SU880442A1 - Способ очистки биологических жидкостей,содержащих белок - Google Patents

Description

(54) СПОСОБ ОЧИСТКИ БИОЛОГИЧЕСКИХ ЖИДКОСТЕЙ, Изобретение относитс  к способу разделени  жидких смесей с помощью полупроницаемых мембран и может быть использовано в биологии дл  очистки растворов, содержащих белки, в медицине при очистке крови и других биологических жидкостей от эндогенных и экзогенных  дов. Известны способы очистки биологических жидкостей методом диализа 1 и методом мембранной экстракции 2). Методы заключаютс  в том, что с одной стороны к полупроницаемой мембра не подводитс  очищаема -биологическа  жидкость, а с другой стороны диализирующий раствор либо экстраген Вследствие разности химических потен циалов растворенного вещества в очищаемой жидкости и диализирующем раст воре (экстрагенте) растворенное вещество проходит через мембрану из од ной фазы в другую. Однако названные методы не всегда эффективны из-за разрушени  структуры макромолекул и форменных элементов биологических жидкостей при контакте с мембраной. Под разрушением структуры понимаетс  коагул ци  молекул белка, разрушение лейкоцитов и СОДЕРЖАЩИХ БЕЛОК других форменных элементов крови, гемолиз . Известен способ очистки биологических жидкостей, содержащих белок; включающий контактирование биологической жидкости с одной стороной полупроницаемой мембраны и пропускание экстрагента с противоположной стороны полупроницаемой мембраны 3. Недостаток этого способа также заключаетс  в возможности пр мого контакта белковых молекул и форменных элементов биологических жидкостей с- материалом мембраны. Необходим способ, позвол ющий исключить непосредственный контакт белковых молекул и форменных элементов с материалом мембраны, что дало бы возможность проводить экстракцию из биологических жидкостей с сохранением структуры eie компонентов. Цель изобрет;ени  - предотвращение нарушени  структуры компонентов обрабатываемой биологической жидкости. Поставленна  цель достигаетс  тем, что на полупроницаемую мембрану осаждают путем создани  на ней перепада давлений предварительно скоагулированный белок.

Раствор со скоагулировайным белко продавливают через обрабатываемую мембрану, причем скоагулированные частицы, размеры которых больше диаметров пор мембраны, осаждаютс  на поверхности мембраны, образу  пористую пленку. Структура этой пленки зависит от количества скоагулированного белка, осажденного на мембране, и от величины приложенного давлени . Причины улучшени  заключаютс  в том, что после описанной обработки мембраны исключаетс  контакт белка биологической жидкости с поверхностью мембраны. При контакте белка биологической жидкости со скоагулированным белком, нанесенным на поверх- , ность мембраны, дальнейша  коагул ци  белка из раствора не происходит.

Пример. В качестве мембраны дл  экстракции валериановой кислотой мочевины из плазмы крови собаки используют лавсановые мембраны толщиной 10 мкм и диаметром пор 0,2 мкм на установке, состо щей и двух вертикально расположенных камер, разделенных полупроницаемой мембраной с площадью 25 см. Перед экстракцие в верхнюю камеру ввод т 25 мл плазмы с предварительно скоагулированным белком (.белок коагулируют добавлением в плазму 0,1мл валериановой кислоты) и отфильтровывают раствор через мембрану при перепаде давлений 30 ат в течение 20 мин. (Перепад давлений создают сжатым азотом), После фильтрации образовавшуюс  пленку коагулированного белка промывают 50 мл физиологического раствора при том же давлении в течение 20 мин.

После промывки в вернюю камеру ввод т 10 мл плазмы, предназначенной дл  экстракции, в нижнюю - 10 мл экстрагента. Момент выпадени  белка в объеме плазмы определ ют методом светор ассеивани  с использованием ФЭК-56 М. Выпадение белка в плазме

начинаетс  через 30 мин после начала экстракции. За это врем  степень извлечени  мочевины достигает 40% (содержание мочевины в плазме до экстракции 59 мг/100 мг плазмы, после экстракции 35 мг/100 мг плазмы).

Параллельно провод т опыты по определению степени экстракции мочевины валериановой кислотой из плазмы крови собаки с мембраной, не.обработанной предварительно описанным способом . Степень извлечени  мочевины за 30 мин достигает 40%, полна  коагул ци  белка в растворе наступает практически мгновенно.

Таким образом, как видно из приведенных данных, предложенный метод позвол ет при той же степени извлечени  экстрагируемого вещества избежать разрушение белка биологической жидкости.

Claims (3)

1.Патент США 3953329,кл. 21022 , опублик. 1976.

2.Патент США 3956112,кл. 21022 опублик. 1976.

3.Canadion Journal of Physiology and Pharmacology. 1967, V.45,

p. 705-715.