TH35877B - Human growth hormone production process in yeast Pichia pastoris - Google Patents

Human growth hormone production process in yeast Pichia pastoris

Info

Publication number
TH35877B
TH35877B TH101002658A TH0101002658A TH35877B TH 35877 B TH35877 B TH 35877B TH 101002658 A TH101002658 A TH 101002658A TH 0101002658 A TH0101002658 A TH 0101002658A TH 35877 B TH35877 B TH 35877B
Authority
TH
Thailand
Prior art keywords
hgh
human growth
yeast
synthetic
growth hormone
Prior art date
Application number
TH101002658A
Other languages
Thai (th)
Other versions
TH66555A (en
Inventor
เอื้อวิไลจิตร นางสาวลิลี่
สุประสงค์สิน นายจิตติวัฒน์
พันธุ์ยิ้ม นายสกล
รอยตระกูล นายสิทธิรักษ์
Original Assignee
นางสาวอรุณศรี ศรีธนะอิทธิพล
นางสาวอรุณศรี ศรีธนะอิทธิพล นายชาญชัย นีรพัฒนกุล
นายชาญชัย นีรพัฒนกุล
สำนักงานพัฒนาวิทยาศาสตร์และเทคโนโลยีแห่งชาติ
Filing date
Publication date
Application filed by นางสาวอรุณศรี ศรีธนะอิทธิพล, นางสาวอรุณศรี ศรีธนะอิทธิพล นายชาญชัย นีรพัฒนกุล, นายชาญชัย นีรพัฒนกุล, สำนักงานพัฒนาวิทยาศาสตร์และเทคโนโลยีแห่งชาติ filed Critical นางสาวอรุณศรี ศรีธนะอิทธิพล
Publication of TH66555A publication Critical patent/TH66555A/en
Publication of TH35877B publication Critical patent/TH35877B/en

Links

Abstract

DC60 (28/03/56) กระบวนการผลิตฮอร์โมนเกี่ยวกับการเจริญเติบโตของมนุษย์สังเคราะห์ที่ประกอบด้วยการเลี้ยง เชื้อและชักนำการผลิตโดยใช้เมทธานอล โดยให้ยีสต์ Pichia pastoris ที่ถูกดัดแปลงให้มีลำดับเบสที่ ควบคุมการสังเคราะห์ของฮอร์โมนเกี่ยวกับการเจริญเติบโต (Human growth hormone, hGH) เชื่อมต่อ อยู่กับจีโนม (Genome) ของยีสต์ เพื่อทำหน้าที่ผลิตโปรตีน hGH สังเคราะห์ ซึ่งลำดับเบสของ hGH สังเคราะห์จะเชื่อมต่อกับลำดับเบสที่ช่วยในการหลั่งสารออกนอกเซล (secretion signal) การปรับปรุงการ ผลิตโปรตีน hGH สังเคราะห์ใน Pichia pastoris ทำให้ได้ผลผลิตที่ไม่มีส่วนของ fMet ที่ส่วนปลายอะมิโน เมื่อใช้รักษาจะไม่เกิดการตอบสนองในทางลบ และยังได้ผลผลิตที่ถูกหลั่งออกนอกเซลทำให้ลดขั้นตอนใน กระบวนการทำให้บริสุทธิ์ลง ส่งผลให้ผลผลิตมีคุณภาพสูงขึ้น และสามารถผลิตได้ในปริมาณมากขึ้นด้วย โปรตีน hGH ที่สังเคราะห์ได้นี้มีขนาด 22 kDa และมีส่วนปลายอะมิโน (N-Terminus) เหมือนกับฮอร์โมน เกี่ยวกับการเจริญเติบโตของมนุษย์จึงน่าจะสามารถนำมาใช้ในการรักษาโรคที่จำเป็นต้องใช้โปรตีน hGH ได้ อย่างมีประสิทธิ์ภาพ กระบวนการผลิตฮอร์โมนเกี่ยวกับการเจริญเติบโตของมนุษย์สังเคราะห์ที่ประกอบด้วยการเลี้ยง เชื้อและชักนำการผลิตโดยใช้เมทธานอล โดยให้ยีสต์ Pichia pastoris ที่ถูกดัดแปลงให้มีลำดับเบสที่ ควบคุมการสังเคราะห์ของฮอร์โมนเกี่ยวกับการเจริญเติบโต (Human growth hormone, hGH) เชื่อมต่อ อยุ่กับจีโนม (Genome) ของยีสต์ เพื่อทำหน้าที่ผลิตโปรตีน hGH สังเคราะห์ ซึ่งลำดับเบสของ hGH สังเคราะห์จะเชื่อมต่อกับลำดับเบสที่ช่วยในการหลั่งสารออกนอกเซล (secretion signal) การปรับปรุงการ ผลิตโปรตีน hGH สังเคราะห์ใน Pichia pastoris ทำให้ได้ผลผลิตที่ไม่มีส่วนของ fMet ที่ส่วนปลายอะมิโน เมื่อใช้รักษาจะไม่เกิดการตอบสนองในทางลบ และยังได้ผลผลิตที่ถูกหลั่งออกนอกเซลทำให้ลดขั้นตอนใน กระบวนการทำให้บริสุทธิ์ลง ส่งผลให้ผลผลิตมีคุณภาพสูงขึ้น และสามารถผลิตได้ในปริมาณมากขึ้นด้วย โปรตีน hGH ที่สังเคราะห์ได้นี้มีขนาด 22 kDa และมีส่วนปลายอะมิโน (N-Terminus) เหมือนกับฮอร์โมน เกี่ยวกับการเจริญเติบโตของมนุษย์จึงน่าจะสามารถนำมาใช้ในการรักษาโรคที่จำเป็นต้องใช้โปรตีน hGH ได้ อย่างมีประสิทธิ์ภาพDC60 (March 28, 2013) The process of producing synthetic human growth hormone involves culturing and inducing production using methanol. The yeast Pichia pastoris, modified to have a base sequence controlling the synthesis of human growth hormone (hGH), is linked to the yeast genome to produce synthetic hGH protein. This synthetic hGH base sequence is linked to a base sequence that aids in secretion (secretion signaling). Improving hGH production in Pichia pastoris results in a product without the fMet component at the amino terminus, preventing negative responses when used for treatment. Furthermore, the product is secreted, reducing the purification process, resulting in higher quality and higher production quantities. This synthesized hGH protein is 22 kDa in size and has the same N-terminus as human growth hormone, making it potentially suitable for effective treatment of diseases requiring hGH. The process of producing synthetic human growth hormone involves culturing... The production of hGH is induced using methanol by inoculating the yeast Pichia pastoris, which has been modified to have a base sequence controlling the synthesis of human growth hormone (hGH). This sequence is linked to the yeast genome to produce synthetic hGH protein. The base sequence of synthetic hGH is linked to the base sequence that controls the secretion signal. Modification of hGH production in Pichia pastoris results in a product without the fMet component at the amino terminus, thus preventing negative responses when used for treatment. Furthermore, the product is secreted, reducing the purification process, resulting in higher quality and higher production quantities. This synthesized hGH protein is 22 kDa in size and has an N-terminus similar to human growth hormone, making it potentially suitable for effective treatment of diseases requiring hGH.

Claims (4)

1. กระบวนการผลิตฮอร์โมนเกี่ยวกับการเจริญเติบโตของมนุษย์ในยีสต์ Pichia pastoris ที่ประกอบด้วย การเลี้ยงยีสต์ที่มียีน hGH สังเคราะห์อยู่ในเซล การชักนำการผลิตฮอร์โมนเกี่ยวกับการเจริญเติบโตของ มนุษย์สังเคราะห์ การตกตะกอนฮอร์โมนเกี่ยวกับการเจริญเติบโตของมนุษย์สังเคราะห์ และการทำให้ บริสุทธิ์ ที่มีลักษณะเฉพาะคือ เลี้ยงยีสต์ที่มียีน hGH สังเคราะห์ดังแสดงในรูปที่ 1 อยู่อย่างน้อย 1 สำเนาในจีโนมในอาหารชักนำการผลิตที่มีสารเมทธานอลอยู่ 3% (v/v) ของปริมาณอาหาร เป็นเวลา 3 วัน โดยเติมสารเมทธานอลบริสุทธิ์ ทุกวันเพื่อให้มีความเข้มข้นสุดท้ายของสารเมทธานอลเป็น 3% ของ ปริมาณอาหารเลี้ยง แล้วจึงเก็บน้ำเลี้ยงซึ่งจะมีฮอร์โมนเกี่ยวกับการเจริญเติบโตของมนุษย์สังเคราะห์อยู่1. The human growth hormone production process in the yeast Pichia pastoris containing Yeast cultivation with hGH gene synthesized in cells Induction of hormone production on the growth of Synthetic human The characteristic synthetic human growth hormone precipitation and purification are At least one copy of the yeast containing the synthetic hGH gene shown in Figure 1 was fed in the genome-inducing diet containing 3% (v / v) of methanol for 3 days. By adding pure methanol Every day, the final concentration of methanol is 3% of the feed amount. It then stores the vitreous, which contains synthetic human growth hormones. 2. ลำดับนิวคลีโอไทด์ hGH สังเคราะห์ที่มีการใช้โคดอนที่เหมาะสมกับการสังเคราะห์โปรตีนในยีสต์ ดัง แสดงในรูปที่ 1 ที่มีลักษณะเฉพาะคือ ลำดับกรดอะมิโน 20 อันดับแรกของ hGH สังเคราะห์ ที่ได้ถูก ออกแบบให้มีการใช้โคดอนที่เหมาะสมกับยีสต์โดยเฉพาะ2. A synthetic hGH nucleotide sequence with the use of codon suitable for protein synthesis in yeast is shown in Figure 1. The top 20 amino acid sequences of synthetic hGH have been designed specifically for yeast-specific codon use. 3. พลาสมิดที่ใช้ในการแสดงออกของยีน hGH ในยีสต์ ดังแสดงในรูปที่ 2 ที่ประกอบด้วยลำดับเบส สังเคราะห์ดังข้อถือสิทธิที่ 2 เชื่อมต่อเข้ากับพลาสมิดสำหรับการแสดงออกของยีสต์ Pichia pastoris3. Plasmid used to express the hGH gene in yeast as shown in Figure 2 containing the baseline. Synthesized as claim 2, connected to the plasmid for the expression of yeast Pichia pastoris. 4. ยีสต์ P. pastoris ที่ถูกดัดแปลงให้ประกอบด้วยพลาสมิดจากข้อถือสิทธิที่ 3 ซึ่งเชื่อมต่อกับจีโนมของ ยีสต์ ที่มีลักษณะเฉพาะคือ สามารถผลิตฮอร์โมนเกี่ยวกับการเจริญเติบโตของมนุษย์ และถูกหลั่งออก นอกเซล ที่มีขนาด 22 kDa และมีส่วนปลายอะมิโน เหมือนกับฮอร์โมนเกี่ยวกับการเจริญเติบโตของ มนุษย์4. Yeast P. pastoris, modified to contain plasmids from claim 3, is linked to the unique yeast genome: Can produce hormones related to human growth And is secreted outside the 22 kDa cell with amino endings. It's like human growth hormones.
TH101002658A 2001-07-04 Human growth hormone production process in yeast Pichia pastoris TH35877B (en)

Publications (2)

Publication Number Publication Date
TH66555A TH66555A (en) 2005-01-21
TH35877B true TH35877B (en) 2013-06-13

Family

ID=

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EP0156355B2 (en) Method of improving the yield of heterologous protein produced by cultivating recombinant bacteria
CN1069346C (en) Expression and secretion of hereologous proteins by yarrowia lipolytica transformants
AU618612B2 (en) Insulin precursors
DE3785864T2 (en) Process for the preparation of human epidermal growth factor and its analogs.
CA2385857C (en) C peptide for improved preparation of insulin and insulin analogs
CN1099799A (en) Method for preparing and purifying alpha-interferon
US20100167342A1 (en) Method of producing biologically active polypeptide having insulinotropic activity
HU9904666A (en) Therapy for alpa-galactosidase a deficiency
CN1079780A (en) Production of recombinant human lactoferrin
ATE77104T1 (en) QUANTITY AND METHOD FOR MAKING HIGH YIELD RECOMBINATION PRODUCTS.
CN117126754A (en) Recombinant type I collagen Pichia pastoris engineering strain and its construction method and application
NZ510385A (en) E. coli enterotoxin II signal peptide and a microorganism expressing a fusion protein of the MST peptide and a heterologous protein, such as human growth hormone
EP0150572A1 (en) Microbial expression of type 1 transforming growth factor, polypeptide analogs thereof and hybrid EGF/TGF polypeptides
CN101450961B (en) Artificial synthetic porcine interferon and method for preparing porcine interferon
EP0129073B1 (en) Hybrid dna synthesis of mature growth hormone releasing factor
CN1105727C (en) Production method of recombinant human serum albumin
JPH0671432B2 (en) Method for producing human serum albumin
EP1313848A1 (en) Yeast transformant producing recombinant human parathyroid hormone and method for producing the hormone
US8691530B2 (en) Process for obtaining aspart insulin using a Pichia pastoris yeast strain
TH66555A (en) Human growth hormone production process in yeast Pichia pastoris
CN102952817B (en) Method for production of recombinant human epidermal growth factor by temperature induction
DE3783305T2 (en) EXPRESSION VECTOR FOR HUMAN INSULINE-LIKE GROWTH FACTOR-I.
EP1169461B1 (en) Use of pancreatic procarboxypeptidase B for the production of insulin
IL167121A (en) Method for the preparation of growth hormone and antagonist thereof having lower levels of isoform impurities thereof
CN1049249C (en) Secretion expression of precursor gene of insulin in yeast and preparing process for human insulin