萄聚糖1"或"㈣聚糖1〇〇〇”之術語係指平均分子量約 !，_道爾頓之低分子葡萄聚糖。專利說明書中每—個事例 之分子量係關於平均分子量。這係指所使用的葡萄聚糖一 般為多樣態的°平均分子量係指至少鄉、較佳地6〇%、更 佳地鄕、甚至更佳地峨、甚至更佳地峨、甚至更佳地 燃、甚至更佳地94%、甚至更钱贼、甚至更佳地嶋 及甚至更佳地99%之葡萄聚糖具有符合數字值之分子量。 "喷霧乾燥粉末調配物"或"乾燥粉末調配物"之術語係指 粉末調配物，其通常含有少於1〇%(w/w)殘餘水分，較佳地 少於释Αν)殘餘水分，最佳地少於3%(w/w)殘餘水分及甚 更佳也乂於2%(w/w)殘餘水分。殘餘水分實質上取決於粉 末調配物中醫藥活性物質的型態及量。 非s曰形之術叩係指粉末調配物含有少於1 結晶部 分、較佳地少於7%、更佳地少於5%及最佳地少於4、3、2 或1 %。 "可吸入性”之術語係指適合於肺部施用之粉末。可吸入 性粉末可以以吸入器方式使散佈及吸入，致使顆粒進入肺 部並且能夠視情況通過肺泡而發展為全身性活彳卜可吸入 性顆粒可以具有平均粒徑例如0本ίο μπι之間（MMD=質量 中位數直徑）’通常在〇.5·5叫之間，較佳地在1-3 _之間 97673.doc 200529863 及/或平均氣動粒徑（MMAD=質量中位數氣動直徑）在 〇.5-1〇4111之間，較佳地在〇.5-7.5 0111之間，更佳地在〇.5-5.5 μηι之間，甚至更佳地在1-5 μιη之間及特別佳地在1-4.5 μιη 之間。 質量中位數直徑”或"MMD"之術語係為平均顆粒大小分 布之測量，因根據本發明之粉末一般為聚分散性的

(polydispersed)。結果以50%總通過流量之總量直徑分布表 示。MMD值可以以例如雷射繞射測量術⑽打diffract〇metry， 參見實施方式章節，方法）測定，雖然當然地任可以使用何 其他習知方法（如電子顯微鏡、離心沉降法）。 平均氣動粒徑之術語（=質量中位數氣動粒徑（MMAD))係 指氣動粒徑，其粉末中50%之顆粒通常具有較小之氣動粒 徑。為避免懷疑參考資料’ MMDA之測定方法係詳細列入 本專利說明書之方法（參見實施方式章節，方法）。

”微細顆粒級分"（FPF)之術語描述由顆粒大小u MMAD之顆粒組成粉末之吸人性部分。分散佳的粉末其卿 超過2〇% ’較佳地超過· ’更佳地超過40%，及更佳地超 過50% ’甚至更佳地超過55%。本文中所使用之"區分直徑 (Cut Off Diameter)’’之術語表示係指冑決定FpF時考慮之顆 粒。具有5 _區分直徑之3〇%之卿卿5)係指粉末中所有 顆粒之至少30%具有小於5,之氣動粒徑。 其中醫藥活性 ’於實施方式 "喷霧溶液”之術語係指水溶液或懸浮液， 物質及至少一種賦形劑一起溶解/懸浮。 "飛行時間"之術語為測量標準方法之名稱 97673.doc -13- 200529863 章節有更詳細的敘述。在飛行時間的测量，同時測定_ A D 及FPF(參見實施方式章節，方法）。 /醫藥可接受賦形劑”、”載體，，或"基質"之術語係指在發明 範圍内可以視情況地包含於調配物中之賦形劑。賦形劑可 以例如’經肺施用而在患者或患者肺部沒有顯著 性效果。 毋

醤藥可接爻之鹽”之術語包含例如以下鹽類，但不限於 此：無機酸鹽例如氣、硫、磷、雙磷、溴及硝酸鹽。並且， 有機酸鹽例如蘋果酸鹽、馬來酸鹽、富馬酸鹽、^石酸鹽: 琥珀酸鹽、乙基丁二酸鹽、檸檬酸鹽、乙酸鹽、乳酸鹽、 曱烷苯磺酸鹽、苯曱酸鹽、抗壞血酸鹽、對_甲笨磺酸鹽、 棕櫚酸鹽、水楊酸鹽及硬脂酸鹽，以及為依牦鹽（6^〇1&⑷ 葡萄糖酸鹽及乳糖醛酸鹽。 π醫藥可接受陰離子”之術語包含，但不限於例如鋰、鈉、 钾、辦、紹及銨（包含經取代之敍）。

’’醫藥活性物質"之術語係指物質、醫藥、組合物或組合， 若使此活性物質與生物性、器官或細胞接觸，其對於生物 性、器官及/或細胞具有藥理，通常為正面效果。當使用於 病人其效果可能為局部或全身性。 π生物性巨分子”之術語係指肽、蛋白質、脂肪、脂肪酸 或核酸。 ’’肽η或”多肽”之術語係指胺基酸聚合物其由二至一百個 胺基酸群所組成。專有名詞，，肽，，或”多肽”作為代稱且同時包 含單肽及雜肽，即由一致或不同之胺基酸群所組成之胺基 97673.doc -14- 200529863 酸聚合物。因此，”雙肽，’由兩個肽連結胺基酸構成，”三肽，， 為三個肽連結胺基酸。這裡使用的專有名詞”蛋白質”係指 具有超過一百個胺基酸群之胺基酸聚合物。 π類似物’’之術語係指一或多個胺基酸被取代、排除（例如 片段）、加入（例如具有C-或Ν-端延伸之衍生物性）或從天然 的（野生型）序列修飾者。也可能從天然的蛋白質衍生，如例 藉由糖、聚乙二醇等。類似物具有至少10、2〇、3〇或4〇0/〇 之生物性活性’較佳地至少5 0、6 0或7 0 %及特佳地至少$ 〇、 90、95或100%或超過1〇〇%之天然的、非合成蛋白質之生物 性活性。 ’胺基酸π之術語表示含有至少一個胺基群及至少一個羧 基群之化合物。雖然胺基群通常在羧基群之以位置，在分子 中任何其他的排列也都可能。胺基酸可以含有其他功能基 例如胺基、羧醯胺、羧基、咪唑、硫基團及其他基團。使 用包含各種立體異構物比率之天然或合成由來、消旋性或 鏡像活性（D-或L-)胺基酸。例如，異白胺酸之術語同時包含 了队異白胺酸、L-異白胺酸、消旋性異白胺酸及兩種鏡像 異構物之各種比率。 "純蛋白質調配物，，之術語係指由一或多個蛋白質及視情 況、地適合之緩衝液組成之噴霧乾燥粉末（典型為相對於乾 粉重量之〇至15%(w/w))。此粉末基本上不含其他賦形劑， 即’任何其他賦形劑含量相對於乾粉重量小於叫咖）。 ”表面活性”物質能夠減少其溶解溶液之表面張力。表面 活性之測量是以例如根據Lecomte du N0叫Bauer、 97673.doc -15- 200529863 F^mming、Fiihrer，第6版）之張力計方法。 根據本發明之粉末 本毛月係關於製備安定醫藥活性物質/活性物質製劑之 新賦形劑。感謝本發明使其可能製備粉末活性物質調配 =八特色為特疋之安定性，特別是低凝集物及高單體含 里。本說明書之後將描述這些新的及令人驚舒優越之安定 活性物質並描寫其更詳細之特徵。 葡萄聚糖通常為高分子葡萄糖聚合物。其可以以例如於 庶糖中培養腸膜狀明串珠菌（—_伽Me讀roides) B512F製得。天然的葡萄聚糖可以在所要的分子量級分之對 應純化步驟後以部分酸水解製得。㈣聚糖係為0·3位置鍵 L側鏈之（1_>6)連結a_D_多酶體。分枝等級通常約為5%。 刀枝通*為1々萄糖單位長度。—般使用之葡萄聚糖具有 平均分子量顯著超過10,000 Da(通常為40 000、70，_或 512，_ Da)。本發明實施方式中所請之㈣聚糖，—方面 /、有達10,000 Da之平均分子量，較佳地達5,咖^，最佳 地達1，5〇〇 Da。本發明之範圍内發現具有平均分子量約 l’ooo Da之葡萄聚糖特別適合在製備顆粒粉末時作為安定 劑。 醫藥葡萄聚糖之優點： •USP及Ph· Eur·專題論文 •沒有明串珠菌（Leucon〇st〇c)抗原 •可用於靜脈注射給予 •可全部生物性降解為二氧化碳及水 97673.doc -16 - 200529863 •於環境溫度中安定達5年 低分子葡萄聚糖（〜15000道爾頓）之特別優點： •低抗原性 本發明因此關於粉末，較佳地噴霧乾燥粉末，含有醫藥 活性物質及分子量約500及i 〇，_道爾頓（Da)之間之葡萄聚 糖，較佳地在約500及5,000 Da之間，及特佳地在5〇〇及丨，π〇

Da之間。根據本發明關於粉末之特佳具體實施例，較佳地 噴霧乾燥粉末，含有除醫藥活性物質外平均分子量約^咖 Da之葡萄聚糖。 已證明特射利之粉末為較佳地讀錢粉末，其關於 粉末乾燥量之葡萄聚糖含量在50及99 99%(w/w)之間，較佳 地在55及99.99%(w/w)之間，更佳地在6〇及99 99%~~)之 間’例如50、5(M、50.2、50.3、.· 5〇 7、5〇』、5〇 9等；51、 52、53、…58、59、60 等；61、62、63、 68、69、7〇 等； 71、72、73、...78、79、80等 ’· 81、82、83、 88、89、 90 等；91、92、93、...98 等，99.1、99.2、99.3、...99·8、 99.9等；99_91、99.92、99.93、...99.98、99.99(w/w)。整體 來說，需選擇低分子葡萄聚糖量已使得喷霧乾燥粉末至少 為部分非晶形，較佳地全為非晶形。低分子葡萄聚糖之量 可以減少至小於50%(w/w)，條件為其他安定賦形劑以合適 之量加至粉末中。其他安定賦形劑之實例可以在本說明書 中其他地方發現。 醫藥活性物質在根據本發明粉末乾燥量中之量一般在 0.01及50°/〇(w/w)之間，較佳地在0·33及5〇%(w/w)之間，更 97673.doc -17- 200529863 佳地在0.33及45%^/^)之間，甚至更佳地在0.3 3及40%(\¥~) 之間。根據另一個較佳具體實施例，根據本發明粉末之固 體含量中之醫藥活性物質量在0.33及35%(w/w)之間，較佳 地在0.33及30%(w/w)之間，更佳地在〇·33及25%(w/w)之 間，甚至更佳地在0.33及10%(w/w)之間。此量例如0.01、 0·02、0·03·.·0·08、0.09等；0.1、〇·2、0.3、...0.8、0.9等； 1、2、3、...8、9、10等；11、12、13、...18、19、20等； 21、22、23、...28、29、30 等；31、32、33、"·38、39、 40等；4卜 42、43、…48、49等；49.：1、49.2、49.3、…49.8、 49.9等；49.91、49.92、49·93 ' ...49.98、49.99(w/w) ° 本發明係關於粉末，其具有低分子葡萄聚糖對活性物質 之比率例如 50/50、51/49、52/48、53/47、54/46、55/45、 56/44、57/43、58/42、59/41、60/40、61/39、62/38、63/37、 64/36、65/35、66/34、67/33、68/32、69/31、70/30、71/29、 72/28、73/27、74/26、75/25、76/24、77/23、78/22、79/21、 80/20、81/19、82/18、83/17、84/16、85/15、86/14、87/13、 88/12、89/11、90/10、91/9、92/8、93/7、94/6、95/5、96/4 ' 97/3、98/2、99/1、99.1/0.9、99.2/0.8、99.3/0.7、99.4/0.6、 99.5/0.5、99.6/0.4、99.66/0.3 3、99 ·7/0 ·3、99.8/0.2、99.9/0」、 99.99/0.01 (w/w)。若此特定粉末含有一或多個額外賦形 劑，低分子葡萄聚糖之量、醫藥活性物質之量或兩者之量 均可因此減少，低分子葡萄聚糖之量相對於粉末之乾量較 佳地為50至99.99%(w/w)之間的一個值。 為本發明目的之醫藥活性物質包含除一般定義所涵蓋外 97673.doc -18 - 200529863 之抗生素、抗病毒活性物質、抗癲癎劑、 抗發炎活性物質或支氣管擴張劑。其亦勺塥J (止痛劑）、 邊神經系統、腎上腺素受體、膽驗受體二：：用於例如週 管系統、平滑肌、血液循環系統、突月月°肌肉、心血 點、内分㈣統、錢系統、生殖H 2 =用連接 ^ 月月σ糸統、内公 泌糸統、營養及排泄系統、組織胺系統 / 活性物質。適合的活性物質也包含 ？左系統之 lt 1 3例如安眠藥及鎮定劑、 :神增強劑、精神安定劑、抗痙擎劑、肌肉鬆弛劑 金生活性物質、解痛劑、抗發炎活性物質、肌肉收缩劑、 抗微生物性活性物質、賀爾蒙活性物質例如㈣^ 感神經藥、利尿劑、脂肪代謝調節活性物質、抗雄激素活 性物質、抗寄生蟲藥、惡性腫瘤、抗惡性腫瘤藥及低血糖 症0 醫藥活性物質之術語也包含例如活性物質，其作用於呼 吸系統，例如對抗以下疾病之一：氣喘、慢性阻塞性肺病 (COPD)、肺氣腫慢性支氣管炎、支氣管肺部發育障礙 (BPD)、新生兒呼吸窘迫症候群(RDS)、細支氣管炎、格魯 布性喉頭炎（croup)、拔管後喘鳴（p〇st_extubati〇n strid〇r)、 肺纖維化、肺炎或囊腫纖維症（CF)。 支氣官擴張劑代表性的實例包含尤其是乙二型交感神經 興奮劑（beta-agonist)、抗膽鹼或甲基黃票呤。抗發炎之實 例為類固醇、咽達永樂（cr〇m〇lyn)、奈多羅米（ned〇cr〇mil) 及白二烯酸抑制劑。類固醇之實例包含必克喘 (beclomethasone)、倍他米松（betamethasone)、拜克羅米松 97673.doc -19- 200529863 (biclomethasone)、力克爽（dexamethasone)、去炎松 (triamcinolone)、可滅喘（budesonide)、別優地咳 (butixocort)、亞伏咳（ciclesonide)、氣替卡松（fluticasone)、 氟尼縮松（flunisolide)、艾克米松（icomethasone)、糠酸莫米 松（mometasone)、替可的松（tixocortol)及羅特比諾 (floteprednol)。其他實例為可滅喘（budesonide)、盧替卡松 -f . (luticasone propionate) 、 必克喘(beclomethasone Λ dipropionate)、佛每特羅（fometerol)及康寧克通 (triamcinolone acetonide) 〇 抗微生物性活性物質實例為紅黴素（erythromycin)、歐黴 素（oleandomycin)、醋竹桃黴素（troleandomycin)、羅紅黴素 (roxithromycin)、克瑞黴素（clarithromycin)、達福黴素 (davercin)、阿齊黴素（azithromycin)、氟紅黴素 (flurithromycin)、地紅黴素（dirithromycin)、交沙黴素 (josamycin)、史拜黴素（spiromycin)、麥迪黴素 (midecamycin)、樂益克黴素（leucomycin)、美歐卡黴素 (miocamycin)、羅地黴素（rokitamycin)、安達黴素 (andazithromycin)及史文諾來 A(swinolide A);氟化恩蓖 (fluoroquinolones)，例如西普氟沙星（ciprofloxacin)、歐氟 洛沙星（ofloxacin)、可樂必妥（levofloxacin)、曲氟沙星 (trovafloxacin)、阿拉曲伐沙星（alatrofloxacin)、膜西氟沙 星（moxifloxicin)、諾氟沙星（norfloxacin)、依歐沙星 (eoxacin)、格裏沙星（grepafloxacin)、加替沙星 (gatifloxacin)、洛美沙星（lomefloxacin)、司怕沙星 97673.doc -20- 200529863 (sparfloxacin)、特馬沙星（temafloxacin)、培氟沙星 (pefloxacin)、氨氟沙星（amifloxacin)、氣羅沙星 (fleroxacin)、托氟沙星（tosufloxacin)、普利沙星 (prulifloxacin)、爾羅沙星（irloxacin)、帕珠沙星 (pazufloxacin)、克林沙星（clinafloxacin)及西塔沙星 (sitafloxacin)、糖甘胺基酸（aminoglycosides)例如抗菌黴素 (gentamicin)、立克菌星（netilmicin)、怕拉每星（paramecin)、 妥布黴素（tobramycin)、阿米卡星（amikacin)、嘉黴素 (kanamycin)、新黴素（neomycin);鏈黴素（streptomycin)、 萬古黴素（vancomycin)、特可拉寧（teicoplanin)、藍波拉寧 (rampolanin)、麥地拉寧（mideplanin)、可利絲丁（colistin)、 達托黴素（daptomycin)、短菌桿素（gramicidin)、甲亞石黃酸 (colistimethate);多黏桿菌素（polymixins)例如多黏桿菌素 B(polymixin B)、捲曲黴素（capreomycin)、枯草菌素 (bacitracin)、盤寧（peneme)、青黴素（penicillins)包含青黴 素酶敏感活性物質青黴素G(wie penicillin G)、青黴素 V(penicillin V)、抗青黴素酶活性物質（penicillinase-resistant active sub stances)如 甲氧苯 青黴素 （methic ill in) 、 扼 青黴素（oxacillin)、鄰氣青黴素（cloxacillin)、雙氯青黴素 (dicloxacillin)、氣青黴素（floxacillin)、乙氧青黴素 (nafcillin);抗革蘭是陰性菌活性物質例如氨苄西林 (ampici 11 in)、阿莫西林（amoxicillin)、海他西林（hetacillin)、 西林（cillin)及加蘭西林（galampicillin);抗假單胞菌盤尼西 林例如緩基配尼西林（carbenicillin)、替卡西林 21 -

97673.doc 200529863

(ticarcillin)、阿洛西林（azlocillin)、美洛西林（mezlocillin)、 安彼拉西林（andpiperacillin);頭孢菌素（cephalosporins)例 如頭孢泊（cefpodoxime)、頭孢丙浠（cefprozil) <頭孢布坦 (ceftbuten)、頭孢口坐（ceftizoxime)、頭孢曲松（ceftriaxon)、 賜福樂素（cephalothin)、西爾必林（cephapirin)、頭孢氨苄 (cephalexin)、頭孢得林（cephradrin)、頭孢p塞吩（cefoxitin)、 頭孢曼多（cefamandol)、峻頭孢菌素（cefazolin)、頭孢洛利 定（cephaloridin)、頭孢克樂頭孢卓西（cefaclor cefadroxil)、 頭孢洛葛利欣（cephaloglycin)、賜福樂幸（cefuroxim)、頭孢 拉尼（ceforanid)、頭孢（cefotaxim)、頭孢（cefatrizin)、頭孢 (cephacetril)、頭孢（cefepim)、頭孢（cefixim)、頭孢泰斯 (cefonizid)、頭孢配拉隆（cefoperazon)、頭孢替坦 (cefotetan)、頭孢美他洛（cefmetazol)、頭孢日頂 (ceftazidim)、氯碳頭孢（loracarbef)及拉特莫（moxalactam)、 單環胺基類（monobactams)例如安達菌素（aztreonam);及碳 醢胺基類（carbapenems)例如亞胺培南（imipenem)、美羅培南 (meropenem)、幫達名定異散紅原酸鹽（pentamidin isethionate)、柳 丁氨醇（albuterol sulphate)、利多卡因 (lidocaine)、硫酸奥西普那林（metaproterenol sulphate)、二 丙酸貝可美松（beclomethasone dipropionate)、去炎松乙醯 胺（triamcinolone acetamide)、可滅喘醋酮（budesonide acetonide)、氟替卡松（fluticasone)、溪化異丙托品 (ipratropium bromide)、氣尼縮松（flunisolide)、色甘酸鈉 (cromolyn sodium)、酒石酸麥角胺（ergotamine tartrate)及可 97673.doc -22- 200529863 拮抗劑、抑制劑及其醫藥可使用 應用之類似物、興奮劑 鹽形式等。 酉樂活性物質較佳地為根據另—個具體實施例之生物性 ^刀子。依照上述提供定義，此意指包含例如肽、蛋白質、 脂肪、脂肪酸或核酸。 生物丨生西藥重要蛋白質/多肽包含例如抗體、酵素、生長 因子，例如類固醇、細胞素、淋巴激素、黏附分子、受體 及其衍生物性或諸，但不限於此。—般來說，所有作為 興奮劑或拮抗劑及/或具有治療或診斷應用之多肽均有價 值。 、 為本發明之目的之適合的肽或蛋白質包含例如胰島素、 類胰島素生長因子、人類生長賀爾蒙（hGH)及其他生長因 子、組織血纖維蛋白溶原活化劑（tPA)、紅血球生成素 (EPO)、細胞素，例如介白素（IL)，例如IL-1、IL-2、IL-3、 IL-4、IL-5、IL-1、IL-7、IL-8、IL-9、IL-10、IL-U、IL-12、 IL-13、IL-14、IL-15、IL-16、IL-17、IL-18、干擾素 (IFN)-alpha、-beta、-gamma、omega或-tau、腫瘤壞死因子 (TNF)例如 TNF-alpha、-beta或-gamma、TRAIL、G-CSF、 GM-CSF、M-CSF、MCP-1及VEGF。其他例子為單株、多 株、多重專一性及單鏈抗體及其片段例如Fab、Fab，、 F(ab’）2、Fc及Fc’片段、輕（L)及重（Η)免疫球蛋白鏈及其固 定（constant)、變異（variable)或高度變異（hypervariable)區， 以及 Fv及 Fd 片段（Chamov et al·，1999，Antibody Fusion proteins，Wiley-Liss Inc_)。抗體可以為人類或非人類來源。 97673.doc •23- 200529863 攻些包含例如人類已知種類：IgA、IgD、lgE、收及igM， '、有其又異亞型’例如kAl、IgA2及IgGl、IgG2、IgG3及 1§〇4人類化及嵌合（chimeric)抗體亦為可能。具有特定醫 療重要II及本發明之一個主題係粉末調配物，其[含有]抗體 例如對抗各種表面抗原如CD4、（：1)2〇或(：：1：)44、各種細胞素 例如IL2、IL4或IL5。其他實例為抗體對抗其他種類之免疫 球蛋白（如抗IgE抗體）或抗病毒蛋白（如抗尺8¥、抗CMV抗體 等）。

Fab片奴（抗原結合片段=Fab)由兩種鏈之變異區所組 成，其藉由相鄰之固定區連結在一起。其他抗體片段為 F〇b h片段，其可以藉胃蛋白酶之蛋白溶解消化製得。藉 由基因複製亦可能製備只由重鏈（VH)及輕鏈（VL)變異區組 成之縮紐之抗體片段。已知為⑺片段（變異片段=變異部分 之片段）。此抗體片段係歸為單鏈^片段（scFv)。已知並已 敛述scFv抗體之貫例’參見例如Hust〇]1 et ai.，，Pr〇c.

Natl· Acad· Sci. USA，16，5879ff。 過去為製造多體scFv衍生物性已發展各種策略，例如 雙、二及五體。使用於此領域之雙體（diab〇d幻之術語表示 二價單質雙體（bivalent homodimeric)scFv衍生物性。縮短 scFv之肽連結至5至1〇個胺基酸導致藉由重疊VH/VL鏈形 成單貝雙體。雙體可以名員外藉由插入雙硫橋接安定之。雙 體之實例可以在文獻中找到，例如在perisic et al.， 1994(Structure ’ 2 ’ 1217ff)。使用於此領域之微型體 (minibody)之術語表示二價單質雙體％卜衍生物性。其由含 97673.doc -24· 200529863 有免疫球蛋白之CH3區，較佳地為IgG，最佳地為IgGl之融 、 合蛋白所組成’作為雙體化（dimerisation)區。其以IgG之樞 v. 紐區及連接區方式與scFv片段連結。此微型體之實例敘述 於Hu et al·，1996，Cancer Res·，56，3 05 5ff。使用於此領 域之三體（triabody)之術語表示三價單質三體（trivalent homotrimeric)scFv衍生物性（Kortt et al.，1997，Protein

Engeedng，10，423ff)。不使用連結片段之VH_VL直接融 合致使三體之形成。 · 此領域所知之片段如具有雙、三或四價結構之微型體同 時也為scFv片段之衍生物性。多體化是藉由雙、三或四體 盤繞之捲曲方式結構達成（Pack，p. et al.，1993，

Biotechnology，U，1271ff; Lovejoy，Be et al，1993，

Science，259，l288ff; Pack，p· et al·，1995，j M〇1 則〇1， 246，28ff) 〇 本發明之一個特佳之具體實施例係關於從抗體種類而來 之蛋白質，更精確地為第一型免疫球蛋白G。此為人類化單 鲁 株抗體具有95%人類及5%鼠類抗體序列。此抗體具有約 1 48千道爾頓（伽)之分子量，由兩個輕鏈及兩個重鍵及全 部4個雙硫橋接組成。 2別有利的是含有作為活性物質之肽或蛋白質，或肽/蛋 貝或蛋白貝/蛋白質之組合之粉末。符合之生物性巨分子 可以以粉末乾燥量之〇·(^5()%之間組成。此量例純W、-0.02、0·03···0·08、0·09等；〇」、〇 2、〇 3 〇 8、〇 9等；^/ 2、3、."8、9、1〇等；11、12、13、.18、19、2〇等；21、 97673.doc -25- 200529863 22、23、...28、29、30 等；31、32、33、...38、39、40 等； 41、42、43、"·48、49、49.1、49·2、49·3···49·8、49.9 等； 49·91、49·92、49·93、...49.98、49.99(w/w)。 根據本發明特別有利的粉末係為粉末、較佳地為噴霧乾 燥粉末，具有低分子葡萄聚糖對肽/蛋白質比率50/50、 51/49、52/48、53/47、54/46、55/45、56/44、57/43、58/42、 59/41、60/40、61/39 ' 62/38、63/37、64/36、65/35、66/34、 67/33、68/32、69/3 卜 70/30、71/29、72/28、73/27、74/26、 75/25、76/24、77/23、78/22、79/21、80/20、81/19、82/18、 83/17、84/16、85/15、86/14、87/13、88/12、89/U、90/10、 91/9 、 92/8 、 93/7 、 94/6 、 95/5 、 96/4 、 97/3 、 98/2 、 99/1 、 99.1/0.9、99.2/0.8、99.3/0.7、99.4/0.6、99.5/0.5、99.6/0.4、 99.66/0.33、99.7/0.3、99.8/0.2、99·9/0·卜 99.99/0·01 (w/w) 〇 如果符合之粉末含有一或多個額外之賦形劑，低分子葡萄 聚糖之量、醫藥活性物質之量或兩者之量均可因此減少，低 分子葡萄聚糖之量較佳地具有50至99·99%之間之一個數值。 如果根據本發明之粉末含有分子量<10 kDa ’較佳地<5 kDa之非常小之蛋白質/肽，此例如生長因子，例如細胞素， 其量較佳地在粉末總重量之0·1至10%(w/w)之間，更佳地在 0.2至5%(w/w)之間。因此，較佳的粉末其細胞素量為〇·2、 0·3、0.4...0.8、〇·9等；1、2、3、…等；4.1、4.2、4·3、"·4·8、 4.9 等；4.91、4.92、4.93、..·4·98、4.99(w/w)。 如果另一方面醫藥活性物質為一或多個抗體或其衍生物 性（較佳具體實施例），活性物質在粉末固體含量中之比例為 97673.doc -26- 200529863 0.01至50°/〇(w/w)之間，較佳地0.1至50%(w/w)之間，更佳地 0.33至 5 0%(w/w)之間，例如 0.1、0.2、0·3、0·33、.·_0·66、 0.7、0.8、0.9等；1、2、3、...8、9、10等；11、12、13、...18、 19、20 等；2 卜 22、23、"·28、29、30 等；3 卜 32、33、…3 8、 39、40 等；4 卜 42、43、".48、49 等；49」、49.2、49.3 '..49.8、 49.9 等；49·91、49.92、49·93、"·49·98、49.99(w/w) ° 根據一個特定具體實施例，抗體在粉末固體含量中之比 例為10至50%(w/w)之間，更佳地10至30%(w/w)之間，甚至 更佳地10至20%(w/w)之間。特別有利地，本發明細關於粉 末，較佳地為喷霧乾燥粉末，其具有低分子葡萄聚糖對抗 體之比率為 50/50、51/49、52/48、53/47、54/46、55/45、 56/44、57/43、58/42、59/4卜 60/40、61/39、62/38、63/37、 64/36、65/35、66/34、67/33、68/32、69/31、70/30、71/29、 72/28、73/27、74/26、75/25、76/24、77/23、78/22、79/21、 80/20、81/19、82/18、83/17、84/16、85/15、86/14、87/13、 88/12、89/11 或 90/10(w/w)。 根據本發明之另一個具體實施例細關於粉末，較佳地為 噴霧乾燥粉末，其特徵為喷霧乾燥粉末之乾燥量含有a)至 少5 0%(w/w)，較佳地在55及99.99%(w/w)之間，最佳地在60 及99.99%(w/w)之間之低分子葡萄聚糖及b)至高達30%之生 物性巨分子，低分子葡萄聚糖及生物性巨分子之重量之百 分比總和最大為1 00%(w/w)。技藝人士能夠製備此粉末。因 此，技藝人士知道如果低分子葡萄聚糖之量為 99.99%(w/w)，他可以加入相對於喷霧溶液之總固體含量最 97673.doc -27- 200529863 大為0.01%(W/W)之醫藥活性物質。 ' 根據本發明之粉末也可以含有其他賦形劑，例如胺基、· 敲肽、非生物性或生物性聚合物及/或一或多個糖。此領 域已知之其他賦形劑例士口為脂月方、脂月方酉吏、脂肪酸醋、類 固醇（如膽固醇）或鰲合劑（如EDTA)以及各種陰離子（見上 述）同玻璃轉換溫度之賦形劑，例如高於4〇cC，較佳地高 於45 c或间於55 C為特佳。適合之賦形劑之清單可以見 ^J^Kippe(Eds.)^-Handbook of Pharmaceutical Excipient11 · 3rd Ed.，2000 〇 適合之含蛋白質賦形劑包含例如白蛋白（人類或重組來 ^)、明谬、酿蛋白、血紅素等。較佳之糖為單、雙、寡或 多+糖或其組合。單糖之例子為果糖、麥芽糖、半乳糖、葡 萄糖、d-甘露糖、山梨糖等。為本發明之目的之適合雙糖 i s例如礼糖、蔗糖、海藻糖、纖維二糖等。適合使用之 多糖包含特別為棉子糖、美樂西妥斯(—Ο、糊精、 澱粉等。糖醇包含除甘露純外之木糖醇、麥芽糖醇、半乳 鲁 糖醇、阿拉伯糖醇、側金盒花醇、多輯、山梨醇⑻心叫、 皮偽弄斯山梨糖醇（pyran〇syls〇rbit〇1)、肌醇、肌纖維醇等 作為賦形劑。適合之胺基酸包含例如丙胺酸、甘胺酸、精 胺酸、組胺酸、麩胺酸、天門冬胺酸、半胱胺酸、白胺酸、 離胺酸、異白胺酸、擷胺酸、色胺酸、甲硫胺酸、苯丙胺 酸、路胺酸、瓜胺酸、L.天門冬胺酸心苯丙胺酸-甲基醋（阿·· 、斤巴甜）一曱基乙酸銨甜菜驗）等。較佳地，使用胺基酸 · 作為緩衝液(如甘胺酸或組胺酸)及/或分散劑。後者包含特 97673.doc -28- 200529863 別是佔大多數之疏水性胺基酸，例如白胺酸、擷胺酸、異 白胺酸、色胺酸、丙胺酸、曱硫胺酸、苯丙胺酸、酪胺酸、 組胺酸或脯胺酸。本發明之範圍内已證明使用除了低分子 葡萄聚糖之外之異白胺酸有特別之優點，較佳地在5至 20%(w/w)之濃度，最佳地從10至20%(w/w)，甚至更佳地從 12至20%(w/w)。亦為特別有利地使用雙、三、寡或多肽作 為賦形劑，其含有一或多個佔大多數之疏水性胺基酸群。 三肤之適合例子包含例如一化多個下列三肤： Leu-Leu-Gly、Leu-Leu-Ala、Leu-Leu_Val、Leu_Leu-Leu、 Leu-Leu-Met、Leu-Leu-Pro、Leu-Leu-Phe、Leu-Leu-Trp、 Leu-Leu-Ser、Leu-Leu-Thr、Leu-Leu-Cys、Leu-Leu-Tyr、 Leu-Leu-Asp、Leu-Leu-Glu、Leu-Leu-Lys、Leu-Leu-Arg、 Leu-Leu-His、Leu-Gly-Leu、Leu-Ala-Leu、Leu-Val-Leu、 Leu-Met-Leu ^ Leu-Pro-Leu - Leu-Phe-Leu、Leu-Trp-Leu、 Leu-Ser-Leu、Leu-Thr-Leu、Leu-Cys-Leu、Leu-Try-Leu、 Leu-Asp-Leu、Leu-Glu-Leu、Leu-Lys-Leu、Leu-Arg-Leu及 Leu-His-Leu。已證明使用以下通式之三肽特別有利： Ile-X-X ; X-Ile-X ; X-X-Ile，其中X可為下列胺基酸之一 ·· 丙胺酸、甘胺酸、精胺酸、組胺酸、魏醯胺（glutamic acid)、 麵胺酸（glutamine)、天門冬醯胺（asparagine)、天門冬胺酸 (aspartic acid)、組胺酸、白胺酸、離胺酸、異白胺酸（lie) 擷胺酸、色胺酸、甲硫胺酸、苯丙胺酸、脯胺酸、絲胺酸、 酥胺酸、酪胺酸、L-天門冬胺酸苯丙胺酸-甲基酯（阿斯 巴甜）、三曱基乙酸銨。特別佳地為符合式（Ile)2-X之三肽， 97673.doc -29- 200529863 例如Ile-Ile-X、Ile-X-Ile或X-Ile_ne，χ可以再次代表上述 所列胺基酸之一。這些包含例如三肽：、

Ile-Ile-Ala、Ile-Ile-Val、Ile-Ile-Ile、iie-Ile-Met、Ile-Ile-Pro、 Ile-Ile_Phe、Ile-Ile-Trp、lie_Ile_Ser、Ile_ne-Thl·、 Ile-Ile-Cys、Ile-Ile-Tyr、Ile-Ile-Asp、ne_Ile_Glu、 Ile-Ile-Lys 、 Ile-Ile-Arg > Ile-Ile-His ^ Ile-Gly-Ile 、 Ile-Ala-Ile、Ile_Val-Ile、Ile-Met-Ile、Ile-Pro-Ile、

Ile-Phe_Ile、Ile-Trp_Ile、Ile-Se卜Ile、iie_Thr_lle、Ile-Cys-Ile、 lie-Try_Ile、Ile-Asp-Ile、Ile-Gh^lie、Ile_Lys_Ile、Ile-Arg_Ile、 le-His-Ile。使用 Ile-Ile_ ne特別有利。 適合之聚合物包含例如上述作為賦形劑之聚乙烯基D比咯 烧酮（polyvinylpyrrolidone)、衍生之纖維素（ceUul〇se),例 如羥基曱基、羥基乙基或羥基丙基乙基纖維素、聚糖例如 Ficoll、澱粉例如羥基乙基或羥基丙基澱粉、糊精例如環糊 精（2-羥基丙基-β-環糊精、磺酸基丁基乙醚_β_環糊精）、聚 乙烯、乙二醇及/或果膠。 鹽可以例如為無機鹽例如氣化物、硫化物、磷酸鹽、二 磷酸鹽、氫溴酸鹽及/或硝酸鹽。此外根據本發明之粉末也 可以含有有機酸，例如蘋果酸鹽、馬來酸鹽、富馬酸鹽、 酒石酸鹽、琥珀酸鹽、乙基丁二酸鹽、檸檬酸鹽、乙酸鹽、 乳酸鹽、甲烷苯磺酸鹽、苯甲酸鹽、抗壞血酸鹽、對-甲苯 石頁酸鹽、棕櫚酸鹽、水楊酸鹽、硬脂酸鹽、依托鹽、葡萄 糖酸鹽及乳糖醛酸鹽。同時符合之鹽類可以含有醫藥可接 叉陰離子’例如鈉、鉀、轉、、I或銨。特別佳地為使 97673.doc 200529863 與安定蛋白質結合。接著，根據本發明之 立入杯a例亦關於粉末’較佳地為噴霧乾燥粉末， 鹽:示低分子㈣聚糖及醫藥活性物質外之醫藥可接受 本發明亦關於噴霧乾燥粉末 及醫藥活性物質外之…… 低刀子㈣糖 或夕個面藥可接受賦形劑及/或一 或夕個鹽。賦形劑可以為例如上述提及之胺基酸、肽及盆 鹽、糖、多醇、有機酸之鹽及/或聚合物。 ” 根據本發明之另—個具體實施例，其係關於粉末，好 地為喷霧乾燥粉末’其含有除低分子葡萄聚糖及醫举活： 物質外之-或多個胺基酸’較佳地為一個進一步作為賦形 劑=基酸。在本文中本發明亦關於粉末，其含有相對於 乾燥量之至少50%(w/w)，較佳地在55及％ 99%(w/w)之間， 最佳地在60及98.99%(w/w)之間之低分子葡萄聚糖，以及工 及2(m(w/w)之間之胺基酸，以及〇〇1及49%(w/w)之間之醫 藥活性物質，較佳地為生物性巨分子，其重量之總和可至 高達最大100%(w/w)。根據較佳之具體實施例，低分子葡萄 聚糖之量至少為60°/〇(w/w)，較佳地在相對於粉末乾燥量之 70及89_99%(w/w)之間。在一個符合之調配物胺基酸的量較 佳地在10及20%(w/w)之間及醫藥活性物質在〇 〇1及 10%(w/w)之間。 因此，根據本發明之另一個具體實施例亦關於粉末，其 含有或由例如以下所組成：80°/。之低分子葡萄聚糖 /19%(w/w)之胺基酸/1%(W/W)之醫藥活性物質（8〇/19/1); 97673.doc •31 · 200529863 (80/18/2) ； (80/17/3) ； (80/16/4) ； (80/15/5) ； (80/14/6)； (80/13/7) ； (80/12/8) ； (80/11/9) ； (80/10/10) ； (70/19/11)； (70/18/12)； (70/17/13)； (70/16/14)； (70/15/15)； (70/14/16)； (70/13/17)； (70/12/18)； (70/11/19)； (70/10/20)； (60/20/20)； (60/19/21)； (60/18/22)； (60/17/23)； (60/16/24)； (60/15/25)； (60/14/26) ； (60/13/27) ； (60/12/28)； (60/1 1/29) ； (60/10/30) 或（70/20/10)。如果活性物質之比例由20%(w/w)減少至 0.01%(w/w)，例如至9.99、…9·9、9·8、9·7 …9.3、9.2、 9.1 "·9、8、7、6、5、4、3、2、卜"·0·9、08、0.7、"·0·66、"·0·6、 0·5、0·4、0·3、0.2、0·1、0·09、0·08、0·07、0·06、0·05、 0.04、0·03、0.02、0·01，當胺基酸比例維持恆定，低分子 葡萄聚糖可以因此降低至例如80.01、…80.1、80.2、 80·3.··80·8、80.9、8卜 82、83、84、85、86、87、88、89、…、 89」、89.2、89.3、…89.33、…89.4、89.5、89.6、89.7、89.8、 89.9、…89.9卜 89.92、89.93、··89.97、89.98、89.99(w/w)， 以致相對於粉末乾燥量之個別粉末成分重量之總和組成為 100%(w/w)。藉由加入其它賦形劑或鹽，低分子葡萄聚糖、 胺基酸/肽及/或醫藥活性物質之量可以因此調整，致使個別 成分重量部分加至總共100%(w/w)。 如果加入之胺基酸為異白胺酸，根據另一個具體實施例 根據本發明之粉末含有量為a)至少50%(w/w)，較佳地從55 至98.99%(w/w)，最佳地從60至98.99%(w/w)之低分子葡萄 聚糖量，b)5至20%(w/w)比例之異白胺酸及c)至少 0.01 %(w/w)，較佳地0·01至最大45%(w/w)之根據本發明之 97673.doc -32· 200529863 醫藥活性物質，較佳地為肽/蛋白質。較佳地異白胺酸之量 為粉末總固體含量之10至20%(w/w)，更佳地為12至 20%(W/W)。再一次，個別成分之重量％之總和不超過 100%(w/w)。本發明亦關於下列組成之粉末：85%之低分子 葡萄聚糖/5%(w/w)之胺基酸或肽/i〇%(w/w)之醫藥活性物 質（85/5/10) ; (84/6/10) ; (83/7/10) ; (82/8/10) ; (81/9/10); (80/10/10)； (79/11/10)； (78/12/10)； (77/13/10) ； (76/14/10); (75/15/10)； (74/16/10)； (73/17/10); (72/18/10)； (71/19/10); (70/20/10)，醫藥活性物質之量一可以降低從1〇至 0.01 %(w/w)，例如至 9.99、…9.9、9.8、9.7 …9.3、9.2、 9.1 …9、8 7、6、5、4、3、2、1、…〇_9、08、0.7、…0.66、··· 0.6、0.5、0.4、0.3、0·2、0·1、〇.〇9、0.08、0.07、0·06、 0.05、0.04、0·03 0.02、0·01，而低分子葡萄聚糖之量亦可 以增加至例如 80.01、…80.1、80.2、80.3···80.8、80.9、81、 82、83、84、85、86、87、88、89、…、89.1、89.2、 89.3、…89.33、…89.4、89.5、89.6、89.7、89.8、89.9、·.·89.9卜 89.92、89.93、...89.97、89.98、89.99(w/w)，以致相對於 粉末乾燥量之重量部分之總和組成100%(w/w)。因此本發明 亦關於具有以下組成之粉末：80°/〇(w/w)之低分子葡萄聚糖 /19%(w/w)之異白胺酸/1% (w/w)之醫藥活性物質 (80/19/1) ； (80/18/2) ； (80/17/3) ； (80/16/4) ； (80/15/5)； (80/14/6) ； (80/13/7) ； (80/12/8) ； (80/11/9) ； (80/10/10); (70/19/11)； (70/18/12)； (70/17/13)； (70/16/14)； (70/15/15)； (70/14/16)； (70/13/17)； (70/12/18)； (70/11/19)； (70/10/20); 97673.doc -33- 200529863 (60/19/21)； (60/18/22)； (60/17/23)； (60/16/24)； (60/15/25)； (60/14/26); (60/13/27); (60/12/28); (60/1 1/29); (60/10/30)。 如果加入其它賦形劑或鹽，低分子葡萄聚糖、異白胺酸及/ 或醫藥活性物質之量必須隨之調整，致使個別成分依重量 之量加至100%(w/w)。 本發明之另一個具體實施例係關於使用低分子葡萄聚糖 及三肽於安定含醫藥活性物質，較佳地為肽、蛋白質或其 混合物之粉末之用途。本說明書以實例提及有些三肽其可 以與低分子葡萄聚糖一起使用已製備根據本發明之粉末。 根據一個特定具體實施例，三肽係含有至少一個異白胺 酸，較佳地為二個異白胺酸，或根據一個特定有利之具體 實施例，係由三個異白胺酸所組成。 與此連結，本發明係關於粉末，其含有a)至少50°/〇(w/w)， 較佳地從55至98.99%(w/w)，最佳地從60至98.99%(w/w)之 低分子葡萄聚糖量，b)l至20%(w/w)比例之三肽，較佳地為 三異白胺酸及c)0.01至最大49%(w/w)之醫藥活性物質，較 佳地為肽/蛋白質。再次地，個別固體總和不能加總至超過 100%(w/w)。本發明亦關於下列組成之粉末：89%(w/w)之 低分子葡萄聚糖/l%(w/w)之三肽，較佳地為含異白胺酸之 三肽，最佳地為三異白胺酸/10%(w/w)之醫藥活性物質 (89/1/10) ; (88/2/10) ; (87/3/10) ; (86/4/10) ; (85/5/10); (84/6/10) ; (83/7/10) ; (82/8/10) ; (81/9/10) ; (80/10/10); (79/11/10); (78/12/10); (77/13/10); (76/14/10); (75/15/10); (74/16/10) ; (73/17/10) ; (72/1 8/10)或（71/19/1〇)，醫藥活性 97673.doc -34- 200529863 物質之量也可以減少至從10至0.01%，例如至9.99、··· 9.9、 9.8、 9·7 …9.3、9.2、9_1 …9、8、7、6、5、4、3、2、1、… 0.9、08、0.7、…〇·66、…0.6、0·5、0·4、0·3、0.2、〇_1、 0.09、0.08、0-07、〇·〇6、0.05、0.04、0.03、0.02、0.01 %(w/w)， 因此低分子葡萄聚糖量可以增加至例如80.01、... 80.1、 80.2、80.3 …80.8、80.9、81、82、83、84、85、86、87、 88、89、…89.1、89.2、89.3、…89.33、…89.4、89.5、 89.6、89.7、89.8、89.9、…89·9卜 89·92、89.93、…89.97、 89.98、89.99%(w/w)，致使相對於粉末乾燥量之重量總和 達100°/〇(w/w)。因此本發明亦關於下列組成之粉末： 80%(w/w)之低分子葡萄聚糖/19%(w/w)之三肽，較佳地為三 異白胺酸/ l%(w/w)之醫藥活性物質（80/19/1) ; (80/1 8/2); (80/17/3) ； (80/16/4) ； (80/15/5) ； (80/14/6) ； (80/13/7)； (80/12/8); (80/11/9) ; (80/10/10) ; (70/19/11) ; (70/18/12); (70/17/13); (70/16/14); (70/15/15); (70/14/16); (70/13/17); (70/12/18)； (70/11/19)； (70/10/20)； (60/19/21)； (60/18/22)； (60/17/23)； (60/16/24)； (60/15/25)； (60/14/26)； (60/13/27)； (60/12/28) ; (60/1 1/29) ; (60/10/30)，三肽之量，較佳地三 異白胺酸也可以減少至從10至1%，例如至9.99、…9 9、 9.8、 9.7 …9.3、9.2、9.1 …9、8、7、6、5、4、3、2 19、 1.8、 1.7、…1.66、…1.6、1.5、1.4、1.3、1_2、1.卜 1%(w/w)， 因此醫藥活性物質，較佳地為肽/蛋白質量可以增加至例如 30.1、30.2、30.3 …30.8、30·9、31、32、33、34、35、36、 37、38、38.：1、38.2、38.3、…38·33、.··、38·4、38·5、38·6、 97673.doc -35- 200529863 3 8·7、3 8·8、3 8.9、··· 39(w/w)，致使相對於粉末乾燥量之 重量總和達l〇〇%(w/w)。當三肽的量從1〇減少至1 (w/w)， 如此所示，低分子葡萄聚糖在粉末中之比例亦可增加。當 活性物質保持恆定，例如1 〇%(w/w)，可以製備葡萄聚糖含 i 為 80.1、80.2、80.3 …80.8、80.9、81、82、83、84、85、 86、87、88、88.1、88.2、88.3、…88.33、…、88.4、88·5、 88·6、88·7、88.8、88.9或 89(w/w)之粉末。 根據本發明之另一個具體實施例粉末可以額外含有界面 活性劑如 TWeen 20、40、60、8〇、Brij 35、泊洛尼克 ρ 88 (Pluronic F 88)及泊洛尼克F 127。較佳地使用濃度為 〇-〇lJ，l%(w/w)。特佳地為喷霧乾燥粉末，其含有低分子葡 珣聚糖之賦形劑及額外之Tween 2〇作為界面活性劑，其較 佳濃度為 0.01-0.1%(w/w)。 人根據本發明之另一個具體實施例亦關於醫藥組合物，其 含有上述噴霧乾燥粉末之一。 根據本發明之粉末之製備 本發明亦提供製備上述噴霧乾燥粉末之一之方法。此方 ^之^色在於含有醫藥活性物質及低分子葡萄聚糖之被喷 霧之命液/懸斤液在温度低於（流入/流出溫度） "每+:霧車又佳地在15(M85/70_9rc。根據本發明之方法於 貫施方式’，章節以有些實例更完整地描述。 ▲基本上，根據本發明之粉末可以藉溶解醫藥活性物質， 也為肽或蛋白質形式之生物性巨分子’於水溶液中， τ慮之活性物質之溶解條件而定。通常，使用ρΗ^， 97673.doc -36 - 200529863 較佳地3.5_9之緩衝液。當製備吸入性粉末時，pH 4_78之 水溶液特別有利。為了確保足夠之溶解度，溶液之阳需小 於肽/蛋白質之？1。水溶液可以視情況地含有額外之水溶性 有機溶劑，例如乙酮、酒精等。低階之酒精如甲醇、乙醇、 丙醇、(正或異丙醇)等特別適合。此類混合溶劑系統通常含 有在1〇场/V)之間之水溶性有機溶劑。噴霧溶液中之固 體含量通常在0._()%(，之間，較佳地在GW—) 之間，特佳地在(M-5%(w/w)之間。本發明之範圍内，從且 有㈣〇或3.33%(w/w)固體含量之水溶液開始製備喷霧 乾燥粉末。 通常’如實例所述之賦形劑或適合之賦形劑之混合物溶 解於第二個容器中PH 之高度純水或適合之緩衝溶 液，較佳地3.5至9’特佳地4.〇至7.8’於第二步與活性物質 浴液混合。然後溶液/懸浮液以pH 3至11，較佳地35至9, 特佳地4.G至7.8之純水或適合緩衝液調整所欲之固體含量。 因此本發明係關於製備噴霧乾燥粉末之方法，其 於： 八、 ^醫藥活性物質溶解於水溶液/懸浮液； W低分子葡萄聚糖溶解於水溶液/懸浮液； 〇如果活性物質及低分子葡萄聚糖溶解於不同之水溶液/ 懸浮液，將其一起混合； d)將含有低分子葡萄聚糖及醫藥活性物質之溶液/懸浮液 於低於2〇〇/12n：，較佳地為175/9代之溫度喷霧。 在欲喷霧之溶液/懸浮液中相對於喷霧溶液固體含量之 97673.doc -37· 200529863 低分子葡萄聚糖賦形劑含量在50%及99.99%(w/w)之間，較 佳地在55%及99.99%(w/w)之間，最佳地在60%及99_99% (w/w)之間。關於欲噴霧之溶液/懸浮液固體含量之活性物質 濃度通常在0.01及50%(w/w)之間’較佳地在0.01%及 4〇%(w/w)之間，最佳地在0·01%及30%(w/w)之間。從根據 上述知本發明粉末組成開始，技藝人士可以製備用於喷霧 之溶液/懸浮液，其在喷霧後產生符合之粉末組成。 因此本發明亦關於如上述之製備喷霧乾燥粉末之方法， 其特色在於欲喷霧溶液/懸浮液之固體量含有在50及 99.99%(w/w)之間，較佳地在60%及99.99°/〇(w/w)之間之低分 子葡萄聚糖。根據本發明之另一個較佳具體實施例係關於 符合之方法，其特色在於欲喷霧之溶液/懸浮液固體量含有 0.01及50°/。~~)之間，較佳地0.01%及30%(〜/\¥)之間，最佳 地在0.33%及30%(w/w)之間之醫藥活性物質。 根據本方法之另一個具體實施例，製備及喷物之噴霧溶 液/懸浮液具有固體含量a)至少50%(w/w)，例如在60至 99.99%(w/w)之間之低分子葡萄聚糖及b)至少0.01% (w/w)，較佳地在0.01至50%(w/w)之間之醫藥活性物質，較 佳地為生物性巨分子，重量％之總和最大為100%(w/w)。根 據一個較佳之具體實施例，製備及噴物之噴霧溶液/懸浮液 具有固體含量a)至少60°/〇(w/w)之低分子葡萄聚糖，較佳地 在60至99.99%(w/w)之間b)製備及喷霧0.01至40%(w/w)之 間之醫藥活性物質，較佳地為生物性巨分子，溶液或懸浮 液重量。/〇之總和最大為l〇〇%(w/w)。 97673.doc -38 - 200529863 符合根據上述本發明之粉* + + 末，根據另一個具體實施例， ;務之溶液/懸浮液額外含有-或多個醫藥可接受之賦形 ㈣及/或-或多個鹽。賦形劑較佳地為胺基酸、肽或·、 糖、聚醇、有機酸之鹽及/或聚合物。 | :佳地喷霧溶液含有除醫藥活性物質及低分子葡萄聚糖 外作為其他賦賴之-或多個胺基酸及/或肽或蛋白質。因 此本發明亦關於製備喷霧乾㈣末之方法，其特色在於喷 霧之溶液/懸浮液含有’相對於固體含#a)至少游如⑼，、 較佳地6〇%(W/W)之低分子葡萄聚糖，b)在!至20%(w/w)之間 之至少-個胺基酸及/或至少—個肽。適合賦形劑之例子包 含醫藥可接受鹽、肽及胺基酸可以在本說明書標題”根據本 發明之粉末”下發現。 ^據另-個較佳具體實施例，f霧溶液亦含有除低分子 葡萄聚糖外之-或多個胺基酸作為進—步之賦形劑。喷霧 之溶液/懸洋液之固體含有a)至少5〇%(w/w)，較佳地⑽至 98.99%(w/w)之間之低分子葡萄聚糖，叫至2〇%(w/句之胺 基酸，0及至少0.01%(w/w)之醫藥純物質，較佳地為肤/ 蛋白質’例如抗體，為有利的。當固體成分總和為最大 100%(w/w)，醫藥活性物質之量較佳地為〇 〇1至最大 3〇%(w/w)。任何一個此領域技藝人士均能夠製備此粉末及 適用此重里使固體成分不超過1 〇〇 %(w/w)。如果醫藥活性物 質量（相對於總固體含量）為例如30%(w/w)及低分子葡萄聚 糖量為60%(w/w)，技藝人士知道其可以加入最大i 〇%(w/w) 之胺基酸至噴霧溶液/懸浮液。 97673.doc -39- 200529863 根據另一個較佳具體實施例，喷霧溶液亦含有除低分子 葡萄聚糖外之異白胺酸作為進一步之賦形劑。喷霧溶液/懸 浮液之固體含有a)至少50%(w/w)，較佳地60至89.99°/〇(w/w) 之間之低分子葡萄聚糖，b)10至20°/〇(w/w)之異白胺酸，c) 及至少0.01%(w/w)之醫藥活性物質，較佳地肽/蛋白質，例 如抗體，為有利的。當固體成分總和為最大100%(w/w)，醫 藥活性物質量較佳地為0.01至最大30%(w/w)。任何一個此 領域技藝人士均能夠製備此粉末及適用此重量使固體成分 不超過100%(w/w)。如果醫藥活性物質量（相對於總固體含 量）為例如30%(w/w)及低分子葡萄聚糖量為60°/〇(w/w)，技藝 人士知道其可以加入最大10%(w/w)之異白胺酸至喷霧溶液 /懸浮液。 根據另一個較佳具體實施例，喷霧溶液亦含有除低分子 葡萄聚糖外之一或多個三肽，較佳地為含異白胺酸之三 肽，最佳地為三異白胺酸。喷霧溶液/懸浮液之固體含量含 有a)至少50%(w/w)，較佳地60至98.99%(w/w)之間之低分子 葡萄聚糖，b)l至19%(w/w)之三肽，較佳地為三異白胺酸， c)至少0.01 %(w/w)之醫藥活性物質，較佳地肽/蛋白質，例 如抗體，為有利的，其固體成分總和為最大1 00%(w/w)。醫 藥活性物質量較佳地為0.01至最大39%(w/w)。任何一個此 領域技藝人士均能夠製備此符合之粉末及適用此重量使固 體成分不超過100%(w/w)。如果醫藥活性物質之量（相對於 總固體含量）為例如30°/〇(w/w)及低分子葡萄聚糖之量為 60%(w/w)，技藝人士知道其可以加入最大10%(w/w)之三 97673.doc -40- 200529863 =乜地為二異白胺酸至噴霧溶液/懸浮液。 為=所及喷霧欲!霧之溶液具有响^ 土為3.5及9，最佳地在4·0及7.8之間。、商Α夕 緩衝液系統為技藝人士已知。 、口之 為緩衝液系統特別有利。 n戈有機鹽作 :型地，每—個蛋白質或肽之最佳賦形劑及蛋白質含量 由貫驗而決定。兔了扑关止 、 所， ”、、 。^末特徵例如分散性及流動性 Iδ %保持較佳的抑制凝集物性f，本發明較佳之調配 可以含有至少一個其他賦形劑。 以傳統噴霧乾燥機完成噴霧，例如Niro A/s(s_叫、 DK)、Biichi Labortechnik 如沾⑺―、ch)等所製之裝 置。噴霧乾燥最佳的條件視符合調配物之每一個個案而 定，且須取決於實驗。使用之氣體典型為空氣，但是惰性 氣體如氮氣或氬氣亦適用。此外，喷霧乾燥溫度，即流入 溫度及流出溫度，依照使用之活性物質溫度敏感性而決 疋，在每一個個案視所使用之安定劑而定。50-200°C為通 常之流入溫度，而流出溫度通常為3(M 50°C。在本發明範 圍内使用流入溫度約17(M85°C，流出溫度約80-100°C。然 而’更高的溫度也是可能，例如流入溫度高達2〇(rc，較佳 地90-185°C，流出溫度高達12〇ι，較佳地9(Μ〇5χ：，視安 疋劑之里而疋。贺霧一般於壓力約2 〇 -1 5 〇 p s i進行，較佳地 於約 30 或 4(M〇〇pSi，例如約 3〇、40、50、60、70、80、90 或 1 00 psi 〇 關於Btichi噴霧機，”進液速率，，通常在〇;^1〇〇ml/min之 97673.doc -41 - 200529863 間，較佳地在⑴丨及川ml/min之間，例如約3 。與此 有3關之水流抽氣機流速為20_40 m3/h，較佳地為3〇_4〇 3例如35 m3/h，喷霧速率為0.3-2.5 m3/h，較佳地約0.67 以A ’已證實特別適合。 。噴務乾秌，舌性物質調配物，較佳地粉末蛋白質調配物， :以視情況給於第二次溫和地乾燥(後乾燥)。目的為了達成 凋配物中少於2%(w/w)之一致殘餘水含量，且因而同時改善 /物冑之安定性及改善粉末性質，例如玻璃轉換溫度、 流動性及分散性。後乾燥方法條件必須選擇致使活性物質 之凝集物形成不會顯著增加。此特別應用於生物性巨分子 …用例如肽/蛋白貝之使用。較佳地在乾燥條件下（於低 相對屋度）製備、處理及儲存喷霧乾燥粉末活性物質調配 物後乾‘方法使其可能在相對高渥度下製備及倒出粉 末。令人驚訝地，本發明相關之賦形劑甚至在非較佳處理 及儲存條件下安定較佳調配物中之蛋白質。 噴霧乾燥之乾燥粉末調配物之性質 於本發明範圍内製備之乾燥粉末蛋白質調配物具有殘餘 水分含量少於丨5%(w/w)，通常少於丨〇%(w/w) ’較佳地少於 6%(w/w)。更佳地噴霧乾燥粉末蛋白質調配物具有殘餘水分 含量少於3%(w/w)，最佳地少於2%(w/w)’最佳地在〇·2及 /〇(w/w)之間。具有低殘餘水分含量之調配物一般在打開 包裝及儲存時呈現改善之安定性。此外，根據本發明之乾 燥粉末蛋白質調配物顯著地具吸濕性，即其具有從環境吸 收夂刀之傾向為了避免此狀況，此類粉末一般包裝於容 97673.doc •42· 200529863 器中，例如可排除水分之塑膠軍包裝。 此處所述賦形劑之安定效# 謹蛋白皙$ % 贺硌乾燥及保存時能夠保 口又蛋白貝免於極端之壓力。缺 + W ^ Ά? ^ ^ ^ ^ 賦形別k賀霧乾燥純蛋白 貝凋配物形成相當大程度之 ^ 前*颅士 η 定集物。方法相關因素如埶、 男力昼力及於空氣/水介面 $ …、 凝隹物^ & y 在嘴務乾燥（最高至約3·7〇/〇 隹^由二I之後乾燥（最高至約4·〇%凝集物）期間導致凝 由於缺少蛋白質之安定水合套（hyd瞻叫，在儲 :广生大量之凝集物形成(從約118至約㈣。之凝集 二：純蛋白質之調配物，本發明之較佳喷霧乾燥調配物 贺霧乾燥後減少凝集物形成並於不同儲存條件下保 持非常低之量。由於噴霧乾燥，在較佳之調配物，僅形成 社1至約1.4%之凝集物，相對於純蛋白質調配物之約4戲 之凝集物。較佳之調配物係為接受第二次溫和乾燥者，顯 示沒有增加凝集物形成之傾向。在特別據挑戰性之儲存條 件下(㈣，相對渔度75%)，較佳之調配物(〜51至〜ι〇ι% 之凝集物）清冑地優於純蛋白質調配物（約189%之凝集物） 及以海藻糖為賦形劑之類似參考調配物。 即使在特別不安定條件下相對地短暫儲存（4〇。〇、相對澄 度75❶/。-星期）’對於併人之蛋白質具有顯著安定效果之調 配物，亦能在很溫和之標準儲存條件下長期安定蛋白質（例 如在乾燥下約25°C —年）。 藉由變更噴霧乾燥條件，亦能製備粉末，其較佳地具有 小於20 μηι之顆粒大小（MMD)，較佳地小於1〇 。根據一 97673.doc -43- 200529863 個特疋較佳之具體實施例，根據本發明之顆粒具有小於7 μπι之平均顆粒大小，較佳地小於5 μηι。特佳為具有平均顆 粒大小小於4 μΐΏ之顆粒，更佳為小於3·5 μιη。一般而言， 其亦可能製備具有平均顆粒大小G1_5 μη1之難，較佳地 〇·2-4 。在另一個具體實施例，非適於呼吸之顆粒如乳 糖其具有至少40 之顆粒大小，較佳地在40及200 μηι 之間’與符合之粉末混合。

除平均顆粒大小（MMD)之外，吸入性實質上取決於平均 氣動粒徑（MMAD)。根據本發明之顆粒較佳地具有小於^ 〇 μπι之MMAD。更佳地小於7·5 μιη。特別有利的為粉末由具 有小於5,5 μιη MMAD之顆粒所組成，較佳地小於5 μιη，甚 至更佳地小於4·5 μηι。實施方式中所述之粉末可以以結合 根據本务明之最佳喷霧乾燥條件及賦形劑之選擇及濃度製 備符合之顆粒大小。特別是加入胺基酸及/或三肽導致改善 ^粒表現，具有小於7·5ΜΜΑ〇之吸入性顆粒比例增加，較 佳地小於5.5。藉由加人異白胺酸或三異白胺酸可以製備 PF超過3 〇 /〇之吸入性粉末，較佳地超過4〇，更佳地超過 50’甚至更佳地超過55g/。（見實施方式）。 根據本發明之粉末其特色亦在於至少45。(：之玻璃轉換溫 度。，較佳地至少5(TC，更佳地至少饥，甚至更佳地至少 60 C。特佳之粉末具有至少65。〇之玻璃轉換溫度。一般而 吕。，根據本發明《含葡萄聚糖粉末之玻璃轉換溫度為60至 C因此，本發明亦關於粉末，較佳地為噴霧乾燥粉末， 其含有醫藥活性物質及低分子葡萄聚糖，纟中玻璃轉換溫 97673.doc -44- 200529863 度為45C，而且，較佳地在45&7(Γ(：之間。根據另一個較 佳具體實施例，玻璃轉換溫度為55它或以上，較佳地在Μ 及70°C之間。 噴霧乾燥粉末之使用 根據本發明之粉末適合於製備醫藥組合物，較佳地為製 備吸入用藥劑。 根據本發明之粉末之施用 基本上’根據本發明之粉末製備可以使用所謂乾粉吸入 器直接施用乾燥粉末或使用所謂喷霧機以氣霧劑形式重新 構成後施用。根據本發明之可吸入性粉末亦可以先前技術 已知之吸入器施用。 根據本發明之可吸入性粉末亦可以例如，使用從美國專 利457063 0A所述計量艙室所供應之給予單一劑量之吸入器 方法，或以德國專利36 25 685A所述之其他方法施用。較 佳地，根據本發明之吸入性粉末係裝入於膠囊中（以製備所 渭之吸入劑），其使用於例如WO 94/28958所述之吸入器。 適合吸入器之其他實例可見於尤其是美國專利 5,458，135 ;美國專利 5,785,〇49或 w〇 〇1/〇〇263。其他適合 之吸入器從WO 97/41031 ;美國專利3,9〇6,95〇及美國專利 4,〇13,075得知。用於乾燥粉末製備之其他分散吸入器描述 於歐洲專利129 985 ;歐洲專利472 598 ;歐洲專利467 172 及美國專利5,522,385。 根據本發明之吸入性粉末可以例如使用已知名稱

Turbuhalei^AstraZeneca LP)或以例如歐洲專利237 5〇7A 97673.doc •45· 200529863 揭示之吸入器施用。其他適合之吸入器為R〇tahaler@或 Discus®(均為 GlaxoSmithKline Corp.所製造）、Spir〇TM吸入 器（Dura Pharmaceuticals)及 Spinhaler®(Fiscon)。 一個施用根據本發明之吸入劑醫藥組合物之特佳吸入器 顯示於圖12。此從膠囊吸入粉末醫藥組合物之吸入器 (Handyhaler)之特徵在於一個外蓋1含有兩個視窗2、一個層 板3，其中有氣體流入口及其具有渡篩蓋子*固定之遽篩$， 一個連接於層板3之吸入艙室6，其上有裝備二個敏銳之梢 拴7及可動計數器於彈簧8之壓鍵9,以及經由軸1〇連接於外 殼1、層板3及蓋子11之咬嘴12，使其可以輕彈開或關閉， 以及調整流動阻力之氣體通過孔13。 如果根據本發明之吸入性粉末如上述較佳用法裝填入膠 囊中（吸入劑）’裝填入每一個膠囊之量應為1至3 〇毫克。 根據本發明之粉末亦可以以含吸入性氣霧劑之推進器施 用。為此，根據本發明之粉末於水溶液中重新構成。適合 之〉谷液為此領域已知。例如，於pH 3-11，較佳地pH 4-9之 生理溶液重新構成粉末為有利的。於pH 5·5-7·8之水溶液重 新構成粉末特別有利。重新構成根據本發明之粉末之溶液 亦可含有安定劑、乳化劑、界面活性劑或水溶性有機溶劑 形式之進一步之賦形劑。符合之物質為技藝人士所已知且 敘述於例如 Bauer，Lehrbuch der Pharmazeutischen

Technologie ’ Wissenschaftl· Verlagsgesellschaft mbH， Stuttgart，178_184; Adler，1998，Journal of Pharmaceutical Sciences，88(2)，199-208 o 97673.doc -46- 200529863 以根據本發明重新構成粉末製備之符合之吸入性氣霧劑 亦為本發明之主題。 可從先前技術得知可以用於製備根據本發明吸入氣霧劑 之推進亂體。適合之推進氣體選自於碳氫化合物中，例如 正丙烷、正丁烷或異丁烷及鹵化碳氫化合物如較佳地甲 烧、乙烧、丙烧、丁烧、環丙烷或環丁烧之氯化及氣化衍 生物性。以上提及之推進氣體可以獨立或以其混合物使 用。特佳之推進氣體為選自於TGU、TG12、 四乱乙烧）、10227(1,1,1,2,3,3,34氟丙烷）及其混合物之鹵 化烷衍生物性，推進氣體TG134a、丁 G227及其混合物為佳。 含有根據本發明推進氣體之吸入氣霧劑可以含有高達 5%(w/w)之活性物質。根據本發明之氣霧劑含有，例如， 0.002至 5 wt，％、0.01 至 3 wt:%、〇 〇15至2 、〇」至2 wt·-%、〇·5至2 wt，％或〇·5至1 wt，％之醫藥活性物質。具有 此範圍活性物質濃度之吸入性氣霧劑可以藉由在符合溶劑 里中製備根據本發明粉末之控制重新構成。 根據本發明上述提及之推進器驅動吸入氣霧劑，其可以 使用此領域所知之吸入器（MDIs=定量吸入器，metered如化 inhaler)施用。此處可提供之參考為ν6ιη〇Ηη@(ν_〇ΐίη

Pharmacy)或美國專利5,32,094或美國專利5,672,58i所述之 吸入器。因此，在另一方面，本發明係關於前述推進器驅 動形式之醫藥組合物結合一或多個適合施用這些氣霧劑之 吸入器。此外，本發明係關於吸入器，其特徵在於其含有 根據本發明上述之含推進氣體之氣霧劑。 97673.doc -47- 200529863 人本發明«於切’其安袭有適合之閱門可以使用於適 D ^'其3有上述根據本發明之含推進氣體之吸 入氣務劑之一。適合之卡ΙΨ 丨、/人士 #认 卡£及u s有根據本發明之推進氣 體忒填入卡匣之方法可從先前技術得知。 根據本發明之粉末亦可以重新構成於無推進器之吸入性 =或懸浮液。符合之無推進器之吸人性溶液含有例如水 “精’㈣地為乙醇溶劑’視情況地為混合水溶劑之乙 醇溶劑。若為水/乙醇溶劑混合物，乙醇相較於水之相對比 例不限制但是最大值較佳地為高達乙醇容量之百分之七 十’更特定地為高達容量之百分之六十。剩餘之容量以水 補足。上述之共溶劑及/或其他賦形劑亦可以加人至根據本 發明之無推進器吸人性溶液。較佳之共溶劑為含有經基基 團或其他極性基團者，例如酒精·料地為異丙基酒精、乙 -酵-特定地為丙二醇、聚乙二醇、聚丙二醇、乙二醇醚、 甘油、聚氧乙醚酒精及聚氧乙醚之酸醋。在文中賦形劑及 添加劑之術語係指任合醫藥可接受物質，其非活性物質， 但其可以與活性物質或物質調配於藥理適合之溶劑以改善 活性調配物之品質特性。較佳地’這些物質不具藥理效用 或者’與所要治療結合後’沒有可以看到的或至少沒有不 要的藥理效果。賦形劑及添加劑包含，除上述之外，例如， 界面活性劑如大豆印鱗月旨、油酸…醇醋(—η ester) ’如聚山梨醇酯、聚乙烯吡咯烷酮、其它安定劑、錯 合劑、抗氧化劑及/或防腐劑，其保證或延長完成之醫㈣ 配物、調味劑、維他命及/或其他此領域已知之添加劑之保 97673.doc •48- 200529863 存期。添加物亦包括筚踩可4 仰呆理可接受鹽例如氯化鈉作為等 劑。較佳之賦形劑包括括氧儿# 氣化劑例如抗壞血酸，例如，其 條件為尚未使用於調整pH、錐从人A a ·人 /、 PH維他命A、維他命E、生育酚及 類似維他命及身體内產生之絡μ人= 一士 玍之維他命原。防腐劑可以用於保 護調配物免於致病原之污染。適合之防腐劑為此領域已 知’特定為氣化十六烷基啶、氣化苯二甲羥銨或笨甲酸或 苯曱酸鹽例如從先前技術已知濃度之苯甲酸鈉。上述所提 之防腐劑較佳存在於至高50 mg/1〇〇 ml之濃度，更佳地在$ 及20毫克/100毫升之間。因此，本發明亦包含無推進器之 吸入性氣霧劑，其以根據本發明重新構成之粉末製備。 施用根據本發明之無推進器吸入性溶液特別使用之吸入 器種類，其能夠在幾秒内噴霧治療劑量之液體調配物，以 產生適合治療性吸入之氣霧劑。在本發明之範圍内，較佳 之吸入器為少於100 μΐ之量者，較佳地少於5〇 ^，更佳地 在10及30 4之間之活性物質，其能夠在一次喷霧動作形成 平均顆粒大小小於20 μηι，較佳地小於1〇 氣霧劑，致 使氣霧劑之吸入部分符合治療有效量。 此類無推進器裝置給予定量之供吸入液體醫藥組合物描 述於例如國際專利申請案WO 91/14468及WO 97/12687(參 見特別為圖6a及6b)。在本發明範圍内特別對包含相關敘述 之WO 97/12687對應之圖6a及6b作為參考資料。在彼所述之 喷霧器（裝置）亦知為名稱1^8卩丨11^©(3(^111411£61'11^611^111 Pharma)。因為其圓柱形狀及小於9至15公分長及2至4公分 寬之便利大小，此裝置可以讓病人隨時攜帶。霧化器使用 97673.doc • 49 - 200529863 通過小噴嘴之高壓噴 性氣霧劑。 務特定容量之醫藥調配物 以產生吸入 制=化器本質上由上蓋部分'幫浦蓋、嗔嘴、鎖機 _、㈣及儲存容器所組成，其特色在於 帛浦皿固疋於上蓋部分且包括-端為有喷嘴及喷嘴裝置 之喷嘴體， 具有閥門體之中空活塞， 且其位於上蓋部分， 動力啟動凸緣，中空活塞固定於其中 位於上蓋部分之上鎖機制， 含有彈簧之彈簧蓋 部分， 其以旋轉軸承方式旋轉架置於上蓋 -下蓋部分，其以軸向安裝於彈簧蓋。 具有閥門體之中空活塞符合於胸97/12687揭示之裝 置。其部分突出於幫浦蓋之汽缸’且於汽缸内部為軸向移 動性。尤其是圖1至4 ’特別為圖3，及說明書之相關部分作 為*考資料曰彈簧啟動時，具閥門體之中空活塞發揮5 至60 Mpa(約50至6〇〇巴），較佳地1〇至6〇 (約1〇〇至6〇〇 巴）其高壓端之壓力於液體’計量之活性物f溶液上。容量 10至5〇μ1為佳，容量至20μ1為特佳，而每次噴霧容量15 Μ為特佳。 閥門體較佳地架置於面對閥門體之中空活塞末端。 噴嘴體中之噴嘴較佳地為微構造，即以微技術製造。微 構造噴嘴體於例如WO-94/07607揭示；在此作為此說明書之 多考 > 料，特別為其揭示之圖1及相關敛述；噴嘴體由例如 97673.doc -50- 200529863 緊岔接合一起之兩片玻璃及/或矽所組成，其中至少一個具 有-或多個微構造之管道，其連接喷嘴之進口端至喷嘴出 口端。在喷嘴出口端有至少_個圓形或非圓形之開口，其 為2至10 μΐΏ深，5至15叫寬，深度較佳地為七5至ο叫， 而長度較佳地為7至9 μηι。在複數之噴嘴開口，較佳地為二 個喷嘴體中噴嘴之噴霧方向可以互相平行延伸或可以於 喷嘴開口方向互相地傾斜。在具有至少兩個噴嘴開口之喷 嘴體，再在開口端噴霧方向可以互相傾斜2〇至16〇。之角 度，較佳地60至150。，最佳地8〇至1〇〇。。喷嘴開口較佳之 排列間隔為10至200陣，更佳地為呢！⑼_，最佳地為 3〇至70陣。50 μιη之間隔為最佳。 噴霧方向將因此在喷嘴開口附近相交。 液體醫藥製備物壓出喷嘴體之進入壓力高達6〇〇巴，較佳 地200至3〇〇巴’其通過喷嘴開口霧化成吸入性氣霧劑。較 佳之氣霧劑顆粒或小滴大小至高達2〇 μιη，較佳地3至1〇 μηι。 上鎖機制含有彈簧，較佳地為圓筒狀螺旋壓縮彈簧，作 為儲存機械能量。作用於動力啟動凸緣之彈簧作為啟動構 件，其移動取決於鎖構件之位置。動力啟動凸緣之移動以 上方及下方停止精確地限制。彈簧較佳地藉由外部轉矩經 由動力增加齒輪加以偏壓，例如螺旋驅動齒輪，外部轉矩 之產生為上蓋部分對下蓋部分之彈簧蓋旋轉。在此，上蓋 部分及動力啟動凸緣具有單一或多重V形齒輪。 具有喷合鎖表面之鎖裝置環狀排列於動力啟動凸緣周 97673.doc 200529863 圍。其由，例如，塑膠或金屬環組成，其天性完全彈性地 可變形。此環排列於霧化器軸右角之平面，彈簧偏壓後， 鎖構件之鎖表面移至動力啟動凸緣之路徑，避免彈簧鬆 開。鎖構件以按鍵方式啟動。啟動按鍵連接或接合於鎖構 件。為啟動鎖機制，啟動按鍵對環形平面平行移動，較佳 地進入喷霧器；導致可變形的環在環形平面變形。詳細鎖 機制之構造在WO 97/20590。 將下蓋部分以彈簣蓋軸向壓，覆蓋底座、軸之傳動襄置 及液體儲存容器。 當啟動霧化器，上蓋部分相對於下蓋部分旋轉，下蓋告 分帶者彈簧蓋。彈簧因此壓縮且以螺旋驅動齒輪方式加c ’鎖機制自㈣合。旋轉角度較佳地為360度之全數与 邛刀如180度。對彈簧施以偏壓之同時，上蓋部分之動犬 啟動部分沿著所給距離移動，中空活塞撤回幫浦蓋之圓貨 中’因此有些㈣從儲存容W出並進人噴嘴前方

艙室。 2要，，午乡含有欲霧化液體之可置換儲存容器可以一値 接者㈣人霧化11接續使用。儲存容H含有根據本發明 所製備之水狀氣霧劑。 矛序以鐵和地壓啟動按鍵開始。因此鎖機制開啟鸯 :啟動構件之路徑。施偏壓之彈簧將活塞推入幫浦蓋之匱 同。液體以霧化形式離開霧化器之噴嘴。 更评細之構造揭示於PCT申請案WO 97/12683及W( 97/20590，其内容在此作為參考資料。 97673.doc -52- 200529863 霧化器（喷霧器）之元件以適合其目的之材料製造。喷霧 器之外殼及，若操作允許，連同其他部分較佳地以塑膠製 造，例如以射出成形。為醫學目的，使用生理安全材質。 WO 97/12687之圖6a/b，包含再次在此作為參考資料之相 關敘述，顯示符合之霧化器（Respimat®)。其特別適合施用 無推進器之根據本發明之吸入性氣霧劑。 WO 97/12687之圖6a顯示在彈簧緊繃下之喷霧器之縱向 切面，WO 97/12687之圖6b顯示彈簧鬆弛之霧化器之縱向切 面。上蓋部分（51)含有幫浦蓋（52)，其末端為霧化器喷嘴裝 置支架（53)。支架上為喷嘴體（54)及濾篩（55)。固定於鎖鉗 緊機制動力啟動凸緣（56)之中空活塞（57)部分突出於幫浦 蓋之圓筒。在其末端中空活塞帶著閥門體（58)。中空活塞以 襯墊（59)密封。上蓋部分内部為終止處（60)，當彈簧鬆弛時 動力啟動凸緣在此停止。位於動力啟動凸緣上為終止處 (61)，當彈簧緊縮時動力啟動凸緣在此停止。彈簧緊縮後， 鎖構件（62)於上蓋部分之終止處（61)及支架（63)間滑動。啟 動按鍵（64)連接於鎖構件。上蓋部分結束於咬嘴（65)，以可 移動保護蓋（66)關住。有壓縮彈簧（68)之彈簧蓋（67)以輕接 架（69)旋轉裝置於上蓋部分，且為旋轉軸承。下蓋部分（70) 被彈簧蓋所推。彈簧蓋内部為可置換之欲霧化液體（72)之儲 存容器（71)。儲存容器以塞子（73)關住，透過它中空活塞突 入儲存容器内，將其末端浸入液體（活性物質溶液之供應）。 機械計數器之軸（74)裝置於彈簧蓋外面。驅動活塞（75)位於 面向上蓋部分之軸之末端。軸上為滾球（76)。 97673.doc -53- 200529863 如果根據本發明之調配物使用上述（Respimat®)方法噴 霧，所有吸入器（一次喷霧）驅動喷出量之至少97%，較佳地 至少98%，應符合定義之量，其具有不超過25°/。，較佳地20% 之耐受量範圍。較佳地，在5及30 mg之間，更佳地在5及20 mg之間之調配物以每一次喷霧定義量傳送。 然而，根據本發明之調配物亦可以使用上述以外之吸入 器喷霧，例如高速氣流吸入器或其他常備之霧化器。

因此，在另一方面，本發明係關於在上文中描述無推進 器吸入性溶液或懸浮液之醫藥組合物，結合適合施用這些 调配物之裝置，較佳地結合Respimat®。較佳地本發明係針 對無推進器吸入性溶液或懸浮液，其含有根據本發明粉末 之一，結合已知Respimat®裝置。此外本發明係關於吸入用 之上述裝置，較佳地Respimat⑧，其特徵在於其含有上述根 據本發明之無推進器吸入性溶液或懸浮液。

根據本發明，含有在此敘述之根據本發明粉末之一之吸 入性溶液於單一製劑中為佳。 根據本發明之無推進器吸入性溶液或 劑或立即可用之無菌吸人性溶液或懸浮液，及設計^ =spimat@之上述溶液及懸浮液之形式。立即可用之調配 :可以從濃縮劑製得，例如，藉由添加等張食鹽溶液， =施用^些溶液之裝置併用，其特徵在於此裝置為能 ( 丨糟由超音波或凡裘 劑。η '、理或其他方法之壓縮空氣方法產生吸入性氣 97673.doc -54· 200529863 因此，在另一方面，本發明係關於前述無推進器吸入溶 液或懸浮液形式之醫藥組合物，其採用濃縮劑形式或立即 可用之無菌調配劑，結合適合施用這些溶液之裝置，其特 徵在於此裝置為能量操作獨立型或攜帶型之喷霧器，其藉 由超音波或凡裘力原理或其他方法之壓縮空氣方法產生吸 入性氣霧劑。 其他吸入重新構成氣霧劑之適合喷霧器為AERx™ (Aradigm) 、Ultravent®(Mallinkrodt) Sl Aconll®(Maquest Medical Products) o 【實施方式】 設備及方法 材料： 使用具有分子量約148 kDa之人類化單株抗體作為 IgGl。此抗體從鼠類抗體所衍生，其中鼠類抗體之互補決 定區已轉移至人類免疫球蛋白結構。產生具有95%人類内 容及5%鼠類内容之嵌合抗體。抗體以鼠類骨髓癌細胞株表 現。細胞以切向流式微濾法（Tangential Flow Microfiltration) 移除，無細胞溶液以各種層析方法純化。其他步驟包含核 酸酶處理，於低pH及奈米過濾法（nanofiltration)處理。含有 抗體之大量溶液含有25 mM組胺酸及1.6 mM甘胺酸作為緩 衝液，而且以透析法濃縮至約100毫克/毫升，以製備喷霧 乾燥用之溶液。製備噴霧溶液之大量溶液含有0.8%凝集 物。完成之藥劑可以儲存於2-8°C至少兩年。具有平均分子 量約1000 Da之低分子葡萄聚糖1或葡萄聚糖1 000從瑞典 97673.doc -55- 200529863

Amersham Biosciences AB，Uppsalla取得。海藻糖從德國 Georg Breuer GmbH取得。L-異白胺酸從德國 Sigma-Aldrich Chemie GmbH取得。三異白胺酸從德國Iris Biotech GmbH 取得。135500 U/毫克之雞白蛋白溶菌酶（lysozyme)從德國 SERVA Electrophoresis GmbH取得。合成缝魚降血妈素 (calcitonin)從德國 Biotrend Chemikalien GmbH取得。 布氏（Biichi)B-290喷霧乾燥 使用 Messrs Biichi Labortechnik(AG，CH)製造之布氏迷 你喷霧乾燥機B-290完成喷霧乾燥。調配物之喷霧乾燥主要 以’’喷霧乾燥手冊”第5版，K. Masters、John Wiley及Sons Inc.，NY，NY(1991)所述進行： 喷霧乾燥機由加熱系統、過濾器、抽氣機、乾燥塔、旋 風機、測量流入及流出溫度之溫度感應器及收集器所組 成。欲喷霧之溶液以續動幫浦方式哪入二物質（two-substances)喷嘴。 在那裡 ，使 用壓縮 空氣將 溶液霧 化成小 滴。使用加熱空氣完成喷霧塔中之乾燥，加熱空氣係藉抽 氣機方式以直接氣流方法抽取通過喷霧塔。在通過旋風機 之後之收集器收集產物。 使用兩種不同之旋風機： •旋風機I ·布氏旋風機 （產品編號41 8 9) •旋風機II :布氏高效氣旋旋風機 （產品編號46369) 喷霧溶液之固體含量為50 ml中10%(w/v)，300 ml中 3.3 3〇/〇(w/v)，600 ml 中 3.33%(w/v)。流入溫度約 170至 1 85cC， 進液速率約3 ml/min，抽氣機流速為35 m3/h，喷霧器流速 97673.doc -56- 200529863 為0.67 m3/h。產生流出温度約80-95°C。 X光繞射法（廣角X光繞射法（WAXS)): 為確定乾燥樣品之結晶形，以Seifert X光繞射儀XRD 3000 TT(Messrs Seifert，Ahrensburg，DE)於 22°C 之控制溫 度之艙室研究樣品。X光管銅陽極，具有λ=0.15418 mm之 Cu-Κα輻射（鎳主要過濾）於40 kV陽極電壓及30 mA電流強 度下操作。樣品盤置於此裝置後，在每一角度2秒測量時 間，掃描速率2Θ = 0·05°，從5至40°範圍測量樣品。 以 SC ΙΟΟΟλΜ貞測器上之ScanX-Rayflex應用，3.07版XRD 3000(掃描）設備或Rayflex 2.1版，1996(分析）取得粉末繞射 圖。 大小排除層析（Size exclusion chromatography，SEC- HPLC) a) 溶解之IgGl蛋白質凝集物 使用SEC-HPLC定量重新構成粉末中之IgGl蛋白質凝集 物。以Messrs Agilent 製造之 HP1090 進行 SEC-HPLC。用於 分離之管柱為 Messrs Tosoh Biosep(Tosoh Bioscience， Stuttgart，DE)製造之 TSK3000SWXL 管柱（300 χ 7·8 mm)。 使用之洗提液為由0.1 M磷酸氫二鈉二水合物、0.1 M硫酸 鈉所組成之緩衝液，將其去水並以85%鄰-磷酸調整至pH 6.8。放入之樣品量為25 μΐ，2-10 mg/ml之蛋白質濃度。使 用Messrs Agilent製造之兩極真空管陣列偵測器於280 nm偵 測蛋白質。使用Agilent製造之Chemstation軟體評估層析圖 形。 b) 溶解之降血鈣素蛋白質凝集物 97673.doc -57- 200529863 為定量重新構成粉末中之降血鈣素蛋白質凝集物，進行 SEC-HPLC。使用 Messrs Agilent 製造之 HP1 1〇〇 進行 SEC-HPLC。用於分離之管柱為Messrs Tosoh BioSep(Tos〇h Bioscience，Stuttgart，DE)製造之 TSK3 00 OS WXL 管柱（300 x 7·8 mm)。使用之洗提液為由pH約為6之0_25M硫酸鈉所組成 之緩衝液（Windisch等人，1997)。放入之樣品量為20 μ1， 0.5-2 mg/ml之蛋白質濃度。使用Messrs Agilent製造之UV 偵測器於210 nm偵測蛋白質。使用Agilent製造之 Chemstation軟體評估層析圖形。 c)溶菌酶殘餘單體含量 為定量重新構成溶菌酶調配物中之溶菌酶殘餘單體含 量，進行修飾之 SEC-HPLC (van de Weert，2000)。使用 Messrs Agilent製造之HP 11 00進行SEC-HPLC。用於分離之管柱為 Messrs Tosoh Biosep(Tosoh Bioscience，Stuttgart，DE)製造 之TSK2000SWXL管柱（300 x 7.8 mm)。使用之洗提液為由 0.05 Μ破酸氫二鈉二水合物、0_2 Μ氣化鈉所組成之緩衝 液，以85%鄰-磷酸調整至pH 7.0。放入之樣品量為25 μΐ， 2-10 mg/ml之蛋白質濃度。使用Messrs Agilent製造之UV偵 測器於280 nm僧測蛋白質。使用Agilent製造之Chemstation 軟體評估層析圖形。 為評估調配物，以下列方法定量剩餘之溶解單體。首先， 使用濃度為2.5 mg/ml、5.0 mg/ml及10 mg/ml之溶菌酶標準 溶液劃校正線。單體尖峰之AUC以相關於對應研究之標準 溶液中溶菌酶濃度來研究。 97673.doc -58 - 200529863 使用校正線計算所研究之各種溶菌酶調配物之殘餘單體 含量。調配物之殘餘單體含量愈高，蛋白質安定性愈佳。 測定顆粒大小（MMD) 使用 Messrs Sympatech Gmbh(Clausthal-Zellerfeld ’ DE) 製造之Sympatech Helos測定顆粒之質量中位數直徑或平均 顆粒大小。測量原則基於雷射繞射，使用氦氖雷射。以氣 體壓力2巴分散1-3 mg之粉末，通過傅立葉鏡（Fourier lens， 50 mm)前之平行雷射束。使用夫琅和費模式（Fraunhofer model)評估顆粒大小分布。對每一顆粒進行測量。 質量中位數直徑（MMAD)及微細顆粒級分（FPF) 為測量，12-18 mg粉末轉移至硬明膠膠囊中（3號大小）並 置於 HandiHaler(Messrs Boehringer Ingelheim製造之粉末吸 入器）。使用轉接器將HandiHaler連接至測量裝置之衝擊器 (impactor)流入口之USP EP/入口，粉末以引入時間6· 1 5秒’ 39.0 Ι/min之速率傳送。空氣產生量以外接控制牆方式控 制。每一種粉末至少測量3個膠囊。 使用 Messrs TSI Inc.，MN，USA之 APS 3321與衝擊器流 入口 33 06連接同時測量氣動粒徑（MMAD)，藉由使用單步驟 衝擊器測量飛行時間及微細顆粒級分（FPF)(有效之區分粒 徑（Cut Off Diameter)在 3 9 L/min : 5 ·0 μπι)。經由 EP/USP入 口或樣品吸入口排出後，粉末到達細微毛細管，於此在等 動力條件下可以移除0.2%之粉末以測量飛行時間。毛細管 通過兩個雷射束後測量飛行時間，其偵測類似於光障礙之 一定距離之飛行時間。因此，得到一數字分布，其轉換為 97673.doc •59- 200529863 質量分布且轉換為質量中位數氣動粒徑（MMAD)。 剩餘99.8%通過毛細管之粉末族群使用單步驟衝擊器分 離。級分大於5.0 μιη因為質量慣性沉澱於衝擊器之擋版。 微細顆粒級分（FPF)跟隨著氣流而最終地沉殿在深的過濾、 器上。微細顆粒級分以重量測定法測定。微細顆粒級分由 相對於使用粉末總量之沉澱於過濾器之粉末量計算而來， 即，每一膠囊秤出之粉末。 殘餘水含量 乾燥產物之殘餘水含量以電量計滴定法測定（Metrohm 737 KF Coulometer with 703 titration stand 9 Germany) 〇 為 測量，於甲醇中溶解或分散粉末（Hydranal-Methanol dry， VWR/Merck Eurolab)。Metrohm 電量計之測量溶液 (Hydranal-Coulomat solution，VWR/Merck Eurolab)於測量 開始時調整，即，測量溶液校正至零水含量。樣品注入滴 定槽並測量。 測定安定性 在噴霧乾燥後研究粉末之不同安定性。在IgGl及降血鈣 素之例子，使用蛋白質凝集物之百分比量於測量調配物之 安定性。在溶菌酶之例子，使用殘餘單體含量之百分比量 於測量調配物之安定性。本發明所描述之創新賦形劑與純 蛋白質調配物比較，且視情況地以類似之海藻糖調配物作 為參考。偵測任何凝集物之分析以有效之有UV偵測器之大 小排除層析法（SEC-HPLC)進行。為此，前處理之粉末首先於 純水中重新構成（pH 6至8)。研究所選擇之調配物於約40°C及 97673.doc •60· 200529863 約75/。相對溼度（4〇1，75% rh)在打開之玻璃瓶開放儲存一 ·. 星期後之安定性（強制儲存安定性）。 ， 選擇之調配物在噴霧乾燥及真空乾燥後，在密封玻璃瓶 氮氣下儲存於2-8°C、25它及40°C。在一、三、六及十二個 月後移走調配物並測試其安定性（超過一年之安定性）。 實例1 噴霧乾燥10%(w/v)IgGl調配物 /辰度、、々109 mg/ml之純igG 1，調配於甘胺酸組胺酸緩衝 籲 液’PH 6(見材料），以去礦物質水（1^約7.5)稀釋至i〇〇 之3里，並在上述沒有任何其他賦形劑之下使用旋風機工噴 霧乾燥。溶液之容量為50 ml。凝集物含量依上所述研究。 在強制儲存後，重新構成粉末之溶液含有約18·9%之凝集 物。 喷霧乾燥含有9%(w/v)海藻糖1%(w/v)IgG1之調配物 4.5 g海藻糖溶解於約4〇 ml去礦物質水中7·5)。接 著，加入濃度約109 mg/ml之約（6 ml純IgGl，調配於甘胺鲁 酸組胺酸緩衝液pH 6(見材料）且以去礦物質水（pH約7·5)稀 釋至50 ml之容量。所得到之溶液含有約9%(〜/4之賦形劑 或基質及l%(w/v)之蛋白質，如上所述使用旋風機〗喷霧乾 燥。凝集物含量依上所述研究。在強制健存後，重新構成 粉末之溶液含有約12·6%之凝集物。 喷務乾無含有9°/〇(w/v)葡萄聚糖⑽◦ 1%(w/v)IgG1i調配物 4.5 g葡萄聚糖1〇〇〇溶解於約4〇 ml去礦物質水中（卩^^約 7·5)。接著’加入濃度約1〇9 mg/ml之約4·6 ml純IgG卜調配 97673.doc -61 · 200529863 於甘胺酸組胺酸緩衝液pH 6(見材料）且以去礦物質水（pH約 7· 5)稀釋至50 ml之容量。所得到之溶液含有約9%(w/v)之賦 形劑或基質及l%(w/v)蛋白質，如上所述使用旋風機1喷霧 乾燥。凝集物含量依上所述研究。得到以下凝集物含量用 於儲存安定性。在強制儲存後，重新構成粉末之溶液含有 約5_1%之凝集物。 喷霧乾燥含有2.00%(w/v)葡萄聚糖〗_ 133%~~)1§(}1之調配物 3·〇 g葡萄聚糖10()0溶解於約12〇 ml去礦物質水中約 7·5)。接著，加入濃度約 ι〇2·8 mg/mi之約 19·5 mb4!gG1， 調配於甘胺酸組胺酸緩衝液pH 6(見材料）且以去礦物質水 (pH約7·5)稀釋至150 ml之容量。所得到之溶液含有約 2.0%(w/v)之賦形劑或基質及133%(w/v)蛋白質，如上所述 使用旋風機II噴霧乾燥。凝集物含量依上所述研究。得到以 下凝集物含量用於儲存安定性。在強制儲存後，重新構成 粉末之溶液含有約11 · 1 %之凝集物。 實例2 喷霧乾燥含有8%(w/v)海藻糖i%(w/v)l_異白胺酸 l%(w/v)IgGl之調配物 4 g海藻糖及0.5 g L·異白胺酸溶解於超音波槽之約μ 去礦物質水中（pH約7.5)。接著，加入濃度約1〇9mg/w之= 4.6 1111純1§〇1，調配於甘胺酸組胺酸緩衝液1)116(見材料）且 以去礦物質水（pH約7.5)稀釋至50 ml之容量。所俨μ /且 里所侍到之溶液 含有約9%(w/v)之賦形劑或基質&1%(w/v)蛋白質，如 述使用旋風機I噴霧乾燥。凝集物含量依上所述研究。 97673.doc -62- 200529863 以下凝集物含量用於儲存安定性。在強制儲存後，重新構 成粉末之溶液含有約22.2%之凝集物。 喷霧乾燥含有8%(w/v)葡萄聚糖1 000 l%(w/v)L-異白胺酸 l°/〇(w/v)IgGl 之調配物 4 g葡萄聚糖100()及0.5 g L-異白胺酸溶解於超音波槽之約 40 ml去礦物質水中（pH約7.5)。接著，加入濃度約109 mg/ml 之約4.6 ml純IgGl，調配於甘胺酸組胺酸缓衝液pH 6(見材 料）且以去礦物質水（pH約7.5)稀釋至50 ml之容量。所得到 _ 之溶液含有約9%(w/v)之賦形劑或基質及1 %(w/v)蛋白質， 如上所述使用旋風機I喷霧乾燥。凝集物含量依上所述研 究。得到以下凝集物含量用於儲存安定性。在強制儲存後， 重新構成粉末之溶液含有約10.1 %之凝集物。在第二大之混 合物，在相同之條件下喷霧乾燥類似調配物（20 g固體及200 ml容量）。凝集物含量依上所述研究。在儲存於40°C 12個月 後（一年安定性），重新構成粉末之溶液含有約2.5%之凝集 物。在儲存於251 3個月後（3個月安定性），重新構成粉末之 _ 溶液含有約2.2%之凝集物。在儲存於2-8 °C 3個月後（3個月 安定性），重新構成粉末之溶液含有約2.0 %之凝集物。測量 所得粉末之MMD、MMAD及FPF。粉末之MMD以上所述測 定。粉末之MMD為5·11 μηι。粉末之MMAD及FPF以上所述 測定。MMAD為6.8 μιη，微細顆粒級分為34.8%，相對於置 一 於膠囊中之粉末重。 喷霧乾燥含有2.833%(w/v)葡萄聚糖1 000、0.166%(w/v) L-異白胺酸、0.33%(w/v)IgGl之調配物 97673.doc -63- 200529863 8·5 g葡萄聚糖1〇⑽及〇·5 g l-異白胺酸溶解於超音波槽之 約28〇1111去礦物質水中（1^約7_5)。接著，加入濃度約1〇2.8 mg/ml之約9.7 ml純IgGl，調配於甘胺酸組胺酸緩衝液pH 6(見材料）且以去礦物質水（pH約7·5)稀釋至3〇〇爪丨之容量。 所知到之溶液含有約3%(w/v)之賦形劑或基質及〇 33%(w/v) 蛋白質’如上所述使用旋風機π喷霧乾燥。 凝集物含量依上所述研究。在強制儲存後，重新構成粉 末之溶液含有約6.3%之凝集物。粉末以上所述測 疋。粉末之MMD為2·98 μηι。粉末之MMAD及FPF以上所述 測疋。MMAD為5·3 μιη，微細顆粒級分為35.2%，相對於置 於膠囊中之粉末重。 噴霧乾燥含有2.66%(w/v)葡萄聚糖1〇〇〇、〇 33%(w/v)L·異白 胺酸、0.33%(w/v)IgGl之調配物 8·〇 g葡萄聚糖1 000及1 g L-異白胺酸溶解於超音波槽之約 280 ml去礦物質水中（ρί^々7·5)。接著，加入濃度約ι〇2·8 mg/ml之約9.7 ml純IgGl，調配於甘胺酸組胺酸緩衝液ρΗ 6(見材料）且以去礦物質水（ρίί約7·5)稀釋至3〇〇㈤丨之容量。 所得到之溶液含有約3%(w/v)之賦形劑或基質及〇.33%(w/v) 蛋白質，如上所述使用旋風機Π喷霧乾燥。 凝集物含量依上所述研究。在強制儲存後，重新構成粉 末之溶液含有約7.1%之凝集物。在儲存於4〇它12個月後（一 年安定性），重新構成粉末之溶液含有約33%之凝集物。在 儲存於25°C 12個月後（-年安定性），重新構成粉末之溶液含 有約2.3%之凝集物。在儲存於2_8它12個月後（一年安定 97673.doc -64- 200529863 性），重新構成粉末之溶液含有約1 ·9 %之凝集物。粉末之 MMD以上所述測定。粉末之MMD為2·75 μηι。粉末之MMAD 及FPF以上所述測定。MMAD為5.3 μιη，微細顆粒級分為 39.2%，相對於置於膠囊中之粉末重。 喷霧乾燥含有2.33°/〇(w/v)葡萄聚糖1 000、0.66%(w/v) L-異白胺酸、0.33%(w/v)IgGl之調配物 7.0 g葡萄聚糖10()0及2 g L-異白胺酸溶解於超音波槽之約 280 ml去礦物質水中（pH約7.5)。接著，加入濃度約102.8 mg/ml之約9.7 ml純IgGl，調配於甘胺酸組胺酸緩衝液pH 6(見材料）且以去礦物質水（pH約7·5)稀釋至300 ml之容量。 所得到之溶液含有約3%(w/v)之賦形劑或基質及0.33%(w/v) 蛋白質，如上所述使用旋風機II喷霧乾燥。 凝集物含量依上所述研究。在強制儲存後，重新構成粉 末之溶液含有約10.6%之凝集物。粉末之MMD以上所述測 定。粉末之MMD為2.71 μιη。粉末之MMAD及FPF以上所述 測定。MMAD為5.1 μιη，微細顆粒級分為36.4%，相對於置 於膠囊中之粉末重。 實例3 噴霧乾燥含有2.66%(w/v)葡萄聚糖10〇〇、0.33%(w/v)三異白 胺酸及〇.33%(w/v)IgGl之調配物 16.0 g葡萄聚糖moo及2 g三異白胺酸溶解於超音波槽之約 560 ml去礦物質水中（pH約7.5)。接著，加入濃度約96.55 mg/ml之約20.7 ml純IgGl，調配於甘胺酸組胺酸緩衝液pH 6(見材料）且以去礦物質水（pH約7.5)稀釋至600 ml之容量。 97673.doc -65- 200529863 所得到之溶液含有約3%(w/v)之賦形劑或基質及〇.33%(油) 蛋白質，如上所述使用旋風機j喷霧乾燥。 次是木物3里依上所述研究。在儲存於4〇〇C 3個月後（3個月 女定性），重新構成粉末之溶液含有約32%之凝集物。在儲 存於25°C 3個月後（3個月安定性），重新構成粉末之溶液含有 約1.2%之凝集物。在儲存於2_8。〇3個月後（3個月安定性” 重新構成粉末之溶液含有約〇.9%之凝集物。在儲存於4〇c>c 2個月後（年女疋性），重新構成粉末之溶液含有約7.3〇/〇 之凝集物。在儲存於25t：12個月後（一年安定性），重新構成 卷末之溶液含有約2.0%之凝集物。在儲存於2_8〇c 12個月後 (一年安定性），重新構成粉末之溶液含有約13%之凝集 物。粉末之MMAD及FPF以上所述測定。MMAD為4·6μιη， 微細顆粒級分為55.7%，相對於置於膠囊中之粉末重。 噴霧乾燥含有2_66%(w/v)葡萄聚糖】刪、〇33%(w/v)三異白 胺酸及0.3 3%(w/v)IgGl之調配物 8·〇 g葡萄聚糖100()及1 g三異白胺酸溶解於超音波槽之約 280 ml去礦物質水中（pH約7·5)。接著，加入濃度約96·55 mg/ml之約ι〇·3 6 ml純IgGl，調配於甘胺酸組胺酸緩衝液ρΗ 6(見材料）且以去礦物質水（？11約7·5)稀釋至3〇〇㈤丨之容量。 所知到之溶液含有約3%(w/v)之賦形劑或基質及〇 33%(w/v) 蛋白質，如上所述使用旋風機^噴霧乾燥。不測量安定性是 因调配物與上面緊接著敘述者完全相同。使用不同的旋風 機對於蛋白質安定性沒有影響。粉末之MMD以上所述測 定。粉末之MMD為2·96μιη。粉末之MMAD及FPF以上所述 97673.doc -66- 200529863 測定。MMAD為3.9 μιη，微細顆粒級分為58.4%，相對於置 於膠囊中之粉末重。 實例4 :製備根據本發明之其他粉末 喷霧乾燥含有3.33%(w/v)溶菌酶之調配物 5 g溶菌酶溶解於約140 ml之去礙物質水中（pH約7.5)且 以去礦物質水（pH約7.5)稀釋至150 ml之容量。所得之溶液 如上所述使用旋風機II喷霧乾燥。殘餘單體含量如上所述研 究。在強制儲存後，重新構成粉末之溶液含有約35.3%之殘 餘單體含量。粉末之MMD以上所述測定。粉末之MMD為 3·23 μπι。粉末之MMAD及FPF以上所述測定。MMAD為4.0 μπι，微細顆粒級分為70.4%，相對於置於膠囊中之粉末重。 嘴霧乾燥含有3.00%卜/¥)葡萄聚糖〗〇0〇0.3 3%溶菌酶^/¥)之 調配物 9.0 g葡萄聚糖】〇〇〇溶解於超音波槽之約280 ml去礦物質 水中（pH約7.5)。接著，加入1 g之溶菌酶，且混合物以去礦 物質水中（pH約7.5)稀釋至300 ml之容量。所得到之溶液如 上所述使用旋風機II喷霧乾燥。 殘餘單體含量如上所述研究。在強制儲存後，重新構成 粉末之溶液含有約49.8%之殘餘單體含量。粉末之MMD以 上所述測定。粉末之MMD為2.82 μπι。粉末之MMAD及FPF 以上所述測定。MMAD為4.2 μπι，微細顆粒級分為34.7%， 相對於置於膠囊中之粉末重。 噴霧乾燥含有2.66%(w/v)葡萄聚糖1 000、0.33%(w/v)異白胺 酸及0.33%溶菌酶（w/v)之調配物 97673.doc -67- 200529863 8.0 g葡萄聚糖⑺⑽及1 g三異白胺酸溶解於超音波槽之 約280 ml去礦物質水中（pH約7.5)。接著，加入1 g之溶菌 酶，且混合物以去礦物質水中（pH約7.5)稀釋至300 ml之容 量。所得到之溶液如上所述使用旋風機II喷霧乾燥。 殘餘單體含量如上所述研究。在強制儲存後，重新構成 粉末之溶液含有約50.7%之殘餘單體含量。粉末之MMD以 上所述測定。粉末之MMD為3.01 μιη。粉末之MMAD及FPF 以上所述測定。MMAD為4·2 μπι，微細顆粒級分為36.6%， 相對於置於膠囊中之粉末重。 喷霧乾燥含有2.66%(w/v)葡萄聚糖1()()()、0.33%(w/v)三異白 胺酸及0 · 3 3 %溶菌酶（w/v)之調配物 8.0g葡萄聚糖10〇0及1 g異白胺酸溶解於超音波槽之約280 ml去礦物質水中（pH約7·5)。接著，加入1 g之溶菌酶，且混 合物以去礦物質水中（pH約7.5)稀釋至300 ml之容量。所得 到之溶液如上所述使用旋風機II噴霧乾燥。 殘餘單體含量如上所述研究。在強制儲存後，重新構成 粉末之溶液含有約43.9°/。之殘餘單體含量。粉末之MMD以 上所述測定。粉末之MMD為2.53 μιη。粉末之MMAD及FPF 以上所述測定。MMAD為3.2 μιη，微細顆粒級分為58.6%， 相對於置於膠囊中之粉末重。 喷霧乾燥含有3.33%(w/v)降血鈣素之調配物 1 g降血鈣素溶解於約25 ml之去礦物質水中（pH約7.5)且 以去礦物質水（pH約7 · 5)稀釋至3 0 ml之容量。所得之溶液如 上所述使用旋風機II噴霧乾燥。 97673.doc -68- 200529863 凝集物含量依上所述研究。在強制儲存後，重新構成粉 末之溶液含有約32.6%之凝集物。粉末之MMAD及FPF以上 所述測定。MMAD為3·9 μιη，微細顆粒級分為59 〇%，相對 於置於膠囊中之粉末重。 噴霧乾燥含有3.166%(w/v)葡萄聚糖1〇〇〇及〇166%(w/v)降血 鈣素之調配物 4·75〇 g葡萄聚糖1〇〇〇溶解於超音波槽之約140 ml去礦物 質水中（pH約7.5)。然後加入0.250 g之降血鈣素，且混合物 以去礦物質水中（pH約7.5)稀釋至15〇 mi之容量。所得到之 溶液如上所述使用旋風機II喷霧乾燥。 凝集物含量依上所述研究。在強制儲存後，重新構成粉 末之溶液含有約27.5%之凝集物。粉末之MMD以上所述測 定。粉末之MMD為3.00μηι。粉末之MMAD及FPF以上所述 測定。MMAD為4.6 μιη，微細顆粒級分為42.6%，相對於置 於膠囊中之粉末重。 噴霧乾燥含有2.833%~/¥)葡萄聚糖10〇〇、〇.33%(\¥~)異白胺 酸及0.166%(w/v)降血飼素之調配物 4.250 g葡萄聚糖1000及0.5 0 g異白胺酸溶解於超音波槽之 約140 ml去礦物質水中（pH約7.5)。然後加入0.250 g之降血 鈣素，且混合物以去礦物質水中（pH約7.5)稀釋至150 ml之 容量。所得到之溶液如上所述使用旋風機II喷霧乾燥。 凝集物含量依上所述研究。在強制儲存後，重新構成粉 末之溶液含有約23.2%之凝集物。粉末之MMD以上所述測 定。粉末之MMD為2.86 μιη。粉末之MMAD及FPF以上所述 97673.doc -69- 200529863 測定。MMAD為4.5 μπι，微細顆粒級分為57.1%，相對於置 於膠囊中之粉末重。 噴霧乾燥含有2.866%(w/v)葡萄聚糖1000、〇.33%(w/v)三異白 胺酸及0.166%(w/v)降血舞素之調配物 4.250 g葡萄聚糖1000及0.50 g三異白胺酸溶解於超音波槽 之約140 ml去礦物質水中（pH約7.5)。然後加入0.250 g之降 血鈣素，且混合物以去礦物質水中（pH約7.5)稀釋至150 ml 之容量。所得到之溶液如上所述使用旋風機Π噴霧乾燥。 粉末之MMD以上所述測定。粉末之MMD為2.60 μηι。粉 末之MMAD及FPF以上所述測定。MMAD為3.7 μπι，微細顆 粒級分為62.5%，相對於置於膠囊中之粉末重。 【圖式簡單說明】 圖1顯示嘴霧後之凝集物形成、強制儲存及重新構成。喷 霧水溶液，其包含（a)10%(w/w)IgG含量，（b)l%(w/w)igG及 9%海藻糖含量及（c)l%(w/w)IgG及9%葡萄聚糖1〇⑽含量。含 葡萄聚糖粉末特徵為低凝集物含量。 圖2顯示喷霧後之凝集物形成、強制儲存及重新構成。喷 霧水溶液，其包含（a)10%(w/w)IgG含量，（b)l%(w/w)IgG、 l0/〇(w/w)異白胺酸及8%海蕩糖含量及（c)1%(w/w)IgG、1%異 白胺酸及8%葡萄聚糖1〇〇〇含量。含葡萄聚糖粉末特徵為低凝 集物含量。 圖3顯示含有葡萄聚糖〗⑼〇、異白胺酸及IgG之水溶液以喷 霧乾燥製備之不同粉末之質量平均氣動粒徑（MMAD)。溶液 製備如實施方式所述並喷霧。所有粉末具有小於7_5 μηΐ2 97673.doc -70· 200529863 MMAD。圖形顯示在恆定總固體濃度及喷霧參數下異白胺 酸含量對於MMAD之影響。調配物中較高之異白胺酸含量 降低MMAD。總固體：噴霧溶液中固體之比例。氣旋j :布 氏氣旋（Btichi Cyclone)。旋風機π :布氏高效旋風機（Btichi High-performance Cyclone) ° 圖4顯不以含有葡萄聚糖⑽〇、異白胺酸及IgG之水溶液噴 務乾餘製備各種粉末之微細顆粒級分（Fine particle Fraction，FPF)，以小於5师區分粒徑（㈤⑽—咖㈣。春 溶液之製備及喷霧如實施方式所述。所有粉末具有超過 30%或超過35%之FPF。總固體：噴霧溶液中固體之比例。 旋風機1 ··布氏旋風機。旋風機II :布氏高效旋風機。 圖5顯不以含有葡萄聚糖1000、三異白胺酸及IgG之水溶液 喷霧乾燥製備各種粉末之質量平均氣動粒徑（MMAD)。溶液 之製備及喷霧如實施方式所述。兩者粉末MMAD均小於5 μπι或小於4 μπι。總固體：噴霧溶液中固體之比例。旋風機 I:布氏旋風機。旋風機11:布氏高效旋風機。 i 圖6顯不以含有葡萄聚糖1 000 '三異白胺酸及IgG之水溶液 喷霧乾製備各種粉末之微細顆粒級分（Fine particle FraCtl〇n’ FPF)’ 以小於5 μ μηι區分直徑（Cut Off Diameter)。 >谷液之製備及喷霧如實施方式所述。兩者粉末均具有超過 5 5%或超過58。/。之FPF。總固體：喷霧溶液中固體之比例。 旋風機I :布氏旋風機。旋風機π :布氏高效旋風機。 圖7顯不喷霧後之凝集物形成，儲存於2-8、25及40°C最 長一年之後重新構成。噴霧含有1%~~)1§〇、異 97673.doc •71 - 200529863 白胺酸及8%(w/w)葡萄聚糖1〇〇〇之水溶液（見實例2)。含葡萄 聚糖之粉末特徵為儲存於2-8、25及4〇。〇 3、6、9及12個月 後有低凝集物含量。 圖8顯示喷霧後之凝集物形成，儲存於2-8、25及4〇它最 長一年之後重新構成。喷霧含有〇_33%(w/w)IgG、〇 33%(w/w) 異白胺酸及2.66〇/〇(w/w)葡萄聚糖ι〇〇〇之水溶液（見實例2)。含 葡萄聚糖之粉末特徵為儲存於、25及40°C —年後有低凝 集物含量。 圖9顯示喷霧後之凝集物形成，儲存於2_8、乃及⑽^最 長一年之後重新構成。噴霧含有0.33%(w/w)IgG、〇33%(w/w) 三異白胺酸及2.66%(w/w)葡萄聚糖1〇〇〇之水溶液（見實例 3)。含葡萄聚糖之粉末特徵為儲存於2_8、25及40°C —年後 有低凝集物含量。 圖1 〇顯示喷霧乾燥、強制儲存及重新構成後之殘餘單體 S里。噴霧水洛液’其含有a)3.33%(w/w)溶菌酶，b) 〇.3 3%(w/w)溶菌酶及 3.0%葡萄聚糖1〇〇〇，c)〇.33%(w/w)溶菌 酶、〇.33%(w/w)異白胺酸及2 66%(w/w)葡萄聚糖】_及 d)0.3 3°/〇(w/w)溶菌酶、〇.33%(w/w)三異白胺酸及 2.66%(w/w) 葡萄聚糖1 000。含葡萄聚糖粉末之特徵為高殘餘單體含量。 圖11顯示喷霧乾燥、強制儲存及重新構成後之凝集物含 里。噴霧水溶液，其含有a)3.33°/〇(w/w)降血|弓素， b)〇.33%(w/w)降血鈣素及 3 ·〇% 葡萄聚糖 ι〇〇〇及 c)〇 33%(w/w) 降血鈣素、0.33%(w/w)異白胺酸及2.66%(w/w)葡萄聚糠1〇〇〇。 含葡萄聚糖粉末之特徵為低凝集物含量。 97673.doc 200529863 圖12顯示以吸入施用乾粉製劑之吸入器。 【主要元件符號說明】 1 外蓋 2 視窗 3 層板 4 濾篩蓋子 5 濾篩 6 吸入艙室 7 梢栓 8 彈簧 9 壓鍵 10 軸 11 蓋子 12 咬嘴 13 氣體通過孔 97673.doc -73-

Claims (1)

1. •200529863 十、申請專利範圍： 1· -種喷霧乾燥粉末，其含有醫藥活性物質及分子量在· 及10,000 Da之間之低分子葡萄聚糖。 2.根據請求項κ噴霧乾燥粉末，其特徵在於低分子葡萄聚 糖具有分子量在500及5,〇〇〇 Da之間。 3·根據請求項！之噴霧乾燥粉末，其特徵在於低分子葡萄聚 糖具有分子量在500及1，500 Da之間。 4.根據睛求項山中任—項之喷霧乾燥粉末，其特徵在於 粉末含有招對於其乾燥量之5〇至99 99%(w/w)之間之低 分子葡萄聚糖。 一 5.根據請以4之喷霧乾燥粉末，其特徵在於粉末含有相對 於其乾無量之60至99.99%(w/w)之間之低分子葡萄聚糖。 ^據4求項1至3中任—項之喷霧乾燥粉末，其特徵在於 醤樂活性物質為生物性巨分子。 7.根據請求項6之噴霧乾燥粉末，其特徵在於生物性巨分子 為多肽或蛋白質。 8. 末’其一肚或蛋” 9. 根據請求項1至 面樂活性物質 間。 3中任一項之喷霧乾燥粉末，其特徵在於 之量在粉末乾燥量之〇.〇1及5〇%(w/w)之 •根據Μ求項1至3中任一 ❿ 員之喷務乾燥粉末，其特徵在 噴務乾燥粉末之乾烽旦人 取 知里3有至>、50%(w/w)之低分子葡 ♦糖及高達5G%(W/W)之生物性巨分子。 97673.doc 200529863 11. 根據請求項ίο之噴霧乾燥粉末，其特徵在於喷霧乾燥粉 末之乾燥量含有至少60%(w/w)之低分子葡萄聚糖及高達 40%(w/w)之生物性巨分子。 12. 根據請求項⑴中任—項之喷霧乾燥粉末，其特徵在於 喷霧乾燥粉末含有—或多種醫藥可接受賦形劑及/或-或 多種鹽。 請求項12之噴霧乾燥粉末，其特徵在於賦形劑為胺 』、肽及其鹽、糖、多醇、有機酸鹽及/或聚 其混合物。 ^ 14 ·根據睛求項1 2之噴霧乾燥 接受鹽。 、蔡乾知私末，其特徵在於鹽為醫藥可 15. 根據請求項12之対乾 末含有除低分早结〜 不其特徵在於贺霧乾燥粉 有除低刀子葡甸聚糖及醫藥活性 胺基酸作為賦形劑。 '卜之或夕種 16. 根據請求項15之噴霧 末含有除低分子葡萄聚糖：醫藥：=:於噴霧乾燥粉 作為賦形劑。 … 貝外之異白胺酸 1 7·根據請求項丨3之噴霧乾燥 末含有除低分子葡糖：末、、特徵在於噴霧乾燥粉 賦形劑。…播及醫藥活性物質外之三肚作為 18·根據請求項17之噴霧乾

   異白胺酸之三肽。 ’、’n ，其特徵在於三 19·根據請求項17之噴霧乾 白胺酸。 、乃’其特徵在於三肚為 97673.doc 200529863 2〇·根據請求項13之喷霧乾燥粉末，其特徵在於噴霧乾燥粉 末之乾燥量含有至少5〇%(w/w)之低分子葡萄聚糖及！及 2〇%(W/W)之間之至少一種胺基酸及/或至少一種肽。 21_根據請f項16之喷霧乾燥粉末，其特徵在於«乾燥粉 末之乾紐ϊ含有至少5〇%(w/w)之低分子葡萄聚糖及職 20%(w/w)之間之異白胺酸。 22. 根據請求項17之喷霧乾燥粉末，其特徵在於喷霧乾燥粉 末之乾燥量含有至少50%(w/w)之低分子葡萄聚糖及！及 20%(w/w)之間之三肽。 23. 根據請求項⑴中卜項之噴霧乾燥粉末，其特徵在於 粉末中之顆粒具有i及！ 〇 μηι之間之MMad。 24. 根據請求項23之噴霧乾燥粉末，其特徵在於粉末中之顆 粒具有1及7·5 μιη之間之MMAD。 25·根據請求項24之噴霧乾燥粉末，其特徵在於粉末中之顆 粒具有1及5·5 μιη之間之MMAD。 26. 根據請求項1至3中任一項之喷霧乾燥粉末 噴霧乾燥粉末為非晶形。 其特徵在於 27. 根據請求項⑴中任一項之噴霧乾燥粉末，1特徵在 噴霧乾燥粉末具有45至65t之麵轉換溫度。 28. 根據請求項27之噴霧乾燥粉末，其特徵 末具有55至65t：之玻璃轉換溫度。 、軚展 29. 一種醫藥組合物，其含有根據請求項丄 霧乾燥粉末。 至3中任一項之噴 30. 一種製備根據請求項1之噴霧乾燥 粉末之方法，其特徵在於 97673.doc 200529863 a) 醫藥活性物質溶解於水溶液/懸浮液； b) 低分子葡萄聚糖溶解於水溶液/懸浮液； C)如果活性物質及低分子葡萄聚糖溶解於不同之水溶液/ 懸浮液，將其混合在一起； d)含有低分子葡萄聚糖及醫藥活性物質之水溶液/懸浮液 於低於2〇0/12(TC之溫度（流入/流出溫度）下噴霧，較佳 地為 150_185/80-95°C。 31. 32. 33. 34. 35. 36. 37. 38 根據請求項30之方法，其特徵在於醫藥活性物質為生物 性巨分子。 其特徵在於生物性巨分子為多 肽 根據請求項3 1之方法 或蛋白質。 其特徵在於多肽或蛋白質為生長 根據請求項32之方法 因子、酵素或抗體。 根據請求項现33中任—項之方法，其特徵在於溶㈣ 懸洋液額外含有-或多種賦形劑及/或一或多種鹽。 根據印求項34之方法’其特徵在於賦形劑為胺基酸1 或其鹽、糖、多醇、有機酸鹽及/或聚合物，或其混合物 根據請求項34之方法，其特徵在於溶液或懸浮液含有玲 t分子葡萄聚糖及醫藥活性物質外之—或多種胺基… 為賦形劑。 根據請求項34之方法’其特徵在於溶液或懸浮液含有p :分子葡萄聚糖及醫藥活性物料之異白胺酸作為心 •根據請求項34之方法’其特徵在於溶液或懸浮液含有 97673.doc 200529863 低7刀子葡萄聚糖及醫藥活性物質外之三肤作為賦形劑。 39·根據晴求項38之方法，其特徵在於溶液或懸浮液含有除 -刀子葡萄水糖及醫藥活性物質外之至少一種含有異白 胺酸之三肽作為賦形劑。 4〇·根據請求項39之方法，其特徵在於溶液或懸浮液含有除 低分子葡萄聚糖及醫藥活性物質外之三異白胺酸作為賦 形劑。 41.根據請求項34之方法，其特徵在於鹽為醫藥可接受鹽。 42·根據#求項34之方法’其特徵在於溶液或懸浮液具有pH 在3 · 0及9 · 〇之間。 43. 根據請求項3〇至33中任一項之方法，其特徵在於低分子 葡萄♦糖之里在洛液或懸浮液乾燥量之5〇及99 99%(w/w) 之間。 44. 根據請求項3〇至33中任一項之方法，其特徵在於低分子 葡萄聚糖之量在溶液或懸浮液乾燥量之6〇及99 99%(w/w) 之間。 45. 根據請求項30至33中任—項之方法，其特徵在於醫藥活 性物質之量在溶液或懸浮液乾燥量之〇 〇1及5〇%(w/w)2 間。 46·根據請求項30至33中任-項之方法’其特徵在於溶液或 懸浮液之乾燥量含有至少50%(w/w)之低分子㈣聚糖及 0.01及50%(w/w)之間之生物性巨分子。 47·根據請求項46之方法’其特徵在於溶液或懸浮液之乾燥 量含有至少60%(w/w)之低分子葡萄聚糖及〇·〇ι及 97673.doc 200529863 40%(w/w)之間之生物性巨分子。 48·根據請求項30至33中任一項之方法，其特徵在於溶液或 懸浮液之乾燥量含有至少50%(w/w)之低分子葡萄聚糖及 1及20%(w/w)之間之至少一種胺基酸及/或至少一種肽。 49. 根據請求項48之方法，其特徵在於溶液或懸浮液之乾燥 里含有至少60%(w/w)之低分子葡萄聚糖及丨及2〇%(w/w) 之至少一種胺基酸。 50. 根據請求項37之方法，其特徵在於溶液或懸浮液之乾燥 量含有至少60%(w/w)之低分子葡萄聚糖及丨〇及2〇%(w/w) 之間之異白胺酸。 51. 根據請求項4〇之方法’其特徵在於溶㈣懸浮液之乾燥 量含有至少5G%(W/W)之低分子葡萄聚糖及i及20%(w/w) 之間三異白胺酸。 52·根據請求項30至33中任一 液或懸浮液以形成粉末， 間之MMAD。 員之方法，其特徵在於喷霧溶 粉末中之顆粒具有丨及^ μηι之 53·根據請求項52之方法，其 、特徵在贺務於溶液或懸浮液以 形成叙末，粉末中之顆粒具有 CA 、虿1及7·5 Pm之間之MMAD。 54· —種根據請求項1至3中任一 項之賀霧乾燥粉末用於製備 樂劑之用途。 才1胥 55. 一種根據請求項25之噴霧乾 用途。 燥粉末用於製備 吸入藥劑之 97673.doc