TH35877B - กระบวนการผลิตฮอร์โมนเกี่ยวกับการเจริญเติบโตของมนุษย์ (Human growth hormone) ในยีสต์ Pichia pastoris - Google Patents
กระบวนการผลิตฮอร์โมนเกี่ยวกับการเจริญเติบโตของมนุษย์ (Human growth hormone) ในยีสต์ Pichia pastorisInfo
- Publication number
- TH35877B TH35877B TH101002658A TH0101002658A TH35877B TH 35877 B TH35877 B TH 35877B TH 101002658 A TH101002658 A TH 101002658A TH 0101002658 A TH0101002658 A TH 0101002658A TH 35877 B TH35877 B TH 35877B
- Authority
- TH
- Thailand
- Prior art keywords
- hgh
- human growth
- yeast
- synthetic
- growth hormone
- Prior art date
Links
Abstract
DC60 (28/03/56) กระบวนการผลิตฮอร์โมนเกี่ยวกับการเจริญเติบโตของมนุษย์สังเคราะห์ที่ประกอบด้วยการเลี้ยง เชื้อและชักนำการผลิตโดยใช้เมทธานอล โดยให้ยีสต์ Pichia pastoris ที่ถูกดัดแปลงให้มีลำดับเบสที่ ควบคุมการสังเคราะห์ของฮอร์โมนเกี่ยวกับการเจริญเติบโต (Human growth hormone, hGH) เชื่อมต่อ อยู่กับจีโนม (Genome) ของยีสต์ เพื่อทำหน้าที่ผลิตโปรตีน hGH สังเคราะห์ ซึ่งลำดับเบสของ hGH สังเคราะห์จะเชื่อมต่อกับลำดับเบสที่ช่วยในการหลั่งสารออกนอกเซล (secretion signal) การปรับปรุงการ ผลิตโปรตีน hGH สังเคราะห์ใน Pichia pastoris ทำให้ได้ผลผลิตที่ไม่มีส่วนของ fMet ที่ส่วนปลายอะมิโน เมื่อใช้รักษาจะไม่เกิดการตอบสนองในทางลบ และยังได้ผลผลิตที่ถูกหลั่งออกนอกเซลทำให้ลดขั้นตอนใน กระบวนการทำให้บริสุทธิ์ลง ส่งผลให้ผลผลิตมีคุณภาพสูงขึ้น และสามารถผลิตได้ในปริมาณมากขึ้นด้วย โปรตีน hGH ที่สังเคราะห์ได้นี้มีขนาด 22 kDa และมีส่วนปลายอะมิโน (N-Terminus) เหมือนกับฮอร์โมน เกี่ยวกับการเจริญเติบโตของมนุษย์จึงน่าจะสามารถนำมาใช้ในการรักษาโรคที่จำเป็นต้องใช้โปรตีน hGH ได้ อย่างมีประสิทธิ์ภาพ กระบวนการผลิตฮอร์โมนเกี่ยวกับการเจริญเติบโตของมนุษย์สังเคราะห์ที่ประกอบด้วยการเลี้ยง เชื้อและชักนำการผลิตโดยใช้เมทธานอล โดยให้ยีสต์ Pichia pastoris ที่ถูกดัดแปลงให้มีลำดับเบสที่ ควบคุมการสังเคราะห์ของฮอร์โมนเกี่ยวกับการเจริญเติบโต (Human growth hormone, hGH) เชื่อมต่อ อยุ่กับจีโนม (Genome) ของยีสต์ เพื่อทำหน้าที่ผลิตโปรตีน hGH สังเคราะห์ ซึ่งลำดับเบสของ hGH สังเคราะห์จะเชื่อมต่อกับลำดับเบสที่ช่วยในการหลั่งสารออกนอกเซล (secretion signal) การปรับปรุงการ ผลิตโปรตีน hGH สังเคราะห์ใน Pichia pastoris ทำให้ได้ผลผลิตที่ไม่มีส่วนของ fMet ที่ส่วนปลายอะมิโน เมื่อใช้รักษาจะไม่เกิดการตอบสนองในทางลบ และยังได้ผลผลิตที่ถูกหลั่งออกนอกเซลทำให้ลดขั้นตอนใน กระบวนการทำให้บริสุทธิ์ลง ส่งผลให้ผลผลิตมีคุณภาพสูงขึ้น และสามารถผลิตได้ในปริมาณมากขึ้นด้วย โปรตีน hGH ที่สังเคราะห์ได้นี้มีขนาด 22 kDa และมีส่วนปลายอะมิโน (N-Terminus) เหมือนกับฮอร์โมน เกี่ยวกับการเจริญเติบโตของมนุษย์จึงน่าจะสามารถนำมาใช้ในการรักษาโรคที่จำเป็นต้องใช้โปรตีน hGH ได้ อย่างมีประสิทธิ์ภาพ
Claims (4)
1. กระบวนการผลิตฮอร์โมนเกี่ยวกับการเจริญเติบโตของมนุษย์ในยีสต์ Pichia pastoris ที่ประกอบด้วย การเลี้ยงยีสต์ที่มียีน hGH สังเคราะห์อยู่ในเซล การชักนำการผลิตฮอร์โมนเกี่ยวกับการเจริญเติบโตของ มนุษย์สังเคราะห์ การตกตะกอนฮอร์โมนเกี่ยวกับการเจริญเติบโตของมนุษย์สังเคราะห์ และการทำให้ บริสุทธิ์ ที่มีลักษณะเฉพาะคือ เลี้ยงยีสต์ที่มียีน hGH สังเคราะห์ดังแสดงในรูปที่ 1 อยู่อย่างน้อย 1 สำเนาในจีโนมในอาหารชักนำการผลิตที่มีสารเมทธานอลอยู่ 3% (v/v) ของปริมาณอาหาร เป็นเวลา 3 วัน โดยเติมสารเมทธานอลบริสุทธิ์ ทุกวันเพื่อให้มีความเข้มข้นสุดท้ายของสารเมทธานอลเป็น 3% ของ ปริมาณอาหารเลี้ยง แล้วจึงเก็บน้ำเลี้ยงซึ่งจะมีฮอร์โมนเกี่ยวกับการเจริญเติบโตของมนุษย์สังเคราะห์อยู่
2. ลำดับนิวคลีโอไทด์ hGH สังเคราะห์ที่มีการใช้โคดอนที่เหมาะสมกับการสังเคราะห์โปรตีนในยีสต์ ดัง แสดงในรูปที่ 1 ที่มีลักษณะเฉพาะคือ ลำดับกรดอะมิโน 20 อันดับแรกของ hGH สังเคราะห์ ที่ได้ถูก ออกแบบให้มีการใช้โคดอนที่เหมาะสมกับยีสต์โดยเฉพาะ
3. พลาสมิดที่ใช้ในการแสดงออกของยีน hGH ในยีสต์ ดังแสดงในรูปที่ 2 ที่ประกอบด้วยลำดับเบส สังเคราะห์ดังข้อถือสิทธิที่ 2 เชื่อมต่อเข้ากับพลาสมิดสำหรับการแสดงออกของยีสต์ Pichia pastoris
4. ยีสต์ P. pastoris ที่ถูกดัดแปลงให้ประกอบด้วยพลาสมิดจากข้อถือสิทธิที่ 3 ซึ่งเชื่อมต่อกับจีโนมของ ยีสต์ ที่มีลักษณะเฉพาะคือ สามารถผลิตฮอร์โมนเกี่ยวกับการเจริญเติบโตของมนุษย์ และถูกหลั่งออก นอกเซล ที่มีขนาด 22 kDa และมีส่วนปลายอะมิโน เหมือนกับฮอร์โมนเกี่ยวกับการเจริญเติบโตของ มนุษย์
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| TH66555A TH66555A (th) | 2005-01-21 |
| TH35877B true TH35877B (th) | 2013-06-13 |
Family
ID=
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| EP0156355B2 (en) | Method of improving the yield of heterologous protein produced by cultivating recombinant bacteria | |
| CN1069346C (zh) | 用解脂亚罗威阿酵母转化株表达和分泌异源蛋白质 | |
| AU618612B2 (en) | Insulin precursors | |
| DE3785864T2 (de) | Verfahren zur Herstellung von menschlichem Epidermalwachstumsfaktor und dessen Analogen. | |
| CA2385857C (en) | C peptide for improved preparation of insulin and insulin analogs | |
| CN1099799A (zh) | 制备和纯化α-干扰素的方法 | |
| US20100167342A1 (en) | Method of producing biologically active polypeptide having insulinotropic activity | |
| HU9904666A (en) | Therapy for alpa-galactosidase a deficiency | |
| CN1079780A (zh) | 生产重组人体乳铁蛋白 | |
| ATE77104T1 (de) | Menge und verfahren zur herstellung rekombinierter erzeugnisse in grosser ausbeute. | |
| CN117126754A (zh) | 重组i型胶原蛋白毕赤酵母工程菌及其构建方法与应用 | |
| NZ510385A (en) | E. coli enterotoxin II signal peptide and a microorganism expressing a fusion protein of the MST peptide and a heterologous protein, such as human growth hormone | |
| EP0150572A1 (en) | Microbial expression of type 1 transforming growth factor, polypeptide analogs thereof and hybrid EGF/TGF polypeptides | |
| CN101450961B (zh) | 人工合成的猪干扰素基因及制备猪干扰素的方法 | |
| EP0129073B1 (en) | Hybrid dna synthesis of mature growth hormone releasing factor | |
| CN1105727C (zh) | 重组人血清白蛋白的生产方法 | |
| JPH0671432B2 (ja) | ヒト血清アルブミンの製造方法 | |
| EP1313848A1 (en) | Yeast transformant producing recombinant human parathyroid hormone and method for producing the hormone | |
| US8691530B2 (en) | Process for obtaining aspart insulin using a Pichia pastoris yeast strain | |
| TH66555A (th) | กระบวนการผลิตฮอร์โมนเกี่ยวกับการเจริญเติบโตของมนุษย์ (Human growth hormone) ในยีสต์ Pichia pastoris | |
| CN102952817B (zh) | 一种采用温度诱导生产重组人表皮生长因子的方法 | |
| DE3783305T2 (de) | Expressionsvektor fuer menschlichen insulinaehnlichen wachstumsfaktor-i. | |
| EP1169461B1 (de) | Verwendung von pankreatischer Procarboxypeptidase B zur Herstellung von Insulin | |
| IL167121A (en) | Method for the preparation of growth hormone and antagonist thereof having lower levels of isoform impurities thereof | |
| CN1049249C (zh) | 胰岛素前体基因在酵母中的分泌表达和人胰岛素的制备 |