SU575352A1

SU575352A1 - Method of obtaining immobilized aminocylase

Info

Publication number: SU575352A1
Application number: SU7602310887A
Authority: SU
Inventors: Илзе Германовна Страздинь; Инта Петровна Розиня; Валдис Эрнестович Калис; Август Карлович Арен
Original assignee: Предприятие П/Я М-5043
Priority date: 1976-01-06
Filing date: 1976-01-06
Publication date: 1977-10-05

Description

1one

Изобретение относитс к получению нерастворимых ферментных препаратов) а именно к способу получени иммобилизованной аминоацилазы, используемой в качестве гетерогенного катализатора дл ассиметрического гидролиза рацемической смеси М-ацил-П,Ь -аминокислотThis invention relates to the preparation of insoluble enzyme preparations, namely, to a method for preparing an immobilized amino acylase, used as a heterogeneous catalyst for asymmetric hydrolysis of a racemic mixture of M-acyl-P, L-amino acids.

Известен р д способов получени иммобилизованной , аминоацилазы на органических носител х, например на бромсщетилцеллюлозе или на ДЭАЭ- сефадексеA number of methods are known for the preparation of immobilized, aminoacylase on organic carriers, for example, on bromocellulose or on DEAE-Sephadex.

Однако низка химическа и микроби ологическа стойкость, плохие механи ческие и гидродинамические свойства ограничивгиот использование в промышленности этих производныхHowever, low chemical and microbial resistance, poor mechanical and hydrodynamic properties are limited by the use of these derivatives in the industry.

Известен также способ получени иммобилизованной аминоацилазы на неорганическом носителе - силохроме путей адсорбировани на силохроме ацилазной активности из экстракта ацетонового порошка свиных почек.There is also known a method for producing immobilized aminoacylase on an inorganic carrier, silochrome, adsorbing pathways on silochrome acylase activity from an extract of acetone powder of pork kidneys.

Полученную иммобилизованную аминоаци .лазу используют многократно (до п ти раз) дл асимметрического гидролиза 0,5 М растворов И-ацетил-В, Ь -аминокислот .The obtained immobilized aminoacyllase is used repeatedly (up to five times) for asymmetric hydrolysis of 0.5 M solutions of I-acetyl-B, L-amino acids.

К недостаткам этого простого способа относ тс неэкономичное использование ацилазного сырь (выход ацилаз The disadvantages of this simple method include the uneconomical use of the acylase feedstock (acylase yield

ной активности составл ет только 10% от ацилазной активности использованного на иммобилизацию экстракта ацетонового порошка свиных почек) и получение иммобилизованной аминоацилазы с относительно низкой ферментативной устойчивостью, что ограничивает ее использование (примерно п ть раз и не более, чем в 0,5 М растворах субстратов ) .activity is only 10% of the acylase activity of the acetone powder of pork kidneys used for immobilization and the preparation of immobilized aminoacylases with relatively low enzymatic stability, which limits its use (approximately five times and no more than 0.5 M solutions of substrates ).

Цель изобретени - повышение стабильности целевого продукта и упрощение процесса - достигаетс тем, что неорганический носитель, например силохром или:силикагель, последовательно активируют силанизирующим агенток, предпочтительно j-аминопропилтриэтоксисиланом , и производным дихлор-сикмтриазина , таким, как активный краситель , например рко-голубой КХ, и аминоацилазу ковалентно св зывают на носителе в присутствии N-ациламинокислоты , преимущественно рацемической М-ацетиламинокислоты , например D ,t -ацв тилаланина,The purpose of the invention is to increase the stability of the target product and simplify the process - achieved by the inorganic carrier, for example silochrome or: silica gel, sequentially activating with a silanizing agent, preferably j-aminopropyltriethoxysilane, and dichloro-symtriazine derivatives, such as an active dye, for example, bright blue CC and aminoacylase are covalently bound on a carrier in the presence of N-acylamino acids, predominantly racemic M-acetylamino acids, for example D, t-acv tilalanine,

После активировани силохрома j -аминопропилтриэтоксисиланом на его поверхности наход тс реакционноспосоОныв аминогруппы, которые через производноеAfter activating the silochrome j-aminopropyltriethoxysilane, there are reacted amino groups on its surface, which through the derivative