TR201514423A3 - Kanser tedavisi için bir ekstre. - Google Patents
Kanser tedavisi için bir ekstre. Download PDFInfo
- Publication number
- TR201514423A3 TR201514423A3 TR2015/14423A TR201514423A TR201514423A3 TR 201514423 A3 TR201514423 A3 TR 201514423A3 TR 2015/14423 A TR2015/14423 A TR 2015/14423A TR 201514423 A TR201514423 A TR 201514423A TR 201514423 A3 TR201514423 A3 TR 201514423A3
- Authority
- TR
- Turkey
- Prior art keywords
- extract
- cancer
- treatment
- usnea
- cells
- Prior art date
Links
- 239000000284 extract Substances 0.000 title claims abstract description 39
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 title claims abstract description 36
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 title claims abstract description 29
- 238000011282 treatment Methods 0.000 title claims abstract description 26
- 241001283431 Usnea longissima Species 0.000 claims abstract description 18
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 39
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 12
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims description 12
- 241000006302 Usnea Species 0.000 claims description 11
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims description 11
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims description 4
- 239000002024 ethyl acetate extract Substances 0.000 claims description 2
- 238000000622 liquid--liquid extraction Methods 0.000 claims description 2
- 238000000638 solvent extraction Methods 0.000 claims description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 8
- 230000036541 health Effects 0.000 abstract description 2
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 30
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- 241000699660 Mus musculus Species 0.000 description 9
- 230000001093 anti-cancer Effects 0.000 description 9
- 238000011580 nude mouse model Methods 0.000 description 9
- 208000020816 lung neoplasm Diseases 0.000 description 8
- 206010058467 Lung neoplasm malignant Diseases 0.000 description 7
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 7
- 201000005202 lung cancer Diseases 0.000 description 7
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 5
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 5
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 5
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 4
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 4
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 4
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 4
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 4
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 3
- 238000011161 development Methods 0.000 description 3
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 3
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 3
- VMGAPWLDMVPYIA-HIDZBRGKSA-N n'-amino-n-iminomethanimidamide Chemical compound N\N=C\N=N VMGAPWLDMVPYIA-HIDZBRGKSA-N 0.000 description 3
- BOLDJAUMGUJJKM-LSDHHAIUSA-N renifolin D Natural products CC(=C)[C@@H]1Cc2c(O)c(O)ccc2[C@H]1CC(=O)c3ccc(O)cc3O BOLDJAUMGUJJKM-LSDHHAIUSA-N 0.000 description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 3
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 3
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 3
- 241000195493 Cryptophyta Species 0.000 description 2
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 2
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 2
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 2
- 239000006146 Roswell Park Memorial Institute medium Substances 0.000 description 2
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 2
- 229940041181 antineoplastic drug Drugs 0.000 description 2
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 2
- 229960004316 cisplatin Drugs 0.000 description 2
- DQLATGHUWYMOKM-UHFFFAOYSA-L cisplatin Chemical compound N[Pt](N)(Cl)Cl DQLATGHUWYMOKM-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 2
- 230000034994 death Effects 0.000 description 2
- 231100000517 death Toxicity 0.000 description 2
- 238000003810 ethyl acetate extraction Methods 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 2
- 241000411851 herbal medicine Species 0.000 description 2
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 2
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 2
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 2
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 description 2
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- 208000030507 AIDS Diseases 0.000 description 1
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 241000235349 Ascomycota Species 0.000 description 1
- 201000009030 Carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 101710088194 Dehydrogenase Proteins 0.000 description 1
- 241000471264 Elaeagnus glabra Species 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 241000608847 Gnaphalium Species 0.000 description 1
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 1
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 1
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- GLNADSQYFUSGOU-GPTZEZBUSA-J Trypan blue Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[Na+].C1=C(S([O-])(=O)=O)C=C2C=C(S([O-])(=O)=O)C(/N=N/C3=CC=C(C=C3C)C=3C=C(C(=CC=3)\N=N\C=3C(=CC4=CC(=CC(N)=C4C=3O)S([O-])(=O)=O)S([O-])(=O)=O)C)=C(O)C2=C1N GLNADSQYFUSGOU-GPTZEZBUSA-J 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000033115 angiogenesis Effects 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- 239000006286 aqueous extract Substances 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000000601 blood cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 1
- 239000003560 cancer drug Substances 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 1
- 238000001516 cell proliferation assay Methods 0.000 description 1
- 230000006364 cellular survival Effects 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 238000007398 colorimetric assay Methods 0.000 description 1
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 1
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 1
- 238000002784 cytotoxicity assay Methods 0.000 description 1
- 231100000263 cytotoxicity test Toxicity 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 230000000235 effect on cancer Effects 0.000 description 1
- 230000002828 effect on organs or tissue Effects 0.000 description 1
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 1
- 208000006454 hepatitis Diseases 0.000 description 1
- 231100000283 hepatitis Toxicity 0.000 description 1
- 238000002513 implantation Methods 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 206010022000 influenza Diseases 0.000 description 1
- 231100000518 lethal Toxicity 0.000 description 1
- 230000001665 lethal effect Effects 0.000 description 1
- 208000037841 lung tumor Diseases 0.000 description 1
- 210000002751 lymph Anatomy 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 230000002438 mitochondrial effect Effects 0.000 description 1
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 1
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 1
- 230000000243 photosynthetic effect Effects 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 230000002062 proliferating effect Effects 0.000 description 1
- 230000005180 public health Effects 0.000 description 1
- 238000001959 radiotherapy Methods 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 229930000044 secondary metabolite Natural products 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 238000009331 sowing Methods 0.000 description 1
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 1
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 1
- 125000003831 tetrazolyl group Chemical group 0.000 description 1
- 201000008827 tuberculosis Diseases 0.000 description 1
- 235000013311 vegetables Nutrition 0.000 description 1
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/09—Lichens
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Medical Informatics (AREA)
- Botany (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Alternative & Traditional Medicine (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
Abstract
Buluş, sağlık sektöründe, kanserli hastaların tedavisinde kullanılan ilaçlar ile ilgilidir. Buluş, özellikle Usnea Longissima?dan elde edilen ekstrenin kanser hastalarının tedavisinde kullanılması ile ilgilidir.
Description
TARIFNAME
Kanser tedavisi için bir ekstre
Teknik Alan
Bulus, saglik sektöründe, kanser hastaliklarinin tedavisinde kullanilan ilaçlar ile
ilgilidir. Bulus, özellikle Usnea Longissima'dan elde edilen ekstrenin kanser
hastaliklarinin tedavisinde kullanilmasi ile ilgilidir.
Teknigin Bilinen Durumu
Kanser, normal hücrelerin kontrolsüz olarak çogalmasiyla gelisen ve klonal yayilma
ile çevresindeki dokulara; kan veya lenf yoluyla da bütün vücuda yayilan bir hastalik
türüdür. Görülme sikligi oldukça fazla olan kanser hastaligi, ölüm sebeplerinin
basinda gelmektedir. Kanser hastaligi günümüzde hala en önemli toplumsal saglik
sorunlarindan biridir.
Kanser tedavisinde mortaliteyi azaltmak ve sag kalimi arttirmak için radyoterapi,
kemoterapi ve cerrahi tedavi, çogu zaman kombine olarak kullanilmaktadir.
Günümüzde kanser kemoterapisinde kullanilan ilaçlar, kanseri tamamen tedavi
edememekte ve kanserden kaynaklanan ölümler giderek artmaktadir. Kanser
tedavisinde kullanilan ilaçlarin, çok ciddi ve öldürücü yan etkileri vardir. Bu da kanser
tedavisindeki basariyi kisitlamaktadir. Antineoplastik ilaçlar konusunda çok sayida
arastirmalar yapilmasina ragmen henüz kanser tedavisinde istenilen basari düzeyine
ulasilamamistir.
Antineoplastik ilaçlar, vücutta patolojik biçimde çogalmakta olan kanser hücrelerini
yok ettikleri gibi, hizli biçimde çogalmakta olan normal hücreleri de yok etmektedirler.
Bu nedenle çogu kanser ilacinin kemik iligi, kan hücreleri ve diger hizli çogalan
hücreleri içeren dokular üzerine de yan etkileri vardir.
Mevcut teknikte konu ile ilgili bilinen gelismeler asagida verilmektedir.
EP13394ZOB1 numarali patent, “Bitkilerin sulu ekstrelerini hazirlama prosesi ve elde
edilen ekstreler” ile ilgilidir. Söz konusu bulusta, sebzelerin özellikle de bitkilerin sulu
ekstrelerini hazirlamak için kullanilan bir yöntem ve bu yöntemle elde edilen, tip
alaninda özellikle de kanser, tüberküloz, grip, soguk alginligi ve AIDS gibi immün-
süpresan hastaliklarin tedavisinde veya hepatit gibi viral hastaliklarin tedavisinde
kullanilan bilesimler sunulmaktadir.
CN numarali patent,” Akciger kanseri tedavisi için bir bitkisel ilaç” ile
ilgilidir. Söz konusu bitkisel ilaç; %19-21 elaeagnus glabra, %29-31 gnaphalium
karisimindan olusmaktadir.
Sonuç olarak yukarida anlatilan olumsuzluklardan dolayi ve mevcut çözümlerin konu
hakkindaki yetersizligi nedeniyle ilgili teknik alanda bir gelistirme yapilmasi gerekli
kilinmistir.
Bulusun Kisa Açiklamasi
Mevcut bulus, yukarida bahsedilen gereksinimleri karsilayan, tüm dezavantajlari
ortadan kaldiran ve ilave bazi avantajlar getiren, kanser tedavisi için bir ekstre ile
Bulusun öncelikli amaci, kanser tedavisinde kullanilmak üzere, öldürücü yan etkisi
olmayan bir ilaç saglamaktir.
Bulus, Usnea Longissima”dan elde edilen ekstre ile kanser hastaliklarinin tedavi
edilmesini saglamayi amaçlamaktadir.
Bulusun bir amaci, kanser tedavisinde kullanilmak üzere üretimi ve uygulanmasi
kolay, yan etki içermeyen bir ilaç gelistirmektir.
Bulus ayrica, Usnea Longissima'dan bir çözücü madde (etil asetat) vasitasiyla
ekstraksiyon yöntemi ile elde edilen bir kanser tedavi ilaci gelistirilmesini
amaçlamaktadir.
Bulusun bir diger amaci, akciger kanseri tedavisinde kullanilmak üzere Usnea
Longissima'dan etil asetat çözücü maddesi vasitasiyla bir ekstre gelistirmektir.
Bulusun baska bir amaci, antikanser aktiviteye sahip, Usnea Longissima'dan
etil asetat ekstraksiyon yöntemi ile elde edilen ekstre saglamaktir.
Bulusun bir baska amaci, karisim halinde olmayan ve tek basina kanser
tedavisinde kullanilabilen, Usnea Longissimanin etil asetatta çözülmesiyle
ekstre elde edilmesini saglamaktir.
Bulus, yukarida anlatilan amaçlarin yerine getirilmesi için, kanser hastaliklarinin
tedavi edilmesini saglayan Usnea longissima ekstresinden olusmaktadir.
Bulusun amaçlarini gerçeklestirmek üzere bahsedilen ekstre, bir çözücü madde
varliginda ekstraksiyon yöntemi ile Usnea longissima'dan elde edilen ekstredir.
Bulusun amaçlarini gerçeklestirmek üzere bahsedilen çözücü madde etil
asetattir.
Bulusun amaçlarini gerçeklestirmek üzere bahsedilen ekstre, etil asetat
varliginda sivi-sivi ekstraksiyon yöntemi ile Usnea Iongissima”dan elde edilen
ekstredir.
Yukarida anlatilan amaçlarin yerine getirilmesi için bulus, Usnea longissima
ekstresinin kanser hastaliklarinin tedavisinde kullanimidir.
Bulusun yapisal ve karakteristik özellikleri ve tüm avantajlari asagida verilen detayli
açiklama sayesinde daha net olarak anlasilacaktir. Bu nedenle degerlendirmenin de
bu detayli açiklama göz önüne alinarak yapilmasi gerekmektedir.
Bulusun Detayli Açiklamasi
Bu detayli açiklamada, bulus konusu kanser tedavisi için bir ekstre ve tercih edilen
yapilanmalari, sadece konunun daha iyi anlasilmasina yönelik olarak ve hiçbir
sinirlayici etki olusturmayacak sekilde açiklanmaktadir.
Bulus, kanser hastaliklarinin tedavisinde kullanilmak üzere hazirlanan bir
ekstre ile ilgilidir. Söz konusu ekstre, Usnea Iongissima'dan ekstraksiyon
yoluyla elde edilmektedir. Usnea longissimaidan etil asetatla çözülmesi yoluyla
elde edilen ekstre (ULE) antikanser aktivite göstermektedir.
Antikanser aktivite gösteren Usnea longissima, bir liken türüdür. Likenler, basli
basina birer organizma degildir. Mantarlar (ascomycetes, bassidomycetes) ve
fotosentetik alglerden meydana gelen simbiyotik yasam süren canlilardir. Liken
yapisinda tek bir birey gibi davranan alg ve mantarlar, tek baslarina üretemedikleri
maddeleri bu ortak yasamla üretmektedir. Likenlerin ürettigi bu sekonder metabolitler;
pulvik, prolikesterinik, fisodik, Iobarik, fumarprotosetrarik, usnik asitler, depsidler ve
depsidonlar vb. diger maddelerdir.
Usnea longissima'nin etil asetatta çözülmesiyle elde edilen ekstre (ULE), in vivo
olarak Nude farelerde, A549 (akciger bazal alveolar epitelyel kanser hücre) hücre
hatti ile deri altinda olusturulan akciger kanser dokusunda antikanser aktivite
göstermistir. Yapilan deneyde, bulus konusu ekstrenin, akciger kanser hücre hattinin
(A549), Nude farelerin cilt altina enjeksiyonu ile olusturulan kanser dokusuna etkisi
arastirilmistir. Nude farelerde, cilt altina A549 enjekte edilerek olusturulan tümör
kitlesinin belirli bir büyüklüge ulasmasindan sonra bir gruba tedavi amaciyla 50
mg/kg dozunda ULE günde bir kez olmak üzere 30 gün boyunca oral yolla verilmistir.
Tedavi edilmeyen grupta tümör kitlesi ortalama olarak 69.3±14.3 mm3iden
53.4±13.1 mm3'ye düsmüstür.
Bulus konusu Usnea Longissima ekstresinin hazirlanma yöntemi asagida
verilmektedir.
Bunun için 100 gram ögütülmüs liken örnegi kahverengi siseye alinarak üzerine
1000 mL etil asetat döküldü ve 2 saat ultrasonik banyoda ekstraksiyona tabi tutuldu.
Süzülerek ekstrakt alindi ve geri kalan kisim bir kez daha 1000mL etil asetat ile ayni
sekilde ekstrakte edilerek süzüldü. Ekstraktlar bir araya toplanarak evaporatörde
40°C' de çözücüsü uçuruldu.
Usnea Iongissima'dan etil asetat ekstraksiyonu yöntemiyle elde edilen ekstre, kuru
granülümsü toz halindedir ve uygulama esnasinda distile su ile sulandirilarak
kullanilmaktadir. Bulus konusu ekstre, hücre kültürü deneylerinde, akciger
kanseri hücreleri (A549) üzerinde antikanser aktivite göstermektedir.
Nude farelerde, A549 hücre implantasyon testi ile Usnea Longissima etil
asetat ekstresinin ant_ikanser etkisinin (Egerlenglirilmesi':
Hücrelerin hazirlanmasi:
Bu çalismada, Nude fareler için kullanilacak olan akciger kanser hücre hatti A549, in-
vitro kosullarda, RPMI, %10 Fetal bovine serumu (FBS), 100 tig/ml streptomycin -
olacak sekilde pasajlanarak üretilmeye baslanmistir. Kültürler her gün vasat aspire
edilerek yeni besiyeri ile beslenmistir. Flasklardaki hücre yogunlugu yaklasik % 70-
80'ne eristiginde, hücreler % 0,25 tripsin-EDTA ile tripsinize edilerek, içinde soguk
besiyeri bulunan 50 ml falkon tüplerine transfer edilmistir. Bunu takiben 600 rpm'de
çökertilen hücreler, 2 x kez daha soguk RPMI ile yikandiktan sonra trypan mavisi ile
1:1 oraninda boyanarak inverted mikroskobunda (Olympus inverted mikroskobu CK
X41, 10 X) sayilmistir.
A549 akciger kanser hücre hattinin, Nude farelere uygulanmasi:
A549 kanser hücreleri, 0.5 ml serum fizyolojik süspansiyonunda 1x106 hücre olacak
sekilde ayarlanmistir. Daha sonra 6-7 haftalik 44 adet Nude farelerin sag yanina
subkutan olarak 0.5 ml A549 içeren süspansiyon enjekte edilmistir. Farelerde tümör
gelisimi haftada üç kez kontrol edilerek degerlendirilmistir. Tümörün ortalama hacmi
yakin olanlar seçilerek EG-50, CIG-2 ve CG olmak üzere üç deney grubuna
ayrilmistir. Gruplar arasindaki tümör hacmi birbirlerine yakin olacak sekilde
ayarlanmistir.
Usnea Longissima etil asetat ekstresinin Nude farelere uygulanmasi:
EG-50 (n-T) fare grubuna, 50 mg/kg dozda ULE, günde bir kez olmak üzere 30 gün
boyunca sonda ile agizdan verilmistir. CIG-2 (n-T) grubuna ise 2 mglkg dozda
sisplatin, 3 günde bir defa (toplam 10 doz) olmak üzere intraperitoneal olarak enjekte
edilmistir. CG (n-8) fare grubuna çözücü olarak distile su, ayni hacimde (1 ml) 30
gün boyunca sonda ile agizdan verilmistir. Bu süre sonunda tüm fare gruplarinin
tümör hacmi ölçülmüs ve islemler tamamlandiktan sonra fareler dekapitasyonla
öldürülmüstür. Daha sonra ULE verilen EG-SO fare grubundan elde edilen sonuçlar;
sisplatin verilen ClG-2 ve çözücü olarak distile su uygulanan kontrol (CG) grubundan
elde edilen sonuçlarla karsilastirilarak degerlendirilmistir. Tümör büyüklükleri bir
kumpas vasitasi ile ölçülerek antikanser aktivite degerlendirmesi yapilmistir.
Hücre kültürü çalismasi
Bu çalismada, A549 hücre hatti, Yeditepe Üniversitesi araciligiyla American Type
Culture Collection (ATCC) den temin edildi.Hücreler RPMl-1640 10% Fetal bovine
serum (FBS) (Gibco) ve antibiotics (100 ug/ml streptomycin+100Ulml penicilin)
kullanilarak T25 flasklarda 37°C de ve 5% C02 destekli inkübatörde üretilmistir.
Confluent hücreler 025% trypsin-EDTA solüsyonu kullanilarak pasajlanmistir.
Morfolojik Çalismalar
Usnea longissima'dan etil asetat yöntemi ile elde edilen ekstre, Stok solüsyonu 100
mg/ml olacak sekilde DMSO”da hazirlandi. A549 hücreleri 1x104 cells/well olacak
sekilde 1000pl büyüme medium ile birlikte 24-kuyucuklu kültür platlerine kondu.
Ertesi gün, Usnea longissima'dan etil asetat yöntemi ile elde edilen ekstre 400 tig/ml
konsantrasyonda hücrelere eklendi. DMSO (% 0.8) ayri kuyucuklara eklenerek kültür
37°C de 24 saat inkübe edildi. 24 saat sonra hücrelerde olusan morfolojik
degisiklikler inverted mikroskop (Olympus inverted mikrokbu CKX41, 10X) ile
incelendi ve sonuçlar fotograflandi.
Sitotoksik çalisma
Sitotoksik aktivite 1983'te Mosmann tarafindan yayinlanan protokole göre test
edilmistir. MTT testi kisaca, kültür ortamindaki mitokondrial aktivitesi devam eden
canli hücrelerin kolorimetrik olarak belirlenmesinde kullanilir. Kültürde, tetrazolium
halkasinin dehidrogenaz enzimlerince parçalanmasi sonucu MTT mor renkli insolubl
formazana dönüsür. Formazan DMSO veya izopropanol gibi baska bir çözücüyle
solubl hale getirilir ve olusan renk reaksiyonu spektrofotometrik olarak okunur. A549
hücreleri trypsinize edildikten sonra, 96 kuyucuklu mikroplaklara 1x103hücre/kuyucuk
olacak sekilde ekimleri yapildi. 24 saat sonra DMSO'da hazirlanmis olan Usnea
sekilde mikroplakalarin ilk kuyucuklarina eklendi. DMSO negatif kontrol olarak ayri
kuyucuklara tek basina eklenerek 2X dilüsyonla ayni sekilde dilüe edildi ve kültürler
24 saat 37°C de ve 5% 002 kosullarinda inkübatorde bekletildi. Inkübasyon
periyodu sonunda, suda 5 mg/ml olarak hazirlanmis olan MTT stogundan her bir
kuyucuga 10 pl eklenerek kültürler 4 saat daha ayni kosullarda inkübatörde
bekletilmistir. Bu periyod sonunda kuyucuklarda ki medium atilarak her bir kuyucuga
100 ul DMSO eklenerek canli hücrelerde olusmus olan formazan kristalleri
çözündürüldü. Absorbans degerleri ELlSA okuyucusunda (Thermo, Multiskan Go)
570 nm dalga boyunda okutuldu ve growth inhibiti0n= [(Kontrol kuyucugunun
absorbansi - Test kuyucugunun absorbansi) / Kontrol kuyucugunun absorbansi] X
100 olarak hesaplanmistir. (Mosmann T.Rapid colorimetric assay for cellular growth
and survival: application to proliferation and cytotoxicity assays.J lmmunol Methods.
ULE, siçanlarda ve farelerde oral yolla günde bir kez 50-100 mg/kg dozunda
uygulanabilmektedir. Uygulanmadan önce distile su ile sulandirilmaktadir. En az bir
ay süreyle kullanilmasi önerilmektedir.
Bulus konusu ULE, ekstraksiyon yöntemi ile tercihen etil asetat kullanilarak elde
edilmistir.
Usnea Iongissimahin herhangi bir çözücü madde ile çözülerek elde edilen ekstresi,
hücre kültüründe A549 akciger kanseri hücrelerinin sayisini azaltmak suretiyle ve
nude farelerde olusturulan akciger tümörünün kitlesini azaltmak suretiyle etki
göstermektedir. Bu etkisini angiyogenezi baskilayarak olusturmaktadir. Yukarida
bahsedilen çalisma, Usnea Iongissimainin antikanser aktivitesini göstermektedir. Söz
konusu antikanser aktivite, Usnea Iongissima'nin bütün çözücü maddeler kullanilarak
elde edilen ekstreleri ile saglanabilmektedir. Önemli olan ekstrenin usnea
çözücü yardimiyla içindeki maddeler ayristirilarak ekstre elde edilmektedir.
Claims (3)
1. Kanser hastaliklari tedavisinde kullanilmak üzere Usnea longissima ekstresi
2. istem 1'e uygun ekstre olup, özelligi; bir çözücü madde varliginda ekstraksiyon yöntemi ile Usnea Iongissima'dan elde edilmis olmasidir.
3. Istem 1”deki ekstre olup, özelligi; bahsedilen ekstrenin, etil asetat varliginda sivi- sivi ekstraksiyon yöntemi ile Usnea longissima'dan elde edilen etil asetat ekstresi olmasidir.
Priority Applications (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| TR2015/14423A TR201514423A3 (tr) | 2015-11-16 | 2015-11-16 | Kanser tedavisi için bir ekstre. |
| PCT/TR2016/050251 WO2017086892A1 (en) | 2015-11-16 | 2016-08-01 | An extract for cancer treatment |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| TR2015/14423A TR201514423A3 (tr) | 2015-11-16 | 2015-11-16 | Kanser tedavisi için bir ekstre. |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| TR201514423A3 true TR201514423A3 (tr) | 2017-02-21 |
Family
ID=56738180
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| TR2015/14423A TR201514423A3 (tr) | 2015-11-16 | 2015-11-16 | Kanser tedavisi için bir ekstre. |
Country Status (2)
| Country | Link |
|---|---|
| TR (1) | TR201514423A3 (tr) |
| WO (1) | WO2017086892A1 (tr) |
Family Cites Families (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4937195A (en) * | 1981-09-30 | 1990-06-26 | Nippon Paint Co., Ltd. | Tissue culture of lichens |
| WO2002041908A1 (en) | 2000-11-27 | 2002-05-30 | Bomsund Grupo Asesor, S.L. | Process for preparing aqueous extracts of plants and extracts so obtained |
| WO2008109521A2 (en) * | 2007-03-02 | 2008-09-12 | University Of South Florida | Method of treatment using atranorin |
| US20090048332A1 (en) * | 2007-08-14 | 2009-02-19 | Hej Research Insitute | Natural Novel Antioxidants |
| CN101596227A (zh) | 2009-04-21 | 2009-12-09 | 廖殷 | 一种治疗晚期肺癌的中草药制剂 |
-
2015
- 2015-11-16 TR TR2015/14423A patent/TR201514423A3/tr unknown
-
2016
- 2016-08-01 WO PCT/TR2016/050251 patent/WO2017086892A1/en active Application Filing
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| WO2017086892A1 (en) | 2017-05-26 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Yuan et al. | In vitro and in vivo inhibitory effects of a Pleurotus eryngii protein on colon cancer cells | |
| JP6209579B2 (ja) | 補助化療薬品とされる医薬組成物その用途 | |
| Du et al. | Cytosolic delivery of the immunological adjuvant Poly I: C and cytotoxic drug crystals via a carrier-free strategy significantly amplifies immune response | |
| Martelli et al. | New visions on natural products and cancer therapy: autophagy and related regulatory pathways | |
| JP6389958B2 (ja) | 瓦草５環性トリテルペンサポニン類化合物抗腫瘍の薬物用途 | |
| Yang et al. | Antrodia camphorata induces G 1 cell-cycle arrest in human premyelocytic leukemia (HL-60) cells and suppresses tumor growth in athymic nude mice | |
| Zdanowski et al. | Experimental immunology The effect of Rhodiola kirilowii extracts on tumor-induced angiogenesis in mice | |
| CN102218140B (zh) | 丹酚酸b和昔布类药物联合用药的抗肿瘤效果 | |
| US8846768B2 (en) | Use of compounds isolated from Euphorbia neriifolia for treating cancer and/or thrombocytopenia | |
| JP6234553B2 (ja) | 抗癌剤および副作用軽減剤 | |
| US20190022162A1 (en) | Combination anticancer endowed with antitumor activity, comprising alkaloids of chelidonium majus | |
| Upase et al. | A review on Phytosome loaded with novel herbal drug and their formulation, standardization and applications | |
| TR201514423A3 (tr) | Kanser tedavisi için bir ekstre. | |
| KR101649047B1 (ko) | 암의 예방 또는 치료를 위한 카지놀 ｃ의 용도 | |
| CN108888628B (zh) | 一种人参皂苷GRh2在制备抗弓形虫复方制剂中的应用及其药物 | |
| JP2015515993A (ja) | ヒトシクロオキシゲナーゼ及びドキソルビシン又はドキソルビシン類を含有する医薬組成物、その調製方法及び多種薬物の製造における使用 | |
| CN108451905B (zh) | 一种藤黄酸纳米乳制剂及其制备方法和应用 | |
| CN101199534B (zh) | 一种原人参二醇衍生物的抗肿瘤用途 | |
| US20110124741A1 (en) | Radiosensitizer compositions comprising schisandra chinensis(turcz.)baill and methods for use | |
| US10758581B2 (en) | Treatment of cancer | |
| TWI635867B (zh) | 中草藥組合物製備抑制腫瘤細胞轉移之藥物之用途 | |
| Hartono et al. | Effects of Borassus flabellifer L. fruit seed coat on HSC-3 cell line | |
| CN115919850A (zh) | 一种抗阿霉素心脏毒性的中药单体组合物及其制备方法和应用 | |
| Suresh et al. | Preparation of Methanolic Crude Extract of Padina Gymnospora Seaweed and their Anticancer Activities against Cancer Cell Line | |
| CN114053285A (zh) | 灵芝酸x在治疗肿瘤中的应用 |