TH58894B - แบคทีเรียที่ผลิตกรด แอล-กลูตามิก และวิธีการสำหรับการผลิตกรดแอล-กลูตามิก - Google Patents

Abstract

DC60 แบคที่เรียที่ผลิตกรด แอล-อะมิโนซึ่งอยู่ในสกุล Pantoea, Enterobacter, Klebsiella หรือ Erwinia โดยที่แบคที่เรียนั้นถูกดัดแปลงโดยการตัดต่อใหม่ของยีนเพื่อทำให้ยีน rpoS ไม่ทำหน้าที่ ได้ถูกเพราะเลี้ยงในตัวกลางเพื่อเป็นเหตุให้มีสารสะสมของกรด แอล-กลูตามิกในตัวกลาง และกรด แอล-กลูตามิกถูกเก็บมาจากตัวกลางนั้น แบคที่เรียที่ผลิตกรด แอล-อะมิโนซึ่งอยู่ในสกุล Pantoea, Klebsiella หรือ Erwinia โดยที่แบคที่เรียนั้นถูกดัดแปลงโดยการตัดต่อใหม่ของยีนเพื่อทำให้ยีน rpos ไม่ทำหน้าที่ ได้ถูกเพราะเลี้ยงในตัวกลางเพื่อเป็นเหตุให้มีสารสะสมของกรด แอล-กลูตามิกในตัวกลาง และกรด แอล-กลูตามิกถูกเก็บมาจากตัวกลางนั้น

Claims (9)

แก้ไข 05/01/2558

1. วิธีการของการผลิตกรด แอล-กลูตามิกที่ประกอบด้วย A) การเพาะเลี้ยงแบคทีเรียที่ผลิตกรดแอล-กลูตามิก ในตัวกลาง ซึ่งเป็นแบคทีเรียที่อยู่ในสกุล Pantoea, Enterorbacter, Serratia, Klebsiella และ Erwinia และ B) การเก็บกรดแอล-กลูตามิก จากตัวกลาง โดยที่แบคทีเรียนั้นถูกดัดแปลงโดยการตัดต่อใหม่ของยีนเพื่อทำให้ยีน rpoS ไม่ทำหน้าที่ โดยที่ ยีน rpoS ได้ถอดรหัสโปรตีนที่ถูกเลือกจากกลุ่มที่ประกอบด้วย: (A) โปรตีนที่ประกอบด้วยลำดับการเรียงตัวกรดอะมิโนของ SEQ ID NO:2 และ (B) โปรตีนที่ประกอบด้วยลำดับการเรียงตัวกรดอะมิโนของ SEQ ID NO: 2 แต่ซึ่งรวมถึงการ แทนที่, การลบออก, การแทรกเข้า หรือการเติม ของหนึ่ง ถึง 5 ส่วนที่เป็นกรดอะมิโน และซึ่งมีการทำ หน้าที่แฟคเตอร์ S ซิกมาของ RNA โพลีเมอเรส

2. วิธีการตามข้อถือสิทธิที่ 1 โดยที่แบคทีเรียถูกเพาะเลี้ยงที่ pH 3 ถึง 5

3. วิธีการตามข้อถือสิทธิที่ 1 โดยที่กรด แอล-กลูตามิก สะสมอยู่ร่วมกับการตกตะกอนใน ตัวกลางในระหว่างการเพาะเลี้ยง 4. วิธีตามข้อถือสิทธิที่ 1 โดยที่ ยีน rpoS ถูกทำให้ไม่ทำหน้าที่โดยวิธีการที่เลือกจากกลุ่มที่ ประกอบด้วยการลดการแสดงออกของยีน rpoS หรือ โดยการรบกวนยีน rpoS และสวนประกอบของ มัน 5. วิธีการตามข้อถือสิทธิที่ 1 โดยที่ยีน rpoS ถูกเลือกจากกลุ่มที่ประกอบด้วย: (a) DNA ที่ประกอบด้วยลำดับการเรียงตัวนิวคลีโอไทด์ของ SEQ ID NO : 1 และ (b) DNA ซึ่งสามารถจับคู่ผสมลำดับการเรียงตัวที่เข้าคู่กับลำดับการเรียงตัวนิวคลีโอไทด์ของ SEQ ID NO : 1 ภายใต้สภาวะที่เข้มงวดประกอบด้วยความเข้มข้นเกลือที่สอดคล้องกับ 60 องศา เซลเซียส, 1xSSC, 0.1% SDS และโดยที่ DNA ดังกล่าวได้ถอดรหัสโปรตีนที่มีการทำหน้าที่แฟคเตอร์ S ซิกมา ของ RNA โพลีเมอเรส 6. วิธีการตามข้อถือสิทธิที่ 1 โดยที่เป็นแบคทีเรียในสกุล Pantaea agglomerans หรือ Pantoea anantis ---------------------------------------- 1.วิธีการผลิตกรด แอล-กลูตามิกที่ประกอบด้วย A) การเพาะเลี้ยงแบคทีเรียที่ผลิตกรดแอล-กลูตามิก ในตัวกลาง ซึ่งเป็นแบคทีเรียที่อยู่ในสกุล Pantoea, Enterobacter, Serratia, Klebsiella และ Erwinia และ B) การเก็บกรดแอล-กลูตามิก จากตัวกลาง โดยที่แบคทีเรียนั้นถูกดัดแปลงโดยการตัดต่อใหม่ของยีนเพื่อทำให้ยีน rpoS ไม่ทำหน้าที่ โดยที่ยีน rpoS ได้ถอดรหัสโปรตีนที่ถูกเลือกจากกลุ่มที่ประกอบด้วย: (A) โปรตีนที่ประกอบด้วยลำดับการเรียงตัวกรดอะมิโนของ SEQ ID NO: 2 และ (B) โปรตีนที่ประกอบด้วยลำดับการเรียงตัวกรดอะมิโนของ SEQ ID NO: 2 แต่ซึ่งรวมถึงการ แทนที่, การลบออก, การแทรกเข้า หรือ การเติมของ 1 ถึง 5 ส่วนที่เป็นกรดอะมิโน และซึ่งมีการทำ หน้าที่แฟคเตอร์ S ชิกมาของ RNA โพลีเมอเรส 2.วิธีการตามข้อถือสิทธิที่ 1 โดยที่แบคทีเรียถูกเพาะเลี้ยงที่ pH 3 ถึง 5 3.วิธีการตามข้อถือสิทธิที่ 1 โดยที่กรด แอล-กลูตามิก สะสมอยู่ร่วมกับการตกตะกอนใน ตัวกลางในระหว่างการเพาะเลี้ยง 4.วิธีการตามข้อถือสิทธิที่ 1 โดยที่ยีน rpoS ถูกทำให้ไม่ทำหน้าที่โดยวิธีการที่เลือกจากกลุ่มที่ ประกอบด้วยการลดการแสดงออกของยีน rpoS หรือโดยการรบกวนยีน rpoS และส่วนประกอบของ มัน 5.วิธีการตามข้อถือสิทธิที่ 1 โดยที่ยีน rpoS ถูกเลือกจากกลุ่มที่ประกอบด้วย: (a) DNA ที่ประกอบด้วยลำดับการเรียงตัวนิวคลีโอไทด์ของ SEQ ID NO: 1 และ (b) DNA ซึ่งสามารถจับคู่ผสมลำดับการเรียงตัวที่เข้าคู่กับลำดับการเรียงตัวนิวคลีโอไทด์ของ SEQ ID NO: 1 ภายใต้สภาวะที่เข้มงวดประกอบด้วยความเข้มข้นเกลือที่สอดคล้องกับ 60 องศา เซลเซียส, 1xSSC, 0.1% SDS และโดยที่ DNA ดังกล่าวได้ถอดรหัสโปรตีนที่มีการทำหน้าที่แฟคเตอร์ S ซิกมา ของ RNA โพลีเมอเรส 6.วิธีการตามข้อถือสิทธิที่ 1 โดยที่เป็นแบคทีเรียในสกุล Pantoea agglomerans หรือ Pantoea ananatis

4. แบคที่เรียตามข้อถือสิทธิที่ 1 โดยที่ ยีน rpoS ถูกเลือกจากกลุ่มที่ประกอบด้วย: (a) DNA ที่ประกอบด้วยลำดับการเรียงตัวนิวคลีโอไทของ SEQ ID NO: 1 และ (b) DNA ซึ่งสามารถจับคู่ผสมลำดับการเรียงตัวที่เข้าคู่กับลำดับการเรียงตัวนิวคลีโอไทด์ของ SEQ ID NO: 1 หรือ ตัวติดตามที่สามารถถูกเตรียมขึ้นจากลำดับการเรียงตัวนิวคลีโอไทด์ ภายใต้ สภาวะเข้มงวด และดดยที่ DNA ดังกล่าวได้ถอดรหัสโปรตีนที่มีการทำหน้าที่แฟคเตอร์. Sซิกมา ของ RNA โพลีเมอเรส

5. วิธีของการผลิตกรด แอล-กลูตามิกที่ประกอบด้วยการเพาะเลี้ยงแบคที่เรียตามข้อหนึ่ง ข้อใดของข้อถือสิทธิที่ 1 ถึง 4 ในตัวกลาง และ การเก็บกรดแอล-กลูตามิก จากตัวกลางนั้น ข้อใดของข้อถือสิทธิที่ 1 ถึง 4 ในตัวกลาง และ การเก็บกรดแอล-กลูตามิก จากตัวกลาง

6. วิธีการตามข้อถือสิทธิที่ 5 โดยที่แบคที่เรียถูกเพาะเลี้ยงที่ PH 3 ถึง 5

7. วิธีการตามข้อถือสิทธิที่ 5 หรือ 6 โดยที่กรด แอล-กลูตามิก สะสมอยู่รวมกับการตกตะกอน ในตัวกลางในระหว่างการเพาะเลี้ยง

8. วิธีการสำหรับการปรับปรุงการเจริญเตอบโตของแบคทีเรียที่ผลิตกรด แอล-กลูตามิก ภายใต้ สภาวะที่เป็นกรด ที่ประกอบด้วยการทำยีน rpoS ไม่ทำหน้าที่ของจุลชียด้วยการตัดต่อใหม่ของยีน

9. วิธีการตามข้อถือสิทธิที่ 8 โดยที่จุลชีพนั้นอยู่ในสกุลที่ถูกเลือกจากกลุ่มที่ประกอบด้วย Pantoea, Enterobacter, klebsiella หรือ Erwinia