TW200522967A - Pharmaceutical compositions and methods comprising combinations of 2-alkylidene-19-nor-vitamin d derivatives and an estrogen agonist/antagonist - Google Patents

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200522967 九、發明說明： 【發明所屬之技術領域】 本發明係關於醫藥組合物及治療方法，該等方法包括對 有需要之患者投與2-次烷基-19-原-維他命D衍生物與雌激 素激動劑/拮抗劑或其醫藥上可接受之鹽或前藥的組合。詳 言之，本發明係關於醫藥組合物及治療方法，該等方法包 括對有需要之患者投與2-亞甲基-19-原-20(S)-la，25-二羥 基維他命D3及（-)-順-6-苯基-5-[4-(2-°比咯啶-1_基-乙氧基）_ 苯基]-5,6,7,8-四氫伸萘基-2-醇，或其醫藥上可接受之鹽或 前藥。 【先前技術】 維他命D為一群類固醇分子之通稱。藉由將脫氫膽留醇 轉變成維他命D3(膽鈣化醇）而在人體中生物合成出稱為 1，25_二羥基維他命〇3(1，25-二羥基膽鈣化醇）的活性形式之 維他命D。此轉變發生在皮膚中且需要通常來自日光 輻射。接著維他命D3在肝臟中代謝為25_羥基維他命d3(25_ 羥基膽鈣化醇），其接著進一步在腎臟中代謝為活性形式之 維他命D，即^%二羥基維他命Ds。接著丨，25_二羥基維他 命分佈於全身，在其中結合至細胞内維他命〇受體。 忒活f生形式之維他命D為已知與礦物質代謝及骨骼生長 有關且促進鈣之腸吸收的激素。 維他命D類似物揭示於1998年12月i日頒准之美國專利第 5’843,928號中。所揭示之化合物為2_次燒基·19_原.維他命d 衍生物，且其特徵在於與U5-二經基維他命A相比具有低 94776.doc 200522967 腸内鈣輸送活性及高骨骼鈣活動化活性。 ,本發明提供治療方法，其使用2_次院基H维他命d π m尤其為化合物2_亞甲基_19_原娜)七，25_二声 基維他命〇3(亦稱為2MD)及雌激素激動劑/拮抗劑或 上可接受之鹽或前藥的組合。 /、 /、 【發明内容】 本發明提供包含化合物2_亞甲基_19_原_2g⑻七，υ•二 經基維他命D3及雌激素激_/拮抗劑或其醫藥上可接Γ 之鹽或前藥㈣藥組合物。本發明亦提供治療以下病症= 方法.老年性骨質疏鬆症、停經後骨質疏鬆症、骨折、移 植骨、乳癌、前列腺癌、肥胖症、骨質減少、男性骨質疏 鬆症、虛弱、肌肉損傷或肌肉貧乏症，該方法包括對ϋ 要之患者投與治療上有效量之2_亞甲基_19_原_2叫 la，25-二經基維他命〇3及雌激素激動劑/拮抗劑或其醫藥上 可接受之鹽或前藥。 μ 【實施方式】 本發明係關於醫藥組合物及使用2_次烧基_19秦維他命 D衍生物與雌激素激_/拮抗劑之組合治療以下病症且= 於提高青春期顛峰骨質量及預防二次髖部骨折之方法：代 謝性骨疾病、老年性骨f疏鬆症、停經後骨質疏鬆症、類 固醇誘發之骨質疏鬆症、低骨轉換骨f疏鬆症、骨軟化症、 腎性骨質營養不良、牛皮癣、多發性硬化症、糖尿病、宿 主抗移植物排斥反應、移植排斥、類風濕性關節炎、哮喘、 骨折、移植骨、痤瘡、脫髮症、乾皮病、皮膚緊實性不足、 94776.doc 200522967 皮脂分泌不足、皺紋、高血壓、白血病、結腸癌、乳癌、 前列腺癌、肥胖症、骨質減少、男性骨質疏鬆症、性腺機 能減退、男性更年期、虛弱、肌肉損傷、肌肉貧乏症、 骨肉瘤、低血鈣性手足抽搐、甲狀旁腺機能減退、軟骨 病、維生素D缺乏、厭食症、由侵犯性運動行為產生之低 骨質。 在一較佳實施例中，本發明係關於使用2_亞甲基_19_原_ 2〇(S)-la，25e二羥基維他命及雌激素激動劑/拮抗劑或其 醫藥上可接受之鹽或前藥治療以下病症且用於提高青春期 顛峰骨質量及預防二次髖部骨折之方法：代謝性骨疾病、 老年性骨質疏鬆症、停經後骨質疏鬆症、類固醇誘發之骨 貝&氣、症、低骨轉換骨質疏鬆症、骨軟化症、腎性骨質營 養不良、牛皮癖、多發性硬化症、糖尿病、宿主抗移植排 斥反應、移植排斥、類風濕性關節炎、哮喘、骨折、移植 骨、痤瘡、脫髮症、乾皮病、皮膚緊實性不足、皮脂分泌 不足、皺紋、高血壓、白血病、結腸癌、乳癌、前列腺癌、 肥胖症、骨質減少、男性骨質疏鬆症、性腺機能減退、男 性更年期、虛弱、肌肉損傷、肌肉貧乏症、骨肉瘤、低ώ 1手足抽搐、甲狀旁腺機能減退、軟骨病、維生素D缺乏 厭食症、由侵犯性運動行為產生之低骨質。 在一杈佳實施例中，使用該組合之治療方法為：老年姓 :質疏鬆症、停經後骨質疏鬆症、骨折、移植骨、乳癌、 前列腺癌、肥胖症、骨質減少、男性骨質疏鬆症、虛弱、 肌肉損傷及肌肉貧乏症。 94776.doc 200522967 骨質減少為骨骼變薄，但很少與骨質疏鬆症一起被觀察 到且為真正骨質疏鬆症前之階段。世界衛生組織已研究出 基於骨質密度（BMD)之診斷種類以指示個人是否具有正常 ㈣’是否具有骨質減少或骨質疏鬆症骨密度係在 月/年平均骨密度之-標準偏差（+1n)内。骨質減少（低 骨質）係定義為低於青少年平均骨密度丨至2.5標準偏差之骨 也度（-1至-2.5) ’且骨質疏鬆症係定義為低於青少年平均骨 密度2.5標準偏差或更多之骨密度（>·2 5)。 性腺機能減退一般定義為性腺功能不足，其體現在在配 子形成及/或性腺激素分泌之缺乏，其可導致青春期延遲及 /或生殖機能不足。有三種主要類型之性腺機能減退：”原 發性腺機能減退；2)繼發性性腺機能減退；及3)抗藥性性腺 機能減退。在原發性腺機能減退中，對萊氏細胞（Leydig 之破壞減少雄激素產生。在繼發性性腺機能減退中，下丘 腦或垂體之病症減少促性腺激素分泌且在抗藥性性腺機能 減退中，對雄激素之身體反應不充足。 軟骨病為涉及骨骼軟化及弱化之兒童期病症，其起初由 缺乏維他命D、鈣及/或磷酸鹽所引起。 厭食症為具有以下特徵之疾病：拒絕將體重保持在適於 年齡及身高之最低正常重量或其上（例如，重量減輕導致體 重之維持低於所期望體重之85% ;或者在生長期間無法完 成所期望之重量增加，導致體重低於所期望體重之85〇/〇); 即使重量不足，仍存在增重或變胖之恐懼；及所經歷某人 體重或體形之擾動，自我評價對體重或體形之不適當壓 94776.doc 200522967 力或否疋當前低體重之嚴重性。本發明化合物及組合可 用於療厭g症且可用於治療與厭食症相關之骨質流失。 可使用本發明化合物及組合治療之另—病況為尤其是在 女性中與侵犯性運動行為相關之骨f流失。在鍛煉、體育 或運動中之侵犯性參與會導致骨f流失，其在女性中通常 伴有月經不調。亦顯示侵犯性運動行為之男性亦顯示骨質 流失。 更年期（亦稱為male menopause或viropause)為男性 中之天然事件，其通常發生於四十與五十五歲之間。男性 更年期為激素睾酮含量下降。當睾_含量下降、且男性進 入男性更年期時’可觀察到包括下列病症之各種變化或病 況：精力及體能下降、體脂肪增加、骨質疏鬆症、抑鬱症' ，曰敏銳度下降、不能保持肌肉、心血管疾病、動脈硬化、 性慾下降、性高潮強度下降、勃起功能障礙、應激性增加、 及尤其為手及腳上之關節疼痛與關節強硬直。另外，正遭 :或已遭受男性更年期之男性可具有男性乳房發育症，企 脂病’其包括高膽固醇企症、脈管反應性降低、性腺機能 減退及良性前列腺增生。 虛弱之特徵為骨骼肌質量之進行性及持續性損失，其導 致跌倒党傷之高危險、疾病疾癒困難、住院治療延長、及 曰苇生活中舄要協助之長期殘疾。肌肉質量、體力及體能 降低通常導致生活質量縮減、獨立性喪失及死亡。虛弱通匕 常與老化相關，但當由於其它因？而發生肌肉損失及力量 降低時亦可導致虛弱，該等因子例如疾病誘發之惡病質、 94776.doc 200522967 固定、或藥物誘發之肌肉貧乏症。另一用 ^ <庇力用於表不虛弱之術 語為肌肉貧乏症，其為用於骨骼肌肉質量或品質損失之通 稱。有助於其總體品質之骨骼肌肉特性實例包括··收縮性、 纖維尺寸及類型、易疲性、激素反應性、葡萄糖吸收/代謝 作用、及毛細管密度。肌肉品質損失甚至在無肌肉質量損 失下可導致體力損失及體能削弱。 本文所用術語”肌肉損傷”為對任何肌肉組織之損傷。肌 肉損傷可起因於由事故、運動傷害、内分泌失調、疾病、 外傷或手術程序所引起的對肌肉組織之物理創傷。本發明 方法適用於藉由促進肌肉損傷修補來治療肌肉損傷。 中老年女性中之骨質疏鬆症係藉由青春期至成人期中所 得顛峰骨質量之量、停經前該顛峰骨質量之保持及停經後 骨質扣失速率來測定。颠峰骨質量之決定因子包括··遺傳、 呂養重里負何（鍛煉）及環境因子。因此，希望提高青春期 之顛峰骨質量以便使骨骼質量最大化以預防在生命後期中 發展骨質疏鬆症。同樣，亦希望提高男性之青春期顛峰骨 質量。 髖。卩月折對邊療資源及患者發病率及死亡率具有顯著影 響。幾乎不考慮對受過髖部骨折之患者進行以降低再次骨 折危險為目標之預防性措施。目前，1〇_13%之患者隨後會 遭受二次競部骨折。遭受二次髖部骨折之患者在第二次骨 折後與第一次相比更少有患者保持了其獨立行走之能力 (刀別為 53及 91%’ Pco oQQsppearse ε·〇·等人，injury，2〇〇3， 34(7)，518-521。隨二次髖部骨折之後，患者之移動水平決 94776.doc -10 - 200522967 定其未來社會獨立性。老年患者及具有多次跌倒史之良者 在骨折間具有較短時間間隔。二次競部骨折對患者移動性 及社會獨立性具有顯著之進__步影響。因此希望具有用於 預防二次髖部骨折之新方法。 骨肉瘤為相對普遍、高惡性原發性骨腫瘤，其具有轉移 至肺部之趨勢。儘管骨肉瘤可發生在任何年齡，但在1〇至 :歲t群中最為普遍。全部骨肉瘤之約一半位於膝蓋區域 但可發現於任何骨中。疼痛及塊體為骨肉瘤之常見症狀。 用於月肉瘤之常見治療為與手術相組合之化學療法。可使 用=如甲胺σ票呤（meth〇trexate)、阿黴素（ — ⑷、順 氯胺鉑（Clsplatin)或卡鉑（carb〇platin)之試劑進行的手術前 或手術後任一者之化學療法來治療骨肉瘤。 甲狀旁腺機能減退為低血約症之趨勢，經常與激素缺乏 所產生之慢性手足抽搐相關，其特徵為低血清鈣及高血清 本έ i甲狀旁腺機能減退通常隨著甲狀腺切除術期間意 外移除或損傷若干甲狀旁腺而發生。暫時性甲狀旁腺機能 減退通常隨亞全甲狀腺切除術之後且在小於3%的熟練執 行之甲狀腺切除術中永久性發生。 低血詞性手足抽搐為產生自低血鈣症之手足抽搐形式。 低血鈣症之特徵為：在正常血漿蛋白質濃度存在下總血漿 鈣濃度降低至8·8 mg/dL(毫克/分升）以下。手足抽搐可以自 發症狀外顯或潛伏。手足抽搐外顯時之特徵為：感覺症狀， 如嘴唇、舌頭、手指及足部之感覺異常；手足痙攣，其可 長’月持、’灵且有疼痛性；全身性肌肉酸痛；及面部肌肉組織 94776.doc 200522967 痙攣。潛伏性手足抽搐需要激發測試來顯現且一般在不太 嚴重減少之血漿鈣濃度（如7至8 mg/dL)下發生。在動物之獸 醫實踐中亦觀察到低A鈣性手足抽搐。舉例而言，馬之低 血約性手足抽搐為與血清離子化鈣之急劇損耗相關且有時 與鎂及磷酸鹽之血清濃度變化有關之罕見病況。其發生在 長期身體透支或運輸（運輸抽搐症）之後且發生在泌乳母馬 中（泌乳抽搐症）。症狀可變且涉及神經肌肉應激性過度。 本發明亦係關於用於治療以下病症且用於提高青春期顛 峰骨質量及預防二次髖部骨折之醫藥組合物··代謝性骨疾 病、老年性骨質疏鬆症、停經後骨質疏鬆症、類固醇誘發 之骨質疏鬆症、低骨轉換骨質疏鬆症、骨軟化症、腎性骨 質營養不良、牛皮癬、多發性硬化症、糖尿病、宿主抗移 植物排斥反應、移植排斥、類風濕性關節炎、哮喘、骨折、 移植骨、痤瘡、脫髮症、乾皮病、皮膚緊實性不足、皮脂 分泌不足、皺紋、高血壓、白血病、結腸癌、乳癌、前列 腺癌、肥胖症、骨質減少、男性骨質疏鬆症、性腺機能減 退、男性更年期、虛弱、肌肉損傷、肌肉貧乏症、骨肉瘤、 低血鈣性手足抽搐、甲狀旁腺機能減退、軟骨病、維生素D 缺乏、厭食症、由侵犯性運動行為產生之低骨質，該等醫 梁組合物包含·如式I之化合物的2 -次烧基-19 -原-維他命d 衍生物，及雌激素激動劑/拮抗劑或其醫藥上可接受之鹽或 前藥及載劑、溶劑、稀釋劑及其類似物。 在一實施例中，本發明之組合包含：治療有效劑量之第 化合物’该第一化合物為2 -次烧基-19 -原-維他命d衍生 94776.doc •12- 200522967 物，如式i之化合物；及治療有效劑量之第二化合物，該第 一化合物為雌激素激動劑/拮抗劑或其醫藥上可接受之趟 或前藥。 一尤其較佳之組合為2-亞甲基-19-原-20(S)-la，25-二經 基維他命D3與（·）_順冬苯基-5-[4-(2^比咯啶+基-乙氧基）_ 笨基]-5,6,7,8 -四氫伸萘基-2 -酵、尤其為£>-酒石酸鹽之組 合。 可用於本發明之2-次烷基-19-原·維他命d衍生物揭示於 美國專利第5,843,928號中，該等衍生物之特徵為以下所示 之通式I ··

R

其中，Yi&Y2可相同或不同，其各選自由氫及羥基保護 基團所組成之群，R6及R8可相同或不同，其各選自由氫、 烷基、羥烷基及氟烷基所組成之群，或&及連在一起時 表示基團-(CH2)X-，其中X為2至5之整數，且其中基團r表 示對於維他命D型化合物所已知之任何常見側鏈。 更詳言之R可表示1至35個碳之飽和或不飽和烴基，其可 94776.doc -13 - 200522967 為直鍵1鏈或環形1其可含有一或多個額外取代基，如 經基或經保護録、氟基、㈣、_基、環氧基、胺基或 其匕雜原子基團。此類型之較佳側鏈由以下結構所表示： 其中A立體化學中心（在類固醇編號中對應於c_2〇)可具 有R或s組態（意即碳20周圍之自然組態或2〇_表組態），且其 中 Z係選自 γ、-ογ、_CH2〇Y ' ^^丫及 ，其中該 雙鍵可具有順式或反式幾何學，且其中Y選自1、甲基、 -COR5及以下結構之基團： R2 \ / /R3 * (CH2) - — c-(CH2)„——c ——R5 其中m及n獨立地表示〇至5之整數，其中…係選自氫、氘、 羥基、經保護羥基、氟基、三氟甲基、及Cw烷基，該Cu 烷基可為直鏈或支鏈且視情況帶有羥基或經保護羥基取代 基’且其中R、R及R4之每一者係獨立選自氘、氘代烷基、 虱、氟基、三氟甲基及Cl·5烷基，該CM烷基可為直鏈或支 鏈且視情況帶有羥基或經保護羥基取代基，且其中r1&r2 連在一起表示氧基、或次烷基、=cr2r3、或基團_(CH2 v(其 中P為2至5之整數），且其中R3及r4連在一起表示氧基、或 基團-(CH2)q-(其中q為自2至5之整數），且其中r5表示氫、羥 基、，’玉保漢·基、或CN:5烧基且其中在側鏈中2〇、22或23 位置之任何CH基團可由氮原子置換，或其中分別在2〇、22 94776.doc -14- 200522967 或23位置之基團-CH(CH3)-、-CH(R3)-或-CH(R2)-之任一者 可由氧或硫原子置換。 在C-20處至甲基取代基之波形線表示碳20可具有R或S組 態之任一種。 具有自然20R組態之側鏈的特定重要實例為由以下式 (a)、（b)、（c)、（d)及（e)所表示之結構，意即存在於下列物 質中之側鏈：25-羥基維他命D3(a);維他命D3(b) ; 25-羥基 維他命D2(c);維他命D2(d);及25-羥基維他命D2之C-24差 向異構物（e); (a)

OH

OH 94776.doc -15- 200522967 (d)

(e)

OH 本文所用術語"經基保護基團"表示通常用於臨時保護經 基功能之任何基團，諸如（例如）烷氧羰基、醯基、烷基甲矽 烷基或烷芳基甲矽烷基（下文簡稱為，，曱矽烷基”）、及烷氧基 烷基。烷氧羰基保護基團為烷基_〇-C〇_基團，例如甲氧基 羰基、乙氧基羰基、丙氧基羰基、異丙氧基羰基、丁氧基 羧基、異丁氧基羰基、第三丁氧基羰基、节氧基羰基或烯 丙氧基.基。術語”醯基’’表示全部異構形式之丨至6個碳之 烧&&基，或1至6個奴之竣基烧醯基，如草酿基、丙二醯基、 丁二醯基、或戊二醯基；或芳醢基，如苯曱酿基，或經鹵 素、硝基或烧基取代之苯甲酸基。本說明書或申請專利範 圍中所用”烷基” 一詞表示全部異構形式之1至1 〇個碳的直 鏈或支鏈院基。烧氧基烧基保護基團例如為下列基團：曱 氧基甲基、乙氧基甲基、甲氧基乙氧基曱基、或四氫呋喃 基及四氫哌喃基。較佳之甲矽烷基保護基團為：三曱基曱 矽烷基、三乙基曱矽烷基、第三丁基二曱基曱矽烷基、二 94776.doc -16 - 200522967 丁基甲基甲矽烷基、二苯基甲基曱矽烷基、苯基二曱基甲 矽烷基、一苯基第三丁基甲矽烷基及類似之烷基化甲矽烷 基。術語π芳基”具體指苯基、或任何經烷基、硝基或鹵素 取代之苯基。 ’’經保護羥基’’為由任何上述通常用於臨時或永久保護羥 基功能之基團來衍生或保護之羥基，例如所先前定義之甲 矽烷基、烷氧基烷基、醯基或烷氧基羰基。術語，，經烷基，，、 M氘代烷基”及"氟烷基”係分別指經一或多個羥基、氘或氟基 取代之任何烧基。 應注意在本說明書中術語”24-高”係指添加一亞甲基且術 語”24-二高’’係指在該側鏈中之碳24位置處添加兩個亞甲 基。同樣，術語”三高”係指添加三個亞甲基。亦及術語 ’’26,27-二甲基”係指在碳26及27位置上添加一甲基以使得 (例如）R3及R4為乙基。同樣，術語”26,27_二乙基”係指在26 及27位置上添加一乙基以使得R3及R4為丙基。 在以下化合物列表中，應將附著於碳2位置上之特殊次烷 基取代基添加至該命名法中。舉例而言，若亞甲基為該次 烷基取代基，則術語”2-亞甲基"應先於所命名之各化合物。 右伸乙基為該次烷基取代基，則術語，，2-伸乙基”應先於所命 名之各化合物，等等。另外，若附著於碳2〇位置上之甲基 為其表組態或非自然組態，則術語，，2〇(s)”或”2〇_表,,應包括 於每種以下命名之化合物中。若需要則該等所命名之化合 物亦可為維他命D2型。 當側鏈不飽和時，結構I之2-次烷基-化合物之特定及較佳 94776.doc -17- 200522967 實例為： 19 -原-24 -南-1，25 -二經基-22-脫鼠維他命D3， 19-原-24-二高-1，25-二羥基-22-脫氫維他命D3 ; 19-原-24-三高-1，25-二羥基-22-脫氫維他命D3 ; 19-原-26,27-二甲基-24-高-1，25-二羥基-22-脫氫維他命 D 3， 19 -原-26,27_二甲基-24-二南-1，25_二經基-22-脫鼠維他 命D3 ; 19-原-26,27-二甲基-24-三高-1，25_二羥基-22•脫氫維他 命D 3， 19 -原-26,27 -二乙基- 24-尚_1，25 -二經基-22-脫鼠維他命 〇3 ； 19-原-26,27-二乙基-24-二高-1，25-二羥基-22-脫氫維他 命D3 ; 19-原-26,27-二乙基-24-三高-1，25-二羥基-22•脫氫維他 命D3 ; 19 -原-26,27 -二丙基- 24 -南-1，25 -二經基-22-脫鼠維他命 〇3 ； 19 -原-26,27 -二丙基- 24 -二南-1，25_二經基_22-脫鼠維他 命D3 ;及 19-原-26,27-二丙基-24-三高-1，25-二羥基-22-脫氫維他 命D3 〇 當側鏈飽和時，結構I之2-次烷基化合物之特定及較佳實 例為： 94776.doc -18- 200522967 19_原-24·南-1，25 -二經基維他命D3 ; 19 -原-24 -二南-1，25-二經基維他命D3 ; 19-原-24-三高-1，25-二羥基維他命D3 ; 19-原-26,26-二甲基- 24 -高-1，25-二經基維他命d3 ; 19-原-26,27-二甲基-24-二高-1，2 5-二經基維他命d3 ; 19_原-26,27-二甲基-24-三高-1，25_二經基維他命〇3; 19-原_26,27_二乙基- 24 -高-1,25-二經基維他命d3 ; 19-原-26,27-二乙基- 24-二高-1，25-二經基維他命d3 ; 19-原-26,27-二乙基-24-三南-1，25-二經基維他命d3 ; 19-原-26,27_二丙基- 24 -南-1,25-二經基維他命d3 ; 19-原-26,27-二丙基-24-二高-1，25-二經基維他命d3 ;及 19-原-26,27-二丙基- 24-三南-1，25-二輕基維他命。 本發明之較佳雌激素激動劑/拮抗劑包括描述於美國專 利第5,552,412號中之化合物。彼等化合物係藉由本文以下 給出指定為式（A)之式來描述：

(A)

其中： A選自CH2及NR ; B、D及E係獨立地選自CH及N ; 94776.doc -19- 200522967 γ為 :視情況經獨立選自R4之1-3個取代基取代； 奈基’其視情況_立選自Ry取代基取代； 3 8讀基’其視情況經獨立選自R4之1_2個取代 基取代； 〜 (d)C3_C8環烯基 基取代； (e)含有選自由-〇_ 個雜原子的五員雜環， 基取代； 其視情況經獨立選自R4之1_2個取代 、-NR2_&_s(〇)n-組成之群的至高兩 其視情況經獨立選自R4之1-3個取代 ⑴含有至高兩個選自由_〇-、_NR2_及-S(0)n-組成之群 的雜原子的六員雜環，其視情況經獨立選自^之^個取代 基取代；或 (g)由稠合至苯環之五或六員雜環組成的雙環系統，該 雜％含有至高兩個選自由_〇_、_NR、及-S(〇)n_組成之蛘的 雜原子，其視情況經獨立選自R4之1-3個取代基取代； Z1為 (a) -(CH2)PW(CH2)q.; (b) -0(CH2)PCR5R6-; (c) <0(CH2)PW(CH2)q.; (d) -OCHR2CHR3_ ;或 (e) -SCHR2CHR3-; G為 (a)-NR7R8 ； 94776.doc -20- 200522967 (b)、_^z2 (CH2)n—’ 中 Ώ為 〇 ' 4 j、2或 3 ’· 22為_冊·、小、· Z且’視情況在相鄰碳原子上與—或兩個苯環相祠 〃 m碳上m三個取代基獨立取代，且 況在見上經選“4之化學上合適之取代基獨立取代；或月

組合之Z1及G可為

W為 (a) -CH2_ ; (b) -CH-CH-； (c) -0-; (d) _NR2_ ; (e) _S(0)n_ ; 〇 (f) ——C——; (g) -CR2(OH)-; (h) -CONR2-； 94776.doc (i) -NR2CO-;

(k)-C=C-； -21 200522967 R為氫或CVC6烷基； R2及R3獨立為 (a)氫；或 烷基； R4為 (a) 氫； (b) 鹵素； (cOCVCs 烷基； 烷氧基； (e)Ci-C4醯氧基； ⑴^-匕烷硫基； 烷基亞磺醯基； 烷基磺醯基； ⑴羥基（cvcu)烷基； (j) 芳基（CVC4)烷基； (k) -C02H ； (l) -CN ； (m) -CONHOR ； (n) -S02NHR ； (o) -NH2 ; (P)C「C4烧胺基， (q) C「C4二烧胺基， (r) -NHS02R ; (s) -N〇2 ； 94776.doc -22- 200522967 (t) 方基；或 (u) -OH ; R5及R6獨立為 R7及R8獨立為 (a)本基； CVC8烷基或一起形成C3_c〇碳環 (b) 飽和或不飽和C3-Cig碳環； (c) C3_C1()雜環，含有至高兩個選自_〇、_n_及之雜 原子； ’

⑷Η ; (e)Ci-C6燒基；或 (0與R5或R6形成3至8員含氮環； 線性或環形之R7及r8可視情況經至高三個獨立選自 Cl C6烷基、齒素、烷氧基、羥基及羧基之取代基取代； 由R7及R8形成之環可視情況稠合至苯環； e為0、1或2 ;

㈤為1、2或3 ; η為〇、1或2 ; ρ為 0、1、2或 3 ; q為 〇、1、2或 3 ; 及其光學與幾何學異構物；及其無毒醫藥上可接受之酸 加成鹽、N-氧化物、酯、四級銨鹽及前藥。 額外較佳之雌激素激動劑/拮抗劑揭示於美國專利第 5,5 52,412號中且藉由本文指定為式（八4之式來描述： 94776.doc -23- 200522967 och2ch2g u (Aa)

其中G為

R4為H、OH、F或Cl ;且B及E獨立選自CH及N，及其光 學與幾何學異構物；及其無毒醫藥上可接受之酸加成鹽、 N-氧化物、醋、四級錄鹽及前藥。 用於本發明方法之尤其較佳雌激素激動劑/拮抗劑為： 順-6-(4_氟基-苯基）-5-[4-(2 -六氫。比咬-1 —基-乙氧基）-苯 基]_5,6,7,8-四氫-伸萘基-2-醇； (>順-6-苯基-5-[4-(2-。比咯啶-1-基-乙氧基）-苯基卜 5,6,7,8-四氫-伸萘基-2-醇； 順-6-苯基-5-[4-(2-吡咯啶_1_基_乙氧基）_苯基]-5,6,7,8-四氫-伸萘基_2_醇； 順_1-[6’-吡咯啶基乙氧基-3，_吡啶基]_2_苯基·6_羥基一 1，2,3,4_四氫萘； 1-(4’_ °比咯啶基乙氧基苯基）-2-(4，，-氟苯基）-6-羥基-1，2,3,4_四氫異喹啉； 順-6-(4-羥苯基）_5·[4_(2_六氫σ比啶-丨_基-乙氧基 > 苯 94776.doc •24· 200522967 基]-5,6,7,8-四氬_伸萘基_2_醇； J ^各疋基乙氧基苯基笨基_6·經基·1，2,3,4-四， 異喹啉及其醫藥上可接受之鹽。 ，，氧 ㈠-順·6·苯基-5·[4·(24以· 5,6,7,8-四氫_伸关其？1^士* 乙氧基）苯基]_ 風伸奈基-2,尤其較佳之鹽為D·酒石酸鹽。 ，、匕較佳之雌激素激動劑/拮抗劑揭示於美 5，’3lt。藉由本文如所指定為下式(Β)之式來描二i 化合物之結構·· 田这《亥專

R1A

其中 ，R :、R τ相同或不同且為11、甲基、乙基或苄基’及豆 光學或幾何學異構物；及其醫藥上可接受之鹽、N•氧化物、、 酯、四級銨鹽及前藥。 額外車乂仏之雌激素激動劑/拮抗劑為美國專利第 4’536’5 16號中所揭示之化合物；基三苯氧胺（tamoxifen) 94776.doc -25- 200522967 (意即，其中2-苯基部分在4位置具有羥基之三苯氧胺）及美 國專利第4,623,660號所揭示之其它化合物；雷洛昔芬 (raloxifene):(甲酮，[6-經基-2-(4-羥苯基）苯幷[b]°塞吩 基][4-[2-(1-六氫σ比啶基）乙氧基]苯基]-鹽酸鹽）及美國專利 第 4,418,068號、第 5,393,763號、第 5,457，117號、第 5,478,847 號及第5,641，790號中所揭示之其它化合物；托瑞米芬 (toremifene):(乙胺，2-[4-(4•氣-1，2-二苯基-1-丁烯基）苯氧 基]-Ν，Ν-二甲基_，（Ζ)-，2-羥基-1，2,3-丙烷三羧酸酯（1:1)) 及美國專利第4,696,949號及第4,996,225號中所揭示之其它 化合物；西替色滿（centchroman): 1-[2_[[4-(-甲氧基-2,2-二 曱基-3·笨基-色滿_4-基）-苯氧基]-乙基]比咯啶及美國專利 第3,822,287號中所揭示之其它化合物；艾多昔芬 (idoxifene):。比咯啶，1 + [4-[[1-(4-碘苯基）-2_ 苯基-1-丁烯 基]苯氧基]乙基]及美國專利第4,839，155號中所揭示之其它 化合物；6-(4-羥基-笨基）-5-[4-(2-六氫吼啶-1-基-乙氧基）-节基]-萘-2-醇及美國專利第5,484,795號中所揭示之其它化 合物；及{4-[2-(2-氮雜-雙環[2.2.1]庚-2-基）-乙氧基]-苯 基}-[6-經基-2-(4-羥基-苯基苯幷噻吩_3_基> 甲酮及公 開之國際專利申請案W〇 95/10513中所揭示之其它化合 物。其它較佳之化合物包括Gw 5 63 8及GW 7604，其合成描 述於 Willson等人，j Med· Chem·，1994 ; 37:1550-1552 中。 進一步較佳之雌激素激動劑/拮抗劑包括EM-652(如在本 文中指定為式（C)之式所示）及EM-800(如式（D)在文中所指 定之式所示）° EM_652及EM-800之合成與各種對映異構物 94776.doc -26- 200522967 之活性描述於Gauthier等人，J. Med. Chem·，1997; 40:2 117-2122 中。

(Ο

(D) 進一步較佳之雌激素激動劑/拮抗劑包括TSE 424及美國 專利第5,998,402號、美國專利第5,985,910號、美國專利第 5,780,497號、美國專利第5,880，137號及歐洲專利申請案EP 0802183 A1中所揭示之其它化合物，其包括藉由下列在本 文中指定為式（E)及（F)之式來描述的化合物： 94776.doc -27- 200522967

其中：

RlB係選自Η、〇H或其CrCidl(直鏈或支鏈）或CVC12(直 鏈或支鏈或環形）烷基醚，或鹵素；4Cl-C4鹵化醚，包括三 氟甲基醚及三氣甲基醚。 R2B、R3B、R4B、r5B 及 r6B係獨立選自 Η、OH 或其 CVC12 酯（直鏈或支鏈(直鏈或支鏈或環狀）烷基醚、齒 素、或Ci-C4鹵化醚（包括三氟甲基醚及三氣甲基醚）、氰基、 Ci-Q烷基（直鏈或支鏈）、或三氟甲基； XA係選自Η、CVG烷基、氰基、硝基、三氟甲基、及_ 素， 94776.doc -28- 200522967 s為2或3 ; YA選自： a) 部分： Ά

I

白8B 其中R7B及R8B係獨立選自下列物質之群：Η、Ci_C6烷基， 或視情況經CN、CVC^基（直鏈或支鏈）、“Μ氧基（直 鏈或支鏈）、鹵素、_〇H、-CL或_〇以3所取代之笨基； b) 五員飽和、不飽和或部分不飽和雜環，其含有至高兩 個選自由·0-、-NH-、-N(Cl_C4 烷基）·、_N=A_s(〇)u_ 組成之 群的雜原子’其中u為〇-2之整數，該雜環視情況經獨立選 自由以下各基團組成之群的丨_3個取代基所取代：氫、羥 基、鹵基、c「C4烷基、三鹵甲基、Ci_C4烷氧基、三鹵甲氧 基、cvc4醯氧基、烷硫基、Ci_C4烷基亞績醯基、Ci_c4 烧基績醯基、羥基（CVC4)烧基、-C02H、-CN、-CONHR1B、 -NH2、Ci-C#烷胺基、二（Ci-CJ烷胺基、_NHS02R1B、 -NHCOR1B、-N〇2，及視情況經1—3個（Ci_C4)烷基取代之苯 基； c) 六員飽和、不飽和或部分不飽和雜環，其含有至高兩 個選自由-0-、-NH-、烷基）-、及-s(0)u-組成之 群的雜原子，其中u為0-2之整數，該雜環視情況經獨立選 自由以下各基團組成之群的1 -3個取代基取代：氫、經基、 鹵基、Ci-CU烧基、三鹵甲基、C1-C4燒氧基、三函甲氧基、 C1-C4S&氧基、C1-C4烧硫基、C1-C4烧基亞續酿基、（^<4烧 94776.doc -29- 200522967 基磺醯基、羥基（Ci-CJ烷基、-C02H、-CN、-CONHRi、-NH2、 ci-c4烷胺基、二（Cl-C4)烷胺基、-NHs〇2R1b、-NHCOR1B、 _N〇2，及視情況經1-3個（<：：1-(：4)烷基取代之苯基； d) 七員飽和、不飽和或部分不飽和雜環，其含有至高兩 個選自由-0-、_NH·、-NCCrG烷基）_、-N=及_S(0)U-組成之 群的雜原子，其中u為0-2之整數，該雜環視情況經獨立選 自由以下各基團組成之群的1_3個取代基取代：氫、羥基、 _基、CVC4烷基、三鹵甲基、Cl_c4烷氧基、三鹵甲氧基、 CVC4醜氧基、Cl_C4烷硫基、Cl-c4烷基亞磺醯基、Cl-C^ 基確 S藍基、羥基（CVC4)烷基、_C02H、-CN、-CONHR1B、 -NH2、CVCU 烷胺基、二（CVC4)烷胺基、-NHS02R1B、 •NHCOR1B、_n〇2，及視情況經U個（Cl_c4)烧基取代之苯 基；或 e) 雙環雜環，其含有經橋接或經稠合之6_12個碳原子且含 有至高兩個選自由_〇_、_NH_、_n(Ci_C4烷基>、及_s(〇l 組成之群的雜原子，其中ug0_2之整數，該雜環視情況經 獨立選自由以下各基團組成之群的1-3個取代基取代：氫、 羥基、鹵基、Ci-C：4烷基、三鹵甲基、Cl-C4烷氧基、三鹵甲 氧基C1-C4酿氧基、CVC4烧硫基、cvcu院基亞績醯基、 CVC4烧基磺酿基、羥基（Ci_c4)烷基、_c〇2H、_CN、 CONHR1B、-NH2、CVC4 烧胺基、二（Ci-c4)烧胺基、 NHS02R1B、-NHCOR1B、-N02，及視情況經卜3 個（CVC4) 烷基取代之苯基；及其光學與幾何學異構物；及其無毒醫 蕖上了接义之酸加成鹽、N-氧化物、g旨、四級銨鹽及前藥。 94776.doc -30- 200522967 本發明之較佳化合物為彼等具有以上一般結構（E)或（F) 者，其中： R1B係選自Η、OH或其Cl_Cl2酯或烷基醚，及鹵素； R2B、R3B、R4B、R5B及 r6B係獨立選自 Η、OH 或其 CVC12 酯或烷基醚、鹵素、氰基、Cl-c6烷基、或三鹵甲基（較佳為 三氣甲基）’其限制條件為當R1B為Η時，R2B不為OH ; XA係選自H、C^C：6烷基、氰基、硝基、三氟甲基及鹵素； YA為以下部分： R7B及R8B係獨立選自Η、CVC6烷基，或由-(CH2)W組合以 形成環’其中w為2至6之整數，該環視情況經至高三個選自 由以下各基團所組成之群的取代基取代：氫、經基、函基、 eve：4烷基、三鹵甲基、Cl-C4烷氧基、三鹵甲氧基、Cl—C4 烷硫基、CrC4烷基亞磺醯基、Ci-C^烷基磺醯基、羥基（(^-0：4) 烷基、-C02H、-CN、-CONHKCVC^ 烧基）、-NH2、CVC4 烷 胺基、c「c4二烷胺基、-NHS〇2(CVC4烷基）、_c〇(Ci_c& 基）及-N〇2 ;及其光學與幾何學異構物；及其無毒醫藥上可 接受之酸加成鹽、N -氧化物、醋、四級鈹鹽及前藥。 上面所提及的由串聯之尺巧及尺⑽形成的環可包括（但不 限於）：氮丙°定、吖丁啶、。比洛唆、六氫。比咬、六亞甲基胺 或七亞曱基胺環。 以上結構式（E)及（F)之較佳化合物為彼等其中Rib為 OH ; R2B-R6B如上所定義；Xa選自 cn、N02、CN、cf3 或 ch3 94776.doc •31 - 200522967 之群；γΑ為以下部分：

尺8日

R7B 且R?b與Rsb串聯至一起為-(CH2)t-以形成視情況經至高三個 選自由以下各基團組成之群的取代基取代之環，其中t為4 至6之整數··氫、羥基、鹵基、Cl-c4烷基、三鹵甲基、Cl-C4 烧氧基、三鹵甲氧基、Cl_C4烷硫基、Cl-C4烷基亞磺醯基、 Ci-C4烧基續醯基、羥基（Ci-C4)烷基、_c〇2h、、 -CONHA-CO烧基、-NH2、CVC4烧胺基、二（CVCU)烧胺基、 -NHSOKCVC4)烧基、-NHCOCCVC4)烧基、及-N02 ;及其光 學與幾何學異構物；及其醫藥上可接受之酸加成鹽、…氧 化物、酯、四級銨鹽及前藥。 另一較佳化合物為在本文中指定為下式（Ea)之式所描述 的 TSE-424 :

可用於本發明之組合態樣的另一 為阿坐昔芬(_Xifene) ’其揭示國專：動劑’拮抗, %義國專利第5,723,474 94776.doc -32- 200522967 中。 本發明亦係關於醫藥組合物及使用2_次烷基_19_原_維他 命D何生物與純抗雌激素之組合治療以下病症且用於提高 青春期顛峰骨質量及預防二次髖部骨折之方法··代謝性骨 疾病、老年性骨質疏鬆症、停經後骨質疏鬆症、類固醇誘 發之骨質疏鬆症、低骨轉換骨質疏鬆症、骨軟化症、腎性 月貝營養不良、牛皮癬、多發性硬化症、糖尿病、宿主抗 移植物排斥反應、移植排斥、類風濕性關節炎、哮喘、骨 折、移植骨、痤瘡、脫髮症、乾皮病、皮膚緊實性不足、 皮脂分泌不足、皺紋、高血壓、白血病、結腸癌、乳癌、 前列腺癌、肥胖症、骨質減少、男性骨質疏鬆症、性腺機 能減退、男性更年期、虛弱、肌肉損傷、肌肉貧乏症、骨 肉瘤、低鈣性手足抽搐、甲狀旁腺機能減退、軟骨病、維 生素D缺乏、厭食症、由侵犯性運動行為產生之低骨質。純 抗雌激素貫例包括克羅米芬（cl〇miphene)及曲沃昔芬 (trioxifene) 〇 本發明亦係關於用於治療以下病症且用於提高青春期之 顛峰骨質量及預防二次髖部骨折之醫藥組合物：代謝性骨 疾病、老年性骨質疏鬆症、停經後骨質疏鬆症、類固醇誘 發之骨質疏鬆症、低骨轉換骨質疏鬆症、骨軟化症、腎性 骨質營養不良、牛皮癬、多發性硬化症、糠尿病、宿主抗 移植物排斥反應、移植排斥、類風濕性關節炎、哮喘、骨 折、移植骨、痤瘡、脫髮症、乾皮病、皮膚緊實性不足、 皮脂分泌不足、皺紋、高血壓、白血病、結腸癌、乳癌、 94776.doc -33- 200522967 前列腺癌、肥胖症、骨質減少、男性骨質疏鬆症、性腺機 月b減退、男性更年期、虛弱、肌肉損傷、肌肉貧乏症、骨 肉瘤、低血鈣性手足抽搐、甲狀旁腺機能減退、軟骨病、 維生素D缺乏、厭食症、由侵犯性運動行為產生之低骨質， 該治療包括對有需要之患者投與2-次烷基-19_原-維他命D 衍生物（如式I化合物）與雌激素激動劑/拮抗劑或其醫藥上 可接文之鹽或前藥及載劑、溶劑、稀釋劑等類似物的組合。 應注意當化合物為文中所討論時，預期可將該等化合物 作為醫藥上可接受之鹽、前藥或前藥之鹽對患者投藥。所 有該等變更意欲包括在本發明内。 術語’’有需要之患者”意謂患有以下疾病或有患以下疾病 之危險且用於提咼青春期之顛峰骨質量及預防二次髖部骨 折的人或其它動物：代謝性骨疾病、老年性骨質疏鬆症、 停經後骨質疏鬆症、類固醇誘發之骨質疏鬆症、低骨轉換 骨質疏鬆症、骨軟化症、腎性骨質營養不良、牛皮癬、多 發性硬化症、糖尿病、宿主抗移植物排斥反應、移植排斥、 類風濕性關節炎、哮喘、骨折、移植骨、痤瘡、脫髮症、 乾皮病、皮膚緊實性不足、皮脂分泌不足、皺紋、高血壓、 白血病、結腸癌、乳癌、前列腺癌、肥胖症、骨質減少、 男性骨質疏鬆症、性腺機能減退、男性更年期、虛弱、肌 肉知傷、肌肉貧乏症、骨肉瘤、低血鈣性手足抽搐、甲狀 旁腺機能減退、軟骨病、維生素D缺乏、厭食症及由侵犯性 運動行為產生之低骨質。 本文所用術語f’治療”包括預防性（如預防劑）、緩和性及治 94776.doc -34- 200522967 癒性治療。 ^ 可接又思明s亥載劑、稀釋劑、賦形劑及/或鹽或 丽樂必須與該調配物之其它成份相容且對患者無害。 雌激素激動劑/拮抗劑”為影㈣激素所影響之相同受體 中之-些、但可不影響全部的化合物，且在—些情況下立 拮抗或阻斷雌激素。其亦稱為"選擇性雌激素受體調節劑" (SERM)。儘管雌激素激動騎抗劑在-些目標組織上具有 某_雌激素活性，但其亦可稱為抗雌激素。因此雌激素激 動劑/拮抗劑並非通常所指"純抗雌激素"。亦可充當激動劑 之抗雌激素稱為I型抗雌激素。丨型抗雌激素活化雌激素受體 以在核子中緊緊結合延長之時間{旦具有削弱t受體補給 (Clark等人，steroids，1973; 22:707，Capony等人，Mol Cell Endocrinol，1975; 3:233) 〇 術語”前藥，，意謂在活體内轉化產生本發明之化合物的化 合物。該轉化可藉由不同機制發生，如經由在血液中水解。 T. Higuchi及 W. Stella之 A.C.S. Symposium Series 第 14 卷 Pro-drugs as Novel Delivery Systems，，，及 Bioreversible Carriers in Drug Design，Edward B. Roche編，American Pharmaceutical Association and Pergamon Press，1987提供 前藥用途之論述。 舉例而言，當本發明化合物含有羧酸官能基時，前藥可 包含藉由以下列基團置換該酸基之氫原子而形成之酯，該 等基團例如：（C^-Cs)烷基、（C2-C12)烷醯基氧甲基、具有4 至9個碳原子之1-(烷醯基氧）乙基、具有5至10個碳原子之1- 94776.doc -35- 200522967

丁内醋-4-基、二-N s 兀乳I绞基氧）乙基、具有3至9 氧基羰基）胺甲基、具有4至1〇個碳原子之 胺基）乙基、3-酞基、4-巴豆酸内酯基、竹 -ν，ν-((^_(：2)燒胺基（C2_C3)烧基（如心二甲 胺基乙基）、胺甲醯基-(Cl-C2)烷基、N，N-二（Ci_c2)烷基胺 甲fe基-(Ci-C2)烷基及六氫吡啶_、吡咯啶·或嗎啉（C2_C3)烷 基。 類似地，當本發明化合物包含醇官能基時，可藉由以（例 如）下列基團置換該醇基之氫原子來形成前藥yCi-C6)烷醯 基氧甲基、l-GCVC6)烷醯基氧）乙基、i•甲基」_((Ci_C6)烧 S&基氧）乙基、（CVC6)烷氧基羰基氧甲基、N^CrCe)烷氧基 Ik基胺甲基、琥轴醯基、（Ci-C6)烧醯基、胺基（Ci-cj烧 酸基、务酿基及0!-胺醯基、或〇(-胺醯基_ 胺酸基，其中各… 胺St基係獨立選自：自然發生之L-胺基酸、ρ(〇)(〇Η)2、 4(0)(0((^-C6)烷基）2或糖基（由移除半縮醛形式之碳水化 合物的羥基產生之基團）。 當本發明化合物包含胺基官能基時，可藉由以（例如）下 列基團置換該胺基中之氫原子來形成前藥：Rx_幾基、rXq_ 羰基、NRXRX1-羰基，其中Rx及RX1彼此獨立為（Ci-Ci〇)烷 基、（C3_C7)環烧基、苄基，或Rx-緩基為自然胺酿基或自 然α-胺醯基-自然胺醯基；-C(0H)C(0)0Yx，其中γΧ為Η、 (Ci-C6)烧基或节基；-C(OYX〇)YX1，其中Υχο為（CrC^)烧基 94776.doc -36- 200522967 且Y為（κ6)烧基、皴基（CVC6)烧基、胺基（c^cj烧基或 單-N-CCVC6)烷胺基烷基或二-N，N_(Cl_c6)烷胺基烷基； -C(YX2)YX3，其中YX2為Η或甲基且γχ3為單·N_(C1_C6)烷胺 基或二-N，N_(C1_C6)烷胺基、嗎啉、六氫吡啶-1-基或吡咯啶-1 基0 π醫藥上可接受之鹽”之表達係指含有例如（但不限於）下 列陰離子之無毒性陰離子鹽：氣化物、溴化物、碘化物、 硫酸鹽、硫酸氫鹽、磷酸鹽、乙酸鹽、馬來酸鹽、反丁烯 二酸鹽（fumarate)、草酸鹽、乳酸鹽、酒石酸鹽、檸檬酸鹽、 葡萄糖酸鹽、甲磺酸鹽及4_甲苯_磺酸鹽。該表達亦指無毒 性陽離子鹽，例如（但不限於）：納、鉀、@、鎂、銨或質子 化卞星（Ν，Ν、二节基乙二胺）、膽驗、乙醇胺、二乙醇胺、 ^二，、甲葡胺（Ν-甲基·葡糖胺）、笨明咖㈣⑽㈣⑽ 苄基苯乙胺）、哌嗪或緩血酸胺（2-胺基_2_羥甲基_丨，3_丙二 醇）之鹽。 子氫反〜、氟及氣之放射性同位素分別包括3h 32p、35S、n — X 一 應認識到本發明化合物可以放射性同位素示縱之形式名 在’意即該等化合物可含有一或多個含有不同於通常於自 然界=發現之原子f量或f量數的原子質量或質量數^ 14 P、35S、18f及％。含有彼等放射性同位素及/或其以 子之其匕放射性同位素之本發明化合物係在本發明範# 内。氣化（意即4)及碳_14(意即放射性同位素因其易方 製備及可偵測性而尤盆較佳 乂仫本發明之放射性同位素示蹄 化合物一般可藉由熟習此項技術者熟知之方法加以製備。 94776.doc -37- 200522967 同位素示蹤劑取代非 之程序來便利地製備 可藉由執行除了以容易獲得之放射性 放射性同位素示蹤劑之外本文所揭示 3亥等放射性同位素示蹤化合物。 般熟習此項技術者應認識到本發明之某些 人 2-, , …二〜σ物具有 =少=不對稱碳料W此為對映異構物或㈣ 7可猎由本身已知之方法(如層析法及/或分步結晶)基於 非對映異構物之物理化學差異將其混合物分離為單獨之非 對映異構物。可藉由以下方法來分離該對映異構物：藉由 與適當光學活性化合物(例如醇)反應將對映異構物轉化為 非對映異構物混合物，分離該等非對映異構物且將單獨之 非對映異構物轉變（例如水解’其既包括化學水解法又包括 如酵素催化水解之微生物脂酶水解法）為相應之純對映里 構物。包括非對映異構物、對映異構物及其混合物之所有 該等異構物看作為本發明之部分。亦及本發明之某些化合 物為滞轉異構物（例如，經取代之聯芳基）且看作為本發明之 部分。 Χ 另外，當本發明之化合物（包括式〗之化合物或雌激素激 動劑/拮抗劑）形成水合物或溶合物時，其亦在本發明之範疇 内。 可經由系統性及/或局部性傳送本發明化合物之任何方 法來投與本發明之化合物。此等方法包括經口、非經腸及 經十二指腸内途徑等。一般而言，本發明化合物係經口投 藥’但例如當經口投藥不適合於該目標或當患者無法攝取 5亥藥物時，可利用非經腸投藥（例如靜脈内、肌肉内、透皮、 94776.doc -38- 200522967 皮下、直腸或髓内）。 亦可將本發明之化合物以合適載劑或稀釋劑局部施用於 患者體内或體外之部位。 可對一位人類患者投與約001微克/天至約1〇微克/天之 範圍内的2MD或本發明之其它孓次烷基-19_原·維他命])衍 生物。較佳之劑量範圍為約〇 〇5微克/天至約i微克/天且更 佳之劑量範圍為約〇·1微克/天至約〇.4微克/天。 一般而言，本發明之雌激素激動劑/拮抗劑之有效劑量在 〇·〇1至200毫克/公斤/天之範圍内，較佳為〇5至丨〇〇毫克/公 斤/天。 尤其為雷洛昔芬之有效劑量在〇1至1〇〇毫克/公斤/天之 範圍内，較佳為〇」至10毫克/公斤/天。 尤其為三苯氧胺之有效劑量在〇1至1〇〇毫克/公斤/天之 範圍，較佳為0.1至5毫克/公斤/天。 尤其為2_(4_甲氧基-苯基六氫吡咬小基-乙氧 基）-苯氧基]-苯幷[b]嘆吩-6-醇之有效劑量為㈣⑴毫克/ 公斤/天。 尤其為以下各化合物之有效劑量在〇 · 〇 〇 〇丨至丨〇 〇毫克/公 斤/天之範圍内，較佳為0.001至10毫克/公斤/天· 順-M4-I苯基）.5-(4-(2-六氫⑽基-乙氧基）_苯 基）-5,6,7,8-四氫-伸萘基-2-醇； (-)-順-6-笨基-5-(4-(2- 0比口各口定·】装 ^ ^ _ 、、疋b基-乙氧基）·苯基）_ 5,6,7,8-四氫-伸萘基_2_醇； 順-6-苯基-5-(4-(2_D比略。定小基.乙氧基）_笨基）-5,6,78_ 94776.doc -39- 200522967 四氫-伸萘基_2-醇； 貝（6比咯啶基乙氧基-3’-。比啶基）-2_苯基·羥基_ 1，2,3,4-四氫萘； 1 (4比咯啶基乙氧基苯基）-2-(4”-氟苯基）_6-羥基_ 1，2,3,4-四氫異啥琳； 順6 (4_搜苯基）-5-(4-(2-六氫η比啶_1_基_乙氧基）_苯 基）-5,6,7,8-四氫_伸萘基|醇；或 1 (4比各"疋基乙氧基苯基）-2-苯基-6-羥基-1，2,3,4_四氫 異喹琳。 ^ 技某里及時間安排應取決於所治療之患者、痛苦 嚴重性、投藥方式及處方醫師之診斷。因&，由於患者與 患者之可交性，所以本文所給劑量為指導性指標，且醫師 可滴定藥物劑量以獲得該醫師認為適合於該患者之治療。 考慮到所要之治療程度，該醫師必須平衡多種因子，如患 者年齡、存在既有疾病以及存在其它疾病。該劑量可一天 提供-次或_天提供多：欠’且可以持續釋放或可控釋放之 調配物提供。亦可能使用立即釋放與可控釋放及/或持續釋 放調配物之組合來投與該等化合物。 可根據任何連續或間歇性給藥時間表來投與2MD或其它 2-次烧基_19.原.維他命_生物及雌激素激動劑/拮抗劑或 其組合。2MD或另-2·找基]9_原·維他命D衍生物及雖激 素激動劑/拮抗劑或其組合之給藥時間表的非限制性實例 次、兩週多次、一月一次、一月多次 94776.doc -40- 200522967 次給藥 月'次及一年 一般以醫藥组合物形式投與本發明之化合物，該組合物 包括至少-種本發明之化合物連同醫藥上可接受之媒劑或 稀釋劑。0此’可以任何習知之經口、非經腸、直腸或透 皮劑型投與本發明之化合物。 對於經口投藥而言’醫藥組合物可採用溶液、懸浮液、 錠d丸劑 '膠囊、散劑等類似形式。採用含有如檸檬酸 納、碳酸#5及鱗酸約之各種賦形劑的錠劑，其與各種崩解 Μ (如;殿来刀1較佳為馬鈴薯或木薯澱粉)及某些錯合矽酸鹽 道，連同如聚乙烯吨略咬_、蔬糖、明膠及阿拉伯膠 da)之黏合劑。另夕卜，如石更脂㈣、月桂基硫酸鈉及滑 石之潤滑劑往往非常適用於製錠目的。相似類型之固體組 合物亦在軟填充及硬填充明膠膠囊中用作填充劑；就此而 言較佳材料亦包括乳糖或奶糖及高分子量聚乙二醇。當希 望經口投藥之含水懸浮液及/或酒劑時，本發明之化合物可 與各種甜味劑、調味劑、著色劑、乳化劑及/或懸浮劑，以 及如水乙醇、丙二醇、甘油及其各種類似組合之稀釋劑 、、且a 2MD及其它2_次烧基_i 9-原-維他命d衍生物可接受之 调配物貝例為含有耐奥比油（ne〇be 〇丨1)之軟明膠膠囊，2MD 及其它2-次烷基原-維他命〇衍生物已溶解於該油中。其 它合適調配物對於熟習此技術者而言將顯而易見。 對於非經腸投藥之目的，可採用在芝麻油或花生油或在 含水丙二醇中之溶液，以及相應水溶性鹽之無菌水溶液。 必要時可適當緩衝該等水溶液，且首先以足夠的鹽水或葡 94776.doc -41 - 200522967 萄糖提供該液體稀釋劑等滲性。該等水溶液尤其適用於靜 脈内、肌肉内、皮下及腹膜内之注射目的。就此而論，藉 由熟習此項技術者熟知之標準技術可很容易獲得所用無菌 含水介質。 為透皮（例如，局部）投藥之目的，製備稀釋之無菌、含 水或部分含水之溶液（通常約0.1%至5%之濃度）、及另外類 似於上文之非經腸溶液。 製備具有特定量活性成分之各種醫藥組合物的方法為已 知的且依據本揭示内容對於熟習此項技術者而言將變得顯 而易見。製備醫藥組合物之方法的實例請參閱Remington，s

Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Company, Easton, pa·，第 19版（1995)。 本發明之另一態樣為包含以下内容之套組： a. 在第一單元劑型中適量2_次烷基_19_原_維他命d衍生 物（如式I之化合物），及醫藥上可接受之載劑或稀釋劑； b. 在第二單元劑型中適量雌激素激動劑/拮抗劑或其醫藥 上可接受之鹽或前藥，及醫藥上可接受之載劑或稀釋劑； 及 C·一容器。 該套組包含兩種分離之醫藥組合物：如式〗之化合物的2_ 次烷基-19-原-維他命D衍生物及上述之第二化合物。該套 組包含用於谷納該等分離組合物之容器裝置，如分裝瓶子 或刀表V#片封包，但該寺分離組合物亦可容納於單一、未 分裝之容器内。該套組通常包含用於投與該等分離成分之 94776.doc -42- 200522967 況明書。當該等分離成分較佳以不同劑型（如經口及非經腸） 投藥、以不同劑量間隔投藥時或者當處方醫師希望滴定該 組合之單獨成分時該套組形式尤其有利。 違套組之實例為所謂發泡包裝。發泡包I在封裝工業中 為人所熟知且廣泛用於醫藥單位劑型（錠劑、膠囊等）之封 裝。發泡包裝一般係由一片覆蓋有一薄片較佳為透明塑膠 材料之相對硬質材料組成。在封裝製程中，塑膝箱片中形 成凹槽。该等凹槽具有待封裝之鍵劑或膠囊的尺寸及形 狀。接著，將該等錠劑或膠囊置於該等凹槽中且在該落片 之正面相對於該塑膠荡片密封該片相對硬質材料，該羯片 正面與形成該等凹槽之方向相反。因此，該等鍵劑或膠囊 岔封於塑膠羯片與薄片之間的凹槽内。該薄片之強度較佳 係使得該等錠劑或膠囊可以手動施壓於凹槽上藉以在該凹 π:内形成開口從而自該發泡包裝移出該等錠劑或 夕囊左由該開口就可移出該錠劑或膠囊。 2望在該套組上提供記憶輔助物，例如為緊接於 之數字形式，藉此該等數字符合所指定劑型應被吸 收之療法的天數。該記憶辅助物之另一實例為打印 上之日層，如以下”第一週，週一、 一 ^ — _··寺···弟二週，週 一、週二…”等。記憶辅助物之其它變 易見。”日劑量”可W日内待服用之什顯而 或若干鍵劑或膠囊。亦及幻之化合物、其：以或：囊 或該前藥之醫藥上可接受之鹽的.曰劑量可由、：“匕口物 組成，而第二化合物之曰劑量可由若干錠 94776.doc -43- 200522967 且反之亦然。該記憶輔助物應反映出此情況。 在本發明之另一特定實施例中，提供經設計以按其預期 用途之順序一次分配一種劑型之分配器。該分配器較佳配 備有記憶輔助物，以便進一步促進與該療法之順應性。該 記憶輔助物之實例為指示已分配之日劑量數之機械計數 器。該記憶辅助物之另一實例為外加液晶讀出器或可聽提 示訊號之電池驅動微晶記憶體，該讀出器或提示訊號（例如） 讀出上一次服用日劑量之日期及/或提醒服用下一次劑量 之時間。 可同時或不同時以相同劑型或不同劑型投與該2-次烷基-19-原-維他命D衍生物及雌激素激動劑/拮抗劑或其醫藥上 可接受之鹽或前藥。涵蓋投藥方法之所有變更。一較佳之 投藥方法為同時以相同劑型投與該組合。另一較佳投藥方 法為投與一種劑型之2-次烧基-19-原-維他命D衍生物及另 一種劑型之雌激素激動劑/拮抗劑或其醫藥上可接受之鹽 或前藥，該兩種劑型同時服用。 製備具有基本結構I之Ice-經基-2-烧基-19-原-維他命D化 合物、尤其為經基-2-甲基-19-原-維他命D化合物可藉由 常見一般方法來完成，意即使雙環溫道斯·古德曼 (Windaus-Grundmann)型酮II與烯丙基氧化膦III縮合得到相 應2-亞曱基-19-原-維他命D類似物IV，隨後在後者化合物之 C-1及C-3位置去除保護： 94776.doc -44· 200522967

R

R

在結構II、III及IV中，基團Yi&Y2及R表示以上定義之基 團；Y1&Y2較佳為羥基保護基團，亦應理解R中可能為敏感 的或干擾縮合反應之任何官能基應如此項技術中所熟知加 以適當保護。以上所示製程代表會聚性合成概念之應用， 其已有效應用於製備維他命D化合物[例如，Lythgoe等人， 94776.doc -45- 200522967 J. Chem. Soc. Perkin Trans. 1，590 (1978); Lythgoe，Chem· Soc. Rev. 9, 449 (1983); Toh等人，J. Org. Chem. 48，1414 (1983); Baggiolini等人，J· Org. Chem. 51，3098 (1986); Sardina等人，J. Org. Chem. 51，1264 (1986); J· Org. Chem· 51，1269 (1986); DeLuca等人，美國專利第 5,086，191 號； DeLuca等人，美國專利第5,536,713號]。 通式結構II之氫化茚酮為人所知或可藉由已知方法加以 製備。該等已知雙環酮之特定重要實例為具有上述側鏈 (a)、（b)、（c)及（d)之結構，意即，25-羥基古德曼_ (f)[Baggiolini等人，J. Org. Chem. 51，3098 (1986)];古德 曼酮（g)[Inhoffen等人，Chem· Ber. 90, 664 (1957)] ; 至 基溫道斯酮（h)[Baggiolini等人，J· Org. Chem· 51， (1986)]及溫道斯酮（i)[溫道斯等人，Ann·，524, 297 (1936)] ·

94776.doc -46 200522967

為製備所需通式結構III之氧化膦，開發了自奎尼酸甲酯 衍生物1起始之新合成路線，該衍生物可如由perlman等 人，Tetrahedron Lett· 32，7663(1991)及 DeLuca等人，美國 專利弟5,〇86，191號中所述很容易自市售（ir，3r，4S，5R)-〇 奎尼酸（quinic acid)獲得。該起始甲酯丨轉化為所要a環合成 纖維之全過程概述於流程圖I中。因此，以Ru〇4氧化（以 RuCh及NalCU作為共氧化劑之催化方法）丨之二級乒羥基。該 受阻羥基之有效氧化過程有必要使用該強氧化劑。然而， 亦可使用其匕更书用之氧化劑（如重鉻酸。比σ定鏽），儘管該等 反應通常需要長得多的時間來完成。該合成之第二步包括 空間受阻之4__基化合物2與自甲基三苯基演化鱗及正丁 基鐘製備之⑽鹽進行料希（wiuig)反應。其它驗亦可用 於生成該反應性亞甲基磷烷，該等鹼如第三丁基鉀、 94776.doc -47- 200522967

NaNH2、NaH、K/HMPT、NaN(TMS)2等。為製備4-亞甲基 化合物3，可使用該維蒂希方法之某些所述修改，例如使2 與經活化之亞甲基三苯基磷烷反應[Corey等人， Tetrahedron Lett· 26，555 (1985)]。或者，可採用廣泛用於 亞甲基化惰性酮之其它方法，例如與自甲基二苯基氧化膦 經以正丁基鋰之去質子化作用所獲得之PO内鑌鹽進行維蒂 希-霍諾（Wittig-Horner)反應[Schosse等人，Chimia 30，197 (1976)]，或使酮與甲基亞石黃酸鈉[Corey等人，J_ Org· Chem. 28，1128 (1963)]及甲基亞石黃酸鉀[Greene等人，Tetrahedron Lett· 3755 (1976)]反應。以氫化鋰鋁或其它合適還原劑（如 DIBALH)還原該酯3提供二醇4，其隨後經高碘酸鈉氧化為 環己酮衍生物5。該方法之下一步包括該酮5與（三甲基甲矽 烧基）乙酸甲酯進行彼德森（Peterson)反應。以二異丁基氫化 鋁處理所得稀丙酯6且又將所形成之烯丙醇7轉化為所要A 環氧化膦8。7轉變為8涉及3個步驟，即以正丁基鋰及對甲 苯磺醯氣進行就地甲苯磺醯化，隨後與二苯基膦鋰鹽反應 及以過氧化氫進行氧化。 可使用A環合成纖維8及具有所要側鏈結構之合適溫道斯-古德曼酮II來合成通式結構IV之若干2-亞甲基-19-原-維他 命D化合物。因此，舉例而言，將自8及正丁基鋰生成之膦 氧基碳化經與根據公開程序[Sicinski等人，J· Med. Chem. 37，3730 (1994)]所製備之經保護25-羥基古德曼酮9進行維 蒂希-霍諾偶合得到了預期之經保護維他命D化合物10。此 化合物以AG 50W-X4陽離子交換樹脂去保護之後得到 94776.doc -48- 200522967 !α，25-二羥基-2-亞f基原-維他命”。 藉由氧化膦8與經保護之（2〇s)-25-羥基古德曼酮13進行 類似偶合來完成C-20差向異構化作用（流程圖π)且提供了 19-原-維他命14，其在該等羥基保護基團水解後得到 (20S)-la，25-二羥基_2_亞f基_19_原_維他命〇3(15)。如上文 所指出，可藉由本文所揭示之方法來合成其它2_亞甲基·ΐ9_ 原-維他命D類似物。舉例而言，可藉由提供古德曼酮來 獲得la-羥基_2_亞甲基_19_原·維他命D3。 本申喷案中所引用之所有文獻（包括專利及專利申請案） 均以引用之方式併入本文中。以下所呈現之實例旨在說明 本心明之特定實施例而非旨在以任何方式限制本發明、包 括申請專利範圍。 實例 在本申請案中使用了以下縮略語。 NMR 核磁共振 mp 熔點 Η 氫 h 小時 min 分鐘 t-Bu 第三丁基 THF 四氫呋喃 n-BuLi 正丁基鋰 MS 質譜 HPLC 高壓液相層才斤 94776.doc -49- 200522967 SEM 標準誤差量測 Ph 苯基 Me 甲基 Et 乙基 DIBALH 二異丁基氫化鋁 LDA 二異丙基醯胺鋰 式i化合物之製備方法描述於如下之美國專利第 5,843,928號中： 在此等實例中，由阿拉伯數字（如1、2、3等）識別之特定 產物係指在前文具體說明及在流程圖【及流程圖π中如此識 別之特定結構。 實例1 製備1α，25-二羥基-2-亞甲基-19-原-維他命d3(11) 首先參考流程圖I，如前述[Perlman等人，Tetrahedron Lett. 32, 7663 (1991)及DeLuca等人，美國專利第5,086，191號]自 市售（-)-奎尼酸得到該起始奎尼酸甲S旨衍生物1。1:11^· 82。-82.5°C.(自己烷），iHNMRCCDCh) δ 0.098, 0.110, 0.142 及 0.159 (各 3Η，各 s，4xSiCH3)，0.896及 0.911 (9Η及 9Η，各 s，2xSi-t-Bu)，1.820 (1H，dd，J=13.1，10·3 Ηζ)，2·02 (1H，ddd， J=14.3, 4.3, 2·4 Hz)，2·09 (1H，dd，J=14.3, 2.8 Hz)，2.19 (1H， ddd，J= 13.1，4·4, 2·4 Hz)，2·31 (1H，d，J=2.8 Hz，OH)，3.42 (1H，m;在 D2O dd 之後，J=8.6，2.6 Hz)，3.77 (3H，s)，4.12 (1H，m)，4.37 (1H，m)，4·53 (1H，br s，OH)。 (a)氧化奎尼酸甲酯衍生物1中之4-羥基 94776.doc -50- 200522967 (3尺，51〇-3,5-雙[(第三丁基二甲基甲矽烷基）氧]-1-羥基_ 4-氧代環己烷羧酸甲酯（2)。向水合氯化釕（111)(434 mg，2.1 mmol)與高蛾酸鈉（10.8g，50.6 mmol)在水（42 mL)中的經攪 拌之混合物中添加奎尼酸甲酯1(6.09 g，14 mmol)之 CC14/CH3CN(1:1 ’ 64 mL)溶液。繼續劇烈撥拌8 h。添加幾 滴2-丙醇，將該混合物傾入至水中且以氯仿萃取。組合該 等有機萃取物，將其以水洗滌、乾燥（MgS04)及蒸發得到深 色油狀殘餘物（約5 g)，其藉由閃火層析法加以純化。以己 烧/乙酸乙酯（8:2)溶離得到純淨油狀4-酮2(3.4 g，56%) : 4 NMR (CDC13) δ 0.054，0.091，0.127及 0.132 (各 3H，各 s， 4xSiCH3)，0.908 及 0.913 (9Η及 9Η，各 s，2xSi_t-Bn)，2·22 (1Η，dd，J=13.2，11·7 Ηζ)，2·28 (1Η，〜dt J=14.9, 3·6 Ηζ)， 2.37 (1Η，dd，J=14.9, 3.2 Ηζ)，2·55 (1Η，ddd，J=13.2, 6.4, 3·4 Hz)，3.79 (3H，s)，4·41 (1H，t，J〜3.5 Hz)，4.64 (1H，s，〇H)， 5·04 (1H，dd，J=11 ·7, 6·4 Hz) ; MS m/z(相對強度）無 M+，375 (M't-Bu，32)，357 (M、t-Bu-H20, 47)，243 (31)，225 (57)， 73 (100) 〇 (b)4-酮2之維蒂希反應 (3R，5R)-3,5-雙[(第三丁基二甲基甲矽烷基）氧卜丨-羥基_ 心亞甲基環己烷羧酸曱酯（3)。在氬氣及攪拌下於〇。(：下向無 水丁1^(32 111乙）中之甲基三苯基溴化鳞（2.813§，7.88 111111〇1) 逐滴添加正丁基鋰（在己烷中2·5 Μ，6.0 mL，15 mmol)。接 著添加另一份^1#113?+81^(2.813§，7.88 111111〇1)且於〇。〇下擾 拌該溶液1〇分鐘並在室溫下攪拌40分鐘。再次將該橙紅色 94776.doc -51 - 200522967 混合物冷卻至0°C且在20分鐘内將4-酮2(1.558 g，3.6 mmol) 之無水THF(16+2 mL)溶液虹吸至反應燒瓶。於〇〇Ct授拌該 反應混合物1 h且在室溫下攪拌3 h。接著將該混合物小心傾 . 入至濃度為1% HC1之鹽水中且以乙酸乙酯及苯萃取。將該 等經組合之有機萃取物以稀釋之NaHC〇3及鹽水洗滌、乾燥 (MgSCU)及蒸發得到燈色油狀殘餘物（約2.6 g)，其藉由閃火 層析法加以純化。以己烷/乙酸乙酯（9 : 1)溶離得到呈無色 油狀物之純淨4-亞甲基化合物3(368 mg，24%) : 士 NMR _ (CDC13) δ 0_078, 0.083, 0.092及 0.115(各3H，各s，4xSiCH3)， 0.889 及 0·920(9Η及 9H，各 s，2xSi-t-Bu)，1·811 (1H，dd， J=12.6，11.2 Ηζ)，2·10 (2H，m)，2.31 (1H，dd，J=12.6，5·1 Hz)， 3.76 (3H，s)，4·69 (1H，t，J=3.1 Hz)，4.78 (1H，m)，4·96(2Η， m ;在D20後 1H，br s)，5·17 (1H，t，J=1.9 Hz); MS m/z(相對 強度）無 M+，373 (M+_t_Bu，57)，355 -H20, 13)，341 (19)，313 (25)，241 (33)，223 (37)，209 (56)，73 (100) 〇 (c)還原4-亞甲基化合物3中之酯基 _ [(3R，5R)-3,5-雙[(第三丁基二甲基甲矽烷基）氧]-1-羥基-4-亞曱基環己基]甲醇（4)。⑴在氬氣下於0°C下向經攪拌之 醋3(90 mg，0.21 mmol)之無水THF(8 mL)溶液添加氫化經 鋁（60 mg，1.6 mmol)。在1 h後移除該冷卻浴且於6°C下繼 · 續攪拌12h並在室溫下攪拌6h。以飽和Na2S04水溶液分解 過量試劑且將該混合物以乙酸乙酯及醚萃取、乾燥（MgS04) 及蒸發。以己烷/乙酸乙酯（9 : 1)進行閃火層析法獲得未反 應基質（12 mg)及純淨結晶二醇4(35 mg，基於回收酯3為 94776.doc -52- 200522967 48%) : 4 NMR (CDC13+D20) δ 0.079，0.091，0·1〇〇 及 0.121(各 3Η，各 s，4xSiCH3)，0.895及 0·927(9Η及 9Η，各 s , 2xSi-t-Bu)，1.339 (1Η，t，J〜12 Ηζ)，1.510 (1Η，dd，J=14.3, 2.7 1^)，2.10(211，111)，3.29及3.40(111及111，各(1，1=11.0 1^)， 4·66 (1H，t，J〜2·8 Hz)，4·78 (1H，m)，4·92 (1H，t，J=1.7 Hz)， 5.13 (1H，t，J=2.0 Hz); MS m/z(相對強度）無 M+，345 (M+-t-Bu，8)，327 (M+-t-Bu-H20，22)，213(28)，195(11)， 73(100) 〇 (ii)在氬氣下於-78°C下將二異丁基氫化鋁（在甲苯中1.5 Μ，2.0 mL，3 mmol)添加至醋 3(215 mg，0.5 mmol)之無水 乙醚（3 mL)溶液内。於-78°C下攪拌該混合物3 h且於-24。(3下 攪拌1.5 h，以乙醚（10 mL)稀釋且藉由緩慢添加2 N酒石酸 鉀鈉來中止。將該溶液溫至室溫且攪拌1 5分鐘，將其傾入 至鹽水中且以乙酸乙酯及乙醚萃取。將該等有機萃取物组 合、以稀鹽酸（約1%)及鹽水洗滌、乾燥（MgS04)及蒸發。藉 由閃火層析法純化該結晶殘餘物。以己烷/乙酸乙酯（9 : i) 溶離得到結晶二酵4(43 mg，24°/〇)。 (d)裂解鄰位二醇4 (3R，5R)-3,5-雙[(第三丁基二甲基曱矽烷基）氧]-4-亞甲基 環己酮（5)。於0°C下將高碘酸鈉飽和水溶液（2.2 mL)添加至 二醇4(146 mg，0.3 6 mmol)之甲醇（9 mL)溶液。將該溶液於 〇°C下攪拌1 h、傾入至鹽水中且以醚及苯萃取。將該等有機 萃取物組合、以鹽水洗滌、乾燥（MgSOO及蒸發。將油狀殘 餘物>谷解於己烧（1 mL)中且施用於二氧化碎Sep-Pak濾筒 94776.doc -53- 200522967 上。以己烷/乙酸乙酯（95:5)溶離出呈無色油狀物之純淨4_ 亞甲基環己酮衍生物5(110 mg，82%) : 4 NMR (CDC13) δ 0·050 及 0·069(6Η 及 6Η，各 s，4xSiCH3)，0.881 (18H，s， 2xSi-t-Bu), 2·45 (2H，ddd，J=14.2，6.9，1.4 Hz)，2·64 (2H， ddd，J=14.2，4·6，1·4 Hz)，4·69 (2H，dd，J=6.9，4·6 Hz)，5.16 (2H，s); MS M/z(相對強度）無 M+，355 (M+-Me，3)，313 (M+_t-Bu，100)，73 (76)。 O)製備烯丙酯6 [(3义，51)-3’，5’-雙[(第三丁基二甲基甲矽烷基）氧]-4，_亞 曱基亞環己基]乙酸甲酯（6)。在攪拌下於-78°C及氬氣下向 二異丙基胺（3 7 μί，0.28 mmol)之無水THF(200 μΐ^)溶液添 加正丁基經（在己烧中2.5^4，113 0!^，〇.28 111111〇1)，且接著 添加（三甲基甲石夕烧基）乙酸甲酯（46 μί，0.28 mmol)。1 5分 鐘後，逐滴添加無水THF(200 + 80 pL)中之酮基化合物5(49 mg，0.132 mmol)。於-78°C下攪拌該溶液2 h且以飽和NH4C1 中止該反應混合物，將其傾入至鹽水中且以醚及苯萃取。 將該等經組合之有機萃取物以鹽水洗滌、乾燥（MgS04)及蒸 發。將該殘餘物溶於己烷（1 mL)且施用在二氧化矽Sep-Pak 濾筒上。以己烷及己烷/乙酸乙酯（98 : 2)溶離得到呈無色油 狀物之純烯丙酯 6(50 mg，89%) : 4 NMR (CDC13) δ 0.039, 〇·〇64及 〇·〇76(6Η，3Η及 3Η，各 s，4xSiCH3)，0.864及 0·884(9Η 及 9Η，各 s，2xSi-t-Bu)，2.26 (1Η，dd，J=12.8, 7.4 Ηζ)，2.47 (1H，dd，J=12.8, 4.2 Hz)，2.98 (1H，dd，J=13.3, 4.0 Hz)，3·06 (1H，dd，J=13.3, 6.6 Hz)，3·69 (3H，s)，4·48 (2H，m)，4.99 94776.doc -54- 200522967 (2H，s)，5·74 (1H，s) ; MS m/z(相對強度）426 (M+，2)，411 (M+-Me，4)，369 (M+-t-Bu，100)，263(69)。 (f)還原烯丙S旨6 2-[(3’11，5’11)-3’，5’-雙[(第三丁基二甲基曱矽烷基）氧]-4，-亞甲基亞環己基]乙醇（7)。在氬氣下於-78°C下將二異丁基 氫化紹（在甲苯中1 ·5 Μ，1 ·6 mL，2.4 mmol)緩慢添加至經 攪拌的烯丙酯6(143 mg，0.33 mmol)之甲苯/二氣甲烧（2:1， 5.7 mL)溶液。於-78°C下繼續攪拌1 h且於-46°C(環己酮/乾 冰浴）下攪拌25分鐘。藉由緩慢添加酒石酸鉀鈉（2 N，3 mL)、HC1水溶液（2 N，3 mL)及H20(12 mL)來中止該混合 物，且接著以二氣甲烧（12 mL)稀釋並以醚及苯萃取。將該 等有機萃取物組合、以稀鹽酸（約1%)及鹽水洗滌、乾燥 (MgSOO及蒸發。藉由閃火層析法純化該殘餘物。以己烷/ 乙酸乙酯（9:1)溶離得到結晶烯丙醇7(130 mg，97%) : 4 NMR (CDC13) δ 0.038，0.050及 0·075(3Η，3H及 6H，各 s， 4xSiCH3)，0.876及 0·904(9Η及 9Η，各s，2xSi-t-Bu)，2.12 (1Η， dd J=12.3, 8.8 Hz), 2.23 (1H, dd, J=13.3, 2.7 Hz), 2.45 (1H, dd，J=12.3，4·8 Hz)，2.51 (1H，dd，Χ=13·3，5·4 Hz)， 4.04(1H，m ;在020 dd之後，J=12.0，7·0 Hz)，4·17(1Η，m ; 在 D20 dd之後，J=12.0，7.4 Hz)，4.38 (1H，m)，4·49 (1H，m)， 4.95 (1H，br s)，5.05 (1H，t，J=1.7 Hz)，5.69 (1H，〜t，J=7.2 Hz); MS m/z(相對強度）398 (M+，2)，383 (M'Me，2)，365 (M+-Me-H2〇, 4)，341 (M+-t_Bu，78)，323 (M+_t-Bu_H20, 10)， 73 (100)。 94776.doc -55- 200522967 (g)烯丙醇7轉變為氧化膦8 [2_[(3 R，5 R)U_雙[(第三丁基二甲基甲石夕燒基）氧]_4，_ 亞甲基亞環己基]乙基]二苯基氧化膦。於〇〇c下在氬氣 下’將正_丁基鋰（溶於己烷中，2.5 μ，1〇5 pL，0.263 mmol) 加至溶於無水丁1^(2.4 1111〇之烯丙醇7(1〇5 11^，0.263 111111〇1) 溶液中。將新鮮經再結晶之甲苯磺醯氯（5〇·4 mg，〇.264 mmol)溶於無水THF(48〇 中，且添加至該烯丙醇_丁基經 〉谷液中。於〇°C下攪拌該混合物5分鐘，且擱置於〇。〇下。在 另一個以氬氣置換空氣之乾燥燒瓶中，於〇。〇及攪拌下，將 正·丁基鋰（溶於己烷中，2.5 Μ，210 μί，0·525 mmol)添加 至溶於無水 THF(750 μι)中之 Ph2PH(93 μί，0.534 mmol)溶 液中。在氬氣壓下，將該紅色溶液虹吸至甲苯磺酸酯溶液 中直到燈色持續存在（添加約該溶液之二分之一）。於〇 下’再攪拌所得混合物30分鐘，且藉由添加h2〇(3〇 pL)中 止。減麼下蒸發溶劑’且將殘餘物再溶解於二氣甲烧（2·4 mL) 中，並於0°C下與10% H2〇2—起攪拌1 h。將該有機層分離、 以冷亞硫酸納水溶液及H2〇洗條，經乾燥（MgS04)及蒸發。 s亥殘餘物以閃火層析法進行純化。以苯/乙酸乙醋（6:4)溶離 得到半結晶氧化膦 8(134 mg，87%) : !h NMR (CDC1J δ 0.002, 0.011 及 0·019(3Η，3Η及 6Η，各 s，4xSiCH3)，0·85 5 及 〇·860(9Η及 9Η，各s，2xSi-t-Bu)，2.0-2.1 (3Η，br m)，2·34 (1Η， m)，3.08 (1H，m)，3.19 (1H，m)，4·34 (2H，m)，4.90及 4·94 (1H及 1H，各 s)，5·35 (1H，〜q，J=7.4 Hz)，7·46 (4H，m)，7·52 (2H，m)，7·72 (4H，m) ; MS m/z(相對密度）無 m+，581 (M+-1， 94776.doc -56- 200522967 1)，567 (M+-Me，3) 525 (M+-t-Bu，100)，450(10)，393(48)。 (h)經保護之25-羥基古德曼酮9與氧化膦8之維蒂希-霍諾偶 合 1α，25-二羥基-2-亞甲基-19-原-維他命D3(l 1)。在授拌及 氣氣下’於〇C下’向氧化鱗8(33.1 mg，56.8 μηιοί)之無水 THF(450 μΐ^)溶液緩慢添加正丁基鐘（在己烧中2.5 Μ，23 pL，57.5 μηιοί)。該溶液變為深橙色。將該混合物冷卻至 •78 C ’且緩慢添加根據公開程序[Sicinski等人，J. Med. Chem· 3 7, 3730 (1994)]製備之經保護羥基酮9(9.0 mg，22.8 μιηοΐ)之無水THF(200+100 pL)預冷（-78。〇溶液。在氬氣下 於-78°C下攪拌混合物1 h且於〇°C下攪拌18 h。添加乙酸乙 酯，且將有機相以鹽水洗滌、乾燥（MgS04)及蒸發。將該殘 餘物溶於己烷中且施用於二氧化矽Sep-Pak濾筒上，並以己 烧/乙酸乙酯（99:1，20 mL)洗滌得到19-原-維他命衍生物 10(13.5 mg，78%)。接著以己烷/乙酸乙酯（96:4，10 mL)洗 滌該Sep-Pak以回收一些未變化之C，D-環酮9(2 mg)，且以乙 酸乙酯（10 mL)洗滌回收二苯基氧化膦（20 mg)。為分析目的 使用己烷/乙酸乙酯（99.9:0.1)溶劑系統藉由HPLC(6.2 mm X 25 cm Zorbax-Sil管柱，4 mL/分鐘）進一步純化經保護之維 他命D樣品。於Rv26 mL溶離出呈無色油狀物之純淨化合物 D : UV(己烷中）kmax 224, 253, 263 nm ; 4 NMR (CDC13) δ 0.025, 0.049, 0·066及 0·080(各 3Η，各 s，4xSiCH3)，0_546 (3Η， s，18-H3)，0·565 (6H，q，J=7.9 Hz，3xSiCH2)，0.864 及 0·896(9Η及 9H，各 s，2xSi-t-Bu)，0.931 (3H，d，J=6.0 Hz， 94776.doc -57- 200522967 21-H3)，0.947 (9H，t，J=7.9 Hz，3xSiCH2CH3)，1.188 (6H，s， 26-及 27-H3)，2.00 (2H，m)，2.18 (1H，dd，J=12.5，8.5 Hz， 4α-Η)，2·33 (1H，dd，J=13.1，2.9 Hz，10β-Η)，2·46 (1H，dd J=12.5, 4.5 Hz5 4a-H)5 2.52 (1H, dd5 J-13.1, 5.8 Hz, 10a-H), 2.82 (1H，br d，J=12 Hz，9β-Η)，4·43 (2H，m，1β_及 3a_H)， 4.92及4.97(1«[及11~1，各3，=(：出），5.84及6.22(111及111，各(1， J=11.0 Hz，7-及 6-H) ; MS m/z(相對強度）758 (M+，17)，729 (M+-Et，6), 701 (M+_t_Bu，4)，626 (100)，494 (23)，366 (50)， 73 (92)。 將經保護維他命10(4.3 mg)溶於苯（150 μΙ〇中且添加甲醇 (800 μΙ〇中之樹脂（AG 50W-X4，60 mg ;以甲醇預洗滌）。 將該混合物在氬氣下於室溫下攪拌17 h、以乙酸乙酯/乙醚 (1:1，4 mL)稀釋且傾析出來。以乙醚（8 mL)洗滌該樹脂且 該等經組合之有機相以鹽水及飽和NaHC03洗滌、乾燥 (MgSCU)及蒸發。使用己烷/2-丙醇（9:1)溶劑系統藉由 HPLC(62 mm X 25 cm Zorbax-Sil 管柱，4 mL/分鐘）來純化該 殘餘物。於Rv 29 mL收集（在相同系統中於RV 52 mL溶離 1α，25-二羥基維他命D3)呈白色固體之分析純2-亞甲基-19-原-維他命 11(2_3 mg，97%) : UV(EtOH 中）kmax 243.5，252, 262.5 nm ； lU NMR (CDC13) δ 0.552 (3H, s, 18-H3)? 0.941 (3H，d，J=6.4 Hz，21-H3)，1.222 (6H，s，26-及 27-H3)，2.01 (2H，m)，2.27-2.36 (2H，m)，2·58 (1H，m)，2.80-2.88 (2H，m)， 4.49(2H，m，ip-&3a-H)，5.10&5.11(lH&lH，&s，=CH2)， 5·89 及 6·37(1Η及 1H，各d，J=11.3 Hz，7-及 6-H); MS m/z(相 94776.doc -58- 200522967 對強度）416 (M+，83)，398 (25)，384 (3 1)，380 (14)，351 (20)， 313(100)。 實例2 製備（20S)-la，25-二羥基—2-亞甲基-19-原-維他命D3(15) 流程圖II *明經保護（2OS)-25-經基古德曼嗣13之製備方 法及其與氧化膦8(如實例1所述得到）之偶合。 (a) 甲石夕烧基化經基酮12 (20S)-25-[(三乙基曱矽烷基）氧卜消-A，B_膽甾烷酮 (13)。以二乙基甲石夕烧基氣（95 μΐ^，0.56 mmol)處理該_ 12(Tetrionics，Inc. Madison，WI. ; 56 mg，0·2 mmol)及咪唾 (65 mg，0·95 mmol)之無水DMF(1.2 mL)溶液，且在氬氣下 於室溫下授拌該混合物4 h。添加乙酸乙酯及水，且分離有 機層。將乙酸乙酯層以水及鹽水洗滌、乾燥（MgS〇4)及蒸 發。使該殘餘物穿過己烷/乙酸乙酯（9:1)中之二氧化石夕 Sep-Pak渡筒’且在蒸發後，使用己烧/乙酸乙§旨（9:1)溶劑系 統藉由 HPLC(9.4 mm X 25 cm Zorbax-Sil管柱，4 mL/分鐘） 進行純化。於Rv 3 5 mL溶離出呈無色油狀物之純淨經保護 之羥基酮 13(55 mg，70%) : !H NMR (CDC13) δ 0.566 (6H，q， J=7.9 Hz，3xSiCH2)，0.638 (3H，s，18-H3)，0.859 (3H，d， ί^ό.Ο Hz, 21-H3), 0.947 (9H, t, J=7.9 Hz, 3xSiCH2CH3) 1.196 (6H，s，26-及 27-H3)，2·45 (1H，dd，J=11.4，7 5 Hz 14a_H)。 (b) 經保遣之（208)-25-¾基古德曼嗣13與氧化膦8之維蒂希 霍諾偶合 94776.doc •59- 200522967 (20S)-la，25-二經基-2-亞甲基-19-原-維他命D3(15)。在氛 氣及攪拌下於(TC下向氧化膦8(1 5.8 mg，27.1 μπιοί)之無水 THF(200 μ。）溶液添加正丁基鋰（在己烷中2.5 Μ，11 μΐ^， 27·5 μπιοί)。該溶液變為深橙色。將該混合物冷卻至_78qC 且緩慢添加經保護羥基酮13(8.0 mg，20.3 μπιοί)之無水 THF(100 gL)預冷（-78^)溶液。在氬氣下於-78°C下攪拌混合 物1 h及於0°C下1 8 h。添加乙酸乙酯，且將有機相以鹽水洗 滌、乾燥（MgS04)及蒸發。將該殘餘物溶於己烷中且施用於 二氧化矽Sep-Pak濾筒上，且以己烷/乙酸乙酯（99.5:0.5，20 mL)洗滌得到呈無色油狀物之19-原·維他命衍生物14(7 mg，45%)。接著以己烷/乙酸乙酯（96:4，10 mL)洗滌該 Sep-Pak以回收一些未改變之C，D-環酮13(4 mg)，且以乙酸 乙酯（10 mL)回收二苯基氧化膦（9 mg)。為分析目的使用己 烷/乙酸乙酯（99·9··0·1)溶劑系統藉由HPLC(6.2 mm X 25 cm Zorbax-Sil管柱，4mL/分鐘）進一步純化經保護之維他命14 樣品。 14: UV(己烷中）Xmax 244, 253.5, 263 nm; 4 NMR (CDC13) δ 0.026, 0.049, 0.066及 0.080 (各 3H，各 s，4xSiCH3)，0.541 (3H，s，18-H3)，0.564 (6H，q，J=7.9 Hz，3xSiCH2), 0.848 (3H， d，J=6.5 Hz，21-H3)，0.864 及 0.896 (9H 及 9H，各 s， 2xSi-t-Bu)，0.945 (9H，t，J=7.9 Hz，3xSiCH2CH3)，1.188 (6H， s，26-及 27-H3)，2.15-2.35 (4H，br m)，2.43-2.53 (3H，br m)， 2·82 (1H，br d，J=12.9 Hz，9β-Η)，4·42 (2H，m，1β-及 3a-H)， 4.92及 4·97(1Η及 1H，各 s，=CH2)，5_84 及 6·22(1Η及 1H， 94776.doc -60- 200522967 各d，J=ll.l Hz，7-及 6-H) ; MS m/z(相對強度）758 (M+，33)， 729 (M+_Et，7)，701 (M+-t_Bu，5)，626 (100)，494 (25)，366 (52)，75 (82)，73 (69)。 將經保護之維他命14(5.0 mg)溶於苯（160 μΙ〇中且添加甲 醇（900 μΙ〇中之樹脂（AG 50W-X4，70 mg ;以甲醇預洗滌）。 將該混合物在氬氣下於室溫下攪拌19 h、以乙酸乙酯/醚 (1 : 1，4 mL)稀釋且傾析出來。以乙醚（8 mL)洗滌該樹脂且 將該等經組合之有機相以鹽水及飽和NaHC03洗滌、乾燥 (MgS04)及蒸發。使用己烷/2-丙醇（9: 1)溶劑系統藉由HPLC (6.2 mm X 25 cm Zorbax-Sil管柱，4 mL/分鐘）純化該殘餘 物。於Rv 28 mL收集[在相同系統中於Rv 29 mL溶離（20R)-類似物且於1^52 1!11^溶離1(1，25-二羥基維他命〇3]呈白色固 體之分析純2-亞甲基-19-原-維他命15(2.6 mg，95%): UV(EtOH 中）Xmax 243.5, 252.5, 262.5 nm ; 3H NMR (CDC13) δ 0·551 (3H，s，18-H3)，0·858 (3H，d，J=6.6 Hz，21-H3)， 1.215(6H，s，26-及 27-H3)，1·95-2·04 (2H，m)，2.27-2.35 (2H， m)，2.58 (1H，dd，J=13.3, 3.0 Hz)，2.80-2.87 (2H，m)，（2H，m， 1β-及 3a-H)，5.09 及 5.11(1H 及 1H，各 s，=CH2)，5.89 及 6·3 6(1Η及 1H，各 d，J=11.3 Hz，7-及 6-H) ; MS m/z(相對強 度）416 (M+，100)，398 (26)，380 (13)，366 (21)，313 (31)。 2-亞甲基取代之19-原_i，25-(OH)2D3化合物及其20S異構物 的生物學活性

在美國專利第5,843,928號中如下提出了式I化合物的生 物學活性。將一亞曱基引入至19-原-i，25-(OH)2D3或其20S 94776.doc -61 - 200522967 異構物之2位置上對於結合至豬腸内維他命D受體影響很小 或不具有影響。全部化合物同等地結合至豬受體，包括標 準l，25-(〇H)2D3。可自該等結果預期所有化合物可能具有等 效之生物學活性。然而驚人的是，該等2_亞甲基取代產生 了主要作用於骨骼之高選擇性類似物。當將7天設定為一慢 陡模式時，所測試的最有效化合物為2_亞甲基_ 1原_ 20S-1，25-(〇H)2D3(表1)。當提供13〇皮莫耳/天時，其對骨骼 鈣活動化（血清鈣）之活性比天然激素大至少約1〇倍且可能 為ι〇〇-ι，οοο倍以上。在相同條件下，在13〇 pm〇i劑量時， 兩倍之l，25-(OH)2D3劑量得到血清鈣之13 8 mg/i〇〇爪丨之血 清鈣值。當提供260皮莫耳/天時，其在骨骼消耗上產生驚 人之14mg/100mli血清鈣。為顯示其選擇性，該化合物在 130或260 pmol劑量時在腸内鈣輸送中未產生顯著改變，而 1，25-(〇Η)2〇3僅在測試劑量（意即26〇皮莫耳/天）下產生預期 之腸内㈣送升高。2_亞甲基_19原·以剛办在兩 種劑量水平時亦具有極強之骨路㈣動化作用但亦未顯示 腸内鈣輸送活性。該化合物之骨骼鈣活動化活性可能為 l，25-(〇H)2D3之骨路每活動化活性的1(Μ⑽倍。該等結果說 ㈣-原]，25侧)21)3之2_亞甲基及寫_2•亞甲基衍生物對 於約自骨絡之活動化作用具有選擇性。表2表明腸及血清約 兩者對單-大劑量之各種化合物的反應；再次支持源自幻 之結論。

吞亥專結果表明I 亞甲基·19·原-20S_1，25-(〇H)2D3對誘發 HL-60細胞分化至單核知胎 干似、、，田胞極其有效。該2_亞甲基·19·原化 94776.doc -62- 200522967 合物具有類似於1，25-(〇h)2D3之活性。該等結果表明2_亞甲 基-19-原-20S-1，25-(OH)2D3 及 2·亞甲基·19_ 原 ^25- (OHhD3化合物作為尤其對抗白血病、結腸癌、乳癌及前列 腺癌之抗癌藥劑或作為治療牛皮癬之藥劑的潛能。 藉由 Dame 等人（Biochemistry 25，4523-4534，1986)所述 之方法執行該等類似物對豬腸内受體之競爭性結合。 如 Ostrem 等人（J· Biol· Chem· 262, 14164 14171，1987)所 述測定了 HL-60前髓細胞至單核細胞之分化。 表1 腸内鈣輸送及血清!鈣活動化^^崎慢性劑量之⑼原 -125-(011)203及其挪異構物之巧甲某衍磙物的/5龐 組別 劑量 (皮莫耳/天/7天） 腸内飼輸送 (S/M) 也清#5 (mg/100 ml) 維他命D缺乏 媒劑 5.5 土0.2 5.1 土 0·16 經 l，25-(OH)2D3 治療 260 6.2 ± 0.4 7.2 ±0.5 2-亞甲基-19-原-1,25- 130 5. 3 土 0.4 9.9 ±0.2 (0H)2D3 260 4.9 ± 0.6 9.6 ±0.3 2-亞甲基-19-原-20S- 130 5.7 士 0.8 13.8 土0.5 l，25-(OH)2D3 260 4.6 ± 0.7 14.4 土 0.6 自 Sprague Dawley Co.(Indianapolis, Ind.)得到雄性離乳 大鼠且將其以0.47%鈣、0.3%磷維他命D缺乏之食物餵養1 週且接著給予含〇·〇2%_、0.3%碟之相同食物2週。在最後 一週中藉由每天經腹膜内注射0·1 ml 95%丙二醇及5%乙酵 來給予該等大鼠指示劑量之化合物持續7天。該等對照動物 僅接收〇·1 ml之95%丙二醇、5%乙醇。在最後給藥24小時 後，犧牲該等大鼠且如前所述藉由翻轉囊技術（everted sac technique)測定腸内鈣輸送且在3 110型Perkin Elmer儀 (Norwalk, Conn·)上藉由原子吸收光譜法測定血清鈣。每組 94776.doc -63 - 200522967 5個大鼠且該等值表示平均值（±) sem。 表2 腸〜鈣輸送及血清鈣(骨骼鈣活動活動化作用）活性對慢性劑量 -----1，25-(ΟΗ)2〇3及其異構物之2-亞甲基衍生物的響應 、 組別 腸内鈣輸送 (S/M) 血清#5 (mg/l〇〇 ml) -D 對' 4·2 土 0·3 4.7 ±0.1 l，25-(〇H)2D3 5·8 士 0_3 5.7 ±0.2 2_ 亞甲基_i9-原—i，25-(〇H)2D3 5·3 土0·5 6.4 ±0.1 2-亞甲基-19-原-20S-1，25-(OH)2D^ 5.5 + 0.6 8.0 + 0.1 自 Sprague Dawley Co.(Indianapolis, Ind·)得到雄性 Holtzman種離乳大鼠且餵養Suda等人（J· Nutr. 100，1049- 1052，1970)描述之0.47%鈣、〇·3%磷食物1週且接著餵以含 〇_〇2%鈣及0.3%磷之相同食物另外2週。此時，該等大鼠接 收溶解於0.1 ml 95%丙二醇/5%乙醇中之指示劑量的單一頸 靜脈内注射。24小時後，犧牲該等大鼠且如表1中所述測定 腸内鈣輸送及血清I弓。該等化合物之劑量為650 pmol且每 組有5個動物。該等數據表示為平均值〇)SEM。 因此，下式la之化合物與式I之彼等化合物一起亦容納於 本發明内： 94776.doc -64- 200522967

在上式 Ia 中，Yl、Y2、R6uZu^〇；^w_。 至於、χ2 ' X3、X4、χ5、χ6、χ7、心及\，該等取代基 可相同或不同且選自：氫或低碳數烷基，意即如甲基、乙 基或正丙基之C,·5烷基。另外，當成對之取代基&及乂4或 X5、X2或X3及X6或X7、X4或&及Xs或X9與該化合物中心部 分之三個相鄰碳原子（分別對應於位置8、丨4、Η或Μ、ι3、 17或13、17、20)連在-起時，該等取代基可相同或不同立 形成飽和或不飽和、經取代或未經取代之3、4、5、6或7 員碳環。 本發明之較佳化合物可由下式之一種表示： 94776.doc 200522967

94776.doc -66- 200522967

Id

R

94776.doc -67- 200522967

94776.doc -68- 200522967

在上式 lb、Ic、Id、Ie、If、Ig及 Ih 中，Yi、Υ2、R6、R8、 R、Z、Xi、X2、X3、X4、X5、X6、X7及 X8之定義如本文先 前所提出。取代基Q表示包含0、1、2、3或4個碳原子之飽 和或不飽和、經取代或未經取代之烴鏈，但較佳為基團 -(CH2)k-，其中k為等於2或3之整數。 用於製備式Ia-Ih之化合物的方法是已知的。具體而言， 參閱1994年7月7日申請且在國際公開案第WO95/01960號 下於1995年1月19日公開之國際申請案第PCT/EP94/02294 號0 94776.doc -69- 200522967 流程圖i HOOC^^oh MeOOC^^oi- 2個步驟

RuCh， Nal(V A、 HO ^〇H 、、、 ▲ tBuMe2SiO OH ㈠·奎尼酸 OSitBuMe2

tBuMe2Si〇xN T〇SitBuMe2 OH 1

MePh3P+Br- n-BuLi JMal04

MeOQC/y. ^ημ tBuMe2Si' i0^N II ( OSitBuMe2

tBuMe2SiO >、、、 ▼OSitBuMe2 r LiA旧4

Me3SiCH2COOMe LDA

T

COOMe

CH2OH 1. n-BuLi,TsCI 2. n-BuLi, Ph?PH 3. H202

tBuMe2Si〇vS

OSitBuMe2 CH2POPh2

DIBALH

tBuMe2SiOxNV OSitBuMe2

tBuMe2SiON>>V

OSitBuMe2 tBuMe2SiO^

OSitBuMe2

OSiEt3 n-BuLi 94776.doc 70- 200522967 流程圖ι(續）

94776.doc -71 - 200522967

流程圖II

伸萘基-2-醇，D-酒石酸鹽之合成及調配物的實例 製備順_6_苯基-5·[4-{2-吡咯啶-1-基乙氧基}苯基】_5,6,7,8_ 四氣伸萘基-2-醇（”拉索昔芬（1&8〇£〇1〖€6116)’’）： 如美國專利第5,552,412號所述製備拉索昔芬且再現於下 文0 94776.doc -72- 200522967 於2(TC及60 ρδί(0·41 Mpa)下將含有丨.0 g氫氧化鈀/碳之 20 mL然水乙醇中的甲氧基_2•苯基_3,4·二氫萘· 1 -基）苯氧基]乙基]σ比咯啶鹽酸鹽（那佛昔芬（naf〇xidene)鹽 酸鹽）（1.0 g，2.16 mmol)溶液氫化19小時。過濾及蒸發提供 863 mg(93%)之順-甲氧基苯基β1，2,3,4_四氫 伸萘-1 ·基）苯氧基]乙基比洛σ定。 H-NMR(CDC13): δ 3.50-3.80 (m，3Η)，3.85 (s，3Η)， 4.20-4.40 (m，3H)，6.80-7.00 (m，3H) ; MS 428 (P+1)。 在攪拌下於 0°C 向 400 mg(0.94 mmol)之順-i-{2-[4-(6-甲 氧基-2-苯基1，2,3,4-四氫伸萘-1-基）苯氧基]乙基丨吼咯啶之 25 mL二氣甲烧溶液逐滴添加1〇 μ三溴化硼之二氣甲烧溶 液4·7 ml(4·7 mmol)。於室溫下3小時後，將該反應傾入至1〇〇 mL快速授拌之碳酸氫納飽和水溶液中。將該有機層分離、 經硫酸鈉乾燥、過濾及濃縮得到呈游離驗之287 mg(產率 74%)拉索昔芬。 lH-NMR (CDC13)： δ 3.35 (dd5 1H)5 4.00 (t, 2H), 4.21 (d, 1H)，6.3 5 (ABq，4H)。藉由以過量二噁烷中之4N HC1隨後 蒸乾且以乙醚濕磨來製備相應之鹽酸鹽（MS: 415 [P+1])。 或者可使用下述程序製備拉索昔芬。 製備1-[2-[4-(6-甲氧基-3,4-二氫萘小基）苯氧基]乙基]α比 咯啶：將無水 CeCl3(138 g，560 mmol)與 THF(500 mL)之混 合物劇烈攪拌2 h。在一分離燒瓶中，將l-[2-(4-溴代苯氧基） 乙基]吡洛啶（100 g，370 mmol)之THF( 1000 mL)溶液冷卻至 -78°C且經20分鐘缓慢添加正丁基鈾（在己烷中2.6 Μ，169 94776.doc -73- 200522967 mL，440 mmol)。15分鐘後，經套管將該溶液添加至冷卻於 -78°C下之CeCh漿液内且於-78°C下攪拌該反應2 h。於-78°C 下經套管將6-甲氧基-1-四氫萘酮（65.2 g，370 mmol)之 THF(1 000 mL)溶液添加至該芳基鈽試劑中。使該反應緩慢 溫至室溫且攪拌共16 h。經由Celite™墊過濾該混合物。真 空濃縮該濾液且添加3 N HC1(500 mL)及Et20(500 mL)。攪 拌15分鐘後，分離該等液層。以Et20(2x)進一步洗條含水 層。將該等經組合之有機層乾燥（MgS04)、過濾及濃縮以提 供6-甲氧基-1-四氫萘酮（22 g)。以5 N NaOH將該水層鹼化 至pH值為12且添加15% (NH4)2C03水溶液（1〇〇〇 mL)。以 CH2C12(2x)萃取該含水混合物。將該有機溶液乾燥 (MgSCU)、過濾、及濃縮以提供棕色油。蒸餾出（11〇。〇_14〇。〇 約0.2 mmHg)雜質以產生產物（74 g，57%)。 lU NMR (250 MHz, CDC13): δ 7.27 (d5 J=8.7 Hz? 2H), 6.92-6.99 (m，3H)，6.78 (d，J=2.6 Hz，1H)，6.65 (dd，J=8.6, 2·6 Hz，1H)，5.92 (t，J =4.7 Hz，1H)，4.15 (t Hz，2H)，3.80 (s， 3H)，2.94 (t，卜6.0 Hz，2H)，2.81 (t，J =7·6 Hz，2H)，2.66 (m， 2H)，2.37 (m，2H)，1_84 (m，4H)。 製備l-[2-[4，（2-溴-6-甲氧基-3,4-二氫萘-基）苯氧基]乙 基]吡咯啶：將過溴化溴化吡啶（21.22 g，60.55 mmol)逐份 添加至l-{2-[4-(6-甲氧基-3,4-二氫萘-1-基）苯氧基]乙基}。比 π各啶（23 g，72 mmol)之THF(700 mL)溶液内。授拌該反應 6〇 h。藉助於THF經由Celite墊過濾該沉澱物。將該灰白色 固體溶於CH2Cl2&MeOH中且自該Celite濾除。以〇·5 N水性 94776.doc -74- 200522967 HC1水溶液隨後以飽和NaHCCb(水性）洗滌該有機溶液。將 該有機溶液乾燥（MgSO〇、過濾、及濃縮以提供棕色固體 (21.5 g，83%)。 lU NMR (250 MHz, CDC13)： δ 7.14 (d5 J=8.7 Hz, 2H)5 6.97 (d，J=8.8 Hz，2H)，6.71 (d，J=2.2 Hz，1H)，6·55 (m，2H)，4·17 (t，J =6.0 Hz，2H)，3.77 (s，3H)，2·96 m，(4H)，2·66 (m，4 h)， 1.85 (m，4H) 〇 製備l-{2-[4-(6-甲氧基-2-苯基-3,4-二氫萘-1-基）苯氧基] 乙基}吡咯啶鹽酸鹽（那佛昔芬鹽酸鹽）：向l[2_[4-(2-漠_6_ 甲氧基-3,4 -二氫萘-1-基）苯氧基]乙基]。比a各ϋ定（19 g，44 mmol)、苯棚酸（7.0 g，57 mmol)、及肆（三苯基鱗）|巴（175 g， 1·51 mmol)在 THF(300 mL)中之混合物添加 H20(1〇〇 mL)中 之Na2C03(13 g，123 mmol)。回流加熱該反應is h。分離該 專液層且以H2〇隨後以鹽水洗條有機層。將該有機溶液乾燥 (MgS〇4)、過濾及濃縮產生17.96 g棕色油。將殘餘物溶於 CH2C12與EtOAc(250 mL)之1 : 1混合物中且添加Et2〇中之i N HC1(100 mL)。攪拌2 h後，使產物自溶液結晶且藉由過 濾收集11 g物質。濃縮該母液至其一半體積提供額外7 · 3 g 產物。 製備順-l-[2_[4-(6-曱氧基-2-苯基-1，2,3,4·四氫伸萘4_基） 本氧基]乙基]°比洛°定：將1-[2-[4-(6-甲氧基_2-苯基-3,4_二氫 萘-1-基）苯氧基]乙基ρ比咯啶鹽酸鹽（那佛昔芬鹽酸鹽）（75 g，162 mmol)溶於 1000 mL EtOH 及 300 mL MeOH 中。添加 無水Pd(OH)2/碳且於50°C及50 psi(0.34 MPa)下在parr震盈 94776.doc -75- 200522967 器上氫化該混合物68 h。藉助於Celite濾除該觸媒且真空移 除該等溶劑。將所得白色固體溶於CH2Cl2中且以飽和 NaHC〇3水溶液洗滌該溶液。將該有機溶液乾燥（MgS〇4)、 過濾、及濃縮產生灰白色固體（62.6 g，90%>。 製備順-6-苯基-5-[4_(2· α比咯啶+基乙氧基）苯基]_

5,6,7,8-四氫伸萘基-2-醇：將順-ΐ_[2-[4-(6-甲氧基-2-苯基_ 1，2,3,4-四鼠伸奈-1-基）本氧基]乙基]σ比洛σ定（12 g，28 mmol)、乙酸（75 mL)、及 48% HBr(75 mL)之混合物於 i〇(TC 下加熱15 h。冷卻該溶液且藉由過濾收集所得白色沉澱 物。將該氫溴酸鹽（9.6 g，69%)溶於CHCl3/MeOH中且於飽 和NaHC〇3水溶液一起攪拌。分離該等液層且以CHCl3/ MeOH進一步萃取水層。將該等經組合之有機層乾燥 (MgS〇4)、過濾及濃縮以產生灰白色發泡體。 lU NMR (250 MHz, CDC13): δ 7.04 (m, 3Η), 6.74 (m, 2H)? 6.63 (d，J =8.3 Hz，2H)，6.50 (m，3H)，6·28 (d，J =8.6 Hz，2H)， 4.14 (d，J=4.9 Hz，1H)，3.94 (t，J=5.3 Hz，2H)，3.24 (dd， J=12.5, 4·1 Hz，1H)，2·95 (m，4H)，4H)，2.14 (m，1H)，1.88 (m，4H)，1.68 (m，1H)。 自2003年7月1日申請之美國專利申請案第1〇/612,679號 再現以下程序及調配物。 以下物質可獲自下文所列相應來源： 94776.doc -76- 200522967

Avicel™ PH101(微晶纖維素) Lactose Fast Flo™ 316 硬脂酸鎂 羥丙基纖維素 交聯羧曱基纖維素鈉 β-環糊精磺丁基醚 FMC Pharmaceutical (Philadelphia, PA) Foremost Corp. (Baraboo, WI) Mallinckrodt (St. Louis, MO)

Hercules Inc· (Hopewell，VA) FMC Pharmaceutical (Philadelphia, PA) 使用美國專利第6，153,746號中所述方 法製備 二氧化石夕 Grace Davison (Columbia，MD)

Penwest, Patterson, NJ

ProSolv™ 50 (石夕化微晶纖維素) 拉索昔芬習知濕式製粒法 (比較法） 以所列順序將以下成分添加至一高剪切摻合器中。 乳糖 5.000 g 微晶纖維素 17.432 g 交聯羧甲基纖維素鈉 1.000 g 經丙基纖維素 1.250 g 二氧化矽 0.125 g 拉索昔芬 0.068 g 將該等混合物摻合大約15分鐘。在摻合同時，經8.5分鐘 添加適量水（大約為乾式摻合之63% w/w)且接著使該混合 物繼續掺合額外30秒以達成所要濕塊體。接著在真空（約50 毫巴（mB))下將該濕塊體乾燥至小於約2%之水分含量。經由 配備有〇·〇4英吋（〇·1〇 cm)篩網及設定於1750 rpm轉速之圓 邊葉輪之錐形球磨機來研磨該乾燥成粒。在一 Turbula攪拌 器上於一 150 cc玻璃瓶中將該混合物摻合約1〇分鐘。向該混 合物中添加硬脂酸鎂（0·125 g)且接著摻合約5分鐘。接著使 94776.doc -77- 200522967 用別⑽頂τ⑽製錠機（購自謹抓& c。，h⑽^ PA)將該活性摻合物壓成錠劑。 溶液令之拉索昔芬藥物濕式製粒法 (比較法） 將水（100 mL)添加至配備有一攪拌器之25〇 1111^玻璃燒杯 中。在攪拌同時，添加心環糊精磺丁基醚（〇 452 g)隨後添加 拉索昔芬（0.113 g)且使其攪拌直至心環糊精磺丁基醚及拉 索曰分洛解且形成溶液。以所列順序將下列成分添加至一 高剪切摻合器中。 乳糖 5.000 g 石夕化微晶纖維素 17.540 g 交聯羧甲基纖維素鈉 1.000 g 羥丙基纖維素 1.250 g 將該混合物摻合約2分鐘。摻合同時，經3分鐘時段添加 拉索昔务水溶液。接著在一 50°C強制熱風烘箱中將該濕塊 體乾燥至小於約1%之水分含量。使該乾燥成粒穿過配備有 0.055英对（0.14 cm)蒒網及設定於1750 rpm轉速之圓邊葉輪 的錐形球磨機。向該混合物中添加硬脂酸鎮（〇·丨25 g)且接 著摻合約5分鐘。接著使用ManestyTM F-製錠機（購自Th〇mas Engineering Inc·，Hoffman Estates, IL)將該活性摻合物壓成 錠劑。 拉索昔芬乾式製粒法 以所列順序將以下成分添加至一高剪切摻合器中。 乳糖 1052.25 g 94776.doc -78- 200522967 375.00 g 45.00 g 7.50 g 5.25 g 微晶纖維素 交聯羧甲基纖維素鈉 二氧化石夕 拉索昔芬 :?糖微曰曰纖維素、交聯叛甲基纖維素鈉及二氧化石夕 山义刀*接著添加拉索昔芬且摻合約15分鐘。接著自該 门另切扣口器排出該活性摻合物且將其在雙殼式"v"摻合 =中杉。、勺5刀鐘。向該活性摻合物中添加硬脂酸鎂（iso g 且摻合約5分鐘。^ 〜 在Vector Freund™滾輪壓實機裝置上滾輪 C貝該活性摻合物且經由配備有一 〇 〇33，，（〇 〇84。叫篩網之 旋轉式製粒機（二者均購自Vector Corp·，Marion，IA)加以研 磨。在雙设式”V”摻合器中摻合該活性成粒約5分鐘。將另 一份硬脂酸鎂（7.50 g)添加至該成粒中且摻合約5分鐘。在 KihanTM T1〇〇旋轉壓力機上將最終摻合物壓為錠劑。 如下文所例示製備本發明之立即釋放低劑量調配物。 •白適^疋尺寸之咼到切摻合器中按順序添加··無水乳 糖、微晶纖維素、交聯羧甲基纖維素鈉、二氧化矽且以適 當葉輪及成粒機速度摻合5分鐘。 2.引入拉索昔芬酒石酸鹽且以適當葉輪及成粒機速度摻合 15分鐘。 3·自該高剪切摻合器排出活性摻合物。 4_將活性摻合器注入一適當尺寸之雙殼式或箱式摻合器中 且摻合5分鐘。 5 ·將一半硬脂酸鎖添加至該活性摻合物中且摻合5分鐘。 94776.doc -79· 200522967 6. 以適當滾輪壓力、滾輪速度及進料速率在一適當滾輪壓 實機裝置上壓實該活性摻合物。 7. 經由配備有20網目（0.03 3 ff)篩網或等效物之適當研磨機 研磨該等活性壓實物。 8. 將該等經研磨之活性摻合物注入適當尺寸雙殼式或箱式 摻合器中且摻合5分鐘。 9. 將另一半硬脂酸鎂添加至該經研磨之活性摻合物中且摻 合5分鐘。 10. 以100 mg之重量在配備有適當尺寸加工設備之旋轉製 鍵機上壓縮該最終摻合物。 11. 在適當尺寸薄膜塗佈裝置中薄膜塗佈該等錠劑核心。將 適量乳濁化及拋光薄膜塗料施用於該等錠劑。 拉索昔芬0.25 mg經薄膜塗佈之組合物： 成分 級別 毫克/旋劑 功能 拉索昔芬酒石酸鹽1 Pfizer 0.341 活性化合物 無水乳糖2 NF/USP/Eu/JP 70.159 稀釋劑/填充劑 微晶纖維素 NF/Eu/JP 25.000 稀釋劑/填充劑 交聯羧甲基纖維素鈉 NF/Eu/JP 3.000 崩解劑 二氧化矽 NF/Eu 0.500 助流劑 硬脂酸鎂 NF/Eu/JP 1.000 潤滑劑 Opadry ΐΓ (Υ-30-13579-Α) (單水合乳糖） (羥丙基甲基纖維素 2910-15 cP) (二氧化鈦） (三乙酸甘油酯） (FD&C黃色6號鋁沉澱顏料 15%-18%) Pfizer (NF/Eu/JP) (USP/Eu/JP) (USP/Eu/JP) (USP/Eu/JPE) (21 CFR，E110) 4.000 (1.60) (1.12) (0.94) (0.32) (0.02) 乳濁化塗料 (稀釋劑/填充劑） (聚合物） (遮光劑） (增塑劑） (著色劑） Opadry Clear® (YS-2-19114-A) (羥丙基甲基纖維素 2910-15cP) (三乙酸甘油酯） Pfizer (NF/Eu/JP) (USP/Eu/JPE) 0.500 (0.45) (0.05) 拋光塗料 (聚合物） (增塑劑） 總量 104.500 94776.doc -80- 200522967 1. 基於73.4%之理論潛能。 2. 重量經調節以適於拉索昔芬酒石酸鹽中之輕微效力變 化0 拉索昔芬0.5 mg經薄膜塗佈之組合物·· 成分 級別 毫克/鍵劑 功能 拉索昔芬酒石酸鹽1 Pfizer 0.681 活性化合物 無水乳糖2 NF/USP/Eu/JP 69.819 稀釋劑/填充劑 微晶纖維素 NF/Eu/JP 25.000 稀釋劑/填充劑 交聯羧曱基纖維素鈉 NF/Eu/JP 3.000 崩解劑 二氧化矽 NF/Eu 0.500 助流劑 硬脂酸鎂 NF/Eu/JP 1.000 潤滑劑 Opadry II® (Y-30-13579-A) (單水合乳糖） (羥丙基甲基纖維素 2910-15 cP) (二氧化鈦） (三乙酸甘油酯） (FD&C黃色6號紹沉殿顏料 15%-18%) Pfizer (NF/Eu/JP) (USP/Eu/JP) (USP/Eu/JP) (USP/Eu/JPE) (21 CFR，E110) 4.000 (1.60) (1.12) (0.94) (0.32) (0.02) 乳濁化塗料 (稀釋劑/填充劑） (聚合物） (遮光劑） (增塑劑） (著色劑） Opadry Clear® (YS-2-19114- A) (羥丙基甲基纖維素2910-15CP) (乙酸甘油酯） Pfizer (NF/Eu/JP) (USP/Eu/JPE) 0.500 (0.45) (0.05) 拋光塗料 (聚合物） (增塑劑） 總量 104.500 1. 基於73.4%之理論潛能。 2. 重量經調節以適於拉索昔芬酒石酸鹽中之輕微效力變 化。 94776.doc -81 -

Claims (1)

1. 200522967 十、申請專利範圍： 1· 一種醫藥組合物，其包含化合物2-亞甲基_丨^原-20(s)_ 1α，25_二經基維他命d3及雌激素激動劑/拮抗劑，或其醫 藥上可接受之鹽或前藥。 2·如清求項1之組合物，其中該雌激素激動劑/拮抗劑為（-)- 順_6·笨基-5-[4-(2-吡咯啶_1_基_乙氧基）苯基]_5,6,7,8•四 氮-伸蔡基-2-醇或其醫藥上可接受之鹽或前藥。 3·如印求項2之組合物，其中該㈠·順苯基-5-[4-(2_σ比咯啶· 1-基_乙氧基）-苯基]-5,6,7,8_四氫-伸萘基-2-醇為酒石酸 鹽之形式。 4· 一種醫藥組合，其係用以治療老年性骨質疏鬆症、停經 後骨質疏鬆症、骨折、移植骨、乳癌、前列腺癌、肥胖 症、骨質減少、男性骨質疏鬆症、虛弱、肌肉損傷或肌 肉貧乏症，該醫藥組合包含治療有效劑量之亞甲基 原-20(S)-la，25-二羥基維他命仏及雌激素激動劑/拮抗劑 或其醫藥上可接受之鹽或前藥。 5·如睛求項4之醫藥組合，其中該2_亞甲基-19_原_2〇(s)、 1α，25·二羥基維他命h及雌激素激動劑/拮抗劑或其醫藥 上可接受之鹽或前藥係為經口投藥。 6·如請求項4之醫藥組合，其中該2_亞甲基-19•原_2〇(s)、 1〇:，25-二羥基維他命〇3及雌激素激動劑/拮抗劑或其醫藥 上可接受之鹽或前藥係為非經腸投藥。 7·如睛求項4之醫藥組合，其中該2·亞甲基_19•原_2〇(s)、 1«，25-二羥基維他命1)3及雌激素激動劑/拮抗劑或其醫藥 94776.doc 200522967 上可接雙之鹽或前藥係為透皮投藥。 8·如請求項4之醫藥組合，其中該2-亞甲義^ 9 1α，25-二羥基維他命〇3及雌激素激動劑/括抗南丨二 上可接受之鹽或前藥係實質上同時投藥。 3 藥 9·如請求項4之醫藥組合，其中係治療停經後骨質疏鬆症。 ίο. 一種醫藥組合，其係用以治療老年性骨質疏鬆症L；^經 後骨質疏鬆症、骨折、移植骨、乳癌、前列腺癌、肥胖 症月貝減少、男性骨質疏鬆症、虛弱、肌肉損傷或肌 肉貧乏症，該醫藥組合包含治療有效劑量之2-亞甲基-19-原-20(S)_la，25_二羥基維他命〇3及（_)_順_6_ 苯基 _5_[4_(2_ °比0各°定-1-基-乙氧基）-苯基]-5,6,7,8-四氫_伸萘基-2-醇或 其醫藥上可接受之鹽或前藥。 H·如請求項10之醫藥組合，其中該（-)•順-6-苯基-5-[4-(2-批 洛°定-1·基-乙氧基）-苯基]_5,6,7,8_四氫-伸萘基醇為酒 石酸鹽之形式。 94776.doc 200522967 七、指定代表圖： (一) 本案指定代表圖為：（無） (二) 本代表圖之元件符號簡單說明: 八、本案若有化學式時，請揭示最能顯示發明特徵的化學式： (無） 94776.doc