TR202006919A2 - Di̇ş kök hücresi̇nden nöron hücresi̇ farklilaştirmasi amaciyla gerçekleşti̇ri̇len besi̇yeri̇ tabanli bi̇r yöntem - Google Patents
Di̇ş kök hücresi̇nden nöron hücresi̇ farklilaştirmasi amaciyla gerçekleşti̇ri̇len besi̇yeri̇ tabanli bi̇r yöntemInfo
- Publication number
- TR202006919A2 TR202006919A2 TR2020/06919A TR202006919A TR202006919A2 TR 202006919 A2 TR202006919 A2 TR 202006919A2 TR 2020/06919 A TR2020/06919 A TR 2020/06919A TR 202006919 A TR202006919 A TR 202006919A TR 202006919 A2 TR202006919 A2 TR 202006919A2
- Authority
- TR
- Turkey
- Prior art keywords
- cells
- differentiation
- medium
- cell
- neurogenic
- Prior art date
Links
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 title claims abstract description 33
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 title claims abstract description 29
- 210000002569 neuron Anatomy 0.000 title claims abstract description 28
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 23
- 230000003291 dopaminomimetic effect Effects 0.000 claims abstract description 4
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 60
- 230000001272 neurogenic effect Effects 0.000 claims description 18
- OHCQJHSOBUTRHG-KGGHGJDLSA-N forskolin Natural products O=C([C@@]12O)C[C@](C)(C=C)O[C@]1(C)[C@@H](OC(=O)C)[C@@H](O)[C@@H]1[C@]2(C)[C@@H](O)CCC1(C)C OHCQJHSOBUTRHG-KGGHGJDLSA-N 0.000 claims description 11
- 102000003974 Fibroblast growth factor 2 Human genes 0.000 claims description 9
- 108090000379 Fibroblast growth factor 2 Proteins 0.000 claims description 9
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 claims description 8
- 210000002901 mesenchymal stem cell Anatomy 0.000 claims description 7
- AEQFSUDEHCCHBT-UHFFFAOYSA-M sodium valproate Chemical compound [Na+].CCCC(C([O-])=O)CCC AEQFSUDEHCCHBT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 7
- SUZLHDUTVMZSEV-UHFFFAOYSA-N Deoxycoleonol Natural products C12C(=O)CC(C)(C=C)OC2(C)C(OC(=O)C)C(O)C2C1(C)C(O)CCC2(C)C SUZLHDUTVMZSEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- OHCQJHSOBUTRHG-UHFFFAOYSA-N colforsin Natural products OC12C(=O)CC(C)(C=C)OC1(C)C(OC(=O)C)C(O)C1C2(C)C(O)CCC1(C)C OHCQJHSOBUTRHG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- HJCMDXDYPOUFDY-WHFBIAKZSA-N Ala-Gln Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(N)=O HJCMDXDYPOUFDY-WHFBIAKZSA-N 0.000 claims description 3
- 239000012583 B-27 Supplement Substances 0.000 claims description 3
- VBEQCZHXXJYVRD-GACYYNSASA-N uroanthelone Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O)C(C)C)[C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1NC=NC=1)NC(=O)[C@H](CCSC)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CS)NC(=O)CNC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O)C(C)C)[C@@H](C)CC)C1=CC=C(O)C=C1 VBEQCZHXXJYVRD-GACYYNSASA-N 0.000 claims description 3
- 102000004219 Brain-derived neurotrophic factor Human genes 0.000 claims description 2
- 108090000715 Brain-derived neurotrophic factor Proteins 0.000 claims description 2
- 229940077737 brain-derived neurotrophic factor Drugs 0.000 claims description 2
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 claims description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 claims description 2
- 239000000411 inducer Substances 0.000 claims description 2
- 102000009024 Epidermal Growth Factor Human genes 0.000 claims 1
- 101800003838 Epidermal growth factor Proteins 0.000 claims 1
- 229940116977 epidermal growth factor Drugs 0.000 claims 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 abstract description 8
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 abstract description 8
- 230000004770 neurodegeneration Effects 0.000 abstract description 7
- 208000015122 neurodegenerative disease Diseases 0.000 abstract description 7
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 abstract description 3
- 229940079593 drug Drugs 0.000 abstract description 3
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 3
- 230000022131 cell cycle Effects 0.000 description 6
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 6
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 5
- 230000000926 neurological effect Effects 0.000 description 5
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 5
- 238000011161 development Methods 0.000 description 4
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 4
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 4
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 4
- 230000001537 neural effect Effects 0.000 description 4
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- ZHAFUINZIZIXFC-UHFFFAOYSA-N [9-(dimethylamino)-10-methylbenzo[a]phenoxazin-5-ylidene]azanium;chloride Chemical compound [Cl-].O1C2=CC(=[NH2+])C3=CC=CC=C3C2=NC2=C1C=C(N(C)C)C(C)=C2 ZHAFUINZIZIXFC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 210000000845 cartilage Anatomy 0.000 description 3
- 230000024245 cell differentiation Effects 0.000 description 3
- 210000003074 dental pulp Anatomy 0.000 description 3
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 3
- 210000005036 nerve Anatomy 0.000 description 3
- 230000004031 neuronal differentiation Effects 0.000 description 3
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 3
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 description 2
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 2
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 2
- 210000000020 growth cone Anatomy 0.000 description 2
- 210000004263 induced pluripotent stem cell Anatomy 0.000 description 2
- 210000003061 neural cell Anatomy 0.000 description 2
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 2
- 210000000578 peripheral nerve Anatomy 0.000 description 2
- 238000003753 real-time PCR Methods 0.000 description 2
- 230000008439 repair process Effects 0.000 description 2
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 2
- 102000040650 (ribonucleotides)n+m Human genes 0.000 description 1
- 101150084750 1 gene Proteins 0.000 description 1
- 201000009030 Carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 108020004635 Complementary DNA Proteins 0.000 description 1
- IVOMOUWHDPKRLL-KQYNXXCUSA-N Cyclic adenosine monophosphate Chemical compound C([C@H]1O2)OP(O)(=O)O[C@H]1[C@@H](O)[C@@H]2N1C(N=CN=C2N)=C2N=C1 IVOMOUWHDPKRLL-KQYNXXCUSA-N 0.000 description 1
- 230000010190 G1 phase Effects 0.000 description 1
- 230000004668 G2/M phase Effects 0.000 description 1
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 description 1
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 description 1
- 101001092197 Homo sapiens RNA binding protein fox-1 homolog 3 Proteins 0.000 description 1
- 101150009249 MAP2 gene Proteins 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 208000028389 Nerve injury Diseases 0.000 description 1
- 206010029260 Neuroblastoma Diseases 0.000 description 1
- 108020002230 Pancreatic Ribonuclease Proteins 0.000 description 1
- 102000005891 Pancreatic ribonuclease Human genes 0.000 description 1
- 230000018199 S phase Effects 0.000 description 1
- 101150076211 TH gene Proteins 0.000 description 1
- 108700005077 Viral Genes Proteins 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 239000012190 activator Substances 0.000 description 1
- 230000011759 adipose tissue development Effects 0.000 description 1
- 210000004504 adult stem cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000003050 axon Anatomy 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 238000010804 cDNA synthesis Methods 0.000 description 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 1
- -1 cartilage Substances 0.000 description 1
- 230000022159 cartilage development Effects 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 230000005779 cell damage Effects 0.000 description 1
- 208000037887 cell injury Diseases 0.000 description 1
- 230000006727 cell loss Effects 0.000 description 1
- 230000010307 cell transformation Effects 0.000 description 1
- 210000003169 central nervous system Anatomy 0.000 description 1
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 1
- 210000002808 connective tissue Anatomy 0.000 description 1
- 229940095074 cyclic amp Drugs 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 210000005258 dental pulp stem cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000005064 dopaminergic neuron Anatomy 0.000 description 1
- 238000009509 drug development Methods 0.000 description 1
- 210000003981 ectoderm Anatomy 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 230000002518 glial effect Effects 0.000 description 1
- XMBWDFGMSWQBCA-UHFFFAOYSA-N hydrogen iodide Chemical compound I XMBWDFGMSWQBCA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 230000002427 irreversible effect Effects 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 230000035800 maturation Effects 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 238000011206 morphological examination Methods 0.000 description 1
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 1
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 1
- 230000008764 nerve damage Effects 0.000 description 1
- 210000001982 neural crest cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000000276 neural tube Anatomy 0.000 description 1
- 108010091047 neurofilament protein H Proteins 0.000 description 1
- 230000004766 neurogenesis Effects 0.000 description 1
- 231100000956 nontoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000032724 odontogenesis Effects 0.000 description 1
- 230000011164 ossification Effects 0.000 description 1
- 239000003973 paint Substances 0.000 description 1
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 1
- 230000003239 periodontal effect Effects 0.000 description 1
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 230000001172 regenerating effect Effects 0.000 description 1
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 description 1
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 description 1
- 210000003705 ribosome Anatomy 0.000 description 1
- 230000019491 signal transduction Effects 0.000 description 1
- 210000003625 skull Anatomy 0.000 description 1
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 1
- 238000011477 surgical intervention Methods 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 230000017423 tissue regeneration Effects 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 1
- DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N β‐Mercaptoethanol Chemical compound OCCS DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
- C12N5/06—Animal cells or tissues; Human cells or tissues
- C12N5/0602—Vertebrate cells
- C12N5/0618—Cells of the nervous system
- C12N5/0619—Neurons
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2500/00—Specific components of cell culture medium
- C12N2500/30—Organic components
- C12N2500/32—Amino acids
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2500/00—Specific components of cell culture medium
- C12N2500/30—Organic components
- C12N2500/36—Lipids
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2500/00—Specific components of cell culture medium
- C12N2500/30—Organic components
- C12N2500/38—Vitamins
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2501/00—Active agents used in cell culture processes, e.g. differentation
- C12N2501/10—Growth factors
- C12N2501/11—Epidermal growth factor [EGF]
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2501/00—Active agents used in cell culture processes, e.g. differentation
- C12N2501/10—Growth factors
- C12N2501/115—Basic fibroblast growth factor (bFGF, FGF-2)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2501/00—Active agents used in cell culture processes, e.g. differentation
- C12N2501/10—Growth factors
- C12N2501/13—Nerve growth factor [NGF]; Brain-derived neurotrophic factor [BDNF]; Cilliary neurotrophic factor [CNTF]; Glial-derived neurotrophic factor [GDNF]; Neurotrophins [NT]; Neuregulins
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2506/00—Differentiation of animal cells from one lineage to another; Differentiation of pluripotent cells
- C12N2506/13—Differentiation of animal cells from one lineage to another; Differentiation of pluripotent cells from connective tissue cells, from mesenchymal cells
- C12N2506/1346—Differentiation of animal cells from one lineage to another; Differentiation of pluripotent cells from connective tissue cells, from mesenchymal cells from mesenchymal stem cells
- C12N2506/1361—Differentiation of animal cells from one lineage to another; Differentiation of pluripotent cells from connective tissue cells, from mesenchymal cells from mesenchymal stem cells from dental pulp or dental follicle stem cells
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Neurology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Neurosurgery (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Psychiatry (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Hospice & Palliative Care (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Materials For Medical Uses (AREA)
Abstract
Bu buluş, diş kök hücrelerinin dopaminerjik sinir hücrelerine özel olarak farklılaşmasını uyarmak amacıyla besiyeri tabanlı bir yöntem kullanılması ile ilgilidir. Buluşun amacı, nörodejeneretif hastalıkların tedavisinde kullanılmak üzere hücresel uygulamalar ve bu hastalıklarla ilgili ilaçların geliştirilmesidir.
Description
TARIFNAME
DIS KÖK HÜCRESINDEN NÖRON HÜCRESI FARKLILASTIRMASI
AMACIYLA GERÇEKLESTIRILEN BESIYERI TABANLI BIR YÖNTEM
Teknik Alan
Bu bulus, dis kök hücrelerinin dopaminerjik sinir hücrelerine özel olarak
farklilasmasini uyarmak amaciyla besiyeri tabanli bir yöntem kullanilmasi ile
Önceki Teknik
Insan vücudunda bulunan mezenkimal kök hücre kaynaklarindan birisi de dis
dokusudur. Disin farkli bölgelerinden izole edilen kök hücrelerin karakterizasyonu
yapilmaktadir. Dis pulpasindan, periodontal bag dokusundan ve olgunlasmamis
gömülü disten izole edilen hücreler bunlara örnektir [1]. Disten kaynaklanan kök
hücrelerin (DKKH), embriyonel dönemde nöral tüpün ektoderminden olusan
nöroektodermal kökenli hücrelerden (nöral krest hücreler) kökenlenmekte olinalari
nedeniyle dikkat çekicidirler [2]. Bu hücreler birçok farkli hücre ve doku tiplerine
farklilasabilme yetenegindedirler. Bu hücrelerin odontogenez disinda osteogenez,
adipogenez, kondrogenez ve nörogenez kabiliyetlerinin oldugu da görülmüstür [1].
Nöral krest hücrelerden kökenlenineleri ve nörona özel bazi ekspresyon profilleri
sergilemeleri nedeniyle, DKKH`lar nörodejeneratif hastaliklarin tedavisi için umut
vadeden hücre tipleri olarak görülmektedirler. Sinir hücrelerinin artarak ve geri
döndürülemez bir sekilde islev kaybina ugramalari veya ölmeleri sonucu ortaya
çikan nörodejeneratif hastaliklarin rastlanma sikligi gün geçtikçe artmaktadir.
Merkezi sinir sisteminde yeni nöron olusumunun sinirli olmasi, iyilesmeyi
geciktiren faktörlerin bulunmasi, kafatasi yapisinin cerrahi müdahaleleri
zorlastiriyor olmasi gibi sebepler bu tip hastaliklarin tedavisini zorlastirmaktadir.
Sinir hücresi hasan ya da kaybi ile olusan bu hastaliklarin tedavisi için öne çikan
yöntemlerden biri kök hücre uygulamalaridir [3]. Kök hücrelerin, uygun teknikle
belirlenen yere uygulandiktan sonra hasarli bölgeye dogru göç edebildikleri,
25418.100
farklilasma yetenegine sahip olduklari ve endojen kök hücreleri de uyararak hasar
tamiri sürecine katkida bulunduklari gözlemlenmistir [4]. Günümüzde dis, kemik
iligi, kan, kikirdak, yag gibi dokular yetiskin kök hücre kaynagi olarak
kullanilabilmektedir [5]. Bu kök hücre tiplerinin nörodejeneratif hastaliklarda
kayba ugrayan hücre tiplerine farklilasabilmeleri, hastalardan merkezi sinir sistemi
dokusundan daha kolayca alinabilen dokulardan hazirlanan hücrelerle laboratuvar
ortaminda bireye Özgü hastalik modellerinin yapilmasini da olasi hale getirecektir
çalisilmasi, hem nörodejeneratif hastaliklarin tedavisinde ölen sinir hücrelerinin
yerine konmasinda hem de bu hastaliklarin bireye özgü hücre kültürü
modellemelerinin yapilarak çesitli terapilerin gelistirilmesinde en büyük katkiyi
saglayabilecek hücre tipinin ve metodun belirlenmesine olanak saglayacaktir.
Indüklenmis pluripotent kök hücrelerin nöronlara farklilastirilmasi, kültürdeki
farklilasma veriminin düsük olmasi, mutasyon oraninin yüksek olmasi, mezenkimal
hücrelerin kültüre edilmesi ve farklilastirilmasindan daha maliyetli olmasi, kaynak
hücrelerin viral genler tasimasi ve bunlara bagli olarak in vivo hücre aktariminda
karsinogcneze sebep olmasi potansiyelinin hayli yüksek olmasi gibi dezavantaj lara
sahiptir. Buna ek olarak dis kök hücrelerinin embriyolojik köken olarak sinir
dokusuna daha yakin olmasina bagli olarak nörojenik farklilasmada kullanilan
adipoz ve kemik iligi kökenli mezenkimal kök hücrelerin sinir hücrelerine
dönüsümünün daha uzun sürmesi ve dis kök hücreleri kadar potansiyelli olmadigi
bilinmektedir. Mezenkimal kök hücrelerin elde edilmesinde özellikle kemik
iliginden ve kikirdak dokusundan elde edilen hücrelerin hem yöntemsel olarak zor
olmasi hem de sayisal olarak yüksek oranda elde edilememesi gibi dezavantajlar
ortaya çikmaktadir. Son olarak çesitli kökenlerden gelen kök hücrelerin
farklilastirilmasinda besiyeri içerisinde DMSO, BHA veya ß-mercaptoethanol gibi
hücrenin morfolojik yapisina zarar vererek hücrelerde psödo-nörogeneze yol açan
maddelerin kullanilmasi farklilastirilmis hücrelerin kültürünün devam etmesini
olanaksiz kilmaktadir.
25418.100
Teknikte bilinen uygulamalardan CN104726406 sayili Çin patent basvurusu
dokümaninda, dis pulpasi mezenkimal kök hücrelerinin sinir hücrelerine
farklilastirilmasi için indüklemesi için inetottan bahsedilmektedir. Bizim patent
basvurumuzda kök hücrelerin nöronlara farklilastirilmasi sirasinda hücre
döngüsünün hücrelerin yogunlugunun yüzde 40-50 arasinda iken durdurulmasi
amaci ile metot kisminda anlatildigi ve Sekil-l”de gösterildigi gibi ek kimyasallar
(VPA ve IBMX) eklenmistir. Bu sayede hücreler yüksek yogunluktan dolayi degil
de uygulanan metotdan dolayi saglikli ve nöral soya indükleninis bir sekilde
farklilasmasi saglanmistir.
Teknikte bilinen uygulamalardan CN1590537 sayili Çin patent basvurusu
dokümaninda, ektomezenkim kök hücrelerin ayrilmasi ve kültür edilmesi için bir
yönteinden bahsedilmektedir. Bu amaçla bulus kapsaminda, keinik doku
mühendisligi, kas doku mühendisligi, dis doku mühendisligi kullanilmakta ve
periferik sinir hücrelerinin hazirlanmasi için onarimi için kullanilmaktadir. Ayrica,
ilgili patent basvurusunda periferik sinir hücrelerinin rejenerasyonun saglanmasi
amaciyla nöral soy degil de glial soya yönelik bir farklilastirma prosedürü
kullanilmistir. Buna ek olarak metodolojik bakimindan yalnizca forskolin
kimyasalinin kullanilmasi ve tek basamaktan meydana gelmesi sebebiyle bizim
patent basvuiumuzdan ayrilmaktadir. Literatürde bilindigi kadariyla forskolin gibi
siklik-amp aktivatörlerinin farklilastirmada tek basina kullanilmasinin yeterli
olmadigi gösterilmistir. Ayni zamanda bizim patentimizde farklilastirma
yönteminin güvenirliligi, nöronlarin hem morfolojik olarak hem de krezil viyolet
boyamasi kullanilarak kanitlanmistir (Sekil 2-3). Yukarida anlatilan tüm sebepler
bakimindan patentimizdeki yöntemin daha etkili oldugu gözlemlenmistir.
basvurusu dokümaninda, sinir hasarinin tedavi edilmesi için graft materyali
üretilmesi için bir yöntemden bahsedilmektedir. Bulus konusu yöntem kapsaminda,
dis pulpasi kök hücrelerinin FGF2 (veya bFGF (Basic Fibroblast Growth Factor))
haricinde büyüme faktörleri içermeyen bir medya içerisinde kültür edilmesi adimi
25418.100
yer almaktadir. Ayrica, ilgili patentte kullanilan FGFZ faktörünün dis pulpasi
kökenli kök hücrelerinin sadece nöral soy ile ilintili genleri aktiflestirdigi
bilinmektir. Ancak kök hücrelerin farklilastirilmasi sirasinda hücre döngüsünün de
dâhil oldugu birçok sinyal yolagi kilit rol oynadigi bilinmektedir. Bu sebeple, kök
hücrelere yalnizca FGF2 faktörünün verilmesinin geçerli bir nöral hücre dönüsümü
saglamadigi açiktir. Bunlar göz Önünde bulundurularak bizim patentimizde, yine
metotda anlatildigi gibi, hem farklilastirma yolaklarinin aktiflestirilmesi hem de
nöral hücrelerin olgunlastirilmasi amaciyla iki basamaktan olusan bir protokol
izlenmesi sonucunda Sekil-47de gösterildigi gibi olgun ve fonksiyonel bir nöronun
genetik ifadesine sahip oldugu gösterilmistir.
Bulusun Kisa Açiklamasi
Bulusun amaci, besiyeri tabanli olarak disten elde edilen kök hücrelerin
dopaminerjik nöron hücrelerine farklilastirilmasidir.
Bulusun diger amaci, nörodejeneretif hastaliklarin tedavisinde kullanilmak üzere
hücresel uygulamalar ve bu hastaliklarla ilgili ilaçlarin gelistirilmesidir.
Bulusun Ayrintili Açiklamasi
Bu bulusun amacina ulasmak için gerçeklestirilen “Dis Kök Hücresinden Nöron
Hücresi Farklilastirmasi Amaciyla Gerçeklestirilen Besiyeri Tabanli Bir
Yöntem” ekli sekillerde gösterilmis olup; bu sekillerden:
Sekil 1- Bulus kapsaminda olusturulan nörolojik indükleme medyumunun
hücrelerin hücre döngüsü üzerine olan etkisinin günlere bagli olarak
gösterimidir. [(a) nörolojik indükleme medyiimu ile 0, 2, 4 ve 6 gün
((a-l), (ci-2), (ci-3) ve (ci-4)) boyunca muamele edilmis hücrelerin
hücre döngüsü grafikleri, (b) GO/Gl Fazindaki hücrelerin yüzde
olarak grafiksel gösterimi, (e) S Fazmdaki hücrelerin yüzde olarak
25418.100
gragßksel gösterimi, (d) G2/M Fazmdaki hücrelerin yüzde olarak
grafiksel gösterimi.]
Sekil 2 - Bulus kapsaminda nörolojik indükleme medyumuna 6 gün boyunca
maruz kalmis olan hücrelerin morfolojik olarak incelenmesi, söz
konusu hücrede nöron hücrelerine özel hücre somasi, uzayan bir
akson ve büyüme konisinin mikroskobik görüntüsüdür.
Sekil 3 - Bulus kapsaminda nörolojik indükleme medyumuna 6 gün boyunca
maruz kalmis olan hücrelerin ve sadece besi ortaminda büyütülmüs
Kontrol hücrelerinin nörojenik hücrelere özgü olan Kresil Viole
boyasi ile boyanip isik mikroskobundaki görünümüdür. [(a)
Sekil 4 - Bulus kapsaminda nörolojik indükleme medyumuna 6 gün boyunca
maruz kalmis olan hücrelerinde ve sadece besi ortaminda
büyütülmüs Kontrol hücrelerinde nörojenik hücrelere özgü olan
genlerin ölçümünün grafiksel gösterimidir. [(a) NeuN geni, (b) Nurr
1 geni, (c) DATgem', (d) Snap 25, (e) NF-Hgeni, (19 Map2 geni, (g)
TH geni ve (h) 301- 2 geni].
Sekillerdeki parçalar numaralandirilmis olup karsiliklari asagida verilmistir
BK. Büyüme Konisi
Bulus kapsaminda, nörodejeneretif hastaliklarin tedavisinde kullanilmak üzere
hücresel uygulamalar ve bu hastaliklarla ilgili ilaçlarin gelistirilmesi, laboratuvarda
hücre farklilastirma çalismalari, nöroblastoma gibi kanser türlerinin tedavisi için
ilaç gelistirilmesi alanlarinda bir çalisma yürütülmektedir. Bu dogrultuda, disten
elde edilen kök hücrelerin dopaminerjik sinir (nöron) hücrelerine
25418.100
farklilastirilmasini özel olarak uyanmak amaciyla besiyeri tabanli yeni bir uygulama
bulus kapsaminda gelistirilmektedir.
Kök hücrelerden sinir hücrelerine farklilasma uygulamalarinda, dis kök
hücrelerinin embriyolojik köken olarak sinir dokusuna daha yakin olmasi ve
nörojenik farklilasmada teknigin bilinen durumunda kullanilan adipoz (kikirdak) ve
kemik iligi kökenli mezenkimal kök hücrelerinin sinir hücrelerine dönüsümünün
daha uzun sürmesi, dis kök hücrelerinin teknikte bilinen uygulamalara kiyasla sinir
hücreye farklilasma konusunda potansiyelinin yüksek oldugu görülmektedir.
Bulus kapsaminda gerçeklestirilen dis kök hücrelerinin nöroj enik farklilastirilmasi
yöntemi;
- Dis kök hücrelerinin 5000 hücre/cm2 yogunlugunda ekilmesi,
- Hücrelerin 24 saat süreyle inkübasyonu sonrasinda, birinci kisim nörojenik
indükleyici besiyeri içerisine alinmasi ve 4 gün süreyle besiyeri
uygulamasinin sürdürülmesi,
- Sonrasinda, ikinci kisim nörojenik indükleyici besiyerine hücrelerin
alinmasi ve 2 gün süreyle besiyeri uygulamasinin sürdürülinesi,
- Farklilasmanin 6 gün sürenin ardindan sonlandirilmasi adimlarini
içermektedir.
Yukaridaki yöntem içerisinde ifade edilen birinci ve ikinci kisim nörojenik
indükleyici besiyeri içerikleri su sekildedir:
Nörojeiiik Indükleyici Besiyeri Kisim 1:
o Dmem/F12 Glutamax supplemented
o B-27 Supplement %l
100 MM
o Valproic acid sodium salt (VPA) 2 mM
o Forskolin 0,1 uM
o Basic Fibroblast Growth Factor (bFGF) 20 ng/ml
o Epidermal Growth Factor (EGF) 20 ng/ml
25418.100
Nörojenik Indükleyici Besiyeri Kisim 2:
Dmem/F12 Glutarnax supplemented
B-27 Supplement %1
o 3-lsobutyl-1-methylxanthine (IBMX) 100 MW
o Valproic acid sodium salt (VPA) 2 mM
o Forskolin 0,1 uM
o Basic F ibroblast Growth Factor (bF GF) 20 ng/ml
o Epidermal Growth Factor (EGF) 20 ng/ml
o Brain derived neurotrophic factor 30 ng/ml
kapsaminda saglanan avantajlar su sekilde siralanabilir:
Uyarilmis pluripotent kök hücresi yerine mezenkimal kök hücrelerde etkin
bir sekilde nöronal farklilasmayi saglamaktadir.
Diger farklilasma medyalari ve protokolleri ile kiyaslandiginda daha kisa
sürede nöronal farklilasmanin gözlemlenmektedir.
Diger farklilasma medyalari ve protokolleri ile kiyaslandiginda daha etkin
bir nöron olusumu gözlemlenmektedir.
Diger medyalar ile farklilastirilan hücrelerin nöronal farklilasmalari geri
dönüsümlü olmasina ragmen bu bulus kapsaminda farklilastirilan hücreler
terminal dönüsüm göstermektedir.
Sekillerde de gösterildigi üzere 2. Günden itibaren hücre döngüsü
durmaktadir ki bu etkin bir farklilasma için gereklidir.
Diger medyalarla karsilastirildiginda hücreler üzerinde bir toksisite
olusturmamaktadir.
Olusturulan bu nöronal hücreler doku rejenerasyonu ve
transplantasyonlarinda kullanilabilecegi gibi sinir bilim çalismalarina
büyük katki saglamaktadir.
25418.100
Deneysel Çalismalar
Hücre Döngüsü Deneyi
Nörojenik besiyeri ile muamele edilmis olan dis kök hücrelerinin, hücre
döngüsündeki fazlariiiiii degisimlerinin gözlenmesi amaciyla flow sitometride
analizleri gerçeklestirilmektedir. Hücre döngüsü deneyi için nörojenik
farklilastirilma sürecindeki ikinci, dördüncü ve altinci günlerde fikse edilen
hücrelerin RNase A ve Nonidet P4O ile muamele edilip propidyuin iyodit ile
boyanarak analizleri yapilmistir.
Gerçek Zamanli Polimeraz Zincir Reaksiyonu
Nörojenik besiyeri ile muamele edilmis olan hücrelerin gen seviyelerindeki
degisimleri gözlemleyebilmek için gerçek zamanli polimeraz zincir reaksiyonu
deneyi gerçeklestirilir. Bu degisimler hem morfolojik hemde gen anlatimi
seviyesinde olur. Kullanilan primerler Primer BLAST yazilimi (The National
Center for Biotechnology : NCBl) kullanilarak tasarlanmistir. Jel kombinasyonu
uygulamasi yapilan hücrelerden total RNA°lar izole edilmis ve cDNA sentezi
yapilmistir. Sentez edilen cDNA”lar Fermentas Maxima SYBR Green karisim
ürünü içinde son hacim 20 ul olacak sekilde primerlerle karistirilmis ve genlerin
ekspresyon seviyeleri BIO-RAD cihazi kullanilarak analiz edilmistir.
Farklilasmis Hücrelerin Morfolojik Analizi
Nörojenik besiyeri ile muamele edilmis olan hücrelerin farklilasma sürecinin son
gününde hücrelerin isik mikroskobu altinda morfolojik analizleri
gerçeklestirilmistir. Farklilastirilmis hücrelerin analizlerin yapilirken morfolojik
olarak nöronlarda bulunan karakteristik hücreler yapilarin gelisimleri ve varliklari
incelenmistir.
Farklilasmis Hücrelerin Kresil Viyole Boyamasi
Nörojenik besiyeri ile muamele edilmis olan hücrelerin farklilasma sürecinin son
gününde hücrelerde nöronlara özgü olarak görülen karakteristik nissl
cisimciklerinin boyanmasi gerçeklestirilmistir. Hücrelerde uygulamasi yapilan
25418.100
kresil Viyole boyasi sinir hücrelerinin somasinda (S) çokça bulunan granüllü
endoplazmik retiküllerin ribozomlarini boyayarak koyu mavi-mor bir renk ortaya
çikarir. Farklilastirilrnamis dis kök hücreleri ise soluk pembe renkte tespit
edilebilmektedir,
Claims (3)
1. Dis dokusundan elde edilen mezenkimal kök hücrelerinden dopaminerjik sinir hücrelerine farklilastirilmasini saglayan bir yöntem olup, - Dis kök hücrelerinin 5000 hücre/cm2 yogunlugunda ekilmesi, - Hücrelerin 24 saat süreyle inkübasyoiiu sonrasinda, birinci kisim nörojenik indükleyici besiyeri içerisine alinmasi ve 4 gün süreyle besiyeri uygulamasinin sürdürülmesi, - Sonrasinda, ikinci kisim nörojenik indükleyici besiyerine hücrelerin alinmasi ve 2 gün süreyle besiyeri uygulamasinin sürdürülmesi, - Farklilasmanm 6 günlük sürenin ardindan sonlandirilmasi adimlarini içeren dis kök hücresinden nöron hücresi farklilastirmasi amaciyla gerçeklestirilen besiyeri tabanli bir yöntem.
2. Birinci kisim Nörojenik Indükleyici Besiyerinin; - Dmem/F 12 Glutamax supplemented, - B-27 Supplement %1, - 3-Isobutyl-l-methylxanthine (IBMX) 100 uM, - Valproic acid sodium salt (VPA) 2 mM, - Forskolin 0,1 uM, - Basic Fibroblast Growth Factor (bFGF) 20 ng/ml, - Epidermal Growth Factor (EGF) 20 ng/ml Içerdigi istem 13deki gibi dis kök hücresinden nöron hücresi farklilastirmasr amaciyla gerçeklestirilen besiyeri tabanli bir yöntem.
3. Ikinci kisim Nörojenik Indükleyici Besiyerinin, - Dmem/F12 Glutamax supplemented - B-27 Supplernent %l - 3-Isobutyl-l-methylxanthine (IBMX) lOO uM - Valproic acid sodium salt (VPA) 2 mM 25418.100 Forskolin 0,] ”M Basic F ibroblast Growth Factor (bF GF) 20 ng/ml Epidermal Growth Factor (EGP) 20 ng/nil Brain derived neurotrophic factor 30 ng/ml Içerdigi istem l°deki gibi dis kök hücresinden nöron hücresi farklilastirmasi amaciyla gerçeklestirilen besiyeri tabanli bir yöntem.
Priority Applications (7)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| TR2020/06919A TR202006919A2 (tr) | 2020-05-04 | 2020-05-04 | Di̇ş kök hücresi̇nden nöron hücresi̇ farklilaştirmasi amaciyla gerçekleşti̇ri̇len besi̇yeri̇ tabanli bi̇r yöntem |
| CN202180047387.4A CN115803431A (zh) | 2020-05-04 | 2021-05-04 | 实现牙齿干细胞向神经元分化的基于培养基的方法 |
| EP21800202.0A EP4146791A1 (en) | 2020-05-04 | 2021-05-04 | A medium-based method realized for differentiation of dental stem cells into neurons |
| US17/923,246 US20230159888A1 (en) | 2020-05-04 | 2021-05-04 | Medium-based method realized for differentiation of dental stem cells into neurons |
| PCT/TR2021/050426 WO2021225552A1 (en) | 2020-05-04 | 2021-05-04 | A medium-based method realized for differentiation of dental stem cells into neurons |
| JP2022567442A JP2023525024A (ja) | 2020-05-04 | 2021-05-04 | 歯牙組織幹細胞からニューロンへの分化を実現するための培地ベースの方法 |
| CA3177932A CA3177932A1 (en) | 2020-05-04 | 2021-05-04 | A medium-based method realized for differentiation of dental stem cells into neurons |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| TR2020/06919A TR202006919A2 (tr) | 2020-05-04 | 2020-05-04 | Di̇ş kök hücresi̇nden nöron hücresi̇ farklilaştirmasi amaciyla gerçekleşti̇ri̇len besi̇yeri̇ tabanli bi̇r yöntem |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| TR202006919A2 true TR202006919A2 (tr) | 2021-11-22 |
Family
ID=78468186
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| TR2020/06919A TR202006919A2 (tr) | 2020-05-04 | 2020-05-04 | Di̇ş kök hücresi̇nden nöron hücresi̇ farklilaştirmasi amaciyla gerçekleşti̇ri̇len besi̇yeri̇ tabanli bi̇r yöntem |
Country Status (7)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US20230159888A1 (tr) |
| EP (1) | EP4146791A1 (tr) |
| JP (1) | JP2023525024A (tr) |
| CN (1) | CN115803431A (tr) |
| CA (1) | CA3177932A1 (tr) |
| TR (1) | TR202006919A2 (tr) |
| WO (1) | WO2021225552A1 (tr) |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| TWI829198B (zh) * | 2022-06-16 | 2024-01-11 | 國泰醫療財團法人國泰綜合醫院 | 神經細胞製備方法、體外牙髓幹細胞混合物、經分離的神經細胞的製藥用途以及加速牙髓幹細胞分化為寡突膠質細胞之方法 |
Family Cites Families (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN104726406B (zh) * | 2015-02-13 | 2018-05-01 | 中国医科大学 | 一种诱导牙髓间充质干细胞分化为神经细胞的方法 |
-
2020
- 2020-05-04 TR TR2020/06919A patent/TR202006919A2/tr unknown
-
2021
- 2021-05-04 CN CN202180047387.4A patent/CN115803431A/zh active Pending
- 2021-05-04 WO PCT/TR2021/050426 patent/WO2021225552A1/en unknown
- 2021-05-04 JP JP2022567442A patent/JP2023525024A/ja active Pending
- 2021-05-04 CA CA3177932A patent/CA3177932A1/en active Pending
- 2021-05-04 EP EP21800202.0A patent/EP4146791A1/en active Pending
- 2021-05-04 US US17/923,246 patent/US20230159888A1/en active Pending
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JP2023525024A (ja) | 2023-06-14 |
| CA3177932A1 (en) | 2021-11-11 |
| EP4146791A1 (en) | 2023-03-15 |
| CN115803431A (zh) | 2023-03-14 |
| WO2021225552A1 (en) | 2021-11-11 |
| US20230159888A1 (en) | 2023-05-25 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Xiong et al. | Selective neuronal differentiation of neural stem cells induced by nanosecond microplasma agitation | |
| Kadar et al. | Differentiation potential of stem cells from human dental origin-promise for tissue engineering | |
| US8716017B2 (en) | Technologies, methods, and products of small molecule directed tissue and organ regeneration from human pluripotent stem cells | |
| Najafzadeh et al. | Hair follicle stem cells: In vitro and in vivo neural differentiation | |
| Heng et al. | Small molecules enhance neurogenic differentiation of dental-derived adult stem cells | |
| Maciaczyk et al. | Combined use of BDNF, ascorbic acid, low oxygen, and prolonged differentiation time generates tyrosine hydroxylase-expressing neurons after long-term in vitro expansion of human fetal midbrain precursor cells | |
| Ahmed et al. | Protocol for mouse adult neural stem cell isolation and culture | |
| TR202006919A2 (tr) | Di̇ş kök hücresi̇nden nöron hücresi̇ farklilaştirmasi amaciyla gerçekleşti̇ri̇len besi̇yeri̇ tabanli bi̇r yöntem | |
| Yurtsever et al. | Dopaminergic induction of human dental pulp stem cells by photobiomodulation: comparison of 660nm laser light and polychromatic light in the nir | |
| Llorente et al. | Reliable generation of glial enriched progenitors from human fibroblast-derived iPSCs | |
| Eftekhari et al. | Nisin and non-essential amino acids: new perspective in differentiation of neural progenitors from human-induced pluripotent stem cells in vitro | |
| CN110396500B (zh) | 诱导成纤维细胞直接向神经元转分化的组合物及其应用 | |
| Miura et al. | Atmospheric-pressure plasma-irradiation inhibits mouse embryonic stem cell differentiation to mesoderm and endoderm but promotes ectoderm differentiation | |
| Liu et al. | Generation of dopaminergic neurons from human fetal mesencephalic progenitors after co-culture with striatal-conditioned media and exposure to lowered oxygen | |
| CA2957071A1 (en) | Mammalian pluripotent stem cells, methods for their production, and uses thereof | |
| CN108148808B (zh) | 有助于诱导生成神经前体细胞的诱导培养基 | |
| Klincumhom et al. | Selective TGF-β1/ALK inhibitor improves neuronal differentiation of mouse embryonic stem cells | |
| Hao et al. | Direct induction of functional neuronal cells from fibroblast-like cells derived from adult human retina | |
| Sarkar et al. | Neural induction of embryonic stem/induced pluripotent stem cells | |
| CN106148284A (zh) | 小分子定向组织和器官再生的多能人类干细胞技术、方法和产品 | |
| Ali et al. | Differentiation of CD34+ Human Hair Follicle Stem Cells into Functional Melanocytes | |
| CN116751747B (zh) | 一种促进间充质干细胞分化为神经元的无血清诱导培养基及诱导方法 | |
| CN108148807B (zh) | 生长因子诱导生成神经前体细胞的方法 | |
| WO2020095592A1 (ja) | 医薬品組成物及び化粧品組成物 | |
| Sato et al. | Microfabric vessel‐based system for efficient 3D culture and rapid differentiation of pluripotent stem cells for regenerative medicine |