TR202007334A2 - Bi̇tki̇sel eksozom üreti̇m yöntemi̇ - Google Patents
Bi̇tki̇sel eksozom üreti̇m yöntemi̇Info
- Publication number
- TR202007334A2 TR202007334A2 TR2020/07334A TR202007334A TR202007334A2 TR 202007334 A2 TR202007334 A2 TR 202007334A2 TR 2020/07334 A TR2020/07334 A TR 2020/07334A TR 202007334 A TR202007334 A TR 202007334A TR 202007334 A2 TR202007334 A2 TR 202007334A2
- Authority
- TR
- Turkey
- Prior art keywords
- plant
- production method
- exosomes
- exosome
- culture
- Prior art date
Links
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims abstract description 19
- 235000013311 vegetables Nutrition 0.000 title claims description 6
- 210000001808 exosome Anatomy 0.000 claims abstract description 81
- 238000004114 suspension culture Methods 0.000 claims abstract description 21
- 238000004161 plant tissue culture Methods 0.000 claims abstract description 7
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 claims description 75
- 235000002637 Nicotiana tabacum Nutrition 0.000 claims description 14
- 241000208125 Nicotiana Species 0.000 claims description 11
- HELXLJCILKEWJH-NCGAPWICSA-N rebaudioside A Chemical compound O([C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]([C@@H]1O[C@H]1[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)O[C@]12C(=C)C[C@@]3(C1)CC[C@@H]1[C@@](C)(CCC[C@]1([C@@H]3CC2)C)C(=O)O[C@H]1[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O HELXLJCILKEWJH-NCGAPWICSA-N 0.000 claims description 10
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 claims description 9
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 206010020649 Hyperkeratosis Diseases 0.000 claims description 8
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims description 8
- 238000009630 liquid culture Methods 0.000 claims description 8
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 8
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 8
- NWBJYWHLCVSVIJ-UHFFFAOYSA-N N-benzyladenine Chemical compound N=1C=NC=2NC=NC=2C=1NCC1=CC=CC=C1 NWBJYWHLCVSVIJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 238000002955 isolation Methods 0.000 claims description 7
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 claims description 7
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 claims description 7
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 claims description 7
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 claims description 7
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 claims description 6
- 239000012467 final product Substances 0.000 claims description 5
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims description 5
- 239000011833 salt mixture Substances 0.000 claims description 4
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 claims description 3
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 claims description 3
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 3
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 claims description 3
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 claims description 3
- 229910000831 Steel Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 claims description 2
- 238000007865 diluting Methods 0.000 claims description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 2
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 2
- 239000010959 steel Substances 0.000 claims description 2
- 238000003828 vacuum filtration Methods 0.000 claims description 2
- 150000003722 vitamin derivatives Chemical class 0.000 claims description 2
- 239000002699 waste material Substances 0.000 claims description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 244000228451 Stevia rebaudiana Species 0.000 claims 2
- 230000008901 benefit Effects 0.000 abstract description 7
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 abstract description 4
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 abstract description 2
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 30
- 241000544066 Stevia Species 0.000 description 14
- 238000000034 method Methods 0.000 description 12
- 239000000047 product Substances 0.000 description 10
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 8
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 8
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 description 7
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 7
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 6
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 6
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 5
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 5
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 5
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 5
- 238000011161 development Methods 0.000 description 4
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 4
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 4
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 4
- 230000008569 process Effects 0.000 description 4
- 244000061176 Nicotiana tabacum Species 0.000 description 3
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 3
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 3
- 230000004044 response Effects 0.000 description 3
- 239000002689 soil Substances 0.000 description 3
- 235000005979 Citrus limon Nutrition 0.000 description 2
- 244000131522 Citrus pyriformis Species 0.000 description 2
- 238000011166 aliquoting Methods 0.000 description 2
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 2
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 2
- 238000002296 dynamic light scattering Methods 0.000 description 2
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 2
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 2
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 2
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 2
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 2
- 238000001878 scanning electron micrograph Methods 0.000 description 2
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 2
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- 240000002234 Allium sativum Species 0.000 description 1
- 201000004384 Alopecia Diseases 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 102100025222 CD63 antigen Human genes 0.000 description 1
- 102100037904 CD9 antigen Human genes 0.000 description 1
- 235000009088 Citrus pyriformis Nutrition 0.000 description 1
- 240000000560 Citrus x paradisi Species 0.000 description 1
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 1
- 241000206602 Eukaryota Species 0.000 description 1
- 238000012425 Freezing-thawing process Methods 0.000 description 1
- 101000934368 Homo sapiens CD63 antigen Proteins 0.000 description 1
- 239000000232 Lipid Bilayer Substances 0.000 description 1
- 241001668545 Pascopyrum Species 0.000 description 1
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 1
- 244000273928 Zingiber officinale Species 0.000 description 1
- 235000006886 Zingiber officinale Nutrition 0.000 description 1
- 206010002026 amyotrophic lateral sclerosis Diseases 0.000 description 1
- 230000004888 barrier function Effects 0.000 description 1
- 230000000975 bioactive effect Effects 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- 230000008499 blood brain barrier function Effects 0.000 description 1
- 210000001218 blood-brain barrier Anatomy 0.000 description 1
- 210000001124 body fluid Anatomy 0.000 description 1
- 239000010839 body fluid Substances 0.000 description 1
- 230000005907 cancer growth Effects 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 230000003915 cell function Effects 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 1
- 239000002537 cosmetic Substances 0.000 description 1
- 239000004062 cytokinin Substances 0.000 description 1
- UQHKFADEQIVWID-UHFFFAOYSA-N cytokinin Natural products C1=NC=2C(NCC=C(CO)C)=NC=NC=2N1C1CC(O)C(CO)O1 UQHKFADEQIVWID-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001086 cytosolic effect Effects 0.000 description 1
- 230000008260 defense mechanism Effects 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 238000002651 drug therapy Methods 0.000 description 1
- 230000010429 evolutionary process Effects 0.000 description 1
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- 235000011389 fruit/vegetable juice Nutrition 0.000 description 1
- 235000004611 garlic Nutrition 0.000 description 1
- 238000001415 gene therapy Methods 0.000 description 1
- 235000008397 ginger Nutrition 0.000 description 1
- 208000024963 hair loss Diseases 0.000 description 1
- 230000003676 hair loss Effects 0.000 description 1
- 238000003306 harvesting Methods 0.000 description 1
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 238000011031 large-scale manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 239000013028 medium composition Substances 0.000 description 1
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 1
- 230000003020 moisturizing effect Effects 0.000 description 1
- 230000003990 molecular pathway Effects 0.000 description 1
- 230000004770 neurodegeneration Effects 0.000 description 1
- 208000015122 neurodegenerative disease Diseases 0.000 description 1
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 1
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 1
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000003973 paint Substances 0.000 description 1
- 230000008506 pathogenesis Effects 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 239000000575 pesticide Substances 0.000 description 1
- 235000017807 phytochemicals Nutrition 0.000 description 1
- 229930000223 plant secondary metabolite Natural products 0.000 description 1
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 238000012805 post-processing Methods 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 238000013341 scale-up Methods 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 230000019491 signal transduction Effects 0.000 description 1
- 235000002639 sodium chloride Nutrition 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 230000002087 whitening effect Effects 0.000 description 1
- 230000029663 wound healing Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
- A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
- A61K36/28—Asteraceae or Compositae (Aster or Sunflower family), e.g. chamomile, feverfew, yarrow or echinacea
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
- C12N5/04—Plant cells or tissues
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
- A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
- A61K36/81—Solanaceae (Potato family), e.g. tobacco, nightshade, tomato, belladonna, capsicum or jimsonweed
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Botany (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Alternative & Traditional Medicine (AREA)
- Mycology (AREA)
- Medical Informatics (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Bu buluş, bitki doku kültürü temelli hücre süspansiyon kültürlerinden bitkisel eksozom üretilmesine yönelik bir yöntem ile ilgilidir. Buluşun amacı, terapötik ve ilaç taşıyıcısı gibi amaçlarda kullanılmak üzere, bitki süspansiyon kültürünün avantajlarından faydalanarak, yüksek hacim ve saflıkta ve homojen bitki eksozomları üretimi gerçekleştirmektir.
Description
TARIFNAME
BITKISEL EKSOZOM ÜRETIM YÖNTEMI
Teknik Alan
Bulus, bitki doku kültürü temelli hücre süspansiyon kültürlerinden bitkisel eksozom
elde edilmesi yöntemi ile ilgilidir.
Önceki Teknik
Hücre içerisinde maddelerin tasinmasi ve depolanmasinda, vezikül ismi verilen ve
sitoplazma sivisindan çift tabakali lipit katmani ile ayrilmis küçük kesecikler görev
almaktadir. Eksozomlar, prokaryotlardan bitkilerin de dahil oldugu yüksek
ökaryotlara kadar birçok organizma tarafindan salgilanan, farkli boyutlarda
bulunabilen çift tabakali lipit zar tasiyan veziküllerdir [1]. Söz konusu veziküller,
hücresel fonksiyonu etkilemek amaciyla diger hücrelere bilgi aktarma kapasitesine
sahiptir. Eksozomlar ile sinyal aktarimi, proteinler, lipidler, nükleik asitler ve
sekerlerden olusan birçok farkli kategorideki biyomoleküller araciligi ile
gerçeklestirilmektedir. Kesfedilmelerinden bu yana, biyoloji ve tip alanlarinda
eksozoinlarin birçok farkli uygulamasi gelistirilmistir. Örnegin, kanser, bagisiklik
sistemi hastaliklari, ALS ve Alzheimer gibi nörodejeneratif hastaliklarin
patogenezleri, tani ve tedavilerinde eksozoinlarin kullanimi bilinmektedir. Bunlara
ek olarak, eksozomlarin hücre güdümlülük, kan-beyin bariyerini geçebilme
özelliklerinden dolayi ilaç ve CRISPR-Casg gibi gen terapisi yöntemlerinde tasiyici
olarak kullanimlari ile ilgili çok sayida arastirma bulunmaktadir [2].
Teknigin bilinen durumunda, eksozom çalismalari yogunlukla insan eksozomlari
ile yapilmaktadir. Farkli hücre hatlarindan, Vücut sivilarindan ve kanser gibi farkli
hastaliklar gösteren birey ve hücre hatlarindan elde edilen eksozomlar ile insanin
neredeyse bütün bir eksozom haritasi çikarilmis durumdadir. Bitkiler de dahil bütün
ökaryotik canlilar eksozom üretmektedir. Bugüne kadar bitkiler tarafindan üretilen
eksozomlarla ilgili olarak yapilan az sayida çalismada, greyfurt [3] ve limonun
(Citrus limon) [4] eksozom ürettigi, söz konusu eksozomlarin in vitro ve In vivo
25418.102
çalismalar ile kanser hücrelerinin büyümesini baskiladigi gösterilmistir. Teknik
alanda yer alan bir baska çalisma, dört ayri bitkiden elde edilen eksozomlarin fare
hücreleri ile etkilesimlerini göstererek, bitki eksozomlarinin tür bariyerini asarak
memeli hücrelerini etkiledigini kanitlamistir [5]. Ayni zamanda, bitki
eksozomlarinin, bitkinin kendi üzerindeki etkilerine dair çalismalar da az sayida
olsa da mevcuttur. Bitkinin patojen stresi altinda kendini korumak için eksozomlar
salgiladigina dair çalismalar bulunmaktadir [6].
Bitki eksozom çalismalari, insan eksozom çalismalarina göre çesitli zorluklar
içermektedir. Bu durum, bitki eksozom çalismalarinin sayica az olmasinin en
önemli sebeplerindendir. Eksozom çalismalarinda kullanilan bitkiler bölgesel
pazarlardan elde edilmektedir. Ancak, kontrolsüz kosullarda büyütülmüs ve
hasadin ardindan uzun zaman bekletilmis bitkiler, denemeler arasinda beklenmedik
sonuçlara sebep olabilmektedir. Ayrica meyve gibi olgunlasmamis dokulardan
eksozom elde edilirken, uzaklastirilmasi gereken çok sayida fitokimyasal (bitkilerin
ürettikleri farkli biyoaktif maddeler) bulunmaktadir. Bu zorluklar asildigi takdirde,
bitkisel eksozomlar kanser üzerinde gösterdikleri etkileri baska hastaliklarinda
tedavisinde gösterme potansiyeli göstermektedir [3, 4]
Bitkiler, yer degistirme kabiliyetine sahip olmamalari nedeni ile habitatlarinda zarar
görebilecekleri durumlara karsi kendilerini koruyabilecek savunma mekanizmalari
gelistiren evrimsel bir süreci izlemislerdir [7]. Bu nedenle, farkli moleküler yolaklar
gelistirerek, çok sayida özel molekül üretebilmeleri mümkün olmaktadir, Söz
konusu moleküller ilaç, gida, boya, kozmetik ve benzeri gibi birçok sanayide uzun
süredir kullanilmaktadir [8].
Her ne kadar bitki bazli birçok molekül ya da ürün bulunmus olsa da bu alan hala
yeni çalismalara ve kesiflere açiktir [9]. Uzun yillardir, bitkisel moleküllerin
üretimi için gelisimini tamamlamis, tüm bitkiler kullanilmaktadir. Ancak bitki
hücre süspansiyon kültürlerinin, bitki türevli ürünlerin üretilmesi için daha uygun
oldugu yakin zamanda ortaya konulmustur. Bitki hücre süspansiyon kültürleri,
25418.102
kallus kültürlerinin sivi besiyeri içerisinde düzenli olarak karistirilmasi ve isik, nem
ve sicaklik gibi degiskenlerin sabit tutulmasi ile yapmaktadirlar [10]. Gelisimini
tamamlamis tüm bitkiler ile karsilastirildiginda, bitki hücre süspansiyon kültürleri
daha yüksek kütle veriminin daha kisa sürede elde edilmesini saglamaktadirlar [9].
Bunun yani sira, toprakta üretilen bitkiler, biyolojik patojenler ya da tarimsal ilaç
kalintilari gibi kontaminasyon riski tasiina ihtimalini barindirirlar [11]. Toprak
bazli tarim, hücre süspansiyon kültürü ile karsilastirildiginda kontrol edilemeyen
çevresel kosullara sahiptir [12].
Bitki hücre süspansiyon kültürleri, sabit bir verime sahip olmalarinin yani sira stabil
ve tekrarlanabilir bitkisel bazli ürünler elde etmeye olanak saglamaktadir. Çevresel
faktörlerin sabit olmasi, ürünlerin olagan degisikliklerden etkilenmesini
engellemektedir. Üretim yapilan hücrelerin tek hücre klonu olmasi da tutarliligi
saglanmaktadir. Ayrica, bitki hücre süspansiyon kültürünün kullanimi üretim
sonrasi süreçlerin de daha kolay olmasini saglamaktadir. Basit bir filtrasyon ya da
santrifüj, bitki hücrelerini ve süspansiyon besi ortamini birbirinden ayirmaktadir.
Hücre süspansiyon kültürlerinin büyük ölçekte üretilmesi ve Ölçek yükseltme
potansiyeli de diger avantajlari arasindadir [13].
Son yillarda bitki kaynakli eksozoinlarin biyolojik sistemlerdeki aktivitelerinin
arastirilmasi ve özellikle moleküler içeriklerinin ve nanoveziküler yapilarinin
incelenmesi ile ilgili çalismalar hiz kazanmis durumdadir. Buna bagli olarak,
çalismalarda kullanilmak üzere, çok yüksek miktarda ve saflikta bitkisel eksozoma
ihtiyaç duyulmaktadir. Günümüzdeki eksozom izolasyon metotlarinin hücre
kültürü hedefli gelistirilmesinin bir sonucu olarak, bitkilerin tamaminin veya
meyvelerinin kullanilmasi ile ortaya çikan solüsyonlar bu yöntemler ile izole
edilemeyecek kadar kirlilik içermektedirler. Bu nedenle, yerel marketlerden alinan
meyvelerden veya tüm bitki seklinde çalisilan örneklerden elde edilen eksozomlarin
safligi, çalismalar açisindan önemli derecede süpheye yol açmaktadir.
25418.102
Memeli hücre kültüründen elde edilen eksozomlar ile ilgili yapilan çalismalarda,
hücrelerin ortam sartlarina bagli olarak salgiladiklari eksozomlarin moleküler
içeriklerini düzenlendigi ve degistirdigi tespit edilmistir. Buna bagli olarak bitki
hücrelerinin de salgiladiklari eksozomlarin biyomolekül içeriklerinin ortam
sartlarindan yüksek oranda etkilenmesi beklenmektedir. Dogadaki bir bitkinin
karakteristigi için sahip oldugu topragin tuzluluk miktari, önemli mineralleri ve iz
elementlerini bulundurma durumlari, havadaki nem miktari ve ortamdaki isik
miktari gibi dogal etkenlerin yaninda yapay olarak ortaya çikan etkenler ve zaman
zaman gerçeklesen doga olaylari yüksek önem tasimaktadir. Bunlarin bir sonucu
olarak, bahsi geçen sekilde (kontrolsüz ortamlarda) gelisimini sürdüren bitkilerden
homojen sekilde ayni özellikleri barindiran ve zaman içerisinde özellikleri degisim
göstermemis ve gelecekte de göstermeyecegi düsünülen tek bir standart eksozom
elde edilmesi oldukça zordur. Bu nedenle. literatürde yapilan bilimsel çalismalarin
deneysel süreç sonrasinda devam edecek olan alt çalismalarinda es sekilde
tekrarlanabilir sonuçlar göstermesine süphe ile bakilmaktadir. Bunlara ek olarak,
eksozomlarin elde edilmesi için kullanilan meyve tabanli çalismalarda ise bitkinin
ürün verme takvimine bagimlilik göstermesi nedeniyle hem zaman baglaminda
kesintisiz hem de büyük ölçeklerde çalisma yürütmek konusunda önemli girisimler
bulunmamaktadir.
Teknigin bilinen durumunda yer alan EP3576844 yayin numarali Avrupa patent
basvuru dokümani, kanser tedavisi ve yara iyilesmesinde kullanilmak üzere, bitki
türevli eksozom içeren bir ürün ile ilgilidir. Söz konusu dokümanda açiklanan
bulus, insan vücudunda toksik etkilere neden olmayan, kanser tedavisi sirasinda
saglikli hücrelerde hasara yol açmayan, enfeksiyon riski olusturmayan, düsük
maliyetli bir ürün temin etmeyi saglamaktadir. Bulusa konu üründe bugday çimi,
sarimsak ve zencefil, bitki kaynagi olarak, tek baslarina veya bulus içinde
kombinasyon halinde kullanilabilmektedir.
suyundan üretilen hücre disi vezikülleri içeren bir bilesik ile ilgilidir. Söz konusu
25418.102
hücre disi veziküller; cilt beyazlatma, nemlendirme ve kiriSiklik azaltici etkilerin
mükemmel cilt durumu iyilestirici etkilerine sahiptir ve saç dökülmesinin
önlenmesinde etki göstermektedir,
Bulusun Kisa Açiklamasi
Bulusun amaci, terapötik ve ilaç tasiyicisi gibi amaçlarda kullanilmak üzere, bitki
süspansiyon kültürünün avantajlarindan faydalanarak, yüksek haciin ve saflikta
bitki eksozomlari üretiini gerçeklestirmektir.
Bu bulusun diger amaci, homojen bir eksozom kültürü elde edilinesidir.
Bulusun Ayrintili Açiklamasi
Bulus konusu bitkisel eksozom üretim yöntemine iliskin sekiller;
Kültür edilen tütün hücrelerinin mikroskopik görüntüleridir.
Kültür edilen stevia (seker otu) hücrelerinin mikroskopik görüntüleridir.
Stevia (seker otu) bitki hücre süspansiyon kültüründen elde edilen
eksozomlarin büyüklüklerinin dagiliminin dinamik isik saçilimi ile
ölçümünün görünümüdür.
Stevia (seker otu) bitki hücre Süspansiyon kültüründen elde edilen
eksozomlarin büyüklüklerinin dagiliminin dinamik isik saçilimi ile
ölçümünün görünümüdür.
Tütün bitkisinden elde edilen eksozomlarin SEM görüntüsü ile farkli bitki
kültürlerinden elde edilen morfolojilerinin ve büyüklüklerinin
görünümüdür.
SteVia (seker otu) bitkisinden elde edilen eksozoinlarin SEM görüntüsü
ile farkli bitki kültürlerinden elde edilen morfolojilerinin ve
büyüklüklerinin görününümüdür.
25418.102
Sekil 7. Tütün hücrelerinden elde edilen eksozomlarin akis sitometrisi ile
karakterizasyonu için gerçeklestirilen kontrol grubunun grafiksel
gösterimidir.
Sekil 8. Tütün hücrelerinden elde edilen eksozomlann akis sitometrisi ile CD 9
proteinlerinin ölçümünün grafiksel gösterimidir.
Sekil 9. Tütün hücrelerinden elde edilen eksozomlarin akis sitometrisi ile CD 63
proteinlerinin ölçümünün grafiksel gösterimidir.
Sekil 10.Tütün hücrelerinden elde edilen eksozomlarin akis sitometrisi ile HSP7O
proteinlerinin ölçümünün grafiksel gösterimidir.
Sekil 11. Stevia (seker otu) hücrelerinden elde edilen eksozomlarin akis sitometrisi
ile karakterizasyonu için gerçeklestirilen kontrol grubunun grafiksel
gösterimidir.
Sekil 12. SteVia (seker otu) hücrelerinden elde edilen eksozomlarin akis sitometrisi
ile CD9 proteinlerinin ölçümünün grafiksel gösterimidir.
Sekil 13. SteVia (seker otu) hücrelerinden elde edilen eksozomlarin akis sitometrisi
ile CD63 proteinlerinin ölçümünün grafiksel gösterimidir.
Sekil 14. Stevia (seker otu) hücrelerinden elde edilen eksozomlarin akis sitometrisi
ile HSP7O proteinlerinin Ölçümünün grafiksel gösterimidir.
Bulus, bitki doku kültürü temelli hücre süspansiyon kültürlerinden bitkisel eksozom
üretim yöntemi olup,
- Bitki hücre süspansiyon kültürünün elde edilmesi,
o Düzenli olarak alt kültür yapilan, bitkiden (tercihen tütün yapragi
veya stevia yapragindan) yaralama yöntemi ile elde edilmis kallus
kültürünün, alt kültür sonrasi 2-3 hafta içerisinde sivi kültüre
geçirilmeye hazir hale getirilmesi,
o Kallus kültürünün, 1-5 mm boyutlarinda küçük parçalara ayrilarak,
o Erlen içerisindeki sivi kültür besi ortaminin; 20-30 g/L sakkaroz,
(Tütün vapragi kullanilmasi durumunda 0,1-0,8mg/L veya stevia
25418.102
yapragi kullanilmasi durumunda l-4m2/L) 6-Benzylaminopurine,
1-3mg/L l-Napthaleneacetic acid, 3,5-4,5g/L Murashige & Skoog
Vitamin içeren tuz karisimi içerecek sekilde hazirlanmasi,
o Sivi kültürün, büyüme süresince sürekli isik altinda tutulup 20-26
°C sicaklikta ve 80-120 devir/dakika karistirma hizinda
çalkalanmasi,
0 Alt kültür, vakum filtrasyon sistemi ile 5-10 gün ara ile yapilmasi,
0 3-5 Alt kültürde bir steril çelik süzgeçten geçirilmesi,
Bitki kültürü medyasinin, içerisinde %2-4, 25-45 kDa molekül agirlikli
polietilen glikol ve %1-2 450-650kDa molekül agirlikli dextran içeren
izolasyon solüsyonu ile 111 oraninda, 20 defa ters-düz (mixmg by in version)
edilerek karistirilmasi,
1500g de 10 dakika +4 °C”de santrifüj edilmesi,
Santrifüj islemi sonrasinda, %90"ini olusturan ve protein ve diger hücresel
atiklari içeren üst faz ile %10`unu içeren ve eksozomlarin toplandigi alt faz
seklinde iki ayrilinis fazin elde edilmesi,
Üst fazin dikkatlice çekilerek atilmasi,
Eksozom içeren alt fazin temiz bir tüpe aktarilmasi,
Izolasyon solüsyonunun 121 oranda su ile dilute edilmesi ve 1000 x g de 10
dakika santrifüjü ile elde edilen sivi çift fazli sistemin üst fazi olarak
Solüsyon C elde edilmesi,
Eksozom içeren bu alt fazin üzerine [:1 oraninda Solüsyon C eklenmesi ve
defa ters-düz edilmesi,
Süpernatant (üst faz)”1n toplanmasiyla, Solüsyon C içerisindeki etanolün
(EtOH) bir evaporatör araciligiyla uzaklastirilmasi,
Elde edilen nihai ürün olan eksozomun (alikotlanarak -80 DC sicaklikta 12
aya kadar veya liyofilize edilerek toz halinde +4 °C sicaklikta 36 aya kadar)
muhafaza edilmesi adimlarini içennektedir.
25418.102
Bulus, bitki doku kültürü temelli hücre süspansiyon kültürlerinden bitkisel eksozom
üretilmesine yönelik bir yöntem ile ilgilidir. Söz konusu yöntemde ilk olarak, tütün
ve stevia (seker otu) hücre süspansiyon kültürleri olusturulmakta, ardindan söz
konusu hücre süspansiyon kültürleri kullanilarak bitkisel eksozomlar elde
edilmektedir.
Bulus kapsaminda kültür besi ortaminin; seker, tuz, vitainin ve hormon ile islem
görmesi saglanmaktadir. Bu süreçte hormon olarak tercih edilen 6-
Benzylaminopurine (ö-Benzilaminopurin; benzil adenin, BAP veya BA, hücre
böliinmesini iiyararak bitkilerin biiyiimesini ve gelisme tepkilerini ortaya Çikaran,
Çiçek açan ve meyve zenginligini uyaran birinci nesil bir sentetik sitokinindir)._
Düzenli olarak alt kültür yapilan, bitkiden (tercihen tütün yapragi veya stevia
yapragindan) yaralama yöntemi ile elde edilmis, uygun hormon konsantrasyonlari
ile bu yaprak dokularinin uyarilmasiyla kallus dokusu olusturulmustur. Elde edilen
kallus dokusunun belirli hormonlar yardimi ile özelliklerinin sürekli olarak
korundugu kallus kültürü hazirlanmaktadir. Tütün ve Stevia farkli bitki türleri olup,
kallus kültürünün korunmasi için düzenli olarak belirli hormonlarla uyarilmasi
gerekmektedir. Bu hormonlar türler arasi çesitlilik gösterir. Seker tuz ve Vitaminler
de çesitlilik gösterebilir ancak Tütün ve Stevia için ayni seker ve tuz orani uygun
olarak buluninustur. Bu hormonlar türler arasi çesitlilik gösterir. Seker tuz ve
vitaminler de çesitlilik gösterebilmektedir. Burada kullanilan Vitamin-tuz karisimi
olarak teknigin bilinen durumunda da yaygin olarak kullanilan Murashige & Skoog
Vitamin içeren tuz karisimi [14] ele alinmaktadir. Bahsi geçen Murashige & Skoog
karisimi, kesfeden arastirmacilarin isimlerince adlandirilmakta olup, bitki doku
kültüründe siklikla kullanilan bir medya kompozisyonudur. Burada bahsi geçen
medyasidir. Kullanilan Murashige&Sskoog miktari: "Murashige & Skoog Vitamin
içeren tuz karisimi bilesenleri [10] 3,5-4,5g/L [ll] içerecek sekilde”
hazirlanmaktadir.
25418.102
Günümüzde yapilan çalismalarda bitkilerden elde edilen eksozomlarm bitki hücre
kültüründe kullanilan besiyerinden izole edilmesi ile eksozomlarin homojenitesi,
üretim miktari ve genetik uygulamalari açisindan çok önemli avantajlarin ortaya
çiktigi belirlenmistir. Bitkisel kökenli eksozomlarin biyoaktivitelerinin
çalisilmasmdaki en önemli engellerden biri olan homojen bir eksozom kültürü elde
edilememesi sorunu, bulus kapsaminda çözülmüstür. Bulus konusu yöntemde, bitki
hücre süspansiyon kültüründeki besiyerine tek bir hücre tipi tarafindan eksozomlar
salgilanmakta ve bahsi geçen hücrelerin de kontrollü kosullar altinda büyütülmesi
saglanmaktadir. Böylece zaman içerisinde gerçeklestirilen deneysel çalismalarda
ihtiyaç duyulan eksozomlarin üretilmesi sirasinda ortaya çikacak veziküler yapi ve
içerik farkliliklarinin en aza indirilmesi mümkün olmaktadir. Bunun bir diger
avantaji ise bitki doku kültüründe kullanilan besiyerinin, eksozom
satlastirilmasinda kullanilacak bir meyve ekstraktina oranla çok daha az kirlilik
içeriyor olmasidir. Buna bagli olarak, eksozom izolasyonunda hem zaman hem de
verimlilik anlaminda önemli avantajlar elde edilmektedir.
Bulus kapsaminda, bitkilerden eksozomlarin saflastirilmasinda genel olarak bitkiler
için gerekli olan büyüme sartlarindan ve gerekli olan alanlardan bagimsiz bir süreç
ortaya koymaktir. Teknik alandaj meyve tabanli çalismalarda bitkilerin
karakteristik olarak ürün verdikleri tarihlere sahip olmalari ve istenen miktarda
eksozom miktari elde edilmesi için gereken alan miktarinin fazla büyük olmasi gibi
problemler, bulus konusu yöntem ile ortadan kalkmaktadir. Bitki kültürleri için
biyoreaktörlerin kullanilmasi ile bitkilerdeki çalisilmak istenilen hücrelerin
eksozomlari zamandan bagimsiz olarak ve daha minimal alanlarda çok yüksek
miktarlarda elde edilebilmektedir.
Bulus kapsaminda, bitki doku kültüründeki hücre toplulugundan eksozom elde
edilebilmesi ile bitki hücrelerinin çevresel degisikliklere cevaplarinin
incelenmesine olanak saglamaktir. Bunun da ötesinde, bitki kökenli üretilen
eksozom kargolarinin düzenlenmesinde özel bir proteininin veziküler yapiya dahil
25418.102
edilmesi ile bitki hücreleri üzerindeki genetik degisikliklerin cevaplarinin hücre
spesifik yapilmasi da mümkün olabilecektir.
Bulus kapsaminda nihai ürün olan eksozomun uzun süreli muhafaza edilmesi için
alikotlama veya liyofîlize etme islemleri uygulanmaktadir. Alikotlamada, tekrar
eden bir donma-çözülme islemine maruz kalinmasmi engellemek amaçlidir.
Liyof'ilizasyon, uzun süreli +4 derece stabilitesi saglamaktadir. Bu islemler son
ürünümüzün dogru muhafazasi için kullanilmaktadir.
Claims (8)
1. Bulus, bitki doku kültürü temelli hücre süspansiyon kültürlerinden bitkisel eksozom üretim yöntemi olup, - Bitki hücre süspansiyon kültürünün elde edilmesi, o Düzenli olarak alt kültür yapilan, bitkiden yaralama yöntemi ile elde edilmis kallus kültürünün, alt kültür sonrasi 2-3 hafta içerisinde sivi kültüre geçirilmeye hazir hale getirilmesi, o Kallus kültürünün, 1-5 mm boyutlarinda küçük parçalara ayrilarak, o Erlen içerisindeki sivi kültür besi ortaininin; sakkaroz, 6- Benzylaminopurine, l-Napthaleneacetic acid, Murashige 86 Skoog vitamin içeren tuz karisimi içerecek sekilde hazirlanmasi, o Sivi kültürün, büyüme süresince sürekli isik altinda tutulup 20-26 OC sicaklikta ve 80-120 devir/dakika karistirma hizinda çalkalanmasi, 0 Alt kültür, vakum filtrasyon sistemi ile 5-10 gün ara ile yapilmasi, 0 3-5 Alt kültürde bir steril çelik süzgeçten geçirilmesi, Bitki kültürü medyasinin, izolasyon solüsyonu ile 121 oraninda, 20 defa ters- düz edilerek kari stirilmasi, 1500g de 10 dakika +4 °C7de santrifüj edilmesi, Santrifüj islemi sonrasinda, %90`1n1 olusturan ve protein ve diger hücresel atiklari içeren üst faz ile %10*unu içeren ve eksozomlarin toplandigi alt faz seklinde iki ayrilmis fazin elde edilmesi, Üst fazin dikkatlice çekilerek atilmasi, Eksozom içeren alt fazin temiz bir tüpe aktarilmasi, Izolasyon solüsyonunun 1:l oranda su ile dilute edilmesi ve 1000 x g de 10 dakika santrifüjü ile elde edilen sivi çift fazli sistemin üst fazi olarak Solüsyon C elde edilmesi, Eksozom içeren bu alt fazin üzerine 1:1 oraninda Solüsyon C eklenmesi ve 10 defa ters-düz edilmesi, 25418.102 - Süpematant (üst faz)'in toplanmasiyla, Solüsyon C içerisindeki etanolün (EtOH) bir evaporatör araciligiyla uzaklastirilmasi, - Elde edilen nihai ürün olan eksozomun muhafaza edilmesi adimlarini içermektedir. .
Bitkisel doku olarak, tütün yapragi kullanilmasi ile karakterize edilen Istem l”deki gibi bir bitkisel eksozom üretim yöntemi. .
Bitkisel doku olarak, stevia yapragi kullanilmasi ile karakterize edilen Istem l`deki gibi bir bitkisel eksozom üretim yöntemi. .
Erlen içerisindeki sivi kültür besi ortaminin; 20-30 g/L sakkaroz, 6- Benzylaininopurine, l-3mg/L l-Napthaleneacetic acid, 3,5-4,5g/L Murashige karakterize edilen Istem 1'deki gibi bir bitkisel eksozom üretim yöntemi. .
Erlen içerisindeki sivi kültür besi ortaminda, bitkisel doku olarak tütün yapragi kullanilmasi durumunda 0,1-0,8 mg/L 6-Benzylaminopurine bulunmasi ile karakterize edilen Istem 2 ve 43teki gibi bir bitkisel eksozom üretim yöntemi. .
Erlen içerisindeki sivi kültür besi ortaminda, bitkisel doku olarak stevia yapragi kullanilmasi durumunda 1-4 mg/L 6-Benzylaminopurine bulunmasi ile karakterize edilen Istem 3 ve 4'teki gibi bir bitkisel eksozom üretim yöntemi. .
Nihai ürün olan bitkisel eksozomun alikotlanarak -80 °C sicaklikta 12 aya kadar muhafaza edilmesi ile karakterize edilen Istem 1°deki gibi bir bitkisel eksozoin üretim yöntemi. 25418.102
8. Nihai ürün olan bitkisel eksozomun liyofilize edilerek toz halinde +4 C>C sicaklikta 36 aya kadar muhafaza edilmesi ile karakterize edilen Istem 1°deki gibi bir bitkisel eksozom üretim yöntemi. 25418.102
Priority Applications (7)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
TR2020/07334A TR202007334A2 (tr) | 2020-05-11 | 2020-05-11 | Bi̇tki̇sel eksozom üreti̇m yöntemi̇ |
CN202180042743.3A CN115667494A (zh) | 2020-05-11 | 2021-05-10 | 产生植物来源的外泌体的方法 |
CA3178161A CA3178161A1 (en) | 2020-05-11 | 2021-05-10 | A method of producing plant-derived exosomes |
JP2022568545A JP2023525526A (ja) | 2020-05-11 | 2021-05-10 | 植物由来エクソソームを産生する方法 |
US17/924,699 US20230183642A1 (en) | 2020-05-11 | 2021-05-10 | Method of producing plant-derived exosomes |
EP21803472.6A EP4150052A1 (en) | 2020-05-11 | 2021-05-10 | A method of producing plant-derived exosomes |
PCT/TR2021/050454 WO2021230847A1 (en) | 2020-05-11 | 2021-05-10 | A method of producing plant-derived exosomes |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
TR2020/07334A TR202007334A2 (tr) | 2020-05-11 | 2020-05-11 | Bi̇tki̇sel eksozom üreti̇m yöntemi̇ |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
TR202007334A2 true TR202007334A2 (tr) | 2021-11-22 |
Family
ID=78524733
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
TR2020/07334A TR202007334A2 (tr) | 2020-05-11 | 2020-05-11 | Bi̇tki̇sel eksozom üreti̇m yöntemi̇ |
Country Status (7)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US20230183642A1 (tr) |
EP (1) | EP4150052A1 (tr) |
JP (1) | JP2023525526A (tr) |
CN (1) | CN115667494A (tr) |
CA (1) | CA3178161A1 (tr) |
TR (1) | TR202007334A2 (tr) |
WO (1) | WO2021230847A1 (tr) |
Families Citing this family (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN115491341B (zh) * | 2022-04-24 | 2024-03-08 | 岭南重峻科技(佛山市南海区)有限公司 | 一种葡萄复合组织外囊泡及其制备方法和应用 |
WO2024090673A1 (ko) * | 2022-10-24 | 2024-05-02 | 주식회사 휴에버그린팜 | 식물세포배양시 수성이상계를 이용한 세포배양 동시 고순도 엑소좀 대량분리, 정제 방법 |
CN117180164B (zh) * | 2023-11-08 | 2024-01-30 | 北京尧景基因技术有限公司 | 天山雪莲紫色愈伤组织类囊泡的提取方法及其在制备抗氧化或美白皮肤产品中的应用 |
Family Cites Families (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US11911713B2 (en) * | 2018-02-15 | 2024-02-27 | Yeditepe Universitesi | Exosome isolation method by two phase fluid system |
-
2020
- 2020-05-11 TR TR2020/07334A patent/TR202007334A2/tr unknown
-
2021
- 2021-05-10 WO PCT/TR2021/050454 patent/WO2021230847A1/en unknown
- 2021-05-10 CA CA3178161A patent/CA3178161A1/en active Pending
- 2021-05-10 US US17/924,699 patent/US20230183642A1/en active Pending
- 2021-05-10 JP JP2022568545A patent/JP2023525526A/ja active Pending
- 2021-05-10 EP EP21803472.6A patent/EP4150052A1/en active Pending
- 2021-05-10 CN CN202180042743.3A patent/CN115667494A/zh active Pending
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
JP2023525526A (ja) | 2023-06-16 |
CN115667494A (zh) | 2023-01-31 |
EP4150052A1 (en) | 2023-03-22 |
CA3178161A1 (en) | 2021-11-18 |
US20230183642A1 (en) | 2023-06-15 |
WO2021230847A1 (en) | 2021-11-18 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
TR202007334A2 (tr) | Bi̇tki̇sel eksozom üreti̇m yöntemi̇ | |
Karny et al. | Therapeutic nanoparticles penetrate leaves and deliver nutrients to agricultural crops | |
CN101842112B (zh) | 含有来自紫杉形成层或原形成层的植物干细胞系的抗癌组合物 | |
ES2831835T3 (es) | Método de producción del Celastrol y de derivados triterpénicos pentacíclicos | |
JP6009545B2 (ja) | 膜輸送タンパク質が豊富な植物から抽出された細胞膜小胞の調製方法および使用 | |
Vanti et al. | Development and percutaneous permeation study of escinosomes, escin-based nanovesicles loaded with berberine chloride | |
Tiboni et al. | Prunus spinosa extract loaded in biomimetic nanoparticles evokes in vitro anti-inflammatory and wound healing activities | |
Amminbavi et al. | Assessment of In vitro wound healing potential of Hibiscus leaf extract Emulgel | |
JP4653658B2 (ja) | 穀類の胎座抽出物の製造方法 | |
Kim et al. | Production of secondary metabolites from cell cultures of Sageretia thea (Osbeck) MC Johnst. using balloon-type bubble bioreactors | |
Martínez et al. | Effect of inoculum size and age, and sucrose concentration on cell growth to promote metabolites production in cultured Taraxacum officinale (Weber) cells | |
RU2619182C1 (ru) | Способ получения биологически активных веществ в клеточной культуре Conium maculatum L. (болиголова пятнистого) | |
CN117100871A (zh) | 一种用于保护生物来源的细胞外囊泡的医用级储存制剂及其应用 | |
Gupta et al. | Establishing the Callus-Based Isolation of Extracellular Vesicles from Cissus quadrangularis and Elucidating Their Role in Osteogenic Differentiation | |
Kozińska et al. | Cytotoxicity of Quillaja saponaria saponins towards lung cells is higher for cholesterol-rich cells | |
CN102893858B (zh) | 一种通过培养龙牙楤木体细胞胚生产有用次生代谢物质的方法 | |
Beale et al. | The development of inclusions in tissue cultures of monkey kidney epithelial cells infected with poliomyelitis virus | |
CN114621313A (zh) | 一种裸藻蛋白提取物及其在化妆品中的用途 | |
WO2016191839A1 (pt) | PROCESSO DE OBTENÇÃO DE VESÍCULAS DE MEMBRANA EXTERNA (OMV) A PARTIR DA LINHAGEM DE HAEMOPHILUS AEGYPTIUS 254 (Hae254), VESÍCULAS DE MEMBRANA EXTERNA ASSIM OBTIDAS (OMV-Hae254) E SEU USO PARA TRANSFECÇÃO CELULAR | |
Roshchina et al. | Single cell plant model of Equisetum arvense for the study antihistamine effects of azulene and sesquiterpene lactones | |
CN109381475A (zh) | 葛根黄酮苷在制备治疗免疫球蛋白e介导的疾病的药物中的应用 | |
Mursaliyeva et al. | Total Content of Saponins, Phenols and Flavonoids and Antioxidant and Antimicrobial Activity of In Vitro Culture of Allochrusa gypsophiloides (Regel) Schischk Compared to Wild Plants | |
Wetterauer et al. | Physiology of Camptothecin Synthesis in Plants and Root Organ Cultures of Ophiorrhiza mungos L. and Its Production in Root Fermenters | |
Winahyu et al. | Formulation and evaluation of the Exopolysaccharide compound extract lotion from the Microalgae Spirulina sp | |
Permatasari et al. | NANOEMULSION-BASED MOUTHWASH OF ETHYL ACETATE FRACTION OF SERAI WANGI STALK: FORMULATION, CHARACTERIZATION AND ANTIBACTERIAL ACTIVITY TEST |