SU992571A1 - Способ определени шигелл ZoNNe в молоке - Google Patents

Description

(S) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ШИГЕЛЛ ZONNE 8 МОЛОКЕ

...... Г 4|1эо6р 0гение относитс  к микробиологии и Mowet быть использовано дл  определени  дизентерийного возбудител  шигёлл Zonne в молоке. Известней способ определени  шигёл Zonne в молоке «гутём посева исследуемого материала в среду Кесслера с последующими пересевом на плотные ди ференциальные среды Эндо или Левина и исследованием еыраСших колоний D . Одйако известный способ обладает низкой чувствительностью. Известен также способ определени  шигелп Zonne в молоке путем посева исслёдуемогр материала в среду обогащени  инкубировани  -посевов с по ,следующим пересевом на дифференциально-диагностические среды и иденти фикации выделенных микроорганизмов 21. : Однако известный способ обладает низкой чувствительностью и позвол ет обнаружить шигелш Zonne в пробах молока лишь при наличии более 1000 микробных клеток в 1 мл молока, причем процент высеваемости возбудител  невелик и составл ет всего 28%. Цель изобретени  - повышение чувствительности способа. Указанна  цель достигаетс  тем, что согласно способу определени  шигёлл Zonne в молоке путём посева исследуемого материала в среду обогащени , инкубировани  посевов с последующим пересевом на дифференциальнодиагностические среды и идентификации выделенных микроорганизмов, молоко предварительно сбраживают с помощью сычужного фермента, отдел ют сыворотку« развод т ее в 5-10 раз физиологическим раствором, разведенную сыворотку ввод т в количестве 0,1-0,2 мл в аллантоисную полость куриного эмбриона, используемого в качестве среды обогащени , и инкубирование осуществл ют при в течение 12-13 ч.

Предлагаемый способ осуществл етс  следующим образом.

Молоко, в .котором определ ют шигеллы Zonne, сбраживают. Затем отдел ют сыворотку и развод т ее в раз физиологическим раствором. Подготовленную таким образом сыворотку ввод т в аллонтоисную полость 9-10 дневного куриного эмбриона при помощи шприца. Эмбрион инкубируют при kQ-kZ C в течение 12-13 м. Зйтем отсасывают аллантоисную жидкость пастеровской пипеткой и засевают на ди(|)ференциально-диагностические среды . Далее шигеллы идентифицируют путем постановки реакции агглютинации с адсорбированной агглютинирующей сывороткой к шигеллам Zonne, а также по биохимическим признакам.

П р им е р. Исследуют молоко на содержание возбудител  дизентерии. С помощью известного способа показано , что шигелл Zonne в молоке нет. Дл  уточнени  проведено дополнительное исследование молока предлагаемым способом. Дл  этого к 5 мл молока добавл ют 0,1 мл 1%-ного сычужного фермента и термостатируют при в течение 20 мин. Затем отдел ют сыворотку , развод т ее стерильным физиологическим раствором в 10 раз и ввод т шприцем в аллонтоисную полост 9 дневного куриного эмбриона. Эмбрио инкубируют 12 ч 2°С, после чего вскрывают и отсасывают аллонтоисную жидкость пастеровской пипеткой.

95

58

28

О

При использовании предлагаемого способа значительно облегчаетс  йден- 55

тификаци  атипичных штаммов шигелл Zonne при постановке реакций агглютинации .

Жидкость засевают на дифференциально- диагностическую среду. Далее провод т идентификацию подозрительных колоний по биохимическим и серологическим признакам. Результаты идентификации: ЛактозаГлюкоза-f

|1очевина Сахароза Подвижность

ИндолЛизис бактериофагом+ Реакци  агглютинации+ ККП+ С помощью предлагаемого способа в молоке обнаружены возбудители дизентерии-шигеллы Zonne. Известными же способами вы вить возбудител  не удаетс .

Предлагаемый способ  вл етс  высоко чувствительным: минимально определ ема  доза заражени  молока 10 микробных клеток в 1 мл, т.е. в 100 раз меньше, чем в известном способе (1000 микробных клеток в MJB) . Кроме того, процент высева шигелл из молока при применении предлагаемого способа на 65-95 выше (в зависимости от дозы заражени ) (см. таблицу).

Результаты определени  шигелл Zonne в пробах искусственно зараженного молока с помощью предлагаемого и известного способов, приведены в таблице .

100 100 10G

95 .95

60

Предлагаемый способ может широко

ратори х санэпидемстанций дл  обнаружени  зараженного молока дизентерийным возбудителем при малых его использоватьс  в практических лабоконцентраци х . Это поможет своевременно вы вить очаг заражени  и пред отвратить дальнейшее распространение инфекции.

формула изобретени 

Способ определени  шигелл Zonne в молоке путем посева исследуемого материала в среду обогащени , инкубировани  посевов с последующими пересевом на дифференциально-диагностические среды и идентификации выделенных микроорганизмов, о т л и ч а ю щ и и с   тем, что, с целью повышени  чувствительности способа, молоко предварительно сбраживают с помощью сычужного фермента, отдел ют сыворотку , развод т ее в 5-10 раз физиологическим раствором, разведенную сыворотку ввод т в количестве 0,1Р 2 мл а аллантоисную полость курино го эмбриона,используемого в качестве средыЪбоГащени , и инкубирование осуществл ют при kQ-k2 t в течение 12-13 ч.

Источники информации, прин тые во внимание при экспертизе

1.Справочник по м«кробиологическим и вирусологическим методам исследовани . Под реД. Н.Б. Биргера Н.,

Медицина, 1973, с, k}6-k}b.

2.Сидоренко Г.И Методы санитарномикрОбиологичес«юго исследовани 

объектов окружающей среды. М., Медицина , 1978, с. 179-180.

Claims (2)

1. Формула изобретения

   Способ определения шигелп Zonne в‘ молоке путем посева исследуемого материала в среду обогащения, инкубирования посевов с последующими пересевом на дифференциально-диагностические среды и идентификации выделенных микроорганизмов, о т лича ю щ и й с я тем, что, с целью повышения чувствительности способа, молоко предварительно сбраживают с помощью сычужного фермента, отделяют сыворотку, разводят ее в 5~Ю раз физиологическим раствором, разведенную сыворотку вводят в количестве О,ΙΟ, 2 мл в аллантоисную полость курино5 'гоэмбриона, используемого в качестве среды'Ъбогащения, и инкубирование осуществляют при 40-42°С в течение 12-13 ч.

   Ю Источники информации, принятые во внимание при экспертизе -

   1. Справочник по микробиологическим и вирусологическим методам исследования. Под ред. М.Б. Биргера, М.,

   1* “Медицина”, 1973» с· 416-418.
2. 2. Сидоренко Г.И. Методы санитарно микробиологического исследования . объектов окружающей среды. М., “Медицина”, 1978, с. 179-130.