TH22287Y - กรรมวิธีการผลิตสารสกัดจากการหมักมันสำปะหลังด้วยเชื้อราเพื่อเป็นส่วนผสมในผลิตภัณฑ์เครื่องสำอาง - Google Patents

Abstract

กรรมวิธีการผลิตสารสกัดจากการหมักมันสำปะหลังด้วยเชื้อราแอสเปอร์จิลัสเพื่อเป็นส่วนผสมใน ผลิตภัณฑ์เครื่องสำอาง โดยการใช้เชื้อราแอสเปอร์จิลัส หรือเชื้อราสายพันธุ์อื่นที่สามารถผลิตกรดโคจิก โดยใช้มันสำปะหลังสด มันเส้น หรือกากมันสำปะหลัง ที่ผ่านการปรับความชื้นและระดับความเป็นกรด- ด่าง (pH) ซึ่งเชื้อราจะผลิตสารสำคัญในระหว่างการเจริญโดยใช้สารอาหารจากมันสำปะหลัง จากนั้นใช้ตัว ทำละลายเพื่อสกัดสารสำคัญออกมาจากวัสดุหมัก ก่อนนำไประเหยแห้งจนได้สารสกัดที่มีกรดโคจิก ใน การประดิษฐ์นี้เป็นการพัฒนาส่วนประกอบในผลิตภัณฑ์เครื่องสำอางที่ได้จากธรรมชาติ ที่มีองค์ประกอบที่ ซึ่งสามารถยับยั้งการทำงานของเอนไซม์ไทโรซิเนส ต่อต้านการเกิดอนุมูลอิสระได้ดีกว่ากรดโคจิกมาตรฐาน สามารถยับยั้งการเจริญของเชื้อแบคทีเรียสาเหตุการเกิดสิว และไม่เป็นพิษต่อเซลล์ผิวหนังปกติและ เซลล์มะเร็งผิวหนัง

Claims (1)

1. กรรมวิธีการผลิตสารสกัดจากการหมักมันสำปะหลังด้วยเชื้อราแอสเปอร์จิลัสเพื่อเป็นส่วนผสมใน ผลิตภัณฑ์เครื่องสำอาง มีขั้นตอนดังนี้ ก. นำมันสำปะหลังมาปอกเปลือก ล้างให้สะอาด นำมาหั่นเป็นชิ้นลูกเต๋าขนาด 1x1x1 ซม3 หรือ เป็นหั่นเป็นเส้นขนาด 3x1x0.5 ซม3 หรือสามารถใช้กากมันสำปะหลัง นำไปอบที่อุณหภูมิ 70 - 90 องศา เซลเซียส ให้มีความชื้นเริ่มต้นร้อยละ 3-30 ข. ทำการบรรจุมันสำปะหลังที่ได้จากข้อ ก. ลงในภาชนะ นำไปนึ่งฆ่าเชื้อด้วยหม้อนึ่งฆ่าเชื้อ โดย ใช้ความดันไอนํ้าที่ 15-17 ปอนด์ต่อตารางนิ้ว อุณหภูมิ 121 องศาเซลเซียส เป็นเวลานาน 15-30 นาที ค. ทำให้อุณหภูมิของมันสำปะหลังที่ได้จากข้อ ข. เย็นลง และทำการปลูกเชื้อราแอสเปอร์จิลัสซึ่ง เตรียมไว้ในรูปของสปอร์แขวนลอย (Spore suspension) ที่ละลายในน้ำปลอดเชื้อ ที่ปรับระดับความเป็น กรด-ด่าง ในช่วง 5.5-7.5 โดยให้มีปริมาณกล้าเชื้อเท่ากับ 1x10ยกกำลัง5 สปอร์ ต่อมันสำปะหลัง 1 กรัม และ อัตราส่วนมันสำปะหลังต่อนํ้า เท่ากับ 1 ต่อ 0.5 ง. ทำการคลุกเคล้าสปอร์กับมันสำปะหลังเพื่อให้เชื้อกระจายอย่างทั่วถึง บ่มเชื้อที่อุณหภูมิ 30- 35 องศาเซลเซียส เป็นระยะเวลา 28 วัน โดยคลุกเคล้ามันสำปะหลังทุก 7 วัน ของการเพาะเลี้ยง จ. เติมนํ้าสะอาดลงในมวลชีวภาพจากข้อ ง. ในอัตราส่วนมวลชีวภาพ 1 กรัม ต่อ นํ้าสะอาด 5 มิลลิลิตร โดยประมาณ เขย่าให้เข้ากัน แล้วตั้งทิ้งไว้ประมาณ 1 ชั่วโมง ที่อุณหภูมิ 25-35 องศาเซลเซียส นำสารละลายที่ได้มากรอง ฉ. ทำการแยกสาร โดยนำสารละลายส่วนใสจากข้อ จ. ใส่ลงในกรวยแยก เติมสารละลายเอทิลอะ ซิเตท (Ethyl acetate) ลงไป ในอัตราส่วน 1 ต่อ 1 เขย่าให้สารละลายเข้ากัน แล้วตั้งทิ้งไว้เพื่อให้ สารละลายทั้ง 2 เฟส แยกออกจากกัน เก็บสารละลายส่วนเอทิลอะซิเตทซึ่งอยู่ชั้นล่าง ในขวดแก้ว ช. ทำการสกัดซํ้าอีก 2 ครั้ง โดยเติมสารละลายเอทิลอะซิเตทใหม่ลงไป ซ. นำส่วนของสารละลายเอทิลอะซิเตทจากข้อ ฉ.-ช. มาเทรวมกัน นำไประเหยแห้งโดยใช้เครื่อง ระเหยสารแบบหมุนภายใต้สุญญากาศ (Rotary Evaporator) ที่อุณหภูมิ 50-70 องศาเซลเซียส จนได้สาร สกัดที่เป็นผงแห้ง เก็บสารสกัดไว้ที่อุณหภูมิ -20 ถึง 4 องศาเซลเซียส ฌ. ทำการตรวจสอบปริมาณกรดโคจิกที่ได้จากการสกัดใบข้อ ซ. เปรียบเทียบกับกรดโคจิก มาตรฐานที่ทราบความเข้มข้น โดยการวิเคราะห์ด้วยวิธีโครมาโตกราฟีเหลวสมรรถนะสูง (High performance liquid chromatography, HPLC) คอลัมน์ C18 (Inertsil ODS-3) (250 x 4.6 mm I.D.) โดยใช้อะซิโตไนไทรล์: กรดอะซิติก (1%, w/v) อัตราส่วน 60:40 เป็นสารละลายเฟสเคลื่อนที่ อัตราการ ไหล 1 มิลลิลิตร/นาที อุณหภูมิของคอลัมน์เท่ากับ 40 องศาเซลเซียส ตรวจวัดด้วยยูวีดีเทคเตอร์ที่ความ ยาวคลื่น 265 นาโนเมตร