TH66555A - กระบวนการผลิตฮอร์โมนเกี่ยวกับการเจริญเติบโตของมนุษย์ (Human growth hormone) ในยีสต์ Pichia pastoris - Google Patents
กระบวนการผลิตฮอร์โมนเกี่ยวกับการเจริญเติบโตของมนุษย์ (Human growth hormone) ในยีสต์ Pichia pastorisInfo
- Publication number
- TH66555A TH66555A TH101002658A TH0101002658A TH66555A TH 66555 A TH66555 A TH 66555A TH 101002658 A TH101002658 A TH 101002658A TH 0101002658 A TH0101002658 A TH 0101002658A TH 66555 A TH66555 A TH 66555A
- Authority
- TH
- Thailand
- Prior art keywords
- yeast
- hgh
- human growth
- synthetic
- pichia pastoris
- Prior art date
Links
Abstract
DC60 (28/03/56) กระบวนการผลิตฮอร์โมนเกี่ยวกับการเจริญเติบโตของมนุษย์สังเคราะห์ที่ประกอบด้วยการเลี้ยง เชื้อและชักนำการผลิตโดยใช้เมทธานอล โดยให้ยีสต์ Pichia pastoris ที่ถูกดัดแปลงให้มีลำดับเบสที่ ควบคุมการสังเคราะห์ของฮอร์โมนเกี่ยวกับการเจริญเติบโต (Human growth hormone, hGH) เชื่อมต่อ อยู่กับจีโนม (Genome) ของยีสต์ เพื่อทำหน้าที่ผลิตโปรตีน hGH สังเคราะห์ ซึ่งลำดับเบสของ hGH สังเคราะห์จะเชื่อมต่อกับลำดับเบสที่ช่วยในการหลั่งสารออกนอกเซล (secretion signal) การปรับปรุงการ ผลิตโปรตีน hGH สังเคราะห์ใน Pichia pastoris ทำให้ได้ผลผลิตที่ไม่มีส่วนของ fMet ที่ส่วนปลายอะมิโน เมื่อใช้รักษาจะไม่เกิดการตอบสนองในทางลบ และยังได้ผลผลิตที่ถูกหลั่งออกนอกเซลทำให้ลดขั้นตอนใน กระบวนการทำให้บริสุทธิ์ลง ส่งผลให้ผลผลิตมีคุณภาพสูงขึ้น และสามารถผลิตได้ในปริมาณมากขึ้นด้วย โปรตีน hGH ที่สังเคราะห์ได้นี้มีขนาด 22 kDa และมีส่วนปลายอะมิโน (N-Terminus) เหมือนกับฮอร์โมน เกี่ยวกับการเจริญเติบโตของมนุษย์จึงน่าจะสามารถนำมาใช้ในการรักษาโรคที่จำเป็นต้องใช้โปรตีน hGH ได้ อย่างมีประสิทธิ์ภาพ กระบวนการผลิตฮอร์โมนเกี่ยวกับการเจริญเติบโตของมนุษย์สังเคราะห์ที่ประกอบด้วยการเลี้ยง เชื้อและชักนำการผลิตโดยใช้เมทธานอล โดยให้ยีสต์ Pichia pastoris ที่ถูกดัดแปลงให้มีลำดับเบสที่ ควบคุมการสังเคราะห์ของฮอร์โมนเกี่ยวกับการเจริญเติบโต (Human growth hormone, hGH) เชื่อมต่อ อยุ่กับจีโนม (Genome) ของยีสต์ เพื่อทำหน้าที่ผลิตโปรตีน hGH สังเคราะห์ ซึ่งลำดับเบสของ hGH สังเคราะห์จะเชื่อมต่อกับลำดับเบสที่ช่วยในการหลั่งสารออกนอกเซล (secretion signal) การปรับปรุงการ ผลิตโปรตีน hGH สังเคราะห์ใน Pichia pastoris ทำให้ได้ผลผลิตที่ไม่มีส่วนของ fMet ที่ส่วนปลายอะมิโน เมื่อใช้รักษาจะไม่เกิดการตอบสนองในทางลบ และยังได้ผลผลิตที่ถูกหลั่งออกนอกเซลทำให้ลดขั้นตอนใน กระบวนการทำให้บริสุทธิ์ลง ส่งผลให้ผลผลิตมีคุณภาพสูงขึ้น และสามารถผลิตได้ในปริมาณมากขึ้นด้วย โปรตีน hGH ที่สังเคราะห์ได้นี้มีขนาด 22 kDa และมีส่วนปลายอะมิโน (N-Terminus) เหมือนกับฮอร์โมน เกี่ยวกับการเจริญเติบโตของมนุษย์จึงน่าจะสามารถนำมาใช้ในการรักษาโรคที่จำเป็นต้องใช้โปรตีน hGH ได้ อย่างมีประสิทธิ์ภาพ
Claims (4)
1. กระบวนการผลิตฮอร์โมนเกี่ยวกับการเจริญเติบโตของมนุษย์ในยีสต์ Pichia pastoris ที่ประกอบด้วย การเลี้ยงยีสต์ที่มียีน hGH สังเคราะห์อยู่ในเซล การชักนำการผลิตฮอร์โมนเกี่ยวกับการเจริญเติบโตของ มนุษย์สังเคราะห์ การตกตะกอนฮอร์โมนเกี่ยวกับการเจริญเติบโตของมนุษย์สังเคราะห์ และการทำให้ บริสุทธิ์ ที่มีลักษณะเฉพาะคือ เลี้ยงยีสต์ที่มียีน hGH สังเคราะห์ดังแสดงในรูปที่ 1 อยู่อย่างน้อย 1 สำเนาในจีโนมในอาหารชักนำการผลิตที่มีสารเมทธานอลอยู่ 3% (v/v) ของปริมาณอาหาร เป็นเวลา 3 วัน โดยเติมสารเมทธานอลบริสุทธิ์ ทุกวันเพื่อให้มีความเข้มข้นสุดท้ายของสารเมทธานอลเป็น 3% ของ ปริมาณอาหารเลี้ยง แล้วจึงเก็บน้ำเลี้ยงซึ่งจะมีฮอร์โมนเกี่ยวกับการเจริญเติบโตของมนุษย์สังเคราะห์อยู่
2. ลำดับนิวคลีโอไทด์ hGH สังเคราะห์ที่มีการใช้โคดอนที่เหมาะสมกับการสังเคราะห์โปรตีนในยีสต์ ดัง แสดงในรูปที่ 1 ที่มีลักษณะเฉพาะคือ ลำดับกรดอะมิโน 20 อันดับแรกของ hGH สังเคราะห์ ที่ได้ถูก ออกแบบให้มีการใช้โคดอนที่เหมาะสมกับยีสต์โดยเฉพาะ
3. พลาสมิดที่ใช้ในการแสดงออกของยีน hGH ในยีสต์ ดังแสดงในรูปที่ 2 ที่ประกอบด้วยลำดับเบส สังเคราะห์ดังข้อถือสิทธิที่ 2 เชื่อมต่อเข้ากับพลาสมิดสำหรับการแสดงออกของยีสต์ Pichia pastoris
4. ยีสต์ P. pastoris ที่ถูกดัดแปลงให้ประกอบด้วยพลาสมิดจากข้อถือสิทธิที่ 3 ซึ่งเชื่อมต่อกับจีโนมของ ยีสต์ ที่มีลักษณะเฉพาะคือ สามารถผลิตฮอร์โมนเกี่ยวกับการเจริญเติบโตของมนุษย์ และถูกหลั่งออก นอกเซล ที่มีขนาด 22 kDa และมีส่วนปลายอะมิโน เหมือนกับฮอร์โมนเกี่ยวกับการเจริญเติบโตของ มนุษย์
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| TH66555A true TH66555A (th) | 2005-01-21 |
| TH35877B TH35877B (th) | 2013-06-13 |
Family
ID=
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| DE19605657B4 (de) | Menschliches Proinsulinderivat, Kodierende DNA, DNA enthaltender Expressionsvektor, mit diesem transformierter Mikroorganismus und Verwendung dieses menschlichen Proinsulinderivats | |
| DE69021335T2 (de) | Wachstumshormonfusionsproteine. | |
| US4656132A (en) | Method of improving the yield of heterologous protein produced by cultivating recombinant bacteria | |
| HU9904666A (en) | Therapy for alpa-galactosidase a deficiency | |
| CN1250055A (zh) | 生产重组人体乳铁蛋白 | |
| CN1099799A (zh) | 制备和纯化α-干扰素的方法 | |
| DE69434909T2 (de) | Herstellung von humaninsulin | |
| DD210306A5 (de) | Verfahren zur herstellung eines rekombinanten dna-klonierungsvektors zur expression von exogenem protein | |
| CN104561020A (zh) | 一种重组人生长激素的编码基因及其应用 | |
| HK1077074A1 (en) | Method for the preparation of growth hormone and antagonist thereof having lower levels of isoform impurities thereof | |
| CN1793375A (zh) | 重组人神经生长因子的酵母表达系统及制备重组人神经生长因子的方法 | |
| CN101450961B (zh) | 人工合成的猪干扰素基因及制备猪干扰素的方法 | |
| EP0129073B1 (en) | Hybrid dna synthesis of mature growth hormone releasing factor | |
| CN107446039A (zh) | 一种人胰岛素类似物前体及其制备方法 | |
| JPH07170984A (ja) | 新規アミノ酸配列及び該アミノ酸配列をコード するｄｎａを保有する発現ベクターを 組み込んだバチルス・ブレビスを用いる 有用物質の製造法 | |
| CN107988190A (zh) | 一种酸性蛋白酶及其编码基因和应用 | |
| US20110117600A1 (en) | Process for obtaining aspart insulin using a pichia pastoris yeast strain | |
| TH66555A (th) | กระบวนการผลิตฮอร์โมนเกี่ยวกับการเจริญเติบโตของมนุษย์ (Human growth hormone) ในยีสต์ Pichia pastoris | |
| TH35877B (th) | กระบวนการผลิตฮอร์โมนเกี่ยวกับการเจริญเติบโตของมนุษย์ (Human growth hormone) ในยีสต์ Pichia pastoris | |
| DE3783305T2 (de) | Expressionsvektor fuer menschlichen insulinaehnlichen wachstumsfaktor-i. | |
| CN1055952A (zh) | 用链霉菌制备外源蛋白的方法 | |
| MX9605082A (es) | Levaduras metilotroficas modificadas geneticamente para la produccion y secrecion de hormona de crecimiento humano. | |
| EP1169461B1 (de) | Verwendung von pankreatischer Procarboxypeptidase B zur Herstellung von Insulin | |
| CA2136564C (en) | Process for producing human serum albumin | |
| CN1049249C (zh) | 胰岛素前体基因在酵母中的分泌表达和人胰岛素的制备 |