------05/02/2564------(OCR) 1. ชุดตรวจหาภูมิคุ้มกันต่อโปรตีน Erns ของไวรัสอหิวาต์สุกร จากตัวอย่างนํ้าล้างเนื้อหรือซีรัมซึ่งประกอบรวมด้วย ก. ไมโครเพลทขนาด 96 หลุม เคลือบด้วยโปรตีน Erns ของไวรัสอหิวาต์สุกร โดยมีความเข้มข้นของแอนติเจนโปรตีนที่ 10-40 นาโนกรัม ต่อหลุม ข. สารละลายควบคุมลบ สำหรับทดสอบตัวอย่างนํ้าล้างเนื้อหรือซีรัม (Negative control formeat juice or serum samples) โดยสารละลายควบคุมลบมีค่า OD อยู่ในช่วง 0.00 - 0.30 ค. สารละลายควบคุมบวก สำหรับทดสอบตัวอย่างนํ้าล้างเนื้อหรือซีรัม (Positive control formeat juice or serum samples) โดยสารละลายควบคุมบวกมีค่า OD อยู่ในช่วง 0.80 - 1.40 ง. นํ้ายาสำหรับละลายตัวอย่าง (Sample diluent) ประกอบด้วย โบไวน์ซีรัมอัลบูมินที่ความเข้มข้น 1 เปอร์เซ็นต์ ในสารละลายฟอสเฟสบัฟเฟอร์ซาลีน (1% BSA-PBS) และ ทวีนทะเว็นตี้ ที่ความเข้มข้น0.05 เปอร์เซ็นต์ (0.05% Tween-20) จ. นํ้ายาสำหรับล้างไมโครเพลท (Washing buffer) ประกอบด้วย ทวีนทะเว็นตี้ ที่ความเข้มข้น0.05 เปอร์เซ็นต์ ในสารละลายฟอสเฟสบัฟเฟอร์ซาลีน (0.05% Tween-20 in PBS) ฉ. สารละลายคอนจูเกตสำหรับทดสอบตัวอย่างนํ้าล้างเนื้อหรือซีรัม (Conjugate solution formeat juice or serum samples) ประกอบด้วย ฟีตอลโบไวน์ซีรัมที่ความเข้มข้น 20 เปอร์เซ็นต์ (20% FBS)และ ทวีนทะเว็นตี้ที่ความเข้มข้น 0.05 เปอร์เซ็นต์ (0.05 % Tween-20) ในสารละลายฟอสเฟตบัฟเฟอร์ และสารโพรไคลน์ ในอัตราส่วน 1 ต่อ 1,000 (Proclin 1:1,000) โดยสารละลายคอนจูเกต มีความเข้มข้นของอิมมูโนกลอบูลิน ชนิด จี (IgG) ที่ความเข้มข้น 1 ต่อ 10,000 ถึง 1 ต่อ 40,000 ช. สารทำให้เกิดสี (Substrate) ประกอบด้วย สารละลาย 3,3’ ,5,5’- เตตระเมธิล เบนซีดีน(3,3’,5,5’-tetramethyl benzidine) (TMB) ซ. สารหยุดปฏิกิริยาอิไลซ่า (Stop solution) ประกอบด้วย สารละลายหยุดปฏิกิริยา 3,3’ ,5,5’-เตตระเมธิล เบนซีดีน (ทีเอ็มบี, TMB) ------------ แก้ไข 16/01/2562 1. ชุดตรวจหาภูมิคุ้มกันต่อโปรตีน Erns ของไวรัสอหิวาต์สุกร จากตัวอย่างน้ำล้างเนื้อหรือซีรัม ซึ่งประกอบรวมด้วย ก. ไมโครเพลทขนาด 96 หลุม เคลือบด้วยโปรตีน Erns ของไวรัสอหิวาต์สุกร โดยมีความเข้มข้น ของแอนติเจนโปรตีนที่ 10-40 นาโนกรัม ต่อหลุม ข. สารละลายควบคุมลบ สำหรับทดสอบตัวอย่างน้ำล้างเนื้อหรือซีรัม (Negative control for meat juice or serum samples) โดยสารละลายควบคุมลบมีค่า OD ไม่เกิน 0.30 ค. สารละลายควบคุมบวก สำหรับทดสอบตัวอย่างน้ำล้างเนื้อหรือซีรัม (Positive control for meat juice or serum samples) โดยสารละลายควบคุมบวกมีค่า OD อยู่ในช่วง 0.80-1.40 ง. น้ำยาสำหรับละลายตัวอย่าง (Sample diluent) ประกอบด้วย โบไวน์ซีรัมอัลบูมินที่ความ เข้มข้น 1 เปอร์เซ็นต์ ในสารละลายฟอสเฟสบัฟเฟอร์ซาลีน (1% BSA-PBS) และ ทวีนทะเว็นตี้ ที่ความเข้มข้น 0.05 เปอร์เซ็นต์ (0.05% Tween-20) จ. น้ำยาสำหรับล้างไมโครเพลท (Washing buffer) ประกอบด้วย ทวีนทะเว็นตี้ ที่ความเข้มข้น 0.05 เปอร์เซ็นต์ ในสารละลายฟอสเฟสบัฟเฟอร์ซาลีน(0.05% Tween-20 in PBS) ฉ. สารละลายคอนจูเกตสำหรับทดสอบตัวอย่างน้ำล้างเนื้อหรือซีรัม (Conjugate solution for meat juice or serum samples) ประกอบด้วย ฟีตอลโบไวน์ซีรัมที่ความเข้มข้น 20 เปอร์เซ็นต์ (20% FBS) และ ทวีนทะเว็นตี้ที่ความเข้มข้น 0.05 เปอร์เซ็นต์ (0.05% Tween-20) ในสารละลายฟอสเฟตบัฟเฟอร์ และ สารโพรไคลน์ ในอัตราส่วน 1 ต่อ 1,000 (Proclin 1:1,000) โดยสารละลายคอนจูเกต มีความเข้มข้นของอิมมู โนกลอบูลิน ชนิด จี (lgG) ที่ความเข้มข้น 1 ต่อ 10,000 ถึง 1 ต่อ 40,000 ช. สารทำให้เกิดสี (Substrate) ประกอบด้วย สารละลาย 3,3' ,5,5'- เตตระเมธิล เบนซีนดีน (3,3' ,5,5'-tetramethyl benzidine) (TMB) ซ. สารหยุดปฏิกิริยาอิไลซ่า (Stop solution) ประกอบด้วย สารละลายหยุดปฏิกิริยา 3,3' ,5,5'- เตตระเมธิล เบนซีนดีน (ทีเอ็มบี, TMB) ------------------------------------------------------ 1. ชุดตรวจหาภูมิคุ้มกันต่อโปรตีน Erns ของไวรัสอหิวาต์สุกร จากตัวอย่างน้ำล้างเนื้อหรือซีรัม ซึ่งประกอบรวมด้วย - ไมโครเพลทขนาด 96 หลุม เคลือบด้วยโปรตีน Erns ของไวรัสอหิวาต์สุกร โดยมีความเข้มข้น ของแอนติเจนโปรตีนที่ 10-40 นาโนกรัม ต่อหลุม - สารละลายควบคุมลบ สำหรับทดสอบตัวอย่างน้ำล้างเนื้อหรือซีรัม (Negative control for meat juice or serum samples) โดยสารละลายควบคุมลบมีค่า OD ไม่เกิน 0.30 - สารละลายควบคุมบวก สำหรับทดสอบตัวอย่างน้ำล้างเนื้อหรือซีรัม (Positive control for meat juice or serum samples) โดยสารละลายควบคุมบวกมีค่า OD อยู่ในช่วง 0.80-1.40 - น้ำยาสำหรับละลายตัวอย่าง (Sample diluent) ประกอบด้วย โบไวน์ซีรัมอัลบูมินที่ความ เข้มข้น 1 เปอร์เซ็นต์ ในสารละลายฟอสเฟสบัฟเฟอร์ซาลีน (1% BSA-PBS) และ ทวีนทะเว็นตี้ ที่ความเข้มข้น 0.05 เปอร์เซ็นต์ (0.05% Tween-20) - น้ำยาสำหรับล้างไมโครเพลท (Washing buffer) ประกอบด้วย ทวีนทะเว็นตี้ ที่ความเข้มข้น 0.05 เปอร์เซ็นต์ ในสารละลายฟอสเฟสบัฟเฟอร์ซาลีน(0.05% Tween-20 in PBS) - สารละลายคอนจูเกตสำหรับทดสอบตัวอย่างน้ำล้างเนื้อหรือซีรัม (Conjugate solution for meat juice or serum samples) ประกอบด้วย ฟีตอลโบไวน์ซีรัมที่ความเข้มข้น 20 เปอร์เซ็นต์ (20% FBS) และ ทวีนทะเว็นตี้ที่ความเข้มข้น 0.05 เปอร์เซ็นต์ (0.05% Tween-20) ในสารละลายฟอสเฟตบัฟเฟอร์ และ สารโพรไคลน์ ในอัตราส่วน 1 ต่อ 1,000 (Proclin 1:1,000) โดยสารละลายคอนจูเกต มีความเข้มข้นของอิมมู โนกลอบูลิน ชนิด จี (lgG) ที่ความเข้มข้น 1 ต่อ 10,000 ถึง 1 ต่อ 40,000 - สารทำให้เกิดสี (Substrate) ประกอบด้วย สารละลาย 3,3' ,5,5'- เตตระเมธิล เบนซีนดีน (3,3' ,5,5'-tetramethyl benzidine) (TMB) - สารหยุดปฏิกิริยาอิไลซ่า (Stop solution) ประกอบด้วย สารละลายหยุดปฏิกิริยา 3,3' ,5,5'- เตตระเมธิล เบนซีนดีน (ทีเอ็มบี, TMB)