SU730694A1

SU730694A1 - Модифицированный террилитином декстран, обладающий фибринолитической активностью

Info

Publication number: SU730694A1
Application number: SU762385858A
Authority: SU
Inventors: Анастасия Глебовна Алексеева; Григорий Ефимович Гринберг; Галина Матвеевна Линденбаум; Ольга Александровна Миргородская; Борис Васильевич Москвичев; Рузмамат Садуллаевич Садуллаев; Аида Александровна Селезнева; Игорь Михайлович Терешин
Priority date: 1976-07-05
Filing date: 1976-07-05
Publication date: 1980-04-30

Description

Изобретение относитс к области производных декстрана, обладающих ферментативной активностью, в частности фибри нолитической, которые могут быть испол зованы в качестве лекарственных препаратов в медицине. Известны производные поливинилпирролидона , обладающие протеолитической активностью l . Однако указанные производные поливиниппирролидона при парэнтеральном вве дении Из-за отсутстви биосовместимости накапливаютс в ткан х и органах, привод в дальнейшем к патологическим изменени м в НИХ. Наиболее близкими к изобретению вл ютс производные декстранов, представд ющие собой продукты модификации декстранов низкомолекул рными физиол1 гически активными веществами - биологическими аминами, такими как норацрёналин обшей формулы ( ( ), (,), где Нор - норадреналин. X 20-80% - дол неокисленнь1х звеньев декстрана, 20 - 80% - дол окисленных звеньев декстрана. Производные декстранов получают обработкой декстранов физиологически активными веществами в водном растворе Однако Известные производные цекстранов не обладают энзиматической акгавностью . Цель изобретени - получение физиологически -активных водорастворимых производных декстранов, обладающих энзима тической, в частности фибринолити ческой активностью. Поставленна цель достигаетс получением протеолитического фермента террилитина , присоединенного к окисленномудекстрану азометиновой св зью с последующим восстановлением этой св зи и избытка альдегидных групп полимера-носител . 37 Взаимоцействис лекстрана с (ол.кул рной массой от 20 тыс. по 11О тыс., окисленного до степогти окислени 6-48% с террилитином, осушестЕи1 ют в ЕЮПНОМ буферном растворе при р1 7,5-10,О, те пературе 15-25 0, в течение 15-180 мин при соотношении реагентов в реакционной смеси (декстрана и фермента) от 10 : 1 до 1,2 : 1. Модифицированные террилитином производные декстрана после очистки диализом выдел ют вместе с полимером или отдел ют от избытка не вступившего в реакцию фермента с помощью гель-хроматографии и высушР1вают лиофильно известными способами, Oim имеют обшую фop fyлyS .ч ( C.W.)x( Оз . - )у СЧ V где Тер - протеолнтический фермент тер р или тин; X 52 - - дол неокисленных звеньев декстрана; 6 - 48% - дол окисленных звеньев декстрана. П р и м е р, 165 мг декстрана с молекул рным весом 20 тыс., растворенного в 3,3 мл воды (концентраци 50 мг/мл) и окисленного до степени окислени 24%, смешивают с 4,9 мл раствора террилитина в 0,1 М боратном буфере с рН 8,5, содержащего 82 мг сухого фермента с удельной активностью 20 ПЕ/мг и обшей активностью 1640ПЕ Реакционную смесь перемешивают при 2lil°C в течение 2 ч при рН 8,5. Затем добавл ют 1 мл 0,1 М раствора бо ратного буфера, содержащего 40 мг бор гидрида натри , и перемешивание провод т при 2111 С в течение 40 мин. Полученный препарат модифицированного ферментом декстрана диализуют на холоду (4±2 С) против дистиллированно воцы в течение 48 ч и лиофильно высуживают . Получают 235 мг сухого пре парата с удельной активностью7,4ПЕ/м и общей активностью 174О ПЕ. Выход 4 пролукта соста1 л ет . от HW ar-nitnii энзиматической акти1М1ости. Под степенью окислени ( ) понимают число окисленных зпеиьев декстрана , приход щеес на 100 элементарных звеньев декстрана. В таблице приведены датпгые по фибринолитической активности и степени ингибнровани сывороткой крови человека дативных протеолитических ферментов (трипсина, террилитина) и модифипированиых п роте ОЛИ ти чески м ферментом (террилитином ) производных декстрана. Предлагаемые физиологически активные водорастворимые производные декстранов , обладающие энзиматической, в том числе фибринолитической активностью, могут быть использованы в медицинской практике при лечении гнойных ран, ожогов, воспалительных заболеваний и в качестве тромболитических препаратов. Препараты могут также найти применение при разработке технологических процессов гидролиза белков под дерютвием модифицированных гидролитических ферментов , позвол ющих )фективно прогзодить эти пропессь; в Mev6paHiU)ix реакторах. Модифицированные террилитином -производные декстранов вл ютс физиологически активными препаратами, причем п процессе модификации протеолитическа активность террилитина практически не измен етс , в то врем как увеличение молекул рного.веса получаемых препаратов в срав1тении с нативньгм (ферментом обуславливает меньшую скорость его выведени из организма. Модифицирован1 ые террилитином произвоа (пле декстранов ингибируютс сывоpOTKOPi крови в значительно меньшей степени , чем нативные ферменты (трипсин, террилнтин), что ат етс их преимуществом . Дл промышленного получени препаратов аппаратур юе о4)ормление процесса не требует каких-либо новых (в сравнении с известными способами) элементов оборудовани .

Трипсин

Террилитнн

Лекстран мопифициРОЕИННЫЙ

террилитнном

ПЕ- количество сыворотки, необходгмое цп ингибировани одной ед-шицы протеолчтической (казеинолитической) активностч на 5О%.

Claims

1.Авторское свидетельство СССР

Ко 522198, кл. С 08 F 271/О2, 1975

2.Патент ГДР № 90197, кл.

кл. 30 Н 2/30, опублнк. 1973 (прототип ).