SU598933A1 - Способ получени ферментного препарата содержащего -1,3 и -1,6 глюканазу - Google Patents

Description

(54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ФЕРМЕНТНОГО ПРЕПАРАТА, СОДЕРЖАЩЕГО /3-13 И/3-1,6 ГЛЮКАНАЗУ

Пример. Готов т 3 м среды следующего состава:

Свекловичный жом2,00

Пшеничные отруби2,00

NaNOs1,50

(NH4)jSO41 0

КН1Ю40,10

MgS04-7HiO0.05

Стерилизуют общеприн тым способом. Засеваю 3л глубиннойкультзфы jQleott ichum candidumSc двухсуточного возраста, выращеннш на среде того же состава.

Гриб культивируют в ферментере при 28-32° С в течение 60 ч при аэрации Q2 11мтреды и njw перемешивании со скоростью мешалки 100 об/мин рН среды после стерилизации 5,4-5,6.

Полученную культуру сепарируют дл  отделени  клеток микроорганизма, и ферменты осаждают из центрифугата культуральной жидкости при добавлении трех объемов спирта или двух объемов ацетона . Отделошый фильтрованием осадок ферментов высушивают на воздухе.

Активный ферментный препарат получают также путем высушивани  фильтрата культуральиой жидкости на распылительной сушилке.

В таблице даны результаты определени  активности 1,3 и 1,6 - глюканаз в препаратах, полученны двум  различными способами, при действии на ламиран (0- 1,3- глюкан), дрожжевой глюкан, на препарат клеточных стенок дрожжей и на пустулан ( 1 ,6 - глюкан); данные рассчитаны на 1 г препарата.

Claims (3)

1. в препарате, по)гученном на распылительной сушилке (целлокандин Г-Зх), содержитс  Ьолее 7 тыс. ед/г р-1,3- г юканазьг, а - 1,6 - глюканазы - более 200 ед. Спиртоосажденный препарат (целлокандин Г-10х) содержит зтих ферментов на 35-40% больше. Определение активности. К 5 мг субстрата (ламин рану, дрожжевому глюкану, препарату клеточных стенок дрожжей S. се г е ч i s i а е или пустулану ) в 0,5 мл ацетатного буфера рН 5,0, 0,1 М, добавл ют 0,5 мл разбавленного раствора фермента. Смесь инкубируют в течение 1 ч при 40° С. Образовавшиес  сахара определ ют по методу Сомоги-Нельсона. Из полученных результатов вычит |;от i количество вое станавпивающих Сахаров, содержашихс  в качестве прв меси в ферментном препарате, а также в субстрате.. Акт ;вность глюканаз выражена в мг глюказы, котора  образуетс  при действии 1 г ферментного препарата на субстрат в тетение 1 ч при 40° С в стационарных услови х. Культурально- морфологическа  характеристика штамма Geotpichom can 3iclum 3 с на 10-е сутки ; На синтетической среде Чапека с сахарозой и . NaN03 - колонии диаметром 25-30 мм с ровным кр ем, радиально-складчатые. Воздушный мицелий йорошистый , скудньш, прижатый, белый. Обратна  сторон колонии желтовата , пигмента нет. На сусло-агаре (сусло 5° по Баллингу) колонии диаметром 35 мм с глубокими радиальными складками , с ровным краем, слегка вдавленным в агар. слабо зональные. Воздушный мицелий белый, т жестый, шерстиотый . Обратна  сторона колонии желтовато-бура , пигмента нет. В центре колонии - крупные капли желтовато-коричневогоэксудата . Предложенный способ по сравнению с известным обеспечивает: }. Повышение выхода целевых ферментов за,счет использовани  гриба Gecbfcric/ivoTTj CQ.nSlidv.Tnn и ишользовани  среды с жомом и пшеничньвли отруб ми , вз тыми в качестве источника углерода. 2.Удешевление среды за счет использовани  жома и отрубей вместо пекарских дрожжей. 3.Получение высокостабильных ферментов, которые не тер ют активности при хранении в течение трех и более лет. А. Получеание ферментов, которые расшепл ют рожжевой глюкан полностью до глюкозы. Препарат может быть применен также дл  получени  глюкозы из ламинарана, постулана и нз клеточных стенок дрожжей. Препарат можно примен ть в качестве добавки (премнкса) в корм скоту, птице и свинь м дл  лучшего усвоени  дрожжей (БВК), так как неусванваемого дрожжевого глюкана в них содержитс  до 10%. Формула изобретени  Способ получени  ферментного препарата, содержашего /3- 1,3-иР- 1,6 - глюканазу,предусматривающий культивирование продуцента ферментов на питательной среде, содержащей источник углерода , азота, фосфора и магний, отличающийс  5 тем, что с целью повышени  выхода целевых ферментов , в качестве продуцента используют грибы вида Qeotrichum coindidum,a в качестве источников углерода, азота, фосфора используют соответственносвекловичный жом и пшеничные отруби, азотнокис- лый натрий и сернокислый аммоний и фосфорнокислый калий однозамешеиный.
2. 2. Способ по п. 1, отличающийс  тем, что на 1 л питательной среды используют 10-20 г свекловичного жома; 10-50 г пшеничных отрубей, 6 0,5 - 3 г NaNOj; 0,5-3,0 г (NH); SO4: 0.5 5.) i 0,1-1,5 г MgSOv .
3. 3. Способ по п. I, отличающий с а тем, что из грибов вида Geotricbum candidum используют штамм 3 с. Источники информации, прин тые во внимание П1ж экспертизе: 1. Патент Великобритании N 1370346, кл. С ЗН