TH6828A3 - ชุดไพรเมอร์ (primers) และไฮบริไดเซชั่นโพรบ (hybridization probes) สำหรับการตรวจวินิจฉัยพยาธิโรคเท้าช้าง วูเชอรีเรีย แบนครอฟไต (Wuchereria bancrofti) และบรูเกีย มาลาไย (Brugia malayi) ด้วยเทคนิค เรียลไทม์ พีซีอาร์ (real-time polymerase chain reaction; real-time PCR) และวิธีการใช้ชุดไพรเมอร์ และไฮบริไดเซชั่นโพรบ ดังกล่าว - Google Patents
ชุดไพรเมอร์ (primers) และไฮบริไดเซชั่นโพรบ (hybridization probes) สำหรับการตรวจวินิจฉัยพยาธิโรคเท้าช้าง วูเชอรีเรีย แบนครอฟไต (Wuchereria bancrofti) และบรูเกีย มาลาไย (Brugia malayi) ด้วยเทคนิค เรียลไทม์ พีซีอาร์ (real-time polymerase chain reaction; real-time PCR) และวิธีการใช้ชุดไพรเมอร์ และไฮบริไดเซชั่นโพรบ ดังกล่าวInfo
- Publication number
- TH6828A3 TH6828A3 TH703001014U TH0703001014U TH6828A3 TH 6828 A3 TH6828 A3 TH 6828A3 TH 703001014 U TH703001014 U TH 703001014U TH 0703001014 U TH0703001014 U TH 0703001014U TH 6828 A3 TH6828 A3 TH 6828A3
- Authority
- TH
- Thailand
- Prior art keywords
- hybridization probes
- primer
- real
- volume
- hybridization
- Prior art date
Links
- 239000000523 sample Substances 0.000 title claims abstract 37
- 238000009396 hybridization Methods 0.000 title claims abstract 35
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract 11
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 title claims abstract 10
- 238000003753 real-time PCR Methods 0.000 title claims abstract 9
- 241000244005 Wuchereria bancrofti Species 0.000 title claims abstract 7
- 241000244038 Brugia malayi Species 0.000 title claims abstract 6
- 241000244036 Brugia Species 0.000 claims abstract 5
- 241000255925 Diptera Species 0.000 claims abstract 5
- 201000006353 Filariasis Diseases 0.000 claims abstract 5
- 206010016675 Filariasis lymphatic Diseases 0.000 claims abstract 5
- 208000037263 Lymphatic filariasis Diseases 0.000 claims abstract 5
- 208000005239 filarial elephantiasis Diseases 0.000 claims abstract 5
- 239000008280 blood Substances 0.000 claims abstract 3
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 claims abstract 3
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 claims abstract 3
- TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L Magnesium chloride Chemical compound [Mg+2].[Cl-].[Cl-] TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims 6
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 claims 4
- 229910001629 magnesium chloride Inorganic materials 0.000 claims 3
- 235000011147 magnesium chloride Nutrition 0.000 claims 3
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims 3
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims 3
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims 2
- 229960002337 magnesium chloride Drugs 0.000 claims 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims 2
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 claims 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims 2
- 101100000858 Caenorhabditis elegans act-3 gene Proteins 0.000 claims 1
- 206010016654 Fibrosis Diseases 0.000 claims 1
- HEFNNWSXXWATRW-UHFFFAOYSA-N Ibuprofen Chemical compound CC(C)CC1=CC=C(C(C)C(O)=O)C=C1 HEFNNWSXXWATRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 101100005280 Neurospora crassa (strain ATCC 24698 / 74-OR23-1A / CBS 708.71 / DSM 1257 / FGSC 987) cat-3 gene Proteins 0.000 claims 1
- 108010006785 Taq Polymerase Proteins 0.000 claims 1
- 230000003321 amplification Effects 0.000 claims 1
- 238000000137 annealing Methods 0.000 claims 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 claims 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 claims 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 claims 1
- SUYVUBYJARFZHO-RRKCRQDMSA-N dATP Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@H]1C[C@H](O)[C@@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O)O1 SUYVUBYJARFZHO-RRKCRQDMSA-N 0.000 claims 1
- SUYVUBYJARFZHO-UHFFFAOYSA-N dATP Natural products C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1C1CC(O)C(COP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O)O1 SUYVUBYJARFZHO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- RGWHQCVHVJXOKC-SHYZEUOFSA-J dCTP(4-) Chemical compound O=C1N=C(N)C=CN1[C@@H]1O[C@H](COP([O-])(=O)OP([O-])(=O)OP([O-])([O-])=O)[C@@H](O)C1 RGWHQCVHVJXOKC-SHYZEUOFSA-J 0.000 claims 1
- HAAZLUGHYHWQIW-KVQBGUIXSA-N dGTP Chemical compound C1=NC=2C(=O)NC(N)=NC=2N1[C@H]1C[C@H](O)[C@@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O)O1 HAAZLUGHYHWQIW-KVQBGUIXSA-N 0.000 claims 1
- NHVNXKFIZYSCEB-XLPZGREQSA-N dTTP Chemical compound O=C1NC(=O)C(C)=CN1[C@@H]1O[C@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O)[C@@H](O)C1 NHVNXKFIZYSCEB-XLPZGREQSA-N 0.000 claims 1
- 238000004925 denaturation Methods 0.000 claims 1
- 230000036425 denaturation Effects 0.000 claims 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 claims 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims 1
- 230000004761 fibrosis Effects 0.000 claims 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 claims 1
- 230000001926 lymphatic effect Effects 0.000 claims 1
- 238000002844 melting Methods 0.000 claims 1
- 230000008018 melting Effects 0.000 claims 1
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 claims 1
- 244000045947 parasite Species 0.000 claims 1
- 230000007170 pathology Effects 0.000 claims 1
- 238000011533 pre-incubation Methods 0.000 claims 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims 1
- 238000009987 spinning Methods 0.000 claims 1
- 239000012085 test solution Substances 0.000 claims 1
- 230000007704 transition Effects 0.000 claims 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 abstract 4
- 238000009007 Diagnostic Kit Methods 0.000 abstract 2
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 abstract 2
- 210000000349 chromosome Anatomy 0.000 abstract 2
- 238000011109 contamination Methods 0.000 abstract 2
- 241000244203 Caenorhabditis elegans Species 0.000 abstract 1
- 210000003917 human chromosome Anatomy 0.000 abstract 1
Abstract
DC60 การประดิษฐ์นี้เป็นการประดิษฐ์ชุดไพรเมอร์ (primers) และไฮบริไดเซชั่นโพรบ (hybridization probes) สำหรับการตรวจวินิจฉัยพยาธิโรคเท้าช้าง วูเชอรีเรีย แบนครอฟไต (Wuchereria bancrofti) และบรูเกีย มาลาไย (Brugia malayi) ด้วยเทคนิค เรียลไทม์ พีซีอาร์ (real-time polymerase chain reaction; real-time PCR) และวิธีการใช้ชุดไพรเมอร์ และไฮบริไดเซชั่นโพรบดังกล่าว จากยุงพาหะหรือ เลือดผู้ป่วย โดยใช้ไพรเมอร์ 4 คู่ และไฮบริไดเซชั่นโพรบ 4 คู่ ซึ่งจำเพาะต่อลำดับพันธุกรรมของพยาธิตัว กลม วูเชอรีเรีย แบนครอฟไต บรูเกีย มาลาไย และตัวควบคุมภายใน ได้แก่ โครโมโซมของมนุษย์ (human genome) และโครโมโซมของยุง โดยมีวัตถุประสงค์หลักเพื่อพัฒนาใช้ไพรเมอร์และไฮบริไดเซชั่นโพรบ ใน การตรวจวินิจฉัยโรคพยาธิเท้าช้าง วูเชอรีเรีย แบนครอฟไต และบรูเกีย มาลาไย ที่มีความไว ความจำเพาะ และความถูกต้องแม่นยำสูง โดยใช้เวลาในการตรวจวินิจฉัยน้อย สามารถรายงานผลในเวลาอันรวดเร็ว โดยได้นำเทคนิคการเพิ่มขยายปริมาณสารพันธุกรรมโดยปฏิกิริยาลูกโซ่ชนิดเรียลไทม์มาใช้ จึงทำให้ชุด ตรวจวินิจฉัยนี้มีความไว ความจำเพาะ และความถูกต้องแม่นยำสูง โดยใช้เวลาในการตรวจวินิจฉัย ประมาณ 1 ชั่วโมง ทำให้สามารถรายงานผลได้ในเวลาอันรวดเร็ว และไม่มีปัญหาในการปนเปื้อน การประดิษฐ์นี้เป็นการประดิษฐ์ชุดไพรเมอร์ (Primers)และไฮบริดเซชั่นโพรบ (hybridization probes) สำหรับการตรวจวินิจฉัยพยาธิโรคเท้าช้าง วูเชอรีเรีย แบนครอฟไต (Wuchereria bancrofti) และบรูเกีย มาลาไย (Brugia malayi) ด้วยเทคนิค เรียลไทม์ พีซีอาร์ (real-time polymerase chain reaction; real-time PCR) และวิธีการใช้ชุดไพรเมอร์ และไฮบริไดเซชั่นโพรบดังกล่าว จากยุงพาหะหรือ เลือดผู้ป่วย โดยใช้ไพรเมอร์ 4 คู่ และไฮบริไดเซชั่นโพรบ 4 คู่ ซึ่งจำเพาะต่อลำดับพันธุกรรมของพยาธิตัว กลม วูเชอรีเรีย แบนครอฟไต บูรเกีย มาลาไย และตัวควบคุมภายใน ได้แก่ โครโมโซมของมนุษย์ (human genome) และโครโมโซมของยุง โดยมีวัตถุประสงค์หลักเพื่อพัฒนาใช้ไพรเมอร์และไฮบริไดเซชั่นโพรบ ใน การตรวจวินิจฉัยโรคพยาธิเท้าช้าง วูเชอรีเรีย แบนครอฟไต และบูรเกีย มาลาไย ที่มีความไว ความจำเพาะ และความถูกต้องแม่นยำสูง โดยใช้เวลาในการตรวจวินิจฉัยน้อย สามารถรายงานผลในเวลาอันรวดเร็ว โดยได้นำเทคนิคการเพิ่มขยายปริมาณสารพันธุกรรมโดยปฏิกิริยาลูกโซ่ชนิดเรียลไทม์มาใช้ จึงทำให้ชุด ตรวจวินิจฉัยนี้มีความไว ความจำเพาะ และความถูกต้องแม่นยำสูง โดยใช้เวลาในการตรวจวินิจฉัย ประมาณ 1 ชั่วโมง ทำให้สามารถรายงานผลได้ในเวลาอันรวดเร็ว และไม่มีปัญหาในการปนเปื้อน
Claims (3)
1.ชุดไพรเมอร์ (Primers) และไฮบริไดเซชั่นโพรบ (hybridization probes) สำหรับการตรวจวินิจฉัย พยาธิโรคเท้าช้าง วูเชอรีเรีย แบนครอฟไต (Wuchereria bancrofti) และบรูเกีย มาลาไย (Brugia malayi) ด้วยเทคนิค เรียลไทม์ พีซีอาร์ (real-time polymerase chain reaction; real-time PCR) ซึ่งประกอบด้วย -ชุดไพรเมอร์-ไฮบริไดเซชั่นโพรบ สำหรับพยาธิโรคเท้าช้าง วูเชอรีเรีย แบนครอฟไต มีลำดับเบสดังนี้ ไพรเมอร์ด้าน forward เป็น 5\' - cgt gat ggc atc aaa gta g -3\', ไพรเมอร์ ด้าน reverse เป็น 5\' - ccc tca ctt acc ata aga ca -3\', ไฮบริไดเซชั่นโพรบ ด้าน acceptor 5\' - aaa att gct aaa aat tcc att cat - 3\'-FL ไฮบริไดเซชั่นโพรบ ด้าน reporter 5\'- Red640 - gaa aat att aaa aaa aca att ccc tta c -3\' - ชุดไพรเมอร์-ไฮบริไดเซชั่นโพรบสำหรับพยาธิโรคเท้าช้าง บูรเกีย มาลาไย มีลำดับเบสดังนี้ ไพรเมอร์ด้าน forward เป็น 5\' - tca tta gac aag gat att ggt tc -3\' ไพรเมอร์ด้าน reverse เป็น 5\' - ttt aaa cta taa gac aac aca -3\' ไฮบริไดเซชั่นโพรบ ด้าน acceptor 5\' - aaa tta att gac acg tga a- 3\'-FL ไฮบริไดเซชั่นโพรบ ด้าน reporter 5\'- Red705- tgt acc agt gct cgt gta -3\'
2.ชุดไพรเมอร์ (primers) และไฮบริไดเซชั่นโพรบ (hybridization probes) สำหรับการตรวจวินิจฉัย พยาธิโรคเท้าช้าง วูเชอรีเรีย แบนครอฟไต (Wuchereria bancrofti) และบรูเกีย มาลาไย (Brugia malayi) ด้วยเทคนิค เรียบไทม์ พีซีอาร์ (real-time polymerase chain reactionว real-time PCR) ตามข้อถือสิทธิ 1 ที่ซึ่งมีขั้นตอนการใช้ ดังนี้ - ทำการสกัดสารพันธุกรรม (DNA) จากสิ่งส่งตรวจ (เลือดผู้ป่วยหรือยุงพาหะ) - การเตรียมน้ำยาทดสอบ (master mix) สำหรับการตรวจวินิจฉัยพายาธิโรคเท้าช้าง วูเชอรีเรีย แบ นครอฟไต และบูรูเกีย มาลาไย โดยใช้หลอดไมโครทิวป์ (micro tube) ปลอดเชื้อ แล้วเติมน้ำยาต่าง ๆ ได้แก่ ก.น้ำยาชุดไพรเมอร์ -ไฮบริไดบริไดเซชั่นโพรบของตัวควบคุมภายใน - กรณีสิ่งส่งตรวจคือเลือดผู้ป่วย จะใช้ชุดไพรเมอร์ -ไฮบริไดเซชั่นโพรบดังนี้ไพรเมอร์ ด้าน forward 5\'-gtg cga agg tag cat aat cac t -3\'และไพรเมอร์ ด้าน reverse 5\' - cgg ttt gaa ctc aga tca tgt a - 3\' ที่มีความเข้มข้น 10 ไมโครโมลาร์ปริมาตร 0.4 ไมโครลิตร ไฮบริไดเซชั่นโพรบ ด้าน acceptor 5\' - aag tta cct tag gga taa cag cgt aat -3\' -FL และไฮบริไดเซชั่นโพรบ ด้าน reporter 5\'- Red670 -tat tct aga gtc cat atc aac aat agg gtt - 3\' ที่มีความเข้มข้น 10 ไมโครโมลาร์ ปริมาตร 0.4 ไมโครลิตร และปริมาตร 0.8 ไมโครลิตร ตามลำดับ -กรณีสิ่งส่งตรวจคือยุงพาหะ จะใช้ชุดไพรเมอร์-ไฮบริไดเซชั่นโพรบดังนี้ ไพรเมอร์ ด้าน forward 5\'-aag tta cct tag gga taa cag cgt aat t -3\'- FL และไพรเมอร์ ด้าน reverse 5\' - cgg ttt gaa ctc aga tca tgt a -3\' ที่มีความเข้มข้น 10 ไมโครโมลาร์ปริมาตร 0.4 ไมโครลิตร ไฮบริไดเซชั่นโพ รบ ด้าน acceptor 5\' -aag tta cct tag gga taa cag cgt aat t- 3\' -FL และไฮบริไดเซชั่นโพรบ ด้าน reporter 5\' - Red610- ttt ttt aga gtt cat act gac aaa aaa ga-3\' ที่มีความเข้มข้น 10 ไมโครโมลาร์ ปริมาตร 0.4 ไมโครลิตร และปริมาตร 0.8 ไมโครลิตร ตามลำดับ ข. ชุดน้ำยาไพรเมอร์-ไฮบริไดเซชั่นโพรบของเชื้อ วูเชอรีเรีย แบนครอฟไต ซึ่งประกอบด้วย ไพรเมอร์พยาธิโรคเท้าช้าง วูเชอรีเรีย แบนครอฟไต ด้าน forward 5\' - cgt gat ggc atc aaa gta g - 3\' และไพรเมอร์พยาธิโรคเท้าช้าง วูเชอรีเรีย แบนครอฟไต ด้าน reverse 5\' - ccc tca ctt acc ata aga ca -3\' ที่มีความเข้มข้น 10 ไมโครโมลาร์ ปริมาตร 1.0 ไมโครลิตร ไฮบริไดเซชั่นโพรบพยาธิโรคเท้าช้าง วูเชอรี เรีย แบนครอฟไต ด้าน acceptor 5\' - aaa att gct aaa aat tcc att cat act -3\'-FL, ไฮบริไดเซชั่นโพรบ พยาธิโรคเท้าช้าง วูเชอรีเรีย แบนครอฟไต ด้าน reporter 5\'- Red640 - gaa aat att aaa aaa aca att ccc tta c - 3\' ที่มีความเข้มข้น 10 ไมโครโมลาร์ ปริมาตร 0.4 ไมโครลิตร และปริมาตร 0.8 ไมโครลิตร ตามลำดับ ค. น้ำยาชุดไพรเมอร์-ไฮบริไดเซชั่นโพรบของเชื้อ บรูเกีย มาลาไย ซึ่งประกอบด้วย ไพรเมอร์ พยาธิโรคเท้าช้าง บรูเกีย มาลาไย ด้าน forward 5\' - tca tta gac aag gat att ggt tc - 3\' และไพรเมอร์ พยาธิโรคเท้าช้าง บรูเกีย มาลาไย ด้าน reverse 5\'- ttt aaa cta taa aat gac aac aca -3\' ที่มีความเข้มข้น 10 ไมโครโมลาร์ ปริมาตร 1.0 ไมโครลิตร ไฮบริไดเซชั่นโพรบพยาธิโรคเท้าช้าง บรูเกีย มาลาไย ด้าน acceptor 5\' - aaa tta att gac tat gtt acg tga a - 3\'-FL และไฮบริไดเซชั่นโพรบพยาธิโรคเท้าช้าง บรูเกีย มาลาไย ด้าน reporter 5\' - Red705- tgt acc agt gct ggt cgt gta -3\' ที่มีความเข้มข้น 10 ไมโครโมลาร์ ปริมาตร 0.4 ไมโครลิตร และปริมาตร 0.8 ไมโครลิตร ตามลำดับ ง. พีซีอาร์รีแอกชั่น มิกซ์ (PCR reaction mix) ประกอบด้วยพีซีอาร์ บัฟเฟอร์ (PCR buffer), ดีเอ็นทีพี (dNTPs) ทั้ง 4 ชนิด ได้แก่ dATP, dCTP, dGTP และ dTTP และเอนไซม์ (enzyme) แท็ก อีเอ็นเอ โพลีเมอเรส (Taq DNA polymerase) ปริมาตร 2.0 ไมโครลิตร สารละลายแมกนีเซียมคลอไรด์ (Magnesiumchloride, MgCl2) ที่มีความเข้มข้น 25 มิลลิโมลาร์ ปริมาตร 3.2 ไมโครลิตร จ. สารพันธุกรรมจากสิ่งส่งตรวจ ปริมาตร 5 ไมโครลิตร ฉ. น้ำกลั่นบริสุทธิ์ที่ไม่มีอิออน (deionized distilled water) โดยมีความบริสุทธิ์ระดับพีซีอาร์ (PCR grade) ใช้สำหรับปรับปริมาตรน้ำยาทดสอบ (master mix) ให้ได้ปริมาตรสุดท้ายเป็น 20 ไมโครลิตร -ผสมส่วนประกอบต่างๆ ให้เข้ากันโดยเขย่าเบาๆ แล้วนำไปปั่นตกเพื่อให้น้ำยาทั้งหมดลงมาอยู่ บริเวณก้นหลอด จากนั้นดูดสารละลายทั้งหมดใส่ลงไปในหลอดแก้วคาปิลลารี่ (glass capillary) ปิดฝา หลอดแก้วคาปิลลารี่ให้แน่น แล้วนำไปปั่นตกโดยเครื่องปั่นเหวี่ยง(centrifuge) แล้วนำไปเข้าเครื่องเพิ่ม ปริมาณสารพันธุกรรมโดยปฏิกิริยาลูกโซ่ ชนิดเรียลไทม์
3. ชุดไพรเมอร์ (primers) และ ไฮบริไดเวชั่นโพรบ (hybridization probes)สำหรับการจรวจวินิจฉัย พยาธิโรคเท้าช้าง วูเชอรีเรีย แบนครอฟไต (Wuchereria bancrofti) และบรูเกีย มาลาไย (Brugia malayi) ด้วยเทคนิค เรียลไทม์ พีซีอาร์ (real-time polymerase chain reaction; real-time PCR) ตามข้อถือสิทธิ 1 หรือ 2 ที่ซึ่งมีโปรแกรมอุณหภูมิในการเพิ่มปริมาณสารพันธุกรรมโดยปฏิกิริยาลูกโซ่ ชนิดเรียลไทม์ ดังนี้ - ขั้นที่ 1 โปรแกรม ปรี-อินคูเบชั่น (Pre-incubation) ใช้อุณหภูมิ 95 องศาเซลเซียส นาน 10 นาที - ขั้นที่ 2 โปรแกรม แอมพลิฟิเคชั่น (Amplification) ประกอบด้วย 3 ขั้นตอน คือ ดีแนทเจอเรชั่น (Denaturation) ที่อุณหภูมิ 95 องศาเซลเซียส นาน 5 วินาที ขั้นตอนแอนเนียลลิง (Annealing) ที่อุณหภูมิ 45 องศาเซลเซียส นาน 15 วินาที ตรวจวัดสัญญาณฟลูออเรสเซนท์หนึ่งครั้ง และขั้นตอนเอ็กเทนชั่น (Extension) ที่อุณหภูมิ 72 องศาเซลเซียส นาน 25 วินาที ทำซ้ำทั้งหมด 45 รอบ (cycles) โดยกำหนดอัตรา การเปลี่ยนแปลงอุณหภูมิ (temperature transition) เป็น 20 องศาเซลเซียสต่อวินาที - ขั้นที่ 3 โปรแกรม เมลติ้งเคิฟ (Melting curve) ประกอบด้วย 3 ขั้นตอน คือ การเพิ่มอุณหภูมิ ถึง 95 องศาเซลเซียส นาน 10 วินาที แล้วลดอุณหภูมิถึง 55 องศาเซลเซียส นาน 30 วินาที โดยใช้อัตราการ เปลี่ยนแปลงอุณหภูมิ 20 องศาเซลเซียสต่อวินาที จากนั้นเพิ่มอุณหภูมิจนถึง 85 องศาเซลเซียส โดยใช้ อัตราการเปลี่ยนแปลงอุณหภูมิ 0.1 องศาเซลเซียสต่อวินาที และตรวจวัดสัญญาณฟลูออเรสเซนท์อย่าง ต่อเนื่อง - ขั้นที่ 4 โปรแกรมคลูลิง (Cooling) ลดอุณหภูมิลงจนถึง 40 องศาเซลเซียส เป็นเวลา 30 วินาที โดยใช้ อัตราการเปลี่ยนแปลงอุณหภูมิ 20 องศาเซลซียสต่อวินาที
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| TH6828A3 true TH6828A3 (th) | 2011-12-26 |
| TH6828C3 TH6828C3 (th) | 2011-12-26 |
Family
ID=
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US8986614B2 (en) | Self-contained biological assay apparatus, methods, and applications | |
| US12146197B2 (en) | Multiplex diagnostic assays for Lyme disease and other tick-borne diseases | |
| EP2773892A1 (en) | Polynucleotide sample preparation device | |
| CA2802563C (en) | Preparation of nucleic acids from different types of biological fluid samples | |
| CN102428189A (zh) | 反应筒内多重核酸序列的检测 | |
| KR101135829B1 (ko) | 유전자 증폭용 프라이머 세트, 그것을 포함하는 유전자 증폭용 시약 및 그 용도 | |
| EP3006938B1 (en) | Real time quantitative and qualitative analysis method for biosubstance | |
| EP2758552A1 (en) | Isolation and enrichment of nucleic acids on microchip | |
| CA2802550C (en) | Generic pcr | |
| JP5600880B2 (ja) | 改良された増幅試薬 | |
| TH6828A3 (th) | ชุดไพรเมอร์ (primers) และไฮบริไดเซชั่นโพรบ (hybridization probes) สำหรับการตรวจวินิจฉัยพยาธิโรคเท้าช้าง วูเชอรีเรีย แบนครอฟไต (Wuchereria bancrofti) และบรูเกีย มาลาไย (Brugia malayi) ด้วยเทคนิค เรียลไทม์ พีซีอาร์ (real-time polymerase chain reaction; real-time PCR) และวิธีการใช้ชุดไพรเมอร์ และไฮบริไดเซชั่นโพรบ ดังกล่าว | |
| TH6828C3 (th) | ชุดไพรเมอร์ (primers) และไฮบริไดเซชั่นโพรบ (hybridization probes) สำหรับการตรวจวินิจฉัยพยาธิโรคเท้าช้าง วูเชอรีเรีย แบนครอฟไต (Wuchereria bancrofti) และบรูเกีย มาลาไย (Brugia malayi) ด้วยเทคนิค เรียลไทม์ พีซีอาร์ (real-time polymerase chain reaction; real-time PCR) และวิธีการใช้ชุดไพรเมอร์ และไฮบริไดเซชั่นโพรบ ดังกล่าว | |
| McChlery et al. | The use of hydrolysis and hairpin probes in real-time PCR | |
| US20130273535A1 (en) | Ndm-1 polymerase chain reaction (pcr) assay | |
| CN105441584A (zh) | 一种乙型肝炎病毒耐药性和基因型的检测试剂盒与检测方法 | |
| US9512488B2 (en) | Method for multiplex-detecting chronic myelogenous leukemia gene using cleavable probe | |
| WO2011008942A2 (en) | Simultaneous quantitative multiple primer detection of clostridium difficile | |
| US9850529B2 (en) | Compositions and methods for nucleic acid based diagnostic assays for variable sequence targets | |
| JP2011062197A (ja) | 生体試料定量方法 | |
| Zhussupova | PCR–diagnostics | |
| JP4576489B2 (ja) | 新規ポリヌクレオチド、それを用いた深在性輸入真菌症原因菌ペニシリウム・マルネッフェイ（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍｍａｒｎｅｆｆｅｉ）の検出用マーカ、プローブ、プライマー、検出方法およびキット | |
| TH141094A (th) | ชุดตรวจวินิจฉัยพยาธิโรคเท้าช้าง และวิธีการตรวจใช้ชุดตรวจดังกล่าว | |
| AU2024213465A1 (en) | Compositions and methods for detecting stx nucleic acids | |
| JP2018000049A (ja) | 蛍光標識プローブ、核酸増幅反応用試薬、および核酸増幅反応方法 | |
| JP6343899B2 (ja) | 黄色ブドウ球菌の検出方法 |